EA038864B1 - Вакцинная композиция против опоясывающего герпеса - Google Patents
Вакцинная композиция против опоясывающего герпеса Download PDFInfo
- Publication number
- EA038864B1 EA038864B1 EA201991575A EA201991575A EA038864B1 EA 038864 B1 EA038864 B1 EA 038864B1 EA 201991575 A EA201991575 A EA 201991575A EA 201991575 A EA201991575 A EA 201991575A EA 038864 B1 EA038864 B1 EA 038864B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- sla
- vaccine composition
- antigen
- vzv
- specific
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 93
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 65
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 title claims abstract description 36
- YGPZYYDTPXVBRA-RTDBHSBRSA-N [(2r,3s,4r,5r,6s)-2-[[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-[[(3r)-3-dodecanoyloxytetradecanoyl]amino]-6-(hydroxymethyl)-5-phosphonooxy-4-[(3r)-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl]oxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,6-dihydroxy-5-[[(3r)-3-hydroxytetradecanoyl]amino]oxan-4-yl] (3r)-3-hydr Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](O)O1 YGPZYYDTPXVBRA-RTDBHSBRSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 101000807236 Human cytomegalovirus (strain AD169) Membrane glycoprotein US3 Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 19
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 claims description 14
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 13
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 12
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 claims description 8
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 claims description 6
- 125000001400 nonyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 125000006538 C11 alkyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 abstract description 71
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 abstract 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 70
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 70
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 70
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 48
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 48
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 47
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 47
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 44
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 44
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 37
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 30
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 28
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 28
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 25
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 22
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 21
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 17
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 16
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 15
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 13
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 11
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 10
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 10
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 10
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 9
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 7
- YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]propan-1-one Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)CCC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 6
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 6
- 101710134694 Transcriptional regulator ICP22 homolog Proteins 0.000 description 6
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 6
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 6
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- OEDPHAKKZGDBEV-GFPBKZJXSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2r)-3-[2,3-di(hexadecanoyloxy)propylsulfanyl]-2-(hexadecanoylamino)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)CSCC(COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC OEDPHAKKZGDBEV-GFPBKZJXSA-N 0.000 description 5
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 5
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 5
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 229940124590 live attenuated vaccine Drugs 0.000 description 5
- 229940023012 live-attenuated vaccine Drugs 0.000 description 5
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 5
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 4
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 4
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 4
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 4
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 4
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical group [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 4
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 4
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 4
- VQWNELVFHZRFIB-UHFFFAOYSA-N odn 1826 Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1C(O1)CC(O)C1COP(O)(=O)OC1CC(N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OC1COP(O)(=O)OC1CC(N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OC1COP(O)(=O)OC1CC(N2C(N=C(N)C=C2)=O)OC1COP(O)(=O)OC1CC(N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)OC1COP(O)(=O)OC1CC(N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OC1COP(O)(=O)OC1CC(N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OC1COP(O)(=O)OC1CC(N2C(N=C(N)C=C2)=O)OC1COP(O)(=O)OC1CC(N2C(N=C(N)C=C2)=O)OC1COP(O)(=O)OC1CC(N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OC1COP(O)(=O)OC(C(O1)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(O)=O)CC1N1C=C(C)C(=O)NC1=O VQWNELVFHZRFIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 4
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- 108010040721 Flagellin Proteins 0.000 description 3
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 3
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 3
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 3
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DEXFNLNNUZKHNO-UHFFFAOYSA-N 6-[3-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperidin-1-yl]-3-oxopropyl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1CCN(CC1)C(CCC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1)=O DEXFNLNNUZKHNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 2
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241001644525 Nastus productus Species 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 206010036376 Postherpetic Neuralgia Diseases 0.000 description 2
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- -1 fish oils Substances 0.000 description 2
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 2
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 description 2
- YYGNTYWPHWGJRM-AAJYLUCBSA-N squalene group Chemical group CC(C)=CCC\C(\C)=C\CC\C(\C)=C\CC\C=C(/C)\CC\C=C(/C)\CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-AAJYLUCBSA-N 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 2
- YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 7-aminoactinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=C(N)C=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 0.000 description 1
- 108700012813 7-aminoactinomycin D Proteins 0.000 description 1
- 241000710929 Alphavirus Species 0.000 description 1
- 108010001779 Ancrod Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000700586 Herpesviridae Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229930191564 Monensin Natural products 0.000 description 1
- GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N Monensin A Natural products O1C(CC)(C2C(CC(O2)C2C(CC(C)C(O)(CO)O2)C)C)CCC1C(O1)(C)CCC21CC(O)C(C)C(C(C)C(OC)C(C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 102000008235 Toll-Like Receptor 9 Human genes 0.000 description 1
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 101900123149 Varicella-zoster virus Envelope glycoprotein E Proteins 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 229940031567 attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000005059 dormancy Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229940013317 fish oils Drugs 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005358 monensin Drugs 0.000 description 1
- GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N monensin A Chemical compound C([C@@](O1)(C)[C@H]2CC[C@@](O2)(CC)[C@H]2[C@H](C[C@@H](O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)C[C@@]21C[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](OC)[C@H](C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- 239000007908 nanoemulsion Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229940115272 polyinosinic:polycytidylic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000010686 shark liver oil Substances 0.000 description 1
- 229940069764 shark liver oil Drugs 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 125000003523 triterpene group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 230000008478 viral entry into host cell Effects 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 244000000009 viral human pathogen Species 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
- A61K39/25—Varicella-zoster virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/01—Hydrocarbons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7024—Esters of saccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6018—Lipids, e.g. in lipopeptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Oncology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к вакцинной композиции против опоясывающего герпеса, которая содержит гликопротеин Е из вируса ветряной оспы, глюкопиранозильный липидный адъювант и поддающееся метаболизму масло и селективно увеличивает опосредованную клетками иммунную реакцию без наличия недостатков живых ослабленных вакцин, таким образом, имеет высокую безопасность и сильный профилактический эффект против опоясывающего герпеса.
Description
Область техники
Настоящее изобретение относится к вакцинной композиции для профилактикиопоясывающего герпеса.
Уровень техники
Первичная инфекция вирусом ветряной оспы - опоясывающего герпеса (VZV) вызывает ветряную оспу, характеризующуюся высокозаразной кожной сыпью, в основном на лице и туловище. После первоначальной инфекции вирусная ДНК может оставаться спящей в течение нескольких лет в цитоплазме нейрональной клетки хозяина. Вирус может быть реактивирован для вызова опоясывающего герпеса (зостер или опоясывающего лишая) у взрослых.
Опоясывающий герпес вызывает кожную сыпь, отличную от сыпи, образуемой в ходе первичной инфекции. Высыпания сопровождаются тяжелой болью и могут приводить к более тяжелым состояниям, таким как постгерпетическая невралгия (PHN).
Вирус ветряной оспы - опоясывающего герпеса (VZV), также известный как вирус герпеса 3 человека (HHV-3), является членом подсемейства альфавируса герпеса из семейства Herpesviridae. VZV представляет собой оболочечный вирус с двухцепочечным ДНК-геномом из приблизительно 125000 нуклеотидов. Геном VZV заключен в икосаэдрический нуклеокапсид. Вирусный тегумент (покровный слой), локализованный в пространстве между нуклеокапсидом и вирусной оболочкой, представляет собой конструкцию, состоящую из кодируемых вирусом белков и ферментов. Вирусная оболочка происходит из мембран клетки-хозяина и содержит кодирумые вирусом гликопротеины.
Геном VZV кодирует семьдесят (70) или более открытых рамок считывания (ORF), девять (9) из которых кодируют гликопротеины (gE, gI, gB, gH, gK, gN, gL, gC и gM), которые считают функционирующими на различных стадиях цикла репликации вируса.
Гликопротеин Е (gE) является необходимым для репликации вируса (Mallory et al. (1997) J. Virol. 71: 8279-8288) и Mo et al. (2002) Virology 304: 176-186), и является наиболее распространенным гликопротеином, обнаруженным в инфицированных клетках, так же как в зрелых вирионах (Grose, 2002, The predominant varicella-zoster virus gE and gI glycoprotein complex, In Structure-function relationships of human pathogenic viruses, Holzenburg and Bogner (eds.), Kluwer Academic/Plenum Publishers, New York, NY).
Гликопротеин I (gI) формирует комплекс с gE в инфицированных клетках, таким образом, стимулируя эндоцитоз обоих гликопротеинов, которые затем доставляются в транс-Гольджи, где образуется окончательная вирусная оболочка (Olson and Grose (1998) J. Virol. 72: 1542-1551).
Гликопротеин В (gB), который, как считается, играют важную роль в проникновении вируса, имеет эпитоп для нейтрализующего вирус антитела и является вторым из наиболее распространенных гликопротеинов на поверхности вириона (Arvin (1996) Clin. Microbiol. Rev. 9: 361-381).
Считается, что гликопротеин Н (gH) выполняет функцию слияния, способствующую распространению вируса от клетки к клетке.
В настоящее время живые аттенуированные вакцины, общеупотребительные для профилактики ветряной оспы или опоясывающего герпеса, имеют несколько недостатков. Во-первых, существуют некоторые доказательства того, что иммунитет против инфекции VZV уменьшается с течением времени, и эффект вакцины исчезает (Chaves et al. (2007) N. Engl. J. Med. 356: 1121-1129). Таким образом, пациенты, вакцинированные с использованием вакцины, могут оставаться чувствительными к опоясывающему герпесу, который является более тяжелым состоянием, вызванным VZV. Кроме того, аттенуированные живые вакцины получают с использованием живых вирусов с ослабленной патогенностью, так что вакцинированные пациенты могут становиться чувствительными к ветряной оспе или опоясывающему герпесу из-за вакцинации. Фактически, существует несколько опубликованных случаев опоясывающего герпеса, вызванных штаммом вируса, использованным в вакцине (Matsubara et al. (1995) Acta Paediatr Jpn 37: 64850; и Hammerschlag et al. (1989) J Infect Dis. 160: 535-7). Кроме того, из-за живого ослабленного вируса, присутствующего в вакцине, использование вакцин может быть ограничено для пациентов, иммунная функция которых уменьшена.
Для увеличения эффекта профилактики опоясывающего герпеса, повторно возникающего в нейрональных клетках после спящего состояния вируса, является важным значительно усиливать активацию опосредованного клетками иммунитета (CMI) против антигена VZV вместо активации гуморального иммунитета против него. Для этого является важным увеличивать соотношение Th1/Th2 посредством стимуляции активации Th1 среди Th1 и Th2, которые представляют собой Т-клетки (Т-клетки-помощники).
Таким образом, существует необходимость разработки новых вакцинных композиций против опоясывающего герпеса, которые могут селективно увеличивать опосредованный клетками иммунный ответ без наличия недостатков живых ослабленных вакцин.
Описание изобретения Техническая задача
Целью настоящего изобретения является получение вакцинной композиции, имеющей высокую безопасность и отличный эффект профилактики опоясывающего герпеса, которая селективно увеличивает опосредованный клетками иммунный ответ без недостатков живых ослабленных вакцин.
- 1 038864
Решение задачи
1. Вакцинная композиция против ветряной оспы или опоясывающего герпеса, содержащая гликопротеин Е из вируса ветряной оспы - опоясывающего герпеса; глюкопиранозильный липидный адъювант следующей формулы 1 и поддающееся метаболизму масло:
Формула 1 где каждый из R1, R3, R5 и R6 независимо представляют собой C10-C12 алкил и каждый из R2 и R4 независимо представляют собой C8-C14 алкил.
2. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.1, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант представляет собой адъювант формулы 1, где R1, R3, R5 и R6 представляют собой С11 алкил.
3. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.1, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант представляет собой адъювант формулы 1, где R2 и R4 представляют собой C13 алкил.
4. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.1, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант представляет собой адъювант формулы 1, где R2 и R4 представляют собой С9 алкил.
5. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.1, в которой поддающееся метаболизму масло представляет собой сквален.
6. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.5, в которой сквален содержится в количестве 1% (об./об.) - 7% (об./об.) от всей вакцинной композиции.
7. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.6, в которой сквален содержится в количестве 1% (об./об.) - 4% (об./об.) от всей вакцинной композиции.
8. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.1, в которой гликопротеин Е содержится в количестве 5 мкг - 100 мкг в однократной дозе вакцинной композиции.
9. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.1, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант содержится в количестве 7,5-20 мкг в однократной дозе вакцинной композиции.
10. Вакцинная композиция по вышеуказанному п.9, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант содержится в количестве 9-18 мкг в однократной дозе вакцинной композиции.
11. Способ профилактики или лечения ветряной оспы или опоясывающего герпеса, включающий введение композиции по любому из вышеуказанных пп.1-10 пациенту.
Выгодные эффекты изобретения
Вакцинная композиция по настоящему изобретению отлично подходит для профилактики опоясывающего герпеса.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению значительно увеличивает опосредованный клетками иммунный ответ против антигена VZV по сравнению с гуморальным иммунным ответом против него.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению сильно увеличивает количество Th1-клеток, продуцирующих два или более специфических для Th1 цитокинов.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению сильно увеличивает продукцию IgG2c по сравнению с продукцией IgG1.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению не имеет возможности инфицировать пациента опоясывающим герпесом из-за вакцинации.
Вакцинную композицию по настоящему изобретению можно вводить пациентам, иммунная функция которых нарушена.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению имеет длительный профилактический эффект.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 проиллюстрирована продукция специфических для антигена gE IgG, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 3.
На фиг. 2 изображена продукция специфических для антигена gE IgG2c и IgG1, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 3.
На фиг. 3 показано количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ специфическим по отношению к белку gE образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 4.
На фиг. 4 показано количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ специфическим по отношению к перекрывающемуся с gE пептидом образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального
- 2 038864 примера 4.
На фиг. 5 показано количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ специфическим по отношению к полноразмерному VZV образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 4.
На фиг. 6 представлено количество различных Th-цитокинов, секретируемых специфическим по отношению к антигену gE образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 5.
На фиг. 7 показано распределение специфических для антигена gE секретирующих цитокины клеток, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 6.
На фиг. 8 проиллюстрирована продукция специфических для антигена VZV IgG, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 7.
На фиг. 9 изображена продукция специфических для антигена VZV IgG2c и IgG1, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 7.
На фиг. 10 показано количество IFN-γ, секретированного специфическим по отношению к полноразмерному VZV образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 8.
На фиг. 11 показано распределение специфических для антигена VZV секретирующих цитокины клеток, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 9.
На фиг. 12 показана продукция специфических для антигена VZV IgG, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 10, и количество Т-клеток, специфических для gE или полноразмерного VZV, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 2-2.
На фиг. 13 представлена продукция специфических для антигена gE IgG, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 11.
На фиг. 14 показана продукция специфических для антигена gE IgG2c и IgG1, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 11.
На фиг. 15 проиллюстрировано количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ специфическим по отношению к белку gE образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 12.
На фиг. 16 показано количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ специфическим по отношению к перекрывающемуся с gE пептидом образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 12.
На фиг. 17 показано количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ специфическим по отношению к антигену VZV образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 12.
На фиг. 18 показано количество IFN-γ, секретированное в результате стимуляции белком gE, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 13.
На фиг. 19 показано количество IFN-γ, секретированное в результате стимуляции перекрывающимся с gE пептидом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 13.
На фиг. 20 представлено количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ специфическим по отношению к белку gE образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 14.
На фиг. 21 показано количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ специфическим по отношению к полноразмерному VZV образом, в соответствии с экспериментом из экспериментального примера 14.
Наилучший способ осуществления изобретения
Настоящее изобретение относится к вакцинной композиции против опоясывающего герпеса, которая содержит гликопротеин Е из вируса ветряной оспы - опоясывающего герпеса, глюкопиранозильный липидный адъювант и поддающееся метаболизму масло, и имеет высокую безопасность и отличный эффект профилактики опоясывающего герпеса посредством селективного увеличения опосредованного клетками иммунного ответа без недостатков живых ослабленных вакцин.
Далее в настоящем описании настоящее изобретение описано подробно.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению содержит гликопротеин Е из вируса ветряной оспы - опоясывающего герпеса (VZV), глюкопиранозильный липидный адъювант следующей формулы 1 и поддающееся метаболизму масло
R6
Формула 1 где каждый из R1, R3, R5 и R6 независимо представляют собой C10-C12 алкил; и каждый из R2 и R4 независимо представляют собой C8-C14 алкил.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению содержит гликопротеин Е (gE) из VZV. Гликопротеин Е (gE) по настоящему изобретению обозначает гликопротеин Е из VZV или его иммуногенное
- 3 038864 производное. Иммуногенное производное по настоящему изобретению может представлять собой производное, где часть гликопротеина Е является модифицированной. Например, оно может представлять собой производное, где часть гликопротеина Е обрезана, одна или несколько аминокислот гликопротеина Е заменены на другие аминокислоты, одна или несколько аминокислот гликопротеина Е удалены, одна или несколько аминокислот добавлены к гликопротеину Е, или одна или несколько аминокислот гликопротеина Е химически модифицированы. Например, гликопротеин Е по настоящему изобретению может быть представлен последовательностью из SEQ ID NO: 1.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению содержит глюкопиранозильный липидный адъювант следующей формулы 1 и поддающееся метаболизму масло о .он НО-Р-О— он 'vlXI\
R6
Формула 1 где каждый из R1, R3, R5 независимо представляют собой C10-C12 алкил и каждый из R2 и R4 независимо представляют собой C8-C14 алкил. Например, R2 и R4 могут представлять собой С8 алкил, С9 алкил, С10 алкил, С11 алкил, С12 алкил, C13 алкил, или C14 алкил. В соответствии с более конкретным примером, R2 и R4 могут представлять собой С9 алкил или С13 алкил. Например, R2 и R4 могут представлять собой С9 алкил.
Термин поддающееся метаболизму масло, в рамках изобретения, обозначает масло, структура которого подвергается модификации посредством метаболизма, и включает растительные масла, рыбий жир, животные масла и синтетические масла, которые не имеют биологической токсичности и могут подвергаться структурным изменениям при прохождении метаболизма.
В соответствии с конкретным вариантом осуществления настоящего изобретения, поддающееся метаболизму масло по настоящему изобретению представляет собой сквален. Сквален представляет собой углеводород с тритерпеновым остовом, имеющим 30 атомов углерода. Множество скваленов являются общеизвестными в данной области для использования в качестве поддающихся метаболизму масел, или можно использовать эмульсии, например, сквалена из масла печени акулы. Иллюстративный состав сквалена описан в Fox CB et al. (2013) Vaccine 31 (49): 5848-55.
Для увеличения эффекта профилактики опоясывающего герпеса, является важным значительное увеличение активации опосредованного клетками иммунитета (CMI) против антигенов VZV, с минимизаций в то же время активации гуморального иммунитета против них.
Высокие уровни специфических для Th2-цитокинов благоприятствуют индукции гуморального иммунного ответа на представленный антиген, в то время как высокие уровни специфических для Th1цитокинов проявляют тенденцию к предпочтительной индукции опосредованного клетками иммунного ответа (CMI) на представленный антиген. Таким образом, чем больше специфических для Th1-цитокинов образуется по сравнению с специфическими для Th2-цитокинами, тем более высокой становится степень активации опосредованного клетками иммунного ответа по сравнению с гуморальным иммунным ответом.
А также, чем больше количество клеток, одновременно продуцирующих два или более цитокинов из IFN-γ, TNF-α и IL-2, тем выше степень активации опосредованного клетками иммунного ответа.
Кроме того, по мере того как степень активации опосредованного клетками иммунного ответа становится выше по сравнению со степенью активации гуморального иммунного ответа, продукция антитела IgG2c сильно увеличивается по сравнению с продукцией антитела IgG1.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению может сильно увеличивать степень активации опосредованного клетками иммунного ответа вместо степени активации гуморального иммунного ответа в организме пациента.
Например, вакцинная композиция по настоящему изобретению может значительно увеличивать продукцию специфических для Th1 цитокинов (например, интерферона-гамма (IFN-γ), фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) и интерлейкина-2 (IL-2)), по сравнению с продукцией специфических для Th2 цитокинов (например, интерлейкина-4 (IL-4), интерлейкина-6 (IL-6), интерлейкина-10 (IL-10) и т.п.), в организме пациента.
А также, например, вакцинная композиция по настоящему изобретению является способной сильно увеличивать количество клеток, одновременно продуцирующих два или более цитокинов из IFN-γ, TNFα и IL-2, по сравнению с количеством клеток, продуцирующим только один цитокин из вышеуказанных цитокинов, среди активированных Th1-клеток.
Кроме того, например, вакцинная композиция по настоящему изобретению может сильно увеличивать продукцию специфических для gE антител IgG в организме пациента, и в особенности, может силь- 4 038864 но увеличивать продукцию специфических для gE антител IgG2c по сравнению с продукцией специфических для gE антител IgG1.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению может содержать 5-100 мкг гликопротеина Е в однократной дозе. Например, она может содержать 5-80 мкг, конкретно, 5-70 мкг, более конкретно 5-60 мкг и наиболее конкретно 5-50 мкг гликопротеина Е в однократной дозе.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению может содержать 7,5-20 мкг, конкретно 9-18 мкг, более конкретно 9-16 мкг и наиболее конкретно 10-15 мкг глюкопиранозильного липидного адъюванта в однократной дозе. В соответствии с другим вариантом осуществления настоящего изобретения вакцинная композиция по настоящему изобретению может содержать 13-17 мкг глюкопиранозильного липидного адъюванта в однократной дозе. Когда глюкопиранозильный липидный адъювант включают в вышеуказанном диапазоне, опосредованный клетками иммунный ответ можно селективно максимизировать.
Вакцинная композиция по настоящему изобретению может содержать 1-7% (об./об.), более конкретно 1-5% (об./об.) и наиболее конкретно 1-4% (об./об.) поддающегося метаболизму масла в однократной дозе.
В дополнение к гликопротеину Е, глюкопиранозильному липидному адъюванту и поддающемуся метаболизму маслу вакцинная композиция по настоящему изобретению может включать фармацевтически приемлемые наполнители, носители и т.п. Например, вакцинная композиция по настоящему изобретению может содержать физиологический солевой раствор или PBS (фосфатно-солевой буфер).
Вакцинную композицию по настоящему изобретению можно составлять и упаковывать в различных формах. В соответствии с одним вариантом осуществления, первый флакон, содержащий гликопротеин Е, но не содержащий глюкопиранозильный липидный адъювант и поддающееся метаболизму масло, и второй флакон, содержащий глюкопиранозильный липидный адъювант и поддающееся метаболизму масло, но не содержащий гликопротеин Е, можно упаковывать по отдельности и смешивать перед использованием (смешивание на месте). В соответствии с другим вариантом осуществления, вакцинную композицию, содержащую все из гликопротеина Е, глюкопиранозильного липидного адъюванта и поддающегося метаболизму масла, можно упаковывать в флакон, шприц (предварительно заполненный шприц) или т.п.
Вариант осуществления изобретения
Далее в настоящем описании настоящее изобретение описано более подробно со ссылкой на экспериментальные примеры. Эти экспериментальные примеры предназначены только для иллюстрации настоящего изобретения, и объем настоящего изобретения не ограничен тем, что проиллюстрировано в этих экспериментальных примерах.
Экспериментальный пример 1: Иммунизация
Поскольку люди имеют историю инфекции ветряной оспы, для имитации инфекции ветряной оспы у мышей живую ослабленную вакцину (LAV, 3000 БОЕ) подкожно инъецировали один раз самкам мышей C57BL/6 для проведения первичной иммунизации (примирование LAV). Через 28 суток после примирования LAV (сутки 0) различные вакцинные композиции VZV, в присутствии или в отсутствие белкового иммуногена VZV или адъюванта, вводили посредством внутримышечной инъекции для проведения вторичной иммунизации.
Для измерения гуморального иммунного ответа на VZV образцы крови отбирали один раз в точке примирования LAV и через 28 суток и 42 суток после этого (сутки 0, сутки 28 и сутки 42) соответственно и лейкоциты собирали из образцов селезенки через 42 суток после примирования LAV (сутки 42) для измерения CMI (опосредованного клетками иммунного ответа) против VZV.
Дизайн эксперимента для первичной иммунизации (примирования LAV), вторичной иммунизации (иммунизации) и измерения иммунного ответа обобщен, как показано в табл. 1 ниже. В табл. 1 ниже gE обозначает гликопротеин Е VZV из SEQ ID NO: 1, LAV обозначает живой ослабленный вирус, SLA обозначает глюкопиранозильный липидный адъювант формулы 1, где R2 и R4 представляют собой С9 алкил, и SE обозначает сквален. SLA и сквален получены из Института исследования инфекционных заболеваний (Seattle, US) и Sigma-Aldrich (St. Louis, МО) соответственно.
Алюм. гидроксид представляет собой гидроксид алюминия; Addavax® представляет собой наноэмульсию масло-в-воде на основе сквалена; Pam3CSK4 представляет собой агонист TLR 1/2, синтетический триацилированный липопротеин номера CAS 112208-00-1; поли-IC представляет собой полиинозиновую-полицитидиловую кислоту; MPL представляет собой монофосфориллипид А; и ODN1826 представляет собой CpG олигонуклеотид класса В - мышиный лиганд TLR9. Кроме того, сутки иммунизации, сбора образцов крови и сбора образцов селезенки подсчитывали от суток 0 как суток примирования LAV.
- 5 038864
Таблица 1
| Группа | Первичная иммунизац ИЯ (примиров ание LAV*) | Вторичная иммунизация (иммунизация) | Сутки вторичной иммунизац ИИ | Сутки сбора образцов крови | Сутки сбора образцов селезенки | |
| Антиген | Адъювант | |||||
| PBS | только PBS | X | X | Сутки 28 | Сутки 0, Сутки 28, Сутки 42 | Сутки 42 |
| LAV (1 инъекция) | LAV | только PBS | X | |||
| LAV (2 инъекция) | LAV | LAV (15000 БОЕ) | X | |||
| дЕ | LAV | gE (5 мкг) | X | |||
| gE+SLA-AF | LAV | gE (5 мкг) | SLA (5 мкг) в водном составе | |||
| gE+SLA-SE | LAV | gE (5 мкг) | SLA (5 мкг)+ЗЕ (2%) | |||
| gE+SE | LAV | gE (5 мкг) | SE (2%) | |||
| дЕ+липосома | LAV | gE (5 мкг) | только липосома | |||
| gE+Addavax | LAV | gE (5 мкг) | Addavax (50%) | |||
| gE+MPL+QuilA | LAV | gE (5 мкг) | MPL (5 MKr)+QuilA (5 мкг) | |||
| gl+SLA-SE | LAV | gl (5 мкг) | SLA (5 мкг)+ЗЕ (2%) | |||
| IE63+SLA-SE | LAV | IE63 (5 мкг) | SLA (5 мкг)+ЗЕ (2%) | |||
| gB+SLA-SE | LAV | gB (5 мкг) | SLA (5 мкг)+ЗЕ (2%) | |||
| gC+SLA-SE | LAV | дС (5 мкг) | SLA (5 мкг)+ЗЕ (2%) | |||
| gL+SLA-SE | LAV | gL (5 мкг) | SLA (5 мкг)+ЗЕ (2%) | |||
| дЕ+гидроксид алюминия | LAV | дЕ (5 мкг) | Гидроксид алюминия (0,5 мг) |
| gE+Addavax | LAV | gE (5 мкг) | Addavax (50 мкл) | |||
| gE+Pam3CSK4 | LAV | gE (5 мкг) | Pam3CSK4 (11 мкг) | |||
| дЕ+поли-IC | LAV | gE (5 мкг) | поли-IC (55 мкг) | |||
| gE+MPL | LAV | gE (5 мкг) | MPL (11 мкг) | |||
| дЕ+флагеллин | LAV | gE (5 мкг) | Флагеллин (5,5 мкг) | |||
| дЕ+имиквимод | LAV | gE (5 мкг) | Имиквимод (55 мкг) | |||
| gE+ODN1826 | LAV | gE (5 мкг) | ODN1826 (35мкг) | |||
| *Первичная иммунизация (примирование LAV): Доза 100 мкл/голову. 3000 БОЕ *Вторичная иммунизация (иммунизация): Доза 100 мкл/голову |
Экспериментальный пример 2: Экспериментальные способы
Экспериментальный пример 2-1: Способ измерения титра специфических для антигена VZV IgG (титра специфических для VZV IgG)
После проведения первичной иммунизации и вторичной иммунизации, проводили ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ) для измерения титра специфических для антигена VZV IgG. Рекомбинантным белком gE или антигеном VZV (1 мкг/мл) покрывали планшет для ELISA и инкубировали в течение ночи при 4°С. Планшет для ELISA промывали три раза и проводили блокирование с использованием раствора PBS (фосфатно-солевого буфера), содержащего 2% BSA (бычий сывороточный альбумин), в течение 1 ч. После промывки планшета для ELISA туда добавляли разведенные образцы сыворотки и инкубировали в течение 2 ч. Туда добавляли конъюгированные с HRP (пероксидазой хрена) антитела козы против IgG, IgG1 или IgG2c мыши и инкубировали в течение 1 ч. После конечной инкубации планшет для ELISA промывали, и реакцию HRP индуцировали добавлением субстрата ТМВ (3,3',5,5'тетраметилбензидина). Реакцию HRP останавливали добавлением останавливающего раствора для ELISA и оптическую плотность (0D) измеряли с использованием спектрометра при длине волны 450 нм.
Экспериментальный пример 2-2: Способ измерения специфического для антигена VZV опосредованного клетками иммунного ответа с использованием иммуноферментного спот-анализа (анализа анализ ELISPOT)
После проведения первичной иммунизации и вторичной иммунизации, проводили анализ ELISPOT (иммуноферментный спот-анализ) мышиного IFN-γ для подтверждения специфического для антигена VZV опосредованного клетками иммунного ответа (CMI). Связывающим IFN-γ антителом (5 мкг/мл) покрывали планшет для ELISPOT и инкубировали в течение ночи при 4°С. Планшет для ELISPOT промывали 3 раза и проводили блокирование с использованием среды, содержащей 10% FBS (эмбриональную бычью сыворотку) в течение 1 ч. После промывки планшета для ELISPOT туда добавляли лейкоциты, собранные от иммунизированных мышей, и белок gE, OLP дЕ (перекрывающийся пептид) или лизат
- 6 038864
VZV и инкубировали в течение 24 ч для стимуляции лейкоцитов. После завершения стимуляции лейкоцитов планшет для ELISPOT промывали, и туда добавляли биотинилированное антитело для детекции мышиного IFN-γ (2 мкг/мл) и инкубировали. После промывки планшета, туда добавляли стрептавидинHRP и снова инкубировали. Затем после промывки планшета для ELISPOT туда добавляли смесь субстрата АЕС для индукции реакции при комнатной температуре. Реакцию останавливали промывкой планшета для ELISPOT, и планшет сушили. Количество полученных в результате пятен подсчитывали с использованием устройства.
Экспериментальный пример 2-3: Способ идентификации цитокинов, секретированных в результате стимуляции антигеном (анализ СВА)
После проведения первичной иммунизации и вторичной иммунизации, анализ СВА (цитометрического массива бусин) проводили для идентификации типов цитокинов, секретированных Т-клетками в результате стимуляции антигеном. Лейкоциты, собранные от мышей, стимулировали с использованием белка gE или лизата VZV в течение 3 суток и центрифугировали для получения супернатанта, в котором затем анализировали цитокины с использованием набора для СВА Th1/Th2/Th17 мыши. Семи (7) видам связывающих цитокины бусин (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ, TNF и IL-17A), образцу супернатанта и бусинам для детекции цитокинов позволяли вступать в реакцию друг с другом в течение 2 ч, бусины промывали и определяли количество цитокинов в супернатанте.
Экспериментальный пример 2-4: Способ определения распределения секретирующих цитокины клеток (анализ ICS)
После проведения первичной иммунизации и вторичной иммунизации секрецию специфических для Th1 цитокинов измеряли посредством анализа ICS (внутриклеточного окрашивания цитокинов) для подтверждения антигенспецифического опосредованного клетками иммунного ответа. Лейкоциты, собранные от мышей, стимулировали в течение ночи с использованием белка gE и в то же самое время GolgiStop (BFA)/GolgiPlug (монензин) также добавляли для профилактики секреции цитокинов из клеток во внешнее пространство. После промывки стимулированных лейкоцитов, клеточную поверхность лейкоцитов метили с использованием антител (7-AAD, CD3-FITC, CD4-V500) для идентификации Т-клеток. После завершения реакции лейкоциты промывали, пермеабилизовали и подвергали реакции с антителами (TNF-a-PE, IFN-y-APC, IL-2-V450), которые могут связываться с цитокинами, для подтверждения присутствия цитокинов в клетках. После реакции, лейкоциты промывали и фиксировали, и анализировали распределение клеток, секретирующих цитокины в результате стимуляции антигеном.
Экспериментальный пример 2-5: Способ определения цитокина IFN-γ, секретированного в результате стимуляции антигеном gE (ELISA IFN-γ)
После проведения первичной иммунизации и вторичной иммунизации анализ ELISA IFN-γ проводили для определения уровня секреции IFN-γ, типичного эффекторного цитокина, секретированного Тклетками в результате стимуляции антигеном. Лейкоциты, собранные от мышей, стимулировали с использованием белка gE или перекрывающегося с gE пептида в течение 3 суток и центрифугировали для получения супернатанта, который затем анализировали с использованием набора для ELISA мышиного IFN-γ. Связывающим IFN-γ антителом (4 мкг/мл) покрывали планшет для ELISA и инкубировали в течение ночи при комнатной температуре. Планшет для ELISA промывали три раза и проводили блокирование с использованием PBS, содержащего 1% бычий сывороточный альбумин (BSA), в течение 1 ч. После промывки планшета для ELISA туда добавляли супернатант, полученный в результате стимуляции лейкоцитов, и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 ч. После промывки планшета для ELISA туда добавляли биотинилированное антитело для детекции мышиного IFN-γ (400 нг/мл) и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 ч. После промывки туда добавляли стрептавидин-HRP и снова инкубировали в течение 20 мин. После инкубации планшет для ELISA промывали и проводили реакцию с раствором субстрата при комнатной температуре в течение 20 мин. После остановки реакции с использованием останавливающего раствора оптическую плотность измеряли с использованием устройства при 450 нм.
Экспериментальный пример 3: Измерение титра специфических для антигена gE IgG (титра специфических для gE IgG)
Титр специфических для антигена gE IgG измеряли в соответствии со способом из экспериментального примера 2-1, и результаты эксперимента обобщены на фиг. 1 и 2.
Как показано на фиг. 1, продукция специфических для антигена gE IgG была сильно увеличена в группе gE+SLA-SE.
Как показано на фиг. 2, продукция IgG2c была сильно увеличена в группе gE+SLA-SE и, в особенности, продукция IgG2c была сильно увеличена по сравнению с продукцией IgG1. На фиг. 2 столбчатые диаграммы на правой стороне от 0 на горизонтальной оси представляют продукцию IgG2c, и столбчатые диаграммы на левой стороне представляют продукцию IgG1.
Принимая во внимание результаты из фиг. 1 и 2, подтвердили, что использование композиции, содержащей gE, SLA и SE, значимо увеличивало общую продукцию IgG и продукцию IgG2c и, в особенности, сильно увеличивало продукцию IgG2c по сравнению с IgG1. Эти результаты означают, что компози- 7 038864 ция, содержащая gE, SLA и SE, удовлетворяющая условиям как высокой продукции IgG2c, так и высокого соотношения IgG2c/IgG1, имеет наибольший эффект профилактики опоясывающего герпеса.
Экспериментальный пример 4: Измерение специфических для антигена gE или VZV опосредованных клетками иммунных ответов (анализ ELISPOT)
Специфические для белка gE, OLP gE или лизата VZV опосредованные клетками иммунные ответы измеряли в соответствии со способом из экспериментального примера 2-2 (анализ ELISPOT IFN-γ), и результаты экспериментов обобщены на фиг. 3, 4 и 5.
Как показано на фиг. 3, когда количество Т-клеток специфически вступающих в реакцию с белком gE после вторичной иммунизации, подтверждали посредством анализа ELISPOT, можно было видеть, что количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ, репрезентативный Th1-цитокин, увеличивалось, когда использовали комбинацию gE, SLA и SE (gE+SLA-SE).
Как показано на фиг. 4, когда количество Т-клеток, специфических для перекрывающегося с gE пептидом, после вторичной иммунизации подтверждали посредством анализа ELISPOT, можно было видеть, что подобно результатам из фиг. 3 для композиции, содержащей gE, SLA и SE, показан значимо увеличенный антигенспецифический CMI по сравнению с другими композициями.
Как показано на фиг. 5, когда количество Т-клеток, специфических для полноразмерного VZV, индуцированных посредством стимуляции лизатом VZV, после иммунизации антигеном gE подтверждали посредством анализа ELISPOT, подтвердили, что количество Т-клеток, секретирующих эффекторные цитокины, специфических для полноразмерного VZV, также как для антигена gE, увеличивали посредством комбинации gE, SLA и SE.
Принимая во внимание результаты из фиг. 3, 4 и 5, подтвердили, что композиция, содержащая gE, SLA и SE (gE+SLA-SE), может максимально увеличивать специфический для антигена VZV CMI, так же как специфический для gE CMI. Это означает, что композиция gE+SLA-SE имеет больший эффект профилактики опоясывающего герпеса, чем другие композиции.
Экспериментальный пример 5: Подтверждение количества цитокинов, секретированных в результате стимуляции антигеном (анализ СВА)
Подтверждение количества цитокинов, секретированных в результате стимуляции антигеном (анализ СВА) проводили в соответствии со способом из экспериментального примера 2-3, и результаты экспериментов обобщены на фиг. 6. На фиг. 6, IFN-g обозначает IFN-γ.
Как показано на фиг. 6, различные Th-цитокины секретировались посредством композиции, содержащей gE, SLA и SE, и секреция репрезентативного Th1-цитокина, IFN-γ (четвертого спереди) была сильно увеличена, в то время как секреция Th2-цитокинов, IL-4 (второго спереди) и IL-6 (третьего спереди), или Th17-цитокина, IL-17A (шестого спереди), была минимальной. Это означает, что композиция, содержащая gE, SLA и SE, имеет больший эффект профилактики опоясывающего герпеса, чем другие композиции.
Экспериментальный пример 6: Подтверждение распределения секретирующих цитокины клеток
Анализ для подтверждения распределения клеток, секретирующих цитокины в результате стимуляции антигеном (анализ ICS) проводили в соответствии со способом из экспериментального примера 2-4, и результаты эксперимента обобщены на фиг. 7.
Как показано на фиг. 7, в случае группы gE+SLA-SE, количество Т-клеток, одновременно секретирующих два или более специфических для Th1 цитокинов значительно увеличивалось (69%), показывая, что высокое количество антигенспецифических Т-клеток было индуцировано посредством иммунизации с использованием gE+SLA-SE. Это означает, что композиция, содержащая gE, SLA и SE, имеет больший эффект профилактики опоясывающего герпеса чем другие композиции.
Экспериментальный пример 7: Измерение титров специфических для антигена VZV IgG (титра специфических IgG против гликопротеина VZV)
Титры различных специфических для антигена VZV IgG в зависимости от использования SLA-SE определяли таким же способом, как в экспериментальном примере 2-1, за исключением того, что любой из gE, gI, IE63, gB, gC и gL использовали в качестве антигена во вторичной иммунизации, и SLA-SE использовали в качестве адъюванта, и результаты обобщены на фиг. 8 и 9.
Как показано на фиг. 8, продукция специфических для антигена VZV IgG была значимо увеличена в группе gE+SLA-SE.
Как показано на фиг. 9, продукция IgG2c была сильно увеличена в группе gE+SLA-SE и, в особенности, продукция IgG2c была значимо увеличена по сравнению с продукцией IgG1. На фиг. 9 столбчатые диаграммы на правой стороне от 0 на горизонтальной оси представляют продукцию IgG2c и столбчатые диаграммы на левой стороне представляют продукцию IgG1.
Принимая во внимание результаты из фиг. 8 и 9, подтвердили, что использование композиции, содержащей gE, SLA и SE, значимо увеличивало общую продукцию IgG и продукцию IgG2c, и, в особенности, сильно увеличивало продукцию IgG2c по сравнению с IgG1. Это означает, что композиция, содержащая gE, SLA и SE, удовлетворяющая условиям как высокой продукции IgG2c, так и высокого соотношения IgG2c/IgG1, имеет наибольший эффект профилактики опоясывающего герпеса.
- 8 038864
Экспериментальный пример 8: Подтверждение количества цитокинов, секретированных в результате стимуляции антигеном VZV
Эксперимент (анализ СВА) для подтверждения цитокинов, секретированных в результате стимуляции антигеном, после иммунизации, проводили таким же способом, как в экспериментальном примере 23, за исключением того, что любой из gE, gI, IE63, gB, gC и gL использовали в качестве антигена во вторичной иммунизации, и SLA-SE использовали в качестве адъюванта, и результаты обобщены на фиг. 10.
Как показано на фиг. 10, в случае группы gE+SLA-SE, количество секретированного IFN-γ, репрезентативного Th1-цитокина, была сильно увеличена. Это означает, что опосредованный клетками иммунный ответ (CMI) был сильно активирован и что композиция, содержащая gE, SLA и SE, имеет больший эффект профилактики опоясывающего герпеса, чем другие композиции.
Экспериментальный пример 9: Подтверждение распределения клеток, секретирующих специфические для антигена VZV цитокины
Эксперимент (анализ ICS) для подтверждения распределения Т-клеток, секретирующих эффекторные цитокины в результате стимуляции антигеном после иммунизации, проводили таким же способом, как в экспериментальном примере 2-4, за исключением того, что любой из gE, gI, IE63, gB, gC и gL использовали в качестве антигена во вторичной иммунизации, и SLA-SE использовали в качестве адъюванта, и результаты обобщены на фиг. 11.
Как показано на фиг. 11, в случае группы gE+SLA-SE, доля CD4+ Т-клеток, секретирующих Th1цитокины IFN-γ, IL-2 и TNF-α, была значимо увеличена. Это означает, что опосредованный клетками иммунный ответ (CMI) был сильно активирован, и что композиция, содержащая gE, SLA и SE, имеет больший эффект профилактики опоясывающего герпеса чем другие композиции.
Экспериментальный пример 10: Идентификация специфической для VZV иммуногенности в зависимости от комбинации антигенов
Для идентификации специфической для VZV иммуногенности, индуцированной с использованием только антигена gE и с использованием антигена gE в комбинации с другим антигеном VZV во время вторичной иммунизации, титры специфических для антигена VZV IgG и иммунных ответов специфических для антигена VZV T-клеток подтверждали в соответствии со способами из экспериментальных примеров 2-1 и 2-2, и результаты экспериментов обобщены на фиг. 12.
Как показано на фиг. 12, специфический для VZV ответ антител и ответ Т-клеток, индуцированные с использованием только антигена gE, статистически значимо не отличались от специфических для VZV иммунных ответов, индуцированных с использованием антигена gE вместе с антигеном gI или IE63. Это означает, что композиция, содержащая gE, SLA и SE, имеет больший эффект профилактики опоясывающего герпеса чем другие композиции.
Экспериментальный пример 11: Измерение титров специфических для антигена gE IgG (титра специфических для gE IgG)
Титры специфических для антигена gE IgG в зависимости от использования различных адъювантов измеряли таким же способом, как в экспериментальном примере 2-1, за исключением того, что gE использовали в качестве антигена, и любой из SLA-SE, гидроксида алюминия, Addavax, Pam3CSK4, полиIC, MPL, флагеллина, имиквимода и ODN1826 использовали в качестве адъюванта во вторичной иммунизации, и результаты обобщены на фиг. 13 и 14.
Как показано на фиг. 13, продукция специфических для антигена gE IgG была сильно увеличена в группе gE+SLA-SE, по сравнению с группами других адъювантов.
Как показано на фиг. 14, продукция IgG2c была сильно увеличена в группе gE+SLA-SE по сравнению с группами других адъювантов и, в особенности, продукция IgG2c была значимо увеличена по сравнению с продукцией IgG1. На фиг. 14 столбчатые диаграммы на правой стороне от О на горизонтальной оси представляют продукцию IgG2c, и столбчатые диаграммы на левой стороне представляют продукцию IgG1.
Принимая во внимание результаты из фиг. 13 и 14, подтвердили, что использование композиции, содержащей gE, SLA и SE, значимо увеличивало общую продукцию IgG и продукцию IgG2c. Это означает, что композиция, содержащая gE, SLA и SE, имеет наибольший эффект профилактики опоясывающего герпеса.
Экспериментальный пример 12: Измерение специфических для антигена gE или VZV опосредованных клетками иммунных ответов (анализ ELISPOT)
Специфические для белка gE, OLP gE или лизата VZV опосредованные клетками иммунные ответы измеряли в соответствии со способом из экспериментального примера 2-2 (анализ ELISPOT IFN-γ) , и результаты экспериментов обобщены на фиг. 15, 16 и 17.
Как показано на фиг. 15, когда количество Т-клеток, специфически отвечающих на белок gE, после вторичной иммунизации подтверждали посредством анализа ELISPOT, можно было видеть, что количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ, репрезентативный Th1-цитокин, было значимо увеличенным в группе gE+SLA-SE, по сравнению с группами других адъювантов.
Как показано на фиг. 16, когда количество Т-клеток, специфических для перекрывающегося с gE
- 9 038864 пептида, после вторичной иммунизации, подтверждали посредством анализа ELISPOT, можно было видеть, что подобно результатам из фиг. 15 для композиции, содержащей gE, SLA и SE, показан значимо увеличенный антигенспецифический CMI по сравнению с другими композициями.
Как показано на фиг. 17, когда количество Т-клеток, специфических для полноразмерного VZV, индуцированных посредством стимуляции лизатом VZV, после иммунизации антигеном gE, подтверждали посредством анализа ELISPOT, подтвердили, что количество Т-клеток, секретирующих IFN-γ, специфических для полноразмерного VZV, было увеличенным посредством gE+SLA-SE.
Принимая во внимание результаты из фиг. 15, 16, и 17, подтвердили, что композиция, содержащая gE, SLA и SE, может максимально увеличивать специфический для антигена VZV CMI, так же как специфический для gE CMI, по сравнению с другими композициями. Это означает, что композиция gE+SLA-SE имеет больший эффект профилактики опоясывающего герпеса, чем другие композиции.
Экспериментальный пример 13: Подтверждение секреции цитокина IFN-γ в результате стимуляции антигеном gE или антигеном VZV (анализ ELISA IFN-γ)
Эксперимент (анализ ELISA IFN-γ) для подтверждения секреции цитокина IFN-γ в результате стимуляции антигеном gE или антигеном OLP gE проводили в соответствии со способом из экспериментального примера 2-5, и результаты обобщены на фиг. 18 и 19.
Как показано на фиг. 18, при наблюдении количества цитокина IFN-γ, секретированного в результате стимуляции белком gE, после вторичной иммунизации, подтвердили, что количество секретированного IFN-γ, типичного эффекторного Th1-цитоkина, в группе gE+SLA-SE было увеличено по сравнению с группами других адъювантов.
Как показано на фиг. 19, при наблюдении количества цитокина IFN-γ, секретированного в результате стимуляции перекрывающимся с gE пептидом, после вторичной иммунизации, подтвердили, что количество секретированного IFN-γ увеличивали посредством комбинации gE, SLA и SE, по сравнению с группами других адъювантов.
Принимая во внимание результаты из фиг. 18 и 19, композиция, содержащая gE, SLA и SE, увеличивала количество секретированного репрезентативного эффекторного Th1-цитокина, по сравнению с содержащими другие адъюванты композициями, и это означает, что композиция gE+SLA-SE имеет больший эффект профилактики опоясывающего герпеса, чем другие композиции.
Экспериментальный пример 14: Определение оптимального количества SLA-SE, индуцирующего специфическую для VZV иммуногенность
В табл. 2 обобщен дизайн эксперимента для подтверждения оптимального количества SLA-SE, которое может наиболее эффективно индуцировать специфический для антигена VZV опосредованный клетками иммунный ответ (CMI). Живую ослабленную вакцину (LAV, 3000 БОЕ) подкожно инъецировали один раз самкам мышей C57BL/6 и, на сутки 28 после этого, проводили вторичную иммунизацию (иммунизацию). На сутки 56 после примирования LAV, лейкоциты собирали из образцов селезенки для подтверждения опосредованного клетками иммунного ответа (CMI), специфического для VZV.
Таблица 2
| Группа | Первичная иммунизация (примирование LAV*) | Вторичная иммунизация (иммунизация) | Сутки вторичной иммунизации | Сутки сбора образцов селезенки | |
| Антиген | Адъювант | ||||
| PBS | только PBS | X | X | Сутки 28 | Сутки 56 |
| дЕ | LAV | gE (5 мкг) | X | ||
| gE+SLA 0,2 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (0,2 mkt)+SE (2%) | ||
| gE+SLA 1 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (1 мкг)+ЗЕ (2%) | ||
| gE+SLA 2,5 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (2,5 мкг)+SE (2%) | ||
| gE+SLA 5 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (5 mkt)+SE (2%) | ||
| gE+SLA 7,5 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (7,5 мкг)+SE (2%) | ||
| gE+SLA 10 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (10 мкг)+SE (2%) | ||
| gE+SLA 15 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (15 мкг)+SE (2%) | ||
| gE+SLA 20 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (20 мкг)+SE (2%) | ||
| gE+SLA 22,5 мкг | LAV | gE (5 мкг) | SLA (22,5 мкг)+SE (2%) |
*Первичная иммунизация (примирование LAV): Доза 100 мкл/голову. 3000 БОЕ *Вторичная иммунизация (иммунизация): Доза 100 мкл/голову
Специфический для антигена gE опосредованный клетками иммунный ответ (анализ ELISPOT IFNγ) измеряли в соответствии со способом из экспериментального примера 2-2, и результаты эксперимента
- 10 038864 обобщены на фиг. 20.
Специфический для антигена VZV опосредованный клетками иммунный ответ (анализ ELISPOT
IFN-γ) измеряли в соответствии со способом из экспериментального примера 2-2, и результаты эксперимента обобщены на фиг. 21.
Принимая во внимание результаты из фиг. 20 и 21, можно было видеть, что оптимальное количество SLA для индукции специфического для антигена VZV опосредованного клетками иммунного ответа лежит в диапазоне 7,5 мкг - 20 мкг.
Claims (8)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Вакцинная композиция против ветряной оспы или опоясывающего герпеса, содержащая гликопротеин Е из вируса Varicella Zoster;глюкопиранозильный липидный адъювант следующей формулы 1 и поддающееся метаболизму маслоФормула 1 где каждый из R1, R3, R5 и R6 независимо представляют собой С10-С12 алкил и каждый из R2 и R4 независимо представляют собой С8-С10 алкил;причем поддающееся метаболизму масло представляет собой сквален.
- 2. Вакцинная композиция по п.1, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант представляет собой адъювант формулы 1, где R1, R3, R5 и R6 представляют собой С11 алкил.
- 3. Вакцинная композиция по п.1, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант представляет собой адъювант формулы 1, где R2 и R4 представляют собой С9 алкил.
- 4. Вакцинная композиция по п.1, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант содержится в количестве 7,5-20 мкг в однократной дозе вакцинной композиции.
- 5. Вакцинная композиция по п.4, в которой глюкопиранозильный липидный адъювант содержится в количестве 9-18 мкг в однократной дозе вакцинной композиции.
- 6. Вакцинная композиция по п.1, в которой сквален содержится в количестве 1-7% (об./об.) от всей вакцинной композиции.
- 7. Вакцинная композиция по п.6, в которой сквален содержится в количестве 1-4% (об./об.) от всей вакцинной композиции.
- 8. Вакцинная композиция по п.1, в которой гликопротеин Е содержится в количестве 5-100 мкг в однократной дозе вакцинной композиции.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20160178793 | 2016-12-26 | ||
| KR1020170176122A KR102034234B1 (ko) | 2016-12-26 | 2017-12-20 | 대상포진 백신 조성물 |
| PCT/KR2017/015155 WO2018124615A1 (ko) | 2016-12-26 | 2017-12-20 | 대상포진 백신 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201991575A1 EA201991575A1 (ru) | 2019-12-30 |
| EA038864B1 true EA038864B1 (ru) | 2021-10-29 |
Family
ID=62913280
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201991575A EA038864B1 (ru) | 2016-12-26 | 2017-12-20 | Вакцинная композиция против опоясывающего герпеса |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10940198B2 (ru) |
| EP (1) | EP3560512A4 (ru) |
| JP (2) | JP6815521B2 (ru) |
| KR (2) | KR102034234B1 (ru) |
| CN (1) | CN110198736B (ru) |
| AU (1) | AU2017389221B2 (ru) |
| BR (1) | BR112019013284A2 (ru) |
| CA (1) | CA3048608C (ru) |
| CO (1) | CO2019007795A2 (ru) |
| EA (1) | EA038864B1 (ru) |
| IL (1) | IL267643B2 (ru) |
| MA (1) | MA46310B1 (ru) |
| MX (1) | MX2019007288A (ru) |
| MY (1) | MY195766A (ru) |
| PE (1) | PE20191547A1 (ru) |
| PH (1) | PH12019550106A1 (ru) |
| UA (1) | UA124397C2 (ru) |
| WO (1) | WO2018124615A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201904889B (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA3114658A1 (en) * | 2018-09-27 | 2020-04-02 | Bravovax Co., Ltd | Immune composition, preparation method therefor and use thereof |
| CN110237248A (zh) * | 2019-07-01 | 2019-09-17 | 大连民族大学 | 一种带状疱疹疫苗的制备方法 |
| CA3161638A1 (en) * | 2019-12-13 | 2021-06-17 | Jun Ge | Pharmaceutical composition and use thereof |
| CA3174927A1 (en) * | 2020-03-09 | 2021-09-16 | Dynavax Technologies Corporation | Shingles vaccines comprising a tlr9 agonist |
| CN111840538A (zh) * | 2020-05-29 | 2020-10-30 | 中山大学 | 一种水痘-带状疱疹病毒亚单位纳米疫苗的制备方法和应用 |
| EP4212173A1 (en) * | 2020-09-11 | 2023-07-19 | Eubiologics Co., Ltd. | Vaccine composition for chickenpox or varicella zoster and method of using same |
| CN116942808B (zh) * | 2023-07-21 | 2024-02-02 | 北京成大天和生物科技有限公司 | 一种重组带状疱疹疫苗组合物及其制备方法和应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20040030599A (ko) * | 2001-04-27 | 2004-04-09 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | Ｈｉｖ 항원 및 ｈｓｖ 항원 및/또는 ｈｐｖ 항원을포함하는 다가 백신 |
| KR20070110413A (ko) * | 2005-03-03 | 2007-11-16 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | 바리셀라 조스터 바이러스 백신 |
| KR20090079209A (ko) * | 2006-09-26 | 2009-07-21 | 인펙셔스 디지즈 리서치 인스티튜트 (아이디알아이) | 합성 애주번트를 함유하는 백신 조성물 |
| KR20100063030A (ko) * | 2007-07-19 | 2010-06-10 | 노바백스, 인코포레이티드 | 바리셀라 조스터 바이러스-바이러스 유사 입자(ＶＬＰｓ) 및 항원 |
| KR20140022799A (ko) * | 2011-02-24 | 2014-02-25 | 재단법인 목암생명공학연구소 | 신규한 수두 대상포진 바이러스주 및 이를 이용한 수두 및 대상포진 바이러스 백신 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102481312B (zh) * | 2009-06-05 | 2015-07-15 | 传染性疾病研究院 | 合成的吡喃葡萄糖脂佐剂 |
| EA027236B1 (ru) * | 2011-04-08 | 2017-07-31 | Иммьюн Дизайн Корп. | Иммуногенные композиции и способы применения таких композиций для индукции гуморального и клеточного иммунного ответа |
| US20180296663A1 (en) | 2015-06-17 | 2018-10-18 | Curevac Ag | Vaccine composition |
| MX2018014399A (es) * | 2016-06-01 | 2019-06-06 | Infectious Disease Res Inst | Particulas de nanoalumbre que contienen un agente de dimensionamiento. |
| US10874734B2 (en) * | 2016-11-25 | 2020-12-29 | Mogam Institute For Biomedical Research | Varicella zoster virus vaccine |
-
2017
- 2017-12-20 WO PCT/KR2017/015155 patent/WO2018124615A1/ko active Application Filing
- 2017-12-20 BR BR112019013284A patent/BR112019013284A2/pt unknown
- 2017-12-20 MX MX2019007288A patent/MX2019007288A/es unknown
- 2017-12-20 US US16/473,393 patent/US10940198B2/en active Active
- 2017-12-20 PE PE2019001327A patent/PE20191547A1/es unknown
- 2017-12-20 CN CN201780080915.XA patent/CN110198736B/zh active Active
- 2017-12-20 KR KR1020170176122A patent/KR102034234B1/ko active IP Right Grant
- 2017-12-20 EA EA201991575A patent/EA038864B1/ru unknown
- 2017-12-20 CA CA3048608A patent/CA3048608C/en active Active
- 2017-12-20 AU AU2017389221A patent/AU2017389221B2/en active Active
- 2017-12-20 MA MA46310A patent/MA46310B1/fr unknown
- 2017-12-20 JP JP2019534872A patent/JP6815521B2/ja active Active
- 2017-12-20 IL IL267643A patent/IL267643B2/en unknown
- 2017-12-20 UA UAA201908518A patent/UA124397C2/uk unknown
- 2017-12-20 MY MYPI2019003454A patent/MY195766A/en unknown
- 2017-12-20 EP EP17887387.3A patent/EP3560512A4/en active Pending
-
2019
- 2019-06-17 PH PH12019550106A patent/PH12019550106A1/en unknown
- 2019-07-19 CO CONC2019/0007795A patent/CO2019007795A2/es unknown
- 2019-07-25 ZA ZA2019/04889A patent/ZA201904889B/en unknown
- 2019-10-10 KR KR1020190125559A patent/KR102363359B1/ko active IP Right Grant
-
2020
- 2020-12-22 JP JP2020212117A patent/JP2021054854A/ja not_active Withdrawn
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20040030599A (ko) * | 2001-04-27 | 2004-04-09 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | Ｈｉｖ 항원 및 ｈｓｖ 항원 및/또는 ｈｐｖ 항원을포함하는 다가 백신 |
| KR20070110413A (ko) * | 2005-03-03 | 2007-11-16 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | 바리셀라 조스터 바이러스 백신 |
| KR20090079209A (ko) * | 2006-09-26 | 2009-07-21 | 인펙셔스 디지즈 리서치 인스티튜트 (아이디알아이) | 합성 애주번트를 함유하는 백신 조성물 |
| KR20100063030A (ko) * | 2007-07-19 | 2010-06-10 | 노바백스, 인코포레이티드 | 바리셀라 조스터 바이러스-바이러스 유사 입자(ＶＬＰｓ) 및 항원 |
| KR20140022799A (ko) * | 2011-02-24 | 2014-02-25 | 재단법인 목암생명공학연구소 | 신규한 수두 대상포진 바이러스주 및 이를 이용한 수두 및 대상포진 바이러스 백신 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL267643A (ru) | 2019-08-29 |
| JP6815521B2 (ja) | 2021-01-20 |
| KR102363359B1 (ko) | 2022-02-16 |
| UA124397C2 (uk) | 2021-09-08 |
| KR20190117462A (ko) | 2019-10-16 |
| KR20180075409A (ko) | 2018-07-04 |
| MA46310B1 (fr) | 2021-04-30 |
| IL267643B1 (en) | 2023-08-01 |
| EP3560512A1 (en) | 2019-10-30 |
| EA201991575A1 (ru) | 2019-12-30 |
| JP2021054854A (ja) | 2021-04-08 |
| JP2020512297A (ja) | 2020-04-23 |
| CN110198736B (zh) | 2023-12-22 |
| WO2018124615A1 (ko) | 2018-07-05 |
| AU2017389221A1 (en) | 2019-08-08 |
| CN110198736A (zh) | 2019-09-03 |
| CA3048608C (en) | 2021-11-23 |
| AU2017389221B2 (en) | 2020-10-08 |
| MY195766A (en) | 2023-02-10 |
| PH12019550106A1 (en) | 2020-02-10 |
| KR102034234B1 (ko) | 2019-10-18 |
| ZA201904889B (en) | 2020-12-23 |
| CA3048608A1 (en) | 2018-07-05 |
| MA46310A1 (fr) | 2020-11-30 |
| US20190328868A1 (en) | 2019-10-31 |
| PE20191547A1 (es) | 2019-10-24 |
| CO2019007795A2 (es) | 2019-08-20 |
| US10940198B2 (en) | 2021-03-09 |
| NZ755255A (en) | 2021-05-28 |
| MX2019007288A (es) | 2019-10-02 |
| BR112019013284A2 (pt) | 2019-12-17 |
| IL267643B2 (en) | 2023-12-01 |
| EP3560512A4 (en) | 2020-07-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA3048608C (en) | Herpes zoster vaccine composition | |
| JP3530526B2 (ja) | ＨＳＶ糖蛋白質ｇＤおよび３脱アシル化モノホスホリルリピッドＡからなる単純ヘルペスワクチン | |
| Ioannou et al. | CpG-containing oligodeoxynucleotides, in combination with conventional adjuvants, enhance the magnitude and change the bias of the immune responses to a herpesvirus glycoprotein | |
| US5714141A (en) | Use of interleukin 7 to enhance humoral immunity | |
| KR20040111467A (ko) | 신생아의 백신접종용 변형 백시니아 바이러스 안카라 | |
| US6641816B1 (en) | Use of poxviruses as enhancer of specific immunity | |
| Paillot | A systematic review of the immune-modulators Parapoxvirus ovis and Propionibacterium acnes for the prevention of respiratory disease and other infections in the horse | |
| Hassan et al. | Immune responses in mice induced by HSV-1 glycoproteins presented with ISCOMs or NISV delivery systems | |
| KR20130081715A (ko) | 개선된 면역반응을 유도하는 백신 | |
| US20080089910A1 (en) | Attenuated Herpes Simplex Virus Type-2, Vectors Thereof and Immunogenic Compositions Thereof | |
| Baca-Estrada et al. | Immunogenicity of Bovine Herpes virus 1 Glycoprotein D in Mice: Effect of Antigen Form on the Induction of Cellular and Humoral Immune Responses | |
| NZ755255B2 (en) | Herpes zoster vaccine composition | |
| EP0604727A1 (en) | Improved immunogenicity of a vaccine by incorporation of a cytokine within an immune-stimulating complex containing an antigen | |
| CA2429505A1 (en) | Prevention of recurrent viral disease | |
| Al-Ghamdi et al. | Latent HSV-1 infection in mice immunized with a zwitterionic detergent-extracted HSV-1 antigen preparation | |
| US20220370600A1 (en) | Multigenic mva-sars-cov-2 vaccine | |
| Araujo et al. | Recombinant BoHV-5 Glycoprotein Elicits Long-Lasting Protective Immunity in Cattle | |
| Scriba | Animal studies on the efficacy of vaccination against recurrent herpes | |
| US20230000968A1 (en) | Recombinant Human Papillomavirus Vaccine Composition and Use thereof | |
| Epstein | The Florey Lecture, 1986-Vaccine prevention of virus-induced human cancers | |
| Gill et al. | Genetic stability in humans of the rabbit immunogenic marker of Cendehill rubella vaccine virus | |
| EP1371375A1 (en) | Vaccine to protect animals against leishmania |