EA026783B1 - 4-((2-ГИДРОКСИЭТОКСИ)МЕТИЛ)-5-МЕТИЛ-2-МЕТИЛМЕРКАПТО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(4H)-OH - ВЕЩЕСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ПРОТИВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА - Google Patents

4-((2-ГИДРОКСИЭТОКСИ)МЕТИЛ)-5-МЕТИЛ-2-МЕТИЛМЕРКАПТО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(4H)-OH - ВЕЩЕСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ПРОТИВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА Download PDF

Info

Publication number
EA026783B1
EA026783B1 EA201600363A EA201600363A EA026783B1 EA 026783 B1 EA026783 B1 EA 026783B1 EA 201600363 A EA201600363 A EA 201600363A EA 201600363 A EA201600363 A EA 201600363A EA 026783 B1 EA026783 B1 EA 026783B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
methyl
triazolo
methylmercapto
pyrimidin
pyrimidine
Prior art date
Application number
EA201600363A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201600363A8 (ru
EA201600363A1 (ru
Inventor
Олег Николаевич ЧУПАХИН
Владимир Леонидович РУСИНОВ
Сергей Леонидович Деев
Игорь Алексеевич Халымбаджа
Светлана Яковлевна ЛОГИНОВА
Сергей Владимирович БОРИСЕВИЧ
Павел Владимирович СОРОКИН
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Уральский центр биофармацевтических технологий"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Уральский центр биофармацевтических технологий" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Уральский центр биофармацевтических технологий"
Publication of EA201600363A1 publication Critical patent/EA201600363A1/ru
Publication of EA201600363A8 publication Critical patent/EA201600363A8/ru
Publication of EA026783B1 publication Critical patent/EA026783B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Заявляемое изобретение касается разработки нового вещества - 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она, имеющего формулуи предназначенного для лечения лихорадки Западного Нила у людей и животных. Способ получения 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-она, заключающийся в дезацетилировании 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (II) при действии раствора метилата щелочного металла в алифатическом одноатомном спирте, при этом 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-он (II) получают при взаимодействии 5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-она (III) с (2-ацетоксиэтокси)метилацетатом (IV) в присутствии силицирующего средства, например, N,O-бис(триметилсилил)ацетамида (BSA) или гексаметилдисилиламина (HMDS) и триметилсилилтрифторметилсульфоната (TMSOTf) в апротонном растворителе. Применение 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она для лечения лихорадки Западного Нила (ЛЗН).

Description

Заявляемое изобретение касается разработки нового вещества - 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло [ 1,5-а]пиримидин-7 (4Н)-она, имеющего формулу
и предназначенного для лечения лихорадки Западного Нила у людей и животных.
Изобретение относится к области новых биологически-активных веществ и касается соединений, активных против возбудителя лихорадки Западного Нила
Расширение ареалов распространения арбовирусных инфекций привели к ухудшению эпидемической обстановки в Российской Федерации.
С 1999 года на юге России сформировался устойчивый активный очаг лихорадки Западного Нила, поддерживаемый циркуляцией возбудителя среди мелких млекопитающих, птиц, комаров и подтверждаемый наличием иммунного ответа к вирусу Западного Нила у населения (см. Мероприятия по борьбе с лихорадкой Западного Нила на территории Российской Федерации (эпидемиологический надзор, диагностика, клиника, лечение и профилактика). Методические рекомендации. М., 2001).
Ежегодно до 2008 года в Южном федеральном округе (ЮФО) зарегистрировались крупные вспышки этой инфекции, сопровождаемые в половине случаев неврологическими проявлениями: энцефалитами и менингоэнцефалитами (см. Борисевич СВ., Бондарев В.П. Лихорадка Западного Нила: прошлое и настоящее // Молекул, медицина. 2008. № 5, с. 47-51).
Увеличение заболеваемости ЛЗН стимулирует поиск новых и оценку эффективности уже имеющихся противовирусных препаратов. До начала вспышек лихорадки Западного Нила в 1999 году в России отсутствовали этиотропные и неспецифические препараты, а основу терапии ЛЗН составляли патогенетические средства (см. Мероприятия по борьбе с лихорадкой Западного Нила на территории Российской Федерации (эпидемиологический надзор, диагностика, клиника, лечение и профилактика). Методические рекомендации. М., 2001).
Анализ данных, опубликованных в зарубежных источниках информации, в отношении этиотропных, эффективных неспецифических препаратов в отношении ЛЗН свидетельствует лишь о наличии единичных препаратов, в частности, рибавирина, а-2Ь интерферона, α- и β- интерферонов (мышиных)), эффективность которых показана ίη νίνο (см. 0йе1о1а Н.А. ΑηίίνίΓαΙ асО\йу о£ Уиа/о1е оп терйсайоп оГ у1гикск 18о1е1еИ ίη №депа. 1п: 81едеп!ка1ег ЬаШу К. еййотк. Сиггеп!: скетоШегару. Уо1.1. \Уак1йпд!оп:
Атепсап 8оае!у оГ МюгоЬю1оду. - 1978. - Уо1.1. - Р.3343-3345) и уйго (см. 1огйап I., Впеке Т., Икйет N. е! а1. РФаутп шШЬйк \Уек! №1е νίπικ герПсаОоп апй суЮрШШс еГГес! ш пеига1 се11к // ί. 1пГес1. Όίκ. - 2000. Уо1.182. - Р.1214-1217. 8Ьайат А., Ьикйд 8., Акоу Υ. е! а1. ИтГГсгсй: раШодетсйу оГ епсеркаПОс !ода\агикек ш огдапо!урю сийигек оГ крша1 сотй кйсек // 1. №итоксЕ Кек. - 1990. -Уо1.25. - Р.345-352. Апйеткоп ί.Ρ., II КаНа1. ЕГПсасу оГ 1п!егГегоп а1рНа-2Ь апй К1Ьпу1Г1п адатк! \Уек! №1е у1тцк ш уйго // Етегд. 1пГ. Ищ. - 2002. Уо1.8, п.1.-Р.107-108).
Израильскими исследователями сконструирован гомологичный иммуноглобулин, обеспечивающий эффективное лечение тяжелых случаев ЛЗН (см. 2.8Ытот, УЗААеп, 8.РйПск, 8.ВиМс. Тгеа!теп! оГ \Уек! №1е у1тцк епсйерйаййк тейй ^η!^аνееηοиκ 1ттипод1оЬи1ш // Етегд. 1пГ. Ищ. - 2001. -Уо1.7, п. 4. Р.759).
Отечественными специалистами также была выявлена умеренная эффективность амиксина в отношении вируса Западного Нила и высокая эффективность рибавирина (см. Логинова С.Я., Ковальчук А.В., Борисевич СВ. и др. Противовирусная эффективность индуктора интерферона амиксина в отношении экспериментальной формы лихорадки Западного Нила // Вопр. вирусол. - 2004. - № 2. -С. 14-17). Однако высокая токсичность рибавирина не позволяет его использовать в равноэквивалентных дозах для человека (см. Логинова С.Я., Борисевич СВ., Пащенко Ю.И., Бондарев В.П. Профилактика и терапия экспериментальной формы лихорадки Западного Нила // Антибиот. и химиотер. - 2009. - Том. 54, №№ 11-12 - С. 17-20; Логинова С.Я., Борисевич СВ., Максимов В.А., Бондарев В.П. Оценка токсичности неспецифических медицинских противовирусных средств, предназначенных для профилактики и лечения опасных и особо опасных вирусных инфекций // Антибиот. и химиотер. - 2009. -Том. 54, №№ 3-4. - С. 11-14).
С учетом изложенного, поиск и разработка эффективных средств профилактики и лечения этого вирусного заболевания являются актуальными.
Из уровня техники известны низкомолекулярные соединения, используемые для лечения и профилактики лихорадки Западного Нила, в частности, применение гетероциклических соединений (см. патенты МХ2010013269, МХ2011008988, №02008124550, №02010039538, №02012135402, №02011137447, №02012145567, КИ2365591), производные сахаров (см. патент №02010027996), синтетические нуклеозиды (см. патенты ΝΖ588670, ΝΖ579880, МХ2009002707, И82012245335).
Наиболее близким техническим решением к заявляемому изобретению является соединение - натриевая соль 2-метилтио-5-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3Н)-она, проявившее актив- 1 026783 ность против возбудителя лихорадки
Западного Нила и других флавивирусов ( см. патент РФ № 2365591 на изобретение Лекарственное средство, обладающее противовирусным действием и содержащее 2-метилтио-5-метил-6-нитро1,2,4триазоло(1,5-а)пиридин-7(3Н)-ОН, дата подачи 21.05.2007 г., опубликовано 27.08.2009 г.).
Техническим результатом данного изобретения является создание нового эффективного химического соединения, обладающего противовирусной активностью, в частности, против возбудителя Лихорадки Западного Нила (далее - ЛЗН).
Указанный технический результат достигается тем, что предложено новое соединение - 4-((2гидроксиэтокси)метил)-5 -метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло [ 1,5-а]пиримидин-7 (4Н)-он, обладающее противовирусной активностью против возбудителя Лихорадки Западного Нила и имеющее формулу
Указанный результат достигается тем, что способ получения 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она заключается в дезацетилировании 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (II) при действии раствора метилата щелочного металла в алифатическом одноатомном спирте, при этом 4-((2ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-он (II) получают при взаимодействии 5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (III) с (2ацетоксиэтокси)метилацетатом (IV) в присутствии силицирующего средства, например, N,0бис(триметилсилил)ацетамида (ΒδΑ) или гексаметилдисилиламин (ГМДС) и триметилсилилтрифторметилсульфоната (ΤΜδΟΤί) в апротонном растворителе.
В качестве апротонного растворителя применяют, например, ацетонитрил, хлористый метилен, хлороформ.
Применение 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она для лечения лихорадки Западного Нила (ЛЗН).
Технических решений, совпадающих с совокупностью существенных признаков заявляемого изобретения, не выявлено, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности как новизна.
Заявляемые существенные признаки, предопределяющие получение указанного технического результата, явным образом не следуют из уровня техники, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности как изобретательский уровень.
Условие патентоспособности промышленная применимость подтверждено на примерах конкретного применения.
4-((2-Г идроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто- 1,2,4-триазоло [ 1,5-а]пиримидин-7 (4Н)-он (I) получают путем дезацетилирования 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (II) раствором метилата щелочного металла в присутствии алифатического одноатомного спирта о о
При этом получение 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5а]пиримидин-7(4Н)-она осуществляют путем взаимодействия 5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло [1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (III) с (2-ацетоксиэтокси)метилацетатом (IV) в присутствии НО-бис(триметилсилил)ацетамида (ΒδΑ или или гексаметилдисилиламин (ГМДС) и триметилсилилтрифторметилсульфоната (ΤΜδΟΤί) в апротонном растворителе, в качестве которого может быть использован или ацетонитрил, или хлористый метилен, или хлороформ.
Заявляемое соединение (I) представляет собой белое кристаллическое вещество, растворимое в воде, полярных растворителях, таких как метанол, диметилформамид, диметилсульфоксид, ацетон, но малорастворимое в бензоле, гексане и большинстве неполярных растворителей.
Данные элементного анализа, ЯМР-, УФ- и ИК-спектроскопии, а также масс-спектрометрии полностью соответствуют приписываемому строению.
Осуществление заявляемого изобретения подтверждается примерами конкретного выполнения.
- 2 026783
Пример 1. Синтез 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (II).
В 30 мл хлористого метилена суспендируют 7, г (35,7 ммоль) 5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (III), после чего добавляют 12,9 мл (52,5 ммоль) ΒδΑ и 0,63 мл (3,57 ммоль) ΤΜδΘΤί и перемешивают в течение 30 мин до полного растворения исходного гетероцикла. К полученному раствору при перемешивании и охлаждении на ледяной бане добавляют (2-ацетоксиэтокси) метилацетат (IV) и выдерживают реакционную смесь при комнатной температуре 8 ч, после чего разбавляют 20 мл хлористого метилена и 10%-ным раствором Ыа2СО3 (50 мл) и перемешивают в течение 10 мин. После разделения фаз водный слой экстрагируют хлористым метиленом (3x50 мл), экстракт высушивают над Ыа28О4 и продукты алкилирования делят хроматографически.
Получено 3,3 г 3-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (34%) и 4,0 г 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5а]пиримидин-7(4Н)-она (41%). Тпл. 118-123°С; Вычислено для С12Н16М4О48, М=312,34, С: 46.14; Н: 5.16; Ν: 17.94, Найдено, С: 46.10; Н: 5.11; Ν: 18.10. ЯМР Ή, δ, м.д.: 1.98 (с, 3Н, СОСН3), 2.53 (с, 3Н, 8СН3), 2.61 (с, 3Н, СНз), 3.78-3.80 (м, 2Н, СН2), 4.01-4.12 (м, 2Н, СН2), 5.66 (с 2Н, СН2), 5.92 (с, 1Н, Н6); ЯМР 13С, δ, м.д.: 13.4 (8СН3), 17.5 (С5СН3), 20.5 (СО-СН3), 62.7 (С4'), 67.1 (С3'), 76.5 (С1'), 101.2 (С6), 151.6 (С5), 153.0 (С3а), 153.9 (С7), 162.9 (С2), 170.2 (СО-СН3); Масс-спектрометрия (электроспрей) т/ζ: 313.14 [М+Н]+; ИК: 1458, 1567, 1714, 1733, 2935, 3012.
Пример 2. Синтез 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (II).
К суспензии 5,0 г (25,2 ммоль) 5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она в 25 мл хлористого метилена последовательно добавляют 9,3 мл (37,8 ммоль) ΒδΆ и 0,44 мл (2,52 ммоль) ΤΜδΟΤί и перемешивают в течение 20 мин до полного растворения исходного вещества. К образовавшемуся раствору при комнатной температуре добавляют (2-ацетоксиэтокси)метилацетат и выдерживают 4 ч, после чего разбавляют 30 мл хлористого метилена и 10%-ным раствором №-ьС'О3 (50 мл) и перемешивают в течение 10 мин. После разделения фаз водный слой экстрагируют хлористым метиленом (3x50 мл), экстракт высушивают над №28О4. Изомеры делят так же как показано в примере 1.
Получено 3,0 г 3-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (38%) и 3,2г 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5а]пиримидин-7(4Н)-она (40%).
Пример 3. Синтез 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5а]пиримидин-7(4Н)-она (II).
Смешивают 10 мл ГМДС, 0,5 мл ДМФА и 2 г (10 ммоль) 5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло [1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (III), кипятят в течение 16 часов, после чего досуха испаряют летучие вещества в вакууме. К полученному остатку силильного производного добавляют 10 мл хлороформа, 1,7 мл (10 ммоль) (2-ацетоксиэтокси)метилацетата (IV) и 0,3 мл (2 ммоль) ΤΜδΟΤί', после чего реакционную смесь кипятят в течение 1 ч, охлаждают до комнатной температуры, разбавляют 10 мл хлороформа, добавляют 10%-ный раствор №-ьСО3 (10 мл), перемешивают в течение 10 мин. Водный слой экстрагируют хлороформом (3x20 мл), после объединения экстракты высушивают М§28О4 и продукты алкилирования делят так же как в примере 1.
Получено 1,1 г 3-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3Н)-она (35%) и 1,1 г 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5а]пиримидин-7(4Н)-она (35%).
Пример 4. Синтез 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (I).
К 30 мл метанольного раствора 3,0 г 3-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она добавляют раствор 10 мг металлического натрия в 1 мл метанола. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре 8 ч, после чего охлаждают и отфильтровывают образовавшиеся кристаллы 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она. Масса 2,1 г (7,78 ммоль, 82%) Тпл. 151-154°С; Вычислено для С10Н14^О38, М=270,31, С: 44.43; Н: 5.22; Ν: 20.73, Найдено, С: 44.53; Н: 5.18; Ν: 20.70. ЯМР Ή, δ, м.д.: 2.52 (с, 3Н, 8СН3), 2.61 (с, 3Н, СН3), 3.48-3.51 (м, 2Н, СН2), 3.59-3.62 (м, 2Н, СН2), 4.44-4.47 (м, 1Н, ОН), 5.66 (с, 2Н, СН2) 5.89 (с, 1Н, Н6); ЯМР 13С, δ, м.д.: 13.4 (Ме), 17.6 (8СН3), 59.9 (С4'), 71.1 (С3'), 76.8 (С1'), 101.1 (С6), 151.8 (С5), 153.0 (С7), 153.9 (С3а), 162.9 (С2); Масс-спектрометрия (электроспрей) т/ζ: 271.09 [М+Н]+; ИК: 1269, 1456, 1566, 1705, 2954, 3477.
Пример 5. Синтез 4-((2-Гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5а]пиримидин-7(4Н)-она (I).
В изопропаноле (35 мл) растворяют 15 мг металлического калия, после чего при перемешивании добавляют 2,5 г 3-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин7(4Н)-она и оставляют реакционную смесь при комнатной температуре на 8 ч, затем охлаждают и отфильтровывают образовавшиеся кристаллы 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4- 3 026783 триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она. Масса 1,8 г (6,48 ммоль, 80%).
Определение биологического действия заявляемого соединения
Пример 6. Оценка цитотоксичности исследуемого соединения с использованием постоянной культуры клеток ОМК-АН (1Д).
Для формирования сплошного монослоя в пробирки вносили по 1 мл суспензии клеток с плотностью 200 тыс./мл, инкубировали при температуре (37,0±0,5)°С, 5% СО2. Затем ростовую среду удаляли и вносили свежую питательную среду, содержащую различные концентрации исследуемого препарата (от 1000 до 6,25 мкг/мл). Затем пробирки инкубировали в течение 5 суток при температуре (37,0±0,5)°С, 5% СО2. С использованием светового микроскопа наблюдали за состоянием монослоя клеток: частичная или полная деструкция монослоя клеток, повреждение отдельных клеток, образование клеточного синцития. Контролем являлись пробирки с монослоем, в которые внесена поддерживающая среда без препарата.
Результаты оценки цитотоксичности исследуемого препарата свидетельствуют, что субстанция в концентрации 50 мкг/мл не вызывает видимых изменений в культуре клеток ОМК-АН (1Д). Полученные данные приведены в табл.1.
Таблица 1. Изучение цитотоксичности заявляемого соединения в культуре клеток ОМК-АН (1Д)
Препарат Частота цитопатического эффекта при применении заявляемого соединения в концентрации, мкг/мл ЦПД50. мкг/мл 168,0 МПК, мкг/мл 1/2 МПК, мкг/м л
200,0 100,0 50,0 25,0 12,5 9,3
Заявляе- мое соедине- ние 1/4 1/4 0/4 0/4 0/4 0/4 84,0 42,0
Пример 7. Изучение эффективности заявляемого соединения в отношении вируса Западного Нила проводили в культуре клеток ОМК-АН (1Д).
Монослой культуры клеток ОМК-АН (1Д) инфицировали вирусом Западного Нила в дозе 0,05 БОЕ/клетку. Адсорбцию вируса проводили при температуре 37°С 5%-ным СО2, в течение 60 мин. По окончании инкубирования монослой трижды промывали поддерживающей средой, содержащей по 100 ед./мл пенициллина и стрептомицина, для удаления не адсорбировавшегося вируса и вносили исследуемые соединения в концентрации, составляющей '/2 МПК. Препарат КУЪ-346 растворяли в ΌΜδΟ до конечной концентрации 10 мкг/мкл и далее разводили до нужной концентрации поддерживающей питательной средой. На каждое соединение использовали не менее 10 пробирок с монослоем клеток. Инкубирование проводили при температуре 37°С, 5% СО2, в течение 48 ч. Далее проводили криодеструкцию клеток и объединяли пробы. Инфекционный титр в объединенных пробах определяли титрованием методом формирования негативных колоний под агаровым покрытием в культуре клеток ОМК-АН (1Д).
Результаты изучения противовирусной активности азолового соединения выявили, что субстанция подавляет репродукцию вируса ЛЗН на 1,5 1д. Коэффициент ингибирования для исследованного препарата составил 96,7 % (см. табл. 2).
Таблица 2. Изучение эффективности заявляемого соединения в культуре клеток ОМК-АН (1Д) в отношении вируса Западного Нила
Препарат Концентрация соединения, мкг/мл Уровень накопления вируса, 1д БОЕ/мл Снижение уровня накопления вируса, !д БОЕ/мл Коэффициент ингибирования репродукции вируса, процент
Заявляемое соединение 42,0 6,3 1,5 96,7
Заявляемое соединение* 42,0 6,3 1,5 96,7
К дозы - 7,8
Примечание *- препарат хранился в течение 7 суток в ϋΜδΟ при комнатной температуре
Таким образом, новое химическое соединение не токсично в используемых концентрациях, обладает значимой противовирусной активностью ίη νίίτο в отношении вируса Лихорадки Западного Нила.

Claims (4)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а] пиримидин-7(4Н)-он, имеющее формулу
2. Способ получения 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а] пиримидин-7(4Н)-она, заключающийся в дезацетилировании 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (II) при действии раствора метилата щелочного металла в алифатическом одноатомном спирте, при этом 4-((2-ацетоксиэтокси)метил)-5-метил-2метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-он (II) получают при взаимодействии 5-метил-2метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она (III) с (2-ацетоксиэтокси)метилацетатом (IV) в присутствии силицирующего средства и триметилсилилтрифторметилсульфоната в апротонном растворителе.
3. Способ по п.2, в котором силицирующее средство представляет собой И,О-бис(триметилсилил) ацетамид или гексаметилдисилиламин.
4. Применение 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4Н)-она для лечения лихорадки Западного Нила.
EA201600363A 2013-11-01 2014-10-21 4-((2-ГИДРОКСИЭТОКСИ)МЕТИЛ)-5-МЕТИЛ-2-МЕТИЛМЕРКАПТО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(4H)-OH - ВЕЩЕСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ПРОТИВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА EA026783B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013148985/04A RU2537295C1 (ru) 2013-11-01 2013-11-01 4-(2-ГИДРОКСИЭТОКСИ)МЕТИЛ)-5-МЕТИЛ-2-МЕТИЛМЕРКАПТО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(4Н)-ОН - ВЕЩЕСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ПРОТИВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА
PCT/RU2014/000795 WO2015065244A1 (ru) 2013-11-01 2014-10-21 4-((2-гидроксиэтокси)метил)-5-метил-2-метилмеркапто-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин- 7(4н)-он, обладающий активностью в отношении вируса лихорадки западного нила

Publications (3)

Publication Number Publication Date
EA201600363A1 EA201600363A1 (ru) 2016-08-31
EA201600363A8 EA201600363A8 (ru) 2016-12-30
EA026783B1 true EA026783B1 (ru) 2017-05-31

Family

ID=53004694

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201600363A EA026783B1 (ru) 2013-11-01 2014-10-21 4-((2-ГИДРОКСИЭТОКСИ)МЕТИЛ)-5-МЕТИЛ-2-МЕТИЛМЕРКАПТО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(4H)-OH - ВЕЩЕСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ПРОТИВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА

Country Status (3)

Country Link
EA (1) EA026783B1 (ru)
RU (1) RU2537295C1 (ru)
WO (1) WO2015065244A1 (ru)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0183848A1 (en) * 1984-03-12 1986-06-11 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Polyazaheterocyclic derivatives, process for their preparation, and pharmaceutical composition
RU2296766C2 (ru) * 1999-12-06 2007-04-10 Бристол-Маерс Сквибб Компани Гетероциклические дигидропиримидиновые соединения
RU2365591C2 (ru) * 2007-05-21 2009-08-27 Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ И СОДЕРЖАЩЕЕ 2-МЕТИЛТИО-5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(3Н)-ОН

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0183848A1 (en) * 1984-03-12 1986-06-11 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Polyazaheterocyclic derivatives, process for their preparation, and pharmaceutical composition
RU2296766C2 (ru) * 1999-12-06 2007-04-10 Бристол-Маерс Сквибб Компани Гетероциклические дигидропиримидиновые соединения
RU2365591C2 (ru) * 2007-05-21 2009-08-27 Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ И СОДЕРЖАЩЕЕ 2-МЕТИЛТИО-5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(3Н)-ОН

Also Published As

Publication number Publication date
WO2015065244A1 (ru) 2015-05-07
EA201600363A8 (ru) 2016-12-30
EA201600363A1 (ru) 2016-08-31
RU2537295C1 (ru) 2014-12-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CS233665B1 (en) Processing of isomere o-phosphonylmethylderivative of anantiomere racemic vicinal diene
Hafez et al. Synthesis of substituted thieno [2, 3-d] pyrimidine-2, 4-dithiones and their S-glycoside analogues as potential antiviral and antibacterial agents
JP5553393B2 (ja) 置換された多環性カルバモイルピリドン誘導体のプロドラッグ
CN103109816B (zh) 硫代苯甲酰胺类化合物及其应用
CA2836579A1 (en) Purine monophosphate prodrugs for treatment of viral infections
RU2453553C1 (ru) 5-о-сукциноилавермектин, способ его получения и антипаразитарное средство на его основе
Kaur et al. Synthesis and evaluation of pyrazole derivatives as potent antinemic agents
SU733504A3 (ru) Инсектицидный состав
RU2404182C2 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-ЭТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
RU2472801C1 (ru) 5-о-производные авермектина, способ их получения и антипаразитарные средства на их основе
RU2330036C1 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4,-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
EA026783B1 (ru) 4-((2-ГИДРОКСИЭТОКСИ)МЕТИЛ)-5-МЕТИЛ-2-МЕТИЛМЕРКАПТО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(4H)-OH - ВЕЩЕСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ПРОТИВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА
CN111620920A (zh) 一种用于治疗肿瘤的黄酮衍生物及其应用
RU2402552C2 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-ПРОПИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ И НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-БУТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
Sun et al. Synthesis and Anti‐HIV Activity of Triazolo‐Fused, Medium‐Sized Cyclic Nucleoside Analogs Prepared by an Intramolecular Huisgen 1, 3‐Dipolar Cycloaddition
DK167765B1 (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af 2-beta-d-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser
RU2024546C1 (ru) ГЛИКОПЕПТИД β-ГЛИЦИРРИЗИНОВОЙ КИСЛОТЫ С ДИБУТИЛОВЫМ ЭФИРОМ L-ГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ АНТИ-СПИД-АКТИВНОСТЬ
RU2466728C1 (ru) Фосфониевые соли на основе производных пиридоксина
Matyugina et al. Synthesis and antiviral evaluation against the Vaccinia virus of new N 1-oxide analogs of 5′-noraristeromycin
RU2381229C2 (ru) 11b-(ГEТ)АРИЛ-2,3,6,11b-ТЕТРАГИДРООКСАЗОЛО[2',3':2,1]ПИРРОЛО[3,4-b]ХИНОЛИН-5,11-ДИОНЫ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ
RU2570113C1 (ru) N-(2-ацетамидопурин-6-ил)глицин, обладающий противотуберкулезной активностью
FR2548190A1 (fr) Procede de preparation de la sinefungine et de composes analogues
RU2493158C2 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛ-6-ФТОР-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4Н)-ОНА ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ
RU2243972C1 (ru) Фосфорамидаты нуклеозидных аналогов - ингибиторы репродукции вируса иммунодефицита человека
RU2783659C1 (ru) 2-[5-(4-Метокси)-3-фенил-5,6-дигидро-4Н-[1,2,4,5]тетразин-1-ил]-бензотиазолы с противовирусной активностью в отношении вирусов Коксаки В3

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU