EP1786447A2 - Verfahren zur herstellung einer ingwer-fraktion und deren verwendung zur inhibierung humaner cyp enzyme - Google Patents
Verfahren zur herstellung einer ingwer-fraktion und deren verwendung zur inhibierung humaner cyp enzymeInfo
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- EP1786447A2 EP1786447A2 EP05776543A EP05776543A EP1786447A2 EP 1786447 A2 EP1786447 A2 EP 1786447A2 EP 05776543 A EP05776543 A EP 05776543A EP 05776543 A EP05776543 A EP 05776543A EP 1786447 A2 EP1786447 A2 EP 1786447A2
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/906—Zingiberaceae (Ginger family)
- A61K36/9068—Zingiber, e.g. garden ginger
Definitions
- the present invention is a process for producing a ginger fraction, the fraction produced by this process and their use alone or in combination with drugs for inhibiting human cytochrome P450 (CYP) enzymes (especially cytochrome P450 3A4, CYP3A4) to positively influence the oral bioavailability and pharmacokinetics of active substances.
- CYP cytochrome P450
- Cytochrome P450 (CYP) enzymes play a central role in drug metabolism. They are found mainly in the liver, but also in the intestinal wall, lungs, kidneys and other extrahepatic organs. Orally-dosed active ingredients may show only poor bioavailability due to the so-called "first-pass effect", for example those active substances which are susceptible to metabolism in the intestinal wall or the liver before the systemic blood circulation is reached. If the first-pass metabolism is inhibited, a marked increase in the bioavailability of orally dosed drugs can be achieved (Gibbs, Megan A. and Hosea, Natalie A .: Factors affecting the clinical development of cytochrome P450 3A substrates; Clin. Pharmacokinet 2003, 42 (11), 969-984). Many examples of drug-drug interactions that result in a higher bioavailability than the drug administered are based on such effects. Here, the first-pass metabolism of the drug is inhibited by another co-administered drug.
- the variability of the bioavailability which according to experience increases with decreasing absolute bioavailability, can be significantly reduced.
- the bioavailability of the therapeutic success of oral drug therapy is significantly improved because it is less likely to occur too high (risk of unwanted side effects) or far too low (risk of treatment failure) drug exposure.
- Such effects may provide several benefits in drug therapy.
- the HIV drug lopinavir shows inadequate bioavailability due to first-pass metabolism by CYP3A4.
- ritonavir which is a potent inhibitor of CYP3A4
- significantly higher oral bioavailability of lopinavir is achieved.
- Ginger is a common food ingredient in much of the world and is also used as a phyto-medicated for various purposes.
- the powder of ginger root is available as a means of preventing seasickness. It contains about 5 to 8% of a viscous balsam (oleoresin), which contains a non-steam-volatile pungent fraction and a volatile volatile oil fraction.
- the pale yellow essential oil occupies about 20 to 25% of the oleoresin.
- the composition of the essential oil is subject to strong fluctuations. It contains as main component sesquiterpene hydrocarbons of the bisabolone type, in particular (-) - ⁇ -zingiberene in addition to (-) - ⁇ -sesquiphellandrene, (-) - ⁇ -bisabolene, (+) - ar-curcumen and the acyclic ⁇ -farnesene (Deutsche maschinerzeitung 1997, 137 (47), 40-46).
- the main component of the sharp fraction with a share of about 25% of the oleoresin is the homologous series of gingerols (HagerROM 2002: Zingiberis rhizoma, Springer Verlag, Heidelberg).
- the fraction obtained here is poorly soluble in hexane and differs by this property from the fraction of the essential oil, for the already inhibition of CYP3A4 has been shown (US 5,665,386).
- the process according to the invention starts from a commercially available oleoresin and comprises several extraction steps with organic and aqueous solvents.
- a first subject of the present invention is thus a process for the isolation of a ginger fraction with separation of the essential oil, comprising the steps
- the residue thus obtained is further purified by a process comprising the steps
- step (d) concentrating the combined supernatants from step (c).
- the fraction obtained in step (d) may be dissolved in an alcohol, preferably methanol or ethanol, and optionally further fractionated, for example by means of solid phase extraction and stepwise elution.
- an alcohol preferably methanol or ethanol
- nonpolar organic solvents for use in step (a) are low-boiling alkane solvents such as hexane, heptane, octane, pentane or cyclohexane, petrochemical distillates, fuels and solvents such as, for example, gasoline, kerosene, petroleum ether, petroleum and other low-boiling, Volatile and non-polar solvents such as diethyl ether, ferric butyl methyl ether, tetrahydrofuran, benzene, toluene, xylene, with hexane is preferably used.
- alkane solvents such as hexane, heptane, octane, pentane or cyclohexane
- fuels and solvents such as, for example, gasoline, kerosene, petroleum ether, petroleum and other low-boiling
- Volatile and non-polar solvents such as diethyl
- the alcohol used in steps (c) and (e) may be selected from the group consisting of methanol, ethanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol and other positionally isomeric butanols, n-pentanol and other positionally isomeric pentanols and may be the same or be different.
- methanol is used.
- the extractant is used in each case in amounts of 4 to 10 ml / g, preferably 4 to 7 ml / g, of the oleoresin used.
- the aqueous extractions are preferably carried out at a temperature of 50 to 80 ° C., more preferably 65 to 75 ° C.
- extractions with suitable aqueous organic acids or instead of a liquid-liquid extraction can also be used with organic solvents and solid phase extractions are used with suitable non-polar sorbents.
- steps (a), (b) and (c) can be carried out one or more times, the phase comprising the desired product being combined from the various extractions of one working step.
- the extraction of each operation is performed three times and the phases containing the product are combined.
- the combined phases are then processed further.
- a second subject of the present invention is the ginger fraction according to the invention, obtainable by one of the processes according to the invention.
- n is the number 1, 2 or 3
- R 1 is H, CH 3 ,
- R 2 is H, CH 3 ,
- R 3 is H, OH, OCH 3 ,
- R 4 is H, O, OH, OCH 3 , OC (O) CH 3 and
- R 5 is H, O, OH, OCH 3 , OC (O) CH 3 ,
- the compounds of the general formulas I to VI were identified from the ginger fraction obtained according to the invention. To further characterize this ginger fraction and elucidate its ingredients, it was further suitably purified with the goal of isolating purified fractions of individual ingredients.
- the ginger fraction obtained according to the invention was further purified by solid phase extraction on a C18 phase.
- the eluent of the solid phase extraction was brought to dryness and further analyzed by means of semipreparative high pressure liquid chromatography (HPLC).
- HPLC semipreparative high pressure liquid chromatography
- smaller aliquots of 5 to 10 mg were injected into the semipreparative HPLC system.
- the eluent of the HPLC column was then collected in 60 to 65 individual fractions and each of the resulting fractions was examined for their inhibitory effect on various P450 test reactions. The result of these investigations showed clearly demarcated zones (peaks) of higher inhibitory potency.
- the compounds (1) to (12) identified according to the invention are the typical ingredients of the ginger nonvolatile pungent fraction already sufficiently described in the literature.
- a well-known main ingredient of ginger the [8] -gingerol (12), and [6] -shogaol (9), the decomposition product of the quantitatively largest main ingredient [6] -gingerol , found.
- a third aspect of the present invention is the use of the ginger fraction according to the invention and one or more of the compounds of the general formulas (I) to (VI) isolated therefrom for the production of a medicament for inhibiting cytochrome P450 enzymes, in particular cytochrome P450 3A4, 1A2, 2C19 and 2C9.
- the cytochromes P450 1A2, P450 2C19 and P450 2C9 are inhibited.
- a fourth object of the present invention is the use of one or more compounds of the general formulas
- n is the number 1, 2 or 3
- R 1 is H, CH 3 ,
- R 3 is H, OH, OCH 3 ,
- R 4 is H, O, OH, OCH 3 , OC (O) CH 3 and
- R 5 is H, O, OH is 1 OCH 3 , OC (O) CH 3 ,
- a fifth subject of the present invention is the use of the ginger fraction according to the invention and one or more of the compounds of the general formulas (I) to (VI) isolated therefrom in combination with a medicament for the production of a medicament for inhibiting human cytochrome P450 (CYP ) Enzymes, in particular cytochrome P450 3A4, 1A2, 2C19 and 2C9, for positively influencing the oral bioavailability and pharmacokinetics of active substances. More preferably, the cytochromes P450 1A2, 2C19 and 2C9 are inhibited.
- CYP human cytochrome P450
- the above-mentioned active substances ie the pharmacologically active constituents of medicaments
- pharmaceuticals means substances and preparations of substances which are intended, by application on or in the human or animal body, to heal, alleviate, prevent or treat diseases, ailments, physical injuries or pathological complaints detect;
- Cytochrome P450 (CYP) enzymes are enzymes from the family of cytochrome P450 monooxygenases that are known to be involved in the metabolism of drugs. In particular, these are all P450 enzymes of the families CYP1A, CYP1B, CYP2A, CYP2B, CYP2C, CYP2D, CYP2E, CYP2F, CYP2J, CYP3A, CYP4A.
- a sixth aspect of the present invention comprises a process for the preparation of a medicament for increasing the bioavailability of an oral administering a pharmaceutical compound comprising the oral administration of the pharmaceutical compound together with a ginger fraction according to any one of claims 8 to 10 to a person in need of such treatment, wherein the ginger fraction is administered in an amount necessary to increase the bioavailability of the pharmaceutical compound over the sole administration of the pharmaceutical compound.
- the pharmaceutical compound is characterized by being metabolized by cytochrome P450 enzymes, preferably by P450 3A4, 1A2, 2C9 and 2C19.
- a seventh subject of the present invention comprises a pharmaceutical formulation comprising the ginger fraction obtainable according to the invention or at least one compound of the general formulas I to VI, their enantiomers or their diastereomers, in addition to optionally one or more pharmaceutically acceptable excipients and / or diluents for improvement oral bioavailability and pharmacokinetics of drugs.
- such a pharmaceutical composition consists of two or more, optionally physically separate components and comprises:
- a second component comprising a pharmaceutical composition comprising a pharmaceutical compound metabolised by cytochrome P450 enzymes and one or more pharmaceutically acceptable diluents and / or carriers.
- the first component consists of at least one compound of the general formulas I to VI, their enantiomers or their diastereomers. In a further preferred pharmaceutical composition, the first component consists of at least one compound of the formulas (1) to (12), their enantiomers or their diastereomers.
- the drug contained in the second component is preferably metabolized by the enzymes cytochrome P450 1A2, 3A4, 2C9 and 2C19.
- corn starch, lactose cane sugar, microcrystalline cellulose, magnesium stearate, polyvinyl pyrrolidone, citric acid, tartaric acid, water, water / ethanol, water / glycerol, water / sorbitol, water / polyethylene glycol, propylene glycol, cetylstearyl alcohol, Carboxymethylcellulose or fatty substances such as Hart ⁇ fat or their suitable mixtures are incorporated into common pharmaceutical preparations such as tablets, dragees, capsules, powders, suspensions, solutions, metered aerosols or suppositories.
- Residues are combined and shaken three times with 40 mL each 70 0 C warm water. The supernatant is discarded again and the supernatant
- Scheme 1 shows an overview of the extraction process of the ginger fraction of oleoresin according to the invention with removal of the essential oils.
- the ginger fraction thus obtained was further purified by solid phase extraction on a C18 phase.
- the eluent of the solid phase extraction was brought to dryness and further investigated by means of semipreparative high-pressure liquid chromatography (HPLC). For this purpose, smaller aliquots of 5 to 10 mg were injected into the semipreparative HPLC system. The eluent of the HPLC column was then collected in 60 to 65 individual fractions and each of those obtained Fractions examined for their inhibitory effect on various P450 test reactions. The results of these investigations ( Figures 1 to 4) showed clearly demarcated zones (peaks) of higher inhibitory potency.
- the ginger fraction or different fractions of the extraction process are examined for their inhibition of CYP.
- 100 ⁇ g of human liver microsomes are incubated with 0.01 to 100 ⁇ g of ginger fraction and 7.34 ⁇ g (10 nmol) of erythromycin at pH 7.4 in the presence of NADPH.
- the inhibition of CYP activity is determined by comparison with control incubations without ginger extract (with equal solvent concentration).
- Test B As a specific test reaction for CYP 1A2, the phenacetin O-deethylation is used.
- the ginger fraction or different fractions of the extraction process are examined for their inhibition of CYP.
- 125 mg of human liver microsomes are incubated with 0.01 to 100 mg of ginger fraction and 5 nmol of phenacetin at pH 7.4 in the presence of NADPH (1 mM) in a total volume of 250 ⁇ l.
- the inhibition of CYP activity is determined by comparison with control incubations without ginger extract (with equal solvent concentration).
- S-mephenytoin 4 "hydroxylation is used as a specific test reaction for CYP 2C19.
- the ginger fraction or the various fractions of the extraction process are examined for their inhibition of CYP.
- 125 mg of human liver microsomes are incubated with 0.01 to 100 mg of ginger fraction and 12.5 nmol of S-mephenytoin at pH 7.4 in the presence of NADPH (1 mM) in a total volume of 250 ⁇ l.
- the inhibition of CYP activity is determined by comparison with control incubations without ginger extract (with the same solvent concentration).
- the ginger fraction or different fractions of the extraction process are examined for their inhibition of CYP.
- 125 mg of human liver microsomes are incubated with 0.01 to 100 mg ginger fraction and 37.5 nmol tolbutamide at pH 7.4 in the presence of NADPH (1 mM) in a total volume of 250 ⁇ l.
- the inhibition of CYP activity is determined by comparison with control incubations without ginger extract (with the same solvent concentration).
- Scheme 1 shows an overview of the extraction process of the ginger fraction according to the invention of an oleoresin with removal of the essential oils.
- Figure 1 shows the HPLC separation of a ginger extract and the determination of the inhibitory potency against CYP3A4 for the eluted HPLC fractions (collection interval: 1 minute).
- Figure 2 shows the HPLC separation of a ginger extract and the determination of the inhibitory potency against CYP1A2 for the eluted HPLC fractions (collection interval: 1 minute).
- Figure 3 shows the HPLC separation of a ginger extract and the determination of the inhibitory potency against CYP2C19 for the eluted HPLC fractions (collection interval: 1 minute).
- Figure 4 shows the HPLC separation of a ginger extract and the determination of the inhibitory potency against CYP2C9 for the eluted HPLC fractions (collection interval: 1 minute).
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Abstract
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung einer Ingwer-Fraktion, die mittels dieses Verfahrens hergestellte Fraktion sowie deren Verwendung allein oder in Kombination mit Arzneimitteln zur Inhibierung humaner Cytochrom P450 (CYP) Enzyme (insbesondere Cytochrom P450 3A4, CYP3A4) zur positiven Beeinflussung der oralen Bioverfügbarkeit und Pharmakokinetik von Wirkstoffen.
Description
Verfahren zur Herstellung einer Ingwer-Fraktion und deren Verwendung zur Inhibierung humaner CYP Enzyme
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung einer Ingwer-Fraktion, die mittels dieses Verfahrens hergestellte Fraktion sowie deren Verwendung allein oder in Kombination mit Arzneimitteln zur Inhibierung humaner Cytochrom P450 (CYP) Enzyme (insbesondere Cytochrom P450 3A4, CYP3A4) zur positiven Beeinflussung der oralen Bioverfügbarkeit und Pharmakokinetik von Wirk¬ stoffen.
Hintergrund der Erfindung
Cytochrom P450 (CYP) Enzyme spielen eine zentrale Rolle im Arzneimittelmetabo¬ lismus. Sie finden sich hauptsächlich in der Leber, aber auch in der Darmwand, der Lunge, den Nieren und anderen extrahepatischen Organen. Oral dosierte Wirkstoffe können aufgrund des sogenannten "first-pass-Effekts" eine nur schlechte Bioverfüg¬ barkeit zeigen, beispielsweise solche Wirkstoffe, die einem Metabolismus in der Darmwand oder der Leber vor Erreichen des systemischen Blutkreislaufs unter¬ liegen. Wird der First-pass-Metabolismus gehemmt, kann ein deutlicher Anstieg der Biover- fügbarkeit von oral dosierten Wirkstoffen erreicht werden (Gibbs, Megan A. und Hosea, Natalie A.: Factors affecting the clinical development of cytochrome P450 3A Substrates; Clin. Pharmacokinet. 2003; 42(11), 969-984). Viele Bespiele von Wirk¬ stoff-Wirkstoff Wechselwirkungen, die in einer höheren Bioverfügbarkeit als der verabreichte Wirkstoff resultieren, basieren auf solchen Effekten. Hier wird der First- pass-Metabolismus des Wirkstoffs durch einen anderen gleichzeitig verabreichten Wirkstoff gehemmt.
Durch eine Hemmung des First-pass Metabolismus kann neben einer Erhöhung der Bioverfügbarkeit eines Wirkstoffes auch die Variabilität der Bioverfügbarkeit, die erfahrungsgemäß mit abnehmender absoluter Bioverfügbarkeit ansteigt, deutlich vermindert werden. Durch eine Verminderung der Variabilität, der Bioverfügbarkeit wird der Therapieerfolg einer oralen Arzneimitteltherapie entscheidend verbessert, da es seltener zum Auftreten viel zu hoher (Gefahr unerwünschter Nebenwirkungen) oder viel zu niedriger (Gefahr des Therapieversagens) Arzneistoff-Exposition kommt.
Solche Effekte können in der Wirkstofftherapie etliche Vorteile bieten. Beispielsweise zeigt der HIV-Wirkstoff Lopinavir aufgrund des First-pass-Metabolismus' durch CYP3A4 nur eine unzureichende Bioverfügbarkeit. Gibt man ihn in einer fixed-dose Kombination mit Ritonavir, welches ein potenter Inhibitor von CYP3A4 ist, wird eine deutlich höhere orale Bioverfügbarkeit von Lopinavir erreicht.
Allerdings ist die Kombinationsmöglichkeit eines Wirkstoffs mit schlechter oraler Bioverfügbarkeit mit einem weiteren Wirkstoff oder einer wirkstoffähnlichen Substanz zur Verringerung des First-pass-Effekts begrenzt. Das beruht hauptsächlich auf. der Wirkungsweise des weiteren Wirkstoffs. So kann z.B. eine zu niedrige Bioverfügbar- keit eines Herz-Kreislauf Arzneistoffes aus ethischen Gründen nicht durch gleich¬ zeitige Gabe eines anti-retroviralen Wirkstoffes (Indikation HIV-Infektion) an nicht HlV-infizierte Patienten erhöht. werden. Auch zugelassene Wirkstoffe sind für den Zweck der Inhibierung von Wirkstoff metabolisierenden Enzymen nicht registriert. Stattdessen können in dieser Hinsicht auch Arzneimittelzusätze hilfreich sein. Beispielsweise sind Inhaltsstoffe von Grapefruitsaft potente Inhibitoren von CYP3A4- und Arzneistofftransportern in der Darmwand. Im Stand der Technik gibt es zahlreiche Beispiele, die zeigen, dass die Wirkstoffaufnahme zusammen mit Grapefruitsaft dramatische Auswirkungen auf die Pharmakokinetik, Sicherheit und Wirksamkeit von oral dosierten Wirkstoffen, wie z.B. Simvastatin, Cyclosporin A, Terfenadine etc. (Ameer, Barbara und Weintraub, Randy A.: Drug interactions with grapefruit juice; Clin. Pharmacokinet. 1997; 33(2):103-121 ) hat.
Beschreibung der Erfindung
Ingwer (Zingiber officinalis) ist in weiten Teilen der Welt ein herkömmlicher Nahrungsmittelbestandteil und wird zudem als Phytoarzneimittel für verschiedene Zwecke eingesetzt. Beispielsweise ist das Pulver der Ingwerwurzel als Mittel zur Verhinderung der Seekrankheit erhältlich. Er enthält etwa 5 bis 8% eines zähflüssigen Balsams (Oleoresin), welcher eine nicht wasserdampfflüchtige Scharfstoff-Fraktion sowie eine flüchtige ätherische Öl- Fraktion beinhaltet.
Das schwachgelbe ätherische Öl nimmt einen Anteil von etwa 20 bis 25% des Oleoresins ein. Je nach Herkunft ist die Zusammensetzung des ätherischen Öls starken Schwankungen unterworfen. Es enthält als Hauptbestandteil Sesquiterpen-
kohlenwasserstoffe des Bisabolon-Typs, vor allem (-)-α-Zingiberen neben (-)-ß-Sesquiphellandren, (-)-ß-Bisabolen, (+)-ar-Curcumen und das acyclische α-Farnesen (Deutsche Apothekerzeitung 1997, 137(47), 40-46). Die Hauptkomponente der Scharfstoff-Fraktion mit einem Anteil von ca. 25% des Oleoresins stellt die homologe Reihe der Gingerole dar (HagerROM 2002: Zingiberis rhizoma, Springer Verlag, Heidelberg).
Überraschenderweise haben in vitro Versuche zur Hemmung von CYP durch verschiedene Wirkstoffe und andere Verbindungen gezeigt, dass eine potente Hemmung verschiedener humaner CYP's durch eine Ingwer-Fraktion erreicht werden kann, die nach einem erfindungsgemäßen Extraktionsverfahren erhalten wird. Diese Fraktion zeigt eine höhere Hemmpotenz (IC50 im Bereich unter 1 μg/ml) sowohl im Vergleich zu dem kommerziell verfügbaren Ingwer-Gesamtextrakt (dem sogenannten Oleoresin) als auch im Vergleich zu der leichtflüchtigen Fraktion des ätherischen Ingweröls (IC50 ca. 23 μg/ml), welche im ersten Extraktionsschritt abgetrennt wird.
Die hier gewonnene Fraktion ist schlecht löslich in Hexan und unterscheidet sich durch diese Eigenschaft von der Fraktion des ätherischen Öls, für das bereits Hemmung von CYP3A4 gezeigt wurde (US 5,665,386).
Das erfindungsgemäße Verfahren geht von einem kommerziell erhältlichen Oleoresin aus und umfasst mehrere Extraktionsschritte mit organischen und wässrigen Lösungsmitteln.
Ein erster Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist somit ein Verfahren zur Isolierung einer Ingwer-Fraktion unter Abtrennung des ätherischen Öls, umfassend die Schritte
(a) Extraktion eines Oleoresins mit einem unpolaren organischen Lösungs- mittel;
(b) Extraktion der vereinigten Rückstände aus Schritt (a) mit warmem Wasser und Verwerfung des Überstands.
Die so gewonnenen Rückstände besitzen für CYP3A4 einen IC50-Wert von 0.9 μg/mL Dieser Wert wird mit dem im experimentellen Teil beschriebenen Experiment mit humanen Lebermikrosomen erhalten.
In einer bevorzugten Ausführungsform wird der so erhaltene Rückstand weiter aufgereinigt durch ein Verfahren, umfassend die Schritte
(c) Extraktion der vereinigten Rückstände aus Schritt (b) mit warmem Alkohol und
(d) Aufkonzentrieren der vereinigten Überstände aus Schritt (c).
Die in Schritt (d) erhaltene Fraktion kann in einem Alkohol, vorzugsweise Methanol oder Ethanol, gelöst und gegebenenfalls weiter fraktioniert werden, beispielsweise mittels .Festphasenextraktion und stufenweiser Elution.
Als unpolare organische Lösungsmittel zur Verwendung in Schritt (a) kommen erfindungsgemäß niedrig siedende Alkan-Lösungsmittel wie beispielsweise Hexan, Heptan, Octan, Pentan oder Cyclohexan, petrochemische Destillate, Treibstoffe und Lösungsmittel wie beispielsweise Benzin, Kerosin, Petrolether, Petroleum sowie andere niedrig siedende, flüchtige und unpolare Lösungsmittel wie beispielsweise Diethylether, ferf.-Butyl-Methylether, Tetrahydrofuran, Benzol, Toluol, XyIoIe in Betracht, wobei Hexan bevorzugt verwendet wird. Der in den Schritten (c).und (e) verwendete Alkohol kann ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Methanol, Ethanol, Isopropanol, n-Propanol, n-Butanol und anderen stellungsisomeren Butanolen, n-Pentanol und anderen stellungsisomeren Pentanolen und kann gleich oder verschieden sein. Vorzugsweise kommt Methanol zum Einsatz. Das Extraktionsmittel wird jeweils in Mengen von 4 bis 10 mL/g, vorzugsweise 4 bis 7 mL/g, des eingesetzten Oleoresins verwendet.
Die wässrigen Extraktionen werden vorzugsweise bei einer Temperatur von 50 bis 800C, besonders bevorzugt 65 bis 750C, ausgeführt.
Alternativ zu diesem Verfahren können auch Extraktionen mit geeigneten wäßrigen organischen Säuren angewendet werden oder anstelle einer flüssig-flüssig Extraktion
mit organischen Lösungsmitteln auch Festphasenextraktionen mit geeigneten unpolaren Sorbentien angewendet werden.
Die in den Schritten (a), (b) und (c) durchgeführten Extraktionen können ein- oder mehrfach durchgeführt werden, wobei die das gewünschte Produkt enthaltende Phase aus den verschiedenen Extraktionen eines Arbeitschrittes vereinigt werden. Vorzugsweise wird die Extraktion eines jeden Arbeitsschrittes dreimal durchgeführt und die das Produkt enthaltenen Phasen vereinigt. Die vereinigten Phasen werden anschließend weiter verarbeitet.
Ein zweiter Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die erfindungsgemäße Ingwer-Fraktion, erhältlich nach einem der erfindungsgemäßen Verfahren.
Bevorzugt ist dabei eine Ingwer-Fraktion, die mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formeln
- (V)
worin
n die Zahl 1 , 2 oder 3,
R1 H, CH3,
R2 H, CH3,
R3 H, OH, OCH3,
R4 H, O, OH, OCH3, OC(O)CH3 und
R5 H, O, OH, OCH3, OC(O)CH3 bedeuten,
eines deren Enantiomere oder Diastereomere enthält.
Als besonders bevorzugte Verbindungen der vbranstehend genannten allgemeinen Formeln I bis VI seien die folgenden genannt:
(2)
(10)
deren Enantiomere und deren Diastereomere.
Die Verbindungen der allgemeinen Formeln I bis VI wurden aus der erfindungs¬ gemäß erhaltenen Ingwer-Fraktion identifiziert. Um diese Ingwer-Fraktion näher zu charakterisieren und ihre Inhaltsstoffe aufzuklären, wurde diese in geeigneter Weise weiter aufgereinigt mit dem Ziel, gereinigte Fraktionen einzelner Inhaltsstoffe zu isolieren.
Hierzu wurde die erfindungsgemäß erhaltene Ingwer-Fraktion durch Festphasen- θxtraktion an einer C18-Phase weiter aufgereinigt. Der Eluent der Festphasen¬ extraktion wurde zur Trockne gebracht und mittels semipräparativer Hochdruck- Flüssigkeitschromatographie (HPLC) weiter untersucht. Hierzu wurden kleinere Aliquots von 5 bis 10 mg in das semipräparative HPLC-System injiziert. Der Eluent der HPLC-Säule wurde anschließend in 60 bis 65 Einzelfraktionen gesammelt und jede der so erhaltenen Fraktionen auf Ihre Hemmwirkung auf verschiedene P450- Testreaktionen untersucht. Das Ergebnis dieser Untersuchungen zeigte deutlich abgegrenzte Zonen (Peaks) höherer Hemmpotenz. •
Zur Aufklärung der chemischen Struktur der Inhaltsstoffe der einzelnen Fraktionen wurden ausgewählte Proben durch wiederholte HPLC weiter aufgereinigt und konzentriert und anschließend mittels Massenspektrometrie und NMR-Spektroskopie untersucht.
Bei den erfindungsgemäß identifizierten Verbindungen (1 ) bis (12) handelt es sich um die bereits in der Literatur hinreichend beschriebenen typischen Inhaltsstoffe der nichtflüchtigen Scharfstoff-Fraktion von Ingwer. Neben verschiedenen Abwandlungs¬ produkten des Gingerole und ihren verschiedenen Homologen wurde auch ein bekannter Hauptinhaltsstoff von Ingwer, das [8]-Gingerol (12), sowie [6]-Shogaol (9), das Zersetzungsprodukt des mengenmäßig größten Hauptinhaltsstoffes [6]-Gingerol, gefunden.
Hiermit konnte bestätigt werden, dass sich die nach dem beschriebenen Verfahren hergestellte Ingwer-Fraktion aus der nichtflüchtigen Scharfstoffraktion ableitet und die Hemmung der CYP Enzyme durch Inhaltsstoffe des Gingerol-Typs sowie seiner Strukturabwandlungen und Zersetzungsprodukte bewirkt wird.
Ein dritter Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfin¬ dungsgemäßen Ingwer-Fraktion sowie einer oder mehrerer der daraus isolierten Verbindungen der allgemeinen Formeln (I) bis (VI) zur Herstellung eines Arznei¬ mittels zur Inhibierung von Cytochrom P450 Enzymen, insbesondere von Cytochrom P450 3A4, 1A2, 2C19 und 2C9.
Weiter bevorzugt werden die Cytochrome P450 1A2, P450 2C19 und P450 2C9 gehemmt.
Ein vierter Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung einer oder mehrerer Verbindungen der allgemeinen Formeln
worin
n die Zahl 1 , 2 oder 3,
R1 H, CH3,
R2 H1 CH3,
R3 H, OH, OCH3,
R4 H, O, OH, OCH3, OC(O)CH3 und
R5 H, O, OH1 OCH3, OC(O)CH3 bedeuten,
deren Enantiomere oder Diastereomere zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Inhibierung von Cytochrom P450 1A2, 2C9 und 2C19.
Besonders bevorzugt seien die folgenden Verbindungen der allgemeinen Formeln I bis IV genannt:
deren Enantiomere und deren Diastereomere.
Ein fünfter Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Ingwer-Fraktion sowie einer oder mehrerer der daraus isolierten Verbindungen der allgemeinen Formeln (I) bis (VI) in Kombination mit einem Arznei¬ mittel zur Herstellung eines Arzneimittels zur Inhibierung humaner Cytochrom P450 (CYP) Enzyme, insbesondere Cytochrom P450 3A4, 1A2, 2C19 und 2C9, zur positiven Beeinflussung der oralen Bioverfügbarkeit und Pharmakokinetik von Wirk¬ stoffen. Weiter bevorzugt werden die Cytochrome P450 1A2, 2C19 und 2C9 gehemmt.
Viele Wirkstoffe weisen eine niedrige orale Bioverfügbarkeit auf, die durch den sogenannten first-pass Metabolismus hervorgerufen wird. Hierbei handelt es sich um den metabolischen Abbau von oral verabreichten Wirkstoffen im Dünndarm oder in der Leber, noch bevor diese über den Blutkreislauf zu ihrem Wirkorgan gelangen können. Dabei können die voranstehend erwähnten Wirkstoffe, d.h. die pharmakologisch akti¬ ven Bestandteile von Arzneimitteln, ausgewählt sein aus einer Gruppe bestehend
aus Arzneimitteln zur Beeinflussung des Herz-Kreislauf Systems im weitesten Sinne, einschließlich solcher Stoffe, die der Beeinflussung der Zusammensetzung des Blutes (z.B. Blutlipide) dienen; Arzneimitteln mit Wirkung auf das zentrale Nerven¬ system; Arzneimitteln zur Behandlung von Stoffwechselerkrankungen (z.B. Diabetes mellitus); Arzneimitteln zur Behandlung von entzündlichen Prozessen im weitesten Sinne; Arzneimitteln zur Beeinflussung des Immunsystems; Arzneimitteln zur Behandlung von Infektionen durch Bakterien, Einzellern, mehrzelligen Parasiten, Viren, Pilze, oder Prionen; Arzneimitteln zur Behebung oder Verbesserung degene¬ rativer Prozesse verschiedener Organe, insbesondere des Gehirns, und Arznei- mittein zur Behandlung von Krebs.
Dabei sind unter dem Begriff "Arzneimittel" Stoffe und Zubereitungen aus Stoffen zu verstehen, die dazu bestimmt sind, durch Anwendung am oder im menschlichen oder tierischen Körper 1. Krankheiten, Leiden, Körperschäden oder krankhafte Beschwerden zu heilen, zu lindern, zu verhüten oder zu erkennen;
2. die Beschaffenheit, den Zustand oder die Funktionen des Körpers oder seelische Zustände erkennen zu lassen;
3. vom menschlichen oder tierischen Körper erzeugte Wirkstoffe oder Körperflüssigkeiten zu ersetzen;
4. Krankheitserreger, Parasiten oder körperfremde Stoffe abzuwehren, zu beseitigen oder unschädlich zu machen oder
5. die Beschaffenheit, den Zustand oder die Funktionen des Körpers oder seelische Zustände zu beeinflussen. '
Cytochrom P450 (CYP) Enzyme sind hier diejenigen Enzyme aus der Familie der Cytochrom P450 Monooxygenasen die nach dem Stand der Wissenschaft am Metabolismus von Arzneimitteln beteiligt sind. Insbesondere sind dies alle P450 Enzyme der Familien CYP1A, CYP1 B, CYP2A, CYP2B, CYP2C, CYP2D, CYP2E, CYP2F, CYP2J, CYP3A, CYP4A.
Ein sechster Gegenstand der vorliegenden Erfindung umfasst ein Verfahren zur Herstellung eines Arzneimittels zur Erhöhung der Bioverfügbarkeit einer oral zu
applizierenden pharmazeutischen Verbindung, umfassend die orale Applikation der pharmazeutischen Verbindung zusammen mit einer Ingwer-Fraktion gemäß einem der Ansprüche 8 bis 10 an eine Person, die einer solchen Behandlung bedarf, wobei die Ingwer-Fraktion in einer Menge verabreicht wird, die nötig ist, um die Bioverfügbarkeit der pharmazeutischen Verbindung gegenüber der alleinigen Gabe der pharmazeutischen Verbindung zu erhöhen.
Die pharmazeutische Verbindung ist dadurch gekennzeichnet, dass sie durch Cytochrom P450 Enzyme metabolisiert wird, vorzugsweise durch P450 3A4, 1A2, 2C9 und 2C19.
Ein siebter Gegenstand der vorliegenden Erfindung umfasst eine pharmazeutische Formulierung, enthaltend die erfindungsgemäß erhältliche Ingwer-Fraktion oder mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formeln I bis Vl, deren Enatiomere oder deren Diastereomere neben gegebenenfalls einem oder mehreren pharma- zeutisch verträglichen Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln zur Verbesserung der oralen Bioverfügbarkeit und Pharmakokinetik von Wirkstoffen.
Vorzugsweise besteht eine solche pharmazeutische Zusammensetzung aus zwei oder mehreren, gegebenenfalls physikalisch voneinander getrennten Komponenten und umfasst:
(a) eine erste Komponente bestehend aus der erfindungsgemäßen Ingwer-Fraktion und ein oder mehrere pharmazeutisch verträgliche Verdünnungsmittel und/oder Trägerstoffe; und
(b) eine zweite Komponente enthaltend ein Arzneimittel, umfassend eine pharmazeutische Verbindung, die durch Cytochrom P450 Enzyme metabolisiert wird, und einen oder mehrere pharmazeutisch verträgliche Verdünnungsmittel und/oder Trägerstoffe.
In einer bevorzugten pharmazeutischen Zusammensetzung besteht die erste Komponente aus mindestens einer Verbindung der allgemeinen Formeln I bis VI, deren Enatiomeren oder deren Diastereomeren.
In einer weiter bevorzugten pharmazeutischen Zusammensetzung besteht die erste Komponente aus mindestens einer Verbindung der Formeln (1) bis (12), deren Enantiomere oder deren Diastereomere.
Das in der zweiten Komponente enthaltene Arzneimittel wird vorzugsweise durch die Enzyme Cytochrom P450 1A2, 3A4, 2C9 und 2C19 metabolisiert.
Als pharmazeutisch verträgliche Trägerstoffe und/oder Verdünnungsmittel können üblicherweise Maisstärke, Milchzucker, Rohrzucker, mikrokristalliner Zellulose, Magnesiumstearat, Polyvinylpyrrolidon, Zitronensäure, Weinsäure, Wasser, Wasser/- Ethanol, Wasser/Glycerin, Wasser/Sorbit, Wasser/Polyethylenglykol, Propylenglykol, Cetylstearylalkohol, Carboxymethylcellulose oder fetthaltigen Substanzen wie Hart¬ fett oder deren geeigneten Gemischen, in übliche galenische Zubereitungen wie Tabletten, Dragees, Kapseln, Pulver, Suspensionen, Lösungen, Dosieraerosole oder Zäpfchen eingearbeitet werden .
Experimenteller Teil
10 g eines Oleoresins (Fa. Eramex Aromatics GmbH) werden dreimal mit je 50 mL Hexan ausgeschüttelt und der Überstand (organische Phase) verworfen. Die
Rückstände werden vereinigt und dreimal mit je 40 mL 700C warmem Wasser ausgeschüttelt. Der Überstand wird wiederum verworfen und die vereinigten
Rückstände dreimal mit je 40 mL 700C warmem Methanol extrahiert. Der Rückstand wird verworfen Der erhaltene Überstand wird einrotiert und wiederum in Methanol gelöst.
Schema 1 zeigt eine Übersicht über den Extraktionsvorgang der erfindungsgemäßen Ingwer-Fraktion des Oleoresins unter Abtrennung der ätherischen Öle.
Anschließend wurde die so erhaltene Ingwer-Fraktion durch Festphasenextraktion an einer C18-Phase weiter aufgereinigt. Der Eluent der Festphasenextraktion wurde zur Trockne gebracht und mittels semipräparativer Hochdruck-Flüssigkeitschromato¬ graphie (HPLC) weiter untersucht. Hierzu wurden kleinere Aliquots von 5 bis 10 mg in das semipräparative HPLC-system injiziert. Der Eluent der HPLC-Säule wurde anschließend in 60 bis 65 Einzelfraktionen gesammelt und jede der so erhaltenen
Fraktionen auf Ihre Hemmwirkung auf verschiedene P450-Testreaktionen untersucht. Das Ergebnis dieser Untersuchungen (Abbildungen 1 bis 4) zeigte deutlich abgegrenzte Zonen (Peaks) höherer Hemmpotenz.
Experimente mit humanen Lebermikrosomen
Test (A):
Als spezifische Testreaktion für CYP 3A4 wird die Erythromycin /V-Demethylierung verwendet.
Die Ingwer-Fraktion bzw. die verschiedenen Fraktionen des Extraktionsverfahrens werden bezüglich ihrer Hemmung von CYP untersucht. Dazu werden 100 μg Humanlebermikrosomen mit 0.01 bis 100 μg Ingwer-Fraktion und 7.34 μg (10 nmol) Erythromycin bei pH 7.4 in Gegenwart von NADPH inkubiert. Die Hemmung der CYP-Aktivität wird bestimmt durch Vergleich mit Kontrollinkubationen ohne Ingwerextrakt (mit gleicher Lösungsmittelkonzentration).
Test B: Als spezifische Testreaktion für CYP 1A2 wird die Phenacetin O-Deethylierung ver¬ wendet.
Die Ingwer-Fraktion bzw. die verschiedenen Fraktionen des Extraktionsverfahrens werden bezüglich ihrer Hemmung von CYP untersucht. Dazu werden 125 mg Humanlebermikrosomen mit 0.01 bis 100 mg Ingwer-Fraktion und 5 nmol Phenacetin bei pH 7.4 in Gegenwart von NADPH (1 mM) in einem Gesamtvolumen von 250 μl inkubiert. Die Hemmung der CYP-Aktivität wird bestimmt durch Vergleich mit Kontrollinkubationen ohne Ingwerextrakt (mit gleicher Lösungsmittelkonzentration).
Test C:
Als spezifische Testreaktion für CYP 2C19 wird die S-Mephenytoin 4"-Hydroxylierung verwendet.
Diθ Ingwer-Fraktion bzw. die verschiedenen Fraktionen des Extraktionsverfahrens werden bezüglich ihrer Hemmung von CYP untersucht. Dazu werden 125 mg Humanlebermikrosomen mit 0.01 bis 100 mg Ingwer-Fraktion und 12.5 nmol S-Mephenytoin bei pH 7.4 in Gegenwart von NADPH (1 mM) in einem Gesamt¬ volumen von 250 μl inkubiert. Die Hemmung der CYP-Aktivität wird bestimmt durch Vergleich mit Kontrollinkubationen ohne Ingwerextrakt (mit gleicher Lösungsmittel¬ konzentration).
Test D:
Als spezifische Testreaktion für CYP 2C9 wird die Tolbutamid-Hydroxylierung verwendet.
Die Ingwer-Fraktion bzw. die verschiedenen Fraktionen des Extraktionsverfahrens werden bezüglich ihrer Hemmung von CYP untersucht. Dazu werden 125 mg Humanlebermikrosomen mit 0.01 bis 100 mg Ingwer-Fraktion und 37.5 nmol Tolbutamid bei pH 7.4 in Gegenwart von NADPH (1 mM) in einem Gesamtvolumen von 250 μl inkubiert. Die Hemmung der CYP-Aktivität wird bestimmt durch Vergleich mit Kontrollinkubationen ohne Ingwerextrakt (mit gleicher Lösungsmittelkonzentra¬ tion).
Kurzbeschreibung der Abbildungen
Schema 1 zeigt eine Übersicht über den Extraktionsvorgang der erfindungsgemäßen Ingwer-Fraktion eines Oleoresins unter Abtrennung der ätherischen Öle.
Abbildung 1 zeigt die HPLC-Trennung eines Ingwer-Extrakts und die Bestimmung der Hemmpotenz gegenüber CYP3A4 für die eluierten HPLC-Fraktionen (Sammel- intervall: 1 Minute).
Abbildung 2 zeigt die HPLC-Trennung eines Ingwer-Extrakts und die Bestimmung der Hemmpotenz gegenüber CYP1A2 für die eluierten HPLC-Fraktionen (Sammel¬ intervall: 1 Minute).
Abbildung 3 zeigt die HPLC-Trennung eines Ingwer-Extrakts und die Bestimmung der Hemmpotenz gegenüber CYP2C19 für die eluierten HPLC-Fraktionen (Sammel¬ intervall: 1 Minute).
Abbildung 4 zeigt die HPLC-Trennung eines Ingwer-Extrakts und die Bestimmung der Hemmpotenz gegenüber CYP2C9 für die eluierten HPLC-Fraktionen (Sammel¬ intervall: 1 Minute).
Schema 1 : Übersicht über den Extraktionsvorgang der erfindungsgemäßen Ingwer- Fraktion eines Oleoresins unter Abtrennung der ätherischen Öle
Oleoresin (10 g)
Ausschütteln mit Hexan (3x50 ml)
Rückstand Überstand verworfen
Ausschütteln mit Wasser (IC50: 22.6 μg/ml) (3x 40 ml, 70 0C)
Rückstand Überstand
(IC50: 0.9 μg/ml) verworfen (IC50: 13.3 μg/ml)
Ausschütteln mit Methanol (3x 40 ml, 700C)
Rückstand verworfen (keine Hemmung)
Claims
1. Verfahren zur Isolierung einer Ingwer-Fraktion unter Abtrennung des ätherischen Öls, umfassend die Schritte
(a) Extraktion eines Oleoresins mit einem unpolaren organischen Lösungs¬ mittel;
(b) Extraktion der vereinigten Rückstände aus Schritt (a) mit warmem Wasser und Verwerfung des Überstands.
2. Verfahren gemäß Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass die in Schritt (b) erhaltenen vereinigten Rückstände weiter aufgereinigt werden durch ein Verfahren, umfassend die Schritte
(c) Extraktion mit warmem Alkohol und
(d) Aufkonzentrieren der vereinigten Überstände aus Schritt (c).
3. Verfahren gemäß Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass in Schritt (a) als unpolares organisches Lösungsmittel ein niedrig siedendes Alkan-Lösungsmittel, ein petrochemisches Destillat, ein Treibstoff oder ein anderes niedrig siedendes, flüchti¬ ges und unpolares Lösungsmittel verwendet wird.
4. Verfahren gemäß Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass in Schritt (a) als unpolares organisches Lösungsmittel Hexan verwendet wird.
5. Verfahren gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass in Schritt (c) als Alkohol Methanol, Ethanol, Isopropanol, /7-Propanol, n-Butanol oder ein anderes stellungsisomeres Butanol, n-Pentanol oder ein anders stellungsisomeres Pentanol verwendet wird.
6. Verfahren gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass in Schritt (c) als Alkohol Methanol verwendet wird.
7. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass das in den Schritten (a), (b) und (c) verwendete Extraktionsmittel jeweils in Mengen von 4 bis 10 mL/g des eingesetzten Oleoresins verwendet wird.
8. Ingwer-Fraktion, erhältlich nach einem Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7.
9. Ingwer-Fraktion gemäß Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass sie mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formeln
worin n die Zahl 1 , 2 oder 3,
R1 H, CH3,
R2 H1 CH3,
R3 H, OH, OCH3,
R4 H, O, OH, OCH3, OC(O)CH3 und
R5 H, O, OH, OCH3, OC(O)CH3 bedeuten,
eines deren Enantiomere oder Diastereomere enthält.
10. Ingwer-Fraktion gemäß Anspruch 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, dass sie mindestens eine der folgenden Verbindungen enthält:
deren Enantiomere und deren Diastereomere.
11. Verwendung der Ingwer-Fraktion gemäß einem der Ansprüche 8 bis 10 zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Inhibierung von Cytochrom P450 Enzymen.
12. Verwendung einer oder mehrerer Verbindungen nach einem der Ansprüche 9 oder 10, deren Enantiomere oder deren Diastereomere zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Inhibierung humaner Cytochrom P450 Enzyme.
13. Verwendung gemäß einem der Ansprüche 11 oder 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Cytochrome P450 3A4, 1A2, 2C19 und 2C9 inhibiert werden.
14. Verwendung gemäß einem der Ansprüche 11 oder 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Cytochrome P450 1A2, 2C9 und 2C19 gehemmt werden.
15. Verwendung einer oder mehrerer Verbindungen der allgemeinen Formeln
worin n die Zahl 1 , 2 oder 3,
R2 H, CH3,
R3 H, OH, OCH3,
R4 H, O, OH, OCH3, OC(O)CH3 und
R5 H, O, OH, OCH3, OC(O)CH3 bedeuten,
deren Enantiomere oder Diastereomere zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Inhibierung von Cytochrom P450 1A2, 2C9 und 2C19.
16. Verwendung gemäß Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formeln I bis IV ausgewählt sind aus
deren Enantiomere und deren Diastereomere.
17. Verwendung der Ingwer-Fraktion gemäß einem der Ansprüche 8 bis 10 in Kombination mit einem Arzneimitteln zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Inhibierung humaner Cytochrom P450 (CYP) Enzyme.
18. Verwendung einer oder mehrerer Verbindungen nach einem der Ansprüche 9 oder 10, deren Enantiomere oder deren Diastereomere in Kombination mit einem Arzneimittel zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Inhibierung humaner Cytochrom P450 Enzyme.
19. Verwendung gemäß einem der Ansprüche 17 oder 18, dadurch gekenn¬ zeichnet, dass das Enzym Cytochrom P450 3A4, 1 A2, 2C19 oder 2C9 ist.
20. Verwendung gemäß einem der Ansprüche 17 oder 18, dadurch gekenn- zeichnet dass das Enzym Cytochrom P450 1A2, 2C19 oder 2C9 ist.
21. Verfahren zur Herstellung eines Arzneimittels zur Erhöhung der Bioverfügbar- keit einer oral zu applizierenden pharmazeutischen Verbindung, umfassend die orale
Applikation der pharmazeutischen Verbindung zusammen mit einer Ingwer-Fraktion gemäß einem der Ansprüche 8 bis 10 an eine Person, die einer solchen Behandlung bedarf, wobei die Ingwer-Fraktion in einer Menge verabreicht wird, die nötig ist, um die Bioverfügbarkeit der pharmazeutischen Verbindung gegenüber der alleinigen Gabe der pharmazeutischen Verbindung zu erhöhen.
22. Verfahren gemäß Anspruch 21 , dadurch gekennzeichnet, dass die pharma- zeutische Verbindung durch Cytochrom P450 3A4 Enzyme metabolisiert wird.
23. Verfahren gemäß Anspruch 21 , dadurch gekennzeichnet, dass die pharma¬ zeutische Verbindung durch Cytochrom P450 1A2 Enzyme metabolisiert wird.
24. Verfahren gemäß Anspruch 21 , dadurch gekennzeichnet, dass die pharma¬ zeutische Verbindung durch Cytochrom P450 2C9 Enzyme metabolisiert wird.
25. Verfahren gemäß Anspruch 21 , dadurch gekennzeichnet, dass die pharma¬ zeutische Verbindung durch Cytochrom P450 2C19 Enzyme metabolisiert wird.
26. Pharmazeutische Formulierung, enthaltend mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formeln I bis VI, deren Enantiomere oder deren Diastereomere neben gegebenenfalls einem oder mehreren inerten Trägerstoffen und/oder Verdünnungs¬ mitteln.
27. Pharmazeutische Formulierung, enthaltend mindestens eine Verbindung der Formeln (1 ) bis (12), deren Enantiomere oder deren Diastereomere neben gegebe¬ nenfalls einem oder mehreren inerten Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln.
28. Pharmazeutische Zusammensetzung aus zwei oder mehreren, gegebenen¬ falls physikalisch voneinander getrennten Komponenten, umfassend: (a) eine erste Komponente bestehend aus der Ingwer-Fraktion gemäß einem der Ansprüche 8 bis 10 und ein oder mehrere pharmazeutisch verträgliche Verdünnungsmittel und/oder Trägerstoffe; und
(b) eine zweite Komponente enthaltend ein Arzneimittel, umfassend eine pharmazeutische Verbindung, die durch Cytochrom P450 Enzyme metabolisiert wird, und einen oder mehrere pharmazeutisch verträgliche Verdünnungsmittel und/oder Trägerstoffe.
29. Pharmazeutische Zusammensetzung gemäß Anspruch 28, dadurch gekenn¬ zeichnet, dass die erste Komponente mindestens eine Verbindung nach einem der Ansprüche 9 oder 10, deren Enantiomere oder deren Diastereomere enthält.
30. Pharmazeutische Zusammensetzung gemäß einem der Ansprüche 28 oder 29, dadurch gekennzeichnet, dass die pharmazeutische Verbindung der zweiten Komponente durch die Enzyme Cytochrom P450 1A2, 3A4, 2C9 oder 2C19 metabolisiert wird.
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