EP0648536B1 - Mehrgefässanordnung zur Instrumental-Analyse - Google Patents

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EP0648536B1
EP0648536B1 EP94202956A EP94202956A EP0648536B1 EP 0648536 B1 EP0648536 B1 EP 0648536B1 EP 94202956 A EP94202956 A EP 94202956A EP 94202956 A EP94202956 A EP 94202956A EP 0648536 B1 EP0648536 B1 EP 0648536B1
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EP
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well
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multiwell
multiwell arrangement
bottoms
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EP94202956A
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Rudolf Dr. Portmann
Andreas Hirschi
Andreas Wellenreiter
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Schweizerische Eidgenossenschaft Vertreten Durch Das Ac-Laboratorium Spiez Der Gruppe fur Ruestungsdienste
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    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/508—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above
    • B01L3/5085—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above for multiple samples, e.g. microtitration plates
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
    • G01N21/03—Cuvette constructions

Definitions

  • the present invention relates to a multi-vessel arrangement according to the preamble of the claim and to its preferred use.
  • Titer plates in particular microtiter plates, are increasingly used in the instrumental analysis of samples. It has been shown that when using known methods with photometric evaluations, such as ELISA tests (enzyme-linked immunosorbent assay) or enzyme determinations, etc., this is often disturbed by a meniscus formed on the surface of the mostly aqueous samples and thereby the Results are falsified.
  • photometric evaluations such as ELISA tests (enzyme-linked immunosorbent assay) or enzyme determinations, etc.
  • meniscus formation results from surface and interfacial tensions and, depending on the wetting of the liquid, can result in a convex or concave surface.
  • a preferred use of the arrangement is to be shown.
  • the vessel walls and the vessel bottoms are joined in such a way that the one to be analyzed Sample to the vessel wall has a contact angle of approximately 90 °.
  • the vessel bottoms must also have the properties suitable for an evaluation so that they can be penetrated by the radiation source used, without causing reflections which falsify the evaluation.
  • Claim 2 takes into account that most samples are aqueous and therefore polar.
  • a plate-like summary according to claim 3 allows useful evaluation methods on one level (e.g. using coordinate tables) on the one hand and connections between plastics that cannot be glued or welded with difficulty, on the other hand.
  • thermoplastics listed in claim 5 have proven to be particularly advantageous for samples with polar solutions.
  • radioactive radiation can be used to produce surfaces on vessel walls or floors.
  • microtiter plates with approx. 100 tubes (in praxi 96) so that the samples must be distinguishable from one another, which is possible according to claim 7 by means of color markings on the tubes and / or on components of the arrangement or on a distinctive protective cover.
  • the assembly of the arrangement can be simplified by using centering pins or spacer elements.
  • the preferred use according to claim 10 is directed to light-optical evaluations by means of video cameras and allows operation in transmission.
  • Fig. 1 denotes a vessel wall.
  • 96 vessel bottoms 2 are arranged in a plate-like manner and form the corresponding number of vessels 11 with the vessel walls 1.
  • centering bores 5 with centering pins / spacers 6 arranged concentrically therein and an overlying grid hood 7 with centering bores 7a for the vessels 11 can be seen.
  • FIG. 2 shows the grid hood 7 with a vessel 11, for example drawn in and centered by this hood 7.
  • the formation of the circumferential support edge 8 can also be seen.
  • the receptacles 11 with their receptacle walls 1 enclose elevations 2 ′ arranged on a bottom plate 2 ′′, see FIG. 3, and that they are guided and centered at the top through the grid hood 7 through the bores 7a are.
  • FIG. 3 shows the configuration of the connecting webs 4 present between the individual vessels 11.
  • the height of the vessel walls 1 is selected such that they do not lie directly on the bottom plate 2 ′′ at the bottom and only protrude slightly above the grid hood 7 with its centering holes 7a at the top.
  • the elevations 2 ' are on the edge through the vessel walls 1 sealed, it being apparent that the wall of the latter is designed conically in order to achieve a desired additional elasticity of the lower end regions of the vessels 11.
  • the base plate 2 ′′ is provided with a circumferential edge and forms a holding shell 3 due to its box shape.
  • Vessels 11, preferably 16, which have been combined into assemblies have proven successful, each of which is guided in the center through a centering bore 5 in the connecting web 4 by means of a centering pin / spacer 6 during assembly.
  • the element 6 lies freely in the bore 5 in a once assembled assembly, as can be seen from FIG. 4; it also serves to distance the grid hood 7 from the base plate 2 ′′.
  • FIG. 4 further shows the planar surface 20 of a sample liquid 21 with, for example, drawn-in organisms 22.
  • FIG. 1 there is a protective cover 15, shown schematically, which, due to its edge regions (not shown here), can be placed unmistakably on the surface of the arrangement, FIG. 1.
  • the vessel walls 1 and thus the vessels 11 consist of polypropylene; the vessel bottoms 2 with their elevations 2 'made of transparent polystyrene.
  • the grid hood 7 is injection molded from transparent polystyrene.
  • the invention has proven itself above all with transparent vessel bottoms for video viewing and evaluation in transmission, the video camera preferably being arranged below the vessel bottoms; see. Fig. 1, wherein the camera is arranged on the viewer side.
  • the shadow and contrast problems that occur with conventional titer plates can be completely eliminated with the subject matter of the invention.
  • Microtiter plates with the dimensions of 125 x 80 mm and a height of 15 mm with 96 tubes with 7 mm inside diameter and a total depth of 9.5 mm have proven themselves in instrumental and automated tests with a wide variety of aqueous solutions. For example with 405.0 mM NaCl + 18.9 mM MgSO 4 * 7H 2 O + 16.4 mM MgCl 2 * 6H 2 O + 7.3 mM CaCl 2 * 2H 2 O + 1.59 mM NaHCO 3 + 6.65 mM KCl.

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Description

  • Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf eine Mehrgefässanordnung nach dem Oberbegriff des Patentanspruches sowie auf deren bevorzugte Verwendung.
  • Titerplatten, insbesondere Mikrotiterplatten werden in zunehmendem Masse bei der Instrumental-Analyse von Proben verwendet. Es hat sich dabei gezeigt, dass bei der Anwendung bekannter Verfahren mit photometrischen Auswertungen, wie beispielsweise ELISA-Tests (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) oder Enzymbestimmungen etc. diese oft durch einen auf der Oberfläche der meist wässrigen Proben gebildeten Meniskus gestört wird und dadurch die Resultate verfälscht werden.
  • Die Meniskusbildung resultiert bekanntlich durch Oberflächen- und Grenzflächenspannungen und kann je nach Benetzung der Flüssigkeit als konvexe oder konkave Oberfläche resultieren.
  • Es ist daher Aufgabe der Erfindung, eine Mehrgefässanordnung zu schaffen, welche einerseits störende Meniskusbildungen an der Oberfläche verhindert bzw. auf ein zulässiges Mass reduziert und andererseits die Strahlung bei einer Instrumental-Analyse nicht wesentlich absorbiert und/oder den Strahlengang beeinflusst. Zudem soll eine bevorzugte Verwendung der Anordnung aufgezeigt werden.
  • Diese Aufgabe wird nach den Merkmalen des Patentanspruches gelöst.
  • Durch den erfindungsgemässen Einsatz von Materialien unterschiedlicher physikalischer Eigenschaften wird somit eine Anordnung angestrebt, bei der die Gefässwände und die Gefässböden derart zusammengefügt sind, dass die zu analysierende Probe zur Gefässwand einen Randwinkel von zirka 90° aufweist. Die Gefässböden müssen zudem die für eine Auswertung geeigneten Eigenschaften aufweisen, damit sie von der eingesetzten Strahlungsquelle durchdringbar sind, ohne Reflektionen hervorzurufen, welche die Auswertung verfälschen.
  • Unter Anwendung des Erfindungsgedankens können anhand von Tabellen und Experimenten eine Vielzahl von geeigneten Materialkombinationen gefunden werden, welche sich in praxi empirisch optimieren lassen.
  • In abhängigen Ansprüchen sind bevorzugte Weiterbildungen des Erfindungsgegenstandes beschrieben.
  • Anspruch 2 berücksichtigt, dass die meisten Proben wässrig und damit polar sind.
  • Eine plattenartige Zusammenfassung gemäss Anspruch 3 erlaubt einerseits zweckmässige Auswertemethoden in einer Ebene (z.B. unter Verwendung von Koordinatentischen) und andererseits Verbindungen zwischen nicht oder nur mit Schwierigkeiten kleb- und schweissbaren Kunststoffen.
  • Besonders bewährt haben sich die unter dem Einsatz mechanischer Dehnungen zustandegekommenen kraftschlüssigen Verbindungen nach Anspruch 4. - Ebenso können gezielte Wärmedehnungen bei der Montage genutzt werden, um die angestrebten flüssigkeitsdichten Verbindungen zu erzielen.
  • Die in Anspruch 5 aufgeführten Thermoplaste haben sich insbesondere bei Proben mit polaren Lösungen als günstig erwiesen.
  • Durch beispielsweise radioaktive Bestrahlung lassen sich Oberflächen an Gefässwänden oder Böden gemäss Anspruch 6 erzeugen.
  • Es ist üblich, Mikrotiterplatten mit ca. 100 Gefässen (in praxi 96) einzusetzen, sodass die Proben voneinander unterscheidbar sein müssen, was entsprechend Anspruch 7 durch Farbmarkierungen an den Gefässen und/oder an Bestandteilen der Anordnung oder auf einem unverwechselbar aufsetzbaren Schutzdeckel möglich ist.
  • Es hat sich gezeigt, dass es herstellungstechnisch günstig ist, die Gefässe zu einzelnen Baugruppen zusammenzufassen, Anspruch 8.
  • Durch den Einsatz von Zentrierzapfen bzw. Distanzelementen nach Anspruch 9 lässt sich die Montage der Anordnung vereinfachen.
  • Die bevorzugte Verwendung nach Anspruch 10 ist auf lichtoptische Auswertungen mittels Videokameras gerichtet und erlaubt einen Betrieb in Transmission.
  • Nachfolgend werden anhand von Zeichnungen Ausführungsbeispiele des Erfindungsgegenstandes näher erläutert.
  • Es zeigen:
    • Fig. 1
    Eine Mikrotiterplatte, mit einem transparenten Schutzdeckel, in üblichen Abmessungen,
    Fig. 2
    eine vereinfachte, vertikale Schnittdarstellung durch die Mikrotiterplatte Fig. 1, in der Längsachse, mit einem beispielsweise eingezeichneten Gefäss,
    Fig. 3
    einen vergrössert dargestellten Teilschnitt durch die Mikrotiterplatte Fig. 1,
    Fig. 4
    weitere Einzelheiten in einem Teilschnitt durch die Mikrotiterplatte Fig. 1, mit einem gefüllten Proben-Gefäss.
  • In Fig. 1 ist mit 1 eine Gefässwand bezeichnet. 96 Gefässböden 2 sind plattenartig angeordnet und bilden mit den Gefässwänden 1 die entsprechende Anzahl Gefässe 11.
  • Im weiteren sind Zentrierbohrungen 5 mit darin konzentrisch angeordneten Zentrierzapfen/Distanzelementen 6 und einer darüberliegenden Rasterhaube 7 mit Zentrierbohrungen 7a für die Gefässe 11 ersichtlich.
  • Im Innern der Rasterhaube 7 befinden sich zudem Verstärkungs- und Führungsstege 9; ausserhalb davon, einander gegenüberliegende Grifflächen 10 oberhalb eines Stützrandes 8.
  • In Schnittdarstellung Fig. 2 ist die Rasterhaube 7 mit einem beispielsweise eingezeichneten und durch diese Haube 7 zentrierten Gefäss 11 dargestellt. Ebenfalls ist die Ausbildung des umlaufenden Stützrandes 8 zu sehen.
  • Es ist Fig. 2 zu entnehmen, dass die Gefässe 11 mit ihren Gefässwänden 1 unten auf einer Bodenplatte 2'' angeordnete Erhebungen 2', siehe Fig. 3, umschliessen und dass sie oben durch die Rasterhaube 7 durch die Bohrungen 7a, geführt und zentriert sind.
  • In den vergrösserten Darstellungen Fig. 3 und 4 lassen sich diese Einzelheiten nochmals erkennen.
  • In Fig. 3 ist die Ausgestaltung der zwischen den einzelnen Gefässen 11 vorhandenen Verbindungsstege 4 ersichtlich. Die Höhe der Gefässwände 1 ist so gewählt, dass sie unten nicht direkt auf der Bodenplatte 2'' aufliegen und oben nur geringfügig über die Rasterhaube 7 mit ihren Zentrierbohrungen 7a herausragen. Die Erhebungen 2' sind randseitig durch die Gefässwände 1 abgedichtet, wobei ersichtlich ist, dass deren Wandung aussen kegelförmig ausgeführt ist, um eine gewünschte zusätzliche Elastizität der unteren Endbereiche der Gefässe 11 zu erreichen.
  • Die Bodenplatte 2'' ist mit einem umlaufenden Rand versehen und bildet durch ihre Kastenform eine Halteschale 3. Diese dient gleichzeitig als Distanzelement zur Rasterhaube 7, siehe rechter Bereich von Fig. 3.
  • Bewährt haben sich zu Baugruppen zusammengefasste Gefässe 11, vorzugsweise deren 16, wobei diese jeweils im Zentrum durch eine Zentrierbohrung 5 im Verbindungssteg 4 mittels eines Zentrierzapfen/Distanzelements 6 bei der Montage geführt sind. Das Element 6 liegt bei einer einmal montierten Baugruppe frei in der Bohrung 5, wie aus Fig. 4 zu entnehmen ist; es dient gleichzeitig zur Distanzierung der Rasterhaube 7 von der Bodenplatte 2''.
  • Im weiteren ist aus Fig. 4 die planare Oberfläche 20 einer Proben-Flüssigkeit 21 mit beispielsweise eingezeichneten Organismen 22 ersichtlich.
  • Darüber befindet sich, schematisch dargestellt ein Schutzdeckel 15, der durch seine - hier nicht eingezeichneten Randbereiche - unverwechselbar auf die Oberfläche der Anordnung, Fig. 1 aufsetzbar ist.
  • Im vorliegenden Fall bestehen die Gefässwände 1 und damit die Gefässe 11 aus Polypropylen; die Gefässböden 2 mit ihren Erhebungen 2' aus transparentem Polystyrol. Die Rasterhaube 7 ist aus transparentem Polystyrol spritzgegossen.
  • Sämtliche Teile sind in an sich bekannter Druckgusstechnik gefertigt.
  • Bei der Montage der Gefässe empfiehlt es sich Spreizdorne zu verwenden, um die Gefässwände 1 problemlos über die Erhebungen 2' zu schieben.
  • Dies ergibt dichte Verbindungen, ohne den Einsatz von Klebstoffen oder von aufwendigen Schweissverfahren. Ausserdem lassen sich damit als "nichtverbindbar" bezeichnete Materialien zusammenfügen.
  • Die Erfindung hat sich vor allem mit transparenten Gefässböden für Videobetrachtungen und Auswertungen in Transmission bewährt, wobei die Videokamera vorzugsweise unterhalb der Gefässböden angeordnet ist; vgl. Fig. 1, wobei die Kamera betrachterseitig angeordnet ist. Die bei herkömmlichen Titerplatten auftretenden Schatten- und Kontrastprobleme sind mit dem Erfindungsgenstand vollständig eliminierbar.
  • Mikrotiterplatten mit den Abmessungen von 125 x 80 mm und einer Höhe von 15 mm mit 96 Gefässen mit 7 mm Innendurchmesser und einer Gesamttiefe von 9,5 mm haben sich in instrumentellen, auch automatisierten Prüfungen mit verschiedensten wässrigen Lösungen bewährt. Beispielsweise mit 405.0 mM NaCl + 18.9 mM MgSO4*7H2O + 16.4 mM MgCl2*6H2O + 7.3 mM CaCl2*2H2O + 1.59 mM NaHCO3 + 6.65 mM KCl.
  • Untersuchungen, welche sterile Gefässe voraussetzen und daher einer Gamma-Strahlung unterzogen werden, wurden aus Polypropylen-Granulat Polypropylen BOREALIS VT 1064 KN; (Lieferant Fa. Borealis AG, Genf) gespritzt.

Claims (10)

  1. Mehrgefässanordnung zur Instrumental-Analyse von wenigstens temporär flüssigen Proben, wobei wenigstens die Gefässböden aus einem transparenten Material bestehen und sich in einer Ebene befinden, dadurch gekennzeichnet, dass für die Gefässwände (1) und für die Gefässböden (2) Materialien unterschiedlicher physikalischer Eigenschaften vorgesehen sind, wobei das Material der Gefässwände (1) derart gewählt ist, dass abhängig von der zu analysierenden Probe die zwischen der Probe und der Gefässwand (1) resultierende Grenzflächenspannung eine zumindest annähernd planare Proben-Oberfläche (20) bildet, und dass der Gefässboden (1) aus einem für die Beobachtung und/oder Auswertung der Probe geeigneten Material gewählt ist.
  2. Mehrgefässanordnung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Gefässwände (1) aus einem apolaren Thermoplast bestehen, und dass zumindest die Gefässböden (2) aus einem transparenten Thermoplast sind.
  3. Mehrgefässanordnung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass die einzelnen Gefässböden (2) plattenartig zusammengefasst sind und als Erhebungen (2') ausgebildet sind.
  4. Mehrgefässanordnung nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass die Gefässwände (1) kraftschlüssig und dicht die Erhebungen (2') umfassen und mit diesen einzelne Gefässe (11) bilden.
  5. Mehrgefässanordnung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass der Thermoplast der Gefässwände (1) ein Polyolefin oder ein Polytetrafluorethylen ist, und dass der Thermoplast der Gefässböden (2) aus einem Polystyrol oder aus einem Copolymer eines Polystyrols oder aus Polymethylmethacrylat oder Polycarbonat oder Polyethersulfon oder Polysulfon oder Polymethylpenten oder Styrolacrylnitril oder amorphem Polyamid oder aus einem Polyethylenterephthalat bestehen.
  6. Mehrgefässanordnung nach Anspruch 1 oder 6, dadurch gekennzeichnet, dass die Gefässwände (1) und/oder Gefässböden (2) zumindest partiell eine die Proben adsorbierende Oberfläche aufweisen.
  7. Mehrgefässanordnung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass zwischen den Gefässen (11) vorgesehene Verbindungsstege (4) und/oder die Gefässe (11) und/oder ein auf die Gefässe (11) aufgelegter, gemeinsamer Schutzdeckel (15) Farbmarkierungen aufweisen, welche die Proben bezeichnen und diese voneinander unterscheiden lassen.
  8. Mehrgefässanordnung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass mindestens zwei Gefässe (11) zu einzelnen Baugruppen zusammengefasst sind.
  9. Mehrgefässanordnung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass die einzelnen Baugruppen über Zentrierbohrungen (5) an senkrecht zu den Gefässböden (2) stehenden Zentrierzapfen/Distanzelementen (6) geführt sind.
  10. Verwendung der Mehrgefässanordnung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur elektrooptischen Instrumental-Analyse.
EP94202956A 1993-10-18 1994-10-12 Mehrgefässanordnung zur Instrumental-Analyse Expired - Lifetime EP0648536B1 (de)

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CH03141/93A CH687592A5 (de) 1993-10-18 1993-10-18 Mehrgefaessanordnung zur Instrumental-Analyse.
CH3141/93 1993-10-18

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EP0648536A1 EP0648536A1 (de) 1995-04-19
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US (1) US5540891A (de)
EP (1) EP0648536B1 (de)
JP (1) JPH07190924A (de)
AT (1) ATE142908T1 (de)
CH (1) CH687592A5 (de)
DE (1) DE59400685D1 (de)
DK (1) DK0648536T3 (de)

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