ES2212758T3

ES2212758T3 - Preparacion de uso cutaneo.

Info

Publication number: ES2212758T3
Application number: ES00940480T
Authority: ES
Inventors: Christian Diehl
Original assignee: Life Science Investments Ltd
Current assignee: Life Science Investments Ltd
Priority date: 2000-06-09
Filing date: 2000-06-09
Publication date: 2005-11-01
Anticipated expiration: 2020-06-09
Also published as: DE60019979T2; ATE294588T1; DE60019979D1; EP1286679A1; WO2001093887A1; EP1286679B1; HK1055673A1; ES2212758T1; EP1286679B8; AU5541100A

Abstract

Preparación de uso cutáneo, que contiene excipientes y un vector medicamentoso encapsulando un extracto vegetal en reduciasa, catalasa y superóxido dismutasa, caracterizado: porque el vector medicamentoso, constituido por nanoesferas que encapsulan un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa, representa entre el 1% y el 20% del peso de la preparación, porque el extracto vegetal utilizado es rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa.

Description

Preparación de uso cutáneo.

La invención se refiere a una nueva preparación para uso cutáneo constituida por una combinación de excipientes, de compuestos vegetales incluyendo enzimas y vectores medicamentosos, destinada a prevenir o detener la evolución del frente inflamatorio en el transcurso de las fases evolutivas del vitíligo y permitir la eventual repigmentación.

Como se sabe, la expresión "vectores medicamentosos" designa partículas huecas y de tamaño reducido que forman reservorios para productos activos, los cuales se encuentran así protegidos y se pueden liberar o atrasar a su debido tiempo en el lugar más adecuado (biodisponibilidad). Los liposomas, descritos por ejemplo en el documento FR-A-2.315.991 correspondiente al documento US-A-4.217.344 son los más conocidos entre estos vectores.

Recientemente los trabajos de los investigadores han permitido, a partir de la investigación fundamental, tener un mejor conocimiento del vitíligo, e indicar nuevas direcciones terapéuticas.

Ha examinado la teoría autosómica del vitíligo, según la secuencia siguiente: la tioredoxina-reductasa, una tioenzima presente en los queratinocitos y los melanocitos humanos reduce los radicales libres, constituyendo así posiblemente la primera línea de defensa contra los daños ocasionados a la piel por los radicales libres generados por los UV.

Por otra parte, se comprobó que el radical anión superóxido era el verdadero sustrato de la tirosinasa, preferentemente al oxígeno molecular.

Se observó una tasa débil de calaza en la epidermis tanto lesional como no lesional de pacientes afectados por vitíligo, comparado con pacientes libres de esta enfermedad. Entonces, se sugirió que estas tasas reducidas de catalasa podrían ser responsables de una mayor concentración de peróxido de hidrógeno en estos pacientes. Este aumento de la tasa de H_{2}O_{2} podría inducir una despigmentación, destruir los melanocitos, y también podría mantener bajos niveles de catalasa, pudiendo inhibir el H_{2}O_{2} el centro hematológico de la catalasa.

El peróxido de hidrógeno puede actuar como un inhibidor reversible de la tirosinasa. Induce una reacción fotoquímica de reducción, produciendo iones hidroxilo sumamente reactivos. Estos son capaces de decolorar la melanina fisiológica, e inducir la lisis membranosa de los melanocitos.

Los mismos investigadores demostraran también un aumento de los TNF-alfa, GTP, 6-BH4 y PAH en la epidermis después de su exposición a los UV.

Por el uso reciente de la espectroscopia Raman, fueron capaces de demostrar por primera vez los altos niveles de H_{2}O_{2} en la epidermis de pacientes afectados de vitíligo.

Estudios muy recientes realizados sobre cultivos celulares de melanocitos humanos provenientes de pacientes afectados, tratados por un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa, mostraron en forma innegable la disminución de la tasa de peróxido de hidrógeno en las células tratadas, así como el retroceso del fenómeno inflamatorio asociado al vitíligo.

Estas investigaciones hacen pensar que una preparación cutánea incluyendo estos extractos vegetales, incluidos en vectores medicamentosos asegurando su protección y su liberación preferencial a nivel de los queratinocitos y de los melanocitos, reduciría el perfil inflamatorio asociado al vitíligo en forma satisfactoria, y entonces debería limitar, sino detener la despigmentación cutánea.

La invención tiene como objeto crear una preparación perfeccionada del tipo en cuestión, que brinde los mejores resultados posibles en cuanto a la limitación, o incluso al paro de la despigmentación cutánea que sea fácil de fabricar, estable, económico y que no libere de forma intempestiva los principios activos.

Esta preparación de uso cutáneo, incluyendo los excipientes, y un vector medicamentoso encapsulando un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa, se caracteriza:

-: En que el vector medicamentoso, constituido por nanoesferas encapsulando un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa, representa entre el 1% y el 20% del peso de la preparación.

-: En que el extracto vegetal utilizado es rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa.

Por nanoesferas, se designan vectores medicamentosos constituidos por partículas, generalmente esféricas u ovoides, de tamaño nanométrico, encapsulando una sustancia determinada, en este caso un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa.

Estos vectores son ampliamente descritos en la literatura.

En otros términos, la invención reside en una doble selección, o sea primero la selección de un vector específico, o sea las nanoesferas, encapsulando un activo específico, un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa.

No se podía pensar que esta doble selección permitiría resolver con éxito el problema planteado, o sea gracias al tamaño reducido de las nanoesferas, una mejor penetración hasta el nivel de los queratinocitos y de los melanocitos y entonces, una mejor biodisponibilidad de los activos a este nivel, y por otra parte gracias a la elección de un extracto vegetal cuyo contenido en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa está equilibrado, una eficacia satisfactoria en cuanto a la limitación, o mejor al paro de la despigmentación cutánea.

Ventajosamente, en la práctica:

-: Las nanoesferas son esferas huecas incluyendo una membrana de colágeno y de glicosaminoglicanos, tales como las comercializadas por COLETICA bajo las marcas registradas NANOTHALASPHERES y NANOCOLLASPHERES; estas nanoesferas están descritas en el documento FR-A-8.901.221; este tipo de vector presenta la ventaja, en combinación con los excipientes, que da preparaciones cutáneas menos irritantes, totalmente biodegradables, biocompatibles y con liberación controlada.

-: Las nanoesferas cargadas de extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa representan entre el 1% y el 20% del peso de la preparación, preferentemente entre el 3% y el 12%; en efecto, se observó que si la proporción de nanoesferas es menor del 1%, no se consigue prácticamente ninguna limitación de la despigmentación, y al revés, cuando esta proporción supera el 20%, la liberación es excesiva, y susceptible de perjudicar los mecanismos fisiológicos normales de la piel.

-: La carga de extracto vegetal de las nanoesferas representa entre el 5% y el 15% del peso de las mismas; en efecto, se observó que una carga menor al 5% brindaba resultados inconstantes sobre la limitación de la despigmentación cutánea y la eventual repigmentación mientras que una carga superior al 15% no era industrialmente admisible en cuanto a la fabricación de las nanoesferas; se consiguen los mejores resultados con una proporción vecina al 10%.

-: El extracto vegetal retenido debe tener las siguientes concentraciones enzimáticas:

\bullet: Reductasa: entre 100 y 1.000 U.I.

\bullet: Catalasa: entre 100 y 1.000 U.I.

\bullet: Superóxido dismutasa: entre 500 y 5.000 U.I.

Concentraciones enzimáticas inferiores a 100 U.I. para la reductasa y la catalasa y 500 U.I. para la superóxido dismutasa, presentan en efecto una eficacia poco satisfactoria mientras que concentraciones superiores a 1.000 U.I. para la reductasa y la catalasa y 5.000 U.I., para la superóxido dismutasa no son compatibles con los imperativos fisiológicos de la piel humana; pues, los mejores resultados se obtuvieron con las siguientes concentraciones enzimáticas:

\bullet: Reductasa: 500 U.I.

\bullet: Catalasa: 500 U.I.

\bullet: Superóxido dismutasa: 1.000 U.I.

La preparación contiene también excipientes de uso común para una aplicación cutánea de tal tipo.

Estos excipientes no deben afectar la estabilidad de las nanopartículas, ni interactuar con las mismas, ni entre ellos. Es preferible que la proporción de materias grasas sea tan reducida como sea posible, y más precisamente menor de la mitad, o de la tercera parte.

Comúnmente, la combinación de excipientes puede también contener agentes antioxidantes y/o agentes conservantes conocidos para este tipo de preparación.

En una forma de realización práctica, la preparación según la invención contiene:

\bullet: 10% de nanoesferas encapsulando el activo vegetal.

\bullet: 1% de agente conservante,

y el resto hasta 100% está constituido por agua desmineralizada y una combinación de excipiente de uso común para una aplicación cutánea.

\newpage

Es lógico que en la preparación según la invención, sea imprescindible que las nanoesferas encapsulando el extracto vegetal y los excipientes no presenten interacción entre ellos.

Generalmente, la preparación terminada es de color muy claro, o beige claro, según la calidad de las materias grasas utilizadas. Esta preparación es untuosa, lisa, de aplicación fácil, se conserva fácilmente a temperatura ambiente, especialmente en un tubo exento de aire, incluso durante más de un año.

Esta preparación cutánea se aplica fácilmente con la mano, y penetra rápidamente con el efecto de un masaje suave.

Se consiguen buenos resultados aplicándola dos veces al día durante uno a cinco meses, e incluso en forma continua.

Una vez la preparación aplicada sobre la piel, las nanoesferas encapsulando el extracto vegetal penetran en el estrato córneo y entran en contacto con los queratinocitos y los melanocitos. Entonces, ambas membranas se fusionan, y el extracto vegetal penetra en el citoplasma del queratinocito y del melanocito, llevando allí la reductasa, catalasa y superóxido dismutasa que contiene.

Sigue una reacción química de reducción del peróxido de hidrógeno que se encuentra en cantidad excesiva, y una pérdida reducida, e incluso nula, de melanina. Sigue una limitación, e incluso un paro de la despigmentación relacionada con el vitíligo y la eventual repigmentación. Sigue también una disminución, e incluso una desaparición de frente inflamatorio asociado a menudo a las despigmentaciones, fenómenos que no se podían obtener hasta
ahora.

La forma según la cual la invención puede ser realizada y las ventajas que reporta resaltan mejor a partir de los siguientes ejemplos de realización.

Ejemplo 1

A temperatura ambiente, y bajo ligera agitación, en 220 gramos (22%) de agua desmineralizada, se mezclan respectivamente:

\bullet: 3 gramos (0,30%) de un agente gelificante a base de celulosa modificada comercializada por GOODRICH bajo la marca "CARBOPOL 934".

\bullet: 30 gramos (3%) de nanoesferas encapsulando un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa, presentándose bajo la forma de una suspensión acuosa y comercializada por COLETICA bajo la marca "NANOTHALASPHERES" y cuya membrana es de colágeno y de glicosaminoglicanos; estas nanoesferas se presentan como microcápsulas de diámetro inferior a (1) micrometro, caracterizadas porque comprenden una pared mixta de colágeno marino o de atelocolágeno, y de glicosaminoglicanos reticulados, la proporción de glicosaminoglicanos con respecto al colágeno marino o al atelocolágeno pudiendo variar entre el 15% y el 50% en peso; los glicosaminoglicanos están elegidos entre el grupo constituido por el condroitina-4-sulfato, condroitina-6-sulfato, dermatan-sulfato, heparina-sulfato, ketatan-sulfato y la heparina con sus derivados.

\bullet: 10 gramos (1%) de un agente conservante líquido a base de propilenglicol, de diazolidinilurea, de metil paraben y de propil paraben, comercializado por SUTTON bajo la marca "GERMABENII".

\bullet: 1 gramo (0,1%) de un agente quelante de iones, conocido bajo el nombre de EDTA disódico.

Se agita lentamente a temperatura ambiente, hasta obtención de una mezcla bien homogénea.

Paralelamente, bajo agitación rápida (1.000 revoluciones/minuto), y a 80ºC, se mezclan en el orden siguiente:

\bullet: 10 gramos (1%) de un excipiente a base de alcohol cetílico;

\bullet: 90 gramos (9%) de otro excipiente a base de miristato de 2-octildodecil;

\bullet: 80 gramos (8%) de un excipiente a base de un derivado no iónico de cera blanca de abejas, comercializado por GATTEFOSSE bajo la marca "APIFIL";

\bullet: 80 gramos (8%) de un excipiente a base de isoestearato de isoestearilo.

Se agita rápidamente hasta la obtención de una homogeneización perfecta. Entonces, se agrega en esta última mezcla agua desmineralizada, calentada a 82ºC, a razón de 456,5 gramos (45,65%). Para iniciar la emulsión, se agita rápidamente, echando esta agua en la mezcla.

Cuando la emulsión está formada, y la temperatura ha disminuido nuevamente a 30-35ºC, entonces se agrega la primera fase conteniendo las nanoesferas de activo vegetal, y luego 6 gramos (0,6%) de una solución al 50% de trietanolamina, para ajustar el pH, y luego 3 gramos (0,3%) de un perfume y al fin, 0,5 gramos (0,05%) de un agente antioxidantes comercializado por GATTEFOSSE bajo la referencia "WL 774".

Mezclar todo lentamente a 30-35ºC.

La preparación obtenida es una emulsión de tipo aceite en agua, de color blanco-beige claro (según la calidad de las materias grasas utilizadas), lisa, untuosa, semi-líquida, cuyo pH está incluido entre 5 y 7,5. Su olor sui generi está relacionado con el perfume utilizado.

Esta preparación estable a lo largo del tiempo (ninguna liberación intempestiva del principio activo después de un año de almacenaje) puede aplicarse sobre la piel a razón de dos aplicaciones por día durante un tiempo ilimitado.

Se obtiene, a veces la tercera semana, más generalmente dentro de los cinco meses el inicio de la aplicación, una limitación, e incluso un paro de la despigmentación cutánea relacionada con el vitíligo y la eventual repigmentación. Además, la aplicación de esta emulsión parece prevenir nuevas despigmentaciones.

Ejemplo 2

Se repite el ejemplo 1 suprimiendo la nanoesfera encapsulando el extracto vegetal. No se observa ningún efecto.

Ejemplo 3

Se repite el ejemplo 1 sustituyendo las nanoesferas y liposomas comerciales encapsulando el extracto vegetal. Se consigue una emulsión de aspecto similar y con propiedades físicas idénticas a las del ejemplo 1. Sin embargo, se observa una limitación de la despigmentación más lenta, y en forma más esporádica que en el ejemplo 1.

Ejemplo 4

Se repite el ejemplo 1, sustituyendo el extracto vegetal elegido por otro extracto vegetal que no contiene ni reductasa, ni catalasa, ni superóxido dismutasa. No se observa ningún resultado.

Estos ejemplos demuestran perfectamente la actividad relacionada con el efecto de sinergia resultante de la combinación de las nanoesferas encapsulando un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa sobre la limitación de la despigmentación y la reducción del frente inflamatorio en el transcurso del proceso de desarrollo del vitíligo y su eventual repigmentación.

Así mismo, estas preparaciones cutáneas pueden ser utilizadas con éxito en paciente que presentan una patología evolutiva del vitíligo.

Claims

1. Preparación de uso cutáneo, que contiene excipientes y un vector medicamentoso encapsulando un extracto vegetal en reduciasa, catalasa y superóxido dismutasa, caracterizado:

\bullet: porque el vector medicamentoso, constituido por nanoesferas que encapsulan un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa, representa entre el 1% y el 20% del peso de la preparación,

\bullet: porque el extracto vegetal utilizado es rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa.

2. Preparación de uso cutáneo según la reivindicación 1, caracterizada porque las nanoesferas en forma de partículas esféricas que encapsulan el extracto vegetal poseen una membrana de colágeno y de glicosaminoglicanos.

3. Preparación de uso cutáneo según una de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizada porque la carga de extracto vegetal de las nanoesferas representa entre el 5% y el 15% del peso de las mismas.

4. Preparación de uso cutáneo según la reivindicación 1, caracterizada porque el extracto vegetal retenido debe tener las siguientes concentraciones enzimáticas:

\bullet: reductasa: entre 100 U.I. y 1.000 U.I.

\bullet: catalasa: entre 100 U.I. y 1.000 U.I.

\bullet: superóxido dismutasa: entre 500 U.I. y 5.000 U.I.

5. Preparación de uso cutáneo según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque los excipientes contienen una combinación de aceites y de ácidos grasos, de agentes antioxidantes y de agentes conservantes.

6. Preparación de uso cutáneo que contiene excipientes, vectores medicamentosos encapsulando un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa, caracterizada porque contiene por ciento partes:

\bullet: entre el 1% y el 20%, preferentemente el 3% de nanoesferas que encapsulan un extracto vegetal rico en reductasa, catalasa y superóxido dismutasa;

\bullet: 1% de agente conservante;

\bullet: 0,1% de un agente quelante de iones;

\bullet: 0,3% de una gente gelificante a base de celulosa modificada;

\bullet: 0,6% de una gente para ajustar el pH;

estando el resto al 100% constituido por agua desmineralizada, y una combinación de excipientes de uso común para una aplicación cutánea.