EP4430064A1 - Composés peptidiques cycliques agonistes du récepteur kiss1r et leurs utilisations thérapeutiques - Google Patents

Composés peptidiques cycliques agonistes du récepteur kiss1r et leurs utilisations thérapeutiques

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Publication number
EP4430064A1
EP4430064A1 EP22814357.4A EP22814357A EP4430064A1 EP 4430064 A1 EP4430064 A1 EP 4430064A1 EP 22814357 A EP22814357 A EP 22814357A EP 4430064 A1 EP4430064 A1 EP 4430064A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
peptide compound
residue
xylylene
group
peptide
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP22814357.4A
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German (de)
English (en)
Inventor
Massimiliano Beltramo
Vincent Aucagne
Thimmalapura Marulappa VISHWANATHA
Pascal Bonnet
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institut Francais Du Cheval Et De L'equitation
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite d Orleans UFR de Sciences
Universite de Tours
Institut National de Recherche pour lAgriculture lAlimentation et lEnvironnement
Centre Île-de-France - Jouy-en-Josas - Antony
Original Assignee
Institut Francais Du Cheval Et De L'equitation
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite d Orleans UFR de Sciences
Universite de Tours
Institut National de Recherche pour lAgriculture lAlimentation et lEnvironnement
Centre Île-de-France - Jouy-en-Josas - Antony
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Filing date
Publication date
Application filed by Institut Francais Du Cheval Et De L'equitation, Centre National de la Recherche Scientifique CNRS, Universite d Orleans UFR de Sciences, Universite de Tours, Institut National de Recherche pour lAgriculture lAlimentation et lEnvironnement, Centre Île-de-France - Jouy-en-Josas - Antony filed Critical Institut Francais Du Cheval Et De L'equitation
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Withdrawn legal-status Critical Current

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Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/72—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for hormones

Definitions

  • the present invention relates to the field of improving fertility in mammals. More particularly, the present invention relates to a peptide compound agonist of the KISS1R receptor capable of improving this fertility, as well as the use of such a compound as a medicament, in particular for improving fertility in mammals, and a veterinary composition and/or or pharmaceutical containing it.
  • the peptide compound according to the invention finds particular application both in the field of animal husbandry and in that of human therapy.
  • the methods currently used to induce ovulation at any time during the off-season and/or to synchronize ovulation within herds rely on the use of steroid hormones, such as progesterone or estradiol, prostaglandin F2 ⁇ (PGF2 ⁇ ) and PMSG (for English Pregnant Mare Serum Gonadotropin, equine chorionic gonadotropin).
  • steroid hormones such as progesterone or estradiol, prostaglandin F2 ⁇ (PGF2 ⁇ ) and PMSG (for English Pregnant Mare Serum Gonadotropin, equine chorionic gonadotropin).
  • PPF2 ⁇ prostaglandin F2 ⁇
  • PMSG for English Pregnant Mare Serum Gonadotropin, equine chorionic gonadotropin
  • the methods currently used to induce ovulation in sheep provide for the implantation for 12 to 14 days of a vaginal sponge containing progesterone, combined with co-treatment by an injection intramuscular PMSG at the time of sponge removal.
  • an injection of PGF2 ⁇ must be carried out 6 days after the vaginal implantation of a device containing progesterone, which must be followed the day after the removal of this vaginal device.
  • Such processing is cumbersome to implement.
  • the treatments currently available for medically assisted procreation have certain undesirable side effects, such as ovarian hyperstimulation. These treatments also use hormones to induce ovulation, and therefore act either at the level of the pituitary or at the level of the gonads.
  • KISS1R will be used to designate both the human receptor and the receptor of other species (indicated by the abbreviation Kiss1r in the official nomenclature).
  • the kisspeptide also called kisspeptin
  • the kisspeptide-10 primarily responsible for the biological stimulatory activity of KISS1R is the decapeptide called kisspeptin-10, or KP10.
  • kisspeptin-10 derived from the mouse (mKP10, Mus musculus, of sequence: Tyr-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Gly-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 1 ) in which the C-terminus is modified by amidation) and human-derived kisspeptin-10 (hKP10, Homo sapiens, sequence: Tyr-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Gly-Leu- Arg-Phe-NH2 (SEQ ID No: 2) in which the C-terminus is also modified by amidation).
  • Ewe-derived kisspeptin-10 is notably identical to mKP10.
  • KISS1R The activation of KISS1R by these ligands, and more particularly by KP10, induces a very powerful stimulatory effect on the release of LH and FSH hormones in mammals, this effect resulting from an increase in the secretion of GnRH (for l 'English Gonadotropin Releasing Hormone, pituitary gonadotropin releasing hormone) (Caraty and Franceschini, 2008, Reprod. Dom. Anim. (Suppl. 2): 172-178).
  • KP10 administered to ewes intravenously at the end of the follicular phase, is capable of inducing a peak in luteinizing hormone (LH) which is followed, 21 hours later, by synchronized ovulations at hour (Caraty et al., 2007, Endocrin. 148(11): 5258-5267). It has also been shown that during the period of sexual rest (seasonal anestrus), prolonged infusion of KP10 is able to reactivate the gonadotropic axis and induce ovulation (Sébert et al., 2010, Domest. Anim. Endocrinol .38(4): 289-298).
  • LH luteinizing hormone
  • KISS1R human immunosensus sarcoma
  • the KISS1R humans and sheep also show a very high degree of homology, with more than 60% identity, and kisspeptides (or kisspeptins) show similar in vivo activity in primates and sheep (Seminara et al. , 2006, Endocrinology 147(5): 2122-2126; Caraty et al., 2007, cited above), which makes it possible to envisage an application in human therapy.
  • KP10 has the particular advantages of being very quickly eliminated from the body and easily destroyed in the natural environment, leaving only amino acids as residues.
  • KP10 has a mechanism of action, resulting in the triggering of the secretion of the LH hormone necessary for the induction of ovulation, which is completely different from that of current treatments, and which allows a more localized action. and fine avoiding unwanted side effects.
  • KP10 is rapidly degraded and excreted by the body, it has a limited duration of action. It has therefore been sought by the prior art to develop compounds derived from KP10 which have a prolonged and controlled duration of action in the body, while retaining properties of degradability in the environment similar to those of KP10. .
  • Document WO 2014/118318 in particular describes peptide compounds agonists of the KISS1R receptor derived from KP10, exhibiting a strong capacity for inducing / synchronizing ovulation in mammals, in which a peptide bond within the KP10 peptide is replaced by a 1,2,3-triazole-1,4-disubstituted group.
  • the publication by Camerino et al., International Journal of Peptide Research and Therapeutics, 2008, 14(4): 323-331 and document WO 2013/136338 both describe derivatives of kisspeptin which are macrocyclized.
  • the cyclization is carried out there, respectively, by a lactam bridge formed between the residues located in positions 4 and 8 of the peptide chain, and by a disulphide bridge linking the N-terminal and C-terminal amino acid residues of this chain.
  • the present invention aims to provide non-steroidal compounds which have properties which are further improved compared to these compounds proposed by the prior art, and which, in particular, combine the advantages of a strong fertility-enhancing effect, including a strong ability to induce/synchronize ovulation in female mammals, and a prolonged duration of action in the body. Additional objects of the invention are that these compounds are easy to synthesize and at low cost, and that they exhibit low toxicity for living organisms and for the environment.
  • the present inventors have also taken an interest in derivatives of kisspeptins. They discovered that cyclic derivatives of kisspeptin-10 responding to a particular structure exhibit, surprisingly, a very good activation efficiency of the KISS1R receptor as well as, compared to the linear derivatives of this kisspeptin proposed by the prior art , a prolonged effect, more gradual over time.
  • the present invention provides a peptide compound agonist of the KISS1R receptor, chosen from: - a compound of formula (I): R 1 -Xaa1-Xaa2-Xaa3-Asn-Xaa4-Phe-Xaa5 -Xaa6-Xaa7-Xaa8-NH2 (I) in which the C-terminal end is modified by amidation, Xaa5 and one, preferably only one, of the residues Xaa1, Xaa2 or Xaa3, both simultaneously represent either a cysteine residue, either a D-cysteine residue, the sulfur atoms of said cysteine residues or of said D-cysteine residues, that is to say of Xaa5 and of one of Xaa1, Xaa2 and Xaa3, being linked to one another other covalently via a disulphide, methylene, cis-but-2-enylene, m
  • the term “pharmaceutically acceptable salt”, in a conventional manner per se, means any salt of the compound of formula (I) or of its analogue comprising, as counterion, a substance which does not produce any adverse, allergic or otherwise undesirable reaction when administered to a subject, particularly a mammal. Any conventional pharmaceutically acceptable salt of the compound of formula (I) or of its analogue can be used according to the invention. By way of examples, mention may be made of chlorides, bromides, formates, acetates, etc.
  • the positions of the amino acids in the peptides are defined in a manner conventional in itself, the numbering starting at the level of the N-terminal end of the peptide, appearing on the left in all the sequences, while the C-terminal end appears on the right.
  • the peptide compound according to the invention is thus such that two residues located in specific positions within the KP10 peptide are replaced simultaneously by cysteine residues or by D-cysteine residues, these cysteine or D-cysteine residues being linked, at the level their respective sulfur atoms, covalently via an arm, called a "clip", so as to achieve macrocyclization of the peptide compound, this clip having a particular chemical formula, chosen from: - a disulphide bridge, - a methylene bridge, of formula: - a cis-but-2-enylene bridge, of formula: - an m-xylylene bridge, of formula: - a p-xylylene bridge, of formula: - and a 2,5-dichloro-p-xylylene bridge, of formula: the reasons in these formulas representing the bonds to the sulfur atoms of the cysteines or D-cysteines residues.
  • the peptide compound according to the invention advantageously has a very powerful stimulatory effect on the release of the luteinizing hormone LH in a female mammal, in particular much stronger than cyclized peptide compounds of similar structure but not falling within the formula ( I), in particular by the structure of the clip, the position of the amino acid residues substituted by the cysteine or D-cysteine residues, and even in which one amino acid residue is substituted by a cysteine and the other by a D-cysteine.
  • the peptide compound according to the invention has a prolonged duration of action in vivo.
  • the present inventors by a calcium mobilization test carried out in vitro on cells of a cell line derived from human embryonic kidney (HEK) stably transfected with the human kisspeptin receptor, this test making it possible to evaluate the activation of this receptor by measuring the intracellular increase in calcium ions, that the peptide compound according to the invention activates the KISS1R receptor in a dose-dependent manner, with median concentrations of activation of the receptor Very low EC50, in the range of 1.1 to 45 nM.
  • the peptide compound according to the invention may even have a greater capacity for activating the KISS1R receptor than kisspeptin itself.
  • the peptide compound in accordance with the invention thus advantageously exhibits, compared to KP10, an extended lifespan in the organism, and all the more so in the blood serum, when it is coupled to a unit capable of binding the serum albumin, while maintaining KISS1R stimulation efficiency as great as that of KP10, or even better.
  • analogue of the compound of formula (I) capable of binding the KISS1R is meant in the present description any peptide compound retaining the ability of this compound to bind the KISS1R receptor and whose sequence is different from the sequence of the peptide compound of formula (I), in particular by: - one or more substitutions of a natural amino acid by its D enantiomer or by another natural or unnatural amino acid, in particular one or more conservative substitutions, that is to say of an amino acid residue by another having chemical and/or physical properties, for example size, polarity, charge, etc., which are similar, for example by substitution of a basic residue such as arginine by another basic residue such as a lysine residue, by an acid residue such as aspartate, by another acid residue such as glutamate, by a polar residue such as serine, by another polar residue such as threonine, by a residue aliphatic like leucine by another aliphatic residue like isoleucine, etc.
  • an in vivo test by measuring the LH concentration in blood samples from a female mammal, for example from mice, into which the compound to be tested has been previously injected, for example according to the protocol described below. later in this description.
  • An increase in this concentration compared to an untreated control, demonstrates an ability of the analog to bind KISS1R.
  • this ability can be checked by in vitro test, by measuring the amount of intracellular calcium in a cell line expressing the KISS1R receptor after incubation with the molecule to be tested.
  • unit capable of binding to serum albumin is meant any unit exhibiting a capacity for binding to serum albumin, preferably with a dissociation constant Kd of the order of 10 ⁇ 3 M or less.
  • Kd dissociation constant
  • a comparison may for example be made with the results obtained, by the same technique, with one of the compounds described in the literature as capable of binding to serum albumin, or with one of the examples of such units described below in the present description, in particular a hexadecanoyl unit, in particular included in a ⁇ -(N-hexadecanoyl-Glu-OH) group.
  • a unit capable of binding to serum albumin increases in particular even more, and very significantly, the duration of action of the peptide compound in the body, by an increase of its half-life in the bloodstream, its renal excretion being in particular delayed.
  • Any unit capable of binding to serum albumin can be implemented according to the invention.
  • Particularly preferred units are lipid chains, and in particular fatty acids, in particular hexadecanoic acid.
  • Z represents a hexadecanoyl group (also called palmitoyl).
  • Z may otherwise represent, for example, an ⁇ -carboxylate fatty acid, as described in the aforementioned publication by Zarandi et al., 2006, the Albu-tag as described in the aforementioned Dumelin et al., 2008 publication, or a cyclopeptide such as described in the publications by Dennis et al., 2002 or Angelini et al., 2012 cited above, etc.
  • a unit capable of binding to serum albumin is preferably attached, directly or indirectly via a spacer arm, to an amino acid located in the N-terminal region of the peptide compound, preferably at the N-terminal end of the latter within the R 1 group of general formula (II) above.
  • a unit capable of binding to serum albumin can also, or otherwise, be attached, directly or indirectly via a spacer arm, to the side chain of an amino acid residue located in position 1, in position 2 and/or in position 3 of the peptide compound, that is to say of Xaa1, Xaa2 and/or Xaa3, or residues which are analogous thereto, for those of these residues which do not represent a cysteine residue or D-cysteine.
  • the residue concerned is preferably a lysine residue.
  • Xaa1, Xaa2 and/or Xaa3, if it does not represent a cysteine or D-cysteine residue can be substituted, on its side chain, by a group of general formula (II), comprising a unit capable of binding to serum albumin, as defined in the present description, in particular when, in formula (I), R 1 does not represent such a group of general formula (II) .
  • the peptide compound according to the invention can also meet one or more of the characteristics described below, implemented in isolation or in each of their technically effective combinations.
  • Y represents a covalent bond or a spacer arm, preferably a pharmacologically inactive spacer arm.
  • This spacer arm is also preferably of the hydrophilic type.
  • Y preferably represents a linear, branched and/or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbon radical, which may be interrupted by one or more heteroatoms, preferably by at least, or only, one or more oxygen atoms, and/ or one or more groups comprising at least one heteroatom, preferably at least, or only, one or more primary amine -NH2, secondary amine -NH- and/or carbonyl -CO- groups.
  • Y can in particular represent such a hydrocarbon radical comprising one or more amino acid residues, in particular a D-lysine, L-lysine, D-arginine or L-arginine residue, or a sequence of several D-lysine and/or L-lysine and/or D-arginine and/or L-arginine, any combination of such residues falling within the scope of the invention.
  • Y can comprise any sequence of six residues formed from D-lysine and/or L-lysine and/or D-arginine and/or L-arginine residues. Such a characteristic notably advantageously increases the solubility of the peptide compound in water.
  • Y comprises, more generally, a so-called solubilizing group, that is to say increasing the solubility of the peptide compound in water.
  • solubilizing groups are small peptide sequences, comprising from 3 to 12 amino acids , composed of one or a plurality of hydrophilic amino acid residues such as L-serine, D-serine, L-threonine, D-threonine, glycine, L-glutamic acid, l D-glutamic acid, L-aspartic acid, D-aspartic acid, as well as the aforementioned D-lysine, L-lysine, D-arginine, and L-arginine.
  • Y may alternatively, or also, comprise a targeting molecule facilitating passage of the blood-brain barrier, in particular a targeting peptide such as the peptides Angiopep-2, ApoE, THR, TGN, THRre, D Angiopep-2 and D CDX , as well as their derivatives, described for example in the publication by Dias-Perlas et al., Chemical Science, 2018, DOI: 10.1039/c8sc02415d.
  • a targeting peptide such as the peptides Angiopep-2, ApoE, THR, TGN, THRre, D Angiopep-2 and D CDX , as well as their derivatives, described for example in the publication by Dias-Perlas et al., Chemical Science, 2018, DOI: 10.1039/c8sc02415d.
  • Such solubilizing groups and/or addressing molecules are then preferably contained in Y between spacer groups which Y then also comprises, such as the Ebes group, of formula -CO-(CH2)2-CO-NH-(CH2 )2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-NH-.
  • Y comprises, or consists of, a ⁇ -glutamyl group.
  • R 1 can thus comprise, or consist of, a ⁇ -(N-hexadecanoyl-L-glutamyl) group, also called ⁇ -(N-hexadecanoyl-Glu-OH).
  • R 1 may otherwise comprise, or consist of, without limitation, a ⁇ -(N-(13-carboxy-tridecanoyl-L-glutamyl) group, a ⁇ -(N-(15-carboxy-pentadecanoyl-L-glutamyl) group, a ⁇ -(N-(17-carboxy- heptadecanoyl -L-glutamyl), a ⁇ -(N-(19-carboxy-nonadecanoyl-L-glutamyl) group, a ⁇ -(N-(18-sulfo-octadecanoyl-L-glutamyl) group, a ⁇ -(N -(18-(5-)
  • Y may in particular comprise, or consist of, a group having the general formula (IV), or a succession of two or more such groups: in which m 1 is equal to 1 or 2, m 2 is equal to 0 or 1, m 3 is equal to 1 or 2, n is an integer between 1 and 24, and Y1 represents an oxygen atom or a amide group.
  • the unit capable of binding to serum albumin Z is coupled to this group of formula (IV) on the side of the terminal amine function of the latter, and the amino acid residue of the peptide compound is coupled to it at the level of its opposite terminal carbonyl function.
  • Y comprises, or consists of, a group having the general formula (IV'), comprising at least one D- and/or L-lysine residue:
  • n represents an integer between 1 and 24, n 1 represents an integer between 1 and 24, and p represents an integer between 1 and 12, for example equal to 6.
  • n can for example be equal to 3.
  • Y represents a group of formula (III): in which represents the bond to the unit capable of binding to serum albumin Z, and R 3 represents a covalent bond to the amino acid residue of said peptide compound, in particular to the terminal amine group of this peptide compound (R 3 then representing a unit or R 3 represents a group of formula (IV) or (IV') as defined above, for example a group of formula (IVa), (IVb), (IVc), (IVd) or (IV'a) , this group being coupled, directly or indirectly, preferentially via its terminal carbonyl function, to the amino acid residue of the compound peptide according to the invention.
  • the group Y can for example be chosen from the groups of formulas (IIIa), (IIIb), (IIIc), (IIId), (IIIe) and (III'a): (III'a) in which n represents an integer between 1 and 24, n1 represents an integer between 1 and 24 and p represents an integer between 1 and 12, for example equal to 6.
  • the pattern able to bind to serum albumin Z in particular the hexadecanoyl unit, is covalently linked to the terminal secondary amine function of said group, and the amino acid residue of the peptide compound, in particular at the level of the N-terminal end of the latter is covalently bonded to the opposite terminal carbonyl function of said Y group.
  • R 1 may otherwise represent a hydrogen atom, an acetyl group, an alkanoyl group, in particular chosen from linear alkanoyls, preferably C1-C6 , for example C2, or a benzoyl group.
  • the peptide compound is an analog of the compound of formula (I), in which a peptide bond is replaced by a non-peptide isostere bond, for example by a 1,2,3- triazole-1,4-disubstituted.
  • Several of the peptide bonds of the compound of formula (I) can thus be replaced by non-peptide isosteric bonds, which are identical or different from each other.
  • Xaa7 represents an arginine residue
  • the –NH2 primary amine function of this residue may be substituted by a C1-C3 alkyl radical, in particular by a methyl radical.
  • Such a substitution advantageously avoids degradation of the C-terminal part of the compound by trypsin-type proteases.
  • - Xaa1 and Xaa5 both simultaneously represent either a cysteine residue or a D-cysteine residue, the sulfur atoms of said cysteine residues or of said D- cysteine being covalently linked to each other by a disulphide or methylene bridge;
  • - or Xaa2 and Xaa5 both simultaneously represent either a cysteine residue or a D-cysteine residue, the sulfur atoms of said cysteine residues or of said D-cysteine residues being covalently bonded to each other by a methylene bridge , cis-but-2-enylene, m-xylylene, p-xylylene or 2,5-dichloro-p-xylylene;
  • - or Xaa3 and Xaa5 both simultaneously represent either a cysteine residue or a D-cysteine residue, the sulfur atoms of said cysteine residues or of
  • the peptide compound according to the invention derived from KP10 may have the amino acid sequence: R 1 -Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 4) in which R 1 represents an acetyl group, and the sulfur atoms of the two cystein residues in positions 3 and 7 are covalently linked to each other by a disulphide, methylene, cis-but-2 bridge - enylene, m-xylylene, p-xylylene or 2,5-dichloro-p-xylylene, or consist of one of its analogues capable of binding the KISS1R receptor, or of one of its salts or one of the salts of said analogue, this salt preferably being pharmaceutically acceptable.
  • peptide compounds of sequence SEQ ID No: 4 in which the clip connecting the sulfur atoms of the cysteine residues is a p-xylylene, m-xylylene, methylene, cis-but-2-enylene or 2,5-dichloro- p-xylylene, are particularly preferred in the context of the invention.
  • the peptide compound according to the invention derived from KP10 may have the amino acid sequence: R 1 -Xaa1-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Xaa5-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 5) in which Xaa1 and Xaa5 each represent a cysteine residue or Xaa1 and Xaa5 each represent a D-cysteine residue, R 1 is as defined above (N-terminal modification), R2 represents a hydrogen atom or a C1-C3 alkyl radical, for example a methyl radical (optional substitution of the NH2 group of the arginine residue by a C1-C3 alkyl radical), and the sulfur atoms of Xaa1 and Xaa5 are covalently bonded to the to each other by a disulphide, methylene, cis-but-2-enylene, m-xylylene, p
  • the peptide compound according to the invention derived from KP10 may have the amino acid sequence: R 1 -Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 6) in which R 1 represents an acetyl group, and the sulfur atoms of the two cystein residues in positions 1 and 7 are covalently linked to each other by a disulphide, methylene, cis-but-2 bridge - enylene, m-xylylene, p-xylylene or 2,5-dichloro-p-xylylene, or consist of one of its analogues capable of binding the KISS1R receptor, or of one of its salts or one of the salts of said analogue, this salt preferably being pharmaceutically acceptable.
  • the peptide compound of sequence SEQ ID No: 6 in which the clip connecting the sulfur atoms of the cysteine residues is a disulphide bridge is particularly preferred within the scope of the invention.
  • the peptide compound according to the invention derived from KP10 can otherwise present the amino acid sequence: R 1 -D-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-D-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 7) in which R 1 represents a group acetyl, and the sulfur atoms of the two cysteines at positions 1 and 7 are covalently linked to each other by a disulfide bridge, methylene, cis-but-2-enylene, m-xylylene, p-xylylene or 2,5-dichloro-p-xylylene, or consist of one of its analogues capable of binding the KISS1R receptor, or of one of its salts or one of the salts of said
  • the peptide compounds of the amino acid sequence SEQ ID No: 7 in which the clip connecting the sulfur atoms of the D-cysteine residues is a disulphide bridge or a methylene bridge are particularly preferred in the context of the invention.
  • the peptide compound according to the invention derived from KP10 may otherwise have the amino acid sequence: R 1 -Tyr-Xaa2-Trp-Asn-Ser-Phe-Xaa5-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 8) in which Xaa2 and Xaa5 each represent a cysteine residue or Xaa2 and Xaa5 each represent a D-cysteine residue, R 1 is as defined above (N-terminal modification), R2 represents a hydrogen atom or a C1-C3 alkyl radical, for example a methyl radical (optional substitution of the NH2 group of the arginine residue by a C1-C3 alkyl radical),
  • the peptide compound according to the invention derived from KP10 may have the amino acid sequence: R 1 -Tyr-Cys-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 9) in which R 1 represents an acetyl group, and the sulfur atoms of the two cystein residues in positions 2 and 7 are covalently linked to each other by a disulfide bridge, methylene, cis-but-2-enylene, m-xylylene, p-xylylene or 2,5-dichloro-p-xylylene, or consist of one of its analogues capable of binding the KISS1R receptor, or of one of its salts or one of the salts of said analogue, this salt preferably being pharmaceutically acceptable.
  • the peptide compound of sequence SEQ ID No: 9 in which the clip connecting the sulfur atoms of the cysteine residues is a p-xylylene bridge is particularly preferred in the context of the invention.
  • the peptide compound according to the invention derived from KP10 may in particular have the amino acid sequence: R 1 -Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 10) in which R 1 represents a group of general formula (II) as defined above (N-terminal modification), R2 represents a methyl group, and the sulfur atoms of the two cysteine residues in positions 3 and 7 are covalently linked to each other by a disulfide, methylene, cis-but-2-enylene, m-xylylene, p-xylylene or 2,5-dichloro-p-xylylene bridge, the p- xylylene
  • R 1 is then chosen from the groups of general formula (II) in which: - Z represents a hexadecanoyl group, - and/or Y represents a group of formula (IIIe) above or a group of formula (IIIa) above or a group of formula (III'a) above, n being an integer between 1 and 24, preferably between 1 and 12, preferably between 1 and 6, preferably still between 2 and 4, in particular equal to 2; n1 being an integer including between 1 and 24, preferably between 1 and 12, preferably between 1 and 6, more preferably between 2 and 4, in particular equal to 2; and p being an integer between 1 and 12, preferably between 3 and 8, in particular equal to 6.
  • R 1 can in particular be chosen from the groups of formulas (Va), (Ve) and (V'a): (V'a)
  • the peptide compound according to the invention can be prepared by any conventional method in itself, in particular by chemical synthesis on a solid support, according to the conventional techniques of peptide synthesis, for example on a solid phase using the Fmoc/ tBu.
  • the modification(s) chemical(s) of the amino acid residues of the peptide compound in particular to form the clip between the cystein residues or between the D-cystein residues, to substitute the side chains of amino acid residues, and/or to couple the R group 1 when the latter is not a hydrogen atom, are then produced on this same solid support.
  • the process for preparing the peptide compound according to the invention may also comprise one or more stages of purification of the peptide compound at the end of the synthesis stages, this or these purification stage(s) possibly being carried out in any conventional manner by itself for those skilled in the art, for example by high performance liquid chromatography (HPLC).
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • the peptide compound according to the invention finds in particular applications in the veterinary field, within livestock, for the control of reproduction, in particular, but not limited to, with a view to programming reproduction throughout the year, by example in small ruminants, such as sheep and goats, for the resumption of postpartum cyclicity or the improvement of fertility in cattle, for the synchronization of gilt flocks, to advance puberty in young bulls, to stimulate testosterone secretion in males, especially in small ruminants such as sheep and goats, etc. It can also be used for fertility enhancement, including ovulation induction, in endangered wildlife species kept in captivity for possible reintroduction into the wild.
  • another aspect of the present invention relates to the use of a peptide compound according to the invention as a medicament, in particular for improving fertility in a mammal, in particular for stimulating reproduction, in particular inducing and/or synchronizing ovulation in a female mammal, or to treat sterility.
  • This mammal can in particular be a livestock animal such as a sheep, a goat, a bovine, a pig, etc., a pet, such as a dog or a cat, a horse, etc., or even , for example a wild animal, such as one encounters in zoos and animal parks, etc. ; otherwise, this mammal can be a human. More generally, the invention relates to the use of a peptide compound according to the invention to stimulate the KISS1R receptor, with a view to increasing the secretion of GnRH, and consequently to stimulate the release of LH hormones and/or FSH in a mammal.
  • the peptide compound according to the invention can in particular be used in the context of the treatment of pathological states resulting from low circulating levels of LH and FSH, for example pathological states resulting from insufficient pituitary stimulation. More generally, it can be used for the treatment of pathologies linked to a deficit activity of the reproductive axis, more particularly to a reduction in the activity of the hypothalamic-pituitary-gonad axis, such as amenorrhea of origin hypothalamic or delayed puberty and any other pathologies which require an increase in the secretion of GnRH and gonadotropins.
  • treatment means obtaining a desired pharmacological and physiological effect.
  • treatment includes the prevention or partial prevention of one or more of the symptoms of a pathology and/or the partial or total cure of a pathology and/or the total or partial disappearance of one or more of his symptoms.
  • Other applications of the peptide compound according to the invention are in particular the treatment of certain forms of cancer, sensitive to steroid hormones, the delay of aging by stimulation of the secretion of GnRH, or even the treatment of any other pathology associated with the functions of the kisspeptin system, for example the treatment of cystic follicular syndrome in female mammals, in particular non-humans, the treatment of polycystic ovary syndrome in women, the restoration of the libido in the case of a reduction in this this or the treatment of certain metabolic disorders that impact reproduction, such as diabetes-induced obesity, etc.
  • the peptide compound according to the invention can also be used, for example, to remedy the inhibition of testosterone secretion in males after chronic treatment, in particular of hormone-dependent tumors such as encountered in prostate cancers.
  • the peptide compound according to the invention can be administered to any subject in need thereof.
  • This subject can in particular be a mammal, such as a livestock or companion animal, or a human.
  • the administration of the peptide compound according to the invention to the subject can be carried out by any conventional route in itself, in particular by the parenteral route, for example by the subcutaneous, subdural, intravenous, intramuscular, intrathecal, intraperitoneal, intracerebral route.
  • the treatment can for example consist of a single injection of the compound into the subject to be treated.
  • the peptide compound according to the invention is preferably administered to said subject in a therapeutically effective amount.
  • therapeutically effective amount is meant that amount of the peptide compound which, when administered to a subject, is sufficient to provide the desired treatment effect.
  • the therapeutically effective amount of the peptide compound according to the invention depends on several factors, such as the disease and its severity, the age, weight, etc., of the subject to be treated, the particular compound used, the route and the form of administration, etc.
  • the therapeutically effective amount of the peptide compound according to the invention will be determined by the doctor or the veterinarian for each individual case.
  • the dose of the peptide compound according to the invention administered to the treated subject can be between 1 ⁇ g and 1 mg, in particular between 1 ⁇ g and 250 ⁇ g, between 10 and 250 ⁇ g or even between 50 and 250 ⁇ g, according to the mammal and the molecular weight of the compound.
  • the dose administered may be around 60 ⁇ g.
  • the invention is also expressed in terms of a method for improving fertility in a mammal, in particular for inducing ovulation in a female mammal, for the therapeutic treatment of pathologies linked to a reduction in the activity of the hypothalamic-pituitary-gonad axis, for treating cancers sensitive to steroid hormones and/or for delaying aging, in a subject in need thereof, this method comprising a step of administering to said subject in need thereof an amount therapeutically effective of a peptide compound according to the invention.
  • This method can meet one or more of the characteristics described above with reference to the use of the peptide compound according to the invention as a drug.
  • the invention also relates to the use of a peptide compound according to the invention for the manufacture of a medicament, in particular a medicament for improving fertility in a mammal, in particular for inducing ovulation in a female mammal.
  • the present invention relates to a veterinary or pharmaceutical composition, in particular for improving fertility in a mammal, for example inducing and/or synchronizing estrus and/or ovulation in a female mammal.
  • This veterinary or pharmaceutical composition contains, as active principle, a peptide compound according to the invention, corresponding to one or more of the above characteristics, in a pharmaceutically acceptable vehicle.
  • pharmaceutically acceptable means any vehicle useful for the preparation of a pharmaceutical or veterinary composition and which is generally safe, non-toxic and neither biologically nor otherwise undesirable for the subject to be treated, in particular for mammals and in particular livestock or humans.
  • vehicle of the pharmaceutical composition according to the invention can equally well be solid, semi-solid or liquid. It may be a diluent, an adjuvant or any other conventional vehicle in itself for the constitution of pharmaceutical or veterinary compositions.
  • This pharmaceutical or veterinary composition can be in any galenic form, in particular in a form suitable for parenteral, oral, intranasal, rectal, pulmonary or topical administration.
  • the pharmaceutical or veterinary composition according to the invention may contain one or more excipients/additives conventional in themselves for the constitution of pharmaceutical or veterinary compositions, as well as, optionally, one or more other active principles, this or these principle(s) ) active ingredient(s) which may or may not act synergistically with the peptide compound according to the invention.
  • the pharmaceutical or veterinary composition according to the invention can be used for the therapeutic applications mentioned above, in particular for improving fertility in a mammal, in particular a livestock or companion animal or a human.
  • FIG. 1 represents general reaction schemes for the cyclization step of a process for the preparation of peptide compounds according to the invention, this step being carried out on a solid support (route A) or in solution (routes B and C).
  • Figure 2 is a graph showing the concentration of LH measured by enzyme-linked immunosorbent (ELISA) in blood samples taken from mice pretreated to secrete low and constant levels of LH, as a function of time after injection of a peptide compound in accordance with the invention C1 at different doses (1, 3 or 10 nmol) or murine peptide KP10 at a dose of 5 nmol.
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent
  • Figure 3 is a graph showing the concentration of LH measured by enzyme-linked immunosorbent (ELISA) in blood samples taken from mice pretreated to secrete low and constant levels of LH, as a function of time after injection of a peptide compound conforming to the invention C2 at different doses (1, 3 or 10 nmol) or murine peptide KP10 at a dose of 5 nmol.
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent
  • Each coupling step is followed by an acetylation step carried out using 60 equivalents of acetic anhydride, 15.5 equivalents of di-isopropylethylamine and 1.8 equivalents of HOBt hydrate (1-hydroxybenzotriaole) for 7 min .
  • the deprotection of the Fmoc group is carried out by three successive treatments using a 20% solution of piperidine in NMP for 3 min.
  • the side chain protecting groups used are Arg(Pbf), Arg(Me,Pbf), Asn(Trt), Cys(Acm) or Cys(Trt), D-Cys(Acm), Ser(tBu), Trp(Boc ), Tyr(tBu).
  • the N-terminal acetyl groups are incorporated by coupling acetic acid following a protocol identical to that used for the protected amino acids.
  • the macrocyclization of the peptides by means of the clip according to the invention is carried out on a solid support (route A) or in solution (routes B and C), according to the general diagrams shown in FIG. 1.
  • the pure macrocyclic peptide is analyzed by HPLC (Chromolith® HighResolution RP-18 column, 4.6 ⁇ 100 mm, 3 mL/min) and mass spectrometry (instrument: Agilent 6120, ESI+ mode).
  • HPLC Chrolith® HighResolution RP-18 column, 4.6 ⁇ 100 mm, 3 mL/min
  • mass spectrometry instrument: Agilent 6120, ESI+ mode
  • the solution is then drawn into a syringe fitted with a polypropylene frit, and containing the resin carrying the peptide, the cysteine or D-cysteine residues of which are deprotected (0.005 mmol).
  • the reaction medium is stirred for 5 h at room temperature.
  • the resin is then washed successively with NMP (5 ⁇ 3 mL) then with CH2Cl2 (5 ⁇ 3 mL).
  • the dihalo derivative of the clip is diiodomethane; in the case of the cis-but-2-enylene bridge the dihalo derivative of the clip is cis-1,4-dibromo-but-2-ene and in the case of the m-xylylene, p-xylylene and 2,5-dichloro-p-xylylene, the di-halo derivative is the corresponding ⁇ , ⁇ '-dibromo-xylene compound.
  • the crude macrocyclic peptide is finally released from the resin with a solution of TFA/H2O/iPr3SiH/phenol, 87.5/5/2.5/5 for 2 h.
  • the peptide is precipitated in cold Et2O, centrifuged and then washed 3 times with Et2O. Macrocyclization by formation of a disulfide bridge in solution (route B)
  • the peptide whose cysteine or D-cysteine residues are deprotected (0.005 mmol) is released from the resin with a solution of TFA/H2O/iPr3SiH/phenol, 87.5/5/2.5/5 for 2 h.
  • the peptide is precipitated in cold Et2O, centrifuged and then washed 3 times with Et2O.
  • the crude peptide is dissolved in 5 mL of a 1:3 DMSO/water mixture and stirred at room temperature for 18 h then freeze-dried. Macrocyclization by formation of a p-xylylene clip in solution (route C) Depending on the general mode of synthesis implemented, in the case of p-xylylene type clips, the reaction can alternatively be carried out in solution.
  • the peptide whose cysteine residues are protected by S-trityl groups (0.005 mmol) is released from the resin with a solution of TFA/H2O/iPr3SiH/phenol, 87.5/5/2.5/5 for 2 h.
  • the peptide is precipitated in cold Et2O, centrifuged and then washed 3 times with Et2O.
  • the crude peptide is dissolved in 2.4 mL of NMP then a solution of 1.58 mg (0.006 mmol, 1.2 equivalents) of ⁇ , ⁇ -dibromo-p-xylene and 26 ⁇ L (0.15 mmol, 30 equivalents ) of di-isopropylethylamine in 100 ⁇ L of NMP is added.
  • the reaction is stirred for 30 min at ambient temperature, then 2.87 mg (0.01 mmol, 2 equivalents) of tris-carboxyethylphosphine hydrochloride (TCEP.HCl) in 100 ⁇ l of water are added.
  • TCEP.HCl tris-carboxyethylphosphine hydrochloride
  • This peptide compound derived from KP10 corresponds to the amino acid sequence: Ac-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 12 ) the two cysteine residues being linked to each other by an o-xylylene staple not in accordance with the invention, and with the chemical formula:
  • This peptide compound derived from KP10 corresponds to the amino acid sequence: Ac-D-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 13) the cysteine and D-cysteine residues being linked to each other by a disulphide bridge, and with the chemical formula:
  • This peptide compound derived from KP10 corresponds to the amino acid sequence: Ac-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-D-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 14) the cysteine and D-cysteine residues being linked to each other by a disulphide bridge, and having the chemical formula: It is prepared according to route B described above, following the general procedure.
  • This peptide compound derived from KP10 corresponds to the amino acid sequence: Ac-Tyr-D-Cys-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 15) the cysteine and D-cysteine residues being linked to each other by a p-xylylene bridge, and to the chemical formula: It is prepared according to route A described above, following the general procedure.
  • This peptide compound derived from KP10 corresponds to the amino acid sequence: Ac-Tyr-Asn-D-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 16) the cysteine and D-cysteine residues being linked to each other by a p-xylylene bridge, and the chemical formula: It is prepared according to route A described above, following the general procedure.
  • Example 2 In Vitro Test for Mobilization of Extracellular Calcium
  • the peptide compounds prepared in Example 1 are subjected to an in vitro test for mobilization of extracellular calcium, according to the following protocol.
  • the HEK293A cell line (ATCC, American Type Culture Collection – CRL-1573) was stably transfected with the human KISS1R receptor (KISS1 receptor (KISS1R) mRNA, Homo sapiens, GenBank accession number: NM_032551.5).
  • KISS1 receptor KISS1R
  • pcDNA3.1 vector Invitrogen
  • HA hemagglutinin
  • the KISS1R receptor is coupled to Gq proteins and its activation produces an increase in the intracellular concentration of calcium.
  • EC50 median KISS1R receptor activation concentration
  • the medium (DMEM with GlutaMAX® and without pyruvate, 10% fetal calf serum, 1% penicillin, 1% streptomycin, 200 ⁇ g/mL Geneticin, and HEPES buffer pH 7.4 (25 mM)) was changed and the cells were incubated with the fluorescent dye Fluo-4NW, according to the manufacturer's instructions (Molecular Probes).
  • the compounds to be tested were prediluted in a so-called “non-binding” plate (Corning), at a concentration 20 times greater than the desired final concentration (20X solution).
  • the peptide compound C1 derived from KP10 has the amino acid sequence: R 1 -Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg(Me)-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 17 ) in which the sulfur atoms of the two cysteine residues are linked by a p-xylylene bridge, Me represents, in a conventional manner per se, a methyl group substituting the -NH2 group of the side chain of the arginine residue, and R 1 represents a group comprising a hexadecanoyl unit, capable of binding serum albumin, coupled via a ⁇ -glutamyl spacer arm to the N-terminal end of the peptide compound, R 1 thus exhibiting a gamma-(N-hexadecanoyl) group -Glu-OH) (N-terminal modification), of formula (Ve): Compound C1 thus has the chemical formula:
  • This peptide compound is prepared according to route A described in Example 1, following the general procedure.
  • the ⁇ -glutamyl residue is introduced by coupling of the protected amino acid Fmoc-Glu-OtBu according to the general procedure, followed by the coupling of palmitic acid according to a slightly modified protocol for solubility reasons: this reaction is carried out in a 1:3 mixture of NMP and dichloromethane rather than in NMP , for 2 h rather than 30 min.
  • the peptide compound C2 derived from KP10 has the amino acid sequence: R 1 -Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg(Me)-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 18 ) in which the sulfur atoms of the two cysteine residues are linked by a p-xylylene bridge and R 1 represents a hexadecanoyl unit, capable of binding serum albumin, coupled via a spacer arm with a ⁇ -glutamyl group and ethylene glycol groups at the N-terminal end of the peptide compound (N-terminal modification), R 1 having the formula (Va): Compound C2 thus has the chemical formula: This peptide compound is prepared according to route A described in Example 1, following the general procedure.
  • mice were housed 3-4 per cage in a light-controlled environment (12 h light and 12 h dark) and with ad libitum access to food and water. Mice were ovariectomized following a standard procedure and implanted with a capsule containing sufficient estradiol to induce a plasma level of 4-7 pg/mL necessary to maintain negative feedback on luteinizing hormone LH secretion ( Quennell et al., 2011, Endocrinology 152(4):1541-50).
  • the samples collected were immediately mixed with phosphate buffered saline and frozen on dry ice.
  • a monoclonal antibody against bovine LH (LH ⁇ , 518 B7, 1:1,000, from the University of California Davis) was used to capture LH and a polyclonal rabbit against LH (AFP240580Rb, AF Parlow) was used to capture LH. was used for detection.
  • the standard was the LH mouse NIDDK (AF Parlow AFP5306A mouse RIA kit).
  • the detection limit was 0.2 ng/mL and the coefficient of variation averaged 11%.
  • the 96-well plates were incubated with the LH ⁇ 518 B7 antibody overnight at 4°C, the antibody was removed and 200 ⁇ L of blocking buffer (5% skimmed milk powder) was added to each well for 2 hours at room temperature. Then the samples were deposited in each well in duplicate, left at room temperature for 2 h, then the AFP240580Rb antibody was added to each well and left to incubate for 90 min.
  • Example 5 Peptide compound in accordance with the invention with a motif capable of binding serum albumin
  • the peptide compound C3 derived from KP10 has the amino acid sequence: R 1 -Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys -Leu-Arg(Me)-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 19) in which the sulfur atoms of the two cysteine residues are linked by a p-xylylene bridge and R 1 represents a hexadecanoyl unit, capable of binding albumin serum, coupled via a spacer arm with a ⁇ -glutamyl group, lysine residues and ethylene glycol groups at the N-terminal end of the peptide compound (N-terminal modification), R 1 having the formula (V'a ):
  • Compound C3 in accordance with the invention thus has the chemical formula:
  • This peptide compound is prepared according to route C described above, following the general procedure, according to which the cysteines are introduced protected by a trityl group, and the macrocyclization is carried out in solution after release of the peptide from the resin and deprotection, by reaction with ⁇ , ⁇ -dibromo-p-xylene.
  • an Ebes spacer group, 6 lysine residues, a second Ebes spacer group, then a ⁇ -glutamyl residue are introduced by successive couplings of the derivative Fmoc-Ebes-OH then Fmoc-Lys( Boc)-OH (repeated six times), then the Fmoc derivative Ebes-OH, then the protected amino acid Fmoc-Glu-OtBu, according to the general procedure, followed by the coupling of palmitic acid according to a protocol slightly modified for ensure its solubility: this reaction is carried out in a 1:3 mixture of NMP and dichloromethane rather than in NMP, for 2 h rather than 30 min.

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Abstract

L'invention concerne un composé peptidique agoniste du récepteur KISS1R, choisi parmi les composés de formule (I) et leurs analogues aptes à lier le récepteur KISS1R, ou un de leurs sels : R1-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Asn-Xaa4-Phe-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-NH2 (I), dans laquelle Xaa5 et un des résidus Xaa1, Xaa2 ou Xaa3, représentent tous deux simultanément soit un résidu cystéine, soit un résidu D-cystéine, les atomes de soufre de ces résidus cystéine ou de ces résidus D-cystéine étant liés de façon covalente l'un à l'autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène. Le composé peptidique selon l'invention présente une durée d'action particulièrement longue dans l'organisme, et s'avère notamment efficace pour améliorer la fertilité chez les mammifères.

Description

COMPOSÉS PEPTIDIQUES CYCLIQUES AGONISTES DU RÉCEPTEUR KISS1R ET LEURS UTILISATIONS THÉRAPEUTIQUES La présente invention s’inscrit dans le domaine de l’amélioration de la fertilité chez les mammifères. Plus particulièrement, la présente invention concerne un composé peptidique agoniste du récepteur KISS1R apte à améliorer cette fertilité, ainsi que l’utilisation d’un tel composé en tant que médicament, notamment pour améliorer la fertilité chez les mammifères, et une composition vétérinaire et/ou pharmaceutique le contenant. Le composé peptidique selon l’invention trouve notamment application aussi bien dans le domaine de l’élevage que dans celui de la thérapie humaine. On entend dans la présente description, par amélioration de la fertilité, aussi bien le traitement de la stérilité, en particulier chez l’humain, que la stimulation et l’amélioration de la maîtrise de la reproduction, notamment l’induction et la synchronisation de l’ovulation chez les mammifères femelles, en particulier pour la reprise de la cyclicité post-partum, et la stimulation de la sécrétion de testostérone chez les mammifères mâles. Dans le domaine de l’élevage, la maîtrise de la reproduction est un enjeu important, en vue d’optimiser la production des produits, tels que la viande, le lait ou ses dérivés, tout au long de l’année. Par exemple, l’élevage ovin et caprin est soumis à de fortes variations saisonnières de productivité, du fait de la saisonnalité de la reproduction et du déroulement de la lactation. Les méthodes utilisées à l’heure actuelle pour induire l’ovulation à tout moment de la contre- saison et/ou pour synchroniser l’ovulation à l’intérieur des troupeaux s’appuient sur l’utilisation d’hormones stéroïdiennes, telles que la progestérone ou l’œstradiol, de la prostaglandine F2α (PGF2α) et de la PMSG (pour l’anglais Pregnant Mare Serum Gonadotropin, gonadotrophine chorionique équine). Ces méthodes ne permettent cependant pas une maîtrise complète de l’ovulation. En outre, les hormones de type œstrogènes mises en œuvre sont des polluants qui ne sont pas facilement dégradés, qui s’accumulent dans la terre et les eaux, et qui présentent une menace pour la santé humaine. Le traitement des animaux par de telles hormones présente également des contraintes importantes pour les éleveurs, qui sont obligés de respecter un cahier des charges très strict. A titre d’exemple, les méthodes utilisées à l’heure actuelle pour induire l’ovulation chez la brebis prévoient l’implantation pendant 12 à 14 jours d’une éponge vaginale contenant de la progestérone, combinée avec un co-traitement par une injection intramusculaire de PMSG au moment du retrait de l’éponge. De même, chez le bovin, un injection de PGF2α doit être conduite 6 jours après l’implantation vaginale d’un dispositif contenant de la progestérone, qui doit être suivie le lendemain du retrait de ce dispositif vaginal. De tels traitements s’avèrent contraignants à mettre en œuvre. En clinique humaine, les traitements disponibles à l’heure actuelle pour la procréation médicale assistée présentent quant à eux certains effets secondaires non souhaitables, tels qu’une hyperstimulation ovarienne. Ces traitements utilisent également des hormones pour induire l’ovulation, et agissent donc soit au niveau de l’hypophyse, soit au niveau des gonades. Il en est de même pour les traitements destinés à soigner l’aménorrhée hypothalamique ou les pubertés retardées. Des traitements alternatifs ont ainsi été recherchés par l’art antérieur, qui mettent en œuvre des molécules non stéroïdiennes capables de déclencher / synchroniser l’ovulation tant chez les ruminants, de sorte à pouvoir programmer leur reproduction et leur production laitière tout au long de l’année, améliorer les rendements de l’insémination artificielle, optimiser la rentabilité des troupeaux, réduire les problèmes d’infertilité dans les troupeaux, etc., que chez les humains, pour induire la libération des gonadotrophines de façon plus naturelle que les traitements hormonaux actuels, en réduisant ainsi les risques de syndrome d’hyperstimulation ovarienne. Le système de neurotransmission formé par un récepteur, le KISS1R, également nommé KISS1 receptor, ou GPR54 (N° d’accession GenBank, pour le récepteur humain : NM_032551.4, GI:189163516), et ses ligands endogènes, nommés kisspeptides (ou kisspeptines), issus du clivage d’un peptide précurseur, le KISS1 (N° d’accession GenBank, pour le peptide humain : NM_002256.3, GI:116829963 ; NP_002247.3, GI:116829964 ; pour le peptide murin : AB666166.1, GI:384367966 ; BAM11250.1, GI:384367967 ; pour le peptide ovin : AFW03832.1, GI:411100741), qui sont des neurotransmetteurs présentant la capacité de stimuler le récepteur KISS1R (Kotani et al., 2011, J. Biol. Chem. 276(37): 34631-34636) a notamment formé la base d’un axe de recherche visant à atteindre ces objectifs. Dans la présente description, l’abréviation KISS1R sera utilisée pour désigner tant le récepteur humain que le récepteur des autres espèces (indiqué par l’abréviation Kiss1r dans la nomenclature officielle). Une liste complète des synonymes utilisés pour désigner le KISS1R est notamment disponible sur le site internet de l’IUPHAR. Le kisspeptide (également nommé kisspeptine) essentiellement responsable de l’activité biologique de stimulation du KISS1R est le décapeptide nommé kisspeptine-10, ou KP10. On connait notamment les séquences de la kisspeptine-10 dérivée de la souris (mKP10, Mus musculus, de séquence : Tyr-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Gly-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 1) dans laquelle l’extrémité C-terminale est modifiée par amidation) et de la kisspeptine-10 dérivée de l’humain (hKP10, Homo sapiens, de séquence : Tyr-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Gly-Leu-Arg-Phe-NH2 (SEQ ID No : 2) dans laquelle l’extrémité C-terminale est également modifiée par amidation). La kisspeptine-10 dérivée de la brebis est notamment identique à la mKP10. L’activation du KISS1R par ces ligands, et plus particulièrement par la KP10, induit un effet stimulateur très puissant sur la libération des hormones LH et FSH chez les mammifères, cet effet résultant d’une augmentation de la sécrétion de la GnRH (pour l’anglais Gonadotropin Releasing Hormone, hormone de libération des gonadotrophines hypophysaires) (Caraty et Franceschini, 2008, Reprod. Dom. Anim. (Suppl. 2): 172-178). Il a notamment été montré que la KP10, administrée aux brebis par voie intraveineuse en fin de phase folliculaire, est capable d’induire un pic de l’hormone lutéinisante (LH) qui est suivi, 21 heures plus tard, par des ovulations synchronisées à l’heure près (Caraty et al., 2007, Endocrin. 148(11): 5258-5267). Il a également été démontré que pendant la période de repos sexuel (anœstrus saisonnier), une infusion prolongée de KP10 est capable de réactiver l’axe gonadotrope et d’induire l’ovulation (Sébert et al., 2010, Domest. Anim. Endocrinol.38(4): 289-298). Ces résultats ont ainsi démontré la faisabilité d’une maîtrise de l’ovulation des animaux d’élevage grâce à la stimulation du système KISS1R/KP10. Le KISS1R humain et celui de la brebis présentent en outre un très haut degré d’homologie, avec plus de 60 % d’identité, et les kisspeptides (ou kisspeptines) montrent une activité in vivo similaire chez les primates et les brebis (Seminara et al., 2006, Endocrinology 147(5): 2122-2126 ; Caraty et al., 2007, précitée), ce qui permet d’envisager une application en thérapie humaine. Par rapport aux hormones stéroïdiennes, la KP10 présente notamment les avantages d’être très rapidement éliminée de l’organisme et facilement détruite dans le milieu naturel, pour ne laisser que des acides aminés comme résidus. Par ailleurs, elle présente un mécanisme d’action, résultant en un déclenchement de la sécrétion de l’hormone LH nécessaire à l’induction de l’ovulation, qui est complètement différent de celui des traitements actuels, et qui permet une action plus localisée et fine en évitant les effets secondaires indésirables. Cependant, la KP10 étant rapidement dégradée et excrétée par l’organisme, elle présente une durée d’action limitée. Il a donc été recherché par l’art antérieur à développer des composés dérivés de la KP10 qui présentent une durée d’action prolongée et maîtrisée dans l’organisme, tout en conservant des propriétés de dégradabilité dans l’environnement similaires à celles de la KP10. Le document WO 2014/118318 en particulier décrit des composés peptidiques agonistes du récepteur KISS1R dérivés du KP10, présentant une forte capacité d’induction / synchronisation de l’ovulation chez les mammifères, dans lesquels une liaison peptidique au sein du peptide KP10 est remplacée par un groupe 1,2,3-triazole-1,4-disubsitué. La publication de Camerino et al., International Journal of Peptide Research and Therapeutics, 2008, 14(4): 323-331 et le document WO 2013/136338 décrivent tous deux des dérivés de la kisspeptine qui sont macrocyclisés. La cyclisation y est réalisée, respectivement, par un pont lactame formé entre les résidus situés en positions 4 et 8 de la chaîne peptidique, et par un pont disulfure reliant les résidus d’acides aminés N-terminal et C-terminal de cette chaîne. La présente invention vise à proposer des composés non stéroïdiens qui présentent des propriétés encore améliorées par rapport à ces composés proposés par l’art antérieur, et qui, notamment, allient les avantages d’un fort effet d’amélioration de la fertilité, et notamment d’une forte capacité à induire / synchroniser l’ovulation chez les mammifères femelles, et d’une durée d’action prolongée dans l’organisme. Des objectifs supplémentaires de l’invention sont que ces composés soient faciles à synthétiser et à coût réduit, et qu’ils présentent une faible toxicité pour les organismes vivants et pour l’environnement. Afin d’atteindre ces objectifs, les présents inventeurs se sont également intéressés aux dérivés des kisspeptines. Ils ont découvert que des dérivés cycliques de la kisspeptine-10 répondant à une structure particulière présentent, de manière surprenante, une très bonne efficacité d’activation du récepteur KISS1R ainsi que, par rapport aux dérivés linéaires de cette kisspeptine proposés par l’art antérieur, un effet prolongé, plus graduel dans le temps. Ainsi, selon un premier aspect, il est proposé par la présente invention un composé peptidique agoniste du récepteur KISS1R, choisi parmi : - un composé de formule (I) : R1-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Asn-Xaa4-Phe-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-NH2 (I) dans laquelle l’extrémité C-terminale est modifiée par amidation, Xaa5 et un, de préférence un seul, des résidus Xaa1, Xaa2 ou Xaa3, représentent tous deux simultanément soit un résidu cystéine, soit un résidu D-cystéine, les atomes de soufre desdits résidus cystéine ou desdits résidus D-cystéine, c’est- à-dire de Xaa5 et de l’un de Xaa1, Xaa2 et Xaa3, étant liés l’un à l’autre de façon covalente par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p- xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, lorsqu’ils ne représentent pas ledit résidu cystéine ou D-cystéine : Xaa1 représente un résidu tyrosine, D-tyrosine ou lysine, Xaa2 est nul ou représente un résidu asparagine ou lysine, et Xaa3 représente un résidu tryptophane, lysine, proline ou hydroxyproline, Xaa4 représente un résidu sérine ou thréonine, Xaa6 représente un résidu leucine ou un résidu α-amino acyle aliphatique analogue, tel que Ile, Val, Ala(cPr), Nle ou Nval, Xaa7 représente un résidu arginine, dont la fonction –NH2 est le cas échéant substituée par un radical alkyle en C1-C3, ou un résidu α-amino acyle chargé positivement analogue, tel que Arg(asymMe2), Lys, le cas échéant substitué, ou Orn, le cas échéant substitué, Xaa8 représente un résidu tyrosine, phénylalanine, tryptophane ou un résidu α- amino acyle de type aryl alanine analogue, tel que la 1-, 2- ou 3-naphtylalanine, la 2- ou 3-thiénylalanine, la 2- ou 3-furylalanine, la 2-, 3- ou 4- fluorophénylalanine, la 2-, 3- ou 4-chlorophénylalanine, la 2-, 3- ou 4- bromorophénylalanine, la 2-, 3- ou 4-cyanophénylalanine, la 2-, 3- ou 4- iodophénylalanine, la 2-, 3- ou 4-méthylphénylalanine ou la 2-, 3- ou 4- trifluorométhylphénylalanine, Asn représente un résidu asparagine, Phe représente un résidu phénylalanine, R1 représente un atome d’hydrogène, un groupement acétyle, un groupement alcanoyle, un groupement benzoyle ou un groupement de formule générale (II) : dans laquelle Y représente une liaison covalente ou un bras espaceur et Z représente un motif apte à se lier à l’albumine sérique, - un analogue du composé de formule (I) apte à lier le récepteur KISS1R, - ou un quelconque de leurs sels, en particulier un quelconque de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. On entend, par « nul », le fait que le résidu d’acide aminé est absent. On entend dans la présente description, par « sel pharmaceutiquement acceptable », de manière classique en elle-même, tout sel du composé de formule (I) ou de son analogue comprenant, en tant que contre-ion, une substance qui ne produit aucune réaction adverse, allergique ou autrement indésirable lorsqu'elle est administrée à un sujet, en particulier à un mammifère. Tout sel conventionnel pharmaceutiquement acceptable du composé de formule (I) ou de son analogue, peut être mis en œuvre selon l’invention. A titre d’exemples, on peut citer les chlorures, bromures, formiates, acétates, etc. Dans la présente description, les positions des acides aminés dans les peptides sont définies de manière classique en elle-même, la numérotation débutant au niveau de l’extrémité N-terminale du peptide, figurant à gauche dans toutes les séquences, alors que l’extrémité C-terminale figure quant à elle à droite. Le composé peptidique selon l’invention est ainsi tel que deux résidus situés dans des positions spécifiques au sein du peptide KP10 sont remplacés simultanément par des résidus cystéine ou par des résidus D-cystéine, ces résidus cystéine ou D-cystéine étant reliés, au niveau de leurs atomes de soufre respectifs, de manière covalente par un bras, dit « agrafe », de sorte à réaliser une macrocyclisation du composé peptidique, cette agrafe présentant une formule chimique particulière, choisie parmi : - un pont disulfure, - un pont méthylène, de formule : - un pont cis-but-2-énylène, de formule : - un pont m-xylylène, de formule : - un pont p-xylylène, de formule : - et un pont 2,5-dichloro-p-xylylène, de formule : les motifs dans ces formules représentant les liaisons aux atomes de soufre des résidus cystéines ou D-cystéines. Le composé peptidique selon l’invention présente avantageusement un effet stimulateur très puissant sur la libération de l’hormone lutéinisante LH chez un mammifère femelle, notamment bien plus fort que des composés peptidiques cyclisés de structure proche mais ne s’inscrivant pas dans la formule (I), notamment par la structure de l’agrafe, la position des résidus d’acides aminés substitués par les résidus cystéine ou D-cystéine, et même dans lesquels un résidu d’acide aminé est substitué par une cystéine et l’autre par une D-cystéine. En outre, le composé peptidique selon l’invention présente une durée d’action in vivo prolongée. Sans préjuger des mécanismes sous-tendant cette prolongation de l’effet du composé peptidique selon l’invention dans le temps, on peut supposer que le choix particulier combiné des positions d’ancrage de l’agrafe sur le composé peptidique et de la structure chimique de cette agrafe, contraint le composé peptidique dans une configuration tridimensionnelle particulière qui d’une part, favorise son interaction avec le récepteur KISS1R, et d’autre part, défavorise son interaction avec les sites actifs des protéases, si bien qu’il est plus résistant aux phénomènes de protéolyse in vivo. En particulier, il a été démontré par les présents inventeurs, par un test de mobilisation de calcium réalisé in vitro sur des cellules d’une lignée cellulaire dérivée de rein embryonnaire humain (HEK) transfectées de façon stable avec le récepteur humain de la kisspeptine, ce test permettant d’évaluer l’activation de ce récepteur par mesure de l’augmentation intracellulaire des ions calcium, que le composé peptidique selon l’invention active le récepteur KISS1R de manière dose-dépendante, avec des concentrations médianes d’activation du récepteur EC50 très basses, dans la plage de 1,1 à 45 nM. Selon sa formule spécifique, le composé peptidique selon l’invention peut même présenter une plus forte capacité d’activation du récepteur KISS1R que la kisspeptine elle- même. Un test réalisé in vivo sur des souris femelles ovariectomisées et implantées en sous-cutané avec un dispositif contenant de l’œstradiol qui est libéré graduellement (ce qui permet d’éliminer le cycle ovarien tout en maintenant un niveau bas et stable de sécrétion de gonadotrophines), le composé peptidique étant injecté par voie intrapéritonéale à trois différentes doses allant de 1,3 à 10 nmol, montre également notamment un fort effet sur la sécrétion de l’hormone lutéinisante (LH), cet effet augmentant en fonction de l’augmentation de la dose administrée et étant durable dans le temps. Ces résultats démontrent notamment que le composé peptidique selon l’invention présente une forte capacité de stimuler l’axe hypothalamo-hypophysaire sur une longue durée. Le composé peptidique conforme à l’invention présente ainsi avantageusement, par rapport au KP10, une durée de vie prolongée dans l’organisme, et d’autant plus, dans le sérum sanguin, lorsqu’il est couplé à un motif apte à lier l’albumine sérique, tout en conservant une efficacité de stimulation du KISS1R aussi importante que celle du KP10, voire meilleure. Par analogue du composé de formule (I) apte à lier le KISS1R, on entend dans la présente description tout composé peptidique conservant l’aptitude de ce composé à lier le récepteur KISS1R et dont la séquence se distingue de la séquence du composé peptidique de formule (I), en particulier par : - une ou plusieurs substitutions d’un acide aminé naturel par son énantiomère D ou par un autre acide aminé naturel ou non-naturel, en particulier une ou plusieurs substitutions conservatives, c’est-à-dire d’un résidu d’acide aminé par un autre présentant des propriétés chimiques et/ou physiques, par exemple de taille, polarité, charge, etc., qui sont similaires, par exemple par substitution d’un résidu basique tel que l’arginine par un autre résidu basique comme un résidu lysine, d’un résidu acide tel que l’aspartate par un autre résidu acide comme le glutamate, d’un résidu polaire comme la sérine par un autre résidu polaire comme la thréonine, d’un résidu aliphatique comme la leucine par un autre résidu aliphatique comme l’isoleucine, etc. ; - et/ou par une modification post-traductionnelle ou une modification chimique de l’extrémité N-terminale et/ou de l’extrémité C-terminale et/ou de tout groupement fonctionnel porté par la chaine latérale d’un résidu d’acide aminé de la séquence, par exemple une glycosylation, une amidation, une estérification, une acylation, une acétylation, une méthylation, etc., - et/ou par le remplacement d’une ou plusieurs liaisons peptidiques par une liaison isostère non peptidique, - et/ou par une ou plusieurs additions d’acides aminés à l’extrémité N-terminale de la séquence du composé peptidique de formule (I), entre le groupement R1 et le résidu Xaa1. L’aptitude des composés peptidiques à lier le KISS1R peut être évaluée de différentes manières. Elle peut notamment être évaluée par un test in vivo, par mesure de la concentration en LH dans des échantillons de sang de mammifère femelle, par exemple de souris, auxquelles a préalablement été injecté le composé à tester, par exemple selon le protocole décrit ci-après dans la présente description. Une augmentation de cette concentration, par rapport à un témoin non traité, témoigne d’une aptitude de l’analogue à lier le KISS1R. Par ailleurs, cette aptitude peut être contrôlée par test in vitro, par mesure de la quantité de calcium intracellulaire dans une lignée cellulaire exprimant le récepteur KISS1R après incubation avec la molécule à tester. En effet, la stimulation du récepteur KISS1R conduit à l’activation de deux voies intracellulaires distinctes, qui induisent l’augmentation de la concentration intracellulaire d’ions calcium : par libération des réserves intracellulaires, suite à la production d’IP3, et par entrée, suite à l’ouverture des canaux ioniques (par exemple TRPC) de la membrane plasmatique de la cellule, d’ions calcium présents dans le milieu extracellulaire. Un exemple d’un tel test, dit de mobilisation du calcium, est décrit de manière détaillée ci-après dans la présente description. Une augmentation de la quantité de calcium intracellulaire, par rapport à un témoin non traité, ou par rapport à la même lignée cellulaire n’exprimant pas le récepteur KISS1R, témoigne alors de l’aptitude de l’analogue à lier le récepteur KISS1R. Par motif apte à se lier à l’albumine sérique, on désigne tout motif présentant une capacité de liaison à l’albumine sérique, de préférence avec une constante de dissociation Kd de l’ordre de 10-3 M ou moins. De tel motifs sont bien connus de l’homme du métier, qui peut notamment, pour les identifier, se référer aux nombreuses publications dans le domaine, par exemple aux publications d’Angelini 2012, J. Med. Chem., 55: 10187-10197, de Dennis et al., 2002, J. Biol. Chem., 277: 35035−35043, de Dumelin et al., 2008, Angew. Chem., Int. Ed., 47: 3196-3201, de Knudsen et al., 2000, J. Med. Chem. 43: 1664-1669, de Zarandi et al., 2006, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103(12): 4610-4615, ou encore dans les revues de Pollaro et Heinis, 2010, Med. Chem. Commun. 1, 319-324 ou de Zorzi et al., 2019, Med. Chem. Commun.10, 1068- 1081. L’homme du métier peut autrement procéder de manière empirique, par détermination de la constante de dissociation Kd d’un motif donné par un test d’étude de la liaison classique en lui-même, par exemple par l’un des tests décrits dans la publication de Phizicky et al., Microbiological Reviews, 1995, 59, 94-123, notamment par la méthode dite de saturation, ou par la méthode dite de déplacement, ou par chromatographie d’affinité, l’albumine sérique étant immobilisée sur la colonne, etc. Des exemples de protocoles pour la mise en œuvre de tels tests de liaison, qui sont tous bien connus de l’homme du métier et qui peuvent facilement être mis en œuvre, sont par exemple décrits dans la publication de Kurtzhals et al., Biochem. J., 1995, 3212, 725-731. Pour l’interprétation des résultats, il peut par exemple être réalisé une comparaison avec les résultats obtenus, par la même technique, avec l’un des composés décrits dans la littérature comme apte à se lier à l’albumine sérique, ou avec l’un des exemples de tels motifs décrits ci-après dans la présente description, en particulier un motif hexadécanoyle, notamment inclus dans un groupement γ-(N- hexadécanoyl-Glu-OH). La présence dans le composé peptidique selon l’invention d’un motif apte à se lier à l’albumine sérique augmente notamment plus encore, et de manière très significative, la durée d’action du composé peptidique dans l’organisme, par un accroissement de sa demi-vie dans la circulation sanguine, son excrétion rénale étant en particulier retardée. Tout motif apte à se lier à l’albumine sérique peut être mis en œuvre selon l’invention. Des motifs particulièrement préférés sont les chaines lipidiques, et en particulier les acides gras, notamment l’acide hexadécanoïque. Ainsi, préférentiellement, dans la formule générale (II), Z représente un groupement hexadécanoyle (également nommé palmitoyle). Z peut autrement représenter par exemple un acide gras ω-carboxylate, tel que décrit dans la publication de Zarandi et al., 2006 précitée, l’Albu-tag tel que décrit dans la publication Dumelin et al., 2008 précitée ou un cyclopeptide tel que décrit dans les publications de Dennis et al., 2002 ou Angelini et al., 2012 précitées, etc. Dans le composé peptidique selon l’invention, un motif apte à se lier à l’albumine sérique est de préférence fixé, directement ou indirectement par l’intermédiaire d’un bras espaceur, sur un acide aminé situé dans la région N-terminale du composé peptidique, préférentiellement à l’extrémité N-terminale de ce dernier au sein du groupement R1 de formule générale (II) ci-dessus. Un motif apte à se lier à l’albumine sérique peut également, ou autrement, être fixé, directement ou indirectement par l’intermédiaire d’un bras espaceur, sur la chaine latérale d’un résidu d’acide aminé situé en position 1, en position 2 et/ou en position 3 du composé peptidique, c’est-à-dire de Xaa1, Xaa2 et/ou Xaa3, ou des résidus qui leur sont analogues, pour ceux de ces résidus qui ne représentent pas un résidu cystéine ou D-cystéine. Lorsque le motif apte à se lier à l’albumine sérique est fixé sur la chaine latérale d’un résidu d’acide aminé situé en position 1, 2 ou 3 du composé peptidique, le résidu concerné est de préférence un résidu lysine. Ainsi, dans des modes de réalisation particuliers de l’invention, Xaa1, Xaa2 et/ou Xaa3, s’il ne représente pas un résidu cystéine ou D-cystéine, peut être substitué, sur sa chaine latérale, par un groupement de formule générale (II), comprenant un motif apte à se lier à l’albumine sérique, tel que défini dans la présente description, en particulier lorsque, dans la formule (I), R1 ne représente pas un tel groupement de formule générale (II). Le composé peptidique selon l’invention peut en outre répondre à l’une ou plusieurs des caractéristiques décrites ci-après, mises en œuvre isolément ou en chacune de leurs combinaisons techniquement opérantes. Dans la formule générale (II), Y représente une liaison covalente ou un bras espaceur, préférentiellement un bras espaceur pharmacologiquement inactif. Ce bras espaceur est en outre de préférence du type hydrophile. Y représente de préférence un radical hydrocarboné linéaire, ramifié et/ou cyclique, saturé ou insaturé, éventuellement substitué, pouvant être interrompu par un ou plusieurs hétéroatomes, de préférence par au moins, ou uniquement, un ou plusieurs atomes d’oxygène, et/ou un ou plusieurs groupements comprenant au moins un hétéroatome, de préférence au moins, ou uniquement, un ou plusieurs groupements amine primaire -NH2, amine secondaire -NH- et/ou carbonyle -CO-. Y peut notamment représenter un tel radical hydrocarboné comprenant un ou plusieurs résidus d’acides aminés, en particulier un résidu D-lysine, L-lysine, D- arginine ou L-arginine, ou un enchainement de plusieurs résidus D-lysine et/ou L-lysine et/ou D-arginine et/ou L-arginine, toute combinaison de tels résidus entrant dans le cadre de l’invention. A titre d’exemple, Y peut comprendre tout enchaînement de six résidus formé de résidus D-lysine et/ou L-lysine et/ou D- arginine et/ou L-arginine. Une telle caractéristique augmente notamment avantageusement la solubilité du composé peptidique dans l’eau. Dans des modes de réalisation particuliers de l’invention, Y comprend, de manière plus générale, un groupement dit solubilisant, c’est-à-dire augmentant la solubilité du composé peptidique dans l’eau. Outre les enchaînements de résidus D-lysine et/ou L-lysine et/ou D-arginine et/ou L-arginine mentionnés ci- avant, des exemples de tels groupements solubilisants sont de petites séquences peptidiques, comprenant de 3 à 12 acides aminés, composées d’un ou d’une pluralité de résidus d’acides aminés hydrophiles tels que la L-sérine, la D-sérine, la L-thréonine, la D-thréonine, la glycine, l’acide L-glutamique, l’acide D-glutamique, l’acide L-aspartique, l’acide D-aspartique, ainsi que la D-lysine, la L-lysine, la D-arginine, et la L-arginine ci-dessus mentionnées. Y peut autrement, ou également, comprendre une molécule d’adressage facilitant le passage de la barrière hématoencéphalique, notamment un peptide d’adressage tel que les peptides Angiopep-2, ApoE, THR, TGN, THRre, DAngiopep-2 et DCDX, ainsi que leurs dérivés, décrits par exemple dans la publication de Dias-Perlas et al., Chemical Science, 2018, DOI: 10.1039/c8sc02415d. De tels groupements solubilisants et/ou molécules d’adressage sont alors de préférence contenus dans Y entre des groupements espaceurs que comprend alors également Y, tels que le groupement Ebes, de formule -CO-(CH2)2-CO- NH-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-NH-. Dans des modes de réalisation particulièrement préférés de l’invention, Y comporte, ou consiste en, un groupement γ-glutamyle. La présence d’un tel groupement entre le résidu d’acide aminé du composé peptidique et le motif apte à se lier à l’albumine sérique, augmente notamment avantageusement l’affinité de ce motif pour l’albumine sérique. Dans la formule (I), R1 peut ainsi comprendre, ou consister en, un groupe γ-(N- hexadécanoyl-L-glutamyle), également nommé γ-(N-hexadécanoyl-Glu-OH). R1 peut autrement comprendre, ou consister en, non limitativement, un groupement γ-(N-(13-carboxy-tridécanoyle-L-glutamyle), un groupement γ-(N- (15-carboxy-pentadécanoyle-L-glutamyle), un groupement γ-(N-(17-carboxy- heptadécanoyle-L-glutamyle), un groupement γ-(N-(19-carboxy- nonadécanoyle-L-glutamyle), un groupement γ-(N-(18-sulfo-octadécanoyle-L- glutamyle), un groupement γ-(N-(18-(5-tétrazolyl)-octadécanoyle-L-glutamyle), ou un groupement 2-(succinamido)-6-(4-(4-iodophényl)butanamido)hexanoate. Dans des modes de réalisation particuliers de l’invention, Y comporte un ou plusieurs, notamment de 1 à 24, groupements éthylène glycol. Une telle caractéristique favorise notamment la liaison à l’albumine sérique du motif apte à se lier à l’albumine sérique Z, notamment grâce à une plus grande liberté conformationnelle alors procurée au groupement R1. Y peut notamment comprendre, ou consister en, un groupement présentant la formule générale (IV), ou une succession de deux ou plus tels groupements : dans laquelle m1 est égal à 1 ou 2, m2 est égal à 0 ou 1, m3 est égal à 1 ou 2, n est un nombre entier compris entre 1 et 24, et Y1 représente un atome d’oxygène ou un groupe amide. Préférentiellement, le motif apte à se lier à l’albumine sérique Z est couplé à ce groupement de formule (IV) du côté de la fonction amine terminale de ce dernier, et le résidu d’acide aminé du composé peptidique lui est couplé au niveau de sa fonction carbonyle terminale opposée. Dans des modes de réalisation particuliers de l’invention, Y comprend, ou consiste en, un groupement présentant la formule générale (IV’), comprenant au moins un résidu D- et/ou L-lysine :
(VI’) dans laquelle m1 est égal à 1 ou 2, m2 est égal à 0 ou 1, m3 est égal à 1 ou 2, n est un nombre entier compris entre 1 et 24, Y1 représente un atome d’oxygène ou un groupe amide, p est un nombre entier compris entre 1 et 12, par exemple égal à 6, m4 est égal à 1 ou 2, m5 est égal à 0 ou 1, m6 est égal à 1 ou 2, n1 est un nombre entier compris entre 1 et 24, et Y2 représente un atome d’oxygène ou un groupe amide. Des exemples particuliers de groupements de formule (IV) ou (IV’) utilisables selon l’invention répondent aux formules respectives (IVa), (IVb), (IVc), (IVd) et (IV’a) :
(IV’a) dans lesquelles n représente un nombre entier compris entre 1 et 24, n1 représente un nombre entier compris entre 1 et 24, et p représente un nombre entier compris entre 1 et 12, par exemple égal à 6. Dans la formule générale (IVd), n peut par exemple être égal à 3. Préférentiellement, dans la formule générale (II), Y représente un groupement de formule (III) : dans laquelle représente la liaison au motif apte à se lier à l’albumine sérique Z, et R3 représente une liaison covalente au résidu d’acide aminé dudit composé peptidique, en particulier au groupement amine terminal de ce composé peptidique ( R3 représentant alors un motif ou R3 représente un groupement de formule (IV) ou (IV’) telles que définies ci- avant, par exemple un groupement de formule (IVa), (IVb), (IVc), (IVd) ou (IV’a), ce groupement étant couplé, directement ou indirectement, préférentiellement par sa fonction carbonyle terminale, au résidu d’acide aminé du composé peptidique selon l’invention. Le groupement Y peut par exemple être choisi parmi les groupements de formules (IIIa), (IIIb), (IIIc), (IIId), (IIIe) et (III’a) : (III’a) dans lesquelles n représente un nombre entier compris entre 1 et 24, n1 représente un nombre entier compris entre 1 et 24 et p représente un nombre entier compris entre 1 et 12, par exemple égal à 6. Préférentiellement, pour l’ensemble de ces groupements, le motif apte à se lier à l’albumine sérique Z, en particulier le motif hexadécanoyle, est lié de façon covalente à la fonction amine secondaire terminale dudit groupement, et le résidu d’acide aminé du composé peptidique, en particulier au niveau de l’extrémité N-terminale de ce dernier, est lié de façon covalente à la fonction carbonyle terminale opposée dudit groupement Y. R1 peut autrement représenter un atome d’hydrogène, un groupement acétyle, un groupement alcanoyle, notamment choisi parmi les alcanoyles linéaires, de préférence en C1-C6, par exemple en C2, ou un groupement benzoyle. Dans des modes de réalisation particuliers de l’invention, le composé peptidique est un analogue du composé de formule (I), dans lequel une liaison peptidique est remplacée par une liaison isostère non peptidique, par exemple par un groupe 1,2,3-triazole-1,4-disubstitué. Plusieurs des liaisons peptidiques du composé de formule (I) peuvent ainsi être remplacée par des liaisons isostères non peptidiques, identiques ou différentes les unes des autres. Dans la formule (I), lorsque Xaa7 représente un résidu arginine, la fonction amine primaire –NH2 de ce résidu peut être substituée par un radical alkyle en C1-C3, en particulier par un radical méthyle. Une telle substitution évite avantageusement la dégradation de la partie C-terminale du composé par les protéases de type trypsine. Dans des modes de réalisation particuliers de l’invention, dans la formule (I) : - Xaa1 et Xaa5 représentent tous deux simultanément soit un résidu cystéine, soit un résidu D-cystéine, les atomes de soufre desdits résidus cystéine ou desdits résidus D-cystéine étant liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure ou méthylène ; - ou Xaa2 et Xaa5 représentent tous deux simultanément soit un résidu cystéine, soit un résidu D-cystéine, les atomes de soufre desdits résidus cystéine ou desdits résidus D-cystéine étant liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène ; - ou Xaa3 et Xaa5 représentent tous deux simultanément soit un résidu cystéine, soit un résidu D-cystéine, les atomes de soufre desdits résidus cystéine ou desdits résidus D-cystéine étant liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont cis-but-2-énylène, m-xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène. Une combinaison particulièrement préférée dans le cadre de l’invention est celle où Xaa6 représente Leu et Xaa7 représente Arg, dont la fonction –NH2 est éventuellement substituée par un groupe méthyle. Le composé peptidique selon l’invention dérivé de KP10 peut présenter la séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Xaa3-Asn-Ser-Phe-Xaa5-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 3) dans laquelle Xaa3 et Xaa5 représentent chacun un résidu cystéine ou Xaa3 et Xaa5 représentent chacun un résidu D-cystéine, R1 est tel que défini ci-avant (modification N-terminale), R2 représente un atome d’hydrogène ou un radical alkyle en C1-C3, par exemple un radical méthyle (substitution optionnelle du groupement NH2 du résidu arginine par un radical alkyle en C1-C3), et les atomes de soufre de Xaa3 et de Xaa5 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p- xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, les ponts cis-but-2-énylène, m-xylylène, p- xylylène et 2,5-dichloro-p-xylylène étant particulièrement préférés, ou consister en un de ses analogues apte à lier le récepteur KISS1R, ou en un de ses sels ou un des sels dudit analogue, ce sel étant de préférence pharmaceutiquement acceptable. En particulier, le composé peptidique selon l’invention dérivé de KP10 peut présenter la séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 4) dans laquelle R1 représente un groupement acétyle, et les atomes de soufre des deux résidus cystéines en positions 3 et 7 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2- énylène, m-xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, ou consister en un de ses analogues apte à lier le récepteur KISS1R, ou en un de ses sels ou un des sels dudit analogue, ce sel étant de préférence pharmaceutiquement acceptable. Les composés peptidiques de séquence SEQ ID No : 4 dans lesquels l’agrafe reliant les atomes de soufre des résidus cystéine est un pont p-xylylène, m- xylylène, méthylène, cis-but-2-énylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, sont particulièrement préférés dans le cadre de l’invention. Autrement, le composé peptidique selon l’invention dérivé de KP10 peut présenter la séquence d’acides aminés : R1-Xaa1-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Xaa5-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 5) dans laquelle Xaa1 et Xaa5 représentent chacun un résidu cystéine ou Xaa1 et Xaa5 représentent chacun un résidu D-cystéine, R1 est tel que défini ci-avant (modification N-terminale), R2 représente un atome d’hydrogène ou un radical alkyle en C1-C3, par exemple un radical méthyle (substitution optionnelle du groupement NH2 du résidu arginine par un radical alkyle en C1-C3), et les atomes de soufre de Xaa1 et de Xaa5 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p- xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, les ponts disulfure et méthylène étant particulièrement préférés, ou consister en un de ses analogues apte à lier le récepteur KISS1R, ou en un de ses sels ou un des sels dudit analogue, ce sel étant de préférence pharmaceutiquement acceptable. En particulier, le composé peptidique selon l’invention dérivé de KP10 peut présenter la séquence d’acides aminés : R1-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 6) dans laquelle R1 représente un groupement acétyle, et les atomes de soufre des deux résidus cystéines en positions 1 et 7 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2- énylène, m-xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, ou consister en un de ses analogues apte à lier le récepteur KISS1R, ou en un de ses sels ou un des sels dudit analogue, ce sel étant de préférence pharmaceutiquement acceptable. Le composé peptidique de séquence SEQ ID No : 6 dans lequel l’agrafe reliant les atomes de soufre des résidus cystéine est un pont disulfure est particulièrement préféré dans le cadre de l’invention. Le composé peptidique selon l’invention dérivé de KP10 peut autrement présenter la séquence d’acides aminés : R1-D-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-D-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 7) dans laquelle R1 représente un groupement acétyle, et les atomes de soufre des deux résidus cystéines en positions 1 et 7 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2- énylène, m-xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, ou consister en un de ses analogues apte à lier le récepteur KISS1R, ou en un de ses sels ou un des sels dudit analogue, ce sel étant de préférence pharmaceutiquement acceptable. Les composés peptidiques de la séquence d’acides aminés SEQ ID No : 7 dans lesquels l’agrafe reliant les atomes de soufre des résidus D-cystéine est un pont disulfure ou un pont méthylène sont particulièrement préféré dans le cadre de l’invention. Le composé peptidique selon l’invention dérivé de KP10 peut autrement présenter la séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Xaa2-Trp-Asn-Ser-Phe-Xaa5-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 8) dans laquelle Xaa2 et Xaa5 représentent chacun un résidu cystéine ou Xaa2 et Xaa5 représentent chacun un résidu D-cystéine, R1 est tel que défini ci-avant (modification N-terminale), R2 représente un atome d’hydrogène ou un radical alkyle en C1-C3, par exemple un radical méthyle (substitution optionnelle du groupement NH2 du résidu arginine par un radical alkyle en C1-C3), et les atomes de soufre de Xaa2 et de Xaa5 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p- xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, ou consister en un de ses analogues apte à lier le récepteur KISS1R, ou en un de ses sels ou un des sels dudit analogue, ce sel étant de préférence pharmaceutiquement acceptable. En particulier, le composé peptidique selon l’invention dérivé de KP10 peut présenter la séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Cys-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 9) dans laquelle R1 représente un groupement acétyle, et les atomes de soufre des deux résidus cystéines en positions 2 et 7 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2- énylène, m-xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, ou consister en un de ses analogues apte à lier le récepteur KISS1R, ou en un de ses sels ou un des sels dudit analogue, ce sel étant de préférence pharmaceutiquement acceptable. Le composé peptidique de séquence SEQ ID No : 9 dans lequel l’agrafe reliant les atomes de soufre des résidus cystéine est un pont p-xylylène est particulièrement préféré dans le cadre de l’invention. Le composé peptidique selon l’invention dérivé de KP10 peut en particulier présenter la séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 10) dans laquelle R1 représente un groupement de formule générale (II) telle que définie ci-avant (modification N-terminale), R2 représente un groupement méthyle, et les atomes de soufre des deux résidus cystéine en positions 3 et 7 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2- énylène, m-xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, le pont p-xylylène étant particulièrement préféré, ou consister en un de ses analogues apte à lier le récepteur KISS1R, ou en un de ses sels ou un des sels dudit analogue, ce sel étant de préférence pharmaceutiquement acceptable. Préférentiellement, dans de tels modes réalisation, R1 est alors choisi parmi les groupements de formule générale (II) dans laquelle : - Z représente un groupement hexadécanoyle, - et/ou Y représente un groupement de formule (IIIe) ci-dessus ou un groupement de formule (IIIa) ci-dessus ou un groupement de formule (III’a) ci- dessus, n étant un nombre entier compris entre 1 et 24, de préférence compris entre 1 et 12, préférentiellement compris entre 1 et 6, préférentiellement encore compris entre 2 et 4, notamment égal à 2 ; n1 étant un nombre entier compris entre 1 et 24, de préférence compris entre 1 et 12, préférentiellement compris entre 1 et 6, préférentiellement encore compris entre 2 et 4, notamment égal à 2 ; et p étant un nombre entier compris entre 1 et 12, de préférence compris entre 3 et 8, notamment égal à 6. R1 peut notamment être choisi parmi les groupements de formules (Va), (Ve) et (V’a) : (V’a) Le composé peptidique selon l’invention peut être préparé par toute méthode classique en elle-même, notamment par synthèse chimique sur support solide, selon les techniques classiques de la synthèse peptidique, par exemple sur phase solide en stratégie Fmoc/tBu. Préférentiellement, la ou les modification(s) chimique(s) des résidus d’acides aminés du composé peptidique, notamment pour former l’agrafe entre les résidus cystéines ou entre les résidus D-cystéines, substituer les chaines latérales de résidus d’acides aminés, et/ou coupler le groupement R1 lorsque celui-ci n’est pas un atome d’hydrogène, sont alors réalisées sur ce même support solide. Une telle caractéristique simplifie avantageusement les étapes de synthèse ainsi que les étapes subséquentes de purification du composé peptidique. Le procédé de préparation du composé peptidique selon l’invention peut en outre comprendre une ou plusieurs étapes de purification du composé peptidique à l’issue des étapes de synthèse, cette ou ces étape(s) de purification pouvant être réalisées de toute manière classique en elle-même pour l’homme du métier, par exemple par chromatographie liquide haute performance (HPLC). Le composé peptidique selon l’invention trouve en particulier des applications dans le domaine vétérinaire, au sein des élevages, pour la maitrise de la reproduction, notamment, mais non limitativement, en vue de programmer la reproduction tout au long de l’année, par exemple chez les petits ruminants, tels que les ovins et caprins, pour la reprise de la cyclicité post-partum ou l’amélioration de la fertilité chez les bovins, pour la synchronisation des bandes de cochettes, pour avancer la puberté chez les taurillons, pour stimuler la sécrétion de testostérone chez les mâles, notamment chez les petits ruminants tels que les ovins et caprins, etc. Il peut également être utilisé pour l’amélioration de la fertilité, notamment l’induction de l’ovulation, chez les espèces sauvages en danger gardées en captivité dans le cadre d’une possible réintroduction en milieu naturel. Par ailleurs, il trouve également des applications dans le domaine de la thérapie humaine, en particulier pour réduire les problèmes d’infertilité, et notamment en clinique humaine pour le traitement de pathologies de la reproduction, en particulier dans le cadre de la mise en œuvre des techniques de procréation médicalement assistée. Ainsi, un autre aspect de la présente invention concerne l’utilisation d’un composé peptidique selon l’invention en tant que médicament, en particulier pour améliorer la fertilité chez un mammifère, notamment pour stimuler la reproduction, en particulier induire et/ou synchroniser l’ovulation chez un mammifère femelle, ou encore pour traiter la stérilité. Ce mammifère peut notamment être un animal d’élevage tel qu’un ovin, un caprin, un bovin, un porcin, etc., un animal de compagnie, tel qu’un chien ou un chat, un équin, etc., ou encore, par exemple un animal sauvage, tel qu’on en rencontre dans les zoos et les parcs animaliers, etc. ; autrement, ce mammifère peut être un être humain. Plus généralement, l’invention concerne l’utilisation d’un composé peptidique selon l’invention pour stimuler le récepteur KISS1R, en vue d’augmenter la sécrétion de GnRH, et par voie de conséquence pour stimuler la libération des hormones LH et/ou FSH chez un mammifère. Le composé peptidique selon l’invention peut notamment être utilisé dans le cadre du traitement d’états pathologiques résultant de faibles niveaux circulants de LH et FSH, par exemple d’états pathologiques résultant d’une stimulation hypophysaire insuffisante. Plus généralement, il peut être utilisé pour le traitement de pathologies liées à une activité déficitaire de l’axe reproducteur, plus particulièrement à une réduction de l’activité de l’axe hypothalamo- hypophyse-gonade, telles que l’aménorrhée d’origine hypothalamique ou les retards de puberté et toutes autres pathologies qui nécessitent une augmentation de la sécrétion de la GnRH et des gonadotrophines. On entend dans la présente description, par le terme « traitement », l'obtention d’un effet pharmacologique et physiologique souhaité. Le terme « traitement », inclut la prévention ou la prévention partielle d'un ou plusieurs des symptômes d’une pathologie et/ou la guérison partielle ou totale d’une pathologie et/ou la disparition totale ou partielle d’un ou plusieurs de ses symptômes. D’autres applications du composé peptidique selon l’invention sont notamment le traitement de certaines formes de cancer, sensibles aux hormones stéroïdiennes, le retardement du vieillissement par stimulation de la sécrétion de la GnRH, ou encore le traitement de toute autre pathologie associée aux fonctions du système à kisspeptine, par exemple le traitement du syndrome kystique folliculaire chez les mammifères femelles, notamment non humains, le traitement du syndrome de l’ovaire polycystique chez la femme, le rétablissement de la libido dans le cas d’une réduction de celle-ci ou encore le traitement de certaines désordres métaboliques qui impactent la reproduction, comme l’obésité induite par le diabète, etc. Le composé peptidique selon l’invention peut également être utilisé par exemple pour remédier à l’inhibition de la sécrétion de testostérone chez le mâle après un traitement chronique, notamment de tumeurs hormone-dépendantes telles que rencontrées dans les cancers de la prostate. Le composé peptidique selon l’invention peut être administré à tout sujet en ayant besoin. Ce sujet peut notamment être un mammifère, tel qu’un animal d’élevage ou de compagnie, ou un humain. L’administration du composé peptidique selon l’invention au sujet peut être réalisée par toute voie classique en elle-même, notamment par voie parentérale, par exemple par voie sous-cutanée, sous-durale, intraveineuse, intramusculaire, intrathécale, intrapéritonéale, intracérébrale, intra-artérielle ou intra-lésionnelle ; par voie intranasale ; par voie rectale ; par voie pulmonaire, par exemple par aérosol ou inhalation ; ou même par voie topique. Elle est préférentiellement réalisée par voie systémique, en particulier par voie parentérale, notamment par injection, en particulier intrapéritonéale, intramusculaire, intraveineuse, sous- cutanée ou intradermique, ou par voie orale. Le traitement peut par exemple consister en une unique injection du composé au sujet à traiter. Le composé peptidique selon l'invention est de préférence administré audit sujet dans une quantité thérapeutiquement efficace. Par "quantité thérapeutiquement efficace", on entend la quantité du composé peptidique qui, lorsqu'il est administré à un sujet, est suffisante pour assurer l’effet de traitement souhaité. La quantité thérapeutiquement efficace du composé peptidique selon l’invention dépend de plusieurs facteurs, tels que la maladie et sa gravité, l'âge, le poids, etc., du sujet à traiter, le composé particulier utilisé, la voie et la forme d'administration, etc. La quantité thérapeutiquement efficace du composé peptidique selon l'invention sera déterminée par le médecin ou le vétérinaire pour chaque cas individuel. A titre d’exemple, la dose du composé peptidique selon l’invention administrée au sujet traité peut être comprise entre 1 µg et 1 mg, notamment entre 1 µg et 250 µg, entre 10 et 250 µg ou encore entre 50 et 250 µg, en fonction du mammifère et de la masse moléculaire du composé. Par exemple, pour une brebis, la dose administrée peut être d’environ 60 µg. L’invention s’exprime également dans les termes d’un procédé d’amélioration de la fertilité chez un mammifère, notamment d’induction de l’ovulation chez un mammifère femelle, de traitement thérapeutique de pathologies liées à une réduction de l’activité de l’axe hypothalamo-hypophyse-gonade, de traitement de cancers sensibles aux hormones stéroïdiennes et/ou de retardement du vieillissement, chez un sujet en ayant besoin, ce procédé comprenant une étape d’administration audit sujet en ayant besoin d’une quantité thérapeutiquement efficace d’un composé peptidique selon l’invention. Ce procédé peut répondre à l’une ou plusieurs des caractéristiques décrites ci-avant en référence à l’utilisation du composé peptidique selon l’invention en tant que médicament. L’invention concerne également l’utilisation d’un composé peptidique selon l’invention pour la fabrication d’un médicament, notamment d’un médicament pour l’amélioration de la fertilité chez un mammifère, en particulier pour induire l’ovulation chez un mammifère femelle. Selon un autre aspect, la présente invention concerne une composition vétérinaire ou pharmaceutique, notamment pour améliorer la fertilité chez un mammifère, par exemple induire et/ou synchroniser l'œstrus et/ou l’ovulation chez un mammifère femelle. Cette composition vétérinaire ou pharmaceutique contient, en tant que principe actif, un composé peptidique selon l’invention, répondant à l’une ou plusieurs des caractéristiques ci-avant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable. On entend, par « pharmaceutiquement acceptable », tout véhicule utile pour la préparation d'une composition pharmaceutique ou vétérinaire et qui est généralement sûr, non toxique et ni biologiquement ni autrement indésirable pour le sujet à traiter, en particulier pour les mammifères et notamment les animaux d’élevage ou les humains. Le véhicule de la composition pharmaceutique selon l'invention peut aussi bien être solide que semi-solide ou liquide. Il peut s'agir d'un diluant, d'un adjuvant ou de tout autre véhicule classique en lui-même pour la constitution des compositions pharmaceutiques ou vétérinaires. Cette composition pharmaceutique ou vétérinaire peut se présenter sous toute forme galénique, notamment sous forme adaptée à une administration par voie parentérale, orale, intranasale, rectale, pulmonaire ou topique. Préférentiellement, elle se présente sous une forme convenant à une administration par voie parentérale, notamment par injection par voie intrapéritonéale, intramusculaire, sous-cutanée, intraveineuse ou intradermique, ou sous une forme administrable par voie orale. La composition pharmaceutique ou vétérinaire selon l'invention peut contenir un ou plusieurs excipients / additifs classiques en eux-mêmes pour la constitution des compositions pharmaceutiques ou vétérinaire, ainsi, éventuellement, qu’un ou plusieurs autres principes actifs, ce ou ces principe(s) actif(s) pouvant ou non agir de manière synergique avec le composé peptidique selon l’invention. La composition pharmaceutique ou vétérinaire selon l’invention peut être utilisée pour les applications thérapeutiques citées ci-avant, notamment pour améliorer la fertilité chez un mammifère, en particulier un animal d’élevage ou de compagnie ou un humain. Les caractéristiques et avantages de l’invention apparaîtront plus clairement à la lumière des exemples de mise en œuvre ci-après, fournis à simple titre illustratif et nullement limitatifs de l’invention, avec l’appui des figures 1 à 3, dans lesquelles : La figure 1 représente des schémas réactionnels généraux pour l’étape de cyclisation d’un procédé de préparation de composés peptidiques selon l’invention, cette étape étant réalisée sur support solide (voie A) ou en solution (voies B et C). La figure 2 représente un graphe montrant la concentration de LH mesurée par immunoabsorption par enzyme liée (ELISA) dans des échantillons sanguins prélevés chez des souris prétraitées pour sécréter des taux bas et constants de LH, en fonction du temps après l’injection d’un composé peptidique conforme à l’invention C1 à différentes doses (1, 3 ou 10 nmol) ou du peptide murin KP10 à la dose de 5 nmol. La figure 3 représente un graphe montrant la concentration de LH mesurée par immunoabsorption par enzyme liée (ELISA) dans des échantillons sanguins prélevés chez des souris prétraitées pour sécréter des taux bas et constants de LH, en fonction du temps après l’injection d’un composé peptidique conforme à l’invention C2 à différentes doses (1, 3 ou 10 nmol) ou du peptide murin KP10 à la dose de 5 nmol. Exemple 1 – Synthèse de composés peptidiques 1.1/ Mode opératoire Mode opératoire général Les synthèses peptidiques sont effectuées sur phase solide en stratégie Fmoc/tBu, à une échelle de 0,025 mmol. Le support solide utilisé est une résine ChemMatrix® fonctionnalisée par un bras « Rink amide ». L’élongation automatisée des peptides est effectuée à l’aide du synthétiseur Prelude® de Protein Technologies. Les couplages sont réalisés en utilisant 10 équivalents d’acide aminé protégé, 9,5 équivalents d’HCTU (hexafluorophosphate de 2-(6-chloro-1H-benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3- tetraméthylaminium) et 20 équivalents de di-isopropyléthylamine dans de la N- méthyl-2-pyrrolidone (NMP) pendant 30 min. Chaque étape de couplage est suivie d’une étape d’acétylation réalisée en utilisant 60 équivalents d’anhydride acétique, 15,5 équivalents de di-isopropyléthylamine et 1,8 équivalents d’hydrate d’HOBt (1-hydroxybenzotriaole) pendant 7 min. La déprotection du groupement Fmoc est réalisée par trois traitements successifs à l’aide d’une solution de 20 % de pipéridine dans de la NMP pendant 3 min. Les groupements protecteurs des chaines latérales utilisés sont Arg(Pbf), Arg(Me,Pbf), Asn(Trt), Cys(Acm) ou Cys(Trt), D-Cys(Acm), Ser(tBu), Trp(Boc), Tyr(tBu). Les groupements acétyles N-terminaux sont incorporés en couplant l’acide acétique en suivant un protocole identique à celui utilisé pour les acides aminés protégés. La macrocyclisation des peptides au moyen de l’agrafe selon l’invention est réalisée sur support solide (voie A) ou en solution (voies B et C), selon les schémas généraux montrés sur la figure 1. Le peptide macrocyclique brut est finalement purifié par chromatographie liquide haute performance à phase inverse (RP-HPLC) (colonne Nucleosil® C18300 Å, 5 µm, 10x250 mm, 3mL/min, éluant A = H2O + 0,1 % TFA, éluant B = CH3CN + 0,1 % TFA). Le peptide macrocyclique pur est analysé par HPLC (colonne Chromolith® HighResolution RP-18, 4,6x100 mm, 3mL/min) et spectrométrie de masse (instrument : Agilent 6120, mode ESI+). Les valeurs théoriques et expérimentales données de m/z correspondent à l’ion monoisotopique dans le cas des pics [M+H]+, et à une moyenne du massif isotopique dans le cas des pics [M+2H]2+. Déprotection des groupements S-acétamidométhyle (Acm) Selon le mode de synthèse général mis en œuvre, AgBF4 (195 mg, 1 mmol, 40 éq.) sont dissous dans 10 ml d’un mélange NMP/eau (9 :1) sous atmosphère d’argon. La solution est ensuite aspirée dans une seringue munie d’un fritté en polypropylène, et contenant la résine portant le peptide dont les résidus cystéine ou D-cystéine sont protégés par des groupements Acm (0,025 mmol). Le milieu réactionnel est agité pendant 2 h à température ambiante. La résine est ensuite lavée successivement avec de la NMP (5 x 5 mL), de la pyridine (5 x 3 mL), une solution de diéthyldithiocarbamate de sodium à 0,5 M dans la NMP (5 x 5 mL), du chlorure de pyridinium 1 M dans un mélange CH2Cl2/MeOH 95:5 (5 x 5 mL) puis du CH2Cl2 (5 x 5 mL). Macrocyclisation sur support solide (voie A) Selon le mode de synthèse général mis en œuvre, dans le cas des agrafes de type bis-thioéther, 2 équivalents d’un dérivé di-halogéné de l’agrafe et 2,5 équivalents de di-isopropyléthylamine sont dissouts dans 1,5 mL de DMF sous atmosphère d’argon. La solution est ensuite aspirée dans une seringue munie d’un fritté en polypropylène, et contenant la résine portant le peptide dont les résidus cystéine ou D-cystéine sont déprotégés (0,005 mmol). Le milieu réactionnel est agité pendant 5 h à température ambiante. La résine est ensuite lavée successivement avec de la NMP (5 x 3 mL) puis du CH2Cl2 (5 x 3 mL). Dans le cas du pont méthylène, le dérivé di-halogéné de l’agrafe est le diiodométhane ; dans le cas du pont cis-but-2-énylène le dérivé di-halogéné de l’agrafe est le cis-1,4-dibromo-but-2-ène et dans le cas des ponts m-xylylène, p- xylylène et 2,5-dichloro-p-xylylène, le dérivé di-halogéné est le composé α,α’- dibromo-xylène correspondant. Le peptide macrocyclique brut est finalement libéré de la résine avec une solution de TFA/H2O/iPr3SiH/phénol, 87,5/5/2,5/5 pendant 2 h. Le peptide est précipité dans Et2O froid, centrifugé puis lavé 3 fois avec Et2O. Macrocyclisation par formation d’un pont disulfure en solution (voie B) Selon le mode de synthèse général mis en œuvre, dans le cas des agrafes de type pont disulfure, le peptide dont les résidus cystéine ou D-cystéine sont déprotégés (0,005 mmol) est libéré de la résine avec une solution de TFA/H2O/iPr3SiH/phénol, 87,5/5/2,5/5 pendant 2 h. Le peptide est précipité dans Et2O froid, centrifugé puis lavé 3 fois avec Et2O. Le peptide brut est dissout dans 5 mL d’un mélange DMSO/eau 1:3 et agité à température ambiante pendant 18 h puis lyophilisé. Macrocyclisation par formation d’une agrafe p-xylylène en solution (voie C) Selon le mode de synthèse général mis en œuvre, dans le cas des agrafes de type p-xylylène, la réaction peut être alternativement être effectuée en solution. Le peptide dont les résidus cystéine sont protégés par des groupements S-trityle (0,005 mmol) est libéré de la résine avec une solution de TFA/H2O/iPr3SiH/phénol, 87,5/5/2,5/5 pendant 2 h. Le peptide est précipité dans Et2O froid, centrifugé puis lavé 3 fois avec Et2O. Le peptide brut est dissout dans 2,4 mL de NMP puis une solution de 1,58 mg (0,006 mmol, 1,2 équivalents) de α,α-dibromo-p-xylène et 26 µL (0,15 mmol, 30 équivalents) de di- isopropyléthylamine dans 100 µL de NMP est ajoutée. La réaction est agitée pendant 30 min à température ambiante, puis 2,87 mg (0,01 mmol, 2 équivalents) de chlorhydrate de tris-carboxyéthylphosphine (TCEP.HCl) dans 100 µL d’eau sont ajoutés. Après 30 min d’agitation supplémentaire, le milieu est dilué avec 25 mL d’un mélange H2O/MeCN/CF3COOH 7:3:0,01. 1.2/ Composés peptidiques selon l’invention 1.2.1/ Composés 10c, 10f, 10g, 10i, 10j Les composés peptidiques de cette famille répondent à la séquence d’acides aminés: Ac-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 4) les deux résidus cystéine étant liés l’un à l’autre par une agrafe conforme à l’invention. Dans cette séquence, comme dans toutes les suivantes, Ac désigne un groupement acétyle (modification N-terminale). Composé 10g Le composé peptidique 10g, de formule chimique :
est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 13,5 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,39 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1425,5 ([M+H]+ calculé pour C66H89N16O16S2 = 1425,6). Composé 10f Le composé peptidique 10f, de formule chimique : est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 12,8 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,37 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 713.3 ([M+2H]2+ calculée pour C66H89N16O16S2 = 713,8). Composé 10c Le composé peptidique 10c, de formule chimique : est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 17,0 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,48 min (gradient : 5-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 668,6 ([M+2H]2+ calculé pour C59H84N16O16S2 = 668,8). Composé 10i Le composé peptidique 10i, de formule chimique : est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 15,9 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,73 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1492,6 ([M+H]+ calculé pour C66H87Cl2N16O16S2 = 1493,5). Composé 10j Le composé peptidique 10j, de formule chimique : est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 15,1 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,77 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1375,5 ([M+H]+ calculé pour C62H87N16O16S2 = 1375,5). 1.2.2/ Composé 4b Ce composé peptidique répond à la séquence d’acides aminés: Ac-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 6) les deux résidus cystéine étant liés l’un à l’autre par une agrafe conforme à l’invention, et présente la formule chimique : Il est préparé selon la voie B décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 15,2 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,95 min (gradient : 5-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1344,6 ([M+H]+ calculé pour C60H82N17O15S2 = 1344,6). 1.2.3/ Composés 7b, 7c Les composés peptidiques de cette famille répondent à la séquence d’acides aminés: Ac-D-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-D-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 7) les deux résidus D-cystéine étant liés l’un à l’autre par une agrafe conforme à l’invention. Composé 7c Le composé peptidique 7c, de formule chimique : est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 15,7 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 4,18 min (gradient : 5-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1358,4 ([M+H]+ calculé pour C61H84N17O15S2 = 1358,6). Composé 7b Le composé peptidique 7b, de formule chimique : est préparé selon la voie B décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 15,5 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,80 min (gradient : 5-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1344,4 ([M+H]+ calculé pour C60H82N17O15S2 = 1344,6). 1.2.4/ Composé 8g Ce composé peptidique répond à la séquence d’acides aminés : Ac-Tyr-Cys-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 9) les deux résidus cystéine étant liés l’un à l’autre par une agrafe conforme à l’invention, et à la formule chimique :
Il est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 12,8 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,12 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1497,5 ([M+H]+ calculé pour C73H93N16O15S2 = 1497,6). 1.3/ Composés peptidiques comparatifs non conformes à l’invention 1.3.1/ Composés 10k, 10l, 10m Les composés peptidiques dérivés de KP10 de cette famille répondent à la séquence d’acides aminés: Ac-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 11) les deux résidus cystéine étant liés l’un à l’autre par une agrafe non conforme à l’invention (2,5-diméthoxy-p-xylylène, éthylène ou 2,5-diméthyl-p-xylylène). Composé 10k Le composé peptidique 10k, dont l’agrafe est une groupement 2,5-diméthoxy-p- xylylène, de formule chimique :
est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 16,2 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,39 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1484,8 ([M+H]+ calculé pour C68H93N16O18S2 = 1485,6). Composé 10l Le composé peptidique 10l, dont l’agrafe est une groupement éthylène, de formule chimique : est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 10,2 min (gradient : 30- 80 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 2,49 min (gradient : 30-60 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1349,4 ([M+H]+ calculé pour C60H85N16O16S2 = 1349,6). Composé 10m Le composé peptidique 10m, dont l’agrafe est une groupement 2,5-diméthyl-p- xylylène, de formule chimique : est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 15,2 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,50 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1452,8 ([M+H]+ calculé pour C68H93N16O16S2 = 1453,6). 1.3.2/ Composé 4e Ce composé peptidique dérivé de KP10 répond à la séquence d’acides aminés: Ac-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 12) les deux résidus cystéine étant liés l’un à l’autre par une agrafe o-xylylène non conforme à l’invention, et à la formule chimique :
est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 13,6 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,19 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1448,5 ([M+H]+ calculé pour C68H90N17O15S2 = 1448,5). 1.3.3/ Composé 5b Ce composé peptidique dérivé de KP10 répond à la séquence d’acides aminés : Ac-D-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 13) les résidus cystéine et D-cystéine étant liés l’un à l’autre par un pont disulfure, et à la formule chimique :
Il est préparé selon la voie B décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 16,2 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 4,08 min (gradient : 5-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1344,5 ([M+H]+ calculé pour C60H82N17O15S2 = 1344,6). 1.3.4/ Composé 6b Ce composé peptidique dérivé de KP10 répond à la séquence d’acides aminés: Ac-Cys-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-D-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 14) les résidus cystéine et D-cystéine étant liés l’un à l’autre par un pont disulfure, et à la formule chimique : Il est préparé selon la voie B décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 16,2 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,96 min (gradient : 5-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1344,6 ([M+H]+ calculé pour C60H82N17O15S2 = 1344,5). 1.3.5/ Composé 9g Ce composé peptidique dérivé de KP10 répond à la séquence d’acides aminés : Ac-Tyr-D-Cys-Trp-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 15) les résidus cystéine et D-cystéine étant liés l’un à l’autre par un pont p-xylylène, et à la formule chimique : Il est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 11,6 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 2,99 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1497,5 ([M+H]+ calculé pour C73H93N16O15S2 = 1497,6). 1.3.6/ Composé 11g Ce composé peptidique dérivé de KP10 répond à la séquence d’acides aminés : Ac-Tyr-Asn-D-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 16) les résidus cystéine et D-cystéine étant liés l’un à l’autre par un pont p-xylylène, et à la formule chimique : Il est préparé selon la voie A décrite ci-avant, en suivant le mode opératoire général. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 13,15 min (gradient : 20- 50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,22 min (gradient : 20-50 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1425,4 ([M+H]+ calculé pour C66H89N16O16S2 = 1425,6). Exemple 2 – Test in vitro de mobilisation de calcium extracellulaire Les composés peptidiques préparés dans l’exemple 1 sont soumis à un test in vitro de mobilisation du calcium extracellulaire, selon le protocole suivant. La lignée cellulaire HEK293A (ATCC, American Type Culture Collection – CRL- 1573) a été transfectée de façon stable avec le récepteur humain KISS1R (ARNm du récepteur KISS1 (KISS1R), Homo sapiens, numéro d’accession GenBank : NM_032551.5). Pour la transfection, il a été utilisé le vecteur pcDNA3.1 (Invitrogen), dans lequel la séquence du KISS1R humain a été insérée avec une étiquette hémagglutinine (HA) en fusion à son extrémité 5’. La transfection et la sélection des clones ont été effectuées comme décrit en littérature (Mancini et al. 2009, British Journal of Pharmacology, 158(1): 382- 391). Le récepteur KISS1R est couplé aux protéines Gq et son activation produit une augmentation de la concentration intracellulaire du calcium. Pour vérifier l’activité agoniste et mesurer la concentration médiane d’activation du récepteur KISS1R (EC50) des composés peptidiques testés, le protocole suivant a été mis en œuvre. Les cellules HEK293A exprimant le récepteur KISS1R humain ont été ensemencées dans une plaque 96 puits (µclear® black plate) à la concentration de 40000 cellules/puits, et mises dans un incubateur à 37 °C. Après 48 h, le milieu (DMEM avec GlutaMAX® et sans pyruvate, 10% sérum fœtal de veau, 1% pénicilline, 1% streptomycine, 200 μg/mL Généticine, et tampon HEPES pH 7,4 (25 mM)) a été changé et les cellules ont été incubées avec le colorant fluorescent Fluo-4NW, suivant les indications du fabricant (Molecular Probes). Pour éviter l’adhésion du composé peptidique au plastique les composés à tester ont été prédilués dans une plaque dite « non-liante » (Corning), à une concentration 20 fois supérieure à la concentration finale désirée (solution 20X). Après avoir mesuré la fluorescence basale, 5 µl de la solution 20X contenant le composé à tester ont été rajoutés dans chaque puits (contenant 95 µl) de façon à obtenir la concentration souhaitée. Les variations de fluorescence ont été enregistrées toutes les 7 s pendant 5-7 min avec un lecteur de plaque Polarstar® Optima (BMG Labtech). Des courbes activités-concentrations ont été générées en utilisant le logiciel GraphPad Prism 5, et l’EC50 de chaque composé peptidique a été calculée en ajustant la courbe à une sigmoïde. A titre comparatif, le peptide KP10 murin a également été testé. Les résultats obtenus sont indiqués dans le tableau 1 ci-après. Tableau 1 L’ensemble des composés conformes à l’invention présentent des EC50 largement inférieures à celles des composés comparatifs non conformes à l’invention, ce qui démontre clairement qu’ils présentent une capacité d’activation du récepteur KISS1R particulièrement forte. En particulier, le composé 10g présente une activité même plus puissante que celle du KP10. Exemple 3 – Synthèse de composés peptidiques conformes à l’invention à motif apte à lier l’albumine sérique Les deux composés peptidiques conformes à l’invention suivants sont préparés. Composé C1 Le composé peptidique C1 dérivé de KP10 présente la séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg(Me)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 17) dans laquelle les atomes de soufre des deux résidus cystéine sont liés par un pont p-xylylène, Me représente, de manière conventionnelle en soi, un groupe méthyle substituant le groupement -NH2 de la chaine latérale du résidu arginine, et R1 représente un groupement comprenant un motif hexadécanoyle, apte à lier l’albumine sérique, couplé par l’intermédiaire d’un bras espaceur γ-glutamyle à l’extrémité N-terminale du composé peptidique, R1 présentant ainsi un groupement gamma-(N-hexadécanoyl-Glu-OH) (modification N-terminale), de formule (Ve) : Le composé C1 présente ainsi la formule chimique :
Ce composé peptidique est préparé selon la voie A décrite dans l’exemple 1, en suivant le mode opératoire général. Préalablement à la déprotection des groupements Acm et la macrocyclisation sur support solide en utilisant l’α,α’- dibromo-p-xylène pour former le pont p-xylylène, le résidu γ-glutamyle est introduit par couplage de l’acide aminé protégé Fmoc-Glu-OtBu selon le mode opératoire général, suivi du couplage de l’acide palmitique selon un protocole légèrement modifié pour des raisons de solubilité : cette réaction est réalisée dans un mélange 1:3 de NMP et de dichlorométhane plutôt que dans la NMP, pendant 2 h plutôt que 30 min. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 14,6 min (gradient : 50-90 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,94 min (gradient : 50-90 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1764,8 ([M+H]+ calculé pour C86H126N17O19S2 = 1764,9.). Ce composé, testé selon le protocole décrit à l’exemple 2, présente un EC50 de 45 nM. Composé C2 Le composé peptidique C2 dérivé de KP10 présente la séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg(Me)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 18) dans laquelle les atomes de soufre des deux résidus cystéine sont liés par un pont p-xylylène et R1 représente un motif hexadécanoyle, apte à lier l’albumine sérique, couplé par l’intermédiaire d’un bras espaceur à groupement γ-glutamyle et groupements éthylène glycol à l’extrémité N-terminale du composé peptidique (modification N-terminale), R1 présentant la formule (Va) : Le composé C2 présente ainsi la formule chimique : Ce composé peptidique est préparé selon la voie A décrite dans l’exemple 1, en suivant le mode opératoire général. Préalablement à la déprotection des groupements Acm et la macrocyclisation sur support solide en utilisant l’α,α’- dibromo-p-xylène pour former le pont p-xylylène, un bras espaceur Ebes, puis un résidu γ-glutamyle sont introduits par les couplages successifs du dérivé Fmoc-Ebes-OH (acide N-[8-(9-fluorenylméthyloxycarbonyl)amino-3,6- dioxaoctyl]succinamique) puis de l’acide aminé protégé Fmoc-Glu-OtBu selon le mode opératoire général, suivi du couplage de l’acide palmitique selon un protocole légèrement modifié pour assurer sa solubilité : cette réaction est réalisée dans un mélange 1:3 de NMP et de dichlorométhane plutôt que dans la NMP, pendant 2 h plutôt que 30 min. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 11,6 min (gradient : 50-90 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 20 min) ; HPLC analytique : tR = 3,71 min (gradient : 50-90 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 998.7 ([M+2H]2+ calculé pour C96H145N19O23S2 = 998.4.). Ce composé, testé selon le protocole décrit à l’exemple 2, présent un EC50 de 15 nM. Exemple 4 – Essais chez la souris Toutes les expériences ont été réalisées sur des souris femelles de la souche C57BL/6 âgées de 9 semaines en accord avec la législation européenne (directive 2010/63/UE) et française (décret n° 2013–118) sur l’utilisation des animaux pour la recherche. Les souris étaient hébergées à 3-4 par cage dans un environnement avec lumière contrôlée (12 h de lumière et 12 h d’obscurité) et avec accès ad libitum à la nourriture et à l’eau. Les souris ont été ovariectomisées en suivant une procédure standard et implantées avec une capsule contenant une quantité d’œstradiol suffisante pour induire un niveau plasmatique de 4-7 pg/mL nécessaire pour maintenir un rétrocontrôle négatif sur la sécrétion de l’hormone lutéinisante LH (Quennell et al., 2011, Endocrinology 152(4):1541-50). Ceci maintient des taux bas et constants de LH permettant de voir facilement une stimulation de sa sécrétion. La chirurgie a été réalisée sous anesthésie induite par une solution de kétamine (80 mg/kg) et médétomidine (1 mg/kg) diluée dans de la solution physiologique stérile (0,25 mL/100 g de poids). Au début de la chirurgie 0,05 mg/mL de buprénorphine (1 µL/gramme de poids) a été injectée en sous-cutané et à la fin de la chirurgie les souris ont été injectées avec de l’atipamézole (Antisedan® 0,015 mL/100 gramme de poids). Les souris ont été injectées par voie intrapéritonéale avec les composés peptidiques conformes à l’invention C1 et C2 à trois différentes doses : 1, 3 ou 10 nmol (n=3 per dose), ainsi qu’avec le peptide murin KP10 à la dose de 5 nmol à titre de comparatif, et des échantillons de sang (4 µL) ont été collectés de la pointe de la queue toutes les 20 min à partir de 40 min avant l’injection des composés et jusqu’à 10 h après. Les échantillons collectés étaient immédiatement mélangés avec du tampon phosphate saline et congelés en carboglace. La concentration de la LH, utilisée comme biomarqueur de l’activation de l’axe gonadotrope, a été réalisée par adaptation d’une méthode immuno-enzymatique ELISA comme décrit dans la publication de Steyn et al., 2013, Endocrinology 154(12):4939-45. Un anticorps monoclonal dirigé contre la LH bovine (LHβ, 518 B7, 1:1.000, de l’University of California Davis) a été utilisé pour capturer la LH et un anticorps polyclonal de lapin dirigé contre la LH (AFP240580Rb, AF Parlow) a été utilisé pour la détection. Le standard était le NIDDK souris LH (kit AFP5306A mouse RIA de AF Parlow). La limite de détection était de 0,2 ng/mL et le coefficient de variation était en moyenne 11%. Les plaques 96 puits ont été incubées avec l’anticorps LHβ 518 B7 pour une nuit à 4°C, l’anticorps a été enlevé et 200 µL de tampon bloquant (5% de lait écrémé en poudre) ont été rajoutés dans chaque puits pendant 2 h à température ambiante. Ensuite les échantillons ont été déposés dans chaque puits en duplicate, laissés à température ambiante pendant 2 h, puis l’anticorps AFP240580Rb a été rajouté dans chaque puits et laissé incuber pendant 90 min. Un anticorps secondaire polyclonal couplé à la péroxydase de raifort a ensuite été rajouté, le mélange a été incubé pendant 90 min, avant révélation avec le substrat OPD (o-phénylènediamine, 100 µL) dilué dans du tampon citrate contenant de l’H2O2 (6 µL). Après 30 min d’incubation la réaction a été bloquée avec du HCl 3 M (50 µL) et la plaque lue à 490 et 650 nm. Des courbes de l’évolution temporelle de la concentration de la LH ont été générées en utilisant le logiciel GraphPad Prism 5. Ces courbes sont montrées sur la figure 2 pour le composé C1, aux 3 doses testées, et sur la figure 3 pour le composé C2, également aux 3 doses testées. On observe clairement sur ces figures, pour chacun des deux composés, un fort effet sur la sécrétion de la LH, cet effet augmentant en fonction de l’augmentation de la dose de composé. Aux concentrations de 3 et 10 nmol, l’augmentation de la LH induite par l’un comme l’autre des composés selon l’invention est encore présente 10 h après l’injection. Ces résultats montrent clairement la capacité des composés C1 et C2 conformes à l’invention à stimuler l’axe hypothalamo- hypophysaire sur une longue durée. En comparaison, l’action du peptide murin KP10 s’exerce sur une durée bien moindre. Exemple 5 – Composé peptidique conforme à l’invention à motif apte à lier l’albumine sérique Le composé peptidique C3 dérivé de KP10 présente la séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg(Me)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 19) dans laquelle les atomes de soufre des deux résidus cystéine sont liés par un pont p-xylylène et R1 représente un motif hexadécanoyle, apte à lier l’albumine sérique, couplé par l’intermédiaire d’un bras espaceur à groupement γ- glutamyle, résidus lysine et groupements éthylène glycol à l’extrémité N- terminale du composé peptidique (modification N-terminale), R1 présentant la formule (V’a) : Le composé C3 conforme à l’invention présente ainsi la formule chimique :
Ce composé peptidique est préparé selon la voie C décrite ci avant, en suivant le mode opératoire général, selon lequel les cystéines sont introduites protégées par un groupement trityle, et la macrocyclisation est effectuée en solution après libération du peptide de la résine et déprotection, par réaction avec le α,α- dibromo-p-xylène. Préalablement à l’étape de libération de la résine, un groupement espaceur Ebes, 6 résidus lysines, un second groupement espaceur Ebes, puis un résidu γ-glutamyle sont introduits par les couplages successifs du dérivé Fmoc-Ebes-OH puis Fmoc-Lys(Boc)-OH (répété six fois), puis le dérivé Fmoc Ebes-OH, puis l’acide aminé protégé Fmoc-Glu-OtBu, selon le mode opératoire général, suivi du couplage de l’acide palmitique selon un protocole légèrement modifié pour assurer sa solubilité : cette réaction est réalisée dans un mélange 1:3 de NMP et de dichlorométhane plutôt que dans la NMP, pendant 2 h plutôt que 30 min. Purification par HPLC semi-préparative : tR = 18,6 min (gradient : 40-60 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 30 min) ; HPLC analytique : tR = 2,52 min (gradient : 40-60 % MeCN/H2O + 0,1 % TFA en 5 min) ; détection UV (λ= 214 et 280 nm) ; MS : m/z observé = 1498,0 ([M+2H]2+ calculé pour C142H235N33O33S2 = 1498.4). Ce composé, testé selon le protocole décrit à l’exemple 2 ci-avant, présente un EC50 de 1,2 nM. Il présente une solubilité dans l’eau améliorée par rapport aux composés C1 et C2 (il est en particulier soluble dans l’eau à une concentration aussi élevée que 10 mg/ml, soit 2,64 nM), et de bonnes performances en termes de capacité de stimulation de l’axe hypothalamo-hypophysaire sur une longue durée.

Claims

REVENDICATIONS 1. Composé peptidique agoniste du récepteur KISS1R, caractérisé en ce qu’il est choisi parmi : - un composé de formule (I) : R1-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Asn-Xaa4-Phe-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-NH2 (I) dans laquelle Xaa5 et un des résidus Xaa1, Xaa2 ou Xaa3, représentent tous deux simultanément soit un résidu cystéine, soit un résidu D-cystéine, les atomes de soufre desdits résidus cystéine ou desdits résidus D-cystéine étant liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m- xylylène, p-xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène, lorsqu’ils ne représentent pas ledit résidu cystéine ou D-cystéine : Xaa1 représente un résidu tyrosine, D-tyrosine ou lysine, Xaa2 est nul ou représente un résidu asparagine ou lysine et Xaa3 représente un résidu tryptophane, lysine, proline ou hydroxyproline, Xaa4 représente un résidu sérine ou thréonine, Xaa6 représente un résidu leucine ou un résidu α-amino acyle aliphatique analogue, Xaa7 représente un résidu arginine, dont la fonction –NH2 est le cas échéant substituée par un radical alkyle en C1-C3, ou un résidu α-amino acyle chargé positivement analogue, Xaa8 représente un résidu tyrosine, phénylalanine, tryptophane ou un résidu α- amino acyle de type aryl alanine analogue, Asn représente un résidu asparagine, Phe représente un résidu phénylalanine, R1 représente un atome d’hydrogène, un groupement acétyle, un groupement alcanoyle, un groupement benzoyle ou un groupement de formule générale (II) : dans laquelle Y représente une liaison covalente ou un bras espaceur et Z représente un motif apte à se lier à l’albumine sérique, - un analogue dudit composé de formule (I) apte à lier le récepteur KISS1R, - ou un de leurs sels.
2. Composé peptidique selon la revendication 1, dans lequel, dans la formule générale (II), Y représente un radical hydrocarboné linéaire, ramifié et/ou cyclique, saturé ou insaturé, éventuellement substitué, interrompu par un ou plusieurs hétéroatomes et/ou un ou plusieurs groupements comprenant au moins un hétéroatome.
3. Composé peptidique selon la revendication 1 ou 2, dans lequel Y comporte un groupement γ-glutamyle.
4. Composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel, dans la formule générale (II), Y comporte un ou plusieurs groupements éthylène glycol.
5. Composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, dans lequel, dans la formule générale (II), Y représente un groupement de formule (III) : dans laquelle R3 représente une liaison covalente au résidu d’acide aminé dudit composé peptidique ou un groupement de formule (IV) : dans laquelle m1 est égal à 1 ou 2, m2 est égal à 0 ou 1, m3 est égal à 1 ou 2, n est un nombre entier compris entre 1 et 24 et Y1 représente un atome d’oxygène ou un groupe amide.
6. Composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel, dans la formule générale (II), Z représente un groupement hexadécanoyle.
7. Composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, dans lequel, dans la formule (I), lorsque R1 ne représente pas un groupement de formule générale (II), Xaa1, Xaa2 et/ou Xaa3, s’il ne représente pas un résidu cystéine ou D-cystéine, est substitué sur sa chaine latérale par un groupement de formule générale (II) tel que défini dans l’une des revendications 1 à 6.
8. Composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, de séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Xaa3-Asn-Ser-Phe-Xaa5-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 3) dans laquelle Xaa3 et Xaa5 représentent chacun un résidu cystéine ou Xaa3 et Xaa5 représentent chacun un résidu D-cystéine, R1 est tel que défini dans l’une des revendications 1 à 6, R2 représente un atome d’hydrogène ou un radical alkyle en C1-C3, et les atomes de soufre de Xaa3 et de Xaa5 sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p- xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène.
9. Composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, de séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 4) dans laquelle R1 représente un groupement acétyle, et les atomes de soufre des deux résidus cystéine sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p- xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène.
10. Composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, de séquence d’acides aminés : R1-Tyr-Asn-Cys-Asn-Ser-Phe-Cys-Leu-Arg(R2)-Tyr-NH2 (SEQ ID No : 10) dans laquelle R1 représente un groupement de formule générale (II) tel que défini dans l’une des revendications 1 à 6, R2 représente un groupement méthyle, et les atomes de soufre des deux résidus cystéine sont liés de façon covalente l’un à l’autre par un pont disulfure, méthylène, cis-but-2-énylène, m-xylylène, p- xylylène ou 2,5-dichloro-p-xylylène.
11. Composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 10, pour son utilisation en tant que médicament.
12. Composé peptidique pour son utilisation selon la revendication 11, pour l’amélioration de la fertilité chez un mammifère.
13. Composé peptidique pour son utilisation selon la revendication 11, pour le traitement de pathologies liées à une réduction de l’activité de l’axe hypothalamo-hypophyse-gonade.
14. Composé peptidique pour son utilisation selon la revendication 11, pour le traitement de cancers sensibles aux hormones stéroïdiennes ou pour retarder le vieillissement.
15. Composition pharmaceutique ou vétérinaire, notamment pour l’amélioration de la fertilité chez un mammifère, caractérisée en ce qu’elle contient un composé peptidique selon l’une quelconque des revendications 1 à 10 dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
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