RU2400233C1 - Способ лечения заболеваний печени различного генеза - Google Patents
Способ лечения заболеваний печени различного генеза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2400233C1 RU2400233C1 RU2009126442/14A RU2009126442A RU2400233C1 RU 2400233 C1 RU2400233 C1 RU 2400233C1 RU 2009126442/14 A RU2009126442/14 A RU 2009126442/14A RU 2009126442 A RU2009126442 A RU 2009126442A RU 2400233 C1 RU2400233 C1 RU 2400233C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- liver
- group
- animals
- medicine
- treatment
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
- A61K31/515—Barbituric acids; Derivatives thereof, e.g. sodium pentobarbital
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
- C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
- C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
- C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
- C07D239/60—Three or more oxygen or sulfur atoms
- C07D239/66—Thiobarbituric acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, и касается лечения заболеваний печени различного генеза. Для этого в качестве гепатопротекторного средства вводят производные бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)арилметанов. Способ обеспечивает снижение проявлений цитолиза под воздействием повреждающих агентов, достоверное снижение диспротеинемии, ускорение восстановления детоксикационных процессов печени, повышение индукции эндогенного интерферона альфа и, как следствие, повышение эффективности защиты клеток печени при гепатитах различного генеза. 5 табл.
Description
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для лечения заболеваний печени различного генеза.
Известны способы лечения заболеваний печени путем введения в организм органических гепатопротекторных средств природного или синтетического происхождения, например «Essentiale», действующее вещество - фосфолипиды эссенциальные (http://essenciale.lek-va.ru/) проникают в клетки печени, внедряются в мембраны гепатоцитов, нормализуют в определенной степени функции печени, метаболизм липидов и белков, улучшают регенерацию и тормозят формирование в печени соединительной ткани.
Более эффективен способ лечения заболеваний печени путем введения простенона, RU 1821209 А1.
По сравнению с вышеописанным способом обеспечивается сокращение сроков наступления ремиссии, способ более эффективен в отношении редуцирования таких проявлений заболевания, как слабость, повышенная утомляемость, тяжесть в правом подреберье; гипераланинемия, гипербилирубенемия, повышенные показатели щелочной фосфатазы и тимоловой пробы, содержания в крови альбуминов, гамма-глобулинов, иммуноглобулинов А и G, кортизола; происходит нормализация нарушенного соотношения между Т-хелперами и Т-супрессорами, снижение содержания в крови белковосвязанного оксипролина.
Основным недостатком этого способа является то обстоятельство, что он не может быть реализован при наличии достаточно широкого круга сопутствующих заболеваний, являющихся противопоказанием для назначения простагландинов Е: патология женской половой сферы, гипотония, диарея различной этиологии, заболевания век, аллергические реакции и др.
Известен также способ лечения заболеваний печени различного генеза путем введения гепатопротекторного средства, в котором с целью повышения эффективности лечения используют средство (в дальнейшем ТДАА), содержащее трис-[N-(2,3-диметилфенил) антранилато] алюминий, сахар молочный, крахмал, поливинилпирролидон низкомолекулярный, твин 80, аэросил А-380, кальций стеариновокислый при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Трис-[N-(2,3-диметилфенил) антранилато] алюминий | 45,24-50,00 |
Сахар молочный | 4,52-5,0 |
Крахмал | 39,21-43,36 |
Поливинилпирролидон | 3,39-3,75 |
Твин-80 | 0,72-0,80 |
Аэросил А-380 | 0,95-1,05 |
Кальций стеариновокислый | 0,95-1,05, |
RU 2035906 C1.
Данный способ принят в качестве прототипа настоящего изобретения.
Эффективность и безвредность способа-прототипа проверялась на лабораторных животных. При этом установлено, что хотя прототип обладает определенным гепатопротекторным действием, уровень защитного действия при реализации способа-прототипа сравнительно невысокий; кроме того, способ-прототип не оказывает направленного влияния на уровень эндогенного интерферона альфа и не инактивирует таким образом вирусы гепатита различного типа, в том числе широко распространяющегося вируса гепатита С.
Задачей настоящего изобретения является создание способа лечения гепатитов различного генеза, обеспечивающего повышение эффективности защиты клеток печени, а также обеспечение специфической противовирусной активности, реализуемой за счет индукции синтеза в организме собственного эндогенного интерферона альфа.
Согласно изобретению в способе лечения заболеваний печени различного генеза путем введения гепатопротекторного средства в качестве гепатопротекторного средства используют производные бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)арилметанов.
Производные бис (2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)арилметанов имеют общую формулу:
где Х выбран из группы кислород, сера,
R1 выбран из группы водород, алкоксигруппа,
R2 выбран из группы нитрогруппа, гидроксигруппа, алкоксигруппа,
Cat+ выбран из группы протон, пиридиний- или 2-гидроксиэтил-аммоний-катион
В заявляемом способе использованы следующие производные:
Применяемые в способе вещества являются новыми и приведены ниже в таблице 1.
Таблица 1. | |||||
№ | X | Cat | R1 | R2 | Название |
I | O | H3N+CH2CH2OH | H | NO2 | 2-гидроксиэтиламмониевая соль бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)(4-нитробензил)метана |
II | S | C5H5NH+ | H | ОН | пиридиниевая соль бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)(4-гидроксибензил)метана |
III | S | C5H5NH+ | H | NO2 | пиридиниевая соль бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)(4-нитробензил)метана |
IV | S | C5H5NH+ | MeO | MeO | пиридиниевая соль бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)(2,4-диметоксибензил)метана |
V | O | H+ | H | NO2 | бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)(4-нитробензил)метан |
Вещества I-IV получены следующим образом:
Смесь 3 ммоль барбитуровой кислоты и 1,5 ммоль соответствующего альдегида в 10-15 мл пиридина кипятят с обратным холодильником в течение 1-2 ч. После охлаждения реакционной массы осадок отфильтровывают, промывают ацетоном и сушат при 55-60°С при остаточном давлении 30 мм рт.ст. Для выделения тиопроизводных из реакционной массы к ней добавляют 10-20 мл диоксана или воды, выпавший осадок отфильтровывают, промывают этанолом и сушат. Для проведения реакций используют 3 ммоля барбитуровой кислоты и 1,5 ммоля соответствующего альдегида. Для выделения продуктов из реакционной массы к ней добавляют 10-20 мл диоксана или воды, выпавший осадок отфильтровывают, промывают этанолом и сушат.
Для получения вещества V к смеси 1 г 2-тиобарбитуровой кислоты и 10 мл этанола добавляют раствор 0.5 г бензальдегида в 10 мл этанола. После перемешивания реакционной массы при 20°С в течение 20-30 мин осадок отфильтровывают и сушат.
Ниже в таблице 2 приведены спектры протономагнитного резонанса растворов веществ I-V в диметилсульфоксиде.
Таблица 2 | ||||
№ | Сα | Ar | Ру | NH |
I | 5.91 с | 6.82 д (2Н, Н2,6), 7.47 д (2Н, Н3,5), J 8 Гц | 2.69 т (4Н, CH2N), 3.44 т (4Н, CH2O), J 5.4 Гц | - |
II | 5.87 с | 6.55 д (2Н, Н2,6), 6.77 д (2Н, Н3,5), J 8.3 Гц | 7.65 м (4Н. Н3,5), 8.10 м (2Н, Н4), 8.71 м (4Н, Н2,6) | 11.57 с |
III | 6.06 с | 7.25 д (2Н, Н2,6), 8.06 д (2Н, Н3,5), J 8.5 Гц | 7.69 м (4Н. Н3,5), 8.15 м (2Н, Н4), 8.72 м (4Н, Н2,6) | 11.72 с |
IV | 5.85 с | 6,31 д (1Н, Н5), 6,35 с (1Н, Н3), 6.91 д (1H, Н6), J 8.4 Гц | 7.61 м (4Н. Н3,5), 8.06 м (2Н, Н4), 8.70 м (4Н, Н2,6) | 11.47 с |
V | 6.06 с | 7.26 д (2Н, Н2,6), 8.07 д (2Н, Н3,5), J 8.3 Гц | - | 11.69 с |
Заявленный способ поясняется приводимыми далее примерами.
Известно, что механизмы гепатотоксичности - воспаление, цитолиз и холестаз - универсальны и неспецифичны вне зависимости от агента, индуцирующего повреждение печени [Frezza E.E. et al. Sex hormones and trace elements in rat CCl4-induced cirrhosis and hepatocellular carcinoma. - European Journal of Cancer Prevention. 2(4), 357-359, 1993; Lin S.C. et al. Hepatoprotective effects of Taiwan folk medicine: Ixeris chinensis (Thunb.) Nak on experimental liver injuris. - American Journal of Chinese Medicine. 22(3-4), 243-54, 1994.]. Таким образом, повреждения клеток печени сходны как при гепатите, вызванном различными бактериями, в том числе рода Leptospira, химическими воздействиями на производствах или в результате попадания отравляющих веществ в воду или продукты питания, а также являющимися результатом воздействия алкоголя, ряда лекарственных препаратов, например цитостатиков, радиационным воздействием, а также различными вирусами (вирусы гепатита А, Е, В, D, С и некоторыми пока окончательно неидентифицированные).
В отношении противовирусной защиты следует отметить, что реализация заявляемого способа вызывает в организме человека повышение уровня эндогенного интерферона альфа. Интерферон альфа способствует защите клеток от различных вирусов, в том числе и поражающих клетки печени (Hoofnagle, J.H., Di Bisceglie, A.M. (1997). The Treatment of Chronic Viral Hepatitis. NEJM 336: 347-356; Malaguarnera M., Di Fazio I., Ferlito L., Pistone G., Restuccia N., Trovato B.-A., Romano M. A comparison of four types of interferon alpha in the treatment of chronic hepatitis C. Curr Ther Res Clin Exp. 1998; 59 (1): 48-59).
Заявленный способ проверен на 100 нелинейных крысах-самцах массой 250-270 г на доступной и воспроизводимой модели токсического гепатита. Животные поступили из питомника «Рапполово», Санкт-Петербург.
Экспериментальным животным, за исключением интактных, вводили токсикант - CCl4 в дозе 1,0 мл/кг в 50% растворе оливкового масла внутрижелудочно (в/ж) ежедневно в течение 5 дней через атравматический зонд. Через 5 дней наличие токсического гепатита подтверждалось по морфологической картине печени, биохимическим и функциональным показателям. Через 24 ч после последнего введения гепатотоксиканта оставшиеся в живых крысы были рандомизированы по массе и разделены на опытные группы. Животным групп 3, 4 и 5 вводили известные гепатопротекторы, животным групп 6-10 вводили приведенные в таблице 1 вещества:
группа 1 - интактная (n=10);
группа 2-CCl4 (n=10);
группа 3 - CCl4 + Эссенциале в/ж 100 мг/кг (n=10);
группа 4 - CCl4 + Карсил в/ж 100 мг/кг (n=10);
группа 5 - CCl4 + ТДАА;
Гепатопротекторы вводили с лечебной целью в течение 10 дней в следующих дозах: эссенциале - 100 мг/кг; карсил - 100 мг/кг; способ-прототип - ТДАА - 100 мг/кг, заявленный способ - вещества I-V - 50 мг/кг. Животные 2 группы вместо лечения получали эквиобъемное количество CCl4. Введение осуществлялось внутрижелудочно с помощью атравматичного металлического зонда. В качестве растворителя использовали легкую крахмальную взвесь.
Декапитацию крыс проводили под легким эфирным наркозом через 5 и 10 дней после начала эксперимента.
Для дифференциальной диагностики основных патологических синдромов определяли активность ферментов печеночного происхождения в сыворотке крови. Оценку степени выраженности цитолитического, холестатического и мезенхимально-воспалительного синдромов проводили с помощью стандартных биохимических методик с использованием реактивов Био-Ла-Тест фирмы "Lachema". При исследовании уровня индикаторных ферментов цитолитического синдрома определяли активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (ACT), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), γ-глутамилтрансферазы (γ-ГТФ) и кислой фосфатазы (КФ). Экскреторную функцию печени оценивали также по содержанию билирубина и активности экскреционного фермента-маркера холестаза щелочной фосфатазы (ЩФ). Содержание в крови липидов определяли по уровню холестерина и общих липидов, диспротеинемию - по уровню общего белка и тимоловой пробе [1. Методические указания по изучению гепатозащитной активности фармакологических веществ. В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническорму) изучению новых фармакологических веществ. М., Ремедиум. 2000, с.228-231; 2. Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник под ред. В.В.Меньшикова. М., Медицина, 1987, 365 с].
Перекисное окисление липидов и активность антиоксидантной системы печени оценивали по содержанию восстановленного глутатиона в печени [Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник под ред. В.В.Меньшикова. М., Медицина, 1987, 365 с], резерву сульфгидрильных групп в крови [Клиническая оценка лабораторных тестов. Под ред. Н.У.Тица, М., Медицина, 1986, 480 с. Kindsay R.H., Kitchm K.T., Sedlak J., Lindsay R.H. Estimation of total protein bound and nonprotein sulfhudryl group in tissues with Ellman plangent. // Anal/biochem., 1968. - 25(1-3). - p.192-205].
Динамику массы тела крыс определяли на весах ВЛР-500.
Печень животных для определения ее относительной массы (отношение массы печени в 1 мг к массе тела в 1 г), характеризующей степень выраженности воспалительного процесса в органе, взвешивали на электронных весах 1602 МР фирмы "Sartorius" [Венгеровский А.И., Маркова И.В., Соратиков А.С. Доклиническое изучение гепатозащитных средств. Методические рекомендации. Ведомости Фарм. Комитета, 1999. - №2. - с.9-12].
При проведении гексеналовой пробы крысам вводили внутрибрюшинно гексенал в дозе 80 мг/кг. Продолжительность наркоза животных позволяет оценить скорость метаболизма гексенала, осуществляемого цитохром Р-450-зависимой монооксигеназной системой гепатоцитов, и характеризует состояние антитоксической функции печени [Венгеровский А.И., Маркова И.В., Соратиков А.С. Доклиническое изучение гепатозащитных средств. Методические рекомендации. Ведомости Фарм. Комитета, 1999. - №2. - с.9-12, Клиническая оценка лабораторных тестов. Под ред. Н.У.Тица, М., Медицина, 1986, 480 с. Kindsay R.H., Kitchm K.T., Sedlak J., Lindsay R.H. Estimation of total protein bound and nonprotein sulfhudryl group in tissues with Ellman plangent. // Anal/biochem., 1968. - 25(1-3). - p.192-205. Кигель Г.Б. Харабаджахьян А.В. Показатели биологической нормы для лабораторных животных. Ростов-на-Дону, 1978, 95 с.].
Пробы крови и печени брали у животных после эвтаназии нембуталом в дозе 70 мг/кг.
Кроме вышеперечисленных параметров об эффективности лечения судили по клинической картине и выживаемости животных.
Применение гепатопротекторов снижало смертность животных в группах и значительно улучшало общее состояние крыс, в то время как отсутствие лечения негативно сказывалось на выживаемости крыс. Перед гибелью у крыс наблюдали геморрагические высыпания вокруг носа, диарею и резкую потерю в весе.
Все выжившие животные были малоактивными, окраска шерсти приобретала желтушный оттенок.
По результатам исследования (выживаемости, клинической картине, биохимическим и функциональным показателям), а также по результатам гистологического исследования можно сделать вывод, что после введения CCl4 была сформирована модель тяжелой и среднетяжелой степени отравления.
Выживаемость в группах 2-10 к окончанию введения CCl4 и гепатопротекторов (15 дней) приведена в таблице 3.
Поскольку показатели, в том числе выживаемость в группах 6-10 практически не отличается друг от друга, то в графе 6 таблицы 3 и далее приведены общие, усредненные и округленные показатели для групп 6-10 животных.
В таблице 4 приведены морфометрические, биохимические и функциональные показатели состояния печени экспериментальных животных при интоксикации CCl4 и лечении согласно заявленному способу в сравнении со способами лечения препаратами эссенциале и карсилом, а также способом-прототипом.
Таблица 4. | ||||||
Показатели | Группа 1 | Интоксикация CCl4 | ||||
Группа 2 | Группа 3 | Группа 4 | Группа 5 | Группы 6-10 | ||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
Вес тела, г | 261.4 | 201.4 | 224.0 | 217.2 | 206.3 | 227.2 |
Относит. масса печени, мг/100 г | 36.3 | 55.33 | 49.03 | 48.78 | 43.7 | 48.96 |
Общий белок, сыворотка, г/л | 7.44 | 5.36 | 7.1 | 6.9 | 6.5 | 6.8 |
Общие липиды, сыворотка, г/л | 3.5 | 2.5 | 3.4 | 3.2 | 2.9 | 3.3 |
АЛТ, Е/л | 124.2 | 726 | 378 | 398 | 450 | 410 |
ACT, Е/л | 314 | 747 | 478 | 530 | 495 | 474 |
ЛДГ, ммоль/ч/л | 4.7 | 9.4 | 6.3 | 6.72 | 6.9 | 6.3 |
γ-ГТФ, Е/л | 4.0 | 20.0 | 15.0 | 14.8 | 15.5 | 14.6 |
КФ, мккат/л | 0.76 | 1.34 | 0.94 | 1.03 | 0.99 | 0.92 |
ЩФ, мккат/л | 0.68 | 1.21 | 0.93 | 0.99 | 1.03 | 0.90 |
Тимоловая проба, ед. помутнен. | 1.46 | 5.72 | 3.10 | 3.50 | 3.10 | 3.72 |
Холестерин, сыворотка, ммоль/л | 1.74 | 1.30 | 1.56 | 1.44 | 1.42 | 1.56 |
Билирубин, сыворотка, мкмоль/л | 3.14 | 7.22 | 3.84 | 3.92 | 4.2 | 3.76 |
SH-группы, сыворотка, мг % | 1508 | 410 | 1062 | 1074 | 998 | 1084 |
Восстановленный глутатион, мг% | 171 | 72 | 130 | 121 | 116 | 130 |
Гексеналовый сон, мин | 25.9 | 89.40 | 31.40 | 41.50 | 40.0 | 30.6 |
Из таблицы 4 видно, что заявленный способ лечения токсического поражения печени путем введения производных бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил) арилметанов существенно эффективнее известных способов.
У крыс после проведенной согласно заявленному способу терапии значительно уменьшались проявления цитолиза. Об этом свидетельствовало снижение степени активности индикаторных ферментов (АЛТ, ACT, ЛДГ, γ-ГТФ, КФ) в сыворотке крови по отношению к активности этих ферментов в группе без лечения. Одновременно происходила коррекция синтетической и пигментообразующей функции печени, о чем говорило увеличение сывороточного содержания общего белка, общих липидов и снижение содержания общего билирубина. Результаты тимоловой пробы указывали на достоверное снижение диспротеинемии.
Существенным звеном в патогенезе поражений печени является холестаз. О степени его выраженности судили по показателям холестерина, ЩФ и уровню билирубина. Все препараты ослабляли холестаз, снижая активность ЩФ, гипербилирубинемию и гиперхолестеринемию.
Отмеченные позитивные изменения биохимических процессов сопровождались восстановлением детоксикационной функции печени, что выражалось в достоверном сокращении длительности гексеналового сна во всех исследуемых группах с применением гепатопротекторов. Параллельно с этим снижался отек печени и восстанавливалась первоначальная масса животных. Судя по полученным данным, лечение устраняло прооксидантное действие CCl4, что выражалось в достоверном увеличении содержания сульфгидрильных групп и восстановленного глутатиона.
В результате проведенного лечения улучшалось общее состояние животных: крысы были подвижны, шерсть вернула первоначальный блеск и окраску, животные стали потреблять больше корма.
Эффективность заявленного способа подтверждается также данными гистологических исследований. При воздействии CCl4 в печени крыс без лечения сохранялись дистрофические изменения гепатоцитов в виде диффузной жировой дистрофии. При окраске гематоксилин-эозином наблюдалась неразличимость клеточных границ и вакуолизация цитоплазмы. После реализации способа по настоящей заявке изменения стромы печени были минимальными, проявляясь в наличии небольших очагов пролиферации клеточных элементов.
Кроме того, было проведено изучение интерферониндуцирующей активности заявляемого способа. Главное внимание было уделено оценке индукции появления в сыворотке крови интерферона альфа, защищающего организм от различных вирусных инфекций (Hoofnagle, J.H., Di Bisceglie, A.M. (1997). The Treatment of Chronic Viral Hepatitis. NEJM 336: 347-356).
В работе использовали белых беспородных мышей весом 18-22 г. Препараты гомогенизировали в физиологическом растворе с добавлением Твина-80 и вводили животным через зонд в объеме 0,2 мл. У животных брали кровь через 2, 4, 6, 8, 12 и 24 ч после введения препарата использовали для определения его противовирусной активности.
Использованы 4 группы животных, по 10 животных в каждой группе:
1 - контрольная группа - получали только растворители,
2 - введение эссенциалле, в/ж,
3 - введение карсила, в/ж,
4 - циклоферон - внутрибрюшинно,
5 - способ-прототип,
6 - заявленный способ.
Препараты вводили в следующем количестве: эссенциале - 100 мг/кг; карсил - 100 мг/кг; циклоферон 100 мг/кг, прототип - ТДАА - 100 мг/кг, заявленный способ - 50 мк/кг. Циклоферон вводили внутрибрюшинно, введение остальных препаратов осуществлялось внутрижелудочно с помощью атравматичного металлического зонда. В качестве растворителя использовали легкую крахмальную взвесь.
Клетки линии L 929 выращивали в 96-луночных планшетах, инкубировали при 37°С в течение суток с различными количествами сыворотки животных. Вирус везикулярного стоматита (штамм Indiana) в дозе 100 CTD50 вносили в лунки планшета и инкубировали при 37°С в течение 30-40 ч. По окончании инкубации клетки промывали фосфатным буфером, окрашивали 30 мин 0,1% раствором кристалл-виолета в 30% этаноле, промывали физиологическим раствором, высушивали на воздухе и экстрагировали краситель 30 мин 30% раствором этанола. Полученный раствор переносили в другой планшет и измеряли оптическую плотность в ячейках при длине волны 580 нм.
О защитном действии сыворотки крови судили по уменьшению проявления цитопатогенного действия вируса везикулярного стоматита, выражающемуся в возрастании оптической плотности в соответствующих ячейках по сравнению с лунками негативного контроля. За титр интерферона принимали величину, обратную наибольшему разведению сыворотки, обеспечивающему достоверное повышение оптической плотности в ячейках, возможному только при большем количестве сохранившихся клеток.
Данные по противовирусной защите сыворотки крови животных на разных сроках после введения препарата приведены в таблице 5.
Таблица 5. | ||||||
Препарат | Титр интерферона на срок после введения препарата, ч | |||||
2 часа | 4 часа | 6 часов | 8 часов | 12 часов | 24 часов | |
Контрольная группа | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
Эссенциале | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
Карсил | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
Циклоферон | 90 | 18 | 110 | 125 | 35 | 22 |
Прототип (ТДАА) | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
Заявленный способ | 35 | 13 | 25 | 73 | 70 | 66 |
Как видно из приведенных результатов, заявленный способ обеспечивал достоверное повышение противовирусной защиты клеток на всех сроках после введения препарата. Более раннее начало действия циклоферона объясняется тем, что он вводится внутрибрюшинно и быстрее проникает в кровь в сравнении с препаратом, вводимым согласно заявленному способу внутрижелудочно. Однако через 12 и 24 ч цитопротективное действие заявляемого способа превосходило по уровню защитный эффект способа, основанного на введении циклоферона, в 2-3 раза. Введение эессенциале и карсила и способ-прототип, основывающийся на введении ТДАА, не обеспечивали появление интерферона и защиту клеток от вируса.
Уровень противовирусной защиты зависит от времени, прошедшего после введения препарата. Первый пик защитного действия приходится на 2 ч после введения и обусловлен, по всей видимости, формированием в сыворотке комплекса (препарата или его метаболита самостоятельно или с сывороточными белками), обеспечивающего прямую противовирусную защиту клеток. После снижения протективного действия на сроке 4 ч отмечается подъем уровня противовирусной активности, обусловленный индукцией эндогенного интерферона и достигающий максимума через 8 ч после введения препарата, после чего следует медленный спад уровня индуцированного интерферона, который, тем не менее, остается существенно выше контрольных значений, вплоть до 24 ч после введения.
Таким образом, заявленный способ обеспечивает повышение эффективности защиты клеток печени при гепатитах различного генеза.
Claims (1)
- Способ лечения заболеваний печени различного генеза путем введения гепатопротекторного средства, отличающийся тем, что в качестве гепатопротекторного средства используют производные бис (2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)арилметанов.
Priority Applications (9)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009126442/14A RU2400233C1 (ru) | 2009-07-07 | 2009-07-07 | Способ лечения заболеваний печени различного генеза |
PL10797363T PL2596794T3 (pl) | 2009-07-07 | 2010-06-04 | Sposób leczenia różnego pochodzenia chorób wątroby |
PCT/RU2010/000291 WO2011005142A1 (ru) | 2009-07-07 | 2010-06-04 | Способ лечения заболеваний печени различного генеза |
US13/382,626 US8962640B2 (en) | 2009-07-07 | 2010-06-04 | Method for treating liver diseases of various origins |
ES10797363T ES2752900T3 (es) | 2009-07-07 | 2010-06-04 | Método para tratar enfermedades hepáticas de diversos orígenes |
EP10797363.8A EP2596794B1 (en) | 2009-07-07 | 2010-06-04 | Method for treating liver diseases of various origins |
US14/611,539 US20150158825A1 (en) | 2009-07-07 | 2015-02-02 | Method for treating liver diseases of various origins |
US15/154,633 US9730933B2 (en) | 2009-07-07 | 2016-05-13 | Method for treating liver diseases of various origins |
US15/668,306 US10052327B2 (en) | 2009-07-07 | 2017-08-03 | Method for treating liver diseases of various origins |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009126442/14A RU2400233C1 (ru) | 2009-07-07 | 2009-07-07 | Способ лечения заболеваний печени различного генеза |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2400233C1 true RU2400233C1 (ru) | 2010-09-27 |
Family
ID=42940195
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009126442/14A RU2400233C1 (ru) | 2009-07-07 | 2009-07-07 | Способ лечения заболеваний печени различного генеза |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US8962640B2 (ru) |
EP (1) | EP2596794B1 (ru) |
ES (1) | ES2752900T3 (ru) |
PL (1) | PL2596794T3 (ru) |
RU (1) | RU2400233C1 (ru) |
WO (1) | WO2011005142A1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8962640B2 (en) | 2009-07-07 | 2015-02-24 | Georgy Viktorovich Tets | Method for treating liver diseases of various origins |
RU2595868C1 (ru) * | 2015-03-27 | 2016-08-27 | Виктор Вениаминович Тец | Лекарственное средство с гепатопротекторной активностью |
WO2019070169A1 (ru) * | 2017-10-05 | 2019-04-11 | Виктор Вениаминович ТЕЦ | Способ получения лиофилизированной формы (бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)-(4-нитрофенил)метана) и полученная лиофилизированная форма |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8870950B2 (en) | 2009-12-08 | 2014-10-28 | Mitral Tech Ltd. | Rotation-based anchoring of an implant |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU1821209C (ru) | 1990-01-08 | 1993-06-15 | Ставропольский государственный медицинский институт | Способ лечени хронических заболеваний печени |
RU2035906C1 (ru) | 1990-05-14 | 1995-05-27 | Григорьева Анна Саввична | Способ лечения заболеваний печени различного генеза |
WO1999025699A1 (fr) * | 1997-11-19 | 1999-05-27 | Tets, Viktor Veniaminoich | Sels d'acides 5,5'-arylidenebisbarbituriques et 5,5'-arylidenebis(2-thiobarbituriques) et acides 5,5'-arylidenebis(2-thiobarbituriques) ayant une action antibacterienne, anti-chlamydiose, antivirale et immuno-modulatrice |
MXPA00012647A (es) | 1998-05-26 | 2003-07-14 | Natural Drug Sciences Llc | Derivados n-sustituidos de acido 5-oxiiminobarbiturico. |
RU2188196C2 (ru) | 1998-05-26 | 2002-08-27 | Ашкинази Римма Ильинична | N-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты |
US6265578B1 (en) * | 1999-02-12 | 2001-07-24 | Hoffmann-La Roche Inc. | Pyrimidine-2,4,6-triones |
CN1450997A (zh) | 2000-07-05 | 2003-10-22 | 拜奥泰治疗公司 | 含铜的胺氧化酶的抑制剂 |
KR20030061825A (ko) * | 2000-10-26 | 2003-07-22 | 화이자 프로덕츠 인크. | 피리미딘-2,4,6-트리온 메탈로프로테이나제 억제제 |
AU2002351731A1 (en) | 2001-12-14 | 2003-06-30 | Novo Nordisk A/S | Compounds and uses thereof for decreasing activity of hormone-sensitive lipase |
RU2317981C2 (ru) | 2001-12-14 | 2008-02-27 | Ново Нордиск А/С | Соединения и их применение для снижения активности гормон-чувствительной липазы |
WO2009059941A1 (de) | 2007-11-06 | 2009-05-14 | Basf Se | Verfahren zur regioselektiven alkoxyalkylierung von substituierten benzolen |
RU2400233C1 (ru) * | 2009-07-07 | 2010-09-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Вирфарм" | Способ лечения заболеваний печени различного генеза |
-
2009
- 2009-07-07 RU RU2009126442/14A patent/RU2400233C1/ru active
-
2010
- 2010-06-04 PL PL10797363T patent/PL2596794T3/pl unknown
- 2010-06-04 US US13/382,626 patent/US8962640B2/en active Active
- 2010-06-04 ES ES10797363T patent/ES2752900T3/es active Active
- 2010-06-04 EP EP10797363.8A patent/EP2596794B1/en active Active
- 2010-06-04 WO PCT/RU2010/000291 patent/WO2011005142A1/ru active Application Filing
-
2015
- 2015-02-02 US US14/611,539 patent/US20150158825A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-05-13 US US15/154,633 patent/US9730933B2/en active Active
-
2017
- 2017-08-03 US US15/668,306 patent/US10052327B2/en active Active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ОСИПОВА А.С. Растительные гепатопротекторы (Лив. 52) в схеме лечения хронического гепатита. РМЖ, 2005, 7, №1 [Найдено 2009-03-16] Найдено из Интернет: <URL: http://hghltd.yandex.com/. FRANKLIN M.R. Induction of rat liver drug-metabolizing enzymes by heterocyclecontaining mono-, di-, tri- and tetra-arylmethanes. Biochem Pharmacol. 1993 Aug 17; 46(4):683-9, реферат PMID: 8363642. * |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8962640B2 (en) | 2009-07-07 | 2015-02-24 | Georgy Viktorovich Tets | Method for treating liver diseases of various origins |
US9730933B2 (en) | 2009-07-07 | 2017-08-15 | Viktor Veniaminovich Tets | Method for treating liver diseases of various origins |
US10052327B2 (en) | 2009-07-07 | 2018-08-21 | Viktor Veniaminovich Tets | Method for treating liver diseases of various origins |
RU2595868C1 (ru) * | 2015-03-27 | 2016-08-27 | Виктор Вениаминович Тец | Лекарственное средство с гепатопротекторной активностью |
WO2016159833A1 (ru) * | 2015-03-27 | 2016-10-06 | Виктор Вениаминович ТЕЦ | Лекарственное средство с гепатопротекторной активностью |
US10307424B2 (en) | 2015-03-27 | 2019-06-04 | Georgy Viktorovich Tets | Drug with hepatoprotective activity |
WO2019070169A1 (ru) * | 2017-10-05 | 2019-04-11 | Виктор Вениаминович ТЕЦ | Способ получения лиофилизированной формы (бис(2-тио-4,6-диоксо-1,2,3,4,5,6-гексагидропиримидин-5-ил)-(4-нитрофенил)метана) и полученная лиофилизированная форма |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US10052327B2 (en) | 2018-08-21 |
EP2596794A4 (en) | 2015-03-25 |
US9730933B2 (en) | 2017-08-15 |
US8962640B2 (en) | 2015-02-24 |
EP2596794B1 (en) | 2019-08-07 |
WO2011005142A1 (ru) | 2011-01-13 |
US20120157483A1 (en) | 2012-06-21 |
US20150158825A1 (en) | 2015-06-11 |
ES2752900T3 (es) | 2020-04-06 |
PL2596794T3 (pl) | 2020-02-28 |
US20180021339A1 (en) | 2018-01-25 |
EP2596794A1 (en) | 2013-05-29 |
US20160250214A1 (en) | 2016-09-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Li et al. | l-Theanine prevents alcoholic liver injury through enhancing the antioxidant capability of hepatocytes | |
Zhao et al. | Neuroprotection by walnut-derived peptides through autophagy promotion via Akt/mTOR signaling pathway against oxidative stress in PC12 cells | |
Paiva et al. | Enhancing AMPK activation during ischemia protects the diabetic heart against reperfusion injury | |
Taparia et al. | Importance of folate-homocysteine homeostasis during early embryonic development | |
King et al. | Involvement of the mitochondrial permeability transition pore in chronic ethanol-mediated liver injury in mice | |
Mehrzadi et al. | Melatonin synergistically enhances protective effect of atorvastatin against gentamicin-induced nephrotoxicity in rat kidney | |
Park et al. | Melatonin prevents pancreatic β‐cell loss due to glucotoxicity: the relationship between oxidative stress and endoplasmic reticulum stress | |
An et al. | A brief review of neurotoxicity induced by melamine | |
US10052327B2 (en) | Method for treating liver diseases of various origins | |
Jong et al. | The ubiquitin–proteasome system and autophagy are defective in the taurine-deficient heart | |
Heidari et al. | Ammonia-induced mitochondrial impairment is intensified by manganese co-exposure: relevance to the management of subclinical hepatic encephalopathy and cirrhosis-associated brain injury | |
Zhu et al. | SP6616 as a Kv2. 1 inhibitor efficiently ameliorates peripheral neuropathy in diabetic mice | |
Sritawan et al. | Effect of metformin treatment on memory and hippocampal neurogenesis decline correlated with oxidative stress induced by methotrexate in rats | |
Rogińska et al. | Depletion of the third complement component ameliorates age‐dependent oxidative stress and positively modulates autophagic activity in aged retinas in a mouse model | |
Lin et al. | Hepatitis E virus infections among Human Immunodeficiency Virus–positive individuals during an outbreak of acute Hepatitis A in Taiwan | |
Genovese et al. | Neuroprotective effects of olprinone after cerebral ischemia/reperfusion injury in rats | |
Zheng et al. | Mitochondrial stress response in drug-induced liver injury | |
Li et al. | Activation of p47phox as a mechanism of bupivacaine‐induced burst production of reactive oxygen species and neural toxicity | |
Heidari et al. | Sulfasalazine-induced hepatic injury in an ex vivo model of isolated perfused rat liver and the protective role of taurine | |
Matsuo et al. | Combined l-citrulline and glutathione administration prevents neuronal cell death following transient brain ischemia | |
EP3870175B1 (en) | Oral aminodihydrophthalazinedione compositions and their use the treatment of non-viral hepatitis | |
Chu et al. | β-hydroxybutyrate administered at reperfusion reduces infarct size and preserves cardiac function by improving mitochondrial function through autophagy in male mice | |
Goulart Nacácio e Silva et al. | The use of nicotinamide and nicotinamide riboside as an adjunct therapy in the treatment of glaucoma | |
Qiao et al. | SRS 16‐86 promotes diabetic nephropathy recovery by regulating ferroptosis | |
RU2446798C2 (ru) | Способ лечения острых форм вирусного гепатита в и микст-гепатитов (b + c, b + d, b + c + d) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20130123 |
|
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20150429 |