ES2226790T3

ES2226790T3 - Piridin-2,4,6-trionas como inhibidores de metaloproteinasas matriz.

Info

Publication number: ES2226790T3
Application number: ES00907524T
Authority: ES
Inventors: Louise Helen Foley; Robert Edward Palermo; Ping Wang
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1999-02-12
Filing date: 2000-02-09
Publication date: 2005-04-01
Anticipated expiration: 2020-02-09
Also published as: EP1153015A1; CN1339028A; BR0008109A; CA2361605C; ATE277912T1; AU774487B2; US6265578B1; AU2908500A; KR20020011963A; WO2000047565A1; DE60014323T2; JP3655551B2; CA2361605A1; PT1153015E; AR035008A1; EP1153015B1; KR100477160B1; CN1147481C; JP2002536439A; ZA200106214B

Abstract

Compuestos de fórmula I donde R1 es hidrógeno, alquilo, alquilo C1, hidroximetilo o benciloxilo; y R2 es fenoxilo; y sales respectivas farmacéuticamente aceptables de un compuesto acídico de fórmula I.

Description

Piridin-2,4,6-trionas como inhibidores de metaloproteinasas matriz.

La invención se refiere a compuestos de fórmula I

1

donde

R^{1}: es hidrógeno, alquilo C_{1-7}, hidroximetilo o benciloxilo, y

R^{2}: es feniloxilo; sales respectivas farmacéuticamente aceptables de un compuesto acídico de fórmula I.

Los compuestos de la invención son inhibidores de metaloproteasa matriz útiles para el tratamiento o el control del cáncer asociado con la sobreexpresión de gelatinasa A y/o gelatinasa B, particularmente cáncer de piel, cáncer de mamas, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón y cáncer gástrico. Los compuestos de la invención son también útiles para otras enfermedades asociadas con la degradación no regulada de la matriz extracelular, incluyendo artritis reumatoide, osteoartritis, esclerosis múltiple, ulceración corneal, enfermedad perio-dontal y similares.

La WO-A-9858925 describe derivados de ácido barbitúrico que actúan como inhibidores de metaloproteasa matriz.

Tal como se utiliza en la presente invención, el término "alquilo" significa un grupo alquilo de cadena rectilínea o ramificada que contiene un máximo de 7 átomos de carbono, como ejemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, t-butilo, pentilo y hexilo.

Preferentemente, R_{2} se encuentra en la posición para.

Los compuestos más preferidos son 5-metil-5-(4-fenoxi-fenil)pirimidin-2,4,6-triona, 5-hexil-5-(4-fenoxifenil)piri-midin-2,4,6-triona, 5-benciloximetil-5-(4-fenoxifenil)piri-midin-2,4,6-triona y 5-(2-hidroxietil)-5-(4-fenoxifenil) pirimidin-2,4,6,triona.

Los compuestos de fórmula I pueden prepararse mediante los siguientes Esquemas I-II.

Los compuestos de fórmula I se preparan mediante el siguiente Esquema I.

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(Esquema pasa a página siguiente)

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Esquema I

2

Los compuestos de fórmula III se preparan mediante tratamiento de los compuestos de fórmula II con una base fuerte, como por ejemplo, hidruro de sodio, diisopropilamida de litio, o bis(trimetilsilil) amida de litio, en un disolvente aprótico, tal como tetrahidrofurano (THF). El anión resultante luego reacciona con dimetilcarbonato o metil cloroformato a temperaturas que oscilan de temperatura ambiente a temperatura de reflujo para formar un compuesto de fórmula III.

Los compuestos de fórmula IV se preparan por reacción de un compuesto de fórmula III con urea en una solución básica, tal como metóxido de sodio en metanol a reflujo.

Los compuestos de fórmula I se preparan por reacción de un compuesto de fórmula IV con una base fuerte, tal como hidruro de sodio, diisopropilamida de litio, o bis-(trimetilsilil) amida de litio, en un disolvente aprótico, tal como tetrahidrofurano (THF) para formar un anión. El anión resultante luego se trata con un haluro de alquilo, tal como yoduro de metilo, bromuro de hexilo, bromuro de alilo o éter de bencilclorometilo, a temperaturas que varían de temperatura ambiente a temperatura de reflujo. Las N-sustituidas-2,4,6-trionas luego se extraen por cromatografía para dar el compuesto deseado de fórmula I.

Los compuestos de fórmula II son conocidos o pueden prepararse mediante métodos conocidos.

Los compuestos de fórmula I pueden también prepararse según se describe en el Esquema II.

Esquema II

3

4

5

Los compuestos de fórmula V se preparan por reacción de un compuesto de fórmula III con una base fuerte, tal como hidruro de sodio, diisopropilamida de litio, o bis-trimetilsilil) amida de litio, en un disolvente aprótico tal como tetrahidrofurano (THF). El anión resultante luego se trata con un haluro de alquilo, tal como yoduro de metilo, bromuro de hexilo, bromuro de alilo o éter de bencil-clorometilo, a temperaturas que varían de temperatura ambiente a temperatura de reflujo.

En el caso del compuesto de fórmula V, donde R_{1} es hidroximetilo, los compuestos de fórmula V se preparan además haciendo reaccionar un compuesto de fórmula III con una base fuerte, tal como hidruro de sodio, diisopropil-amida, o bis-trimetilsilil) amida de litio, en un disolvente aprótico tal como tetrahidrofurano (THF). El anión resultante luego se trata con óxido de etileno. Alternativamente, en el caso de un compuesto de fórmula V, en el cual R_{1} es hidroximetilo, los compuestos de fórmula V se preparan también realizando una división oxidativa del compuesto de fórmula III, dimetil 2-(2-propenil)-2-(4-fenoxifenil) malonato, con ozono y reduciendo la ozonida resultante con una fosfina o un tiol para dar el aldehido que luego se reduce al alcohol, usando un agente reductor tal como borohidruro de sodio.

Los compuestos de fórmula I se preparan calentando los compuestos de fórmula V con urea en presencia de Mg(OCH_{3})_{2} como pasta a una temperatura entre 80 y 100ºC durante un período de tiempo necesario para completar la reacción.

Si se desea, se puede convertir un compuesto acídico de la fórmula I en una sal farmacéuticamente aceptable con una base de manera conocida. Las sales adecuadas son aquellas que derivan no solamente de bases inorgánicas, por ejemplo, sales de sodio, potasio o calcio, sino que también de bases orgánicas tales como etilendiamina, monoetanolamina o dietanolamina.

Los compuestos de fórmula I y sus sales farmacéuticamente aceptables y profármacos inhiben la metalo-proteasa matriz y por lo tanto son útiles para tratar o controlar el cáncer asociado con la sobreexpresión de gelatinasa-A y/o gelatinasa-B, particularmente cáncer de piel, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón y cáncer gástrico. Los compuestos de la invención son también útiles para otras enfermedades asociadas con la degradación no regulada de la matriz extracelular, incluyendo la artritis reumatoide, osteo-artritis, esclerosis múltiple, ulceración corneal, enfermedad periodontal y similares.

La gelatinasa 72 kDa humana fue purificada a partir del medio condicionado de fibroblastos fetales de pulmón de acuerdo con métodos conocidos. La enzima se almacenó en la pro-forma a 80ºC y se activó antes de usarla mediante tratamiento con 1 mM de aminofenil mercuriacetato (APMA) durante una hora a 37ºC, luego fue dializado frente a un tampón de reacción antes de utilizarlo. La gelatinasa neutrófila humana (gelatinasa 95 kDa) fue purificada a partir de un medio condicionado de células NSO de acuerdo con métodos conocidos. Esta enzima fue asimismo almacenada en forma de zimógena a -80ºC. Fue activada mediante tratamiento con tripsina (5 \mug./ml.) durante una hora a 37ºC, seguido de la adición de inhibidor de tripsina pancreática bovina a 50 \mug./ml. La matrilisina humana se obtuvo a partir de un sistema de expresión bacteriano como constructor de fusión de ubiquitina Welch, A.R., Holman, C.M., Browner, M.F. Gehring, M.R., Kan, C.-C., & Van Wart, H.E. (1995) Arch. Biochem. Biophys. 324, 59-64. La forma madura de la matrilisina se purificó luego de la activación con 1 mM de APMA (1 hora, 37ºC) y la enzima activa almacenada a -80ºC. El dominio catalítico humano de la colagenasa-3 se obtuvo de manera análoga a aquella de la matrilisina. La forma final de la colagenasa-3 usada para estos estudios se formó de los residuos Tyr_{104}-Asn_{274} a partir de la secuencia de colagenasa de longitud completa. El dominio catalítico de la estromelisina-1 humana se produjo vía la expresión de E. coli y la purificación de acuerdo con métodos conocidos; el dominio catalítico activado se almacenó a -80ºC.

Los métodos de ensayo utilizaron el sustrato fluorgénico: Dnp-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH_{2}. (Dnp = dinitro fenil); Cha = ciclohexilalanina; Cys(Me) = S-metil cisteína, Lys(NMA) = N_{\varepsilon}-metil-antranoil-l-lisina). Las soluciones madre se prepararon en DMSO. Las soluciones madre de los compuestos de fórmula I (inhibidor) se prepararon además en DMSO. Todas las reacciones tenían un nivel de DMSO final neto de 5% (v/v) en los tampones indicados para las enzimas.

En el caso de las gelatinasa-A y gelatinasa-B, el tampón fue pH 7,5, 50 mM TrisHCl, 200 mM NaCl, 5mM CaCl_{2}, 20 \muM ZnCl_{2}, 0,05% (peso/vol.) Brij-35. En el caso de la matri-lisina y el dominio catalítico de la colagenasa-3, la composición tampón tenía un pH de 7,5, 50 mM Hepes, 200 mM NaCl, 5 mM CaCl_{2}, 20 \muM ZnCl_{2}, 0,05% (peso/vol.) Brij-35. La concentración del sustrato final en todos los casos fue de 10 \muM. Las concentraciones aproximadas para las enzimas eran:

gelatinasa-A, 0,8 nM; gelatinasa-B, 0,5 nM; colagenasa-3, 0,4 nM; matrilisina 10 nM. Para desarrollar el ensayo de división de péptidos, el recipiente que contiene el tampón y el compuesto de fórmula I se equilibraron previamente a 37ºC, luego la reacción se inició por adición sucesiva de materiales concentrados de enzimas y materiales de enzima y sustrato y se continuó la incubación a 37ºC. En períodos sucesivos entre 30 y 120 minutos, se obtuvieron partes alícuotas de 50 \mul de los ensayos y la reacción enzimática se obtuvo por adición a 150 \mul de 30 mM EDTA (pH 7,4) en el pozo de una placa de microtitulación de fondo plano de color negro. El alcance de la conversión del sustrato se determinó por lectura de fluorescencia de las reacciones detenidas (longitud de onda de excitación: 355 nm; longitud de onda de emisión: 460 nM). Se realizaron controles positivos en ausencia del inhibidor; los controles negativos no tenían enzimas y demostraron una división espontánea negligible.

Los diagramas de fluorescencia tiempo (30-120 minutos) eran lineales; la comparación con estándares demostraron que la conversión del sustrato era de <20% en todos los ejemplos. Se obtuvo una proporción en cada concentración del inhibidor a partir de cuadrados menos lineales adaptados al curso de tiempo de fluorescencia. La inhibición porcentual en la concentración del inhibidor [I] fue calculado como:

% inh. [I] = 100 (1-proporción [I]/proporción PC)

donde

% inh. [I] = inhibidor porcentual en la concentración del inhibidor [I]

proporción [I] = proporción en la concentración del inhibidor [I]

proporción PC = proporción de control positivo.

La IC_{50} para el inhibidor se obtuvo luego adaptando la dependencia de la concentración de % inh.[I] para la isoterma de unión simple.

% inh. [I] = 100(([I]/(IC_{50} + [I]))

Las mediciones de estromelisina-1: se probó el dominio catalítico de estromelisina-1 usando el mismo sustrato pero con un protocolo modificado. El tampón de ensayo tenía un pH de 6,5 50 mM Mes, 2,5 mM EDTA, 5 mM CaCl_{2} y 0,05% (peso/ vol.) Brij-35. La concentración del sustrato era de 10 \muM y la concentración de enzimas era de 10 nM. Se desarrollaron las reacciones a temperatura ambiente. Las porciones apropiadas de tampón, sustrato e inhibidor se combinaron en el pozo de una placa de microtitulación de fondo plano, de color negro. La reacción comenzó por la adición de una alícuota de material enzimático y la fluorescencia generada se leyó directamente después de 60 minutos. Los controles positivos se realizaron en ausencia del inhibidor. A los controles negativos les faltaron enzimas y demostraron un aumento finito durante el curso del ensayo; para corregir las reacciones enzimáticas, esta fluorescencia precedente se redujo a partir de los valores para el control positivo y las reacciones inhibidas. El % inh. [I] se calculó como:

% inh. [I] = 100(1-flúor[I]/flúor PC)

donde flúor [I] = fluorescencia corregida a 60 minutos observada para la concentración del inhibidor [I]

Flúor PC = fluorescencia corregida a 60 minutos bóxer-vada para el control positivo.

La IC_{50} para el inhibidor se obtuvo luego por adaptación del % inh.[I] a la isoterma de unión de sitio único que indica precedentemente.

Se dan las IC_{50} en la Tabla a continuación para los compuestos de fórmula I.

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A = 5-metil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona.

B = 5-hexil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona.

C = 5-benciloximetil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona.

D = 5-(2-hidroxietil)-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona.

Los compuestos de fórmula I y sus sales y profármacos se pueden utilizar como medicamentos, por ejemplo, en forma de preparaciones farmacéuticas, que puede administrarse oralmente, por ejemplo, en forma de tabletas, tabletas recubiertas, grageas, cápsulas de gelatina dura o blanda, soluciones, emulsiones o suspensiones. Dichas preparaciones se pueden administrar en forma rectal, por ejemplo, mediante supositorios o en forma parenteral, por ejemplo, en forma de soluciones de inyección.

Para la fabricación de preparaciones farmacéuticas, estos compuestos pueden formularse con portadores terapéuticamente inertes, orgánicos e inorgánicos. Se pueden utilizar lactosa, almidón de maíz o derivados de los mismos, talco, ácido esteárico o sus sales como portadores para tabletas, tabletas recubiertas, grageas, cápsulas de gelatina dura y blanda. Los portadores adecuados para las cápsulas de gelatina blanda son aceites vegetales, ceras grasas, polioles semisólidos o líquidos. Teniendo en cuenta la naturaleza de la sustancia activa, en general, no se requiere ningún portador, sin embargo, requerido en el caso de las cápsulas de gelatina blanda. Los portadores adecuados para la fabricación de soluciones y jarabes son agua, polioles, sacarosa, azúcares invertidos y glucosa. Los portadores adecuados para las soluciones de inyección son agua, alcoholes, polioles, glicerina y aceites vegetales. Los portadores adecuados para los supositorios son aceites naturales o endurecidos, ceras, grasas y polioles semi-líquidos.

Las preparaciones farmacéuticas pueden también contener agentes conservantes, agentes solubilizantes, agentes estabilizantes, agentes humidificantes, agentes emulsionantes, agentes endulzantes, agentes colorantes, agentes saborizantes, sales para variar la presión osmótica, tampones, agentes de recubrimiento o antioxidantes. Los mismos pueden contener además otras sustancias terapéuticamente valiosas.

Los compuestos de fórmula I y sus sales mencionadas precedentemente y profármacos pueden utilizarse en el tratamiento o control del cáncer asociado con la sobre-expresión de gelatinasa-A y/o gelatinasa-B, particularmente cáncer de piel, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón y cáncer gástrico. Los compuestos de la invención son también útiles para otras enfermedades asociadas con la degradación no regulada de matriz extracelular, incluyendo artritis reumatoide, osteo-artritis, esclerosis múltiple, ulceración corneal, enfermedad periodontal y similares. La dosis puede variar dentro de límites amplios y se ajusta a los requerimientos individuales de cada caso particular. En general, en el caso de la administración oral o parenteral a los humanos adultos, es apropiada una dosis diaria de aproximadamente 10 mg a 1.000 mg y preferentemente de 100 mg a 500 mg, aunque el límite superior pueda excederse cuando esto sea conveniente. Se puede administrar la dosis diaria como dosis única o en dosis divididas, o para administración parenteral, se puede dar como infusión continua.

Los siguientes ejemplos ilustran, sin limitación, la presente invención. Tal como se utiliza en la presente invención, el THF significa tetrahidrofurano y EtOAc significa acetato de etilo.

Ejemplo 1

(Referencia)

A una suspensión de NaH (1,02 g de NaH al 60% en aceite mineral lavado con hexanos, 0,61 g, 25,6 mmol) en THF anhidro (30 ml), se agregó metil(4-fenoxifenil)acetato(2,7 g, 11,1 mmol) en THF anhidro (10 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se agregó dimetilcarbonato (4,0 g, 3,75 ml, 44,4 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante la noche y luego se enfrió a temperatura ambiente, se enfrió con 1 N HCl (60 ml) y se extrajo con éter (2 x 100 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua, luego con salmuera, luego se secaron (Na_{2}SO_{4}) concentraron y purificaron usando HPLC (porasil), se eluyeron con 15% EtOAc/hexanos para dar 2,56 g de dimetil 2-(4-fenoxifenil)malonato en forma de sólido blanco: RMN ^{1}H (200 mHz, CDCl_{3}) \delta 7,39-6,92 (9H, m), 4,65 (1H, s), 3,75 (6H, s).

Ejemplo 2

(Referencia)

Una solución de NaOCH_{3} (preparada dando 0,23 g de metal de Na para reaccionar con 7,2 ml de CH_{3}OH anhidro), se agregó dimetil 2-(4-fenoxifenil) malonato (1,0 g, 3,33 mmol) seguido de urea (0,4 g, 6,66 mmol). La mezcla de reacción blanca resultante se refluyó durante 24 horas y luego se enfrió a 0ºC y se acidificó con 3 N HCl. Los sólidos blancos se filtraron y lavaron con agua y se secaron para dar 900 mg del producto crudo. Esto luego fue purificado por titulación con EtOAc/hexanos (1:1) para dar 5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona en forma de polvo blanco (830 mg): RMN ^{1}H(400 mHz CDl_{3}) 3:2 forma ceto/enol \delta 11,38 (forma ceto 2xNH, s), 10,58 (forma enol 2xNH, s), 7,46-6,91 (9H, m), 4,85(H-5, s); HRMS calculado para C_{16}H_{12}N_{2}O_{4} 296,0796; Encontrado: 296,0806.

Ejemplo 3

Realizado bajo una atmósfera inerte:

A una suspensión de NaH (16,21 g de 60% en aceite mineral, 9,72 mg, 0,405 mmol) en THF anhidro se agregó 5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona (100 mg, 0,34 mmol). Luego de agitar la mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos, se agregó yoduro de metilo (48,2 mg, 0,34 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas y luego se agregó NaH adicional (24 mg de 60% en aceite mineral, 14 mg, 0,60 mmol), seguido de yoduro de metilo (96,4 mg, 0,86 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y luego refluyó durante la noche. La solución de reacción se diluyó con EtOAc y luego se enfrió con 1 N HCl. La capa orgánica se separó, se lavó con agua, salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}), se concentró y luego se purificó mediante cromatografía en un Comatotrón usando una placa de gel de sílice (1.000 micrones) con 30% EtOAc/hexanos y luego 50% EtOAc/hexanos y finalmente EtOAc para dar 1,3-di-N-metil-5-metil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona (7,3 mg) y 1-N-metil-5-metil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona (10,0 mg) y luego 5-metil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona (27 mg) a los fines de la elución.

Espectros para 5-metil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona: RMN ^{1}H(200 mHz, CD_{3}OD \delta 7,37-6,95 (9H, m), 1,77 (3H, s); HRMS calculado para C_{17}H_{14}N_{2}O_{4} 310,0954; Encontrando: 310,0963.

RMN ^{1}H (200 mHz, CDCl_{3}) \delta 8,38 (1NH, s), 7,39-6,92 (9H, m), 3,31 (3H, s), 1,86 (3H, s); HRMS calculado para C_{18}H_{16}N_{2}O_{4} 324,1110; Encontrando 324,1116.

Espectros para 1,3-di-N-metil-5-metil-5-(4-fenoxifenil) pirimidin-2,4,6-triona: RMN ^{1}H(200 mHz, CDCl_{3}) \delta 7,38-6,91 (9H, m), 3,34 (6H, s), 1,85 (3H, s); HRMS calculado para C_{19}H_{18}N_{2}O_{4} 338,1267; Encontrando: 338,1267.

Ejemplo 4

Paso 1

Realizado bajo una atmósfera inerte:

A una suspensión de NaH (144 mg de 60% en aceite mineral lavado con hexanos, 86,4 mg, 3,6 mmol) en THF anhidro se agregó cuidadosamente dimetil 2-(4-fenoxi-fenil)malonato (900 mg, 3,0 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y luego se agregó 1-yodohexano (1,27 g, 0,89 ml, 6,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora y luego se calentó a reflujo durante la noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se templó con 1N HCl (20 ml) y se extrajo con éter (2x40 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con Na_{2}S_{2}O_{3}, agua, luego con salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}), concentraron y purificaron por cromatografía usando un Cromatotrón con una placa de gel de sílice (4.000 micrones) eluída con 13% EtOAc/hexanos para dar 950 mg de dimetil-2-(4-fenoxifenil)-2-n-hexilmalonato en forma de aceite viscoso. RMN ^{1}H(200 mHz, CDCl_{3}) \delta 7,39-6,92 (9H, m), 3,75 (6H, s), 2,10 (2H, t); 1,29 (8H, m); 0,87 (3H, t).

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Paso 2

Se preparó Mg(OCH_{3})_{2} de la siguiente manera: A un matraz de fondo redondo de 25 ml bajo atmósfera de argón se agregaron trocitos de Mg (90 mg, 3,70 mmol), CH_{3}OH anhidro (2 ml), 2 gotas de CCl_{4} y una cantidad catalítica de polvo de Mg. Tuvo lugar una reacción exotérmica y se observó una evolución de gas de hidrógeno. Después de remitir la reacción exotérmica inicial, la mezcla de reacción se calentó hasta reflujo durante 1 hora y luego se enfrió a temperatura ambiente. Se agregaron dimetil 2-(4-fenoxi-fenil)-2-n-hexilmalonato (500 mg, 1,30 mmol) y urea (162 mg, 2,70 mmol) al Mg(OCH_{3})_{2}. La mezcla de reacción se calentó a 85-90ºC durante 1 hora y luego el exceso de CH_{3}OH se destiló hasta que se obtuvo una pasta fluida y esta pasta luego se calentó a 85-90ºC durante la noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc y se lavó con 1N HCl. La capa acuosa acídica se extrajo nuevamente con EtOAc. Los extractos combinados de EtOAc se lavaron con agua, salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron. El aceite resultante se purificó con HPLC (porasil) usando 30% EtOAc/ hexanos como eluyente para dar 330 mg de 5-n-hexil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona en forma de espuma blanca: RMN ^{1}H(400 mHz, DMSO-d6) \delta 11,71 (2NH, s), 7,42-6,99 (9H, m), 2,22 (2H,s), 1,24 (8H, m); 0,85 (3H, t) HRMS calculado para C_{22}H_{24}N_{2}O_{4} 380,1736; Encontrado: 380,1740.

Ejemplo 5

Paso 1

Realizado bajo una atmósfera inerte:

A una suspensión de NaH (0,37 g de 60% en aceite mineral lavado con hexanos, 0,22 mg, 9,2 mmol) en THF anhidro se agregó cuidadosamente dimetil 2-(4-fenoxifenil) malonato (2,5 g, 8,33 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se agregó éter de bencilclorometilo (1,43 g, 1,27 ml, 9,16 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche y luego se enfrió con NH_{4}Cl sat. y luego se extrajo con éter (100 ml). El extracto de éter se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar 4,0 g de aceite viscoso. Esto se purificó usando HPLC (porasil), eluyendo con 15% EtOAc/hexanos para dar 2,1 g de dimetil-2-benciloximetil-2-(4-fenoxifenil)-malonato en forma de aceite viscoso. RMN ^{1}H(200 mHz, CDCl_{3}) \delta 7,48-6,95 (14H, m), 4,55 (2H, s), 4,20 (2H, s); 3,75 (6H, s).

Paso 2

Se preparó Mg(OCH_{3})_{2} según se describe en el Ejemplo 4, Paso 2: Mg (116 mg, 4,76 mmol), CH_{3}COH (3,0 ml), 1 gota de CCl_{4}, cantidad catalítica del polvo de Mg. A esto se agregó dimetil 2-benciloximetil-2-(4-fenoxifenil)malonato (700,0 mg, 1,67 mmol), urea (208,0 mg, 3,47 mmol) y se calentó para refluir y luego el exceso de CH_{3}OH se destiló hasta que se obtuvo una pasta. La pasta resultante luego se calentó a 85-90ºC durante la noche. La reacción según se describe en el Ejemplo 4, dio luego de la concentración, un aceite viscoso (0,75 g) que fue cromatografiado usando un Cromatotron con una placa de gel de sílice (4000 micrones) y eluyó con 40% et/hexanos para dar 180 mg de 5-benciloximetil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona en forma de sólido blanco: RMN ^{1}H(400 mHz, DMSO-d6) \delta 8,01 (2NH, s), 7,38-6,94 (15H, m), 4,58 (2H, s), 4,27 (2H, s); HRMS calculado para C_{24}H_{20}N_{2}O_{5} 416,1372; Encontrado: 416,1383.

Ejemplo 6

Paso 1

Una solución de dimetil 2-(4-fenoxifenil)malonato (2,56 g, 8,54 mmol) en THF anhidro (50 ml) se enfrió a -78ºC y luego se agregó diisopropilamida de litio (4,7 ml de una solución de 2M en THF, 9,8 mmol. La reacción se agitó a -78ºC durante 1 hora y luego se agregó bromuro de alilo (11,4 mg; 9,4 mmol). La reacción se agitó a -78ºC durante 3 horas y luego se entibió a temperatura ambiente y se calentó en un baño de aceite de 75ºC hasta completar la reacción por TLC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y luego se enfrió con 1N HCl. La extracción con éter y el secado de los extractos de éter (MgSO_{4}) dieron el producto crudo. La purificación por filtración a través de gel de sílice 60 (malla de 70-230), usando EtOAc, seguido de HPLC (porasil) usando 11% EtOAc/hexanos dieron 1,8 g de dimetil 2-(2-propenil)-2-(4-fenoxifenil)malonato en forma de aceite viscoso: RMN ^{1}H(200 mHz, CDCl_{3}) \delta 7,4-6,85 (9H, m), 5,75 (1H, m), 5,05 (2H, m), 3,75 (6H, s), 3,1 (2H, d).

Paso 2

Una solución de dimetil 2-(2-propenil)-2-(4-fenoxi-fenil)malonato (1,8 g, 5,3 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (200 ml) se enfrió a -70ºC y luego se burbujeó O_{3} hasta obtener un color azul. La solución azul fue desgasificada con argón y aún a -70ºC fue tratada con Ph_{3}P (4,0 g, 15,2 mmol) y se entibió lentamente a temperatura ambiente. La concentración seguida de purificación por HPLC (porasil) usando 20% EtOAc/hexanos dio 1,66 g del aldehído en forma de aceite. Esto se disolvió en CH_{3}OH (50 ml) y se agregó NaBH_{4} (0,184 g, 4,85 mmol) y se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 30 minutos. Luego de la concentración, el residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con agua, salmuera y luego se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar 1,55 g de una mezcla de dimetil 2-(2-hidroxietil)-2-(4-fenoxifenil)malonato y su lactona derivada.

Paso 3

Se preparó Mg(OCH_{3})_{2}, según se describe en el Ejemplo 4, paso 2 a partir de: Mg (116 mg, 4,76 mmol), 3 ml de CH_{3}OH, 1 gota de CCl_{4} y una cantidad catalítica de polvo de Mg. A esto se agregó la mezcla precedente de dimetil 2-(2-hidroxietil)-2-(4-fenoxifenil)malonato y su lactona derivada (521 mg, 1,67 mmol) y urea (228 mg, 3,47 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo y luego se destiló CH_{3}OH hasta obtener una pasta. La pasta resultante se calentó a 85-90ºC durante 8 horas y luego se enfrió a temperatura ambiente. La reacción estaba dividida entre EtOAc y 10 ml 1N HCl. La capa de EtOAc se separó, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró para dar 600 mg de un producto crudo. Se realizó la cromatografía usando un Cromatotron con una placa de gel de sílice (2000 micrones) y eluyó con EtOAc que dio 120 mg del compuesto puro 5-(2-hidroxietil)-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona en forma de sólido blanco: IR(KBr) 3214. 1765 (sh), 1705 cm-1; RMN ^{1}H(400 mHz, DMSO-d6) \delta 11,48 (2H, br, s, N-H); 7,45-6,95 (9H, m); 4,85 (1H, t, OH); 3,50 (2H, m); 2,50 (2H, m); HRMS calculado para C_{18}N_{16}N_{2}O_{5} 340,1059; Encontrado: 340,1055.

Ejemplo 7 Formulación de Tableta

7

Procedimiento de fabricación

1.: Mezclar los productos 1, 2 y 3 en un mezclador adecuado durante 15 minutos.

2.: Granular la mezcla en polvo del Paso 1 con 15% de solución de Povidona K30 (Producto 4).

3.: Secar la granulación del Paso 2 a 50ºC.

4.: Pasar la granulación del Paso 3 a través de un equipo de molido adecuado.

5.: Agregar el producto 5 a la granulación molida del Paso 4 y mezclar durante 5 minutos.

6.: Comprimir la granulación del Paso 5 en una prensa adecuada.

7.: Utilizar un sistema de pulverización de aire adecuado, revestir los granos del Paso 6 con una Suspensión para recubrimiento de película que contiene hidroxipropil metilcelulosa 6 cps-2910, talco y dióxido de titanio.

Ejemplo 8 Formulación de cápsula

8

1. Mezclar los productos 1, 2 y 3 en un mezclador adecuado durante 15 minutos.

2. Agregar los productos 4 y 5 y mezclar durante 3 minutos.

3. Rellenar la cápsula con la mezcla del Paso 2.

Claims

1. Compuestos de fórmula I

9

donde

R^{1}: es hidrógeno, alquilo, alquilo C_{1}, hidroximetilo o benciloxilo; y

R^{2}: es fenoxilo; y sales respectivas farmacéuticamente aceptables de un compuesto acídico de fórmula I.

2. Los compuestos de la reivindicación 1, donde R_{2} se encuentra en la posición para.

3. 5-metil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona.

4. 5-hexil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona.

5. 5-benciloximetil-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona.

6. 5-(2-hidroxietil)-5-(4-fenoxifenil)pirimidin-2,4,6-triona.

7. Un compuesto según se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-6 para uso como medicamento.

8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-6 y un portador farmacéuticamente aceptable.

9. El uso de un compuesto, según se define encualquiera de las reivindicaciones 1-6, en la fabricación de un medicamento que contiene dicho compuesto para el tratamiento o control de cáncer de piel, cáncer de pecho, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, artritis reumatoide, osteoartritis, esclerosis múltiple, ulceración corneal o enfermedad periodontal.