EA031541B1

EA031541B1 - Ионные водные композиции

Info

Publication number: EA031541B1
Application number: EA201691147A
Authority: EA
Inventors: Константинос Алевизопоулос
Original assignee: Геролиматос Интернэшнл С.А.
Priority date: 2013-12-03
Filing date: 2014-11-28
Publication date: 2019-01-31
Also published as: US10485819B2; DK3076983T3; LT3076983T; AU2014359488B2; US20170000817A1; ES2753218T3; PT3076983T; CN114569549A; US11672821B2; CN114569549B; IL245920B; EP3076983A1; CA2932237C; RS59437B1; AU2014359488A1; CN105792835A; IL245920A0; WO2015082356A1; CN105792835B; CA2932237A1

Abstract

В патенте раскрыты фармацевтические композиции для назального введения или ингаляции, применимые для промывания носовых ходов для облегчения снятия отека слизистой оболочки дыхательных путей, например, назальной слизистой оболочки, для лечения состояний, связанных с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей. Фармацевтическая композиция содержит ионный водный раствор и разветвленный сульфатированный полисахарид, имеющий средний молекулярный вес от 4 кДа до 5 МДа и содержащий группы L-фукозы и сульфатного эфира, где ионный водный раствор содержит морскую воду или солевой раствор, и где сульфатированный полисахарид получен из экстракта, выделенного из бурых водорослей, или где сульфатированный полисахарид представляет собой синтетический фукоидановый полисахарид. Также предложены способ для лечения состояний, связанных с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей, выбранных из группы, состоящей из острого риносинусита, рецидивирующего острого риносинусита, подострого риносинусита, хронического риносинусита, синусита, острого обострения хронического риносинусита, аллергического и неаллергического ринита, астмы, кистозного фиброза и хронического обструктивного заболевания легких (ХОБЛ), и устройство в корпусе для доставки фармацевтической композиции.

Description

Данное изобретение представляет фармацевтические композиции на основе морской воды. Композиции с широко распространенными, легко выделяемыми из растущих в природе организмов, совместимыми по своим свойствам с морской водой и/или солевыми растворами всех типов осмолярности и общепризнанно безопасными ингредиентами особенно подходят для разработки новых растворов с улучшенной эффективностью и незначительными побочными эффектами. Композиции, описанные в настоящей заявке, считают удовлетворяющими всем этим условиям.

Композиции могут быть полезными для промывания носовых ходов, что способствует снятию отека слизистой оболочки носа и/или лечению состояний, связанных с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей, таких как хронический риносинусит, синусит, аллергический ринит, носовые полипы и другие назальные состояния и/или воспалительные состояния слизистой оболочки носа, бронхов и дыхательных путей. Композиции включают ионный водный раствор и полученные из водорослей составляющие, такие как сульфатированные полисахариды со средним молекулярным весом от 4 до 5 МДа, содержащие группы L-фукозы и сульфатного эфира.

Сульфатированные полисахариды могут быть линейными или разветвленными.

Композиции можно применять в форме назального спрея (или альтернативно в аэрозольной/небулайзерной форме для ингаляции) у пациентов с разными воспалительными и иными состояниями, затрагивающими слизистую оболочку носа, бронхов и легких, вызываемыми различными агентами (например, веществами бактериального происхождения, вирусами, бактериями, раздражающими агентами, аллергенами и т.п.). Некоторые неограничивающие примеры воспалительных состояний включают острый и хронический риносинусит, аллергический и неаллергический ринит, астму, кистозный фиброз, хроническое обструктивное заболевание легких (ХОБЛ) и другие заболевания дыхательных путей.

Фармацевтические композиции

В настоящей заявке описаны композиции, такие как композиции на основе морской воды, предназначенные для введения в или через дыхательные пути, в частности, посредством назального введения или ингаляции. Композиции, представленные в настоящей заявке, применимы в качестве фармацевтических композиций для лечения состояний, связанных с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой

- 4 031541 дыхательных путей, таких как риносинусит. Композиции могут включать смесь ранее отфильтрованной, очищенной и стерилизованной морской воды и составляющих на основе водорослей. В одном аспекте настоящее изобретение представляет фармацевтическую композицию с ионным водным раствором и экстрактом водорослей, таких как бурые водоросли. Ниже описаны фармацевтические композиции морской воды, содержащие ионные водные растворы, такие как солевые растворы или растворы морской воды, и полученные из водорослей составляющие.

Ионные водные растворы

Композиции настоящего изобретения могут включать ионный водный раствор, отфильтрованный и/или стерилизованный. Ионные водные растворы можно разделить на две разные категории: солевые растворы и растворы морской воды.

Стерилизация морской воды была описана ранее. В EP 0909184 также описано относительное процентное содержание магния, кальция, калия, цинка и меди, представленных в морской воде, собранной в заливе Cancale Bay. Дополнительные места в той же области (Saint Malo) также можно применять в качестве источников морской воды, см. FR2915389. Собранную морскую воду можно разбавлять в несколько раз очищенной/фильтрованной/деионизованной водой или применять для селективного электродиализа для изменения ионных концентраций, см. также WO/2012/110665.

Солевые растворы могут относиться к водным растворам, содержащим разные концентрации хлорида натрия (NaCl), включая (1) нормальные или изотонические солевые растворы: растворы, содержащие приблизительно от 0,9% вес/объем NaCl и с осмолярностью равной приблизительно 300 мОсм/л; (2) гипотонические солевые растворы, содержащие NaCl в количестве меньшем, чем приблизительно 0,9% NaCl и с осмолярностью менее приблизительно 300 мОсм/л, см., например, US 8337906; и (3) гипертонические солевые растворы, содержащие NaCl в количестве большем, чем приблизительно 0,9% NaCl и с осмолярностью выше 300 мОсм/л. Например, растворы 3 и 5% NaCl будут иметь осмолярность равную приблизительно 1000 мОсм/л и приблизительно 1700 мОсм/л, соответственно.

Солевые растворы могут включать дополнительные соли, такие как неограничивающие примеры солей Мертвого моря и антиоксиданты, примеры которых приведены в US 7541052, см. также US 6528081. Необязательные дополнительные ингредиенты могут включать цинк, как, например, в US 5622724, медь, марганец, магний и другие ионы металлов, противомикробные агенты, эфирные масла и т.п., см. также WO/2003/015746 и WO/2012/110665. У этих растворов может быть подведен pH, т.е. до физиологических уровней (pH 7-8) с помощью разных буферов. Или гипотонические солевые растворы.

Растворы морской воды могут относиться к трем типам растворов: (1) неразбавленная морская вода; (2) разбавленная морская вода; и (3) морская вода с измененным содержанием ионов/осмолярностью.

Неразбавленная морская вода содержит множество ингредиентов, см. табл. 1 ниже; они могут включать различные соли, минералы и следовые элементы. Отмечено, что содержание ионов/ионную силу морской воды измеряют 2 способами: либо в виде эквивалентов хлорида натрия, либо с помощью прямых измерений осмолярности (например, приблизительно 1000 мОсм/л).

В первом случае эквиваленты NaCl рассчитывают с помощью способов, таких как способ Фольграрда. В этом способе осаждают все хлориды в морской воде (галиды, например, соли Na, K, Ca, Mg соли с Cl) и переводят их в процент NaCl. Соответственно, в неразбавленной морской воде содержится приблизительно 3,1-3,8 вес./об.% NaCl (в зависимости о происхождения морской воды).

Что касается измерений осмолярности чистой морской воды, вклад различных ионов (в мОсм) в значение приблизительно 1000 мОсм/л, как отмечается, составляет: Na: 459, K: 10, Ca: 10, Mg: 53, Cl: 538. Морскую воду, применяемую в данном случае, как правило фильтруют и/или стерилизуют для удаления/уничтожения микроорганизмов перед применением.

Морскую воду можно разбавлять в несколько раз очищенной/дистиллированной/деионизованной/ фильтрованной водой. В зависимости от степени разбавления растворы могут быть гипотоническими, изотоническими или все менее гипертоническими по сравнению с неразбавленной морской водой. Например, разбавление 7:3 описано в ЕР 0908184, включенном в полном объеме посредством ссылки. Это приводит к образованию гипертонического раствора, содержащего приблизительно 2,3-2,5% NaCl (эквиваленты). Можно провести дополнительное разбавление с образованием растворов с приблизительно 0,9, 2, 2,6 или 3% NaCl, см., например, US 4581226 (также табл. 1 и 3). Очевидно, что осмолярность морской воды также изменяется в соответствии с разбавлением.

Содержание ионов/ионную силу морской воды также можно искусственно изменить химическими способами, например, электродиализом, чтобы специфично снизить содержание ионов до желаемого уровня, например, приблизительно до 0,9% NaCl (с образованием изоосмотического раствора) или приблизительно до 2,2% (гиперосмотичный). Типичные растворы этого рода описаны в EP 1091747 или US2010/0151044 (изоосмотические) или WO/2008/037938 и WO/2012/110665 (гиперосмотические).

Различие между разбавленными и прошедшими электродиализ растворами морской воды заключается в том, что помимо разного процентного содержания NaCl ингредиенты морской воды разбавляются в первом случае, в то время как в последнем случае они остаются такими, как были в чистой морской воде. Важность этой информации объяснена ниже, см. также табл. 2 и 3 ниже для прямого сравнения содержания ионов в обоих способах. Отмечено, что поскольку чистая морская вода изначально имеет

- 5 031541 разное процентное содержание различных ингредиентов, существует некоторая вариабельность препаратов растворов в каждом случае.

Таблица 1. Композиция морской воды из Handbook of Chemistry and Physics 63^rd edition 1982-1983, CRC Press, см. также табл. А из US2010/0151044

Элемент	Количество (м.д.)	Элемент	Количество (м.д.)
С1	18980	РЬ	0,004-0,005
Na	10561	Se	0, 004
Mg	1272	Sn	0, 003
S	884	Cs	0, 002 (приблизительно)
Са	400	и	0,00015-0,0016
К	380	Mo	0,0003-0,002
Br	65	Ga	0,0005
С (неорганический)	28	Ni	0,0001-0,0005
Sr	13	Th	<0,0005
(SiO2)	0,01-7,0	Ce	0,0004
В	4,6	V	0,0003
С (органический)	1,2-3,0	La	0,0003
А1	0,16-1,9	Y	0,0003
F	1, 4	Hg	0,00003
N (нитрат)	0,001-0,7	Ag	0,00015-0,0003
N (органический азот)	0,03-0,2	Bi	0,0002
Rb	0,2	Co	0,0001
Li	0, 1	Sc	0,00004
Р (фосфат)	>0,001-0,10	Au	0,000004-0,000008
Ва	0,05	Fe (в истинном растворе)	<10-9
I	0,05	Ra	2,10-11=3,10--10
N (нитрит)	0,0001-0,05	Ge	Присутствует
N (аммиачный)	>0,005-0,05	Ti	Присутствует
As (мышьяк)	0,003-0,024	W	Присутствует
Fe	0,002-0,02	Cd	Присутствует в морских организмах
Р (органический фосфор)	0,016	Cr	Присутствует в морских организмах
Zn	0,005-0,014	TI	Присутствует в морских организмах
Си	0,001-0,09	Sb	Присутствует в морских организмах
Мп	0,001-0,01	Zr	Присутствует в морских организмах
		Pt	Присутствует в морских организмах

м.д.=миллионная доля

- 6 031541

Таблица 2. Содержание ионов/осмолярность, измененные посредством разбавления морской воды для специфичного снижения содержания ионов до желаемого уровня

штрия

Натрии

2486

Хлорид

Калии

Кальции

Магнии

1350

2700

Ияотони*значения для чистой воды взяты из Langmuir (1997): Aqueous environmental geochemistry: Upper Saddle River, Prentice Hall, Inc., 600p;

**приведенные значения варьируются в пределах 5-10% в зависимости от источника морской воды; ***рассчитанное в эквивалентах NaCl (способ Фольгарда).

Таблица 3. Содержание ионов/осмолярность, измененные посредством электродиализа для специфичного снижения содержания ионов до желаемого уровня

		Чистая морская вода*	Изотонический	Гипертонический
(мг/л)
% хлорида натрия	NaCl	3,50%	0, 90%	2,20%
Натрий	Na+	10500	2100-2600	5500-7500
Хлорид	Cl-	19000	5400-6300	10000-13000
Калий	К+	390	44-62	100-250
Кальций	Са+ +	410	280-390	300-450
Магний	Мд+ +	1350	1100-1500	1100-1500
Сульфат	SO4--	2700	2700	2700

Экстракты водорослей

Композиции настоящего изобретения также могут включать экстракты водорослей, такие как сульфатированные полисахариды, полученные из экстрактов водорослей. Экстракты водорослей можно получать из трех разных водорослей: (1) бурые водоросли; (2) сине-зеленые водоросли; (3) и красные водоросли. Экстракты бурых водорослей.

Также представлены композиции, включающие экстракты из бурых водорослей. Бурые водоросли и некоторые морские беспозвоночные (такие как морские ежи и морские огурцы) богаты сульфатированными полисахаридами. Сульфатированные полисахариды, полученные из экстрактов бурых водорослей, могут обладать средним молекулярным весом выше приблизительно 4 кДа. Сульфатированные полисахариды могут быть линейными или разветвленными. Сульфатированные полисахариды включают полисахариды на основе фукозы с группами L-фукозы и сульфатного эфира, такие как фукоидан. Фукоиданы включают полученные из бурых водорослей, таких как Undaria pinnafitida, или также применимы синтетические фукоидановые полисахариды, такие как высокомолекулярная фукоидановая фракция со средним молекулярным весом в интервале приблизительно от 1 до 2 МДа (например, Kraeber, Germany) и низкокомолекулярная фукоидановая фракция со средним молекулярным весом приблизительно 8,2 кДа.

- 7 031541

Конкретные виды бурых водорослей включают

Ascoseira,

Himantothallus, Phaeurusm, Dictyopteris, Dictyota, Dilophus,

Distromium, Glossophora, Homoeostrichus, Lobophora, Lobospira,

Newhousia, Pachydictyon, Padina, Spatoglossum, Stypopodium,

Taonia, Zonaria, Scoresbyella, Choristocarpus, Discosporangium,

Acinetospora, Feldmannia, Geminocarpus, Hincksia, Pogotrichum,

Pylaiella, Adenocystis, Caepidium

Utriculidi um,

Acrothrix,

Ascoseirophila ,

Asperococcus,

Austrofilum,

Chordaria ,

Cladosiphon, Corycus, Delamarea

Dictyosiphon

Elachista,

Eudesme, Giraudia, Gononema,

Halothrix, Haplogia,

Hecatonema,

Heterosaundersella ,

Нитш!а

Isthmoplea

Laminariocolax,

Laminarionema ,

Leathesia,

Leptonematella ,

Litosiphon,

Microspongium,

Mikrosyphar, Myelophycus, Myriogloea, Myrionema,

Myriotrichia,

Papenfussiella

Petrospongiurn

Pleurocladla ,

Polytretus,

Proselachista ,

Protectocarpus ,

Punctaria,

Sauvageaugloia,

Soranthera

Sorocarpus

Spermatochnus,

Sphaerotrichia,

Stschapovia,

Stictyosiphon,

Tinocladia , Chordariopsis,

Streblonema,

Striaria ,

Asterocladon

Ectocarpus, Kuckuckia, Mesospora, Asterotrichia, Bachelotia,

Bifurcariopsis, Durvillaea, Ascophyllum, Fucus, Hesperophycus

Pelvetia, Pelvetiopsis, Silvetia

Xiphosphora,

Himanthalia

Hormosira, Notheia, Anthophycus,

Axillariella,

Bifurcaria

Bifurcariopsis

Carpoglossum,

Caulocystis,

Coccophora

Cystophora,

Cystoseira, Halidrys,

Hizikia,

Hormophysa

Myagropsis,

Myogropsis, Myriodesma,

Sargassum,

Turbinaria

Cystophaera,

Marginariella, Phyllospora, Seirococcus, Ishige,

Akkesiphycus,

Alaria, Aureophycus, Druehlia, Eualaria, Hirome,

Lessoniopsis,

Pleurophycus, Pterygophora, Undaria, Undariella,

Undariopsis ,

Chorda ,

Agarum,

Costaria ,

Dictyoneurum,

Thalassiophyllum,

Arthrothamnus,

Costularia,

Cymathere,

Feditia, Gigantea, Laminaria,

Macrocystis,

Nereocystis,

Pelagophycus ,

Pelagophycus,

Macrocystis,

Phycocastanum,

Phyllariella,

Polyschidea

Postelsia

Pseudoless onia

Saccharina, Streptophyllopsis,

Ecklonia, Eckloniopsis, Egregia

Eisenia

Lessonia,

Pseudochorda

Nemoderma

Onslowia

Verosphacella

Neoralfsia

Basispora

Hapalospongidi on

Jonssonia, Lithoderma, Myrionemopsis, Petroderma, Porterinema

Pseudolithoderma,

Ralfsia,

Chnoospora,

Colpomenia,

Hydroclathrus,

Petalonia, Rosenvingea, Scytosiphon, Bodanella,

Coelocladia,

Heribaudieila,

Phaeostroma,

Asteronema,

Scytothamnus,

Stereocladon,

Splachnidiиш,

Cladostephus,

Sphacelaria,

Sphacella, Alethocladus, Halopteris,

Stypocaulon,

Austronereia,

Bellotia, Carpomitra, Encyothalia, Nereia,

Peri sporochnus,

Perithalia,

Sporochnema,

Sporochnus ,

Tomaculopsis ,

Syringoderma

Halosiphon,

Masonophycus

Phyllariopsis ,

Saccorhiza,

Stschapovia,

Haplospora,

Phaeosiphoniella ,

Tilopteris ,

Neolepioneuma,

Analipus и

Phaeostrophion.

- 8 031541

Другие источники включают некоторые зеленые водоросли и иглокожих, таких как морские ежи и морские огурцы. Примеры зеленых водорослей включают Ulva sp, Enteromorpha sp, Codium sp, Caulerpa sp и Halimala sp.

Сульфатированные полисахариды, включающие полисахариды на основе фукозы, могут включать экстракты, полученные из Fucus vesiculosus, и содержать в основном фукозу, сульфат, поташ, и следовые количества аминоглюкозы. Сульфатированные полисахариды из бурых водорослей F. evanescens С. Ад, F. distichus и F. serratus L. включают в основном фукозу, сульфат и ацетат. Фукоиданы включают Fфукоидан, в основном состоящий из сульфоэфиров фукозы, и U-фукоидан, состоящий из приблизительно 20% глюкуроновой кислоты. Некоторые сульфатированные полисахариды включают чередующиеся 3- и 4-связанные остатки оШ-фукопиранозо-2-сульфата, а другие могут включать повторяющиеся дисахаридные единицы. В дополнение к линейным полисахаридам в экстракт, полученный из E. kurome или Chorda filum, включены сильно разветвленные структуры.

Сульфатированные полисахариды для применения в способе и композициях, описанных в настоящей заявке, могут включать экстракт из целого растения или из любой части растения, такой как листья, стебли, споры или их комбинации. Исходный материал может быть свежим, замороженным или сухим материалом. После фильтрования или диализа экстракт можно применять в жидком или сухом виде. Как правило, такой экстракт включает полисахарид на основе фукозы в количестве от по меньшей мере 1% вес./об. до приблизительно 100 вес./об.%.

Как правило, молекулярный вес сульфатированных полисахаридов составляет от приблизительно 4 кДа до приблизительно 5 МДа, включая приблизительно 5, 10, 15, 20, 30, 50, 70, 90, 100, 300, 500, 700, 900, 1000, 2000, 3000, 4000 и 5000 кДа или средний молекулярный вес в интервале между указанными размерами.

Сульфатированные полисахариды также включают фукоиданы, описанные в патентной заявке WO/2011/100805, см., например, соответствующую информацию по молекулярному весу (выше приблизительно 4 кДа, препараты, содержащие разное количество фукоидана, например, приблизительно 1095% или более), по видам, которые можно применять для выделения, техническому описанию применяемых фукоиданов и т.п. Важно отметить, что фукоиданы, применяемые в примерах, получены из Undaria pinnafitida (водн.) экстрактов и содержат более 85% фукоиданов.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения композиции включают от приблизительно 0,1% до приблизительно 10% сульфатированных полисахаридов или фукоиданов от массы композиции. Содержание сульфатированных полисахаридов или фукоидана в композиции может находиться в пределах от приблизительно 0,1% до приблизительно 20%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 10%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 5% и от приблизительно 0,1% до приблизительно 1% от веса композиции. В других вариантах осуществления настоящего изобретения композиция включает по меньшей мере 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 4%, 5%, б%, 7%, 8%, 9%, 10% или более % сульфатированных полисахаридов или фукоидана по весу.

Экстракты сине-зеленых водорослей

Композиции настоящего изобретения могут также включать экстракты из сине-зеленых водорослей. Экстракты сине-зеленых водорослей богаты белком, витаминами, минералами и каротиноидами, антиоксидантами, позволяющими защитить клетки от повреждений. Экстракты содержат питательные вещества, включая комплекс витаминов В, бета-каротин, витамин Е, марганец, цинк, медь, железо, селен и гамма-линоленовую кислоту (незаменимая жирная кислота). Сине-зеленые водоросли, такие как Aphanizomenon flos aquae (AFA) или Spirulina (Arthrospira), содержат до 62% аминокислот в экстрактах. Поскольку экстракты являются богатым источником белка и других питательных веществ, их применяют в качестве пищевых добавок.

Сине-зеленые водоросли, такие как AFA или Spirulina (Arthrospira), можно выделять из любого источника. Источник может быть природным источником, богатым сине-зелеными водорослями. Источник может также быть искусственным источником, таким как искусственное озеро или искусственный источник воды. Источником также могут быть биореакторы или ферментеры. Источником может быть окружающая среда, созданная для коммерческого выращивания и получения сине-зеленых водорослей.

Экстракты сине-зеленых водорослей могут включать экстракт из цельных водорослей или из любой части водорослей. Экстракт можно фракционировать. Экстракт сине-зеленых водорослей может включать любую фракцию или выделенную или очищенную молекулу из клетки сине-зеленой водоросли. Сине-зеленые водоросли разрушают, добавляют неорганический или органический растворитель и собирают экстракт (или молекулы). Конкретные неограничивающие примеры экстрактов выделяют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, тонкослойной хроматографии, аффинной колонки, магнитных шариков или дистилляции. В одном варианте осуществления настоящего изобретения фракционирование применяют для выделения экстракта на основании молекулярного веса или гидрофобности молекул сине-зеленых водорослей. Например, экстракт может включать молекулы весом менее приблизительно 50 кДа, но не 50 кДа и выше; менее приблизительно 10 кДа, но не 10 кДа и выше; менее приблизительно 5 кДа, но не 5 кДа и выше.

Экстракт сине-зеленых водорослей, такой как экстракт в сухой форме, включает от приблизительно

- 9 031541

0,5% до приблизительно 5% массовой доли экстракта сине-зеленых водорослей в композиции. Массовая доля экстракта сине-зеленых водорослей в композиции может составлять от приблизительно 0,1% до приблизительно 20%, от приблизительно 0,5% до приблизительно 20%, от приблизительно 0,5% до приблизительно 10%, от приблизительно 0,5% до приблизительно 5% и от приблизительно 0,5% до приблизительно 1%. В других вариантах осуществления настоящего изобретения композиция включает экстракт сине-зеленых водорослей, массовая доля которого составляет по меньшей мере приблизительно 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%,0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10% или более. В примерном варианте осуществления настоящего изобретения содержание экстракта синезеленых водорослей составляет от приблизительно 0,1% до приблизительно 10% композиции.

Экстракты красных водорослей

Представленные композиции могут включать экстракты из красных водорослей. Красные водоросли содержат сульфатированные полисахариды с D-галактозой, связанной чередующимися альфа (1-3) и бета (1-4) связями. Полисахариды на основе галактозы отличаются наличием или отсутствием 3,6ангидридного мостика на альфа-связанном (1-3) остатке галактозы, и по уровню сульфатирования. Каррагинан является общим названием линейных и разветвленных сульфатированных полисахаридов на основе галактозы, экстрагированных из красных водорослей (багрянок или красных водорослей). Примеры в этом случае описаны в WO/2009/027057.

Способы экстрагирования и получения полисахаридов на основе галактозы или каррагинана могут быть основаны на применении дикорастущих красных водорослей, таких как содержащие каррагинан растения, такие как Gigartina radula, Gigartina skottsbergii, Gigartina chamissoi, Gigartina stellata, Iridaea cordata, Chondrus chrispus и Sarcothalia crispate, посаженные вдоль нейлоновых канатов и собираемые в рамках сельскохозяйственной деятельности по масштабному культивированию в воде или получаемые при образовании синтетического каррагинана. Выделение полисахаридов на основе галактозы из красных водорослей проводят в соответствии со стандартными техниками, как описано в патенте США № 3094517, авторы которого Stanley et al. Каррагинан экстрагируют из промытых водорослей, также подвергнутых щелочной модификации при помещении водорослей в немного щелочной раствор за счет добавления низкой концентрации щелочной соли (т.е. pH раствора поднят до интервала, например, 9-10), а затем нагревании этого раствора до температуры приблизительно равной 80°С в течение периода времени от приблизительно 20 мин до двух часов.

Существует более 10 структурно различающихся каррагинанов, их природа зависит от рода водорослей, из которых они были экстрагированы. Тремя основными типами являются йота-, каппа- и лямбда-каррагинаны, которые немного различаются по своей структуре и уровню сульфатирования. Йотакаррагинан является образующим мягкий гель сульфатированным полисахаридом на основе галактозы, в основном экстрагируемым из красных водорослей Gigartina stellata и Chondrus crispus. Каппакаррагинаны образуют прочные твердые гели, и в основном их получают из Kappaphycus cottonii. Лямбда-каррагинаны, являющиеся наиболее распространенной формой, часто применяют в качестве загустителей молочных продуктов.

Полисахариды на основе галактозы могут иметь молекулярный вес, варьирующий от приблизительно 15 кДа до 5 МДа, и фракции, имеющие средний молекулярный вес выше 50 кДа, и в особенности, фракции, имеющие средний молекулярный вес в интервале от 50 кДа до 3 МДа. Полисахариды на основе галактозы также включают каррагинаны, описанные в патентной заявке WO/2009/027057, см., например, соответствующую информацию.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения композиции включают полисахарид на основе галактозы или каррагинан с массовой долей приблизительно от 0,1% до приблизительно 10% композиции. Массовая доля полисахарида на основе галактозы или каррагинана в композиции может составлять от приблизительно 0,1% до приблизительно 20%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 10%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 5%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 1%. В других вариантах осуществления настоящего изобретения композиция включает полисахарид на основе галактозы или каррагинан, массовая доля которых составляет по меньшей мере приблизительно 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10% или более.

Экстрагирование водорослей

Как представлено в настоящей заявке, экстракты водорослей можно получить из свежих, дегидратированных или законсервированных клеток водорослей или из клеток морских видов организмов. Водоросли можно экстрагировать в водном растворе, таком как вода, или в подходящем буферном солевом растворе, или в других растворителях, таких как этанол и метанол, и ДМСО. Экстракт также можно получить любым другим подходящим способом. После экстрагирования экстракты высушивают, как описано выше. Экстракты водорослей можно применять сразу или можно сохранять как клетки в жидком виде, в виде замороженной жидкости, в дегидратированном виде, в лиофилизированном виде, после высушивания в вакууме, после барабанной сушки и после высушивания распылением.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения экстракты фильтруют для разделения фракций разных размеров. Фильтрование проводят с помощью фильтров для ультрафильтрования, отсе

- 10 031541 кающих разный молекулярный вес, таких как фильтры, отсекающие 10 МДа, позволяющие собрать молекулы с молекулярным весом менее приблизительно 10 МДа и исключающие молекулы с весом приблизительно 10 МДа или более. В данном контексте приблизительно относится к различию в 5 кДа. В других примерах фильтры, отсекающие разный молекулярный вес, позволяют собрать молекулы с весом менее 5 МДа и исключают молекулы с весом 5 МДа или более; менее 1 МДа и исключают молекулы с весом 1 МДа или более; менее 500 кДа и исключают молекулы с весом 500 кДа или более; менее 300 кДа и исключают молекулы с весом 300 кДа или более; менее 100 кДа и исключают молекулы с весом 100 кДа или более; менее 50 кДа и исключают молекулы с весом 50 кДа или более.

Прочие компоненты

Фармацевтические композиции, представленные в настоящей заявке, могут включать один или несколько дополнительных компонентов. Неограничивающие примеры дополнительных компонентов/агентов, при необходимости включенных в композицию, включают охлаждающие агенты, такие как ментол, согревающие агенты, ароматизаторы, вызывающие слюноотделение агенты, экстракт чая, экзогенные соли (например, соли Мертвого моря), антисептические и антибактериальные агенты, аминокислоты, эфирные масла, витамин (витамины) (например, витамин А, витамин С, витамин В и/или витамин D), каротиноид, розмарин, экстракт розмарина, кофеиновую кислоту, экстракт кофе, экстракт куркумы, куркумин, экстракт черники, экстракт косточек винограда, розмариновую кислоту, антиоксидант, фермент, пребиотик, пробиотик, экстракт андрографиса, L-триптофан, посевной чеснок, лекарственные средства из растений, добавки, натуральные ингредиенты, минералы, энергетики, снотворное, иммуностимуляторы, красители, консервант, ароматизатор, фруктовый экстракт, другие агенты и их комбинации. Также возможные дополнительные компоненты включают гидратирующие агенты.

Эфирные масла можно добавлять в качестве лекарственных средств из растений с характерным запахом, которые могут дезинфицировать или оказывать противомикробное действие. Лимонное масло, эвкалиптовое масло, мелиссовое масло, мятное масло, камфара, анисовое масло, розмариновое масло, масло мяты кудрявой, масло перечной мяты, масло тимьяна и шалфейное масло можно применять в качестве эфирных масел. Концентрация эфирных масел может составлять приблизительно от 0,01 мг до 50 мг, в частности, от 0,05 мг до 15 мг на 10 мл, где от 0,01 мг до 10 мг, в частности, от 0,01 мг до 5 мг это лимонное масло; от 0,01 мг до 10 мг, в частности, от 0,01 мг до 5 мг это эвкалиптовое масло; от 0,01 мг до 5 мг, в частности, 0,01 мг до 0,3 мг это мелиссовое масло; от 0,01 мг до 10 мг, в частности, 0,01 мг до 3 мг это мятное масло; от 0,01 мг до 10 мг, в частности, от 0,01 мг до 3 мг это камфара; от 0,001 мг до 5 мг, в частности, от 0,001 мг до 0,5 мг это анисовое масло; от 0,001 мг до 5 мг, в частности, от 0,001 мг до 0,05 это розмариновое масло; от 0,01 мг до 10 мг, в частности, от 0,01 мг до 5 мг это масло мяты кудрявой; от 0,01 мг до 10 мг, в частности, от 0,01 мг до 5 мг это масло перечной мяты; от 0,01 мг до 10 мг, в частности, от 0,01 мг до 5 мг это масло тимьяна; и от 0,001 мг до 5 мг, в частности, от 0,001 мг до 0,5 мг это шалфейное масло на 10 мл композиции.

Фармацевтические композиции могут включать фармацевтически приемлемый носитель или адъювант, или могут быть получены без такого носителя или адъюванта. Фармацевтически приемлемый носитель представляет собой, например, один или несколько растворителей, диспергирующую среду, покрытия, противомикробные агенты, изотонические и задерживающие адсорбцию агенты и подобное, совместимое с введением млекопитающему, такому как человек. Любой носитель, совместимый с эксципиентом (эксципиентами) и терапевтическим агентом (агентами) подходит для применения. В одном варианте осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция включает ионный водный раствор, экстракт из бурых водорослей и фармацевтически приемлемый носитель или адъювант. В другом варианте осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция включает ионный водный раствор, разветвленный сульфатированный полисахарид со средним молекулярным весом выше 4 кДа, содержащий группы L-фукозы и сульфатного эфира и фармацевтически приемлемый носитель или адъювант. Применимые фармацевтически приемлемые носители или адъюванты являются общепринятыми. В Remington's Pharmaceutical Sciences, by E. W. Martin, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 15^th Edition (1975) описаны композиции, а композиции, подходящие для фармацевтической доставки, описаны в настоящей заявке.

Композиция может содержаться в любом подходящем количестве в любом подходящем вещественосителе и, как правило, присутствует в количестве 1-99% по весу от общего веса фармацевтической композиции. Фармацевтические композиции можно составлять в форме, соответствующей общепринятой фармацевтической практике (см., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20^thed.), ed. A. R. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000 and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York).

В дополнение к биологически нейтральным носителям фармацевтические композиции для введения могут содержать небольшие количества нетоксичных веществ, таких как увлажняющие или эмульгирующие агенты, консерванты и регулирующие pH буферные агенты и подобное, например, ацетат натрия или сорбитанмонолаурат.

Также в композиции можно включить дополнительные активные соединения.

Любой противомикробный агент, известный в данной области техники, можно применять в компо

- 11 031541 зициях в концентрациях, обычно применяемых для данных агентов. Противомикробные агенты включают антибактериальные, противогрибковые и противовирусные агенты. Примеры антибиотиков (т.е. антибактериальных агентов) включают пенициллины (например, пенициллин G, ампициллин, метициллин, оксациллин и амоксициллин), цефалоспорины (например, цефадроксил, цефоранид, цефотаксим и цефтриаксон), тетрациклины (например, доксициклин, миноциклин и тетрациклин), аминогликозиды (например, амикацин, гентамицин, канамицин, неомицин, стрептомицин и тобрамицин), макролиды (например, азитромицин, кларитромицин и эритромицин), фторхинолоны (например, ципрофлоксацин, ломефлоксацин, левофлоксацин и норфлоксацин), и другие антибиотики, включая хлорамфеникол, клиндамицин, циклосерин, изониазид, рифампин, сульфаметоксазол с триметопримом, цефуроксим, цефподоксим и ванкомицин. Противовирусные агенты представляют собой вещества, способные ингибировать репликацию вирусов. Примеры противовирусных агентов включают 1,-О-рибофуранозил-1,2,4-триазол3-карбоксамид, 9-2-гидроксиэтоксиметилгуанин, адамантанамин, 5-йодо-2'-дезоксиуридин, трифтортимидин, интерферон, аденинарабинозид, ингибиторы протеаз, ингибиторы тимидинкиназы, ингибиторы синтеза Сахаров или гликопротеинов, ингибиторы синтеза структурных белкового, ингибиторы прикрепления и адсорбции и нуклеозидные аналоги, такие как ацикловир, пенцикловир, валацикловир и ганцикловир. Противогрибковые агенты включают как фунгицидные, так и фунгистатические агенты, такие как, например, бензойная кислота, ундецилениновый алканоламид, циклопироксоламин, полиены, имидазолы, аллиламин, трикарбаматы, амфотерицин В, бутилпарабен, клиндамицин, эконазол, флуконазол, флуцитозин, гризеофульвин, нистатин и кетоназол.

Композицию также можно составлять в форме комбинации с другими агентами, обычно применяемыми для облегчения симптомов синусита, сенной лихорадки, заложенности носа, аллергического ринита и/или неаллергического (круглогодичного) ринита. Примеры других агентов могут включать, но не ограничиваться кортикостероидами, другими стероидными соединениями, антигистаминными агентами, противоотечными агентами, брохнодилататорами, в2-адренергическими агонистами и противомикробным агентом. В одном варианте осуществления настоящего изобретения композиция далее включает по меньшей мере один кортикостероид, другое стероидное соединение, антигистаминное средство, противоотечное средство, бронходилататор, в2-адренергический агонист и противомикробный агент.

Кортикостероиды и другие стероидные соединения можно применять с описанной композицией для снижения воспаления и образования гистамина в носовых ходах, тем самым облегчая заложенность носа, насморк, чихание, боль в придаточных пазухах носа, головную боль и пр. Примеры кортикостероидов и других стероидных соединений могут включать алкометазон, беклометазон, бетаметазон, будесонид, циклезонид, клобетазол, дефлазакорт, дифлукортолон, дезоксиметазон, дексаметазон, флудрокортизон, флунизолид, флуоцинолон, флуометолон, флутиказон, гидрокортизон, мометазона фуроат, нандролона деканоат, римексолом, метилпреднизолон, преднизолон и триамцинолона ацетонид. Иллюстративные примеры кортикостероидов и других стероидных соединений могут включать мометазон, будесонид, флутиказон, флунизолид, беклометазон, триамцинолон и циклезонид.

Антигистаминные средства являются первичными лекарственными средствами, применяемыми для лечения аллергического ринита. Антигистаминные средства помогают контролировать чихание, зуд и ринорею, а также ассоциированные глазные симптомы, но являются неэффективными в отношении уменьшения заложенности носа. Антигистаминные средства конкурируют с гистамином за связывание рецепторов H1 и таким образом препятствуют действию гистамина, включающему бронхоспазм, отек, повышенную секрецию слизи и зуд. Применяемые сегодня антигистаминные средства можно вводить перорально или местно (интраназально). Примеры полезных антигистаминных средств, которые можно применять с описанной композицией, могут включать акривастин, азатадин, азеластин, астемизол, бромфенирамин, карбиноксамин, цетиризин, хлорофенирамин, клемастин, ципрогептадин, дексхлорофенирамин, дифенгидрамин, доксиламин, эбастин, гидроксизин, кетотифен, левокабастин, лодоксамид, лоратадин, меклизин, меквитазин, метдилазин, оксатомид, фениндамин, прометазин, пириламин, сетастин, рокастин, тазифиллин, темеластин, терфенадин, тримепразин, трипеленнамин и трипролидин. Иллюстративные примеры антигистаминных средств могут включать астемизол, азатадин, азеластин, цетиризин, эбастин, кетотифен левокабастин, лоратадин, лодоксамид, меквитазин, оксатомид, сетастин, тазифиллин, темеластин и терфенадин.

Назальные противоотечные средства включают соединения, облегчающие заложенность носа за счет сужения (констрикции) кровеносных сосудов и уменьшения кровотока, отека и образования слизи. Большинство противоотечных средств действует, усиливая норэпинефриновую (норадреналиновую) и эпинефриновую (адреналиновую) или адренергическую активность за счет стимуляции α-адренергических рецепторов. Противоотечные средства могут быть пероральными (например, таблетки), в виде назального спрея или капель. Примеры противоотечных средств могут включать эфедрин, левометамфетамин, нафазолин, оксиметазолин, фенилэфрин, фенилпропаноламин, пропилгекседрин, псевдоэфедрин, синефрин, тетрагидрозолин, трамазолин и ксилометазолин.

Бронходилитаторы представляют собой вещества, дилатирующие бронхи и бронхиолы, тем самым уменьшая сопротивление в дыхательных путях и усиливая прохождения воздуха в легкие. Они наиболее

- 12 031541 применимы при обструктивных заболеваниях легких, из которых самыми распространенными являются астма и хроническое обструктивное заболевание легких. Классы в этой категории соединений включают в2-адренергические агонисты и антихолинергические средства. в2-адренергические агонисты, также известные как агонисты в2-адренергических рецепторов, представляют собой класс лекарственных средств, действующих на в2-адренергический рецептор, тем самым вызывая расслабление гладкой мускулатуры, приводящее к дилатации бронхиальных ходов. Примеры в2-агонистов длительного действия (LABA, long-acting 32-agonist) включают формотерол, салметерол и их соли, такие как формотерола фумарат и салметерола ксинафоат. Примеры в2-агонистов кратковременного действия включают сальбутамол, тербуталин и их соли, такие как сальбутамола сульфат. Примеры антихолинергических средств включают агенты, применяемые при ХОБЛ и/или астме, такие как тиотропия и ипратропия бромид.

Растительные экстракты, которые можно применять в композиции, включают, но не ограничиваются экстрактами, полученными различными способами (например, посредством экстракции водными или органическими растворителями) из разных частей растения (например, корней, фруктов, листьев и пр.), такими как экстракт розмарина, экстракт кофе, экстракт куркумы, экстракт черники, экстракт косточек винограда, экстракт андрографиса, экстракт посевного чеснока, экстракт тимьяна (например, экстракт тимьяна обыкновенного Thymus vulgaris), экстракт центеллы азиатской Centella asiatica или экстракты, обычно применяемые в косметической и фармацевтической индустрии, такие как включенные в Фармакопею, монографии ВОЗ (Всемирной Организации Здравоохранения) или в краткое руководство Справочника лекарственных средств растительного происхождения (Herbal Medicines 4^th Edition (Thomson Healthcare)). Обычные концентрации растительных экстрактов, которые можно применять в композиции, варьируют в интервале от 0,001% до 5%, наиболее предпочтительно, между 0,05-1% в композиции.

Также можно включать лекарственные средства растительного происхождения и другие природные ингредиенты (например, каротиноиды, кофейная кислота, розмариновая кислота, куркумин).

Другим дополнительным компонентом, который можно включить в композицию, является гидратирующий агент. Гидратирующие агенты можно определить как агенты, улучшающие гидратацию рогового слоя, снижающие трансэпидермальную потерю воды, поддерживающие мягкость и эластичность кожи или оказывающие общее успокаивающее действие в случае сухости и/или раздражения. Примеры таких гидратирующих агентов включают пропиленгликоль, глицерин, сорбит, полиэтиленгликоль или другие агенты, описанные в US 5603943 или US 20070190081. Предпочтительные гидратирующие агенты включают декспантенол или пантотеновую кислоту в концентрации, варьирующей от 0,25 до 2,5 вес./вес.%, предпочтительнее от 0,5 до 1,5 вес./вес.%, предпочтительнее 1 вес./вес.%, гиалуроновую кислоту или ее соль (такую как гиалуронат натрия) в концентрации, варьирующей от 0,01 до 2,5 вес./вес.%, предпочтительнее от 0,025 до 0,5 вес./вес.%, предпочтительнее от 0,2 вес./вес.%, или эктоин, природное соединение, обнаруживаемое в нескольких видах бактерий, таких как Ectothiorhodospira halochloris) в концентрации, варьирующей от 0,001 до 10 вес./вес.%, предпочтительнее от 0,01 до 2 вес./вес.%, предпочтительнее от 0,5 до 1 вес./вес.%.

Примерный вариант композиции для назального введения может включать раствор морской воды/солевой раствор с осомлярностью в пределах от 250 до 350 мОсм/л для изотонического раствора, >350 мОсм/л для гипертонического раствора и <250 мОсм/л для гипотонического раствора, что соответствует массовой доле от 10 до приблизительно 99,9% в водном растворе (соответствующее содержание NaCl составляет 0,9%, >0,9% и <0,9% NaCl или эквивалентов NaCl), разветвленный сульфатированный полисахарид со средним молекулярным весом выше 4 кДа, с группами L-фукозы и сульфатного эфира и, при необходимости, любой из экстракта сине-зеленых водорослей и полисахарида на основе галактозы, такого как каррагинан, или как экстракт сине-зеленых водорослей, так и полисахарид на основе галактозы, такой как каррагинан.

Другой примерный вариант композиции для назального введения может включать раствор морской воды/солевой раствор, экстракт из бурых водорослей и экстракт сине-зеленых водорослей, таких как Spirulina, и, при необходимости, экстракт красных водорослей, такой как каррагинан.

В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения композицию можно упаковать в контейнер под давлением, снабженный самостерилизующейся насадкой, и инструкциями по применению.

Состояния, связанные с дыхательными путями и слизистой оболочкой дыхательных путей.

Способы и композиции настоящего изобретения применимы для лечения состояний, связанных с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей. Состояния, связанные с дыхательными путями и слизистой оболочкой дыхательных путей, включают любые состояния или нарушения с аномальным образованием слизи, секрецией или выведением, или воспалением (бактериальным, вирусным, аллергическим или аутоиммунным) слизистой оболочки носа, бронхов и легких. Примеры заболеваний включают острый риносинусит, рецидивирующий острый риносинусит, подострый риносинусит, хронический риносинусит, обострение хронического риносинусита, синусит, аллергический и неаллергический ринит, астму, кистозный фиброз, хроническое обструктивное заболевание легких (ХОБЛ) и другие заболевания верхних и нижних отделов дыхательных путей.

- 13 031541

Основными функциями носовых ходов являются регуляция потока вдыхаемого воздуха, нагрев и увлажнение вдыхаемого воздуха и удаление инородных элементов (пыли, микробов). Ресничный эпителий, покрывающий слизистую оболочку носа, играет жизненно важную роль в защите от инфекций. Мерцательные реснички эпителия погружены в окружающую их защитную слизь, и двигаются, выталкивая эту слизь вместе с внешними примесями назад, т.е. по направлению к гортани).

Риносинусит представляет собой воспаление (бактериальное, вирусное, алергическое или аутоиммунное) придаточных пазух носа. Риносинусит можно классифицировать на несколько категорий: острый риносинусит - новая инфекция, которая может продолжаться вплоть до четырех недель и симптоматически может подразделяться на тяжелую и нетяжелую формы; рецидивирующий острый риносинусит четыре или более отдельных эпизодов острого синусита, возникших в течение одного года; подострый риносинусит - инфекция, продолжающаяся от четырех до 12 недель и представляющая собой переходное состояние между острой и хронической инфекцией; хронический риносинусит, при котором признаки и симптомы, продолжаются более 12 недель; и обострение хронического риносинусита, при котором признаки и симптомы хронического риносинусита обостряются, но возвращаются к исходному уровню после лечения. Симптомы риносинусита включают заложенность носа, лицевую боль, головную боль, лихорадку и общее недомогание. Некоторые неограничивающие примеры воспалительных состояний включают острый и хронический риносинусит, аллергический и неаллергический ринит, астму, кистозный фиброз, хроническое обструктивное заболевание легких (ХОБЛ) и другие заболевания дыхательных путей.

Существует несколько парных придаточных пазух носа, включая фронтальные, решетчатые, гайморовы и клиновидные пазухи. Риносинуситы часто развиваются как часть спектра заболеваний, затрагивающих дыхательные пути, и состояния, связанные со слизистой оболочкой дыхательных путей, часто связаны с другими состояниями, такими как астма или кистозный фиброз. Все формы риносинусита могут либо приводить к развитию генерализованного воспаления дыхательных путей, либо быть частью этого процесса, так, что с ними могут быть ассоциированы другие респираторные симптомы, такие как кашель.

Способы доставки

Фармацевтические композиции, описанные выше, можно доставить с помощью разных методологий, включая спреи, системы орошения (например, устройства для промывания носа), шприцы или другое. Композицию можно получить в дозированной форме, подходящей для способа введения в виде назального аэрозоля или ингаляции. Пример способа введения композиции может включать распыление парообразных или рассеянных небулайзером микрочастиц под активным динамическим давлением.

Подходящие аэрозольные распылители для применения будут очевидны специалистам в данной области техники и могут варьироваться от аналогов простых устройств до парфюмерных распылителей и даже сложных аппаратов, таких как те, что могут применяться в больницах. Какое бы устройство не применяли, как правило, предпочтительно, чтобы оно содержало некоторый дозиметр для контроля количества раствора, вводимого за один раз. Одно устрйоство, соответствующее распылителю с насадкой, эффективно включает такой дозиметр без необходимости какой-либо специальной адаптации, при этом ограничитель хода нажимаемой головки распылителя фиксирует максимальное количество раствора, распыляемое за один раз. Специально разработанные устройства для распыления можно сделать таким образом, чтобы они содержали ручное устройство, содержащее емкость с композицией.

Представлены подходящие средства для распределения распыляемого раствора, предпочтительно, в аэрозольной форме. Примеры включают пневматические устройство под давлением и устройства, в которых применяют силы сжатого газа в отверстии трубки, ведущей в емкость, для получения аэрозоля, и устройства с кнопкой, в которых нажатие кнопки создает давление на поверхности жидкости в емкости, проталкивая ее через трубку и через тонкий наконечник для диспергирования раствора в аэрозольную струю. Другие примеры включают аэрозольные распылители, ингаляторы, распылители с насосом, небулайзеры (такие как небулайзеры с положительным давлением) и подобное. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения применяемое устройство заранее наполнено композицией, описанной в настоящей заявке.

Один вариант осуществления настоящего изобретения будет включать многодозовый дозирующий распылитель, позволяющий распылять фиксированный объем раствора. В качестве альтернативы применяют газоприводные (например, с азотом) устройства, такие как системы, отделяющие композицию от сжатого газа в алюминиевой или пластиковой (или любого другого типа) бутыли. Эти устройства доставляют раствор с разным значением диффузионного потока и углов при комбинировании с разными устройствами. Предпочтительные диффузионные потоки могут доставлять 0,5-10 мл раствора за секунду распыления с углом 0-60°.

Композиции, описанные выше, можно вводить, согласно инструкциям терапевта и в зависимости от состояния. Предпочтительный способ (назальный) введения включает 1 -5 впрысков в каждую ноздрю 1 5 раз в день; это может продолжаться на протяжении многих недель в зависимости от состояния или симптомов, подлежащих лечению (например, при аллергии).

- 14 031541

Лечение

Способы, описанные в настоящей заявке, представлены для лечения состояний, связанных с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей, или их симптомов, которые включают острый и хронический риносинусит, синусит, аллергический и неаллергический ринит, астму, кистозный фиброз, хроническое обструктивное заболевание легких (ХОБЛ) и другие заболевания верхних и нижних отделов дыхательных путей. В одном варианте осуществления настоящего изобретения способы включают лечение состояния, связанного с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей, у нуждающегося в этом субъекта посредством аэрозольного введения фармацевтической композиции в носовые ходы субъекта. Такие способы включают стадию введения субъекту терапевтического количества описанной в настоящей заявке композиции, достаточного для лечения риносинусита, например, острого и хронического риносинусита, синусита, аллергического и неаллергического ринита, астмы, кистозного фиброза, хронического обструктивного заболевания легких (ХОБЛ) и других заболеваний дыхательных путей.

Способы и композиции, описанные в настоящей заявке, можно вводить в комбинации с одним или несколькими агентами или по отдельности в качестве последовательного лечения. Например, один вариант осуществления настоящего изобретения описывает композицию, вводимую в комбинации в виде единого лечения по меньшей мере с одним кортикостероидом, другим стероидным соединением, антигистаминным средством, противоотечным средством, бронходилататором, в2-адренергическим агонистом и противомикробным агентом. В другом варианте осуществления настоящего изобретения композицию вводят в рамках независимого лечения с другим последующим лечением, включающим по меньшей мере одно из следующего: из кортикостероида, другого стероидного соединения, антигистаминного средства, противоотечного средства, бронходилататора, в2-адренергического агониста и противомикробного агента.

Лечение риносинусита не требует полного устранения риносинусита или ассоциированных симптомов, хотя это является желательным.

Терапевтические способы, описанные в настоящей заявке (включающие профилактическую обработку), как правило, включают введение терапевтически эффективного количества композиций, описанных в настоящей заявке, нуждающемуся в этом субъекту (например, животному, человеку), включая млекопитающее, в частности, человеку. Такое лечение будет надлежащим образом введено субъектам, в частности, человеку, страдающим от, имеющим, предрасположенным к или с риском риносинусита или воспалительного состояния или их симптомов. Определить субъектов с риском можно с помощью любого объективного или субъективного определения с помощью диагностического теста или по мнению субъекта или медицинского работника.

В дополнение к стандартным способам фармацевтической химии и составам, описанным выше, практическое применение композиций и способов, описанных в настоящей заявке, может включать, если иное не указано, стандартные техники молекулярной биологии (включая рекомбинантные техники), микробиологии, клеточной биологии, биохимии и иммунологии, которые находятся в компетенции специалистов в данной области техники. Такие техники подробно объяснены в литературе, такой как Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook, 1989); Oligonucleotide Synthesis (Gait, 1984); Animal Cell Culture (Freshney, 1987); Methods in Enzymology Handbook of Experimental Immunology (Weir, 1996); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (Miller and Calos, 1987); Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel, 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis, 1994); Current Protocols in Immunology (Coligan, 1991). Эти техники применимы для получения полинуклеотидов и полипептидов настоящего изобретения и сами по себе могут рассматриваться для создания и практического применения настоящего изобретения. Конкретные полезные техники для частных вариантов осуществления настоящего изобретения будут обсуждаться в следующих разделах.

Примеры

Следующие примеры приведены с целью предоставить специалистам в данной области техники полное раскрытие и описание создания и применения способов исследования, скрининга и терапии настоящего изобретения и не предназначены для ограничения объема изобретения, предусмотренного изобретателями.

Пример 1. Составы настоящего изобретения способны уменьшить секрецию маркеров воспаления.

Фиг. 1 представляет данные, полученные на растворах, описанных в составах 1-4 в модели трехмерного реконструированного эпителия дыхательных путей человека (коммерчески доступного в Epithelix, Geneva, CH). Эпителий дыхательных путей является свежевыделенным из назальных биопсий и полностью дифференцированным. Благодаря дифференцированной природе и свойствам клеток, модель считают высоко физиологичной системой для исследования эффектов применяемых агентов, включая цитотоксичность и воспаление. Таким образом, в эксперименте, представленном на фиг. 1, полностью дифференцированные клетки назального эпителия человека разводили в смеси клеток, выделенных из назальных полипов 14 различных нормальных доноров, в трехмерных культурах, очень похожих на природные назальные ткани (Huang S et al., The Use of In Vitro 3D Cell Models in Drug Development for Respi

- 15 031541 ratory Diseases, InTech. 2011 ISBN: 978-953-307-615-7). Вкладку клеток, полученную от каждого пациента, с апикальной стороны промывали средой для культивирования за 3 дня до эксперимента для удаления скопившейся слизи и минимизации риска искажения результатов анализа. Чтобы проверить, что все выбранные вкладки удовлетворяют соответствующим требованиям контроля качества, перед применением тестируемых агентов вкладки проверяли под микроскопом на предмет надлежащего функционирования ресничек и соответствия значений трансэпителиального электрического сопротивления. Впоследствии в культуральную среду добавляли липополисахарид в количестве 0,3 мг/мл в присутствии различных растворов (10 мкл наносили на апикальную часть два раза в день в течение 8 ч) или без них на протяжении всего четырех дней. Культуральную среду собирали в дни 0, 1, 2, 3 и 4 и с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA, enzyme-linked immunosorbent assay) измеряли количество IL-8 (интерлейкина-8), хорошо известного маркера воспаления, секретируемого клетками эпителия дыхательных путей.

Как и ожидалось, необработанные культуры не демонстрировали никаких существенных изменений выделения IL-8. Липополисахариды сильно стимулировали экспрессию IL-8, зависящим от времени способом с пиком в день 3. Гипертонический раствор морской воды, содержащий 2,3% NaCl, мог снизить выделение IL-8, вызванное липополисахаридом. Интересно отметить, что растворы, содержащие морскую воду с 2,3% NaCl и указанные ингредиенты (UP: экстракт Undaria pinnafitida, SP: экстракт Spirulina platensis) (составы 1-4) обладали преимуществом надо просто морской водой с 2,3% NaCl (*p<0,05, **р<0,01, критерий Стьюдента), что указывает на то, что ингредиенты из водорослей усиливают эффект морской воды с 2,3% NaCl статистически значимым образом. Отмечается, что все исследуемые растворы были не цитотоксическими по отношению к культивируемым клеткам (по данным измерения отсутствия высвобождения лактатдегидрогеназы в среду).

Пример 2. Лекарственные составы настоящего изобретения уменьшают воспаление и улучшают функционирование клеток носа в культуре эпителиальных клеток донора с аллергией.

В экспериментах, представленных на фиг. 2, полностью дифференцированные клетки назального эпителия человека разводили в смеси вкладок, полученных от донора с аллергией (женщина 35 лет) в трехмерных культурах, очень похожих на природные назальные ткани (Huang S et al., The Use of In Vitro 3D Cell Models in Drug Development for Respiratory Diseases, InTech. 2011 ISBN: 978-953-307-615-7). Клетки с апикальной стороны промывали средой для культивирования за 3 дня до эксперимента для удаления скопившейся слизи и минимизации риска искажения результатов анализа. Микроскопия клеток и соответствующие измерения трансэпителиального электрического сопротивления подтвердили надлежащее функционирование ресничек перед началом эксперимента.

План эксперимента после указанной выше подготовки клеток был следующим: в день 0 клетки оставляли необработанными (отрицательный контроль) или обрабатывали 10 мкл состава 1, контрольного солевого раствора или смеси Cytomix (смесь IL-1-бета, TNF-альфа (tumor necrosis factor, фактор некроза опухоли) и интерфероном-гамма, которая, как предполагают, оказывает цитотоксическое действие на назальный эпителий), которые наносили на апикальную поверхность эпителия. Через 24 ч (день 1) эффект растворов на мукоциллиарный клиренс наблюдали с помощью камеры Ds-5mc (Nikon), соединенной с микроскопом DMIRE2 (Leica). В частности, 5 мкМ микрошариков добавляли к апикальной поверхности клеточных культур во время инкубации с составом 1 (или с контрольным солоевым раствором) и снимали 1-минутные видео, показывающие движение шариков. При последующем анализе с помощью программного обеспечения для анализа изображений Image Pro Plus (Mediacy) отслеживали траекторию движения частиц и рассчитывали скорость каждой частицы, чтобы определить скорость мукоциллиарного клиренса (в мкм/с). После измерения мукоциллиарного клиренса 30 мкл 20 мМ HCPt (Ammonium hexachloroplatinate, гексахлорплатинат аммония, сильный респираторный сенсибилизатор) или солевого раствора добавляли к клеткам в присутствии состава 1 или контрольного солевого раствора. Через 16 ч инкубации (день 2) растворы HCPt удаляли и к клеткам добавляли новую среду для культивирования клеток, содержащую состав 1 или контрольный солевой раствор. Обработку растворами продолжали дважды в день на протяжении дня 2 и дня 3; растворы удаляли в течение дня 4 (заменяли средой для культивирования). В течение этого времени (дни 1-4) собирали культуральную среду для анализа маркера воспаления IL-8 посредством ELISA. В день 4 проводили измерение частоты биения ресничек (выраженной в Гц) с помощью специализированной установки, включающей камеру (Sony XCD V60 Firewire), плату расширения PCI и соответствующее программное обеспечение.

Фиг. 2, панель А, показывает, что состав 1 существенно увеличивал мукоциллиарный клиренс по сравнению с солевым раствором (результаты представляют среднее значение для 200-500 частиц с определенной траекторией). Как и ожидалось, Cytomix оказывал негативное действие на назальный эпителий, приводящее к существенному снижению мукоциллиарного клиренса по сравнению с исходным уровнем. Панель В представляет данные по секреции IL-8 в дни 1-4. Как и ожидалось, HCPt эффективно индуцировал воспаление с пиком секреции IL-8 в день 4. Секрецию IL-8 не наблюдали в клетках, обработанных солевым раствором вместо HCPt, или в необработанных клетках. Состав 1 мог уменьшать воспаление, индуцированное респираторным аллергеном HCPt в этих трехмерных культурах из донора с аллергией. Панель С показывает измерения частоты биения ресничек в день 4. Как и ожидалось, функция клеток,

- 16 031541 обработанных HCPt, была нарушена, по данным измерения частоты биения ресничек, которая была снижена по сравнению с контролем. Напротив, культуры, обработанные HCPt после обработки Составом 1, имели повышенные значения частоты биения ресничек в соответствии с защитным свойствам, наблюдаемым при анализе IL-8, и улучшенное действие на мукоциллиарный клиренс. В целом, эти результаты позволяют предположить, что состав 1 улучшает параметры назальных функций в трехмерных культурах клеточных островков, образованных из клеток донора с аллергией, и уменьшает воспаление, индуцированное респираторным аллергеном. Отмечено, что специфические измерения высвобождения лактатдегидрогеназы (в культуральной среде), проводимые в ходе этих экспериментов, доказывали, что состав 1 не был цитотоксическим по отношению к культивируемым клеткам (данные не показаны).

Пример 3. Материалы и способы.

Можно получить следующие составы, приведенные в качестве примера.

Состав 1.

Раствор морской воды, содержащий:_____________________________________

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,1 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная вода	По необходимости до 100,0 г

Состав 2.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная вода	По необходимости до 100,0 г

Состав 3.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,1 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная вода	По необходимости до 100,0 г

Состав 4.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная вода	По необходимости до 100,0 г

Состав 5.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0, 16 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 6.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,1 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0, 16 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

- 17 031541

Состав 7.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,1 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Декспантенол	1,0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 8.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Декспантенол	1,0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 9.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,1 г
Декспантенол	1,0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 10.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Декспантенол	1, 0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная вода	По необходимости до 100,0 г

Состав 11.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0, 1 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0,16 г
Декспантенол	1, 0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 12.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0, 16 г
Декспантенол	1,0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Составы 1-12 приводят к образованию гипертонических растворов морской воды с приблизительно 2,2-2,5% NaCl.

- 18 031541

Состав 13.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	28, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,1 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 14.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	28, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 15.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	28, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0, 16 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 16.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	28, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0, 1 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Декспантенол	1,0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 17.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	28, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Декспантенол	1,0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 18.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	28, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0, 3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0, 16 г
Декспантенол	1,0 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Составы 13-18 приводят к образованию изотонических растворов морской воды с приблизительно 0,9% NaCl.

- 19 031541

Получение растворов составов 1-18.

Составы 1-18 получают, помещая в смесительную камеру

71,6 или 28,6 г	морской воды
0,1 или 0,3 г	экстракта Undaria pinnafitida
0,5 г (или без)	экстракта Spirulina platensis
0,16 г (или без)	йота-каррагинана
1 г (или без)	декспантенола

и оставшейся очищенной воды и смешивают в течение 15 мин до образования прозрачного гомогенного раствора.

Состав 19.

Раствор морской воды, содержащий:________________________________________

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Морская вода (электродиализованная до 2,2% NaCl)	По необходимости до 100,0 г

Состав 20.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Морская вода (электродиализованная до 2,2% NaCl)	По необходимости до 100,0 г

Состав 21.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0, 16 г
Морская вода (электродиализованная до	По необходимости
2,2% NaCl)	до 100,0 г

Состав 22.

Раствор морской воды,

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Морская вода (электродиализованная	По необходимости
до 0,9% NaCl)	до 100,0 г

Состав 23.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0,16 г
Морская вода (электродиализованная до 0,9% NaCl)	По необходимости до 100,0 г

Состав 24.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0, 5 г
Декспантенол	1,0 г
Морская вода (электродиализованная до	По необходимости
2,2% NaCl)	до 100,0 г

- 20 031541

Состав 25.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0, 3 г
Декспантенол	1, 0 г
Морская вода (электродиализованная до	По необходимости
2,2% NaCl)	до 100,0 г

Состав 26.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0,16 г
Декспантенол	1,0 г
Морская вода (электродиализованная до	По необходимости
2,2% NaCl)	до 100,0 г

Состав 27.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Декспантенол	1,0 г
Морская вода (электродиализованная до	По необходимости
0,9% NaCl)	до 100,0 г

Состав 28.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йо та-каррагинан	0, 16 г
Декспантенол	1,0 г
Морская вода (электродиализованная до 0,9% NaCl)	По необходимости до 100,0 г

Получение растворов составов 19-28.

Следуя способу по US 6451352 можно получить эти составы с помощью электродиализа морской воды до желаемого осмотического состава, а затем добавления и смешивания дополнительных ингредиентов. Альтернативный способ заключается в смешивании всех ингредиентов вместе и последующем электродиализе.

Состав 29.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0, 1 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Масло эвкалипта	0,0075 г
Масло мяты курчавой	0,015 г
Экстракт тимьяна	0, 1 г
1,3-пропандиол	5 г
Глицерин	3 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

- 21 031541

Состав 30.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Масло эвкалипта	0,0075 г
Масло мяты курчавой	0,015 г
Экстракт тимьяна	0, 1 г
1,3-пропандиол	5 г
Глицерин	3 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 31.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0, 1 г
Масло эвкалипта	0,0075 г
Масло мяты курчавой	0,015 г
Экстракт тимьяна	0, 1 г
1,3-пропандиол	5 г
Глицерин	3 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Состав 32.

Раствор морской воды, содержащий:

Морская вода	71, 6 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Масло эвкалипта	0,0075 г
Масло мяты курчавой	0,015 г
Экстракт тимьяна	0, 1 г
1,3-пропандиол	5 г
Глицерин	3 г
Очищенная/дистиллированная/фильтрованная	По необходимости
вода	до 100,0 г

Получение растворов составов 29-32.

Составы 29-32 получают, помещая в смесительную камеру следующие ингредиенты для образования первой смеси:

71,6 или 28,6 г	морской воды
0,1 или 0,3 г	экстракта Undaria pinnafitida
0,5 г (или без)	экстракта Spirulina platensis
0,16 г (или без)	йота-каррагинана
0,1 г (или без)	экстракта тимьяна

Вторая смесь, содержащая (в малом объеме очищенной воды)

- 22 031541

0,0075 г	Масло эвкалипта
0,015 г	Масло мяты курчавой
5 г	1,3-пропандиол

Затем добавляют глицерин во вторую смесь:

3 г

глицерина

Затем вторую смесь добавляют к первой смеси при постоянном интенсивном перемешивании в течение 30 мин и добавляют очищенную воду до конечного веса равного 100 г.

Состав 33.

Раствор морской воды, содержащий:_______________________________________

Экстракт Undaria pinnafitida	0, 1 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Масло эвкалипта	0,0075 г
Масло мяты курчавой	0,015 г
Экстракт тимьяна	0, 1 г
1,3-пропандиол	5 г
Глицерин	3 г
Морская вода (электродиализованная до 2,2% NaCl)	По необходимости до 100,0 г

Состав 34.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0, 3 г
Экстракт Spirulina platensis	0, 5 г
Масло эвкалипта	0,0075 г
Масло мяты курчавой	0,015 г
Экстракт тимьяна	0, 1 г
1,3-пропандиол	5 г
Глицерин	3 г
Морская вода (электродиализованная до 2,2% NaCl)	По необходимости до 100,0 г

Состав 35.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0, 1 г
Масло эвкалипта	0,0075 г
Масло мяты курчавой	0,015 г
Экстракт тимьяна	0, 1 г
1,3-пропандиол	5 г
Глицерин	3 г
Морская вода (электродиализованная до 2,2% NaCl)	По необходимости до 100,0 г

- 23 031541

Состав 36.

Раствор морской воды, содержащий:

Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Масло эвкалипта	0,0075 г
Масло мяты курчавой	0,015 г
Экстракт тимьяна	0,1 г
1, 3-пропандиол	5 г
Глицерин	3 г
Морская вода (электродиализованная до 2,2% NaCl)	По необходимости до 100,0 г

Получение растворов составов 33-36.

Следуя способу по US 6451352, можно получить эти составы с помощью электродиализа морской воды до желаемой осмолярности. Затем получают первую смесь, добавляя ингредиенты водорослей и экстракт тимьяна в электродиализованную воду. Получают вторую смесь в меньшем объеме электродиализованной воды и перемешивают, затем добавляют глицерин при интенсивном перемешивании в течение 30 мин, затем все смеси объединяют до конечного объема, доводя осмолярность до конечного значения с помощью электродиализованной морской воды подходящей осмолярности.

Морская вода, применяемая для получения образцов.

Морскую воду, предназначенную для применения с целью получения этих растворов, предпочтительно, получать из специального сбора морской воды с глубины 5-10 м в зонах, характеризующихся наличием сильного течения (с гарантированным постоянным обновлением свежей воды). Морскую воду после сбора можно стандартным образом профильтровать для удаления органических загрязняющих примесей и/или микроорганизмов.

Местом сбора является залив Cancale Bay, Бретань, Франция, см. EP 0909184. Технические характеристики морской воды, собранной в Cancale Bay, представлены в табл. 4.

Таблица 4. Технические характеристики морской воды

КОНТРОЛЬ	ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ	СПОСОБ
Внешний вид	Бесцветная прозрачная жидкость	Органолептический
Запах	Характерный	Органолептический
pH (20°С)	7,5-8,5	Европейская Фармакопея 7/2.2.3
Плотность (20°С)	0,975-1,078 г/мл	Европейская Фармакопея 7/2.2.5
Мышьяк	< 2 м.д.	Европейская Фармакопея 7/2.4.2
Тяжелые металлы	< 1 м.д.	Европейская Фармакопея 7/2.4.8
Осмолярность	1000-1200 мОсм/л	Европейская Фармакопея 7/2.2.35
Общее количество	< 50 м.д.	Европейская
органического углерода		Фармакопея 7/2.2.44
Содержание NaCl	29,0-34,0 г/л	Способ Фольгарда
Общее содержание углеводородов	< 1 мг/мл	Ст. Способы/503А

- 24 031541

Общее количество аэробных микроорганизмов	< 1000 КОЕ/мл	Европейская Фармакопея 7/2.6.12
Общее количество дрожжевых грибков и плесневых грибков	< 100 КОЕ/мл	Европейская Фармакопея 7/2.6.12
Энтеробактерии	<10 КОЕ/мл	Европейская Фармакопея 7/2.6.13
Staphylococcus aureus	Отсутствуют в 10 мл	Европейская Фармакопея 7/2.6.13
Термотолерантные	Отсутствуют в 10	Европейская
колиформные бактерии	мл	Фармакопея 7/2.6.13
Pseudomonas aeruginosa	Отсутствуют в 10 мл	Европейская Фармакопея 7/2.6.13

Состав 37.

Солевой раствор, содержащий:

Хлорид магния	2 г
Бромид магния	0, 05 г
Сульфат магния	0, 05 г
Хлорид калия	1,00 г
Хлорид кальция	0,05 г
Карбонат натрия	0,05 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
1% солевой раствор	По необходимости до 100,0 г

Состав 38.

Солевой раствор, содержащий:

Хлорид магния	2 г
Бромид магния	0, 05 г
Сульфат магния	0, 05 г
Хлорид калия	1, 00 г
Хлорид кальция	0, 05 г
Карбонат натрия	0, 05 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina	0,5 г
platensis
1% солевой раствор	По необходимости до 100,0 г

Состав 39.

Солевой раствор, содержащий:

Хлорид магния	2 г
Бромид магния	0, 05 г
Сульфат магния	0, 05 г
Хлорид калия	1,00 г
Хлорид кальция	0, 05 г
Карбонат натрия	0, 05 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0,16 г
1% солевой раствор	По необходимости до 100,0 г

- 25 031541

Состав 40.

Солевой раствор, содержащий:

Хлорид натрия	3 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Очищенная вода	По необходимости до 100,0 г

Состав 41.

Солевой раствор, содержащий:

Хлорид магния	2 г
Бромид магния	0, 05 г
Сульфат магния	0, 05 г
Хлорид калия	1,00 г
Хлорид кальция	0, 05 г
Карбонат натрия	0, 05 г
Экстракт Undaria	0,3 г
pinnafitida
Декспантенол	1,0 г
1% солевой раствор	По необходимости до 100,0 г

Состав 42.

Солевой раствор, содержащий:

Хлорид магния	2 г
Бромид магния	0, 05 г
Сульфат магния	0, 05 г
Хлорид калия	1,00 г
Хлорид кальция	0, 05 г
Карбонат натрия	0,05 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Декспантенол	1,0 г
1% солевой раствор	По необходимости до 100,0 г

Состав 43.

Солевой раствор, содержащий:

Хлорид магния	2 г
Бромид магния	0, 05 г
Сульфат магния	0, 05 г
Хлорид калия	1, 00 г
Хлорид кальция	0, 05 г
Карбонат натрия	0, 05 г
Экстракт Undaria pinnafitida	0,3 г
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Йота-каррагинан	0,16 г
Декспантенол	1,0 г
1% солевой раствор	По необходимости до 100,0 г

- 26 031541

Состав 44.

Солевой раствор, содержащий:

Хлорид натрия	3 г
Экстракт Undaria	0,3 г
pinnafitida
Экстракт Spirulina platensis	0,5 г
Декспантенол	1, 0 г
Очищенная вода	По необходимости до 100,0 г

Образцы солевого раствора (составы 37-44).

Получение солевых растворов проводят в соответствии с US 7541052 (смешивая все ингредиенты при перемешивании, пока раствор не станет прозрачным и гомогенным).

После получения любого из составов растворы можно фильтровать с помощью подходящих фильтров (например, 0,22 мкМ), стерилизовать с помощью стандартных методологий (например, у-излучения) и применять при получении устройств для доставки растворов.

Другие варианты осуществления настоящего изобретения

Из приведенного выше описания будет очевидно, что можно внести изменения и модификации в настоящее изобретение, описанное в настоящей заявке, чтобы адаптировать его к различным применениям и условиям. Такие варианты осуществления настоящего изобретения также входят в объем следующей формулы изобретения.

Перечисление списка элементов под любым определением переменной в настоящей заявке включает определения этой переменной как единого элемента или комбинации (или субкомбинации) перечисленных элементов. Раскрытие варианта осуществления настоящего изобретения в настоящей заявке включает этот вариант в отдельности или в комбинации с любыми другими вариантами осуществления настоящего изобретения или их частями.

Все патенты и публикации, упомянутые в настоящем описании изобретения, включены в настоящую заявку посредством ссылки в таком же объеме, как если бы каждый отдельный патент и публикация были бы указаны конкретно и отдельно для включения посредством ссылки.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Фармацевтическая композиция для назального введения или ингаляции, содержащая ионный водный раствор и сульфатированный полисахарид со средним молекулярным весом от 4 кДа до 5 МДа, содержащий группы L-фукозы и сульфатного эфира, где ионный водный раствор содержит морскую воду или солевой раствор, и где сульфатированный полисахарид получен из экстракта, выделенного из бурых водорослей, или где сульфатированный полисахарид представляет собой синтетический фукоидановый полисахарид.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, где сульфатированный полисахарид, полученный из экстракта, выделенного из бурых водорослей, представляет собой фукоидан.
3. Фармацевтическая композиция по п.2, где бурая водоросль является Undaria pinnafitida.
4. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-3, дополнительно содержащая экстракт синезеленых водорослей.
5. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-4, дополнительно содержащая по меньшей мере одно из следующих:

сульфатированный полисахарид на основе галактозы, имеющий средний молекулярный вес от 15 кДа до 5 МДа;

по меньшей мере одно вещество, выбранное из экзогенных солей, противомикробных агентов, аминокислот и эфирных масел;

по меньшей мере одно вещество, выбранное из кортикостероидов или других стероидных соединений, антигистаминных средств, противоотечных средств, бронходилататоров, 32-адренергических агонистов и антибиотиков;

экстракт тимьяна;

по меньшей мере один гидратирующий агент.
6. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-5, где содержание сульфатированного полисахарида составляет от 0,1 до 10% от веса композиции и, в случае присутствия в фармацевтической композиции, содержание экстракта сине-зеленых водорослей составляет от 0,1 до 10% веса композиции, и содержание полисахарида на основе галактозы составляет от 0,1 до 10% веса композиции.
7. Фармацевтическая композиция по любому из пп.4-6, где экстракт сине-зеленых водорослей вы

- 27 031541 делен из Spirulina platensis.
8. Фармацевтическая композиция по п.5 или 6, где полисахарид на основе галактозы является каррагинаном или где полисахарид на основе галактозы получен из экстракта, выделенного из красных водорослей.
9. Фармацевтическая композиция по п.8, где каррагинан выбран из группы, состоящей из йотакаррагинана, каппа-каррагинана и лямбда-каррагинана, предпочтительно йота-каррагинана.
10. Фармацевтическая композиция по п.8, где красные водоросли выбраны из группы, состоящей из Gigartina stellata, Chondrus chrispus, Kappaphycus cottonii.
11. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-10, где содержание ионного водного раствора составляет от 10 до 99,9% веса композиции.
12. Фармацевтическая композиция по п.5, где гидратирующий агент является декспантенолом или пантотеновой кислотой, и где декспантенол или пантотеновая кислота присутствуют в концентрации от 0,25 до 2,5% вес./вес.
13. Способ лечения состояния, связанного с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей, у нуждающегося в этом субъекта, включающий аэрозольное введение фармацевтической композиции по любому из пп.1-12 в носовые ходы субъекта, где состояние, связанное с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей, выбрано из группы, состоящей из острого риносинусита, рецидивирующего острого риносинусита, подострого риносинусита, хронического риносинусита, синусита, острого обострения хронического риносинусита, аллергического и неаллергического ринита, астмы, кистозного фиброза и хронического обструктивного заболевания легких (ХОБЛ).
14. Способ по п.13, где состояние, связанное с дыхательными путями и/или слизистой оболочкой дыхательных путей, является риносинуситом или аллергическим ринитом.
15. Устройство в корпусе для доставки фармацевтической композиции, содержащее фармацевтическую композицию по любому из пп.1-12.

16. Устройство в корпусе по п.15, дополнительно содержащее инструкции по применению.

Секреция IL-8 т

180

Ш) и День 1 м День 2

День 3 ыДень 4

1-10

80 111 60 В· и· Й MJ 20 .и И· I И· О 1.....ЯВа·..... ни Η Необрабо- Только исход- Морская тайные ныи липопо- вода 2,3% культуры лисахарид NaCI

И Ϊ lllti И 1т .|||M ΙΜΙ л|| ¹ И м ь м ш· Н· 11 а И Морская Морская Морская Морская вода UP и вода UP и вода UP вода UP SP Состав 1 SP Состав 2 Состав 3 Состав 4