EA028426B1

EA028426B1 - СОЕДИНЕНИЯ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ tau-ВИЗУАЛИЗИРУЮЩИХ АГЕНТОВ И tau-ВИЗУАЛИЗИРУЮЩИХ СОСТАВОВ

Info

Publication number: EA028426B1
Application number: EA201690294A
Authority: EA
Inventors: Джорджио Аттардо; Джон Листер-Джэймс; Натаниэль Энтони Ко Лим; Хуй Сюн
Original assignee: Эли Лилли Энд Компани
Priority date: 2013-09-26
Filing date: 2014-09-19
Publication date: 2017-11-30
Also published as: TW201605852A; AR097683A1; CN105579454A; US20160228586A1; AU2014327076A1; EP3049414A1; HK1222654A1; MX2016003725A; KR20160045143A; AU2014327076B2; JP2016531851A; CA2920402A1; EA201690294A1; WO2015047902A1; KR101808969B1

Abstract

В изобретении описываются новые триметиламмониевые соединения формулыспособы получения указанных соединений, способы применения указанных соединений для получения tau-визуализирующих агентов и получение составов tau-визуализирующих агентов.

Description

Настоящее изобретение относится к новым триметиламмониевым соединениям, к способам применения указанных соединений для получения !аи-визуализирующего агента [¹⁸Р]-Т807 и к композициям и составам указанных соединений для диагностической визуализации, а также к способам визуализации с применением указанных соединений, композиций и составов.

Болезнь Альцгеймера (ΑΌ), основная причина деменции, развивается у 1% населения в возрасте от 65 до 69 лет и достигает 40-50% у людей в возрасте 95 лет и более. Пациенты с ΑΌ демонстрируют характерные клинические симптомы, которые включают ухудшение когнитивной функции и дефицит функции памяти. У таких пациентов наличие ΑΌ подтверждают по большому количеству сенильных бляшек, находящихся в коре головного мозга при гистопатологическом исследовании при вскрытии. Зрелые сенильные бляшки состоят из внутриклеточных нейрофибриллярных клубков (ΝΡΤ), образованных из волокон гиперфосфорилированных белков 1аи. и внеклеточных β-амилоидных белков, образованных в результате ферментативного процессинга белка-предшественника амилоида. Скопления гиперфосфорилированного 1ан (РНР-!аи), такие как нейрофибриллярные клубки, связаны со степенью ухудшения когнитивной функции у пациентов с болезнью Альцгеймера. [¹⁸Р]-Т807 представляет собой визуализирующий агент для позитронно-эмиссионной томографии (РЕТ), демонстрирующий высокую аффинность и селективность к РНР-!аи, а также благоприятные свойства ίη νίνο. ([(18)Р]-Т807, а поус1 1ан ροδίίτοη еш188юп ЮнюдгарНу нпадшд адсп! Ют АСНсипсг'з Шзсазс. АСНсипсг'з & ЭстспНа (РеЬ. 2013), 1-11, доступен в режиме онлайн по адресу Ηίίρ://ύχ.Ηοΐ.οΓ§/10.1016/). _]а1г.2012.11.008).

[¹⁸Р]-Т807 подходит для обнаружения и/или количественного определения отложений 1ан у пациентов (Еаг1у с1шюа1 РЕТ шадшд ΐΌδΐιΙΙδ \νί11ι 1йс гюус1 РНР-!аи габюПдапб [Р-18]-Т807, СЫсп с! а1., ί. Акйштсгк Όίδ. 1 января 2013; 34(2):457-68).

Существует несколько потенциальных преимуществ визуализации 1аи в головном мозге с помощью [¹⁸Р]-Т807. Визуализация Таи оптимизирует диагностику посредством определения потенциальных пациентов с высоким содержанием 1аи в головном мозге, которые могут иметь повышенный риск развития ΑΌ. Визуализация с помощью [¹⁸Р]-Т807 также станет подходящей для контролирования накопления 1аи и/или прогрессирования ΑΌ, и при появлении анти-1аи медикаментозных средств лечения визуализация 1аи может обеспечить мощный инструмент для мониторинга лечения. Узлы, содержащие !аи, сначала появляются в тех областях головного мозга, которые очень тесно связаны с памятью, и патологоанатомические исследования демонстрируют, что указанные узлы еще сильнее, чем тромбоциты, могут коррелировать с познавательной функцией. Следовательно, востребованы простые неинвазивные способы обнаружения и/или количественного определения отложений 1аи у пациентов. (См. М. Магиуата с! а1., 1тадтд ο£ 1ан ра^Ыду ίη а СиюраШу тοиδс тοάс1 апб ίη ЛСНсппсг ρаί^сηΐδ ^трагсй ίο гюгта1 ^ηίτοϊδ, №игоп, 79: 1094-1108, 2013, С. Μπίΐιίδ апб XV. К1ипк, 'Зтадшд Таи ^сροδ^!δ Ιη νίνο: Ргодн^ ίη Ую\ушд Μοκ ο£ ТЬс Р^οΐсορЬаίу Рю!игс, №игоп, 79: 1035-10-37, 2013).

Следовательно, необходима также улучшенная технология, совершенствующая возможность визуализации !аи у пациентов, для улучшения клинических показателей и расширения эффекта диагностических !аи-визуализирующих агентов.

Способы радиохимического синтеза [¹⁸Р]-Т807 известны в данной области техники. δΐιοι.ιρ с! а1. приводят способ, в котором соединение-предшественник в незащищенной форме или его трет-бутил-7(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-5-карбоксилат помечают радиоактивным изотопом по реакции с ¹⁸Р с изократической очисткой методом ВЭЖХ (I. ЬаЬс1 Сотрб. Кабюрйатт (2013)).

!-Βοс версия указанного предшественника, а именно трет-бутил-7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Нпиридо[4,3-Ь]индол-5-карбоксилат, изображена ниже:

- 1 028426

Х1а е1 а1. описывают способ, в котором соединение-предшественник представляет собой 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол, представленный ниже:

Η ΝΟ₂

Х1а е1 а1. описывают, что 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол помечают радиоактивным изотопом ¹⁸Р, используя вторую стадию с порошкообразным железом/муравьиной кислотой в отдельной пробирке для восстановления нитрогруппы оставшегося предшественника до соответствующего 2-аминопиридинового производного, что облегчает выделение с помощью ВЭЖХ ([(18)Р]-Т807, а иоуе1 1аи ροδΐΐτοη ет188юи ЮтодгарНу ипадшд адет Гот АОНеипег'з Шеазе. АОНеипег'з & Эетеийа (РеЬ. 2013) 1-11, доступен в режиме онлайн по адресу Ьйр://бхДог0т§/10.1016/)..)а17.2012.11.008).

Несмотря на то что указанные способы обеспечивают средство получения [¹⁸Р]-Т807, они имеют технические признаки, которые могут быть улучшены разработкой инновационных синтетических реагентов и способов синтеза [¹⁸Р]-Т807 для применения в клинической визуализации. Улучшенные агенты, способы получения [¹⁸Р]-Т807 и визуализирующие составы с требуемыми радиохимическими и/или радиофармацевтическими свойствами станут подходящими для клинической визуализации 1аи. Указанная технология обеспечит улучшение обнаружения, диагностики, мониторинга и/или контроля течения АЭ и других таупатий. Усовершенствованные соединения-предшественники для синтеза [¹⁸Р]-Т807, имеющие преимущественные радиосинтетические свойства, обеспечат улучшенный доступ к [¹⁸Р]-Т807, одновременно исключая проблемы, связанные с известными предшественниками, и, следовательно, обеспечат создание улучшенных средств получения [¹⁸Р]-Т807 и его улучшенных составов.

В настоящем изобретении предложено применение соединений формулы I, 1а или 1Ь для получения радиофармацевтического агента [¹⁸Р]-Т807 для визуализации 1аи у людей. В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы получения соединений формулы I, 1а или 1Ь. В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы получения [¹⁸Р]-Т807 из соединений формулы I, 1а или 1Ь. Особенно предпочтителен способ получения [¹⁸Р]-Т807 из соединения формулы 1а. В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая [¹⁸Р]-Т807, полученный из соединения формулы I, 1а или 1Ь, и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель. В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая [¹⁸Р]Т807, полученный из соединения формулы I, О или ]Ъ, составленный в рецептуру со смесью 10% (об./об.) раствора этанола/90% мас./об. (0,9% водного хлорида натрия), предпочтительно для применения у людей. В настоящем изобретении предложены также способы визуализации 1аи, включающие введение пациенту обнаруживаемого количества [¹⁸Р]-Т807, полученного из соединения формулы I, О или ]Ъ, или его композиции.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I

где [анион]^- представляет собой подходящий анионный противоион.

Подходящие анионные противоионы включают ненуклеофильные анионы, такие как органические сульфонаты или тартрат. Органический сульфат предпочтительно представляет собой алкилсульфонат или арилсульфонат.

В настоящем изобретении дополнительно предложено соединение формулы I, где [анион]^- представляет собой алкилсульфонат или арилсульфонат. Алкилсульфонаты согласно настоящему изобретению включают С1-С₄-алкилсульфонат. Арилсульфонаты согласно настоящему изобретению включают фенилсульфонат, где фенильная группа необязательно замещена один раз С1-С₄-алкилом, галогеном или нитрогруппой.

Конкретные значения С1-С₄-алкилсульфоната включают метансульфонат (мезилат) и этансульфонат. Конкретные значения фенилсульфоната включают бензолсульфонат, 4-метилбензолсульфонат (тозилат), 4-бромбензолсульфонат и 4-нитробензолсульфонат. Другой подходящий анионный противоион представляет собой трифторметилсульфонат (СР₃8О₃ ^-).

- 2 028426

Предпочтительное соединение согласно настоящему изобретению представляет собой соединение формулы Та, где [анион]^- представляет собой 4-метилбензолсульфонат:

Предпочтительное соединение согласно настоящему изобретению представляет собой соединение формулы ТЬ, где [анион]^- представляет собой метансульфонат:

Соединения формул Т, Та и ТЬ подходят, например, для синтеза соединения формулы ТТ

II

Соединение формулы ТТ называют также [^1δΡ]-Τ807.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы ТТ, полученное из соединения формулы Т:

В настоящем изобретении дополнительно предложено соединение формулы ТТ, полученное из соединения формулы Та или формулы ТЬ.

В настоящем изобретении предложен способ получения соединения формулы

включающий взаимодействие 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7-ил)-М,М,Мтриметилпиридин-2-аминия 4-метилбензолсульфоната, представленного формулой

с источником [¹⁸Р]фторида.

Следующие схемы, способы получения и примеры представлены для лучшего осуществления практического осуществления настоящего изобретения. Подходящие условия реакций для стадий указанных схем, способов получения и примеров общеизвестны в данной области техники, и опытным специалистам понятны соответствующие модификации условий реакций, включая замену растворителей и совместных реагентов.

- 3 028426

Общая химическая информация

Соединение формулы II может быть получено из соединения формулы I. Более конкретно, как показано на схеме 1, соединение формулы Л сначала подвергают реакции с подходящим источником [¹⁸Р]фторида, таким как [¹⁸Р]фторид криптанда 2.2.2-К₂СО₃, в присутствии основания, такого как карбонат калия. Реакцию обычно проводят в растворителе, таком как ДМСО, ацетонитрил и их смеси. Полученное Ν-защищенное [¹⁸Р] промежуточное соединение подвергают реакции с подходящей кислотой, такой как водный раствор хлористо-водородной кислоты, в растворителе, таком как ДМСО и вода, с получением соединения формулы II.

Соединение формулы I может быть получено из соединения формулы II. Более конкретно, соединение III подвергают реакции с активатором, таким как п-толуолсульфоновый ангидрид (тозиковый ангидрид) или трифторуксусный ангидрид, и триметиламином в растворителе, таком как метиленхлорид, с получением соединения формулы Л, где [анион]^- представляет собой 4-метилбензолсульфонат или, в альтернативном варианте, трифторацеатат. Использование пиридина, триазола, триалкил-или гетероариламинов приводит к получению пиридиния, триазолия, триалкиламмония или гетероциклических аммониевых соединений, соответственно. Соединение формулы III может быть получено из соединения формулы IV. Более конкретно, соединение формулы IV подвергают реакции с бис-(пинаколато)дибором в присутствии катализатора на основе переходного металла, такого как аддукт дихлор-1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладия(П) с дихлорметаном в диоксане. Полученный промежуточный сложный пинаколовый эфир подвергают реакции с 3-бромпиридин-1-оксидом в присутствии катализатора, такого как тетракистрифенилфосфинпалладий(П), и основания, такого как водный карбонат натрия, с получением соединения формулы III. Реакцию обычно проводят в растворителе, таком как метиленхлорид.

Кроме того, опытным специалистам понятно, что в некоторых случаях порядок введения фрагментов не критичен. Конкретный порядок стадий, необходимых для получения соединений формулы I, зависит от конкретного синтезируемого соединения, исходного соединения и относительной подвижности замещенных фрагментов, что понятно опытным химикам. Опытным специалистам понятно, что не все заместители совместимы со всеми условиями реакций. Указанные соединения могут быть защищены или модифицированы в удобной точке синтеза по способам, хорошо известным в данной области техники. Промежуточные соединения и конечные продукты согласно настоящему изобретению могут быть при необходимости дополнительно очищены с помощью общепринятых технологий, таких как перекристаллизация или хроматография на твердых подложках, таких как силикагель или оксид алюминия.

Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно получены в виде радиофармацевтических композиций, которые вводят различными способами. Предпочтительно указанные композиции предназначены для внутривенного введения. Указанные фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, РепипдЮп: Тйе 8с1спсс апб Ргасбсе о£ Рйатшасу (А. Оеппато, е! а1., ред., 19-е изд., Маск РиЬйкЛпд Со., 1995).

Предпочтительные составы согласно настоящему изобретению представляют собой составы [¹⁸Р]-Т807, полученного из соединений формулы I, и особенно предпочтительны составы [¹⁸Р]-Т807, полученного из соединения формулы Л. Особенно предпочтителен [¹⁸Р]-Т807, полученный из соединения формулы Л в соответствии со способами, описанными на схеме 1. Особенно предпочтителен [¹⁸Р]-Т807,

- 4 028426 полученный из соединения формулы 1а в соответствии со способами, описанными в примерах 1 и 2. Предпочтительный состав [¹⁸Ρ]-Τ807 получают из соединения формулы I и объединяют со смесью 10% (об./об.) этанола/90% мас./об. (0,9% водного хлорида натрия). Особенно предпочтительный состав [¹⁸Ρ]-Τ807 получают из соединения формулы 1а и объединяют со смесью 10% (об./об.) этанола/90% мас./об. (0,9% водного хлорида натрия). Предпочтительный состав [¹⁸Ρ]-Τ807 получают из соединения формулы I и объединяют со смесью 10% (об./об.) этанола/90% (21 мМ фосфат натрия). Предпочтительный состав [¹⁸Ρ]-Τ807 получают из соединения формулы 1а и объединяют со смесью 10% (об./об.) этанола/90% (21 мМ фосфат натрия). Другой вариант реализации настоящего изобретения представляет собой состав [¹⁸Ρ]-Τ807, полученного из соединения формулы 1а и составленного в рецептуру со смесью 9% (об./об.) этанола, 1% (мас./об.) КоШрйот Н§ 15 и 90% (об./об.) (0,9% водного хлорида натрия). Особенно предпочтителен [¹⁸Ρ]-Τ807, полученный из соединения формулы 1а в соответствии со способами, описанными на схеме 1, и составленный в рецептуру со смесью 10% (об./об.) этанола/90% мас./об. (0,9% водного хлорида натрия). Особенно предпочтителен [¹⁸Ρ]-Τ807, полученный из соединения формулы 1а в соответствии со способами, описанными в примерах 1 и 2, и объединенный со смесью 10% (об./об.) этанола/90% мас./об. (0,9% водного хлорида натрия).

Было обнаружено, что новые триметиламмониевые соединения согласно настоящему изобретению неожиданно и вопреки ожиданиям являются преимущественными для применения в качестве синтетических предшественников для радиохимического синтеза [¹⁸Ρ]-Τ807 для применения для визуализации, включая клиническую визуализацию у людей. Предпочтительное соединение, соединение формулы 1а, обладает сочетанием особенно подходящих свойств в качестве предшественника для синтеза [¹⁸Ρ]-Τ807, включая растворимость, реакционную способность, более короткое время реакции, возможность разделения и выход реакции. Указанное неожиданно преимущественное сочетание улучшенных свойств обеспечивает эффективный и действенный клинический способ радиохимического синтеза [¹⁸Ρ]-Τ807, который облегчает визуализацию нагрузки (аи на организм пациентов. Растворимость соединенияпредшественника обеспечивает возможность выхода указанного соединения в раствор для эффективного протекания реакции с образованием [¹⁸Ρ]-Τ807. В отличие от 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3Ь]индола, соединение формулы 1а легко растворимо в ДМСО и, следовательно, не требует обработки ультразвуком или нагревания для перехода соединения в раствор, как это было необходимо в известных способах с применением предшественника 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола.

Синтез [¹⁸Ρ]-Τ807 из 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола по способу без применения железа также имеет недостаток, который заключается в том, что оставшийся непрореагировавший 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол выпадает в осадок во время водной обработки реакционной смеси. Указанный осадок может приводить к блокированию течения жидкости и, в конечном итоге, может приводить к невозможности получения продукта. Напротив, улучшенная растворимость соединения формулы 1а обеспечивает снижение и/или исключение риска производственного сбоя, обусловленного образованием осадка. Производственные сбои представляют собой известную проблему в клинической практике радиохимического синтеза и могут ограничивать количество партий, получаемых каждый день, и, следовательно, ограничивать количество пациентов, для которых может быть проведена визуализация за определенный период времени. Таким образом, производственные сбои могут существенно влиять на стоимость, доступность и возможность визуализации пациента.

Выход продукта представляет собой другой важный аспект клинического процесса радиохимического синтеза для получения [¹⁸Ρ]-Τ807. Способ с применением соединения формулы 1а обеспечивает получение клинически подходящего выхода продукта. Напротив, бром- или хлорзамещенные предшественники имеют очень низкий скорректированный выход (<5%), поскольку бром- и хлорзаместители с трудом поддаются вытеснению в обычных условиях нуклеофильного ароматического фторирования без добавления носителя. В то время как данный аспект сам по себе является существенным и важным, указанное свойство, обнаруженное в комбинации с другими преимущественными свойствами соединения формулы 1а, обеспечивает неожиданное улучшение клинических процессов радиохимического синтеза для получения [¹⁸Ρ]-Τ807.

Кроме того, на выход продукта может негативно влиять сложность разрушения оставшегося непрореагировавшего 7-(6-нитропиридин-3 -ил)-5Н-пиридо [4,3-Ь]индола.

Например, в процессе, в котором для получения [¹⁸Ρ]-Τ807 использовали 7-(6-нитропиридин-3-ил)5Н-пиридо[4,3-Ь]индол и использовали железо, скорректированные выходы, полученные на двух разных производственных площадках, составили 42, 48 и 25% в Калвер-Сити и 8, 6 и 19% в Норт-Уэльсе. Для сравнения, способ компании §1ешеп8 без применения железа обеспечивает получение скорректированных выходов 71, 45, 70, 55 и 54%. Полученные результаты указывают на то, что при разрушении 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола может происходить сопутствующее разрушение [¹⁸Ρ]-Τ807, что приводит к противоречивости выходов и более низким скорректированным выходам. Напротив, при использовании соединения формулы 1а необходимо лишь удалить Вос-защитную группу в более мягких химических условиях и отделить положительно заряженное соединение формулы 1а, не содержащее Вос-защиты, от [¹⁸Ρ]-Τ807, что обеспечивает стабильно более высокие скорректированные выходы продукта на уровне 45-55%.

- 5 028426

Возможность эффективной и действенной очистки продукта [¹⁸Ρ]-Τ807 представляет собой третий важный атрибут клинического процесса радиохимического синтеза для получения [^1δΡ]-Τ807, и на данный аспект может влиять предшественник, используемый в процессе. В способе получения [¹⁸Ρ]-Τ807 с применением 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола необходимо разрушение оставшегося непрореагировавшего 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола для облегчения хроматографической очистки продукта [¹⁸Ρ]-Τ807. Это обусловлено тем, что 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3Ь]индол и [¹⁸Ρ]-Τ807 имеют сходные хроматографические свойства, что приводит к проблематичности их разделения. В способе компании §1ешеи8 с использованием 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3Ь]индола без применения железа, в котором после реакции сохраняется высокое содержание 7-(6-нитропиридин-3-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола, состав подвижной фазы для ВЭЖХ ограничен необходимостью меньшего содержания органического растворителя для обеспечения возможности разделения. Такой относительный недостаток органического растворителя приводит к элюированию [¹⁸Ρ]-Τ807 из разделительной колонки за время, составляющее примерно 27 мин. Указанное относительно продолжительное время является недостатком для фармацевтических препаратов, меченных короткоживущим радионуклидом, таких как [¹⁸Ρ]-Τ807. Напротив, предложенный способ с применением соединения формулы 1а обеспечивает возможность элюирования [¹⁸Ρ]-Τ807 за 8 мин с небольшим содержанием совместно элюирующихся примесей или без них. Кроме того, значительная разница хроматографических свойств [¹⁸Ρ]-Τ807 и побочного продукта, образованного при использовании соединенияпредшественника формулы 1а, также способствует применению картриджной очистки, в отличие от более длительных и трудоемких процессов ВЭЖХ. Таким образом, применение соединения формулы 1а может обеспечивать также упрощение производственного процесса. Указанные различия могут обеспечивать существенно более короткое время получения и увеличение производственных возможностей клинического радиохимического синтеза, что может иметь существенное позитивное влияние на стоимость, доступность и возможность визуализации пациента.

Таким образом, предложенный способ с применением соединения формулы 1а, 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7-ил)-Х,Х,Х-триметилпиридин-2-аминия 4-метилбензолсульфоната, имеет неожиданные и важные практические преимущества для обеспечения безотказности и производственной возможности клинического радиохимического синтеза визуализирующих доз [¹⁸Ρ]-Τ807. Большее количество партий, полученных в результате улучшения производственных возможностей и безотказности, может иметь существенное позитивное влияние на визуализацию 1аи у пациентов.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1. Пик ВЭЖХ, соответствующий профилю 7-[¹⁸Р]фтор-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола, [¹⁸Ρ]-Τ807.

На верхней диаграмме для меченого [¹⁸Ρ]-Τ807 (гамма-детектор ВЭЖХ) изображена радиохроматограмма 7-(6-[¹⁸Р]фтор-3-пиридил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола, [¹⁸Ρ]-Τ807. На нижней диаграмме для меченого [¹⁸Ρ]-Τ807 (УФ-детектор ВЭЖХ) изображена ультрафиолетовая хроматограмма 7-(6-[¹⁸Р]фтор-3пиридил)-5Н-пиридо [4,3-Ь] индола, [¹⁸Ρ]-Τ807.

Фиг. 2. Внедрение метки [¹⁸Ρ]-Τ807 в 1аи в срезах (10 мкм) ткани лобных долей головного мозга 1аи-положительных пациентов с АО после вскрытия, примерно 20 мкКи [¹⁸Ρ]-Τ807 на одно предметное стекло.

В области серого вещества (СМ) наблюдают сильный радиоавтографический сигнал [¹⁸Ρ]-Τ807, и наличие 1аи в указанных областях подтверждают иммунным окрашиванием !аи. Неспецифический или фоновый сигнал [¹⁸Ρ]-Τ807 показан в области белого вещества (^М), и он является низким. На специфичность радиоавтографического сигнала в отношении связывания с нативными агрегатами !аи указывает блокирующий эффект 1 мкМ холодного Т807.

Примеры и способы получения

Все реакции проводили в атмосфере азота, если не указано иное. Продукты очищали с помощью автематической системы флэш-хроматографии Τе1еάуηе Рео®. Реагенты, растворители и поставщики известны опытным химикам.

Спектры ¹Н и ¹³С ЯМР записывали на спектрометре Вгикег ΗΩ Ауапсе III 400 в СЭС1₃, (СатЬпбде РоЮре ЬаЬогаФпек, кат. № ОЬМ-7-100, пропущенном через щелочной оксид алюминия непосредственно перед применением) или ДМСО-ф, (СатЬпбде РоЮре ЬаЬогаФпек, кат. № ОЬМ-10-25). Данные массспектрометрии высокого разрешения (МСВР) получали на масс-спектрометре \Уа1ег5 ΟΤοΓ. используя режим сканирования с положительной электрораспылительной ионизацией. Элементарный анализ проводили в компании Са1ЬгаИй ЬаЬогаФпек (СЬ1) (Са1Ьгайй 1пс., 2323 §усатоге Эпуе, Ноксвилл, штат Теннесси, 37921) по способу СЬ1 МЕ-12, а анализ палладия проводили по способу СЬ1 МЕ-70 (оптикоэмиссионная спектроскопия индуктивно связанной плазмы на ОЭС анализаторе 5300 1СР или его эквиваленте), записывая результаты в м.д. (см.: Са1Ьгайй 1пс., 2323 §усатоге Эпуе, Ноксвилл, штат Теннесси, 37921).

Названия соединений согласно настоящему изобретению созданы с помощью программы §утух версии 3.2.ΝΕΤ с функциональной возможностью создания названий по ИЮПАК.

- 6 028426

Сокращения имеют общее и обычное применение, известное специалистам в данной области техники, и некоторые сокращения, использованные в настоящем документе, имеют следующие значения:

Вое или ВОС - трет-бутилкарбонил;

(Вос)₂О - ди-трет-бутилкарбонат; шс - широкий синглет; д - дублет;

ΌΑΌ - диодно-матричный детектор; дд - дублет дублетов;

ΌΜΑΡ - диметиламинопиридин;

ДМСО-бб - гексадейтеродиметилсульфоксид;

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография;

МСВР - масс-спектрометрия высокого разрешения;

ЖХМС - жидкостная хромато-масс-спектрометрия;

ЯМР - ядерный магнитный резонанс; м.д. - миллионные доли;

ОТоГ - квадрупольное время пролета; с - синглет; т - триплет;

ТГФ - тетрагидрофуран;

СВЭЖХ - сверхэффективная жидкостная хроматография;

СЕ - компания Сеиета1 Е1ес1пс;

Κι - константа ингибирования;

ПЭТ - позитронно-эмиссионная томография;

Т_1/2 - период полувыведения;

%ГО/г - процент введенной дозы на 1 г ткани;

И8Р - фармакопея США;

об./об. - соотношение объема к объему;

\νΕΙ - вода для инъекций.

Способ получения 1. Синтез трет-бутил-7-бром-5Н-пиридо[4,3-Ъ]индол-5-карбоксилата, (IV).

В круглодонную колбу загружали 7-бром-5Н-пиридо[4,3-Ъ]индол (15,00 г, 60,7 ммоль), ди-трет-бутилдикарбонат (19,87 г, 91,1 ммоль, 1,5 экв.) и диметиламинопиридин (0,204 г, 1,8 ммоль, 0,03 экв.). Добавляли тетрагидрофуран (550 мл) и перемешивали полученный коричневый раствор при комнатной температуре. Завершение реакции определяли по ЖХМС через 4 ч. Реакционную смесь концентрировали до коричневого твердого вещества. Твердое вещество повторно суспендировали примерно в 500 мл гексанов (при перемешивании), выделяли фильтрованием, промывали гексанами, а затем высушивали под высоким вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде темнокоричневого твердого вещества (18,03 г, 86%). Полученный материал использовали на следующей стадии без очистки.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆): δ 9,37 (д, 1=1,2 Гц, 1Н), 8,59 (д, +=6,0 Гц, 1Н), 8,36 (д, 1=1,2 Гц, 1Н), 8,19 (дд, 1=8,4 Гц, 1=0,4 Гц, 1Н), 7,99 (дд, +=6,0 Гц, 1_т=1,2 Гц, 1Н), 7,59 (дд, +=8,4 Гц, 1_т=1,6 Гц, 1Н), 1,66 (с, 9Н).

¹³С ЯМР (100,6 МГц, СОС1₃): δ 150,06, 147,46, 143,37, 142,47, 139,07, 127,07, 122,51, 122,71, 121,27, 120,92, 119,67, 110,97, 85,67, 28,24.

МСВР: Рассчитано для С1₆Н₁₅Х₂О₂Вт (М+Н)' 347,0395, найдено 347,0400, погрешность = 1,4 м.д.

Способ получения 2. Синтез 3-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ъ]индол-7-ил)пиридин-1оксида, (III).

Суспензию трет-бутил-7-бром-5Н-пиридо[4,3-Ъ]индол-5-карбоксилата (IV) (20,41 г, 58,8 ммоль, 1,0 экв.), бис-(пинаколато)дибора (22,53 г, 88,7 ммоль, 1,5 экв.) и ацетата калия (19,55 г, 199,2 ммоль, 3,4 экв.) в диоксане (590 мл) продували азотом в течение 15 мин и обрабатывали аддуктом дихлор-1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроценпалладия (II) с дихлорметаном (4,82 г, 5,91 ммоль, 0,1 экв.).

- 7 028426

Смесь продували азотом еще 10 мин и перемешивали реакционную смесь при 80°С в течение ночи. Через

17.5 ч данные ЖХМС указывали на завершение реакции с получением сложного пинаколового эфира (трет-бутил-7-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-5-карбоксилата), составляющего 90% реакционной смеси (по УФ). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь продували азотом в течение 15 мин и добавляли 3-бромпиридин-1-оксид (15,76 г,

90.6 ммоль, 1,5 экв.), карбонат натрия (156 мл 2 М раствора в дистиллированной воде, 312 ммоль, 5,3 экв.) и тетракис-трифенилфосфинпалладий(П) (3,40 г, 2,9 ммоль, 5 мол.%). Реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 7,5 ч, охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали до темно-коричневого/черного остатка, который суспендировали в 90:10 растворе метиленхлорида:метанола (500 мл) и обрабатывали ультразвуком, а затем отфильтровывали. Соли промывали чередующимися порциями метиленхлорида (2x250 мл) и метанола (2x250 мл), концентрировали и предварительно абсорбировали на примерно 65 г силикагеля. Полученный материал разделяли и очищали на двух силикагелевых флэш-колонках по 330 г, используя градиент от 100:0 (удержание в течение 2 мин) до 95:5 метиленхлорида:метанола за 10 мин (удержание в течение 8 мин), затем сразу повышая до 90:10 метиленхлорида:метанола (удержание в течение 25 мин). Полученный материал концентрировали и высушивали под высоким вакуумом с получением серо-черного твердого вещества (9,01 г, 31%). Полученный материал растворяли в 90:10 смеси метиленхлорида:метанола (400 мл) и перемешивали со смолой ОнайгаО-МР (26,05 г, 26,05-39,08 ммоль тиола, 1-1,5 экв.) в течение ночи. Смесь отфильтровывали и промывали смолу 90:10 смесью метиленхлорида:метанола (4x200 мл). Фильтраты концентрировали, повторно растворяли в 90:10 смеси метиленхлорида:метанола (400 мл) и перемешивали со свежей смолой (6,48 г, 6,48-9,72 ммоль тиола, 0,26-0,39 экв.) в течение ночи. Смесь отфильтровывали и промывали смолу 90:10 смесью метиленхлорида:метанола (3x125 мл). Фильтраты концентрировали и высушивали с получением бежевого твердого вещества. Твердое вещество растворяли в теплом этаноле (800 мл, примерно 75°С), а затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры в течение ночи. Полученную смесь дополнительно охлаждали до 4°С. Через 7 ч твердое вещество выделяли фильтрацией, промывали холодным этанолом и высушивали под высоким вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого твердого вещества (6,29 г). Таким же образом выделяли вторую партию кристаллов (0,714), получая в общем 7,00 г (выход 78%).

Затем из объединенных партий 3-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7-ил)пиридин1-оксида удаляли палладий. Несколько партий 3-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7ил)пиридин-1-оксида объединяли (21,57 г, 59,7 ммоль) и растворяли в 90:10 смеси метиленхлорида:метанола (990 мл). Золотисто-коричневый раствор обрабатывали смолой ОнайгаО-МР (56,0 г, 56,0-84,0 ммоль тиола, 0,9-1,4 экв.) в течение ночи. Смесь отфильтровывали и промывали смолу 90:10 смесью метиленхлорида:метанола (3x200 мл). Фильтраты концентрировали и высушивали с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества кремового цвета (20,82 г, выход 97%).

Ή ЯМР (400 МГц, ΟΌΟ1₃): δ 9,31 (д, 1=0,8 Гц, 1Н), 8,67 (д, 1=5,6 Гц, 1Н), 8,64 (д, 1=1,2 Гц, 1Н), 8,59 (тд, 1_т=1,6 Гц, 1р=0,4 Гц, 1Н), 8,23 (ддд, 1_О=6,4 Гц, 1_т=1,6 Гц, 1_т=1,2 Гц, 1Н), 8,17 (дд, 1_о=8,0 Гц, ф=0,4 Гц, 1Н), 8,10 (дд, 1о=5,6 Гц, 1т=1,2 Гц, 1Н), 7,60 (дд, ф=8,0 Гц, 1т=1,6 Гц, 1Н), 7,58 (ддд, Ц=6,4 Гц, 1т=1,6 Гц, 1_р=0,8 Гц, 1Н), 7,38 (ддд, 1_о=8,0 Гц, 1_т=6,4 Гц, 1_р=0,4 Гц, 1Н), 1,79 (с, 9Н).

¹³С ЯМР (100,6 МГц, ΟΌΟ1₃): δ 150,23, 147,74, 143,83, 142,90, 140,60, 139,13, 137,94, 137,77, 135,00, 125,88, 124,61, 124,47, 122,66, 121,25, 120,82, 115,11, 111,03, 85,68, 28,31.

МСВР: рассчитано для С₂1Н₁₉Ы₃О₃ (М+Н)+ 362,1505, найдено 362,1515, погрешность = 2,8 м.д.

Пример 1. Синтез 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7-ил)-П,П,Птриметилпиридин-2-аминия 4-метилбензолсульфоната, (1а).

К перемешанному раствору 3-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7-ил)пиридин-1оксида (6,10 г, 16,9 ммоль, 1,0 экв.) в метиленхлориде (435 мл) при комнатной температуре одной порцией добавляли п-толуолсульфоновый ангидрид (12,50 г, 38,3 ммоль, 2,0 экв.). Оранжево-коричневая реакционная смесь становилась однородной, и ее перемешивали в течение 30 мин. Медленно добавляли 1,0 М раствор триметиламина в тетрагидрофуране (335 мл, 335 ммоль, 20,0 экв.) (примечание: небольшой экзотермический эффект). Полученный раствор перемешивали в течение 30 мин, а затем обрабатывали дополнительным количеством п-толуолсульфонового ангидрида (5,49 г, 16,9 ммоль, 1,0 экв.), добавленного одной порцией. Через 30 мин добавляли третью порцию п-толуолсульфонового ангидрида (5,49 г, 16,9 ммоль, 1,0 экв.). Еще через 30 мин добавляли последнюю порцию п-толуолсульфонового ангидрида (5,49 г, 16,9 ммоль, 1,0 экв.) и перемешивали смесь/раствор в течение 30 мин. В это время

- 8 028426 данные ЖХМС указывали на полное расходование исходного материала (т//=306, М-ТВи). Реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением до светло-желтого твердого вещества. Твердое вещество суспендировали в метиленхлориде (500 мл) и дважды экстрагировали водой (300 мл, 200 мл). Водные слои объединяли и экстрагировали метиленхлоридом (2x200 мл). Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия, отфильтровывали и концентрировали до светлокоричневого/оранжевого твердого вещества. Твердое вещество растворяли в метиленхлориде (75 мл) и по каплям добавляли к быстро перемешиваемому диэтиловому эфиру (600 мл). Полученное твердое вещество выделяли фильтрацией и промывали диэтиловым эфиром. Процесс повторного суспендирования повторяли еще 1-3 раза, сколько необходимо для удаления дополнительных примесей, обусловленных тозилом. При необходимости материал дополнительно очищали на силикагелевой колонке массой 40 г (2-4 г соединения), используя градиент от 100:0 (удержание в течение 3 мин) до 90:10 метиленхлорида:метанола за 3 мин с удержанием в течение 3 мин, с последующим повышением до 80:20 метиленхлорида:метанола за 3 мин и удержанием в течение 20 мин. Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли, концентрировали, повторно растворяли в метиленхлориде, отфильтровывали для удаления остаточного силикагеля, а затем концентрировали. После высушивания под высоким вакуумом получали соединение 1а в виде бежевого твердого вещества (6,73 г, 69%).

Очистка 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7-ил)-Х,Х,Х-триметилпиридин-2аминия 4-метилбензолсульфоната.

Несколько партий 5-(5 -(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо [4,3-Ь] индол-7 -κί)-Ν,Ν,Ν триметилпиридин-2-аминия 4-метилбензолсульфоната объединяли (11,25 г) и растворяли в метиленхлориде (500 мл). Мутную оранжевую смесь высушивали над Ν;·ι₂8Θ₄ и отфильтровывали через Се1йе®. Осадок на фильтре промывали метиленхлоридом (100 мл). Полученный оранжевый раствор по каплям добавляли к быстро перемешиваемому диэтиловому эфиру (2 л). Выпавшее в осадок твердое вещество выделяли фильтрацией и промывали диэтиловым эфиром (1 л). После высушивания под высоким вакуумом получали титульное соединение в виде бежевого твердого вещества (10,75 г, выход 96%).

Ή ЯМР (400 МГц, СЭС1₃): δ 9,31 (дд, К0,5 Гц (2), 1Н), 8,77 (дд, 1=2,4, 0,6 Гц, 1Н), 8,67 (дд, 1=5,9, <0,5 Гц, 1Н), 8,63 (дд, 1=1,6, 0,5 Гц, 1Н), 8,51 (дд, 1=8,7, 0,6 Гц, 1Н), 8,16 (дд, 1=8,1, 0,5 Гц, 1Н), 8,13 (дд, 1=8,7, 2,4 Гц, 1Н), 8,11 (дд, 1=5,9, <0,5 Гц, 1Н), 7,80 (пара-дублет, 1=8,1 Гц, 2Н), 7,58 (дд, 1=8,1, 1,6 Гц, 1Н), 7,13 (пара-дублет, 1=8,1 Ите, 2Н), 3,94 (с, 9Н), 2,28 (с, 3Н), 1,78 (с, 9Н).

¹³С ЯМР (100,6 МГц, СЭС1₃): δ 156,0, 150,2, 147,6, 146,6, 144,0, 143,9, 142,8, 139,6, 139,3 (2), 139,2, 135,2, 128,7, 126,0, 124,3, 123,1, 121,3, 120,9, 116,0, 115,3, 111,1, 85,7, 55,4, 28,3, 21,2.

МСВР: Рассчитано для С₂₄Н₂₇^О₂ (исходный ион, М+Н)' 403,2134, найдено 403,2129, погрешность = -1,2 м.д.

Элементарный анализ (способ ОЬТ МЕ-12): рассчитано С 64,79 Н 5,96 N 9,75, найдено С 63,88/63,44 Н 6,05/5,90 N 9,34/9,24.

Анализ Ρά (способ ОЬТ МЕ-70): 4,6 м.д. (Оа1ЬгайЪ Тпс., 2323 8усатоте Эпес, Ноксвилл, штат Теннесси, 37921).

Пример 2. Радиохимический синтез 7-(6-[¹⁸Р]фтор-3-пиридил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола, [¹⁸Ρ]-Τ807.

Титульное соединение получали при помощи автоматического устройства для радиохимического синтеза, такого как автоматическое устройство для радиохимического синтеза ОЕ ТКАСЕК1аЬ ΡΧ_ρ-Ν. Типичный выход с поправкой на радиоактивный распад составлял 45-55% активного [¹⁸Р]фторида, остающегося на карбонатном картридже 8ер-Рак® ЫдЫ Ассе11™ Р1и8 (ОМА) (46 мг сорбента на один картридж, размер частиц 40 мкм) при элюировании в реакционный сосуд с использованием 0,8 мл водного раствора криптанда 2.2.2-К2СО3 [криптанд 2.2.2 (7 мг) и карбоната калия (0,75 мг) в νΡΊ (вода для инъекций, 0,4 мл) и ацетонитриле (0,4 мл)]. Элюированное активное соединение высушивали нагреванием при 70°С в токе азота под вакуумом в течение 4,5 мин. Затем температуру повышали до 100°С и выдерживали еще 1 мин. Ток азота отключали и высушивали активное соединение под вакуумом в течение 4 мин с получением безводного [¹⁸Р]фторида криптанда 2.2.2-К2СО₃.

В реакционный сосуд добавляли раствор 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7ил)-ННН-триметилпиридин-2-аминия 4-метилбензолсульфоната [1,5 мг в безводном ДМСО (2 мл)] и выдерживали полученную смесь при 110°С в течение 5 мин, затем проводили снятие защиты с помощью 1 мл 3н. раствора НС1 (водн.) при 100°С в течение 5 мин. После охлаждения до 50°С неочищенное титульное соединение нейтрализовали с помощью 7 мл 0,5 М раствора №ГОН (водн.) (3,5 мл 1н. раствора №ОН (водн.) и 3,5 мл воды для инъекций, νΡΊ). Полученную смесь пропускали через обращеннофазовый картридж Оа818® НЬВ (30 мг сорбента на один картридж, размер частиц 30 мкм). Удержанное неочищенное титульное соединение промывали νΡΊ (5 мл), затем элюировали из картриджа Оа818 НЬВ ЫдйТ ацетонитрилом (1,5 мл). Неочищенный материал разбавляли νπ (3 мл), затем наносили на полупрепаративную колонку С-18 для обращенно-фазовой ВЭЖХ (АдйепТ 2ОКВАХ Есйрке

- 9 028426

ХИВ-С18, 9,4x250 мм, скорость потока = 4 мл/мин.) для очистки (время удержания ~8 мин), используя изократическое элюирование с 40% ацетонитрилом в 10 мМ растворе ацетата аммония в воде.

ВЭЖХ фракцию, содержащую титульное соединение, собирали и разбавляли 30 мл АР1. Затем разбавленный раствор пропускали через обращенно-фазовый картридж §ер-Рак ПдЫ С18 (130 мг сорбента на один картридж, размер частиц 55-105 мкм) и промывали удержанное титульное соединение 5 мл АР1. [¹⁸Р]-Т807 элюировали из картриджа 8ер-Рак С18 Р1и8 ЫдЫ абсолютным спиртом, И8Р (1 мл), затем 0,9% раствором хлорида натрия для инъекций, И8Р (2 мл), в 0,9% раствор хлорида натрия для инъекций, И8Р (7 мл). Раствор лекарственного вещества переносили в пробирку для нерасфасованного продукта (ВРУ) через стерилизующий фильтр с размером пор 0,22 мкм (МШех ОУРУИР, МйНроте 8РОУ013§Ь).

В методе ВЭЖХ анализа использовали изократическое элюирование подвижной фазой 25:75% об./об. ацетонитрила:воды с 0,1% ТФК на колонке С18 для обращенно-фазовой ВЭЖХ при скорости потока 1,0 мл/мин. Систему оснащали двумя детекторами, радиометрическим детектором и УФ-детектором, установленным на 270 нм. Вводили пробы растворов стандартного образца и образца лекарственного продукта. Пики УФ-хроматограмм и радиохроматограмм интегрировали и использовали данные для расчета радиохимической чистоты и удельной радиоактивности, а также для подтверждения радиохимической идентичности. Идентичность титульного соединения подтверждали сопоставлением УФ и радиохроматографического времени удержания при ВЭЖХ, полученного для соединения с меткой ¹⁸Р и нерадиоактивного стандартного образца 7-(6-фтор-3-пиридил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индола. См. фиг. 1.

Пример 3 Пленочная радиоавтография срезов ткани головного мозга, пораженного ЛИ.

Пленочную радиоавтографию срезов ткани головного мозга, пораженного ЛИ, выполняли в соответствии с ранее опубликованными способами (см. Ζ1ι;·ιη§. А., е( а1. Р-18 8Й1Ьеие8 аз РЕТ ипащпд адеп15 £от йеЮсОпд Ье!а-ату1о1Й р1ацие8 ίη (Не Ьтат. 1оигпа1 о£ Мейюша1 СНет181гу, 48:5980-5988, 2005, Ζ1ι;·ιη§, А., е( а1. Р-18 зШЬепез аз РЕТ ипащпд адеп(8 £от атуЫй р1ацие ипащпд. Иис1. Мей Вю1. 2007, 34(1):89-97). Срезы головного мозга, полученные после вскрытия людей с диагнозом ЛИ (лобная доля, 10 мкм), покрывали 0,5 мл [¹⁸Р]-Т807 (в смеси 2,5:2,5:95 = ДМСО:этанол:1Х-фосфатно-солевой буферный раствор (РВ§), примерно 20 мкКи [¹⁸Р]-Т807 на одно предметное стекло) и инкубировали в течение 60 мин при комнатной температуре. Затем проводили последовательные циклы промывания: 2 мин 1Х РВ§, 2 мин 30% этанола/1Х РВ§, 2 мин 70% этанола/1Х РВ§ и 2 мин 1Х РВ§ для удаления несвязанной метки. После высушивания в вытяжном шкафу срезы укладывали на радиочувствительную кассету РирРйт и оставляли на ночь. Происходила запись сигнала радиоавтографии на радиочувствительной пленке, который считывали/визуализировали при помощи биовизуализирующей системы РирРйт РЬЛ-7000. Радиоавтографическую визуализацию 1аи наблюдали в сером веществе ткани головного мозга, пораженного ЛИ, после вскрытия.

На фиг. 2 изображено внедрение метки [¹⁸Р]-Т807 в 1аи в срезах (10 мкм) ткани лобной доли головного мозга (аи-положительных пациентов с ЛИ после вскрытия, примерно 20 мкКи [¹⁸Р]-Т807 на одно предметное стекло. В области серого вещества (ОМ) наблюдали сильный радиоавтографический сигнал [¹⁸Р]-Т807, и наличие 1аи в указанных областях подтверждали иммунным окрашиванием 1аи. Неспецифический или фоновый сигнал [¹⁸Р]-Т807 показан в области белого вещества (АМ), и он является низким. На специфичность радиоавтографического сигнала в отношении связывания с нативными агрегатами 1аи указывает блокирующий эффект 1 мкМ холодного Т807.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы где [анион]^- представляет собой подходящий органический сульфонатный или тартратный анионный противоион.
2. Соединение по п.1 формулы где [анион]^- представляет собой алкилсульфонат или арилсульфонат.
3. Соединение по п.2, представляющее собой 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол7-ил)-Н,И,И-триметилпиридин-2-аминия 4-метилбензолсульфонат, представленный формулой
4. Соединение по п.2, представляющее собой 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол7-ил)-Н,И,И-триметилпиридин-2-аминий метилсульфонат, представленный формулой
5. Способ получения соединения формулы включающий взаимодействие соединения формулы где [анион]^- представляет собой подходящий органический сульфонатный или тартратный анионный противоион, с [¹⁸Р]фторидом.
6. Способ получения соединения формулы включающий взаимодействие 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ь]индол-7-ил)-Н,И,И- с [¹⁸Р]фторидом.

- 11 028426
7. Способ получения соединения формулы включающий взаимодействие 5-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ъ]индол-7-ил)-Н,Ы,Птриметилпиридин-2-аминий-метилсульфоната, представленного формулой с [¹⁸Р]фторидом.
8. Промежуточное соединение для получения соединения по п.1, где указанное промежуточное соединение представляет собой 3-(5-(трет-бутоксикарбонил)-5Н-пиридо[4,3-Ъ]индол-7-ил)пиридин-1оксид, представленный формулой