EA034014B1 - Способ лечения субъекта с диареей, вызванной ротавирусом - Google Patents
Способ лечения субъекта с диареей, вызванной ротавирусом Download PDFInfo
- Publication number
- EA034014B1 EA034014B1 EA201400827A EA201400827A EA034014B1 EA 034014 B1 EA034014 B1 EA 034014B1 EA 201400827 A EA201400827 A EA 201400827A EA 201400827 A EA201400827 A EA 201400827A EA 034014 B1 EA034014 B1 EA 034014B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- glucose
- secretion
- composition
- cells
- diarrhea
- Prior art date
Links
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 title claims abstract description 62
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 title claims description 15
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 211
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 206
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 82
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 claims abstract description 20
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 87
- RMTFNDVZYPHUEF-XZBKPIIZSA-N 3-O-methyl-D-glucose Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](OC)[C@H](O)[C@H](O)CO RMTFNDVZYPHUEF-XZBKPIIZSA-N 0.000 claims description 32
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 16
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 13
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 11
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 8
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 7
- 150000002303 glucose derivatives Chemical class 0.000 claims description 7
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 6
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 5
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 claims description 5
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 claims description 5
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 4
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 4
- 229960001153 serine Drugs 0.000 claims description 4
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 claims description 4
- 229960004295 valine Drugs 0.000 claims description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 2
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 claims description 2
- BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N L-lysine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCCC[C@H](N)C(O)=O BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N 0.000 claims 1
- 229940037395 electrolytes Drugs 0.000 claims 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 abstract description 36
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 17
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 abstract description 13
- 206010017943 Gastrointestinal conditions Diseases 0.000 abstract description 11
- 206010014418 Electrolyte imbalance Diseases 0.000 abstract description 2
- 206010051283 Fluid imbalance Diseases 0.000 abstract 1
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 207
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 203
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 51
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 47
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 41
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 38
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 37
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 35
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 32
- 102000008130 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 26
- 108010049894 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 26
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 19
- 108091052347 Glucose transporter family Proteins 0.000 description 17
- ZKZXNDJNWUTGDK-NSCUHMNNSA-N (E)-N-[2-(4-bromocinnamylamino)ethyl]isoquinoline-5-sulfonamide Chemical compound C1=CC(Br)=CC=C1\C=C\CNCCNS(=O)(=O)C1=CC=CC2=CN=CC=C12 ZKZXNDJNWUTGDK-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 16
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 15
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 15
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 15
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 15
- OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N FORSKOLIN Chemical compound O=C([C@@]12O)C[C@](C)(C=C)O[C@]1(C)[C@@H](OC(=O)C)[C@@H](O)[C@@H]1[C@]2(C)[C@@H](O)CCC1(C)C OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N 0.000 description 14
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 14
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 13
- 102000018711 Facilitative Glucose Transport Proteins Human genes 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 10
- 229940077731 carbohydrate nutrients Drugs 0.000 description 10
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 10
- 230000006870 function Effects 0.000 description 10
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 10
- 108091006277 SLC5A1 Proteins 0.000 description 9
- 102000058090 Sodium-Glucose Transporter 1 Human genes 0.000 description 9
- 210000001100 crypt cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000006377 glucose transport Effects 0.000 description 9
- 108091006515 Anion channels Proteins 0.000 description 8
- 102000037829 Anion channels Human genes 0.000 description 8
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 8
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- SUZLHDUTVMZSEV-UHFFFAOYSA-N Deoxycoleonol Natural products C12C(=O)CC(C)(C=C)OC2(C)C(OC(=O)C)C(O)C2C1(C)C(O)CCC2(C)C SUZLHDUTVMZSEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 7
- OHCQJHSOBUTRHG-UHFFFAOYSA-N colforsin Natural products OC12C(=O)CC(C)(C=C)OC1(C)C(OC(=O)C)C(O)C1C2(C)C(O)CCC1(C)C OHCQJHSOBUTRHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 7
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 7
- WBSMIPAMAXNXFS-UHFFFAOYSA-N 5-Nitro-2-(3-phenylpropylamino)benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=CC=C1NCCCC1=CC=CC=C1 WBSMIPAMAXNXFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010062745 Chloride Channels Proteins 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 6
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 6
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 6
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 6
- 102000011045 Chloride Channels Human genes 0.000 description 5
- 102000042092 Glucose transporter family Human genes 0.000 description 5
- 206010067470 Rotavirus infection Diseases 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 5
- 229940043437 protein kinase A inhibitor Drugs 0.000 description 5
- 239000012656 protein kinase A inhibitor Substances 0.000 description 5
- 239000000310 rehydration solution Substances 0.000 description 5
- 201000009881 secretory diarrhea Diseases 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 4
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 4
- 230000000741 diarrhetic effect Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 230000003871 intestinal function Effects 0.000 description 4
- 230000037041 intracellular level Effects 0.000 description 4
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 4
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- NLMDJJTUQPXZFG-UHFFFAOYSA-N 1,4,10,13-tetraoxa-7,16-diazacyclooctadecane Chemical compound C1COCCOCCNCCOCCOCCN1 NLMDJJTUQPXZFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YJIYWYAMZFVECX-UHFFFAOYSA-N 2-[N-[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]-2-[2-[2-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]phenoxy]ethoxy]anilino]acetic acid acetyloxymethyl ester Chemical compound CC(=O)OCOC(=O)CN(CC(=O)OCOC(C)=O)C1=CC=CC=C1OCCOC1=CC=CC=C1N(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O YJIYWYAMZFVECX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YSCNMFDFYJUPEF-OWOJBTEDSA-N 4,4'-diisothiocyano-trans-stilbene-2,2'-disulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(N=C=S)=CC=C1\C=C\C1=CC=C(N=C=S)C=C1S(O)(=O)=O YSCNMFDFYJUPEF-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 3
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 3
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000009840 acute diarrhea Diseases 0.000 description 3
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 3
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- -1 o-aminophenoxy Chemical group 0.000 description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 108010065251 protein kinase modulator Proteins 0.000 description 3
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 102000003787 Anoctamin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108090000160 Anoctamin-1 Proteins 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical class [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 2
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108090000315 Protein Kinase C Proteins 0.000 description 2
- 102000003923 Protein Kinase C Human genes 0.000 description 2
- 108091006649 SLC9A3 Proteins 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 2
- 208000019902 chronic diarrheal disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001218 confocal laser scanning microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 2
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 2
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 229960004580 glibenclamide Drugs 0.000 description 2
- ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N glyburide Chemical compound COC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NCCC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(=O)NC2CCCCC2)C=C1 ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 2
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 210000000110 microvilli Anatomy 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 238000000853 optical rotatory dispersion Methods 0.000 description 2
- 101150030907 ord gene Proteins 0.000 description 2
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000002151 serous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- HEVPOMZWTZQALZ-XZBKPIIZSA-N (2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxy-3-methylhexanal Chemical compound O=C[C@H](O)[C@](O)(C)[C@H](O)[C@H](O)CO HEVPOMZWTZQALZ-XZBKPIIZSA-N 0.000 description 1
- PSDFQEVOCCOOET-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2-aminophenoxy)ethoxy]aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1OCCOC1=CC=CC=C1N PSDFQEVOCCOOET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSCNMFDFYJUPEF-UHFFFAOYSA-N 4,4'-diisothiocyanostilbene-2,2'-disulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(N=C=S)=CC=C1C=CC1=CC=C(N=C=S)C=C1S(O)(=O)=O YSCNMFDFYJUPEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 102000003837 Epithelial Sodium Channels Human genes 0.000 description 1
- 108090000140 Epithelial Sodium Channels Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010016952 Food poisoning Diseases 0.000 description 1
- 208000019331 Foodborne disease Diseases 0.000 description 1
- 241000224467 Giardia intestinalis Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- 241000288105 Grus Species 0.000 description 1
- 241001272567 Hominoidea Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005479 Lucite® Polymers 0.000 description 1
- 206010025476 Malabsorption Diseases 0.000 description 1
- 208000004155 Malabsorption Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001263478 Norovirus Species 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000282405 Pongo abelii Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 208000032384 Severe immune-mediated enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 102000000070 Sodium-Glucose Transport Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010080361 Sodium-Glucose Transport Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000046061 Sodium-Hydrogen Exchanger 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100030375 Sodium/hydrogen exchanger 3 Human genes 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- BKYHTWFRZPRHNM-UHFFFAOYSA-N acetyloxymethyl 2-[n-[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]-4-[3-(acetyloxymethoxy)-6-oxoxanthen-9-yl]-2-[2-[2-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]phenoxy]ethoxy]anilino]acetate Chemical compound CC(=O)OCOC(=O)CN(CC(=O)OCOC(C)=O)C1=CC=CC=C1OCCOC1=CC(C2=C3C=CC(=O)C=C3OC3=CC(OCOC(C)=O)=CC=C32)=CC=C1N(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O BKYHTWFRZPRHNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- XSDQTOBWRPYKKA-UHFFFAOYSA-N amiloride Chemical compound NC(=N)NC(=O)C1=NC(Cl)=C(N)N=C1N XSDQTOBWRPYKKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002576 amiloride Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 208000001974 autoimmune enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 150000001669 calcium Chemical class 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- AIXAANGOTKPUOY-UHFFFAOYSA-N carbachol Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCOC(N)=O AIXAANGOTKPUOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004484 carbachol Drugs 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 208000010227 enterocolitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 238000011902 gastrointestinal surgery Methods 0.000 description 1
- 229940085435 giardia lamblia Drugs 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 210000002570 interstitial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000037427 ion transport Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004937 luminal membrane Anatomy 0.000 description 1
- 150000004667 medium chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 239000003182 parenteral nutrition solution Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008289 pathophysiological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000002661 proton therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000007723 transport mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 210000002438 upper gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/205—Amine addition salts of organic acids; Inner quaternary ammonium salts, e.g. betaine, carnitine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
- A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
- A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/20—Elemental chlorine; Inorganic compounds releasing chlorine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение обеспечивает терапевтическую композицию и способ лечения от желудочно-кишечных болезней и состояний, таких как диарея, для обеспечения регидратации, для исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или для улучшения функции тонкого кишечника. В одном варианте осуществления изобретение обеспечивает композицию, рецептированную для энтерального введения, причем композиция не содержит глюкозы. В предпочтительном варианте осуществления композицию рецептируют для введения в форме раствора для пероральной регидратации.
Description
Уровень техники
Ротавирусная инфекция является главной причиной тяжелых диарейных болезней и обезвоживания у грудных детей и детей старшего возраста во всем мире. К симптомам ротавирусной инфекции относятся водянистая диарея, сильное обезвоживание, лихорадка и рвота. Ротавирусная инфекция также может приводить к повреждениям тощей кишки с максимальным повреждением на третий день после заражения и в некоторых случаях может вызывать уменьшение площади поверхности ворсин до 30-50% от нормы (Rhoads et al. (1996), J. Diarrhoeal Dis. Res. 14(3):175-181).
Патофизиологический механизм, через который ротавирус вызывает диарею, состоит в воздействии энтеротоксина - неспецифического белка-4 (NSP4) на эпителиальные клетки тонкого кишечника. NSP4 мобилизует внутриклеточный Са2+ в эпителиях крипт тонкого и толстого кишечника для имитации секреторного эффекта холинергического агониста карбахола (CCh) в потенцировании секреции сАМРзависимой жидкости.
Известно, что повышение внутриклеточного сАМР ([cAMP]i) и Са2+ ([Ca2+]i опосредует секрецию Cl- и/или HCO3- при диарее, связанной с инфекционными, а также воспалительными состояниями (Zhang et al. (2007), J. Physiol. 581(3):1221-1233). Осмотический градиент, создаваемый секрецией хлорида, приводит к пассивному перемещению воды в просвет кишечника, таким образом, вызывая водянистый стул. Секреция Cl- с пассивным перемещением воды в меньшем количестве происходит во время нормального пищеварения и абсорбции, что является существенным для надлежащего смешивания, перемешивания и плавного продвижения через просвет кишечника. В тонком кишечнике с нормальной абсорбцией существует точный баланс между абсорбцией, происходящей в зоне клеток ворсин, и секрецией из клеток крипт. Дисбаланс, являющийся результатом снижения абсорбции, повышенной секреции или комбинированного эффекта, в результате может привести к диарее.
Активируемые кальцием хлористые каналы (СаСС) участвуют в важных физиологических процессах. Трансфекция эпителиальных клеток специфической малой интерферирующей РНК против каждого из мембранных белков, которые регулируются IL-4, обнаруживает, что ТМЕМ16А, относящийся к семейству предполагаемых мембранных белков плазмы с неизвестной функцией, связан с кальцийзависимым хлоридным потоком (Caputo et al. (2008), Science 322(5901):590-594). TMEM16A широко экспрессируется в тканях млекопитающих, включая трахеальный, кишечный и железистый эпителий, гладкомышечные клетки и интерстициальные клетки Кахаля в желудочно-кишечном тракте (Namkung et al., J. Biol. Chem. 286(3):2365-2374).
Поглощение глюкозы энтероцитами в просвете тонкого кишечника происходит путем вторичного активного переноса (Hediger et al. (1994), Physiol. Rev. 74(4):993-1026; Wright et al. (2004), Physiology (Bethesda) 19:370-376). Натрий-зависимый переносчик глюкозы (SGLT-1) обладает стехиометрией 2:1, таким образом, перенося два иона натрия на одну молекулу глюкозы через люминальную мембрану (Chen et al. (1995), Biophys. J. 69(6):2405-2414). Тесно связанный натрий-зависимый перенос глюкозы приводится в действие электрохимическим градиентом Na+, создаваемым активностью Na-K-АТФазы. SGLT-1-опосредованное, электрогенное поглощение Na+ вызывает растворное привлечение, что приводит к пассивному поглощению воды из просвета.
Поддержка гидратации является ключевым элементом в лечении диарейных болезней, включая вызываемую ротавирусом диарею. В настоящее время секреторная диарея лечится растворами для пероральной регидратации (ORD) - путем введения раствора соли, содержащего натрий и значительное количество глюкозы и других сахарных молекул. Глюкоза всегда являлась основой в энтеральных и парентеральных растворах для коррекции нарушений поглощения электролитов и питательных веществ, связанных с болезненными состояниями. ORD предназначены для коррекции потери жидкостей и электролитов при секреторной диарее на основе теории, согласно которой после активного совместного усвоения натрия и глюкозы в тонком кишечнике происходит последующий приток воды вследствие перемещения абсорбированного состояния.
Хотя ORD обеспечивают значительный прорыв в лечении холеры и других диарейных состояний, существует потребность в улучшении его эффективности. Существует потребность в усовершенствованной композиции из-за низкой степени регидратации, обеспечиваемого существующими композициями ORD. Степень регидратации у пациентов с диареей не соответствует степени потери электролитов. Существующие композиции ORD оказались неэффективными для лечения вызванной ротавирусом диареи, причем точная причина неэффективности остается неизвестной.
Соответственно, существует потребность в усовершенствованных композициях ORD для лечения диареи.
- 1 034014
Краткое описание изобретения
Изобретение обеспечивает терапевтическую композицию и способ лечения желудочно-кишечных болезней и состояний, таких как диарея, для обеспечения регидратации, для исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или для улучшения функции тонкого кишечника.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает композицию, рецептированную для энтерального введения, причем композиция не содержит глюкозы. В предпочтительном варианте осуществления композицию рецептируют в форме раствора для пероральной регидратации (ORD). В другом предпочтительном варианте осуществления композиция предусматривается в форме порошка с возможностью восстановления влагосодержания для применения в качестве ORD.
В одном варианте осуществления композиция согласно настоящему изобретению включает один или несколько ингредиентов, выбранных из группы, к которой относятся свободные аминокислоты; электролиты; вода, терапевтически приемлемые носители, формообразующие, буферы, ароматизаторы, красители и/или консерванты.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, включающий энтеральное введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества композиции согласно изобретению. Композиция может вводиться один или несколько раз в день. В предпочтительном варианте осуществления композицию вводят перорально.
В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает лечение от диареи, вызванной ротавирусной инфекцией и/или NSP4. В другом предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение в результате ведет к снижению секреции Cl- и/или HCO3 - и/или улучшению абсорбции жидкости.
Краткое описание фигур
Фиг. 1 показывает кинетику насыщения для транспорта Na'-связанной глюкозы и Na'-связанной 3О-метилглюкозы (3-ОМГ). (А) Повышение концентрации глюкозы в просвете в результате ведет к зависимому от концентрации повышению Isc. Подбор нелинейной кривой моделью Михаэлиса-Ментен для ферментативной кинетики демонстрирует Vmax=3,3±0,19 мкэкв-ч-1-см-2 и Km=0,24±0,06 мМ. (В) Повышение концентрации 3-ОМГ в просвете в результате ведет к зависимому от концентрации повышению Isc с Vmax=1,9±0,13 мкэкв-ч-1-см-2 и Km=0,22±0,07 мМ. Повышение концентрации 3-ОМГ в тканях, предварительно обработанных Н-89, в результате ведет к значительному снижению Isc, по сравнению с показателем для тканей, не подвергавшихся предварительной обработке Н-89. (С) Добавление с повышением концентрации 3-ОМГ в тканях, предварительно обработанных флоризином, продемонстрировало отсутствие реакции на глюкозу. Получали значения для n=6 тканей;
фиг. 2 - однонаправленный и результирующий поток Na+ (А) и Cl- (В). (А) Инкубация тканей тонкого кишечника с глюкозой в концентрации 0, 0,6 или 6 мМ не приводит к значительным различиям в JmsCl-. Глюкоза вызывает повышение JsmCl- в тонком кишечнике. При этом JsmCl- значительно выше в присутствии 0,6 и 6 мМ глюкозы по сравнению с показателем 0 мМ глюкозы. При 0 мМ глюкозы наблюдается значительная абсорбция Cl- (по сравнению с уровнем абсорбции Cl- при 0,6 и 6 мМ глюкозы), в то время как при 0,6 и 6 мМ глюкозы наблюдается секреция Cl-. (В). При 0 мМ глюкозы чистая абсорбция Na+ наблюдается в тканях тонкого кишечника. Минимальная абсорбция Na+ наблюдается при 0,6 мМ глюкозы, в то время как значительная абсорбция Na+ наблюдается при 6 мМ глюкозы. Однонаправленные потоки (Jms и Jsm) не демонстрируют значительных различий при 0, 0,6 или 6 мМ глюкозы. Получали значения для n=8 тканей;
фиг. 3 - воздействие глюкозы и 3-О-метилглюкозы на уровень внутриклеточного сАМР в ворсинах, криптах и фракции цельных клеток подвздошной кишки. (А) Обработка форсколином значительно повышает уровень внутриклеточного сАМР в клетках крипт и ворсин подобным образом. (В) В результате инкубации клеток с 8 мМ глюкозы значительно повышается уровень внутриклеточного сАМР в клетках ворсин, но не в клетках крипт. (С) В результате инкубации соскоба слизистой оболочки, состоявшего из эпителиальных клеток ворсин и крипт, с глюкозой и 3-О-метилглюкозой, соответственно, значительно повышается уровень внутриклеточного сАМР. В результате инкубации клеток с 3-О-метилглюкозой при 6 мМ происходит небольшое, но значительное повышение уровня внутриклеточного с AMP. Инкубация клеток с разной концентрацией глюкозы оказывает подобное воздействие на уровень внутриклеточного с AMP. Колонки представляют средние значения, а чертами обозначается стандартная погрешность среднего. Получали значения для n=4 разных мышей с трехкратными повторами. Значения сАМР унифицируют со значениями белка соответствующих фракций и выражают в пикомолях (мг белка)-1. * Р<0,001 сравнивали с группой после добавления форсколина или глюкозы; # Р<0,01 сравнение между обработанными солевым раствором и глюкозой клетками ворсин. NS - не существенно (множественные сравнения Бонферрони);
фиг. 4 - воздействие глюкозы и 3-О-метилглюкоза на уровень внутриклеточного Са2+ в клетках Сасо-2. (А) В результате инкубации клеток Сасо-2 с 0,6 мМ глюкозы повышается флуоресценция по сравнению с контрольным показателем. В результате инкубации с 6 мМ глюкозы значительно повышается флуоресценция по сравнению с контрольным образцом и 0,6 мМ глюкозы. В клетках, предварительно
- 2 034014 инкубированных (в течение периода 45 мин) с 1,2-бис-(о-аминофенокси)этан-М,М,М',М'-тетрауксусной кислотой) (ВАРТА-АМ), глюкоза не стимулирует повышение уровня внутриклеточного Са2+. В результате инкубации с 3-ОМГ значительно снижается стимулируемое глюкозой повышение уровня внутриклеточного Са2+ по сравнению с показателем глюкозы в подобной концентрации. (В) Репрезентативная кривая, представляющая повышение уровня внутриклеточного Са2+, стимулируемое глюкозой в концентрации 0,6 и 6 мМ;
фиг. 5 - результаты статистических экспериментов с уровнем pH, которые демонстрируют CT-зависимую и CT-независимую секрецию HCO3 -. (А) В отсутствие глюкозы наблюдается минимальный уровень ^--независимой секреции HCO3-. В присутствии 6 мМ глюкозы удаление Cl- просвета не приводит к значительному снижению секреции HCO3-. (В) Воздействие ингибитора анионного обмена и блокатора анионных каналов на секрецию HCO3-. Эксперименты выполняют в присутствии Cl- просвета. В отсутствие глюкозы добавление 100 мкМ 4,4'-диизотиоциано-2,2'-стильбендисульфоновой кислоты (DIDS) прекращает секрецию HCO3-, в то время как 10 мкМ 5-нитро-2-(3-фенилпропиламино)бензойной кислоты (NPPB) не имеет ингибиторного воздействия на секрецию HCO3-. В присутствии 6 мМ глюкозы NPPB, но не DIDS, ингибирует секрецию HCO3-. Получали значения для n=6 тканей от разных мышей. Р<0,001.
Подробное описание изобретения
Изобретение обеспечивает терапевтическую композицию и способ лечения желудочно-кишечных болезней и состояний, таких как диарея, обеспечения регидратации, исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или улучшения функции тонкого кишечника.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает композицию, рецептированную для энтерального введения, причем композиция не содержит глюкозы. В предпочтительном варианте осуществления композицию рецептируют в форме раствора для пероральной регидратации (ORD). В другом предпочтительном варианте осуществления композиция предусматривается в форме порошка с возможностью восстановления влагосодержания для применения в качестве ORD.
В одном варианте осуществления композиция согласно настоящему изобретению включает один или несколько ингредиентов, выбранных из группы, к которой относятся свободные аминокислоты; электролиты; вода, терапевтически приемлемые носители, формообразующие, буферы, ароматизаторы, красители и/или консерванты. В одном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, включающий энтеральное введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества композиции согласно изобретению. Композиция может вводиться один или несколько раз в день. В предпочтительном варианте осуществления композицию вводят перорально.
В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает лечение от диареи вызванной ротавирусной инфекцией и/или NSP4. В другом предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение в результате обеспечивает снижение секреции Cl- и/или HCO3 - и/или улучшенную абсорбцию жидкости.
Индукция секреции анионов глюкозой.
В соответствии с настоящим изобретением было обнаружено, что глюкоза просвета вызывает секрецию чистых ионов в тонком кишечнике. При этом глюкоза вызывает активную секрецию хлоридов, вызванную повышенным внутриклеточным уровнем сАМР и Са2+. Кроме того, транспорт чистого Na+ в тонком кишечнике является абсорбционным при высокой концентрации глюкозы. Глюкоза также ведет к секреции бикарбонатов в тонком кишечнике.
Авторами настоящего изобретения было продемонстрировано, что повышение внутриклеточного уровня сАМР опосредует секрецию Cl- и/или HCO3-. Секреция Cl- и/или HCO3- в значительной степени опосредуется ионными каналами муковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости (CFTR), имеющими многочисленные (~ 20) центры возможного фосфорилирования серина и треонина. Известно, что протеинкиназа А (PKA) и протеинкиназа С (PKC) активируют анионные каналы CFTR. В исследованиях с фиксацией потенциала было продемонстрировано, что каналы CFTR быстро инактивируются (истощаются) в отсутствие постоянной активации со стороны PKA, что указывает на значение PKA в активации CFTR. Согласуется с этим наблюдением то, что предварительная обработка клеток тонкого кишечника эффективным ингибитором PKA Н89 в результате ведет к значительному снижению стимулируемого глюкозой чистого повышения Isc.
Было продемонстрировано, что антагонисты PKA ингибируют экспрессию белка SGLT1 вследствие воздействия глюкозы (Dyer et al. (2003), Eur. J. Biochem. 270(16):3377-3388). Каналы CFTR активируются сАМР-зависимой протеинкиназой (PKA), что ведет к секреции анионов. Стимулируемое глюкозой повышение Isc в тонком кишечнике частично опосредуется CFTR-опосредованным транспортом ионов.
Было продемонстрировано, что глюкоза, а также агонисты PKA (такие как сАМР) повышают миграцию SGLT1 к мембране щеточной каймы (Wright et al. (1997), J. Exp. Biol. 200(Pt 2):287-293; Dyer et al. (2003), Eur. J. Biochem. 270(16):3377-3388). Снижение Vmax указывает на общее уменьшение потока, представляющее снижение транспорта глюкозы. Снижение Vmax может быть результатом уменьшения общего количества переносчика глюкозы SGTL1, который главным образом находится в эпителиальных клетках ворсин. Потеря ворсин ведет к значительной потере доступного переносчика для поглощения
- 3 034014 глюкозы клетками.
Было обнаружено, что инкубация энтероцитов с глюкозой повышает уровень внутриклеточного сАМР. Большее повышение уровня вызываемого глюкозой внутриклеточного сАМР наблюдается в клетках ворсин по сравнению с клетками крипт. Инкубация энтероцитов с форсколином повышает уровень внутриклеточного сАМР в клетках крипт и ворсин (фиг. 3А). Опосредованный SGLT1 транспорт глюкозы происходит, главным образом, в клетках ворсин, а не в клетках крипт, поскольку большее количество SGLT-1 находится в области ворсин, чем в области крипт (Knickelbein et al. (1988), J. Clin. Invest. 82(6):2158-2163). Соответственно, повышение концентрации глюкозы в клетках крипт не приводит к повышенному ответу сАМР (фиг. 3В).
Даже при низкой концентрации (например, 0,6 мМ глюкозы, что приблизительно составляет половину его Vmax), глюкоза просвета вызывает секрецию чистых анионов. При более высокой концентрации глюкозы абсорбция натрия является преобладающей. Повышенная концентрация глюкозы просвета увеличивает внутриклеточный уровень сАМР и Са2+. Предыдущие исследования продемонстрировали, что значение Km для транспорта Na'-связанной глюкозы составляет от 0,2 до 0,7 мМ (Lo & Silverman (1998), J. Biol. Chem. 273(45):29341-29351).
Наличие опосредованного глюкозой повышения Isc в клетках, предварительно обработанных Н-89, указывает на существование РКА-независимого(ых) пути(ей) в вызванной глюкозой секреции анионов. Электрогенная секреция анионов через тонкий кишечник опосредуется ионными каналами, которые могут классифицироваться в зависимости от механизмов их активации, таких, как активация со стороны сАМР, Са2+, объем клеток и мембранный потенциал.
Также было обнаружено, что глюкоза просвета вызывает повышение внутриклеточного уровня Са2+. Кроме того, вызываемая глюкозой секреция Cl- опосредуется РКА-зависимыми, а также РКА-независимыми путями. Это означает, что помимо CFTR, активируемые кальцием хлористые каналы (СаСС) также играют роль в вызываемой глюкозой секреции анионов.
Кроме того, глюкоза стимулирует электрогенную секрецию HCO3-. Клетки тонкого кишечника, инкубированные с глюкозой, демонстрируют более высокий уровень секреции HCO3- в просвете Cl- содержащего раствора по сравнению с раствором без Cl- просвета (фиг. 4А и 4В). Эти результаты указывают, что анионные каналы опосредуют секрецию HCO3- в присутствии глюкозы. Кроме того, в результате добавления глюкозы слегка снижается обмен Cl- HCO3 - по сравнению с клетками без добавления глюкозы. Это снижение может быть вторичным по отношению к повышению внутриклеточного уровня сАМР глюкозой. Это также указывает на то, что глюкоза вызывает опосредованную анионными каналами секрецию и ингибирует электронейтральный обмен Cl- HCO3-.
Кроме того, клетки тонкого кишечника инкубировали с блокатором анионных каналов (100 мМ NPPB) и ингибитором анионного обмена (100 мМ DIDS) соответственно. Наблюдается значительное ингибирование вызванной глюкозой, опосредованной анионными каналами секреции HCO3- со стороны NPPB (100 мМ) (4,2±0,7 по сравнению с 7,6±1,5 мэкв-ч-1-см-2).
В присутствии ингибиторов анионных каналов все еще наблюдается остаточная секреция HCO3-. Это указывает на то наличие обмена Cl- HCO3- в опосредованной глюкозой секреции. Это также указывает на то, что повышенный внутриклеточный уровень кальция может ингибировать активность натриевоводородного обменника 3 (NHE3) во время нормальной пищеварительной функции, а также при некоторых болезненных состояниях. Это также указывает на то, что SGLT1 играет двойную роль в регулировании абсорбции натрия и, в некоторые моменты, стимулировании секреторного и/или абсорбционного дефекта.
Открытие вызываемого глюкозой секреторного механизма может быть использовано в лечении желудочно-кишечных болезней, включая диарею. Пациенты с острыми диарейными болезнями обычно страдают от нарушенной абсорбции глюкозы, которая случается в верхних отделах желудочнокишечного тракта. Наличие неабсорбированных углеводов может создавать осмотический эффект в кишечнике, что приводит к диарее. Кроме того, глюкоза повышает внутриклеточный уровень Са2+ и/или сАМР и вызывает секрецию анионов. Секреторный эффект глюкозы ранее был недостаточно изучен или был скрыт за одновременной абсорбцией Na'-глюкозы. Кроме того, из-за секреторного эффекта введение глюкозы особенно обостряет желудочно-кишечные болезни с нарушением абсорбции Na'-глюкозы. такие как болезнь Крона и вызванный облучением или химиотерапией энтерит, которые связаны с сокращением ворсин и, следовательно, крайне ухудшенной абсорбцией.
Во время ротавирусной инфекции, хотя и преобладает связанная с глюкозой абсорбция Na' через натрий-зависимый переносчик глюкозы (SGLT-1), который главным образом экспрессируется в клетках ворсин, существует значительная активируемая кальцием секреция Cl- через активируемый кальцием хлоридный канал (СаСС или ТМЕМ-16а) в тонком кишечнике. Кроме того, внутриклеточная глюкоза активирует активируемую кальцием секрецию хлорида и жидкости. Неструктурный белок (NSP4) является энтеротоксином, вырабатываемым ротавирусом. Было обнаружено, что результатом совместного введения глюкозы и NSP4 является длительная секреция хлоридов в клетках. В результате существующая композиция ORD, содержащая значительное количество глюкозы, дополнительно увеличивает стимулируемую кальцием секрецию хлоридов, таким образом, ухудшая вызываемую ротавирусом диарею.
- 4 034014
Терапевтические композиции.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает терапевтическую композицию для лечения желудочно-кишечных болезней и состояний, таких как диарея, для обеспечения регидратации, для исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или для улучшения функции тонкого кишечника.
Композицию рецептируют для энтерального введения, и она не содержит глюкозы. В предпочтительном варианте осуществления композицию рецептируют в форме раствора для пероральной регидратации. В другом предпочтительном варианте осуществления композиция предусматривается в форме порошка с возможностью восстановления влагосодержания для применения в качестве раствор для пероральной регидратации.
В другом варианте осуществления композиция не содержит никакого субстрата переносчиков глюкозы. В другом конкретном варианте осуществления композиция не содержит агонистов натрийзависимого переносчика глюкозы (SGLT-1), включая, помимо прочего, аналоги глюкозы (например, неметаболизируемые агонисты глюкозы для SGLT-1) и других углеводов (таких, как сахара).
Специалистам в данной области известны различные субстраты SGLT-1, включая, помимо прочих, неметаболизируемые аналоги глюкозы, такие, как α-метил-О-глюкопиранозид (АМГ), 3-С-метилглюкозу (3-ОМГ), дезокси-С-глюкозу и α-метил-О-глюкозу; и галактозу. Субстраты переносчиков глюкозы (например, SGLT-1) могут быть выбраны на основе агонистических анализов, известных специалистам в данной области. Кроме того, возможны структурные модификации глюкозы и других углеводов (таких как сахара) для получения субстратов переносчиков глюкозы (например, SGLT-1).
В одном варианте осуществления композиция не содержит глюкозы. В другом варианте осуществления композиция не содержит углеводов (таких как ди-, олиго- или полисахариды) или других соединений, которые могут быть гидролизированы в глюкозу или субстрат переносчиков глюкозы (например, SGLT-1).
В одном варианте осуществления композиция включает, по сути состоит или состоит из одного или нескольких ингредиентов, выбранных из группы, к которой относятся свободные аминокислоты; электролиты; вода, терапевтически приемлемые носители, формообразующие, буферы, ароматизаторы, красители и/или консерванты.
В другом альтернативном варианте осуществления композиция включает, по сути состоит или состоит из одного или нескольких ингредиентов, выбранных из группы, к которой относятся свободные аминокислоты; электролиты; вода, терапевтически приемлемые носители, формообразующие, буферы, ароматизаторы, красители и/или консерванты;
причем субстраты переносчиков глюкозы (например, SGLT-1) (такие как глюкоза, аналоги глюкозы) и/или соединения (такие как углеводы), которые могут быть гидролизированы в субстрат переносчиков глюкозы (например, SGLT-1) в случае присутствия в композиции, присутствуют в общей концентрации ниже чем 0,05 мМ или любой концентрации ниже чем 0,05 мМ, включая, помимо прочего, концентрацию ниже 0,04, 0,03, 0,02, 0,008, 0,005, 0,003, 0,001, 0,0005, 0,0003, 0,0001, 10-5, 10-6 или 10-7 мМ. В одном варианте осуществления противодиарейная композиция не содержит сахара. В другом варианте осуществления противодиарейная композиция не содержит субстратов переносчиков глюкозы (например, SGLT-1) (таких как глюкоза, аналоги глюкозы) и/или соединений (таких как углевод), которые могут быть гидролизированы в субстрат переносчиков глюкозы (например, SGLT-1).
К аминокислотам, применимым для противодиарейной композиции согласно изобретению, относятся, помимо прочих, аланин, аспарагин, аспарагиновая кислота, цистеин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, фенилаланин, глицин, гистидин, изолейцин, лизин, лейцин, метионин, пролин, глутамин, аргинин, серии, треонин, валин, триптофан и тирозин в L-форме.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает противодиарейную композицию, причем композиция включает, по сути состоит или состоит из свободных аминокислот лизина, глицина, треонина, валина, тирозина, аспарагиновой кислоты, изолейцина, и серина в L-форме; терапевтически приемлемых носителей, электролитов, буферов, консервантов и ароматизаторов.
В одном варианте осуществления свободные аминокислоты, содержащиеся в терапевтической композиции, могут присутствовать в нейтральных или солевых формах.
В одном варианте осуществления терапевтическая композиция также включает один или несколько электролитов, выбранных из группы, к которой относятся Na+, K+, Са2+, HCO3 - и Cl-. В одном варианте осуществления терапевтическая композиция включает хлорид натрия, бикарбонат натрия, хлорид кальция и/или хлорид калия.
В некоторых вариантах осуществления каждая свободная аминокислота может присутствовать в концентрации от 4 до 40 мМ или любое значение между этими значениями. В контексте данного описания термин состоит по сути из ограничивает объем ингредиентов и этапов указанными материалами или этапами и теми, которые не имеют существенного влияния на основные и новые характеристики настоящего изобретения, например композициями и способами, предназначенными для лечения желудочно-кишечных болезней и состояний (которые в некоторых вариантах осуществления представляют собой способы лечения диареи, такой как вызванная ротавирусом диарея), для обеспечения регидрата- 5 034014 ции, для исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или для улучшения функции тонкого кишечника. Например, фраза состоит по сути из означает, что терапевтическая композиция не содержит никаких не указанных ингредиентов, включая, помимо прочего, не указанные свободные аминокислоты, ди-, олиго- или полипептиды или белки; моно-, ди-, олиго- или полисахариды; или углеводы, оказывающие прямое благоприятное или неблагоприятное терапевтическое воздействие на лечение желудочнокишечных болезней и состояний (которое в некоторых вариантах осуществления является лечением диареи, такой как вызываемая ротавирусом диарея) для обеспечения регидратации, для исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или для улучшения функции тонкого кишечника.
Кроме того, применение фразы состоит по сути из означает, что композиция может включать вещества, не оказывающие терапевтического воздействия на лечение желудочно-кишечных болезней и состояний (которое в некоторых вариантах осуществления является лечением диареи, такой как вызываемая ротавирусом диарея) для обеспечения регидратации, для исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или для улучшения функции тонкого кишечника; к таким ингредиентам относятся носители, формообразующие, ароматизаторы, красители, консерванты и т.п., которые не влияют на лечение желудочно-кишечных болезней и состояний (которое в одном варианте осуществления является лечением диареи) для обеспечения регидратации, для исправления дисбаланса электролитов и/или для улучшения функции тонкого кишечника.
В контексте данного описания термин олигопептид означает пептид, состоящий из аминокислот в количестве от трех до двадцати.
В контексте данного описания термин олигосахарид означает сахарид, состоящий из моносахаридов в количестве от трех до двадцати. В контексте данного описания термин углеводы означает соединения, имеющие общую формулу Cn(H2O)n, где n является целым числом от 1; и включает моносахариды, дисахариды, олигосахариды и полисахариды.
Общая осмолярность композиции составляет приблизительно от 230 до 280 мосмоль или любое значение между этими значениями. Предпочтительно общая осмолярность составляет приблизительно от 250 до 260 мосмоль. В другом варианте осуществления композиция имеет общую осмолярность в любом значении ниже 280 мосмоль.
В некоторых вариантах осуществления уровень pH композиции составляет приблизительно от 7,1 до 7,9 или любое значение между этими значениями. Предпочтительно уровень pH композиции составляет приблизительно от 7,3 до 7,5, более предпочтительно приблизительно от 7,2 до 7,4, еще более предпочтительно приблизительно 7,2.
В некоторых вариантах осуществления композиция не содержит одного или нескольких ингредиентов, выбранных из группы, к которой относятся олиго- или полисахариды или углеводы; олиго- или полипептиды или белки; липиды; коротко-, средне- и/или длинноцепочечные жирные кислоты; и/или пищевой продукт, содержащий один или несколько вышеупомянутых питательных веществ.
Лечение желудочно-кишечных болезней и состояний.
Еще один аспект настоящего изобретения обеспечивает способы лечения желудочно-кишечных болезней и состояний. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения диареи, для обеспечения регидратации, для исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или для улучшения функции тонкого кишечника. В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает лечение от вызываемой ротавирусом диареи. В другом предпочтительном варианте осуществления изобретение обеспечивает лечение от диареи, вызванной NSP4.
В одном варианте осуществления способ включает введение энтеральным путем субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества композиции согласно изобретению. Композиция может вводиться один или несколько раз в день. В одном варианте осуществления композицию вводят перорально.
В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает снижение секреции Cl- и/или HCO3 - и/или улучшение абсорбции жидкости.
В контексте данного описания термин лечение или любая его грамматическая форма (например, лечить и т.п.) включает, помимо прочего, ослабление или уменьшение симптомов болезни или состояния; и/или уменьшение тяжести болезни или состояния. В некоторых вариантах осуществления лечение включает один или несколько из следующих аспектов: ослабление или уменьшение диареи, уменьшение тяжести диареи, сокращение длительности диареи, содействие выздоровлению кишечника, обеспечение регидратации, исправление дисбаланса электролитов, содействие заживлению слизистой оболочки тонкого кишечника и увеличение высоты ворсин у субъекта с диареей.
В контексте данного описания термин эффективное количество означает количество, способное излечивать или ослаблять болезнь или состояние или иным образом способное создавать предусмотренный терапевтический эффект.
В контексте данного описания термин субъект или пациент означает организм, включая млекопитающих, например приматов, для которых предусмотрено лечение с применением композиций согласно настоящему изобретению. К видам млекопитающих, для которых могут быть благоприятными описываемые способы лечения, относятся, помимо прочих, человекообразные обезьяны, шимпанзе, орангута- 6 034014 ны, человек, нечеловекообразные обезьяны; одомашненные животные, такие как собака, кошка; домашний скот, например лошади, крупный рогатый скот, свиньи, овцы, козы, куры; и другие животные, такие как мыши, крысы, морские свинки и хомяки.
В одном варианте осуществления человек является грудным ребенком в возрасте до одного года или ребенком любого возраста до одного года, например 10, 6 и 4 месяца. В другом варианте осуществления человек является ребенком в возрасте до пяти лет или любого возраста до пяти лет, например в возрасте четырех, трех или двух лет. В одном варианте осуществления субъект, нуждающийся в лечении согласно настоящему изобретению, страдает от диареи.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи, вызванной патогенными инфекциями, включая, помимо прочего, инфицирование вирусами, включая, помимо прочего, ротавирус, норовирус, цитомегаловирус и гепатит; бактериями, включая, помимо прочего, кампилобактер, сальмонеллу, шигеллу, Vibrio cholerae и Escherichia coli; паразитами, включая, помимо прочего, Giardia lamblia и криптоспоридию. В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от вызываемой ротавирусом диареи.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи, вызванной повреждением тонкого кишечника, вызванного, например, инфекцией, токсинами, химикатами, алкоголем, воспалением, аутоиммунными болезнями, раком, химиотерапией, лучевой терапией, протонной терапией и хирургической операцией желудочно-кишечного тракта.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи, вызванной болезнями, включая, помимо прочих, воспалительные болезни кишечника (IBD), включая болезнь Крона и язвенный колит; синдром раздраженной толстой кишки (IBS); аутоиммунную энтеропатию; энтероколит и глютенчувствительную целиакию.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи, вызванной хирургической операцией желудочно-кишечного тракта; резекцией желудочнокишечного тракта; трансплантацией тонкого кишечника; послеоперационной травмой и вызванным лучевой терапией, химиотерапией и протонной терапией энтеритом.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от связанной с алкоголем диареи. В другом варианте осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи путешественников и/или диареи, вызванной пищевым отравлением.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи, вызываемой повреждением слизистой оболочки тонкого кишечника, например диарейных состояний, характеризующихся уменьшенной высотой ворсин, уменьшенной площадью поверхности слизистой оболочки в тонком кишечнике и атрофией ворсин, например частичным или полным истощением ворсистой области и щеточной каймы. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи, вызываемой повреждением эпителиальных клеток слизистой оболочки тонкого кишечника, включая слизистый слой двенадцатиперстной кишки, тощей кишки и подвздошной кишки.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от секреторной диареи. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от секреторной диареи, опосредованной CFTR-каналами и/или СаСС-каналами (например, ТМЕМ-16а). В одном варианте осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от острой и/или хронической диареи.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от диареи, вызванной нарушением всасывания питательных веществ. В одном варианте осуществления настоящее изобретение может применяться для лечения от секреторной диареи, вызываемой снижением уровня или функциональной активности переносчиков глюкозы, таких, как SGLT-1.
В контексте данного описания термин диарея означает состояние, при котором в течение 24часового периода трижды или большее количество раз случается неоформленный, жидкий или водянистый стул. Острая диарея означает диарейные состояния, длящиеся не более четырех недель. Хроническая диарея означает диарейные состояния, длящиеся более четырех недель.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение не включает введения одного или нескольких из следующих ингредиентов, выбранных из группы, к которой относятся глюкоза, аналоги глюкозы, субстраты переносчиков глюкозы (например, SGLT-1), ди-, олиго- или полисахариды; углеводы; или молекулы, которые могут быть гидролизированы в глюкозу или субстрат переносчиков глюкозы (например, SGLT-1).
В некоторых альтернативных вариантах осуществления настоящее изобретение включает введение одного или нескольких ингредиентов, выбранных из группы, к которой относятся глюкоза; аналоги глюкозы; субстраты переносчиков глюкозы (например, SGLT-1); ди-, олиго- или полисахариды; углеводы; или молекулы, которые могут быть гидролизированы в глюкозу или субстрат переносчиков глюкозы (например, SGLT-1), причем общая концентрация этих ингредиентов составляет менее 0,05 мМ или является любой концентрацией ниже 0,05 мМ включая, помимо прочих, концентрацию ниже 0,04, 0,03,
- 7 034014
0,02, 0,01, 0,008, 0,005, 0,003, 0,001, 0,0005, 0,0003, 0,0001, 10-5, 10-6 или 10-7 мМ.
Композиции и введение.
Настоящее изобретение обеспечивает терапевтическую или фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество композиции, являющейся предметом изобретения, и, необязательно, фармацевтически приемлемый носитель. Такие фармацевтические носители могут быть стерильными жидкостями, такими как вода. Терапевтическая композиция также может включать формообразующие, ароматизаторы, красители, консерванты и т.п., которые не влияют на лечение желудочнокишечных болезней и состояний (которое в одном варианте осуществления является лечением диареи), для обеспечения регидратации, для исправления дисбаланса электролитов и жидкостей и/или для улучшения функции тонкого кишечника.
В одном варианте осуществления терапевтическая композиция и все содержащиеся в ней ингредиенты являются стерильными. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композицию рецептируют в форме средства для питья, или же композиция предусматривается в форме порошка с возможностью восстановления влагосодержания в воде для использования в форме средства для питья.
Термин носитель означает разбавитель, адъювант, формообразующее или основу, с которыми вводят соединение. Примеры подходящих фармацевтических носителей описываются в публикации Remington's Pharmaceutical Sciences E.W. Martin. Такие композиции содержат терапевтически эффективное количество терапевтической композиции вместе с соответствующим количеством носителя для обеспечения формы для надлежащего введения пациенту. Рецептура должна соответствовать энтеральному режиму введения.
Изобретение также обеспечивает фармацевтическую упаковку или комплект, включающий одно или несколько вместилищ, заполненных одним или несколькими ингредиентами, например, соединением, носителем или фармацевтическими композициями согласно изобретению. Ингредиенты композиции могут быть упакованы отдельно или могут быть смешаны между собой. Комплект также может включать инструкции по введению композиции пациенту.
Материалы и способы.
Композиция для животных.
Получавших нормальное питание 8-недельных самцов, утвержденных Национальными институтами здравоохранения домовых мышей, умерщвляют углекислым газом с последующим смещением шейных позвонков. Тонкий кишечник осторожно извлекают и отрезок промывают и ополаскивают в ледяном растворе Рингера. Затем слизистую оболочку отделяют от серозной оболочки и мышечных слоев путем страйпинга через подслизистую плоскость, как описывалось ранее (Zhang et al. (2007), J. Physiol. 581(3):1221-1233). После обескровливания слизистую оболочку подвздошной кишки берут из 10 см отрезка поблизости от слепой кишки. Все эксперименты были утверждены Комитетом по содержанию и использованию лабораторных животных Флоридского университета.
Биоэлектрические измерения.
Исследования ионного переноса выполняют на листовом материале подвздошной кишки. Затем ткани закрепляют между двумя половинами люцитовой камеры Уссинга с площадью открытой поверхности 0,3 см2 (Р2304, Physiologic Instruments, San Diego, CA, USA). Регулярный раствор Рингера (115 мМ NaCl, 25 мМ NaHCO3, 4,8 мМ K2HPO4, 2,4 мМ KH2PO4, 1,2 мМ MgCl2 и 1,2 мМ CaCl2), барботированный 95% О2: 5% СО2, используют с двух сторон в качестве промывочного раствора для тканей и температуру поддерживают на неизменном уровне 37°C. Камеры уравновешивают для устранения осмотических и гидростатических сил. Также компенсируют сопротивление от жидкости. Тканям дают стабилизироваться. Основной ток короткого замыкания (Isc) и соответствующую проводимость (G) записывают с использованием компьютеризированного вольт-амперного зажимного устройства (VCC МС-8, Physiologic Instalments).
Исследования потока.
Изотоп натрия, 22Na, используют для исследования потока Na через слизистую оболочку в основных условиях с последующим добавлением глюкозы. Спаренные по проводимости ткани предусмотрены для изучения потока от серозной до слизистой оболочки (Jsm), представляющего секреторную функцию, и для изучения потока от слизистой до серозной оболочки (Jms), представляющего абсорбционную функцию. 22Na добавляют на указанной стороне ткани и образцы по 500 мкл собирают каждые 15 мин с другой стороны. В отдельном наборе тканей 36Cl добавляют на серозной или слизистой стороне. Глюкозу в концентрации 8 мМ добавляют в камеру для полной стимуляции и записывают соответствующие изменения Isc и проводимости. Проводимость записывают на основе закона Ома.
Собирают три образца при каждых условиях. Радиоактивность подсчитывают при помощи гаммасчетчика. Подбирают ткани с изменением проводимости менее чем 10% и рассчитывают среднее значение Jnet Jms Jsm.
- 8 034014
Исследование ингибитора протеинкиназы А (PKA).
Ткани, спаренные по подобию проводимости и тока, обрабатывают с применением или без применения 100 мкМ Н-89 (Santa Cruz Biotechnology, Inc, Santa Cruz, CA), необратимого ингибитора протеинкиназы А (PKA). Ткани инкубируют с Н-89 в течение 30 мин. Глюкозу с повышающейся концентрацией (0,015-8 мМ) добавляют каждые 5 мин и записывают пиковый ток. Константу кинетики насыщения рассчитывают для соответствующих Km и Vmax для обработанных и необработанных тканей.
Культура клеток Сасо-2.
Клетки Сасо-2 дифференцируют после слияния в клетки с функциональными характеристиками эмбрионального эпителия подвздошной кишки. Клетки Сасо-2 вырабатывают микроворсины и обладают повышенной экспрессией специфических транспортных белков тонкого кишечника, включая SGLT1, и, таким образом, широко применяются в качестве модельной системы для изучения функции энтероцитов.
Клетки Сасо-2 получают от АТТС и культивируют в модифицированной Дульбекко среде Игла, дополненной 10% эмбриональной сывороткой крупного рогатого скота (FCS) и 1% заменимыми аминокислотами, при 37°C и 5% CO2. Клетки Сасо-2 пассируют 20-25 раз и высевают (2х 105 клеток/чашку) на 5 см чашки Петри и выращивают до слияния 80%, когда концентрация FCS изменяется до 5%. Клетки выращивают еще в течение 10 дней до их использования для функциональных исследований.
Конфокальная флуоресцентная микроскопия Са2+.
Клетки Caco2, выращиваемые на 25 мм покровных стеклах, закрепляют на термостатированной ванне RC-21BR, прикрепленной к переходнику 20-й серии (Warner Instruments, CT USA). Клетки поддерживают при 37°C, используя одноканальный настольный терморегулятор (ТС-324В, Warner Instruments, CT, USA). Клетки загружают с флуоресцентным красителем - индикатором кальция Fluo-8 AM (Cat # 0203, TEFLab, Inc., Austin, TX USA) в концентрации 0,5 мкМ при комнатной температуре и инкубируют в течение 45 мин. Конфокальную лазерную сканирующую микроскопию выполняют с применением инвертированного микроскопа Fluoview 1000 IX81 (Olympus, Tokyo, Japan) и объектива U Plan S-Apo 20х. Флуоресценцию записывают при помощи аргоновых лазеров с возбуждением при 488 нм и излучением при 515 нм. Флуоресцентные изображения собирают при помощи сканирующего конфокального микроскопа. В каждую ванну добавляют растворы, такие как раствор Рингера, раствор Рингера с содержанием глюкозы или раствор Рингера с содержанием глюкозы и ВАРТА-АМ с применением многоклапанной перфузионной системы (VC-8, Warner Instruments, Hamden CT, USA), контролируемой при помощи клапанного контроллера VC-8 (Warner Instruments, Hamden CT, USA). Изменения записывают и измеряют флуоресценцию для различных клеток. Клетки промывают раствором Рингера и эксперимент повторяют с применением 3-O-метилглюкозы и карбехола (положительный контроль).
Колориметрические измерения сАМР.
Свежевыделенные соскобы эпителиальных клеток слизистой оболочки подвздошной кишки трижды промывают в растворе Рингера, содержащем 1,2 мМ Са2+ при 37°C. Промытые клетки затем разделяют на две группы и обрабатывают солевым раствором или 6 мМ глюкозы и инкубируют в течение 45 мин. Клетки обрабатывают 0,1М HCl для прекращения эндогенной активности фосфодиэстеразы. Лизаты затем используют для анализа сАМР с применением комплекта для прямого иммуноанализа сАМР (Calbiochem, USA).
Для количественного анализа сАМР применяют поликлональное антитело к сАМР, которое конкурентно связывается с сАМР в образцах. После одновременной инкубации при комнатной температуре излишки реагентов смывают и добавляют субстраты. После кратковременной инкубации реакцию прекращают и образовавшийся желтый цвет считывают при 405 нм. Интенсивность цвета обратно пропорциональна концентрации сАМР в стандартах и образцах. Значения сАМР унифицируют со значениями белка соответствующих фракций и выражают в пикомолях (мг белка)-1.
Обработанные форсколином клетки используют в качестве положительного контроля. Обработанные глюкозой и форсколинов клетки инкубируют в течение 45 мин. Все анализы выполняют в трех экземплярах и повторяют до n=4 разных мышей.
Примеры
Далее представлены примеры, поясняющие процедуры и варианты практического осуществления изобретения. Эти примеры не следует рассматривать как ограничивающие. Все процентные показатели указываются по массе, и все пропорции смеси указываются по объему, если не указано иного.
Пример 1. Стимулируемое глюкозой повышение Isc в подвздошной кишке.
Этот пример демонстрирует, что глюкоза стимулирует повышение Isc подвздошной кишки у мышей. В частности, добавление глюкозы (8 мМ) со стороны просвета в результате ведет к значительному повышению Isc по сравнению с исходным уровнем (3,4±0,2 vs 1,1±0,1 мэкв-ч-1-см-2). Показатель Isc, полученный с применением исследований в стандартной камере Уссинга, является суммой движения чистых ионов через эпителий (Isc=JnetNa++JnetCl-+JnetHCO3--JnetK+).
Механизмы (ENaC-опосредованные) абсорбции Na+ или секреции Na+ в тонком кишечнике неизвестны. Лечение стороны слизистой оболочки тонкого кишечника с применением 10 мкМ амилорида, ингибитора эпителиального натриевого канала, никак не воздействует на Isc.
- 9 034014
Таким образом, базовый показатель Isc 1,1±0,1 мэкв-ч-1-см-2 в первую очередь обусловлен активностью муковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости (CFTR) из крипты и секреторным потоком K+.
Для определения кинетики насыщения транспорта Na'-связанной глюкозы глюкозу с повышающейся концентрацией до 8 мМ добавляют со стороны просвета в присутствии 140 мМ Na+. Глюкоза с повышающейся концентрацией в результате дает повышенный, но насыщаемый показатель Isc (фиг. 1 А), 12 с Km 0,24±0,03 мМ и Vmax 3,6±0,19 мкэкв-ч- -см для глюкозы. При концентрации глюкозы от 0,5 до 0,7 мМ кинетика насыщения глюкозой демонстрирует ранние признаки насыщения; несмотря на это непрерывное повышение концентрации глюкозы приводит к непрерывному повышению показателя Isc, таким образом ведя к перегибу кривой насыщения глюкозой при концентрации глюкозы от 0,5 до 0,7 мМ.
Пример 2. Стимулируемое 3-O-метилглюкозой повышение Isc.
В этом примере исследовали, обусловлена ли кинетика насыщения глюкозой, наблюдаемого в примере 1, SGLT'1-опосредованным транспортом, а не метаболизмом глюкозы в эпителиальных клетках. В частности, 3-O-метилглюкозу (3-ОМГ), слабо метаболизируемую форму глюкозы, добавляют со стороны просвета для изучения кинетики насыщения транспорта Na'-связанной глюкозы.
Фиг. 1В показывает кинетику насыщения 3-ОМГ с показателем Vmax 2,3±0,13 мкэкв-ч-1-см-2 и Km 0,22±0,07 мМ). Добавление 3-ОМГ в результате ведет к значительному снижению Vmax (2,3±0,13 мкэкв-ч-1-см-2 vs 3,4±0,2 мкэкв-ч-1-см-2) без изменений Km в транспорте Na'-связанной глюкозы по сравнению с показателем глюкозы. Как и в случае глюкозы, наблюдается перегиб с 3-ОМГ при концентрации от 0,5 до 0,7 мМ (фиг. 1В).
Пример 3. Стимулируемый глюкозой показатель Isc в присутствии Н-89.
Согласно известным ныне механизмам транспорта стимулируемое глюкозой повышение Isc может быть результатом электрогенной секреции анионов или электрогенной абсорбции Na+.
Протеинкиназа А (PKA), также известная как сАМР-зависимая протеинкиназа, требуется для активации CFTR-каналов. Для изучения роли для PKA в вызываемом глюкозой повышении Isc ткани закрепляют в камерах Уссинга и инкубируют с Н-89, ингибитором PKA, в течение 45 мин. Затем ткани используют для изучения кинетики насыщения глюкозой.
В присутствии Н-89 глюкоза демонстрирует Vmax 0,8±0,06 мкэкв-ч-1-см-2 и Km 0,58±0,08 мМ. Перегиб в кривой насыщения глюкозой (наблюдаемый при инкубации тканей подвздошной кишки инкубируют с глюкозой в концентрации от 0,5 до 0,7 мМ) полностью исчезает при предварительной обработке клеток подвздошной кишки Н-89 со сдвигом кривой насыщения вправо (фиг. 1С). Результаты указывают на ингибирование процессов PKA-зависимого транспорта при низкой концентрации глюкозы.
Подобно кривой насыщения глюкозой, 3-ОМГ также демонстрирует PKA-чувствительный поток. Кривая насыщения 3-ОМГ (с инкубацией Н-89) существенно не отличается от наблюдаемой с глюкозой (с инкубацией Н-89) (фиг. 1А и В).
Изменения в кинетике насыщения глюкозой и 3-О-метилглюкозой в присутствии и в отсутствие Н-89 - ингибитора PKA
| V щах | кт | V max | Кт | |
| Ингибиторы РКА | - | - | Н-89 | Н-89 |
| Глюкоза | 3,6 ±0,2 | 0,2 ±0,1 | 1,6 ±0,1 | 0,5 ±0,1 |
| 3-ОМГ | 2,7 ±0,1 | 0,2 ±0,1 | 1,4 ±0,1 | 0,6 ±0,1 |
*Часть стимулируемого глюкозой и 3-ОМГ потока прекращается в присутствии PKA. Результаты указаны для n=8 тканей.
Результаты указывают, что ингибируемый PKA поток (показанный в таблице) является результатом транспорта Na'-связанной глюкозы, а не других внутриклеточных метаболизмов с участием глюкозы (см. таблицу).
PKA играет значительную роль в сАМР-опосредованной секреции анионов и SGLT1опосредованной абсорбции Na+ и глюкозы. Наличие нечувствительного к Н-89 потока указывает, что глюкоза стимулирует не опосредованную PKA секрецию анионов (такую, как опосредованная внутриклеточным Са2+ секреция).
Пример 4. Прекращение стимулируемого глюкозой повышения Isc в присутствии флоризина.
Чтобы исследовать, прекращает ли ингибирование транспорта глюкозы чувствительный к PKA поток, проводят эксперименты с использованием флоризина (Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA, USA), обратимого конкурентного ингибитора SGLT1. В частности, ткани подвздошной кишки, закрепленные в камере Уссинга, обрабатывают 100 мкМ флоризина на стороне просвета и проводят исследования кинетики насыщения глюкозой.
Результаты демонстрируют, что стимулируемое глюкозой и/или 3-ОМГ повышение Isc полностью прекращается в присутствии флоризина (фиг. 1С). Результаты указывают, что активность переносчика глюкозы через SGLT1 существенна для чувствительного и нечувствительного к PKA потока.
- 10 034014
Пример 5. Влияние глюкозы на однонаправленный и результирующий поток натрия.
Измерения изотопного потока Na+ выполняют с использованием 22Na при неизменной скорости переноса от слизистой до серозной оболочки Jms или от серозной до слизистой оболочки Jsm. Результирующий поток Na+ рассчитывают при помощи уравнения Jnet Jms - Jsm + Jnet указывает на чистую абсорбцию; при этом -Jnet указывает на чистую секрецию.
В отсутствие глюкозы (0 мМ) ткани тонкого кишечника демонстрируют абсорбцию чистого натрия (1,8±0,3 мэкв-ч-1-см-2). Абсорбция Na+ прекращается в присутствии 0,6 мМ глюкозы. Однако добавление 6 мМ глюкозы в результате ведет к значительному повышению Jnet Na+ (3,2±0,5 мэкв-ч-1-см-2), указывая на абсорбцию чистого натрия. Однонаправленные потоки Na+ не демонстрируют значительной разницы при 0, 0,6 и 6 мМ глюкозы (фиг. 2В).
Пример 6. Влияние глюкозы на однонаправленный и результирующий поток хлорида.
Изменение Isc при 0,6 мМ глюкозы рассчитывают как 1,1 мэкв-ч-1-см-2 (2,2±0,3-1,1±0,1 мэкв-ч-1-см-2), а изменение Isc при 6 мМ глюкозы рассчитывают как 2,2 мэкв-ч-1-см-2 (3,4±0,2-1,1±0,1 мэкв-ч-1-см-2). Повышение Isc с увеличивающейся концентрацией глюкозы не может полностью объясняться на основе значений JnetNa+ (на основе значений при 0,6 и 6 мМ глюкозы).
Измерения изотопного потока для Cl- выполняют с использованием 36Cl для того, чтобы определить, обусловливает ли поток Cl- часть Isc, которая не может объясняться JnetNa+. Показатель JnetCl-, рассчитанный в отсутствие глюкозы, указывает на абсорбцию Cl- (2±0,3 мэкв-ч-1-см-2). Уровень абсорбции натрия (1,8±0,3 мэкв-ч-1-см-2) сравним с показателем хлорида (2,0±0,3 мэкв-ч-1-см-2) в отсутствие глюкозы, указывая на электронейтральную абсорбцию Na+ и Cl-.
Добавление 0,6 или 6 мМ глюкозы на слизистой стороне приводит к секреции чистого Cl- (фиг. 2А). JnetCl- при 0,6 мМ глюкозы (-3,6±0,8 мэкв-ч-1-см-2) и 6 мМ глюкозы (-4,0±1,4 мэкв-ч-1-см-2) существенно не отличаются.
Результаты демонстрируют наличие значительного повышения JsmCl- в присутствии глюкозы (при 0,6 и 6 мМ глюкозы) (JsmCl- 16,9±0,7 мэкв-ч-1-см-2 и 17±0,7 мэкв-ч-1-см-2 соответственно) по сравнению с JsmCl- в отсутствие глюкозы (11,9±0,4 мэкв-ч-1-см-2) (фиг. 2А). Результаты указывают на значительную секрецию Cl- при концентрации глюкозы всего 0,6 мМ. Повышение концентрации глюкозы не ведет к повышению секреции Cl-.
Пример 7. Секреция НСО3 - в подвздошной кишке в отсутствие глюкозы в просвете.
Трансэпителиальные электрические измерения и исследования потока показывают, что добавление глюкозы к тканям подвздошной кишки вызывает значительную секрецию Cl-. Хотя JnetCl- при 0,6 и 6 мМ глюкозы демонстрирует значительную секрецию анионов, это не объясняет всех изменений Isc, особенно с учетом значительных различий между значениями Isc при 6 мМ глюкозы 6 мэкв-ч-1-см-2 (7,5±0,4 1,5±0,1 мэкв-ч-1-см-2) и 0,6 мМ.
Статистические исследования pH выполняют для того, чтобы определить, участвует ли секреция HCO3 - в неучтенной части Isc. Авторами настоящего изобретения было распознано как минимум два режима секреции HCO3 - в тонком кишечнике мыши:
1) Cl- зависимый, электронейтральный обмен Cl--HCO3- и
2) Cl--независимая электрогенная секреция НСО3-.
Результаты демонстрируют, что эндогенная секреция HCO3- не участвует в чистой секреции HCO3-. В частности, не содержащий HCO3- слабо буферированный раствор добавляют с обеих сторон тканей, закрепленных в камере Уссинга, и обе стороны тканей барботируют 100% O2. В таких условиях записывают минимальную секрецию HCO3 - (0,1±0,01 мэкв-ч-1-см-2, n=12). Последующее добавление содержащего HCO3- буферного раствора на базолатеральной стороне и барботирование 95% О2 и 5% CO2 на этой стороне приводит в значительной секреции HCO3 - 3,8±0,2 мэкв-ч-1-см-2 (n=9).
Чтобы определить, играет ли независимая от Cl- просвета секреция HCO3- роль в секреции HCO3- (в отсутствие глюкозы в просвете), статистические эксперименты pH выполняют в отсутствие Cl- просвета. В отсутствие Cl- просвета записывают минимальную секрецию HCO3- (0,4±0,1 мэкв-ч-1-см-2) (фиг. 5А). Результаты указывают, что основная секреция HCO3- в отсутствие глюкозы в просвете главным образом обусловлена Cl--зависимым электронейтральным обменом Cl--HCO3 -.
Пример 8. Влияние глюкозы в просвете на секрецию НСО3 - в подвздошной кишке.
Статистические эксперименты pH выполняют для определения влияния глюкозы на зависимую от Cl- просвета секрецию HCO3-. В присутствии Cl- просвета добавление глюкозы со стороны просвета приводит к значительной секреции HCO3 - (7,6±мэкв-ч-1-см-2).
Секреция HCO3- в присутствии глюкозы может быть обусловлена зависимым от Cl- просвета электронейтральным обменом Cl-HCO3- или независимой от Cl- просвета опосредованной анионными каналами секреции HCO3-. Для оценки механизма стимулируемой глюкозой секреции HCO3- глюкоза добавляют со стороны слизистой оболочки. Удаление Cl- просвета не прекращает секрецию HCO3- в тканях, инкубированных с 6 мМ глюкозы (3,2±0,6 мэкв-ч-1-см-2) (фиг. 5А). Результаты указывают, что секреция HCO3- в присутствии глюкозы главным образом обусловлена независимой от Cl- просвета секрецией и
- 11 034014 опосредована анионными каналами.
В другом эксперименте 100 мкМ 5-нитро-2-(3-фенилпропиламино)бензойной кислоты (NPPB), неспецифического блокатора анионных каналов, добавляют со стороны просвета. NPPB ингибирует независимую от Cl- просвета секрецию HCO3-, обнаруживаемую в присутствии 6 мМ глюкозы (фиг. 5В). Результаты указывают, что стимулируемая глюкозой секреция HCO3- опосредуется через анионный канал.
Чтобы исследовать, происходит ли вызванная глюкозой секреция HCO3 - через канал CFTR, 100 мкМ глибенкламида добавляют со стороны просвета. Глибенкламид ингибирует независимую от Clпросвета секрецию HCO3-, стимулируемую глюкозой, указывая на то, что каналы CFTR опосредуют стимулируемую глюкозой секрецию HCO3-.
Пример 9. Влияние метаболизма глюкозы на опосредованную анионными каналами секрецию НСОз-.
Чтобы определить, объясняет ли метаболизм глюкозы в ткани тонкого кишечника стимулируемую глюкозой секрецию HCO3 -, ткани тонкого кишечника инкубируют с 3-ОМГ, слабо метаболизируемой формой глюкозы, в отсутствие HCO3- просвета и ванны. Секреция HCO3- (0,1±0,03 мэкв-ч-1-см-2) наблюдается в присутствии 3-ОМГ (6 мМ) и в отсутствие HCO3 - просвета и ванны.
Пример 10. Влияние глюкозы на уровень внутриклеточного сАМР в подвздошной кишке.
В отсутствие глюкозы лизаты клеток из клеток ворсин демонстрируют более высокий уровень внутриклеточного сАМР по сравнению с уровнем в клетках крипт. Инкубация с форсколином в результате ведет к значительному повышению уровня |cAMP|, в клетках ворсин и крипт (фиг. 3А). Обработанные форсколином клетки используют в качестве положительного контроля.
Для изучения влияния глюкозы на уровень внутриклеточного сАМР клетки ворсин и крипт инкубируют с 6 мМ глюкозы. Инкубация лизатов вирусных клеток с глюкозой в результате ведет к значительному повышению уровня внутриклеточного сАМР по сравнению с показателем клеток крипт (фиг. 3В). Результаты указывают, что опосредованное глюкозой повышение уровня внутриклеточного сАМР играет роль в опосредовании стимулируемой глюкозой секреции анионов. Повышение |cAMP|, наблюдается в клетках ворсин, но не в клетках крипт; это указывает на то, что механизм транспорта глюкозы требуется только в полностью созревших и дифференцированных эпителиальных клетках ворсин.
Чтобы определить, влияет ли метаболизм глюкозы на уровень внутриклеточного сАМР, соскобы слизистой оболочки из подвздошной кишки предварительно инкубируют с 3-ОМГ в течение 45 мин, а затем лизаты клеток используют для измерения уровня внутриклеточного сАМР.
Подобно глюкозе, инкубация клеток ворсин с 3-ОМГ в концентрации 0,6 и 6 мМ приводит к значительному повышению уровня внутриклеточного сАМР (фиг. 3С). Инкубация клеток ворсин с 3-ОМГ при 6 мМ приводит к значительному повышению уровня внутриклеточного сАМР по сравнению с 6 мМ глюкозы (Р < 0,01) (фиг. 3С). Результаты демонстрируют, что наблюдаемое повышение уровня внутриклеточного сАМР не вызвано метаболизмом глюкозы в тканях тонкого кишечника.
Пример 11. Влияние глюкозы на внутриклеточный Ca2+ в линиях клеток Caco2.
Ингибитор PKA (Н-89) ингибирует стимулируемую сАМР секрецию анионов и опосредованный SGLT1 транспорт глюкозы. Наличие нечувствительного к Н-89 Isc (фиг. 1А и В) указывает, что PKAнезависимый механизм также участвует в вызываемой глюкозой секреции. В качестве сАМР внутриклеточный Са2+ является одним из главных внутриклеточных вторичных мессенджеров, участвующих в секреции анионов.
Для определения роли внутриклеточного Са2+ в стимулируемом глюкозой повышении Isc уровень внутриклеточного Са2+ измеряют в присутствии различных концентраций глюкозы и 3-ОМГ, соответственно, и в присутствии ВАРТА-AM (1,2-бис-(о-аминофенокси)этан-Ц^№,№-тетрауксусной кислоты) внутриклеточного кальций-специфического хелатирующего агента. Реакцию Са2+ на глюкозу и 3-ОМГ в культивируемых клетках Caco2, нагруженных индикатором Са2+ fluo 8, наблюдают при помощи лазерной сканирующей конфокальной микроскопии. Добавление 0,6 мМ глюкозы к среде ванны вызывает колебания внутриклеточного Са2+ (фиг. 4 В). Амплитуда колебаний со временем снижается. Рассчитанная средняя пиковая амплитуда флуоресценции кальция (F/Fo) с 0,6 мМ глюкозы составляет 1,32±0,1 (n=10).
Вызванное глюкозой колебание Са2+ не связано с внутриклеточным метаболизмом глюкозы, поскольку 0,6 мМ 3-ОМГ глюкозы вызывает подобное колебание Са2+ (1,2±0,1 (n=10) (фиг. 4А). Стимулируемое глюкозой колебание Са2+ устраняют путем предварительной инкубации клеток с хелатирующим агентом внутриклеточного Са2+ ВАРТА-AM в течение 45 мин (1,01±0,1) (n=10) (фиг. 4А).
Глюкозу добавляют в более высокой концентрации (6 мМ), чтобы определить, увеличивает ли повышенная концентрация глюкозы амплитуду колебаний Са+. Колебания Са2+ значительно повышаются при добавлении глюкозы (1,85±0,2 vs 1,32±0,1) или 3-ОМГ (1,5±0,1 vs 1,2±0,2) в количестве 6 мМ к среде ванны по сравнению с показателем 0,6 мМ глюкозы или 3-ОМГ (фиг. 4А). Стимулируемое глюкозой увеличение колебаний Са2+ полностью устраняется путем предварительной инкубации клеток с ВАРТААМ (фиг. 4А). Это указывает на то, что внутриклеточный Са2+ участвует в вызываемой глюкозой секреции анионов.
Пример 12. Терапевтическая композиция для лечения от диареи.
- 12 034014
В некоторых вариантах осуществления этот пример обеспечивает композицию для лечения от диареи, такой как вызываемая ротавирусом диарея. В одном варианте осуществления композиция не включает глюкозы, аналогов глюкозы, субстратов переносчиков глюкозы или молекул сахара.
| Композиция 1 (на флакон размера 1 (237 мл) | ||
| Количество на порцию | | % суточной нормы* | |
| L-Валин | 276 мг * | |
| L-Аспарагиновая кислота | 252 мг * | |
| L-Серин | 248 мг * | |
| L-Изолейцин | 248 мг * | |
| L-Треонин | 225 мг * | |
| L-Лизин HCL | 172 мг * | |
| L-Глицин | 141 мг * | |
| L-Тирозин | 51 мг * | |
| Другие ингредиенты: вода, электролиты |
Все приведенные авторами источники, включая публикации, патентные заявки и патенты, включены путем ссылки в том же объеме, как если бы каждый источник был отдельно и специально указан как включенный путем ссылки и был изложен в этом описании в полном объеме.
Термины, указанные в единственном числе, и другие подобные объекты, указанные в контексте описания изобретения, следует рассматривать как охватывающие как единственное, так и множественное число, если авторами не указывается иного или если это явно не противоречит контексту.
Указание диапазонов значений предусмотрено лишь в качестве способа сокращенного представления каждого отдельного значения, охватываемого этим диапазоном, если авторами не указывается иного, и каждое отдельное значение включается в описание, как если бы оно было отдельно указано авторами. Если не указано иного, все указанные авторами конкретные значения представляют соответствующие приблизительные значения (например, все конкретные типичные значения, представленные в отношении конкретного фактора или измерения могут рассматриваться как такие, что также предусматривают соответствующее приблизительное измерение, с определением приблизительно в соответствующих случаях).
Использование любых и всех примеров или указание в качестве примера (например, выражение такие, как) предусмотрено лишь для улучшенного освещения изобретения и не предполагает ограничения объема изобретения, если не указано иного. Ни одна формулировка в описании не должна рассматриваться как указывающая на какой-либо элемент в качестве существенного для практического осуществления изобретения, если этого прямо не указано.
Описание любого аспекта или варианта осуществления изобретения с применением таких терминов, как включает, имеет, охватывает или содержит по отношению к элементу или элементам предусматривается в подтверждение подобного аспекта или варианта осуществления изобретения, который состоит из, главным образом состоит из или главным образом включает этот конкретный элемент или элементы, если не указано иного или если это явно не противоречит контексту (например, композиция, описываемая авторами как включающая конкретный элемент, также должна рассматриваться как композиция, состоящая из этого элемента, если не указано иного или если это явно не противоречит контексту).
Следует понимать, что описанные авторами примеры и варианты осуществления предусмотрены лишь для пояснения и специалистам станут понятны различные модификации или видоизменения в контексте изобретения, которые соответствуют сущности и объему данного изобретения.
- 13 034014
Библиография
Zhang Н, Ameen Ν, Melvin JE, & Vidyasagar S (2007) Acute inflammation alters bicarbonate transport in mouse ileum. J Physiol 581(3):1221-1233.
Hediger MA & Rhoads DB (1994) Molecular physiology of sodium-glucose cotransporters. (Translated from eng) Physiol. Rev. 74(4):993-1026 (in eng).
Wright EM, Loo DD, Hirayama BA, & Turk E (2004) Surprising versatility of Na+glucose cotransporters: SLC5. (Translated from eng) Physiology (Bethesda) 19:370-376 (in eng).
Chen XZ, Coady MJ, Jackson F, Berteloot A, & Lapointe JY (1995) Thermodynamic determination of the Na+: glucose coupling ratio for the human SGLT1 cotransporter. (Translated from eng) Biophys. J. 69(6):2405-2414 (in eng).
Torres-Pinedo R, Rivera CL, & Fernandez S (1966) Studies on infant diarrhea. II. Absorption of glucose and net fluxes of water and sodium chloride in a segment of the jejunum. (Translated from eng) J. Clin. Invest. 45(12):1916-1922 (in eng).
Davidson GP, Gall DG, Petrie M, Butler DG, & Hamilton JR (1977) Human rotavirus enteritis induced in conventional piglets. Intestinal structure and transport. (Translated from eng) J. Clin. Invest. 60(6):1402-1409 (in eng).
Nalin DR, et al. (1979) Oral rehydration and maintenance of children with rotavirus and bacterial diarrhoeas. (Translated from eng) /ri///. World Health Organ. 57(3):453-459 (in eng).
Lorrot M & Vasseur M (2007) How do the rotavirus NSP4 and bacterial enterotoxins lead differently to diarrhea? (Translated from eng) Virol./4:31 (in eng).
Chapman MJ, et al. (2009) Glucose absorption and gastric emptying in critical illness. (Translated from eng) Crit Care 13(4):R140 (in eng).
Telch J, et al. (1981) Intestinal glucose transport in acute viral enteritis in piglets. (Translated from eng) Clin Sci (Lond) 61(1):29-34 (in eng).
Lo В & Silverman M (1998) Cysteine scanning mutagenesis of the segment between putative transmembrane helices IV and V of the high affinity Na+/Glucose cotransporter SGLT1. Evidence that this region participates in the Na+ and voltage dependence of the transporter. (Translated from eng) J. Biol. Chem. 273(45):29341-29351 (in eng).
Wright EM, Hirsch JR, Loo DD, & Zampighi GA (1997) Regulation of Na+/glucose cotransporters. (Translated from eng) J. Exp. Biol. 200(Pt 2):287-293 (in eng).
Dyer J, Vayro S, King TP, & Shirazi-Beechey SP (2003) Glucose sensing in the intestinal epithelium. (Translated from eng) Eur. J. Biochem. 270(16):3377-3388 (in eng).
Gribble FM (2008) RD Lawrence Lecture 2008: Targeting GLP-1 release as a potential strategy for the therapy of Type 2 diabetes. (Translated from eng) Diabet. Med. 25(8):889-894
- 14 034014 (in eng).
Gustavsson N, et al. (Synaptotagmin-7 as a positive regulator of glucose-induced glucagon-like peptide-1 secretion in mice. (Translated from eng) Diabetologia 54(7):1824-1830 (in eng).
Eissele R, et al. (1992) Glucagon-like peptide-1 cells in the gastrointestinal tract and pancreas of rat, pig and man. (Translated from eng) Eur. J. Clin. Invest. 22(4):283-291 (in eng).
Elliott RM, et al. (1993) Glucagon-like peptide-1 (7-36)amide and glucose-dependent insulinotropic polypeptide secretion in response to nutrient ingestion in man: acute post-prandial and 24-h secretion patterns. (Translated from eng) J. Endocrinol. 138(1):159-166 (in eng).
Herrmann C, et al. (1995) Glucagon-like peptide-1 and glucose-dependent insulinreleasing polypeptide plasma levels in response to nutrients. (Translated from eng) Digestion 56(2):117-126 (in eng).
Knickelbein RG, Aronson PS, & Dobbins JW (1988) Membrane distribution of sodiumhydrogen and chloride-bicarbonate exchangers in crypt and villus cell membranes from rabbit ileum. J. Clin. Invest. 82(6):2158-2163.
Vidyasagar S, Rajendran VM, & Binder HJ (2004) Three distinct mechanisms of HCO3secretion in rat distal colon. Am J Physiol Cell Physiol 287(3):C612-621.
Coon S, Kekuda R, Saha P, & Sundaram U (Reciprocal regulation of the primary sodium absorptive pathways in rat intestinal epithelial cells. (Translated from eng) Am J Physiol Cell Physiol 300(3):C496-505 (in eng).
Hu Z, et al. (2006) MAPKAPK-2 is a critical signaling intermediate in NHE3 activation following Na+-glucose cotransport. (Translated from eng) J. Biol. Chem. 281(34):24247-24253 (in eng).
Turner JR & Black ED (2001) NHE3-dependent cytoplasmic alkalinization is triggered by Na(+)-glucose cotransport in intestinal epithelia. (Translated from eng) Am J Physiol Cell Physiol 281(5):C1533-1541 (in eng).
Donowitz M & Li X (2007) Regulatory binding partners and complexes of NHE3. (Translated from eng) Physiol. Rev. 87(3):825-872 (in eng).
Zachos NC, Kovbasnjuk O, & Donowitz M (2009) Regulation of intestinal electroneutral sodium absorption and the brush border Na+/H+ exchanger by intracellular calcium. (Translated from eng) Ann. N. Y. Acad. Sci. 1165:240-248 (in eng).
Zachos NC, et al. (2009) NHERF3 (PDZK1) contributes to basal and calcium inhibition of NHE3 activity in Caco-2BBe cells. (Translated from eng) J. Biol. Chem. 284(35):2370823718 (in eng).
- 15 034014
Donowitz M, et al. (2009) NHE3 regulatory complexes. (Translated from eng) J. Exp.
Biol. 212(Pt 11): 1638-1646 (in eng).
Zhu X, et al. (Elevated Calcium Acutely Regulates Dynamic Interactions of NHERF2 and NHE3 Proteins in Opossum Kidney (OK) Cell Microvilli. (Translated from eng) J. Biol.
Chem. 286(40):34486-34496 (in eng).
Caputo A, et al. (2008) TMEM16A, a membrane protein associated with calciumdependent chloride channel activity. (Translated from eng) Science 322(5901):590-594 (in eng).
Namkung W, Phuan PW, & Verkman AS (TMEM16A inhibitors reveal TMEM16A as a minor component of calcium-activated chloride channel conductance in airway and intestinal epithelial cells. (Translated from eng) J. Biol. Chem. 286(3):2365-2374 (in eng).
Engle MJ, Goetz GS, & Alpers DH (1998) Caco-2 cells express a combination of colonocyte and enterocyte phenotypes. (Translated from eng) J. Cell. Physiol. 174(3):362-369 (in eng).
Ball JM, Tian P, Zeng CQ, Morris AP, & Estes MK (1996) Age-dependent diarrhea induced by a rotaviral nonstructural glycoprotein. (Translated from eng) Science 272(5258):101104 (in eng).
Rhoads JM, et al. (1996) Can a super oral rehydration solution stimulate intestinal repair in acute viral enteritis? (Translated from eng) J. Diarrhoeal Dis. Res. 14(3):175-181 (in eng).
Claims (7)
1. Способ лечения субъекта с диареей, вызванной ротавирусом, включающий введение субъекту один или более раз в день композиции, содержащей свободные аминокислоты L-лизин HCl, L-аспарагиновую кислоту, L-глицин, L-изолейцин, L-треонин, L-тирозин, L-валин и L-серин, электролиты и воду вместе с фармацевтически приемлемыми наполнителями, что приводит к снижению секреции Cl- и/или HCO3 - посредством исключения глюкозы или аналога глюкозы при лечении.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что аналог глюкозы представляет собой α-метил-О-глюкопиранозид (АМГ), 3-O-метилглюкозу (3-ОМГ), дезокси-О-глюкозу или а-метил-О-глюкозу.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что композиция не содержит углеводов.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что субъектом является человек.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что субъектом является человек в возрасте пяти лет или меньше.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что композицию вводят энтерально.
7. Способ по п.5, отличающийся тем, что композицию вводят перорально.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201261596480P | 2012-02-08 | 2012-02-08 | |
| PCT/US2013/025294 WO2013119917A1 (en) | 2012-02-08 | 2013-02-08 | Materials and methods for treating diarrhea |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201400827A1 EA201400827A1 (ru) | 2014-12-30 |
| EA034014B1 true EA034014B1 (ru) | 2019-12-19 |
Family
ID=48948047
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201400827A EA034014B1 (ru) | 2012-02-08 | 2013-02-08 | Способ лечения субъекта с диареей, вызванной ротавирусом |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US20140377374A1 (ru) |
| EP (1) | EP2812007B1 (ru) |
| JP (1) | JP6084238B2 (ru) |
| KR (2) | KR102262179B1 (ru) |
| CN (1) | CN104093410B (ru) |
| AP (1) | AP3941A (ru) |
| AU (1) | AU2013216871B2 (ru) |
| BR (1) | BR112014019350B1 (ru) |
| CA (1) | CA2863388C (ru) |
| EA (1) | EA034014B1 (ru) |
| ES (1) | ES2862392T3 (ru) |
| HK (1) | HK1204290A1 (ru) |
| IN (1) | IN2014DN06737A (ru) |
| MX (1) | MX368543B (ru) |
| WO (1) | WO2013119917A1 (ru) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2624825B1 (en) | 2010-09-24 | 2017-06-14 | University of Florida Research Foundation, Inc. | Materials and methods for improving gastrointestinal function |
| JP6378307B2 (ja) | 2013-03-11 | 2018-08-22 | ユニバーシティ オブ フロリダ リサーチ ファンデーション インコーポレーティッド | 肺機能を改善するためならびに放射線誘発肺合併症の予防および／または処置のための物質および方法 |
| BR112017010832A2 (pt) | 2014-11-24 | 2017-12-26 | Entrinsic Health Solutions Llc | composições de aminoácido para o tratamento de sintomas de doença |
| MX2019003821A (es) | 2016-10-04 | 2019-12-18 | Univ Florida | Composiciones de aminoacidos y usos de las mismas. |
| WO2019070753A1 (en) * | 2017-10-02 | 2019-04-11 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | AMINO ACID COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING DIARRHEA |
| IL298743A (en) * | 2020-06-02 | 2023-02-01 | Univ Florida | Formulations and methods for treating diarrhea |
| WO2022006397A1 (en) * | 2020-07-02 | 2022-01-06 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Formulations for promoting hydration and methods of use thereof |
| US20240252580A1 (en) * | 2021-05-28 | 2024-08-01 | The Coca-Cola Company | Amino acid hydration formulation and method of use |
| CN115531363B (zh) * | 2021-06-30 | 2024-03-29 | 中国科学技术大学 | 预防、抑制或治疗轮状病毒感染的药物组合物及其用途 |
| US11878073B1 (en) | 2022-09-20 | 2024-01-23 | Entrinsic, LLC | Generation of hydration-targeted formulations and methods of use therein |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030143293A1 (en) * | 2002-01-31 | 2003-07-31 | Sergei Shushunov | Compositions and methods for treating diarrhea |
| KR20060130583A (ko) * | 2003-11-12 | 2006-12-19 | 스토클리-밴 캠프, 인크. | 탄수화물 및 전해질 보충 조성물 |
| KR20070103506A (ko) * | 2005-02-17 | 2007-10-23 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | 경구 투여용의 약독된 생 로타바이러스 백신 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5290538A (en) * | 1988-12-22 | 1994-03-01 | Skrezek Christian | Nephro protective infusion solutions |
| JP3301646B2 (ja) * | 1993-03-19 | 2002-07-15 | シスメックス株式会社 | 幼若細胞測定用試薬 |
| KR19980703876A (ko) * | 1995-04-14 | 1998-12-05 | 스티븐 엘. 허스트 | 분산성이 개선된 분말화된 약학적 조성물 |
| JP4255656B2 (ja) * | 2001-09-17 | 2009-04-15 | 株式会社メニコン | 眼科用液剤及びコンタクトレンズ用液剤 |
| JP2004123642A (ja) * | 2002-10-04 | 2004-04-22 | Shimizu Pharmaceutical Co Ltd | 電解質組成物 |
| DK175877B1 (da) * | 2002-11-11 | 2005-05-09 | Pharmalett As | Præparater til anvendelse som terapeutisk middel |
| JP4811576B2 (ja) * | 2005-03-31 | 2011-11-09 | 味の素株式会社 | 水分電解質補給飲料 |
| JP4512013B2 (ja) * | 2005-09-07 | 2010-07-28 | 和光堂株式会社 | 液体飲料組成物及びその製造方法 |
| DE102006018293A1 (de) * | 2006-04-20 | 2007-10-25 | Fresenius Kabi Deutschland Gmbh | Pädiatrische Aminosäurelösung zur parenteralen Ernäherung |
| EP2624825B1 (en) | 2010-09-24 | 2017-06-14 | University of Florida Research Foundation, Inc. | Materials and methods for improving gastrointestinal function |
| JP6378307B2 (ja) * | 2013-03-11 | 2018-08-22 | ユニバーシティ オブ フロリダ リサーチ ファンデーション インコーポレーティッド | 肺機能を改善するためならびに放射線誘発肺合併症の予防および／または処置のための物質および方法 |
-
2013
- 2013-02-08 EA EA201400827A patent/EA034014B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-02-08 WO PCT/US2013/025294 patent/WO2013119917A1/en not_active Ceased
- 2013-02-08 CA CA2863388A patent/CA2863388C/en active Active
- 2013-02-08 MX MX2014009557A patent/MX368543B/es active IP Right Grant
- 2013-02-08 AU AU2013216871A patent/AU2013216871B2/en active Active
- 2013-02-08 HK HK15104949.7A patent/HK1204290A1/xx unknown
- 2013-02-08 JP JP2014556712A patent/JP6084238B2/ja active Active
- 2013-02-08 AP AP2014007916A patent/AP3941A/en active
- 2013-02-08 ES ES13747028T patent/ES2862392T3/es active Active
- 2013-02-08 KR KR1020207024016A patent/KR102262179B1/ko active Active
- 2013-02-08 BR BR112014019350-9A patent/BR112014019350B1/pt active IP Right Grant
- 2013-02-08 US US14/376,027 patent/US20140377374A1/en not_active Abandoned
- 2013-02-08 KR KR1020147025066A patent/KR20140120941A/ko not_active Ceased
- 2013-02-08 IN IN6737DEN2014 patent/IN2014DN06737A/en unknown
- 2013-02-08 CN CN201380008424.6A patent/CN104093410B/zh active Active
- 2013-02-08 EP EP13747028.2A patent/EP2812007B1/en active Active
-
2015
- 2015-06-04 US US14/730,974 patent/US20150297636A1/en not_active Abandoned
-
2020
- 2020-07-31 US US16/945,040 patent/US20210299076A1/en not_active Abandoned
-
2024
- 2024-11-14 US US18/947,836 patent/US20250073260A1/en active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030143293A1 (en) * | 2002-01-31 | 2003-07-31 | Sergei Shushunov | Compositions and methods for treating diarrhea |
| KR20060130583A (ko) * | 2003-11-12 | 2006-12-19 | 스토클리-밴 캠프, 인크. | 탄수화물 및 전해질 보충 조성물 |
| KR20070103506A (ko) * | 2005-02-17 | 2007-10-23 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | 경구 투여용의 약독된 생 로타바이러스 백신 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| GUTIERREZ C. et al., "Does an L-glutamine-containing, glucose-free, oral rehydration solution reduce stool output and time to rehydrate in children with acute diarrhoea? A double-blind randomized clinical trial", Journal of Health, Population and Nutrition, 2007, Vol. 25, No. 3, pages 278-284, see abstract; pages 279 and 282-283 * |
| MATHEW J.L., "Non-glucose oral rehydration solution - Does it make a good thing better?", Indian Pediatrics, 2009, Vol. 46, pages 501-505, see pages 501-503 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP6084238B2 (ja) | 2017-02-22 |
| US20250073260A1 (en) | 2025-03-06 |
| EP2812007A1 (en) | 2014-12-17 |
| BR112014019350A8 (pt) | 2017-07-11 |
| KR20140120941A (ko) | 2014-10-14 |
| KR20200105525A (ko) | 2020-09-07 |
| WO2013119917A1 (en) | 2013-08-15 |
| US20210299076A1 (en) | 2021-09-30 |
| EP2812007B1 (en) | 2020-12-30 |
| EP2812007A4 (en) | 2015-09-09 |
| CA2863388C (en) | 2020-11-17 |
| JP2015506981A (ja) | 2015-03-05 |
| CN104093410B (zh) | 2018-04-27 |
| US20150297636A1 (en) | 2015-10-22 |
| US20140377374A1 (en) | 2014-12-25 |
| CA2863388A1 (en) | 2013-08-15 |
| KR102262179B1 (ko) | 2021-06-07 |
| IN2014DN06737A (ru) | 2015-05-22 |
| AU2013216871A1 (en) | 2014-09-11 |
| CN104093410A (zh) | 2014-10-08 |
| EA201400827A1 (ru) | 2014-12-30 |
| ES2862392T3 (es) | 2021-10-07 |
| MX2014009557A (es) | 2014-11-10 |
| BR112014019350A2 (ru) | 2017-06-20 |
| AP2014007916A0 (en) | 2014-09-30 |
| AU2013216871B2 (en) | 2017-08-17 |
| MX368543B (es) | 2019-10-07 |
| AP3941A (en) | 2016-12-16 |
| HK1204290A1 (en) | 2015-11-13 |
| BR112014019350B1 (pt) | 2020-09-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20250073260A1 (en) | Amino acid formulations and uses thereof | |
| US12239633B2 (en) | Materials and methods for improving gastrointestinal function | |
| Vijayan et al. | Methionine down‐regulates TLR 4/MyD 88/NF‐κ B signalling in osteoclast precursors to reduce bone loss during osteoporosis | |
| Rajendram et al. | Glutamine in clinical nutrition | |
| de Souza Goncalves et al. | Mg 2+ supplementation treats secretory diarrhea in mice by activating calcium-sensing receptor in intestinal epithelial cells | |
| Wheler et al. | Taurine: stimulation of pineal N-acetyltransferase activity and melatonin production via a beta-adrenergic mechanism | |
| Härtel et al. | Immunomodulatory effect of vitamin C on intracytoplasmic cytokine production in neonatal cord blood cells | |
| Singh et al. | Vascular and immunopathological role of asymmetric dimethylarginine (ADMA) in experimental autoimmune encephalomyelitis | |
| García-Herrera et al. | Effect of lipopolysaccharide on D-fructose transport across rabbit jejunum | |
| Jacob | Effects of leucine supplementation in combination with resistance training and optimal dietary protein intake in pre-frail and frail older women | |
| Kles et al. | Enteral Nutrients Alter Enterocyte Function Within anIn VitroModel Similar to an AcuteIn VivoRat Model During Hypoxia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM |