EA032429B1 - Селективные низкомолекулярные ингибиторы cdk8/cdk19 и их применение в качестве агентов для лечения рака - Google Patents

Селективные низкомолекулярные ингибиторы cdk8/cdk19 и их применение в качестве агентов для лечения рака Download PDF

Info

Publication number
EA032429B1
EA032429B1 EA201791284A EA201791284A EA032429B1 EA 032429 B1 EA032429 B1 EA 032429B1 EA 201791284 A EA201791284 A EA 201791284A EA 201791284 A EA201791284 A EA 201791284A EA 032429 B1 EA032429 B1 EA 032429B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
cancer
compounds
disease
molecular weight
sec8
Prior art date
Application number
EA201791284A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201791284A1 (ru
Inventor
Игорь Ронинсон
Дональд Си. Портер
Марк Пи. Уэнтланд
Original Assignee
Сенекс Биотекнолоджи Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сенекс Биотекнолоджи Инк. filed Critical Сенекс Биотекнолоджи Инк.
Publication of EA201791284A1 publication Critical patent/EA201791284A1/ru
Publication of EA032429B1 publication Critical patent/EA032429B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/86—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in position 4
    • C07D239/94—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57415—Specifically defined cancers of breast
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57449—Specifically defined cancers of ovaries
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/106—Pharmacogenomics, i.e. genetic variability in individual responses to drugs and drug metabolism
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/118—Prognosis of disease development
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G01N2333/4701—Details
    • G01N2333/4739—Cyclin; Prad 1
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/91—Transferases (2.)
    • G01N2333/912—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
    • G01N2333/91205—Phosphotransferases in general

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)

Abstract

Изобретение относится к низкомолекулярным соединениям, которые специфически ингибируют циклинзависимую киназу (CDKI), в частности CDK8/19. Дополнительно изобретение относится к составам, включающим указанные соединения, и способам лечения млекопитающего, имеющего CDKI-опосредованное заболевание, предпочтительно болезнь Альцгеймера, другие деменции, амилоидоз, атеросклероз, заболевание почек, вирусные заболевания и рак. Данные соединения могут быть введены перорально.

Description

Изобретение относится к низкомолекулярным соединениям, которые специфически ингибируют циклинзависимую киназу (СОК1), в частности СОК8/19. Дополнительно изобретение относится к составам, включающим указанные соединения, и способам лечения млекопитающего, имеющего СОКЕопосредованное заболевание, предпочтительно болезнь Альцгеймера, другие деменции, амилоидоз, атеросклероз, заболевание почек, вирусные заболевания и рак. Данные соединения могут быть введены перорально.
032429 Β1
Предпосылки создания изобретения
Область изобретения
Изобретение относится к лечению и профилактике рака.
Краткое описание предшествующего уровня техники
ΟΌΚ8, наряду с тесно связанной с ней изоформой ΟΌΚ19, является онкогенной киназой, регулирующей транскрипцию (1-3). В противоположность более известным членам семейства ΟΌΚ (таким как ΟΌΚ1, ΟΌΚ2 и ΟΌΚ4/6), ΟΌΚ8 не играет роли в развитии клеточного цикла. Нокаут по гену ΟΌΚ8 в эмбриональных стволовых клетках предотвращает развитие эмбриона (5) благодаря своей важной роли в фенотипе плюрипотентных стволовых клеток (6), но истощение ΟΌΚ8 не подавляет рост нормальных клеток (5, 7). Роль ΟΌΚ8 при заболевании раком связана с его уникальной функцией в качестве регулятора нескольких транскрипционных программ, вовлеченных в канцерогенез (1). Было установлено, что ΟΌΚ8 играет роль при меланоме (8) и раке толстой кишки (7), при этом ген ΟΌΚ8 усиливает в ~50% в случае последних указанных видов рака. Повышенные уровни экспрессии ΟΌΚ8 связали с плохим прогнозом при раке толстой кишки (9). Известные уровни активности ΟΌΚ8, относящиеся к раку, включают положительное регулирование пути катенина \Уп1/|бета| (7, 11), транскрипцию, индуцированную фактором роста (12) и сигнальный путь ТОБ-бета (13). Было также показано, что ΟΌΚ8 может поддерживать плюрипотентный фенотип эмбриональных стволовых клеток и что он может ассоциироваться с фенотипом стволовых клеток рака (6). Химиотерапевтические препараты, вызывающие повреждения ДНК, индуцируют ФНО-а, активатор фактора транскрипции №ΚΒ (14), в эндотелиальных клетках и в других стромальных элементах, связанных с раковыми заболеваниями. Стромальный ФНО-а действует на опухолевые клетки, где он индуцирует ИБкВ-опосредованное продуцирование цитокинов СХСБ1 и СХСБ2. способствующих образованию зависимых от этих цитокинов опухолей. СХСБ1/2 привлекают миелоидные клетки к опухоли путем связывания с рецептором СХСК.2 на поверхности миелоидных клеток. Миелоидные клетки затем секретируют небольшие кальций-связывающие белки 8100А8 и А9, которые связаны с хроническим воспалением и раком. 8100А8/9 действуют на опухолевые клетки, способствуя как их метастазу, так и выживаемости при химиотерапии (15).
В РСТ/И8 12/55064 раскрывается, что ингибиторы СЭИ8/19 ингибируют индукцию фактора транскрипции ΝΡΚΒ, который опосредует продуцирование белков, способствующих развитию множественных опухолей, и воспалительных цитокинов, и что ингибиторы ΟΌΚ8/19, в частности, ингибируют ОТЕВ-опосредованную индукцию СХСБ1 и СХСБ2. Публикация заявки на патент США 20120071477 указывает, что ингибиторы ΟΌΚ8/19 также предотвращают индукцию паракринной активности, способствующей развитию опухолей, во время повреждений ДНК в нормальных фибробластах, а также подавляют репликацию ВИЧ и [бета] - сигнального пути катенина.
Заявки на патент США 20040180844 и 20040180848 раскрывают Способ уничтожения раковой клетки, включающий контактирование раковой клетки с ингибитором гена, выбранного из группы, состоящей из СЭКХ 8ΤΚ33, РНХСМ, РНХАСА, АСУН1В, СЭС42ВРВ, МРР6 и СЭС42ВРА, на основании открытия того, что трансфекция кЖНАк, нацеленных на СЭ1<8 и некоторые другие гены, вызывает токсичность в клеточной линии рака легких. Однако это не означает, что ингибирование тех же генов не будет токсичным для организма и не предлагает механистическое обоснование ингибирования СЭ1<8 в лечении рака.
Публикации заявки на патент США 20120071477 раскрывает селективные ингибиторы СЭ1<8 и его изоформу, СЭ1<19. Существует потребность в более растворимых и более сильнодействующих соединениях и способах селективного ингибирования СЭ1<8. Существует также необходимость в лучшем понимании роли СЭ1<8 при раке с целью разработки дополнительных видов применения ингибиторов СЭ1<8.
Краткое изложение сущности изобретения
В изобретении предложены соединения, фармацевтические составы и способы лечения дегенеративных заболеваний центральной нервной системы (в том числе болезни Альцгеймера и других видов деменции), рака, вирусных заболеваний, атеросклероза, артрита и хронического заболевания почек. Кроме того, авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что ингибиторы ΟΌΚ8/19 предотвращают возникновение онкологических заболеваний (хемопрофилактика), а также предотвращают рецидив и метастазирование рака путем введения этих агентов после циторедуктивного лечения опухоли при хирургическом вмешательства, химиотерапии или облучении.
В настоящем изобретении предложено удивительное открытие того, что лечение животного с помощью ингибитора ΟΌΚ8/19 до введения опухолевых клеток в животное снижает скорость роста опухолей, которые развиваются в дальнейшем при лечении ингибитором. Этот неожиданный эффект может быть вызван ингибированием экспрессии этих СЭ1<8-регулируемых генов в нормальных тканях, которые поддерживают рост опухолей. Важность экспрессии СЭ1<8 для исхода лечения рака в дальнейшем показана в настоящей заявке, путем высокой корреляции между высоким уровнем экспрессией СЭ1<8 и его партнером по связыванию, Циклином С (ССЫС) с плохой выживаемостью у больных раком молочной железы, и у тех больных раком яичников, лечение которых включает введение соединений платины, которые вызывают повреждения ДНК. Эти данные показывают, что введение низкомолекулярного соединения, которое специфически подавляет ΟΌΚ8/19, должно благоприятно влиять на продление жизни
- 1 032429 больных раком, даже если такое соединение вводят, когда основная часть опухоли отсутствует у пациента, например, в контексте хемопрофилактики или в качестве адъювантной или противорецидивной/противометастазной терапии, следующей за циторедуктивным лечением опухоли.
Эти данные также указывают на то, что измерение экспрессии СЭК8 при раковых заболеваниях могут рассматриваться как диагностическая процедура для выявления больных раком с общим высоким риском, а также с риском после лечения химиотерапией, вызывающей повреждения ДНК, а также тех пациентов, которым, скорее всего, лечение низкомолекулярным соединением, которое специфически ингибирует СЭК8/19, пойдет на пользу. В некоторых вариантах реализации изобретения больной раком имеет рак молочной железы или рак яичника.
В первом аспекте данное изобретение предлагает новые соединения, обладающие повышенной растворимостью и/или способностью специфически ингибировать циклин-зависимых киназы 8 и 19 (СЭК8/СЭК19). Первоначально авторы изобретения использовали систему скрининга с высокой пропускной способностью, которая была описана более подробно в заявке № РСТ/И806/01046, для скрининга более 100000 малых молекул, подобных лекарству, из коммерчески доступных разнообразных коллекций соединений, на способность предотвращать индукцию транскрипции СЭК-связывающего белка р21. С помощью этого скрининга, авторы настоящего изобретения определили набор активных соединений. (См. публикацию заявки на патент США 20080033000). Этот набор включал серию структурнородственных соединений, которые ингибируют индукцию транскрипции с помощью р21, показывая невысокую цитотоксичность или полное ее отсутствие в нормальных клетках, и которые не влияют на функции СЭКИ, ингибирующие клеточный цикл. Затем авторы настоящего изобретения обнаружили выборку соединений, которые селективно ингибируют ί.ΌΙ<8/ί.ΌΙ<19. Эти соединения представляли собой первые такие соединения, способные показать такую селективность.
На основании вышеописанных результатов авторы настоящего изобретения начали разработку новых соединений, которые сохраняют преимущества ранее идентифицированных соединений с такой активностью, обеспечивая еще большую растворимость и/или эффективность.
Во втором аспекте соединения и способы согласно изобретению могут применяться для лечения СЭК1-опосредованного заболевания, в том числе, но не ограничиваясь перечисленным, болезни Альцгеймера, атеросклероза, амилоидоза, артрита, хронического заболевания почек, вирусных заболеваний и рака. Таким образом, настоящее изобретение предлагает способ лечения или терапевтического лечения млекопитающего, имеющего СЭК1-опосредованное заболевание, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества низкомолекулярного соединения, которое специфически ингибирует СЭК8/19.
В третьем аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения рака молочной железы у пациентов, включающий введение пациенту низкомолекулярного соединения, которое специфически ингибирует СЭК8/19.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 показаны структуры соединений;
на фиг. 2 - схема синтеза соединений;
на фиг. 3 - графики Каплана-Мейера (КМ) для корреляции между уровнем экспрессии СЭК8 и генов, ассоциированных с СЭК8, и безрецидивной выживаемостью (БРВ), полученные с использованием веб-программы для метаанализа экспрессии генов;
на фиг. 4А - примеры типичных признаков окрашивания участков инвазивной внутрипротоковой опухоли молочной железы, сфотографированных на 10х увеличении;
на фиг. 4В показано, что уровень СЭК8 повышен при инвазивном внутрипотоковом раке (ИВПР) по отношению к нормальным (НСТ) или гиперпластическим (Г) тканям молочной железы или инвазивному дольковому раку (ИДР);
на фиг. 5 показано, что определенные клеточные линии рака молочной железы, такие как ΜΌΑΜΒ-468 и МОА-МВ-157, показали дозозависимое ингибирование роста при введении соединений согласно изобретению, в то время как другие клеточные линии этого не показали.
Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения
Изобретение относится к ингибированию пути циклин-зависимых киназ (СЭК1). Более конкретно, изобретение относится к способам ингибирования пути СЭК! для исследований и вмешательства в заболевания, связанные со старением, и раковые заболевания.
Изобретение предлагает новые соединения, фармацевтические составы и способы лечения дегенеративных заболеваний центральной нервной системы, в том числе болезни Альцгеймера и других видов деменций, а также рака и вирусных заболеваний.
Изобретение предлагает соединения и способы ингибирования пути СЭКЕ которые могут иметь различное применение в клинической практике и химиопрофиалктики и терапии различных возрастных заболеваний. Ингибиторы пути СЭК! согласно изобретению имеет невысокую цитотоксичность или полное ее отсутствие в нормальных клетках. Эти молекулы не влияют на функции СЭКИ, ингибирующие клеточный цикл. Они также ингибируют секрецию антиапоптотических факторов в клетках, заблокированных СЭКЕ Эти соединения селективно ингибируют СЭК8 и СЭК! 9 с большей растворимостью
- 2 032429 и/или активностью, чем описано ранее.
В различных аспектах настоящее изобретение относится к лечению рака. Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что ингибиторы СЭК8/19 предотвращают появление рака (химиопрофилактика) и предотвращают рецидив рака или метастазов при введении этих агентов после циторедуктивного лечения опухоли при хирургическом вмешательстве, химиотерапии или облучении. Настоящее изобретение предлагает удивительное открытие того, что лечение животного при помощи ингибитора СЭК8/19 до инъекции опухолевых клеток животному снижает скорость роста опухолей, которые развиваются в дальнейшем при лечении ингибитором. Этот неожиданный эффект может быть связан с ингибированием экспрессии данных генов, регулируемых СЭК8/19. в нормальных тканях, которые поддерживают рост опухолей. Настоящее изобретение также описывает удивительное открытие того, что лечение животного, имеющего опухоль, ингибитором СЭК8/19 ингибирует инвазивный рост опухоли. Важность экспрессии СЭК8 для исхода лечения рака в дальнейшем показана в настоящей заявке путем высокой корреляции между высоким уровнем экспрессии СЭК8. СЭК1 9 и их партнером по связыванию, Циклином С (ССЫС), при отсутствии ответа на адъювантную терапию для предотвращения рецидивов опухолей у больных раком молочной железы, и у тех больных раком яичников, лечение которых включает соединения платины, повреждающие ДНК, а также с корреляцией между высоким уровнем экспрессии СЭК8 и плохой безрецидивной выживаемостью у больных раком молочной железы, независимо от ответа на адъювантную терапию. Эти данные показывают, что введение ингибиторов СЭК8/19 должно способствовать продлению жизни больных раком, даже в случае, если такие ингибиторы вводят, когда основная часть опухоли отсутствует у пациента, например при химиопрофилактике или в качестве адъювантной терапии или терапии, направленной против рецидива или развития метастазов опухоли, проводимых после циторедуктивного лечения опухоли.
Эти данные также указывают на то, что измерение уровня экспрессии СЭК8 при раковых заболеваниях обеспечивает диагностическую процедуру для идентификации раковых больных с общим высоким риском, а также с риском после лечения химиотерапевтическими препаратами, вызывающими повреждения ДНК, или облучения, а также тех пациентов, которые, скорее всего, получат пользу от лечения адъювантной терапией, а также больных, которые, скорее всего, получат пользу от лечения, включающего ингибиторы СЭК8. В некоторых вариантах реализации рак представляет собой рак молочной железы или рак яичников. В конечном итоге, эти данные предлагают способ определения вероятности рецидива или развития метастазов опухоли у больного раком, включающий получение образца опухоли от пациента и определения того, избыточно ли экспрессируется СЭК8 в образце опухоли.
Для целей настоящего изобретения низкомолекулярное соединение, которое специфически ингибирует СЭК8/19 представляет собой низкомолекулярное соединение, которое ингибирует один или более из СЭК8 и СЭК19 в большей степени, чем он ингибирует некоторые другие СЭК. В некоторых вариантах реализации такие соединения также ингибируют СЭК8/19 в большей степени, чем СЭК9. В предпочтительных вариантах реализации ингибирование в больше степени представляет собой ингибирование по меньшей мере в 2 раза больше, чем СЭК9. Низкомолекулярное соединение представляет собой молекулу, имеющую молекулярный вес примерно 800 Да или менее. В список соединений, которые могут быть использованы согласно настоящему изобретению, кроме случаев, когда явно не указано иное, включены соединения, описанные в заявке на патент США 20120071477 в настоящей заявке, которые находятся одновременно на рассмотрении патентного ведомства США. Термин определение того, избыточно ли экспрессируется СЭК8 в образце и подобные термины означают измерение уровня экспрессии СЭК8 в ткани (например, в образце опухоли) или биологической жидкости, полученной от пациента, и сравнения его с стандартом, представляющим собой средний уровень СЭК8 тК А или белок из нормальных и/или опухолевых образцов ткани от нескольких других человеческих индивидов и/или небольного (например неракового) образца от пациента. Адьювантная терапия представляет собой лучевую терапию и/или системную терапию (химиотерапию, иммунотерапию, модификаторы биологической реакции, гормональную терапию и тому подобное, и их комбинации) в комбинации с хирургическим вмешательством (см., например, в качестве неограничительного примера рака молочной железы, етеб1С1пе. теб8саре.сош/агйс1е/1946040-обзора).
В первом аспекте настоящее изобретение предлагает новые низкомолекулярные соединения, которые специфически ингибируют ί.ΌΙ<8/ί.ΌΙ<19 и имеют повышенную растворимость и/или эффективность. В некоторых вариантах реализации низкомолекулярное соединение имеет следующие структурные формулы:
- 3 032429
Во втором аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения или терапевтического лечения млекопитающего с СИК1-опосредованным заболеванием, включающий введение млекопитающему эффективного или терапевтически эффективного количества низкомолекулярного соединения, которое специфически ингибирует СИК8/19.
Предпочтительно СИК1-опосредованные заболевания включают, без ограничения, болезнь Альцгеймера, другие деменции, амилоидоз, атеросклероз, заболевания почек, вирусные заболевания, а также раковые заболевания. В некоторых вариантах реализации вирусное заболевание представляет собой инфекцию вируса иммунодефицита человека (ВИЧ). Ранее было показано, что соединения, которые специфически ингибируют СИК8, ингибируют репликацию ВИЧ-1 (см. публикацию заявки на патент США 20120071477). Предпочтительно млекопитающие включают человека.
В третьем аспекте настоящее изобретение предлагает низкомолекулярные соединения, которые ингибируют СИК8 и СИК1 9 в большей степени, чем они ингибируют некоторые другие виды СИК. В некоторых вариантах реализации такие соединения также ингибируют СТЖ8 и СИК1 9 в большей степени, чем СИК9. В предпочтительных вариантах реализации ингибирование в больше степени представляет собой ингибирование по меньшей мере в 2 раза больше, чем СИК9. Степень ингибирования измеряют при помощи анализов, указанных в примерах в данном описании, включая условия анализа, используемые поставщиками услуг, используемых в настоящем описании. Результаты данных анализов, как правило, указаны в процентах по отношению к контрольному образцу (РОС), с указанием контрольного соединения, которое не указано в описании, но используется в анализе. Кроме того, результаты могут быть выражены в виде 1С50.
В четвертом аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения рака молочной железы у пациента, включающий введение пациенту специфического ингибитора СИК8/19.
В некоторых вариантах реализации каждого из способов согласно аспектам со второго по десятый, низкомолекулярное соединение имеет структурную формулу:
- 4 032429
В некоторых вариантах реализации каждого из способов лечения или профилактики согласно изобретению низкомолекулярное соединение вводят перорально.
Фармацевтический состав и введение.
В способах согласно изобретению соединения, описанные выше, могут быть включены в фармацевтический состав. Такие составы включают соединение, которое может быть в форме свободной кислоты, соли или пролекарства, в фармацевтически приемлемом растворителе (включая, без ограничения, воде), носителе или разбавителе. Такие составы хорошо известны в данной области и описаны, например, в издании Фармацевтическая наука Ремингтона, 18-е издание, изд. А. Дженнаро, Маск РиЬНзЫпд Со, Еаз!оп, РА., 1990. Характеристики носителя будут зависеть от пути введения. Как указано в данном описании, термин фармацевтически приемлемый означает нетоксичное вещество, которое совместимо с биологической системой, такой как клетки, культуры клеток, ткани или организм, и которое не влияет на эффективность биологической активности активного ингредиента (ингредиентов). Таким образом, составы согласно изобретению могут содержать в дополнение к ингибитору разбавители, наполнители, соли, буферы, стабилизаторы, солюбилизаторы и другие материалы, хорошо известные в данной области техники. Как указано в данном описании, термин фармацевтически приемлемые соли относится к солям, которые сохраняют желаемую биологическую активность указанных выше соединений и обладают минимальными или вообще не нежелательными токсикологическими эффектами. Примеры таких солей включают, но не ограничиваются ими, соли, образованные с неорганическими кислотами (например, хлороводородной кислотой, бромоводородной кислотой, серной кислотой, фосфорной кислотой, азотной кислотой и т.п.), и соли, образованные с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, винная кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, аскорбиновая кислота, бензойная кислота, дубильная кислота, пальмовая кислота, альгиновая кислота, полиглютаминова кислота, нафталинсульфокислоты, нафталиндисульфоновая кислота, метан-сульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота и полигалактуроновая кислота. Соединения также могут быть введены в виде фармацевтически приемлемых четвертичных солей, известных специалистам в данной области, которые включают в себя, в частности, четвертичную аммониевую соль с формулой -ΝΚ + Ζ-, в котором К означает водород, алкил или бензил, а Ζ представляет собой противоион, в том числе хлорид, бромид, иодид, -О-алкил, толуолсульфонат, метилсульфонат, сульфонат, фосфат или карбоксилат (например, бензоат, сукцинат, ацетат, гликолат, малеат, малат, цитрат, тартрат, аскорбат, бензоат, циннамоат, манделоат, бензилоат, и дифе
- 5 032429 нилацетат). Активное соединение включено в фармацевтически приемлемый носитель или растворитель в количестве, достаточном для доставки пациенту терапевтически эффективного количества, не вызывая серьезных токсических эффектов у пациента при лечении. Термин терапевтически эффективное количество означает количество, достаточное, чтобы облегчить или устранить признаки или симптомы заболевания. Диапазон эффективных доз фармацевтически приемлемых производных может быть рассчитан на основе массы исходного соединения, которое должно быть введено. Если производные проявляют активность как таковые, то эффективная доза может быть рассчитана, как описано выше, используя массу производного или с помощью других средств, известных специалистам в данной области. В определенных случая применения, в том числе, без ограничений, в случае старческого слабоумия, такого как болезнь Альцгеймера, эффективный диапазон доз для пациента весом 70 кг составляет от примерно 50 мг на пациента в день до примерно 10 г на одного пациента в день, или максимально переносимые дозы. В определенных предпочтительных вариантах диапазон доз составляет от примерно 200 мг на одного пациента в день до примерно 10 г на пациента в день. В некоторых предпочтительных вариантах диапазон доз составляет от примерно 200 мг на одного пациента в день до примерно 5 г на пациента в день. Доза для каждого пациента может быть скорректирована в зависимости от клинического ответа на введение конкретного препарата. Введение фармацевтических составов по способам согласно изобретению может проводиться любым способом, приемлемым с медицинской точки зрения, в том числе, без ограничения, парентерально, перорально, сублингвально, трансдермально, местно, интраназально, внутритрахиально или ректально. В некоторых предпочтительных вариантах реализации составы согласно изобретению вводят парентерально, например внутривенно, в больничных условиях. В некоторых других предпочтительных вариантах реализации введение предпочтительно осуществляется перорально.
Следующие примеры предназначены для дополнительной иллюстрации некоторых предпочтительных вариантов реализации настоящего изобретения и не предназначены для ограничения сферы применения изобретения.
Пример 1. Синтез ингибиторов СО 8/СЭ 19.
Все соединения согласно изобретению синтезировали с использованием методик, аналогичных схеме синтеза, показанной на фиг. 2.
Пример 2. Тестирование пути ингибирования СЭКЕ
Соединения, описанные согласно изобретению, показаны на фиг. 1. Все соединения были исследованы на их способность ингибировать путь СЭКЗ в клеточном анализе, описанном в предыдущей заявке на патент РСТ/И806/01046. Данный анализ основан на индукции экспрессии зеленого флуоресцентного белка (ЗФБ) из промотора цитомегаловируса (ЦМВ) в человеческих клетках фибросаркомы НТ1080, которые экспрессируют р21 СЭК1 из промотора, индуцируемого изопропил-Р-тиогалактозидом (1РТС). Активность соединения в качестве ингибитора пути СЭКЗ измеряется его способности предотвращать стимуляцию промотора ЦМВ при добавлении 1РТС, индуцируемого р21. Активность промотора ЦМВ измеряется с помощью отношения флуоресценции ЗФБ к относительному количеству клеток, как определено с помощью окрашивания клеточной ДНК с Ноесйз! 33342. Только соединения, показывающие 1С50 <10 мкМ, представлены в этом анализе на фиг. 1.
Пример 3. Тестирование растворимости и активности.
Соединения были также следующим образом испытаны на растворимость в 20% пропиленгликоле и в воде. Соединения (сухой порошок) растворяли в 20%> пропиленгликоля в концентрации 1 мМ при температуре 40°С с нерегулярным перемешиванием на вортексе. Через 30 мин раствор центрифугировали при 10000 х г в течение 5 мин. Были получены серийные разведения очищенного супернатанта и использованы для измерения концентрации соединения в результате считывания оптической плотности, относящейся к 1 мкМ стандартного раствора того же соединения. Результаты измерения были выражены как % растворимости соединения при 1 мм в 20% пропиленгликоля. Чтобы определить растворимость в воде, соединения (сухой порошок) сначала растворяли в воде при концентрации 100 мМ при температуре 40°С с нерегулярным перемешиванием на вортексе. Через 30 мин раствор центрифугировали при 10000 х г в течение 5 мин и контролировали образование нерастворимого осадка. На последующих стадиях соединение пробовали растворить при более низких концентрациях, пока более не наблюдался осадок после центрифугирования, что указывает на полное растворение полученного соединения. На следующем этапе был синтезирован ряд производных из исходных соединений при сочетании их фармакофорных групп с боковыми группами двух новых растворимых производных. После проверки данных новых производных было выбрано несколько соединений (8ΝΧ2-1-162, 8ΝΧ2-1-163), которые проявили как высокую активность, так и высокую растворимость.
Пример 4. Влияние уровня экспрессии СО 8 на безрецидивное выживание рака молочной железы.
Чтобы проверить влияние экспрессии СЭК8 при раке молочной железы, использовали онлайн инструмент анализа выживания (Ы1р://ктр1о1.сот/апа1у818/), который оценивает влияние гена на прогноз с использованием данных микрочипов по экспрессии генов многочисленных исследований касательно рака молочной железы (10). На фиг. 11 показаны графики Каплана-Мейера (КМ) для корреляции между уровнем экспрессией СОК8 и генами, ассоциированными с СЭК8. и безрецидивной выживаемостью
- 6 032429 (БРВ), полученные с использованием веб-программы (10) для метаанализа экспрессии генов.
Микрочипы данных АГГушс1пх от 2896 больных раком молочной железы; 1е18е1 Ьсь( ртоЬеке! был выбран для каждого из тестируемых генов. В группе этих больных было известно, что 995 пациентов не получали адъювантную системную терапию после сбора образцов (без лечения), а 1465 получали системную терапию (с лечением). Высокий уровень экспрессии СЭК8 (как это определено средним значением между 2896 пациентами) показал поразительную корреляцию с плохой безрецидивной выживаемостью у всех больных раком молочной железы (р = 2.6х10-15). Эта корреляция была гораздо слабее среди пациентов, не получавших лечение (р = 0,0055), но гораздо сильнее среди пациентов, получавших лечение (р = 0), указывая на то, что неблагоприятное прогностическое воздействие экспрессии СЭК8 было связано с ответом на лечение в большей степени, чем на прогрессирование лечебно-независимой опухоли.
Аналогично, вышеуказанные средние уровни экспрессии ССЫС (Циклин С, партнёр по связыванию СЭК8). СЭК19 (также называемый СЭС2Б6. изоформа СЭК8) и ΜΕΌ 13 (протеин, который взаимодействует с СПК8/ССЫС в модуле СЭК посредника комплекса (2)) также выявили, что существует сильная корреляция между всеми пациентами, полное отсутствие корреляции между больными, не получавшими лечение, и очень сильная корреляция между больными, получавшими лечение (фиг. 11), указывая на то, что отрицательное прогностическое воздействие экспрессии этих генов было связано с ответом на лечение, а не на прогрессирование опухоли. В отличие от этого ΜΕΌ 12, другая субъединица модуля СЭК Посредника, показал противоположную корреляцию, с нижеуказанной средней экспрессией ΜΕΌ 12, которая прочно ассоциируется с более короткой БРВ. Кроме того, в отличие от СЭК8 и других генов в данном анализе, ΜΕΌ 12 показал аналогичные корреляции между больными, получавшими лечение и не получавшими его (фиг. 11), указывая на то, что положительное прогностическое воздействие экспрессии ΜΕΌ 12 было связано с прогрессированием опухоли, а не с ответом на лечение.
Это положительное влияние экспрессии ΜΕΌ 12 может быть объяснено в свете недавнего исследования (17), в котором сообщалось о том, что ΜΕΌ 12 действует как негативный регулятор сигнализации ТОР, как активность, независимая от его роли в Посреднике.
Данные корреляции показывают, что высокая экспрессия СЭК8, ССЫС, СЭК18 и ΜΕΌ 13 связана с отсутствием ответа на адъювантную терапию при раке молочной железы и что пациентам, у которых опухоли проявляли низкую экспрессию данных генов, скорее всего, адъювантная терапия принесет пользу. Кроме того, высокий уровень экспрессии СЭК8 и низкий уровень экспрессии ΜΕΌ 12 связаны с независящим от лечения неблагоприятным прогнозом при раке молочной железы. На основе наблюдаемых поразительных клинических корреляций для уровней экспрессии СЭК8 также можно предположить, что фармакологическое ингибирование СЭК8 в комбинации со стандартной терапией может привести к резкому увеличению срока жизни пациента без болезни.
Пример 5. Иммуногистохимическое окрашивание образцов рака молочной железы.
Экспрессия белка СЭК8 также была проанализирована в клинических образцах рака молочной железы с использованием коммерчески доступных тканевых монослоев рака молочной железы от ϋδ Βίοтах, включающие зафиксированные в формалине, залитые парафином серийные срезы биопсии молочной железы на микроскопических слайдах. После мытья, эпитопного открытия и этапов блокирования пероксидазы стекла инкубировали в течение ночи при 4°С с антителами против СЭК 8 (козьи поликлональные, разбавление 1:250; Санта-Крус 8С1521), используя усилитель антитела (АийЬойу Атрййет) (ΡτοΗίδΐο, ООО).
Области связывающего антитела были обнаружены путем инкубации в полимере на основе вторичных козлиных антител (8С-2020, 8аи1а Сти/), разбавление 1:2000, в течение 1,5 ч. Хромогенное обнаружение проводили с использованием ΌΑΒ и контрастного окрашивания с метиловым зеленым. На фиг. 13А показаны примеры типичного признака окрашивания срезов инвазивного внутрипротокового рака молочной железы (ϋδ Вютах ΒΚ1003), которые были сфотографированы с помощью 10х увеличения.
Данный анализ показывает, что самое сильное окрашивание СЭК8 связано с опухолью, а не со стромальными клетками. Иммуногистохимический (1НС) анализ экспрессии белка СЭК8 на разных стадиях канцерогенеза молочной железы показывает, что уровень СЭК8 повышается при инвазивном протоковом раке по сравнению с нормальными или гиперпластическими тканями молочной железы или внутридольковой карциномой (фиг. 13В).
Пример 6. Влияние ингибиторов СП 8 только на клетки рака молочной железы.
Чтобы выяснить клинические корреляции, указывающие на критическую роль СЭК8 при раке молочной железы, на культуре клеток было проведено исследование ингибирующего влияния ингибитора СЭК8/19 на рост клеточных линий различных типов рака молочной железы. Клетки помещали в 96луночные планшеты, 1500 клеток/лунка, и подвергали обработке носителем или возрастающими концентрациями соединений (в четырех одинаковых экземплярах) в течение пяти дней; выживание клеток измеряли с помощью анализа МТТ.
Как показано на фиг. 14, на некоторых клеточных линиях рака молочной железы, такие как ΜΌΑΜΒ-468 и ΜΌΑ-ΜΒ-157, наблюдали дозозависимое ингибирование роста, в то время как рост некоторых
- 7 032429 других, таких как 4Т1, не ингибировался за исключением случаев самых высоких концентраций ингибитора СЭК8/19. Данные результаты, наряду с корреляций экспрессии СЭК8, СЭК19 и ССNС с плохой выживаемостью при раке молочной железы, указывают на возможность применения ингибиторов СЭК8/19 для терапии рака молочной железы.
Использованная литература
Хи, λΥ. & Л, I. Υ. (2011) Иузге^икйоп о£ СЭК8 апб СусПп С ίη
1итоп£епеы8.1. Сепе!. Сепопйсз 38, 439-452.
Оа1ЪгаЛ11, Μ. Ό., Иоппег, А. I., & Езртоза, I. М. (2010) ΟΌΚ8: а розШуе ге§и1а1ог о£ !гапзспр!юп. Тгапзспрйоп. 1, 4-12.
Рпез!ет, К. & НаНп, λΥ. С. (2009) Иеуупщ !Ие Т11го!!1е оп ап опсо^епе: СЭК8 !акез !ке йпуег зеа!. Сапсег Кез 69, 7899-7901.
АУез!ег1т§, Т., Киикгсатеп, Е., & Маке1а, Τ. Р. (2007) С4к8 18 еззеп!1а1
Гог ргеш1р1ап!а1юп тоизе 4еуе1ортеп1. Мо1. Се11 Βΐοΐ. 27, 6177-6182.
Ас11ег, А. 8., МсС1е1ап4, М. Ь., Тгиоп§, Т., Еаи, 8., Модгазап, Ζ., 8оикир,
Τ. М., Коозе-Ошпа, М., В1аск\уоос1, Ε. М., & Гнетет, К. (2012) СЭК8 тапйатз 1итог 4е- сНГГегепбаОоп апб етЪгуотс 81ет се11 р1ипро!епсу. Сапсег Кез. 72,2129-2139.
Рпез1ет, К., Вазз, А. I., Кип, 8. Υ., Эипп, I. Г., Зйуег, 8. I., Сипеу, I.,
Ргеед, Ε., Εΐ§οη, А. Н., Уепа, Ν., Ощпо, 8. е! ак (2008) СОК8 Ϊ8 а со1огес!а1 сапсег опсо^епе Ига! ге^иЫез Ъе!а-са!епт асЛуНу. Иа!иге 455, 547-551.
Кароог, А., СоМЪег£, М. 8., СитЪег1ап4, Е. К., Ка1пакитаг, К., Зелига,
М. Г., Етапие1, Р. О., Мепепбег, 8., УагдаЬаззо, С, Еегоу, О., УИа1, С. I. е! ак (2010) ТНе Ыз1опе уапап! тасгоН2А зирргеззез текпота ргощеззюп !11гоиД1 ге§и1а!юп οί СОК8. Иа!иге 468,1105-1109.
Р1гез!ет, К., ЗЫта, К., Иозко, К., I гак ага, Ν., ВаЪа, Υ., Во)агзк1, Е., Сюуапписс1, Е. Ь., Накп, λΥ. С, Рискз, С. 8., & Ощпо, 8. (2010) СОК8 ехргеззюп ίη 470 со1огес!а1 сапсегз ίη ге1а!юп !о Ъе!а-са!етп асйуайоп, оШег то1еси1аг акегайопз апб райеп! зипгуак Ιηί. I. Сапсег 126, 2863-2873.
СуогГГу, В., капсгку, А., Ек1ипс1, А. С, Эепкег!, С, Ви0сг1ез, I., Εΐ, ()., &
8га11аз1, Ζ. (2010) Ап опНпе зигу1уа1 апа1уз1з ίοοί !о гар1сПу аззезз !ке е££ес! о£
22,277 §епез оп Ъгеаз! сапсег рго§поз18 изт§ пйсгоапау 4а!а о£ 1,809 райеп!з. Вгеаз! Сапсег Кез. Тгеа!. 123, 725-731.
Мотз, Ε. I., Л, Л Υ., Уап§, Г., Όΐ 8!е£апо, Ь., Неп, А., Мооп, N. 8.,
Κννοη, Ε. I., Нащ1з, К. М., Иааг, А. М., & Оузоп, N. I. (2008) Е2Р1 гергеззез Ъе!а-са!етп !гапзспр!юп апб 18 ап!а£отгес1 Ъу Ъо!11 рКВ апб СОК8. Иа!иге 455, 552-556. Όοηηετ, А. I., ЕЪте1ег, С. С, Таа^ез, Ό. Л, & Езртоза, I. М. (2010)
СЭК8 Ϊ8 а розШуе ге§и1а!ог о£ !гапзспр!юпа1 е1огща!юп ννίίΐιίη !11е зегит гезропзе пе!\уогк. Иа!. δίπιοί. Мок Βΐοΐ. 17, 194-201.
А1агсоп, С, Ζа^οтуί^άοи, А. I., Χΐ, (Д, Сао, 8., Уи, I., ГиДзалуа, 8., Ваг1аз,
А., МШег, Α. Ν., Мапоуа-Тодогоуа, К., Мас1аз, Μ. I. е! ак (2009) Иис1еаг
СЭКз άήνε 8тас1 !гапзспр!юпа1 асОуабоп апб Шгпоуег ίη ВМР апб ТОР-Ье!а раШлуауз. Се11 139, 757- 769.
ΌΐΌοΜίο, I. А., Мегсипо, Г., & Капп, М. (2012) ΝΕ-карраВ апб !ке 1тк
Ье!\уееп тйаттайоп апй сапсег. 1ттипо1. Кеу. 246, 379-400.
Аск агу у а, 8., Озкагззоп, Т., Уап11агап!а, 8., МаПаск, 8., Кнп, I., Мотз,
Р. С., Мапоуа- Тойогоуа, К., ЙсуегзИа, Μ., Η裏, Ν., Зезкап, V. Е. е! ак (2012)
А СХСЬ1 рагасппе пеГСогк 1ткз сапсег с11етоге818!апсе апй те!аз!аз1з. Се11
150, 165-178.
РаЫап е! а1, Иа!. В1о!ес1то1. 23, 329-336, 2005.
Ниапё е! ак {Сей 151, 937-950, 2012)
- 8 032429

Claims (8)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Низкомолекулярное соединение, которое специфически ингибирует ΟΏΚ8 и ΟΏΚ19, выбранное из следующих соединений:
  2. 2. Фармацевтический состав для лечения СОК1-опосредованного заболевания, содержащий любое соединение по п.1, и физиологически приемлемый носитель или растворитель.
  3. 3. Способ терапевтического лечения млекопитающего, имеющего СОК1-опосредованное заболевание, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтического состава по п.2.
  4. 4. Способ по п.3, в котором СОК1-опосредованное заболевание выбрано из группы, включающей болезнь Альцгеймера, другие деменции, амилоидоз, атеросклероз, заболевание почек, вирусные заболевания и рак.
  5. 5. Способ по п.3, в котором заболевание представляет собой рак или ВИЧ-инфекцию.
  6. 6. Способ лечения рака молочной железы у пациентов, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества низкомолекулярного соединения по п. 1 или фармацевтического состава по п.2.
  7. 7. Способ по любому из пп.3-6, в котором низкомолекулярное соединение, содержащееся в указанном составе, выбирается из следующих соединений:
    - 9 032429
  8. 8. Способ по любому из пп.3-7, в котором низкомолекулярное соединение или состав вводят перо рально.
EA201791284A 2012-02-02 2013-02-01 Селективные низкомолекулярные ингибиторы cdk8/cdk19 и их применение в качестве агентов для лечения рака EA032429B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261594023P 2012-02-02 2012-02-02
US201261673419P 2012-07-19 2012-07-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201791284A1 EA201791284A1 (ru) 2017-10-31
EA032429B1 true EA032429B1 (ru) 2019-05-31

Family

ID=47716178

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201491399A EA028595B1 (ru) 2012-02-02 2013-02-01 Селективные ингибиторы cdk8/cdk19 и их применение в качестве противометастатических и химиопрофилактических агентов для лечения рака
EA201791284A EA032429B1 (ru) 2012-02-02 2013-02-01 Селективные низкомолекулярные ингибиторы cdk8/cdk19 и их применение в качестве агентов для лечения рака

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201491399A EA028595B1 (ru) 2012-02-02 2013-02-01 Селективные ингибиторы cdk8/cdk19 и их применение в качестве противометастатических и химиопрофилактических агентов для лечения рака

Country Status (16)

Country Link
US (2) US9321737B2 (ru)
EP (2) EP3431087A1 (ru)
JP (1) JP6193268B2 (ru)
KR (1) KR20150023223A (ru)
CN (1) CN104363913B (ru)
AU (1) AU2013214783B2 (ru)
BR (1) BR112014019052A8 (ru)
CL (1) CL2014002062A1 (ru)
CO (1) CO7151516A2 (ru)
EA (2) EA028595B1 (ru)
GE (1) GEP201706688B (ru)
MY (1) MY165446A (ru)
PH (1) PH12014501862A1 (ru)
SG (1) SG11201404596UA (ru)
UA (1) UA117342C2 (ru)
WO (1) WO2013116786A1 (ru)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2013295594B2 (en) 2012-07-27 2018-03-29 Biogen Ma Inc. Compounds that are S1P modulating agents and/or ATX modulating agents
JP2015533778A (ja) * 2012-08-23 2015-11-26 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がんの治療のための新規フェニル−ピリジン／ピラジンアミド
EP2914266B1 (en) 2012-11-01 2019-06-19 University of South Carolina Cdk8/cdk19 selective inhibitors for use in a method for treating prostate cancer
US20160000787A1 (en) * 2013-02-26 2016-01-07 Senex Biotechnology, Inc. Inhibitors of cdk8/19 for use in treating estrogen receptor positive breast cancer
EP3087080B1 (en) 2013-12-24 2018-11-28 President and Fellows of Harvard College Cortistatin analogues and syntheses and uses thereof
US9957251B2 (en) 2014-04-18 2018-05-01 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic compound
EP3154952A4 (en) * 2014-06-10 2018-03-14 University of South Carolina Methods and compositions for treatment of her-positive cancers
EP3233086B1 (en) 2014-12-18 2023-02-15 University of South Carolina Suppression of neointimal formation following vascular surgery using cdk8 inhibitors
JP2018516884A (ja) * 2015-05-08 2018-06-28 プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ コルチスタチン誘導体による治療に対する患者の標的化選択
EP3294298A4 (en) 2015-05-08 2018-10-17 President and Fellows of Harvard College Cortistatin analogues, syntheses, and uses thereof
WO2017004411A1 (en) 2015-07-01 2017-01-05 President And Fellows Of Harvard College Cortistatin analogues and syntheses and uses thereof
MX2018005158A (es) 2015-11-03 2019-05-16 Lu License Ab Compuestos para el tratamiento de trastornos hipoproliferativos.
WO2017091836A1 (en) * 2015-11-25 2017-06-01 University Of South Carolina Enhancement of cytarabine activity by inhibiting cdk8/19
JP7198489B2 (ja) * 2016-03-23 2023-01-04 国立大学法人 岡山大学 リン酸化ｓａｒｍ１、抗体、ｓａｒｍ１リン酸化阻害剤、神経変性疾患の予防又は治療薬、スクリーニング方法、ｓａｒｍ１改変体及び使用
WO2018027082A1 (en) 2016-08-03 2018-02-08 The Broad Institute, Inc. Use of cdk8 inhibitors to treat diseases of inflammation and autoimmunity
JP7142846B2 (ja) * 2017-01-30 2022-09-28 国立大学法人京都大学 新規化合物及び制御性ｔ細胞の製造方法
WO2018151633A1 (ru) * 2017-02-20 2018-08-23 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Способы получения производных 4-(((нафталин-2-ил)алкил)амино)хинозалин-6-карбонитрилов
US20220040179A1 (en) * 2017-02-23 2022-02-10 University Of South Carolina Use of cdk8/19 inhibitors for treatment of established colon cancer hepatic metastasis
EP3591040A4 (en) 2017-03-03 2020-11-11 Kyoto University METHOD FOR PRODUCING PANCREATIC ANALYZER CELLS
WO2018186366A1 (ja) 2017-04-03 2018-10-11 京都薬品工業株式会社 新規サイクリン依存性キナーゼ８及び／又は１９阻害剤
RU2641001C1 (ru) * 2017-04-03 2018-01-15 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Соли 4-((2-(6-(4-метилпиперазин-1-карбонил)нафталин-2-ил)этил)амино)хиназолин-6-карбонитрила и фармацевтическая композиция
EP3684420A4 (en) * 2017-09-18 2021-06-16 Chan Zuckerberg Biohub, Inc. METHOD OF TREATMENT FOR TRIPLE NEGATIVE BREAST CANCER
JP7285249B2 (ja) 2017-10-02 2023-06-01 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃｄｋ８／ｃｄｋ１９阻害剤としての新規な［１，６］ナフチリジン化合物及び誘導体
RU2763347C2 (ru) * 2018-03-01 2021-12-28 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Новые ингибиторы cdk8/19
US11014906B2 (en) 2018-08-21 2021-05-25 University Of South Carolina Quinoline-based compounds and methods of inhibiting CDK8/19
AU2020216498A1 (en) 2019-02-01 2021-09-23 Senex Biotechnology, Inc Bicyclic pyridine compositions and methods of using the same for cancer therapy
US20230399607A1 (en) 2020-11-20 2023-12-14 Orizuru Therapeutics, Inc. Maturation agent
TW202246489A (zh) 2021-02-09 2022-12-01 日商千紙鶴治療公司 成熟化劑
US20240180921A1 (en) * 2021-03-25 2024-06-06 University Of South Carolina Cdk8/19 inhibitors for the treatment of cytokine storm
WO2023048275A1 (ja) 2021-09-27 2023-03-30 国立大学法人京都大学 Ｔ細胞の製造方法
CA3239019A1 (en) 2021-11-24 2023-06-01 Regcell Co., Ltd. Human inducibility controllable t-cell and method for preparing same
WO2023095802A1 (ja) 2021-11-24 2023-06-01 レグセル株式会社 Ｔ細胞関連疾患を治療または予防するための医薬組成物

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6046206A (en) * 1995-06-07 2000-04-04 Cell Pathways, Inc. Method of treating a patient having a precancerous lesions with amide quinazoline derivatives
US20040204409A1 (en) * 2003-04-10 2004-10-14 Kazuo Ando Bicyclic compounds as NR2B receptor antagonists
US20080033000A1 (en) * 2006-05-15 2008-02-07 Senex Biotechnology, Inc. Identification of CDKI pathway inhibitors
US20120071477A1 (en) * 2009-11-30 2012-03-22 Senex Biotechnology, Inc. Cdki pathway inhibitors and uses thereof

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE332896T1 (de) * 1997-10-27 2006-08-15 Agouron Pharma 4-aminothiazol derivate, deren herstellung und deren verwendung als inhibitoren cyclin- abhängiger kinasen
US6440959B1 (en) * 1999-04-21 2002-08-27 Hoffman-La Roche Inc. Pyrazolobenzodiazepines
US20040180848A1 (en) 2003-03-10 2004-09-16 Fesik Stephen W. Method of killing cancer cells
US20040180844A1 (en) 2003-03-10 2004-09-16 Fesik Stephen W. Method of killing cancer cells

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6046206A (en) * 1995-06-07 2000-04-04 Cell Pathways, Inc. Method of treating a patient having a precancerous lesions with amide quinazoline derivatives
US20040204409A1 (en) * 2003-04-10 2004-10-14 Kazuo Ando Bicyclic compounds as NR2B receptor antagonists
US20080033000A1 (en) * 2006-05-15 2008-02-07 Senex Biotechnology, Inc. Identification of CDKI pathway inhibitors
US20120071477A1 (en) * 2009-11-30 2012-03-22 Senex Biotechnology, Inc. Cdki pathway inhibitors and uses thereof

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
D. C. PORTER, E. FARMAKI, S. ALTILIA, G. P. SCHOOLS, D. K. WEST, M. CHEN, B.-D. CHANG, A. T. PUZYREV, C.-U. LIM, R. ROKOW-KITTELL,: "Cyclin-dependent kinase 8 mediates chemotherapy-induced tumor-promoting paracrine activities", PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES, NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES, vol. 109, no. 34, 21 August 2012 (2012-08-21), pages 13799 - 13804, XP055056523, ISSN: 00278424, DOI: 10.1073/pnas.1206906109 *
VICTOR���J. CEE, DAVID���Y.-K. CHEN, MATTHEW���R. LEE, K.���C. NICOLAOU: "Cortistatin���A is a High-Affinity Ligand of Protein Kinases ROCK, CDK8, and CDK11", ANGEWANDTE CHEMIE INTERNATIONAL EDITION, �VERLAG CHEMIE| :, vol. 48, no. 47, 9 November 2009 (2009-11-09), pages 8952 - 8957, XP055056483, ISSN: 14337851, DOI: 10.1002/anie.200904778 *

Also Published As

Publication number Publication date
EA201491399A1 (ru) 2015-04-30
KR20150023223A (ko) 2015-03-05
EP3431087A1 (en) 2019-01-23
WO2013116786A1 (en) 2013-08-08
US10993945B2 (en) 2021-05-04
US20140038958A1 (en) 2014-02-06
BR112014019052A2 (ru) 2017-06-20
MY165446A (en) 2018-03-22
EA028595B1 (ru) 2017-12-29
JP2015506376A (ja) 2015-03-02
EA201791284A1 (ru) 2017-10-31
EP2809324A1 (en) 2014-12-10
US9321737B2 (en) 2016-04-26
CO7151516A2 (es) 2014-12-29
EP2809324B1 (en) 2018-08-01
AU2013214783B2 (en) 2017-07-06
GEP201706688B (en) 2017-06-26
CL2014002062A1 (es) 2015-03-20
CN104363913B (zh) 2018-08-21
AU2013214783A1 (en) 2014-08-28
US20170071942A1 (en) 2017-03-16
JP6193268B2 (ja) 2017-09-06
PH12014501862A1 (en) 2014-11-24
UA117342C2 (uk) 2018-07-25
CN104363913A (zh) 2015-02-18
SG11201404596UA (en) 2014-10-30
BR112014019052A8 (pt) 2017-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA032429B1 (ru) Селективные низкомолекулярные ингибиторы cdk8/cdk19 и их применение в качестве агентов для лечения рака
Humphries-Bickley et al. Characterization of a dual Rac/Cdc42 inhibitor MBQ-167 in metastatic cancer
Zhou et al. Development of selective mono or dual PROTAC degrader probe of CDK isoforms
Zhang et al. Transcriptional inhibition by CDK7/9 inhibitor SNS-032 abrogates oncogene addiction and reduces liver metastasis in uveal melanoma
Xiong et al. Effects of MDM2 inhibitors on vascular endothelial growth factor-mediated tumor angiogenesis in human breast cancer
Luo et al. Structure-activity relationships of 2, 4-disubstituted pyrimidines as dual ERα/VEGFR-2 ligands with anti-breast cancer activity
KR20170001962A (ko) 항 악성 종양제 조성물
EP2687216B1 (en) Pharmaceutical composition for treating aging-associated diseases, containing progerin expression inhibitor as active ingredient, and screening method of said progerin expression inhibitor
Sun et al. A small molecule that disrupts Mdm2-p53 binding activates p53, induces apoptosis, and sensitizes lung cancer cells to chemotherapy
Wang et al. Eg5 inhibitor YL001 induces mitotic arrest and inhibits tumor proliferation
Song et al. Discovery of bazedoxifene analogues targeting glycoprotein 130
CN108309982B (zh) 3位取代的5H-[1,2,4]三嗪[5,6-b]吲哚衍生物的用途
US20090005398A1 (en) Methods For The Treatment of Central Nervous System Tumors
US20230129381A1 (en) Compositions and methods for treatment of anticancer-drug resistant cancers
US11427543B2 (en) Compounds for targeting cancer stem cells
Liang et al. Design and development of novel fasudil derivatives as potent antibreast cancer agent that improves intestinal flora and intestinal barrier function in rats
US20210353631A1 (en) 1,4-Benzoxazines for the Treatment of Cancers and Other Neurodegenerative Diseases
KR20170024107A (ko) 아릴 아민 치환된 퀸옥살린의 항암 약물로서 용도
Cseke et al. Propafenone analogue with additional H‐bond acceptor group shows increased inhibitory activity on P‐glycoprotein
JP2009275020A (ja) 細胞増殖阻害剤
US20230390279A1 (en) Composition and method for treating cancer
RU2789449C2 (ru) Способ прогнозирования терапевтического эффекта ингибитора lsd1 на основе экспрессии insm1
WO2016160819A1 (en) Method for the treatment of nf1-or ras-associated disorders
KR101890993B1 (ko) 항암효능을 보이는 다이페닐나프틸피라조리닐카보티오아미드 유도체
Pokhodylo et al. Novel hybrid benzoisothiazole-1, 2, 3-triazole-4-carboxamides with sub-micromolar toxicity towards human breast carcinoma cells and high affinity to DNA

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU