EP1917004A2 - Verfahren zur einschleusung von therapeutischen substanzen in zellen - Google Patents

Verfahren zur einschleusung von therapeutischen substanzen in zellen

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EP1917004A2
EP1917004A2 EP06775877A EP06775877A EP1917004A2 EP 1917004 A2 EP1917004 A2 EP 1917004A2 EP 06775877 A EP06775877 A EP 06775877A EP 06775877 A EP06775877 A EP 06775877A EP 1917004 A2 EP1917004 A2 EP 1917004A2
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EP
European Patent Office
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nanoparticles
cells
pharmaceutical composition
acid
composition according
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP06775877A
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English (en)
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Andreas Jordan
Norbert Waldoefner
Regina Scholz
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Magforce Nanotechnologies AG
Original Assignee
Magforce Nanotechnologies AG
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Publication date
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Priority to EP10012394.2A priority patent/EP2266544B1/de
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • Y10S977/70—Nanostructure
    • Y10S977/773—Nanoparticle, i.e. structure having three dimensions of 100 nm or less

Definitions

  • pharmacologically acceptable carriers excipients and / or solvents
  • the usual in galenics (pharmaceutical technology) substances can be used, with liquid pharmaceutical compositions are preferred.
  • Increasing the activity is understood to mean that the same amount of therapeutically active substance, especially anticancer agent, exhibits enhanced activity in the presence of the nanoparticles, rather than in their absence.
  • Such a positively polarizable and / or positively ionizable coating can be obtained by coating the nanoparticles with positively polarizable and / or positively ionizable substances.
  • Such substances may contain, for example, amino groups or protonatable nitrogen atoms which are present in protonated form at the corresponding pH.
  • this coating consists of monomeric aminosilanes, e.g. 3-aminopropyltriethoxysilane, 2-aminoethyl-3-aminopropyltrimethoxysilane, trimethoxysilylpropyldiethylenetriamine or N- (6-aminohexyl) -3-aminopropyltrimethoxysilane, which are polycondensed to obtain the required stability by known methods.
  • a suitable method is described for example in DE 19614136 A or DE 19515820 A.
  • poly-barrier or copolymers based on ⁇ -hydroxycarboxylic acids such as polylactic acid, polylactides, polyglycolic acid, polyglycolides and copolymers thereof.
  • polyols e.g., polyethylene glycol
  • polyacid such as e.g. Polyacrylic acids as well as carbohydrates and sugars, especially dextrans.
  • polyclonal, antibodies, monoclonal antibodies, humanized antibodies, human antibodies, chimeric antibodies, recombinant antibodies, bispecific antibodies, antibody fragments, aptamers, Fab can be synthesized on the surface of the nanoparticles or on the outer layer or shell of the nanoparticles. Fragments, Fc fragments, peptides, peptidomimetics, gap mers, ribozymes, CpG oligomers, DNA Zyme, riboswitches and / or lipids coupled and / or attached and / or stored.
  • the compounds are designed in such a way that they recognize certain cells, for example tumor cells, and further increase the cell discrimination of the nanoparticles.
  • Methotrexate, 5-fluorouracil, 6-thioguanine, 6-mercaptopurine, fludarabine, cladribine, pentostatin, gemcitabine, cytarabine, azathioprine, raltitrexed, capecitabine, cytosine arabinoside, tioguanine and mercaptopurine may be cited as examples of antimetabolites (antimetabolic agents).
  • the class of alkaloids and podophyllotoxins include, but are not limited to, vincristine, vinblastine, vindesine, etoposide, and teniposide.
  • platinum-containing compounds can be used according to the invention. Examples of platinum-containing compounds are cisplatin, carboplatin and oxaliplatin.
  • To the microtubule inhibitors include, for example alkaloids, such as vinca alkaloids (vincristine, vinblastine, vindesine, Venorelbin) and paclitaxel (Taxol ®), as well as derivatives of paclitaxel.
  • Examples of topoisomerase inhibitors include etoposide, teniposide, camptothecin, topotecan and irinotecan.
  • osteoplastic carcinoma osteosarcoma, ovarian carcinoma, pancreatic carcinoma, penile cancer, plasmocytoma, squamous cell carcinoma of the head and neck, prostate cancer, pharyngeal cancer, rectal carcinoma, retinoblastoma, vaginal cancer, thyroid carcinoma, Schneeberger disease, esophageal cancer, spinal, T-cell lymphoma (Mycosis fungoides), Thymoma, tubal carcinoma, tumors of the eye, urethral cancer, urological tumors, urothelial carcinoma, vulvar cancer, wart involvement, soft tissue tumors, soft tissue sarcoma, Wilms tumor, cervical carcinoma and tongue cancer.
  • FIG. 3 shows RUSIRS1 cells 24h after addition of mitomycin in 0.9% NaCl
  • FIG. 6 shows RUSIRS1 cells 48h after addition of mitomycin in 0.9% NaCl + nanoparticles
  • FIG. 11 shows WiDr cells after 72 hours as a control with cefamandole but without nanoparticles
  • the 7 cell lines were a) glioblastoma-human cell line RUSIRS1, b) mammary carcinoma cell lines BT20, c) cell carcinoma Zellline WiDr, d) bronchial carcinoma cells NSCLC, e) rectal carcinoma Cells and f) prostate carcinoma Zellline DU 145 with the active ingredients mentioned in Table 1 in vitro.

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Abstract

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Zusammensetzungen enthaltend Nanopartikel und Verwendungen dieser Zusammensetzung zur Einschleusung von therapeutisch wirksamen Substanzen in Zellen mit Hilfe von speziell beschichteten Nanopartikeln. Die Partikel sind chemisch so gestaltet, dass eine hohe intrazelluläre Aufnahme in die Zellen stattfindet. Für die Einschleusung muss keine direkte Bindung zwischen Nanopartikel und der therapeutisch wirksamen Substanz vorliegen. Durch die Einschleusung wird eine erhöhte Wirksamkeit der Substanz bei gleichzeitig niedriger systemischer Toxizität erreicht, also eine Steigerung der Wirksamkeit bei gleichzeitiger Reduktion der Nebenwirkungen.

Description

Verfahren zur Einschleusung von therapeutischen Substanzen in Zellen
Beschreibung
Die vorliegende Erfindung betrifft Zusammensetzungen enthaltend Nanopartikel und Verwendungen dieser Zusammensetzung zur Einschleusung von therapeutisch wirksamen Substanzen in Zellen, insbesondere Krebszellen. Die Partikel sind chemisch so gestaltet, dass eine hohe intrazelluläre Aufnahme in die Zellen stattfindet. Für die Einschleusung in die Zellen muss keine direkte Bindung zwischen Nanopartikel und der therapeutisch wirksamen Substanz vorliegen. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen aus Nanopartikel und Antikrebsmittel führen zu einer gesteigerten Wirkung des Antikrebsmittels und zu verringerten Nebenwirkungen.
Es ist bekannt, dass Nanopartikel von Zellen (insbesondere Tumorzellen) durch Endozytose aufgenommen werden können. Ein Verfahren zur Herstellung von zellgängigen Nanopartikeln ist in DE 197 26 282.1 genannt. Die Aufnahme der Nanopartikel kann durch in-vitro Untersuchungen an hochreinem Zellmaterial untersucht werden. In der DE 199 12 798 C1 sind Methoden genannt, mit deren Hilfe man beliebige Zellen aus Gewebematerial in Kultur bringen kann. Durch diese Methoden ist es möglich, die Partikel chemisch so zu gestalten, dass eine hohe Aufnahme in bestimmte Tumorzellen stattfindet. Methoden zur Wirksamkeitssteigerung von therapeutischen Substanzen durch Ankopplung an Nanopartikel als Trägersysteme sind ebenfalls bekannt und auch Gegenstand der Forschung. So wird in DE 10059151 A eine Ankopplung der Substanzen durch ionische Wechselwirkung verfolgt, wobei das Konjugat im Tumorgewebe angereichert werden soll. Die Freisetzung der therapeutischen Substanz erfolgt dann allerdings im Interstitium und nicht intrazellulär. Die Einschleusung von Nanopartikeln in Tumorzellen mit Hilfe von Antikörpern oder Peptiden (z.B. TAT- Peptide) ist ebenfalls bekannt. Diese Art der Einschleusung führt allerdings nur zu einer vergleichsweise geringen Anreicherung von Nanopartikeln in Tumorzellen und kann daher nicht für therapeutische Zwecke genutzt werden.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, Zusammensetzungen und Verwendungen dieser Zusammensetzungen zur Behandlung und Prophylaxe von Krebserkrankungen bereitzustellen.
BESTÄTIGUNGSKOPIE
MFH-P01542WO04Anmeldung Die Aufgabe wird durch die pharmazeutische Zusammensetzung gemäß Anspruch 1 sowie die Verwendungen dieser pharmazeutischen Zusammensetzung gelöst.
Weitere vorteilhafte Ausgestaltungen ergeben sich aus den abhängigen Ansprüchen, den Beispielen sowie Figuren und der Beschreibung.
Die vorliegende Erfindung betrifft pharmazeutische Zusammensetzungen, welche aus Nanopartikeln mit einer hohen Affinität zu entarteten Zellen, mindestens eine therapeutisch wirksame Substanz, insbesondere ein Antikrebsmittel und mindestens einem pharmakologisch verträglichen Träger, Hilfsstoff und/oder Lösungsmittel bestehen.
Als pharmakologisch verträgliche Träger, Hilfsstoffe und/oder Lösungsmittel können die in der Galenik (Pharmazeutische Technologie) üblichen Stoffe eingesetzt werden, wobei flüssige pharmazeutische Zusammensetzungen bevorzugt sind.
Als Lösungsmittel eignen sich Wasser oder physiologische Kochsalzlösung. Falls erforderlich, können auch Cosolventien wie beispielsweise Ethanol bis vorzugsweise zu einer Menge von 10 Vol.-% eingesetzt werden.
Bei diesen pharmazeutischen Zusammensetzungen handelt es sich insbesondere um Infusions- oder Injektionslösungen. Derartige Lösungen der Nanopartikel in beispielsweise physiologischer Kochsalzlösung sind für die interstitielle bzw. intratumorale Applikation geeignet. Eine intraarterielle oder intravenöse Applikation ermöglicht ferner eine systemische, den ganzen Körper betreffende Therapiemöglichkeit für nicht solide und/oder metastasenbildende Tumorarten.
Dabei ist es nicht zwingend, dass die Nanopartikel oder Nanoteilchen und die mindestens eine therapeutische Substanz, insbesondere das mindestens eine Antikrebsmittel in einer einzigen vorzugsweise Injektionslösung oder Infusionslösung enthalten sind. Es ist durchaus möglich, dass die erfindungsgemäße pharmazeutische Zusammensetzung aus zwei Lösungen besteht, wobei die eine die Nanopartikel und die andere die mindestens eine therapeutisch wirksame Substanz, insbesondere das mindestens eine Antikrebsmittel enthält, und beide Lösungen gleichzeitig oder zeitgleich appliziert werden.
Erfindungswesentlich ist, dass sich überraschend herausgestellt hat, dass die hierin beschriebenen Nanopartikel die Fähigkeit besitzen, therapeutische Substanzen, insbesondere Antikrebsmittel in entartete Zellen einzuschleusen. Unter entartete
MFH-P01542WO04Anmelduπg Zellen werden onkogene Zellen, Tumorzellen als auch Krebszellen verstanden, also Zellen, welche vollständig entartet sind oder sich auf dem Weg zur vollständigen Entartung befinden. Als entartete Zellen werden somit Zellen bezeichnet, welche eine unkontrollierte Proliferation besitzen. Dies bedeutet, dass die therapeutischen Substanzen insbesondere Antikrebsmittel bei gleichzeitiger Anwesenheit der hierin beschriebenen Nanopartikel deutlich besser von den entarteten Zellen aufgenommen werden als bei Abwesenheit der Nanopartikel. Durch die verbesserte Aufnahme der therapeutischen Substanzen in die entarteten Zellen erfolgt sowohl eine deutliche Steigerung der Aktivität dieser Substanzen insbesondere Antikrebsmittel als auch eine Reduktion der Nebenwirkungen dieser Substanzen.
Unter Steigerung der Aktivität wird verstanden, dass dieselbe Menge an therapeutisch wirksamer Substanz, insbesondere Antikrebsmittel eine gesteigerte Wirksamkeit bei Anwesenheit der Nanopartikel als bei deren Abwesenheit zeigt. Unter Reduktion der Nebenwirkungen von therapeutischen Substanzen, insbesondere Antikrebsmitteln soll verstanden werden, dass die Schädigung gesunder Zellen bei gleicher Wirksamkeit oder bei derselben Menge an Antikrebsmittel geringer ist bei gleichzeitiger Anwesenheit der Nanopartikel als bei deren Abwesenheit.
Somit ist Voraussetzung für die Wirksamkeitssteigerung, dass die therapeutische Substanz im Verlaufe der großvolumigen Einschleusung der Nanopartikel mit in die Zelle aufgenommen werden kann. Offensichtlich führt die Invagination der Zellmembran infolge der Partikelbindung zumindest zur teilweisen Aufhebung der transmembranären Passagekontrolle und damit zu einem vollkommen neuen Einschleusungskanal für therapeutisch wirksame Substanzen. Dabei ist es vorteilhaft, wenn eine lokale Konzentrationserhöhung von Nanopartikeln und therapeutischer Substanz insbesondere Antikrebsmittel im Interstitium erreicht werden kann. Dies kann z.B. durch interstitielle Gabe der Mischung erreicht werden oder durch geeignete Anreicherungsstrategien, wie der kontrollierten Freisetzung (controlled release), der Erkennung von Rezeptoren oder auch anderen Biomolekülen, die von Liganden an der Partikeloberfläche erkannt werden (Targeting). Ebenfalls ist es möglich, nach interstitieller Gabe der Nanopartikel, die therapeutische Substanz systemisch zu verabreichen. Die intrazelluläre Aufnahme der Nanopartikel vollzieht sich innerhalb von Stunden bis Tagen, so dass auch eine mehrfache Gabe der Substanz innerhalb der Endozytose-Phase möglich ist. Eine systemische Gabe der Substanz ist insbesondere dann notwendig, wenn eine Metabolisierung erfolgen muss.
MFH-P01542WO04An meidung Die Nanopartikel sollten eine positive Oberflächenladung aufweisen, da derartige Nanopartikel besonders gut in entartete Zellen, insbesondere Krebszellen aufgenommen werden.
Eine unter physiologischen Bedingungen positive Oberflächenladung auf den Nanopartikeln lässt sich erreichen, indem man die Nanopartikel mit einer positiv polarisierbaren und/oder positiv ionisierbaren Beschichtung versieht.
Eine solche positiv polarisierbare und/oder positiv ionisierbare Beschichtung kann erhalten werden, indem man die Nanopartikel mit positiv polarisierbaren und/oder positiv ionisierbaren Stoffen beschichtet. Solche Stoffe können beispielsweise Aminogruppen oder protonierbare Stickstoffatome enthalten, welche beim entsprechenden pH-Wert in protonierter Form vorliegen.
Unter positiver Oberflächenladung soll eine positiv geladene Oberfläche oder eine positiv aufladbare Oberfläche oder eine positiv polarisierbare Oberfläche eines jeden Nanopartikels verstanden werden, wobei die Nanopartikel unter physiologischen Bedingungen diese positiv polarisierte oder positiv geladene Oberfläche aufweisen sollten.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform wird die positiv geladene, positiv aufladbare oder positiv polarisierbare Oberfläche oder Beschichtung mit einer Schutzschicht überzogen, welche die positiven Ladungen kompensiert oder sogar überkompensiert, so dass sich insgesamt eine neutrale oder sogar negativ geladene äußere Oberfläche ergibt. Auf diese äußere, die positiven Ladungen kompensierende Schicht kann verzichtet werden, wenn die positiv geladene oder positiv polarisierbare Beschichtung eine ausreichende Stabilität gegen Abbau durch das Körpergewebe oder Tumorgewebe besitzt. Die Nanopartikel besitzen in einer bevorzugten Ausführungsform eine Beschichtung aus polykondensierten Aminosilanen und eventuell eine weitere die positiven Ladungen kompensierende Carboxylatgruppen aufweisende äußere Beschichtung.
Da die positiv geladene oder positiv polarisierbare oder positiv aufladbare Beschichtung nur langsam biologisch abgebaut werden sollte, besteht sie vorzugsweise aus biologisch stabilen bzw. biologisch inerten bzw. biostabilen Substanzen, beispielsweise aus Polymeren.
Als biostabile Polymere können eingesetzt werden: Polyacrylamid, Polyacrylonitrile, Polyamide, Polyetheramide, Polyethylenamin, Polyimide, Polycarbonate,
MFH-P01542WO04Aπmelduπg Polycarbourethane, Polyvinylketone, Polyvinylhalogenide, Polyvinylidenhalogenide, Polyvinylether, Polyisobutylene, Polyvinylaromaten, Polyvinylester,
Polyvinylpyrollidone, Polyoxymethylene, Polytetramethylenoxid, Polyethylen, Polypropylen, Polytetrafluorethylen, Polyurethane, Polyetherurethane Silicon- Polyetherurethane, Silicon-Polyurethane, Silicon-Polycarbonat-Urethane, Polyolefin- Elastomere, Polyisobutylene, EPDM-Gummis, Fluorosilicone,
Carboxymethylchitosane, Polyaryletheretherketone, Polyetheretherketone, Polyethylenterephtalat, Polyvalerate, Carboxymethylcellulose, Cellulose, Rayon, Rayontriacetate, Cellulosenitrate, Celluloseacetate, Hydroxyethylcellulose, Cellulosebutyrate, Celluloseacetatbutyrate, Ethylvinylacetat-copolymere, Polysulfone, Epoxyharze, ABS-Harze, EPDM-Gummis, Silicone wie Polysiloxane, Polydimethylsiloxane, Polyvinylhalogene und Copolymere, Celluloseether, Cellulosetriacetate. Chitosane und Copolymere und/oder Mischungen dieser Substanzen.
Die biologisch stabilen Polymere sollten eine genügende Anzahl positiver oder positiv polarisierbarer oder positiv aufladbarer Gruppen wie beispielsweise Aminogruppen oder Stickstoffatome aufweisen. Normalerweise verfügt die positiv geladene Beschichtung pro Nanopartikel im Durchschnitt über mindestens 50, bevorzugt mindestens 100 und insbesondere bevorzugt mindestens 500 kationische, positiv polarisierbare und/oder positiv aufladbare Gruppen wie beispielsweise Aminogruppen.
Bei bevorzugten Ausführungsformen besteht diese Beschichtung aus monomeren Aminosilanen wie z.B. 3-Aminopropyltriethoxysilan, 2-Aminoethyl-3- aminopropyltrimethoxysilan, Trimethoxysilylpropyldiethylentriamin oder N-(6- Aminohexyl)-3-aminopropyltrimethoxysilan, welche zur Erzielung der erforderlichen Stabilität nach bekannten Verfahren polykondensiert werden. Ein geeignetes Verfahren ist beispielsweise in DE 19614136 A oder DE 19515820 A beschrieben.
Die positiv geladene Schicht oder Beschichtung kann zur Kompensierung der Ladung als auch zur Steigerung der Zelldiskriminierung mit einer weiteren Beschichtung aus vorzugsweise biologisch abbaubaren Polymeren bzw. biodegradierbaren Stoffen überzogen werden.
Als bioabbaubare Polymere werden vorzugsweise verwendet: Polyvalerolactone, Poly-ε-Decalactone, Polylactonsäure, Polyglycolsäure Polylactide, Polyglycolide, Copolymere der Polylactide und Polyglycolide, Poly-ε-caprolacton, Polyhydroxybuttersäure, Polyhydroxybutyrate, Polyhydroxyvalerate,
MFH-P01542WO04Anmelduπg Polyhydroxybutyrate-co-valeratθ, PoIy(1 ,4-dioxan-2,3-dione), PoIy(1 ,3-dioxan-2-one), Poly-para-dioxanone, Polyanhydride wie Polymaleinsäureanhydride, Polyhydroxymethacrylate, Fibrin, Polycyanoacrylate, Polycaprolacton- dimethylacrylate, Poly-ß-Maleinsäure Polycaprolactonbutylacrylate, Multiblockpolymere wie z.B. aus Oligocaprolactondiole und Oligodioxanondiole, Polyetherestermultiblockpolymere wie z.B. PEG und Poly(butylenterephtalat), Polypivotolactone, Polyglycolsäuretrimethylcarbonate Polycaprolacton-glycolide, Poly(g-ethylglutamat), Poly(DTH-iminocarbonat), Poly(DTE-co-DT-carbonat), Poly(bisphenol A-iminocarbonat), Polyorthoester, Polyglycolsäuretrimethyl- carbonate, Polytrimethylcarbonate Polyiminocarbonate, Poly(N-vinyl)-pyrrolidon, Polyvinylalkohole, Polyesteramide, glycolierte Polyester, Polyphosphoester, Polyphosphazene, Poly[(p-carboxyphenoxy)propan] Polyhydroxypentansäure, Polyanhydride, Polyethylenoxidpropylenoxid, weiche Polyurethane, Polyurethane mit Aminosäureresten im Backbone, Polyetherester wie das Polyethylenoxid, Polyalkenoxalate, Polyorthoester sowie deren Copolymere, Lipide, Carrageenane, Fibrinogen, Stärke, Kollagen, protein-basierende Polymere, Polyaminosäuren, synthetische Polyaminosäuren, Zein, modifiziertes Zein, Polyhydroxyalkanoate, Pectinsäure, Actinsäure, modifiziertes und unmodifiziertes Fibrin und Casein, Carboxymethylsulfat, Albumin, Hyaluronsäure, Chitosan und seine Derivate, Heparansulfate und seine Derivate, Heparine, Chondroitinsulfat, Dextran, ß- Cyclodextrine, Alginate, Glycosaminoglycane, Saccharide, Polysaccharide, Proteoglykane, Glycoproteine, Copolymere mit PEG und Polypropylenglycol, Gummi arabicum, Guar, Gelatine, Collagen Collagen-N-Hydroxysuccinimid, Lipide, Phospholipide, Modifikationen und Copolymere und/oder Mischungen der vorgenannten Substanzen.
Insbesondere bevorzugt sind Polyrriere oder Copolymere auf Basis von α- Hydroxycarbonsäuren wie beispielsweise Polymilchsäure, Polylactide, Polyglycolsäure, Polyglycolide sowie Copolymere davon. Zudem bevorzugt sind Polyole (z.B. Polyethylenglycol) und Polysäure wie z.B. Polyacrylsäuren als auch Kohlenhydrate und Zucker, insbesondere Dextrane.
In weiteren bevorzugten Ausführungsformen werden die erfindungsgemäßen Nanopartikel ferner noch mit einer dritten Beschichtung versehen bzw. überzogen. Die Beschichtungen können als Schutzhülle, Barriereschicht oder zur Zelldiskriminierung dienen.
Eine zellspezifische Beschichtung erhöht die Affinität der Nanopartikel zu bestimmten Zellen, beispielsweise zu bestimmten Bakterienzellen oder zu bestimmten
MFH-P01542WO04Anmeldung Tumorzellen und dient somit der Zelldiskriminierung. Solche zellspezifischen Nanopartikel reichern sich bevorzugt in solchen Zellen an, zu denen sie aufgrund der Funktionalität auf ihrer Oberfläche eine erhöhte Affinität haben und sind somit tumorspezifisch. Mit dieser Technologie lassen sich beispielsweise tumorspezifische Nanopartikel für bestimmte Krebsarten entwickeln.
Zur weiteren Affinitätssteigerung bezüglich bestimmter Zellen können auf der Oberfläche der Nanopartikel bzw. auf der äußeren Schicht oder Hülle der Nanopartikel polyklonale, Antikörper, monoklonale Antikörper, humanifizierte Antikörper, humane Antikörper, chimere Antikörper, rekombinante Antikörper, bispezifische Antikörper, Antikörperfragmente, Aptamere, Fab-Fragmente, Fc- Fragmente, Peptide, Peptidomimetika, gap-Mere, Ribozymes, CpG-Oligomere, DNA- Zyme, Riboswitches und/oder Lipide gekoppelt und/oder angelagert und/oder eingelagert werden. Die Verbindungen sind derart ausgestaltet, dass sie bestimmte Zellen beispielsweise Tumorzellen erkennen und die Zelldiskriminierung der Nanopartikel weiter steigern.
Die Nanopartikel selbst bestehen vorzugsweise aus einem magnetischen Material, einem ferromagnetischen, antiferromagnetischen, ferrimagnetischen, antiferrimagnetischen oder superparamagnetischen Material, weiter bevorzugt aus Eisenoxiden, insbesondere superparamagnetischen Eisenoxiden oder aus reinem Eisen, welches mit einer Oxidschicht versehen ist. Derartige Nanopartikel können durch ein magnetisches Wechselfeld erwärmt werden. Eine Erwärmung des die Nanopartikel enthaltenden Gewebes auf über 500C ist möglich. Derartig hohe Temperaturen können erreicht werden, da bis zu 1000 pg und mehr Eisen in Form der Nanopartikel pro Tumorzelle aufgenommen werden können.
Die Nanopartikel bestehen vorzugsweise aus Eisenoxiden und insbesondere aus Magnetit (Fe3O4), Maghemit (γ-Fe2O3) oder Mischungen dieser beiden Oxide und sind vorzugsweise superparamagnetisch. Allgemein können die bevorzugten Nanopartikel durch die Formel FeOx wiedergegeben werden, worin X eine Zahl von 1 bis 2 bedeutet. Es besteht aber auch die Möglichkeit, die Nanopartikel in ein nicht magnetisches Material wie beispielsweise Siliziumoxid (Siθ2) einzulagern (s.u.). Die Nanopartikel weisen vorzugsweise einen Durchmesser von weniger als 500 nm auf. Vorzugsweise besitzen die Nanopartikel einen durchschnittlichen Durchmesser von 15 nm oder liegen vorzugsweise in dem Größenbereich von 1 - 100 nm und insbesondere bevorzugt im Bereich von 10 - 20 nm.
MFH-P01542WO04Aπmeldung Neben den magnetischen Materialien der Formel Feθχ, worin X eine Zahl im Bereich von 1,0 bis 2,0 ist, sind erfindungsgemäß auch Materialien der allgemeinen Formel M(II)Fe2O4 mit M = Co, Ni, Mn, Zn, Cu, Cd, Ba oder andere Ferrite einsetzbar. Der Gehalt an von Eisenatomen verschiedenen Metallatomen beträgt vorzugsweise nicht mehr als 70 Metallatom-%, insbesondere nicht mehr als 35 Metallatom-%. Bevorzugt bestehen die Nanopartikel jedoch zu über 98 Gew.-% aus Eisenoxid, welches sowohl Fe(III) als auch Fe(II) in einem Verhältnis von vorzugsweise 1 zu 1 bis 1 zu 3 enthält. Ferner eignen sich auch Silica- oder Polymerpartikel, in die magnetische Materialien wie beispielsweise die hierin genannten magnetischen Materialien eingelagert und/oder angebunden sind.
Die verwendeten Nanopartikel-Kerne können auch aus nichtmagnetischen Materialien bestehen. In Frage kommen z.B. Nanopartikel aus Polymeren (z.B. PLGA, Polyacrylamid, Polybutylcyanoacrylat), Metallen sowie aus sämtlichen oxidischen Materialien (z.B. MgO, CaO, TiO2, ZrO2, SiO2, AI2O3). Erfindungsgemäß eignet sich jedes Material, dass sich mit den oben beschriebenen Methoden mit tumorspezifischen Hüllen beschichten lässt, da die Endozytosefähigkeit nicht vom Kern der Partikel, sondern von der Hülle abhängt.
Die Nanopartikel oder nanoskaligen Teilchen besitzen vorzugsweise einen durchschnittlichen Teilchendurchmesser von nicht mehr als 100 nm, bevorzugt nicht mehr als 50 nm und insbesondere bevorzugt nicht mehr als 30 nm. Der mittlere Teilchendurchmesser liegt vorzugsweise bei 1 - 40 nm, bevorzugt bei 3 - 30 nm und insbesondere bevorzugt bei 5 - 25 nm.
Derartige Nanopartikel eignen sich überraschenderweise sehr gut zur Einschleusung von therapeutischen Substanzen in bestimmte Zelltypen, wodurch die Wirksamkeit der therapeutischen Substanzen deutlich gesteigert wird. Bei diesen therapeutischen Substanzen handelt es sich vorzugsweise um Antikrebsmittel, Zytostatika, zytotoxische Wirkstoffe, antiproliverative Wirkstoffe, antiphlogistische Wirkstoffe, antimigrative Wirkstoffe, antiangiogene Wirkstoffe, antiinflammatorische Wirkstoffe, antibakterielle Wirkstoffe und/oder Mikrotubuli-Inhibitoren.
Als zytotoxische und/oder zytostatische Verbindungen, d.h. chemische Verbindungen mit zytotoxischen und/oder zytostatischen Eigenschaften können unter anderem Alkylierungsmittel, Antibiotika mit zytostatischen Eigenschaften, Antimetabolite, Mikrotubuli-Inhibitoren und Topoisomerase-Inhibitoren, Platin-enthaltende Verbindungen und andere Zytostatika wie beispielsweise Asparaginase, Tretinoin, Alkaloide, Podophyllotoxine, Taxane und Miltefosin®, Hormone, Immunmodulatoren,
MFH-P01542WO04Anmelduπg monoklonale Antikörper, Signaltransduktoren (Signaltransduktionsmoleküle) und Zytokine eingesetzt werden.
Als Beispiele für Alkylierungsmittel können unter anderem Chlorethamin, Cyclophosphamid, Trofosfamide, Ifosfamid, Melphalan, Chlorambucil, Busulfan, Thiotepa, Carmustin, Lomustin, Dacarbazin, Procarbazin, Temozolomid, Treosulfan, Estramustin und Nimustin genannt werden.
Beispiele für Antibiotika mit zytostatischen Eigenschaften sind Daunorubicin als auch liposomales Daunorubicin, Doxorubicin (Adriamycin), Dactinomycin, Mitomycin C, Bleomycin, Epirubicin (4-Epi-Adriamycin), Idarubicin, Dactinomycin, Mitoxantron, Amsacrin und Actinomycin D.
Methotrexat, 5-Fluorouracil, 6-Thioguanin, 6-Mercaptopurin, Fludarabin, Cladribin, Pentostatin, Gemcitabin, Cytarabin, Azathioprin, Raltitrexed, Capecitabin, Cytosinarabinosid, Tioguanin und Mercaptopurin können als Beispiele für Antimetabolite (antimetabolische Wirkstoffe) angeführt werden.
Zu der Klasse der Alkaloide und Podophyllotoxine gehören unter anderem Vincristin, Vinblastin, Vindesin, Etoposid als auch Teniposid. Des weiteren können Platinenthaltende Verbindungen erfindungsgemäß eingesetzt werden. Als Platinenthaltende Verbindungen seien beispielsweise Cisplatin, Carboplatin und Oxaliplatin genannt. Zu den Mikrotubuli-Inhibitoren zählen beispielsweise Alkaloide wie beispielsweise Vinca-Alkaloide (Vincristin, Vinblastin, Vindesin, Venorelbin) und Paclitaxel (Taxol®) sowie Derivate des Paclitaxel. Als Topoisomerase-Inhibitoren können beispielsweise Etoposid, Teniposid, Camptothecin, Topotecan und Irinotecan genannt werden.
Paclitaxel und Docetaxel sind Beispiele für die Verbindungsklasse der Taxane und zu den anderen zytostatischen Wirkstoffen (anderen Zytostatika) zählen beispielsweise Hydroxycarbamide (Hydroxyurea), Imatinib, Miltefosin®, Amsacrin,
Topotecan (Topoisomerase-I-Inhibitor), Pentostatin, Bexaroten, Tretinoin und
Asparaginase. Vertreter der Verbindungsklasse der monoklonalen Antikörper sind unter anderem Trastuzumab (auch bekannt als Herceptin®), Alemtuzumab (auch bekannt als MabCampath®) und Rituximab (auch bekannt als MabThera®).
Erfindungsgemäß können auch Hormone wie beispielsweise Glucocorticoide (Prednison), Oestrogene (Fosfestrol, Estramustin), LHRH (Buserelin, Goserelin, Leuproreiin, Triptorelin), Flutamid, Cyproteronacetat, Tamoxifen, Toremifen,
MFH-P01542WO04Anmeldung Aminoglutθthimid, Formestan, Exemestan, Letrozol und Anastrozol eingesetzt werden. Zu den Klassen der Immunmodulatoren, Zytokine, Antikörper und Signaltransduktoren zählen lnterleukin-2, Interferon-α, Erythropoietin, G-CSF, Trastuzumab (Herceptin®), Rituximab (MabThera®), Efitinib (Iressa®), Ibritumomab (Zevalin®), Levamisol sowie Retinoide.
Als weitere mögliche therapeutische Substanzen sind zu nennen: Actinomycin D, Aminoglutethimid, Anthracycline, Aromatasehemmer, Antiöströgene, Buselerin, Folsäureantagonisten, Goselerin, Hormonantagonisten, Hycamtin, Hydroxyharnstoff, Mitosehemmstoffe, Tamoxifen, Testolacton, Sirolimus (Rapamycin), Everolimus, Pimecrolimus, Somatostatin, Tacrolimus, Roxithromycin, Dunaimycin, Ascomycin, Bafilomycin, Erythromycin, Midecamycin, Josamycin, Concanamycin, Clarithromycin, Troleandomycin, Folimycin, Cerivastatin, Simvastatin, Lovastatin, Fluvastatin, Rosuvastatin, Atorvastatin, Pravastatin, Pitavastatin, 4-Hydroxyoxycyclophosphamid, Tropfosfamid, Bendamustin, Thymosin α-1 , Aclarubicin, Fludarabin-5'- dihydrogenphosphat, Antagonisten von Purin- und Pyrimidin-Basen, Hydroxycarbamid, Aldesleukin, Pegasparase, Letrozol, Aminoglutethemid, Adriamycin, Azithromycin, Spiramycin, Cepharantin, Epothilone A und B, Mitoxanthrone, Azathioprin, Mycophenolatmofetil, c-myc-Antisense, b-myc- Antisense, Betulinsäure, Camptothecin, Camptothecin-Derivate, Melanocyte- stimulating hormon (α-MSH), aktiviertes Protein C, IL1-ß-lnhibitor, Fumarsäure und deren Ester, Dermicidin, Calcipotriol, Tacalcitol, Lapachol, ß-Lapachon, Podophyllotoxin, Betulin, Podophyllsäure-2-ethylhydrazid, Molgramostim (rhuGM- CSF), Peginterferon α-2b, Lanograstim (r-HuG-CSF), Filgrastim, Macrogol, Dacarbazin, Chephalomannin, Trastuzumab, Exemestan, Basiliximab, Daclizumab, Selectin (Cytokinantagonist), CETP-Inhibitor, Cadherine, Cytokininhibitoren, COX-2- Inhibitor, NFkB, Angiopeptin, Ciprofloxacin, Camptothecin, Fluroblastin, bFGF- Antagonisten, Probucol, Prostaglandine, 1 ,11-Dimethoxycanthin-6-on, 1-Hydroxy-11- Methoxycanthin-6-on, Scopolectin, Colchicin, NO-Donoren, Pentaerythrityltetranitrat, Syndnoeimine, S-Nitrosoderivate, Staurosporin, ß-Estradiol, α-Estradiol, Estriol, Estron, Ethinylestradiol, Fosfestrol, Medroxyprogesteron, Estradiolcypionate, Estradiolbenzoate, Tranilast, Kamebakaurin, Verapamil, Tyrosin-Kinase-Inhibitoren (Tyrphostine), Cyclosporin A, Paclitaxel und dessen Derivate wie 6-α-Hydroxy- Paclitaxel, Baccatin, Taxotere, Mofebutazon, Acemetacin, Diclofenac, Lonazolac, Dapson, o-Carbamoylphenoxyessigsäure, Lidocain, Ketoprofen, Mefenaminsäure, Piroxicam, Meloxicam, Chloroquinphosphat, Penicillamin, Hydroxychloroquin, Auranofin, Natriumaurothiomalat, Oxaceprol, Celecoxib, ß-Sitosterin, Ademetionin, Myrtecain, Polidocanol, Nonivamid, Levomenthol, Benzocain, Aescin, Ellipticin, D- 24851 (Calbiochem), Colcemid, Cytochalasin A-E, Indanocine, Nocadazol,
MFH-P01S42WO04Anmeldung Bacitracin, Vitronectin-Rezeptor Antagonisten, Azelastin, freie Nukleinsäuren, Nukleinsäuren in Virenüberträger inkorporiert, DNA- und RNA-Fragmente, Plasminogen-Aktivator lnhibitor-1 , Plasminogen-Aktivator lnhibitor-2, Antisense Oligonucleotide, VEGF-Inhibitoren, IGF-1 , Wirkstoffe aus der Gruppe der Antibiotika wie Cefadroxil, Cefazolin, Cefaclor, Cefotixin, Tobramycin, Gentamycin, Penicilline, Dicloxacillin, Oxacillin, Sulfonamide, Metronidazol, Antithrombotika, Argatroban, Aspirin, Abciximab, synthetisches Antithrombin, Bivalirudin, Coumadin, Enoxoparin, Gpllb/Illa-Plättchenmembranrezeptor, Faktor Xa-lnhibitor Antikörper, Heparin, Hirudin, r-Hirudin, PPACK, Protamin, Prourokinase, Streptokinase, Warfarin, Urokinase, Vasodilatoren, Dipyramidol, Trapidil, Nitroprusside, PDGF-Antagonisten, Triazolopyrimidin, Seramin, ACE-Inhibitoren, Captopril, Cilazapril, Lisinopril, Enalapril, Losartan, Thioproteaseinhibitoren, Prostacyclin, Vapiprost, Interferon α, ß und Y, Histaminantagonisten, Serotoninblocker, Apoptoseinhibitoren, Apoptoseregulatoren, NF-kB oder Bcl-xL-Antisense-Oligonukleotide, Halofuginon, Nifedipin, Tocopherol Tranirast, Molsidomin, Teepolyphenole, Epicatechingallat, Epigallocatechingallat, Boswellinsäuren und ihre Derivate, Leflunomid, Anakinra, Etanercept, Sulfasalazin, Etoposid, Dicloxacyllin, Tetracyclin, Triamcinolon, Mutamycin, Procainimid, Retinolsäure, Quinidin, Disopyrimid, Flecainid, Propafenon, Sotolol, Amidoron., natürliche und synthetisch hergestellte Steroide wie Bryophyllin A, Inotodiol, Maquirosid A, Ghalakinosid, Mansonin, Streblosid, Hydrocortison, Betamethason, Dexamethason, Fenoporfen, Ibuprofen, Indomethacin, Naproxen, Phenylbutazon, Acyclovir, Ganciclovir, Zidovudin, Antimykotika, Clotrimazol, Flucytosin, Griseofulvin, Ketoconazol, Miconazol, Nystatin, Terbinafin, Chloroquin, Mefloquin, Quinin, natürliche Terpenoide, Hippocaesculin, Barringtogenol-C21- angelat, 14-Dehydroagrostistachin, Agroskerin, Agrostistachin, 17-Hydroxyagrosti- stachin, Ovatodiolide, 4,7-Oxycycloanisomelsäure, Baccharinoide B1 , B2, B3 und B7, Tubeimosid, Bruceanole A1B und C, Bruceantinoside C, Yadanzioside N, und P, Isodeoxyelephantopin, Tomenphantopin A und B, Coronarin A1B1C und D, Ursolsäure, Hyptatsäure A, Zeorin, Iso-Iridogermanal. Maytenfoliol, Effusantin A, Excisanin A und B, Longikaurin B, Sculponeatin C, Kamebaunin, Leukamenin A und B, 13,18-Dehydro-6-alpha-Senecioyloxychaparrin, Taxamairin A und B, Regenilol, Triptolid, Cymarin, Apocymarin, Aristolochsäure, Anopterin, Hydroxyanopterin, Anemonin, Protoanemonin, Berberin, Cheliburinchlorid, Cictoxin, Sinococulin, Bombrestatin A und B, Cudraisoflavon A, Curcumin, Dihydronitidin, Nitidinchlorid, 12- beta-Hydroxypregnadien-3,20-dion, Bilobol, Ginkgol, Ginkgolsäure, Helenalin, Indicin, Indicin-N-oxid, Lasiocarpin, Inotodiol, Glykosid 1a, Podophyllotoxin, Justicidin A und B, Larreatin, Malloterin, Mallotochromanol, Isobutyrylmallotochromanol, Maquirosid A, Marchantin A, Maytansin, Lycoridicin, Margetin, Pancratistatin, Liriodenin, Bispsrthenolidin, Oxoushinsunin, Aristolactam-All, Bisparthenolidin,
MFH-P01542WO04Anmeldung Periplocosid A, Ghalakinosid, Ursolsäure, Deoxypsorospermin, Psycorubin, Ricin A, Sanguinarin, Manwuweizsäure, Methylsorbifolin, Sphatheliachromen, Stizophyllin, Mansonin, Streblosid, Akagerin, Dihydrousambaraensin, Hydroxyusambarin, Strychnopentamin, Strychnophyllin, Usambarin, Usambarensin, Berberin, Liriodenin, Oxoushinsunin, Daphnoretin, Lariciresinol, Methoxylariciresinol, Syringaresinol, Umbelliferon, Afromoson, Acetylvismion B, Desacetylvismion A, Vismion A und B.
Erfindungswesentlich ist somit, dass die mindestens eine therapeutisch wirksame Substanz mit zellgängigen Nanopartikeln, die von Tumorzellen in hohem Maße durch Endozytose aufgenommen werden, verabreicht wird. Nanopartikel, wie sie beispielsweise auch in der DE 197 26 282 A beschrieben sind, werden von Tumorzellen im Vergleich zu Normalzellen vermehrt aufgenommen. Wie durch in- vitro Untersuchungen mit Eisenoxid-Nanpartikeln gezeigt werden konnte, werden in bestimmten Tumorzelllinien mehr als 1000 pg/Zelle Eisen in Form von Nanopartikeln aufgenommen. Dabei werden die Nanopartikel großvolumig in die Zellen eingeschleust, wie durch Elektronenmikroskopieuntersuchungen gezeigt werden konnte. Überraschend wurde nun durch in-vitro-Untersuchungen festgestellt, dass die Verabreichung von pharmazeutischen Zusammensetzungen aus diesen Nanopartikeln und mindestens einer therapeutisch wirksamen Substanz, insbesondere eines Zytostatikums oder Antikrebsmittels zu einer Wirksamkeitssteigerung der verabreichten Substanz führt. Dieser Effekt wurde auch beobachtet, wenn keine Bindung (kovalent, ionisch oder adsorptiv) zwischen den Nanopartikeln und dem Zytostatikum vorliegt. Eine Bindung zwischen Zytostatikum und Nanopartikel beeinflusst diese Ergebnisse nur dann, wenn das Zytostatikum durch die Bindungsreaktion seine Wirksamkeit verliert, oder wenn die Bindung so fest ist, dass nach intrazellulärer Aufnahme keine Freisetzung des Zytostatikums erfolgen kann.
Somit eignen sich die pharmazeutischen Zusammensetzungen aus den besagten Nanopartikeln und mindestens einer therapeutisch wirksamen Substanz hervorragend zur Prophylaxe und Behandlung von Krebserkrankungen, Geschwüren, Tumoren, Karzinomen sowie in der Proliferation gestörten Zellen.
Als Beispiele für Krebs- und Tumorarten, bei denen die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen aus Nanopartikel und therapeutischer Substanz eingesetzt werden können, sind zu nennen: Adenokarzinome, Aderhautmelanom, Akute Leukämie, Akustikusneurinom, Ampullenkarzinom, Analkarzinom, Astrozytome, Basaliom, Bauchspeicheldrüsenkrebs, Bindegewebstumor, Blasenkrebs, Bronchialkarzinom, Nicht-kleinzelliges Bronchialkarzinom, Brustkrebs, Burkitt-
MFH-P01542WO04 Anmeldung Lymphom, Corpuskarzinom, CUP-Syndrom, Dickdarmkrebs, Dünndarmkrebs, Dünndarmtumore, Eierstockkrebs, Endometriumkarzinom, Ependymom, Epithel- Krebsarten, Ewing-Tumoren, Gastrointestinale Tumoren, Gallenblasenkrebs, Gallenkarzinome, Gebärmutterkrebs, Gebärmutterhalskrebs, Glioblastome, Gynäkologische Tumoren, Hals-, Nasen- und Ohrentumoren, Hämatologische Neoplasien, Haarzell-Leukämie, Harnröhrenkrebs, Hautkrebs, Hirntumoren (Gliome), Hirnmetastasen, Hodenkrebs, Hypophysentumor, Karzinoide, Kaposi- Sarkom, Kehlkopfkrebs, Keimzellentumor, Knochenkrebs, kolorektales Karzinom, Kopf-Hals-Tumore (Tumore des Hals- Nasen- und Ohrenbereichs), Kolonkarzinom, Kraniopharyngeome, Krebs im Mundbereich und auf der Lippe, Leberkrebs, Lebermetastasen, Leukämie, Lidtumor, Lungenkrebs, Lymphdrüsenkrebs (Hodgkin/Non-Hodgkin), Lymphome, Magenkrebs, Malignes Melanom, malignes Neoplasma, Malignome des Magen-Darm-Traktes, Mammakarzinom, Mastdarmkrebs, Medulloblastome, Melanom, Meningeome, Morbus Hodgkin, Mycosis fungoides, Nasenkrebs, Neurinom, Neuroblastom, Nierenkrebs, Nierenzell- karzinome, Non-Hodgkin-Lymphome, Oligodendrogliom, Ösophaguskarzinom, osteolytische Karzinome, u. osteoplastische Karzinome, Osteosarkom, Ovarial- Karzinom, Pankreaskarzinom, Peniskrebs, Plasmozytom, Plattenepithelkarzinome des Kopfes und Halses, Prostatakrebs, Rachenkrebs, Rektumkarzinom, Retinoblastom, Scheidenkrebs, Schilddrüsenkarzinom, Schneeberger Krankheit, Speiseröhrenkrebs, Spinaliom, T-Zell-Lymphom (Mycosis fungoides), Thymom, Tubenkarzinom, Tumoren des Auges, Urethrakrebs, Urologische Tumoren, Urothelkarzinom, Vulvakrebs, Warzenbeteiligung, Weichteiltumoren, Weichteilsarkom, Wilms Tumor, Zervixkarzinom und Zungenkrebs.
Bevorzugt sind insbesondere solide Tumoren. Ferner sind bevorzugt
Prostatakarzinome, Gehimtumore, Sarkome, Zervix-Karzinome, Ovarialkarzinome, Mammakarzinome, Bronchialkarzinome, Melanome, Kopf-Hals Tumore, Ösophaguskarzinome, Rektumkarzinome, Pankreas-, Blasen- und Nierenkarzinome, Metastasen der Leber, des Gehirns und in Lymphknoten.
Insbesondere bevorzugt ist ferner die Anwendung und der Einsatz der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen zusammen mit der konventionellen Hyperthermie, Magnetflüssigkeitshyperthermie bzw. Thermotherapie mit magnetischen Flüssigkeiten, Strahlentherapie und/oder zusammen mit der herkömmlichen Chemotherapie. Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen unterstützen somit vorzugsweise auch die konventionellen Krebsbehandlungsmethoden.
MFH-P01542WO04Aπmeldung Demgemäß ist die vorliegende Erfindung auch auf Kombinationen aus einer erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzung und Hyperthermie, Thermotherapie, Strahlentherapie und/oder Chemotherapie gerichtet.
Als Beispiel für eine derartige Kombination sei die Verwendung einer erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzung zusammen mit der Magnetflüssigkeitshyperthermie bzw. Thermotherapie mit magnetischen Flüssigkeiten genannt. Dabei wirkt ein wechselndes Magnetfeld als externe Anregung, die im Falle von superparamagnetischen Nanopartikeln verschiedene Relaxationsprozesse der Nanopartikel in Gang setzt. Diese Prozesse führen u.A. zu einer Erwärmung der Nanopartikel und ihrer Umgebung. Diese durch das magnetische Wechselfeld in Gang gesetzten Prozesse werden erfindungsgemäß dazu benutzt, die entarteten Zellen zu erwärmen, wodurch die therapeutisch wirksame Substanz noch schneller zu einer Abtötung dieser Zelle führen kann.
Somit werden die pharmazeutischen Zusammensetzungen für die Behandlung als auch zur Prophylaxe von Krankheiten eingesetzt, welche sich durch entartete Zellspezies oder körperfremde Zellen auszeichnen und bei denen die Eigenschaften der erfindungsgemäßen Nanopartikel ausgenutzt werden können, zum einen zwischen fremden Zellen bzw. entarteten Zellen und gesunden körpereigenen Zellen zu diskriminieren und zum anderen therapeutisch wirksame Substanzen in diese Zellen einzuschleusen. Als entartete Zellen gelten insbesondere Krebszellen bzw. in ihrer Proliferation gestörte Zellen als auch stenotisches oder restenotisches Gewebe. Als körperfremde Zellen können insbesondere Bakterien genannt werden.
Durch die Eigenschaft der Nanopartikel, Wirkstoffe in entartete Zellen einschleusen zu können, wird die Wirksamkeit dieser Wirkstoffe gesteigerte. Kombiniert man zudem die Applikation der pharmazeutischen Zusammensetzung umfassend Nanopartikel und therapeutisch wirksame Substanz mit der Strahlentherapie oder Chemotherapie oder der Hyperthermie oder Hyperthermie und Chemotherapie oder Hyperthermie und Strahlentherapie, dann kann die Effektivität der Behandlung ein weiteres Mal gesteigert werden.
Erfindungsgemäß wird somit die Effektivität der Wirkstoffe infolge einer erhöhten lokalen, lokoregionalen oder intrazellulären Wirkstoffkonzentration gesteigert und die systemische Toxizität sowie Nebenwirkungen der therapeutisch wirksamen Substanz gemindert.
MFH-P01 S42WO04Anmeldung Figurenbeschreibung
Figur 1 zeigt RUSIRS1 Zellen 3h nach Zugabe von Mitomycin in 0,9% NaCI
Figur 2 zeigt RUSIRS1 Zellen 3h nach Zugabe von Mitomycin in 0,9% NaCI + Nanopartikel
Figur 3 zeigt RUSIRS1 Zellen 24h nach Zugabe von Mitomycin in 0,9% NaCI
Figur 4 zeigt RUSIRS1 Zellen 24h nach Zugabe von Mitomycin in 0,9% NaCI + Nanopartikel
Figur 5 zeigt RUSIRS1 Zellen 48h nach Zugabe von Mitomycin in 0,9% NaCI
Figur 6 zeigt RUSIRS1 Zellen 48h nach Zugabe von Mitomycin in 0,9% NaCI + Nanopartikel
Figur 7 zeigt RUSIRS1 Zellen 48h (Kontrolle)
Figur 8 zeigt BT20 Zellen nach 72 Std. als Kontrolle mit Cefamandol jedoch ohne Nanopartikel
Figur 9 zeigt BT20 Zellen nach 72 Std. Inkubation mit Nanopartikeln und
Cefamandol
Figur 10 zeigt BT20 Zellen nach 72 Std. Inkubation mit Nanopartikeln und
Cefamandol
Figur 11 zeigt WiDr Zellen nach 72 Std. als Kontrolle mit Cefamandol jedoch ohne Nanopartikel
Figur 12 zeigt WiDr Zellen nach 72 Std. Inkubation mit Nanopartikeln und Cefamandol
Figur 13 zeigt WiDr Zellen nach 72 Std. Inkubation mit Nanopartikeln und Cefamandol
MFH-P01 S42WO04Annπelduπg Beispiele
Beispiel 1 :
Wirksamkeitssteigerung des Zytostatikums Mitomycin (in-vitro)
Die Steigerung der Wirksamkeit von Mitomycin zur Bekämpfung von Tumorzellen ließ sich durch in-vitro Untersuchungen belegen. Die in-vitro Untersuchungen wurden mit der Glioblastom-Human-Zelllinie RUSIRS1 (Hirntumor) durchgeführt. Die Glioblastomzellen wurden wie in DE 199 12 798 C1 beschrieben aus dem Tumorgewebe eines Patienten entnommen und kultiviert. Zur Testung der Wirksamkeit des Mitomycin/Nanopartikel-Gemisches wurden jeweils 2x106 RUSIRS1 Zellen in einer 75 qcm Zellkulturflasche mit 25 ml Zellkulturmedium (D-MEM + 20% FBS + 1 ,2 ml Pyruvat) angesetzt. Zu dieser Zellsuspension wurden 136 μl Magnetflüssigkeit MFL AS M01 (Eisenoxid-Nanopartikel mit einer Beschichtung aus polykondensiertem N-(2-Aminoethyl)-3-(trimethoxysilyl)propylamin, Hersteller: MagForce Nanotechnologies GmbH, Berlin) (cFe = 2 mol/l) und 390 μl Mitomycin-Lsg. (1 mg/ml in 0.9 % NaCI) gegeben. Die Proben wurden vor der Zugabe zu den Zellen für 15 Minuten auf 37°C erwärmt und 10 Minuten bei RT stehen gelassen. Eine Vergleichsprobe mit Mitomycin, aber ohne Nanopartikel wurde auf die gleiche Weise angesetzt.
Der Einfluss der Nanopartikel auf die Wirksamkeit des Mitomycins lässt sich anhand der Abbildungen 1-6 erläutern. Zellen, die nur mit einer Mitomycin-Lsg. versetzt worden sind, zeigen erst nach 48 Stunden Inkubationszeit eine deutliche Schädigung. Im Gegensatz dazu zeigen Zellen, die mit dem Zytostatikum und den Partikeln inkubiert wurden, eine deutliche Schädigung schon nach 3 Stunden. Die Aufnahme der Eisenoxid-Nanopartikel in die Zellen lässt sich anhand der Braunfärbung der Zelle belegen. Vergleichsversuche haben gezeigt, dass die Nanopartikel alleine (ohne Mitomycin) ebenfalls aufgenommen werden, aber nicht zu einer derart hohen Zellschädigung führen. Eine schnelle Zellschädigung (nach 3h) tritt also nur auf, wenn Partikel und Mitomycin gleichzeitig vorhanden sind. Durch die Endozytose der Partikel wurde also auch Mitomycin eingeschleust, was zu der signifikanten Zellschädigung führte.
MFH-P01542WO04Anmelduπg Beispiel 2:
Wirksamkeitssteiqerunq des Antibiotikums Cefamandol (in-vitro)
Cefamandol (CAS Nr. 30034-03-8) wird zur Bekämpfung von bakteriellen Infektionen eingesetzt. Eine Wirksamkeit gegen Krebszellen wurde im Jahr 2000 überraschenderweise an Biopsie-Material von Lebermetastasen gefunden (MagForce Nanotechnologies). Das Potential dieser Substanz zur Bekämpfung von Krebszellen ist allerdings als eher gering einzustufen. Unsere Untersuchungen haben ergeben, dass eine Schädigung von Tumorzellen (in-vitro) in der Regel erst ab einer Konzentration von 0,5 mg/ml (Konz. im Zellkulturmedium) einsetzt. Die Wirksamkeit von Cefamandol zur Bekämpfung von Tumorzellen lässt sich jedoch bei gleichzeitiger Anwendung von Nanopartikeln drastisch erhöhen. Die in-vitro Untersuchungen wurden mit den Zelllinien BT20 (Mamma-Karzinom) und WiDr (Kolon-Karzinom) durchgeführt. Die Tumorzellen wurden wie in DE 199 12 798 C1 beschrieben aus dem Tumorgewebe eines Patienten entnommen und kultiviert. Zur Überprüfung der Wirksamkeit des Cefamandol/Nanopartikel- Gemisches wurden jeweils 2x106 Zellen in einer 75 qcm Zellkulturflasche mit 25 ml Zellkulturmedium (RPMI + 10% FBS + 1 ,2 ml Pyruvat für WiDr-Zellen, bzw. BME + 10% FBS + Pyruvat + 5 ml non. ess. AS + 5 ml Glutamin für BT20-Zellen) angesetzt. Zu dieser Zellsuspension wurden 136 μl Magnetflüssigkeit MFL AS M01 (Eisenoxid- Nanopartikel mit einer Beschichtung aus polykondensiertem N-(2-Aminoethyl)-3- (trimethoxysilyl)propylamin, (Hersteller: MagForce Nanotechnologies AG, Berlin) (cFe = 2 mol/l) und 390 μl Cefamandol-Lsg. (Stammlösung 1 mg/ml in 0.9 % NaCl) gegeben. Die Konzentration von Cefamandol im Zellkulturmedium (25 ml) betrug somit 0,016 mg/ml, also deutlich unterhalb der Wirksamkeitsschwelle des reinen Cefamandols.
Nach 72 h Inkubation war eine deutliche Zellschädigung festzustellen, wie die Abbildungen 7-12 belegen. Im Fall von BT20 waren nach 72 Std. 30,5 % der Zellen tot, im Fall von WiDr 24%. Weder durch Cefamandol in der gewählten Konzentration, noch durch die Nanopartikel alleine kommt es zum Absterben von Zellen (0% tote Zellen). Erst durch die Kombination von Cefamandol und Nanopartikeln ergibt sich durch die Einschleusung des Cefamandols in die Zellen diese signifikante Schädigung der Tumorzellen.
MFH-P01542WO04Anmeldung Beispiel 3:
Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung aus Nanopartikeln, pharmakologischem Wirkstoff und Lösungsmittel
Zu einem ml einer wässrigen Dispersion superparamagnetischer Eisenoxid- Nanopartikel (Eisenkonzentration 2 mol/l) werden ca. 1 mg Zytostatikum (oder 1 bis 10 mmol, vorzugsweise 2 bis 6 mmol Zytostatikum) gegeben.
Sollte das Zytostatikum nicht ausreichend wasserlöslich sein, so können Cosolventien in einer Menge bis zu 20VoI. % der Lösung eingesetzt werden. Als Cosolventien können DMSO, DMS, Ethanol, Essigsäureethylester oder andere physiologisch verträgliche Lösungsmittel eingesetzt werden.
Beispiel 4:
Zu einem ml der Magnetflüssigkeit MFL AS M01 (Eisenoxid-Nanopartikel mit einer Beschichtung aus polykondensiertem N-(2-Aminoethyl)-3-(trimethoxysilyl)propylamin, (Hersteller: MagForce Nanotechnologies AG, Berlin) (cFe = 2 mol/l) werden 1 mg Carmustin oder 1 mg Cisplatin oder 1 mg Epirubicin oder 1 ,5 mg Gemcitabin oder 1 mg Imatinib oder 0,8 mg Paclitaxel oder 1 ,2 mg Vinblastin oder 1 mg Vincristin oder 1 ,5 mg Adriamycin oder 1 mg Oxacillin oder 1 mg Tetracyclin oder 1 mg Temozolomid gegeben und durchmischt.
Beispiel 5:
Wirksamkeitssteiqerunq des Zytostatikums Mitoxantron (in-vitro)
Primäre Prostata-Karzinom-Zellen wurden wie in DE 199 12 798 C1 beschrieben kultiviert. Zur Überprüfung der Wirksamkeit eines Mitoxantron/Nanopartikel- Gemisches wurden jeweils 2x106 Zellen in einer 75 qcm Zellkulturflasche mit 25 ml Zellkulturmedium angesetzt. Zu dieser Zellsuspension wurden 136 μl Magnetflüssigkeit MFL AS M01 (Eisenoxid-Nanopartikel mit einer Beschichtung aus polykondensiertem N-(2-Aminoethyl)-3-(trimethoxysilyl)propylamin, (Hersteller: MagForce Nanotechnologies AG, Berlin) (cFe = 2 mol/l) und 390 μl Mitoxantron-Lsg. (Stammlösung 1 mg/ml in 0.9 % NaCI) gegeben. Nach 72 h Inkubation war eine deutliche Zellschädigung festzustellen. Ein ähnlicher Effekt lässt sich auch mit den Zytostatika Epirubicin und Docetaxel (gelöst in polyoxyethyliertem Sorbitol; Polysorbat 80) belegen.
MFH-P01542WO04An meidung Beispiel 6:
Wirksamkeitssteigerunq des Zytostatikums 5-Fluorouracil (in-vitro) Primäre Rektum-Karzinom-Zellen wurden wie in DE 199 12 798 C1 beschrieben kultiviert. Zur Überprüfung der Wirksamkeit eines 5-Fluorouracil/Nanopartikel- Gemisches wurden jeweils 2x106 Zellen in einer 75 qcm Zellkulturflasche mit 25 mi Zellkulturmedium angesetzt. Zu dieser Zellsuspension wurden 136 μl Magnetflüssigkeit MFL AS M01 (Eisenoxid-Nanopartikel mit einer Beschichtung aus polykondensiertem N-(2-Aminoethyl)-3-(trimethoxysilyl)propylamin, (Hersteller: MagForce Nanotechnologies AG, Berlin) (cFe = 2 moi/l) und 390 μl 5-Fluorouracil_Lsg. (Stammlösung 1 mg/ml in 0.9 % NaCI) gegeben. Nach 72 h Inkubation war eine deutliche Zellschädigung festzustellen. Ein ähnlicher Effekt lässt sich auch mit den Zytostatika Irinotecan, und Oxaliplatin belegen.
Beispiel 7:
Wirksamkeitssteigerunq des Zytostatikums Carboplatin (in-vitro)
Primäre Bronchialkarzinom-Zellen (nicht kleinzelliges Bronchialkarzinom; NSCLC) wurden wie in DE 199 12 798 C1 beschrieben kultiviert. Zur Überprüfung der Wirksamkeit eines Caboplatin/Nanopartikei-Gemisches wurden jeweils 2x106 Zellen in einer 75 qcm Zellkulturflasche mit 25 ml Zellkulturmedium angesetzt. Zu dieser Zellsuspension wurden 136 μl Magnetflüssigkeit MFL AS M01 (Eisenoxid- Nanopartikel mit einer Beschichtung aus polykondensiertem N-(2-Aminoethyl)-3- (trimethoxysilyl)propylamin, (Hersteller: MagForce Nanotechnologies AG, Berlin) (cFe = 2 mol/l) und 390 μl Carboplatin-Lsg. (Stammlösung 1 mg/ml in 0.9 % NaCI) gegeben. Nach 72 h Inkubation war eine deutliche Zellschädigung festzustellen. Ein ähnlicher Effekt lässt sich auch mit den Zytostatika Gemcytabin und Docetaxel (gelöst in polyoxyethyliertem Sorbitol; Polysorbat 80) belegen.
Beispiele 8 - 196:
Entsprechend der Versuchsdurchführung gemäß Beispiel 2 wurden die 7 Zelllinien a) Glioblastom-Human-Zelllinie RUSIRS1 , b) Mamma-Karzinom Zeillinien BT20, c) Kolon-Karzinom Zellline WiDr, d) Bronchial-karzinom-Zellen NSCLC, e) Rektum- Karzinom-Zellen und f) Prostata-karzinom Zellline DU 145 mit den in folgender Tabelle 1 genannten Wirkstoffen in-vitro getestet.
In allen Fällen zeigte sich eine Aktivitätssteigerung des Zytostytikums. Die aktivitätssteigemde Wirkung wird hinter dem jeweiligen Zytostatikum in Klammern
MFH-P01542WO04Anmeldung angegeben, wobei (+) eine Steigerung von ca. 5% bis 80% und (++) eine Aktivitätssteigerung von 80% bis 500% bedeutet.
MFH-P01542WO04Aπmeldung
MFH-P01542WO04Anmeld_ng

Claims

Patentansprüche
1. Pharmazeutische Zusammensetzung bestehend aus Nanopartikeln mit einer hohen Affinität zu entarteten Zellen, mindestens einer therapeutischen Substanz und mindestens einem pharmakologisch verträglichen Träger, Hilfsstoff und/oder Lösungsmittel.
2. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1 , wobei die Nanopartikel eine positive Oberflächenladung aufweisen.
3. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, wobei die Nanopartikel eine Beschichtung aus positiv polarisierbaren und/oder positiv ionisierbaren Stoffen aufweisen.
4. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der vorherigen Ansprüche, wobei die positiv polarisierbaren und/oder positiv ionisierbaren Stoffe Aminogruppen und/oder Stickstoffatome aufweisen.
5. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der vorherigen Ansprüche, wobei die Nanopartikel aus Eisenoxid, Magnetit, Maghemit oder M(ll)Fe2θ4 bestehen, worin M für Zn, Cu, Co, Ni, Cd, Ba oder Mn steht.
6. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der vorherigen Ansprüche, wobei es sich bei der mindestens einen therapeutischen Substanz um ein Zytostatikum, zytotoxischen Wirkstoff, antiproliverativen Wirkstoff, antiphlogistischen Wirkstoff, antimigrativen Wirkstoff, antiangiogenen Wirkstoff, antiinflammatorischen Wirkstoff, antibakteriellen Wirkstoff oder einen Mikrotubuli-Inhibitor handelt.
7. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der vorherigen Ansprüche, wobei die mindestens eine therapeutische Substanz ausgewählt wird aus der Gruppe umfassend: Actinomycin D, Aminoglutethimid, Amsacrin, Anastrozol, Antagonisten von Purin- und Pyrimidin-Basen, Anthracycline, Aromatasehemmer, Asparaginase, Antiöströgene, Bexaroten, Bleomycin, Buselerin, Busulfan, Camptothecin-Derivate, Capecitabin, Carboplatin,
Carmustin, Chlorambucil, Cisplatin, Cladribin, Cyclophosphamid, Cytarabin, Cytosinarabinosid, alkylierende Cytostatika, Dacarbazin, Dactinomycin, Daunorubicin, Docetaxel, Doxorubicin (Adriamycin), Doxorubicin lipo, Epirubicin, Estramustin, Etoposid, Exemestan, Fludarabin, Fluorouracil,
MFH-P01542WO04Anmeldung Folsäureantagonisten, Formestan, Gemcitabin, Glucocorticoide, Goselerin, Hormone und Hormonantagonisten, Hycamtin, Hydroxyharnstoff, Idarubicin, Ifosfamid, Imatinib, Irinotecan, Letrozol, Leuprorelin, Lomustin, Melphalan, Mercaptopurin, Methotrexat, Miltefosin, Mitomycine, Mitosehemmstoffe, Mitoxantron, Nimustine, Oxaliplatin, Paclitaxei, Pentostatin, Procarbazin,
Tamoxifen, Temozolomid, Teniposid, Testolacton, Thiotepa, Thioguanin, Topoisomerase-Inhibitoren, Topotecan, Treosulfan, Tretinoin, Triptorelin, Trofosfamide, Vinblastin, Vincristin, Vindesin, Vinorelbin, zytostatisch wirksame Antibiotika, Actinomycin D, Aminoglutethimid, Anthracycline, Aromatasehemmer, Antiöströgene, Buselerin, Folsäureantagonisten, Goselerin,
Hormonantagonisten, Hycamtin, Hydroxyharnstoff, Letrozol, Mitosehemmstoffe, Tamoxifen, Testolacton, Sirolimus (Rapamycin), Everolimus, Pimecrolimus, Somatostatin, Tacrolimus, Roxithromycin, Dunaimycin, Ascomycin, Bafilomycin, Erythromycin, Midecamycin, Josamycin, Concanamycin, Clarithromycin, Troleandomycin, Folimycin, Cerivastatin, Simvastatin, Lovastatin, Fluvastatin,
Rosuvastatin, Atorvastatin, Pravastatin, Pitavastatin, 4-
Hydroxyoxycyclophosphamid, Tropfosfamid, Bendamustin, Thymosin α-1 , Aclarubicin, Fludarabin-5'-dihydrogenphosphat, Antagonisten von Purin- und Pyrimidin-Basen, Hydroxycarbamid, Aldesleukin, Pegasparase, Letrozol, Aminoglutethemid, Adriamycin, Azithromycin, Spiramycin, Cepharantin,
Epothilone A und B, Mitoxanthrone, Azathioprin, Mycophenolatmofetil, c-myc- Antisense, b-myc-Antisense, Betulinsäure, Camptothecin, Camptothecin- Derivate, Melanocyte-stimulating hormon (α-MSH), aktiviertes Protein C, IL1-ß- Inhibitor, Fumarsäure und deren Ester, Dermicidin, Calcipotriol, Tacalcitol, Lapachol, ß-Lapachon, Podophyllotoxin, Betulin, Podophyllsäure-2- ethylhydrazid, Molgramostim (rhuGM-CSF), Peginterferon α-2b, Lanograstim (r- HuG-CSF), Filgrastim, Macrogol, Dacarbazin, Letrozol, Goserelin, Chephalomannin, Trastuzumab, Exemestan, Basiliximab, Daclizumab, Selectin (Cytokinantagonist), CETP-Inhibitor, Cadherine, Cytokininhibitoren, COX-2- Inhibitor, NFkB, Angiopeptin, Ciprofloxacin, Camptothecin, Fluroblastin, bFGF-
Antagonisten, Probucol, Prostaglandine, 1 ,11-Dimethoxycanthin-6-on, 1- Hydroxy-11-Methoxycanthin-6-on, Scopolectin, Colchicin, NO-Donoren, Pentaerythrityltetranitrat, Syndnoeimine, S-Nitrosoderivate, Tamoxifen, Staurosporin, ß-Estradiol, α-Estradiol, Estriol, Estron, Ethinylestradiol, Fosfestrol, Medroxyprogesteron, Estradiolcypionate, Estradiolbenzoate,
Tranilast, Kamebakaurin, Verapamil, Tyrosin-Kinase-Inhibitoren (Tyrphostine), Cyclosporin A, Paclitaxei und dessen Derivate wie 6-α-Hydroxy-Paclitaxel, Baccatin, Taxotere, Mofebutazon, Acemetacin, Diclofenac, Lonazolac, Dapson, o-Carbamoylphenoxyessigsäure, Lidocain, Ketoprofen, Mefenaminsäure,
MFH-P01542WO04Aπmelduπg Piroxicam, Meloxicam, Chloroquinphosphat, Penicillamin, Hydroxychloroquin, Auranofin, Natriumaurothiomalat, Oxaceprol, Ceiecoxib, ß-Sitosterin, Ademetionin, Myrtecain, Polidocanol, Nonivamid, Levomenthol, Benzocain, Aescin, Ellipticin, D-24851 (Calbiochem), Colcemid, Cytochalasin A-E, Indanocine, Nocadazol, Bacitracin, Vitronectin-Rezeptor Antagonisten,
Azelastin, freie Nukleinsäuren, Nukleinsäuren in Virenüberträger inkorporiert, DNA- und RNA-Fragmente, Plasminogen-Aktivator lnhibitor-1 , Plasminogen- Aktivator lnhibitor-2, Antisense Oligonucleotide, VEGF-Inhibitoren, IGF-1 , Wirkstoffe aus der Gruppe der Antibiotika wie Cefadroxil, Cefazolin, Cefaclor, Cefotixin, Tobramycin, Gentamycin, Penicilline, ' Dicloxacillin, Oxacillin,
Sulfonamide, Metronidazol, Antithrombotika, Argatroban, Aspirin, Abciximab, synthetisches Antithrombin, Bivalirudin, Coumadin, Enoxoparin, Gpllb/Illa- Plättchenmembranrezeptor, Faktor Xa-lnhibitor Antikörper, Heparin, Hirudin, r- Hirudin, PPACK, Protamin, Prourokinase, Streptokinase, Warfarin, Urokinase, Vasodilatoren, Dipyramidol, Trapidil, Nitroprusside, PDGF-Antagonisten,
Triazolopyrimidin, Seramin, ACE-Inhibitoren, Captopril, Cilazapril, Lisinopril, Enalapril, Losartan, Thioproteaseinhibitoren, Prostacyclin, Vapiprost, Interferon α, ß und Y, Histaminantagonisten, Serotoninblocker, Apoptoseinhibitoren, Apoptoseregulatoren, NF-kB oder Bcl-xL-Antisense-Oligonukleotide, Halofuginon, Nifedipin, Tocopherol Tranirast, Molsidomin, Teepolyphenole,
Epicatechingallat, Epigallocatechingallat, Boswellinsäuren und ihre Derivate, Leflunomid, Anakinra, Etanercept, Sulfasalazin, Etoposid, Dicloxacyllin, Tetracyclin, Triamcinolon, Mutamycin, Procainimid, Retinolsäure, Quinidin, Disopyrimid, Flecainid, Propafenon, Sotolol, Amidoron., natürliche und synthetisch hergestellte Steroide wie Bryophyllin A, Inotodiol, Maquirosid A,
Ghalakinosid, Mansonin, Streblosid, Hydrocortison, Betamethason, Dexamethason, Fenoporfen, Ibuprofen, Indomethacin, Naproxen, Phenylbutazon, Acyclovir, Ganciclovir, Zidovudin, Antimykotika, Clotrimazol, Flucytosin, Griseofulvin, Ketoconazol, Miconazol, Nystatin, Terbinafin, Chloroquin, Mefloquin, Quinin, natürliche Terpenoide, Hippocaesculin,
Barringtogenol-C21-angelat, 14-Dehydroagrostistachin, Agroskerin,
Agrostistachin, 17-Hydroxyagrosti-stachin, Ovatodiolide, 4,7-
Oxycycloanisomelsäure, Baccharinoide B1 , B2, B3 und B7, Tubeimosid, Bruceanole A1B und C, Bruceantinoside C, Yadanzioside N, und P, Isodeoxyelephantopin, Tomenphantopin A und B, Coronarin A1B1C und D,
Ursolsäure, Hyptatsäure A, Zeorin, Iso-Iridogermanal. Maytenfoliol, Effusantin A, Excisanin A und B, Longikaurin B, Sculponeatin C, Kamebaunin, Leukamenin A und B, 13,18-Dehydro-6-alpha-Senecioyloxychaparrin, Taxamairin A und B, Regenilol, Triptolid, Cymarin, Apocymarin, Aristolochsäure, Anopterin,
MFH-P01542WO04Anme!d_πg Hydroxyanopterin, Anemonin, Protoanemonin, Berberin, Cheliburinchlorid, Cictoxin, Sinococulin, Bombrestatin A und B, Cudraisoflavon A, Curcumin, Dihydronitidin, Nitidinchlorid, 12-beta-Hydroxypregnadien-3,20-dion, Bilobol, Ginkgol, Ginkgolsäure, Helenalin, Indicin, Indicin-N-oxid, Lasiocarpin, Inotodiol, Glykosid 1a, Podophyllotoxin, Justicidin A und B, Larreatin, Malloterin,
Mallotochromanol, Isobutyrylmallotochromanol, Maquirosid A, Marchantin A, Maytansin, Lycoridicin, Margetin, Pancratistatin, Liriodenin, Bispsrthenolidin, Oxoushinsunin, Aristolactam-All, Bisparthenolidin, Periplocosid A, Ghalakinosid, Ursolsäure, Deoxypsorospermin, Psycorubin, Ricin A, Sanguinarin, Manwuweizsäure, Methylsorbifolin, Sphatheliachromen, Stizophyllin, Mansonin,
Streblosid, Akagerin, Dihydrousambaraensin, Hydroxyusambarin, Strychnopentamin, Strychnophyllin, Usambarin, Usambarensin, Berberin, Liriodenin, Oxoushinsunin, Daphnoretin, Lariciresinol, Methoxylariciresinol, Syringaresinol, Umbelliferon, Afromoson, Acetylvismion B, Desacetylvismion A, Vismion A und B..
8. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der vorherigen Ansprüche, wobei die pharmazeutische Zusammensetzung in einer zur Injektion oder
Infusion geeigneten Formulierung vorliegt.
9. Verwendung der pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß eines der Ansprüche 1 - 8 zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Krebserkrankungen.
10. Verwendung der pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß eines der Ansprüche 1 - 8 zur Steigerung der Aktivität von Antikrebsmitteln.
11. Verwendung der pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß eines der Ansprüche 1 - 8 zur Reduktion der Nebenwirkungen von Antikrebsmitteln.
12. Verwendung der pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß eines der Ansprüche 1 - 8 zur Unterstützung der konventionellen Krebsbehandlungsmethoden.
13. Verwendung der pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß eines der Ansprüche 1 - 8 zur Einschleusung von Antikrebsmitteln in Zellen.
14. Kombination aus der pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß eines der Ansprüche 1 - 8 und der Hyperthermie, Magnetflüssigkeitshyperthermie, Thermotherapie mit magnetischen Flüssigkeiten, Strahlentherapie und/oder Chemotherapie.
MFH-P01542WO04Anme!dung
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL424773A1 (pl) * 2018-03-06 2019-09-09 Nanovelos Spółka Akcyjna Enkapsulowana polisacharydem antracyklina do zastosowania w leczeniu nowotworów
WO2021124028A1 (es) 2019-12-18 2021-06-24 Universidad De Guadalajara Nanopartículas para el tratamiento del cáncer

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102005039579B4 (de) 2005-08-19 2022-06-30 Magforce Ag Verfahren zur Einschleusung von therapeutischen Substanzen in Zellen
US8093038B2 (en) 2007-09-17 2012-01-10 Illinois Institute Of Technology Apparatus and method for encapsulating pancreatic cells
DE102008003615A1 (de) * 2008-01-09 2009-07-16 Magforce Nanotechnologies Ag Magnetische Transducer
DE102008008522A1 (de) 2008-02-11 2009-08-13 Magforce Nanotechnologies Ag Implantierbare Nanopartikel-enthaltende Produkte
US8236284B1 (en) 2008-04-02 2012-08-07 University Of Central Florida Research Foundation, Inc. Multimodal, multifunctional polymer coated nanoparticles
US9233110B2 (en) 2008-05-09 2016-01-12 Omathanu P. Perumal Protein nanocarriers for topical delivery
AU2009329024A1 (en) * 2008-11-17 2010-06-24 Laila Pharmaceuticals Pvt. Ltd. Curcuminoids and its metabolites for the application in ocular diseases
DK2379096T3 (da) 2008-12-19 2019-11-25 Baxalta GmbH TFPI-inhibitorer og fremgangsmåder til anvendelse
US8450275B2 (en) 2010-03-19 2013-05-28 Baxter International Inc. TFPI inhibitors and methods of use
AU2008365627A1 (en) * 2008-12-23 2011-07-14 Board Of Regents Of The University Of Texas System Inflammation targeting particles
PL222496B1 (pl) 2009-04-10 2016-08-31 Inst Biochemii I Biofizyki Pan Wektorowa cząsteczka wirusopodobna, sposób jej wytwarzania oraz kompozycja farmaceutyczna zawierająca wektorową cząsteczkę wirusopodobną
CN101885905B (zh) * 2009-05-12 2013-08-21 无锡纳奥新材料科技有限公司 聚合物/无机纳米粒子复合纳米颗粒及其制备和用途
CN101991597B (zh) * 2009-08-29 2012-07-04 鲁南制药集团股份有限公司 一种口服药物组合物在制备预防或治疗肾脏疾病药物中的用途
CN101991596B (zh) * 2009-08-29 2012-02-01 鲁南制药集团股份有限公司 一种口服药物组合物在制备预防或治疗冠心病的药物中的用途
US9095629B2 (en) * 2009-10-30 2015-08-04 Northwestern University Magnetic nanostructures as theranostic agents
EP2528601A1 (de) 2010-01-26 2012-12-05 Yissum Research Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Ltd. Zusammensetzungen und verfahren zur prävention und behandlung von lungenhochdruck
KR101668029B1 (ko) 2010-04-16 2016-10-20 코웨이 주식회사 라파콜을 유효성분으로 포함하는 주름개선용 화장료 조성물
EP2566474B1 (de) 2010-05-03 2017-11-15 Teikoku Pharma USA, Inc. Nichtwässrige taxan-pro-emulsionsformulierungen sowie verfahren zu ihrer herstellung und verwendung
WO2011146819A2 (en) * 2010-05-20 2011-11-24 Dmd Therapies, Llc METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATMENT NF-κB-MEDIATED AND α7 INTEGRIN-SUPPRESSED DISEASES
JP2013526616A (ja) 2010-05-26 2013-06-24 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 磁性ナノ粒子
EP2450058A1 (de) * 2010-08-23 2012-05-09 Matera Lda Antimikrobielle Nanopartikelkonjugate
WO2012081038A2 (en) * 2010-12-17 2012-06-21 Godavari Biorefineries Limited Anticancer compounds and targeting cancer with the same
JP5844902B2 (ja) 2011-08-10 2016-01-20 マグフォース アーゲー アルコキシシランでコーティングされた磁性ナノ粒子の凝集化
US20130178691A1 (en) * 2012-01-11 2013-07-11 Petr Saha Electrically lossy magnetic liquid composition for controlled tissue heating
US20130195752A1 (en) 2012-02-01 2013-08-01 Regents Of The University Of Minnesota Functionalized nanoparticles and methods of use thereof
HUE046572T2 (hu) 2012-03-21 2020-03-30 Baxalta GmbH TFPI inhibitorok és alkalmazási eljárások
EP3939572B1 (de) 2012-04-12 2024-03-27 Yale University Trägersubstanz zur kontrollierten abgabe verschiedener pharmazeutischer wirkstoffe
WO2013169739A1 (en) * 2012-05-07 2013-11-14 The General Hospital Corporation Novel compositions and uses of anti-hypertension agents for cancer therapy
TWI583395B (zh) * 2012-05-22 2017-05-21 長庚大學 A mixture of cells for promoting cell uptake and a preparation method thereof
DE102012213839B4 (de) * 2012-08-03 2017-06-14 Leibniz-Institut Für Festkörper- Und Werkstoffforschung Dresden E.V. Verfahren zur kontrollierten Bewegung von Objekten in flüssigen Medien
JO3685B1 (ar) 2012-10-01 2020-08-27 Teikoku Pharma Usa Inc صيغ التشتيت الجسيمي للتاكسين غير المائي وطرق استخدامها
WO2014071506A1 (en) * 2012-11-09 2014-05-15 Bioniche Life Sciences Inc. Compounds for reducing glucocorticoids, and methods of treatment thereof
CN103239430B (zh) * 2013-05-08 2015-01-07 首都医科大学 拉帕醇在制备预防和/或治疗恶性胶质瘤的产品中的应用
RU2554219C2 (ru) * 2013-05-17 2015-06-27 Общество с ограниченной ответственностью "ТехноМикрон" Способ лазерной термотерапии кожи и ее придатков, фармацевтическая композиция для него и их применение
AU2014273043B2 (en) 2013-05-30 2019-02-07 Curadigm Sas Pharmaceutical composition, preparation and uses thereof
CN103820492A (zh) * 2013-10-29 2014-05-28 王深明 功能化纳米儿茶素的基因导入材料及其制备方法
CA2987519A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Yale University Delivery vehicles
RU2548722C1 (ru) * 2013-12-06 2015-04-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Противоопухолевое лекарственное средство пролонгированного действия на основе противоопухолевого препарата, ингибитора синтеза эстрогенов - анастрозола
US9381171B2 (en) 2013-12-19 2016-07-05 Samsung Electronics Co., Ltd. Composition including dapsone for preventing or treating side effect of steroid in subject and use of the composition
US9320749B2 (en) 2014-01-06 2016-04-26 University Of Wyoming Nanoparticle delivery system for targeted anti-obesity treatment
CN103877029B (zh) * 2014-03-10 2015-10-21 同济大学 一种磁性载5-氟尿嘧啶聚乳酸羟基乙酸共聚物材料的制备方法
EP2921179A1 (de) * 2014-03-17 2015-09-23 Fundación Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares Carlos III (CNIC) Mizellare Nanopartikel enthaltende antitumorale Glykoside
WO2015148971A2 (en) * 2014-03-27 2015-10-01 Research Foundation Of The City University Of New York Method for detecting or treating triple negative breast cancer
US9687455B2 (en) 2014-08-14 2017-06-27 John Daniel Dobak Sodium tetradecyl sulfate formulations for treatment of adipose tissue
DK3223796T3 (da) 2014-11-25 2021-09-27 Curadigm Sas Farmaceutiske sammensætninger, fremstilling og anvendelser deraf
PT3236934T (pt) 2014-11-25 2024-08-01 Curadigm Sas Composição farmacêutica, preparação e suas utilizações
PT3229776T (pt) 2014-11-25 2023-08-17 Curadigm Sas Composição farmacêutica combinando pelo menos duas nanopartícuas distintas e um composto farmacêutico, preparaçâo e suas utilizações
US9351945B1 (en) 2015-02-27 2016-05-31 John Daniel Dobak, III Reduction of adipose tissue
US9795624B2 (en) 2015-05-04 2017-10-24 Research Foundation Of The City University Of New York Cationic polymers as co-drugs for chemotherapeutic agents
CN107708668A (zh) 2015-05-28 2018-02-16 纳米生物技术公司 用作治疗性疫苗的纳米粒子
CN107007595B (zh) * 2015-12-01 2019-01-25 哈尔滨商业大学 水鬼蕉新碱a在制备抗炎药物中的应用
CN106074562B (zh) * 2016-06-16 2018-10-09 武汉大学 桦木酸作为机体镉清除剂的应用
CA3056797A1 (en) 2017-03-16 2018-09-20 Children's Medical Center Corporation Engineered liposomes as cancer-targeted therapeutics
CR20190524A (es) 2017-05-19 2020-01-10 Lunella Biotech Inc Antimitoscinas: inhibidores específicos de la biogénesis mitocondrial para erradicar células madre cancerosas
KR101970808B1 (ko) * 2017-07-21 2019-04-22 스노우화이트팩토리(주) 화합물이 직접 결합된 마그헤마이트 나노입자 및 이의 제조방법
KR102004333B1 (ko) * 2017-12-13 2019-07-26 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 내부에 공동을 가지는 구형 나노입자 및 그 용도
RU2665922C1 (ru) * 2018-04-24 2018-09-05 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Федеральный исследовательский центр "Казанский научный центр Российской академии наук" Фосфониевые соли на основе бетулиновой кислоты, обладающие цитотоксической активностью в отношении аденокарциномы предстательной железы
MA52347A (fr) * 2018-04-24 2021-03-03 Amgen Inc Procédé de fabrication de compositions pharmaceutiques injectables
EP3801678A4 (de) 2018-06-11 2022-04-06 EpicentRx, Inc. Infusionsvorrichtungen, systeme und verfahren
US11464858B2 (en) 2018-06-23 2022-10-11 University Of Wyoming Magnetic nanoparticle delivery system for pain therapy
WO2020194034A1 (en) 2019-03-27 2020-10-01 Universidad De Chile Nanoparticle of chitosan and cyclodextrin containing encapsulated interferon and pharmaceutical compositions that contain it
CN110024721B (zh) * 2019-04-29 2021-09-21 中国水产科学研究院北戴河中心实验站 一种诱导鲆鲽鱼类卵巢生殖细胞凋亡的方法
CN110201216B (zh) * 2019-07-24 2021-10-08 中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院 一种用于贯穿伤快速止血材料及其制备方法
KR20220113996A (ko) 2019-12-11 2022-08-17 에피센트알엑스, 인코포레이티드 약제 주입 디바이스, 시스템 및 방법
CN110935018A (zh) * 2019-12-23 2020-03-31 新乡医学院 治疗乳腺癌的药物或组合物
CN111494382A (zh) * 2020-05-28 2020-08-07 吉林大学 氯化两面针碱的新应用
CN112410295B (zh) * 2020-11-20 2023-07-28 华东理工大学 一种控制细胞间相互作用的细胞表面工程方法及其应用
CN112274525B (zh) * 2020-12-04 2022-04-08 遵义医科大学 一种化疗药物组合物及其应用
CN113274396A (zh) * 2021-06-09 2021-08-20 重庆医科大学 植物固醇在制备预防或治疗肺癌药物中的应用
CN113711960A (zh) * 2021-09-30 2021-11-30 北部湾大学 一种降低海水珍珠贝异种移植免疫排斥的方法
CN116763756A (zh) * 2022-10-11 2023-09-19 中国科学院化学研究所 一种脂质纳米颗粒及其制备方法和应用
CN116271028A (zh) * 2023-03-14 2023-06-23 浙江省人民医院 一种免疫调节性斑蝥素磁响应纳米药物及制备方法
CN116143705B (zh) * 2023-04-11 2023-06-30 齐泽(云南)生物科技有限公司 一种药用化合物

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006089290A1 (en) * 2005-02-18 2006-08-24 Abraxis Bioscience Inc.. Combinations and modes of administration of therapeutic agents and combination therapy

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5554638A (en) * 1993-05-24 1996-09-10 Duke University Methods for improving therapeutic effectiveness of agents for the treatment of solid tumors and other disorders
US5411730A (en) * 1993-07-20 1995-05-02 Research Corporation Technologies, Inc. Magnetic microparticles
DE19515820A1 (de) 1995-04-29 1996-10-31 Inst Neue Mat Gemein Gmbh Verfahren zur Herstellung schwach agglomerierter nanoskaliger Teilchen
US6147205A (en) * 1995-12-15 2000-11-14 Affymetrix, Inc. Photocleavable protecting groups and methods for their use
DE19614136A1 (de) * 1996-04-10 1997-10-16 Inst Neue Mat Gemein Gmbh Verfahren zur Herstellung agglomeratfreier nanoskaliger Eisenoxidteilchen mit hydrolysebeständigem Überzug
DE19714949A1 (de) 1997-04-10 1998-10-15 Inst Neue Mat Gemein Gmbh Verfahren zum Versehen einer metallischen Oberfläche mit einer glasartigen Schicht
DE19726282A1 (de) * 1997-06-20 1998-12-24 Inst Neue Mat Gemein Gmbh Nanoskalige Teilchen mit einem von mindestens zwei Schalen umgebenen eisenoxid-haltigen Kern
WO2000006244A2 (en) * 1998-07-30 2000-02-10 Hainfeld James F Loading metal particles into cell membrane vesicles and metal particle use for imaging and therapy
DE19912798C1 (de) * 1999-03-10 2000-02-17 Andreas Jordan Verfahren zur Kultivierung von Krebszellen aus Humangewebe und Vorrichtung zur Aufbereitung von Gewebeproben
DE19912502A1 (de) * 1999-03-19 2000-09-21 Inst Neue Mat Gemein Gmbh Nanoskalige Teilchen, Komplexe mit Polynukleotiden und deren Verwendung
DE19940220B4 (de) * 1999-08-19 2007-05-03 Magforce Nanotechnologies Ag Medizinisches Präparat zur Behandlung von Arthrose, Arthritis und anderen rheumatischen Gelenkerkrankungen
US6530944B2 (en) * 2000-02-08 2003-03-11 Rice University Optically-active nanoparticles for use in therapeutic and diagnostic methods
DE10020376A1 (de) * 2000-04-26 2001-11-08 Inst Zelltechnologie E V Dynamische Marker
DE10059151C2 (de) 2000-11-29 2003-10-16 Christoph Alexiou Magnetische Partikel zur zielgerichteten regionalen Therapie und Verwendung derselben
JPWO2003066644A1 (ja) * 2002-02-04 2005-05-26 財団法人理工学振興会 フェライト結合有機物質及びその製造方法
JP2004305055A (ja) 2003-04-04 2004-11-04 Hitachi Maxell Ltd 磁性複合粒子およびその製造方法
WO2005044224A2 (en) * 2003-05-02 2005-05-19 Case Western Reserve University Drug delivery system based on polymer nanoshells
US20050090732A1 (en) * 2003-10-28 2005-04-28 Triton Biosystems, Inc. Therapy via targeted delivery of nanoscale particles
DE102005016873A1 (de) * 2005-04-12 2006-10-19 Magforce Nanotechnologies Ag Nanopartikel-Wirstoff-Konjugate
DE102005039579B4 (de) 2005-08-19 2022-06-30 Magforce Ag Verfahren zur Einschleusung von therapeutischen Substanzen in Zellen

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006089290A1 (en) * 2005-02-18 2006-08-24 Abraxis Bioscience Inc.. Combinations and modes of administration of therapeutic agents and combination therapy

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL424773A1 (pl) * 2018-03-06 2019-09-09 Nanovelos Spółka Akcyjna Enkapsulowana polisacharydem antracyklina do zastosowania w leczeniu nowotworów
WO2021124028A1 (es) 2019-12-18 2021-06-24 Universidad De Guadalajara Nanopartículas para el tratamiento del cáncer

Also Published As

Publication number Publication date
JP2009504688A (ja) 2009-02-05
CN102716068A (zh) 2012-10-10
CN101299998A (zh) 2008-11-05
EP2266544B1 (de) 2017-06-28
AU2006281783B2 (en) 2011-07-14
WO2007019845B1 (de) 2007-06-14
IL189079A0 (en) 2008-08-07
KR20080034925A (ko) 2008-04-22
RU2008110324A (ru) 2009-09-27
ES2635493T3 (es) 2017-10-04
WO2007019845A3 (de) 2007-04-19
DE102005039579A1 (de) 2007-02-22
CA2619278C (en) 2013-08-06
US20160067338A1 (en) 2016-03-10
BRPI0614835A2 (pt) 2012-12-04
DE102005039579B4 (de) 2022-06-30
PL2266544T3 (pl) 2017-10-31
PT2266544T (pt) 2017-08-16
IL189079A (en) 2015-08-31
WO2007019845A8 (de) 2008-06-19
US20120225128A1 (en) 2012-09-06
WO2007019845A2 (de) 2007-02-22
KR20110094222A (ko) 2011-08-22
DK2266544T3 (en) 2017-10-02
US20080187595A1 (en) 2008-08-07
JP5512968B2 (ja) 2014-06-04
AU2006281783A1 (en) 2007-02-22
CA2619278A1 (en) 2007-02-02
EP2266544A3 (de) 2012-08-08
EP2266544A2 (de) 2010-12-29
RU2480201C2 (ru) 2013-04-27
US9827312B2 (en) 2017-11-28

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