EA046787B1 - Водная фармацевтическая композиция антитела к pd-1 пролголимаба и ее применение - Google Patents
Водная фармацевтическая композиция антитела к pd-1 пролголимаба и ее применение Download PDFInfo
- Publication number
- EA046787B1 EA046787B1 EA202290642 EA046787B1 EA 046787 B1 EA046787 B1 EA 046787B1 EA 202290642 EA202290642 EA 202290642 EA 046787 B1 EA046787 B1 EA 046787B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- concentration
- pharmaceutical composition
- antibody
- aqueous pharmaceutical
- prolgolimab
- Prior art date
Links
- 229940121482 prolgolimab Drugs 0.000 title claims description 300
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 227
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 244
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 165
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 161
- 208000008319 Bietti crystalline dystrophy Diseases 0.000 claims description 158
- DPVHGFAJLZWDOC-PVXXTIHASA-N (2r,3s,4s,5r,6r)-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxane-3,4,5-triol;dihydrate Chemical compound O.O.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DPVHGFAJLZWDOC-PVXXTIHASA-N 0.000 claims description 120
- 229940074409 trehalose dihydrate Drugs 0.000 claims description 120
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 110
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 claims description 99
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 82
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 80
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 67
- BDKLKNJTMLIAFE-UHFFFAOYSA-N 2-(3-fluorophenyl)-1,3-oxazole-4-carbaldehyde Chemical compound FC1=CC=CC(C=2OC=C(C=O)N=2)=C1 BDKLKNJTMLIAFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- 229940087562 sodium acetate trihydrate Drugs 0.000 claims description 66
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 66
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 63
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 60
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 59
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims description 59
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 54
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 52
- QZNNVYOVQUKYSC-JEDNCBNOSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 QZNNVYOVQUKYSC-JEDNCBNOSA-N 0.000 claims description 46
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 44
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 42
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 41
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical group CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 claims description 39
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 claims description 39
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 38
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims description 36
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 36
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 30
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 claims description 30
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 claims description 29
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 claims description 29
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 29
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 26
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 claims description 23
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 22
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 19
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 19
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 19
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 13
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 claims description 12
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 11
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 claims description 10
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 9
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 9
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 claims description 9
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 9
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 7
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 claims description 6
- 208000037843 metastatic solid tumor Diseases 0.000 claims description 6
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 claims description 4
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 claims description 4
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010055113 Breast cancer metastatic Diseases 0.000 claims description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 206010063569 Metastatic squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000032818 Microsatellite Instability Diseases 0.000 claims description 3
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 claims description 3
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 claims description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 201000005243 lung squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010044412 transitional cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000023747 urothelial carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims 2
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 claims 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims 1
- 210000002230 centromere Anatomy 0.000 claims 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 claims 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 claims 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims 1
- 210000003411 telomere Anatomy 0.000 claims 1
- 108091035539 telomere Proteins 0.000 claims 1
- 102000055501 telomere Human genes 0.000 claims 1
- 201000007795 Bietti crystalline corneoretinal dystrophy Diseases 0.000 description 150
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 71
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 70
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 50
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 44
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 43
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 42
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 33
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 32
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 24
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 23
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 23
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 23
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 23
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 22
- 230000008859 change Effects 0.000 description 22
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 22
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 21
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 21
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 20
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 20
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 19
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 18
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 17
- 239000002585 base Substances 0.000 description 16
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 16
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 16
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 14
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 13
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 13
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 13
- 238000011160 research Methods 0.000 description 13
- 229940074410 trehalose Drugs 0.000 description 13
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 12
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 11
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 10
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 10
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 10
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 10
- 239000002357 osmotic agent Substances 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 9
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 9
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 9
- 231100000371 dose-limiting toxicity Toxicity 0.000 description 9
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 9
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 9
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 9
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 9
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 8
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 8
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 8
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 8
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 8
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 8
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 7
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 7
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 7
- 239000000061 acid fraction Substances 0.000 description 7
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 7
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 7
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 7
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 7
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 7
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 7
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 7
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 7
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 6
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 6
- 238000009109 curative therapy Methods 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 6
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 5
- 101000984753 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase B-raf Proteins 0.000 description 5
- -1 ICOS Proteins 0.000 description 5
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 5
- 239000008118 PEG 6000 Substances 0.000 description 5
- 229920002584 Polyethylene Glycol 6000 Polymers 0.000 description 5
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 description 5
- 102100027103 Serine/threonine-protein kinase B-raf Human genes 0.000 description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 238000013461 design Methods 0.000 description 5
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 230000008646 thermal stress Effects 0.000 description 5
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 4
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 4
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 4
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 4
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 4
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 4
- 102000003670 Carboxypeptidase B Human genes 0.000 description 3
- 108090000087 Carboxypeptidase B Proteins 0.000 description 3
- 238000000729 Fisher's exact test Methods 0.000 description 3
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 description 3
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 description 3
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 3
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 238000001325 log-rank test Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 3
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FJACZYDXMHRUJF-WCCKRBBISA-N 2-aminoacetic acid;(2s)-pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound NCC(O)=O.OC(=O)[C@@H]1CCCN1 FJACZYDXMHRUJF-WCCKRBBISA-N 0.000 description 2
- MXDNXMXAOOHCKT-UHFFFAOYSA-N 7-hydroxy-3-(4-hydroxy-2-methoxyphenyl)chromen-4-one Chemical compound COC1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O MXDNXMXAOOHCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 244000187656 Eucalyptus cornuta Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 2
- 101000864344 Homo sapiens B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 description 2
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 2
- 206010027452 Metastases to bone Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229960004106 citric acid Drugs 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 2
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 238000009092 lines of therapy Methods 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 2
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- KCUJGKQDHCBUIM-MDTVQASCSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 KCUJGKQDHCBUIM-MDTVQASCSA-N 0.000 description 1
- CMXXUDSWGMGYLZ-XRIGFGBMSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydron;chloride;hydrate Chemical compound O.Cl.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 CMXXUDSWGMGYLZ-XRIGFGBMSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001233887 Ania Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 238000012371 Aseptic Filling Methods 0.000 description 1
- 101100241486 Caenorhabditis elegans him-10 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100463133 Caenorhabditis elegans pdl-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 244000060234 Gmelina philippensis Species 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010020850 Hyperthyroidism Diseases 0.000 description 1
- KOGVDCPMCJJZTB-UHFFFAOYSA-N INNI Chemical compound INNI KOGVDCPMCJJZTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 241000575946 Ione Species 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- 241000917703 Leia Species 0.000 description 1
- LTXREWYXXSTFRX-QGZVFWFLSA-N Linagliptin Chemical compound N=1C=2N(C)C(=O)N(CC=3N=C4C=CC=CC4=C(C)N=3)C(=O)C=2N(CC#CC)C=1N1CCC[C@@H](N)C1 LTXREWYXXSTFRX-QGZVFWFLSA-N 0.000 description 1
- 206010050551 Lupus-like syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010027145 Melanocytic naevus Diseases 0.000 description 1
- 206010050513 Metastatic renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- MMOXZBCLCQITDF-UHFFFAOYSA-N N,N-diethyl-m-toluamide Chemical compound CCN(CC)C(=O)C1=CC=CC(C)=C1 MMOXZBCLCQITDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007256 Nevus Diseases 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 239000012270 PD-1 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000012668 PD-1-inhibitor Substances 0.000 description 1
- 206010035603 Pleural mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 108091005906 Type I transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011374 additional therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 229960004543 anhydrous citric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 1
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 230000009460 calcium influx Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003749 cleanliness Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 239000013578 denaturing buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002411 histidines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 102000048362 human PDCD1 Human genes 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000009114 investigational therapy Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000002665 ion therapy Methods 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009099 neoadjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 230000010494 opalescence Effects 0.000 description 1
- 238000011022 operating instruction Methods 0.000 description 1
- 230000000671 osmolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940121655 pd-1 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 108010086652 phytohemagglutinin-P Proteins 0.000 description 1
- 229940116406 poloxamer 184 Drugs 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 229940092597 prolia Drugs 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 208000015347 renal cell adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 102200055464 rs113488022 Human genes 0.000 description 1
- 231100000279 safety data Toxicity 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 229960000999 sodium citrate dihydrate Drugs 0.000 description 1
- BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogenphosphate monohydrate Chemical compound O.[Na+].OP(O)([O-])=O BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000000196 viscometry Methods 0.000 description 1
Description
Область техники
Изобретение относится к новым водным композициям для антител к PD-1, и, в частности, к новым водным композициям для антитела к PD-1 пролголимаба, которые могут быть использованы в качестве лекарственного средства для лечения злокачественных новобразований.
Уровень техники
Белок программируемой смерти 1 (PD-1) является ингибиторным членом семейства рецепторов CD28, которое включает в себя также CD28, CTLA-4, ICOS и BTLA. PD-1 экспрессируется активированными Вклетками, Т-клетками и миелоидными клетками (Agata et al., supra; Okazaki et al. (2002) Curr. Opin. Immunol. 14: 391779-82; Bennet et al. (2003) J Immunol 170:711-8). Первоначальные члены данного семейства, CD28 и ICOS, были обнаружены по функциональным действиям на увеличение пролиферации Т-клеток после добавления моноклональных антител (Hutloff et al. (1999) Nature 397:263-266; Hansen et al. (1980) Immunogenics 10:247-260). PD-1 был обнаружен скринингом на дифференциальную экспрессию в апоптотических клетках (Ishida et al. (1992) EMBO J 11:3887-95). Другие члены данного семейства, CTLA-4 и BTLA, были обнаружены скринингом на дифференциальную экспрессию в цитотоксических Т-лимфоцитах и ТН1-клетках, соответственно. CD28, ICOS и CTLA-4, все, имеют неспаренный остаток цистеина, дающий возможность гомодимеризации. В противоположность этому, предполагается, что PD-1 существует в виде мономера, не имея неспаренного остатка цистеина, характерного для других членов семейства CD28.
PD-1 является трансмембранным белком типа I 55 кДа, который является частью суперсемейства генов Ig (Agata et al. (1996) Int Immunol 8:765-72). PD-1 содержит мембранопроксимальный иммунорецепторный ингибирующий мотив на основе тирозина (ITIM) и мембранодистальный мотив переключения на основе тирозина (ITSM) (Thomas, M.L. (1995) J Exp Med 181:1953-6; Vivier, E. и Daeron, M. (1997) Immunol Today 18:286-91). PD-1, хотя и является структурно сходным с CTLA-4, лишен мотива MYPPPY, который является критическим для связывания В7-1 и В7-2. Были идентифицированы два лиганда для PD-1, PD-L1 и PD-L2, которые, как было показано, отрицательно регулируют активацию Тклеток после связывания с PD-1 (Freeman et al. (2000) J Exp Med 192:1027-34; Latchman et al. (2001) Nat Immunol 2:261-8; Carter et al. (2002) Eur J Immunol 32:634-43). Как PD-L1, так и PD-L2 являются гомологами В7, которые связываются с PD-1, но не связываются с другими членами семейства CD28.
Один лиганд для PD-1, PD-L1, является изобилующим в различных типах рака человека (Dong et al. (2002) Nat. Med. 8:787-9). Взаимодействие между PD-1 и PD-L1 приводит к снижению количества инфильтрирующих опухоль лимфоцитов, уменьшению опосредованной рецептором Т-клеток пролиферации и ускользанию от иммунологического надзора раковых клеток (Dong et al. (2003) J. Mol. Med. 81:281-7; Blank et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307-314; Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100). Иммуносупрессия может быть обращена ингибированием локального взаимодействия PD-1 с PD-L1, и это действие является аддитивным при блокировании взаимодействия PD-1 с PD-L2 (Iwai et al. (2002) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 99:12293-7; Brown et al. (2003) J. Immunol. 170:1257-66).
PD-1 является ингибирующим членом семейства CD28, экспрессируемым на активированных Вклетках, Т-клетках и миелоидных клетках (Agata et al., supra; Okazaki et al. (2002) Curr Opin Immunol 14: 391779-82; Bennett et al. (2003) J Immunol 170:711-8). PD-1-недостаточные животные развивают различные аутоиммунные фенотипы, включая аутоиммунную кардиопатию и подобный волчанке синдром с артритом и нефритом (Nishimura et al. (1999) Immunity 11:141-51; Nishimura et al. (2001) Science 291:31922). Кроме того, было обнаружено, что PD-1 играет роль в аутоиммунном энцефаломиелите, системной красной волчанке, болезни трансплантат против хозяина (GVHD), диабете типа I и ревматоидном артрите (Salama et al. (2003) J Exp Med 198:71-78; Prokunina and Alarcon-Riquelme (2004) Hum Mol Genet 13:R143; Nielsen et al. (2004) Lupus 13:510). Было показано, что в линии мышиных опухолевых В-клеток ITSM PD-1 является необходимым для блокирования BCR-опосредованного вхождения Са2+ и фосфорилирования тирозина, находящихся ниже по ходу процесса эффекторных молекул (Okazaki et al. (2001) PNAS 98:13866-71).
В настоящее время известен ряд антител против PD-1, например, nivolumab (BMS), pembrolizumab (Merck), которые представляют собой монокональное антитело человека изотипа IgG4.
Также известно новое антитело к PD-1 пролголимаб (также известное как BCD-100) представляет собой моноклональное антитело человека изотипа IgG1 с безэффекторными мутациями L234A, L235A. Пролголимаб показал повышенную аффинность к PD-1, повышенную агрегационную стабильность в сравнении с антителами изотипа IgG4. Кроме того, пролголимаб в настоящее время проходит клинические исследования для различных типов злокачественных новообразований, включая меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого.
Таким образом, в настоящее время является актуальной разработка новых улучшенных стабильных водных фармацевтических композиций для антитела к PD-1 пролголимаба.
- 1 046787
Краткое описание чертежей
Изобретение станет более понятным из последующего подробного описания вариантов осуществления настоящего изобретения со ссылкой на прилагаемые чертежи, где:
фиг. 1, 2 представляют собой графики, иллюстрирующие динамику концентраций BCD-100 в сыворотке крови пациентов на протяжении 6 введений препарата (с учетом коэффициента) в мкг/мл. (Исследование BCD-100-1);
фиг. 3 представляет собой график, иллюстрирующий дизайн исследования BCD-1002/MIRACULUM;
фиг. 4 представляет собой график, иллюстрирующий блок-схему исследования;
фиг. 5 представляет собой график, иллюстрирующий общую выживаемость пациентов 1-й группы (BCD-100, 1 мг/кг раз в 2 недели) по результатам исследования BCD-100-2/MIRACULUM;
фиг. 6 представляет собой график, иллюстрирующий общую выживаемость пациентов 2-й группы (BCD-100, 3 мг/кг раз в 3 недели) по результатам исследования BCD-100-2/MIRACULUM;
фиг. 7 представляет собой график, иллюстрирующий беспрогрессивную выживаемость пациентов группы BCD-100, 1 мг/кг (в соответствии с критериями irRECIST) по результатам исследования BCD100-2/MIRACULUM;
фиг. 8 представляет собой график, иллюстрирующий беспрогрессивную выживаемость пациентов группы BCD-100, 3 мг/кг (в соответствии с критериями irRECIST) по результатам исследования BCD100-2/MIRACULUM;
фиг. 9 представляет собой график, иллюстрирующий концентрацию BCD-100 у пациентов, получавших 1 мг/кг каждые 2 недели, после введения одной дозы препарата (результаты исследования BCD100-2/MIRACULUM);
фиг. 10 представляет собой график, иллюстрирующий концентрацию BCD-100 у пациентов, получавших 3 мг/кг каждые 3 недели (результаты исследования BCD-100-2/MIRACULUM);
фиг. 11 представляет собой график, иллюстрирующий долю Th9 в общей популяции Т-хелперов в подгруппах пациентов, получавших BCD-100 в дозе 1 мг/кг Q2W, с различными типами ответа на терапию (результаты исследования BCD-100-2/MIRACULUM);
фиг. 12 представляет собой график, иллюстрирующий долю Th9 в общей популяции Т-хелперов в подгруппах пациентов, получавших BCD-100 в дозе 3 мг/кг Q3W, с различными типами ответа на терапию (результаты исследования BCD-100-2/MIRACULUM).
Описание изобретения
Определения
Термины, используемые в настоящем описании, как правило, имеют их обычные для данной области значения в пределах контекста изобретения и в конкретном контексте, где используют каждый термин. Ниже, или в другом месте описания, определены некоторые термины, которые используют для описания изобретения, для предоставления практику дополнительного руководства в отношении описания изобретения. Приведены синонимы некоторых терминов. Изложение одного или нескольких синонимов не исключает использование других синонимов. Использование примеров в любом месте настоящего описания, включая примеры любых терминов, описываемых в настоящем документе, является исключительно иллюстративным и никоим образом не ограничивает объем и значение изобретения или любого иллюстрируемого объекта. Изобретение не ограничено различными вариантами осуществления, приведенными в настоящем описании.
Моноклональное антитело, как используется в данной заявке, относится к гуманизированному антителу или полностью человеческому антителу, если в данной заявке не указано иное. Моноклональные антитела по изобретению могут быть получены с использованием, например, рекомбинантных технологий, технологий фагового дисплея, синтетических технологий или комбинаций таких технологий или других технологий, хорошо известных из уровня техники.
Популяция моноклональных антител, как используется в настоящем документе, относится к гомогенной или по существу гомогенной популяции антител (т.е. по крайней мере приблизительно 96%, но более предпочтительно по крайней мере приблизительно 97 или 98% или еще более предпочтительно по крайней мере 99% антител в популяции будут конкурировать в иммунно-ферментном анализе ELISA за тот же антиген или эпитоп, или более предпочтительно антитела являются идентичными в аминокислотной последовательности).
Полноразмерное антитело, существующее в природе, представляет собой молекулу иммуноглобулина, которая состоит из четырех полипептидных цепей (две тяжелые (Н) цепи (приблизительно 50-70 кДа при полной длине) и две легкие (L) цепи (приблизительно 25 кДа при полной длине)), связанных дисульфидными мостиками. Аминоконцевая часть каждой цепи включает вариабельный домен из приблизительно 100-110 или более аминокислот, которые отвечают за связывание антигена. Карбоксиконцевая часть каждой цепи определяет константный участок, главным образом, отвечающий за функцию эффектора. Легкие цепи классифицируют как каппа или лямбда, и они характеризуются специфичным константным участком. Каждая легкая цепь состоит из вариабельного участка N-концевой легкой цепи (в данной заявке VL или VK) и константного участка легкой цепи, состоящего из одного домена
- 2 046787 (CL или CK). Тяжелые цепи классифицируют как γ (гамма), δ (дельта), альфа (α), мю (μ) или эпсилон (ε), и они определяют изотип антитела, такой как IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, соответственно, и несколько из них могут быть дополнительно разделены на подклассы (изотипы), такие как, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2. Каждый тип тяжелой цепи характеризуется конкретным константным участком Fc. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельного участка N-концевой тяжелой цепи (в данной заявке VH) и константного участка СН (тяжелой цепи). Константный участок тяжелой цепи состоит из трех доменов (CH1, CH2 и СН3) для IgG, IgD и IgA и 4 доменов (CH1, CH2, СН3 и СН4) для IgM и IgE. Вариабельные домены VH и VL могут быть дополнительно разделены на участки гипервариабельности (гипервариабельные участки, CDR), чередующиеся с более консервативными каркасными участками (FR). Каждый вариабельный домен состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных в следующем порядке от Nконца к С-концу: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4.
Вариабельные участки каждой из пар легкая/тяжелая цепь образуют антиген-связывающие сайты антитела. Таким образом, интактное IgG антитело имеет два сайта связывания. За исключением бифункциональных или биспецифических антител два сайта связывания являются одинаковыми. Как используется в данной заявке, антигенсвязывающая часть, или антигенсвязывающий участок, или антигенсвязывающий домен относятся, взаимозаменяемо, к такой части молекулы антитела, которая содержит аминокислотные остатки, взаимодействующие с антигеном и обуславливающие специфичность и аффинность антитела по отношению к антигену. Такая часть антитела включает каркасные аминокислотные остатки, необходимые для поддержания надлежащей конформации антиген-связывающих остатков.
Фрагмент антитела может представлять собой фрагмент антитела или фрагмент антитела, имеющий активность полноразмерного антитела. Указанный фрагмент антитела может представлять собой F(ab')2, F(ab)2, Fab', Fab Fv и scFv.
Термин ингибировать или нейтрализовать, как используется в данной заявке, по отношению к функциональной активности антитела по изобретению, означает способность в значительной степени препятствовать, предотвращать, ограничивать, замедлять, прекращать, уменьшать или обращать, например, развитие или тяжесть того, что ингибируют, включая, но не ограничиваясь вышеприведенными, биологическую активность (например, активность PD-1) или свойство, заболевание или состояние. Ингибирование или нейтрализация активности PD-1 в результате связывания антитела по изобретению с PD-1 составляет предпочтительно по крайней мере приблизительно 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95% или выше.
Термин выделенный или изолированный при использовании по отношению к нуклеиновой кислоте или белковому препарату (например, антителу) относится к молекуле нуклеиновой кислоты или белковой молекуле, которые идентифицируют и отделяют по крайней мере от одного контаминантного вещества, с которым она обычно связана в природном источнике. Предпочтительно выделенное антитело является антителом, которое по существу не содержит другие антитела, обладающие отличительной антигенной специфичностью (например, фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению содержат выделенное антитело, которое специфически связывает PD-1 и по существу не содержит антитела, которые специфически связывают антигены, отличные от PD-1).
Полинуклеотид является функционально связанным, если он имеет функциональные связи с другим полинуклеотидом. Например, промотор или энхансер функционально связаны с кодирующей последовательностью, если они влияют на транскрипцию последовательности. Полипептид функционально связан с другим полипептидом, если полинуклеотиды, кодирующие их, связаны функционально, предпочтительно, если они находятся в той же открытой рамке считывания.
Термин Специфическое связывание между антителом и мишенью антигена (антигеном) относится к иммунологической специфичности. Антитело может специфически связываться с мишенью антигена, если оно связывает эпитоп на антигене в большей степени, чем другие эпитопы на антигене. Специфическое связывание не исключает кросс-реактивность с другими антигенами, несущими сходные эпитопы антигенов.
VL домены в антителах, согласно изобретению, могут быть типа VL лямбда, или типа VL каппа. Термин VL домен относится к обоим изотипам VK лямбда и VL каппа, которые содержат одну или более аминокислотных замен, инсерций или делеций.
Термин фармацевтическая композиция относится к композиции и/или составу, содержащему антитело согласно изобретению в терапевтически эффективном количестве и эксцепиенты или вспомогательные вещества (носители, разбавители, наполнители, растворители и другие эксцепиенты).
В настоящей заявке, термин буфер или буферный раствор относится к водному раствору, содержащему смесь кислоты (обычно слабой кислоты, такой как, например, уксусная кислота, лимонная кислота) и ее конъюгированного основания (такой как, например, ацетатной или цитратной соли, например, ацетат натрия, цитрат натрия, а также гидраты указанных солей, например, натрия ацетат тригидрат) или альтернативно смесь основания (обычно слабого основания, например, гистидина) и его конъюгированной кислоты (например, гистидина гидрохлорида). Значение рН буферного раствора мало изменяется при добавлении к нему небольшого количества сильного основания или сильной кислоты, а также при разбавлении и концентрировании, благодаря буферному эффекту, обеспечиваемому буферным агентом.
- 3 046787
В настоящей заявке, буферная система содержит один или несколько буферных агентов и/или их конъюгата(ов) с кислотой или основанием, и более подходяще содержит один или несколько буферных агентов и их конъюгата(ов) с кислотой или основанием, и наиболее подходяще содержит только один буферный агент и его кислотный/щелочной конъюгат. Если не указано иное, любые концентрации, указанные в настоящем изобретении по отношению к буферной системе (концентрация буфера) могут относится к объединенной концентрации буферного(ых) агента(ов) и/или его конъюгата(ов) с кислотой или основанием. Другими словами, концентрации, указанные в настоящей заявке по отношению к буферной системе, могут относиться к объединенной концентрации релевантных буферных видов (то есть видов в динамическом равновесии друг с другом, например, цитрат/лимонная кислота). Суммарное значение рН композиции, содержащей релевантную буферную систему, является отображением равновесной концентрация каждого из релевантных буферных видов (то есть баланса буферного (ых) агента (ов) с его конъюгатом (ами) с кислотой или основанием).
В настоящей заявке, термин буферный агент относится к кислотному или щелочному компоненту (обычно слабой кислоте или слабому основанию) буфера или буферного раствора. Буферный агент помогает поддерживать значение рН данного раствора при или около заранее определенного значения, и буферные агенты обычно выбирают для дополнения заранее определенного значения. Буферный агент может представляет собой единственное соединение, которое приводит к желательному буферному эффекту, в особенности, если указанный буферный агент смешанный с (и подходяще способен к протонному обмену с) подходящим количеством (в зависимости от заранее определенного желательного значения) его соответствующего кислотного/щелочного конъюгата.
Термин солюбилизатор при использовании в данном тексте означает фармацевтически приемлемое неионногенное поверхностно-активное вещество. Можно использовать один солюбилизатор, а также комбинации солюбилизаторов. Примерами солюбилизаторов являются, но не ограничиваются ими, полисорбат 20 или полисорбат 80, полоксамер 184 или полоксамер 188, или PLURONIC®.
Термины осмотический агент или агент, регулирующий тоничность, а также осмолитик в том виде, как они здесь использованы, относятся к эксципиенту, который может обеспечивать требуемое осмотическое давление жидкого раствора антитела. В некоторых воплощениях агент, регулирующий тоничность, может подводить осмотическое давление жидкого препарата антитела до изотоничного так, что данный препарат антитела является физиологически совместимым с клетками ткани организма субъекта. В еще одном воплощении агент, регулирующий тоничность, может способствовать увеличению стабильности антител. Изотоничный препарат представляет собой препарат, который имеет осмотическое давление, эквивалентное человеческой крови. Изотоничные препараты обычно имеют осмотическое давление от примерно 250 до 350 мОсм/кг. Термин гипотонический описывает препарат с осмотическим давлением, меньшим, чем осмотическое давление человеческой крови. Соответственно, термин гипертонический используется для описания препарата с осмотическим давлением, превышающим осмотическое давление человеческой крови. Изотоничность можно измерять с использованием, например, парового или криоскопического осмометра. Агент, регулирующий тоничность, может находиться в энантиомерной (например, L- или D-энантиомер) или рацемической форме; в форме изомеров, таких как альфа или бета, включая альфа, альфа; или бета, бета; или альфа, бета; или бета, альфа; в форме свободной кислоты или свободного основания; в форме соли; в гидратированной форме (например, моногидрат) или в безводной форме. Примерами осмотических агентов являются, но не ограничиваются ими, сахара (трегалозы дигидрат, сахароза, глюкоза), полиолы (маннитол, сорбитол), аминокислоты (пролин, аргинин, глицин), или соли (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид).
Термин длительное хранение или долговременная стабильность следует понимать, как обозначение того, что фармацевтическая композиция может храниться в течение трех месяцев или более, в течение шести месяцев или более и предпочтительно в течение одного года или более, наиболее предпочтительно, с минимальным сроком хранения в стабильном состоянии по меньшей мере два года. В общем, термины длительное хранение и долговременная стабильность дополнительно включают продолжительности хранения в стабильном состоянии, которые по меньшей мере сравнимы или лучше, чем срок хранения в стабильном состоянии, как правило, необходимый для доступных в настоящее время коммерческих составов антитела к PD-1 пролголимаба без потерь в стабильности, которые могут сделать состав непригодным для определенного для него фармацевтического применения.
Термин парентеральное введение означает режимы введения, обычно с помощью инъекции, и включает, в частности, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, внутритрахеальную, внутрикапсулярную, внутриорбитальную, внутрикардиальную, внутрикожную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, внутрисуставную, субкапсулярную, субарахноидальную, внутриспинальную, эпидуральную и надчревную инъекцию или инфузию.
Термин применение относится к возможности применения антитела согласно изобретению или фармацевтической композиции, его содержащей, для лечения, облегчения течения заболеваний, для ускорения ремиссии, снижения частоты рецидивов вследствие заболеваний или нарушений, опосредуемых рецепторами, с которыми может связываться антитело согласно изобретению. Примерами заболеваний являются, но не ограничиваются ими, злокачественные новообразования, включая меланому, в том числе
- 4 046787 неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого; неплоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный рак легкого; мелкоклеточный рак легкого, в том числе неоперабельный или метастатический мелкоклеточный рак легкого; рак легкого ранних стадий до и после радикального лечения; рак шейки матки, в том числе метастатический рак шейки матки, ранние стадии рака шейки матки до и после радикального лечения; опухоли головы и шеи, в том числе плоскоклеточный рак головы и шеи; лимфома Ходжкина; опухоли желудка и кишечника, метастатический плоскоклеточный рак пищевода; рак мочевого пузыря, в том числе метастатическая уротелиальная карцинома, рак почки; рак эндометрия, в том числе метастатический рак эндометрия, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения; рак молочной железы, в том числе метастатический рак молочной железы, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения; рак печени, в том числе метастатический или неоперабельный рак печени, ранние стадии рака печени до и после радикального лечения; неоперабельная или метастатическая солидная опухоль, в том числе неоперабельная или метастатическая солидная опухоль с признаками микросателлитной нестабильности.
Термин способ лечения относится к возможности применения антитела согласно изобретению или фармацевтической композиции, его содержащей, для лечения, облегчения течения заболеваний, для ускорения ремиссии, снижения частоты рецидивов вследствие заболеваний или нарушений, связанных с активностью PD1. Лечить или лечение заболевания, нарушения или состояния может включать предотвращение или замедление появления клинических симптомов заболевания, нарушения или состояния, развивающегося у человека, ингибирования заболевания, нарушения или состояния, то есть остановки, уменьшения или замедления развития заболевания или его рецидива (в случае поддерживающей терапии) или по меньшей мере его одного клинического или субклинического симптома, или облегчение или ослабление заболевания, то есть вызывание регресса заболевания, нарушения или состояния. Примерами заболеваний являются, но не ограничиваются ими, злокачественные новообразования, включая меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального оперативного лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого.
Термин водная композиция при использовании в данном документе относится к композиции на основе воды, в качестве воды могут быть использованы: вода, вода для инъекций, физиологический раствор (0,9-1,0%-ый водный раствор хлористого натрия).
В одном варианте осуществления изобретения субъект лечения или пациент является млекопитающим, предпочтительно человеческим субъектом. Вышеупомянутый субъект может быть мужского или женского пола любого возраста.
В настоящем описании и в последующей формуле изобретения, если контекстом не предусмотрено иное, слова иметь, включать и содержать или их вариации, такие как имеет, имеющий, включает, включающий, содержит или содержащий, следует понимать, как включение указанного целого или группы целых, но не исключение любого другого целого или группы целых.
Сущность изобретения
В настоящем изобретении раскрыты водные фармацевтические композиции антитела к PD-1 пролголимаба, которое имеет улучшенную агрегационную стабильность, повышенную аффинность по сравнению с известными антителами к PD-1, которые базируются на человеческом антителе изотипа IgG4.
Как описано в публикации международной заявки на изобретение WO/2018/013017, включенной в настоящий документ посредством ссылки, было показано, что антитело к PD-1 пролголимаб, которое представляет собой моноклональное антитело человека изотипа IgG1 с безэффекторными мутациями L234A, L235A, (именуемое в настоящем документе антитело по изобретению), обладает улучшенной агрегационной стабильностью, повышенной аффинностью и улучшенными фармакинетическими параметрами, такими как 11/2β (час) или Cmax (мкг/мл), по сравнению с известными антителами к PD-1, которые базируются на человеческом антителе изотипа IgG4, такими как ниволумаб. Пролголимаб имеет средневесовую молекулярную массу около 146 кДа и является специфическим по отношению к PD-1 человека. Пролголимаб имеет тяжелую цепь, которая насчитывает 459 аминокислот (SEQ ID NO: 1), и имеет легкую человека, насчитывающую 214 аминокислот (SEQ ID NO: 2), константная часть (Fc) пролголимаба содержит мутации L234A, L235A.
В этой связи было бы полезно вводить водную композицию с антителом по изобретению пациенту с злокачественным новобразованием.
Широким аспектом настоящего изобретения является водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1. Водная фармацевтическая композиция содержит фармацевтически эффективное количество антитела к PD-1 пролголимаба, эффективное количество трегалозы дигидрата, буферный агент на основе ацетата или гистидина.
В соответствии с одним широким аспектом настоящего изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:
(a) пролголимаб в концентрации от 15 до 40 мг/мл в качестве антитела;
- 5 046787 (b) трегалозы дигидрат в концентрации от 80 до 110 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 до 25 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 20 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 95 до 105 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 100 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1,6 до 1,9 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации 1,742 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может быть добавлена до рН 5,0.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0,04 до 0,77 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0,40 до 0,50 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации 0,43 мг/мл.
В соответствии с одним широким аспектом настоящего изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция aHTu-PD-1 антитела, содержащая:
(a) пролголимаб в концентрации от 90 до 150 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 50 до 110 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 90 до 110 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 100 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 75 до 85 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 80 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1,6 до 1,9 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации 1,742 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может быть добавлена до рН от 5,0 до 5,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может быть добавлена до рН 5,0.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации 0,045 до 0,77 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0,40 до 0,50 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0,43 мг/мл.
В соответствии с одним широким аспектом настоящего изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция анти-PD-i антитела, содержащая:
(a) пролголимаб в концентрации от 5 мг/мл до 150 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 70 до 110 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в
- 6 046787 концентрации от 15 до 40 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 до 25 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 20 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 95 до 105 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 100 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидин может находиться в концентрации от 0,7 до 1,0 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидин может находиться в концентрации 0,92 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации от 2,8 до 3,3 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации 2,96 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН от 5,5 до 6,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН 5,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 90 до 110 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 100 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 75 до 85 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 80 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидин может находиться в концентрации от 0,7 до 1,0 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидин может находиться в концентрации 0,92 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации от 2,8 до 3,3 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации 2,96 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН от 5,5 до 6,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН от 5,5 до 6,0.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН 5,5.
Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела пролголимаба по настоящему изобретению дополнительно может содержать подходящий солюбилизатор.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный солюбилизатор может представлять собой полоксамер 188.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве 0 мг/мл, 0,1 мг/мл, 0,2 мг/мл, 0,3 мг/мл, 04 мг/мл, 0,5 мг/мл, 0,6 мг/мл, 0,7 мг/мл, 0,8 мг/мл, 0,9 мг/мл, 1,0 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0.
- 7 046787
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 5,0 до 5,5.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 5,0 до 5,5.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мли (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН 5,5.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,0.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
- 8 046787 (c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН 5,5.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела пролголимаба по настоящему изобретению дополнительно может содержать подходящий солюбилизатор.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный солюбилизатор может представлять собой полоксамер 188.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве 0 мг/мл, 0,1 мг/мл, 0,2 мг/мл, 0,3 мг/мл, 0.4 мг/мл, 0,5 мг/мл, 0,6 мг/мл, 0,7 мг/мл, 0,8 мг/мл, 0,9 мг/мл, 1,0 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5;
(e) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0;
(e) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0;
(e) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5;
(e) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
- 9 046787 (c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 5,0 до 5,5;
(e) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 5,0 до 5,5;
(e) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0;
(e) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5;
(f) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН 5,5;
(f) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5;
(f) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,0;
(f) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции анти-PD-1 антитела, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН 5,5;
(f) полоксамер 188 в концентрации больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве 0 мг/мл, 0,1 мг/мл, 0,2 мг/мл, 0.3 мг/мл, 0.4 мг/мл, 0,5 мг/мл, 0,6 мг/мл, 0,7 мг/мл, 0,8 мг/мл, 0,9 мг/мл, 1,0 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция aнти-PD-1 антитела по настоящему изобретению может быть введена парентерально.
- 10 046787
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция анти-PD-l антитела по настоящему изобретению может быть введена внутримышечно.
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по настоящему изобретению может быть введена подкожно.
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по настоящему изобретению может быть введена внутривенно.
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по настоящему изобретению может быть введена внутривенно в виде инфузии.
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по настоящему изобретению может быть введена внутривенно в виде инфузии длительностью 60 мин, при хорошей переносимости длительность инфузии может быть сокращена до 30 мин.
В одном варианте осуществления водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела пролголимаба по настоящему изобретению может находиться во флаконе.
В некоторых вариантах осуществления указанный флакон может представлять собой стеклянный флакон.
В некоторых вариантах осуществления указанный флакон может иметь объем от 1 мл до 50 мл.
В некоторых вариантах осуществления указанный флакон может иметь объем от 1 мл до 20 мл.
В некоторых вариантах осуществления указанный флакон может иметь объем 1 мл, 2 мл, 3 мл, 4 мл, 5 мл, 6 мл, 7 мл, 8 мл, 9 мл, 10 мл, 15 мл, 20 мл, 25 мл, 30 мл, 35 мл, 40 мл, 45 мл или 50 мл.
В одном варианте осуществления водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела пролголимаба по настоящему изобретению может находиться в шприце.
В некоторых вариантах осуществления указанный шприц может иметь вместимость 1 мл.
В некоторых вариантах осуществления указанный шприц может иметь вместимость 2 мл.
В одном варианте осуществления водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела пролголимаба по настоящему изобретению может находиться в преднаполненном шприце.
В некоторых вариантах осуществления указанный преднаполненный шприц может иметь вместимость 1 мл.
В некоторых вариантах осуществления указанный преднаполненный шприц может иметь вместимость 2 мл.
В соответствии с другим широким аспектом настоящего изобретения предлагается способ получения водной фармацевтической композиции, подходящей для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1. Способ включает комбинирование фармацевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба с буферным агентом на основе ацетата; и эффективного количества трегалозы. Способ включает комбинирование фармацевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба с буферным агентом на основе гистидина; и эффективного количества трегалозы.
В некоторых вариантах осуществления полоксамер 188 может быть добавлен в качестве солюбилизатора.
В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба, как определено в настоящем документе, для лечения злокачественных новообразований.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба для лечения злокачественных новообразований, которое может быть выбрано из группы, содержащей меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого; неплоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный рак легкого; мелкоклеточный рак легкого, в том числе неоперабельный или метастатический мелкоклеточный рак легкого; рак легкого ранних стадий до и после радикального лечения; рак шейки матки, в том числе метастатический рак шейки матки, ранние стадии рака шейки матки до и после радикального лечения; опухоли головы и шеи, в том числе плоскоклеточный рак головы и шеи; лимфома Ходжкина; опухоли желудка и кишечника, метастатический плоскоклеточный рак пищевода; рак мочевого пузыря, в том числе метастатическая уротелиальная карцинома, рак почки; рак эндометрия, в том числе метастатический рак эндометрия, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения; рак молочной железы, в том числе метастатический рак молочной железы, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения; рак печени, в том числе метастатический или неоперабельный рак печени, ранние стадии рака печени до и после радикального лечения; неоперабельная или метастатическая солидная опухоль, в том числе неоперабельная или метастатическая солидная опухоль с признаками микросателлитной нестабильности.
В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба для лечения злокачественного образования, включающий введение фармацевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции, как определено в настоящем документе.
В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение водной фармацевтической
- 11 046787 композиции антитела к PD-1, содержащей:
(а) пролголимаб в концентрации от 15 до 40 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 80 до 110 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 4.5-5.5, для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 до 25 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 20 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 95 до 105 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 100 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1,6 до 1,9 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации 1,742 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может быть добавлена до рН 5,0.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0,04 до 0,77 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0,40 до 0,50 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации 0,43 мг/мл.
В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации от 5 до 40 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 70 до 110 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;
для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 до 25 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 20 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 95 до 105 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 100 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L- гистидин может находиться в концентрации от 0,7 до 1,0 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L- гистидин может находиться в концентрации 0,92 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L- гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации от 2,8 до 3,3 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L- гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации 2,96 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН от 5,5 до 6,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН 5,5.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5;
для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается применение водной фармацевтической
- 12 046787 композиции антитела к PD-1, содержащей:
(а) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0;
для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0;
для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5;
для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН 5,5;
для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл; |
для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл: |
для лечения злокачественного новообразования у субъекта нуждающего в этом.
Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела пролголимаба по настоящему изобретению дополнительно может содержать подходящий солюбилизатор.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный солюбилизатор может представлять собой полоксамер 188.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве 0 мг/мл, 0,1 мг/мл, 0,2 мг/мл, 0,3 мг/мл, 04 мг/мл, 0,5 мг/мл, 0,6 мг/мл, 0,7 мг/мл, 0,8 мг/мл, 0,9 мг/мл, 1,0 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтиче
- 13 046787 ской композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции каждые 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции 1 раз в 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции каждые 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции 1 раз в 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела каждые 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела 1 раз в 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела каждые 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела 1 раз в 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции парентерально.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанное парентеральное введение может представлять собой внутривенное, подкожное или внутримышечное введение.
В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции внутривенно в виде инфузии.
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция антитела к PD-1 пролголимаба по настоящему изобретению может быть введена внутривенно в виде инфузии длительностью 60 мин, при хорошей переносимости длительность инфузии может быть сокращена до 30 мин.
В некоторых вариантах осуществления изобретения злокачественное новообразование представляет собой меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого.
В одном варианте изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации от 15 до 40 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 80 до 110 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 4,5-5,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 до 25 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 20 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 95 до 105 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 100 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1,6 до 1,9 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации 1,742 мг/мл.
- 14 046787
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может быть добавлена до рН 5,0.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0,04 до 0,77 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0,40 до 0,50 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации 0,43 мг/мл.
В одном варианте изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации от 5 до 40 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 70 до 110 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 до 25 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 20 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 95 до 105 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 100 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L- гистидин может находиться в концентрации от 0,7 до 1,0 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L- гистидин может находиться в концентрации 0,92 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L- гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации от 2,8 до 3,3 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L- гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации 2,96 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН от 5,5 до 6,5.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь рН 5,5. В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;
- 15 046787 (e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет рН 5,5.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей: II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела пролголимаба по настоящему изобретению дополнительно может содержать подходящий солюбилизатор.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный солюбилизатор может представлять собой полоксамер 188.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве 0 мг/мл, 0,1 мг/мл, 0,2 мг/мл, 0,3 мг/мл, 0,4 мг/мл, 0,5 мг/мл, 0,6 мг/мл, 0,7 мг/мл, 0,8 мг/мл, 0,9 мг/мл, 1,0 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD1 пролголимаба каждые 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба 1 раз в 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба каждые 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба 1 раз в 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела каждые 2 недели.
- 16 046787
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела 1 раз в 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела каждые 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела 1 раз в 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба парентерально.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанное парентеральное введение может представлять собой внутривенное, подкожное или внутримышечное введение.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба внутривенно в виде инфузии.
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция антитела к PD-1 пролголимаба по настоящему изобретению может быть введена внутривенно в виде инфузии длительностью 60 мин, при хорошей переносимости длительность инфузии может быть сокращена до 30 мин.
В некоторых вариантах осуществления изобретения злокачественное новообразование представляет собой меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого.
В одном варианте изобретения предлагается способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества пролголимаба.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба в дозе 1 мг/кг.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба в дозе 3 мг/кг.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба каждые 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба 1 раз в 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба каждые 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба 1 раз в 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба в дозе 1 мг/кг каждые 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба в дозе 1 мг/кг 1 раз в 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба в дозе 3 мг/кг каждые 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба в дозе 3 мг/кг 1 раз в 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразо
- 17 046787 ваний у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба парентерально.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанное парентеральное введение может представлять собой внутривенное, подкожное или внутримышечное введение.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба внутривенно в виде инфузии.
В некоторых вариантах осуществления пролголимаб может быть введен внутривенно в виде инфузии длительностью 60 мин, при хорошей переносимости длительность инфузии может быть сокращена до 30 мин.
В некоторых вариантах осуществления изобретения злокачественное новообразование представляет собой меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатичесий немелкоклеточный рак легкого.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1, при этом фармацевтическая композиция содержит на каждый 1 мл фармацевтической композиции:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1, при этом фармацевтическая композиция содержит на каждый 1 мл фармацевтической композиции:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена каждые 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена 1 раз в 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена 1 раз в 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела каждые 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела 1 раз в 2 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела каждые 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка PD-1 может быть введена в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела 1 раз в 3 недели.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба парентерально.
- 18 046787
В некоторых вариантах осуществления изобретения указанное парентеральное введение может представлять собой внутривенное, подкожное или внутримышечное введение.
В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения злокачественных новообразований у нуждающегося в этом субъекта может включать введение терапевтически эффективного количества пролголимаба внутривенно в виде инфузии.
В некоторых вариантах осуществления пролголимаб может быть введен внутривенно в виде инфузии длительностью 60 мин, при хорошей переносимости длительность инфузии может быть сокращена до 30 мин.
В некоторых вариантах осуществления изобретения злокачественное новообразование представляет собой меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатичесий немелкоклеточный рак легкого.
Примерные варианты осуществления
Настоящее изобретение относится к подходящим водным фармацевтическим композициям антитела к PD-1 пролголимаба, В одном варианте осуществления изобретения водная фармацевтическая композиция пролголимаба может содержать буфер на основе ацетата и трегалозу. Полоксамер 188 может быть добавлен в качестве солюбилизатора. В еще одном варианте осуществления изобретения водная фармацевтическая композиция пролголимаба может содержать буфер на основе гистидина и трегалозу. Полоксамер 188 может быть добавлен в качестве солюбилизатора.
Буфер на основе гистидина может быть образован за счет комбинирования L-гистидина с гистидина гидрохлоридом или, дополнительно, с соляной кислотой или другими кислотами. Следует понимать, что хотя в качестве соли для буфера на основе гистидина можно использовать гистидина гидрохлорид, для буфера на основе гистидина можно использовать любую другую соль на основе гистидина, не отступая при этом от идей настоящего изобретения.
Буфер на основе ацетата может быть образован за счет комбинирования уксусной кислоты с натрия ацетат тригидратом. Следует понимать, что хотя в качестве соли для буфера на основе ацетата можно использовать натрия ацетат тригидрат, для буфера на основе ацетата можно использовать любую другую ацетатную соль, например, ацетат калия, не отступая при этом от идей настоящего изобретения.
Кроме того, композиция по настоящему изобретению может дополнительно включать один или несколько других подходящих эксципиентов, которые хорошо известны специалистам в данной области.
В некоторых вариантах осуществления жидкая фармацевтическая композиция исполнена так, что она стабильна при хранении в том смысле, что не происходит каких-либо дальнейших процессов агрегации белка или его модификаций по сравнению с показателем стабильности в нулевой временной точке.
В одном варианте осуществления авторы изобретения неожиданно получили высококонцентрированные водные фармацевтические композиции антитела к PD-1 пролголимаба, где пролголимаб может находиться в концентрации от 90 до 150 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 90 мг/мл, 95 мг/мл, 100 мг/мл, 105 мг/мл, 110 мг/мл, 115 мг/мл, 120 мг/мл, 125 мг/мл, 130 мг/мл, 135 мг/мл, 140 мг/мл, 145 мг/мл, 150 мг/мл.
Такие высококонцентрированные водные фармацевтические композиции антитела к PD-1 пролголимаба по настоящему изобретению показали коллоидную стабильность при интенсивном перемешивании (800 об./мин) в течение 120 ч и высокую термическую стабильность при нагревании при 50 и 37°С, а также приемлемую для парентерального введения вязкость менее 50 сР.
Указанные выше композиции подходят для парентерального введения, такого как внутривенное, подкожное, интрадермальное, внутриартериальное, интратекальное, внутрибрюшинное, внутрисуставное и/или внутримышечное введение.
Предоставляемые фармацевтические композиции можно вводить нуждающемуся в лечении индивидууму посредством системной инъекции, например, посредством внутривенной или подкожной, или внутримышечной инъекции; или посредством инъекции или нанесения на соответствующий участок, например, посредством прямой инъекции или прямого нанесения на участок, когда участок доступен при хирургическом вмешательстве; или посредством местного применения.
Указанные выше композиции можно вводить нуждающемуся в лечении индивидууму внутривенно в виде инфузии.
В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция антитела к PD-1 пролголимаба по настоящему изобретению может быть введена внутривенно в виде инфузии длительностью 60 мин, при хорошей переносимости длительность инфузии может быть сокращена до 30 мин.
Водная фармацевтическая композиция антитела к PD-1 пролголимаба по настоящему изобретению может быть использована после разведения. Для этого необходимое количество композиции из флакона переносят в ёмкость для инфузий, содержащую стерильный 0,9% раствор натрия хлорида или стерильный 5% раствор декстрозы. Концентрация указанной композиции в приготовленном растворе может составлять от 0,5 до 10 мг/мл. Приготовленный раствор перемешивают путем осторожного переворачива
- 19 046787 ния емкости для инфузий во избежание пенообразования.
Способы лечения и применение водной композиции.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения млекопитающего, включающему введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтических композиций, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по настоящему изобретению, где у млекопитающего может присутствовать заболевание или нарушение, которые можно эффективно лечить антителом к PD-1 пролголимабом по настоящему изобретению.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения млекопитающего, включающему введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтических композиций, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по настоящему изобретению, где у млекопитающего может присутствовать заболевание или нарушение, которые можно эффективно лечить антителом к PD-1 пролголимабом по настоящему изобретению.
В предпочтительном варианте осуществления млекопитающее представляет собой человека.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения нуждающегося в этом субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтических композиций, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по настоящему изобретению, где у субъекта может присутствовать заболевание или нарушение, которые можно эффективно лечить антителом к PD-1 пролголимабом по настоящему изобретению.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения нуждающегося в этом субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтических композиций, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по настоящему изобретению, где у субъекта может присутствовать заболевание или нарушение, которые можно эффективно лечить антителом к PD-1 пролголимабом по настоящему изобретению.
В предпочтительном варианте осуществления субъект представляет собой человека.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения неоперабельной меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения неоперабельной меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения метастатической меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения метастатической меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения ранних стадий меланомы до и после радикального лечения, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения ранних стадий меланомы до и после радикального лечения, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения рака легкого, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения рака легкого, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества од
- 20 046787 ной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ), включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ), включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения неоперабельного или метастатического немелкоклеточного рака легкого, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет от 15 до 40 мг/мл, по данному изобретению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения неоперабельного или метастатического немелкоклеточного рака легкого, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций антитела к PD-1 пролголимаба, где концентрация антитела к PD-1 пролголимаба составляет 20 мг/мл, по данному изобретению.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения меланомы у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения меланомы у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения неоперабельной меланомы у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения неоперабельной меланомы у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения метастатической меланомы у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количест- 21 046787 ва водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения метастатической меланомы у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения ранних стадий меланомы до и после радикального лечения у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
I) состав на 1 мл:
Пролголимаб 20.0 мг
Натрия ацетата тригидрат 1.742 мг
Трегалозы дигидрат 100 мг
Кислота уксусная лед. до pH 5.0
Вода для инъекций до 1 мл.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения ранних стадий меланомы до и после радикального лечения у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения рака легкого у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения рака легкого у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
- 22 046787
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения неоперабельного или метастатического немелкоклеточного рака легкого у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
I) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Натрия ацетата тригидрат | 1.742 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| Кислота уксусная лед. | до pH 5.0 |
| Вода для инъекций | до 1 мл. |
В одном варианте осуществления изобретения предлагается способ лечения неоперабельного или метастатического немелкоклеточного рака легкого у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции антитела к PD-1, содержащей:
II) состав на 1 мл:
| Пролголимаб | 20.0 мг |
| Трегалозы дигидрат | 100 мг |
| L-гистидин | 0.92 мг |
| L-гистидина гидрохлорид | 2.96 мг |
| Вода для инъекций | до 1 мл |
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения неоперабельной меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения метастатической меланомы, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения ранних стадий меланомы до и после радикального лечения, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения рака легкого, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ), включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения неоперабельного или метастатического немелкоклеточного рака легкого, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба.
Терапевтически эффективное количество антитела к PD-1 пролголимаба по настоящему изобрете
- 23 046787 нию, и водных композиций, включающих антитело к PD-1 пролголимаб, по настоящему изобретению, в предлагаемых составах зависит от состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, предшествующей терапии и истории болезни пациента, и ответу на терапевтическое средство. Подходящую дозу можно регулировать по решению лечащего врача так, что ее можно вводить пациенту один раз или посредством нескольких введений.
В одном из вариантов осуществления эффективное количество антитела к PD-1 на дозу для пациента составляет приблизительно от 0,01 до 10 мг на килограмм массы тела, или приблизительно от 1 до 10 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 0,05 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 0,25 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 0,5 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 1 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 2 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 3 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 4 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 5 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 6 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 7 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 8 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 9 мг на килограмм массы тела, или приблизительно 10 мг на килограмм массы тела.
Частота введения доз обычно может быть примерно один раз в неделю, или примерно один раз каждые 2 недели, или примерно один раз каждые 3 недели.
В другом варианте осуществления приемлемая доза для введения посредством инфузии может содержать 5-450 мг/дозу, или может содержать 40 мг, или 50 мг, или 60 мг на одну дозу; или может содержать 70 мг, или 80 мг, или 90 мг, или 100 мг на одну дозу; или может содержать 110 мг, или 120 мг, или 130 мг, или 140 мг на одну дозу; или может содержать 150 мг, или 160 мг, или 170 мг, или 180 мг на одну дозу; или может содержать 190 мг, или 200 мг, или 210 мг, или 220 мг на одну дозу; или может содержать 230 мг, или 240 мг, или 250 мг, или 260 мг на одну дозу; или может содержать 270 мг, или 280 мг, или 290 мг на одну дозу, или может содержать 300 мг, или 310 мг, или 320 мг, или 330 мг, или 340 мг, или 350 мг на одну дозу; или может содержать 360 мг, или 370 мг, или 380 мг, или 390 мг, или 400 мг, или 410 мг, или 420 мг, или 430 мг, или 440 мг, или 450 мг на одну дозу.
В одном варианте осуществления изобретения доза может быть доставлена посредством одной или более одной инфузий. Доза может быть доставлена посредством одной, двух или трех инфузий. В некоторых вариантах изобретения длительность терапии может составлять от одной или нескольких инфузий. В некоторых вариантах изобретения улучшения состояния пациента можно добиться посредством лечения в течение продолжительного периода времени. В некоторых вариантах изобретения длительность терапии может быть до прогрессирования заболевания или пожизненно.
В другом варианте осуществления фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно получать в виде нерасфасованного состава, и, по существу, компоненты фармацевтической композиции присутствуют в количествах выше, чем может требоваться для введения, и их соответствующим образом разбавляют до введения.
Альтернативно, фармацевтическая композиция может быть заморожена, высушена распылением, либо лиофилизирована и восстановлена перед применением в подходящем стерильном носителе. Лиофилизация может быть выполнена с использованием способов, известных в данной области техники, которые включают в себя различные шаги, такие как замораживание, отжиг, первичная и вторичная сушка.
Фармацевтические композиции можно вводить в виде одного терапевтического средства или в комбинации с дополнительными терапевтическими средствами по мере необходимости. Таким образом, в одном варианте осуществления предлагаемые способы лечения и/или профилактики используют в комбинации с введением терапевтически эффективного количества другого активного средства. Другое активное средство можно вводить до, в течение или после введения фармацевтических композиций по настоящему изобретению. Другое активное средство можно вводить как часть предлагаемой композиции или, альтернативно, в виде отдельного состава.
Введение предлагаемых фармацевтических композиций можно проводить различными способами, включая парентеральное, пероральное, буккальное, назальное, ректальное и местное введение. Парентеральное введение может включать, без ограничения, трансдермальное, подкожное, внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное, интрадермальное, внутрисердечное, внутрижелудочковое, внутричерепное, внутритрахеальное, интратекальное введение, внутримышечную инъекцию, внутривитреальную инъекцию.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению особенно пригодны для парентерального введения, т.е. подкожно, внутримышечно, внутривенно, интраперитонеально, в спинной мозг, в суставы, интрасиновиально и/или интратекально. Парентеральное введение можно проводить посредством болюсной инъекции или непрерывной инфузии. Фармацевтические композиции для инъекций могут находиться в стандартной лекарственной форме, например, в ампулах, флаконах, преднаполненных шприцах или в контейнерах с несколькими дозами с добавленным консервантом, но не ограничиваясь этим. Кроме того, разработан ряд недавних подходов к доставке лекарственного средства, и фармацевтические композиции по настоящему изобретению подходят для введения этими новыми способами, например, BD Physioject™, Inject-ease®, Genject®, ручки-инжекторы, такие как GenPen®, и безыгольные устройст
- 24 046787 ва, такие как MediJector®40 и BioJector®. Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению также можно адаптировать для еще не открытых способов введения.
Также см. Langer, 1990, Science, 249: 1527-1533.
Предлагаемые фармацевтические композиции также можно формулировать в качестве депопрепарата. Такие длительно действующие составы можно вводить посредством имплантации (например, подкожно или внутримышечно) или посредством внутримышечной инъекции. Таким образом, например, составы можно модифицировать с использованием подходящих полимерных или гидрофобных материалов (например, в виде эмульсии в приемлемом масле), или ионообменных смол, или в виде умеренно растворимых производных, например, в виде умеренно растворимой соли.
Фармацевтические композиции при желании можно предоставлять во флаконе, упаковке или в устройстве-распределителе, которые могут содержать одну или несколько стандартных лекарственных форм, содержащих активный ингредиент. В одном варианте осуществления устройство-распределитель может содержать шприц, содержащий однократную дозу жидкого состава, готового к инъекции. Шприц может сопровождаться инструкцией по введению.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к набору или контейнеру, содержащим водную фармацевтическую композицию по изобретению. Концентрация антитела в водной фармацевтической композиции может варьировать в широком диапазоне, но, как правило, в пределах диапазона приблизительно от 1 до приблизительно 200 мг/мл. Набор также может сопровождаться инструкциями по применению.
Способ получения вышеуказанных композиций включает добавление в водную фазу ацетатных буферных агентов, с последующим добавлением, в любой последовательности, следующих компонентов: трегалозы, пролголимаба, и/или солюбилизатора, выбранного из группы: полисорбат 20, полисорбат 80, полоксамер 188 или их комбинация.
Способ получения вышеуказанных композиций включает добавление в водную фазу гистидиновых буферных агентов, с последующим добавлением, в любой последовательности, следующих компонентов: трегалозы, пролголимаба, и/или солюбилизатора, выбранного из группы: полисорбат 20, полисорбат 80, полоксамер 188 или их комбинация.
Пример исследования
Ниже представлены примеры исследования по определению реагентов и их концентраций для получения водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба по настоящему изобретению.
Исследования и примеры, представленные в настоящем документе, предназначены исключительно для иллюстративных целей, которые демонстрируют подходимость определенных компонентов, используемых в водных фармацевтических композициях антитела к PD-1 пролголимаба. Подразумевается, что средний специалист в данной области техники может использовать и другие способы, не отступая при этом от идей настоящего изобретения.
Подходимость водных композиций по настоящему изобретению была испытана посредством иллюстративных способов, описанных в настоящем документе.
Пример 1. Получение стабильных составов антитела к PD-1 пролголимаба.
Получение образцов антитела с концентрацией 5 мг/мл осуществляли в концентрационных ячейках Stirred Cell (Millipore) под давлением. Для этого антитело в исходном составе помещали в ячейку, при непрерывном перемешивании белок концентрировали под потоком сжатого воздуха до концентрации 10 мг/мл, после чего вносили в ячейку не менее чем 10 кратный объем водного раствора с целевым составом, включающим буферные, осмотические агенты и, если необходимо, дополнительные водорастворимые стабилизаторы. По завершении процесса диафильтрации антитело концентрировали до концентрации около 10 мг/мл, выгружали из ячейки, определяли точную концентрацию белка методом УФспектрофотометрии. Затем к образцу вносили соответствующий раствор вспомогательных веществ для получения раствора с целевой концентрацией белка 5 ± 0,2 мг/мл.
Получение образцов белка с концентрацией более 50 мг/мл проводили в кассетах Pellicon (Millipore) в режиме тангенциального потока. Для этого антитело в исходном составе помещали в емкость для диафильтрации, концентрировали белок до концентрации 50 -100 мг/мл, после чего к системе подключали подачу не менее чем 10 кратного объема раствора с целевым составом, содержащим буферные, осмотические агенты и, если необходимо, дополнительные водорастворимые стабилизаторы. Допускается внесение концентрата осмотических агентов и водорастворимых стабилизаторов после завершения диафильтрации. По завершении процесса диафильтрации антитело концентрировали до концентрации, превышающей целевую, выгружали из системы и определяли точную концентрацию белка. Затем к образцу вносили соответствующий раствор вспомогательных веществ для получения раствора с целевой концентрацией белка.
При получении составов, содержащих солюбилизаторы, концентраты поверхностно-активных веществ вносили к антителу после завершения диафильтрации и концентрирования при финальном разведении антитела раствором вспомогательных веществ до целевой концентрации.
- 25 046787
Перед асептическим наполнением в конечный контейнер (например, стеклянный или полимерный сосуд, флакон или шприц) раствор антитела фильтровали через мембрану с размером пор 0,22 мкм.
Пример 2. Определение концентрации белка в исследуемых образцах.
Концентрацию белка определяли с помощью метода УФ-спектрофотометрии при длине волны 280 нм в УФ-прозрачных планшетах.
Каждый образец разводили соответствующим раствором вспомогательных веществ до концентрации ~0.5 мг/мл. В лунку планшета для УФ-спектрофотометрии помещали 150 мкл разведенного образца. Измеряли оптическую плотность помещенных в планшет растворов на планшетном спектрофотометре при длине волны 280 нм. В качестве раствора сравнения использовали соответствующий раствор вспомогательных веществ.
Концентрацию белка (С) в мг/мл рассчитывали по формуле
I _ А(280)*Ь ε*1 ’ где А280 - значение оптической плотности при длине волны 280 нм; ε - коэффициент экстинкции исследуемого белка;
b - суммарный коэффициент разведения образца;
l - толщина слоя в лунке планшета; для 150 мкл 1 = 0,42 см.
Пример 3. Исследование ПЭГ-агрегации.
Готовили раствор ПЭГ 6000 с массовой концентрацией 20-25% в исследуемом составе эксципиентов. Итоговые растворы фильтровали через фильтр Durapore 0,45 мкм.
В 96-луночные планшеты для УФ-спектрофотометрии переносили расчетное количество образца, раствора вспомогательных веществ и 20-25% раствора ПЭГ 6000 так, чтобы в ряде лунок была концентрация ПЭГ6000 от 0 до 18%, а концентрация белка в каждой лунке составляла 1 мг/мл. Все полученные в лунках растворы хорошо перемешивали, пипетированием.
После этого оценивали степень мутности растворов визуально, а также измеряли оптическую плотность растворов при длине волны 400 нм.
Осаждение белка в присутствии ПЭГ связано с эффектом замещения объема, то есть белок стерически вытесняется из регионов растворителя полимером. Это приводит к концентрированию белка до тех пор, пока не будет превышена его растворимость и не выпадет осадок. Чем менее стабилен образец, тем при меньшей концентрации ПЭГ 6000 он будет образовывать видимые агрегаты (опалесценцию).
Пример 4. Определение коллоидной стабильности методом шейк-тест.
Исследуемые образцы разделяли на 2 части по 200 мкл и помещали в стеклянные виалы, по 1 виале на каждый состав закладывали в холодильник на хранение при 2 -8°С, остальные устанавливали в шейкер и шейкировали со скоростью 800 об./мин при температуре 2-8°С в течение указанного времени. После окончания стресса пробирки встряхивали на вортексе и передавали на анализ.
Пример 5. Определение коллоидной стабильности методом криоконцентрирования.
Исследуемые образцы разделяли на 2 части и помещали в полимерные пробирки: по 1 пробирке на каждый состав откладывали в холодильник на хранение при 2-8°С, остальные устанавливали в морозильную камеру и хранили при температуре минус 16-20°С в течение указанного времени. После окончания стресса пробирки убирали из морозильной камеры, выдерживали при комнатной температуре до полного оттаивания содержимого, перемешивали растворы с помощью vortex и передавали на анализ.
Пример 6. Определение термической стабильности методом термостресс.
Исследуемые образцы разделяли на 2 части и помещали в отдельные стеклянные виалы: по 1 виале на каждый состав откладывали в холодильник на хранение при 2 -8°С, остальные устанавливали в термостат и инкубировали при необходимой температуре в течение указанного времени. После окончания прогрева виалы убирали из термостата, выдерживали при комнатной температуре около 15 мин и передавали на анализ.
Пример 7. Определение гомогенности образцов методом эксклюзионной (Э) высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Колонка Tosoh TSK-GelG3000SWXL 7,8 mm IDx30 cm, cat. № 08541.
Температура колонки: 25°С.
Скорость потока подвижной фазы: 0,7 мл/мин.
Объем вкола: 10 мкл.
Концентрация образца: 5 мг/мл.
Длина волны детектора: 220 нм.
Продолжительность элюирования: 25 мин.
Подвижная фаза: динатрия гидрофосфат б/в 7,1 мг/мл.
Натрия хлорид 17.54 мг/мл.
рН подвижной фазы доводили до 7,0 ортофосфорной кислотой.
Изменение чистоты после стресса рассчитывали по формуле:
Δ = (доля основного пика после стресса - доля основного пика до стресса).
- 26 046787
Пример 8. Определение гетерогенности по заряду (профиль заряженных форм) образцов на приборе Caliper Labchip GXII.
Приготовление анализируемых образцов.
Образцы разводили до концентрации 1 мг/мл. К 200 мкл полученного раствора добавляли 2 мкл раствора карбоксипептидазы В (СрВ) с концентрацией 5 мг/мл, перемешивали и инкубировали в течение 2 часов при температуре 37°С. Испытуемые образцы диализовывали против трёх смен воды. Для проведения диализа поместили испытуемые растворы в центрифужные пробирки Amicon Ultra объемом 0,5 мл и центрифугировали в течение 10 мин при скорости вращения ротора 10000 об/мин в центрифуге Eppendorf Centrifuge 5417R. Измеряли интенсивность поглощения растворов при помощи спектрофотометра Cary 50 Bio относительно воды. Готовили пробы исследуемых серий с концентрацией 2 мг/мл. В 96луночный планшет Bio-Rad вносили по 3 мкл Labelling Buffer (из набора НТ Protein Charge Variant Labeling Kit), по 15 мкл испытуемых растворов и по 3 мкл раствора Dye Mixture (из набора НТ Protein Charge Variant Labeling Kit). Помещали планшет в темное место на 10 мин, после чего добавляли в каждую лунку по 36 мкл воды и перемешивали, пипетируя. Центрифугировали в течение 1 мин при 1000 об/мин в центрифуге Eppendorf Centrifuge 5417R.
Приготовление рабочих растворов и заполнение чипа.
Приготовление рабочих растворов и подготовку чипа проводили в соответствии с методикой от производителя с использованием набора НТ Protein Charge Variant Labeling Kit. Запуск анализа является стандартной процедурой. Метод анализа НТ Protein Charge Variant 90s.
Пример 9. Определение чистоты образцов на приборе Caliper Labchip GXII в редуцирующих и нередуцирующих условиях.
Приготовление анализируемых образцов.
Для приготовления денатурирующего и восстанавливающего растворов использовали по 700 мкл НТ Protein Express Sample Buffer. Для восстановления образцов вносили 24,5 мкл 1М дитиотреитола (DTT). В буфер для невосстанавливаемых образцов вносили алкилирующий агент - 24,5 мкл 1М йодацетамида (IAM).
Для каждого образца подготавливали две микропробирки - в одну вносили 35 мкл денатурирующего буфера, в другую - 35 мкл восстанавливающего. Образцы разводили до концентрации 2 мг/мл. Вносили в каждую пару пробирок по 5 мкл образца. Денатурировали образцы при 100°С в течение 5 мин. Перемешивали пробирки на вортексе, после чего добавляли 70 мкл воды в каждую пробирку и перемешивали на вортексе. Переносили по 44 мкл каждого образца в лунки 96-луночного планшета.
Приготовление рабочих растворов и заполнение чипа.
Рабочие растворы и подготовку чипа проводили в соответствии с методикой от производителя с использованием набора НТ Protein Express Reagent Kit. Запуск анализа является стандартной операцией. Метод анализа НТ Protein Express 200.
Пример 10. Определение профиля заряженных форм образцов методом ионообменной (ИО) высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Колонка: ProPac WCX-10 Analytical, 4x250 мм.
Предколонка: Pro Рас WCX-10G, 4x50 мм.
Температура колонки: 30°С.
Скорость потока подвижной фазы: 0,7 мл/мин.
Объем вкола: 50 мкл.
Концентрация образца: 1 мг/мл.
Длина волны детектора: 220 нм.
Продолжительность элюирования: 60 мин.
Подвижная фаза:
Элюент А: 0,03М 2-монфолиноэтансульфаоновая кислота (MES), рН 6.0.
Элюент В: 0,03 М MES, 0,5 М NaCl, pH 6.0.
Градиент элюента А: 86% - 0% - 86%.
Перед анализом испытуемый образец обрабатывали раствором карбоксипептидазы Б при температуре +37 ± 1°С в течение 2 ч.
Абсолютное изменение профиля заряженных форм после стресса рассчитывали по формуле:
Δ = |содержание кислых фракций до стресса - содержание кислых фракций после стресса| + |содержание доминирующей фракции до стресса - содержание доминирующей фракции после стресса| + |содержание щелочных фракций до стресса - содержание щелочных фракций после стресса|.
Пример 11. Определение низкомолекулярных примесей методом вертикального гель-электрофореза (ВЭФ) в полиакриламидном геле (ПААГ) в редуцирующих и нередуцирующих условиях.
Готовили ПААГ в стеклянных пластинах в присутствии натрия додецилсульфата, состоящие из концентрирующего слоя - 4% ПААГ и разделяющего слоя: в редуцирующих условиях - 12,5% ПААГ, в нередуцирующих условиях - 8% ПААГ.
Собирали и устанавливали электрофорезную камеру в соответствии с инструкцией по эксплуатации
- 27 046787 прибора для проведения вертикального электрофореза. Пробы готовили, разводя образцы очищенной водой до конечной концентрации 1 мг/мл. Отбирали объем, эквивалентный 40 мкг и смешивали подготовленные пробы исследуемого образца в соотношении 3:1 (об./об.) с буферным раствором для нанесения образцов 4-кратным, содержащим 2-меркаптоэтанол (редуцирующие условия) и не содержащим 2меркаптоэтанол (нередуцирующие условия), перемешивали. Полученные растворы инкубировали при температуре (99 ± 1)°С в течение 3 мин (образцы, содержащие 2-меркаптоэтанол) и при температуре (99 ± 1)°С в течение 1 мин (образцы, не содержащие 2-меркаптоэтанол). Растворы охлаждали до комнатной температуры, перемешивали и наносили в лунки ПААГ под слой электродного буферного раствора.
Электрофорез проводили в режиме постоянного тока, используя систему водяного охлаждения. Задавали параметры работы источника питания: при прохождении фронта красителя через концентрирующий гель напряжение тока составляло 110 В. После вхождения фронта красителя в нижний разделяющий гель на 5 - 7 мм напряжение тока увеличивали до 180 В. Источник питания отключали, когда фронт красителя достиг нижней границы геля.
После окончания электрофореза гели отделяли от стекол и проводили фиксацию белков в фиксирующем растворе в течение 16-18 ч при комнатной температуре. Затем проводили окрашивание гелей (в растворе кислотном синем 83) и отмывку до получения четкой визуализации полос. Гели сканировали. Чистоту и примеси в испытуемых образцах оценивали с помощью программного обеспечения GelPro.
Пример 12. Определение относительной специфической активности.
Относительную специфическую активность образцов моноклонального антитела против PD-1 оценивали по способности специфично связываться с белком PD-1 на поверхности мембраны клеток линии Jurkat PD-1 NFAT. За день до проведения анализа иммобилизировали PDL-1 в лунках культуральных планшетов. На следующий день промывали планшеты, вносили по 50 мкл/лунку раствора фитогемагглютинина-П (ПанЭко, Россия, кат. № М021). При помощи роботизированной станции Freedom Evo готовили серийные разведения стандартного и исследуемого образцов и вносили в культуральные планшеты по 10 мкл/лунку. Вносили в культуральные планшеты по 40 мкл/лунку клеточной суспензии Jurkat PD-1 NFAT. Инкубировали планшеты 4-6 ч при 37°С, 5% СО2. Все описанные выше процедуры проводили в асептических условиях.
По завершении инкубации добавляли 100 мкл/лунку раствора BioGlo (Promega, США, кат. № G7941) и определяли уровень люминесценции.
С помощью программного обеспечения Magellan строили четырехпараметровые кривые зависимости среднего значения люминесценции от концентрации белка для растворов стандартного образца и испытуемого образцов, расположенных на одном планшете.
Относительную специфическую активность испытуемого образца в процентах (RP) рассчитывали по формуле
ED.rst
RP =---—-100%,
EDi.. test , где ED50st - значение половинной эффективной дозы стандартного образца, нг/мл;
ED50test - значение половинной эффективной дозы испытуемого образца, нг/мл.
За конечный результат принимали среднее значение относительной специфической активности, рассчитанное по трем независимым определениям (определенное на 3-х разных культуральных планшетах).
Пример 13. Определение вязкости.
Динамическую вязкость исследуемых растворов определяли методом ротационной вискозиметрии на вискозиметре Брукфильда CAP2000+L.
Пример 14. Исследования природы буферного раствора.
Исследуемые составы.
Для настоящего исследования выбраны четыре буферных раствора. При выборе молярности и рН буфера учтены ограничения при возможном подкожном введении, а также pI антитела (рН исследуемых буферных растворов выбраны в минимальном возможном физиологичном значении).
- 28 046787
Состав (на 1 мл):
| Acetate, pH 5.0 | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат тригидрат (т/г) 0.436 мг Уксусная кислота ледяная (лед.)до pH 5.0 |
| Citrate, pH 5.0 | Пролголимаб 5 мг Натрия цитрат дигидрат (д/г) 0.932 мг Лимонная кислота безводный (б/в) 0.35,2 мг |
| Histidine, pH 5.5 | Пролголимаб 5 мг L-гистидин 0.23 мг L-гистидина гидрохлорид моногидрат (м/г)0.74 мг |
| Phosphate, pH 6.0 | Пролголимаб 5 мг Натрия дигидрсфосфат моногидрат (м/г) 1.21 мг Натрия гидрофосфат безводный (б/в) 0.17 мг |
Определение коллоидной стабильности методом ПЭГ-агрегации.
Исследование проводили в трех повторностях для каждого образа. Результаты представлены в табл. 1 и на фиг. 1.
Таблица 1
Средняя оптическая плотность растворов сразу после риготовления при длине волны 400 нм
| ПЭГ 6000, Ϊ | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 14 | 16 | 18 |
| Acetate,pfl 5.0 | 0Л5 9 | 0.061 | 0.063 | 0.063 | 0.062 | 0.064 | 0.066 | 0.063 | 0.069 | 0.070 |
| CitraterpH 5.0 | 0.05 6 | 0.050 | 0.053 | ВНя | ||||||
| Histidine,pH 5.5 | 0.05 8 | 0.062 | 0.062 | 0.063 | 0.064 | 0.066 | ||||
| Phosphate,pH 6.0 | 0.05 3 | 0.061 | 0.061 |
В результате исследования наиболее высокую коллоидную стабильность в присутствии ПЭГ показали образцы в гистидиновом и ацетатном буферных растворах. Композиции на основе цитрата и фосфата были исключены из дальнейшего исследования, так как агрегация при 6% ПЭГ является показателем неудовлетворительной коллоидной стабильности. На основании полученных результатов для дальнейшего выбора рН и молярности буферного раствора выбраны ацетатный и гистидиновый буферные рас творы.
Пример 15. Выбор рН и буферной емкости раствора.
____________________Исследуемые составы (на 1 мл)
| Обозначение | pH 5.5 | pH 6.0 | pH 6.5 |
| 5 ntv Гистидиновый буферный раствор | Пролголимаб 5 мг L-гистидин 0.23 мг L-гиссидина г/х м/г 0.74 мг | Пролголимаб 5 мг L-гистидин 0.45 мг L-гистидина г/х м/г 0.45 мг | Пролголимаб 5 мг L-гистидин 0.58 мг L-гистидина г/х м/г 0.27 мг |
| 10 Гистидиновый буферный раствор | Пролголимаб 5 мг L-гистидин 0.46 мг L-гистидина г/х м/г 1.48 мг | Пролголимаб 5 мг Ь-тистидин 0.9 мг L-гистидина г/х м/г 0.9 мг | Пролголимаб 5 мг L-гистидин 1.16 мг L-гистидина г/х м/г 0.54 мг |
| 20 шМ Гистидиновый буферный раствор | Пролголимаб 5 мг L-гистидин 0.92 мг L-гистидина г/х м/г 2.96 мг | Пролголимаб 5 мг Ь-тистидин 1.8 мг Ь-гистидина г/х м/г 1.8 мг | Пролголимаб 5 мг L-гистидин 2.32 мг Ь-гистидина г/х м/г 1.08 мг |
- 29 046787
| 5 пК Ацетатный буферный раствор | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат т/т 0.24 мг Уксусная к-та до pH до 4.5 | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат т/г 0.44 мг Уксусная к-та до pH до 5.0 | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат т/г 0.58 мг Уксусная к-та до pH до 5.5 |
| 10 иМ Ацетатный буферный раствор | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат т/г 0.49 мг Уксусная к-та до pH до 4.5 | Пролголимаб 5 мг Натрм ацетат т/г 0.87 мг Уксусная к-та до pH до 5.0 | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат т/г 1.16 мг Уксусная к-та до pH до 5.5 |
| 20 иМ Ацетатный буферный раствор | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат т/г 0. 98 мг Уксусная к-та до pH до 4.5 | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат т/г иг 1.74 Уксусная к-та до pH до 5.0 | Пролголимаб 5 мг Натрия ацетат т/г 2.31 мг Уксусная к-та до pH до 5.5 |
Исследование проводили методом термостресс при 50°С в течение 72 ч. Результаты представлены в табл. 2. Гомогенность образцов анализировали методом Э ВЭЖХ и электрофореза на приборе Labchip. Профиль заряженных форм образцов анализировали на приборе Labchip.
Таблица 2
Сводные результаты показателей качества до и после термостресса______________
| 5 шИ Histidine pH 5.5 10 шИ Histidine pH Ξ.ϊ - , 7..................................................... 5 inM Histidine pH 6.0 10 isH Histidine pH 6.3 2? rii Histidine pH 6.0 5 ml-1 Histidine pH 6.5 10 ibM Histidine pH c.r 2 0 rll Histiline pH6. Ξ 5 иМ Acetate pH 4.5 10 rll Acetate pH 4 . 5 20 nM Acetate pH i . 5 5 ml-I Acetate pH 5.0 | теор»., 5.5 a. οι A. 51 5.3 | ..ел'.' tW™ -it . : НИМИ .№.. ВВП m. .№ kt/йй ω ,ffc3 lb | -cc. Ю ω НйгШ n мН 1 ΕΒΒΙ № Ή ·’ ,г кЙЙМ ,n L’ КЗжйЬ! 113 1 ' ла : | ₽H практ. noc.te 50 °C 72ч 5 . 72 = . с: 5.63 6.12 6.20 6.17 6.67 6. ЗЭ 6.34 5.03 4.27 4.66 5.43 | Βχοι 3: ВЭЖХ,' Седер .т.ание моном ера, % 93.46 93.55 S3.53 93.4 0 92.57 93.61 93.70 93.59 93.74 93.79 93.53 93.59 53.55 | ΓΪΞΖ ΚΞ2- Соде моном Lafc ЭФ ред. уел. , =5 9 2.70 95.4 9 99.05 92 . 97 92 . 94 95.95 92.94 9 9.02 9 9.07 92. 93 9 2.22 9 5.26 99.20 | троль зжание ера, ЭФ Chip ЭФ неред. ус л. , % = 4.50 95.05· 94.12 93. 99 94.12 93.99 94.09 93.75 93.52 90.95 90.29 92.25 93.31 | э/ВЭЖХ', Δ содерж. мономера, % 1¾^¾¾¾ кйввйЗ ожв йЖйёШйЙ И· _ -7.-13 ШИ — 7.42 -7.4 6 -0.41 -9.42 | Изменение Д киол. фракции, % нивни -24.2-7 -25.7- НИНИ· НИМ -+2^.2 и внв··· + 25.69 + 26.46 | Термострес стдержания LaoChio* д дсминж. фракции, % -15.-75 -15.21 МИВ -16.16 ИНН ЖЙЙЙ -15.34 -1т.41 -14.06 -15.61 -16.64 | с- 72 ч фракций, Д щел. фракций, % ИМИ -5.77 НИНИН ййййя — - = . 61 ими -:. s о нНнн -7.64 | ' . Изме-ι седер кс иске ЖаЫ ЭФ р=д. УСЛ.г ΐ ΗΒΗ 0.:5 НИИ НИН· ПИМ ИМ· НИНИ HHI -1.09 -0.62 | :ение лания раг ЭФ Γ.1Ζ ЭФ неред. _:.п. , % -2.34 -1.11 - 2 . £ £ - 2 . Ξ = - 2 . 43 пии ипм - 1 . 35 ним |
| 10 Eli Acetate pH 5.0 | 5.33 | 5.31 | 93.65 | 99.23 | 92.75 | -2 Е.Ξ Ξ | -15.71 | -9:5 | -0,63 | |||
| 5.20 | 93. €С | 9:.:5 | 94.67 | ннннвнн | -15.75 | -9.54 | ним | иин | ||||
| 5 eM Acetate pH 5.5 | 5.5 | 6.11 | j^MI | 93.55 | 99.17 | 92.43 | -15.15 | -9.2: | НИНИ | иин | ||
| 10 eM Acetate pH 5.5 | 5.71 | 5.72 | 93.43 | 99.37 | 92.50 | +25.40 | -15.40 | ИНН | ими | |||
| 20 eM Acetate pH 5.5 | 5.66 | 53.67 | 9:.95 | 93.94 | +26.42 | -16.6S | -9.7 4 | -1.97 |
* Изменение рассчитывали по формуле Δ = содержание фракции после стресса - содержание фракции до стресса
- лучший результат
худший результат
- входной контроль или средний результат
В результате исследования показано, что присутствие моноклонального антитела против PD-1 (пролголимаб) в водном растворе приводит к увеличению уровня рН. Наибольшая стабилизация рН обеспечивается 20 мМ буферными растворами.
Все исследуемые образцы продемонстрировали высокую агрегационную стабильность на Э ВЭЖХ, так как прирост примесей в ходе термостресса составил не более 0,5% для всех образцов. Наилучшую
- 30 046787 стабильность показали образцы на основе гистидина с рН 5,5-6,0, а также на основе ацетата с рН 5,0-5,5.
Все составы продемонстрировали схожую стабильность профиля заряженных форм, количественная разница изменения содержания фракций между составами находится в пределах погрешности метода.
Согласно результатам гель-электрофореза в редуцирующих условиях, более высокую стабильность продемонстрировали все составы на основе гистидина, в то время как в нередуцирующих условиях лучшие показатели были получены для ацетатных буферных растворов.
На основании полученных данных стабильности по показателям рН, чистота и профиль заряженных форм моноклонального антитела против PD-1 для дальнейшей работы рекомендованы следующие составы вспомогательных веществ.
| 20 шМ Acet 5.0 /20 мМ Ацетатный буферный раствор pH 5.0 | Натрия ацетат т/г Уксусная кислота лед. | 1.74 мг/мл до pH 5.0 |
| 20 шМ His 5.5 /20 мМ Гистидиновый буферный раствор pH 5.5 | L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г | 0.92 мг/мл 2.9 6мг/мп |
Пример 16. Выбор фармацевтической композиции на основе гистидина.
Исследуемые составы.
Для скрининга стабильной фармацевтической композиции на основе 20 мМ гистидинового буферного раствора с рН 5,5 были взяты следующие вспомогательные вещества: маннитол, трегалозы дигидрат, сахароза (осмотические агенты). Все исследуемые растворы являются изотоническими.
- 31 046787
| Пролгслимаб | Стабилизатор! | Солюбилизаторы | 2о; мН His pH:5,5 | ||||||
| Осмотические Οι гейты | |||||||||
| Маннктол | Трегалозы д/г | Сахароза | 1-Пролии | Глинин | В а о о О ча к О •к; | Полоксамер 188 | |||
| 1 | 5 | г J | до/1 мл | ||||||
| 2 | 5 | 5 3 | С . 2 | до 1 мл | |||||
| 3 | 5 | 50 | 5 . 5 | до/ 1 мл | |||||
| 4 | 5 | 50 | 5 . 3 | де 1 мл | |||||
| 5 | -5 | 50 | С 2 | до 1 мл | |||||
| ;·5 | 50 | С . 5 | до 1 мл | ||||||
| 7/ | ·5 | 50 | С . В | де 1 мл | |||||
| 8 | ; /5; | 5 | 2: . : | до 1 мл | |||||
| 9 | ;;5 | 5 | 23.5 | bi. | де 1 мл | ||||
| 10 | ; ;5 | 5 | 23.5 | 5 . 5 | де 1 мл | ||||
| 11 | 5 | 5 | 2: . : | С . 3 | де 1 мл | ||||
| 12 | 5' | s; | 23.5 | С . 2 | до 1 мл | ||||
| 13 | ;;5; | 5 | 2 : . ζ | С . 5 | до'/ 1 мл | ||||
| 14 | /5 | 5 | 2 5.3 | G . 8 | до; 1 мл | ||||
| •Ιΐτ | /5 | 33;. 5 | / . 0 | до; 1 мл | |||||
| 16; | '·5· | 33. 5 | 7 . 5 | С . 2 | до 1 мл | ||||
| 17 | 5 | 33. 5 | ~ . 5 | С . 5 | до/ 1 мл | ||||
| 18 | '·;5· | зз. з; | т . 5 | =:. ? | ДО/ 1 мл | ||||
| 19 | ;·5· | 33. 5 | “ . 5 | С . 2 | до 1 мл | ||||
| 20; | /5 | Зз, 5 | . 5 | 5 . 5 | до; 1 мл | ||||
| ;ζΐ; | ;;5; | 3 3 . 5 | “ . 5 | С . 8 | до/1 мл | ||||
| ;2£ | 5 | 2: ·: | ' до/ 1 мд | ||||||
| 23 | 5 | 2: : | до/1 мл; ; | ||||||
| 24 | _... | :. з | до;;; 1 мл | ||||||
| 25 | 5 | 2:: | :. з | до; 1 мл | |||||
| 26 | 5 | 2: с | С . 2 | до 1 мл | |||||
| 27 | 5 | 2:: | С . 5 | до/ 1 мп | |||||
| 2Ε | 5 | 222 | С. Я | до/1 мл | |||||
| 29 | 5 | 2 5.3 | до ;1 мл |
- 32 046787
Исследуемые составы (мг до 1 мл)
| 2 ·: | ч-> | 1С | 23.8 | С 2 | до 1 мл | ||||
| _·. | Б | 1С | 23.5 | С , 5 | -С 1 мл | ||||
| 32 | г— | 1С | 1 . i | С « 8 | дс 1 мл | ||||
| 3 | 1С | 23.5 | С . ζ | до 1 мл | |||||
| 34 | Σ' | 1С | 2 з . Б | ,- ζ | дс 1 мл | ||||
| 33 | - | 1С | Ю . 3 | t о | до-<1 мл | ||||
| ? : | г | 67 | 7 - | ДО '·1· мл | |||||
| Г | 67 | 7 Ц | L - έ | до 71 мл | |||||
| - = | = | 67 | . г | С . 5 | дс 1 мл | ||||
| -J | 5 | 67 | ' . г | П Я | до 1 мл | ||||
| L с | Б | 67 | 7 ” | и . Z | дс 1 мл | ||||
| 4 1 | - | 67 | 7 ~ | С . 5 | до 1 ял | ||||
| / « | ¢7 | .· . W | 0.8 | ДС 1 МЛ | |||||
| 4 3 | □ | - ! J | до>--1 мл | ||||||
| 44 | _ : J L· | и . ζ | до 1 мл | ||||||
| - | - | _ · | С , ό | дс _ мл | |||||
| - : | - | 207 | С , У | ДО <:1 МЛ | |||||
| / т | г | 2 27 | L· . ώ | дс 1 мл | |||||
| ί 2 | - | юс | г Ξ | до)! мл | |||||
| 4 3 | Г | 107 | п Я | до-71 мл | |||||
| 5 С | - | 1С | ίί.: | до 1 мл | |||||
| с 1 - — | - | Ю | до 1 мл | ||||||
| Л | - | 1 с | £— Z . Z | г | до 1 мп | ||||
| 53 | 5 | 1С | ιί. z . : | С: Я | до 1 мл | ||||
| 54 | 1С | i ζ . с | L· . Ζ | до71 мл | |||||
| Ц К. | г | 1С | Ξ . Ξ | г Ξ | до 1 мл | ||||
| 56 | 5 | 1С | ώ ί . :ζ· | дс 1 мл | |||||
| 57 | 5 | 67 | .· . г | до 71 мл | |||||
| 58 | 5 | 67 | .· . О | L . Ζ | ДО<1 мл | ||||
| 59Г | 5 | 67 | -7 - | Г | до 1 мл | ||||
| 60 | <5; | ·: ~ | ' . г | 7^0 | до 1 мл | ||||
| '61- | 5 | 67 | 7 С | Ь' - Ζ. | до -1 мл | ||||
| 62 | 5 | >2 / | 7 ζ | — | дс 7 мл | ||||
| 63· | 5 | 67 | ί . □ | f”i· Q | ДО/1 мл |
Исследование стабильности образцов проводили методом термостресс при 50°С в течение 72 ч, шейк-тест в течение 120 ч при скорости 800 об/мин, а также однократного замораживания при температуре минус 16-20°С и размораживания при температуре +25 ± 1°С. Мутность растворов оценивали методом спектрофотометрии при 400 нм. Гомогенность образцов анализировали методом Э ВЭЖХ и электрофореза на приборе Labchip. Профиль заряженных форм образцов анализировали на приборе Labchip.
- 33 046787
Таблица 3
Сводные результаты показателей качества до и после стресс воздействия, полученные в результате анализа методами гель-фильтрации и УФ-спектрофотометрии образцов
| № | О1 Прслголимай | Состав вспомогательных веществ | , мг/мл | Содержа ние ирншера- 3 Ε3ΖΧ, %·.·. ' 97.54 | Изменение чистоты Э ВЭЖХ, % | Оптич. плотность, 400: нм | Отбор на анализ профиля изоформ | ||||||||
| В К к я< | И й о S Ϊ ь Ч е ft в | Сахароза | L-ПрОЛИН | Глицин | Η β ®: ft ΰ 11 ο c« 0 И: | Полоксамер -8 8 | Шейктест: 120 ч -5.30 | Замсрсзка -153С, размсссзк а +25аС -1.05 | Терктстрезс, +53аС 96 ч -1.37 | Шейк- тест: 120 ч 0.1232 | Заморозка -13 °C, разморозка -25°С 0.0-00 | ||||
| 2 | 5 | 5: | 0.2 | 97.52 | -2.26 | -1.33 | -1.77 | 9.1795 | 0.0735 | ||||||
| 8 | 5 | 5: | 0.5 | 97.54 | ПИИ | -1.72 | -1.54 | 0.1703 | ВИННИ | ||||||
| 4 | 5 | 50 | ύ.3 | 97.4Ε | нннн | -1.90 | -28.94 | 0,1622 | ннннн | ||||||
| 5 | 5 | 50 | 2.2 | 97.14 | 0.12 | -1.15 | 0.1852 | 0.07.52 | |||||||
| б | 5 | 50 | 0.5 | 97.53 | -2.32 | -3.22 | -1.29 | 0.1740 | 0.0723 | ||||||
| 7 | 5 | 50 | 0.8 | 97.48 | -0.72 | -4.45 | -1.24 | 0.2017 | ИНД·· | ||||||
| 8 | 5 | 5 | 2-.. z | 97.5Οι | -2.22 | -1.11 | -1.50 | 0.0747 | |||||||
| 9 | 5 | . 5 -; | 2-. . 8 | 0.2 | 8 8 . 8 5 | -0.71 | -2.16 | -2.75 | 0.1541 | 0.0753 | |||||
| 10 | 58 | /5: | 23.8 | 0.5 | 98.12 | НИВ | -2.40 | - 3.0 7 | 0.14 5 6 | ННННН | |||||
| 11 | 58 | : Д | 23.8 | 0.8 | 98.23 | -2,67 | 0.1477 | и··· | |||||||
| 12 | Д | 5 | 28.8 | 3.2 | 97.93 | -С. 58 | -1.30 | -2.33 | 0.1557 | 0.0797 | |||||
| 13 | 5 | ;5 | 28 . Ξ | 0.5 | 97.90 | -0.31 | -1. 98 | -2.04 | 0.1545 | 0.0759 | |||||
| 14 | 5 | ;5^ | 28.8 | ύ. 8 | 97.95 | -2.6£ | -2.12 | -2.05 | 0.1440 | 0.0781 | |||||
| 15 | 5 | 33. 5 | . 5 | 93.00 | ИЦ | -1.2-7 | -1.39 | НННН | нннни | ||||||
| 16 | 5 | 33. 5 | 7.5 | 0.2 | 97.94 | НННН | -1.42 | •О. 1100 | нннни | ||||||
| 17 | 5 | 33. 5 | 7.5 | 0. 5 | 97.84 | ни | -1. 85 | 0.1035 | ПИННИ | ||||||
| 18 | 5 | 33. ·:5: | 7.5 | 0. 8 | 97.3 | -2.08 | -2.90 | 0.1094 | |||||||
| 19 | 5 | 33 5 | . 5 | 8 .2 | 97.3-0 | ИН· | -1.75 | -1.22 | НИИ | ни | |||||
| 20 | 5 | 33. • ,5: | . 8 | 0.5 | 97.32 | нннн | -2.44 | -1.35 | НННН | пннни | |||||
| 21 | 5 | 33. 5: | . 5 | 0.8 | 97.93 | НННН | -2,87 | -1.37 | 0.1115 | нннни | |||||
| 22 | 5 | 100 | 97 . 33 | -0.69 | -0.58 | 0.С849 | 0.0716 | V | |||||||
| 23 | 5 | 100 | и . ζ | 97.90 | -0.64 | -0.58 | -0.32 | :.1_85 | 0.074 | /у | |||||
| 24 | 5 | 130 | 0. :· | 97.8-3 | SBBS | ННННН | ННННН | 0.1030 | ннннн | V | |||||
| 25 | 5 | 1:: | η. | 97.88 | НННН | ннннн | ННННН | 0.1110 | НЦИи | V | |||||
| 28 | 5 | 100 | 8 .2 | 97.90 | -2.66 | -:. 85 | -0.32 | 0.1096 | 0.0730 | V | |||||
| 27 | 5 | 1:: | 0.5 | 97.92 | -7.5с | -0.82 | -0.80 | 0.1124 | 0.0741 | ; V | |||||
| 23 | Я | юо | 0.8 | 97.82 | -0. 53 | -:.=5 | -0.5 3 | 0.1147 | 0.0740 | : V | |||||
| 29 | 5: | о: | 28 . : | 97.74 | -:..4 6 | -0.91 | -1.31 | /ЖОВ® | 5,0725 | ||||||
| 30 | 10 | 28.8. | 0.2- | 97.86 | -:.5э | -1.02 | -1,84 | 0.1399 | С.077' | ||||||
| 31 | • Л | :1α | 28.8 | 0.5 | 97.73 | ННВ· | -1.13 | -1.72 | 0.1476 | НИНИН |НИдРР| | |||||
| мадмм | |||||||||||||||
| 32 | 5 | 20 | 28.8 | 0.8 | 37.85 | ИН· | -1.17 | -1.90 | 0.1375 | ПНИН· | |||||
| 33 | 5< | ι: | 28 . 8 | 8 . 2 | 97.80 | . <9 | -1.14 | -1.35 | 0.1499 | С. 07 5Ξ | |||||
| 34 | 5 | ID | 28.8 | 0.5 | 97.77 | -5.58 | -1.05 | -1.53 | 0.1450 | 0.076С | |||||
| 35 | А | ι: | 2 8 . Ε | 0.8 | 97.73 | . 52 | -1.03 | -1.41 | 0.1409 | 0.0751 | |||||
| 38 | 5 | •Г | 7.5 | 97.89 | -0.61 | -S..5-2 | -0.33 | 0.0725 йв^грмд^^а1 | : V | ||||||
| 37 | '5' | S’ | 7.5 | 0.2 | 91. 8 8 | -0. 86 | -· | -0.39 | 0.1006 | 0.0743 | V | ||||
| 33 | 5 | 67 | 7.5 | 0.5 | 97.84 | НИИ нннн | нннн | -1.22 | 0.1209 | НИНИН | : V | ||||
| 33 | ;5 | Έ7 | 7.5 | 0.3 | 97.94 | НННН | 1— | -1.95 | 0.1057 | У | |||||
| ... . | |||||||||||||||
| 40 | 5 | 67 | 7.5 | 8.2 | 97.35 | -:.72 | -0.73 | -0.50 | . - | 0.0739 | V | ||||
| 41 | 5 | 57 | 7.5 | 0.5 | 97.81 | -:. 51 | -3.57 | -0.30 | 0.0369 | 0.0744 | Г V | ||||
| 42 | 5 | 57 | 7.5 | 0.8 | 93.27 | -1.14 | -1.04 | -0.72 | 0.0967 | уЖ-МЖд | : V | ||||
| 43 | 5 | ΙΰΟ | 97.30 | -0 . об | -С.31 | -ύ.50 | ,. 7° 58 | '· .-ЛО- | : V | ||||||
| 44 | :· | 100 | 0.2 | 97.-3 | . 29 | -:·.3ί | -1.50 | 0.12.: | 0.0792 | 2 V |
- 34 046787
| 45 | 5 | 199 | ϋ . 5· | 97.7? | НИИ| | МИНН | -- - | 3.1327 | НИНИ· | Cv | |||||
| 4 Е | 5 | 199 | ϋ. 3 | 97.35 | иииии | мнии | НИМ· | 3·. 1233· | ниннн | V | |||||
| 47 | 0 | 199 | 3.2 | 97.3ϋ | -3.41 | -9.44 | 9.122п | 0.9-73 | V | ||||||
| 4 □ | 5 | Ιύϋ | j , 5 | 97.34 | “ Э ; | -<··. 46 | -9.42 | 3'. 1 Li с 1 | 9.97.92 | V | |||||
| 4 9 | 5 | Ιϋύ | С'. 3 | 97.3:1 | -З.ЗЕ | 3.11г1 | ИНИН· | V | |||||||
| 5 3 | 5 | 12 | 13 . Ξ | 97 > Е ϋ | ИИИИ|И| | - С , 9· 5 | -1,. 4 3 | 3.3ё£5 | 3.0741 | V | |||||
| 51 | 5 | 13 | 23 .3 | 3ι. 2 | 97.72 | -3.54 | - ? , 9 Ό | -1, 33 | 0.1364 | 2.9773 | V | ||||
| 52 | 5 | 11 | 23 . Ξ | ύ. 5· | 97.7й | -1.33 | - - | 0.1691 | ИННИ| | ||||||
| 53 | 1 = | 23.3 | ϋ . 3 | 97.34 | н·· | -1.97 | 9.1454 | V | |||||||
| 54 | о | 1.3 | 23.3 | 3.2 | 3 3.24 | -3.39 | -1.35 | -1.73 | 9.1391 | 3.9763 | V | ||||
| 55 | о | 1 - | 23.3 | .j . 5 | 97.33 | -3.32 | -1.33 | £.7 | 0.1321 | 9.0-32 | V | ||||
| q ς | ζ> | 12 | 2 Ξ . С | |J „ 5 | 97.52 | -С. 73 | -1.27 | S | и.1302 | с.о-ег | 7 | ||||
| R7 | ; | 67 | 7.5 | 97.37 | -3.61 | -С--.4& | -0,15 | 9.9733 | V | ||||||
| 5 3 | 5 | 67 | 7 5 | ΰ . 2 | 97.37 | -3.34 | -3.44 | -9.39 | 3.1199 | 9.9773 | v | ||||
| 59 | 5 | 67 | 7.5 | Ci. 5- | 97 . с 5 | иинм | ННИН| | 9. 1129 | V | ||||||
| 3 3 | 5 | 7.5 | ϋ.3 | 97.7 4 | ннни | нннни | НИ|М| | 9.1121 | пнинн· | ||||||
| 61 | 5 | 67 | 7.5 | С.2 | Э7.63 | я» дммеа | 7.16 | V | |||||||
| 62 | 5 | 67 | 7 5 | ϋ . 5 | ч7 2 | иннн | у | ||||||||
| £3 | 5 | 67 | 7.5 | и.. 8 | 97.75 | . UJ1 | ... ~:-L-. | Г . 7 ... . -.- .. | : о 37 | V |
лучший результат
- худший результат
- входной ксытроль или средний результат
- 35 046787
Таблица 4
Сводные результаты исследования кислотно-щелочного профиля образцов до и после стресс воздействия
| » | Состав вспомогательных веществ в 20 мМ тисткудшовом ••буферном растворе с: pH· 5.5, мг/мл | Суммарное изменение :вяс л отао-щелочного профиля ПО МОДУЛЕ**, % | Отбор.' . на . лио—· . филь— ную ./сушку·. | |||||||||
| Ер олг злимаб | Улннисол | Трегаловь: Д/г | Сахарова | К о д, ц 1 й | ГлкМКН | Полкссрбат 30 | Лолоксамер 1&S | Шейктест 120: ч | /Заисрозка -13аС, разисрозка: +25° с: | Термостресс:: -Ξ1 | ||
| 22: | = | 122 | 5 . '24 | С.6В | ;.·: | V | ||||||
| 23 | 5 | 12 : | 2.2 | 8.81 | 6.43 | 36.39 | ||||||
| 24 | : | 12 : | 2.7 | и···· | 1.2'2 | 34.67 | ||||||
| 25 | г | 122 | 2.2 | 2,22 | 4.92 | 3 2.32 | ||||||
| 26 | =· | 122 | :.о | q* $5 . . | 7.82 | 06 61 | ||||||
| 27 | 7 | 12 : | О, 5 | 4. S3 | O1WS6 2'_ | V | ||||||
| 2 В | 5 | i; : | 2. 2 | 2.22 | с. 94 | 2 3.1- | ||||||
| 36: | 5 | 2.5 2 | 1.32 | 32.62 | у·· | |||||||
| 37 | 5 | ” .5 | 2.2 | 5.34 | 1.61 | 32 6 5 | ||||||
| 38 | 5 | -.5 | 2.7 | - . 12 | 2.22 | 36.07 | ||||||
| 39 | 5 | г | ~.7 | 2.2 | 9. ОС | 1.90 | ::36.83 | |||||
| 40: | = | r | :.: | 2. 2 | 1.15 | |||||||
| 41 | = | r | ~.= | 2.2 2 | V'· | |||||||
| 42: | 5 | ~.7 | :. з | 11.61 | 2.95 | 35.86 | ||||||
| 43 | 5 | i:? | 2. | 0.40 | 36.38 | т | ||||||
| 44 | = | 2.2 | 10.22 | 2.67 | 41.24 | |||||||
| 45 | 5 | i:.' | 2.7 | : ,54 | 1.72 | 41.14 | ||||||
| 46 | 5 | i: / | 2.2 | 6,3 | 2 . | |||||||
| 47 | 5 | 1'2 | :. 2 | 9.20 | 2.24 | 3 .24 | ||||||
| 48: | 5 | 12 2 | с | 11 | 3.43 | 34. ЕЕ | ||||||
| 49 | 5 | 12 2 | 2 . 2 | 2 . 2 2 | 3.42 | :36.52 | ||||||
| 50 | 5 | 12 | 1? 2 | 2.22 | 1.2 3 | :35.62 | ||||||
| 57 | 5 | _.5 | 0.98 | V· | ||||||||
| 58 | : 5 | ΐ~· | ~.7 | 2.2 | 10.78 | 1.68 | 34.48 | |||||
| 59:· | 5 | , : | 2.7 | 2. 2 2 | 0.72 | |||||||
| 60: | 5 | ’.5 | 2. 2 | 11.31 | 1.2 3 | 33.52 | ||||||
| 61 | 5 | _ , Ξ | 2.2 | 12.0 6 | 1.5“ | :34.34 | ||||||
| 62 | 5 | έ | _ .7 | 2.5 | 2.2 2 | 0.95 | т: | |||||
| 63/ | 5 | 6” | 2. 2 | 12.06 | 3.24 | 34.92 |
Изменение рассчитывали по формуле Δ = (содержание фракции после стресса — содержание фракции до стресса) * Абсолютное изменение рассчитывали по формуле Δ = Содержание кпсл. фракций до стресса — содержание кисл, фракций после стресса — -содержание щел. фракций до стресса — содержание щел, фракций после стресса1 + 'содержание доминир, фракции до стресса — содержание доминир, фракции после стресса^
- лучший результат
- худший результат
- иодной шнтрсшь или средний результат
В табл. 3 показано негативное влияние маннитола на термическую и коллоидную стабильность моноклонального антитела против PD-1 в 20 мМ гистидиновом буферном растворе с рН 5,5: в ходе термо стресса в течение 96 ч прирост примесей на Э ВЭЖХ составил от 1,24 до 3,18% в ходе шейк-теста в течение 120 ч растворы приобрели видимую агрегацию. Составы с маннитолом показали также отрицательные результаты стабильности в ходе криоконцентрирования: после одного цикла заморозкиразморозки прирост примесей на Э ВЭЖХ составил от 1,05 до 4,45%, что гораздо выше данного показа теля для других составов.
Составы, содержащие L-пролин, также продемонстрировали низкую коллоидную стабильность вследствие образования видимой агрегации в процессе шейк-теста. После тестов заморозки-разморозки и термостресса прирост примесей составов с L-пролином составил в среднем более 1% на Э ВЭЖХ.
В ходе эксперимента выявлена высокая термическая и коллоидная стабильность пролголимаба (отсутствие значимых изменений показателей качества на всех стресс-воздействиях) в составах с трегалозы дигидратом без наличия солюбилизаторов, таких как полисорбат 80 и полоксамер 188.
- 36 046787
Наибольшим стабилизирующим эффектом на моноклональное антитело против PD-1 в 20 мМ гистидиновом буферном растворе обладают: трегалозы дигидрат, сахароза, а также их комбинации с глицином. Эти составы могут быль использованы для лиофильной лекарственной формы моноклонального антитела.
Оценка стабильности перспективных составов на основе гистидина при лиофильной сушке.
Образцы, продемонстрировавшие наилучшую стабильность на предыдущем этапе скрининга, были исследованы на возможность получения лиофилизата для приготовления раствора для инфузий.
Для этого растворы, содержащие 20 мг/мл или 100 мг/мл моноклонального антитела к PD-1 пролголимаба, разливали в стеклянные флаконы I гидролитического класса, флаконы неплотно укупоривали резиновой пробкой с прорезью. Флаконы с раствором помещали в камеру лиофильной сушки. Проводили лиофильную сушку в автоматическом режиме. Стадию заморозки проводили при температуре минус 40°С, первичную сушку проводили при давлении (0,10 ± 0,03) мбар, во время вторичной сушки температуру повышали, давление составляло (0,05 ± 0,02) мбар. После завершения процесса сушки давление сбрасывали до необходимого значения вакууму 0,76 ± 0,03 мбар, проводили укупорку флаконов резиновыми пробками и далее сбрасывали вакуум до атмосферного давления. Укупоренные флаконы передавали на дальнейшие исследования. Лиофилизированные образцы моноклонального антитела к PD-1 пролголимаба хранили при температуре 2-8°С.
Для подтверждения стабильности белка после лиофилизации образцы восстанавливали. Содержание мономера оценивали методом Э ВЭЖХ, профиль заряженных форм анализировали на приборе Labchip. Также определяли значение рН до и после лиофилизации. Результаты представлены в табл. 5.
При лиофильной сушке отобранных составов на основе гистидина и после восстановления лиофилизатов наблюдали незначительный сдвиг рН, находящийся в пределах погрешности метода. Все составы продемонстрировали высокую стабильность по чистоте на Э ВЭЖХ и профилю заряженных форм после восстановления. Однако ощутимое различие чистоты образцов было продемонстрировано методом гель-электрофорез в системе LabChip Caliper. Наиболее стабильными образцами по этому показателю являются составы №№ 22, 27, 36, содержащие трегалозы дигидрат. Составы в L-пролином также показали значимое изменение профиля заряженных форм, поэтому не рекомендованы для использования. Была продемонстрирована возможность лиофилизации составов № 22 и 27 с концентрацией белка 100 мг/мл.
Таблица 5
Сводная таблица результатов показателей качества составов на основе 20-мМ гистидинового буферного раствора с рН 5,5 до и после лиофилизации
| № | Состав вспомогательных веществ, иг/мп: | Да лисф. | После лиоф. | &, (абсолютное изменение) носите лиофилизации | ||||||||||||||
| Псолгслкмаб | Маннитсл | Трегалсэы д/г | и а 1 07 | Ь-Пролин | Глицин | О ' Ш; В Й U о ϋ к | со ч—I.. ей- S о i к | pH: | Э ВЭЖХ | рн: | Э ВЭЖХ | pH | Э БЭЖХ | Изменение содержания фракций, LabChip | ||||
| Чистатaf % | Чистота, | : %; | КИСЛ, фракш-ги * Р % | доминир фракции ★, % | хел. фракций* | Суммарное изменение ки2лот:-хщелочногс псофиля по модулю” * J. . . % | ||||||||||||
| Концентрация белка в растворе 20<мг/мл· | ||||||||||||||||||
| 22 | 20 | 1С0 | 5 АО | 98 87 | 5.66 | 99.00 | Гб | и— | +0.24 | -0.23? | -0.03 | Μ··· | ||||||
| 27 | 20 | ICO | 0.5 | 5.42 | 98.86 | 5.64 | 98.97 | · С.’ | ммии | +2.55 | -0.47 | :-2.07 | мн | |||||
| з; | 20 | 67 | 7.5 | 5.60 | 98.89 | 5.65 | 98.96 | <: | НИН· | + 1 32 | -1.19 | -0.14 | ИМННН | |||||
| 20 | 67 | 7.5 | 0.5 | 5.45 | 98.89 | 5.64: | 98.98 | 0.19 | + 1 2S | +0.30: | -0.85 | 2-1-' | ||||||
| - | 20 | 100 | 5.38 | 98.87 | 5.65 | 99.02 | 0.2? | ннн· | +2 03 | -1.71 | -0.31 | 4.06 | ||||||
| 57 | 20 | 67 | 7.5 | 5.42 | 98.88 | 5.62 | 99.02 | -4.11 | +3.06 | +1.05 | 8.22 | |||||||
| 62 | 20 | 67 | 7.5 | 0.5 | 5.40 | 98.87 | 5.73, | 98.99 | 0.33 | +2 39 | :-2.38: | 0 | ||||||
| 8 | 20 | /5· | 28.S | 5.71 | 98 8ΐ | 5.70 | 98.48 | /Safe | -0.39 | +5.12 | -3.88 | -1.23 | 10 23 | |||||
| 29' | 20: | 10 | 28.8 | 5.43: | 98.88 | 5.90 | 98.95 | 0 47 | ж··· | -6 67 | ,-2.75: | -3.92 | 13 34 | |||||
| 507 | 20 | 10 | 28.8 | 5.50 | 98 89 | 5.76 | 98.94 | 0.26 | ИНИН | + 1 74 | +0тЗЗ: | :-2.12 | 4.24 | |||||
| Концентрация оелка в растворе 100 мг 'мл | ||||||||||||||||||
| 22 | 100 | 100 | 5.44 | 99 13 | : 5.61 | 98.81 | 0.17 | -0.22,· | +1.46 | :-0.45: | -0.03 | 1.94 | ||||||
| 27: | 100 | 100 | 0.5 | 5.44 | 99.05: | 5.75 | 98.76 | 0.31 | -0.16 | +1.47 | -0.80 | -0.68 | 2.95 |
* Изменение рассчитывали по формуле Δ = (содержание фракции после стресса — содержание фракции до стресса) * * Абсолютное изменение рассчитывали па формуле Δ = (содержание кисл. фракций до стресса — содержание кисл. фракций после стресса] + [содержание щел, фракций до стресса — содержание щел. фракций после стресса] + | содержание доминир. фракции до стресса — содержание доминир, фракции после стресса] — лучший результат — худший результат — входной контроль/средний |__________| || резуль тат
Получение высококонцентрированной формы и подтверждение стабильности при ускоренном хра нении.
На основании результатов скрининга в жидкой и лиофильной лекарственных форм для ускоренного исследования стабильности выбраны следующие составы:
- 37 046787
| Пролголимаб 20 - 150 мг/мл | Пролголимаб 20 - 150 мг/мл |
| П-гистидин 0.92 мг/мл | П-гистидин 0.92 мг/мл |
| L-гистидина г/х м/г 2.96 мг/мл | L-гистидина г/х м/г 2.96 мг/мл |
| Трегалозы дигидрат 100 мг/мл | Трегалозы дигидрат 80 мг/мл |
| Вода для инъекций до 1 мл | Вода для инъекций до 1 мл |
Содержание трегалозы дигидрата было снижено для выравнивания уровня осмоляльности растворов с повышенной концентрацией моноклонального антитела против PD-1 до физиологического уровня (около 300 мОсм/кг), а также для снижения вязкости растворов до уровня менее 100 сР. Стабильность образцов подтверждали ускоренным хранением при +37°С, анализ проводили методами Э ВЭЖХ, ИО ВЭЖХ и ВЭФ, а также определяли относительную специфическую активность пролголимаба. Результаты представлены в табл. 6 и 7.
Таблица 6
| Результаты исследования стабильности п | ри 37°С | ||||
| Состав | Концентрация белка | Показатель | Входной контроль | 2. не л | ;4;;н.ед; |
| Проллолжаб 20 - 150 мг/мл; ;L-гистидин·· 0.92 мг/м* 'Е-гистйжйау г/х м/г 2.96 мг/ми 1регалозы ситиграт 100 мг/мп | ' SO-'-'W/mk' ' | Сбций белокf мг/мл | 19.9 | 20,.-1 | 20.0 |
| 100 мг/мл;; | 101.X | 100.6 | ;101.9; | ||
| 1'50 мг/мл; | 14918 | /151.3 | 150.4 | ||
| 2 0: мг/мл ' : | pH ; | 5.5 | 5.5 | 5.5 | |
| 100 мг/мл | 5.6 | /5.6; | 5.6 | ||
| 1'50 мг/мл;; | 5.6 | 5.6 | --5/.7 | ||
| '20;;мг/мл· | ВЯЗКОСТ·:, cF | В·· | - | - | |
| 100 мг/мл | 40 | - | - | ||
| 150 мг/мл: | '122';· | - | - | ||
| Чистота S E3ZX | |||||
| 20 мг/мл ; | С одержание агрегатоб, % | 0.40 | 0.67 | 0.21 | |
| Содержание мономера, % | '99:.'.ц | 92.65 | 92.32 | ||
| 100 мг/мл:; ; | Со'держаиие;-/а.-1’р=егатоБ;,;;-% | 0.57 | 0.97 | I. 23 | |
| Содержание мономера, % | 99.22 | 95.39 | 97.21 | ||
| 15С мг/мл | Содержание агрегатов, % | 0.51 | :1.11/ | 1,.75 | |
| Содержание мономера, % | 99.19 | 97.92 | 97.09 | ||
| 20 мг/мл | ;ВЭФ; В'-;ред·. Условиях ; Содержание мономера, % | 95.33/ | 94.27 | 94.06 | |
| ' 100 мг/мл' . | 95.27 | 94.79 | /93:.:93-- | ||
| 150 мг/мл | 95,40 | 94.61 | 93.90 | ||
| 20 мг/?ш | ЗЭФ б перед, условиях Содержание мономера, %; | 93.36 | 91.96 | ^/91:.14/, | |
| ......100 мг'/мл; | '93.28/' | 91.79 | 90.89 | ||
| 150 мг/мл : | 93.21., | 91.64 | 90.52 | ||
| Профиль заряженных форм ,ΗΟ Ξ3ΙΧ) | |||||
| ΙΒ'/μγ/μπ·' | Кислая фракция, % | 16.72 | 25.22 | 31.03 | |
| 1 Домшир... ;;|ра:кци я ,/.;%' ' | 50.27 | 54.07 | 56.11 | ||
| Щелочная фракция, % | 32.41 | 20.71 | 12.26 | ||
| 100 мг/мл | Кислая фракция, % | 17.00 | 25.95 | 32.04 | |
| Доминир. ·..фракция, % | 50.66 | /53.91/ | 55.26 | ||
| Щелочная фракция, % | 32.34 | 20.14 | 12.10 | ||
| 150 мг/мл·. | Кислая фракция, % | 16.95 | 26.09 | ;32.19; | |
| . Состав' | Концентрация белка | Показатель : | Входной.; контроль; | ;2'';иед; | 4 нед |
| Доминир. фракиия,% | 49;.-87 ' | 54.36 | 56.11 | ||
| Щелочная фракция, % | .33.18;' | /19.55/ | ц.<70; | ||
| 2 С мг/мл | Относительная ./специфическая· .активность, % | 105 | 97 | 11'0·; | |
| 100 мг/мл;. | 101 | 104 ' | 97' | ||
| ' ' 150 мг/мл .' | ::97- | 100 | 105 |
- 38 046787
Таблица 7
Результаты исследования стабильности при 37°С
| Состав | Концентрация белка | Показатель | Входной контроль | 2 нет | 4нед |
| Пролголимаб 20 150 мг/мл L-гистидин 0.92 из/мл Ь-гистидина: г/х м/г 2.96 мг/мл Трегалозы дитидрат Ξ0 мг/мл | 2 0 Мг/мл | Обпж белой,: мг/мл: | 20.4 | 20.2 | 2D.S |
| 100 мг/мл | 100.3 | 102.8 | 101.2 | ||
| 150 мг/мл | /152.2 | 1507 | 153.0 | ||
| 20 мг/мл | pH | :5.4 | <55 | 5.6- | |
| 100 мг/мл | 5.5: | 55 | 5.6/ | ||
| 150 мг/мл | 5.6 | 55 | 5.7 | ||
| 20 мг/мл | Вязкость, cP | -5 ..... | - | - | |
| 100 мг/мл | 2 в | - | - | ||
| 150 мг/мл | 96/ | - | - | ||
| Чистота Э ВЯХ | |||||
| 20 мг/мл | Содержание агрегатов, 1 | 0.41 | 0.46 | 073 | |
| Содержание мономера, 1 | 99.09 | 98.72 | 98.30 | ||
| 100 мг/мл | Содержание агрегатов, % | 0.55 | 0.98 | 1.10 | |
| • Содержание/!®мера, А | 99.26 | 98.60 | 9’79 | ||
| 150 мг/мл | Содержание агрегатов, :;%< | 0.60 | 0.92 | 1.26 | |
| Содержание мономера, 1 | 99.27 | 98.16 | 97.55 | ||
| 20 мг/мл | ВЭФ в ред, условиях Содержание мономера,· i | 95.45 | 9479 | 94.15 | |
| 100 мг/мл | 95.59 | 94.52 | 93.SS | ||
| 150 мг/мл | 95.26 | 94.40 | 93.76 | ||
| 20 мг/мл | ВЭ4 в неред. условиях Содержание мономера, % | 93.18 | 91.82 | 91.10 | |
| -100 мг/мл | 93.04 | 91.62 | 9С77 | ||
| 150 мг/мл | 93.00 | 9L25 | 9С.28 | ||
| Профиль звдяжен1М/;фпрм/:(ЖВЭЖ) | |||||
| 20 мг/мл | Кислая фракция, 1 | 15.3 В | 24.11 | 30.66 | |
| Домгаир. фракция, Ϊ | 51.81 | 55.09 | 56.31 | ||
| Щелочная фракция, Ϊ | 32.81 | 2C.S0 | 13.03 | ||
| 100 мг/мл | .целая фракция, * | 16.66 | 24.91 | 31.64 | |
| Дожнир. фракция, % | 50.65 | 53.05 | :56.17- | ||
| Щелочная фракция, % ........... | :32.-69 | 22.04 | 12.19 | ||
| 150 мг/мл | лислая фракция, * | :17-.17: | 25.36 | 3252: | |
| Доминир. фракция, Ϊ | 50.34 | 54.06 | 57.81 | ||
| Щелочная фракция, ί | 32.49 | 2C.5S | 9.6 | ||
| 20 мг/мл | Относительная специфическая активность,: % | 100 | '103 | 94 | |
| 100 мг/мл | 89 ..... | 94 | 105 | ||
| 150 мг/мл | 91 | 99; | 108 |
Пример 17. Выбор фармацевтической композиции на основе ацетата.
Исследуемые составы.
Для скрининга стабильной фармацевтической композиции на основе 20 мМ ацетатного буферного раствора с рН 5,0 были взяты следующие вспомогательные вещества: маннитол, трегалозы дигидрат, сахароза (осмотические агенты), L-пролин (осмотический агент и стабилизатор), глицин (осмотический агент и стабилизатор), полисорбат 80 и полоксамер Р188 (солюбилизаторы). Все исследуемые растворы являются изотоническими.
- 39 046787
Исследуемые составы (на 1 мл)
| в | ш R О h R О $ | Стабилизаторы | 20 мМ.- ЙсеС pH 5.5 | |||||||
| Осмотические агенты | / Солюбилизаторы | |||||||||
| Маннитс-л | Трегалозы д/г | «в п D & й К в 70 | L-Продин | 1 | Полисорбат 80 | Полоксамер 188 | ||||
| 1 | 5 | 50 | До | 1: юг | ||||||
| 2 | 5 | 50 | 0.5 | До | 1 №1 | |||||
| 3 | 5 | 50 | 0.5 | До | 1 мл: | |||||
| 4 | 5 | 5 | 28.8 | до | 1 мп:· | |||||
| 5/ | 5 | 5 | 28.8 | 0.5 | ...... до | 1: МЛ : | ||||
| б | 5 | 5 | 28.8 | 0.5 | До | 1 мл: | ||||
| 7' | 5 | 33.5 | 7.5 | До | 1: мл | |||||
| 8 | 5 | 33.5 | 7.5 | 0.5 | до: | 1: мп/ | ||||
| 9 | 5 | 33.5 | 7.5 | 0.5 | ДО | 1: мп / | ||||
| 10 | 5 | 100 | ДО | 1 мл | ||||||
| И | 5 | 100 | 0.5 | до: | 1 мл/ | |||||
| ..... 12 | 5 | 100 | 0.5 | ДО: | 1 мл | |||||
| 13 | 5 | 1С | 28.8 | ДО· | 1: мп: | |||||
| 14 | 5 | 10 | 28.8 | 0.5 | :ДО: | 1 МП: | ||||
| 15 | 5 | 1Г | 28.8 | 0.5 | до | 1 мл: | ||||
| 16 | 5 | 67 | 7.5 | До | 1 МП: | |||||
| 17 | 5 | 5 | 7.5 | 0.5 | до | 1: мл | ||||
| 18 | 5 | 67 | 7.5 | 0.5 | До | 1 мл | ||||
| 19 | 5 | 100 | /До | 1 мл/ | ||||||
| 20 | 5 | 100 | 0.5 | До | 1 мл ’ | |||||
| 21 | 5 | 100 | 0.5 | ДО | 1' МОТ:/ | |||||
| 22 | 5 | 57 | 7.5 | До | 1: мл | |||||
| 23 | 5 | с— | 7.5 | 0.5 | ДО | 1: мл | ||||
| 24 | 5 | 67 | 7.5 | 0.5 | ДО | 1 МЛ:: |
Исследование стабильности образцов проводили методом термостресс при 50°С в течение 72 ч, шейк-тест в течение 120 ч при скорости 800 об/мин, а также однократного замораживания минус 16-20°С и размораживания при температуре +25 ± 1°С. Мутность растворов оценивали методом спектрофотометрии при 400 нм. Гомогенность образцов анализировали методом Э ВЭЖХ и электрофореза на приборе Labchip. Профиль заряженных форм образцов анализировали на приборе Labchip.
- 40 046787 гель»в
Таблица 8
| » | Состав вспомогательных веществ, МГ/МЛ< | Содержание мономера Э ВЭЕХ, % | Изменение чистоты Э ВЗЖХ, % | Слтич. плотность, 4СО нм | Отбор на анализ кислотнощелочного профиля | |||||||||
| Пролголимаб Маннитол | Трегалозы д/г | Сахароза | L-прЭЛИИ | | Глицин | | ОУ: ΟΪ X в< Ш ю от (Ж (Ж S'· R О ЕЖ | Kolliphor isа | Пейктест; 123 ч | Заморозка -13сС, разморозка +2 = сС | Термс-стресс, +503С 96 ч | Еейктест/ 12 3 ч | Заморозка -13сС, разморозка +25 сС | |||
| 1 | 5 50 | 97.71 | -1.63 | -2.48 | 0.0’49 | O.C’’S | ||||||||
| 2 | 5 50 | 0.5 | 97.66 | -С.35 | -3.19 | -1.66 | С.0749 | 0.0’51 | ||||||
| 3 | 5 50 | 0.5 | 97.54 | -С.С7 | -9.12 | -1.25 | C.C6SS | 0.0’21 | ||||||
| 4 | 5 5 | 28.8 | 97.56 | -С.СЗ | -2.19 | 0.0809 | 0.0’97 | |||||||
| 5 | 5 5 | 2S.S | 0.5 | 97.74 | -С.36 | -1.15 | -2.59 | С.О32О | 0.0804 | |||||
| б | 5 5 | 2S.S | 0.5 | 97.66 | -С.28 | -1.Ό | ' ' 0.0773 | ' 0.0'58 | ||||||
| Ж | 5 33.5 | 5 | 97.58 | -С-.С5 | -1.15 | -1.54 | 0.0745 | 0.0777 | ||||||
| 8 | 5 33.5 | 0.5 | 97.52 | -0.21 | -2.84 | -2.08 | 0.0’96 | О.С^'б | ||||||
| 9 | 5 33.5 | ' 5 | 0.5 | / 97.58 | -С.С9 | -9.44 | -1.59 | 0.0’33 | 0.0831 | |||||
| 10 | 5 | ICO | ς?63 | -С.;9. .. | . .. -2.17 . .. | 0.0744 .. | . .0.076’ .. | ж | ||||||
| И | W | luj | 0.5 | 97.60 | -0.19 | -0.48 | -?зс | 0.0778 | 0.0801 | Ж | ||||
| 12 | 5 | ICO | 0.5 | 97.52 | -0.10 | -0.22 | -3.10 | 0.0’25 | 0.0'33· | .......V· | ||||
| 13 | 5 | 10 | 2S..S | 97.48 | -С.17 | -0.38 | -1.54 | 0.C7S1 | 0.0802 | |||||
| 14 | 5 | 10 | 28.8 | 0.5 | | 97.55 | . -С.12 | . гО.,-1 . . | -1.93 | . 0.0797 . | . 0.0319 . | ||||
| 15 | Ж | 10 | 28.8 | 1 °'5 | 97.64 | -С.26 | -0.98 | -1.91 | 0.0756 | 0.0^2 | ||||
| 16 | 5 | 6’ | Ж | 1 97.71 | -0.36 | -0.45 | -С.32 | 0.0754 | 0.0765 | V | ||||
| Г | 5 | 6’ | 7.5 | 0.5 | ..... 97.57 | -0.31 | -0.45 | -0.53 | 0.3’76 | 0.СЖ5 | .......V...... | |||
| 1S | 5 | 6’ | '5 | 0.5 | 97.68 | -0.36 | -338 | 0.0’25 | 0.0’32 | 1 | ||||
| 19 | 5 | ICO | 97.56 | -С.26 | -0.34 | -0.31 | С.С’92 | 0.0819 | V | |||||
| 20 | 5 1 | ICO | 0.5 | 97.53 | -032 | -3.05 | 0.0313 | 0.0821 | V: | |||||
| 21 | 5 | ICO | °'5 | 97.50 | -С.29 | -038 | -3.34 | C.C7S3 | 0.0767 | V | ||||
| 22 | 5 | б | 5 | 97.50 | -С.27 | -035 | -0.0с | 0.0’37 | 0.08С’ | .V | ||||
| 23 | 5 | б- | .5 | 0.5 | 97.43 | -O.-SS | -0:22- | 0.0312 | V | |||||
| 24 | 5 | 63 | 7.5 | 0.5 | 97.50 | ИИ | -0Ж | -0.01 | 0.0751 | 0.0’61 | V |
- лучшей результат
- худший результат
- ехсднсй контроль или средний результат
- 41 046787
Таблица 9
Результаты кислотно-щелочного профиля образцов ._________
| ж | Состав вспомогательных веществ, иг/нй'·· | Суммарное изменение кислотно-щелочного профиля то модулю**, % | Отбор на лиофиль Н’/К сушку | |||||||||
| Пролголимаб | Маннитол | Трегалозы д/г | ίη о < а «· X Й О' | Ж· X а· к | Г лицин | 0 0 хефасситод | 83Т хсчйтттоя | Шейктест'· 120 ч | Зайорйзка -19°СГ размеров. +2 5 °C | Сермостресс, +50 °C •96 Ж· | ||
| ι: | 5 | 100 | 5.16 | 1.4S | 29 28 | V | ||||||
| и | 5 | 100 | С.5 | 5.53 | 1.52. | 33.76 | Г | |||||
| 12 | 5 | 100 | 0 5 | ИИИМш | 1.91 | 33.89' | V | |||||
| 15 | 5 | г | 7.5 | б 59 | 1.09 | 33.47 | ||||||
| 1’ | 5 | 5’ | ’.2 | 0.5 | 5.S1 | О.3 | 34.7? | |||||
| 18 | 2 | 5’ | 7.2 | ?: | - ·.: | 34.95 | ||||||
| ι; | 2 | 100 | 5.33 | 1.DS | 33.48 | V | ||||||
| •20 | 180 | 0.5 | 6.92 | 0.93 | 34.2’8 | |||||||
| 21 | •5· | 100 | 0.2 | б.З | 1.02 | 34.06 | V- | |||||
| 222·· | /5 | 6’ | 5.94 | 2.46 | 34.38 | |||||||
| 23 | 5· | -.5 | 0.5 | ддд | I.-, | 33.63 | ||||||
| /24·· | ζ” | 7.5 | 0.2 | 5+6 | 1.37 | 33.60 | V |
* Изменение рассчитывали по формуле Δ= (содержание фракции пзсле стресса — содержание фракции до стресса) ** Абсолютное изменение рассчитывали по формуле Д = | содержание кисл. фракций до стресса — содержание кисл. фракции после стресса] + [содержание щел, фракций до стресса — содержание щел. фракций поме стресса] + |содержание дзминир. фракции до стресса — содержание доминир. фракции после стресса]
- лучший результат
- худший результат
- ехсдной контроль или средний результат
В результате работы показано негативное влияние маннитола на термическую и коллоидную стабильность моноклонального антитела против PD-1 в 20 мМ ацетатном буферном растворе с рН 5,0: в ходе термостресса в течение 96 ч прирост примесей на Э ВЭЖХ составил от 0,48 до 2,59%, в ходе шейктеста в течение 120 ч все исследуемые растворы не приобрели видимой агрегации (см. результаты УФспектрофотометрии). Составы с маннитолом показали также отрицательные результаты стабильности в ходе криоконцентрирования: после одного цикла заморозки-разморозки прирост примесей на Э ВЭЖХ составил от 0,69 до 9,44%, что гораздо выше данного показателя для других составов.
Составы, содержащие L-пролин, также продемонстрировали низкую термическую стабильность по показателю чистота при исследовании методом Э ВЭЖХ: прирост примесей через 96 ч стресса составил 1,64-1,93%. После заморозки-разморозки прирост примесей составов с L-пролином не превысил среднее значение наиболее стабильных составов в группе. В ходе эксперимента не было выявлено влияния солюбилизаторов на термическую или коллоидную стабильность белка. Пролголимаб в составах с трегалозы дигидратом проявил высокую стабильность на всех стресс-воздействиях в отсутствии поверхностноактивных веществ, таких как полисорбат 80 и полоксамер 188.
Наибольшим стабилизирующим эффектом на моноклональное антитело против PD-1 в 20 мМ ацетатном буферном растворе обладают: трегалозы дигидрат, сахароза, а также их комбинации с глицином. Эти составы могут быть использованы для получения лиофильной лекарственной формы моноклональ ного антитела.
Определение стабильности перспективных составов на основе ацетата при лиофильной сушке.
Образцы, продемонстрировавшие наилучшую стабильность на предыдущем этапе скрининга, были исследованы на возможность получения лиофилизата для приготовления раствора для инфузий.
Для этого растворы, содержащие 20 мг/мл или 100 мг/мл моноклонального антитела против PD-1, разливали в стеклянные флаконы I гидролитического класса, флаконы неплотно укупоривали резиновой пробкой с прорезью. Флаконы с раствором помещали в камеру лиофильной сушки. Проводили лиофильную сушку в автоматическом режиме. Стадию заморозки проводили при температуре минус 40°С, первичную сушку проводили при давлении (0,10 ± 0,03) мбар, во время вторичной сушки температуру повышали, давление составляло (0,05 ± 0,02) мбар. После завершения процесса сушки давление сбрасывали до необходимого значения вакууму 0,76 ± 0,03 мбар, проводили укупорку флаконов резиновыми пробками и далее сбрасывали вакуум до атмосферного давления. Укупоренные флаконы передавали на дальнейшие исследования. Лиофилизированные образцы моноклонального антитела против PD-1 хранили при температуре 2-8°С.
- 42 046787
Для подтверждения стабильности белка после лиофилизации образцы восстанавливали. Содержание мономера оценивали методом Э ВЭЖХ, профиль заряженных форм анализировали на приборе Labchip. Также определяли значение рН до и после лиофилизации. Результаты представлены в табл. 8.
При лиофильной сушке отобранных составов на основе ацетата и после восстановления лиофилизатов наблюдается значительный сдвиг рН в диапазоне 0,26-0,45. Данный сдвиг является может быть обусловлен потерей ацетат-ионов в процессе сушки. Таким образом, составы на основе ацетата могут быть рекомендованы к лиофильной сушке при условии учета данного явления.
Все составы продемонстрировали высокую стабильность по чистоте на Э ВЭЖХ и профилю заряженных форм после восстановления. В ходе работы была продемонстрирована возможность лиофилизации составов № 10 и 12 с концентрацией белка 100 мг/мл.
Таблица 10
Результаты стабильности составов на основе 20-мМ ацетатного буферного раствора с рН 5,0 после лиофилизации
| » | Состав вспомогательных веществ, мг/мл | До лиоф. | После лиоф. | Δ, [абсолютное изменение) после лиофилизации | ||||||||||||||
| Пролтолимаб | S' в 1 х * | Трегалозы д/г | Сахароза | si 3 | Полисорбат Sj | Ползисаиер 1== | pH | Э ВЭЖХ | pH | Э ВЭЖХ | pH· | Э ВЭЖХ | Изменение содержания фракций, LabChip | |||||
| Чистота, ΐ | Чистота, % | ?fi; чистом, 1 | L У7.2~. фракции *, % | . дстнир | Δ щел. = фраНЦИЙ *, % | Суммарное изменение кислотно— щелочного профиля по модуля**, ?%г | ||||||||||||
| £ракции *, %;) | ||||||||||||||||||
| Концентрация белка в растворе 2С мг/мл | ||||||||||||||||||
| 10 | 2С | '00 | 4.99 | 98.91 | 5.44 | 99.05 | 1.66; | 0.90; | :-2.56 | |||||||||
| 10' | 20 | 100 | °·2 | 5.02 | 98.91 | 5.38 | 98/97 | 2.07 | -159 | -048 | ||||||||
| 11? | 20 | ::: | 0.5 | 5.00 | 98.91 | 5.35 | 98.97 | ш | -2.68 | -0.35 | ||||||||
| 1(Г | 20 | ΐϋΟ1 | 0.8 | 5.02 | 98.91 | 5.39 | 98.92 | 1-91? | ;-1.73? | -0.18 | ........о ................Ί | |||||||
| 12: | 20 | ‘.К· | 0.2 | 5.05 | 98.93 | 5.34 | 98.95 | <29| | 1.44? | )-0.42) | -1.01 | |||||||
| 12 | 20 | ΐϋο | 0.5 | 5.02 | 99.01 | 5.28 | 98.94 | -0.26 | JQ | 1.80? | -0.86; | -0.94 | ||||||
| 12,: | 20 | iOO | 0.8 | 5.01 | 99.19 | 5.43 | 98.96 | 1.91; | -1.0.2) | :-0.88 | ||||||||
| 19 | 20; | 5.00 | 99.19 | 5.37 | 98.9S | 2.37) | -1.90 | 7-047 | ||||||||||
| 21? | 20 | ::: | 0.5 | 5.01 | ВД? | 5.33 | 98.95 | 2.45 | -1.56 | -0.89 | ||||||||
| 24; | 20 | 67 | Ί.5 | 0.5 | 5.04 | 99/22? | 5 35· | 9902 | 3:09 | -2.14 | -0.95 | 618 | ||||||
| Конц | ентрация белка | в растворе 100 мг/мл | ||||||||||||||||
| 10? | 100 | 100; | 5.10 | 99.10 | 5.55 | 98.75 | -0.45 | -0.34 | 2.17; | )-1.44/ ? | -0/73/ | 4.34 | ||||||
| 12) | 100 | 100 | 0.2 | 5.06 | 99.05 | 5.41 | 98.76; | -0.35 | -0.35 | 1.04 | -1.68 | -1.36 | 4 08 |
“Изменение рассчитывали по формуле Δ= (содержание фракции после стресса - содержание фракции до стресса) ** .Абсолютнее изменение рассчитывали по формуле Д= (содержание кисл. фракций до стресса-содержание зп:сл. фракций после стресса] т [содержание щел. фракций до стресса - содержание шел. фракций после стресса] + [содержание ломинир, фракам до стресса - содержание доиинир. фракции после стресса]
- лучший?· результат·?·
- худший результат]
- входной контроль или средний результат
Получение высококонцентрированной формы и подтверждение стабильности при ускоренном хранении.
На основании результатов скрининга в жидкой и лиофильной лекарственных форм для ускоренного исследования стабильности выбраны следующие составы:____________________________
| Пр о л голима б | 20 - 150 вд/нл | Прелосликаб | 20 - 150 мг/мл |
| Натрия ацетат т/г | 1,712 мг/мл | Натрия ацетат т/г | 1,71.2 мг/мл |
| Уксусная кислота лед. | до pH 5.0 | Уксусная кислота лед. | до pH 5.0 |
| Трегалозы дагидрат | ICC мг/мл | Трегалозы дигидрат | ^0 мг/мл |
| Вода для инъевдщ | до 1 мл | Вода для инъекций | до 1 мл |
Содержание трегалозы дигидрата было снижено для выравнивания уровня осмоляльности растворов с повышенной концентрацией моноклонального антитела против PD-1 до физиологического уровня (около 300 мОсм/кг), а также снижения вязкости растворов до уровня менее 100 сР. Образцы закладывали на хранение при +37°С и анализировали методами Э ВЭЖХ, ИО ВЭЖХ и ВЭФ, а также определяли специфическую активность белка. Результаты представлены в табл. 9 и 10.
- 43 046787
Таблица 11
Результаты исследования стабильности при 37°С
| Состав | Концентрация белка: | Показатель | Входной контроль | 2<нед | 4 нед · |
| Пролголимаб· /20/ - <150 мг/мл Натрия ацетат т/т · 1.7 42 мт/мл Уксусная кислота лед. до pH 5.0 Трегалозы дигидрат 100 мг/мл | 20 мг/мп | Общий белок, мг/мл | 21.5 | /20.85 | 20.89/ |
| 100 мг/мп | 102.2 | 102.9 | 10 0.3 | ||
| 150 мг/мя | 152.1 | 150.0 | 151.6 | ||
| <2 0 <ж/мп< | pH | 5.2 | /5-.1 | 5.2 | |
| 10· 0 мг/мп | 5.3 | <5<.<3 | 5,3 | ||
| . 150 мг/мп | 5.4 | 5.4 | 5.4 | ||
| 2 0 мг/мп· | Вязкость,- сР< | 6 | - | - | |
| 100 мг/мп | 33 | - | < | ||
| 150 мг/мп· | 110 | - | - | ||
| Чистота Э ВЭЖХ | |||||
| 20 мг/мп | Содержание • агрегатов,· % | 0.34 | -0:.41: | 0.68 | |
| Содержание мономера, :% | 99.17 | 98.85 | 98.39 | ||
| 100 кг/мл | Содержание· 'агрегатов, :%·< | 0.57 | 0.99 | 1,03 | |
| Содержание- Мономера, Чз< | 99.25 | 98.64 | <97.8 8 | ||
| 15·0· мг/мп | Содержание агрегатов, %:< | 0.64 | 0.99 | 1.35 | |
| Содержание:: ...... Мономера, %<< | 99.20 | 93.08 | 97.64 | ||
| <20-: мг/мп· | ВЭФ <ж<< ред . условиях Содержание Мономера, %< | <95.45 | 94.23 | 94.01 | |
| 100 йг/мл· | /95129 | 94.60 | 94.12 | ||
| 150 мг/мл | /95.60 | 94.15 | 93.79 | ||
| 2 0 мг/мп | ВЭФ · в< < неред. условиях | 93.05 | 91.40 | 91.14 | |
| 100 мг/мл: | <93.22 | /91.05 | 90.95/ | ||
| Состав | Концентрация белка | Показатель | Входной контроль·. | 2 < нёд· | <4 нед/ |
| 150 мг/мп | •Содержание мономера, % | /93.79 | 90.87/ | 90.22 | |
| Профиль заряженных форм (ИСВЭЖХ) | |||||
| 2 0 мг/мп | Кислая:фракция, % | <15.63 | /24.15 | /29.32 | |
| Доминир·. фракция,· % | 50.81 | 55.96 | 58.03 | ||
| Щелочная фракция,: % | 33.56 | 19.89 | 12.65 | ||
| 100 мг/мл | Кислая фракция, <%' | /16.02 | 23.76 | /30.44 | |
| Доминир·. фракция,:% ' | 51.01 | 55.33 | <57.57 | ||
| Щелочная фракция, % | 32.97 | <20.91/ | 11.99 | ||
| 150 мг/мп | Кислая фракция, Ϊ | 16.31 | 24.4 8 | 33.23 | |
| Доминир . фракция ,<% | 53.99 | 54.07 | 57.51 | ||
| Щелочная фракция, % | <32.7 0 | 21.45 | <9.<26 | ||
| 2 0 мг/мп | Относительная спегртфическаж активность, % | 8 9 | 93/ | •99 | |
| 100 мг/мл | 107 | <112 | <97< | ||
| 150 мт/мй: | ..... 92 | 106 | 103 |
- 44 046787
Таблица 12
Результаты исследования стабильности при 37°С
| Состав | Концентрация белка | Показатель | Входной контроль | 2 нед | 4 нед |
| Пролголимаб 20 - 150 мг/мл Натрия ацетат т/г 1.742 мг/мл Уксусная кислота лед. до pH 5.0 Трегалозы дигидрат 80 мг/мл | 20 мг/мл | Общий белок, .мг/мл | 1-9.9 | 20.4 | 20.5 |
| 100 мг/мл | 103..5 | 102.1 | 102.0 | ||
| 150 мг/мл | 150..2 | 153.8 | 153.0 | ||
| 20 мг/мл | pH | 5.1 | 5.2 | 5.2 | |
| 100 мг/мл | 5.3 | 5.2 | 5.3 | ||
| 150 мг/мл | 5.4 | 5.4 | 5.4 | ||
| 20 мг/мл | Вязкость, cP | 5 | |||
| 100 мг/мл- | 26 | - | - | ||
| 150 мг/мл | 93 | - | - | ||
| Чистота Э ВЭЖХ | |||||
| 20 мг/мл | Содержание агрегатов, % | 0.49 | 0.79 | 0.98 | |
| Содержание мономера, % | 99.22 | 98.85 | 98.47 | ||
| 100 мг/мл | Содержание агрегатов, % | 0.52 | 1.09 | 1.23 | |
| Содержание .мономера, % | 99.04 | 98.36 | 97.72 | ||
| 150 мг/мл | Содержание агрегатов, % | 0.64 | 1.15 | 1.55 |
- 45 046787
| Содержание мснсжра, ·ΐ | /99.00 | 97.80 | 97 . 14 | ||
| 20 мг/мл | БЭФ а ред. условиях Содержание моног^ера, % | 95.47 | 94 ЮО | 94 . 16 | |
| 103 мг/мл | 95.47 | 94.81 | 93.91 | ||
| 151 мг/мл | 95.47 | 94 . 63 | 93.94 | ||
| 20 мг/мл | ВЭФ в: веред, условиях'; Содержание мономера, % | 93.20 | 91.09 | 91.14 | |
| 103 мг/мл | 93.20/ | 91.35/ | 90.16 | ||
| 150 мг/мл | 93.20 | 91.3 0 | 90.97 | ||
| Просила наряже:-:яь:х герм ΪΖ053ί·.Χ; | |||||
| 20 мг/мл | Кислая фракция, % | 1Ю0 | 23.75 | 28.29 | |
| Доминир. фракция,% | 49.37 | 54.86 | 5Ю32 | ||
| Щелочная фракция, 9 | 32.43 | 21.39 | 14.40 | ||
| 101 μγ/ι-л | Кислая фракция, % | 16.66 | 2-.. 91 | 29.30 | |
| Доминир. фракция,% | 50.65 | 53.15 | 57,31 | ||
| Щелочная фракция, % | 32.69 | 22.04 | 13.01 | ||
| 150 мг/мл | Кислая: фракция, ϊ· ' | 16.81 | 24.11 | 31.52 | |
| Доминир. фракция,% | 5 0.34 | 54 . 39 | 57.31 | ||
| Щелочная фракция, '%- | 32.3 5 | 21.8· | 10.67 | ||
| 20 мг/мл | Относительная специфическая активно со а * | 130 | 133 | 94 | |
| 101 мг/мл | 89 | 94 | 105 | ||
| 153 мг/мл | 91 | 99 | 108 |
При том, что изобретение было описано со ссылкой на предпочтительные варианты осуществления, следует понимать, что можно прибегнуть к изменениям и модификациям, как очевидно для специалистов в данной области техники. Подобные изменения и модификации следует рассматривать в рамках и объеме притязаний настоящего изобретения.
Выше были подробно описаны иллюстративные, неограничивающие примеры осуществления настоящего изобретения. Данное детальное описание приведено просто для того, чтобы ознакомить специалиста в данной области техники с дополнительными деталями практической реализации предпочтительных аспектов настоящих идей, и не ограничивает объема данного изобретения. Кроме того, каждый из дополнительных признаков и идей, раскрытых выше по тексту и ниже по тексту, могут быть использованы по отдельности или в совокупности с другими признаками или идеями.
Более того, комбинации отличительных признаков и шагов, раскрытых в нижеприведенном детальном описании, также, как и эксперементальные примеры, могут быть необязательными для практической реализации изобретения в самом широком смысле, и приведены только для того, чтобы подробно описать конкретные примеры для настоящего изобретения. Более того, отличительные признаки описанных выше конкретных примеров и независимые и зависимые пункты формулы изобретения, приведенные в данном изобретении, можно комбинировать способами, которые конкретно и непосредственно не указаны, с целью реализации дополнительных целесообразных вариантов осуществления настоящего изобретения.
Были проведены дополнительные примеры исследований с использованием различных водных фармацевтических композиций, содержащих антитело к PD-1 пролголимаб, для лечения злокачественных новобразований, таких как меланома, в том числе неоперабельная или метастатическая меланома, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения, рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого. Типовые фармацевтические композиции, используемые для данных исследований, охарактеризованы следующими составами ниже (табл. 12.1).
- 46 046787
Таблица 12.1
I. Состав на 1 мл: Пролголимаб
Натрия ацетата тригидрат Трегалозы дигидрат Кислота уксусная лед. Вода для инъекций
20.0 мг
1.742 мг
100 мг до pH 5.0 до 1 мл.
II. Состав на 1 мл: Пролголимаб Трегалозы дигидрат L-гистидин
L-гистидина гидрохлорид Вода для инъекций
20.0 мг
100 мг
0,92 мг
2.96 мг до 1 мл.
Основные сведения о клинической разработке исследуемого препарата.
Фармакокинетика, фармакодинамика, безопасность и иммуногенность BCD-100 (пролголимаб) в монотерапии при внутривенном введении изучены в клиническом исследовании фазы I с эскалацией дозы. В данном исследовании были продемонстрированы безопасность и преимущества исследуемого продукта у пациентов с распространенными формами злокачественных новообразований различных локализаций (меланома, НМРЛ) и по результатам исследования два режима введения BCD-100 выбраны для дальнейшей клинической разработки, 3 мг/кг в/в 1 раз в 3 недели и 1 мг/кг в/в 1 раз в 2 недели.
Целью исследования № BCD-100-2/MIRACULUM применения BCD-100 у пациентов с нерезектабельной или метастатической меланомой была оценка фармакокинетики, эффективности, безопасности и иммуногенности в монотерапии в двух режимах введения: 3 мг/кг в/в 1 раз в 3 недели и 1 мг/кг в/в 1 раз в 2 недели. Первичная конечная точка (ОЧО) оценивалась по результатам промежуточного анализа через 6 месяцев. BCD-100 продемонстрировал благоприятный профиль безопасности на всех дозовых режимах. Оба дозовых режима продемонстрировали эффективность около 60% КЗ и 30% ОЧО у пациентов с нерезектабельной или метастатической меланомой.
Пример 18. Применение пролголимаба (BCD-100) для терапии пациентов с распространенными формами злокачественных новообразований различных локализаций, исследование I фазы, BCD-100-1.
Дизайн исследования.
В исследовании № BCD-100-1 были изучены фармакокинетика и переносимость препарата BCD100 (пролголимаба). Исследование № BCD-100-1 (NCT03050047) являлось многоцентровым открытым исследованием I фазы у пациентов с солидными опухолями, проведенным на территории Российской Федерации. Первичной задачей исследования была оценка фармакокинетики и клинических фармакологических параметров BCD-100. Основные характеристики исследования BCD-100-1 приведены в табл. 1.
- 47 046787
Таблица 13
Характеристики, исследования BCD-100-1
| Многоцентро вое открытое несравнител мое /мультикогор: тное исследование фармакокине тических и фармакодина/ мических свойств, безопасное-: ти и ИИЙунОГеННО: сти препарата BCD-too (ЗАО БИОКАД, Россия) :(!/ •фаза): у пациентов с респросщра—Ненными формами: злОкачест^ венных Новообразо— ваний ^различных.: локализаций: BCD-100-1 Фаза I (Российская •Федерация) | ФК, ФД, переносимость, безопасност: в, -пилотная: зффекТив— НОСТЬ 1' иммуногенность Исследование фармакокине -тических, фар&икодана: мических свойств, ^безопас- но оси и иммуноген— ности препарата: BCD—100 : (пролгеитима б) при внутривеыном введении в< возрастающей дозе в ионотерапий: | 15 паиртентовс ранличным и типами неЬперйбе льных :злокачёст венных новообра·^· зовании: /б Пациентов в: когорте 1: мт/кг, 6/ пациентов· в когорте 3 мг/кг, и:: 3 пациента в: когорте 10 мг/кг | Многоцен: /тровое открытое мультико гортное исспедо вание с эскалаци ей : дозы : (фаза I) /3/месяца · | BCD-100 в дозе 0,3 мг/кг в/в каждые /2: недели, Йерез : Ф: недели (два: введения )/ эскала гдая: до до 1 мг/кг BCD-100 в дозе 1: мг/кг в/ в каждые·: 2: недели (Q2W) /в/ течение 85 дней (основ— ной. .период: исследо^ вания, 6 введений )/ BCD-100 в дозе 3 мг/кг в/в каждые /2 недели (Q2W) в течение: 85 дней | Фармакоише |
| тика: АП^ i o-CMj ,: AUCro—·. , Сщх, Тш, Тч, Kei, 01, Vd после однократнег о /применения исследуемог о :препарата; /Ciin. в хода: •б приме нений исследуемог о препарата Фармаксдина | |||||
| мика: % -занятости : рецепторов. PD-1 : препаратом BCD-103 через 4 ч -/после /первого/ введения, 336 ч после /первого: введения (но до следующей дозы} , и: перед:6—м введением^ Инмуиогенно с^ь: ^Частота обнаружения CAT, НАГ/ |
- 48 046787
| • (ОСИОЕНО «период.: исследов ания, 6 введений BCD-100 в дозе 10 мт/кг в/в :каждрле 2 недели -(121/- в течение В5 дней (-OCH0EH0·· й период исследов·: ания, € -введений': J..... | Безопасности ь: Частота возникнавенияи тяжесть связанных с. приемам :иссиедуемог о :препарата.:: нежелательн ых явлений (НЯ) на основании оцеию4 Комиссии помониторингу данных и безопасност и Эффективное ть : :Пилотная оценка протиЕоспух олёвой активности BCD-100 по результата» КТ(критерии RECIST 1.1 и irRC) |
Первому пациенту назначалась стартовая доза препарата BCD-100 - 0,3 мг/кг каждые две недели. В случае отсутствия явлений дозолимитирующей токсичности в течение 4-х недель, пациенту проводилось увеличение дозы до 1 мг/кг раз в две недели. После первого пациента исследование продолжалось по классическому дизайну с эскалацией дозы 3+3, т.е. при отсутствии ДЛТ каждые 4 недели в исследование последовательно включалась когорта из 3-х пациентов на следующем дозовом уровне. На каждом дозовом уровне BCD-100 назначался на 85 дней (около 3 месяцев) либо до появления признаков ДЛТ или прогрессирования заболевания.
Если явления ДЛТ на текущем дозовом уровне отмечались у одного пациента, следующая когорта из трёх пациентов получала препарат на этом же уровне, то есть всего шесть пациентов начинало получать данную дозу BCD-100. Если явления ДЛТ отмечались у двух и более пациентов на одном уровне дозы, набор дозы и назначение препарата новым пациентам прекращались.
Длительность последующего наблюдения за пациентами после терапии препаратом BCD-100 составляла 126 дней. На протяжении этого периода производился мониторинг нежелательных явлений, медицинские осмотры, осуществлялись анализы крови (1 раз в 2 недели - первые 28 дней, далее 1 раз в 28 дней).
Результаты исследования.
Сводная информация о характеристиках популяции пациентов.
В исследование были включены 15 пациентов с распространенными формами злокачественных солидных новообразовании различных локализации (меланома, включая меланому хориоидеи, НМРЛ, почечно-клеточный рак, мезотелиома), в возрасте 18 лет и старше, обоих полов. Для включения в исследование пациенты должны были соответствовать 0-2 баллам по шкале ECOG и иметь как минимум один измеряемый целевой очаг согласно RECIST 1.1 (не считая костных метастазов). Описание характеристик заболевания у пациентов и распределение пациентов представлено в табл. 14, 15.
- 49 046787
Таблица 14
Характеристики заболевания в популяции пациентов (исследование BCD-100-1)
| Показатель | Все пациенты | BCD-100 1 мг/кг | BCD-100 3 мг/кг | BCD-100 10 мг/кг | Значение P | ||||
| (п = 15) | (n = 6) | (n = 6) | (n = 3) | ||||||
| п | % | n | 6 | π | % | n | |||
| ЗЗиагнсв | |||||||||
| Меланома | 9 | 60,00 | '4/ | 66,67 | 3 | 5C | 2 | 66, 67 | |
| НМРЛ | 4· | 26, 67 | /;i; | 16, 67 | 2 | 33,33 | Л;; | S3,33 | ;;1: |
| Почечноилеточный рак | 1 | 6, 67 | 0 | 0 | 1; | 16,67 | 07 | 0, 03 | 71; |
| Ыез о те:пи ока | 1 | 6,67 | Έ | /16,-6 7 | 0 | : | 3 | :,73 | /1; |
| •Стадия | |||||||||
| III | 1 | 2 8, 6 | 72; | S3, 33 | 1 | 16, 87 | 1 | 33,33 | ;/i; |
| IV | 11 | ”3,33 | /4/ | 68,67 | : | 8 3,33 | ?2·· | 66,67 | ;;;1; .......... |
| ..редыдудее лечение | |||||||||
| Х^зуррия- | 10 | 66,67 | 74; | 66/67 | /4/ | 66,67 | 2 | 66,67 | 71; |
| Лучевая терапия | 2 | 13,33 | ;;1; | 16, 67 | /1/ | 16,67 | 0 | 3,7 3 | ;/i; |
| Иная терапии2 | ΐ | 4 8, 67 | ;;3·; | EC, 3-C | /2/ | 33,33 | ;27 | 86, 87 | 3,6-4 |
| Химиотерапия неоперабельного состояния | 10 | 88, 6 | 5 | 83,33 | /3- | SC, 7-3 | 2 | 66, 67 | 3, 775 |
| Одна линия | 6 | 4C, jC | /2/ | S3, S3 | 2/ | 33,33 | 2 | 66,67 | 3 , 6 4 C |
| Пае или более •ЛИНИИ | 4 | 2 6, 67 | 73; | EC, 3-C | 71·; | 16, 67 | 0 | 0 | 3, 44C |
| Длительность заболевания । | [нес) ....... | ||||||||
| Преснее значение | 26 r 31 | 28, 13 | 2C, 83 | 38,38 | 1,683 | ||||
| Медиана | 17,07 | 11, EC | 8,2 3 | 2C, 13 | |||||
| Минимум | -, ? | 2fj7 | , 6 7 | 17,07 | |||||
| Максимум | 31,2C | ”2,77 | 91,2 c | ^7,93 | |||||
| СЗ | 31,31 | 2 3,28 | 85,21 | 34,2 3 | |||||
| Примечание: ....... - сравнение воен когорт производилось о помотан двустороннего точного критерия Фидера 2 пол ’’иной терапией” подразумевается использование таких средств, как интерферон, препараты направленного действия, противораковые вакцины |
- 50 046787
Таблица 15
Распределение пациентов (исследование BCD-100-1)
| Пациент | Когорта | Доза BCD-100 (мг/кг) | Кол-во введений | Дальнейшее участие |
| 1?-: 1 | 0,3-1 | 6 | В соответствии с протоколом | |
| 08-02 | 1 | 1 | 6 | Б соответствии с .протоколом |
| 10-03 | 1 | 1 | 5 | Выбыл по причине процессирования заболевания |
| 08-04 | 1 | 1 | 6 | В соответствии с протоколом |
| 12-05 | 1 | 1 | 5 | Выбыл по причине прогрессирования заболевания |
| 12-06 | 1 | 1 | 6 | В соответствии с .протоколом |
| 12-07 | 2 | 3 | 6 | В соответствии с протоколом |
| 12-08 | 2 | 3 | 6 | В соответствии с протоколом |
| 13-09 | 2 | 3 | 6 | В соответствии с протоколом |
| 13-10 | 2 | 3 | 3 | Выбыл по причине по причине СНЯ |
| 13-11 | 2 | 3 | 6 | В соответствии с протоколом |
| 01-12 | 2 | 3 | € | В соответствии с протоколом |
| 13-13 | 3 | 10 | 6 | В соответствии с протоколом |
| 13-14 | 3 | 10 | 6 | В соответствии с протоколом |
| 08-15 | 3 | 10 | 5 | Выбыл по причине прогрессирования заболевания |
В итоговый анализ были включены данные 15 пациентов (6 пациентов из когорты BCD-100 1 мг/кг, включая 1 пациента после эскалации дозы, 6 пациентов из когорты BCD-100 3 мг/кг и 3 пациента из когорты BCD-100 10 мг/кг). Все пациенты получили терапию в рамках основного этапа исследования (85 дней).
Все когорты пациентов были сбалансированы по основным демографическим характеристикам. Распределение всех пациентов по половой принадлежности было равномерным: женщины - 53,33% (8 пациентов), мужчины - 46,67% (7 пациентов). Медиана возраста пациентов составила 56 лет (минимум 35 лет, максимум - 77 лет).
По характеристикам основного заболевания в популяции преобладали пациенты с меланомой (9/15 пациентов). Популяция также включала 4 пациентов с НМРЛ, 1 пациента с мезотелиомой плевры и 1 больного почечно-клеточным раком. Длительность заболевания на момент скрининга во всей популяции составила (медиана) 17,07 месяцев, минимум - 0,6 месяца, максимум - 91,2 месяца.
Сводная информация о клинической безопасности, полученная в ходе I фазы исследования.
Безопасность была исследована на популяции, в которую были включены все пациенты, получившие как минимум одну дозу исследуемого препарата (n=15). У каждого из 15 пациентов были отмечены НЯ и/или СНЯ, общее число явлений составило 247. Статистический анализ не выявил различий между когортами по количеству НЯ (р=0,567, критерий Краскела - Уоллиса). Сводная табл. 16 с данными по безопасности препарата приведена ниже.
НЯ, соответствующие 3-й степени тяжести по шкале СТСАЕ 4,03, были отмечены у 40,00% (6 из 15) пациентов - у двух пациентов в каждой когорте. У 4 из 6 данных пациентов НЯ со степенью тяжести 3 и выше были сочтены исследователем связанными с терапией: у пациента, получавшего BCD-100 в дозировке 1 мг/кг, у пациента, получавшего
BCD-100 в дозировке 3 мг/кг, и у двух пациентов, получавших BCD-100 в дозировке 10 мг/кг. Многие из этих нежелательных явлений носили гематологический характер.
СНЯ были отмечены у трех пациентов, получавших BCD-100 в дозировке 1 мг/кг, и у одного пациента, получавшего 3 мг/кг BCD-100.
В ходе исследования был выявлен один случай дозолимитирующей токсичности (ДЛТ). У пациента 13-09, получившего две дозы BCD-100 в дозировке 3 мг/кг, нарушился гормональный фон (снизился ТТГ) и развился аутоиммунный тиреоидит (иммуноопосредованное нежелательное явление 2-й степени тяжести по критериям СТСАЕ 4.03). Комиссия по мониторингу данных и безопасности сочла данный случай явлением ДЛТ. Пациент 13-09 продолжил получать исследуемую терапию, течение его заболевания было охарактеризовано как стабильное по критериям RECIST 1.1 и irRC.
Помимо аутоиммунного тиреоидита, иммуноопосредованные НЯ были отмечены у 33,33% (5 из 15) пациентов: у 33,33% (2 из 6) пациентов, получавших 1 мг/кг BCD-100, у 50,00% (3 из 6) пациентов, получавших 3 мг/кг BCD-100, но ни у одного из пациентов, получавших 10 мг/кг BCD-100. Все эти НЯ были явлениями 1-й степени тяжести по шкале СТСАЕ 4.03, и не были сочтены явлениями ДЛТ.
НЯ/СНЯ привели к временному прекращению исследуемой терапии у трех пациентов: у 16,67% (1 из 6) пациентов, получавших 1 мг/кг BCD-100 и у 33,33% (2 из 6) пациентов, получавших 3 мг/кг BCD100. Все НЯ, из-за которых была временно прекращена терапия, носили иммунный характер (гипертире
- 51 046787 оз 1-й степени тяжести у пациента 10-03, получавшего 1 мг/кг BCD-100; аутоиммунный тиреоидит 1-й степени тяжести у пациента 13-10, и аутоиммунный тиреоидит 2-й степени тяжести у пациента 13-09 оба пациента получали 3 мг/кг BCD-100). Получение исследуемой терапии пациентом 10-03 было приостановлено. Пациентам 13-09 и 13-10 были назначены глюкокортикоиды по поводу заболевания, после чего исследуемая терапия была возобновлена. Ни один из перерывов в терапии не превысил норм (2-4 недели), установленных в протоколе исследования.
У трех пациентов исследуемый препарат был отменен из-за прогрессирования заболевания (у двух из них - после 5 введений в дозировке 1 мг/кг и у одного - после 5 введений в дозировке 10 мг/кг). Причиной отмены во всех случаях было прогрессирование заболевания, а не прием BCD-100.
СНЯ привело к отмене терапии, а затем к смерти одного из испытуемых.
У пациента 13-10, перенесшего три введения препарата в дозировке 3 мг/кг, произошло кровоизлияние 5-й степени тяжести в правом полушарии. Исследователь счел, что данное НЯ было, вероятно, связано с исследуемой терапией.
Не было отмечено различий между группами пациентов в плане изменения лабораторных и физиологических параметров с течением времени. Хотя анализ данных параметров и выявил изолированные примеры статистически значимых различий, было сочтено, что эти различия отражают естественную вариабельность в рамках нормы. Отклонения, обнаруженные по результатам биохимического анализа крови и анализа крови на свертываемость (повышение уровней трансаминаз, билирубина, отклонения в показателях свертываемости крови и т.п.) в большинстве случаев были типичны для исследуемой популяции (пациентов с неоперабельными новообразованиями), ожидаемыми, и преходящими; нормализация параметров прошла без последствий, дополнительной терапии не потребовалось.
Описанные результаты демонстрируют благоприятный профиль безопасности препарата BCD-100 в любой из изученных дозировок при внутривенном применении.
Таблица 16
Данные по безопасности (исследование BCD-100-1)
| Доля пациентов | Все пациенты (а = 15) | Когорты | ||
| BCD-100, 1 мг/кг (п = 6) | BCD-100 , 3 мг/кг (п = 6) | BCD-100, 10 мг/кг (п = 3) | ||
| Любое НЯ | 15 (100%) | 6 (100%) | 6 (100%) | 3 (100%) |
| - связанное с терапией | 11 (73%) | 4 (671) | 5 (83%) | 2 (671) |
| НЯ 3-5 степени | 6 (401) | 2 (33%) | 2 (33%) | 2 (671) |
| - связанное с терапией | 4 (271) | 1 (17%) | 1 (17%) | 2 (67%) |
| сня | 3 (201) | 2 (33%) | 1 (17%) | 0 (0%) |
| - связанное с терапией | 1 (7%) | 0 (0%) | 1 (171) | 0 (0%) |
| Дозолимитиружщая токсичность | 1 (7%) | 0 (01) | 1 (17%) | 0 (0%) |
| Иммуноопосредованные НЯ | 5 (33%) | 2 (33%) | 3 (50%) | 0 (0%) |
| Досрочное выбывание из-за Ж | 1(7%·) | 0 (0%) | 1 (17%) | 0 (0%) |
| Цикл терапии отложен изза НЯ | 3 (251) | 1 (171) | 2 (33%) | 0 (0%) |
| Иммуногенность (появление антител к препарату) | 0 (0%) | 0 (0%) | 0 (0%) | 0 (0%) |
Иммуногенность.
Оценка иммуногенности производилась во время скрининга, на 28-й день исследуемой терапии, по завершению основного периода (на 85-й день), а среди пациентов, продолжавших получать терапию препаратом BCD-100, также и каждые 42 дня после этого. Оценка иммуногенности осуществлялась в два этапа: на первом этапе производился скрининг на содержание связывающих антител к препарату (CAT) в образцах сыворотки пациентов, на втором - скрининг образцов с положительным титром CAT на содержание нейтрализующих антител (HAT).
В анализ иммуногенности были включены все пациенты, образцы сыворотки которых были доступны для анализа на момент скрининга и в последующие дни анализов (n=15). Не было обнаружено ни одного образца, содержащего CAT. Ввиду отсутствия образцов с CAT анализ на содержание HAT не осуществлялся.
Сводная информация по фармакокинетике и метаболизму, полученная в ходе I фазы исследования.
- 52 046787
В анализ фармакокинетики (ФК) включены данные пациентов, у которых не было пропущено/утеряно/испорчено более 3-х образцов сыворотки крови для определения концентрации BCD-100 после первого введения препарата (n=15).
Исследование фармакокинетики (как после первого введения препарата, так и на протяжении всех введений) проводилось по следующим группам: у первого пациента (доза BCD-100 0,3 мг/кг) (n=1); в первой когорте пациентов (доза BCD-100 1 мг/кг) (n=5); во второй когорте пациентов (доза BCD-100 3 мг/кг) (n=6); в третьей когорте пациентов (доза BCD-100 10 мг/кг) (n=3).
В фармакокинетический анализ входила оценка стандартных ФК характеристик распределения и выведения исследуемого препарата после неоднократного внутривенного введения. Результаты анализа представлены в табл. 17.
Образцы крови для анализа фармакокинетики (содержания BCD-100 в сыворотке) собирались у всех пациентов, включенных в исследование, на каждом дозовом уровне. Использовались следующие временные точки забора образцов: до первого введения препарата; через 30 мин, 2 ч (±15 мин), 4 ч (±15 мин), 6 ч (±15 мин), 24 ч (±1 ч), 48 ч (±2 ч), 192 ч (±8 ч), и 336 ч (±8 ч) после первого введения препарата (перед вторым введением), и перед каждым последующим введением препарата раз в две недели. Забор образцов крови для анализа концентрации BCD-100 в сыворотке производился одновременно с забором образцов для анализа иммуногенности (для того, чтобы оценить возможное воздействие антител к препарату на фармакокинетические показатели BCD-100). Концентрация BCD-100 в сыворотке крови определялась с помощью валидированной методики ИФА.
Таблица 17
Фармакокинетические параметры (исследование BCD-100-1)
| Среднее (медиана [нижняя квартиль ; верхняя квартиль]) | 1 мг/кг (п=5) | 3 мг/кг (п=6) | 1С мг/кг (п=3) | Значение р1 |
| С-ах (МКГ МЛ; | 17,36 ¢13,9 [13,1; 15,4]) | 50,65 (49,4 [17,4; 74,7]) | 110,467 (93,100 [85,80; 152,50]) | 0,0103 |
| Тезх (ч) | 8,1(6 [4; б]) | 12,333 (6 [4: б]) | 0,5 | |
| АКС(О-336 ч) С(мкг/мл)>'ч) | 1934,815 (2201,575 [1576,75; 2360,925]) | 8972,413 ¢8482,938 [3397,3; 14254,5]) | 12927,308 (13441,075 [7382,850; 17958,000]) | 0,0088 |
| AUC(0-=) ((мкг/мл) *ч) | 3664,334 ¢3491,898 [2348,363; 3510,258]) | 18071,061 ¢15978,296 [14630,459; 21616,064]) | 27943,841 (27373,114 [11989,993; 44468,417]) | 0,0123 |
| Т1 2(ч) | 305,511 (288,811 [248,440; 319,423]) | 470,936 ¢447,192 [305,351; 597,541]) | 315,015 (336,479 [247,553; 361,014]) | 1 |
| Сщф (мкг/мл) | 3,260 (2,600 [1,800; 3,600]) | 15,817 ¢14,100 [10,300; 21,800]) | 30,833 ¢28,700 [12,900; 50,900]) | |
| 1 Критерий Краскела - Уоллиса |
Измерение всех параметров происходило после единичного введения препарата, за исключением показателя Cmin, который рассчитывался для 6 введений препарата (12 недель).
Статистически значимые отличия между тремя когортами, получавшими разные дозы, были отмечены для показателя AUC(0-336 ч) (р=0,0088, критерий Краскела -Уоллиса); AUMC(0-336 ч)) (р=0,0088, критерий Краскела - Уоллиса); AUC(0l-/., (p=0,0123, критерий Краскела - Уоллиса); Cmax (р=0,0103, критерий Краскела - Уоллиса). На дозах 3 мг/кг и 10 мг/кг были отмечены более благоприятные профили фармакокинетики по сравнению с дозой 1 мг/кг; однако при этом показатели ФК, эффективности и безопасности оказались не связаны с дозировкой.
Профили концентрации препарата BCD-100 в период с первого введения до 10-й недели во всех дозовых когортах (когорта 1 мг/кг [n=5], когорта 3 мг/кг [n=6] и когорта 10 мг/кг [n=3]) показаны на фиг. 1 и 2.
- 53 046787
Расчет параметров ФК показал, что концентрация BCD-100 изменяется прямо пропорционально введенной дозе, достигая пика между 30 мин и 6 ч после введения и постепенно снижаясь после этого. Не было обнаружено зависимости между периодом полувыведения и количеством введенного препарата. Значение показателя T1/2 оказалось типичным для моноклональных антител (12-18 дней).
Сводная информация о фармакодинамике, полученная в ходе I фазы исследования.
В анализ фармакодинамики были включены все пациенты, образцы сыворотки которых были доступны для анализа на момент скрининга и в последующие дни анализов (n=15).
Исследование фармакодинамики проводилось по следующим группам:
у первого пациента (доза BCD-100 0,3 мг/кг) (n=1);
в первой когорте пациентов (доза BCD-100 1 мг/кг) (n=5);
во второй когорте пациентов (доза BCD-100 3 мг/кг) (n=6);
в третьей когорте пациентов (доза BCD-100 10 мг/кг) (n=3).
Показатель насыщенности рецептора PD-1 препаратом BCD-100 помогает оценить взаимодействие исследуемого препарата с его мишенью и является наиболее важным фармакодинамическим маркером активности моноклонального антитела к PD-1, поскольку блокада рецептора PD-1 инициирует антиопухолевый иммунный ответ. Забор крови для оценки фармакодинамики (% насыщенности рецептора PD-1 препаратом BCD-100) производился у всех пациентов. Забор образцов для оценки ФД осуществлялся до введения препарата, через 4 ч и 336 ч после введения (но до второго введения), и перед шестым введени ем препарата.
Результаты демонстрируют высокую насыщенность рецептора PD-1 препаратом BCD-100 (от 95 до 100%) на всех дозовых уровнях и во всех популяциях клеток (табл. 18).
Таблица 18
Насыщенность рецептора PD-1 (исследование BCD-100-1)
| Когорта | Показатель | CD4- | CD8+ | О | CD4+ HLA-DR- | CDS- HLA-DR- | р: | ||||||||||
| Визит 1 | Визит 5 | Визит 1.0 | Визит 1 | Визит 5 | Визит 10 | Визит И11||| | Визит 5 | Визит 10 | Визит 1 | Визит | Визит 10 | ||||||
| Среднее | 95,60 | 95,64 | 91,65 | 96,42 | 95,55 | 94,.65 | 97,83 | 98,17 | 96,86 | 97,19 | 97,43 | 97,01 | |||||
| Медиана | 95,21 | 97,72 | 95,44 | 96,62 | 98,35 | 97,08 | 98,45 | 99,10 | 99,15 | 97,17 | 98,81 | 97,89 | |||||
| Когор- | Минимум Максимум | 89,89 | 86,24 | 83,41 | 89,48 100,0 | 83,09 100,0 | 88,13 | 94,00 100,0 | 94,87 100,0 | 91,42 | 93,70 100,0 | 90,71 100,0 | 93,15 | ||||
| 111 BCD10U 1 мг/кг (п = 5) | Н^вартиль В квартиль | 99,36 9-,32 | 99,03 97,01 | 96,10 83,41 | |Э,71 65 | 0 96,23 | 0 97,81 | 98,75 88,13 | 0,71 65 | 0 97,83 | 0 97,58 | 100,00 91,42 | 0,71 65 | 0 95,24 | 0 98,14 | 100,00 93,15 | 0,71 65 |
| 99,21 | 98,20 | 96,10 | 99,75 | 98,50 | 98,75 | 98,86 | 99,31 | 100,00 | 99,85 | 99,51 | 100,00 | ||||||
| СО | 3,92 | 531 | 7,14 | 4,25 | 7,01 | 5,71 | 2,28 | 2,05 | 4,73 | 2,78 | 3,82 | 3,51 | |||||
| кв,% | -ио | 5 Я 5 | 7,80 | 4,41 | 7,34 | 6,03 | 2,33 | 2,09 | 4,88 | 2,86 | 3,93 | 3,62 | |||||
| Среднее | 98,14 | 96,24 | 99,19 | 99,48 | 95=72 | 99,58 | 97,46 | 99,04 | 99,24 | 98,75 | 97,88 | 99,05 | |||||
| Медиана | 99.94 | 95,84 | 100,00 | 100,0 0 | 96,27 | 100,00 | 100,0 0 | 99,53 | 99,54 | 100,0 0 | 98,63 | 99,90 | |||||
| Когор- | Минимум | 93,84 | 92,83 | 96,29 | 97.39 | 90,80 | 98,08 | 87,30 | 97,26 | 98,00 | 95,31 | 91,75 | 95,95 | ||||
| та | Максиму | 100,0 | 100,0 | 100,0 | 100,0 | 100,0 | 100,0 | ||||||||||
| BCD- | м | 0 | 99,99 | 100,00 | 0,06 | 0 | 98,26 | 100,00 | 0,01 | 0 | 0 | 99,95 | 0,51 | 0 | 0 | 100,00 | 0,93 |
| 100 | Нквартиль | 95 | 100,0 | 47 | 100,0 | 34 | 55 | ||||||||||
| 3 мг/кг | 96,93 | 93,85 | 99,65 | 0 | 94,52 | 99,83 | 0 | 97,93 | 98,88 | 98,43 | 98,25 | 99,40 | |||||
| (11=6) | Вквартиль | 100,0 | 100,0 | 1000 | 100,0 | 100,0 | 100,0 | ||||||||||
| 99,08 | 100,00 | 98,18 | 100,00 | 0 | 99,84 | 0 | 100,00 | ||||||||||
| СО | 2Д4 | 2,95 | 1,63 | 1,17 | 2,81 | 0,84 | 5,68 | 1,16 | 0,81 | 2,04 | 3,10 | 1,75 | |||||
| кв,% | 2,80 | 3,07 | 1,64 | 1,17 | 2,94 | 0,85 | 5,83 | 1=17 | 0,82 | 2,06 | 3,17 | 1,77 | |||||
| Среднее | 97,00 | 98,61 | 98,71 | 96,86 | 100,0 0 | 97,82 | 98,89 | 98,72 | 100,00 | 99,37 | 100,0 0 | 100,00 | |||||
| Когор та BCD100 10 мг.'кг (п = 3) | Медиана | 97,45 | 99,25 | 98,71 | 98,06 | 100,0 0 | 97,82 | 98,82 | 99,02 | 100,00 | 100,0 0 | 100,0 0 | 100,00 | ||||
| Минимум | 93,66 | 96,58 | 97,41 | 92,58 | 100,0 0 | 95,64 | 98,13 | 97,13 | 100,00 | 98,10 | 100,0 0 | 100,00 | |||||
| Максиму м | 99=S9 | 100,0 0 | 100,00 | 0,60 65 | 99,94 | 100,0 0 | 100,00 | 0,15 61 | 99,66 | 100,0 0 | 100,00 | 0,36 79 | 100,0 0 | 100,0 0 | 100,00 | - | |
| Н. квартиль | 93,66 | 96,58 | 97,41 | 92,58 | 100,0 0 | 95,64 | 98,18 | 97,13 | 100,00 | 98,10 | 100,0 0 | 100,00 | |||||
| В. | 100,0 | 100,0 | 100,0 | 100,0 | 100,0 | ||||||||||||
| квартиль | 99,89 | 0 | 100,00 | 99,94 | 0 | 100,00 | 99,66 | 0 | 100,00 | 0 | 0 | 100,00 | |||||
| СО | 3,14 | 1=80 | 1,83 | 3,82 | 0,00 | 3=08 | 0,74 | 1=46 | 0,00 | 1,10 | 0,00 | 0,00 | |||||
| 3,24 | 1,82 | 1,86 | 3,95 | 0,00 | 3=15 | 0,75 | 1,48 | 0,00 | 1,10 | 0,00 | 0,00 | ||||||
| p-value1 | 0,323 6 | 0,416 | 0,047 | 0,108 3 | 0,032 | 0,1589 | 0,318 5 | 0,654 7 | 0,1804 | 0,264 8 | 0.140 7 | 0,3018 |
- 54 046787
Сводная информация о клинической эффективности, полученная в ходе I фазы исследования.
В популяцию для оценки эффективности было включено 14 из 15 пациентов, получавших BCD-100. Терапия одного из пациентов была прекращена из-за СНЯ (смерть); к моменту смерти пациента оценка ответа опухоли на терапию с помощью КТ не была проведена.
Определение общей частоты ответов (частота частичного ответа + частота полного ответа) и контроля заболевания (стабильное заболевание + частичный ответ + полный ответ) производилось через 85 дней терапии препаратом BCD-100. Оценка эффективности, производившаяся через 85 дней терапии препаратом BCD-100, была основана на анализе результатов КТ-сканирования. Ответ опухоли оценивался по критериям RECIST 1.1 и Immune-Related RECIST (irRECIST).
Согласно критериям irRECIST, которые были разработаны с учетом иммунотерапии, контроль заболевания был достигнут у 28,57% (4 из 14) пациентов. Общая частота ответа составила 7,14% (1 из 14). Не было обнаружено значимых различий по частоте ответа между разными когортами пациентов (табл. 19).
Таблица 19
Опухолевый ответ (исследование BCD-100-1)
| Пациент | Доза BCD100 Ь£Г/КГ | Диагноз | Мутации | Ответ по RECIST 1,1 | □твег по irRECIST | Терапия BCD- 103 |
| 10-01 | о5з^1 | Метастатическая меланома | BRAF V600E - | о^ет | Частичный ответ (пЧО) | Продолжалась 9 месяцев (подтвержден ЧО после б и: 9 мес) |
| 08-02 | 1 | Местнораспрсст раненный НМРЛ | Не тестврова. лея: на EGFR.H ALK | Прогрессия заболевания | Стабилизация забсхиевашш (1гСЗ) | Продолжалась 8 месяцев (подтверждено СЗ после б мес) |
| 10-Ю | 1 | Межжжш ышясша | BRAF V600E - | Прогрессия заболевай» | Прогрессия safciesm: (ЙПЗ) | Прекращена |
| 08-04 | 1 | Метастатическая мезотелиома шири | Прогрессия заболевания | Стабижтацня заболевания (нСЗ) | Прекращена (нз-sa жлинич. симптомов) | |
| 12-05 | 1 | Нерезеиаб^етиа а меланом | BRAF V600E - | Прогрессия заболевания | Прогрессия заболевания (пПЗ) | Прекращена |
| 12-06 | 1 | йжитикш МШЯИ1 | BRAF V600E + | Прогрессия заболевания | Прогрессия заболевания (ИВ) | Прекращена |
| 12-07 | 3 | Метастатический НМРЛ | EGFR+ | Прогрессия заболевания | Прогрессия забивеаатя (ИВ) | Прекращена |
- 55 046787
| ф-08 | 3 | МетэстатичеЕЕИй НМРЛ | EGFR+, тест ALK не проводи! ся | Прогрессия заболевания | Прогрессия заболевания (ЙПЗ) | Прекращена |
| 13-09 | 3 | Метастатическая меланома | IMF- | Стабилизация заболевания | Стабилжация заболевания (пСЗ) | Продолжалась 2 месяца (лимфаденэкто мия) |
| 13-11 | 3 | Нерезеяабемна. я меланома | IMF- | Прогрессия заболевания | Прогрессия заболевания (1гПЗ) | Прекращена |
| 01-12 | 3 | Метастатический почечно- клеточный рак | Прогрессия заболеваим | Прогрессия заболевания (ШЗ) | Прекращена | |
| 13-13 | 10 | Метастатический НМРЛ | EGFR.-, ALK- | Стабилшадш заболевания | Стабилизация заболевании (цСЗ) | Продолжалась 1 мес |
| 13-14 | 10 | Метастатическая меланома | IMF- | Прогрессия заболевания | Прогрессия заболевания (иПЗ) | Прекращена |
| 08-15 | 10 | Метастатическая меланома | IMF- | Прогрессия заболевания | Прогрессия заболевания (1тПЗ) | Прекращена |
Вывод.
Проведенный анализ полученных данных наглядно демонстрирует благоприятный профиль безопасности препарата BCD-100 при его использовании в широком диапазоне доз от 0,03 до 10,0 мг/кг. Для дальнейшего клинического изучения представляется оптимальным выбор 2-х режимов введения препарата BCD-100: 1 мг/кг 1 раз в 2 недели и 3 мг/кг раз в 3 недели.
Пример 19. Применение пролголимаба (BCD-100) для терапии пациентов с нерезектабельной/метастатической меланомой, исследование II фазы, BCD-100-2/MIRACULUM.
Дизайн исследования.
Исследование № BCD-100-2/MIRACULUM (MIRACULUM, NCT03269565) - многоцентровое открытое рандомизированное исследование фармакокинетики, эффективности, безопасности и иммуногенности препарата BCD-100 (пролголимаб) в качестве монотерапии у пациентов с нерезектабельной/метастатической меланомой, ранее не получавших либо получавших лечение. Сравнение осуществлялось между препаратом BCD-100, вводимым внутривенно в дозе 3 мг/кг раз в три недели, и BCD-100, вводимым внутривенно в дозе 1 мг/кг раз в две недели. Исследование в настоящий момент продолжается в Российской Федерации и Белоруссии. Были получены и проанализированы данные за 1 год терапии.
Оценка каждого параметра эффективности проводилась в отдельности для каждой группы. Первичной конечной точкой для оценки эффективности являлась общая частота ответа (частота достижения частичного ответа + полного ответа) по irRECIST у участников исследования на фоне терапии препаратом BCD-100. К расчету ОЧО (общей частоты ответа) и контроля над заболеванием принимался лучший ответ на терапию за вышеуказанный период. Вторичными конечными точками для оценки эффективности являлись беспрогрессивная и общая выживаемость пациентов через 12 месяцев от начала терапии, частота достижения контроля над заболеванием (частота достижения стабилизации + частичного ответа + полного ответа), время достижения ответа на терапию, длительность ответа на терапию (фиг. 3, табл. 20).
- 56 046787
Таблица 20
Характеристики исследования BCD-100-2/MIRACULUM (NCT03269565)
| Название Код исследования: (оц>ана) | Цели исследования | Пациен ты | Дизайн / длительность | Терапия | Конечные точки |
| Международное | ФК, безопасность, | 126 | Рандомизированное, | BCD-100, | Первичные |
| многоцентровое | эффективность и | пациен | открытое | внутри- | (ФК): |
| открытое | иммуногенность | тов с | международное | венног | AUCo-t, |
| рандомизирован- | мелано | многоцентровое | 1 мг/кг | Cliaxj Тиа*, | |
| ное исследование | Исследовать | мой | клиническое | раз в | Т TZ J-Нг ЛйХг |
| эффективности, | эффективность, | (п=63 | исследование у | две | Cl, и т.д. |
| фармакокинетичес | фармакокинетику, | В | субъектов с | недели | после |
| КИК свойств, | безопасность и | каждой | нерезектабельной/мета | многократ- | |
| безопасности и | иммуногенность | из | статической меланомой | BCD-100, | нога |
| иммуногенности | двух дозовых | групп) | внутри- | внутривен- | |
| препарата BCD- | режимов | Основной период: 52 | венно, | нога | |
| 100 (ЗАО | применения BCD- | недели; последующее | 3 мг/кг | введения с | |
| «БИОКАД», | 100 (ЗАО | наблюдение: 12 недель | раз в | испальзова | |
| Россия) в ионотерапии у пациентов с нерез ектабел ьной или метастатической меланомой BCD-1002/HIRACULUM (НСТ03269565) Фаза III (Российская Федерация, Республика Беларусь] | «БЖКАД»Т Россия) в качестве монотерапии у пациентов с нерезектабельной/ метастатической меланомой. | (всего 64 недели) | три недели | нием двух дозовых режимов Иммуногенность: Частота обнаружения САГ, ΗΆΤ после многократного в/в введения препарата с использова нием двух дозовых режимов |
Результаты исследования.
Сводная информация о характеристиках популяции пациентов.
В исследование был включен 131 пациент в возрасте от 18 лет. Популяция пациентов включала как мужчин, так и женщин, страдавших распространенной меланомой, в том числе меланомой хориоидеи. Данная популяция включала пациентов, которые заняли место тех, кто выбыл до первого введения BCD100 либо вследствие серьезных отклонений от Протокола. Образованная в итоге модифицированная ITTпопуляция, состоящая из пациентов, получивших хотя бы одну дозу BCD-100, насчитывала 126 пациентов. Для включения в исследование пациенты должны были соответствовать 0-1 баллам по шкале ECOG и иметь как минимум один измеряемый целевой очаг согласно RECIST 1.1 (не считая метастазов в костях) (фиг. 4, табл. 21).
- 57 046787
Таблица 21
Характеристики заболевания в популяции пациентов (исследование BCD-100-2/MIRACULUM)
| Показатель | BCD-ICO,. 1 мг/кг | BCD-1C0. 3 кг /кг | Значение ρ | ||
| η = 63 | η = 63 | ||||
| r· | 1 ’» | ||||
| Дкагшкз 1 | на момент скрининга) | ||||
| Меланома нерезектасельная IZ стадии | 4 | 635 | 1 | 1.59 | 0,3652 |
| Меланома нерезектасельная IZI стадии | 0 | 07’0 | 1 | 1.59 | IjCOij- |
| Меланома метастатическая ГС стадии | 59 | 93,65 | 61 | 96-83 | 0,6S0: |
| Гисмижнпй™ вирии | |||||
| Смешанно-клеточная меланома | 3 | 4,76 | 2 | 3,17 | LCOO: |
| Дпитетптпи_тап-жэтятп'»тняя: мвляигмя | 23 | 36,51 | 26 | 41,27 | D715- |
| Веретенпшжточная ишиномв | 5 | 7,94 | 5 | “;94 | LCO'O2 |
| Невс-клетсчная меланома | 1 | 179 | 0 | 070 | LCDO2 |
| NA | 31 | 4Я21 | 30 | 47,62 | 1ГСЭО- |
| Опухоли нетипичных локализаций | |||||
| Меланома нетипичней локализации | 4 | 6J5 | 5 | 7,94 | LC002 |
| Меланома хорисидеи | 3 | 4,76- | 5 | 794 | 071S2 |
| Ммяттмя слизистой -оболочки | 1 | 1,59 | 0 | 070 | LOGO2 |
| киш е чник а | |||||
| Степе» -иетаижгиесвго поражении | |||||
| Классификация AJCC | |||||
| Мн | 0 | й С-0 | 0 | 070 | LOGO2 |
| М1а | 6 | 9,52 | 8 | 1270 | G |
| М1Ъ | 13 | 20.54 | 8 | 1270 | 0,3391 |
| М1с | 44 | 59.S4 | 47 | “4.50 | 0,6911 |
| Классификация AJCC 8 | |||||
| мм | | 17 | 1 26,98 I | 9 | 1 1<29 I | | 0,1231 |
| Метастатическое поражение ЦНС | |||||
| Имеется | 17 | 26.98 | 9 | 14,29 | 0,1231 |
| Отсутствует | 46 | 73,02 | 54 | 85,71 | 0,1231 |
- 58 046787
| -М>-Ы статус. : ' | |||||
| Псзитлв ньтк | /33<</ | 52Д8 | 7:31/: | <49,21 | 0,359- |
| 'Негативный | /12/7. | 19,05 | 14// | 22.22 | ClS26: |
| Ис следов вине не проводилось | /18/:, | 25,57 | 18 | 23,5’ | 1,0001 |
| BRAF-статус | |||||
| 3RAF ммтаикя сонар’жена | 21 | 33,33 | 24 | :38,1/ ..... | 07103 |
| BRAF кпстьпня не обнаружена | /25// | 39,68 | 22 | 34,92 | 0713- |
| Исследование не проводилось | /1’7 / | 26,95 | 17/ | 26,95 | 1,000- |
| Медиана BTS (объема опухоли на скрининге) | |||||
| Медиана BTS | | 71мм/ | | 1 9’ мм | 1 0,0-f | ||
| Уровень ЛДГ на скрининге | |||||
| Норма | /-42/// | 66,67 | 741/ | 65,05 | 1,0001 |
| Выше носс·.:ье | 21 | 33,33 | --:22:7 | 34,92 | 1,0001 |
| Предшествующая терапия | |||||
| Терапия ранних стадий | |||||
| Неоадъювантная терапил | 0 | 0,00 | 0 | 0,30 | 1,0002 |
| Хирургическое лечение | 59 | 93,65 | -9 | “7,73 | 0.322 |
| Адъювантная терапия | <23::// | 36,51/ | :/-:247 | /:/38,:1-- | 1,0001 |
| Терапия поздних стадий | |||||
| Химиотерапия распространенного заболевания | |||||
| Не прсЕоддлагь (препарат BCD-lOO ПрЯМЕНЯеТСл Е 1 ЛИНИИ ! | /46/ | ~з;к | 47 | “4,60 | 1,0001 |
| Проводилась | 7177 | 26,95 | 16 | 25,40 | 1,0003 |
| 1 линия предтпествуюшей тералин (препарат BCD-:ОС применяется во 2 | /15 | 23,81 | 8 | К7 | 0,1563 |
| .2 двияштаг ' (препарат BCD-ЮС применяется е 3 „nwHWHji · · : | 2: | 3,17 | 8 | 127 | 0,0 95- |
| Другое (йммуиот^гапия, /важдинмерапия) | 6 | 9,52 | <5 | 7>4 | 1,0002 |
| /Лучевая терапия / | 4 | 635 | 7 7 | 11,11 | 0.5 З2 |
| Длительность заболевания (мес.) | |||||
| Среднее | 3373 | 31.32 | 0,1 ”4- | ||
| 2. 1едкана | 19,55 | / 15,447 | |||
| Ммниуяг' | 0,53 ..... | '0/13 | |||
| Мжсимум/...... ..... ..........: | 315,83 | ......./227,09 | |||
| СО | -6,12 | 45,86/ | |||
| Примечание: -критерийПирсона с поправкой Кете а, - двусторонний точный критерий Фишера, -критерий Манна-Уитни. ХА - нет данных |
В анализ безопасности вошли все пациенты, получившие как минимум одно введение исследуемого препарата (modified Intent-to-treat (mITT) популяция, n=126).
Анализ эффективности проведен в двух популяциях пациентов:
все пациенты, получившие как минимум одно введение исследуемого препарата (mITT популяция, n=126);
пациенты, получившие, как минимум, одно введение исследуемого препарата и прошедшие, как минимум, 1 плановое КТ-исследование в динамике для оценки ответа (популяция per protocol (PP), n=114).
В анализ фармакокинетики были включены данные пациентов, получивших, как минимум, одно введение препарата BCD-100, у которых не было пропущено/утеряно/испорчено необходимых образцов, согласно протоколу, действующей версии, на момент определения (n=125).
Сводная информация о клинической эффективности, полученная в ходе исследования № BCD-1002/MIRACULUM.
Результаты оценки эффективности по первичной конечной точке (ОЧО) свидетельствуют о достаточной эффективности препарата BCD-100 в обоих дозовых режимах, во всех исследуемых популяциях пациентов. Так, ОЧО и контроль над заболеванием в популяции РР составили 40,68 и 67,80% в 1-й группе и 32,73 и 52,73% - во 2-й группе терапии. В популяции mITT наблюдались схожие показатели эффективности. Таким образом, ожидаемая целевая частота ответа (28%) и критическое значение r (11 ответов) были достигнуты в обеих группах терапии.
Подгрупповой анализ по линиям терапии продемонстрировал высокую эффективность препарата BCD-100 в минимальной дозе 1 мг/кг в популяции не леченных прежде пациентов (ОЧО составила 50,00%).
Результаты анализа эффективности по вторичным конечным точкам подтвердили заключение о до
- 59 046787 статочной эффективности препарата BCD-100 в обеих дозах. Показатели БПВ, ОВ, длительности ответа были сопоставимы с таковыми лучших в классе ингибиторов PD-1.
12-месячная БПВ составила 41,27% для пациентов группы BCD-100, 1 мг/кг и 34,92% - для пациентов группы BCD-100, 3 мг/кг. Медиана БПВ составила 5,78 месяца (95% ДИ 3,52 - -) для пациентов группы BCD-100, 1 мг/кг и 2,33 месяца (95% ДИ 2,07-10,25) - для пациентов группы BCD-100, 3 мг/кг (р=0,400, лог-ранговый критерий). При детальной оценке беспрогрессивной выживаемости в каждой из групп, по линиям терапии (по критериям irRECIST, в mITT популяции), статистически значимых различий выявлено не было. Препарат BCD-100 был равно эффективен как при применении у не леченных прежде пациентов, так и при применении у ранее получавших терапию пациентов.
При медиане наблюдения 13,8 месяца (95% ДИ 13,2-14,7) медиана общей выживаемости для пациентов группы BCD-100, 1 мг/кг не была достигнута (95% ДИ -1 - -) (1 в данном случае и далее по тексту означает не достигнута). 12-месячная ОВ составила 74,60% для пациентов группы BCD-100, 1 мг/кг. Медиана ОВ для пациентов группы BCD-100, 3 мг/кг составила 15 месяцев (95% ДИ 9,99 - -) при медиане наблюдения 14,5 месяца (95% ДИ 13,9-15,2). 12-месячная ОВ составила 53,97% для пациентов группы BCD-100, 3 мг/кг. При детальной оценке общей выживаемости в каждой из групп, по линиям терапии, статистически значимых различий выявлено не было. Препарат BCD-100 был равноэффективен как при применении у не леченных прежде пациентов, так и при применении у ранее получавших терапию пациентов. Медианы ОВ не были достигнуты ни в одной из подгрупп у пациентов, получавших препарат BCD-100 в дозе 1 мг/кг (р=0,800; лог-ранговый критерий). Медиана ОВ составила 16,8 месяца (95% ДИ 9,33 - -) для не леченных прежде пациентов и 15 месяцев (95% ДИ 7,46 - -) для получавших ранее терапию, в группе препарата
BCD-100, 3 мг/кг (р=0,900; лог-ранговый критерий) (табл. 22, табл. 23, табл. 24, табл. 25, фиг. 5, фиг. 6, фиг. 7, фиг. 8).
Таблица 22
Первичная конечная точка, отражающая эффективность препарата в РР-популяции (популяции пациентов, прошедших лечение в соответствии с протоколом) по результатам исследования BCD-100-2/MIRACULUM
| Параметры эффективности | irRECIST | ||||
| BCD-100, 1 мг/кг (п=59) | BCD-100, 3 мг/кг (п=55) | Значение р | |||
| г. | % | iligjjgi· | % | ||
| Частичный ответ (40) | 19 | 32,20 | 16 | 29,09 | 0,: |
| Полный ответ (ПО) | 5 | 8,47 | 2 | 3,64 | 0,4402 |
| Стабилизация (СТ) | 16 | 27,12 | 11 | 20,00 | 0,5011 |
| Прогрессирование (ПР)2 | 19 | 32,20 | 26 | 47,27 | 0,1461 |
| Контроль над заболеванием (КЗ) | 40 | 67,80 | 29 | 52,73 | 0,1461 |
| Обпря частота ответа (ОЧО) | 24 | 40,68 | 18 | 32,73 | 0,4931 |
Примечание: критерий Пирсона с поправкой Йетса, 2 двусторонний точный критерий Фишера (2 Подтвержденное данными 1 плановой КТ-оценки на S визите).
Сводная информация о клинической безопасности, полученная в ходе исследования № BCD-1002/MIRACULUM.
BCD-100 продемонстрировал благоприятный профиль безопасности в обоих дозовых режимах (табл. 23).
- 60 046787
Таблица 23
Профиль безопасности препарата BCD-100 по результатам исследования BCD-100-2/MIRACULUM
| Доля пациентов с (со); | BCD-130г 1 мг/кг п=63 η (?) | ЕСЕ-10С, 3 мг/кг п=бЗ п (%) | Значение Р |
| НЯ | 54 (85,71%) | 54 (35,71%) | 1,0301 |
| НЯ связанными, по мнении исследователей, с проводимой терапией | 35 (55,561) | 34 (53, 97%) | 1,0001 |
| НЯ 3 и более степени тяжести по СТСАЕ 4.03 | IB (28,57%) | 21 (33, 33%) | 0,6991 |
| НЯ 3 и более степени тяжести по С'ТСАЕ 4.03 связанными, по мнению исследователей, с проводимой терапией | 0 (12,70%) | 2 (3,17%) | 0,0953 |
| СНЯ | 5 (7,94%) | 13 (15,с7%) | 0,2712 |
| СМ связанными, по мнении исследователей, с проводимой терапией | 2 (3,17%) | 0 (0,00%) | 0,4963 |
| иоНЯ | 23 (36,51%) | 22 (34, 92%) | 1,0001 |
| иоНЯ 3 и более степени тяжести по СТСАЕ 4.03 | 5 (7,94%) | 1 (1,59%) | 0,2072 |
| Отмена терапии по причине развития НЯ | 3 (4,76%) | 2 (3,17%) | 1,0003 |
| Отмена терапии по причине развития иоНЯ | 1 (1,59%) | 1 (1,59%) | 1,0002 |
| Примечание: критерий J2 Пирсона с лопразксй Йетса, двусторонний точный критерий Фишера |
На основании приведенных выше данных можно сделать вывод о том, что результаты, полученные в настоящем исследовании, не противоречат известным данным о профиле безопасности препаратов моноклональных антител к рецептору PD-1. Статистически значимых различий в профиле безопасности препарата в изученных дозах выявлено не было, за исключением количества СНЯ с последующим летальным исходом (значимо большее количество отмечалось среди пациентов группы BCD-100, 3 мг/кг).
Иммуногенность.
В анализ иммуногенности были включены все пациенты, образцы сыворотки которых были доступны для анализа на момент скрининга и в последующие дни анализов (n=121). Ни у одного из пациентов не было обнаружено CAT к BCD-100.
Сводная информация по фармакокинетике и метаболизму, полученная в ходе исследования № BCD-100-2/MIRACULUM.
Проведенный анализ показал, что однократное внутривенное введение препарата BCD-100 в дозе от 1 до 3 мг/кг характеризуется линейным нарастанием концентрации исследуемого вещества в плазме крови, с последующим равномерным снижением, при этом период полувыведения препарата, независимо от введенной в организм дозы, характеризуется обычной для иммуноглобулинов класса IgG продолжительностью - от 11,5 до 17 дней (фиг. 9, фиг. 10).
Тенденция к дозозависимому нарастанию концентрации исследуемого вещества в плазме крови (по параметрам Cmax и AUC0-t,SS) сохраняется также и после многократного введения препарата BCD-100, что соответствует литературным данным о ФК профиле других препаратов анти-PD-1 антител.
Продемонстрированное в рамках клинического исследования № BCD-100-2/MIRACULUM стойкое сохранение Cmin на достаточном уровне на фоне проведения курса лечения свидетельствует о том, что терапевтические концентрации препарата сохраняются как при применении препарата BCD-100 в дозе 1 мг/кг 1 раз в 2 недели, так и при применении препарата в дозе 3 мг/кг в режиме 1 раз в 3 недели. Таким образом, применение BCD-100 в обоих дозовых режимах является оправданным с позиции фармакокинетических свойств.
Оценка параметра T1/2, в том числе и сравнительная оценка между группами терапии, была затруднена ввиду отсутствия у ряда пациентов типичного терминального периода фазы элиминации препарата после однократного введения.
-
Claims (68)
- В целом, препарат BCD-100 как в дозе 1 мг/кг раз в 2 недели, так и в дозе 3 мг/кг раз в 3 недели характеризовался фармакокинетическими показателями, обеспечивающими длительное пребывание препарата в организме, достаточное для поддержания стабильной терапевтической концентрации на фоне многократного введения. Дозозависимости в отношении показателей эффективности и безопасности препарата отмечено не было.Сводная информация о фармакодинамике, полученная в ходе I фазы исследования.Процент насыщенности PD-1 рецепторов препаратом BCD-100 во всех изученных субпопуляциях лейкоцитов не отличался между группами терапии. Насыщенность PD-1 на уровне >99% в популяции активированных Т-хелперов и цитотоксических лейкоцитов была зарегистрирована у 33,33% пациентов, включенных в анализ данного показателя (14 из 42). При этом статистически значимой разницы между группами терапии отмечено не было: 8 пациентов получали BCD-100 в дозе 1 мг/кг, 6 пациентов - в дозе 3 мг/кг.Ki-67 является универсальным маркером клеточной пролиферации, что обусловлено его присутствием в клетке только во время процесса деления и разрушением в течение 1,5-2 ч после окончания митоза. Маркер Ki-67 выявляется в области теломер, центромер и ядрышках. Процент Ki-67 положительных цитотоксических Т-лимфоцитов в ходе терапии возрастал в обеих группах, но достоверных различий при этом обнаружено не было. Анализ доли Ki-67 положительных цитотоксических Т-лимфоцитов также не выявил статистически значимых различий между группами.Процент Th9 в общей популяции Т-хелперов в ходе терапии возрастал преимущественно в группе 2 (BCD-100, 3 мг/кг Q3W), но достоверных различий при этом обнаружено не было. Достоверные различия отсутствовали и при межгрупповом сравнении.По имеющимся литературным данным, раннее повышение уровня Th9 ассоциировано с лучшим ответом на терапию ниволумабом при меланоме3 (3 Nonomura Y., Otsuka A., Nakashima С., Seidel J.A., Kitoh A., Dainichi T., Nakajima S., Sawada Y., Matsushita S., Aoki M., Takenouchi T., Fujimura T., Hatta N., Koreeda S., Fukushima S., Honda T., Kabashima K. Peripheral blood Th9 cells are a passible pharmacodynamic biomarker of nivolumab treatment efficacy in metastatic melanoma patients. Qncoimmunology. 2016 Oct 18; 5(12):e1248327). Следует обратить внимание, что эти результаты были получены на ограниченной выборке пациентов (n=42), гетерогенной по половой принадлежности и характеристикам основного заболевания.Сравнительный анализ доли Th9 в общей популяции Т-хелперов в подгруппах с различными типами ответа на терапию препаратом BCD-100 не выявил статистически значимых различий в обеих дозовых когортах. Тем не менее, на представленных графиках видна тенденция к лучшему ответу на проводимую терапию у пациентов с исходно повышенным уровнем Th9 (фиг. 11, фиг. 12).Вывод.Полученные данные об эффективности, безопасности и фармакокинетических свойствах BCD-100 являются достаточными для обоснования применения препарата как в дозовом режиме 1 мг/кг 1 раз в 2 недели, так и в дозовом режиме 3 мг/кг 1 раз в 3 недели.В рамках международного многоцентрового рандомизированного открытого исследования II фазы № BCD-100-2/MIRACULUM в популяции пациентов с нерезектабельной и метастатической меланомой были продемонстрированы значимые терапевтические преимущества по сравнению с известными данными об эффективности химиотерапии, и результаты сопоставимые с лучшими существующими методами лечения. С учетом полученных в рамках исследования показателей эффективности при благоприятном профиле безопасности, применение препарата BCD-100 в рутинной клинической практике отвечает балансу риска и пользы в данной популяции пациентов.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации от 15 до 40 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 80 до 110 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,6 до 1,9 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 4,5-5,5.
- 2. Водная фармацевтическая композиция по п.1, где указанный пролголимаб находится в концентрации от 15 до 25 мг/мл.
- 3. Водная фармацевтическая композиция по п.2, где указанный пролголимаб находится в концентрации 20 мг/мл.
- 4. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.1-3, где указанный трегалозы дигидрат находится в концентрации от 95 до 105 мг/мл.
- 5. Водная фармацевтическая композиция по п.3, где указанный трегалозы дигидрат находится в концентрации 100 мг/мл.
- 6. Водная фармацевтическая композиция по п.1, где указанный натрия ацетат тригидрат находится в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл.- 62 046787
- 7. Водная фармацевтическая композиция по п.6, где указанный натрия ацетат тригидрат находится в концентрации 1,742 мг/мл.
- 8. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.1-3, где указанная уксусная кислота добавлена до рН 5,0.
- 9. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации от 90 до 150 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 50 до 110 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,6 до 1,9 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5.
- 10. Водная фармацевтическая композиция по п.9, где указанный пролголимаб находится в концентрации от 90 до 110 мг/мл.
- 11. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.9, 10, где указанный пролголимаб находится в концентрации 100 мг/мл.
- 12. Водная фармацевтическая композиция по п.9, где указанный трегалозы дигидрат находится в концентрации от 75 до 85 мг/мл.
- 13. Водная фармацевтическая композиция по п.12, где указанный трегалозы дигидрат находится в концентрации 80 мг/мл.
- 14. Водная фармацевтическая композиция по п.9, где указанный натрия ацетат тригидрат находится в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл.
- 15. Водная фармацевтическая композиция по п.14, где указанный натрия ацетат тригидрат находится в концентрации 1,742 мг/мл.
- 16. Водная фармацевтическая композиция по п.9, где указанная уксусная кислота добавлена до рН от 5,0 до 5,5.
- 17. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации от 5 до 150 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 70 до 110 мг/мл;(c) L-гистидин в концентрации от 0,7 до 1,0 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 2,8 до 3,3 мг/мл.
- 18. Водная фармацевтическая композиция по п.17, где указанный пролголимаб находится в концентрации от 15 до 40 мг/мл.
- 19. Водная фармацевтическая композиция по п.18, где указанный пролголимаб находится в концентрации от 15 до 25 мг/мл.
- 20. Водная фармацевтическая композиция по п.19, где указанный пролголимаб находится в концентрации 20 мг/мл.
- 21. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.17-20, где указанный трегалозы дигидрат находится в концентрации от 95 до 105 мг/мл.
- 22. Водная фармацевтическая композиция по п.21, где указанный трегалозы дигидрат находится в концентрации 100 мг/мл.
- 23. Водная фармацевтическая композиция по п.17, где указанный пролголимаб находится в концентрации от 90 до 110 мг/мл.
- 24. Водная фармацевтическая композиция по п.23, где указанный пролголимаб находится в концентрации 100 мг/мл.
- 25. Водная фармацевтическая композиция по пп.17, 23, 24, где указанный трегалозы дигидрат находится в концентрации от 75 до 85 мг/мл.
- 26. Водная фармацевтическая композиция по п.25, где указанный трегалозы дигидрат находится в концентрации 80 мг/мл.
- 27. Водная фармацевтическая композиция по п.17, где указанный L-гистидин находится в концентрации 0,92 мг/мл.
- 28. Водная фармацевтическая композиция по п.17, где указанный L-гистидина гидрохлорид находится в концентрации 2,96 мг/мл.
- 29. Водная фармацевтическая композиция по п. 17, где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5.
- 30. Водная фармацевтическая композиция по п.29, где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,0.
- 31. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.1, 17, дополнительно содержащая подходящий солюбилизатор.
- 32. Водная фармацевтическая композиция по п.31, где указанный солюбилизатор представляет собой полоксамер 188.
- 33. Водная фармацевтическая композиция по п.32, где указанный полоксамер 188 находится в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
- 34. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5.- 63 046787
- 35. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-l антитела по п.34, содержащая:(а) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0.
- 36. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по п.35, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН 5,0.
- 37. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 4,5 до 5,5.
- 38. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по п.37, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 1,7 до 1,8 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 5,0 до 5,5.
- 39. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по п.38, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг/мл и (d) уксусную кислоту до рН от 5,0 до 5,5.
- 40. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5.
- 41. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по п.40, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;(e) где указанная композиция имеет рН 5,5.
- 42. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;(c) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл;(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,5.
- 43. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела по п.42, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;(c) L-гистидин в концентрации 0,92 мг/мл и (d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2,96 мг/мл;(e) где указанная композиция имеет рН от 5,5 до 6,0.
- 44. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг/мл;(d) уксусную кислоту до рН 5,0.
- 45. Водная фармацевтическая композиция анти-PD-1 антитела, содержащая:(a) пролголимаб в концентрации 20 мг в качестве антитела;(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг;(c) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1,742 мг;(d) уксусную кислоту до рН 5,0, и (e) воду для инъекций до 1 мл.
- 46. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.34-45, дополнительно содержащая подходящий солюбилизатор.- 64 046787
- 47. Водная фармацевтическая композиция по п.46, где указанный солюбилизатор представляет собой полоксамер 188.
- 48. Водная фармацевтическая композиция по п.47, где указанный полоксамер 188 находится в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
- 49. Применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба по любому из пп.1-48 для лечения злокачественного новообразования у субъекта, нуждающегося в этом.
- 50. Применение по п.49, где злокачественное новообразование выбрано из группы, содержащей меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого; неплоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный рак легкого; мелкоклеточный рак легкого, в том числе неоперабельный или метастатический мелкоклеточный рак легкого; рак легкого ранних стадий до и после радикального лечения; рак шейки матки, в том числе метастатический рак шейки матки, ранние стадии рака шейки матки до и после радикального лечения; опухоли головы и шеи, в том числе плоскоклеточный рак головы и шеи; лимфома Ходжкина; опухоли желудка и кишечника, метастатический плоскоклеточный рак пищевода; рак мочевого пузыря, в том числе метастатическая уротелиальная карцинома, рак почки; рак эндометрия, в том числе метастатический рак эндометрия, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения; рак молочной железы, в том числе метастатический рак молочной железы, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения; рак печени, в том числе метастатический или неоперабельный рак печени, ранние стадии рака печени до и после радикального лечения; неоперабельная или метастатическая солидная опухоль, в том числе неоперабельная или метастатическая солидная опухоль с признаками микросателлитной нестабильности.
- 51. Применение водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба по любому из пп.1-8, 17-21, 34-36, 40, 41 для лечения злокачественного новообразования у субъекта, нуждающегося в этом.
- 52. Применение по п.51, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела.
- 53. Применение по п.51, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела.
- 54. Применение по п.51, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят каждые 2 недели.
- 55. Применение по п.51, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят каждые 3 недели.
- 56. Применение по п.51, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела каждые 2 недели.
- 57. Применение по п.51, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела каждые 3 недели.
- 58. Применение по п.51, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят парентерально.
- 59. Применение по п.58, где указанное парентеральное введение представляет собой внутривенное, подкожное или внутримышечное введение.
- 60. Применение по п.58, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят внутривенно в виде инфузии.
- 61. Применение по п.51, где злокачественное новообразование представляет собой меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого.
- 62. Способ лечения злокачественного новообразования у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции по любому из пп.1-8, 17-21, 34-36, 40, 41.
- 63. Способ по п.62, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела.
- 64. Способ по п.62, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела.
- 65. Способ по п.62, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят каждые 2 недели.
- 66. Способ по п.62, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят каждые 3 недели.
- 67. Способ по п.62, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 1 мг/кг массы тела каждые 2 недели.
- 68. Способ по п.62, где указанную водную фармацевтическую композицию вводят в дозе антитела к PD-1 пролголимаба 3 мг/кг массы тела каждые 3 недели.-
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019126511 | 2019-08-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA046787B1 true EA046787B1 (ru) | 2024-04-23 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7402693B2 (ja) | 単独のおよびプログラム死受容体１（ｐｄ－１）抗体と組み合わされた抗ｔｉｇｉｔ抗体の安定な製剤、ならびにその使用方法 | |
| KR102624564B1 (ko) | 항-ctla4 항체 단독의, 및 프로그램화된 사멸 수용체 1 (pd-1) 항체와 조합된 항-ctla4 항체의 안정한 제제 및 그의 사용 방법 | |
| JP2024009946A (ja) | 抗ｐｄ－１抗体と他の抗体の組み合わせを含む組成物 | |
| TWI802942B (zh) | Pd-l1/lag-3雙特異性抗體製劑及其製備方法和用途 | |
| WO2021147854A1 (zh) | 重组全人源抗tigit单克隆抗体制剂及其制备方法和用途 | |
| WO2020102728A1 (en) | Method of treating a tumor with a combination of il-7 protein and an immune checkpoint inhibitor | |
| JP2024501029A (ja) | Ｐｄ１／ｐｄ－ｌ１抗体の皮下投与 | |
| EP4019047A1 (en) | Aqueous pharmaceutical composition of anti-pd1 antibody prolgolimab and use thereof | |
| EA046787B1 (ru) | Водная фармацевтическая композиция антитела к pd-1 пролголимаба и ее применение | |
| RU2806320C2 (ru) | Водная фармацевтическая композиция антитела к pd-1 пролголимаба и ее применение | |
| CN111683681B (zh) | 包含抗ox40抗体的制剂、其制备方法及其用途 | |
| KR20220129548A (ko) | 생물제약 조성물 및 관련 방법 | |
| TWI844666B (zh) | 抗ＰＤ－１抗體Ｐｒｏｌｇｏｌｉｍａｂ的水性藥物組合物及其用途 | |
| AU2023213937A1 (en) | Combination therapy for hepatocellular carcinoma | |
| US20230265188A1 (en) | Lag-3 antagonist therapy for hepatocellular carcinoma | |
| CN116710071A (zh) | Pd1/pd-l1抗体的皮下施用 | |
| WO2023235847A1 (en) | Antibody compositions and methods of use thereof | |
| KR20240099362A (ko) | 혈액암에 대한 lag-3 길항제 요법 | |
| JP2024523311A (ja) | 抗ｔｇｆ－ベータ抗体製剤およびそれらの使用 | |
| CN116529261A (zh) | 用于肝细胞癌的lag-3拮抗剂疗法 | |
| CN116510006A (zh) | 抗trbv9抗体的药物组合物及其用途 | |
| CN115697400A (zh) | 抗cd30抗体-药物缀合物及其用于治疗非霍奇金淋巴瘤的用途 |