EA030302B1

EA030302B1 - Антрахинондиоксимы и их применение

Info

Publication number: EA030302B1
Application number: EA201500218A
Authority: EA
Inventors: Веслав М. Холодий; И Цзан; Карина Зук; Джеффри В.Х. Уоттхи; Зое Охлер; Джеффри Стровел; Норман Е. Охлер; Шила Челлаппан; Джанак Падия
Original assignee: Форест Лэборетериз Холдингз Лимитед
Priority date: 2008-11-21
Filing date: 2008-11-21
Publication date: 2018-07-31
Also published as: EA022290B1; EA201270376A1; EA201500218A1; WO2010059142A1

Abstract

В изобретении раскрыты соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли, стереоизомеры или геометрические изомеры. Изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество соединения формулы I в фармацевтически приемлемом носителе. В изобретении также раскрыт способ предупреждения, лечения или облегчения рака или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения формулы I

Description

Изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество соединения формулы I в фармацевтически приемлемом носителе. В изобретении также раскрыт способ предупреждения, лечения или облегчения рака или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения формулы I

030302

Настоящая заявка является частичным продолжением заявки РСТ/υδ 2008/006015, поданной 9 мая 2008, которая претендует на приоритет предварительной заявки на патент США 60/928592, поданной 10 мая 2007, и предварительной заявки на патент США 60/999153, поданной 15 октября 2007, содержание которых включено в настоящую заявку во всей полноте.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к области противоопухолевой терапии с применением антрахинондиоксимов.

Предпосылки изобретения

Сигнальный путь \УШ/бета-катенина признан в качестве одного из ключевых сигнальных путей при раке и в качестве эффективной мишени для терапевтического вмешательства при многих типах опухолей, в особенности опухолей толстой кишки.

Клетки многоклеточных организмов обладают способностью передавать и распознавать сигналы друг друга, иногда на значительных расстояниях. Эта передача сигнала может осуществляться путем выработки сигнальных молекул, продуцируемых одной из клеток, которые затем связываются с определенными рецепторами на другой клетке. Подобные пути передачи сигнала принимают участие в процессах развития различных заболеваний, в том числе рака. Передачу сигнала \Уп1 за счет связывания с рецептором с последующим повышением уровней внутриклеточного β-катенина считают каноническим сигнальным путем. Белки \Уп1 образуют семейство высококонсервативных секретируемых сигнальных молекул, которые регулируют межклеточные взаимодействия и принимают участие в патогенезе рака. Белки \Уп1 связываются с рецепторами семейств Рп//1еб и ЬКР на поверхности клеток. Через несколько транслирующих компонентов в цитоплазме их сигнал передается β-катенину, который затем попадает в ядро и образует комплекс с ТСР, что приводит к активации транскрипции целевых генов \Уп1.

При передаче сигнала по этому пути полипептиды \Уп1 либо находятся на поверхности передающей сигнал клетки, либо высвобождаются клеткой и в конце концов вступают в контакт с определенными рецепторами на поверхности другой клетки. Эти рецепторы на поверхности целевых клеток включают рецептор Рп//1еб/ЪКР (ЪКР=ЭЪ-рецепторсвязанный белок), и они передают поступивший сигнал внутриклеточным белкам, например β-катенину, уровень которых в стационарном состоянии обычно остается относительно невысоким, за счет постоянного распада (как правило, опосредованного протеосомами). Этот процесс регулируется комплексом, содержащим белки ΟδΚ-3/АРС/аксин (С8К-3 - гликоген синтаза киназа и АРС - белок аденоматозного полипоза толстой кишки). Результатом связывания \Уп1 на поверхности целевой клетки является ингибирование разрушения β-катенина, в результате чего количество последнего увеличивается, он поступает в ядро и соединяется с регуляторами транскрипции, активируя гены.

Было обнаружено, что мутации, которые способствуют конститутивной активации сигнального пути \Уп1. могут привести к раку [для ознакомления с обзором смотрите Ьодап апб Ыиззе, "ТНе \Уп1 §1§иа1ίη§ Рабиуау ίη Эеуе1ортеп1 апб ЭЪеазе" в Апп.Кеу.Се11 Иеу.Вю1., 20:781-810 (2004)]. Например, мутации в Ах1п2 могут вызвать предрасположенность индивидуума к раку толстой кишки (Ьатш1 е1 а1. , Ат. ί. Нит. СепеР, 74:1043-50 (2004)). В качестве другого подобного примера семейный аденоматозный полипоз (РАР), т.е. наследственное заболевание, характеризующееся многочисленными полипами в толстой и прямой кишке, часто вызван укорачиванием АРС (еще один белок, принимающий участие в сигнальном пути ^Щ), что способствует аномальной активации сигнального пути \Уп1. [см., Кт/1ег е1 а1. , 8с1епсе, 253:661-665 (1991)]. Мутации в АРС и β-катенине были обнаружены также в раковых опухолях прямой кишки и опухолях других типов (для ознакомления с обзором смотрите СПез е1 а1., ВюсНип. ВюрНуз. Ас1а, 1653:1-24 (2003)). Кроме того, в гепатоклеточных карциномах были обнаружены мутации в аксине, вызывающие потерю его функции [см. 8а1оН е1 а1. , №И. СепеР, 24:245-50 (2000)]. Таким образом, любые мутации и другие явления в клетке, которые приводят к нарушению сигнального пути \Уп1 и регулированию уровней β-катенина, по-видимому, играют важную роль в возникновении рака.

Поскольку описанные выше случаи канцерогенеза были связаны с повышенными уровнями βкатенина (т.е. ситуациями, в которых уровни β-катенина не зависели от ^Мп1), низкомолекулярные органические соединения и другие агенты, которые способствуют восстановлению этой зависимости или иным образом понижают уровни β-катенина, могли бы оказаться полезными для ослабления ракового процесса и найти применение в качестве антинеопластических средств. В настоящем изобретении разработаны такие средства в форме дисульфонамидных производных флуорена, антрацена, ксантена, дибензосуберона и акридина, которые понижают уровни β-катенина в опухолевых клетках.

В технике известны структурно-родственные производные флуорена и антрацена с сульфонамидными группами, замещенными ароматическими аминами (см., например, υδ 2004/0019042), в качестве ингибиторов Р2Х2 и Р2Х2/3 содержащих рецепторов, и было обнаружено, что они применимы в лечении и профилактике таких расстройств, как избыточная активность мочевого пузыря, недержание мочи или боль. Однако в настоящей заявке показано, что могут быть получены новые структурно-родственные соединения, применимые в качестве модуляторов сигнального пути \νιτΙ/β-катенина. Известно, что βкатенин является регулятором сигнального пути \νπΙ (см. \νί1Κη апб Ыиззе, Сиггей Оршюп ш Сепейсз

- 1 030302

апй Пеуе1ортеп1, 8:95-102 (1998)).

Краткое изложение сущности изобретения

Настоящее изобретение относится к низкомолекулярным органическим соединениям семейства антрахинондиоксимов, применимым для лечения рака, которые препятствуют сигнальному пути Ап! и уменьшают уровни β-катенина в раковых клетках, а также к способам их синтеза. В конкретных вариантах осуществления эти соединения включают дисульфонамидные производные антрахинондиоксима, которые понижают уровни β-катенина в опухолевых клетках.

Соединения по настоящему изобретению имеют структуру, отображаемую формулой (I)

где п=1, X является С=ЫОН;

Υ является ΝΟΗ, и и V каждый означает О=8=О,

каждый из заместителей К₁, К₂, К₃ и К₄ независимо выбран из Н, С₁-Сзалкила, С₁-С₅моно или диС₁С₅алкиламиноС₁-С₅алкила, С₃-С₇циклоалкила, фенил(С1-С₂)алкила, С₂-С₄алкенила, С₂-С₄алкинила, фенила, 5-17 членного гетероарила, включающего 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, 5-17членного гетероциклоалкила, включающего 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, и каждый из указанных ΝΚ4Κ.2 и ΝΚ₃Κ₄ может независимо образовывать 5-17-членный гетероциклоалкил, включающий 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода,

где каждый К₅ и Кб оба являются Н;

и где, если один из К! или К₂ и один из К₃ или К₄ означает фенил, тогда другой из К! или К₂ и К₃или К₄ не является Н или С1 -С₃алкилом,

или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер или геометрический изомер.

В одном из вариантов осуществления соединения по настоящему изобретению включают соединения, где один или оба неодинаковых ΝΚιΚ₂ и ΝΚ₃Κ₄ представляет собой незамещенный пиперидино, Νметилпиперазино или Ν-метилгомопиперазино.

В еще одном варианте осуществления изобретения соединения по настоящему изобретению включают соединения, где Κι, К₂, К₃, и К₄ каждый независимо выбран из Н, С1-С₃алкила, С₃-С7циклоалкила, С2-С4алкенила или С2-С4алкинила.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, включающим соединения формулы I в фармацевтически приемлемом носителе. Помимо этого, настоящее изобретение относится к способу облегчения рака или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения по настоящему изобретению. В том числе изобретение охватывает применение соединений табл.1-4 для лечения рака. Применение каждого из указанных соединений само по себе является вариантом осуществления изобретения, и любая комбинация указанных вариантов осуществления сама по себе является отдельным вариантом осуществления изобретения.

Определения.

Если в явном виде не указано иное, перечисленные ниже термины имеют указанные значения.

"Алкил" означает насыщенный углеводородный радикал, включающий от 1 до 5 атомов углерода, наиболее предпочтительно от 1 до 3 атомов углерода, который может быть разветвленным или неразветвленным. Не ограничивающие примеры алкильных радикалов включают метил, этил, н.-пропил, изопропил, н.-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, трет-амил, пентил, причем метил, этил, н.-пропил и изопропил являются особенно предпочтительными примерами.

Термин "алкенил" сам по себе или в комбинации с другими терминами относится к необязательно замещенному линейному или необязательно замещенному разветвленному углеводородному радикалу, включающему одну или несколько двойных связей углерод-углерод и содержащему от 2 до 4 атомов углерода. Примеры алкенильных радикалов включают этенил, пропенил, бутенил, 1,3-бутадиенил и т.п.

Термин "алкинил" сам по себе или в комбинации с другими терминами относится к необязательно замещенному линейному или необязательно замещенному разветвленному углеводородному радикалу, включающему одну или несколько тройных связей углерод-углерод и содержащему от 2 до 4 атомов углерода. Примеры алкинильных радикалов включают этинил, 2-пропинил, 2-бутинил, 1,3-бутадиинил и т.п.

Предпочтительные разветвленные алкильные, алкенильные и алкинильные цепи включают одно или два разветвления, предпочтительно одно разветвление, и каждая из них может являться незамещенной или быть замещена 1-4 заместителями, предпочтительно не более чем 3 заместителями, более предпочтительно 2 заместителями и наиболее предпочтительно одним заместителем. Предпочтительными заместителями являются остатки углеводородов, галогены (предпочтительно Р, С1, Вг и I), гидрокси, арилокси (например, фенокси), гетероарилокси, ацилокси (например, ацетокси), карбокси, арилы (на- 2 030302

пример, фенил), гетероарилы, циклоалкилы, гетероалкилы, гетероциклоалкилы, спироциклы, амино, амидо, ациламино, кето, тиокето, циано или любые комбинации перечисленных заместителей. Предпочтительными остатками углеводородов являются метил, этил, пропил, изопропил, бутил, винил, аллил, бутенил и этоксиметиленил.

Термин "низший алкил" означает алкил с короткой цепью, например алкил, содержащий от одного до примерно шести атомов углерода.

Также в тексте настоящей заявки "низший" алкильный, алкенильный или алкинильный фрагмент (например "низший алкил") представляет собой цепь, включающую от 1 до 5 атомов углерода в случае алкила и от 2 до 4 в случае алкенила или алкинила.

Термин "алкокси" означает атом кислорода, имеющий в качестве заместителя углеводородную цепь, где эта углеводородная цепь является алкилом или алкенилом (т.е. -О-алкил или -О-алкенил). Примеры алкоксизаместителей включают метокси, этокси, н.-пропокси, изопропокси, н.-бутокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, аллилокси и т.п.

"Арил" означает ароматический углеводородный цикл. Арильные фрагменты являются моноциклическими или конденсированными бициклическими системами. Моноциклические арильные циклы содержат 6 атомов углерода в цикле. Моноциклические арилы именуют также фенильными циклами. Бициклические арилы содержат от 8 до 17 атомов углерода, предпочтительно от 9 до 12 атомов углерода. Бициклические арилы включают циклические системы, где один из циклов является арилом, а другой цикл представляет собой арил, циклоалкил или гетероциклоалкил. Предпочтительные бициклические арилы включают 5-, 6- или 7-членные циклы, конденсированные с 5-, 6- или 7-членными циклами. Арильные циклы могут быть незамещенными или могут быть замещены 1-4 заместителями. Арилы могут быть замещены галогенами, циано, нитро, гидрокси, карбокси, амино, ациламино, алкилами, гетероалкилами, галогеналкилами, фенилами, арилокси, алкокси, гетероалкилокси, карбамоилами, галогеналкилами, метилендиокси, гетероарилокси или любыми комбинациями перечисленных заместителей. Предпочтительные арильные циклы включают нафтил, толил, ксилил и фенил. Наиболее предпочтительным арильным циклическим заместителем является фенил.

Группа "арилокси" представляет собой атом кислорода, у которого имеется арильный заместитель (т.е. -О-арил). Предпочтительные арилоксигруппы включают, например, фенокси, нафтилокси, метоксифенокси и метилендиоксифенокси.

Термин "циклоалкил" относится к насыщенному углеводородному циклу, который не является ароматическим. Циклоалкилы являются моноциклическими или конденсированными, спиро или мостиковыми бициклическими или полициклическими системами. Моноциклические циклоалкилы содержат в цикле от 3 до 7 атомов углерода. Термин "низший алкенил" или "низший алкинил" относится соответственно к алкенильному или алкинильному остатку, углеродная цепь которого включает от двух до примерно четырех атомов углерода и не включает заместителей.

"Галоген" означает фтор, хлор, бром или йод, предпочтительными галогенами являются фтор, хлор и бром; более предпочтительными галогенами, как правило, являются хлор и фтор, особенно фтор.

Термин "гетероатом" относится к атомам азота, серы или кислорода. Группы, содержащие более одного гетероатома, могут содержать различные гетероатомы.

Термин "гетероалкил" относится к углеводороду, содержащему насыщенную или ненасыщенную цепь и по меньшей мере один гетероатом, причем два гетероатома не являются соседними. Гетероалкильные цепи содержат от 2 до 15 атомов (углерода и гетероатомов), предпочтительно от 2 до 10, более предпочтительно от 2 до 5. Например, в число гетероалкилов входят алкоксигруппы (т.е. -О-алкил или О-гетероалкил). Гетероалкильные цепи могут быть линейными или разветвленными. Предпочтительные разветвленные гетероалкилы включают одно или два разветвления, предпочтительно одно разветвление. Предпочтительные гетероалкилы являются насыщенными. Ненасыщенные гетероалкилы включают одну или несколько двойных углерод-углеродных связей и/или одну или несколько тройных углеродуглеродных связей. Предпочтительные ненасыщенные гетероалкилы включат одну или две двойных связи или одну тройную связь, более предпочтительно одну двойную связь. Гетероалкильные цепи могут быть незамещенными или они могут быть замещены 1-4 заместителями. Предпочтительные замещенные гетероалкилы являются моно-, ди- или тризамещенными. Гетероалкил может быть замещен низшим алкилом, галогеналкилом, галогеном, гидрокси, ацилокси, карбокси, амино, ациламино, амидо, кето, тиокето, циано и любой комбинацией перечисленных групп. В случае, если группу описывают, например, как производное алкила, например "-этилпиридин", знак тире "-" указывает на точку присоединения заместителя. Так, например, "-этилпиридин" означает присоединение этилпиридина к остальной части молекулы через этильный фрагмент группы, тогда как "этилпиридин-" означает присоединение через пиридиновый цикл.

"Гетероарил" представляет собой ароматический цикл, содержащий атомы углерода и от 1 до примерно 4 гетероатомов. Гетероарильные циклы представляют собой моноциклические или конденсированные бициклические системы. Моноциклические гетероарильные циклы содержат от примерно 5 до примерно 9 атомов (углерода и гетероатомов), предпочтительно 5 или 6 атомов. Бициклические гетероарилы содержат от 8 до 17 атомов, предпочтительно от 8 до 12 атомов. Бициклические гетероарилы вклю- 3 030302

чают циклические системы, в которых один цикл является гетероарилом, и другой цикл представляет собой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероалкил, гетероциклоалкил. Предпочтительные бициклические гетероарильные циклические системы включают 5-, 6-или 7-членные циклы, конденсированные с 5, 6- или 7-членными циклами. Предпочтительные гетероарильные циклы включают, не ограничиваясь перечисленным, следующие группы:

изоиндол бензофуран бензотиофен

1Н-индазол пурин хинолин

бензимидазол бензтиазол бензоксазол

птеридин карбазол

изохинолин циннолин фталазин

хиназолин хиноксалин 1,8-нафтиридин

акридин феназин

Конденсированные гетероарильные радикалы могут содержать от двух до четырех конденсированных циклов, и если цикл, присоединенный к остальной части молекулы, является гетероароматическим, другие индивидуальные циклы в конденсированной циклической системе могут быть ароматическими, гетероароматическими, алициклическими или гетероциклическими. Термин гетероарил включает также моногетероарилы или конденсированные гетероарилы, включающие от пяти до примерно двенадцати атомов циклического скелета, а также гетероарилы, включающие от пяти до примерно десяти атомов циклического скелета. Термин "низший гетероарил" относится к гетероарилам, включающим от пяти до примерно десяти атомов циклического скелета, например пиридилу, тиенилу, пиримидинилу, пиразинилу, пирролилу или фуранилу.

"Гетероарилокси" означает атом кислорода, у которого имеется гетероарильный заместитель (т.е. -О-гетероарил). Предпочтительные гетероарилоксигруппы включают, например, пиридилокси, фуранилокси, (тиофен)окси, (оксазол)окси, (тиазол)окси, (изоксазол)окси, пиримидинилокси, пиразинилокси и бензотиазолилокси.

"Гетероциклоалкил" представляет собой насыщенный или ненасыщенный цикл, содержащий атомы углерода и от 1 до 4 (предпочтительно от 1 до 3) гетероатомов. Гетероциклоалкилы не являются ароматическими. Гетероциклоалкилы являются моноциклическими или представляют собой конденсированные, мостиковые или спиробициклические системы. Моноциклические гетероциклоалкильные группы содержат от примерно 3 до примерно 9 циклических атомов (включая как атомы углерода, так и гетероатомы), предпочтительно от 5 до 7 циклических атомов. Бициклические гетероциклоалкильные группы содержат от 7 до 17 циклических атомов, предпочтительно от 7 до 12 циклических атомов. Бициклические гетероциклоалкильные системы содержат от примерно 7 до примерно 17 циклических атомов, предпочтительно от 7 до 12 циклических атомов. Бициклические гетероциклоалкильные группы могут быть конденсированными, спиро- или мостиковыми циклическими системами. Предпочтительные би- 4 030302

циклические гетероциклоалкильные группы включают 5-, 6- или 7-членные циклы, конденсированные с 5-, 6- или 7-членными циклами.

Гетероциклоалкильные группы могут являться незамещенными (т.е. включать атомы водорода в качестве заместителей циклических атомов) или замещенными (либо по атомам углерода, либо по гетероатомам, либо по атомам обоих типов) 1-4 заместителями, выбранными из метила, циано, гидрокси, карбокси, кето, тиокето, амино, ациламино, ацила, амидо, алкила, гетероалкила, фенила, алкокси, арилокси или любой комбинации перечисленных заместителей. Предпочтительные заместители гетероциклоалкильных групп включают метил, этоксил и галогены. Гетероциклоалкильная группа может быть присоединена в качестве заместителя к остальной части молекулы через любой возможный с химической точки зрения атом указанного гетероциклоалкила. Предпочтительные гетероциклоалкильные группы включают, не ограничиваясь этим, следующие фрагменты:

у о™ ф о со

оксиран азиридин оксетан азетидин тетрагидрофуран пирролидин зн-индол

г⁰'

0^м

1,3-диоксолан 1,2-дитиолан 1,3-дитиолан 4,5-дигидроизоксазол 2,3-дигидроизоксазол

ό-ОО О СО

пиразолидин 2Н-пиран 3,4-дигидро-2Н-пиран тетрагидропиран 2Н-хромен

О 00 о о о о

хромой хроман пиперидин морфолин 4Н-1,3-оксазин 6Н-1,3-оксазин

о со сос с?

5,6-дигидро-4Н-1,3-оксазин 4Н-3,1-бензоксазин фенотиазин 1,3-диоксан

Ю О О О О ω

цефам пиперазин азепан

IОУ О “г \

З" '0'

1,3-дитиан 1,4-диоксан пенем

кумарин тиоморфолин урацил

О

тимин

ΝΗ₂

цитозин

Сс» Сс° О О

6^Н

'3^ 5

З.З-дигидро-ТН-изоиндол фталан 1,4-оксатиан 1,4-дитиан гексагидропиридазин

Н

сс» 05» 0„

1,2-бензизотиазолин бензилсультам [1,4]диазепан

Термин "-членный цикл" может охватывать любые циклические структуры, включая ароматические, гетероароматические, алициклические, гетероциклические и полициклические конденсированные циклические системы, как описано ниже. Термин "-членный" означает число скелетных атомов, которые образуют цикл. Так, например, пиридин, пиран или пиримидин являются шестичленными циклами, а пиррол, тетрагидрофуран и тиофен являются пятичленными циклами.

Термин "алкиламино" относится к группе -ΝΗΚ', где К независимо выбран из числа алкилов.

Термин "диалкиламино" относится к группе -ΝΚΚ', где К и К' являются алкилами.

Термин "необязательный" или "необязательно" означает, что упомянутое после него событие или обстоятельство может иметь место, но необязательно, и что это описание включает ситуации, когда событие или обстоятельство имеет место, а также ситуации, когда событие или обстоятельство не имеет места. Например, фраза "арил необязательно замещен одним или двумя алкилами" означает, что алкил может присутствовать, но присутствует необязательно, причем может присутствовать один алкил или два алкила, и данное описание включает ситуации, когда арил замещен одним или двумя алкилами, и ситуацию, когда арил не замещен алкилом.

"Независимо выбранными" группами являются группы, присутствующие в одной структуре, которые необязательно представляют собой один и тот же заместитель. Например, если два заместителя

- 5 030302

представлены обозначением ΝΘΡ_Α, и о каждом Р_А сказано, что он независимо выбран из Н, метила, этила и т.д., это означает, что если один заместитель Р_А является метилом, другой Р_А может быть метилом, но мог бы быть Н или этилом (или любым другим указанным заместителем). Типовые варианты заместителей представлены в табл. 2.

Некоторые из соединений по настоящему изобретению могут содержать один или несколько хиральных центров и, следовательно, могут существовать в энантиомерных и диастереомерных формах. В объем настоящего изобретения входят все изомеры сами по себе, а также смеси цис- и транс-изомеров, смеси диастереомеров и, кроме того, рацемические смеси энантиомеров (оптических изомеров). Помимо этого, имеется возможность разделения различных форм с использованием хорошо известных методик, и некоторые варианты осуществления настоящего изобретения могут представлять собой очищенные энантиомеры или диастереомеры или смеси, обогащенные данным энантиомером или диастереомером.

Термин "фармакологическая композиция" относится к смеси одного или нескольких соединений, описанных в настоящей заявке, или их фармацевтически приемлемых солей с другими химическими компонентами, такими как фармацевтически приемлемые носители и/или наполнители. Задача фармакологической композиции заключается в облегчении введения соединения в организм.

Фраза "фармацевтически приемлемый носитель" в настоящей заявке означает фармацевтически приемлемый материал, композицию или носитель, например жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, эксципиент, растворитель или инкапсулирующий материал, принимающий участие в переносе или транспортировке целевого агента из одного органа или части тела в другой орган или часть тела. Каждый носитель должен быть "приемлемым" в смысле совместимости с другими ингредиентами состава и отсутствия вреда для пациента. Некоторые примеры материалов, которые могут служить фармацевтически приемлемыми носителями, включают: (1) сахара, например лактозу, глюкозу и сахарозу; (2) крахмалы, например кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, например натрий карбоксиметилцеллюлозу, этилцеллюлозу и ацетат целлюлозы; (4) порошкообразный трагакант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) наполнители, например масло какао и воски для суппозиториев; (9) масла, например масло арахиса, масло хлопчатника, саффлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, например пропиленгликоль; (11) полиолы, например глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, например этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферирующие агенты, например гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновую кислоту; (16) апирогенную воду; (17) изотонический солевой раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) фосфатные буферные растворы и (21) другие нетоксичные совместимые вещества, применяемые в фармацевтических составах. Физиологически приемлемый носитель не должен вызывать значительного раздражения тканей организма и не должен аннулировать биологическую активность вводимого соединения и его полезные свойства.

Термин "эксципиент" относится к инертному веществу, добавляемому к фармакологической композиции для дальнейшего облегчения введения соединения. Примеры эксципиентов включают, не ограничиваясь этим, карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара и различные типы крахмала, производных целлюлозы, желатина, растительных масел и полиэтиленгликолей.

В настоящем описании термин "терапевтический эффект" включает, не ограничиваясь этим, полное или частичное подавление роста клеток, характерных для пролиферативного расстройства, например рака толстой кишки. Терапевтический эффект может включать также облегчение одного или нескольких симптомов заболевания помимо роста клеток или размера клеточной массы и может включать: 1) сокращение количества клеток; 2) уменьшение размера клеток; 3) ингибирование (т.е. замедление, предпочтительно остановка) инфильтрации клеток (т.е. образования метастазов) в окружающие органы; 4) ингибирование или замедление роста клеток и/или 5) облегчение одного или нескольких симптомов, связанных с таким заболеванием, как рак. Считается, что любое количество или доза соединений, раскрытых в настоящей заявке, которые ведут к такому терапевтическому эффекту, является "терапевтически эффективной дозой" или "терапевтически эффективным количеством" указанного соединения.

Что касается раковых заболеваний, фраза "эффективное количество" означает количество, достаточное для того, чтобы вызвать желаемую реакцию или чтобы облегчить симптом или признак, в отношении прогрессирования, размера или роста как метастазов, так и первичной опухоли. Типовые реципиенты соединений по настоящему изобретению из числа млекопитающих включают мышей, крыс, кошек, собак и приматов, в том числе людей. Эффективное количество для конкретного пациента может меняться в зависимости от таких факторов, как подвергаемое лечению состояние, общее состояние здоровья пациента, способ, путь и дозировка, а также тяжесть побочных эффектов. Предпочтительно этот эффект будет заключаться в изменении желаемого количественного параметра по меньшей мере примерно на 10%, предпочтительно по меньшей мере на 20, 30, 50, 70 или даже на 90% или более. При применении в составе комбинации эффективное количество находится в зависимости от входящих в комбинацию компонентов, и эффект не ограничивается действием индивидуальных компонентов самих по себе.

"Сольват" представляет собой комплекс, образованный комбинацией растворенного вещества (например, ингибитора металлопротеазы) и растворителя (например, воды) (см. ТНошд с1 а1. , Тйе Уаи ΝοδΙππιύ СйепиЧ'з Оюйоиагу, р. 650 (1953)).

- 6 030302

Термины "оптический изомер", "геометрический изомер" (например, цис- и/или транс-изомер), "стереоизомер" и "диастереомер" имеют общепринятое значение (см., например, НаМеуд Соибеикеб С11списа1 Оюйопагу, 11* Εά.). Приведенные в качестве иллюстрации конкретные защищенные формы и другие производные соединений по настоящему изобретению не носят ограничивающего характера. Применение других подходящих защитных групп, солевых форм и т.д. находится в рамках компетенции специалиста в данной области техники.

Термин "1С₅₀" в настоящем описании относится к количеству, концентрации или дозировке конкретного тестируемого соединения, при котором достигается 50%-ное ингибирование максимальной реакции в анализе, в котором происходит измерение этой реакции. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения значение "1С₅₀" соединения по настоящему изобретению для нормальных клеток может превышать таковое для клеток, проявляющих пролиферативное расстройство, например клеток рака молочной железы. Полученное значение зависит от использованной методики анализа.

Под "стандартом" подразумевается положительный или отрицательный контроль. Термин "отрицательный контроль" в данном случае относится к нормальным клеткам, в противоположность раковым клеткам, например образцам, в которых наблюдается активность сигнального пути ^ηί/β-катенина, соответствующая нормальной клетке. Отрицательный контроль может также включать образец, в котором отсутствует такой сигнальный путь. В противоположность этому положительный контроль не демонстрирует этого сигнального пути, предпочтительно в той же степени, которая соответствует избыточной экспрессии, обнаруживающейся при пролиферативных расстройствах, например раковых заболеваниях молочной железы. Контрольные образцы могут представлять собой клетки или образцы тканей или в другом случае содержать очищенный лиганд (или не содержать лиганда), иммобилизованный или нет. В некоторых вариантах осуществления один или несколько контрольных образцов могут иметь форму диагностических "полосок".

Под "селективным нацеливанием" подразумевается воздействие на один из типов клеток в большей степени, чем на другой, например на раковые клетки по сравнению с нераковыми клетками.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к соединению, имеющему структуру, изображенную формулой (I)

где

η=1, X является ί'.’=ΝΟΗ;

Υ является ΝΟΗ, и и V каждый означает Ο=δ=Ο,

каждый из заместителей Κι, К₂, К₃ и К₄ независимо выбран из Н, С1-С₃алкила, С1-С₅моно или диС₁С₅алкиламиноС1-С₅алкила, С₃-С₇циклоалкила, фенил(С1-С₂)алкила, С₂-С₄алкенила, С₂-С₄алкинила, фенила, 5-17 членного гетероарила, включающего 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, 5-17членного гетероциклоалкила, включающего 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, и каждый из указанных ΝΚ.|Κ.₂ и ΝΚ₃Κ₄ может независимо образовывать 5-17-членный гетероциклоалкил, включающий 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода,

где каждый К₅ и Кб оба являются Н;

и где, если один из Κι или К₂ и один из К₃ или К₄ означает фенил, тогда другой из К₁ или К₂ и К₃или К4 не является Н или С1-С3алкилом,

В одном из предпочтительных вариантов осуществления каждый из заместителей X и Υ представляет собой ΝΟΗ.

В одном из таких вариантов осуществления изобретение относится к соединению (производному антрахинона), имеющему структуру, отображенную формулой (II)

где К₇ и К₈ независимо выбраны из Н и §Ο₂ΝΚ₃Κ₄, причем один из заместителей К₇ и К₈ представляет собой водород, и где другие заместители имеют значения, определенные при описании формулы (I).

В отдельных примерах соединений формулы (I) каждый из заместителей и и V представляет собой группу Ο=δ=Ο;

Во всех вариантах осуществления формулы (I), если оба заместителя X и Υ представляют собой ΝΟΗ, каждый фрагмент и и V означает Ο=δ=Ο, и один из К! или К₂ и один из К₃ или К₄ является фени- 7 030302

лом, то другой заместитель из каждой пары Κι или К₂ и К₃ или К4 не является Н или алкилом.

В конкретных вариантах осуществления формулы (II) каждый из заместителей Κι, Κ₂, Κ₃ и Κ₄ независимо выбран из Н, алкила, циклоалкила, алкенила или алкинила. В других подобных примерах Κ_Α является водородом, и каждый из заместителей Κ!, Κ₂, Κ₃ и Κ₄ независимо выбран из Н, алкила, циклоалкила, алкенила или алкинила. В дополнительных примерах фрагменты ΝΚ^ и ΝΚ₃Κ₄ независимо представляют собой 6-15-членные, предпочтительно 6-10-членные гетероциклы, предпочтительно гетероциклоалкилы, наиболее предпочтительно 8 или 9-членные циклы.

В одном из конкретных вариантов осуществления соединение по настоящему изобретению имеет структуру, отображенную формулой (III)

где фрагменты ΝΚ₁Κ₂ и ΝΚ₃Κ₄ независимо представляют собой 6-12-членные гетероциклоалкилы, содержащие в цикле один атом азота, и где группы Κ соответствуют определениям, данным для формулы (II). В предпочтительных вариантах осуществления по меньшей мере одна из групп Κ_Α представляет собой Н, или обе группы являются Н. В другом предпочтительном варианте осуществления формулы (III) фрагменты ΝΚ₁Κ₂ и ΝΚ₃Κ₄ независимо выбраны из групп формулы (IV)

формула

где Ζ означает (0Κ₁₇Κ₁8)_ο и т=1-4, Κ₉, Κ₁₀, Κ₁₁, Κ₁₂, Κ₁₃, Κ₁₄, Κ₁₅, Κ₁₆, Κ₁₇ и Κ₁₈ независимо представляют собой Н, метил, этил, пропил, бутил, метокси или этокси.

В одном из вариантов осуществления соединение по настоящему изобретению имеет структуру, отображаемую формулой (V)

где фрагменты ΝΚ₁Κ₂ и ΝΚ₃Κ₄ независимо представляют собой 6-12-членные гетероциклоалкилы, содержащие в цикле один атом азота, и где группы Κ соответствуют определениям, данным для формулы (II). В предпочтительных вариантах осуществления по меньшей мере одна группа Κ_Α представляет собой Н, или обе группы Κ_Α представляют собой Н. В другом предпочтительном варианте осуществления фрагменты ΝΚ^ и ΝΚ₃Κ₄ независимо выбраны из групп формулы (VI)

В,2

формула (VI) ;

где Ζ означает (ΟΚ₁₇Κ₁₈^ и т=1-4, Κ₉, Κ₁₀, Κ_π, Κ₁₂, Κ₁₃, Κ₁₄, Κ₁₅, Κ₁₆, Κ₁₇ и Κ₁₈ независимо представляют собой Н, метил, этил, пропил, бутил, метокси или этокси.

В одном из вариантов осуществления соединение по настоящему изобретению имеет структуру соединения, показанного в табл. 1, так что каждая из указанных структур сама по себе является отдельным вариантом осуществления изобретения. В предпочтительных примерах таких вариантов осуществления изобретение конкретно относится к соединениям, выбранным из соединений 1-1, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 1-6, 122, 1-26, 1-37, 1-44, 1-45, 1-46, 1-49, 1-51, 1-56, 1-77, 1-95 табл. 1.

В другом предпочтительном варианте осуществления соединение по настоящему изобретению имеет структуру соединения табл. 3. Конкретными примерами этих предпочтительных вариантов осуществления являются соединения 3-1, 3-2, 3-3, 3-4, 3-7, 3-8, 3-11, 3-13, 3-14, 3-16, 3-21, 3-28, 3-38, 3-39 и 3-40 табл. 3.

Другими предпочтительными вариантами осуществления соединений по настоящему изобретению являются соединения, имеющие структуры, показанные в табл. 2 и/или 4.

В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения любые из показанных выше соединений, включая комбинации этих соединений или комбинации одного или нескольких из этих соединений с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами, предпочтительно про- 8 030302

тивораковыми средствами (например, использованными в примере 12) применяются в лечении любого или всех упомянутых в заявке раковых заболеваний, например одного или нескольких заболеваний из числа рака толстой кишки, аденокарциномы, рака прямой кишки, колоректального рака, рака молочной железы, рака легких, рака яичников, полипозного аденоматоза и гепатоклеточной карциномы, где рак толстой кишки и колоректальный рак являются особенно предпочтительным.

Одним из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения является 2,7-бис(азепан-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион диоксим

Одним из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения является 2,7-бис(азокан-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион диоксим

Одним из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения является 2((3К,5§)-3,5-диметилпиперидин-1 -илсульфонил)-7 ((3 §,5К)-3,5-диметилпиперидин-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион диоксим

Одним из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения является 2,6-бис(4-этоксипиперидин-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион диоксим

Одним из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения является 2,6-бис(азепан-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион диоксим

Одним из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения является 2,6-бис(азокан-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион диоксим

Одним из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения является 2,6-бис((3К,5К)-3,5-диметилпиперидин-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион диоксим

Кроме того, настоящее изобретение относится к композициям соединений, в том числе их фарма- 9 030302

цевтически приемлемых солей, имеющих структуры, определенные приведенными выше формулами (I)(VI) (с заместителями, раскрытыми в настоящей заявке), предпочтительно соединений табл.1-4, в терапевтически эффективном количестве в фармацевтически приемлемом носителе.

Соединения, входящие в указанные композиции, могут также содержать мультициклическую циклоалкильную или гетероциклоалкильную мостиковую структуру (как в табл.1-4), включающую в общей сложности до 12 атомов и до 4 гетероатомов, выбранных из N и О.

Помимо этого, настоящее изобретение относится к терапевтическим композициям любых из соединений по настоящему изобретению, например соединений табл.1-4.

Соединения по настоящему изобретению могут иметь форму своих фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, амидов, стереоизомеров, геометрических изомеров, сольватов или пролекарств. Если соединение по настоящему изобретению является стереоизомером, этот стереоизомер может быть энантиомером или диастереомером. Если указанное соединение является энантиомером (или содержит хиральный центр, например хиральный атом углерода), форма соединения, применяемая для фармацевтических целей, может включать любой энантиомер либо рацемат, хотя один из указанных энантиомеров может быть предпочтительным, например, в том случае, если он является активной формой или более активен, чем другой энантиомер. Если указанное соединение по настоящему изобретению является геометрическим изомером (например, включает пару атомов углерода с заместителями, присоединенными в цис- или транс-конфигурации), предпочтительной для фармацевтического применения может являться либо цис-, либо трансформа, хотя в способах по настоящему изобретению могут применяться смеси циси трансформ, при условии, что они обладают желаемым фармацевтическим действием.

"Фармацевтически приемлемая соль" представляет собой соль с катионом, образованную любой кислотной (например, карбоксильной) группой соединения, или соль с анионом, образованную любой основной (например, амино) группой соединения. Многие из этих солей известны в технике, как указано, например, в АО 87/05297 (ΙοΙιηΛοη е! а1., опубликована 11 сентября 1987, включена в настоящую заявку с помощью ссылки). Примеры подходящих солей, образованных кислотами, включают ацетаты, адипаты, альгинаты, аспартаты, бензоаты, бензолсульфонаты, бисульфаты, бутираты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, циклопентанпропионаты, диглюконаты, додецилсульфаты, этансульфонаты, формиаты, фумараты, глюкогепатноаты, глицерофосфаты, гликоляты, гемисульфаты, гептаноаты, гексаноаты, гидрохлориды, гидробромиды, гидройодиды, 2-гидроксиэтансульфонаты, лактаты, малеаты, малонаты, метансульфонаты, 2-нафталинсульфонаты, никотинаты, нитраты, оксалаты, пальмитаты, пектинаты, персульфаты, 3-фенилпропионаты, фосфаты, пикраты, пивалаты, пропионаты, салицилаты, сукцинаты, сульфаты, тартраты, тиоцианаты, тозилаты и ундеканоаты. Предпочтительные соли с катионами включают соли щелочных металлов (например, натрия и калия) и щелочно-земельных металлов (например, магния и кальция) и соли органических оснований. Предпочтительные соли с анионами включают галогениды (например, хлориды), сульфонаты, карбоксилаты, фосфаты и т.п.

В настоящем изобретении предполагается также кватернизация любой основной азотсодержащей группы соединений, раскрытых в настоящей заявке. С помощью такой кватернизации можно получить водо- или маслорастворимые или диспергируемые продукты.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к композициям любых из соединений по настоящему изобретению, в которых это соединение предпочтительно находится в фармацевтически приемлемом носителе и в терапевтически эффективном количестве. Эти композиции, как правило, должны включать такое количество соединения по настоящему изобретению, которое не является токсичным (т.е. количество, которое безопасно для терапевтического применения).

Кроме того, настоящее изобретение охватывает метаболиты любых новых соединений по настоящему изобретению, где эти метаболиты являются вторыми соединениями, образующимися в результате одной или нескольких метаболических реакций ίη νίνο, происходящих с первым соединением, после введения этого первого соединения млекопитающему, где указанное первое соединение является новым соединением по настоящему изобретению. В предпочтительных вариантах осуществления указанное первое соединение является любым из соединений, раскрытых в настоящей заявке, и имеющим структуру, определенную формулами (Ι)-(νΐ), с заместителями, раскрытыми для этих формул, и еще более предпочтительно любым из соединений табл.1, 2, 3 или 4, включая все их фармацевтически приемлемые соли.

Избранные примеры соединений по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются этим, любые или все соединения табл.1-4, включая все их фармацевтически приемлемые соли, а также метаболиты любого из указанных соединений, образующиеся в организме обычного млекопитающего, в особенности человека, причем метаболизм указанных соединений происходит после введения соединений указанному млекопитающему в качестве терапевтического средства. Любое и все эти соединения конкретно заявлены для применения в любом и всех способах по настоящему изобретению. В каждой из показанных структур лиганд присоединен через атом, отмеченный звездочкой (*). Например, в табл. 1 (антрахинон диоксимы) атом серы показанной формулы (т.е. "ядра структуры") присоединен к показанной группе К через атом азота, отмеченный звездочкой в столбце К таблицы; то же самое верно и для других таблиц.

- 10 030302

Таблица 1

- 11 030302

1-29	"ΗΝ Ρ	664.8
1-30	Ρ *Ν ъ	724.9
1-31	·^ηνΟΟ	672.8
1-32	·^ηΟΟ	588.7
1-33	·^ηνΟ	560.6
1-34	ъ	588.7
1-35	'Ν^Ο _/°~Α ον	762.8
1-36	•Ο 0	618.6
1-37	Ό	700.9
1-38	Ό ⁴—Ν 0	646.7
1-39	СО	640.8
1-40	"СО	640.8
1-41	·_ΗΝ-θ	636.7
1-42	Ο	684.8
1-43	'СиЭ	712.8
1-44	•ΟΥ-	644.8
1-45	'СС	588.7
1-46	ο	672.8
1-47	ΟρΟ 0	754.9
1-48	V	668.8
1-49	Οο.	616.7
1-50	"00	640.8
1-51	α	588.7
1-52	со Η	640.8
1-53	Ό	564.6
1-54	Τ	640.8
1-55	Η	668.8
1-56	4	672.8
1-57	Υ	628.7

- 12 030302

1-58	”~χ	750.9
1-59	ηΡ	604.5
1-β0		620.8
1-61	44	837.01
1-62	то	640.8
1-63		588.7
1-64	™2он 0	620.6
1-65	то \ I	843.1
1-66	,то	815.1
1-67	н • ΗΝ. 1 ТО	668.8
1-68	‘Ы'Ю ОН	620.6
1-69	*Ν'^^Χ' к	508.6

1-70	л •Ν ОН 4	784.9
1-71	...то	692.8
1-72	он	732.8
1-73	°ТО	788.9
1-74	г то	867.2
1-75	ох	748.8
1-76	•тог 4°	592.6
1-77		616.7
1-78	о<^он то	676.7
1-79	4 η	871.2

- 13 030302

Таблица 2

Соединение	К	к,	Р₂	мол.масса
2-1	О X I	.о—	• о—	590.7
2-2	γ	I ·ο^^Ν-	I ο^^Ν-	730.9
2-3	ν	I	I	759.03
2-4	ν	Г I О	Ζ л	899.2
2-5	Ό-	. *θ^—	• о—	618.7
2-6	Ό	I	I	730.9

- 14 030302

2-7	Ό		I	*ο ν"	817.1
2-8	Ό		°'-^χ"^νη₂	702.9
2-9	Ό	*Ο^χ-χ^ΝΗ2	*ο^^νη₂	674.8
2-10	ν	• ο^⁴	.0	ο^⁴	.0	783.05
2-11	ν		,οΗΟ	811,1
2-12	0	,_ϋ	.0^.0	839.1
2-13	α	.С0	I	.0^	I	702.9
2-14	-α	0 Ν	'0^	I \χ^\	730.9
2-15	•α	.0^	.0	-0^	.0	755
2-16	-α	.οΗΟ	,ю	783.1
2-17	СС	..ϋ	.„ο	811.1
2-18	Ό	ΗΝ^Ν. Ο	I ЫЧ/Νχ,	г ΗΝ^Ν 0	I Ы\/М	899.2
2-19		Г ΗΝ^,Ν. Ο	I Ы0К	Г ΗΝ^Ν 0	I	931.2
2-20	α	* ^ΟΉ\Η-_ΝΗί	'^Οχ/Χ/4ΝΗ2	702.9

2-21	α	Г ΗΝ-^Ν^ Ο	I	Г ! ΗΝ^Ν-^χ\^Ν 0	871.1
2-22	0	Г ΗΝγΝ^. 0	I <\χ^Ν\	·ο0Α Ζ ζ—	959.1
2-23	Ό	Г ΗΝ^Ν^ 0	I	•ОД0 ζ ζ—	927.2
2-24	Ό	Ο Ν	0 Ν	759.03
2-25	-0 Η	0 Ν	0 Ν	811.1
2-26	Ό	Г ^ΗΝγΝ^ 0	I -^0	*ΟΗ	715.9
2-27	0	*θ'χχ^\χ·ΝΗ₂	*ΟΗ	645.8
2-28	Ό		^νη₂	*ΟΗ	645.8

- 15 030302

Таблица 3

Соединение	β	мол.масса
3-1	φ	560.6
3-2	Ό	560.6
3-3	Ό	532.6
3-4	V	588.7
3-5	’СФ	676.7
3-6	*Ο~	590.7
3-7	'Ск	560.6
3-8	я	588.7
3-9	чо	640.8
3-10	°Ό	684.8
3-11		644.8
3-12	Ό	668.8
3-13	Φ	588.7
3-14	Ό	588.7
3-15	4°	837.01
3-16	Ό.	616.7
3-17	ΟΟ	712.8
3-18	Ό	664.8
3-19	φ	720.9
3-20	φ Η	640.8
3-21	Ό	616.7
3-22	'2)	628.7
3-23	•φ φ°	564.6
3-24	* ^И φ Η	640.8
3-25	γφ 4	592.6
3-26	•N'4 Φ	744.8

- 16 030302

- 17 030302

Таблица 4

В соответствии с изложенным выше настоящее изобретение направлено на применение соединений по настоящему изобретению в качестве действующих ингредиентов лекарственных средств, в частности лекарственных средств, применимых при лечении опухолей. Таким образом, соединения по настоящему изобретению будут входить в фармацевтические композиции, содержащие, например, соединения формулы (I) в качестве действующих ингредиентов в смеси с фармацевтически приемлемыми носителями и эксципиентами, включающими любые фармацевтические агенты, которые сами по себе не вызывают выработку антител, наносящих вред индивидууму, принимающему композицию, и которые могут вводиться, не оказывая неприемлемого токсического действия. Фармацевтически приемлемые носители включают, не ограничиваясь приведенным перечнем, жидкости, например воду, солевой раствор, глицерин, этанол и т.п., в том числе носители, применимые для получения спреев для назальной доставки и доставки через другие части дыхательных путей или доставки через зрительную систему. Подробное обсуждение фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей и других эксципиентов представлено в ΚΕΜΙΝΟΤΟΝ'δ РНАКМАСЕИТЮЛЬ δΟΙΕΝΟΕδ (Маек РиЬ. Со., Ν.Τ сиггеи! ейФои). Применение этих носителей хорошо известно специалистам в данной области техники и не будет описываться в тексте заявки более подробно.

Кроме того, согласно изложенному выше настоящее изобретение относится к способу предупреждения или лечения заболевания, связанного с изменением уровней экспрессии определенных наборов генов у млекопитающих, включающему введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения по настоящему изобретению.

Соединения по настоящему изобретению обладают, например, эффектом уменьшения размера и/или количества опухолей, в частности первичных опухолей у млекопитающих, в том числе у человека, которому необходимо такое лечение. Статистически значимое изменение числа клеток первичной опухоли или метастаза, как правило, будет составлять по меньшей мере примерно 10%, предпочтительно 20, 30, 50, 70, 90% или более.

В соответствии с настоящим изобретением средства, описанные в настоящей заявке, могут быть скомбинированы с другими способами лечения медицинских состояний, описанных в заявке, например другими видами химиотерапии, радиационного лечения, иммунотерапии, хирургического лечения и т.п. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно также вводить в комбинации с такими средствами, как аналгетики, диуретики, антидиуретики, противовирусные средства, антибиотики, пищевые добавки, средства для лечения анемии, средства для коагуляции крови, средства для лечения костей и психиатрические и психологические средства.

Определение подходящей для лечения дозы осуществляет клиницист, используя, например, параметры или факторы, известные в технике для того, чтобы осуществить лечение или прогнозировать осуществление лечения. Введение, как правило, начинают с количества, которое несколько меньше оптимальной дозировки, и после этого повышают дозировку небольшими шагами до достижения желаемого или оптимального результата относительно любых отрицательных побочных эффектов.

- 18 030302

Конкретные дозы соединения, вводимого по настоящему изобретению для достижения терапевтического и/или профилактического эффекта, безусловно будут определяться конкретными обстоятельствами заболевания, включая, например, конкретное вводимое соединение, путь введения, подвергаемое лечению состояние и подвергаемого лечению индивидуума. Типовая дневная доза (вводимая в виде одной или нескольких доз) будет составлять от примерно 0,01 до примерно 50-100 мг/кг массы тела действующего соединения по настоящему изобретению. Предпочтительные дневные дозировки, как правило, будут составлять от примерно 0,05 до примерно 25 мг/кг и оптимально от примерно 0,1 до примерно 10 мг/кг. Такие факторы, как скорость выведения, время полужизни и максимальная переносимая доза (ΜΤΌ), которые конкретно не указаны в настоящем описании, могут быть легко определены рядовым специалистом в данной области техники с использованием стандартных методик.

Эффективное количество терапевтического средства будет регулировать симптомы, как правило, по меньшей мере примерно на 10%; обычно по меньшей мере примерно на 20%; предпочтительно, по меньшей мере примерно на 30% или более предпочтительно по меньшей мере примерно на 50%. В качестве альтернативы регулирование миграции будет означать, что терапевтическое средство оказывает влияние на миграцию или перенос раковых клеток различных типов. Это приведет, например, к статистически значимым и количественно определяемым изменениям в количестве пораженных клеток. Этот эффект может заключаться в уменьшении количества целевых клеток, прикрепившихся за определенный период времени к целевой области. Кроме того, можно следить за прогрессированием, размером или ростом первичной опухоли.

Настоящее изобретение относится к способу профилактики, лечения или облегчения рака или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения по настоящему изобретению, причем указанное млекопитающее предпочтительно является человеком.

Соединения по настоящему изобретению можно также вводить в комбинации (одновременно или последовательно) с другими химиотерапевтическими средствами. Такое комбинированное введение предпочтительно приводит к синергетическому эффекту. В одном предпочтительном варианте осуществления способа по настоящему изобретению соединение по настоящему изобретению вводят с таким агентом, как ингибитор ΗΜΟ СоА (3-гидрокси-3-метилглутарил коэнзима А) редуктазы, например аторвастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин, розувастатин, симвастатин и т.п. (применяемым при лечении сердечно-сосудистых расстройств (например, атеросклероза), как описано в АО 2006/083214). Другие предпочтительные агенты для совместного введения включают 5-фторурацил и оксалиплатин. Методики такого совместного введения приведены в примере 12 (см. данные в табл. 8).

Соединения по настоящему изобретению, как правило, будут проявлять терапевтический эффект за счет модулирования одного или нескольких генов, имеющихся в клетке, в частности клетке млекопитающих, например раковой клетке, предпочтительно клетке рака толстой кишки и наиболее предпочтительно аденокарциномы. Таким образом, соединения по настоящему изобретению могут применяться для определения или разграничения набора генов путем определения модулирования такого набора генов одним или несколькими соединениями по настоящему изобретению. Например, если обнаружено, что набор генов подергается повышающей регуляции в раковых клетках, но не подвергается аналогичной регуляции в нормальных клетках, в частности нормальных клетках той же ткани или органа, к которым относятся раковые клетки, набор генов можно определить по их обычной способности подвергаться модулированию (на основании изменения экспрессии генов, например, изменения скорости транскрипции или количества транскрибированного РНК, или количества полипептида, выработанного в результате упомянутой экспрессии) путем приведения в контакт этих генов или клеток, содержащих эти гены, с одним или несколькими соединениями по настоящему изобретению. Очевидно, что степень этого модулирования может быть связана с количеством указанного соединения или соединений, использованного для контакта. Упомянутое модулирование может включать повышенную экспрессию всех определенных генов (т.е. генов упомянутого набора), пониженную экспрессию всех генов набора или повышенную экспрессию некоторых из генов набора и пониженную экспрессию других. Поэтому ген, не подвергшийся модулированию при действии тестируемого соединения (соединения, введенного в контакт с генами или содержащими их клетками), не считается членом набора. Таким образом, настоящее изобретение относится к набору генов, где экспрессия каждого члена указанного набора генов модулируется в результате приведения в контакт указанного набора генов с соединением по настоящему изобретению. В конкретных вариантах осуществления экспрессия каждого члена указанного набора генов увеличивается в результате указанного приведения в контакт или понижается в результате указанного приведения в контакт. В другом предпочтительном варианте осуществления этот набор генов находится в клетке. Указанный набор генов обычно будет связан с конкретным болезненным процессом, как, например, набор генов, все составляющие которого модулируются соединением по настоящему изобретению, где это соединение обладает определенным терапевтическим эффектом, например является антинеопластическим агентом. Этот набор генов показан в табл. 5. Любое подмножество генов табл. 5 также может образовывать набор генов, охваченный настоящим изобретением.

- 19 030302

Таблица 5

№ гена	Наименование гена
1	фактор, активирующий транскрипцию 3
2	нуклеопротеин ΑΗΝΑΚ 2
3	член С2 семейство альдо-кето редуктаз 1 (дигидродиол дегидрогеназа 2; белок, связывающий желчные кислоты; 3альфа гидроксистероид дегидрогеназа;)
4	содержащий основной домен спираль-петля-спираль, класса в, 2
5	молекула СБ2000
б	лиганд хемокинов (С-С мотив) 20
7	открытая рамка считывания 15 13-й хромосомы
8	цитидин дезаминаза
9	дегидрогеназа/редуктаза (семейство 3ΌΚ) член 9
10	транскрипт 3, индуцируемый повреждением ДНК
11	гомолог БпаД (Нзр40), подсемейство В, член 9
12	гомолог РпаД (Нзр40), подсемейство С, член 12
13	ΌΟΡΑ декарбоксилаза (декарбоксилаза ароматических Ьаминокислот)
14	фосфатаза двойной специфичности 1
15	фосфатаза двойной специфичности 5
16	белок эпителиальной мембраны 3
17	белок, подобный САВА(А) рецептор-ассоциированному белку 1
18	белок, подобный САВА(А) рецептор-ассоциированному белку 3
19	фактор роста и дифференцировки 15
20	СТР-связывающий белок, избыточно экспрессируемый в скелетных мышцах
21	лимфоид-специфичная хеликаза

22	гемм-оксигеназа (дециклизирующая) 1
23	гистоновый кластер 2, Н2Ье
24	гипотетический белок МСС14376
25	1Ь8
26	ген интерферон-стимулированной экзонуклеазы 20 КДа
27	интерлейкин 32
28	интерлейкин 8
29	ламинин, альфа 3
30	регулятор лизосомальной миграции
31	ΝΑΒΡΗ оксидаза 1
32	оптиневрин
33	протеин фосфатаза 1, регуляторная (ингибирующая) субъединица 15А
34	предполагаемая индуцируемая ΡΤΕΝ киназа 1
35	семейство генов гомологов Каз, член Р (в филоподиях)
36	содержащий домен склеростина 1
37	секвестосома 1
38	малый богатый пролином белок 1А
39	малый богатый пролином белок 1В (корнифин)
40	малый богатый пролином белок 3
41	переносчик растворенных веществ семейство 7, (переносчик катионных аминокислот, система у+), член 11
42	ЗРС25, ΝϋΟ80 компонент кинетохорного комплекса, гомолог (5.οοΓονίδίΒθ - пекарские дрожжи)
43	белок 2, ассоциированный с киназой 3-фазы (р45)
44	Тубулин, альфа 1а

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу предупреждения, лечения или облегчения рака или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения, которое модулирует экспрессию одного или нескольких генов табл. 5. В предпочтительных вариантах осуществления такие соединения имеют структуру, отображенную формулами (I), (II), (III) и (V), с заместителями, описанными для этих формул в настоящей заявке, и еще более предпочтительно представляют собой любое из соединений табл. 1, 2, 3 или 4, включая все их фармацевтически приемлемые соли.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу облегчения рака или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения по настоящему изобретению. В частности, предполагается применение соединений табл. 1. В

- 20 030302

некоторых вариантах осуществления указанное раковое заболевание представляет собой саркому или же указанное раковое заболевание является карциномой. Конкретные раковые заболевания, охватываемые способами по настоящему изобретению, включают, не ограничиваясь приведенным перечнем, одно или несколько заболеваний из числа рака толстой кишки, аденокарциномы, рака прямой кишки, колоректального рака, рака молочной железы, рака легких, рака яичников, аденоматозного полипоза и гепатоклеточной карциномы, где рак толстой кишки и колоректальный рак являются предпочтительными вариантами осуществления.

Кроме того, в настоящем изобретении разработаны удобные способы синтеза соединений формулы (I), соответствующие общей методике синтеза, представленной на схеме 1. Исходные сульфонилхлориды

1 можно получать непосредственным хлорсульфонилированием соответствующих ароматических систем или хлорированием подходящих производных сульфоновой кислоты. Соединения 1 вводят во взаимодействие с 6- или 7-членными циклическими аминами, получая вторичные сульфонамиды 2. Соединения

2 можно дополнительно превратить в производные 3, которые в некоторых случаях служат пролекарствами с модифицированными физико-химическими и фармакологическими свойствами, например растворимостью в воде, модифицированной способностью связываться с белками, устойчивостью в плазме, токсичностью и другими.

Примеры

Большую часть соединений, раскрытых в настоящей заявке, получали из соответствующих производных сульфонилхлоридов, в соответствии с общей методикой синтеза, представленной на схеме 1

Приведенные ниже схемы и примеры предназначены для иллюстрации изобретения, а не для ограничения его объема, который определен приложенной формулой изобретения

Пример 1. 2,7-бис-(азокан-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион.

Антрахинон-2,7-дисульфонилхлорид (1215 мг, 3 ммоль) растворяли в 100 мл ИСМ. Раствор охлаждали до -50°С. К этому раствору добавляли 1 мл (8 ммоль) гептаметиленимина и затем 1 мл диизопропилэтиламина. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель выпаривали, и остаток обрабатывали 1н. НС1, фильтровали, промывали водой и высушивали. Неочищенный продукт кристаллизовали из смеси хлороформ-гексан, получая 1,014 г (91%) желтого вещества, представлявшего собой желаемое соединение. ’Н ЯМР (СИС1₃): 8,70 (2Н, д, С1 и С8), 8,47 (2Н, д, С4 и С5), 8,22 (2Н, дд, С3 и С6), 3,22 (8Н, м), 1,70 (20Н, м).

Пример 2. 2,7-бис-(азокан-1-ил сульфонил)антрацен-9,10-дион диоксим (1-22).

Продукт примера 1 (1,0 г, 1,706 ммоль), 5 мл пиридина и гидрохлорид гидроксиламина (1,5 г, 21,5 ммоль) перемешивали при 95°С в течение 36 ч. Пиридин выпаривали, и остаток перемешивали с 1н. НС1 (50 мл) в течение нескольких минут. Белый продукт собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали. После этого неочищенный продукт кристаллизовали из смеси ИСМ-гексан, получая 970 мг (97%) соединения 1-22 белого цвета. ’Н ЯМР (СИС1₃): 9,05 (1Н, дд), 8,75 (1Н, дд), 8,35 (1Н, дд), 8,05 (1Н, дд), 7,90 (2Н, м), 3,20 (8Н, м), 1,70 (20Н, м).

Пример 3. Динатриевая соль 2,7-бис-(азокан-1-илсульфонил)антрацен-9,10-дион диоксима (222χ2Να).

Смесь соединения 1-22 (620 мг, 1,0 ммоль), 35 мл ИСМ и 2,2 мл 1М этоксида натрия в этаноле перемешивали при нагревании до образования прозрачного раствора. К этому раствору добавляли 100 мл

- 21 030302

эфира, и смесь обрабатывали ультразвуком в течение 5 мин. Продукт в виде желтого твердого вещества собирали фильтрованием, промывали эфиром и высушивали, получая 660 мг (100%) указанного в заглавии соединения.

Пример 4. Тетрагидрохлорид 9,10-бис-(№-(3-диметиламино)пропил-Л-этилкарбамимидоилоксиимино)-2,7-бис-(азокан-1 -илсульфонил)-9,10-дигидроантрацена (3-18).

Соединение 1-22 (442 мг, 0,75 ммоль), 4 мл безводного хлороформа и 400 мг БОАС перемешивали при 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь конденсировали и хроматографировали с помощью ВЭЖХ. Объединенные фракции, содержащие желаемый продукт (МН+=899), подкисляли добавлением 5 мл 1н. НС1 и упаривали досуха. Продукт растворяли в дистиллированной воде и лиофилизовали, получая 530 мг (68%) указанного в заглавии соединения белого цвета

Пример 5. 9,10-бис-[(3 -аминопропил)оксиимино] -2,7-бис-(азокан-1 -илсульфонил)-9,10-дигидроантрацен (2-24).

К раствору соединения 1-22/2Να (320 мг, 0,5 ммоль) в ДМСО (2 мл) добавляли трет-бутил 3бромпропилкарбамат (180 мг, 0,75 ммоль), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли воду и экстрагировали осажденные продукты этилацетатом. Экстракт высушивали сульфатом натрия, упаривали, и остаток перемешивали с 4н. НС1/диоксан (5 мл) в течение 1 ч. Растворитель выпаривали, остаток растворяли в метаноле и очищали препаративной ВЭЖХ. Фракции, содержащие основной продукт, подкисляли хлористо-водородной кислотой и упаривали. Остаток растворяли в воде и лиофилизовали, получая указанное в заглавии соединение в виде дигидрохлорида (170 мг, выход двух стадий 44%). МС 703 (МН').

Пример 6. 10-(3-Аминопропил)оксимино-9-гироксиимино-2,7-бис-(азокан-1-илсульфонил)-9,10дигидроантрацен (2-28).

Указанное в заглавии соединение выделяли в качестве второго основного продукта в примере 5. Выход 2 стадий 20%. МС 646 (МН^').

- 22 030302

Пример 7. Ы²,М⁷-бис-(4-1рет-бутилциклогексил)-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2,7дисульфонамид.

Антрахинон-2,7-дисульфонилхлорид (10 г, 24,7 ммоль) растворяли в 200 мл ЭСМ (дихлорметана). Раствор охлаждали до -50°С. К этому раствору добавляли 4-третбутилциклогексанамин (8,43 г, 54 ммоль) и затем триэтиламин (8,6 мл, 61,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель выпаривали, остаток обрабатывали МеОН, отделяли фильтрованием и высушивали, получая 15 г (95%) продукта в виде желтого порошка.

Пример 8. ^К⁷-бис-(4-трет-бутилциклогексил)-^-(3-(диметиламино) пропил)-9,10-диоксо-9,10дигидроантрацен-2,7-дисульфонамид и ^К⁷-бис-(4-трет-бутилциклогексил)-^К⁷-бис-(3(диметиламино)пропил)-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2,7-дисульфонамид.

К ледяному раствору сульфонамида (продукт примера 7, 6,82 г, 10,61 ммоль) в безводном ДМФА (100 мл) в атмосфере аргона добавляли ΝαΗ (95,0%, 697 мг, 27,58 ммоль). Этот раствор перемешивали в течение 5 мин и затем добавляли гидрохлорид 3-хлор-К^диметилпропан-1-амина (2,18 г, 13,8 ммоль). Через 10 мин реакционную смесь переносили на масляную баню, предварительно нагретую до 40°С, и перемешивали в течение 3 дней. ЖХМС показала наличие моноалкилированного и бисалкилированного продуктов (в соотношении 65:25) в смеси с не прореагировавшим исходным веществом. После охлаждения к реакционной смеси добавляли 1н. ΝαΟΗ и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу высушивали над безводным сульфатом магния, и упаривали фильтрат при пониженном давлении. Неочищенную смесь очищали колоночной хроматографией на силикагеле. Не вступивший в реакцию исходный продукт выделяли из колонки при элюировании 40% ЕЮАс в гексане. Чистый моноалкилированный продукт (ЖХМС, МС 728,0 (МН+)) получали при элюировании чистым ЕЮАс, и бисалкилированный продукт (ЖХМС, МС 813,2 (МН+)) выделяли при использовании в качестве элюента 5% триэтиламина в ЕЮАс. Собранные фракции упаривали досуха при пониженном давлении, получая указанные в заглавии продукты (3,02 г, 53%) и (1,10 г, 17%).

Пример 9. ^К⁷-бис-(4-трет-бутилциклогексил)-^-(3-(диметиламино)пропил)-9,10-бис(гидроксиимино)-9,10-дигидроантрацен-2,7-дисульфонамид (4-1).

Диоксим (4-1) получали по общей методике, используя моноалкилированный сульфонамид (продукт примера 8, 2г, 2,7 ммоль), избыток гидрохлорида гидроксиламина (2,7 г, 2 7,5 ммоль) и пиридин (50 мл) при 95°С в течение 36 ч. После охлаждения избыток гидроксиламина удаляли фильтрованием, промывали пиридином, и фильтрат упаривали досуха при пониженном давлении. К полученному продукту добавляли избыток 1н. водной НС1, оксим выпадал в осадок и его отделяли фильтрованием, собирая и высушивая бесцветный осадок. Оксим (4-1) дополнительно очищали кристаллизацией или ВЭЖХ, получая его в виде бесцветной соли с НС1 (1,42 г, 65%).

'Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ: 13,04-13,01 (м, 1Н) , 12,94-12,89 (м, 1Н) , 10,48 (уш. с, 1Н) , 9,18-9,07 (м, 1Н) , 8,87-8,78 (м, 1Н) , 8,40-7,78 (м, 4Н), 3,75-3,05 (м, 16 Н), 2,72 (с, 6Н), 1,96-0,76 (м, 28Н).

Пример 10. Активность ингибирования роста НТ-29.

Для определения выживаемости клеток клеточных линий использовали анализ активности АРН (кислой фосфатазы), который основан на количественном определении активности цитозольной кислой фосфатазы (Соппо11у с1 а1., 1986; ЕпейпсН с1 а1. , 2007; Майш & С1упе8, 1993) . Внутриклеточные кислые фосфатазы в живых клетках гидролизуют п-нитрофенилфосфат до п-нитрофенола. Его поглощение при 405 нм прямо пропорционально количеству клеток в диапазоне 10³-10⁵ клеток в виде монослоя. Клетки НТ-29 выращивали в стандартных плоскодонных 96-луночных микротитровальных планшетах и давали им прирасти к стенке в течение 24 ч перед обработкой тестируемыми соединениями. Через 72 ч после

- 23 030302

обработки тестируемым соединением клетки промывали ΡΒδ, добавляли 100 мкл аналитического буфера (0,1М ацетат натрия, 0,1% Τπΐοπ Х-100, с добавкой иммунологически чистого п-нитрофенилфосфата, Р1егсе Вю1еск 1пс., КоскЮгб, Ш υδΆ) на лунку и инкубировали в течение 90 мин при 37°С. После инкубирования в каждую лунку добавляли 10 мкл 1н. ЫаОН и измеряли поглощение в каждой лунке при 405 нм в течение 10 мин на приборе Ризюп итуегза1 М!сгор1а1е Лпа1у2ег (Раскагб, Мепбеп, СТ, υδΑ). Результаты показаны в табл. 6:

Ингибирование роста клеток т νΐΐΓο

Таблица 6

Соединение №	Результат	Соединение №	Результат	Соединением»	Результат
1-1	++	1-78	++	3-1	+++
1-2	+++	1-79	+++	3-2	+++
1-3	++	1-80	++	3-3	+++
1-4	+++	1-81	++	3-4	+++
1-5	+++	1-82	++	3-7	+++
1-6	+++	1-83	+++	3-8	++
1-9	+	1-84	+++	3-9	+++
1-10	++	1-85	+++	3-10	+++
1-13	++	1-86	+++	3-11	+++
1-14	+	1-87	+++	3-12	+++
1-15	++	1-88	+++	3-13	+++
1-16	++	1-89	++	3-14	+++
1-19	+	1-90	+++	3-15	+
1-26	+++	1-91	++	3-16	+++
1-27	+++	1-92	++	3-17	+++
1-28	+++	1-93	+++	3-18	+++
1-29	+++	1-95	+++	3-19	+++
1-31	+++	1-96	+++	3-20	+++
1-34	+	1-97	+++	3-21	+++
1-37	+++	1-98	+	3-22	+++
1-39	+++	1-99	+++	3-24	++

1-40	+++	2-1	++	3-26	++
1-41	+++	2-2	+++	3-28	+++
1-42	+++	2-3	+++	3-29	+++
1-43	+++	2-4	+++	3-32	+++
1-44	+++	2-5	++	3-33	+++
1-45	+++	2-6	+++	3-34	+++
1-46	+++	2-8	++	3-37	+++
1-48	+++	2-9	++	3-39	+++
1-49	+++	2-10	++	3-41	++
1-50	+++	2-11	++	3-42	+++
1-51	++	2-12	++	3-43	+++
1-52	++	2-13	+++	3-44	+++
1-55	++	2-14	+++	3-45	+++
1-56	+++	2-15	++	3-46	+++
1-57	++	2-16	+++	4-1	+++
1-59	++	2-17	++	4-2	+++
1-60	+++	2-18	+++	4-3	+++
1-62	++	2-20	++	4-4	+++
1-65	+++	2-21	++	4-5	+++
1-66	+++	2-22	+	4-6	+++
1-67	+++	2-23	+++	4-8	+
1-69	++	2-24	+++	4-9	++
1-71	+++	2-25	++	4-10	++
1-74	+++	2-26	+++	4-11	+++
1-75	+++	2-27	+++
1-76	++	2-28	+++
1-77	++

Символы в табл. 6 означают следующие результаты:

+++ - хорошее ингибирование,

++ - умеренное ингибирование и

+ - плохое ингибирование.

Диапазоны значений для этих результатов являются следующими: + + + - 1С50 1 мкМ или менее,

++ - 1С50 от 1 до 5 мкМ и + - 1С50 более 5 мкМ.

- 24 030302

Пример 11. Эксперимент ίη νίνο: исследование эффективности против ксенотрансплантата.

Самок мышей пи/пи (20-30 г, в возрасте 7-9 недель) помещали в вентилируемые стойки и давали им фильтрованную подкисленную воду и стерильный лабораторный корм без ограничений. Перед началом тестирования мышам давали адаптироваться в течение 1 недели. Перед введением тестируемых соединений животным с опухолями проводили исследование на интактных животных с целью определения максимальной дозы при 5-недельном расписании введения. С этой целью мышам вводили препараты ΙΡ или перорально один раз в день в течение одной недели и определяли массу их тела два раза в неделю в течение двух недель. Потеря 20% или более массы тела считалась летальной, и более высокие дозы считались дозами, вызывающими значительную смертность по данным экспериментов по потере массы тела (см. Ететкоп е( а1., Сапсег КекеатсЬ, (1995) 55, 603-609; Μοτίοη е( а1. , Иа1иге Ρτοΐοεοίκ, (2007) 2(2) 247250).

Развитие опухоли вызывали с помощью одной подкожной инъекции выращенных опухолевых клеток в точку, находящуюся в нижней части левого бока животного. Затем мышей разделяли по массе тела, группируя по 5 мышей в клетке, и вводили в их организмы микрочипы для постоянной идентификации. Для каждой группы устанавливали узкий диапазон масс тела ±1 г и размеров опухоли. Исследования эффективности препаратов проводили в диапазоне дозировок, который включал определенную ранее наивысшую дозу. Объем опухоли у каждой мыши определяли измерением двух размеров с помощью штангенциркуля и вычислением с использованием формулы

длина х (ширина г Объем опухоли =-^:--* 2

Итоговый рост опухолей выражали в виде соотношения Т/С, где объем опухоли в конце введения тестируемых соединений (Т) делили на объем опухоли в конце введения носителя (С). Соединения, приведенные в табл. 7, продемонстрировали ингибирование роста опухоли по сравнению с контролем, использованным в этом исследовании.

Таблица 7

Линия клеток	Соединение №	Доза	Носитель	Путь введения
Со1о-205	1-10	10	РУР/глюкоза	IV
Со1о-205	1-10	75	РУР/глюкоза	РО
Со1о-205	1-26	15	РУР/глюкоза	IV
Со1о-205	3-2	40	РУР/глюкоза	ΙΡ
Со1о-205	3-2	40	РУР/глюкоза	IV
Со1о-205	3-2	30	РУР/глюкоза	ΙΡ
Со1о-205	3-2	40	РУР/глюкоза	IV
Со1о-205	1-10	15	РУР/глюкоза	IV
Со1о-205	3-2	30	РУР/глюкоза	РО
Н460	3-2	40	РУР/глюкоза	IV
Н460	3-2	30	РУР/глюкоза	ΙΡ
НТ-29	1-22	75	глюкоза	РО
НТ-29	1-6	50	глюкоза	РО
НТ-29	1-3	25	глюкоза	ΙΡ
НТ-29	1-22	75	глюкоза	РО
НТ-29	1-6	25	глюкоза	РО
НТ-29	1-22	50	глюкоза	РО
НТ-29	2-14	5	глюкоза	ΙΡ
НТ-29	1-22	75	глюкоза	РО
НТ-29	1-28	75	глюкоза	РО
НТ-29	1-6	50	глюкоза	РО
НТ-29	1-8	50	глюкоза	ΙΡ
НТ-29	1-6	50	глюкоза	РО
НТ-29	3-2	40	РУР/глюкоза	IV
НТ-29	3-2	30	РУР/глюкоза	РО
НТ-29	1-5	75	глюкоза	РО
НТ-29	1-6	75	глюкоза	РО
НТ-29	1-8	25	глюкоза	ΙΡ
НТ-29	3-4	50	глюкоза	РО

Пример 12. Комбинированная химиотерапия.

Производили оценку эффективности набора химиотерапевтических средств в моделях рака толстой кишки (НТ29 и 8^480) для определения, способна ли комбинация этих препаратов с соединением 3-2 действовать синергетически, с точки зрения индуцирования гибели раковых клеток. Используя статистическую модель, разработанную С1юи и Та1ау (1981) ("СепегаП/еб едиа1юпк ίοτ (Не апа1ук15 οί ίηΗίϋίΐοτκ МюНаейк-МеШеп апб ЫдНет ο^τ кшебс 5ук1етк \\ί(1ι (\\ό οτ итоге ти1аиа11у ехсНтоке апб гюпехскыуе шΗί6ίΐοτκ" ш Еигореап ίοιιπκιί οί ВюсНепикДу. 115:207-216), выявили 4 лекарственных средства, демонст- 25 030302

рирующих синергию с соединением 3-2 (табл. 8). Комбинационные коэффициенты рассчитывали для каждой комбинации лекарственных препаратов, и значение комбинационного коэффициента менее 1,09 указывало на синергию, а значение менее 0,5 указывало на сильную синергию. Комбинированное применение совместно с ловастатином, флувастатином, оксалиплатином и 5-РИ давало синергетический эффект индуцирования гибели раковых клеток.

Таблица 8

Лекарственное средство	Комбинационный индекс	Результат
Ловастатин	0, 62	Синергия
Флувастатин	0, 72	Умеренная синергия
Оксалиплатин	0,25	Сильная синергия
5-ги	0,24	Сильная синергия

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, имеющее структуру, отображаемую формулой I

где η=1, X является 6=ΝΟΗ;

Υ является ΝΟΗ, и и V каждый означает О=8=О.

каждый из заместителей Р_ь К₂, К₃ и К₄ независимо выбран из Н, С1-С₃алкила, И-С₅моно или диС1С₅алкиламиноС1-С₅алкила, С₃-С₇циклоалкила, фенил(С1-С₂)алкила, С₂-С₄алкенила, С₂-С₄алкинила, фенила, 5-17-членного гетероарила, включающего 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, 5-17членного гетероциклоалкила, включающего 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, и каждый из указанных ΝΡιΡ₂ и ΝΡ₃Ρ₄ может независимо образовывать 5-17-членный гетероциклоалкил, включающий 1-4 гетероатомов, выбранных из азота и кислорода,

где каждый Р₅ и Кб, оба, являются Н;

и где, если один из Ρ₁ или Ρ₂ и один из Ρ₃ или Ρ₄ означают фенил, тогда другой из Ρ₁ или Ρ₂ и Ρ₃или Ρ₄ не является Н или С₁-С₃алкилом,

или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер или геометрический изомер.
2. Соединение по п.1, где один или оба неодинаковых ΝΡ|Ρ₂ и ΝΡ₃Ρ₄ представляет собой незамещенный пиперидино, Ν-метилпиперазино или Ν-метилгомопиперазино.
3. Соединение по п.1, где Ρι, Ρ₂, Ρ₃ и Ρ₄ каждый независимо выбран из Н, С1-С₃алкила, С₃С7циклоалкила, С2-С4алкенила или С2-С4алкинила.
4. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество соединения по п.1 в фармацевтически приемлемом носителе.
5. Способ предупреждения, лечения или облегчения рака или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества соединения по п.1.