EA026414B1

EA026414B1 - Способ получения флавоноидов, обладающих биологической активностью

Info

Publication number: EA026414B1
Application number: EA201500407A
Authority: EA
Inventors: Джамиля Юсиф кызы Юсифова; Исрафиль Солтан Оглы Мовсумов
Original assignee: Азербайджанский Медицинский Университет
Priority date: 2014-12-25
Filing date: 2014-12-25
Publication date: 2017-04-28
Also published as: EA201500407A1

Abstract

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения флавоноидов из листьев лещины (Corylus avellana L.), обладающих сосудоукрепляющим, противовоспалительным, гепатотропным, антиоксидантным действиями для создания лекарственных препаратов. Сущность способа состоит в экстракции листьев лещины обыкновенной 95%-ным этиловым спиртом, упаривании спирта, прибавлении очищенной воды, упаривании до водного остатка, промывании хлороформом, упаривании очищенного водного раствора, отфильтровании осадка, упаривании до сухого остатка, дальнейшем растворении в этиловом спирте, концентрировании, отделении кристаллов, упаривании фильтрата до сухого остатка, растворении в очищенной воде, отфильтровании, упаривании до сухого остатка и объединении осадка из воды с кристаллами из спирта. Полученный целевой продукт является суммой агликонов и гликозидов, состоящей из мирицетина, кемпферола, кверцетина, кверцитрина, афзелина, мирицитрина.

Description

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения флавоноидов из листьев лещины (Согу1и8 ауе11апа Ь.), обладающих сосудоукрепляющим, противовоспалительным, гепатотропным, антиоксидантным действиями для создания лекарственных препаратов.

Известен способ получения препарата Фламин, содержащего сумму флавоноидов из цветков бессмертника песчаного [1]. Недостатком данного способа является то, что экстракция из сырья флавоноидов 50%-ным этанолом не обеспечивает полноту выхода целевого продукта. Кроме того, способ является трудоемким. Извлечение флавоноидов из водного раствора смесью этилацетат-этанола в соотношении 9:1 не обеспечивает чистоту целевого продукта.

Известен способ получения суммы флавоноидов из семян расторопши пятнистой, обладающей гепатотропным действием [2]. Недостатком данного способа является то, что при экстракции сырья 9596%-ным этанолом из растительного материала, наряду с флавоноидами, экстрагируются и такие сопутствующие вещества, как кумарины, стерины, хлорофиллы, липиды и др., которые загрязняют первичный экстракт. Экстракция в течение 12 ч не обеспечивает полноту выхода целевого продукта.

Наиболее близким по техническому решению (прототипом) является работа по лещине [3]. Листья лещины во многих странах мира применяются в народной медицине при различных заболеваниях [4]. В Азербайджанской Республике имеются огромные природные запасы лещины обыкновенной, как, например, на территории районов Шеки, Закаталы. Гаха, Ленкорани, Лерика и др. [5]. В листьях лещины обыкновенной содержится около 4% флавоноидов. Следовательно, все эти преимущества стимулируют разработку способа получения флавоноидов из данного сырья. Недостатком известного способа является то, что он является дорогостоящим, так как применяются такие растворители, как гексан, этилацетат, которые являются огнеопасными и труднодоступными. Кроме того, способ является сложным и требует много времени.

Задачей данного изобретения явилось упрощение технологии, увеличение выхода целевого продукта и сокращение процесса.

Поставленная задача решается тем, что в способе получения флавоноидов, включающем использование в качестве сырья листьев С.ауе11апа Ь., экстракцию 95%-ным этанолом трижды в соотношении 1:8, объединение экстрактов, упаривание до водного остатка, обработку хлороформом и другими органическими растворителями, предусмотрены следующие отличия: экстракция растительного сырья 95%-ным этиловым спиртом проводится дважды в соотношении 1:10 (1 часть сырья:10 частей этанола), очистку проводят только хлороформом.

Сумма флавоноидов в растениях представлена агликонами и гликозидами. И гликозиды, и агликоны флавоноидов хорошо экстрагируются 95%-ным этиловым спиртом.

Преимуществом данного способа является то, что потеря целевого продукта снижается до минимума, так как не применяются гексан и этилацетат. Применение хлороформа для очистки водного раствора, содержащего флавоноиды, позволяет избавиться от хлорофиллов, тритерпеновых соединений, стеринов, красящих веществ и смол.

Между совокупностью существенных признаков и достигаемым техническим результатом существует причинно-следственная связь: из-за отказа от применения таких органических растворителей, как гексан и этилацетат, потеря целевого продукта снижается до минимума; применение хлороформа для очистки водного раствора, содержащего флавоноиды, позволяет избавиться от хлорофиллов, тритерпеновых соединений, стеринов, красящих веществ и смол; проведение экстракции этанолом дважды сокращает и облегчает процесс.

Способ осуществляется нижеследующим: очищенный водный раствор упаривают под вакуумом до объема 100 мл и оставляют при комнатной температуре на сутки. Образующий осадок отфильтровывают, промывают водой (продукт 1). Продукт 1 состоит из мирицетина, кверцетина, кемпферола. Далее промывную воду присоединяют к маточному раствору, который упаривают до сухого остатка, растворяют в 95%-ном этаноле, упаривают до объема 100 мл и оставляют при 8-10°С. Через сутки осадок отфильтровывают (продукт 2). Продукт 2 состоит из кверцетрина. Затем промывают этим же растворителем и присоединяют к спиртовому раствору. Спирт упаривают до сухого остатка, растворяют в очищенной воде, отфильтровывают, фильтрат упаривают до сухого остатка (продукт 3). Продукт 3 состоит из афзелина, мирицитрина. Продукты 1, 2, 3 объединяют, высушивают до постоянной массы. Таким образом, получают целевой продукт, который состоит из веществ флавоноидной природы: мирицетина (3,5,7,3',4',5'гексаоксифлавон), кемпферола (3,5,7,4'-тетраоксифлавон), кверцетина (3,5,7,3',4'-пентаоксифлавон), кверцетрина (5,7,3',4'-тетраокси-3-(0-а-Ь-рамнопиранозил)флавон или кверцетин-3-0-а-Ь-рамнозид), афзелина (5,7,4'-тригидрокси-3-(0-а-Ь-рамнопиранозил)флавон или кемпферол-3-(0-а-Ь-рамнозид) и мирицитрина (5,7,3',4',5'-пентаокси-3-(0-а-Ь-рамнопиранозил)флавон). Выход целевого продукта составляет 3,8-4,0%.

Полученная сумма флавоноидов (целевой продукт) желтовато-коричневого цвета. Продукт плохо растворим в воде, этаноле, хорошо растворим в диметилсульфоксиде (ДМСО) и водном этаноле.

Возможность осуществления заявляемого изобретения показана следующими примерами.

- 1 026414

Пример 1.

1,0 кг сухих и измельченных листьев лещины обыкновенной (Согу1и8 ауе11апа Ь.) экстрагируют 95%-ным этиловым спиртом в соотношении 1:10 в течение 24 ч. Экстракты отфильтровывают, к обработанному сырью прибавляют новую порцию того же растворителя в том же соотношении. Через 24 ч экстракты отфильтровывают, объединяют, упаривают под вакуумом до 300 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды, упаривают в тех же условиях до водного остатка. К водному остатку прибавляют 10 л хлороформа и тщательно взбалтывают в течение 1 ч. Хлороформ отделяют, водный раствор упаривают до объема 100 мл и оставляют на сутки. Образующийся осадок отфильтровывают (продукт 1), промывают водой, промывную воду прибавляют к маточному раствору, упаривают до сухого остатка, остаток растворяют в 95%-ном этаноле, упаривают до объема 100 мл и оставляют при 8-10°С. Через сутки осадок отфильтровывают (продукт 2), промывают тем же растворителем, присоединяют к маточному раствору, упаривают до сухого остатка, растворяют в воде, отфильтровывают и упаривают до сухого остатка (продукт 3). Продукты 1, 2 и 3 объединяют, высушивают при 90-95°С до постоянной массы. Получают целевой продукт. Выход целевого продукта 3,8-4,0%. Чистота целевого продукта определяется по цвету и бумажной хромотографией. Вещество высушивают в термостате.

Пример 2.

1,0 кг сухих и измельченных листьев лещины обыкновенной (Согу1и8 ауе11апа Ь.) экстрагируют 95%-ным этиловым спиртом в соотношении 1:8 в течение 24 ч. Экстракты отфильтровывают, к обработанному сырью прибавляют новую порцию того же растворителя в том же соотношении. Через 24 ч экстракты отфильтровывают, объединяют, упаривают под вакуумом до 300 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды, упаривают в тех же условиях до водного остатка. К водному остатку прибавляют 10 л хлороформа и тщательно взбалтывают в течение 1 ч. Хлороформ отделяют, водный раствор упаривают до объема 100 мл и оставляют на сутки. Образующийся осадок отфильтровывают (продукт 1), промывают водой, промывную воду прибавляют к маточному раствору, упаривают до сухого остатка, остаток растворяют в 95%-ном этаноле, упаривают до объема 100 мл и оставляют при 8-10°С. Через сутки осадок отфильтровывают (продукт 2), промывают тем же растворителем, присоединяют к маточному раствору, упаривают до сухого остатка, растворяют в воде, отфильтровывают и упаривают до сухого остатка (продукт 3). Продукты 1, 2 и 3 объединяют, высушивают при 90-95°С до постоянной массы. Получают целевой продукт. Выход целевого продукта 3,2-3,4%. Чистота целевого продукта определяется по цвету и бумажной хромотографией. Вещество высушивают в термостате.

Пример 3.

1,0 кг сухих и измельченных листьев лещины обыкновенной (Согу1и8 ауе11апа Ь.) экстрагируют 80%-ным этиловым спиртом в соотношении 1:10 в течение 24 ч. Экстракты отфильтровывают, к обработанному сырью прибавляют новую порцию того же растворителя в том же соотношении. Через 24 ч экстракты отфильтровывают, объединяют, упаривают под вакуумом до 300 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды, упаривают в тех же условиях до водного остатка. К водному остатку прибавляют 10 л хлороформа и тщательно взбалтывают в течение 1 ч. Хлороформ отделяют, водный раствор упаривают до объема 100 мл и оставляют на сутки. Образующийся осадок отфильтровывают (продукт 1), промывают водой, промывную воду прибавляют к маточному раствору, упаривают до сухого остатка, остаток растворяют в 80%-ном этаноле, упаривают до объема 100 мл и оставляют при 8-10°С. Через сутки осадок отфильтровывают (продукт 2), промывают тем же растворителем, присоединяют к маточному раствору, упаривают до сухого остатка, растворяют в воде, отфильтровывают и упаривают до сухого остатка (продукт 3). Продукты 1, 2 и 3 объединяют, высушивают при 90-95°С до постоянной массы. Получают целевой продукт. Выход целевого продукта 3,8-4,0%, но загрязненный. Чистота целевого продукта определяется по цвету и бумажной хромотографией. Вещество высушивают в термостате.

Список используемых аппаратур и средств

1. Стеклянные сосуды для экстракции.

2. Воронки для фильтрации.

3. Приемник для экстрактов.

4. Водяная баня 90-95°С.

5. Стеклянная колба для упаривания.

6. Холодильник для перегонки экстракта.

7. Приемник для растворителей.

8. Фарфоровая чашка для упаривания концентрированного экстракта.

9. Вытяжная система для сушки.

10. Термостат для окончательной сушки целевого продукта.

11. Стеклянный сосуд для сбора целевого продукта.

12. Вакуум-насос.

13. Роторный испаритель.

14. Фильтровальная бумага.

15. Растворитель: хлороформ, этиловый спирт, очищенная вода.

16. Хроматографическая бумага - РШгак ΡΝ 5.

- 2 026414

Литература

1. Технология лекарственных форм, под ред. Л.А. Ивановой. Москва: Медицина, 1991, т. 2, с. 439.

2. Караев Э.А., Мовсумов И.С. Патент Азербайджанской Республики I 2009 0059 от 08.04.2009.

3. Мовсумов И.С., Юсифова Д.Ю., Гараев Э.А. Биологически активные вещества Согу1из ауейапа Б., произрастающей в Азербайджане // Химия растительного сырья, 2013, № 4, с. 259-261.

4. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Мадпойаееае - Ышотаееае. Ленинград, 1985, 460 с.

5. Флора Азербайджана, Баку, 1952, т. III, с. 88 (в 8-и томах).

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ получения флавоноидов, обладающих биологической активностью, включающий экстракцию растительного сырья 95%-ным этиловым спиртом, упаривание до водного остатка, промывание хлороформом, отличающийся тем, что сырье (листья лещины обыкновенной Согу1из ауейапа Б.) дважды экстрагируют 95%-ным этиловым спиртом в соотношении сырье:этанол 1:10, экстракты объединяют, упаривают, прибавляют 200 мл воды, упаривают до водного остатка, промывают хлороформом, отделяют водный раствор, упаривают до 100 мл, оставляют, через сутки образующийся осадок отделяют, получают продукт 1, состоящий из мирицетина, кверцетина, кемпферола, далее маточник упаривают до сухого остатка, растворяют в этаноле, отфильтровывают, упаривают до объема 100 мл, оставляют при 8-10°С, через сутки осадок отфильтровывают, получают продукт 2, состоящий из кверцетрина, затем фильтрат упаривают до сухого остатка, растворяют в воде, отфильтровывают, упаривают до сухого остатка, получают продукт 3, состоящий из афзелина, мирицитрина, продукты 1, 2 и 3 объединяют, высушивают до постоянной массы и получают целевой продукт в виде порошка желтовато-коричневого цвета.

Схема получения флавоноидов, обладающих биологической активностью