ES2222939T3

ES2222939T3 - Utilizacion de una composicion dermatologica que contiene oligosacaridos para el tratamiento de enfermedades de la piel.

Info

Publication number: ES2222939T3
Application number: ES00990076T
Authority: ES
Inventors: Gerard Martinez; Christian Francisco
Original assignee: G PHARM LAB; LABORATOIRES G PHARM
Current assignee: G PHARM LAB; LABORATOIRES G PHARM
Priority date: 1999-12-20
Filing date: 2000-12-20
Publication date: 2005-02-16
Anticipated expiration: 2020-12-20
Also published as: DE60034898D1; US6946121B2; EP1248630B1; EP1248630A1; US20030045505A1; ATE270892T1; FR2802414B1; DK1248630T3; EP1248630B9; ATE362386T1; DE60034898T2; DE60012230T2; WO2001045713A1; JP2003518066A; TR200401935T4; EP1464330A1; AU2688001A; FR2802414A1; PT1248630E; AU778953B2

Abstract

Utilización de una asociación de por lo menos dos componentes para la preparación de una composición destinada al tratamiento de por lo menos un síntoma seleccionado de entre el grupo constituido por asma, eczema, prurito, psoriasis, conjuntivitis alérgica, urticaria, reacciones a las picaduras de insectos, picores en particular los picores sintomáticos de los grandes quemados o como antiinflamatorio, destinado a ser administrado por vía tópica externa o por inhalación, de modo que el primer componente, que es el principio activo, es un oligosacárido de fórmula I que contiene de tres a cinco unidades osídicas y que presenta por lo menos una unidad D-galactosa unida por un enlace á [1-6] a una unidad de sacarosa: C6 Sacarosa en la que R1, R2, R3 y R4, independientemente entre sí representan un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo que contiene de 1 a 10 átomos de carbono y que presentan eventualmente por lo menos una insaturación, una función ácida que contiene de 1 a 10 átomos de carbono yque presenta eventualmente por lo menos una insaturación, una función sulfato o incluso un ósido, y el segundo componente es una saponina o un aminoácido básico.

Description

Utilización de una composición dermatológica que contiene oligosacáridos para el tratamiento de enfermedades de la piel.

La presente invención pertenece al campo de los síntomas desagradables asociados o no a la alergia, y en particular asma, eczema, prurito, psoriasis, conjuntivitis alérgica, urticaria, reacciones a las picaduras de insectos y picores, en particular los picores sintomáticos en los grandes quemados.

Las propiedades de desgranulación de los polinucleados y principalmente de los eosinófilos, basófilos y mastocitos son conocidas por estar implicadas en los fenómenos de las alergias.

De este modo, los basófilos maduros de la sangre presentan unos gránulos distribuidos al azar y bordeados por una membrana, dichos gránulos contienen diversos productos (heparina, SRS-A, ECF-A) que se liberan cuando un estímulo adecuado induce una desgranulación. Dicho estímulo es habitualmente un alérgeno que empareja las IgE específicas fijadas en la superficie de la célula con los receptores adecuados. Los productos liberados por la desgranulación son responsables de una parte de los síntomas desagradables asociados a la alergia, pero están asimismo implicados en la inmunidad antiparasitaria.

El documento EP 652 012 describe un número muy amplio de combinaciones de azúcar + aminoácido para el tratamiento de las diferentes condiciones, pero no describe específicamente la combinación rafinosa + arginina. Además, las combinaciones azúcar+aminoácido del documento EP 652 012 están destinadas a ser ingeridas, y no a ser administradas por vía tópica externa o por inhalación.

Los principales compuestos de la técnica anterior conocidos por sus propiedades antialérgicas son los compuestos de las familias de los antihistamínicos tales como la clorfeniramina (polaramina). Dichos compuestos no están desprovistos de los efectos secundarios tales como el riesgo de somnolencia. Es por ello que la presente invención propone la utilización de una asociación de compuestos que están desprovistos de los efectos secundarios de los antihistamínicos clásicos y que permiten no obstante tratar las alergias y otras afecciones o trastornos del mismo tipo.

El solicitante ha puesto de manifiesto que la utilización de determinados oligosacáridos es eficaz para reducir o incluso bloquear los síntomas desagradables asociados o no a la alergia y también como antiinflamatorio.

Sin intención de estar vinculados a una teoría particular, se manifiesta que el solicitante ha demostrado que determinados oligosacáridos presentan una actividad antidesgranulante, antigranulante o antiactivadora de una célula diana de la alergia y principalmente del basófilo humano estimulado según una reacción IgE dependiente.

Están asimismo implicadas en dicha actividad otras células especializadas de la piel (como por ejemplo las neuronas que mediante la liberación de la sustancia P son responsables del dolor pero que asimismo inducen una desgranulación de los basófilos).

El fenómeno de la desgranulación así como los síntomas desagradables que están ligados son conocidos por la persona experta en la técnica sin embargo los inventores de la presente solicitud no excluyen que la asociación utilizada según el sentido de la presente solicitud interviene con anterioridad en la desgranulación: en el momento de la maduración de los gránulos. Es por ello que, según los inventores, dicha asociación podría asimismo poseer una actividad denominada "antigranulante".

La presente invención se refiere a la utilización de una asociación de por lo menos dos componentes para la fabricación de una composición para el tratamiento de por lo menos un síntoma seleccionado de entre el grupo constituido por el asma, el eczema, el prurito, la psoriasis, la conjuntivitis alérgica, la urticaria, y las reacciones a las picaduras de insectos, los picores en particular los picores sintomáticos de los grandes quemados o a título de antiinflamatorio, destinado a ser administrado por vía tópica externa o por inhalación, de modo que el primer componente - el principio activo - es un oligosacárido de la fórmula I que contiene de tres a cinco unidades osídicas y que presenta por lo menos una unidad D-galactosa unida por un enlace \alpha [1-6] a una unidad de sacarosa:

1

en la que R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4}, independientemente los unos de los otros representan un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo que contiene de 1 a 10 átomos de carbono y que presentan eventualmente por lo menos una insaturación, una función ácida que contiene de 1 a 10 átomos de carbono y que presenta eventualmente por lo menos una insaturación, una función sulfato o incluso un ósido, dicho oligosacárido se selecciona preferentemente de entre el grupo constituido por la rafinosa y la estaquiosa en una forma libre o derivada, y

el segundo componente es una saponina o un aminoácido básico.

El segundo componente actúa como vector del primer componente, dicho primer componente es el principio activo. Dicho segundo componente tiene como papel esencial permitir al primer componente, el principio activo, de atravesar la membrana de los glóbulos blancos.

Preferentemente, el segundo componente se selecciona de entre el grupo constituido por las saponinas y la arginina.

Preferentemente, se utilizarán las saponinas naturales siguientes: los harpagosidos, los ginsenósidos, las saponinas de tipo quillaja saponaria QS III y QS 21A.

Las asociaciones preferidas para una utilización según el sentido de la presente invención son las siguientes: el oligasacárido es la rafinosa en una forma libre o derivada y el segundo componente una saponina; el oligosacárido es la rafinosa en forma libre o derivada y el segundo componente es la arginina; el oligosacárido es el estaquiosa en forma libre o derivada y el segundo componente es una saponina; el oligosacárido es la estaquiosa en forma libre o derivada y el segundo componente es la arginina.

Según una forma preferida, dicha composición es tal que la concentración ponderal en oligosacárido está comprendida entre el 0,01% y el 20% en relación con la masa total de la composición, preferentemente entre el 0,01 y el 10% en relación con la masa total de la composición. De forma preferida, la concentración del segundo componente (saponinas, arginina) está preferentemente comprendida entre el 5 y el 20% en peso en relación con la concentración de oligosacárido, preferentemente aproximadamente el 10% en peso en relación con la concentración de oligosacárido.

Dicha composición contiene además generalmente por lo menos un excipiente aceptable.

Las composiciones utilizadas según la presente invención se pueden presentar en forma de pomada, crema, colirio, loción, aerosol destinado a la vía externa o aerosol para inhalación. Sin pretender vincularse a una teoría particular, podría parecer que la ingestión (bebidas, comprimidos, cápsulas) hace que la composición resulte ineficaz, porque probablemente, los sistemas enzimáticos del estómago destruyen la parte sacarosa de la molécula, transformándola en melibiosa. Ahora bien, los estudios in vitro han demostrado que la melibiosa no era activa sobre los leucocitos.

Dichos oligosacáridos constituidos por unas unidades de galactosa unidas por uno (o unos) enlaces de tipo \alpha entre ellas y a una unidad sacarosa, son las sustancias de reserva de un determinado número de plantas (judías, guisantes, soja,..) y sobretodo son conocidos por su responsabilidad en el fenómeno de la flatulencia en los humanos. Por el contrario, no se había puesto de manifiesto hasta la fecha ninguna acción directa que puede presentar un interés terapéutico (dermatológico) o cosmético.

Sin pretender estar vinculado a una teoría particular, se han ensayado dichas moléculas para la actividad antidesgranulante de los basófilos humanos partiendo de la idea de que, el organismo de los mamíferos no presenta los enzimas necesarios para la degradación de las unidades galactosa asociados en \alpha, dichos oligosacáridos podían perturbar la glicólisis de los mastocitos es decir la fuente de energía de la granulación y de la desgranulación.

Los oligosacáridos utilizados para la puesta en marcha de la presente invención presentan de tres a cinco unidades osídicos, con por lo menos una unidad D-galactosa unida por su carbono 1 al carbono 6 de una unidad sacarosa, mediante un enlace \alpha según la fórmula I siguiente:

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en la que R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4}, representan independientemente el uno del otro un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo que contiene de 1 a 10 átomos de carbono y que presentan eventualmente por lo menos una insaturación, una función ácida que contiene de 1 a 10 átomos de carbono y que presenta eventualmente por lo menos una insaturación, una función sulfato o incluso un ósido, que se puede presentar en forma libre o derivada.

Además, la unidad de sacarosa se puede presentar en forma libre (es decir un azúcar en el que las funciones alcoholes no están protegidas) o derivada. Por otra parte, dicha unidad de sacarosa parece indispensable para la actividad biológica ya que la melibiosa, ensayada en las mismas condiciones del experimento, no presenta estrictamente ninguna actividad sobre los mastocitos.

Por "forma derivada" en el sentido de la presente invención se entiende que las funciones alcoholes están sustituidas por ejemplo por un grupo acetilo (CH_{3}CO)...

De forma preferida, se utilizará la estaquiosa y la rafinosa.

La estaquiosa es un tetraholósido cuya estructura final es: \alpha-D-galactopiranosil-(1,6)-\alpha-D-Galactopiranosil-(1,6)-\alpha-D- Glucopiranosil-(1,2)-\beta-D-Fructofuranósido.

La estaquiosa y la rafinosa corresponden a la fórmula presentada a continuación.

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con R = H y n = 2 para la estaquiosa y R = H y n = 1 para la rafinosa.

Las composiciones utilizadas según la invención se pueden presentar en forma de pomadas, cremas, colirio, aerosoles o lociones para la administración local, en asociación con unos excipientes compatibles. Los excipientes generalmente utilizados para preparar tales composiciones son unos aglutinantes, unos conservantes, unos aromas.... En dichas formas, el porcentaje ponderal en principio activo en relación con la masa de la composición total está comprendido entre el 0,01% y el 20% preferentemente entre el 0,2% y el 1%. Unas composiciones farmacéuticas de inhalación pueden asimismo prepararse para los tratamientos internos (asma).

Con el fin de ensayar la actividad antidesgranulante o antiactivadora de los oilgosacáridos sobre los basófilos humanos por citometría de flujo, se han utilizado unas suspensiones leucocitarias de individuos diferentes y seleccionados por ser buenos respondones al anti-IgE para aislar, por sedimentación simple a 1 g, los leucocitos. Dichos leucocitos se pre-incuban durante 30 minutos con unas diluciones sucesivas del producto a ensayar de 10 a 0,01 mg/ml. Los basófilos se estimulan entonces con una concentración marcada de un anti-IgE humano y marcados con una mezcla de los anticuerpos anti-IgE FITC, anti-CD63PE, el CD63 es un marcador de activación de los basófilos humanos. Los porcentajes de activación o de inhibición se calculan entonces por citometría de flujo. La actividad biológica de los oligosacáridos se evalúa de este modo.

Se ha comprobado la estructura química de las moléculas comerciales y de sus derivados, en particular la de la estaquiosa, por RMN : RMN^{1} H y ^{13}C, RMN 2D (DQF-COSY, HMQC y HMBC).

Se han realizado los mismos ensayos biológicos sobre unos análogos estructurales como la rafinosa o de los oligosacáridos que presentan una unión \alpha entre una unidad galactosa y otra unidad ósido como en la melibiosa.

Dichas moléculas altamente hidrosolubles sólo tienen una pequeña oportunidad de atravesar las membranas liposolubles de los mastocitos, lo que confirma los resultados de los ensayos.

No obstante, es bien conocido que los mastocitos presentan una actividad de pinocitosis importante frente a unas moléculas cargadas positivamente (por lo tanto unas bases) al pH fisiológico.

Por lo tanto, se han propuesto unos ensayos. Dichos ensayos tienen como objetivo comprobar el poder de inhibición de la desgranulación de composiciones que contienen un primer compuesto - el principio activo - que es un oligosacárido seleccionado de entre la estaquiosa y la rafinosa a diferentes concentraciones y un segundo compuesto seleccionado de entre el grupo proporcionado por la arginina, la colina, el cloruro de calcio (CaCl_{2}) y la saponina. El porcentaje de inhibición se ha calculado repitiendo tres veces el experimento.

Los resultados obtenidos se presentan en la tabla 1, habiéndose utilizado las abreviaciones siguientes:

"S": para estaquiosa	R: para Rafinosa
"10": para 10 mg/ml	1: para 1 mg/ml
"0,1": para 0,1 mg/ml	"a": para arginina
"b": para colina	"c": para CaCl_{2}
"Sp": para Saponina	"NE": para no ensayado

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A la vista de los resultados, se aprecia claramente que, a las concentraciones ensayadas, las composiciones que contienen arginina y estaquiosa o rafinosa permiten inhibibir la desgranulación o la puesta en marcha del sistema de granulación y por lo tanto la inhibición de la liberación de histamina, de bradiquinina, de serotonina y de los factores quimiotácticos de otros leucocitos.

Con el fin de obtener una mayor inhibición de los mastocitos, hemos decidido por lo tanto favorecer la penetración de dichas moléculas a través de las membranas reemplazando la arginina por la saponina (Quillaja Bark). Los resultados de la tabla 1 muestran que entonces se han obtenido unos porcentajes de inhibición todavía más elevados.

La utilización de los oligosacáridos según la presente invención, en presencia de moléculas cargadas positivamente al pH fisiológico (como por ejemplo la arginina) que favorecen la pinocitosis o de unas moléculas que favorecen la penetración membranosa (por ejemplo unas saponinas), permiten por lo tanto bloquear o reducir las actividades biológicas de los mastocitos, basófilos y eosinófilos en los mamíferos.

No se ha detectado ninguna actividad citotóxica a lo largo de los estudios biológicos. Dicho tipo de moléculas se puede por lo tanto utilizar con provecho en todos los dominios terapéuticos (dérmicos) y cosméticos en los que están implicados los mastocitos y los basófilos humanos (y a continuación los eosinófilos). Citamos a título de ejemplo el prurito, las picaduras de insectos, la psoriasis, la conjuntivitis alérgica, la urticaria, el eczema y el asma.

Los ejemplos siguientes no limitan en ningún caso el alcance de la presente invención.

Ejemplos de formulación Gél tópico

Oligosacárido	0,1 g
Arginina (o saponinas)	0,01 g
Metilcelulosa	3 g
Agua purificada c.s.p	100 g
Conservantes, perfume	c.s.

Crema grasa

Oligosacárido	0,1 g
Arginina (o saponinas)	0,01 g
Agua purificada	5 ml
Cuerpo graso c.s.p	100 g
Conservantes, perfume	c.s.
(aplicada tal cual o bien como un tul graso)

Emulsión

Oligosacárido	0,2 g
Arginina (o saponinas)	0,02 g
Monoestearato de PEG 1500	5 g
Monoestearato de PEG 300	2 g
Aceite de parafina fluida	5 g
Agua purificada c.s.p	100 g
Conservantes, perfume	c.s.

Inhalación

Se obtiene una preparación destinada a la inhalación a partir de la mezcla siguiente:

Oligosacárido	100 mg
Arginina (o saponinas)	10 mg
Excipiente	10 g

A dicha mezcla, se añade un excipiente clásico para la formulación por inhalación, como por ejemplo el ácido oleico, así como un gas propulsor de tipo triclorofluorometano, diclorodifluorometano.

Crema grasa A (fórmula centesimal)

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Efecto antipruriginoso sobre el tegumento recientemente epidermizado de un gran quemado

En fase de cicatrización, los grandes quemados sufren unos picores intensos, incluso a veces bajo un fuerte tratamiento de antihistamínicos.

Dicho estudio, de un año de duración, que se ha realizado con 33 pacientes ha puesto de manifiesto el efecto antipruriginoso potente de la composición A en dicha indicación.

Protocolo

Los pacientes que sufren picores se tratan mediante una aplicación de la composición A cuya concentración en rafinosa es del 10%, o mediante una aplicación de la composición A' cuya concentración en rafinosa es del 5%, o incluso mediante una aplicación de la composición A'' cuya concentración en rafinosa es del 3% la aplicación que se atribuye mediante un sorteo. El porcentaje en saponina de las composiciones A' y A'' representa una décima parte de la concentración en rafinosa.

En el caso de una segunda zona a tratar paralelamente, se aplica al paciente a doble ciego y sin su conocimiento sobre dicha segunda zona una composición considerada como placebo conteniendo los mismos excipientes pero que no contiene ni rafinosa, ni saponina.

Los tres tubos concentrados de forma diferente en rafinosa se codifican para el paciente y para el personal encargado de la aplicación.

Las aplicaciones se repiten diversas veces al día en caso de picor y a petición del paciente y se puede extender durante diversos días.

Una ficha de seguimiento indica el tiempo de acción del o de los productos según una escala analógica del prurito de 0 a 10.

Resultados y conclusiones

De los 33 casos tratados, 30 han puesto de manifiesto una acción del producto, 3 se han mostrado negativos.

8 casos se refieren a dos zonas de aplicación frente a un placebo.

El tiempo medio de acción de la composición A en los 30 casos positivos se sitúa entre 2 y 5 min, con una duración media comprendida entre 3 y 4 horas.

La intensidad de prurito inicial estimada en una media de 7 sobre la escala analógica, es de 0 en los 30 casos después de 15 min.

No se ha puesto de manifiesto ninguna diferencia estadísticamente significativa en cuanto a las tres dosificaciones de rafinosa.

Contra el placebo, se observan siempre los mismos efectos que los anteriores para la zona tratada con la composición A.

Para la zona tratada con el placebo, la intensidad del prurito baja ligeramente de 0 a 5 mn para situarse de nuevo en el nivel de intensidad inicial al cabo de 5 a 15 min. Dicho fenómeno transitorio bien conocido está ligado a la hidratación de la piel.

No se ha señalado ningún fenómeno de intolerancia en el momento del estudio en la aplicación simple o repetida.

Hay que señalar que ninguno de los casos de eczema ha revertido debido al efecto del tratamiento.

De los 3 casos negativos, uno no está explicado y los otros dos pacientes padecían, en el caso de uno, una inflamación muy fuerte y el otro una sensación de escozor, pero no de prurito realmente.

Claims

1. Utilización de una asociación de por lo menos dos componentes para la preparación de una composición destinada al tratamiento de por lo menos un síntoma seleccionado de entre el grupo constituido por asma, eczema, prurito, psoriasis, conjuntivitis alérgica, urticaria, reacciones a las picaduras de insectos, picores en particular los picores sintomáticos de los grandes quemados o como antiinflamatorio, destinado a ser administrado por vía tópica externa o por inhalación, de modo que el primer componente, que es el principio activo, es un oligosacárido de fórmula I que contiene de tres a cinco unidades osídicas y que presenta por lo menos una unidad D-galactosa unida por un enlace \alpha [1-6] a una unidad de sacarosa:

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en la que R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4}, independientemente entre sí representan un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo que contiene de 1 a 10 átomos de carbono y que presentan eventualmente por lo menos una insaturación, una función ácida que contiene de 1 a 10 átomos de carbono y que presenta eventualmente por lo menos una insaturación, una función sulfato o incluso un ósido, y

el segundo componente es una saponina o un aminoácido básico.

2. Utilización según la reivindicación 1, en la que dicho oligosacárido se selecciona de entre el grupo constituido por la rafinosa y la estaquiosa en forma libre o derivada.

3. Utilización según la reivindicación 1 ó 2, en la que el segundo componente se selecciona de entre el grupo constituido por las saponinas y la arginina.

4. Utilización según la reivindicación 1, en la que el oligosacárido es la rafinosa en forma libre o derivada y el segundo componente es una saponina.

5. Utilización según la reivindicación 1, en la que el oligosacárido es la rafinosa en forma libre o derivada y el segundo componente es arginina.

6. Utilización según la reivindicación 1, en la que el oligosacárido es la estaquiosa en forma libre o derivada y le segundo componente es una saponina.

7. Utilización según la reivindicación 1, en la que el oligosacárido es la estaquiosa en forma libre o derivada y el segundo componente es arginina.

8. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la concentración ponderal en oligosacáridos está comprendida entre el 0,01 y el 20% en relación con la masa total de la composición.

9. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la concentración del segundo componente está comprendida entre el 5% y el 20% en peso en relación con la concentración en oligosacáridos.

10. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la concentración ponderal en oligosacáridos está comprendida entre el 0,01 y el 10% en relación con la masa total de la composición y la concentración del segundo componente es aproximadamente el 10% en peso en relación con la concentración en oligosacáridos.

11. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que dicha composición se presenta en forma de pomada, crema, colirio, loción, aerosol destinado a la vía externa o aerosol para inhalación.