ES2055661B1 - Determinacion de la expresion genica por captura especifica de arn y su cuantificacion directa por electroforesis capilar en zona libre. - Google Patents

Determinacion de la expresion genica por captura especifica de arn y su cuantificacion directa por electroforesis capilar en zona libre.

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DETERMINACION DE LA EXPRESION GENICA POR CAPTURA ESPECIFICA DE ARN Y SU CUANTIFICACION DIRECTA POR ELECTROFORESIS CAPILAR EN ZONA LIBRE. METODO DE DETERMINACION DE LA EXPRESION GENICA POR DETECCION DIRECTA DE TRANSCRITOS MEDIANTE ELECTROFORESIS CAPILAR EN ZONA LIBRE PARA MUESTRAS BIOLOGICAS. MUESTRAS DE ARN PURIFICADAS O SEMIPURIFICADAS SE HIBRIDAN CON UN OLIGONUCLEOTIDO O SONDA ESPECIFICA PREVIAMENTE SELECCIONADA, MARCADA CON BIOTINA Y PERTENECIENTE A UNA SECUENCIA CODIFICANTE DE UNA GEN. A LA SOLUCION DE HIBRIDACION CONTENIENDO EL HIBRIDOESPECIFICO SE LE AÑADEN ESFERAS MAGNETICAS CARGADAS CON RSTREPTAVIDINA. SE APLICA SEGUIDAMENTE UN SISTEMA MAGNETICO QUE SELECCIONA EN LA PARED DEL TUBO EL COMPLEJO ESTEPTAVIDINA-BIOTINA-OLIGONUCLEOTIDO-O-SONDA RNA ESPECIFICO, SE LAVA EL COMPLEJO CON SOLUCIONES ASTRINGENTES Y A CONTINUACION SE ELUYE EL RNA ESPECIFICO. EL RNA OBTENIDO SE INYECTA EN UN SISTEMA DE ELECTROFORESIS CAPILAR EN ZONA LIBRE Y LA SEÑAL OBTENIDA POR EL DETECTOR PERMITE LA CUANTIFICACION DIRECTA DE LA MUESTRA.
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