ES2217767T3

ES2217767T3 - Uso de un derivado de piridazinona como un sensibilizador al calcio.

Info

Publication number: ES2217767T3
Application number: ES99928033T
Authority: ES
Inventors: Heimo Haikala; Piero Pollesello; Juha Kaivola; Jouko Levijoki
Original assignee: Orion Oyj
Current assignee: Orion Oyj
Priority date: 1998-06-19
Filing date: 1999-05-26
Publication date: 2004-11-01
Anticipated expiration: 2019-05-26
Also published as: DE69915475T2; AU760379B2; EP1087769B1; JP2002518450A; DE69915475D1; EE04658B1; CZ20004554A3; CZ295283B6; CA2334910C; SK285004B6; WO1999066932A1; JP4938928B2; NZ508444A; CA2334910A1; IL140032A; EE200000755A; HUP0202836A2; PL194344B1; IL140032A0; TR200003772T2

Abstract

Uso de (R)-N-[4-(1, 4, 5, 6-tetrahidro-4-metil-6-oxo- 3-piridazinil)fenil]-acetamida en la fabricación de un medicamento para usar en el tratamiento del desequilibrio neurohumoral provocado por alteraciones de la función cardíaca para prevenir el desarrollo del fallo cardíaco.

Description

Uso de un derivado de piridazinona como un sensibilizador frente al calcio.

Un medicamento para incrementar la sensibilidad al calcio de proteínas contráctiles en el músculo cardíaco o para tratar el desequilibrio neurohumoral provocado por alteraciones de la función cardíaca para prevenir el desarrollo del fallo cardíaco puede fabricarse usando (R)-N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]acetamida.

La N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]acetamida (I) racémica se ha descrito previamente como un agente hipotensivo (US 3.746.712) y como un agente cardiotónico que tiene actividad inotrópica (US 4.397.854). Se ha presentado que la acción inotrópica de la N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]acetamida racémica se basa en la inhibición de la enzima fosfodiesterasa III (PDE III) (Ishimori t. y otros, Arzneim.-Forsch. (1994), 44(5), 583-8). El compuesto (I) tiene un átomo de carbono asimétrico y por lo tanto puede existir en dos formas estereoisómeras. Los enantiómeros (R) y (S) de (I) se han descrito previamente en la solicitud de patente japonesa Nº (Heisei) JP 3163050. Sin embargo, no se han descrito datos de la actividad biológica para los enantiómeros.

Robertson y otros en J. Med. Chem. 1986, 29, 1832 a 1840, describen 1,3-dihidro-3,3-dimetil-5-(1,4,5,6-tetrahidro-6-oxo-3-piridazinil)-2H-indol-2-ona y ciertos análogos de lactama como inótropos positivos, que proporcionan un incremento en la contractilidad.

Coates y otros en J. Med. Chem. 1990, 73, 1735 a 1741, describen el uso de 1,4-bis(3-oxo-2,3-dihidropiridazin-6-il)benceno y análogos del mismo como inhibidores de fosfodiesterasa III e inodilatadores.

Bakewell y otros en Eur. J. Med. Chem, 1990, 25, 765-774 describe actividades inhibidoras de fosfodiesterasa (PDE III) inhibidas por cGMP, selectivas a cAMP, inotrópicas, vasodilatadoras y de bajo K_{m}, de 4\alpha-metil-4,4\alpha-dihidro-5H-indenol[1,2-c]piridazin-3(2H)-onas y 4\alpha-metil-4,4\alpha,5,6-tetrahidrobenzo[h]cinolin-3(2H)-onas.

Por el momento, la serie de compuestos inotrópicos, por ejemplo milrinona, cuyo mecanismo se basa en la inhibición de PDE III, están sometidos a pruebas clínicas para el tratamiento del fallo cardíaco. Estos compuestos incrementan la contractilidad del músculo cardíaco incrementando la corriente de calcio al músculo cardíaco y producen vasodilatación. La contracción en el músculo cardíaco se activa por la unión del calcio a troponina en el filamento delgado de proteínas contráctiles. Sin embargo, es posible que la aplicación a largo plazo de inhibidores de PDE III conduzca a sobrecarga de calcio en el músculo cardíaco que puede activar las arritmias. Por lo tanto, el principal mecanismo para incrementar la contractilidad cardíaca debe ser un mecanismo que no produzca sobrecarga de calcio. La mejora de la renovación de calcio intracelular liberado del retículo sarcoplásmico y el incremento de la sensibilidad al calcio de proteínas contráctiles son mecanismos tales que no inducen la sobrecarga de calcio.

Cuando un paciente tiene alteraciones peligrosas en la función cardíaca, la contractilidad del músculo cardíaco todavía puede mantenerse a través de la activación neurohumoral del cuerpo, lo que incrementa la captación de calcio en el músculo cardíaco. En esta situación, la sobrecarga de calcio puede activar arritmias y la activación neurohumoral prolongada acelerar el desarrollo del fallo cardíaco. El desequilibrio neurohumoral puede estar indicado, por ejemplo, por concentraciones alteradas de renina y noradrenalina en el plasma del paciente. Los inhibidores de PDE III no pueden usarse crónicamente en el tratamiento del desequilibrio neurohumoral debido a que incrementan adicionalmente la captación de calcio en el músculo cardíaco. Sin embargo, el uso de un sensibilizador frente al calcio puede incrementar suficientemente la contractilidad ya en concentraciones de calcio normales y disminuidas, lo que reduciría la necesidad de activación neurohumoral y de ese modo prevendría el desarrollo del fallo cardíaco.

Se ha descubierto ahora que el enantiómero (R) de la N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]acetamida tiene un efecto sensibilizador frente al calcio en el filamento delgado de proteínas contráctiles y este es su principal mecanismo para incrementar la contractilidad cardíaca. Esto era inesperado ya que se presentó que el mecanismo del compuesto (I) racémico era la inhibición de PDE III. Así, siendo un sensibilizador frente al calcio, el enantiómero (R) de N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]acetamida tiene una utilidad en el tratamiento del desequilibrio neurohumoral provocado por alteraciones de la función cardíaca para prevenir el desarrollo del fallo cardíaco.

La presente invención se refiere además a un uso del enantiómero (R) del compuesto (I) en la fabricación de un medicamento para usar en el tratamiento del desequilibrio neurohumoral provocado por alteraciones de la función cardíaca para prevenir el desarrollo del fallo cardíaco. El medicamento puede administrarse, por ejemplo, oralmente o parenteralmente en una forma de dosificación sólida o líquida.

La presente invención se refiere además al uso del enantiómero (R) del compuesto (I) en la fabricación de un medicamento para incrementar la sensibilidad frente al calcio de proteínas contráctiles. El compuesto farmacéuticamente activo usado de acuerdo con esta invención se formula como formas de dosificación usando los principios conocidos en la técnica. Se administra a un paciente como tal o en combinación con excipientes farmacéuticos adecuados en forma de tabletas, grageas, cápsulas, supositorios, emulsiones, suspensiones o soluciones. La composición contiene una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto farmacéuticamente activo de la invención. El contenido del compuesto activo es en la composición de aproximadamente 0,5 a 100% en peso.

En el método reivindicado, el compuesto de la invención puede administrarse al hombre en dosis orales que varían de aproximadamente 0,1 a 500 mg, preferiblemente de 0,5 a 100 mg, al día. Elegir ingredientes adecuados para la composición es un hábito para los expertos normales en la técnica. Es evidente que también pueden usarse portadores, disolventes, ingredientes formadores de gel, ingredientes formadores de dispersiones, antioxidantes, colores, edulcorantes, compuestos humectantes y otros ingredientes adecuados normalmente usados en este campo de la tecnología.

El siguiente ejemplo ilustrará adicionalmente la invención.

Ejemplo 1. Preparación de (R)-N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]acetamida

Se mezclaron (R)-6-(4-aminofenil)-4,5-dihidro-5-metil-3(2H)-piridazinona (30,0 g) y acetonitrilo (600 ml) y la mezcla se sometió a reflujo hasta que el material de partida se disolvía. Se añadió anhídrido acético (30,0 ml) a la mezcla a reflujo. Después de 10 minutos la solución se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. El producto se filtró, se lavó con acetonitrilo y se secó. Rendimiento 30,8 g, p.f. 230-232ºC, ^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}, 400 MHz) 1,06 (d, 3H, J = 7,3 Hz), 2,06 (s, 3H), 2,22 (d, 1H, J = 16,6 Hz), 2,67 (dd, 1H, J = 16,6 Hz, 6,8 Hz), 3,35 (m, 1H), 7,63 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,72 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 10,09 (s,1H) 10,88 (s, 1H). [\alpha]_{D}^{20} = -466º (c = 2 mg/ml, DMF).

La utilidad del compuesto de la invención se demuestra mediante los siguientes experimentos. El compuesto A es (R)-N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]acetamida.

Efecto sensibilizador frente al calcio en fibra cardíaca limpia

El músculo papilar ventricular izquierdo de la cobaya se disecó y se enjuagó ensolución de Tyrode enfriada con hielo. A continuación, el músculo papilar se sumergió en una solución que contenía (mM): acetato potásico 74,7, EGTA 10, MgSO_{4} 5,4, ATP-Na_{2} 4, DTE 1, MOPS 20, pH 7,0 (mediante KOH 1 M). Subsiguientemente, el músculo papilar se sometió ultrasonidos a 10 vatios durante 60 segundos en esta solución enfriada con hielo. La distancia entre la sonda ulstrasónica y el músculo papilar era 10 mm. Las fibras (<200 \mum de diámetro) se disecaron de la superficie de los músculos papilares sometidos a ultrasonidos. Por otra parte, las fibras sometidas a ultrasonidos y disecadas se mantuvieron durante 30 minutos en una solución "limpiadora" (enfriada con hielo) que contenía saponina (250 \mug/ml) además de los otros constituyentes. Se usó agitación magnética continua durante este tratamiento.

Las fibras que se disecaban adicionalmente (< 100 \mum de diámetro) se montaban a continuación horizontalmente con un pegamento (acetato de celulosa en acetona) entre una extensión de cilindro de acero de transductor de fuerza isométrica (indicador de deformación AME-801, Horten Electronics, Noruega) y un cilindro de vidrio unido a un micromanipulador. El transductor de fuerza se conectó a un amplificador. Las fibras se mantuvieron en la solución "relajadora" que contenía (mM): imidazol 30, ATP-Na_{2} 10, NaN_{3} 5, EGTA 5, MgCl_{2} 12,5 y 350 U de creatinina quinasa. La temperatura de la solución era 22ºC y el pH se fijó a 6,7 mediante KOH 1 M. La fuerza iónica se ajustó con KCl 1 M para corresponder a la de la solución "activadora". La composición de la solución "activadora" era la misma que la de la solución "relajadora" excepto que también contenía CaCl_{2}. Las fibras se indujeron a la contracción en pCas (-log[Ca^{2+}]) libres deseados que se obtuvieron mezclando apropiadamente las soluciones "relajadora" y "activadora". La tensión producida por una fibra a pCa 4,8 se tomó como la respuesta máxima. Al principio del experimento la fibra se estiró como se describe previamente.

Los efectos sensibilizadores frente al calcio del Compuesto A y la milrinona se muestran en la Tabla 1.

TABLA 1

Efecto sensibilizador frente al calcio en fibra limpia a pCa 5,6
	Cambio en la fuerza/% de control
Compuesto A	0,3 \mum	+26 \pm 6 (n = 7)
	3 \mum	+109 \pm 35 (n = 7)
Milrinona		Ineficaz

Efecto inotrópico positivo en músculo cardíaco de ritmo regulado

Se usaron cobayas de cuatro semanas de edad que pesaban aproximadamente 350 g. En los experimentos, el músculo papilar ventricular izquierdo del corazón se montó para la medida de la tensión isométrica en un baño orgánico que contenía solución de Tyrode modificada (37ºC) burbujeada con 95% de O_{2}, 5% de CO_{2}. La composición de la solución de Tyrode modificada era (mM): NaCl 135; MgCl_{2} \cdot 6H_{2}O 1; KCl 5; CaCl_{2} \cdot 2H_{2}O 2; NaHCO_{3} 15;
Na_{2}HPO_{4} \cdot 2H_{2}O 1; glucosa 10; pH 7,3-7,4. El volumen de la cámara horizontal abierta era 1 ml y el caudal de la solución de superfusión que corría a través de la cámara era 5 ml/minuto. El músculo papilar (< 1 mm de diámetro) se estiró horizontalmente entre el transductor de desplazamiento de fuerza (FT 0.3 C) y una aguja fijada al fondo de la cámara. Una tensión de estiramiento inicial de 300 mg se aplicó al músculo que fue estimulado eléctricamente (estimulador modelo SEC 48 F, Grass Instruments) a través de electrodos de campo de platino a 1 Hz con impulsos rectangulares (duración 4 ms). La estimulación se producía a dos veces el voltaje umbral para alcanzar la activación simultánea de todos los miocitos del músculo capilar. Un transductor de desplazamiento de fuerza se conectó a un amplificador activador de D.C. poligráfico (modelo 7 DA, Grass Instruments) y un explorador programable (modelo SI 5010, Tetronix). La señal amplificada se digitalizó con una frecuencia de 1 kHz mediante un digitalizador programable (modelo 390 A, Sony Tetronix).

El efecto inotrópico del Compuesto A y la milrinona se muestra en la Tabla 2.

TABLA 2

Efecto inotrópico positivo en músculo papilar de cobaya
	EC_{50}/\muM
Compuesto A	0,1
Milrinona	2

Claims

1. Uso de (R)-N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]-acetamida en la fabricación de un medicamento para usar en el tratamiento del desequilibrio neurohumoral provocado por alteraciones de la función cardíaca para prevenir el desarrollo del fallo cardíaco.

2. Uso de (R)-N-[4-(1,4,5,6-tetrahidro-4-metil-6-oxo-3-piridazinil)fenil]-acetamida en la fabricación de un medicamento para incrementar la sensibilidad al calcio de proteínas contráctiles del músculo cardíaco.