EA038968B1 - Композиция с пониженной иммуногенностью - Google Patents
Композиция с пониженной иммуногенностью Download PDFInfo
- Publication number
- EA038968B1 EA038968B1 EA201591933A EA201591933A EA038968B1 EA 038968 B1 EA038968 B1 EA 038968B1 EA 201591933 A EA201591933 A EA 201591933A EA 201591933 A EA201591933 A EA 201591933A EA 038968 B1 EA038968 B1 EA 038968B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- human
- serum
- antibodies
- cells
- composition
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 73
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 title description 2
- FDJKUWYYUZCUJX-AJKRCSPLSA-N N-glycoloyl-beta-neuraminic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@](O)(C(O)=O)C[C@H](O)[C@H]1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-AJKRCSPLSA-N 0.000 claims abstract description 45
- FDJKUWYYUZCUJX-UHFFFAOYSA-N N-glycolyl-beta-neuraminic acid Natural products OCC(O)C(O)C1OC(O)(C(O)=O)CC(O)C1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 29
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 18
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 127
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 62
- 210000003293 antilymphocyte serum Anatomy 0.000 claims description 59
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 37
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 30
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 30
- 206010040400 serum sickness Diseases 0.000 claims description 25
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 24
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 16
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 claims description 14
- TXCIAUNLDRJGJZ-BILDWYJOSA-N CMP-N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound O1[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(=O)C)[C@@H](O)C[C@]1(C(O)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(N=C(N)C=C2)=O)O1 TXCIAUNLDRJGJZ-BILDWYJOSA-N 0.000 claims description 13
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 claims description 12
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 12
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 12
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 claims description 11
- 230000001494 anti-thymocyte effect Effects 0.000 claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 claims description 8
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 claims description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 7
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 claims description 5
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 claims description 5
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 claims description 5
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 5
- 206010037844 rash Diseases 0.000 claims description 5
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 claims description 5
- 230000000781 anti-lymphocytic effect Effects 0.000 claims 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 abstract description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 36
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 23
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 21
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 21
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 16
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 13
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 12
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 12
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 10
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 10
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 10
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 10
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 10
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 7
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 101150082479 GAL gene Proteins 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 4
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 4
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 4
- 102000030902 Galactosyltransferase Human genes 0.000 description 4
- 108060003306 Galactosyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 101000856513 Homo sapiens Inactive N-acetyllactosaminide alpha-1,3-galactosyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 102100025509 Inactive N-acetyllactosaminide alpha-1,3-galactosyltransferase Human genes 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 4
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 4
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 3
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 3
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101100454807 Caenorhabditis elegans lgg-1 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100217502 Caenorhabditis elegans lgg-3 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 2
- 208000021709 Delayed Graft Function Diseases 0.000 description 2
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 2
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 2
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- -1 antibodies Substances 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000005000 autoimmune gastritis Diseases 0.000 description 2
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 2
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 2
- 229960004669 basiliximab Drugs 0.000 description 2
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 2
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- 206010052015 cytokine release syndrome Diseases 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000017805 post-transplant lymphoproliferative disease Diseases 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 2
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 2
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 description 2
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 description 2
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N Acrinol Chemical compound CC(O)C(O)=O.C1=C(N)C=CC2=C(N)C3=CC(OCC)=CC=C3N=C21 IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010050245 Autoimmune thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282817 Bovidae Species 0.000 description 1
- 101100454808 Caenorhabditis elegans lgg-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010667 Carcinoma of liver and intrahepatic biliary tract Diseases 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 201000003066 Diffuse Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010013710 Drug interaction Diseases 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 206010048748 Graft loss Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 206010073069 Hepatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000000521 Immunophilins Human genes 0.000 description 1
- 108010016648 Immunophilins Proteins 0.000 description 1
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 208000011200 Kawasaki disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283960 Leporidae Species 0.000 description 1
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010052178 Lymphocytic lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-LUWBGTNYSA-N N-acetylneuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)CC(O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-LUWBGTNYSA-N 0.000 description 1
- FDJKUWYYUZCUJX-KVNVFURPSA-N N-glycolylneuraminic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@](O)(C(O)=O)C[C@H](O)[C@H]1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-KVNVFURPSA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 230000006051 NK cell activation Effects 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000000582 Retinoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000021712 Soft tissue sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101100121082 Sus scrofa GAL gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033781 Thyroid carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000008383 Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 1
- 210000005006 adaptive immune system Anatomy 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229940092117 atgam Drugs 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000001531 bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000004709 chorioretinitis Diseases 0.000 description 1
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- FHIVAFMUCKRCQO-UHFFFAOYSA-N diazinon Chemical compound CCOP(=S)(OCC)OC1=CC(C)=NC(C(C)C)=N1 FHIVAFMUCKRCQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002554 disease preventive effect Effects 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 229940073621 enbrel Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000012953 feeding on blood of other organism Effects 0.000 description 1
- 229960000556 fingolimod Drugs 0.000 description 1
- KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N fingolimod Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(CCC(N)(CO)CO)C=C1 KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 208000010749 gastric carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229940048921 humira Drugs 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011419 induction treatment Methods 0.000 description 1
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940047834 lemtrada Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 201000002250 liver carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 208000001725 mucocutaneous lymph node syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010065579 multifocal motor neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000000491 multivariate analysis Methods 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001276 rectum malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940116176 remicade Drugs 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 229940107955 thymoglobulin Drugs 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013077 thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000010570 urinary bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39516—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum from serum, plasma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к композиции, содержащей поликлональные антитела к клеткам человека, причем указанные поликлональные антитела лишены первой антигенной детерминанты, выбранной из группы, содержащей (i) N-гликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и (ii) -1,3-галактозу, и ее применению в качестве лекарственного средства.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к области иммунологии, и в частности к антилимфоцитарной сыворотке (АЛС) и антитимоцитарному глобулину (АТГ) и их применению в медицине для человека.
Предшествующий уровень техники
В области техники известно, что в отторжение аллотрансплантата вовлечены в основном активированные Т-клетки человека, которые при контакте с клеточными антигенами донора трансформируются во вредные лимфоциты-эффекторы, разрушающие пересаженные клетки.
Для достижения успешной трансплантации органа и длительной выживаемости трансплантатов было предложено нейтрализовать вредное воздействие Т-клеток пациентов после трансплантации на трансплантат посредством введения антилимфоцитарной сыворотки (АЛС) и антитимоцитарного глобулина (АТГ) (Mohty M et al., Best Pract. Res. Clin. Haematol., 2010 Jun; 23 (2):275-82).
Также согласно отдельной терапевтической стратегии снижения вредного эффекта Т-клеток у пациентов после трансплантации достигают за счет применения моноклональных антител к мембранным антигенам. Необходимо упомянуть применение базиликсимаба, являющегося моноклональным антителом к альфа-субъединице (CD25) рецептора интерлейкина 2 (IL-2R), на активированных лимфоцитах. Также может быть упомянуто применение алемтузумаба (продаваемого как Кампат, Мабкампат или Кампат-1Н и в настоящее время в дальнейшем продвигаемый как Лемтрада), представляющего собой моноклональное антитело к поверхностному гликопротеину (CD 52), присутствующему на поверхности зрелых лимфоцитов.
По сравнению, в частности, с базиликсимабом или алемтузумабом, АЛС и АТГ ингибируют множество различных рецепторов, таким образом, вызывая заметное ослабление Т-лимфоцитов (S Louis et al., Transplantation, 2007, vol. 83: 712-721).
Таким образом, в области техники известно, что АЛС и АТГ могут снижать частоту возникновения острого отторжения, могут лечить случаи острого отторжения, а также повышать выживаемость трансплантата (Gaber АО et al., Drugs. 2010 Apr 16; 70 (6): 691-732; Lawen JG et al., Transplantation 2003, 75: 3743; Lee BM et al., Transplant. Proc. 2006, 38: 2025-2028; Gaber АО et al., Drugs. 2010 Apr 16; 70 (6): 691732; Mohty M et al., Best Pract. Res. Clin. Haematol., 2010 Jun; 23 (2): 275-82).
Например, в настоящее время АЛС и АТГ являются наиболее популярным индукционным лечением почек.
АЛС и АТГ представляют собой инфузии нечеловеческих поликлональных антител животного происхождения к клеткам человека, в частности Т-клеткам человека. Более конкретно АЛС и АТГ представляют собой сывороточные поликлональные антитела, полученные посредством иммунизации животных, не являющихся человеком, таких как кролики и лошади, при помощи ксеногенных клеток (в частности, лимфоцитов), в частности лимфоцитов человека, тимоцитов человека или иммортализованной клеточной линии человека, в случае получения АЛС и АТГ, предназначенных для применения людьми.
АЛС и АТГ оказывают иммуносупрессорное действие, которое было показано на людях, и, таким образом, их применяют для предотвращения и/или лечения отторжения трансплантата, включая предупреждение и/или лечение острого отторжения при трансплантации органа.
АЛС и АТГ также применяют для предупреждения и/или лечения апластической анемии, а также реакции трансплантат против хозяина (РТПХ) (Norbert Frickhofen et al., N Engl J Med 1991, 324: 12971304; Kaya В et al., J. Clin. Pathol. 58(9):994-5; Stein RS et al., Am J Med Sci. 1994 Dec; 308(6):338-43; Bacigalupo A et al., Blood 98(10):2942-7; Bacigalupo A et al., Biology of Blood and Marrow Transplantation 12(5):560-5).
Однако известно, что традиционные АЛС и АТГ ассоциированы с нежелательными побочными эффектами (TU et al., Chin. Med. J., 2012, 125(9): 1664-1666; WANG et al., Chin. Med. J., 2012, 125(6):1135-1140).
В частности, известно, что традиционные АЛС и АТГ ассоциированы с синдромом выброса цитокинов в краткосрочной перспективе и с повышенным риском посттрансплантационного лимфопролиферативного расстройства в долгосрочной перспективе.
Более того, несмотря на то, что в настоящее время их вводят с другими иммуносупрессивными лекарственными средствами, АЛС и АТГ остаются сильно иммуногенными и ответственны за возникновение заболеваний, связанных с иммунными комплексами (ИК), включая серьезные ИК-манифестации, такие как кожная сыпь, лихорадка и т.д.
В этой связи авторы изобретения впервые показали, что возникновение сывороточной болезни является независимой переменной, связанной с поздним отторжением трансплантата. Более того, авторы изобретения впервые наблюдали статистическую значимость ассоциации между сывороточной болезнью и повышением антител к Neu5Gc IgG спустя годы после трансплантации (см. в данном документе после примера 4).
Таким образом, сохраняется необходимость обеспечения композиций, имеющих сниженные побочные эффекты, включая композиции, которые являются улучшенными или альтернативными в отношении традиционных композиций АЛС или АТГ, которые существенно менее иммуногенны по сравнению с традиционными АЛС или АТГ и которые в идеальном случае не задействуют манифестацию ИКсвязанных заболеваний.
- 1 038968
Краткое описание изобретения
Согласно первому аспекту изобретение относится к композиции, включающей поликлональные антитела к клеткам человека, причем указанные поликлональные антитела лишены первой антигенной детерминанты, выбранной из группы, содержащей (i) N-гликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и (ii) α1,3-галактозу.
Согласно другому аспекту изобретение относится к способу получения композиции поликлональных антител по изобретению, включающему этапы:
а) обеспечение генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего первый ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-N-ацетил-нейраминовой кислоты (СМАН), и (ii) ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу;
b) иммунизация указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, к клеткам человека;
c) сбор антител, содержащихся в жидкости организма указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком этапа, с этапа b).
Как известно в области техники, антитела к клеткам человека могут быть легко получены за счет иммунизации млекопитающего, не являющегося человеком, которое включает свиней, лошадей или кроликов, за счет введения иммуногенной композиции, содержащей мишеневые клетки человека.
Это специально проиллюстрировано путем получения композиций, названных АЛС и АТГ, которые получают посредством иммунизации млекопитающих, не являющихся человеком, клетками человека, а именно лимфоцитами человека и тимоцитами человека соответственно.
Затем поликлональные антитела к любому типу клеток человека могут быть получены за счет иммунизации млекопитающего, не являющегося человеком, при помощи указанных клеток человека.
Это включает поликлональные антитела, интересные с точки зрения терапии, антитела к клеткам, присутствие которых в организме человека нежелательно.
Это включает поликлональные антитела к клеткам, оказывающим вредное воздействие на организм человека, таким как лимфоциты, которые являются вредными для тканевого трансплантата или трансплантированного органа или таким как клетки, обладающие нарушенными пролиферативными свойствами, подобные злокачественным клеткам (опухолевым клеткам или раковым клеткам).
Поэтому указанные клетки человека могут быть предпочтительно выбраны из группы, содержащей лимфоциты человека, тимоциты человека и раковые клетки человека, в частности из группы, содержащей лимфоциты человека и тимоциты человека.
Настоящее изобретение также предполагает применение генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившим первый ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-N-ацетил-нейраминовой кислоты (СМАН), и (ii) ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу, для получения композиции, содержащей поликлональные антитела к клеткам человека.
Создание такого генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, является дополнительным преимуществом, в том смысле, что указанное генетически измененное млекопитающее, не являющееся человеком, вырабатывает лишь минимальное количество антител к NeuGc на немодифицированной диете, как показано в примере 3 и на фиг. 5. Таким образом, это освобождает от этапа иммуносорбции сыворотки указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, перед ее введением пациенту человеку.
Согласно другому аспекту, изобретение относится к способу индукции иммуносупрессивного состояния индивидуума, нуждающегося в этом, указанному способу, включающему этап введения указанному индивидууму композиции по изобретению.
Согласно другому аспекту изобретение относится к композиции по изобретению для применения в качестве лекарственного средства.
Настоящее изобретение также относится к композиции, как описано выше, для ее применения для предупреждения и/или лечения заболевания, выбранного из группы, включающей отторжение трансплантата, апластическую анемию, реакцию трансплантат против хозяина, тяжелое аутоиммунное заболевание и злокачественные клетки, связанные с заболеванием.
Согласно другим аспектам изобретение относится к композиции, как описано выше, с целью ее применения для предупреждения и/или лечения отторжения трансплантата, в частности отторжения почечного трансплантата.
Настоящее изобретение также относится к композиции, как описано выше, с целью ее применения для предупреждения посттрансплантационных ИК-связанных заболеваний, в частности сывороточной болезни, кожной сыпи или лихорадки.
В некоторых вариантах воплощения композиция, содержащая поликлональные антитела, выбрана из группы, включающей антилимфоцитарную сыворотку (АЛС) и сыворотку с антитимоцитарным глобулином (АТГ).
- 2 038968
Краткое описание графических материалов
Фиг. 1 иллюстрирует график получения рассматриваемых данных от пациентов (многоцентровая когорта базы данных DIVAT, Институт транспланталогии Нанта, Нант), имеющих по меньшей мере один почечный трансплантат и индукцию лечения при помощи АЛС или АТГ и в этой связи имеющих развитие заболеваний, связанных с иммунными комплексами (ИК), часть которых представляет сывороточную болезнь и ассоциированные побочные эффекты в отношении длительной выживаемости трансплантатов (ось абсцисс: продолжительность (в месяцах); ось ординат: % выживаемости трансплантата).
Фиг. 2 иллюстрирует график собранных рассматриваемых данных от пациентов (моноцентровая когорта базы данных DIVAT, институт трансплантологии Нанта, Нант), имеющих почечный трансплантат и получающих лечение АЛС или АТГ и в этой связи имеющих развитие заболеваний, связанных с иммунными комплексами (ИК), часть которых представляет сывороточную болезнь и ассоциированные побочные эффекты в отношении длительной выживаемости трансплантата (ось абсцисс: созревание (в месяцах); ось ординат: % выживаемость трансплантата).
Фиг. 3 иллюстрирует график собранных рассматриваемых данных от пациентов (моноцентровая когорта из базы данных DIVAT, институт трансплантологии Нанта, Нант), имеющих пересаженный первый трансплантат почки и/или почки/поджелудочной железы и получающих лечение АЛС или АТГ, и в отношении развитых заболеваний, связанных с иммунными комплексами (ИК), часть которых представляет сывороточную болезнь и ассоциированные побочные эффекты в отношении длительной выживаемости трансплантата (ось абсцисс: созревание (в годах); ось ординат: % выживаемости трансплантата).
Фиг. 4 иллюстрирует график, отражающий количества антител к мононуклеарным клеткам периферической крови человека в сыворотке иммунизированных свиней посредством детекции проточной цитометрией.
Фиг. 5 иллюстрирует график, отражающий данные ИФА для определения IgG к Neu5Gc в сыворотке свиней.
Фиг. 1 и 2 относятся к многоцентровой и моноцентровой когорте базы данных DIVAT соответственно, при этом фиг. 3, которая применена для статистического анализа, относится к более гомогенной моноцентровой когорте (DIVAT, Нант), как показано в данном описании далее в табл. A-C.
Подробное описание изобретения
Определения
Для более полного понимания изобретения, некоторые определения приведены ниже. Такие определения охватывают грамматические эквиваленты.
Термин антитело применяют в данном описании в самом широком смысле. Антитело относится к любому полипептиду, который, по меньшей мере, содержит (i) Fc-участок и (ii) связывающий полипептидный домен, полученный из вариабельного участка иммуноглобулина. Таким образом, антитела включают, но не ограничены, полноразмерные иммуноглобулины, антитела, конъюгаты антител и фрагменты каждого соответственно. Термины антитело и иммуноглобулин могут быть применены взаимозаменяемо в данном описании.
Термин антитело охватывает полипептид, как указано выше, который дополнительно содержит по меньшей мере одну сахарную группу, отличную от антигенной детерминанты, выбранной из группы, включающей (i) N-гликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и/или (ii) а-1,3-галактозу.
Поликлональные антитела, как используется в настоящем описании, означает смесь антител, распознающих различные эпитопы данного антигена. Поликлональные антитела охватывают таковые, которые заключены в или альтернативно получены из жидкостей организма, в частности из сыворотки или плазмы из организма млекопитающего.
В случае иммуноглобулинов человека легкие цепи классифицируют как каппа и лямбда легкие цепи. Тяжелые цепи классифицируют как мю, дельта, гамма, альфа или эпсилон и определяют изотип антитела как IgM, IgD, IgG, IgA и IgE соответственно.
IgG, как используется в настоящем описании, означает полипептид, относящийся к классу антител, которые в основном кодируются геном гамма-иммунноглобулина. У людей IgG имеет подклассы или изотипы lgG1, lgG2, lgG3 и lgG4. У мыши IgG имеет lgG1, lgG2a, lgG2b, lgG3. Полноразмерные IgG состоят из двух идентичных пар двух иммуноглобулиновых цепей, при этом каждая пара имеет одну легкую и одну тяжелую цепь, причем каждая легкая цепь содержит домены иммунноглобулина VL и CL, и каждая тяжелая цепь содержит домены иммуноглобулина VH, Cy1 (также называемый CH1), Cy2 (также называемый CH2) и Cy3 (также называемый CH3).
Как используется в настоящем описании, антитело-зависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (или ADCC) относится к механизму клеточного иммунитета, при этом эффекторная клетка иммунной системы активно лизирует мишеневую клетку, которая связывается специфичными антителами. ADCC в основном опосредована NK-клетками, а также другими иммунными клетками, таким как нейтрофилы и эозинофилы. Как правило, ADCC является результатом активации NK-клеток. Активация NK клеток включает связывание других Fc-рецепторов с Fc-участком IgG, связывающегося с антигенами, присутствующими на поверхности мишеневых клеток. Такие взаимодействия индуцируют высвобо- 3 038968 ждение NK-клетками цитокинов и цитотоксичных гранул. Для оценки способности антитела индуцировать ADCC может быть проведено исследование, как описано в de Romeuf et al. Br J Haematol. 2008 Mar;
140(6):635-43.
Под антигенной детерминантой (или эпитопом), как применяется в настоящем описании, в отношении поликлональных антител млекопитающих, не являющихся человеком, как используется в данном документе, понимают структурный компонент антигенной молекулы, которая включает антигенный белок и антигенный карбогидрат, ответственные за их специфическое взаимодействие с молекулами антител, выявляемых таким же или связанным антигеном. Разумеется, термин антигенная детерминанта, как используется в настоящем описании, в отношении поликлональных антител млекопитающих, не являющихся человеком, также применяют обобщенно в данном документе для антигенной молекулы, содержащей множество эпитопов, которые могут быть распознаны молекулами антител, выявляемых тем же или связанным антигеном. Для иллюстрации антигенная молекула N-гликольнейраминовой кислоты (Neu5Gc) может быть названа в данном описании антигенной детерминантой, хотя указанная антигенная молекула содержит более чем один эпитоп, распознаваемый антителами, выявляемыми при помощи молекул, содержащих Neu5Gc, или Neu5Gc.
Тимоциты представляют собой гематопоэтические клетки-предшественники, присутствующие в тимусе. Тимопоез представляет собой процесс в тимусе, посредством которого тимоциты дифференцируются в зрелые Т-лимфоциты.
Т-клетки или Т-лимфоциты относится к группе белых кровяных клеток, известных как лимфоциты, и играют центральную роль в клеточном иммунитете. Их можно отличить от других лимфоцитов, таких как В-клетки и клетки нормальные киллеры (NK клетки), за счет присутствия Т-клеточного рецептора (TCR) на поверхности клетки. Их называют Т-клетками, поскольку они зреют в тимусе.
В-клетки или В-лимфоциты также относятся к группе белых кровяных клеток, известных как лимфоциты, делая их важной частью иммунной системы, в частности ветви гуморального иммунитета адаптивной иммунной системы. В-клетки можно отличить от других лимфоцитов, таких как Т-клетки и клетки натуральные киллеры (NK-клетки), за счет присутствия белка на наружной поверхности Вклеток, известного в качестве В-клеточного рецептора (BCR). Этот специализированный рецепторный белок позволяет В-клеткам связываться с конкретным антигеном. Основными функциями В-клеток является продукция антител к антигенам, выполнение роли антиген-презентирующих клеток (АПК) и развитие в В-клетки памяти после активации в результате взаимодействия с антигеном.
В крови сыворотка представляет собой компонент, производное плазмы, при этом клетки (белые кровяные клетки, а также красные кровяные клетки) и факторы свертывания крови удалены. Сыворотка включает все белки, не участвующие в свертывании крови (коагуляции), и все электролиты, антитела, антигены, гормоны и иногда также любые экзогенные вещества (например, лекарственные средства и микроорганизмы).
Антилимфоцитарная сыворотка (или АЛС) и антитимоцитарный глобулин (или АТГ) представляют собой, как указано выше, инфузии поликлональных антител, полученных из животных, не являющихся человеком, к лимфоцитам человека и тимоцитам человека соответственно.
Как используется в настоящем описании, традиционная сыворотка, и в частности традиционная антилимфоцитарная сыворотка (АЛС) и традиционная сыворотка с антитимоцитарным глобулином (АТГ) (или известная сыворотка, известный АТГ или известная АЛС), обозначает сыворотку, в которой содержащиеся в ней поликлональные антитела не лишены антигенных детерминант, выбранных из группы, включающей (i) N-гликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и/или (ii) а-1,3-галактозу. В этом отношении, в частности, могут быть указаны продукты, коммерчески доступные под наименованием Тимоглобулин от компании Genzyme или наименованием Атгам от компании Pfizer.
Термины злокачественные клетки, раковые клетки и опухолевые клетки могут использоваться взаимозаменяемо в данном описании. Как используется в настоящем описании, опухолевые клетки относится к клеткам, которые гиперпролиферируют автономно in vivo. Примеры опухолевых клеток включают клетки, включенные в (1) саркомы, такие как остеосаркому и саркому мягких тканей, (2) карциномы, такие как карцинома груди, карцинома легких, карцинома мочевого пузыря, карцинома щитовидной железы, карцинома простаты, карцинома толстой кишки, колоректальная карцинома, карцинома поджелудочной железы, карцинома желудка, карцинома печени, карцинома матки, карцинома шейки матки и карцинома яичника, (3) лимфомы, такие как лимфома Ходжкина и неходжкинская лимфома, (4) нейробластомы, (5) меланомы, (6) миеломы, (7) опухоли Вильмса, (8) лейкемии, такие как острая миелоцитарная лейкемия (ОМЛ), хроническая миелоцитарная лейкемия (ХМЛ), острая лимфоцитарная лейкемия (ОЛЛ) и хроническая лимфоцитарная лейкемия (ХЛЛ), (9) глиомы и (10) ретинобластомы.
Как используется в настоящем описании, термин рак означает неконтролируемый анормальный рост клеток и включает внутри объема изобретения все известные заболевания, вызванные неконтролируемым и анормальным ростом клеток. Неограничивающие примеры распространенного рака включают рак мочевого пузыря, рак груди, рак яичников и рак желудка, рак шейки матки, рак толстой кишки, рак эндометрия, рак головы и шеи, рак легких, меланому, множественную миелому, лейкемию (например, миелоидную, лимфоцитарную, миелоцитарную и лимфобластную лейкемию), неходжкинскую лимфому,
- 4 038968 рак простаты, ректальный рак, злокачественные меланомы, и в частности рак поджелудочной железы.
Как используется в настоящем описании, термин аутоиммунное заболевание означает заболевание, развившееся в результате иммунного ответа против собственных тканей или компонентов тканей, включая как гуморальный иммунный ответ, так и клеточно-опосредованные ответы.
Термин аутоиммунное заболевание, как используется в настоящем описании, охватывает органспецифичные аутоиммунные заболевания, при которых аутоиммунный ответ направлен против одной ткани, такие как сахарный диабет I типа (Т1 Д), болезнь Крона, язвенный колит, миастения Грависа, витилиго, болезнь Грейвса, тиреоидит Хашимото, болезнь Аддисона, аутоиммунный гастрит и аутоиммунный гепатит. Термин аутоиммунное заболевание также охватывает неспецифичные для органов аутоиммунные заболевания, при которых аутоиммунный ответ направлен против компонента, присутствующего в нескольких или многих органах всего тела. Такие аутоиммунные заболевания включают, например, ревматоидную болезнь, системную красную волчанку, прогрессирующий системный склероз и варианты, полиомиозит и дерматомиозит. Дополнительное аутоиммунное заболевание включает пернициозную анемию, включая некоторые из аутоиммунного гастрита, первичного билиарного цирроза печени, аутоиммунной тромбоцитопении, синдрома Шегрена, множественного склероза и псориаза. Специалисты в области техники понимают, что при желании способы по изобретению могут быть применены к данным или иным аутоиммунным заболеваниям. Неограничивающие примеры некоторых аутоиммунных заболеваний также включают тромбоцитопению, такую как идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ИТП), дробьевидный ретинохориоидит, синдром Гийена-Барре (СГБ), мультифокальную моторную нейропатию или болезнь Кавасаки (или слизисто-кожный лимфонодулярный синдром), аутоиммунный тиреоидит или анкилозирующий спондилит.
Композиция по изобретению
Согласно изобретению обнаружено, что в популяции пациентов после трансплантации, получавших лечение АЛС или АТГ, время выживаемости трансплантата у этих пациентов в основном зависело от возникновения ИК-связанных заболеваний, таких как сывороточная болезнь при образовании иммунных комплексов (ИК). В частности, авторы изобретения обнаружили, что пациенты после лечения АЛС или АТГ, имеющие ИК-связанное заболевание, и в частности сывороточную болезнь, имеют намного более сниженное время выживаемости трансплантата и неудовлетворительный отдаленный результат, причем последний можно сравнить с таковым, наблюдаемым при отторжении трансплантата, вызванным несовместимостью по пяти versus одного HLA-антигена.
С целью преодоления недостатков традиционных АЛС или АТГ авторы изобретения разработали композиции, содержащие поликлональные антитела, имеющие сниженные иммуногенные свойства у индивидуумов человека и, таким образом, обладающие пониженной способностью индуцировать иммуногенные комплексы (ИК) у человека и, следовательно, пониженной способностью к индукции ИКсвязанных заболеваний, таких как сывороточная болезнь.
Данное изобретение в первую очередь относится к композиции, содержащей поликлональные антитела к клеткам человека, причем указанные поликлональные антитела лишены первой антигенной детерминанты, выбранной из группы, содержащей (i) N-гликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и (ii) α1,3-галактозу.
Согласно конкретному варианту воплощения композиция по изобретению может быть дополнительно лишена второй антигенной детерминанты, которая отличается от первой антигенной детерминанты, и при этом указанная вторая антигенная детерминанта выбрана из группы, содержащей (i) Nгликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и (ii) а-1,3-галактозу.
Полагают, что поликлональные антитела, содержащиеся в композиции поликлональных антител по изобретению, обладают сниженными иммуногенными свойствами у человека по сравнению с композициями поликлональных антител, которые в настоящее время применяют в области в виде АЛС и АТГ.
В области техники известно, что Neu5Gc является иммуногенным для людей (Noguchi A. et al., J. Biochem. Tokyo (1995), 117(1):59-62). Более того, известно, что у пациенты, у которых развивается тяжелый иммунный комплекс (ИК) вслед за инфузией животных иммуноглобулинов, нарастают антитела, в основном развивающиеся против Neu5Gc эпитопа (Merrick JM et al., Int. Allergy Appl. Immunol., 1978, Vol. 57: 477-480; Aggarwal S.et al., Nat Biotechnol. 2008;26:1227-1233; Arnold JN et al., Annu Rev Immunol. 2007;25:21-50; Durocher Y et al., Curr Opin Biotechnol. 2009;20:700-707; Higgins E et al., Glycoconj. J. 2009).
Также известно, что фермент а1,3-галактозилтрансфераза (a1,3GT или GGTA1) синтезирует эпитопы а1,3-галактозы (a1,3Gal) (Gala1,3Gale1,4GlcNAc-R), которые являются основными ксеноантигенами, вызывающими гиперострое отторжение при ксенотрансплантации от свиньи к человеку.
Следовательно, композиция, содержащая поликлональные антитела, лишенные антигенных детерминант к (i) N-гликольнейраминовой кислоте (Neu5Gc) и/или (ii) а-1,3-галактозе, поскольку данные поликлональные антитела являются менее иммуногенными, чем поликлональные антитела, которые содержатся в традиционных АЛС и АТГ, обладает пониженной иммуногенностью. Также полагают, что такая композиция, содержащая поликлональные антитела по изобретению, обладает пониженными свойствами в отношении увеличения побочных эффектов, индуцирующихся после введения традиционных АЛС или
- 5 038968
АТГ продуктов, которые включают индукцию серьезных ИК-заболеваний, включая сывороточную болезнь, синдром высвобождения цитокинов и посттрансплантационное лимфопролиферативное расстройство.
Таким образом, полагают, что композиция, содержащая поликлональные антитела по изобретению, снижает риск возникновения побочных эффектов, индуцированных после традиционныхх АЛС или традиционных АТГ, причем каждый из этих побочных эффектов вносит вклад в снижение долгосрочной выживаемости трансплантата у человека, как показано в данном описании.
Согласно знаниям авторов изобретения, АЛС или АТГ, лишенные антигенной детерминанты, выбранной из группы, содержащей (i) Neu5Gc и/или (ii) а-1,3-галактозу, не известны в области техники, в частности для применения, раскрытого в настоящем описании.
В этой связи композиция по изобретению обладает особыми преимуществами в том, что она определенно позволяет преодолеть вышеупомянутые нежелательные эффекты, вызванные традиционными АЛС и АТГ, поскольку она сохраняет свои иммуномодулирующие свойства в отношении Т-клеток человека и/или В-клеток человека, при меньшей токсичности на системном уровне организма человека.
Другими словами, композиция по изобретению является существенно менее иммуногенной, и, таким образом, ожидают, что частота возникновения заболеваний, связанных с иммунными комплексами (ИК), и в частности с сывороточной болезнью, наблюдаемыми при традиционных АЛС или АТГ, будет существенно снижена.
Дополнительным преимуществом композиции по изобретению является то, что она позволяет существенно повысить долгосрочную выживаемость трансплантата.
Кроме того, в области техники известно, что N-гликозилирование антител играет критичную роль в модулировании их эффекторных свойств, в частности их про- или противовоспалительных свойств.
Таким образом, обнаружено, что сиалирование представляет собой добавление Nацетилнейраминовой кислоты, также называемой Neu5Ac, NANA, N-ацетилсиаловой или сиаловой кислоты, на остатках галактозы N-гликанов кристаллизируемого фрагмента (Fc) антител.
Сиалирование придает антителам особо интересные противовоспалительные свойства (Dimitrov et al.; Nephrol. Dial. Transplant., 2007.22: 1301 и WO 2007/117505).
Поэтому согласно варианту воплощения, в котором поликлональные антитела по настоящему изобретению лишены, по меньшей мере, антигенной детерминанты N-гликольнейраминовой кислоты (Neu5Gc), преимуществом указанных антител, кроме того, является то, что они проявляют, за счет лучшего физиологического доступа к Fc-гамма рецептору, повышенную аффинность к FcyR и, таким образом, повышенную ADCC (антителозависимую клеточную цитотоксичность) в отношении Т-лимфоцитов.
Кроме того, из-за отсутствия в поликлональных антителах по настоящему изобретению антигенной детерминанты, выбранной из группы, состоящей из (i) N-гликольнейраминовой кислоты (Neu5Gc) и/или (ii) а-1,3-галактозы, указанные поликлональные антитела при введении в организм человека не повышают иммунный ответ, увеличивая продукцию анти-Neu5Gc или анти-GAL антител, которые необходимы для возникновения иммунных комплексов (ИК) и ИК-связанных заболеваний, таких как сывороточная болезнь.
Способ идентификации и характеристики поликлональных антител по настоящему изобретению находится в пределах общих знаний специалистов в области техники.
Способ, который может быть применен специалистами в области техники для идентификации или характеристики поликлональных антител по изобретению, включает твердофазный иммуноферментный анализ (тИФА), причем антитела к Neu5Gc и/или антитела к Gal применяют в качестве детектирующих молекул.
В качестве антител к Neu5Gc для оценки утраты антигенной детерминанты Neu5Gc может быть упомянут Gc-Free Basic Kit, коммерчески доступный от компании Sialix, Inc.
В качестве антител к Gal для демонстрации утраты антигенной детерминанты а-1,3-галактозы может быть рассмотрен протокол, раскрытый в Jianq-Qiang Wang et al. (J. Am. Chem. Soc, 1999, 121: 8181) или таковые, распространяемые под торговым наименованием WH0051083M1 Sigma компанией SigmaAldrich.
Согласно способу тИФА, в котором конкретные антитела к Neu5Gc и/или антитела к Gal могут быть иммобилизованы в лунках микропланшета, антитела, содержащие антигенную детерминанту, выбранную из группы, содержащей (i) N-гликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и/или (ii) α-1,3галактозу, образуют комплекс с указанными антителами к Neu5Gc и/или антителами к Gal и, таким образом, остаются связанными с лунками. При применении такого способа тИФА поликлональные антитела по изобретению представляют собой антитела, лишенные одной или более антигенных детерминант, выбранных из группы, содержащей (i) N-гликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и/или (ii) а-1,3-глактозу, и, следовательно, антитела, которые не образуют комплексы с (i) антителами к Neu5Gc, (ii) антителами к Gal или (iii) как антителами к Neu5Gc, так и с антителами к Gal.
Также данное изобретение относится к способу получения композиции, содержащей поликлональные антитела по изобретению, включающему этапы:
a) обеспечение генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утративше-
- 6 038968 го первый ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-К-ацетилнейраминовой кислоты (СМАН), и (ii) ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу;
b) иммунизация указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, к клеткам человека;
c) сбор антител, содержащихся в жидкости организма указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, с этапа b) и, таким образом, получение композиции, содержащей поликлональные антитела.
В некоторых вариантах воплощения композицию по изобретению можно получить при помощи смешивания поликлональных антител, собранных на этапе c) способа, описанного выше, с одним или более фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, такими как физиологически приемлемый носитель, разбавители или стабилизаторы.
В некоторых вариантах воплощения поликлональные антитела очищают до их применения в композиции по изобретению.
В некоторых вариантах воплощения композиция поликлональных антител по изобретению имеет жидкую форму.
В некоторых вариантах воплощения композиция поликлональных антител по изобретению имеет твердую форму, которая включает лиофилизированную форму.
Композиция по изобретению может быть получена стандартными способами, описанными в Remington: The Science and Practice of Pharmacy (Lippincott Williams & Wilkins; Twenty first Edition, 2005).
Фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, которые могут применяться, представляют собой, в частности, описанные в Handbook of Pharmaceuticals Excipients, American Pharmaceutical Association (Pharmaceutical Press; 6th revised edition, 2009).
С целью лечения пациента, нуждающегося в этом, такому как вышеуказанный, ему может быть введена терапевтически эффективная доза композиции по изобретению.
В данном документе терапевтически эффективная доза означает дозу, оказывающую эффекты, для которых ее вводят. Точная доза будет зависеть от цели лечения и будет очевидна специалистам в области техники, применяющим известные способы. Дозы могут варьировать от 0,001 до 100 мг поликлональных антител по изобретению на кг массы тела (мг/кг) или выше, например 0,1, 1,0, 10 или 50 мг/кг массы тела, предпочтительно 1-10 мг/кг. Доза и частота введения могут быть модифицированы в зависимости от ответа хозяина, а также частоты введения, исходя из лучшей толерантности.
Как известно в области техники, может быть необходима корректировка вследствие деградации белка, системной versus локализованной доставки, а также возраста, массы тела, общего состояния, пола, диеты, времени введения, лекарственного взаимодействия и тяжести состояния, и ее легко определить при помощи рутинных экспериментов специалистам в области техники.
Введение композиции по изобретению может быть выполнено различными путями, включая, но не ограничиваясь, перорально, подкожно, внутривенно, парентерально, интраназально, интраортикально, интраокулярно, ректально, вагинально, трансдермально, местно (например, гели), интраперитонеально, внутримышечно, внутрилегочно или интратекально.
Композиция по изобретению может быть введена параллельно с другими терапевтическими агентами, т.е. терапевтические агенты, описанные в данном документе, могут быть введены параллельно с другими курсами терапии или терапевтическими агентами, включая, например, малые молекулы, радиационную терапию, хирургию и т.д.
В наиболее предпочтительном варианте воплощения композиция по изобретению имеет форму, приемлемую для введения внутривенным путем.
Согласно конкретному варианту воплощения, композиция по изобретению может дополнительно содержать по меньшей мере одно иммуносупрессивное лекарственное средство, такое как глюкокортикоиды, цитостатики (Азатиоприн, Метотрексат), антитела, лекарственные средства, действующие на иммунофилины (Циклоспорин, Такролимус, Рапамицин).
Способ получения композиции по изобретению
Как упомянуто выше, способ получения композиции по изобретению включает этапы:
a) обеспечение генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего первый ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-К-ацетил нейраминовой кислоты (СМАН), и (ii) ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу;
b) иммунизация указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, к клеткам человека;
c) сбор антител, содержащихся в жидкости организма указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, с этапа b).
Согласно конкретному варианту воплощения генетически измененное млекопитающее, не являющееся человеком, может дополнительно утратить второй ген, отличный от первого гена, причем указан- 7 038968 ный второй ген выбирают из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-N-ацетилнейраминовой кислоты (СМАН), и (ii) ген, кодирующий α-(1,3)галактозилтрансферазу.
Предпочтительно способ по изобретению может дополнительно включать этап d) очистки указанных поликлональных антител из указанной жидкости организма.
Этап а) обеспечения генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком
Для получения композиции по изобретению проводят первый этап а), заключающийся в обеспечении генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-Nацетилнейраминовой кислоты (СМАН), и/или (ii) ген, кодирующий функциональную α-(1,3)галактозилтрансферазу.
Предпочтительно указанное генетически измененное млекопитающее, не являющееся человеком, представляет собой СМАН и/или GGTA1 нокаутное трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком (или СМАН и/или GGTA1 KO млекопитающее, не являющееся человеком), которое включает двойное СМАН и GGTA1 нокаутное трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком.
Как используется в настоящем описании, нокаутное трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком означает трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком, у которого изменена функция одной или более аллелей рассматриваемого гена, например, за счет гомологичной рекомбинации или иной инсерции или делеции.
В конкретном варианте воплощения данный ген разрушен. Разрушенный ген означает, что часть генетического кода изменена таким образом, что изменена транскрипция и/или трансляция этого участка генетического кода, например, делая этот участок генетического кода нечитаемым за счет методик нокаутирования или посредством инсерции дополнительного гена для желаемого белка или инсерции регуляторной последовательности, которая модулирует транскрипцию существующей последовательности.
В некоторых вариантах воплощения изобретения все клетки трансгенного млекопитающего, не являющегося человеком, включают разрушенный ген.
В конкретных вариантах воплощения нокаутное трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком, представляет собой трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком, в котором одна или более аллелей рассматриваемого гена приведены в нефункциональное состояние.
В некоторых вариантах воплощения обе аллели рассматриваемого гена оказываются нефункциональными. Такие варианты воплощения включают таковые, обычно рассматриваемые в качестве генных нокаутов, нокаутных инсерций в ген и любую другую модификацию одной или более нативной аллели нативного рассматриваемого гена, которая делает такой ген нефункциональным. Такое трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком, полезно в качестве источника получения композиции по настоящему изобретению.
Способ получения генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-N-ацетилнейраминовой кислоты и/или (ii) ген, кодирующий функциональную α(1,3)-галактозилтрнсферазу, находится в пределах общих знаний специалиста в области техники.
Генетически измененное млекопитающее, не являющееся человеком, утратившее ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-N-ацетилнейраминовой кислоты, называют СМАН KO млекопитающим, не являющимся человеком.
Генетически измененное млекопитающее, не являющееся человеком, утратившее ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу, называют GAL KO млекопитающим, не являющимся человеком.
Способ получения СМАН нокаутного трансгенного млекопитающего, не являющегося человеком, в частности, описан в WO 2006/133356, который более подробно раскрывает способ получения животных продуктов, лишенных N-гликольнейраминовой кислоты (Neu5Gc), для применения человеком, включающий этапы: получения генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего ген функциональной гидролазы цитидин-5'-монофосфат-М-ацетилнейраминовой кислоты (СМАН); и выделения по меньшей мере одного животного продукта из генетически измененного животного, не являющегося человеком.
Способ получения GAL нокаутного трансгенного млекопитающего находится в пределах обычных знаний специалиста в области техники (Cooper DK et al., Genetically engineered pigs, Lancet 1993, 342: 682; Lai L et al., Science 2002, 295:1089; Sachs DH et al., Current Opinion in Organ Transplantation, 2009, 14:148-153).
Способ получения GAL нокаутного трансгенного животного, не являющегося человеком, в частности, описан в US 7547816.
Согласно конкретному варианту воплощения изобретения для получения указанной композиции по настоящему изобретению, содержащей поликлональные антитела к лимфоцитам человека и тимоцитам
- 8 038968 человека, причем указанные поликлональные антитела лишены антигенной детерминанты, выбранной из группы, содержащей (i) N-гликольнейраминовую кислоту (Neu5Gc) и (ii) а-1,3-галактозу, включает получение генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'монофосфат-М-ацетилнейраминовой кислоты (СМАН), и (ii) ген, кодирующий функциональную α-(1,3)галактозилтрансферазу.
Другими словами, указанное специфичное генетически измененное млекопитающее, не являющееся человеком, представляет собой двойное СМАН- и GAL-нокаутное трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком.
Протокол получения данного специфичного двойного СМАН- и GAL-нокаутного трансгенного млекопитающего, не являющегося человеком, описан в Lutz AL et al. (Xenotransplantation, 2013; 20(1):2735) или в Conchon S. et al. (Xenotransplantation; special issue International Xenotransplantation Association IXA 2013, 2013, Vol. 20, Issue 5).
В качестве генетически измененного трансгенного млекопитающего, которое можно использовать в настоящем изобретении, в частности, могут быть упомянуты Ovidae, Bovidae, Suidae, Leporidae и Equidae.
Предпочтительно генетически измененное трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком, может представлять собой свинью. Более того, свиньи предпочтительны для получения композиции по настоящему изобретению, и в частности АЛС или АТГ, по той причине, что они особенно интересны с точки зрения производства.
Более того, свиньи обладают рядом преимуществ, в частности, по сравнению с кроликами в отношении объема иммунной сыворотки и, таким образом, интересующих поликлональных антител, которые могут быть собраны пропорционально отношению массы животного (в 30 раз лучше).
Кроме того, свиней не надо подвергать эвтаназии во время сбора сыворотки, и, таким образом, юридические процедуры, позволяющие собирать сыворотку, существенно облегчены.
Более того, может быть собрано 10% объема крови животного в месяц.
По всем этим причинам получение композиции по настоящему изобретению из генетически измененной трансгенной свиньи является особенно экономичным.
Этап b) иммунизации генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, к клеткам человека
Как только получают генетически измененное трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком, утратившее ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-М-ацетилнейраминовой кислоты (СМАН), и/или (ii) ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу, ему вводят раствор, содержащий исключительно клетки человека.
Предпочтительно клетки человека на этапе b) могут быть выбраны из группы, содержащей лимфоциты человека, тимоциты человека и раковые клетки человека, и в частности, лимфоциты человека и тимоциты человека.
Например, способ получения раствора, содержащего только Т-клетки человека, находится в пределах общего знания специалистов в области техники (EP 1778836; EP 0335804).
Согласно конкретному варианту воплощения указанные клетки человека представляют собой клоны Т-клеток человека, такие как описанные в EP 0335804.
Данный вариант воплощения обладает преимуществом, поскольку позволяет преодолеть возможные нежелательные побочные эффекты, связанные с присутствием вместе с клетками человека, особенно Т-лимфоцитами, различных примесей клеточной природы, включая нейтрофилы, моноциты, красные кровяные клетки и тромбоциты, которые могут участвовать посредством иммунизированного млекопитающего, не являющегося человеком, в образовании соответствующих контаминирующих антител.
Протокол достижения хорошего уровня иммунизации трансгенного млекопитающего, не являющегося человеком, к Т-клеткам, в частности, описан в EP 0335804.
Такой протокол, в частности, может включать иммунизацию животных, таких как кроликов, лошадей или свиней, предпочтительно свиней, с повторным введением, согласно известным способам, Тклеток человека.
Например, выполняют несколько введений, внутривенно или подкожно, с адъювантом или без, от 106 до 109 клеток каждый раз, с разделением, по меньшей мере, в неделю. Приблизительно спустя неделю после последней иммунизации собирают сыворотку от иммунизированных животных и выделяют согласно известным способам.
Генетически измененное трансгенное млекопитающее, не являющееся человеком, будет продуцировать антитела к этим Т-клеткам человека, причем указанные специфичные антитела будут лишены антигенной детерминанты Neu5Gc и/или a-1,3-Gal согласно природе рассматриваемого генетически измененного трансгенного млекопитающего, не являющегося человеком.
- 9 038968
Этап c), сбор антител, содержащихся в жидкости организма генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, с этапа b)
Далее часть жидкости крови указанного генетически измененного трансгенного млекопитающего, не являющегося человеком, удаляют и собирают интересующие антитела.
Согласно конкретному варианту воплощения указанную жидкость организма можно выбрать из группы, содержащей плазму крови и сыворотку крови.
Протокол получения жидкости крови, и в частности плазмы крови или сыворотки крови, находится в пределах знаний специалиста в области техники.
Дополнительный этап d) очистки антител из жидкости организма с этапа c)
Согласно предпочтительному варианту воплощения, и как указано выше, способ согласно изобретению может дополнительно включать этап d) очистки антител от указанной жидкости организма.
Указанный этап d) очистки обладает преимуществом в том, что он, в частности, позволяет преодолеть возможные нежелательные побочные эффекты, связанные с присутствием внутри жидкости организма различных примесей клеточной природы, которые могут вызывать, за счет иммунизированного млекопитающего, не являющегося человеком, образование соответствующих контаминирующих антител.
Указанный этап d) очистки также обладает преимуществом в том, что делает возможным получение композиции, обладающей желаемой степенью чистоты.
Указанный этап d) очистки находится в пределах общих знаний специалиста в области техники. Все возможные изменения любого обычного протокола очистки также находятся в объеме общих знаний специалиста в области техники. В этом отношении согласно первому варианту композиция по изобретению может представлять собой антилимфоцитарную сыворотку (АЛС), сыворотку с антитимоцитарным глобулином (АТГ) или сыворотку с противораковыми клетками по существу, предпочтительно композиция по изобретению может представлять собой антилимфоцитарную сыворотку (АЛС) или сыворотку с антитимоцитарным глобулином (АТГ) по существу.
В качестве подходящего способа получения указанной АЛС или АТГ, в частности, может быть упомянут способ фракционированного осаждения при помощи этанола, сульфата аммония, риванола или полиэтиленгликоля, способа пропускания через ионообменные колонки. Затем полученные антитела могут быть подвергнуты обычным методам обработки для их внутривенного введения, например, посредством энзиматического расщепления плазмином, папаином или пепсином.
В этом отношении, в частности, может быть упомянут протокол, реализуемый в примере 3 согласно EP 0335804, в котором применена ионообменная хроматография на целлюлозе DEAE.
Согласно другим вариантам воплощения композиция по изобретению может состоять из композиции, причем антитела, полученные на этапе с) описанного выше способа, отделяют от других клеточных компонентов, иных, чем антитела, включая, в частности, нейтрофилы, моноциты, красные кровяные клетки и тромбоциты.
Согласно этим другим вариантам воплощения композиция по изобретению может состоять из композиции, содержащей очищенные поликлональные антитела, которые изначально присутствуют в сыворотке, причем указанные очищенные поликлональные антитела по существу не содержат белковых компонентов сыворотки или даже поликлональных антител, которые по существу свободны от любого вещества, изначально содержащегося в сыворотке, применяемой в качестве исходного продукта.
В качестве указанного способа очистки данных интересующих поликлональных антител могут быть упомянуты данные способы очистки антител на аффинной подложке, к которой прикреплен антиген, на белке G или на белке А, например таковые, продаваемые компаниями ProteoGenix, Cell Biolabs, Inc. или CliniSciences или также описанные в EP 1601697, JP 7155194 или US 6870034.
Также может быть указана аффинная подложка для селективной фиксации интересующих антител из жидкости крови, содержащая твердый материал подложки, имеющий иммобилизованный аптамер, специфично связывающий указанные интересующие антитела из жидкости крови. Такой способ, в частности, раскрыт в WO 2010/094901.
Медицинское применение по изобретению
Как указано выше, настоящее изобретение согласно одному из его аспектов относится к применению генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего первый ген, выбранный из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'монофосфат-К-ацетил нейраминовой кислоты (СМАН), и (ii) ген, кодирующий функциональную α-(1,3)галактозилтрансферазу, для получения композиции, содержащей поликлональные антитела к клеткам человека.
Согласно конкретному варианту воплощения данное генетически измененное млекопитающее, не являющееся человеком, дополнительно может быть утратившим второй ген, отличный от первого гена, причем указанный второй ген выбран из группы, содержащей (i) ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-К-ацетилнейраминовой кислоты (СМАН), и (ii) ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу.
В частности, отсутствие антител к Neu5Gc в образце может быть определено согласно способу до- 10 038968 зирования, описанному в Padler-Karavani V et al. (PLoS One. 2013; 8 (3): e58443).
Предпочтительно клетки человека могут быть выбраны из группы, включающей лимфоциты человека, тимоциты человека и раковые клетки человека, и в частности могут быть выбраны из группы, включающей лимфоциты человека и тимоциты человека.
Согласно другому предпочтительному варианту воплощения композиция по настоящему изобретению может представлять собой сыворотку к клеткам человека, причем указанную композицию предпочтительно выбирают из группы, включающей антилимфоцитарную сыворотку (АЛС), сыворотку с антитимоцитарным глобулином (АТГ) и сыворотку к противораковым клеткам, при этом указанную композицию более предпочтительно выбирают из группы, включающей антилимфоцитарную сыворотку (АЛС) и сыворотку с антитимоцитарным глобулином (АТГ).
Данное изобретение также относится к композиции, содержащей поликлональные антитела, как раскрыто в настоящем описании, для ее применения в качестве лекарственного средства.
Настоящее изобретение относится к композиции, содержащей поликлональные антитела, как раскрыто в настоящем описании, для ее применения для предупреждения и/или лечения заболевания, выбранного из группы, включающей отторжение трансплантата, апластическую анемию, реакцию трансплантат против хозяина, тяжелое аутоиммунное заболевание и заболевание, связанное со злокачественными клетками (или заболевание, связанное с раковыми клетками).
Настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей поликлональные антитела, как раскрыто в настоящем описании, для ее применения для предупреждения и/или лечения отторжения трансплантата, и в частности отторжения почечного трансплантата.
Настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей поликлональные антитела, как раскрыто в настоящем описании, для ее применения для предупреждения заболеваний, связанных с посттрансплантационными иммунными комплексами (ИК), в частности сывороточной болезни, кожной сыпи или лихорадки, в сравнении с традиционной сывороткой к лимфоцитам человека или тимоцитам человека.
Кроме того, настоящее изобретение также относится к способу индукции иммуносупрессивного состояния у индивидуума, нуждающегося в этом, причем указанный способ включает этап введения указанному индивидууму композиции по настоящему изобретению.
Согласно конкретному варианту воплощения указанный индивидуум может страдать апластической анемией.
Согласно другому конкретному варианту воплощения, указанный индивидуум может представлять собой реципиента аллогенного или ксеногенного трансплантата органа.
Согласно другому конкретному варианту воплощения композиция, содержащая поликлональные антитела, как раскрыто в настоящем описании, может быть введена индивидууму, нуждающемуся в этом, в сочетании по меньшей мере с одним иммуносупрессивным лекарственным средством.
В качестве такого иммуносупрессивного лекарственного средства может быть, в частности, упомянут глюкокортикоид, цитостаз (метотрексат, азатиоприн и меркаптопурин), лекарственные средства, действующие на иммунофиллины (циклоспорин, такролимус и сиролимус), финголимод, микофеноловая кислота, ФНО-α (фактор некроза опухолей альфа), связывающие белки (инфликсимаб (ремикейд), этанерцепт (энбрел) или адалимумаб (хумира)).
В качестве иллюстрации этого конкретного варианта воплощения может быть процитирован Marsh J et al. (Blood. 1999 Apr 1; 93 (7): 2191-5) or Delmonico FL et al. (Ann Surg. 1987 Nov; 206 (5): 649-54).
Настоящее изобретение в дальнейшем проиллюстрировано без ограничения посредством нижеприведенных примеров.
Примеры
В данном документе во всех последующих примерах все используемые свиньи получали немодифицированную диету.
Пример 1. Протокол получения АЛС и АТГ из двойной GAL/CMAH KO свиньи.
Предварительно используемая двойная свинья GAL/CMAH KO раскрыта в Lutz AL et al. (Xenotransplantation, 2013; 20 (1): 27-35) или раскрыта в Conchon S. et al. (Xenotransplantation; special issue International Xenotransplantation Association IXA 2013, 2013, Vol. 20, Issue 5).
Иммортализованная клеточная линия Т-лимфоцитов, используемая в данном исследовании, представляла собой линию Jurkat, доступную в Американской коллекции типовых культур под номером CRL2899 (которая также может быть названа Т-клетки в примере в данном описании).
1) Протокол иммунизации двойной GAL/CMAH KO свиньи к Т-лимфоцитам человека.
Иммунизация двойной GAL/CMAH KO свиньи описана в Lutz AL et al. (Xenotransplantation, 2013; 20(1):27-35) или в Conchon S. et al. (Xenotransplantation; special issue International Xenotransplantation Association IXA 2013, 2013, Vol. 20, Issue 5) при помощи введения 3, 108 Т-клеток.
Выполняли три внутривенных инъекций на день 0, 14 и 21.
Возможно, введение внутривенно 10 доз BCG или любого типа адъюванта при 107-108 возбудителя/10 доз на день 5.
Сбор сыворотки проводили на день 28 посредством кровопускания. Сбор составлял приблизитель- 11 038968 но 100 мл сыворотки свиньи.
2) Протокол получения АЛС из двойной GAL/CMAH КО свиньи.
Вышеуказанную сыворотку свиньи подвергали хроматографии на целлюлозе Whatman DEAE и затем выполняли этап элюирования при помощи динатрийфосфатного буфера 1,5 г/л, pH 8.
Проводили очистку полученного раствора гамма-глобулина посредством двойного осаждения сульфатом натрия при 180 г/л, затем 170 г/л, pH 7. Осадок повторно растворяли в растворе 0,3 М глицина, pH 7, до получения объема, эквивалентного начальному объему.
Альтернативно вышеуказанный этап очистки может быть проведен при помощи белка А и ионообменной хроматографии на колонке.
Проводили гемасорбцию раствора дважды на сгустках красных кровяных клеток человека (объем сгустков для каждой адсорбции по сути эквивалентен объему неочищенной сыворотки) для снижения показателя гемаглютинина. Проводили повторное осаждение раствора сульфатом натрия для удаления гемоглобина. Осадок растворяли в 0,3 М глициновом буфере, диафильтровали против конечного раствора глицина 10 г/л, NaCl 2 г/л, маннитола 10 г/л. Добавляли белки до 5 г/л и затем лиофилизировали.
Комментарии: полученная АЛС от двойной GAL/CMAH KO свиньи особо интересна тем, что она существенно менее иммуногенна по сравнению с традиционной АЛС.
Таким образом, данная АЛС делает возможным снижение заболеваний, связанных с иммунным комплексом (ИК), которые могут развиться у пациентов после трансплантации аллотрансплантата или ксенотрансплантата. К тому же, данная АЛС также позволяет снизить сывороточную болезнь, которая может развиться в дальнейшем.
Все данные преимущества безусловно улучшают долговременную выживаемость трансплантата.
Пример 2. Иммунная реакция двойных GAL/CMAH KO свиней на Т-клетки человека (или ЛПК (лимфоциты периферической крови) человека).
Иммунизацию двойных нокаутных свиней согласно примеру 1 (в котором рассмотрен BCG или любой другой тип адъюванта) и свиней дикого типа выполняли посредством трех последовательных инъекций 30, 106 клеток Jurkat в фосфатно-солевом буфере: первую подкожную инъекцию проводили на день 0 с последующими двумя внутривенными инъекциями на день 14 и 28. Клетки Jurkat культивировали в среде, не содержащей Neu5Gc и соединений. Кровь брали на день 35, и сыворотку применяли для дальнейших экспериментов или очистки IgGs.
Метод детекции специфичных антител человека к ПЛК в упомянутой сыворотке адаптировали на основе протокола, описанного в Poirier N et al., Journal of Surgical Research, 2007. Кратко, 2,5x105 мононуклеарных клеток периферической крови человека инкубировали с различными разведениями сыворотки иммунизированных свиней (от 1:5 до 1:5000) или без сыворотки в качестве отрицательного контроля, в течение 30 мин при 4°C. После промывки в буфере FACS (ФСБ, 1% бычьего сывороточного альбумина (БСА), 0,1% азида) клетки инкубировали с FITC-меченными козьими антителами к IgG свиньи (AbD Serotec, reference: AAI41F) при разведении 1:30, в течение 30 мин, при 4°C. Клетки промывали три раза до ресуспендирования в буфере FACS и немедленно анализировали на BD FACSCanto™ II.
Результаты показаны в виде средней интенсивности флуоресценции в одном и том же эксперименте для сыворотки, взятой на день 35 протокола иммунизации.
Результаты.
Результаты показаны на фиг. 4. Более сильная интенсивность наблюдается в случае сыворотки двойных GAL/CMAH KO свиней. Таким образом, упомянутые двойные KO свиньи дают сильный ответ на ЛПК человека (= лимфоциты периферической крови) вследствие иммунизации клетками Jurkat.
Пример 3. Измерение антител к Neu5Gc (или IgGs к Neu5Gc) у двойных GAL/CMAH KO свиней.
Антитела к Neu5Gc в сыворотке иммунизированных свиней согласно примеру 2 (взятой на день 35 протокола иммунизации) количественно оценивали при помощи тИФА, адаптированного исходя из Scobie et al., J Immunol., 2013, модифицированного для улучшения специфичности. Вкратце, планшеты покрывали сывороткой мышей дикого типа (содержащей Neu5Gc) в течение ночи при 4°C, затем блокировали при помощи ФСБ 1% овальбумина, 0,05% Твин в течение 2 ч при комнатной температуре. В течение данного времени образцы предварительно инкубировали в течение 2 ч на льду при помощи сыворотки от CMAH-KO мыши (отсутствие экспрессии Neu5Gc) и с или без 5 мМ синтетической Neu5Gc (для сравнительной адсорбции антител к Neu5Gc). Затем образцы добавляли к тИФА планшету в течение 2 ч при комнатной температуре. Вторичные козьи антитела к IgG (Fc) свиньи, меченные пероксидазой хрена (AbD Serotec, reference:AAI41Р), применяли для детекции антител к Neu5Gc, и детекцию проводили при помощи субстрата ТМВ (Sigma-Aldrich). Оптическую плотность считывали на планшетном ридере MRX (Dynatech Laboratories). Результаты представляли в качестве разницы между оптической плотностью лунок, ингибированных или неингибированных синтетическим Neu5Gc.
Результаты.
Результаты показаны на фиг. 5. Таким образом, двойные GAL/CMAH KO свиньи продуцируют минимальное количество антител к NeuGc, которое показывает, что нет необходимости в адсорбции иммунной сыворотки.
- 12 038968
Пример 4. Связь между диагностикой сывороточной болезни и выживаемостью почечного трансплантата.
Данное исследование оценивает долю собранных данных от пациентов (моноцентрическая когорта базы данных DIVAT, Nantes Transplantation Institute, Nantes), имеющих первый трансплантат почки или почки/поджелудочной железы и получающих лечение АЛС или АТГ, и в этом отношении имеющих развившиеся заболевания, связанные с иммунным комплексом (ИК), проявляющиеся в сывороточной болезни и связанных побочных эффектах в отношении долгосрочной выживаемости трансплантата.
Указанное исследование проиллюстрировано при помощи фиг. 3 и при помощи трех последующих табл. A-C.
Табл. А отражает характеристики пациентов, входящих в рассматриваемые когорты. Табл. B и C отражают анализы выживаемости посредством одновариантной и многовариантной моделей Кокса соответственно.
Таблица A
| Параметры | Пропущенные значения | общее | Группа с сывороточной болезнью | Группа без сывороточной болезни | рзначение |
| Число (%) | (N=889) Число (%) | (N=86) Число (%) | (N=803) Число (%) | ||
| Реципиент | |||||
| Мужчина | 0 (0,0) | 554 (62,3) | 55 (64,0) | 499 (62,1) | 0,8318 |
| Возраст > 55 лет | 0 (0,0) | 254 (28,6) | 9 (10,5) | 245 (30,5) | 0,0002* |
| Возраст > 40 лет | 0 (0,0) | 545 (61,3) | 42 (48,8) | 503 (62,6) | 0,0173* |
| Индекс массы тела | 54 (6,1) | 0,5115 | |||
| худой | 72 (8,6) | 10 (11,8) | 62 (8,3) | ||
| нормальный | 724 (86,7) | 72 (84,7) | 652 (86,9) | ||
| тучный | 39 (4,7) | 3 (3,5) | 36 (4,8) | ||
| Реккурентное | |||||
| исходное | 85 (9,6) | 301 (37,4) | 26 (32,1) | 275 (38,0) | 0,3545 |
| заболевание | |||||
| Превентивный диализ | 35 (3,9) | 86 (10,1) | 13(15,1) | 73 (9,5) | 0,1468 |
| PRA** к классу 1 | 65 (7,3) | 235 (28,5) | 23 (26,7) | 212 (28,7) | 0,7956 |
| PRA** к классу II | 391 (44,0) | 195 (39,2) | 30 (41,1) | 165 (38,8) | 0,8121 |
| Анамнез диабета | 0 (0,0) | 103 (11,6) | 9 (10,5) | 94 (11,7) | 0,8693 |
| Анамнез | |||||
| повышенного | 0 (0,0) | 613 (69,0) | 62 (72,1) | 551 (68,6) | 0,5896 |
| кровяного давления Сердечнососудистый Анамнез Т рансплантат Трансплантат почка- | 0 (0,0) | 127 (14,3) | 7(8,1) | 120 (14,9) | 0,1207 |
| поджелудочная | 0 (0,0) | 96 (10,8) | 12 (14,0) | 84 (10,5) | 0,4185 |
| железа | |||||
| Срок трансплантата | 0 (0,0) | 0,0473* | |||
| 1985-1989 | 351 (39,5) | 43 (50,0) | 308 (38,4) | ||
| 1990-1999 | 538 (60,5) | 43 (50,0) | 495 (61,6) | ||
| Отсроченная функция трансплантата (ОФТ) | 21 (2,4) | 363 (41,8) | 36 (42,91) | 327 (41,7) | 0,9312 |
| Холодовая ишемия > 36 ч | 12(1,3) | 413(47,1) | 44 (51,8) | 369 (46,6) | 0,4273 |
| Трупный донор | 0 (0,0) | 863 (97,1) | 83 (96,5) | 780 (97,1) | 0,7326 |
- 13 038968
| Число несовместимости HLA | 2 (0,2) | 431 (48,6) | 35 (40,7) | 396 (49,4) | 0,1534 |
| Донор | |||||
| Мужчина | 1 (0,1) | 639 (71,9) | 67 (77,9) | 572 (71,2) | 0,2371 |
| Возраст > 55 лет | о (0,0) | 90 (10,1) | 4 (4,7) | 86 (10,7) | 0,1136 |
| Возраст > 40 лет | о (0,0) | 325 (36,6) | 21 (24,4) | 304 (37,9) | 0,0192* |
| Креатинин > 133 мкмоль/л | 338 (38,0) | 98(17,8) | 7 (15,2) | 91 (18,0) | 0,7837 |
| Сосудистая причина смерти | 35 (3,9) | 266 (31,1) | 19 (7,1) | 247 (18,0) | 0,0982 |
| Лечение | |||||
| Кортикоиды | 0 (0,0) | 760 (85,5) | 79 (91,9) | 681 (84,8) | 0,1087 |
** ΤΛΤΊ A
PRA - панель реактивных антител
Таблица B
| Параметр | Соотношение вреда (СВ) | 95 % CI | Р |
| Реципиент | |||
| пол (мужчины/женщины) | 1,38 | [1,12; 1,69] | 0,0021* |
| возраст (> 55 / < 55) | 0,94 | [0,75; 1,18] | 0,6062 |
| Индекс массы тела | 0,7158 | ||
| Худой/нормальный | 0,98 | [0,69; 1,39] | 0,8940 |
| Тучный/нормальный | 1,21 | [0,75; 1,95] | 0,4270 |
| Реккурентное исходное заболевание (да / нет) | 1,19 | [0,96; 1,48] | 0,1103* |
| Превентивный диализ (да/нет) | 0,81 | [0,58; 1,13] | 0,2222 |
| PRA** класса I (да/нет) | 1,34 | [1,08; 1,66] | 0,0082* |
| PRA** класа II (да/нет) | 1,33 | [1,04; 1,70] | 0,0229* |
| Анамнез диабета (да/нет) | 0,82 | [0,59; 1,14] | 0,2278 |
| Анамнез повышенного кровяного давления (да/нет) | 1,16 | [0,93; 1,45] | 0,1784* |
| Сердечнососудистый анамнез (да/нет) | 0,96 | [0,72; 1,26] | 0,7487 |
| Сывороточная болезнь (да/нет) | 0,0233* | ||
| До 10 лет | 0,89 | [0,59; 1,35] | 0,5910 |
| После 10 лет | 1,85 | [1,18; 2,91] | 0,0072* |
| Возникновение отторжения (да/нет) | 2,62 | [2,14; 3,21] | < 0,0001* |
| Трансплантат | |||
| Тип трансплантата (почкаподжелудочная железа/только почка) | 0,80 | [0,56; 1,12] | 0,1900* |
| Срок трансплантата (> 1990 / < 1990) | 0,82 | [0,67; 1,00] | 0,0462* |
| Отсроченная функция трансплантата (ОФТ) (да/нет) | 1,33 | [1,09; 1,62] | 0,0055* |
- 14 038968
| Холодовая ишемия (> 36 ч / < 36 ч) | 1,16 | [0,95; 1,41] | 0,1356* |
| Взаимоотношение донор-реципиент (трупный донор/живой донор) | 1,04 | [0,62; 1,75] | 0,8705 |
| Число несовместимости HLA (> 4 / < 4) | 0,83 | [0,68; 1,01] | 0,0623* |
| Донор | |||
| Пол (мужчины/женщины) | 0,93 | [0,75; 1,15] | 0,5063 |
| Возраст (10 лет) | 1,16 | [1,09; 1,25] | <0,0001* |
| креатинин (> 133 мкмоль/л /<133 мкмоль/л) | 1,18 | [0,84; 1,66] | 0,3392 |
| Причина смерти (сосудистая/другая) | 1,25 | [1,01; 1,55] | 0,0380* |
| Лечение | |||
| Кортикоиды (да/нет) | 0,34 | [0,27; 0,44] | <0,0001* |
одновариантный анализ. Значимые параметры (p<0.20)
PRA - панель реактивных антител
Таблица C
| Параметр | Отношение рисков (HR) | 95 % Cl | Р |
| Пол реципиента (мужчины/женщины) | 1,39 | [1,12; 1,73] | 0,0027* |
| Возраст реципиента (> 55 / < 55) | 1,03 | [0,805; 1,31] | 0,8427 |
| PRA** класса I (да/нет) | 1,51 | [1,20; 1,89] | 0,0004* |
| Сывороточная болезнь (да/нет) | 0,0233* | ||
| До 10 лет | 0,90 | [0,59; 1,39] | 0,6430 |
| После 10 лет | 1,72 | [1,08; 2,72] | 0,0218* |
| Возникновение острого отторжения (да/нет) | 2,86 | [2,29; 3,57] | <0,0001* |
| Срок трансплантата (> 1990 / < 1990) | 1,06 | [0,84; 1,33] | 0,6278* |
| Холодовая ишемия (> 36 ч / < 36 ч) | 1,25 | [1,02; 1,54] | 0,0322* |
| Число несовместимости HLA (> 4 / < 4) | 0,82 | [0,67; 1,01] | 0,0587* |
| Возраст (10 лет) | 1,26 | [1,17; 1,36] | < 0,0001* |
| Кортикоиды (да/нет) | 0,26 | [0,20; 0,35] | <0,0001* |
Многовариантный анализ. Значимые параметры (p<0.05)
PRA: панель реактивных антител
Комментарии.
Относительно этих клинических данных (см. фиг. 3) авторы изобретения показали, что возникновение сывороточной болезни представляет собой независимую переменную, связанную с поздней утратой трансплантата.
Более того, авторы изобретения показали, что относительный риск (СВ для соотношения вреда) указанной сывороточной болезни оценивается числом 2 после острого отторжения и более высок, чем для всех тестируемых параметров.
И, наконец, авторы изобретения наблюдали статистически значимую взаимосвязь между сывороточной болезнью и повышением целых IgG антител к Neu5Gc спустя годы после трансплантации.
Claims (10)
1. Композиция антилимфоцитарной сыворотки (АЛС) к лимфоцитам человека для предупреждения или лечения отторжения трансплантата, реакции трансплантат против хозяина или посттрансплантационных заболеваний, связанных с иммунным комплексом (ИК), у пациента-человека, где композиция АЛС содержит поликлональные антитела к лимфоцитам человека, причем поликлональные антитела ли-
- 15 038968 шены антигенных детерминант - N-гликольнейраминовой кислоты (Neu5Gc) и а-1,3-галактозы - и содержат по меньшей мере одну сахарную группу, отличную от N-гликольнейраминовой кислоты (Neu5Gc) и а-1,3-галактозы.
2. Композиция сыворотки с антитимоцитарным глобулином (АТГ) к тимоцитам человека для предотвращения или лечения отторжения трансплантата, реакции трансплантат против хозяина или посттрансплантационных заболеваний, связанных с иммунным комплексом (ИК), у пациента-человека, где композиция АТГ содержит поликлональные антитела к тимоцитам человека, причем поликлональные антитела лишены антигенных детерминант - N-гликольнейраминовой кислоты (Neu5Gc) и α-1,3галактозы - и содержат по меньшей мере одну сахарную группу, отличную от N-гликольнейраминовой кислоты (Neu5Gc) и а-1,3-галактозы.
3. Способ получения поликлональных антител композиции по п.1 или 2, включающий этапы:
a) обеспечение генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-N-ацетилнейраминовой кислоты (СМАН), и ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу;
b) иммунизация указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, к лимфоцитам человека или тимоцитам человека путем инъецирования млекопитающему, не являющемуся человеком, раствора, содержащего лимфоциты человека или тимоциты человека; и
c) сбор антител, содержащихся в жидкости организма указанного генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, с этапа b) с получением таким образом композиции, содержащей поликлональные антитела.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что указанная жидкость организма выбрана из группы, содержащей плазму крови и сыворотку крови.
5. Способ по п.3 или 4, отличающийся тем, что указанное млекопитающее, не являющееся человеком, представляет собой свинью.
6. Применение генетически измененного млекопитающего, не являющегося человеком, утратившего ген, кодирующий функциональную гидролазу цитидин-5'-монофосфат-N-ацетилнейраминовой кислоты (СМАН), и ген, кодирующий функциональную а-(1,3)-галактозилтрансферазу, для получения антилимфоцитарной сыворотки (АЛС), как определено в п.1, или сыворотки с антитимоцитарным глобулином (АТГ), как определено в п.2.
7. Применение композиции по п.1 или 2 (i) для предупреждения или лечения заболевания, выбранного из группы, содержащей отторжение трансплантата и реакцию трансплантат против хозяина, или (ii) для предупреждения посттрансплантационных заболеваний, связанных с иммунным комплексом (ИК).
8. Применение по п.7, где посттрансплантационное заболевание, связанное с иммунным комплексом (ИК), представляет собой сывороточную болезнь, кожную сыпь или лихорадку.
9. Способ предупреждения или лечения отторжения трансплантата, реакции трансплантат против хозяина и посттрансплантационных заболеваний, связанных с иммунным комплексом (ИК), у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение указанному субъекту композиции по п.1 или 2.
10. Способ по п.9, где посттрансплантационное ИК-связанное заболевание выбрано из группы, состоящей из сывороточной болезни, кожной сыпи и лихорадки.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP13305507 | 2013-04-18 | ||
| PCT/IB2014/060813 WO2014170867A1 (en) | 2013-04-18 | 2014-04-17 | Composition with reduced immunogenicity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201591933A1 EA201591933A1 (ru) | 2016-02-29 |
| EA038968B1 true EA038968B1 (ru) | 2021-11-16 |
Family
ID=48227107
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201591933A EA038968B1 (ru) | 2013-04-18 | 2014-04-17 | Композиция с пониженной иммуногенностью |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11084871B2 (ru) |
| EP (1) | EP2986639B1 (ru) |
| CN (1) | CN105263960B (ru) |
| AU (1) | AU2014255285B2 (ru) |
| CA (1) | CA2909139C (ru) |
| EA (1) | EA038968B1 (ru) |
| ES (1) | ES2894837T3 (ru) |
| PL (1) | PL2986639T3 (ru) |
| WO (1) | WO2014170867A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201507770B (ru) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2963437A1 (en) | 2014-10-15 | 2016-04-21 | Xenothera | Composition with reduced immunogenicity |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0388151A1 (en) * | 1989-03-13 | 1990-09-19 | Celltech Limited | Modified antibodies |
| WO2003097812A2 (en) * | 2002-05-17 | 2003-11-27 | Hematech, Llc | Transgenic ungulates capable of human antibody production |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2629347B1 (fr) | 1988-04-01 | 1991-06-14 | Merieux Inst | Procede de preparation d'un serum antilymphocytaire par immunisation d'animaux a l'aide d'un clone de lymphoblaste t humain, et serum antilymphocytaire ainsi obtenu |
| JPH07155194A (ja) | 1993-12-10 | 1995-06-20 | Teijin Ltd | タンパク質の精製法 |
| US7547816B2 (en) | 2001-12-21 | 2009-06-16 | The Curators Of The University Of Missouri | α(1,3)-galactosyltransferase knockout swine, tissues and organs |
| EP1472275B1 (en) | 2002-02-05 | 2008-12-17 | Genentech, Inc. | Protein purification |
| PT1601697E (pt) | 2003-02-28 | 2007-09-04 | Lonza Biologics Plc | Purificação de anticorpos através de proteína a e cromatografia de troca iónica. |
| AU2005274649B2 (en) | 2004-08-19 | 2010-09-09 | University College Cardiff Consultants Limited | Preparation of antigen-presenting human gamma delta T cells and use in immunotherapy |
| US8232448B2 (en) | 2005-06-08 | 2012-07-31 | The Regents Of The University Of California | Transgenic mouse with a homozygous mutation in the CMAH gene |
| NZ572379A (en) | 2006-04-05 | 2012-06-29 | Univ Rockefeller | Polypeptides with enhanced anti-inflammatory and decreased cytotoxic properties and relating methods |
| CN101646775B (zh) * | 2006-12-28 | 2016-08-24 | 森托科尔奥索生物科技公司 | 用于产生脱唾液酸化免疫球蛋白的方法和载体 |
| FR2942233B1 (fr) | 2009-02-19 | 2015-03-13 | Lfb Biotechnologies | Moyens pour la purification d'une proteine du plasma sanguin, et procedes pour sa mise en oeuvre |
| CN102893154A (zh) * | 2010-01-15 | 2013-01-23 | 加利福尼亚大学董事会 | 用于检测癌症的组合物和方法 |
| JP2014520533A (ja) * | 2011-06-30 | 2014-08-25 | シグマ−アルドリッチ・カンパニー・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | Ｃｍｐ−ｎ−アセチルノイラミン酸ヒドロキシラーゼおよび／または糖タンパク質アルファ−１，３−ガラクトシルトランスフェラーゼを欠損する細胞 |
| CA2963437A1 (en) * | 2014-10-15 | 2016-04-21 | Xenothera | Composition with reduced immunogenicity |
-
2014
- 2014-04-17 CA CA2909139A patent/CA2909139C/en active Active
- 2014-04-17 ES ES14728313T patent/ES2894837T3/es active Active
- 2014-04-17 CN CN201480032734.6A patent/CN105263960B/zh active Active
- 2014-04-17 PL PL14728313T patent/PL2986639T3/pl unknown
- 2014-04-17 EA EA201591933A patent/EA038968B1/ru unknown
- 2014-04-17 AU AU2014255285A patent/AU2014255285B2/en active Active
- 2014-04-17 WO PCT/IB2014/060813 patent/WO2014170867A1/en active Application Filing
- 2014-04-17 EP EP14728313.9A patent/EP2986639B1/en active Active
- 2014-04-17 US US14/785,138 patent/US11084871B2/en active Active
-
2015
- 2015-10-16 ZA ZA2015/07770A patent/ZA201507770B/en unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0388151A1 (en) * | 1989-03-13 | 1990-09-19 | Celltech Limited | Modified antibodies |
| WO2003097812A2 (en) * | 2002-05-17 | 2003-11-27 | Hematech, Llc | Transgenic ungulates capable of human antibody production |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ANDREW J. LUTZ, PING LI, JOSE L. ESTRADA, RICHARD A. SIDNER, RAY K. CHIHARA, SUSAN M. DOWNEY, CHRISTOPHER BURLAK, ZHENG-YU WANG, L: "Double knockout pigs deficient in N-glycolylneuraminic acid and Galactose α-1,3-Galactose reduce the humoral barrier to xenotransplantation", XENOTRANSPLANTATION, MUNKSGAARD, vol. 20, no. 1, 5 January 2013 (2013-01-05), pages 27 - 35, XP055069928, ISSN: 0908665X, DOI: 10.1111/xen.12019 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2014255285B2 (en) | 2019-07-11 |
| CN105263960A (zh) | 2016-01-20 |
| WO2014170867A1 (en) | 2014-10-23 |
| EA201591933A1 (ru) | 2016-02-29 |
| US20160075770A1 (en) | 2016-03-17 |
| EP2986639A1 (en) | 2016-02-24 |
| CA2909139C (en) | 2021-07-06 |
| AU2014255285A1 (en) | 2015-11-12 |
| US11084871B2 (en) | 2021-08-10 |
| CN105263960B (zh) | 2020-05-22 |
| EP2986639B1 (en) | 2021-08-11 |
| CA2909139A1 (en) | 2014-10-23 |
| ZA201507770B (en) | 2017-02-22 |
| PL2986639T3 (pl) | 2022-01-10 |
| ES2894837T3 (es) | 2022-02-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108064182B (zh) | 采用抗cd38抗体的联合疗法 | |
| KR101935088B1 (ko) | Ror1 암을 치료하고 전이를 저해하는데 이용을 위한 항체와 백신 | |
| JP7015820B2 (ja) | 薬物としての使用のための抗ｃｄ４５ｒｃ抗体 | |
| TWI507416B (zh) | 抗ｃｄ４８抗體及其用途 | |
| JP7324565B2 (ja) | Ｃｄ１２７に対する抗体 | |
| CN116284402A (zh) | 仅有重链的抗bcma抗体 | |
| JP2010526153A (ja) | Ｇｉ症候群及び移植片対宿主病を治療及び予防する方法 | |
| JP6900051B2 (ja) | Ｃｌａｕｄｉｎ ５抗体、及びその抗体を含有する医薬 | |
| US20200376118A1 (en) | A B Cell Depleting Agent for the Treatment of Atherosclerosis | |
| Baranyi et al. | Transgenic rabbits that overexpress the neonatal Fc receptor (FcRn) generate higher quantities and improved qualities of anti-thymocyte globulin (ATG) | |
| CN111201034A (zh) | 涉及施用抗ccr5受体试剂的治疗或预防移植物抗宿主病的方法 | |
| EA038968B1 (ru) | Композиция с пониженной иммуногенностью | |
| US20210236512A1 (en) | Clozapine for the treatment of a immunoglobulin driven b cell disease | |
| US20220227869A1 (en) | Association of polyclonal antibodies and anti-pd1 or anti-pdl1 antibodies for th treatment of cancer | |
| KR20210132644A (ko) | 이식편 대 숙주 질환(GvHD)의 예방 또는 치료를 위한 항-CCR7 mAb의 용도 | |
| US9533039B2 (en) | Methods of treating systemic lupus erythematosus (SLE) using anti-CD48 antibodies | |
| US20240182589A1 (en) | Antibody and use thereof for the treatment of cancer | |
| WO2024073700A2 (en) | Methods of treating autoimmune disorders using multimeric anti-cd20/anti-cd3 antibodies | |
| Cheong | Immunopathogenesis of childhood idiopathic nephrotic syndrome | |
| Lobo et al. | Natural IgM switches the function of LPS activated murine bone marrow dendritic cells (BMDC) to a “regulatory” DC that suppresses innate inflammation | |
| O'Quinn | The roles of leukocyte cell adhesion molecules in mucosal inflammation | |
| Thuc-vy | B cell clonal abundance and MAdCAM-1 mediate affinity maturation and fate of germinal center B cells |