CN101991596B - 一种口服药物组合物在制备预防或治疗冠心病的药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药领域，具体涉及一种口服药物组合物在制备预防或治疗冠心病的药物中的用途。本发明提供的药物组合物，它包含两种活性成分，即瑞舒伐他汀或其可药用盐和肝素、低分子肝素或其可药用盐。通过动物实验证实了本发明提供的药物组合物对大鼠的冠心病具有很好的预防和治疗作用。本发明提供的药物组合物可以通过常规制剂技术制备成固体口服制剂。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种口服药物组合物在制备预防或治疗冠心病的药物中的用途。
背景技术
冠心病是冠状动脉粥样硬化性心脏病的简称，冠状动脉供应心脏自身血液，冠状动脉发生严重粥样硬化或痉挛，使冠状动脉狭窄或闭塞，导致心肌缺血缺氧或梗塞的一种心脏病。主要临床表现是心肌缺血、缺氧而导致的心绞痛、心律失常，严重者可发生心肌梗塞，使心肌大面积坏死，危及生命。如何预防和治疗冠心病是广大医学工作者共同关注的问题。目前，临床上对于冠心病的治疗没有非常有效的药物，因此，开发这方面的新药十分必要。
瑞舒伐他汀(Rosuvastatin)是国内外进行了广泛研究并已在多国上市的HMG-CoA还原酶抑制剂，它通过在体内选择性地抑制胆固醇合成过程中的限速酶HMG-CoA还原酶，使胆固醇的合成减少，也使低密度脂蛋白受体合成增加，主要作用部位在肝脏，结果使血胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平降低，由此对动脉粥样硬化和冠心病的防治产生作用。另外，瑞舒伐他汀还能降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。
肝素类药物属粘多糖类药物，由己糖醛酸、氨基己糖及它们的硫酸化、乙酰化等衍生物为结构单位构成的一类物质，包括肝素、低分子肝素和超低分子肝素。肝素提自于猪、牛、羊等动物的小肠粘膜、肺等组织，分子量分布为3000Da-50000Da，平均分子量在15000Da左右。低分子肝素为经分级分离从肝素中获得的低分子量组分，或用酶解法、化学法或物理法降解肝素获得的低分子量肝素片断，其分子量小于8000Da的组分占60％以上。
肝素是体内外均能延长凝血时间的抗凝血药。其抗凝血作用极为复杂，对凝血过程的许多环节都有影响。低分子量肝素的活性/抗凝血活性的比值为1.5～4.0，而普通的肝素为1，保持了肝素的抗血栓作用而降低了出血的危险。具有半衰期长，生物利用度高等优点，正广泛应用于血栓栓塞性疾病的预防及治疗，其有效性和安全性均优于普通肝素，量效关系明确。
他汀类药物联合肝素或低分子肝素治疗不稳定心绞痛已经有所报道，其中他汀类药物主要包括阿托伐他汀、辛伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀等，而且肝素或低分子肝素是用来注射给药的，肝素或低分子肝素注射制剂在临床上应用最大的缺点是反复注射，皮下注射经常会造成皮下出血，从而会给需要长期用药患者带来很大的痛苦，病人难以接受。
专利CN101239216《一种新型球囊扩张导管》公开了一种涂敷在治疗冠心病的支架上的药物材料，所述的药物材料包括肝素和他汀类药物。然而，该方案只适用于需要手术治疗的患者，在临床上应用受限。
发明内容
本发明提供了一种口服药物组合物在制备预防或治疗冠心病的药物中的用途。
发明人对瑞舒伐他汀或其可接受的盐和肝素、低分子肝素或其可接受的盐联合应用进行了认真的动物实验研究，得出了该两种活性成分联合应用在预防或治疗冠心病方面具有很好的疗效。
使用基于这些研究得到的发现来制备的口服药物组合物，发明人进行了如实施例8的动物实验研究。结果发现，通过本发明提供的方式给予该组合物，具体的发明内容详述如下。
一种口服药物组合物在制备预防或治疗冠心病的药物中的用途，所述口服药物组合物含有如下活性成分：
1)瑞舒伐他汀或其可药用盐；
2)肝素或低分子肝素或其可药用盐。
优选地，所述口服药物组合物中瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素或其可接受的盐的重量比为0.01～4∶1，其中肝素的效价以170IU/mg计；进一步优选地，所述口服药物组合物中瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素或其可接受的盐的重量比为0.1～2∶1，其中肝素的效价以170IU/mg计。
优选地，所述的口服药物组合物中瑞舒伐他汀或其可药用盐与低分子肝素或其可接受的盐的重量比为0.025～10∶1，其中低分子肝素的效价以104.4IU/mg计；进一步优选地，瑞舒伐他汀或其可药用盐与低分子肝素或其可接受的盐的重量比为0.05～5∶1，其中低分子肝素的效价以104.4IU/mg计。
上述口服药物组合物中，所述瑞舒伐他汀可药用盐、肝素或低分子肝素可药用盐，包括钠盐、钙盐、钾盐、镁盐、锌盐、铁盐，优选其钙盐和钠盐。
上述口服药物组合物中所有涉及的肝素、低分子肝素或其可接受的盐的衍生物包括其不同程度的硫酸化产物、脱硫酸化产物。
上述口服药物组合物中，所有涉及的肝素、低分子肝素或其可药用盐和瑞舒伐他汀或其可药用盐，可以根据它们的性质，通过常规制剂技术制成固体口服制剂，包括普通片、分散片、缓释片和胶囊。
通过动物试验研究，本发明人证实了瑞舒伐他汀或其可药用盐和肝素、低分子肝素或其可药用盐在制备预防或治疗大鼠冠心病的药物中用途。发明人通过对SD大鼠喂食高脂饲料或辅以注射异丙肾上腺素来完成冠心病的造模，同时给予本发明的口服药物组合物，连续给药6周后进行心电图变化观察，检测血脂水平、心肌酶水平。
具体地，首先发明人通过实施例(实施例1和2)设置瑞舒伐他汀联合肝素或低分子肝素注射组作为阳性组对照组，结果发现，瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素、低分子肝素或其可药用盐复方灌胃给药，在改善冠心病大鼠心肌缺血以及调节血脂、心肌酶水平均具有很好的效果，并与单药相比具有协同性作用。并且瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素、低分子肝素或其可药用盐复方灌胃给药与瑞舒伐他汀联合肝素或低分子肝素注射组相比治疗冠心病综合效果相当。这进一步表明，瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素、低分子肝素或其可药用盐复方在制备治疗冠心病药物中具有很大的优势。
其次，发明人通过实施例3瑞舒伐他汀与低分子肝素复方与辛伐他汀、阿托伐他汀与低分子肝素复方对冠心病疗效比较，结果发现与辛伐他汀或阿托伐他汀与低分子肝素复方相比，瑞舒伐他汀与低分子肝素复方在改善冠心病大鼠心肌缺血以及调节血脂水平方面都具有显著性差异。
最后，发明人通过实施例4瑞舒伐他汀与低分子肝素复方不同剂量组对冠心病大鼠心电图改变的影响，结果发现该实施例给出的不同比例的三个瑞舒伐他汀与低分子肝素复方组(高、中、低组)在改善冠心病大鼠心肌缺血方面均有协同作用。
总之，与其它治疗冠心病的药物相比，本发明中的口服药物组合物具有以下优点：
1)协同作用。本发明的组合物通过动物实验研究，表明当用本发明的组合物时，尤其是采用优选的配比时，与单独应用有效量的瑞舒伐他汀或肝素或低分子肝素时相比，本发明的组合物在改善冠心病大鼠心肌缺血以及调节血脂、心肌酶水平方面都具有显著性差异，并具有协同性作用。同时大大降低了单方的使用剂量，这就显著降低了瑞舒伐他汀的不良反应和肝素或低分子肝素的用药风险。
2)成本降低。本发明的组合物成分中，一种是他汀类药物，一种是肝素。肝素就是从天然资源中提取纯化的一种粘多糖的硫酸酯，没有后续的裂解分级工序，本发明的生产成本大大降低，从而使普通收入的患者也能用得起药。
3)方便给药。传统的观点认为肝素口服无效，是基于在凝血测试系统中检测不到明显的变化得出的结论。有关肝素的口服研究大多局限于对给药后肝素的抗凝作用，并由血浆中抗凝血酶与凝血酶复合物的生成检测得出该类药物不能由胃肠道吸收或吸收甚微的结论。然而，本发明的发明人在做动物实验时发现，口服肝素或低分子肝素依然可以表现出一定的药效学作用，特别是与他汀类药物联合应用并选择本发明给出的最佳剂量配比时，该组合物表现出意想不到的药效学作用。本发明摒弃传统的注射给药方式，采用口服方式。本发明口服药物组合物可以制成胶囊和片剂等，方便患者服用。
具体实施方式
以下通过具体实施例进一步描述本发明，但本发明的应用范围不限于下列实施例。由于已经根据以下优选实施例描述了本发明，某些修饰和等价变化对于本领域的普通技术人员是显而易见的且包括在本发明的范围内。
1.瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素、低分子肝素或其可药用盐的药物组合物的药效学研究
实施例1瑞舒伐他汀与肝素复方对大鼠冠心病的影响
1.实验方法
选用SD大鼠70只，雄性，体重(250±20)g。所有大鼠适应性喂养一周后随机分成7组，每组10只。除肝素钠注射组和瑞舒伐肝素注射组外其它各组均采取灌胃给药方式。具体分组及给药如下：
正常对照组：同体积的纯化水；
模型对照组：同体积的羧甲基纤维素钠；
瑞舒伐他汀组：1.0mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙；
肝素钠灌胃组：5.0mg/(kg.d)肝素钠；
肝素钠注射组：5.0mg/(kg.d)肝素钠，其中肝素钠的效价以170IU/mg计；
瑞舒伐肝素注射组：1.0mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙灌胃给药，5.0mg/(kg.d)肝素钠腹腔注射，其中肝素钠的效价以170IU/mg计；
瑞舒伐肝素灌胃组：1.0mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙+5.0mg/(kg.d)肝素钠；
高脂饲料配制：2％胆固醇，10％猪油，0.2％甲基硫嘧啶，余为基础饲料。
正常对照组喂食基础饲料；其它各组喂食高脂饲料；自末次给药前3天，除正常对照组外均于给药10min后皮下注射异丙肾上腺素5mg/kg复制心肌缺血模型，正常对照组皮下注射等体积生理盐水，1次/天，连续三天。造模同时给药6周后以20％乌拉坦4ml/kg体重腹腔注射，待动物麻醉后将连接PCLAB生物信号系统电极的6号针头分别插入大鼠前肢和下肢皮下，采用PCLAB生物信号采集处理系统，记录标II导联心电图，描记系统由电脑操作，随后彩色多谱勒检测正常组和模型组大鼠心功能。于第43天早晨各组大鼠经乌拉坦麻醉后，称体重，颈主动脉采血。
2.检测指标及统计学处理
心电图检测：参照徐氏标准，进行心电图观察，具备下列条件之一者判断为心肌缺血阳性：①ST段水平向下或者向上偏移≥0.1mv。②T波高耸，超过同导联R波的1/2。③T波高耸伴ST段移位。记录心电图ST段、T波。ST段：代表心室早期复极(2期平台)的电位和时间的变化。T波：反映心室晚期快速复极(3期)过程中的电位和时间的改变。通过心电图ST段、T波的改变来判断对心肌缺血的影响，心电图ST段、T波的偏移幅度越大，表明心肌缺血越严重。
用试剂盒检测大鼠血脂：血清总胆固醇(CHO)，血清甘油三酯(TG)，血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL)血清，高密度脂蛋白胆固醇(HDL)。用试剂盒检测大鼠心肌酶水平。
统计学处理：所有试验数据用均数±标准差表示。用SPSS13.0统计软件进行统计处理，对各组数据均进行方差齐性检验，方差齐时不同组间用单因素方差分析，两两比较用SNKq检验；方差不齐用K-WH检验，两两比较用Neminy法两两比较。检验水准＝0.05。
3.实验结果
3.1瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠心电图的影响(见表1)
实验结果显示：
1)与正常组比较，模型组大鼠心电图ST段、T波偏移幅度具有显著差异，说明大鼠心肌缺血模型复制成功。
2)与模型组比较，瑞舒伐他汀组、肝素钠注射组、瑞舒伐肝素注射组及瑞舒伐肝素灌胃组对冠心病大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响具有显著或极显著差异(p＜0.05或p＜0.01)；与模型组比较，肝素钠灌胃组对冠心病大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响无显著差异(p＞0.05)。
3)与瑞舒伐他汀组相比，瑞舒伐肝素注射组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响具有显著差异(p＜0.05)；与肝素钠注射组相比，瑞舒伐肝素注射组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响无显著差异(p＞0.05)。可见与单独用药相比，瑞舒伐肝素注射组在对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响方面没有协同作用。
4)与瑞舒伐他汀组、肝素钠灌胃组比较，瑞舒伐肝素灌胃组对冠心病大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响具有显著差异(p＜0.05)，并具有协同作用。
5)与瑞舒伐肝素注射组相比，瑞舒伐肝素灌胃组对冠心病大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响相当，无显著性差异。
结果表明，在改善冠心病大鼠心肌缺血方面，与单独用药相比，瑞舒伐肝素注射组无协同作用；瑞舒伐肝素灌胃组具有协同作用；并且瑞舒伐肝素灌胃组改善心肌缺血效果与瑞舒伐肝素注射组效果相当。这进一步说明了在没有降低疗效的前提下，瑞舒伐他汀与肝素口服药物组合物因能够减少病人反复注射带来的痛苦从而提高患者治疗的依从性。
表1瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠心电图的改变
注：与正常对照组比，**p＜0.01；
与模型组比较，##P＜0.01，#P＜0.05；
与瑞舒伐他汀组比较，△P＜0.05；
与肝素钠灌胃组比较，★P＜0.05。
3.2瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠血脂水平的影响
实验结果显示：
1)与模型组比较，各治疗组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平有显著性差异；
2)与瑞舒伐他汀组、肝素钠灌胃组比较，瑞舒伐肝素灌胃组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平均有显著性差异，并具有很好的协同作用；
3)与瑞舒伐他汀组、肝素钠注射组比较，瑞舒伐肝素注射组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平均有显著性差异，但无协同作用；
4)与瑞舒伐肝素注射组相比，瑞舒伐肝素灌胃组对冠心病大鼠的血脂水平的影响综合效果相当。
结果表明，在改善冠心病大鼠血脂水平方面，与单独用药相比，瑞舒伐肝素注射组无协同作用；瑞舒伐肝素灌胃组具有协同作用；并且瑞舒伐肝素灌胃组改善心肌缺血效果与瑞舒伐肝素注射组效果相当。这进一步说明了在没有降低疗效的前提下，瑞舒伐他汀与肝素口服药物组合物因能够减少病人反复注射带来的痛苦从而提高患者治疗的依从性。
表2瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠血脂的影响
注：与正常组比*p＜0.05，**p＜0.01；
与模型组比较，#p＜0.05，##P＜0.01；
与瑞舒伐他汀组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；
与肝素钠组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01；
与肝素钠注射组相比，■P＜0.05。
3.3瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠心肌酶水平的影响(见表3)
实验结果表明：
1)与模型组比较，各治疗组对于降低冠心病大鼠心肌酶水平有显著性差异；
2)与瑞舒伐他汀组、肝素钠灌胃组比较，瑞舒伐肝素灌胃组对于降低冠心病大鼠心肌酶水平均有显著性差异，并具有很好的协同作用；
3)与瑞舒伐他汀组、肝素钠注射组比较，瑞舒伐肝素注射组对于降低冠心病大鼠心肌酶水平均有显著性差异，但无协同作用；
4)与瑞舒伐肝素注射组相比，瑞舒伐肝素灌胃组对冠心病大鼠的血脂水平的影响综合效果相当，无显著性差异。
表3瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠心肌酶水平的影响
与正常组比，*p＜0.05，**p＜0.01；
与模型组比较，#p＜0.05，##P＜0.01；
与瑞舒伐他汀组比较，△P＜0.05；
与肝素钠组比较，★★P＜0.01；
与肝素钠注射组相比，■P＜0.05。
实施例2瑞舒伐他汀与低分子肝素复方对冠心病大鼠的影响
1.实验方法
选用SD大鼠70只，雄性，体重(250±20)g。所有大鼠适应性喂养一周后随机分成7组，每组10只。除低分子肝素注射组和瑞舒伐低分子肝素注射组外其它各组均采取灌胃给药方式。具体分组及给药如下：
正常对照组：同体积的纯化水；
模型对照组：同体积的羧甲基纤维素钠；
瑞舒伐他汀组：2mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙；
低分子肝素灌胃组：1mg/(kg.d)低分子肝素钙；
低分子肝素注射组：2mg/(kg.d)低分子肝素钙，其中低分子肝素钙效价为104.4IU/mg；
瑞舒伐低分子肝素注射组：2mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙+1mg/(kg.d)低分子肝素钙，其中低分子肝素钙的效价以104.4IU/mg计；
瑞舒伐低分子肝素灌胃组：2mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙+1mg/(kg.d)低分子肝素钙；
高脂饲料配制：2％胆固醇，10％猪油，0.2％甲基硫嘧啶，余为基础饲料。
正常对照组喂食基础饲料；其它各组喂食高脂饲料；自末次给药前3天，除正常对照组外均于给药10min后皮下注射异丙肾上腺素5mg/kg复制心肌缺血模型，正常对照组皮下注射等体积生理盐水，1次/天，连续三天。造模同时给药6周后以20％乌拉坦4ml/kg体重腹腔注射，待动物麻醉后将连接PCLAB生物信号系统电极的6号针头分别插入大鼠前肢和下肢皮下，采用PCLAB生物信号采集处理系统，记录标II导联心电图，描记系统由电脑操作，随后彩色多谱勒检测正常组和模型组大鼠心功能。于第43天早晨各组大鼠经乌拉坦麻醉后，称体重，颈主动脉采血。
2.检测指标及统计学处理
心电图检测：参照徐氏标准，进行心电图观察，具备下列条件之一者判断为心肌缺血阳性：①ST段水平向下或者向上偏移≥0.1mv。②T波高耸，超过同导联R波的1/2。③T波高耸伴ST段移位。记录心电图ST段、T波。ST段：代表心室早期复极(2期平台)的电位和时间的变化。T波：反映心室晚期快速复极(3期)过程中的电位和时间的改变。通过心电图ST段、T波的变化来判断对心肌缺血的影响。
用试剂盒检测大鼠血脂：血清总胆固醇(CHO)，血清甘油三酯(TG)，血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL)血清，高密度脂蛋白胆固醇(HDL)。用试剂盒检测大鼠心肌酶水平。
统计学处理：所有试验数据用均数±标准差表示。用SPSS13.0统计软件进行统计处理，对各组数据均进行方差齐性检验，方差齐时不同组间用单因素方差分析，两两比较用SNKq检验；方差不齐用K-WH检验，两两比较用Neminy法两两比较。检验水准＝0.05。
3.实验结果
3.1瑞舒伐他汀与低分子肝素复方对冠心病大鼠心电图的影响(见表4)
实验结果显示：
1)与正常组比较，模型组大鼠心电图ST段、T波偏移幅度具有显著差异，说明大鼠心肌缺血模型复制成功。
2)与模型组比较，瑞舒伐他汀组、低分子肝素注射组、瑞舒伐低分子肝素注射组及瑞舒伐低分子肝素灌胃组对冠心病大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响具有显著或极显著差异(p＜0.05或p＜0.01)；与模型组比较，低分子肝素灌胃组对冠心病大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响无显著差异(p＞0.05)。
3)与瑞舒伐他汀组相比，瑞舒伐低分子肝素注射组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响具有显著差异(p＜0.05)；与低分子肝素注射组相比，瑞舒伐低分子肝素注射组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响无显著差异(p＞0.05)。可见与单独用药相比，瑞舒伐低分子肝素注射组在对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响方面没有协同作用。
4)与瑞舒伐他汀组、低分子肝素灌胃组比较，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对冠心病大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响具有显著差异(p＜0.05)，并具有协同作用。
5)与瑞舒伐低分子肝素注射组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对冠心病大鼠心电图ST段、T波偏移幅度的影响相当，无显著性差异。
结果表明，在改善冠心病大鼠心肌缺血方面，与单独用药相比，瑞舒伐低分子肝素注射组无协同作用；瑞舒伐低分子肝素灌胃组具有协同作用；并且瑞舒伐低分子肝素灌胃组改善心肌缺血效果与瑞舒伐低分子肝素注射组效果相当。这进一步说明了在没有降低疗效的前提下，瑞舒伐他汀与低分子肝素口服药物组合物因能够减少病人反复注射带来的痛苦从而提高患者治疗的依从性。
表4瑞舒伐他汀与低分子肝素复方对冠心病大鼠心电图的影响
注：与正常对照组比，**p＜0.01；
与模型组比较，##P＜0.01，#P＜0.05；
与瑞舒伐他汀组比较，△P＜0.05；
与低分子肝素灌胃组比较，★P＜0.05。
3.2瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠血脂水平的影响(见表5)
实验结果表明：
1)与模型组比较，各治疗组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平有显著性差异；
2)与瑞舒伐他汀组、低分子肝素灌胃组比较，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平均有显著性差异，并具有很好的协同作用；
3)与瑞舒伐他汀组、低分子肝素注射组比较，瑞舒伐低分子肝素注射组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平均有显著性差异，但无协同作用；
4)与瑞舒伐低分子肝素注射组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对冠心病大鼠的血脂水平的影响综合效果相当。
表5瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠血脂的影响
注：与正常组比*p＜0.05，**p＜0.01；与模型组比较，#p＜0.05，##P＜0.01；
与瑞舒伐他汀组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；
与低分子肝素灌胃组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01；
与低分子肝素注射组相比，■P＜0.05。
3.3瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠心肌酶水平的影响(见表6)
实验结果表明：
1)与模型组比较，各治疗组对于降低冠心病大鼠心肌酶水平有显著性差异；
2)与瑞舒伐他汀组、低分子肝素灌胃组比较，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对于降低冠心病大鼠心肌酶水平均有显著性差异，并具有很好的协同作用；
3)与瑞舒伐他汀组、低分子肝素注射组比较，瑞舒伐低分子肝素注射组对于降低冠心病大鼠心肌酶水平均有显著性差异，但无协同作用；
4)与瑞舒伐低分子肝素注射组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对冠心病大鼠的血脂水平的影响综合效果相当，无显著性差异。
表6瑞舒伐他汀与肝素复方对冠心病大鼠心肌酶水平的影响
与正常组比*p＜0.05，**p＜0.01；
与模型组比较，#p＜0.05，##P＜0.01；
与瑞舒伐他汀组比较，△P＜0.05；
与低分子肝素灌胃组比较，★★P＜0.01；
与低分子肝素注射组相比，■P＜0.05。
实施例3瑞舒伐他汀与低分子肝素复方与辛伐他汀、阿托伐他汀与低分子肝素复方对冠心病疗效比较
1.实验方法
选用SD大鼠130只，雄性，体重(250±20)g。所有大鼠适应性喂养一周后随机分成13组，每组10只。具体分组及给药如下：
正常对照组：同体积的纯化水；
模型对照组：同体积的羧甲基纤维素钠；
瑞舒伐他汀组：1.5mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙；
阿托伐他汀组：1.5mg/(kg.d)阿托伐他汀钙；
辛伐他汀组：1.5mg/(kg.d)辛伐他汀；
低分子肝素灌胃组：1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠；
低分子肝素注射组：1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠；
瑞舒伐低分子肝素注射组：1.5mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙+1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠；
阿托伐低分子肝素注射组：1.5mg/(kg.d)阿托伐他汀钙+1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠；
辛伐低分子肝素注射组：1.5mg/(kg.d)辛伐他汀+1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠；
阿托伐低分子肝素灌胃组：1.5mg/(kg.d)阿托伐他汀钙+1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠；
辛伐低分子肝素灌胃组：1.5mg/(kg.d)辛伐他汀+1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠；
瑞舒伐低分子肝素灌胃组：1.5mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙+1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠。
其中，低分子肝素钠的效价为104.4IU/mg，低分子肝素注射组、瑞舒伐低分子肝素注射组、阿托伐低分子肝素注射组、辛伐低分子肝素注射组中的低分子肝素均为注射给药，其它各组均为灌胃给药，所有他汀类药物均为灌胃给药。
正常对照组喂食基础饲料；其它各组喂食高脂饲料；自末次给药前3天，除正常对照组外均于给药10min后皮下注射异丙肾上腺素5mg/kg复制心肌缺血模型，正常对照组皮下注射等体积生理盐水，1次/天，连续三天。造模同时给药6周后以20％乌拉坦4ml/kg体重腹腔注射，待动物麻醉后将连接PCLAB生物信号系统电极的6号针头分别插入大鼠前肢和下肢皮下，采用PCLAB生物信号采集处理系统，记录标II导联心电图，描记系统由电脑操作，随后彩色多谱勒检测正常组和模型组大鼠心功能。于第43天早晨各组大鼠经乌拉坦麻醉后，称体重，颈主动脉采血。
2.检测指标及统计学处理
心电图检测：参照徐氏标准，进行心电图观察，具备下列条件之一者判断为心肌缺血阳性：①ST段水平向下或者向上偏移≥0.1mv。②T波高耸，超过同导联R波的1/2。③T波高耸伴ST段移位。记录心电图ST段、T波。ST段：代表心室早期复极(2期平台)的电位和时间的变化。T波：反映心室晚期快速复极(3期)过程中的电位和时间的改变。通过心电图ST段、T波的变化来判断对心肌缺血的影响，心电图ST段、T波的偏移幅度越大，表明心肌缺血越严重。
用试剂盒检测大鼠血脂：血清总胆固醇(CHO)，血清甘油三酯(TG)，血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL)血清，高密度脂蛋白胆固醇(HDL)。
统计学处理：所有试验数据用均数±标准差表示。用SPSS13.0统计软件进行统计处理，对各组数据均进行方差齐性检验，方差齐时不同组间用单因素方差分析，两两比较用SNKq检验；方差不齐用K-WH检验，两两比较用Neminy法两两比较。检验水准＝0.05。
3.实验结果
3.1他汀低分子肝素复方冠心病大鼠心电图的影响(见表7)
实验结果显示：
1)与正常组比较，模型组心电图ST段、T波偏移幅度具有显著差异，说明大鼠心肌缺血模型复制成功；
2)与模型组比较，除低分子肝素灌胃组以外各治疗组对心电图ST段、T波偏移幅度均有显著或极显著改善(p＜0.05或p＜0.01)；
3)与低分子肝素注射组相比，瑞舒伐低分子肝素注射组、阿托伐低分子肝素注射组、辛伐低分子肝素注射组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度无显著差异(p＞0.05)；瑞舒伐低分子肝素注射组、阿托伐低分子肝素注射组、辛伐低分子肝素注射组分别与瑞舒伐他汀组、阿托伐他汀组、辛伐他汀组相比，在对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度影响方面具有显著性差异。可见与单独用药相比，瑞舒伐低分子肝素注射组、阿托伐低分子肝素注射组、辛伐低分子肝素注射组在改善大鼠心肌缺血方面没有协同作用。
4)与低分子肝素灌胃组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组、阿托伐低分子肝素灌胃组、辛伐低分子肝素灌胃组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度无显著差异(p＞0.05)；瑞舒伐低分子肝素灌胃组、阿托伐低分子肝素灌胃组、辛伐低分子肝素灌胃组分别与瑞舒伐他汀组、阿托伐他汀组、辛伐他汀组相比，在对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度影响方面具有显著性差异。并且与单独用药相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组在对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度影响方面具有协同作用；与单独用药相比，阿托伐低分子肝素灌胃组、辛伐低分子肝素灌胃组在对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度影响方面没有协同作用。
5)与阿托伐低分子肝素灌胃组、辛伐低分子肝素灌胃组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度影响方面具有显著性差异(p＜0.05)。
结果表明，与瑞舒伐他汀组、低分子肝素灌胃组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组在对大鼠冠心病的改善方面具有显著性差异，并具有协同作用；与阿托伐低分子肝素灌胃组、辛伐低分子肝素灌胃组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对大鼠冠心病的改善方面具有显著性差异(p＜0.05)。
表7瑞舒伐他汀与低分子肝素复方对冠心病大鼠心电图的改变
注：与模型组比较，##P＜0.01，#P＜0.05；
与阿托伐他汀组比，**p＜0.01，*p＜0.05；
与辛伐他汀组相比，■p＜0.05，■■p＜0.01；
与瑞舒伐他汀组比较，△P＜0.05；
与低分子肝素灌胃组比较，★P＜0.05；
与低分子肝素注射组相比，$p＜0.05；
与阿托伐他汀低分子肝素灌胃组相比，#p＜0.05；
与辛伐他汀低分子肝素灌胃组相比，&p＜0.05。
3.2他汀肝素灌胃组对冠心病大鼠血脂水平的影响(见表8)
实验结果显示：
1)与模型组比较，各治疗组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平有显著性差异；
2)与瑞舒伐他汀组、低分子肝素灌胃组比较，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平均有显著性差异，并具有很好的协同作用；
3)与辛伐他汀组、低分子肝素灌胃组比较，辛伐低分子肝素灌胃组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平均无显著性差异；
4)与阿托伐他汀组、低分子肝素灌胃组比较，阿托伐低分子肝素灌胃组对于降低冠心病大鼠血清CHO、LDL、TG水平以及升高HDL水平均无显著性差异；
4)与辛伐低分子肝素灌胃组、阿托伐低分子肝素灌胃组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对冠心病大鼠的血脂水平的影响综合效果具有显著性差异。
进一步表明，与瑞舒伐他汀组、低分子肝素灌胃组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组在对大鼠血脂水平的改善方面具有显著性差异，并具有协同作用；与阿托伐低分子肝素灌胃组、辛伐低分子肝素灌胃组相比，瑞舒伐低分子肝素灌胃组对大鼠血脂水平的改善方面具有显著性差异(p＜0.05)。
表8他汀与低分子肝素复方对冠心病大鼠血脂水平的影响
注：与模型组比*p＜0.05，**p＜0.01；
与瑞舒伐他汀组比较，△P＜0.05；
与低分子肝素灌胃组比较，★P＜0.05；
与阿托伐低分子肝素灌胃组比较，#p＜0.05；
与辛伐低分子灌胃组相比，■P＜0.05；
实施例4瑞舒伐低分子肝素复方不同剂量组对冠心病大鼠心电图改变的影响
1.实验方法
选用SD大鼠130只，雄性，体重(250±20)g。所有大鼠适应性喂养一周后随机分成13组，每组10只。以下各组均为灌胃给药，具体分组及给药如下：
正常对照组：同体积的纯化水；
模型对照组：同体积的羧甲基纤维素钠；
低分子肝素组：1mg/(kg.d)低分子肝素钠；
他汀低剂量组：0.05mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙；
他汀中剂量组：2.5mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙；
他汀高剂量组：5mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙；
复方低组：0.05mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙+1mg/(kg.d)低分子肝素钠；
复方中组：2.5mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙+1mg/(kg.d)低分子肝素钠；
复方高组：5mg/(kg.d)瑞舒伐他汀钙+1mg/(kg.d)低分子肝素钠；
其中，低分子肝素钠的效价为104.4IU/mg。
正常对照组喂食基础饲料；其它各组喂食高脂饲料；造模同时灌胃给药6周后以20％乌拉坦4ml/kg体重腹腔注射，待动物麻醉后将连接PCLAB生物信号系统电极的6号针头分别插入大鼠前肢和下肢皮下，采用PCLAB生物信号采集处理系统，记录标II导联心电图，描记系统由电脑操作，随后彩色多谱勒检测正常组和模型组大鼠心功能。于第43天早晨各组大鼠经乌拉坦麻醉后，称体重，颈主动脉采血。
2.检测指标及统计学处理
心电图检测：参照徐氏标准，进行心电图观察，具备下列条件之一者判断为心肌缺血阳性：①ST段水平向下或者向上偏移≥0.1mv。②T波高耸，超过同导联R波的1/2。③T波高耸伴ST段移位。记录心电图ST段、T波。ST段：代表心室早期复极(2期平台)的电位和时间的变化。T波：反映心室晚期快速复极(3期)过程中的电位和时间的改变。通过心电图ST段、T波的偏移幅度来判断对心肌缺血的影响，心电图ST段、T波的偏移幅度越大，表明心肌缺血越严重。
统计学处理：所有试验数据用均数±标准差表示。用SPSS13.0统计软件进行统计处理，对各组数据均进行方差齐性检验，方差齐时不同组间用单因素方差分析，两两比较用SNKq检验；方差不齐用K-WH检验，两两比较用Neminy法两两比较。检验水准＝0.05。
3.实验结果
3.1他汀低分子肝素复方冠心病大鼠心电图的影响(见表9)
实验结果显示：
1)与正常组比较，模型组心电图ST段、T波偏移幅度具有显著差异，说明大鼠心肌缺血模型复制成功；
2)与模型组比较，复方高、中、低剂量组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度均有显著或极显著影响(p＜0.05或p＜0.01)；
3)与低分子肝素相比，复方高、中、低剂量组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度均有显著或极显著影响(p＜0.05或p＜0.01)；复方高、中、低剂量组分别与他汀高、中、低剂量组相比均有显著性差异；并且复方高、中、低剂量组对大鼠心电图ST段、T波偏移幅度影响相比单独用药具有协同作用。
进一步表明，瑞舒伐他汀与低分子肝素组复方高、中、低组在对大鼠冠心病的改善方面具有很好的协同作用，瑞舒伐他汀与低分子肝素复方可以作为制备治疗或预防冠心病的药物使用。
表9瑞舒伐他汀与低分子肝素复方对冠心病大鼠心电图的改变
注：与模型组比较，##P＜0.01，#P＜0.05；
与他汀低剂量组比，*p＜0.05；
与他汀中剂量组相比，■p＜0.05；
与他汀高剂量组比较，△P＜0.05；
与低分子肝素组比较，★P＜0.05；
2.瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素、低分子肝素或其可药用盐的药物组合物的制备
实施例5 片剂
处方 瑞舒伐他汀钙 40g
肝素钠 10g
微晶纤维素 120g
2％羟丙基甲基纤维素溶液 适量
低取代羟丙基纤维素 8g
硬脂酸镁 2g
制备工艺：将处方中的瑞舒伐他汀钙和肝素钠过100目筛，微晶纤维素和低取代羟丙基纤维素过80目筛，称取处方量的瑞舒伐他汀钙、肝素钠与低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入2％羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒，40℃干燥，16目筛整粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀，压片即得。
实施例6胶囊
处方 瑞舒伐他汀锌 0.1g
肝素钙 10g
预胶化淀粉 60g
微晶纤维素 100g
6％PVP的95％乙醇溶液 适量
硬脂酸镁 3g
制备工艺：将处方中的瑞舒伐他汀锌、肝素钙、预胶化淀粉、微晶纤维素和硬脂酸镁分别过100目筛，混匀，加6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，40℃烘干，18目筛整粒，胶囊充填即可。
实施例7分散片
处方 瑞舒伐他汀钙 2g
肝素钙 20g
交联聚乙烯吡咯烷酮 7g
微晶纤维素 110g
5％PVPK30无水乙醇溶液 适量
硬脂酸镁 2g
制备工艺：将处方中的瑞舒伐他汀钙和肝素钙过100目筛，交联聚乙烯吡咯烷酮过80目筛，称取处方量的瑞舒伐他汀钙、肝素钙和交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，加入5％PVPK30无水乙醇溶液适量制粒，干燥后加入处方量微晶纤维素、硬脂酸镁混匀，压片即得。
实施例8胶囊
处方 瑞舒伐他汀锌 20g
肝素钠 10g
预胶化淀粉 60g
微晶纤维素 100g
6％PVP的95％乙醇溶液 适量
硬脂酸镁 3g
制备工艺：将处方中的瑞舒伐他汀锌、肝素钠、预胶化淀粉、微晶纤维素和硬脂酸镁分别过100目筛，混匀，加6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，40℃烘干，18目筛整粒，胶囊充填即可。
实施例9胶囊
处方 瑞舒伐他汀钙 2g
肝素钠 10g
预胶化淀粉 50g
微晶纤维素 100g
羧甲基纤维素纳 20g
6％PVP的95％乙醇溶液 适量
硬脂酸镁 2g
制备工艺同实施例8。
实施例10片剂
处方 瑞舒伐他汀钙 10g
低分子肝素钙 1g
微晶纤维素 120g
2％羟丙基甲基纤维素溶液 适量
低取代羟丙基纤维素 7g
硬脂酸镁 2g
制备工艺：将处方中的瑞舒伐他汀钙和低分子肝素钙过100目筛，微晶纤维素和低取代羟丙基纤维素过80目筛，称取处方量的瑞舒伐他汀钙、低分子肝素钙与低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入2％羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀，压片即得。
实施例11片剂
处方 瑞舒伐他汀钙 10g
低分子肝素钙 20g
微晶纤维素 140g
2％羟丙基甲基纤维素溶液 适量
低取代羟丙基纤维素 8g
硬脂酸镁 3g
制备工艺同实施例10。
实施例12胶囊
处方 瑞舒伐他汀钙 1g
低分子肝素钠 40g
预胶化淀粉 60g
微晶纤维素 100g
6％PVP的95％乙醇溶液 适量
硬脂酸镁 3g
制备工艺：将处方中的瑞舒伐他汀钙、低分子肝素钠、预胶化淀粉、微晶纤维素和硬脂酸镁分别过100目筛，混匀，加6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃烘干，18目筛整粒，胶囊充填即可。
实施例13胶囊
处方 瑞舒伐他汀钙 20g
低分子肝素钠 20g
预胶化淀粉 100g
微晶纤维素 100g
6％PVP的95％乙醇溶液 适量
硬脂酸镁 3g
制备工艺同实施例12。
实施例14胶囊
处方 瑞舒伐他汀钙 20g
低分子肝素钠 10g
预胶化淀粉 100g
微晶纤维素 80g
6％PVP的95％乙醇溶液 适量
硬脂酸镁 3g
制备工艺同实施例12。
实施例15分散片
处方 瑞舒伐他汀钙 1g
低分子肝素钙 20g
交联聚乙烯吡咯烷酮 7g
微晶纤维素 110g
5％PVP K30无水乙醇溶液 适量
硬脂酸镁 2g
制备工艺：瑞舒伐他汀钙和低分子肝素钙过100目筛，交联聚乙烯吡咯烷酮过80目筛，称取处方量的瑞舒伐他汀钙、低分子肝素钙和交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，加入5％PVPK30无水乙醇溶液适量制粒，干燥后加入处方量微晶纤维素、硬脂酸镁混匀，压片即得。
实施例16缓释片
处方 瑞舒伐他汀钙 20g
低分子肝素钠 4g
羟丙基甲基纤维素 30g
微晶纤维素 100g
硬脂酸镁 2g
制备工艺：将处方量的瑞舒伐他汀钙、低分子肝素钠、羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素混匀，按照常规制备方法制粒，干燥，整粒，加硬脂酸镁混匀，压片即得。
Claims (1)
1.一种口服药物组合物在制备预防或治疗冠心病的药物中的用途，所述药物组合物由如下活性成分组成：
1）瑞舒伐他汀或其可药用盐；和
2）肝素或低分子肝素或其可药用盐。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述的药物组合物中瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素或其可药用盐的重量比为0.01～4：1，其中肝素效价以170IU/mg计。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于所述的药物组合物中瑞舒伐他汀或其可药用盐与肝素或其可药用盐的重量比为0.1～2：1，其中肝素效价以170IU/mg计。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述的药物组合物中瑞舒伐他汀或其可药用盐与低分子肝素或其可药用盐的重量比为0.025～10：1,其中低分子肝素效价以104.4IU/mg计。
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于所述的药物组合物中瑞舒伐他汀或其可药用盐与低分子肝素或其可药用盐的重量比为0.05～5：1，其中低分子肝素效价以104.4IU/mg计。
6.如权利要求5所述的用途，其特征在于所述的药物组合物中瑞舒伐他汀或其可药用盐与低分子肝素或其可药用盐的重量比为1～5：1，其中低分子肝素效价以104.4IU/mg计。
7.如权利要求1-6中任一所述的用途，其特征在于所述的药物组合物中瑞舒伐他汀、肝素或低分子肝素的可药用盐是钠盐、钙盐、钾盐、镁盐、锌盐或者铁盐。
8.如权利要求1-6中任一所述的用途，其特征在于所述的药物组合物为固体口服制剂。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于所述的药物组合物为片剂或胶囊。
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| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20211210 Address after: 276006 No. 209 Hongqi Road, Shandong, Linyi Patentee after: LUNAN HOPE PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Address before: 276005 No. 209 Hongqi Road, Shandong, Linyi Patentee before: LUNAN PHARMACEUTICAL Group Corp. |
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| TR01 | Transfer of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120201 |
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| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |