DK167765B1 - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 2-beta-d-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser - Google Patents

Analogifremgangsmaade til fremstilling af 2-beta-d-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser Download PDF

Info

Publication number
DK167765B1
DK167765B1 DK129983A DK129983A DK167765B1 DK 167765 B1 DK167765 B1 DK 167765B1 DK 129983 A DK129983 A DK 129983A DK 129983 A DK129983 A DK 129983A DK 167765 B1 DK167765 B1 DK 167765B1
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
compound
carboxamide
preparation
selenazole
ribofuranosylselenazole
Prior art date
Application number
DK129983A
Other languages
English (en)
Other versions
DK129983D0 (da
DK129983A (da
Inventor
Roland Kenith Robins
Prem Chandra Srivastava
Original Assignee
Univ Brigham Young
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Brigham Young filed Critical Univ Brigham Young
Publication of DK129983D0 publication Critical patent/DK129983D0/da
Publication of DK129983A publication Critical patent/DK129983A/da
Application granted granted Critical
Publication of DK167765B1 publication Critical patent/DK167765B1/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D421/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having selenium, tellurium, or halogen atoms as ring hetero atoms
    • C07D421/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having selenium, tellurium, or halogen atoms as ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D421/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having selenium, tellurium, or halogen atoms as ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/20—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

i DK 167765 B1
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 2-0-D-ribofuranosylselenazol- 4-carboxamidforbindelser med farmakologisk virkning, især an* tisvulstvirkning og antiviral virkning.
5
Bekæmpelse af ondartede svulster hos mennesker og dyr er fortsat et uopnået mål. Inden for de sidste adskillige årtier har ondartethedsforståelsen gjort betydelige fremskridt, men overvindelse af ondartethedens syg-10 domstilstand er ikke blevet opnået.
Konventionel behandling af både mennesker og andre værdifulde dyrearter, der er plaget af ondartede svulster, omfatter i øjeblikket kirurgisk bortskæring af svulsten, 15 lokal strålingsbehandling af det angrebne dyr og kemoterapi ved administration af et kemoterapeutisk middel til dyret. Døden af et betydeligt antal patienter, der er angrebet af ondartede svulster, skyldes ikke primærsvulsten, men i stedet metastaser fra primærsvulsten til 20 sekundære steder hos værten. Hvis en primærsvulst opdages tidligt, kan den normalt fjernes ved hjælp af kirurgi, stråling eller kemoterapi eller kombinationer deraf. Metastasekolonierne fra disse primærsvulster er imidlertid betydelig vanskeligere at opdage og fjerne, og den 25 mislykkede behandling af dem forbliver at være et alvorligt lægeligt problem.
Svulster klassificeres normalt enten som godartede eller ondartede. Den ondartede svulst karakteriseres ved sin 30 evne til både at trænge ind i omgivende væv og at inficere fjerne steder via metastase. Visse organer er mere modtagelig eller udsatte for metastase end andre. Til denne gruppe vil lungerne, hjernen, leveren, ovarierne og binyrerne høre. Det har yderligere været forventet, 35 at både kirurgi og bestråling af en primærsvulst i visse tilfælde i virkeligheden fremmer metastase.
UiV ID/ /OO D I
2
Som følge af nuværende cancerbehandlings manglende evne til på vellykket måde at bekæmpe den ondartede svulst og dens metastase, foreligger der et behov for yderligere kemoterapeutiske midler.
5 På lignende måde står der for tiden midler til rådighed til bekæmpelse og behandling af antivirale infektioner, men få af disse midler er klinisk anvendelige, og disse er kun aktive inden for et snævert område. På dette felt 10 foreligger der derfor også et behov for yderligere kemoterapeutiske midler, især for midler, der har såvel antiviral virkning som antisvulstvirkning.
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til 15 fremstilling af hidtil ukendte 2-/3-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser med den almene formel: 20 N-^Se R °(jH2 fy r20 OR1 25 hvori Ri og R2 hver er hydrogen, lavere alkanoyl eller benzoyl, og R3 er hydrogen,lavere alkanoyl, benzoyl eller 0' H0-P-;.
30 OH
og når R3 er phosphono, fysiologisk acceptable salte deraf.
35 Foretrukne ved fremgangsmåden if^S« opfindelsen fremstillede forbindelser er følgende: DK 167765 B1 3 2-/3-D-r ibof uranosy Iselenazol-4-carboxamid, 2-(2,3,5-tri-0-acetyl-0-D-ribofuranosyl)-selenazol-4-carbox-amid, 2-0-D-ribofuranosyIselenazol-4-carboxamid-51-phosphat, og 5 2-0-D-ribof ur anozy Isel enazol-4-carboxam i d-5' -phosphat, natri umsalt .
Forbindelsen 2-0-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamid, i det følgende undertiden omtalt som forbindelse 1, har vist sig at 10 udvise signifikant antisvulstvirkning in vivo og signifikant antiviral virkning in vitro. Midler indeholdende denne forbindelse og/eller esterderivater med formlen I kan anvendes til behandling af ondartede svulster i varmblodede dyr. Anti-svulstegenskaberne hos 2-0-D-ribofuranosylselenazol-4-carbox-15 amid og dens afledte estere udnyttes ved administration til et varmblodet dyr af en effektiv mængde af et farmaceutisk middel indeholdende som aktiv bestanddel mindst ca. 0,1 vægt%, regnet i forhold til midlets samlede vægt, af mindst én forbindelse med formlen I.
20
Midler indeholdende forbindelsen 1 og/eller esterderivater med formlen I kan endvidere anvendes til behandling af virale infektioner i varmblodede dyr. De antivirale egenskaber hos 2-0-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamid og estere deraf udnyttes 25 ved administration til et varmblodet dyr af en effektiv mængde af et farmaceutisk middel, der som aktiv bestanddel indeholder mindst ca. 1,0 vægt%, regnet i forhold til midlets samlede vægt, af mindst én forbindelse med formlen I.
30 Særlige betydninger af R*, R2 og R3 i forbindelserne ifølge opfindelsen som foretrukne alkanoylgrupper er acetyl, propi-nyl, butyryl og isobutyryl. Som foretrukne salte, hvor R3 er phosphono, kan nævnes alkalimetalsalte og ammoniumsalte eller substituterede ammoniumsalte, såsom natrium-, kalium- eller 35 ammoniumsaltet.
Når Ri og R2 begge er H, er R3 fortrinsvis H, Cj.Cø-alkanoy1, DK 16776b ΒΊ 5 4 Ο
II
eller ΗΟ-Ρ-, og når R1 og R2 begge er Ci-Cø-alkanoy1, er R3 OH
Ci-Cg-alkanoyl.
Farmaceutisk midler indeholdende de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser kan fremstilles på enhver egnet måde, fortrinsvis sammen med en indifferent bærer. 10 Den farmaceutisk bærer vælges fortrinsvis til at muliggøre administration af en passende koncentration af midlet som en opløsning eller suspension ved indsprøjtning i et angrebet varmblodet dyr. Afhængigt af værten, der huser den ondartede svulst, svulsttypen samt svulstens sted, eller, afhængigt af 15 den virale infektion og infektionstype og infektionens sted, som tilfældet kan være, kan administrationen ved hjælp af indsprøjtning være intravenøs, intramuskulær, intracerebral, subkutan eller intraperitoneal.
20
Alternativt kan midlet sammensættes med en passende farmaceutisk bærer, der muliggør administration ad en anden vej, såsom oral, ophthalmisk, topisk eller som suppositorie.
Alkanoylgrupperne kan vælges blandt ligekædede, forgrenede, 25 substituerede, umættede, mættede eller aromatiske syrer, såsom, men ikke nødvendigvis begrænset til, eddikesyre, triflu-oreddikesyre, propionsyre, n-smørsyre, isosmørsyre, valerianesyre, capronsyre, pelargonsyre, ønantsyre, palmi tinsyre, benzoesyre, phthalsyre, salicylsyre, kanelsyre og naphthalencar-30 boxylsyre. Med hensyn til phosphatforbindelser, der er fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan phospho-rylesteren foreligge som en fri syre eller i saltform. Acceptable salte af phosphatdelen kan vælges fra, men er ikke nødvendigvis begrænset til, en gruppe bestående af alkali- og 35 jordalkalimetaller, f.eks. natrium, kalium, calcium, magnesium og lithium, ammonium og substitueret ammonium omfattende trialkylammonium, dialkylammonium og allylammonium, f.eks.
DK 167765 B1 5 triethylammonium, trimethylammonium, diethylammonium, octyl-ammonium og cetyltrimethylammonium samt cetylpyridinium.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er kendetegnet ved, at man: 5 a) underkaster et alkyl-2-(2,3,5-tri-0-acyl-/3-D-ribofurano-syl)selenazol-4-carboxylat ammonolyse, b) phosphory1 erer 2-0-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamid, 10 c) acylerer 2-0-D-ribofuranosy 1 selenazol-4-carboxamid, og isolerer produktet, eventuelt i form af et salt.
15 Ammonolysereaktionen til fremstilling af 2-/3-D-ribofuranosyl-selenazol-4-carboxamid (forbindelse 1) udføres i et passende opløsningsmiddel, såsom methanol. Reaktionsbeti.ngelserne kan varieres, såsom f.eks. ved omgivelsernes temperatur og tryk, fortrinsvis ved stuetemperatur, indtil reaktionen er afslut-20 tet, f.eks. i ca. 24 timer. Produktet isoleres fra reaktionsblandingen på en hvilken som helst egnet måde, såsom ved hjælp af søjlekromatografi. Udgangsmaterialets alkyl- og acylgrup-per kan varieres inden for vide grænser, eftersom de fjernes under reaktionen, og valget deraf er således ikke kritisk. Fo-25 retrukne alkylgrupper er C^-Cg-alkylgrupper. Foretrukne acyl-grupper er acetylgruppen, n-butyrylgruppen og benzoylgruppen.
Phosphoryleringsreaktionen til fremstilling af 2-p-D-ribofu-ranosylselenazol-4-carboxamid-5'-phosphatforbindelserne ud- 30 føres roed den nævnte forbindelse 1 samt et phosphorylerings-middel, såsom phosphorylchlorid, fordelagtigt i kulden, i et passende medium, såsom triethylphosphat eller pyridin og ace-tonitril. Produktet isoleres fra reaktionsblandingen på en hvilken som helst egnet måde, såsom ved ionbytningskromatogra-35 fi. Acylering udføres ved omsætning af forbindelsen 1 med acy-leringsmidlet, såsom et syreanhydrid eller syrechlorid, fortrinsvis i overskud ved omgivelsernes temperatur, indtil reaktionen er afsluttet.
Ulv ΙΟ/ /Οϋ D I
6
Opfindelsen og den bedste måde at udøve den på beskrives i de følgende eksempler.
Eksempel 1 S
2-jJ-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamid, forbindelse 1 2,5-anhydro-3,4,6-tri-O-benzoyl-D-al1 onselenocarboxamid.
a) En blanding af 2,3,5-tri-0-benzoyl-8-P“ribofuranosyl= 10 cyanid (10,Og, 21,2 mmol), 4-axmethylaminopyridin (200 mg) og flydende hydrogenselenid (kondenseret under en atmosfære, 20 ml) blev omrørt i en lukket bombe ved stuetemperatur i 20 timer. Hydrogenselenid fik lov til at afdampe. Den mørkt farvede rest blev opløst i chloroform 15 (200 ml) og vasket i rækkefølge med vand (3 x 50 ml) , mættet NaHCO^ (3 x 50 ml) efterfulgt af vand (2 x 50 ml) . Chloroformportionen blev tørret (MgSO^) og under vakuum inddampet til opnåelse af produktet med undertitlen som et skum i næsten kvantitativt udbytte. Sidstnævnte pro-20 dukt med analyserenhed blev opnået ved hjælp af søjlekromatografi (silicagel, 5% ethylacetat i chloroform).
Produktet udviklede en violet farve, når silicagelkroma-togrammet af produktet blev sprøjtet med en fortyndet etha= 25 nolopløsning af 2,3-dichlornaphthoquinon og blev udsat for ammoniak. Analyse beregnet for C2-7^23^0-780: C 58,91; H 4,21; Se 13,98. Fundet: C 58,81; H 4,29; N 2,51; Se 13,74.
Omsætning af 2,5-anhydro-3,4,6-tri-0-benzoyl-D-allonseleno-3 0 carboxamid med ethylbrompyruvat samt syntese af ethyl-2-(2,3,5-tri-o-benzoyl-D-ribofuranosyl)selenazol-4-carboxy= later.
b) En opløsning af 2,5-anhydro-3,4,6-tri-O-benzoyl-D-3 5 allonselenocarboxamid (5,5 g, 10 mmol) i acetonitril (60 ml) blev kølet i is. Ethylbrompyruvat (3,0 g) i acetoni= tril (20 ml) blev dråbevis tilsat (10 minutter) . Isbadet DK 167765 B1 7 blev fjernet, og reaktionsblandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time- Opløsningsmidlet blev afdampet i vakuum, og resten blev findelt med en mættet natriumbi= carbonatopløsning (100 ml) samt ekstraheret med ethyl= 5 ether (2 x 100 ml). Den kombinerede etherportion blev vasket med vand og tørret (MgSO^). Etheren blev afdampet i vakuum og resten (sirup) ført gennem en silicagelsøjle (300 g), indeholdt i chloroform. Eluering med 5% ethyl= acetat i chloroform resulterede i produkter med under-10 titlen: nemlig det hurtigt bevægende ethyl-2(2,3,5-tri-0-benzoyl-2-B-D-ribofuranosyl)selenazol—4-carboxylat (2,5 g) og det langsomt bevægende ethyl-2-(2,3,5-tri-O-benzoyl-2-ct-D-ribofuranosyl) selenazol—4-carboxylat (1,0 g), der blev isoleret efter inddampning under formindsket 15 tryk i form af tyktflydende sirupper, β-isomeren, ethyl-2-(2,3,5-tri-0-benzoyl-2-p-D-ribofuranosyl)selenazol-4-carboxylat, er karakteriseret ved en optisk drejning, 1,07% i methanol, [α]ρ5 = 34,7°. Analyse beregnet for C32H27NOgSe (648,51): C 59,26; H 4,20; N 2,16. Fundet: C 59,44; 20 H 4,21; N 1,89.
Forbindelse 1.
c) Ethyl-2-(2,3,5-tri-O-benzoyl-B-D-ribofuranosyl)se= 25 lenazol-4-carboxylat (3,2 g, 5 mmol) blev opløst i me= thanol (100 ml), kølet samt mættet med ammoniak (0°C). Opløsningen blev omrørt i en trykflaske ved stuetemperatur i 48 timer. Opløsningsmidlet blev afdampet i vakuum, og resten blev ekstraheret med chloroform (3 x 25 ml) .
30 Chloroformmængden blev bortkastet. Resten blev adsorberet på silicagel (10 g) ved hjælp af methanol og påført på en silicagelsøjle (2,8 x 45 cm), indeholdt i ethylacetat. Søjlen blev elueret med opløsningsmiddel E (ethylacetat, n-propanol, H20; 4:1:2; vol./vol.: øverste lag danner 35 opløsningsmiddel E), og de homogene fraktioner (Rf = 0,42, silicagel-tlc i opløsningsmiddel E) indeholdende hovedproduktet blev opsamlet. Opløsningsmidlet blev afdampet
UK lb//oo D I
8 i vakuum, og titelforbindelsen blev som rest krystalliseret fra 2-propanol: udbytte 900 mg af titelforbindelsen, forbindelse 1, (60%), med smeltepunkt 135 - 136°C. Resten resulterede i et andet udbytte (200 mg) med smeltepunkt 5 131 - 133°C. Analyse beregnet for cgHi2N2°5Se: C 35,19; H 3,94; N 9,12; Se 25,71- Fundet: C 35,43; H 3,97; N 9,03;
Se 25,55. [a]^5 , 1,07% i methanol, -22,2°. LD10, akut toksicitet, 96,5 mg/kg ved intraperitoneal injektion i mus.
10 Eksempel 2 2-/S-D-ribof uranosylselenazol -4-carboxamid-5' -phosphat, forbindelse 2.
15 Vand (151 mg, 8,4 mmol) blev forsigtigt sat til en opløsning (holdt ved 0°C ved hjælp af omrøring) af phosphoryl= chlorid (2,0 g, 13,2 mmol), pyridin (1,21 g, 14,4 mmol) og acetonitril (2,3 g, 56,7 mmol). 2-8-D-ribofuranosyl= selenazol-4-carboxamid (921· mg, 3,0 mmol) blev sat til op-20 løsningen, og reaktionsblandingen omrørtes i 4 timer ved 0°C. En klar opløsning opnåedes, og denne blev udhældt i isvand (50 ml), hvorefter pH-værdien blev indstillet til 2,0 med koncentreret natriumhydroxid. Opløsningen blev påført på en søjle af aktivt carbon (30 g), og søjlen 2 5 blev vasket grundigt med vand, indtil eluatet var saltfrit. Søjlen blev elueret med en opløsning af ethanol/ vand/koncentreret ammoniumhydroxid (10:10:1), og fraktionerne (hver på 25 ml) blev opsamlet. Fraktionerne indeholdende nucleotidtitelforbindelsen, forbindelse 2, i 30 ren form (tic, silicagel, acetonitril-0,1 N ammonium= chlorid (7:3)) blev opsamlet og inddampet til tørhed under vakuum. Det vandfri restprodukt, forbindelse 2, blev opløst i vand og ført gennem en søjle af "Dowex" 50W- X8 (20 - 50 mesh, H+-form, 15 ml)- Søjlen blev vasket 3 5 med vand, og fraktionen indeholdende nucleotidet blev opsamlet. Opløsningen blev inddampet til et ringe volumen (5 ml) og ført gennem en søjle af "Dowex" 50W-X8 (20 - DK 167765 B1 9 50 mesh, Na+-form, 15 ml) . Søjlen blev vasket med vand. Fraktionen indeholdende nucleotidet i form af natriumsaltet blev lyofiliseret. Resten blev findelt med etha= nol, opsamlet ved hjælp af filtrering samt tørret (P205) 5 til opnåelse af 580 mg (42%) 2-|3-D-ribofuranosylselena= zol-4-carboxamid-5'-phosphat som mononatriumtrihydrat i den krystallinske form. Analyse beregnet for C9Hi2N2°8= PSeNa,3H20: C 23,33; H 3,90; N 6,05; P 6,69; Se 17,04.
Fundet: C 23,01; H 3,76; N 5,86; P 7,02; Se 16,32.
10
Eksempel 3 2-(2,3,5-tri-0-acetyl-0-D-ribofuranosyl)selenazol-4-carbox-amid, forbindelse 3.
15
En blanding af 2-8-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamid (1,0 g, 3,25 mmol), Ν,Ν-dimethylaminopyridin (katalysator, 80 mg) og eddikesyreanhydrid (15 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 3 timer. Opløsningsmidlet blev afdampet 20 i vakuum og af dampet samtidigt med vand (2 x 10 ml) til opnåelse af forbindelse 3 som et hvidt, krystallinsk produkt, som blev findelt med vand og opsamlet ved hjælp af filtrering. Produktet blev rekrystalliseret fra vand indeholdende nogle få dråber ethanol til opnåelse af hvide 25 nåle i et udbytte på 1,2 g (85%) med smeltepunkt 117 -119°C. Analyse beregnet for c15H18N20gSe: C 41,58; H 4,19; N 6,47; Se 18,22. Fundet C 41,80; H 4,30; N 6,58;
Se 17,97. Tilsvarende 2',3',5'-0-acylforbindelser fremstilles ifølge opfindelsen ud fra forbindelse 1 ved hjælp af denne 30 procedure ved omsætning af sidstnævnte med det behørige syre-anhydrid, indtil reaktionen er afsluttet, og isolation af produktet i ren form. 1 10
Som illustrerende eksempler på antisvulstanvendelsen af forbindelserne 1 og 2 anføres nedenfor eksemplerne 4 til 6. I disse eksempler demonstreres effektiviteten af forbindelserne ved anvendelse af standardforsøg over 5 for en ondartet svulst, Lewis' lungecarcinom. De i disse illustrative eksempler benyttede forsøg blev udført af the Developmental Therapeutics Program, Division of Cancer Treatment, National Cancer Institute. Forsøgene blev overvåget af dette foretagende under anvendelse af dettes standardforskrifter og procedurer. Alle forsøg blev udført i overensstemmelse med disse forskrifter, og alle forsøg blev bedømt i henhold til.de kriterier, der er defineret i henhold til disse forskrifter. De efterfølgende repræsentative eksempler illustrerer på 15 bekræftende made virkningen af de illustrative forbindelser ifølge opfindelsen over for sorterende svulstsystemer i henhold til the National Cancer Institute.
Til de følgende eksemplers formål står forkortelsen IP
20 for intraperitoneal, og IV star for intravenøs. Middel- og medianoverlevelsestider er beregnet i instruktion 14 (revision 6/78) i the Screening Data Summary, Develop= mental Therapeutics Program, Division of Cancer Treatment,
National Cancer Institute. Indholdet af denne sorterings-25 datasaramenfatning inklusive tilsvarende revisioner medtages heri ved henvisningen dertil. 1 de nedenfor illustrerede eksempler blev den som bærer for lægemidlet benyttede grundmasse indsprøjtet (minus 30 noget lægemiddel deri) i kontroldyrene i den samme brugsmængde af grundmassen som til de lægemiddelbehandlede dyr med henblik på eliminering af enhver grundmas sevirkning ved forsøgene.
35 2-3-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamid, forbindelse 1, er anført som værende aktiv over for Lewis' lungecarci= nom ifølge eksempel 4 og opfyldte på vellykket måde DN (decision network) 2 kriterierne ifølge the National Cancer Institute Testing. Til eksempel 4' benyttedes BgD2Fl~ 11
UK 1b//bt> bT
hanmus, som blev smittet med Lewis' lungecarcinom. Forsøgsdyrenes medianoverlevelsestid blev sammenlignet med medianoverlevelsestiden for tilsvarende kontroldyr. Baseret på dette kriterium blev forbindelse 1 betragtet 5 som et effektivt antisvulstmiddel.
I eksempel 4 blev 40 kontroldyr og 10 forsøgsdyr benyttet, hvert dyr ved dosismængder anført nedenfor i tabel 1. Både i kontrolgruppen og i den lægemiddelbehandlede ^ gruppe blev svulster fremkaldt ved IV-injektion på dagen nul efterfulgt af begyndende lægemiddelbehandling på dagen 1. I eksempel 4 blev vand benyttet som grundmasse for lægemidlet.
15 I bade kontrolgruppen og den lægemiddelbehandlede gruppe i eksempel 4, blev dyrene på dagen nul podet med et g homogenat af 10 podeceller af Lewis' lungecarcinom. I eksempel 12 blev lægemiddelbehandling påbegyndt på dagen 1, og forbindelse 1 administreres én gang daqligt i 9 20 dage. Den 5. dag blev benyttet som skæringsdag for dødsfald, som kunne henføres til lægemidlets toksicitet. Der var i dette eksempel ingen dødelighed, som -måtte tilskrives lægemidlets toksicitet. Behandlingseffektivitet blev bestemt ved sammenligning af kontroldyrenes median-25 overlevelsestid, og den udtrykkes som procentisk forøgelse af behandlede dyr/kontroldyr (T/C).
Forsøgsperioden var 60 dage, og ved afslutningen af den 60 dages periode blev alle i forsøgsgrupperne overleven-30 de dyr bedømt som værende enten helbredte, ikke-modtagelige eller svulstoverlevere.
Eksempel 4._ 35 I dette eksempel blev de lægemiddelafprøvede dyr injiceret IP med den i nedenstående tabel 1 anførte dosismængde.
10 dyr blev behandlet ved hver dosismængde. Ingen kontroldyr overlevede efter dag 23 med en mediandødsdato
UK I0//00 D I
12
på dag 19,0. Ved dosismængder på 75 og 13 mg/kg overlevede alle de behandlede dyr, hvilket indebærer en T/C på 315% og henholdsvis 7 ud af 10 og 5 ud af 10 helbredelser. Ved den relativt lave dosis på 3 mg/kg blev endvidere 5 DN2-kriteriet ifølge NCI opfyldt ved opnåelse af en T/C
på 152%. 1 helbredelse blev opnået ved denne· dosismængde.
Forbindelse 1 er anført som værende en aktiv antisvulst-forbindelse ved de anførte flerdosisundersøgelser.
10
Tabel 1.
Antisvulstvirkning - forbindelse 1.
15 lægemiddel- Behandlet Kontrol Helbred- Procent dosis gruppe, gruppe, eiser behandlede mg/kg overlevelses- overlevelses- dyr/kontrol- tid - tid dyr.
75 60,0 19,0 7/10 315% 20 50 18,0 1/10 94% 33 18,0 3/10 94% 20 16,0 2/10 13 60,0 5/10 315% 9 10,4 3/10 25 6 12,0 1/10 3 28,9 1/10 152%
Som vist i tabel 1 udviser forbindelse 1 fremragende virkning mod Lewis' lungecarcinom. Lewis' lungecarcinom 3 0 er et fortrinligt eksempel på et metastatisk svulstsystem. Forsøgsdyrene og kontroldyrene blev i eksempel 12 podet IV med et homogenat af svulsten. Dramatisk ekspression af denne svulst ses derefter i lungerne. Evnen til metastasedannelse er en egenskab, der specielt karakteri-3 5 serer en ondartet svulst i forhold til en godartet svulst.
DK 167765 B1 13
Eksempel ·5.
I dette eksempel blev forbindelse 1 afprøvet i BrD„F,-hunmus, der blev smittet med Lewis’ lungecarcinom. Me-5 dianoverlevelsestiden for forsøgsdyrene blev sammenlig net med medianoverlevelsestiden for tilsvarende kontroldyr· På basis af dette kriterium viste forbindelse 1 sig at være et effektivt antisvulstmiddel som vist i tabel 2. Ved dosismængder på 50, 25 og 12,50 mg/kg overlevede alle forsøgsdyrene, hvilket fører til en T/C på 355%.
Henholdsvis 6 ud af 10, 7 ud af 10 og 8 ud af 10 helbredelser blev opnået.
15 Tabel 2.
Antisvulstvirkning - forbindelse-1.
Lægemiddel- Behandlet Kontrol Helbred- Procent 20 dosis gruppe, gruppe, eiser behandlede rogAg overlevelses- overlevelses- dyr/kontrol- tid tid dyr.
200 10,7 16,9 0/10 25 100 20/3 3/10 120 50 60,0 6/10 355 25 60,0 7/10 355 12 60,0 8/10 355
Forbindelse 1 blev yderligere afprøvet i en Lewis' lunge 30 , , xn vivo musemodel under anvendelse af B^D^F,-hunmus, der O 2 1 blev smittet med Lewis' lungecarcinom. Resultaterne er anført i tabel 3. Som vist fører forbindelse 1 i lave dosismængder (24, 12 og 6 mg/kg) til en T/C på 297%.
Henholdsvis 9 ud af 10, 9 ud af 10 og 5 ud af 10 hel-35 bredeiser blev opnået. Forbindelse 1 frembragte en DN2-virkningsgrad (procent T/C større end 150) på 153 ved den lave dosis på 3 mg/kg. Resultaterne bekræfter, at forbindelse 1 er et effektivt antisvulstmiddel over for Lewis' lungecarcinom hos mus.
14
Antisvulstvirkning - forbindelse 1.
5 DK 167765 B1
Tabel 3.
Lægemiddel- Behandlet ’ Kontrol Helbred- Procent dosis gruppe, gruppe, eiser behandlede iaq/kq overlevelses- overlevelses- dyrAontrol- tid tid dyr.
10 _*_ 24.00 60,0 20,2 9/10 297 12.00 60,0 9/10 297 6.00 60,0 5/10 297 3.00 31,0 0/10 153 15 1,50 22,3 0/10 110 0,75 21,7 0/10 107
Eksempel 6 20
Forbindelse 2, 2- (5-phosphono-f3-D-ribofuranosyl) selena= zol-4-carboxamid, blev afprøvet for virkning mod Lewis' lungecarcinom på en måde svarende til den i eksempel 4 beskrevne. I dette eksempel blev B6D2Fl-hanmus smittet med Lewis' lungecarcinom. Middeloverlevelsestiden for 25 forsøgsdyrene blev sammenlignet med middeloverlevelsestiden for tilsvarende kontroldyr. På basis af dette kriterium blev forbindelse 2 betragtet som et effektivt anti-' svulstmiddel. I dette eksempel opnåedes helbredelser gående fra 1 ud af 10 til 4 ud af 10 ved en dosis gående fra 30 9 mg/kg til 75 mg/kg som vist i nedenstående tabel 4.
Ved 13 mg/kg har de behandlede, overlevende mus en T/C på 315%, og 4 ud af 20 helbredelser blev opnået.
35
Antisvulstvirkning - forbindelse 2.
DK 167765 Bl 15
Tabel 4.
5 Lægemiddel- Behandlet Kontrol Helbred- Procent dosis gruppe, gruppe, eiser behandlede mgAg overlevelses- overlevelses- dyrAontrol- tid tid dyr.
75 15,5 19,0 1/10 10 50 12,5 3/10 33 12,5 3/10 20 12,0 2/10 13 60,0 4/10 315 9 12,5 1/10 15 6 22,0 0/10 115 3 20,8 0/10 109
Ved yderligere forsøg blev vækstinhiberende virkninger af forbindelse 1 og forbindelse 2 målt over for 3 muse-20 svulstslægter i suspensionscellekultur. Cellekulturer blev initieret ved en tæthed på 50.000 celler/mg i mediet.' RPftE 1630 suppleret med 10% kalvefosterserum. Sammensætningen af dette kulturmedium og detaljer ved dyrkningsproceduren fulgte den publiserede metode (G. E.
25 Morre, A. A. Sandberg og K. Ulrich, Suspension Cell
Culture and in vivo and in-vitro chromosome constitution of mouse leukemia L1210, Journal of the National Cancer Institute _36, 405-415, 1966) . Kulturer blev holdt ved 37 C i stationær suspensionskultur under en atmosfære 30 af 95% luft + 5% C02· Forsøgsforbindelser blev sat til behandlede kulturer på initieringstidspunktet og var kontinuerligt til stede. Efter 72 timer blev 40 ganges fortyndelser af lægemiddelbehandlede og ubehandlede kontrolkulturer fremstillet i 0,9% NACl-opløsning, og cel-35 ler blev talt med en elektronisk partikeltæller. Resul taterne ved forsøgene er vist i nedenstående tabel 5.
De vækstinhiberende virkninger er udtrykt som IDgQ-værdier, nemlig inhiberende doser eller koncentrationer af forsøgsforbindelse, der kræves til formindskelse af celleop- DK 167765 Bl 16 tællingen i behandlede kulturer til 50% af celleoptællingen i ubehandlede kontrolkulturer.
Tabel 5.
ID^q-værdier (molær) over for forskellige svulstcelleslægter .
L-1210 P388 B^gMelanom
Forbindelse 1 4,0 x 10~7 2,7 x 10~7 3,5 x ΙΟ-6
Forbindelse 2 5,8 x lo"8 6,6 x 10~8 7,5 x 10"6
Disse resultater viser, at forbindelse 1 og forbindelse 5 2 begge inhiberer vækst i cellekulturer af repræsentative svulstslægter i ekstrem lav dosis. I denne henseende viser 51-phosphatet (forbindelse 2) sig at være overlegent i forhold til forbindelse 1«
Eksempel 7 10 I én udførelsesform udviste forbindelse 1 virkning over for både små og store vira af både DNA- KNA-typer ved virusbedømmelsesmetoden (VR) ifølge Sidwell et al., Appl. Microbiol. 22, 797 (1971). En virusbedømmelse, der er større end 1,0, angiver bestemt antiviral virkning. En 15 virusbedømmelse på 0,5 - 0,9 angiver moderat antiviral virkning, og en virusbedømmelse på mindre end 0,5 antyder ringe eller ingen tilsyneladende antiviral virkning. De nedenfor anførte resultater blev opnået ved afprøvning på "Microtest" II (Falcon Plastics) plastplader 20 med et monolag af Vero- eller HeLa-celler.
Antiviral virkning af forbindelse 1.
DK 167765 B1 17
Virusbe- ED^q (yg/ml) dønmelse
Virus Vero HeLa Vero HeLa ENA-vira.
Para 3 2,6 2,2 1 1 Mæslinger 2,0 1,8 1 2 Fåresyge 1,7 1,0 5 1
Eeo 3 1,8 2,7 1 8 VSV 0,4 2,1 1000 9
Cox Bl 1,7 1,8 15 10
Cox B4 0,0 2,3 1000 6.
DM-vira.
W 2,1 2,4 3 2
Ad-2 1,9 9 HSV-1 1,2 1,4 30 2 HSV-2 1,5 1,5 10 4
Resultaterne viser, at forbindelse 1 har en god bredspektret antiviral virkning over for både DNA- og RNA-vira. Af DNA-viraene blev repræsentanterne for familierne 5 Poxviridae (Vaccinia) og Herpesviridae (HSV-1, HSV-2) inhiberet mest. Størst virkning blev iagttaget over for repræsentanterne for KNA-familierne Paramyxoviridae (para-3, fåresyge, mæslinger) og Reoviridae (Reo-3). Fortrinlig antiviral virkning blev målt i HeLa-celler for 10 familierne Adenoviridae (Adeno-2), Picornaviridae (Cox Bl, Cox B4) og Rhabdoviridae (VSV).
Undersøgelserne viser yderligere, at antiviral virkning af forbindelse 1 er både virusidal (over for Vaccinia)

Claims (4)

5 Forbindelse 1 er ikke-toksisk over for Vero, HeLa- og MRC-5-celler i mængder på 1000 yg/ml (den højeste afprøvede koncentration). Disse resultater viser yderligere, at forbindelse 1 in-hiberer viral-cytopatiske virkninger i cellekultur for 10 repræsentative viraer i ekstremt lav dosis. Forbindelse 1 udviser lav cytotoksicitet og er opløselig i vandige medier. Patentkrav.
1. Analogi fremgangsmåde til fremstilling af 2 - /3 - D - ribof urano - sylselenazol-4-carboxamidforbindelser med den almene formel: O ti /-C-N- H2N 1I x •S/3® r3och9 RO OR 1. o hvori R og R hver er H, lavere alkanoyl eller benzoyl, og R er H, lavere alkanoyl, benzoyl eller 0 II H0-P-; OH DK 167765 B1 19 og når R3 er phosphono, fysiologisk acceptable salte deraf, kendetegnet ved, at man: aj underkaster et alkyl-2-(2,3,5-tri-0-acyl-/J-D-ribofurano-syl)selenazol-4-carboxylat ammonolyse, 5 b) phosphorylerer 2-/3-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxmid, c) acy 1 erer 2-0-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamid, og isolerer produktet, eventuelt i form af et salt.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af 2-0-D-ribo-furanosylselenazol-4-carboxamid kendetegnet ved, at 10 et alkyl-2-(2,3,5-tri-O-acyl-jff-D-ribofuranosyl) selenazol-4-carboxylat som udgangsmateriale underkastes ammonolyse.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af 2-ø-D-ribo- furanolsylselenazol-4-carboxamid-5'-phosphat, kende tegnet ved, at 2-/3-D-ribofuranosylselenazol-4-carbox- 15 amid phosphoryleres.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af natriumsaltet af 2-£-D-ribofuranosy1selenazol-4-carboxamid-5'-phosphat, kendetegnet ved, at 2-0-D-ribofuranosylselenazol- 4-carboxamid phosporyleres, og at produktet isoleres i form af 20 natriumsaltet. 1 25 Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af 2-(2,3,5-tri-O-acety l-j8-D-r ibof uranosyl )selenazol-4-carboxamid, kendetegnet ved, at 2-/3-D-ribofuranosylselenazol-4-car-boxamid acetyleres.
DK129983A 1982-03-23 1983-03-22 Analogifremgangsmaade til fremstilling af 2-beta-d-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser DK167765B1 (da)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US36096882A 1982-03-23 1982-03-23
US36096882 1982-03-23
US06/465,221 US4531001A (en) 1982-03-23 1983-02-15 2-β-D-ribofuranosylselenazole-4-carboxamide compounds
US46522183 1983-02-15

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK129983D0 DK129983D0 (da) 1983-03-22
DK129983A DK129983A (da) 1983-09-24
DK167765B1 true DK167765B1 (da) 1993-12-13

Family

ID=27001098

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK129983A DK167765B1 (da) 1982-03-23 1983-03-22 Analogifremgangsmaade til fremstilling af 2-beta-d-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser
DK025093A DK172165B1 (da) 1982-03-23 1993-03-08 Mellemprodukter til fremstilling af terapeutisk aktive 2-beta-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK025093A DK172165B1 (da) 1982-03-23 1993-03-08 Mellemprodukter til fremstilling af terapeutisk aktive 2-beta-D-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4531001A (da)
EP (1) EP0089678B1 (da)
KR (1) KR880001869B1 (da)
AU (1) AU553665B2 (da)
CA (1) CA1209986A (da)
DE (1) DE3366378D1 (da)
DK (2) DK167765B1 (da)
ES (5) ES8404373A1 (da)
FI (1) FI76574C (da)
GR (1) GR78301B (da)
IE (1) IE54520B1 (da)
NO (1) NO155842C (da)
NZ (1) NZ203649A (da)
PT (1) PT76426B (da)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4619996A (en) * 1984-07-09 1986-10-28 Warner-Lambert Company Process for preparing 2-β-D-ribofuranosylselenazole-4-carboxamide
US4801698A (en) * 1986-08-15 1989-01-31 Warner-Lambert Company Process for preparing diaminopyrimido(4,5-d)pyrimidine glycoside and glycotide
US5438131A (en) * 1992-09-16 1995-08-01 Bergstrom; Donald E. 3-nitropyrrole nucleoside
GB9307043D0 (en) * 1993-04-05 1993-05-26 Norsk Hydro As Chemical compounds
WO1996026212A1 (en) * 1995-02-17 1996-08-29 Icn Pharmaceuticals, Inc. Procedures for obtaining ribo-c-nucleosides
SI20161A (sl) * 1997-06-30 2000-08-31 Icn Pharmaceuticals, Inc. Postopek za proizvodnjo tiazofurina in drugih C-nukleozidov

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3423399A (en) * 1966-06-09 1969-01-21 Takeda Chemical Industries Ltd Method for the production of 5'-ribonucleotide
US3798209A (en) * 1971-06-01 1974-03-19 Icn Pharmaceuticals 1,2,4-triazole nucleosides
US3984396A (en) * 1971-06-01 1976-10-05 Icn Pharmaceuticals, Inc. 1-(β,-D-ribofuranosyl)-1,2,4-triazole acid esters

Also Published As

Publication number Publication date
IE830580L (en) 1983-09-23
CA1209986A (en) 1986-08-19
EP0089678B1 (en) 1986-09-24
ES520826A0 (es) 1984-05-01
DK25093D0 (da) 1993-03-08
EP0089678A1 (en) 1983-09-28
NO831012L (no) 1983-09-26
FI830941A0 (fi) 1983-03-22
DK129983D0 (da) 1983-03-22
NZ203649A (en) 1985-02-28
ES8600322A1 (es) 1985-10-01
PT76426B (en) 1986-02-04
ES8600323A1 (es) 1985-10-01
AU553665B2 (en) 1986-07-24
FI76574B (fi) 1988-07-29
KR840004126A (ko) 1984-10-06
FI76574C (fi) 1988-11-10
NO155842B (no) 1987-03-02
FI830941L (fi) 1983-09-24
AU1269383A (en) 1983-09-29
DE3366378D1 (en) 1986-10-30
ES527279A0 (es) 1985-10-01
NO155842C (no) 1987-06-10
ES8404373A1 (es) 1984-05-01
KR880001869B1 (ko) 1988-09-23
ES527276A0 (es) 1985-10-01
DK129983A (da) 1983-09-24
DK172165B1 (da) 1997-12-08
IE54520B1 (en) 1989-11-08
DK25093A (da) 1993-03-08
PT76426A (en) 1983-04-01
ES8600321A1 (es) 1985-10-01
ES8504795A1 (es) 1985-04-16
US4531001A (en) 1985-07-23
GR78301B (da) 1984-09-26
ES527278A0 (es) 1985-04-16
ES527277A0 (es) 1985-10-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5721219A (en) N-alkyl-2-substituted ATP analogues and administration to inhibit platelet aggregation
EP0508687B1 (en) ATP analogues
CS233665B1 (en) Processing of isomere o-phosphonylmethylderivative of anantiomere racemic vicinal diene
KR890000762B1 (ko) 1-β-D-아라비노프라노실-(E)-5-(2-할로게노비닐)우라실-5'-인산의 제조방법
US5654285A (en) ADP and ATP analogues, process for making and administration to inhibit ADP-induced platelet aggregation
DK167765B1 (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af 2-beta-d-ribofuranosylselenazol-4-carboxamidforbindelser
JPH0674259B2 (ja) フラバノン誘導体
AU2008278337B2 (en) Novel sulfonated sugar compound and use thereof as medicine
EP0445258B1 (en) 5'-alkylphosphonylnucleosides as antivirals
EP0272810A2 (en) Antitumor and antiviral alkaloids
US4594416A (en) 2-β-D-ribofuranosylselenazole-4-carboxamide compounds and methods for their production
US4594414A (en) 2-β-D-ribofuranosylselenazole-4-carboxamide compounds and methods for their production
CA1304359C (en) Antitumor and antiviral compositions of marine origin
AU648885C (en) ATP analogues
DE2529533A1 (de) 3-desazaguanin sowie derivate dieser verbindung
IL44537A (en) 9-beta-d-arabinofuranosyl purine nucleotides and their preparation
FI76573C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya, 2- -d-ribofuranosyltiazol-4-karboxamidderivat med antitumoeraktivitet.
JPH0326194B2 (da)
JPS5885898A (ja) ネプラノシンａリン酸エステル誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
PUP Patent expired
B1 Patent granted (law 1993)
PUP Patent expired