EA025863B1

EA025863B1 - Карбазолкарбоксамидные соединения

Info

Publication number: EA025863B1
Application number: EA201690012A
Authority: EA
Inventors: Соо Сун Ко; Дуглас Г. Батт; Мира Беаудоин Бертранд; Джордж В. Делукка; Чарльз М. Лангевин; Чинцзе Лю; Анураг С. Сривастава; Скотт Хантер Ваттерсон
Original assignee: Бристол-Майерс Сквибб Компани
Priority date: 2013-06-25
Filing date: 2014-06-25
Publication date: 2017-02-28
Also published as: EP3013815B1; US20160200710A1; US9714234B2; WO2014210087A1; CA2916504A1; CN105473573B; BR112015031432A2; KR20160022890A; CN105473573A; IL243295A0; MX2015016771A; JP2016523908A; JP6353530B2; KR102345381B1; EA201690012A1; AU2014302550A1; SG11201510028PA; EP3013815A1

Abstract

Раскрытыми являются соединения формулы (I)и их соли, где Q представляет собойилиRпредставляет собой -С(СН)ОН, -NHC(=O)C(CH), -N(CH)или -CHR; Rпредставляет собой Cl или -СН; Rпредставляет собой Н, F или -СН; Rпредставляет собой Н или -СН; Rпредставляет собой Н, F, Cl или -ОСН; Rпредставляет собой Н или F и Rпредставляет собой -ОН, -ОСН, -NHC(=O)CHилиТакже раскрыты способы применения таких соединений в качестве ингибиторов тирозинкиназы Брутона (Btk) и фармацевтические композиции, содержащие такие соединения. Эти соединения являются полезными для лечения, профилактики или замедления прогрессирования заболеваний или расстройств в различных терапевтических областях, таких как аутоиммунные заболевания и заболевания сосудов.

Description

Настоящее изобретение, в общем, относится к карбазолкарбоксамидным соединениям, которые используются в качестве ингибиторов киназы, включая модулирование активности тирозинкиназы Брутона (В1к) и других киназ семейства Тес, таких как Ик. В настоящем изобретении представлены карбазолкарбоксамидные соединения, композиции, содержащие такие соединения, и способы их применения. Изобретение, кроме того, относится к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно соединение по изобретению, которое используется для лечения патологических состояний, ассоциированных с модулированием активности киназы, и к способам ингибирования активности киназ, включая В1к и другие киназы семейства Тес, такие как Ик, у млекопитающих.

Протеинкиназы, самое большое семейство ферментов человека, охватывают более 500 белков. В1к представляет собой член семейства Тес тирозинкиназ и является регулятором раннего развития В-клеток, а также активации, передачи сигнала и выживаемости зрелых В-клеток.

Передача сигнала в В-клетках через посредство В-клеточного рецептора (ВСК) приводит к широкому кругу биологических продуктов, которые, в свою очередь, зависят от стадии развития В-клеток. Величина и длительность сигналов ВСК должны точно регулироваться. Аберрантная ВСКопосредованная передача сигнала может вызывать нерегулируемую активацию В-клеток и/или образование патогенных аутоантител, приводящих к многочисленным аутоиммунным и/или воспалительным заболеваниям. Мутация В1к у человека приводит к Х-сцепленной агаммаглобулинемии (ХЬА). Это заболевание связано с нарушенным созреванием В-клеток, уменьшенной продукцией иммуноглобулинов, аномальным независимым от Т-клеток иммунным ответом и заметным снижением постоянного кальциевого сигнала при стимуляции ВСК.

Доказательство роли В1к при аллергических расстройствах и/или аутоиммунном заболевании и/или воспалительном заболевании было обосновано посредством моделей В1к-нокаутных мышей. Например, как было показано на стандартных предклинических мышиных моделях системной красной волчанки (8ЬЕ), недостаточность В1к, приводит к заметному улучшению состояния при развитии заболевания. Кроме того, В1к-нокаутные мыши также устойчивы к развитию индуцированного коллагеном артрита и менее восприимчивы к артриту, вызываемому стафилококком.

Роль В-клеток и гуморальной иммунной системы в патогенезе аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний поддерживается большим количеством доказательств. Терапевтические средства на основе белка (такие как ΚΙΤυΧΑΝ®), разработанные для истощения В-клеток, представляют собой важный подход к лечению ряда аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний. Исходя из роли В1к при В-клеточной активации ингибиторы активности В1к могут быть полезны в качестве ингибиторов опосредованной В-клетками патогенной активности (такой как образование аутоантител). В1к также экспрессируется в тучных клетках и моноцитах и, как было показано, является важной для функции этих клеток. Например, недостаточность В1к у мышей ассоциируется с ослабленной 1дЕ-опосредованной активацией тучных клеток (заметным понижением высвобождения ΤΝΕ-α и других воспалительных цитокинов), а недостаточность В1к в организме человека ассоциируется со значительно пониженной продукцией ΤΝΕα активированными моноцитами.

Таким образом, ингибирование активности В1к может быть использовано для лечения аллергических расстройств и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний, включая, но, не ограничиваясь ими, системную красную волчанку (8ЬЕ), ревматоидный артрит, рассеянный склероз, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ΙΤΡ), миастению, аллергический ринит, рассеянный склероз (М§), отторжение трансплантата, диабет типа I, мембранозный нефрит, воспалительное заболевание кишечника, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунный тиреоидит, болезни холодовой и тепловой агглютинации, синдром Эванса, гемолитико-уремический синдром/тромботическую тромбоцитопеническую пурпуру (Ηυδ/ΤΤΡ), саркоидоз, синдром Шегрена, периферическую невропатию (например, синдром Гийена-Барре), пузырчатку обыкновенную и астму.

В дополнение, В1к, как было отмечено, играет важную роль в контролировании выживаемости Вклеток при некоторых видах В-клеточного рака. Например, В1к, как было показано, имеет важное значение для выживаемости клеток ВСК-АЫ-позитивного В-клеточного острого лимфобластного лейкоза. Таким образом, ингибирование активности В1к может быть полезным для лечения В-клеточной лимфомы и лейкемии. Ввиду многочисленных обстоятельств, которые, как предполагается, принесут пользу при лечении, включающем модулирование активности протеинкиназ, становится очевидным, что новые соединения, способные модулировать активность протеинкиназы, такой как В1к, и способы применения этих соединений должны обеспечить значительные терапевтические преимущества для широкого круга пациентов.

В патенте США № 8084620 и \УО 2011/159857 представлены соединения трициклического карбок- 1 025863 самида, используемые в качестве ингибиторов киназ, включая модулирование активности В1к и других киназ семейства Тес.

Но все еще остается потребность в соединениях, полезных в качестве ингибиторов активности В1к и, кроме того, обладающих селективностью в отношении тирозинкиназы 1ак2. Кроме того, все еще существует потребность в соединениях, полезных в качестве ингибиторов В1к, которые обладают селективностью в отношении тирозинкиназы 1ак2 и также имеют улучшенный потенциал в отношении ВСКстимулированной экспрессии СЭ69 в анализе цельной крови.

Авторы обнаружили сильнодействующие соединения, которые обладают активностью в качестве ингибиторов В1к. Кроме того, авторы обнаружили соединения, которые обладают активностью в качестве ингибиторов В1к и являются селективными в отношении тирозинкиназы 1ак2. Дополнительно авторы обнаружили соединения, которые обладают активностью как ингибиторы В1к, являются селективными в отношении 1ак2 тирозинкиназы и имеют улучшенный потенциал в отношении ВСК-стимулированной экспрессии СИ69 в анализе цельной крови. Эти соединения, как установлено, являются полезными в качестве фармацевтических средств с желаемой стабильностью, биодоступностью, терапевтическим индексом и значениями токсичности, которые важны для использования их в качестве лекарственных средств.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к карбазольным соединениям, которые полезны в качестве ингибиторов В1к, и могут быть использованы для лечения пролиферативных заболеваний, аллергических заболеваний, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний, включая их соли и пролекарства.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

Настоящее изобретение также относится к способу ингибирования активности В1к, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения аллергических заболеваний и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения пролиферативных заболеваний, таких как рак, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения заболевания или расстройства, связанного с активностью В1к, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также относится к способам и промежуточным соединениям для получения соединений формулы (I) и/или их соли.

Настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для применения в терапии.

Настоящее изобретение также относится к применению соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей для изготовления лекарственного средства для лечения или профилактики связанных с В1к патологических состояний, таких как пролиферативные заболевания, аллергические заболевания, аутоиммунные заболевания и воспалительные заболевания.

Настоящее изобретение также относится к применению соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей для изготовления лекарственного средства для лечения рака.

Соединения формулы (I) и композиции, содержащие соединения формулы (I), могут быть использованы для лечения, профилактики или санирования различных состояний, связанных В1к. Фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, являются полезными для лечения, профилактики или замедления прогрессирования заболеваний или нарушений в различных терапевтических областях, таких как пролиферативные заболевания, аллергические заболевания, аутоиммунные заболевания и воспалительные заболевания.

Эти и другие признаки изобретения будут изложены в развернутом виде как продолжение раскрытия.

Краткое описание чертежей

Изобретение проиллюстрировано путем ссылки на прилагаемые чертежи, описанные ниже.

На фиг. 1 показана абсолютная стереохимия промежуточного соединения 15.

На фиг. 2 показана абсолютная стереохимия двух взаимопревращающихся диастереомеров примера 3.

На фиг. 3 показаны экспериментальные и смоделированные структуры, установленные с помощью РХКЭ (порошковая рентгеновская дифракция) (излучение Си Κα, λ = 1,5418 А) моногидрата примера 3, кристаллическая форма Н1-6.

- 2 025863

Подробное описание изобретения

Первый аспект настоящего изобретения относится, по меньшей мере, к соединению формулы (I)

или его соли, где

О представляет собой

Κι представляет собой -С(СН₃)₂ОН, -ЛНС(=О)С(СН₃)₃, -Ы(СН₃)₂ или -СН₂К_а;

К₂ представляет собой С1 или -СН₃;

К₃ представляет собой Н, Р или -СН₃;

Ка представляет собой Н или -СН₃;

К_ь представляет собой Н, Р, С1 или -ОСН₃;

Ка представляет собой Н или Р; и

Ка представляет собой -ОН, -ОСН₃, - ЛНС(=О)СН₃ или

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где К_! представляет собой -С(СН₃)₂ОН и О. К₂ и К₃ определены в соответствии с первым аспектом. Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где К! представляет собой -ЛНС(=О)С(СН₃)₃ и Ц, К₂ и К₃ определены в соответствии с первым аспектом. Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I) или его соли, где К! представляет собой -Ы(СН₃)₂ и Ц, К₂ и К₃ определены в соответствии с первым аспектом. Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I) или его соли, где К! представляет собой -СН₂К_а и Ц, К₂, К₃ и К_а определены в соответствии с первым аспектом.

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I) или его соли, где К₂ представляет собой С1 и Ц, К_! и К₃ определены в соответствии с первым аспектом. Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I) или его соли, где К₂ представляет собой -СН₃ и Ц, К_! и К₃ определены в соответствии с первым аспектом. Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где К_! представляет собой -С(СН₃)₂ОН; К₂ представляет собой С1 и О и К₃ определены в соответствии с первым аспектом.

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где К_! представляет собой -С(СН₃)₂ОН; К₂ представляет собой С1; К₃ представляет собой Н и О определено в соответствии с первым аспектом.

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где К_! представляет собой -С(СН₃)₂ОН; К₂ представляет собой -СН₃ и О и К₃ определены в соответствии с первым аспектом.

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где К_! представляет собой -С(СН₃)₂ОН; К₂ представляет собой -СН₃; К₃ представляет собой Н и О определено в соответствии с первым аспектом.

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где К_! представляет собой -С(СН₃)₂ОН; К₂ представляет собой -СН₃; К₃ представляет собой -СН₃ и О определено в соответствии с первым аспектом.

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I) или их соли, где О представляет собой

- 3 025863

и К_ь К₂, К₃ и К_а определены в соответствии с первым аспектом.

Соединения по этому варианту осуществления имеют структуру формулы (II)

Включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (II), в которой О представляет собой

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (II), где представляет собой -С(СН₃)₂ОН и К₂, К₃, К., и К_ь определены в соответствии с первым аспектом. Соединения по этому варианту осуществления имеют структуру формулы (ПЛ)

Включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (ПЛ), в которой К₂представляет собой С1 или -СН₃; К₃ представляет собой Н; К_а представляет собой Н или -СН₃, включая -СИ₃; и К_ь представляет собой Н, Р или -ОСН₃. Также включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (ПЛ), в которой О представляет собой

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (II) или его соли, где указанное соединение выбрано из

4-(3-(8-фтор-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (1 и 2);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (3);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил(б₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (4);

4-(2-хлор-3 -(8-фтор-1 -метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)фенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (5);

4-(2-хлор-3-(1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)фенил)-7-(2-гидроксипропан-2ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (6);

7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(8-метокси-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (7);

4-(3-(6-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидрокси- 4 025863 пропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (8);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (24);

4-(3-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (25);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-8-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (26);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил(6₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (27) и

8-фтор-4-(3-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (33).

и К₁, К₂, К₃, К_ь и К_с определены в соответствии с первым аспектом. Соединения по этому варианту осуществления имеют структуру формулы (III)

Включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (III), в которой О представляет собой

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (III) или их соли, где К₂ представляет собой -СН₃ и Κι, К₃, К_ь и К_с определены в соответствии с первым аспектом. Соединения по этому варианту осуществления имеют структуру формулы (ША)

Включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (ША), в которой К представляет собой -С(СН₃)₂Он, -ΝΗΟ(=Θ)Ο(ΟΗ₃)₃, -Ν(ΟΗ₃)₂ или -СН₂К,|; К₃ представляет собой Н, Р или -СН₃; К_ь представляет собой Н, Р, С1 или -ОСН₃; К_с представляет собой Н или Р и К-ι представляет собой -ОН, -ОСН₃, -№НС(=О)СН₃ или

Также включенными в этот вариант осуществления являются соединения, в которых К₃ представляет собой Н.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (III) или его соли, где указанное соединение выбрано из

7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(7-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2- 5 025863 метилфенил)-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (10);

7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(6-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (11);

7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(5-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (12);

4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил) -9Н-карбазол-1 -карбоксамида (13);

4-(3-(К)-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (14);

4-(3-(8)-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (15);

4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-пиваламидо-9Нкарбазол-1-карбоксамида (16);

4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(метоксиметил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (17);

4-(3 -(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(метоксиметил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (18);

4-(3-(4-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (19);

4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (21);

4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (22 и 23);

4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(гидроксиметил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (28);

7-(диметиламино)-4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (29);

7-(ацетамидометил)-4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (30) и

4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(пирролидин-1илметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (31).

О

и Κι, К₂ и К₃ определены в соответствии с первым аспектом. Соединения по этому варианту осуществления имеют структуру формулы (IV)

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (IV), где Κ! представляет собой -С(СН₃)₂ОН и К₂ и К₃ определены в соответствии с первым аспектом. Соединения по этому варианту осуществления имеют структуру формулы (ίνΑ)

Включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (ίνΑ), в которой К₂

- 6 025863 представляет собой -СН₃. Также включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (1УА), в которой К₃ представляет собой Н.

Соединения по этому варианту осуществления имеют структуру формулы (V)

где Κι, К₂ и К₃ определены в соответствии с первым аспектом.

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (V), где Κι представляет собой

-С(СН₃)₂ОН. Соединения по этому варианту осуществления имеют структуру формулы (νΑ)

где К₂ и К₃ определены в соответствии с первым аспектом. Включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (νΑ), в которой К₂ представляет собой -СН₃. Также включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (νΑ), в которой К₃ представляет собой Н.

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I) или их соли, где К₃ представляет собой -СН₃ и Κι, Κ₂ и О определены в соответствии с первым аспектом. Включенными в этот вариант осуществления являются соединения, имеющие структуру формулы (ΙΑ)

Также включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (I) и соединения формулы (VI), в которых Κ| представляет собой -С(СН₃)₂ОН.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его соли, где указанное соединение выбрано из

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил(й₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (4);

4-(2-хлор-3-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)фенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (5);

7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(8-метокси-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2- 7 025863 метилфенил)-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (7);

4-(3-(6-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (8);

4-(3-(3-(4-фторфенил)-2,6-диоксо-2,3-дигидропиримидин-1(6Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (9);

7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(7-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2метилфенил)-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (10);

4-(3 -(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (13);

4-(3 -(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (14 и 15);

4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-пиваламидо-9Нкарбазол-1-карбоксамида (17);

4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(метоксиметил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (18);

4-(3-(5,7-диоксо-5Н-тиазоло[3,2-с]пиримидин-6(7Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (20);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2 -ил) -5 -метил-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (24);

4-(3-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил) -5 -метил-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (25);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-8-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (26);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил(б₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (27);

7-(ацетамидометил)-4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (30);

4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(пирролидин-1илметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (31) и

4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(метоксиметил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (32).

Атропоизомеры являются стереоизомерами, возникающими в результате заторможенного вращения вокруг оси одинарной связи, где барьер вращения достаточно высок для выделения отдельных поворотных изомеров (ЬаР1айе е! а1., I. Меб. Сйет., 54:7005-7022 (2011)).

Соединения формулы (I) имеют две стереогенных оси: связь (а) между трициклической карбазольной группой и фенильной группой; и связь (Ь) между асимметричной гетероциклической дионовой группой О и фенильной группой.

Из-за несимметричного характера заместителей в кольцах, соединенных одинарными связями, обо- 8 025863 значенными а и Ь, и из-за ограниченного вращения вокруг этих связей, вызванных стерическим затруднением, соединения формулы (I) могут образовывать поворотные изомеры. Если энергетические барьеры вращения достаточно высоки, заторможенные вращения около связи (а) и/или связи (Ь) происходят при скоростях, которые достаточно медленны, чтобы сделать возможным выделение отдельных атропоизомеров в виде различных веществ. Таким образом, соединения формулы (I) могут образовывать четыре поворотных изомера, которые при определенных условиях, таких как хроматография на хиральной неподвижной фазе, могут быть разделены на отдельные атропоизомеры. В растворе соединения формулы (I) могут быть получены в виде смеси четырех диастереомеров или смеси двух пар диастереомеров или отдельных атропоизомеров.

Было обнаружено, что для соединений формулы (I) пара поворотных изомеров, образованных путем заторможенного вращения вокруг стереогенной оси (а), представленных в виде структур

является разделяемой. Тем не менее, было обнаружено, что при температурах окружающей среды и выше раствор, содержащий один из индивидуальных поворотных изомеров, подвергается рацемизации вокруг стереогенной оси (а) с образованием смеси атропоизомеров, например, в течение часа. Стабильные поворотные изомеры, образованные из-за заторможенного вращения вокруг стереогенной оси (Ь), были разделены и, как было обнаружено, являются стабильными в растворе при температуре окружающей среды и физиологических температурах.

Оба поворотных изомера соединения формулы (II), которые образуются в результате заторможенного вращения вокруг стереогенной оси (Ь), могут быть представлены следующим образом:

(II-1) (П-2).

ного

Оба поворотных изомера соединения формулы (III), которые образуются в результате заторможенвращения вокруг стереогенной оси (Ь), могут быть представлены следующим образом:

ного

Оба поворотных изомера соединения формулы (IV), которые образуются в результате заторможенвращения вокруг стереогенной оси (Ь), могут быть представлены следующим образом:

Оба поворотных изомера соединения формулы (V), которые образуются в результате заторможенного вращения вокруг стереогенной оси (Ь), могут быть представлены следующим образом:

- 9 025863

Абсолютные пространственные конфигурации атропоизомеров могут быть определены с помощью рентгеновской кристаллографии монокристаллов.

Таким образом, соединения формулы (I) могут быть выделены в виде отдельных атропоизомеров, в виде смесей, содержащих два атропоизомера, или в виде стабильных пар диастереомеров, в которых одна пара имеет (К)-конфигурацию относительно связи (Ь), но представляет собой смесь из (К)- и (§)конфигураций вокруг связи (а), и другая пара имеет (^-конфигурацию относительно связи (Ь), но представляет собой смесь (К)- и (§)-конфигураций относительно связи (а).

Соединения формулы (I) могут быть разделены на пары диастереомеров с одной абсолютной конфигурацией вокруг связи (Ь), но в виде смеси двух взаимопревращающихся абсолютных конфигураций относительно связи (а); или, альтернативно, на пары диастереомеров с одной абсолютной конфигурацией вокруг связи (а), но виде смеси двух взаимопревращающихся абсолютных конфигураций относительно связи (Ь). Такое разделение может быть достигнуто с помощью способов, известных в данной области, таких как препаративная хроматография на хиральной неподвижной фазе.

Соединения по настоящему изобретению могут существовать в виде смеси четырех атропоизомеров, которые предпочтительно могут быть разделены с помощью различных методик, в том числе сверхкритической флюидной хроматографии (§РС), с получением отдельных атропоизомеров или смесей двух атропоизомеров. §РС, которая является одной из форм ВЭЖХ с нормальной фазой, представляет собой методику разделения, которая использует супер/субкритический флюид СО₂ и полярные органические модификаторы, такие как спирты, в качестве подвижной фазы (А1Шс с1 а1., I. СНготаЮщарНу А 1074:175-185 (2005)).

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (ΙΙ-1) или его соли, где К₂, К₃, К_а и К_Ь определены в соответствии с первым аспектом. Включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (ΙΙ-1), в которых К₂ представляет собой С1 или -СН₃; К₃ представляет собой Н, Р или -СН₃; К_а представляет собой Н или -СН₃, включая -СЭ₃; и К_Ь представляет собой Н, Р или -ОСН₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (ΙΙΙ-2) или его соли, где Κι, К₃, К_Ь и К_с определены в соответствии с первым аспектом. Включенными в этот вариант осуществления являются соединения формулы (ΙΙΙ-2), в которых К! представляет собой -С(СН₃)₂ОН, -ХНС(=О)С(СН₃)₃, -Ы(СН₃)₂, или -СН₂Кь К₃ представляет собой Н, Р или -СН₃; К_Ь представляет собой Н, Р, С1 или -ОСН₃; К_с представляет собой Н или Р; и Κι представляет собой -ОН, -ОСН₃, -№НС(=О)СН₃ или

Также включенными в этот вариант осуществления являются соединения, в которых К3 представляет собой Н.

Один вариант осуществления относится к соединению, выбранному из приведенных в качестве примеров примеров в пределах объема первого аспекта, или его соли.

Один вариант осуществления относится к соединению, выбранному из любого подмножества соединений в пределах объема первого аспекта или любого из вышеупомянутых вариантов осуществления, или его соли.

В одном варианте осуществления композиция представлена содержащей соединение формулы (ΙΙ) или его соль. Включенной в этот вариант осуществления является композиция, содержащая смесь в любой пропорции (ί) соединения формулы (ΙΙ-1) и (ίί) соединения формулы (ΙΙ-2) или их солей. Композиции по этому варианту осуществления включают фармацевтические композиции.

В одном варианте осуществления композиция представлена содержащей по меньшей мере 98 экв. мас.% соединения, выбранного из соединения формулы (ΙΙ-1) и соединения формулы (ΙΙ-2), на основе общей эквивалентной массы соединений формулы (ΙΙ-1) и формулы (ΙΙ-2). Включенными в этот вариант осуществления являются композиции, содержащие 99 экв. мас.%, 99,5 экв. мас.%, 99,8 экв. мас.% и 99.9 экв. мас.% выбранного соединения на основе общей эквивалентной массы соединений формулы (ΙΙ-1) и формулы (ΙΙ-2). Композиции по этому варианту осуществления включают фармацевтические композиции.

В одном варианте осуществления композиция представлена содержащей соединение формулы (ΙΙΙ) или его соль. Включенной в этот вариант осуществления является композиция, содержащая смесь в любой пропорции (ί) соединения формулы (ΙΙΙ-1) и (ίί) соединения формулы (ΙΙΙ-2) или их соли. Композиции по этому варианту осуществления включают фармацевтические композиции.

В одном варианте осуществления композиция представлена содержащей по меньшей мере 98 экв. мас.% соединения, выбранного из соединения формулы (ΙΙΙ-1) и соединения формулы (ΙΙΙ-2), на основе

- 10 025863 общей эквивалентной массы соединений формулы (ΙΙΙ-1) и формулы (ΙΙΙ-2). Включенными в этот вариант осуществления являются композиции, содержащие 99 экв. мас.%, 99.5 экв. мас.%, 99.8 экв. мас.% и 99.9 экв. мас.% выбранного соединения на основе общей эквивалентной массы соединений формулы (ΙΙΙ-1) и формулы (ΙΙΙ-2). Композиции по этому варианту осуществления включают фармацевтические композиции.

В одном варианте осуществления композиция представлена содержащей соединение формулы (IV) или его соль. Включенной в этот вариант осуществления является композиция, содержащая смесь в любой пропорции (ί) соединения формулы (Ιν-1) и (ίί) соединения формулы (Ιν-2) или их соли. Композиции по этому варианту осуществления включают фармацевтические композиции.

В одном варианте осуществления композиция представлена содержащей по меньшей мере 98 экв. мас.% соединения, выбранного из соединения формулы (Ιν-1) и соединения формулы (Ιν-2), на основе общей эквивалентной массы соединений формулы (Ιν-1) и формулы (Ιν-2). Включенными в этот вариант осуществления являются композиции, содержащие 99 экв. мас.%, 99.5 экв. мас.%, 99.8 экв. мас.% и 99.9 экв. мас.% выбранного соединения на основе общей эквивалентной массы соединений формулы (Ιν1) и формулы (Ιν-2). Композиции по этому варианту осуществления включают фармацевтические композиции.

В одном варианте осуществления композиция представлена содержащей соединение формулы (ν) или его соль. Включенной в этот вариант осуществления является композиция, содержащая смесь в любой пропорции (ί) соединения формулы (ν-1) и (ίί) соединения формулы (ν-2) или их соли. Композиции по этому варианту осуществления включают фармацевтические композиции.

В одном варианте осуществления композиция представлена содержащей по меньшей мере 98 экв. мас.% соединения, выбранного из соединения формулы (ν-1) и соединения формулы (ν-2), на основе общей эквивалентной массы соединений формулы (ν-1) и формулы (ν-2). Включенными в этот вариант осуществления являются композиции, содержащие 99 экв. мас.%, 99.5 экв. мас.%, 99.8 экв. мас.%, и 99.9 экв. мас.% выбранного соединения на основе общей эквивалентной массы соединений формулы (ν-1) и формулы (ν-2). Композиции по этому варианту осуществления включают фармацевтические композиции.

Настоящее изобретение может быть воплощено в других конкретных формах без отступления от его сущности или существенных признаков. Это изобретение охватывает все комбинации аспектов и/или вариантов осуществления изобретения, упомянутых здесь. Следует понимать, что любые и все варианты осуществления настоящего изобретения могут быть взяты в сочетании с любым другим вариантом осуществления или вариантами осуществления для описания дополнительные вариантов осуществления. Следует также иметь в виду, что каждый отдельный элемент вариантов осуществления предназначен для объединения с любыми и всеми другими элементами из любого варианта осуществления для описания дополнительного варианта осуществления.

Определения

Существенные признаки и преимущества настоящего изобретения могут быть более легко поняты обычным специалистом в данной области техники после прочтения следующего подробного описания. Следует отметить, что некоторые признаки изобретения, которые описаны выше и ниже в контексте отдельных вариантов осуществления, по вполне очевидным причинам могут быть также объединены в одном варианте осуществления. И наоборот, различные признаки изобретения, которые по причинам краткости описаны в контексте отдельного варианта осуществления, также могут быть объединены так, чтобы образовать их субкомбинации. Варианты осуществления, определенные в данном документе как иллюстративные или предпочтительные, предназначены для иллюстрации и не являются ограничивающими.

Если в данном документе специально не указано иное, ссылки, сделанные в единственном числе, могут также включать множественное число.

Используемое здесь выражение соединения или их соли относится по меньшей мере к одному соединению, по меньшей мере одной соли соединений или их комбинации. Например, соединение формулы (Ι) или его соль включает соединение формулы (Ι); два соединения формулы (Ι); соль соединения формулы (Ι); соединение формулы (Ι) и одну или более солей соединения формулы (Ι) и две или более солей соединения формулы (Ι). Если не указано иное, любой гетероатом с ненасыщенными валентностями, как предполагается, имеет достаточно атомов водорода, чтобы насытить эти валентности. Определения, изложенные в данном документе, имеют приоритет перед определениями, изложенными в любом патенте, патентной заявке и/или публикации заявки на патент, включенными в настоящее описание посредством ссылки.

Ниже перечислены определения различных терминов, используемых для описания настоящего изобретения. Эти определения применяются к терминам, как они используются во всем описании (если только они не ограничены в определенных случаях) либо индивидуально, либо как часть большей группы.

Везде в описании группы и их заместители могут быть выбраны любым специалистом в данной области, чтобы обеспечить стабильные фрагменты и соединения.

В соответствии с конвенцией, используемой в данной области, используется здесь в структур- 11 025863 ных формулах, чтобы показать, что связь представляет собой точку присоединения фрагмента или заместителя к структуре главной или основной цепи. Выражение фармацевтически приемлемый в данном документе используется для обозначения соединений, материалов, композиций и/или лекарственных форм, которые в рамках здравого медицинского суждения пригодны для использования в контакте с тканями человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, соразмерных с разумным соотношением польза/риск.

Соединения формулы (I) могут образовывать соли, которые также входят в объем настоящего изобретения. Если не указано иное, ссылка на соединение по изобретению, как следует понимать, включает ссылку на одну или более его солей. Предпочтительными являются фармацевтически приемлемые (т.е. нетоксичные, физиологически приемлемые) соли, в которых анион существенно не вносит вклад в токсичность или биологическую активность соли. Однако другие соли могут быть полезны, например, на стадиях их выделения или очистки, которые могут быть использованы в процессе получения, и таким образом рассматриваются в пределах объема настоящего изобретения. Соли соединений формулы (I) могут быть получены, например, путем реакции соединения формулы (I) с таким количеством кислоты, как эквивалентное количество, в среде, такой как среда, в которой соль осаждается, или в водной среде с последующей лиофилизацией. Примерные соли присоединения кислоты включают ацетаты (такие как соли, образованные с уксусной кислотой или тригалоуксусной кислотой, например трифторуксусной кислотой), адипаты, альгинаты, аскорбаты, аспартаты, бензоаты, бензолсульфонаты, бисульфаты, бораты, бутираты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, циклопентанпропионаты, диглюконаты, додецилсульфаты, этансульфонаты, фумараты, глюкопентаноаты, глицерофосфаты, гемисульфаты, гептаноаты, гексаноаты, гидрохлориды (полученные с хлористо-водородной кислотой), гидробромиды (полученные с бромистым водородом), гидройодиды, малеаты (полученные с малеиновой кислотой), 2гидроксиэтансульфонаты, лактаты, метансульфонаты (полученные с метансульфоновой кислотой), 2нафталинсульфонаты, никотинаты, нитраты, оксалаты, пектинаты, персульфаты, 3-фенилпропионаты, фосфаты, пикраты, пивалаты, пропионаты, салицилаты, сукцинаты, сульфаты (такие как соли, полученные с серной кислотой), сульфонаты (такие как упомянутые здесь), тартраты, тиоцианаты, толуолсульфонаты, такие как тозилаты, ундеканоаты и тому подобное.

Соединения формулы (I) могут быть предоставлены как аморфные твердые вещества или кристаллические твердые вещества. Чтобы обеспечить получение соединений формулы® в виде твердого вещества, может быть использована лиофилизация.

Кроме того, следует понимать, что сольваты (например, гидраты) соединений формулы (I) также находятся в пределах объема настоящего изобретения. Термин сольват означает физическую ассоциацию соединения формулы (I) с одной или более молекулами растворителя либо органического, либо неорганического. Эта физическая ассоциация включает образование водородных связей. В некоторых случаях сольват может быть выделен, например, когда одна или более молекул растворителя включена в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. Термин сольват охватывает как жидкую фазу, так и разделяемые сольваты. Примеры сольватов включают гидраты, этанолаты, метанолаты, изопропанолаты, ацетонитрильные сольваты и этилацетатные сольваты. Способы сольватации известны в данной области техники.

Различные формы пролекарств хорошо известны в данной области и описаны в

a) . ХУсптцН. С.С. с1 а1., ТНе РгасОсе ой Мебю1иа1 Скеш181гу, СНарЮг 31, Асабетю Ргекк (1996);

b) . Випбдаагб, Н. еб., Иек1дп ой Ргобгидк, Е1кеу1ег (1985);

c) . Випбдаагб, Н., СНарЮг 5, Эечдп апб АррПсаОоп ой Ргобгидк, А Те.чЬоок ой Игид Иек1дп апб Иеуе1ортеп1, рр. 113-191, Кгодкдаагб-Ьагкеп, Р. е1 а1., ебк., Нагоооб Асабетю РиЬНкЬегк (1991) и

б). ТеЧа, В. е1 а1., Нубго1ук1к ш Эгид апб Ргобгид Ме1аЬоПчп, \УПеу-УСН (2003).

Кроме того, соединения формулы (I) после их получения могут быть выделены и очищены, чтобы получить композицию, содержащую количество по массе, равное или большее чем 99% соединения формулы (I) (по существу, чистую), которая затем применяется или входит в состав смеси, как здесь описано. Такие по существу, чистые соединения формулы (I) также рассматриваются здесь как часть настоящего изобретения.

Выражения стабильное соединение и стабильная структура предназначены для обозначения соединения, которое достаточно устойчиво, чтобы выдержать выделение до пригодной степени чистоты из реакционной смеси и превратить его в эффективное терапевтическое средство. Настоящее изобретение, как предполагается, осуществляет получение стабильных соединений.

Выражение терапевтически эффективное количество предназначено для включения количества соединения по настоящему изобретению одного, или количества комбинации заявленных соединений, или количества соединения по настоящему изобретению в комбинации с другими активными ингредиентами, эффективного, чтобы действовать в качестве ингибитора Вйк, или эффективного для лечения или предупреждения аутоиммунных и/или воспалительных болезненных состояний, таких как системная красная волчанка, рассеянный склероз и ревматоидный артрит.

Используемый здесь термин лечение или терапия охватывает лечение болезненного состояния у млекопитающего, в особенности у человека, и включает: (а) предупреждение проявления болезненного

- 12 025863 состояния у млекопитающего, в особенности, когда такое млекопитающее предрасположено к болезненному состоянию, но которому еще не был поставлен диагноз как имеющему ее; (б) ингибирование болезненного состояния, то есть прекращение его развития; и/или (с) облегчение болезненного состояния, то есть регрессию болезненного состояния.

Соединения по настоящему изобретению, как предполагается, включают в себя все изотопы атомов, встречающихся в соединениях по изобретению. Изотопы включают атомы, имеющие одинаковый атомный номер, но разные массовые числа. В качестве общего примера и без ограничения изотопы водорода включают дейтерий (Ό) и тритий (Т). Изотопы углерода включают ^!3С и ^!4С. Меченые изотопами соединения по настоящему изобретению, в общем, могут быть получены обычными способами, известными специалисту в данной области техники, или способами, аналогичными тем, которые описаны в данном документе с использованием соответствующего изотопно-меченого реагента вместо немеченого реагента, используемого в противном случае. Например, метил (-СН3) также включает в себя дейтерированные метильные группы, такие как -СЭ₃.

Соединения в соответствии с формулой (I) и/или их фармацевтически приемлемые соли могут быть введены любым способом, подходящим для состояния, подлежащего лечению, которое может зависеть от необходимости сайт-специфического лечения или от количества соединения формулы (I), которое должно быть введено.

Кроме того, настоящим изобретением охватывается класс фармацевтических композиций, содержащих соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемые соли и один или более нетоксичных, фармацевтически приемлемых носителей и/или разбавителей и/или вспомогательных средств (совместно именуемых здесь как носитель) и, при желании, другие активные ингредиенты. Соединения формулы (I) могут быть введены любым подходящим способом, предпочтительно в форме фармацевтической композиции, адаптированной к такому способу введения, и в дозе, эффективной для предполагаемого лечения. Соединения и композиции по настоящему изобретению могут быть введены, например, перорально, через слизистую оболочку или парентерально, в том числе внутриваскулярно, внутривенно, внутрибрюшинно, подкожно, внутримышечно и внутригрудинно в виде единичных дозированных составов, содержащих обычные фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные вещества и наполнители. Например, фармацевтический носитель может содержать смесь маннита или лактозы и микрокристаллической целлюлозы. Смесь может содержать дополнительные компоненты, такие как смазывающее вещество, такое как, стеарат магния, и разрыхлитель, такой как кросповидон. Смесь носителей может быть заложена в желатиновую капсулу или спрессована в виде таблетки. Фармацевтическая композиция может быть введена, например, в виде пероральной лекарственной формы или, например, путем инфузионного раствора.

Фармацевтическая композиция для перорального введения может быть в форме, например, таблетки, капсулы, жидкой капсулы, суспензии или жидкости. Фармацевтическая композиция предпочтительно может быть изготовлена в виде дозированной единицы, содержащей определенное количество активного ингредиента. Например, фармацевтическая композиция может быть представлена в виде таблетки или капсулы, содержащей количество активного ингредиента в пределах от около 0.1 до 1000 мг, предпочтительно от около 0.25 до 250 мг и более предпочтительно от около 0.5 до 100 мг. Подходящая суточная доза для человека или другого млекопитающего может широко варьироваться в зависимости от состояния пациента и других факторов, но может быть определена с помощью обычных методов.

Любая фармацевтическая композиция, рассмотренная здесь, может быть введена, например, перорально с помощью любых приемлемых и отвечающих требованиям пероральных лекарственных средств. Примеры пероральных лекарственных средств включают, но не ограничиваются ими, например, таблетки, драже, пастилки, водные и масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые и мягкие капсулы, жидкие капсулы, сиропы и эликсиры.

Фармацевтические композиции, предназначенные для перорального введения, могут быть получены согласно любым известным в данной области способам изготовления фармацевтических композиций, предназначенных для перорального введения. Для того чтобы обеспечить фармацевтически привлекательный вкус лекарственных средств, фармацевтическая композиция по изобретению может содержать по меньшей мере один компонент, выбранный из подсластителей, ароматизаторов, красителей, мягчителей, антиоксидантов и консервантов.

Таблетка, например, может быть получена путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его фармацевтически приемлемой соли по меньшей мере с одним нетоксичным фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, пригодным для изготовления таблеток. Примеры вспомогательных веществ включают, но не ограничиваются ими, например, инертные разбавители, такие как, например, карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция и фосфат натрия; гранулирующие и разрыхляющие вещества, такие как, например, микрокристаллическая целлюлоза, кроскармеллоза натрия, кукурузный крахмал, альгиновая кислота; связующие вещества, такие как, например, крахмал, желатин, поливинилпирролидон и камедь; и смазывающие вещества, такие как, например, стеарат магния, стеариновая кислота и тальк. Кроме того, таблетка может быть или без покрытия, или покрыта известными способами, чтобы либо замаскировать неприятный вкус лекарст- 13 025863 венного средства, либо задержать разрушение и абсорбцию активного ингредиента в желудочнокишечном тракте, тем самым поддерживая действие активного ингредиента в течение более длительного периода времени. Иллюстративные водорастворимые маскирующие вкус материалы, включают, но не ограничиваются ими, гидроксипропилметилцеллюлозу и гидроксипропилцеллюлозу. Иллюстративные материалы, обеспечивающие продолженное действие активного ингредиента, включают, но не ограничиваются ими, этилцеллюлозу и ацетобутират целлюлозы. Твердые желатиновые капсулы, например, могут быть получены путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли по меньшей мере с одним инертным твердым разбавителем, таким как, например, карбонат кальция; фосфат кальция и каолин.

Мягкие желатиновые капсулы, например, могут быть получены путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его фармацевтически приемлемой соли по меньшей мере с одним водорастворимым носителем, таким как, например, полиэтиленгликоль; и по меньшей мере одним масляным компонентом, таким как, например, арахисовое масло, жидкий парафин и оливковое масло.

Водная суспензия может быть получена, например, путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его фармацевтически приемлемой соли по меньшей мере с одним носителем, пригодным для изготовления водной суспензии. Примеры вспомогательных веществ, пригодных для изготовления водной суспензии, включают, но не ограничиваются ими, например, суспендирующие вещества, такие как, например, натрий-карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, альгиновая кислота, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и аравийская камедь; диспергирующие или смачивающие вещества, такие как, например, фосфатиды природного происхождения, например лецитин; продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, такие как, например, полиоксиэтиленстеарат; продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, такие как, например, гептадекаэтилен-оксицетанол; продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такие как, например, полиоксиэтилен сорбитан моноолеат; и продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гексита, такие как, например, полиэтилен сорбитан моноолеат. Водная суспензия может также содержать по меньшей мере один консервант, такой как, например, этил и н-пропил-п-гидроксибензоат; по меньшей мере одно окрашивающее вещество; по меньшей мере один ароматизатор и/или по меньшей мере один подсластитель, включая, но не ограничиваясь, например, сахарозу, сахарин и аспартам.

Масляные суспензии могут быть получены, например, путем суспендирования по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по крайней мере одной его фармацевтически приемлемой соли в любом растительном масле, таком как, например, арахисовое масло; оливковое масло; кунжутное масло и кокосовое масло; или в минеральном масле, таком как, например, жидкий парафин. Масляная суспензия может также содержать по меньшей мере один загуститель, такой как, например, пчелиный воск; твердый парафин и цетиловый спирт. Для того чтобы обеспечить приятный вкус масляной суспензии, к ней может быть добавлен по меньшей мере один из подсластителей, уже описанных выше, и/или по меньшей мере один ароматизатор. Масляная суспензия может дополнительно содержать по меньшей мере один консервант, включая, но не ограничиваясь этим, например, антиоксидант, такой как, например, бутилированный гидроксианизол и α-токоферол.

Диспергируемые порошки и гранулы могут быть получены, например, путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его фармацевтически приемлемой соли по меньшей мере с одним диспергирующим и/или смачивающим веществом; по меньшей мере одним суспендирующим веществом и/или по меньшей мере одним консервантом. Подходящие диспергирующие вещества, смачивающие вещества и суспендирующие вещества уже были описаны выше. Примеры консервантов включают, но не ограничиваются ими, например, антиоксиданты, например аскорбиновую кислоту. Кроме того, диспергируемые порошки и гранулы могут также содержать по меньшей мере одно вспомогательное вещество, включая, но не ограничиваясь этим, например, подсластители; ароматизирующие вещества и красители.

Эмульсия по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его фармацевтически приемлемой соли может быть, например, быть изготовлена в виде эмульсии типа масло-вводе. Масляная фаза эмульсий, содержащих соединения формулы (I), может быть составлена из известных ингредиентов известным способом. Масляная фаза может представлять собой, но не ограничивается этим, например, растительное масло, такое как, например, оливковое масло и арахисовое масло; минеральное масло, такое как, например, жидкий парафин; и их смеси. Наряду с тем, что эта фаза может содержать только эмульгатор, она может содержать смесь по меньшей мере одного эмульгатора с жиром или маслом или как с жиром, так и с маслом. Подходящие эмульгаторы включают, но не ограничиваются ими, например, природные фосфатиды, например соевый лецитин; сложные эфиры или неполные сложные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гексита, такие как, например, сорбитан моноолеат; и продукты конденсации неполных сложных эфиров с этиленоксидом, такие как, например, полиоксиэтилен сорбитан моноолеат. Предпочтительно гидрофильный эмульгатор включается вместе с ли- 14 025863 пофильным эмульгатором, который действует как стабилизатор. Предпочтительно также включать как масло, так и жир. Вместе эмульгатор(ы) с или без стабилизатора(ов) образуют так называемый эмульгирующий воск, и этот воск вместе с маслом и жиром образует так называемую эмульгирующую мазевую основу, которая образует масляную дисперсную фазу кремообразного состава. Эмульсия может содержать также подсластитель, ароматизатор, консервант и/или антиоксидант. Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, пригодные для использования в композиции по настоящему изобретению, включают Тетееп 60, §рап 80, цетостеариловый спирт, миристиловый спирт, глицерил моностеарат, лаурилсульфат натрия, глицерил дистеарат один или с воском или другие материалы, хорошо известные в данной области техники.

Соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль также могут быть введены, например, внутривенно, подкожно и/или внутримышечно в виде любой фармацевтически приемлемой и подходящей инъекционной лекарственной формы. Примерные инъекционные формы включают, но не ограничиваются ими, например стерильные водные растворы, содержащие приемлемые носители и растворители, такие как, например, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия; стерильные микроэмульсии типа масло-в-воде и водные или масляные суспензии.

Композиции для парентерального введения могут быть в форме водных или неводных изотонических стерильных инъекционных растворов или суспензий. Эти растворы и суспензии могут быть изготовлены из стерильных порошков или гранул с применением одного или более носителей или разбавителей, предусмотренных для использования в композициях для перорального введения, или с использованием других подходящих диспергирующих или смачивающих средств и суспендирующих средств. Соединения могут быть растворены в воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, этаноле, кукурузном масле, хлопковом масле, арахисовом масле, кунжутном масле, бензиловом спирте, хлориде натрия, трагакантовой камеди и/или различных буферах. Другие вспомогательные средства и способы введения хорошо и широко известны в фармацевтической области. Активный ингредиент может быть введен также путем инъекции в виде композиции с подходящими носителями, включая физиологический раствор, декстрозу или воду, или с циклодекстрином (то есть САРТШОЕ®). солюбилизации с сорастворителем (например, пропиленгликоль) или мицеллярной солюбилизации (например, Тетееп 80).

Стерильное инъецируемое лекарственное средство может представлять собой также стерильный инъецируемый раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, как раствор в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут применяться, являются вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно применяются стерильные нелетучие масла. Для этой цели может быть использовано любое легкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, в изготовлении инъецируемых лекарственных средств находят применение жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

Стерильная инъецируемая микроэмульсия типа масло-в-воде, например, может быть получена посредством 1) растворения по меньшей мере одного соединения формулы (I) в масляной фазе, такой как, например, смесь соевого масла и лецитина; 2) объединения соединения формулы (I), содержащего масляную фазу, со смесью воды и глицерина; и 3) обработки этой комбинации, чтобы сформировать микроэмульсию.

Стерильная водная или масляная суспензия могут быть получены в соответствии с методами, уже известными в данной области. Например, стерильный водный раствор или суспензия могут быть изготовлены с нетоксичным парентерально приемлемым разбавителем или растворителем, таким как, например, 1,3-бутандиол; и стерильная масляная суспензия может быть получена с использованием стерильного нетоксичного приемлемого растворителя или суспендирующей среды, такой как, например, стерильные нелетучие масла, например синтетические моно- или диглицериды; и жирные кислоты, такие как, например, олеиновая кислота.

Фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные вещества и наполнители, которые могут быть использованы в фармацевтических композициях по данному изобретению, включают, но не ограничиваются ими, ионообменные смолы, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, самоэмульгирующиеся системы доставки лекарственных средств (δΕΌΌδ), такие как ά-α-токоферол полиэтиленгликоль 1000 сукцинат, поверхностно-активные вещества, используемые в фармацевтических лекарственных формах, такие как Тетеепк, полиэтоксилированное касторовое масло, такое как поверхностно-активное вещество СКЕМОРНОК® (ΒΑδΡ), или другие подобные полимерные матрицы доставки, сывороточные белки, такие как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, неполные глицеридные смеси насыщенных растительных жирных кислот, вода, соли или электролиты, такие как протамин сульфат, гидрофосфат натрия, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный диоксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропилен-блок-полимеры, полиэтиленгликоль и ланолин.

Циклодекстрины, такие как α-, β- и γ-циклодекстрин, или химически модифицированные произ- 15 025863 водные, такие как гидроксиалкилциклодекстрины, включая 2- и 3-гидроксипропилциклодекстрины, или другие солюбилизированные производные, также предпочтительно могут быть использованы для улучшения доставки соединений формул, описанных в данном документе.

Фармацевтически активные соединения по настоящему изобретению могут быть обработаны в соответствии с обычными методами фармацевтики, чтобы получить лекарственные средства для введения пациентам, в том числе людям и другим млекопитающим. Фармацевтические композиции могут быть подвергнуты обычным фармацевтическим операциям, таким как стерилизация, и/или могут содержать обычные вспомогательные вещества, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие вещества, эмульгаторы, буферы и так далее. Кроме того, таблетки и пилюли могут быть изготовлены с энтеросолюбильным покрытием. Такие композиции могут содержать также вспомогательные вещества, такие как смачивающие, подсластители, вкусовые и ароматизирующие средства.

Количества соединений, которые вводятся, и режим дозирования для лечения болезненного состояния с помощью соединений и/или композиций по настоящему изобретению зависят от множества факторов, включая возраст, массу, пол, состояние здоровья субъекта, тип заболевания, тяжесть заболевания, способ и частоту введения лекарственного средства и конкретно используемое соединение. Таким образом, схема приема лекарственного средства может варьироваться в широких пределах, но может быть определена обычным путем с использованием стандартных методик. Суточная доза от около 0.001 до 100 мг/кг массы тела, предпочтительно от около 0.0025 до около 50 мг/кг массы тела и наиболее предпочтительно от около 0.005 до 10 мг/кг массы тела может быть адекватной. Суточная доза может быть введена от одной до четырех доз в день. Другие схемы дозирования включают в себя одну дозу в неделю и одну дозу на два дня цикла.

Для терапевтических целей активные соединения по данному изобретению обычно объединяются с одним или более вспомогательными веществами, соответствующими намеченному способу введения. В случае перорального введения соединения могут быть смешаны с лактозой, сахарозой, крахмальным порошком, сложными целлюлозы эфирами алкановых кислот, сложными целлюлозы алкилэфирами, тальком, стеариновой кислотой, стеаратом магния, оксидом магния, натриевыми и кальциевыми солями фосфорной и серной кислот, желатином, аравийской камедью, альгинатом натрия, поливинилпирролидоном и/или поливиниловым спиртом и затем таблетированы или инкапсулированы для удобного введения. Такие капсулы или таблетки могут содержать композиции с контролируемым высвобождением, которые могут быть представлены в виде дисперсии активного соединения в гидроксипропилметилцеллюлозе. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одну его фармацевтически приемлемую соль и необязательно дополнительное средство, выбранное из любого фармацевтически приемлемого носителя, вспомогательного вещества и наполнителя. Альтернативные композиции по настоящему изобретению содержат соединение формулы (I), описанное здесь, или его пролекарство и фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество или наполнитель.

Полезность

Соединения по настоящему изобретению модулируют активность киназы, включая модулирование активности В1к. Другие типы активности киназы, которые могут модулироваться посредством соединений по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, активность соединений семейства Тес, таких как ВМХ, В1к, ПК, ТХК и Тес и их мутантов.

Соответственно, соединения формулы (I) представляют собой средство для лечения патологических состояний, ассоциированных с модулированием активности киназы, и, в частности для селективного ингибирования активности В1к. Такие состояния включают опосредованные В-клетками заболевания, в которых уровни цитокинов модулируются как следствие внутриклеточной сигнализации.

Использованные здесь термины лечение или терапия включают одну или обе реактивные и профилактические меры, например меры, направленные на ингибирование или задержку начала заболевания или патологического расстройства, достижение полного или частичного снижения симптомов или болезненного состояния и/или на облегчение, улучшение, приостановку или излечение заболевания или расстройства и/или его симптомов.

Ввиду их активности в качестве селективных ингибиторов В1к, соединения формулы (I) являются полезными для лечения цитокин-ассоциированных патологических состояний, включая, но не ограничиваясь этим, воспалительные заболевания, такие как болезнь Крона и язвенный колит, астма, острый криз отторжения трансплантата, хроническое обструктивное заболевание легких; аутоиммунные заболевания, такие как болезнь Грейвса, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, псориаз; деструктивные костные расстройства, такие как резорбция костной ткани, остеоартрит, остеопороз, поражение костей, связанное с множественной миеломой; пролиферативные расстройства, такие как острый миелогенный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз; ангиогенные расстройства, такие как ангиогенные расстойства, включающие солидные опухоли, неоваскуляризацию роговицы глаза, детские гемангиомы; инфекционные заболевания, такие как сепсис, септический шок, бактериальная дизентерия; нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, церебральная ишемия или нейродегенеративное заболевание, вызванное травматическим повреждением, онкологические и вирусные заболе- 16 025863 вания, такие как метастатическая меланома, саркома Капоши, множественная миелома и ВИЧ-инфекции и генерализованный ретинит, СПИД соответственно.

В частности, конкретные условия или болезни, которые можно лечить с помощью соединения по изобретению, включают, без ограничения, панкреатит (острый или хронический), астму, аллергию, синдром острой дыхательной недостаточности у взрослых, хроническую обструктивную болезнь легких, гломерулонефрит, ревматоидный артрит, системную красную волчанку, склеродермию, хронический тиреоидит, болезнь Грейвса, аутоиммунный гастрит, диабет, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунную нейтропению, тромбоцитопению, атопический дерматит, хронический активный гепатит, злокачественную миастению, рассеянный склероз, воспалительное заболевание кишечника, язвенный колит, болезнь Крона, псориаз, болезнь трансплантат против хозяина, воспалительную реакцию, индуцированную эндотоксином, туберкулез, атеросклероз, мышечную дистрофию, кахексию, псориатический артрит, синдром Рейтера, подагру, травматический артрит, артрит при краснухе, острый синовит, нарушение функции β-клеток поджелудочной железы; заболевания, характеризующиеся массивной нейтрофильной инфильтрацией; ревматоидный спондилит, подагрический артрит и другие артрогенные состояния, болезнь Кавасаки, хроническую воспалительную демиелинизирующую полинейропатию (СГОР), дерматомиозит, увеит, болезнь, ассциированную с антигемолитическим факторо-фактором-УИ, болезнь Бехтерева, миастению, болезнь Гудпасчера, антифосфолипидный синдром, васкулит, ассоциированный с антинейтрофильными цитоплазматическими антителами (ЛИСА), дерматомиозит/полимиозит, церебральную малярию, хроническое воспаление легких, силикоз, легочный саркоидоз, атрофию костной ткани, отторжение аллотрансплантата, лихорадку и мышечные боли вследствие инфекции, кахексию, возникающую вследствие инфекции, миелоидное образование, образование рубцовой ткани, язвенный колит, пирезис, грипп, остеопороз, остеоартрит, острый миелобластный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз, метастатическую меланому, саркому Капоши, множественную миелому, сепсис, септический шок и бактериальную дизентерию; болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, церебральную ишемию или нейродегенеративное заболевание, вызванное травматическим повреждением; ангиогенные расстройства, в том числе солидные опухоли, неоваскуляризацию роговицы глаза и детские гемангиомы; вирусные заболевания, включая острый инфекционный гепатит (включая гепатит А, гепатит В и гепатит С), ВИЧ-инфекции и инклюзионный (СМУ) ретинит, СПИД, артрогрипозный ренальный холестаз (АКС) или злокачественное новообразование и герпес; инсульт, ишемию миокарда, ишемию вследствие инфаркта миокарда, гипоксию органа, сосудистую гиперплазию, сердечное и почечное реперфузионное повреждение, тромбоз, сердечную гипертрофию, тромбин-индуцированную агрегацию тромбоцитов, эндотоксемию и/или синдром токсического шока, состояния, ассоциированные с простагландин эндопероксидазой синдазой-2, и пузырчатку обыкновенную. Предпочтительными методами лечения являются те, в которых патологическое состояние выбрано из колита Крона и неспецифического язвенного колита, отторжения аллотрансплантата, ревматоидного артрита, системной красной волчанки, псориаза, анкилозирующего спондилита, псориатического артрита и пузырчатки обыкновенной. Также предпочтительными способами лечения являются те, в которых патологическое состояние выбрано из ишемии реперфузионного повреждения, в том числе мозгового ишемического реперфузионного повреждения в результате инсульта и сердечного ишемического реперфузионного повреждения в результате инфаркта миокарда. Другим предпочтительным способом лечения является тот, в котором патологическое состояние представляет собой множественную миелому.

Кроме того, БТК ингибиторы по настоящему изобретению ингибируют экспрессию индуцибельных провоспалительных белков, таких как простагландин эндопероксид синтаза-2 (РСН8-2), также называемая как циклооксигеназа-2 (СОХ-2). Соответственно, дополнительные В1к-ассоциированные патологические состояния включают водянку, анальгезию, лихорадку и боль, такую как нервно-мышечная боль, головная боль, боль, вызванная раком, зубная боль и боль при воспалении сустава. Соединения по изобретению также могут быть использованы для лечения ветеринарных вирусных инфекций, таких как лентивирусные инфекции, включая, но не ограничиваясь, вирус инфекционной анемии лошадей; или ретро-вирусных инфекций, включая вирус иммунодефицита кошек, вирус иммунодефицита крупного рогатого скота и собачий вирус иммунодефицита.

Когда выражения В!к-ассоциированное патологическое состояние или В!к-ассоциированное заболевание или расстройство используются в настоящем документе, каждое предназначено, чтобы охватить все патологические состояния, указанные выше, как если бы они повторялись во всех подробностях каждый раз, а также любые другие состояния, на которые оказывает влияние активность В1к киназы.

Выражение терапевтически эффективное количество предназначено, чтобы включать такое количество соединения по настоящему изобретению, которое является эффективным, когда вводится одно или в комбинации, для ингибирования В1к. Один вариант осуществления изобретения представляет способы лечения таких патологических состояний, ассоциированных с В1к киназой, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, по меньшей мере, одного соединения Формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Для лечения таких патологических состояний может быть введено терапевтически эффективное количество соединения. Способы по настоящему варианту осуществления изобретения могут быть использованы для лечения В1к киназа-ассоциированных состояний, таких как аллергиче- 17 025863 ские расстройства и/или аутоиммунные и/или воспалительные заболевания, включая, но не ограничиваясь, системную красную волчанку, ревматоидный артрит, множественный васкулит, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ΙΤΡ), тяжелую миастению, аллергический ринит, рассеянный склероз (Μδ), отторжение трансплантата, диабет типа I, мембранозный нефрит, воспалительные заболевания кишечника, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунный тиреоидит, синдром холодовой и тепловой агглютинации, синдром Эванса, гемолитический уремический синдром/тромботическую тромбоцитопеническую пурпуру (Ηυδ/ΤΤΡ), саркоидоз, синдром Шегрена, периферическую невропатию (например, синдром Гийена-Барре), пузырчатку обыкновенную и астму.

Способы лечения В1к киназа-ассоциированных патологических состояний могут включать введение, по меньшей мере, одного соединения формулы (I), одного или в комбинации с каждым другим и/или другими подходящими терапевтическими средствами, полезными при лечении таких патологических состояний. Для лечения таких патологических состояний может быть введено терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы (I) и других подходящих терапевтических средств. Соответственно, терапевтически эффективное количество, как предполагается, включает также количество комбинаций заявленных соединений, которая является эффективной для ингибирования В1к. Комбинация соединений предпочтительно является синергетической комбинацией. Синергия, как описано, например, в Сйон с1 а1., Αάν. Еп/утс Кеди1., 22:27-55 (1984), наблюдается, когда эффект (в данном случае, ингибирования В1к) соединений при введении в комбинации превышает аддитивный эффект соединений при введении их, взятых по отдельности. В общем, синергетический эффект наиболее ярко проявляется при субоптимальных концентрациях соединений. Синергия может выражаться в виде снижения цитотоксичности, повышения ингибирующего эффекта в отношении В1к или другого положительного эффекта комбинации по сравнению с отдельными компонентами.

Иллюстративные примеры таких других терапевтических средств включают кортикостероиды, ролипрам, калфостин, цитокин-супрессивные противовоспалительные средства (С'ЪЛШз). 4-замещенные имидазо[1,2-А]хиноксалины, как описано в патенте США № 4200750; интерлейкин-10, глюкокортикоиды, салицилаты, окись азота и другие иммунодепрессанты; ингибиторы ядерной транслокации, такие как деоксиспергуалин с двойным сцеплением (ΌδΟ); нестероидные противовоспалительные препараты (ΝδΑΓΌδ), такие как ибупрофен, целекоксиб и рофекоксиб; стероиды, такие как преднизон или дексаметазон; противовирусные препараты, такие как абакавир; антипролиферативные средства, такие как метотрексат, лефлуномид, РК506 (такролимус, РКОСКАР®); цитотоксические средства, такие как азатиоприн и циклофосфамид; ΤΝΕ-α ингибиторы, такие как тенидаб (1епШар), антитела против ΤΝΕ-α или растворимый рецептор ΤΝΕ и рапамицин (сиролимус или ΚΑΡΑΜυΝΉ®) или их производные. Описанные выше другие терапевтические средства, когда они используются в комбинации с соединениями по настоящему изобретению, могут быть использованы, например, в количествах, указанных в РйузШапз' Эезк КеГегепсе (ΡΌΚ), или иным образом, как определит обычный специалист в данной области техники. В способах по настоящему изобретению такое другое терапевтическое средство(а) может вводиться до, одновременно или после введения соединения по изобретению. Настоящее изобретение относится также к фармацевтическим композициям, с помощью которых можно лечить В1к киназа-ассоциированные заболевания, в том числе ГЪ-1, Ш-6, Ш-8, ΣΡΝγ и ΤΝΕ-α-опосредованные патологические состояния, как описано выше. Композиции по изобретению могут содержать другие терапевтические средства, как описано выше, и могут быть изготовлены, например, с использованием обычных твердых или жидких носителей или разбавителей, а также фармацевтических добавок, соответствующих способу желаемого введения, (например, вспомогательных веществ, связующих, консервантов, стабилизаторов, ароматизаторов и так далее) согласно технологии, которая, хорошо известна специалисту в области изготовления фармацевтической композиции. В другом варианте осуществления изобретения представлены соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соли для применения в терапии. В настоящем варианте осуществления применение в терапии может включать введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) и его фармацевтически приемлемых солей.

Настоящее изобретение также относится к применению соединений формулы (I) или его фармацевтически приемлемых солей для изготовления лекарственного средства для лечения или профилактики аллергических расстройств и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний. В настоящем варианте осуществления изобретения применение лекарственного средства может включать введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых солей для проведения профилактики аллергических расстройств и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний.

Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых солей для изготовления лекарственного средства для лечения рака. Настоящий вариант осуществления изобретения может включать применение для изготовления лекарственного средства, которое включает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых солей для проведения профилактики аллергических расстройств и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний.

- 18 025863

Соответственно, настоящее изобретение дополнительно включает композиции, содержащие одно или несколько соединений формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель.

Выражение фармацевтически приемлемый носитель относится к наполнителям, обычно принятым в данной области для доставки биологически активных веществ животным, в частности млекопитающим. Фармацевтически приемлемые носители подбираются в соответствии с рядом факторов, что находится в пределах компетенции обычного специалиста в данной области техники. Они включают без ограничения тип и характер активного вещества, которое подбирается; субъекта, которому должна вводиться композиция, содержащая носитель; предполагаемый способ введения композиции; и терапевтическое показание, являющееся целью. Фармацевтически приемлемые носители включают в себя как водные, так и неводные жидкие среды, а также различные твердые и полутвердые лекарственные формы. Такие носители могут включать ряд различных ингредиентов и добавок в дополнение к активному веществу. Такие дополнительные ингредиенты, включенные в рецептуру по различным причинам, например для стабилизации активного вещества, связующие вещества, и так далее, хорошо известны обычному специалисту в данной области техники. Описания подходящих фармацевтически приемлемых носителей и факторов, влияющих на их выбор, находятся в различных легкодоступных источниках, таких как, например, Кеш1п§1ои'8 РЬагтасеиЕса1 8аспсс5. 17ΐΗ Εάίίίοη (1985), который полностью включен в настоящее описание посредством ссылки.

Соединения формулы (I) можно вводить любым способом, подходящим для патологического состояния, подлежащего лечению, который может зависеть от специфики локализации заболевания или от количества лекарственного средства, которое должно быть доставлено. Местное введение обычно является предпочтительным для кожных заболеваний, а системное лечение предпочтительно для раковых или предраковых состояний, хотя предусматриваются другие способы доставки лекарственного средства. Например, соединения могут быть доставлены перорально, например в форме таблеток, капсул, гранул, порошков или жидких лекарственных форм, включая сиропы; местно, например в форме растворов, суспензий, гелей или мазей; сублингвально; буккально; парентерально, например путем подкожной, внутривенной, внутримышечной или интрастернальной инъекции или инфузии (например, в виде стерильных инъецируемых водных или неводных растворов или суспензий); назально, например путем ингаляции спрея; местно, например в форме крема или мази; ректально, например в виде суппозиториев; или липосомально. Могут быть введены дозированные лекарственные композиции, содержащие нетоксичные, фармацевтически приемлемые носители или растворители. Соединения могут вводиться в форме, подходящей для немедленного высвобождения или продленного высвобождения. Немедленное высвобождение или продленное высвобождение может быть достигнуто посредством выбора подходящей фармацевтической композиции или особенно в случае продленного высвобождения с помощью устройств, таких как подкожные импланты или осмотические насосы.

Иллюстративные композиции для местного введения включают местный носитель, такой как Р1аз11Ьазе (минеральное масло, желатинированное полиэтиленом). Иллюстративные композиции для перорального введения включают суспензии, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу для придания массы, альгиновую кислоту или альгинат натрия в качестве суспендирующего средства, метилцеллюлозу в качестве усилителя вязкости и подсластители или вкусовые добавки, такие как те, которые известны в данной области техники; и таблетки с немедленным высвобождением, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу, дикальцийфосфат, крахмал, стеарат магния и/или лактозу и/или другие вспомогательные вещества, связующие, наполнители, разрыхлители, разбавители и смазывающие вещества, такие как те, которые известны в данной области. Соединения по изобретению также могут быть введены перорально посредством сублингвального и/или буккального введения, например, с помощью сформованных, спрессованных или сублимированных таблеток. Иллюстративные композиции могут включать быстрорастворимые разбавители, такие как маннит, лактозу, сахарозу и/или циклодекстрины. Кроме того, такие композиции могут включать наполнители с высокой молекулярной массой, такие как целлюлоза (ЛУТСЕЬ®) или полиэтиленгликоль (РЕО); вспомогательное вещество, облегчающее адгезию в слизистой оболочке, такое как гидроксипропилцеллюлоза (НРС), гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), натрий-карбоксиметилцеллюлоза (8СМС) и/или сополимер малеинового ангидрида (например, ОаШге/); и средства для контроля высвобождения, такие как полиакриловый сополимер (например, СагЬоро1 934). Смазки, вещества, способствующие скольжению, ароматизаторы, красители и стабилизаторы также могут быть добавлены для облегчения изготовления и применения.

Иллюстративные композиции для введения посредством назального аэрозоля или ингаляции включают растворы, которые могут содержать, например, бензиловый спирт или другие подходящие консерванты, промоторы абсорбции для улучшения абсорбции и/или биодоступности и/или другие солюбилизирующие или диспергирующие средства, такие как те, которые известны в данной области.

Иллюстративные композиции для парентерального введения включают инъекционные растворы или суспензии, которые могут содержать, например, подходящие нетоксичные, парентерально приемлемые разбавители или растворители, такие как маннит, 1,3-бутандиол, вода, раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия или другие подходящие диспергирующие или смачивающие и суспенди- 19 025863 рующие средства, в том числе синтетические моно- или диглицериды и жирные кислоты, включая олеиновую кислоту. Иллюстративные композиции для ректального введения включают суппозитории, которые могут содержать, например, подходящие не раздражающие вспомогательные вещества, такие как масло какао, синтетические сложные эфиры глицерина или полиэтиленгликоли, которые являются твердыми при обычных температурах, но превращаются в жидкость и/или растворяются в ректальной полости, чтобы высвободить лекарственное средство. Терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению может быть определено обычным специалистом в данной области и включает иллюстративные величины дозы для млекопитающего от около 0.05 до 1000 мг/кг; 1-1000 мг/кг; 1-50 мг/кг; 5-250 мг/кг; 250-1000 мг/кг массы тела активного соединения в сутки, которое может быть введено в виде одноразовой дозы или в виде отдельных разделенных доз, например от 1 до 4 раз в день. Следует понимать, что конкретный уровень дозы и частота дозировки для любого конкретного субъекта может изменяться и будет зависеть от различных факторов, в том числе от активности конкретного используемого соединения, метаболической стабильности и продолжительности действия этого соединения, вида, возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола и диеты субъекта, способа и времени введения, скорости экскреции, комбинации лекарственных средств и серьезности конкретного состояния. Предпочтительные субъекты для лечения включают животных, наиболее предпочтительно виды млекопитающих, такие как люди и домашние животные, такие как собаки, кошки, лошади и тому подобное. Таким образом, когда в данном документе используется термин пациент, этот термин включает всех субъектов, наиболее предпочтительно вида млекопитающих, которые страдают от заболеваний, опосредованных уровнями ферментов В1к.

Примеры соединений формулы (I), как указано в разделе Примеры ниже, были протестированы в одном или нескольких анализах, описанных ниже.

Предпочтительные соединения формулы (I) ингибируют активность ферментов В1к со значениями 1С₅₀ 6 нМ или меньше, например от 0.001 до 6 нМ, согласно данным анализа рекомбинантного фермента В1к человека. Более предпочтительно соединения формулы (I) ингибируют активность ферментов В1к со значениями 1С₅₀ 2 нМ и меньше, например от 0.001 до 2 нМ. Другие предпочтительные соединения ингибируют активность ферментов В1к со значениями 1С₅₀ 1.0 нМ и меньше, например от 0.001 до 1.0 нМ. Предпочтительные соединения формулы (I) имеют пониженное ингибирование активности киназы 1ак2, характеризующееся значениями Κ.'₅₀ больше чем 50 нМ, например больше чем 250 нМ, согласно данным анализа 1ак2 тирозинкиназы. Более предпочтительно соединения формулы (I) ингибируют активность ферментов 1ак2 со значениями Κ.'₅₀ больше чем 400 нМ, например со значениями Κ.'₅₀ больше чем 700 нМ. Предпочтительные соединения формулы (I) имеют отношение значений Κ.'₅₀ при ингибировании активности 1ак2, полученных в результате анализа 1ак2 тирозинкиназы, к значениям Κ.'₅₀ при ингибировании активности В1к, полученным в результате анализа рекомбинантного фермента В1к человека, 150 и больше, например отношение 300 и больше. Более предпочтительно соединения формулы (I) имеют отношение значений Κ.'₅₀ при ингибировании активности 1ак2 к значениям Κ.'₅₀ при ингибировании активности В1к 400 и больше, например отношение 500 и больше.

Предпочтительные соединения формулы (I) имеют улучшенный потенциал в отношении ВСКстимулированной экспрессии СО69 в анализе цельной крови, характеризующийся значением Κ.'₅₀ 250 нМ или меньше, например от 0.1 до 250 нМ. Более предпочтительно соединения формулы (I) имеют потенциал в отношении ВСК-стимулированной экспрессии СО69 в анализе цельной крови со значениями Κ.'₅₀160 нМ или меньше, например от 0.1 до 160 нМ; и значениями Κ.'₅₀ 100 нМ или меньше, например от 0.1 до 100 нМ.

Способы получения

Соединения формулы (I) могут быть получены с использованием способов, показанных на схеме 1. Замещенные карбазолкарбоксамиды 1 (где Υ является подходящей группой, такой как Вг, С1 или трифторметансульфонилокси, предпочтительно Вг) могут быть преобразованы в соответствующие сложные боронатные эфиры 2 (К' = алкил, или обе группы К', взятые вместе, образуют кольцо, такое как 4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан или 5,5-диметил-1,3,2-диоксаборинан) с помощью методик, хорошо известных в химической литературе (см, например, Ыиуата. Т. с1 а1., Тс1гаксбгоп. 57:9813 (2001) и приведенные ссылки в них). Примерами таких методик являются реакции 1 с 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'би(1,3,2-диоксаборолан) или 5,5,5',5'-тетраметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборинан) в присутствии основания, такого как ацетат калия, и подходящего катализатора, такого как 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен палладий(П) хлорид, в подходящем растворителе.

Соединения 2 могут быть преобразованы в соединения 4 формулы (I), в которой Ζ представляет собой замещенное моноциклическое или конденсированное бициклическое гетероциклическое кольцо (заместитель О в соединениях формулы (I)) путем реакции с соответствующим соединением 3 (где Υ' является подходящей группой, такой как Вг или трифторметансульфонилокси, предпочтительно Вг). Это преобразование может быть достигнуто путем применения подходящего основания, такого как карбонат калия, карбонат цезия или трикалийфосфат, и подходящего катализатора, такого как тетракис(трифенилфосфин)палладий, хлорид 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен палладия(П) или хлорид 1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен палладия(П), в подходящем растворителе, таком как диоксан

- 20 025863 или тетрагидрофуран, необязательно с подходящим сорастворителем, таким как вода. Такие реакции сочетания обычно известны как реакции сочетания Сузуки-Мияура и хорошо известны в химической литературе (см, например, Негауц М.М., Тс1гаНсбгоп. 68:9145 (2012) и приведенные там ссылки).

Схема 1

Из-за несимметричного характера ароматических колец, соединенных между собой одинарными связями, помеченными как а и Ь на схеме 1, и из-за ограниченного вращения вокруг этих связей, вызванного стерическим затруднением, соединения формулы (I) проявляют хиральность, известную как атропоизомеризм. Таким образом, при определенных условиях, таких как хроматография на хиральной неподвижной фазе, все четыре диастереомера благодаря двум хиральным связям можно наблюдать на хроматограмме в виде четырех отдельных пиков. Заторможенное вращение вокруг связи Ь происходит со скоростью, которая является достаточно медленной, чтобы сделать возможным разделение отделенных атропоизомеров в виде различных соединений, которые являются стабильными при нормальной комнатной температуре. Тем не менее, заторможенное вращение относительно связи а может происходить с такой скоростью, что, если они разделены, эти атропоизомеры будут быстро взаимопревращаться при комнатной температуре, и разделенные атропоизомеры вокруг связи а невозможно сохранить в виде отдельных устойчивых соединений. Таким образом, соединения формулы (I) могут быть выделены либо в виде смесей четырех диастереомеров, или в виде стабильных пар диастереомеров, где одна пара имеет (К)-конфигурацию относительно связи Ь, но представляет собой смесь (К)- и (8)-конфигураций относительно связи а, и другая пара имеет (8)-конфигурацию относительно облигаций Ь, но представляет собой смесь (К)- и (8)-конфигураций относительно связи а. Соединения 4 формулы (I) могут быть разделены на пары диастереомеров 4а с одной абсолютной конфигурацией относительно связи Ь (либо как показано, или, наоборот, абсолютная конфигурация), и смесь двух взаимопревращающихся абсолютных конфигураций относительно связи а. Такое разделение может быть достигнуто с помощью способов, известных в данной области, таких как препаративная хроматография на хиральной неподвижной фазе. Альтернативно, соединения 4а формулы (I), которые являются конфигурационно стабильными парами диастереомеров, как описано выше, могут быть получены из соединений 2 путем той же реакции сочетания СузукиМияура, описанной выше, но с использованием единственного энантиомера 3а (с показанной абсолютной конфигурацией или с противоположной абсолютной конфигурацией), при условии, что условия сочетания Сузуки-Мияура таковы, что рацемизация 3 а или 4а не происходит.

Соединения 4 формулы (I) также могут быть получены с использованием способов, показанных на схеме 2. Замещенные сложные бороновые эфиры 5, в которых Ζ обозначает замещенное моноциклическое или конденсированное бициклическое гетероциклическое кольцо (заместитель О в соединениях формулы (I)), могут быть подвергнуты взаимодействию с замещенными карбазолкарбоксамидами 1 (где Υ представляет собой подходящую группу, такую как Вг, С1 или трифторметансульфонилокси, предпочтительно Вг) в условиях реакции сочетания Сузуки-Мияура, как описано выше, с получением соединений 4 формулы (I) в виде смеси четырех диастереомеров. Необязательно, как описано выше, такие соединения могут быть разделены на пары взаимопревращающихся диастереомеров 4а с одной абсолютной конфигурацией относительно связи Ь (либо как показано, или, наоборот, абсолютная конфигурация) и смесь абсолютных конфигураций относительно связи а. Альтернативно, соединения 5 могут быть разделены на отдельные энантиомеры 5а и подвергнуты взаимодействию с соединениями 1 в реакции сочетания Сузуки-Мияура в условиях, которые не вызывают рацемизации 5а, с получением соединений 4а формулы (I).

- 21 025863

Альтернативный способ синтеза некоторых соединений 7 формулы (I) показан на схеме 3. Подходящим образом замещенный 4-арилимино-1Н-бензо[б][1,3]оксазин-2(4Н)-он 6 может реагировать со сложными бороновыми эфирами 2 в условиях реакции сочетания Сузуки-Мияура, как описано выше, с получением соединений 7 формулы (I) в виде смесей четырех диастереомеров. В ходе реакции фрагмент 4-арилимино-1Н-бензо[б][1,3]оксазин-2(4Н)-он, присутствующий в 6, перегруппировывается во фрагмент 3-арилхиназолин-2,4(1Н, 3Н)-дион, присутствующий в продукте реакции 7.

Схема 3

Альтернативный способ синтеза некоторых соединений 9 формулы (I) показан на схеме 4. Соединение 8 формулы (I) либо в виде смеси четырех диастереомеров, или смеси двух взаимопревращающихся диастереомеров может быть обработано алкилирующим агентом, таким как йодометан или тридейтеройодометан, в присутствии подходящего основания, такого как карбонат цезия или карбонат калия, в подходящем растворителе, таком как ΌΜΡ или ТНР, с получением соединения 9 формулы (I), в которой К_апредставляет собой алкильную группу, полученную из использованного алкилирующего агента.

Схема 4

Промежуточные соединения 1, используемые при получении соединений формулы (I), могут быть получены с использованием способов, известных в химической литературе, например в патенте США № 8084620, и показанных на схеме 5. Соответственно замещенный циклогексанон 10 и 2-гидразинилбензойная кислота 11 или подходящая соль 11, такая как соль хлористо-водородной кислоты (где Υ представляет собой подходящую группу, такую как Вг, С1 или трифторметансульфонилокси, предпочтительно Вг), обе легко получены способами, хорошо известными из химической литературы, могут вступать в реакцию в подходящем растворителе с соответствующим катализатором, например этанолом с соляной кислотой, толуолом с п-толуолсульфоновой кислотой или трифторуксусной кислотой или ук- 22 025863 сусной кислотой (в этом случае растворитель также может служить в качестве катализатора), при подходящей температуре с получением соответствующего производного тетрагидрокарбазола 12. Эта реакция общеизвестна как синтез индола по Фишеру и хорошо известна в химической литературе (см., например, Ката!а, I. е! а1., СЬет. РЬагт. Ви11., 52:1071 (2004)). В качестве альтернативы синтез индола по Фишеру может быть осуществлен в две последовательные стадии: 10 может вступать в реакцию с 11 в подходящих условиях (например, в соответствующем растворителе, таком как этанол или толуол, необязательно, с подходящим катализатором, таким как п-толуолсульфоновая кислота) с образованием промежуточного гидразона, который может быть выделен, а затем подвергнут дальнейшему взаимодействию в подходящих условиях (например, этанол с соляной кислотой, уксусная кислота с хлоридом цинка или толуол с трифторуксусной кислотой) с образованием 12.

Схема 5

Карбоновая кислота 12 может быть преобразована в карбоксамид 13 с использованием способов, хорошо известных в химической литературе, например, путем превращения 12 в хлорангидрид обработкой оксалилхлоридом или тионилхлоридом с последующей обработкой аммиаком; или путем обработки 12 аммиаком в присутствии агента сочетания, такого как карбодиимид или гидрохлорид N-(3диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимида и 1-гидроксибензотриазол или 1-гидрокси-7-азабензотриазол. Превращение тетрагидрокарбазола 13 в карбазол 14 может быть выполнено с использованием способов, хорошо известных в химической литературе, например путем обработки 13 окисляющим агентом, таким как 2,3-дихлор-5,6-дицианобензохинон, в подходящем растворителе.

Превращение этоксикарбонильной группы в 14 до заместителя Κι соединения 1 может быть выполнено с использованием способов, хорошо известных в химической литературе. Например, обработкой 14 реагентом, таким как хлорид метиллития или метилмагния, можно получить соединение 1, где Κ представляет собой 2-гидрокси-2-метилэтильную группу. В качестве альтернативы обработкой 14 восстановителем, таким как литийалюминийгидрид, можно получить соединение 1, где Κ представляет собой гидроксиметил. Эти и другие группы Κ также могут в дальнейшем варьироваться, для получения еще других групп Κι. Например, соединение 1, где Κι представляет собой гидроксиметил, может быть преобразовано в соединение 1, где Κι представляет собой метоксиметил, обработкой тионилхлоридом с последующей обработкой промежуточного соединения 1, где Κι представляет собой хлорметил, метанолом. Дополнительные примеры известны в химической литературе, например, как указано в патенте США № 8084620.

Промежуточные соединения 3 и 5, используемые при получении соединений 4 формулы (I), могут быть получены с помощью различных способов. Некоторые из этих способов показаны на схеме 6. Изатиновый ангидрид 15 может вступать в реакцию с замещенным анилином 16 с получением амида 17. Такие реакции можно проводить при различных условиях, например при нагревании в подходящем растворителе или при нагревании в присутствии вспомогательного реагента, такого как триметилалюминий. Соединение 17 может быть преобразовано в замещенный хиназолиндион 18 (который является примером соединения 3 на схеме 1), например, путем обработки фосгеном или трифосгеном в подходящем растворителе. Необязательно, соединение 18 может быть преобразовано в соответствующий сложный боронатный эфир 19 (который является примером соединения 5 на схеме 2) с использованием ранее описанных способов для преобразования 1 в 2 (см. комментарии к схеме 1 выше). Альтернативно, соединение 18 необязательно может быть преобразовано в соединение 20, где Κ представляет собой алкильную группу (пример соединения 3 на схеме 1), с использованием способов, хорошо известных в химической литературе, например, путем обработки алкилирующим веществом, таким как иодометан, в присутствии подходящего основания, такого как карбонат цезия.

- 23 025863

Соединение 20 может быть необязательно преобразовано в соответствующий сложный боронатный эфир 21 (который является примером соединения 5 на схеме 2), используя те же способы, описанные выше. Соединение 19 также может быть необязательно преобразовано в соответствующее соединение 21 с помощью способов, аналогичных описанным для преобразования 18 в 20.

Как отмечалось выше, промежуточные соединения хиназолиндиона 18, 19, 20 и 21 проявляют хиральность за счет заторможенного вращения вокруг связи, обозначенной Ь. При желании эти промежуточные соединения могут быть разделены на отдельные энантиомерные атропоизомеры, например, с помощью хроматографии с хиральной неподвижной фазой. Разделенные энантиомеры необязательно могут быть затем подвергнуты преобразованиям, описанным выше (от 18 до 19, от 18 до 20, от 19 до 21 или от 20 до 21), с получением определенных примеров соединений 3а на схеме 1 или 5а на схеме 2.

Промежуточные соединения 6 на схеме 3 могут быть получены с использованием способа, показанного на схеме 7. Ν-замещенный изатиновый ангидрид 22, где К, представляет собой алкильную группу, может вступать в реакцию с замещенным анилином 16 с получением амида 23. Такие реакции могут быть проведены в различных условиях, например, при нагревании в подходящем растворителе, или при нагревании в присутствии вспомогательного реагента, такого как триметилалюминий. Соединение 23 может быть преобразовано в замещенный арилиминобензоксазинон 6, например, путем обработки фосгеном или трифосгеном в подходящем растворителе.

Некоторые дополнительные способы, которые могут быть использованы для получения соединений 3 и 5, применяемые при получении соединений 4 по настоящему изобретению, приведены на схеме 8. Замещенная пиридил-2-уксусная кислота 24 или соль замещенной пиридил-2-уксусной кислоты, такая как натриевая соль (которые либо коммерчески доступны, либо могут быть получены способами, хорошо известными в литературе), могут быть подвергнуты взаимодействию с анилином 16 различными способами, хорошо известными в химической литературе, с получением амида 25. Например, реакция может быть проведена в присутствии реагента сочетания, такого как гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний (НАТИ), или смеси 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида гид- 24 025863 рохлорида (ЕЭС) и гидрата 1-гидроксибензотриазола (НОВТ). Амид 25 может быть преобразован в соответствующий замещенный 1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион 26 (который является примером промежуточного соединения 3 на схеме 1) путем нагревания с реагентом, таким как карбо нилдиимидазол, в соответствующем растворителе, таком как толуол.

Промежуточное соединение 26 необязательно может быть преобразовано в соответствующий сложный боронатный эфир 27 (который является примером промежуточного соединения 5 на схеме 2) с использованием ранее описанных способов для преобразования 1 в 2 (см. комментарии к схеме 1 выше). Альтернативно, соединение 25 может быть преобразовано в соответствующий сложный боронатный эфир 28 с использованием способов, описанных выше, с последующим преобразованием 28 в 27 путем нагревания с реагентом, таким как карбонилдиимидазол.

На схеме 8 пиридиловое кольцо в показанных структурах также может быть заменено другим азотистым гетероциклом, таким как тиазол. В этом случае соответствующие соединения структур 26 и 28 будут содержать фрагмент 5Н-тиазоло[3,2-с]пиримидин-5,7(6Н)-дион вместо показанного фрагмента 1Нпиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион. Как обсуждалось выше, 1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)дион соединений 26 и 27 проявляют хиральность за счет заторможенного вращения вокруг связи, обозначенной Ь. При желании, эти промежуточные соединения могут быть разделены на отдельные энантиомеры, например, с помощью хроматографии с хиральной неподвижной фазой, с получением соответствующих примеров промежуточных соединений 3а на схеме 1 или 5а на схеме 2.

На схеме 9 проиллюстрирован другой способ получения соответствующих промежуточных соединений 5 схемы 2. Амид 25, полученный, как показано на схеме 8, может быть обработан фторирующим реагентом, таким как 1-(хлорметил)-4-фтор-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-бис(тетрафторборат) [§ЕЬЕСТРЬиОК®], в соответствующем растворителе с получением фторзамещенного амида 29. Это соединение затем может быть преобразовано в фторированный боронатный сложный эфир 30, а затем в промежуточное соединение 31 (которое является примером промежуточного соединения 5 на схеме 2), ис- 25 025863 пользуя способы, описанные на схеме 8.

Получение соединения 3 на схеме 1, где Ζ представляет собой фрагмент замещенного пиримидин1,3-диона, может быть достигнуто с помощью способа, показанного на схеме 10, следуя общему способу в соответствии с данными Сао, ί. с1 а1. (8уп1ЬеЬс Соттип., 39:205 (2009)). Соединение 32 может быть получено путем объединения п-метоксибензиламина, метилакрилата и фенил гипобромоселенита. Это вещество может быть подвергнуто взаимодействию с соответствующим арилизоцианатом 33 (который может быть получен с использованием способов, хорошо известных в химической литературе) из анилина 16 (см. схему 6) с получением замещенного дигидропиримидин-1,3-диона 34. Обработкой этого соединения окислителем, таким как пероксид водорода, можно получить замещенный пиримидин-1,3-дион 34. Удаление п-метоксибензиловой группы может быть достигнуто с помощью ряда способов, представленных в химической литературе, например путем обработки смесью трифторметансульфокислоты и трифторуксусной кислоты (как сообщалось Аи, Р. е1 а1., ί. Огд. СЬет., 69:9307 (2004)). Полученный пиримидин-1,3-дион 35 может быть подвергнут взаимодействию с арилбороновой кислотой, используя условия, описанные .ТасоЬкеп, М.Р. е1 а1. (ί. Огд. СЬет., 71:9183 (2006)), с получением 36, который является примером промежуточного соединения 3 на схеме 1.

Примеры

Соединения по настоящему изобретению и промежуточные соединения, используемые при получении соединений по настоящему изобретению, могут быть получены с использованием способов, показанных в следующих примерах и соответствующих способах. Методики и условия, применяемые в этих примерах, и фактические соединения, полученные в этих примерах, не предназначены для ограничения, а предназначены, чтобы продемонстрировать, как соединения по настоящему изобретению могут быть получены. Исходные материалы и реагенты, используемые в этих примерах, если не получены по методике, описанной в данном документе, как правило, либо коммерчески доступны, либо представлены в химической литературе, или могут быть получены с использованием методик, описанных в химической литературе. Изобретение дополнительно определено в следующих примерах. Следует понимать, что примеры приведены только в качестве иллюстрации. Из вышеизложенного и примеров специалист в данной области может установить существенные характеристики настоящего изобретения и, не отступая от сущности и объема изобретения, может сделать различные изменения и модификации, чтобы адаптировать изобретение для различных применений и условий. В результате этого изобретение не ограничено иллюстративными примерами, изложенными здесь ниже, а определяется прилагаемой к нему формулой изобретения.

В приведенных примерах фраза высушивали и концентрировали обычно относится к сушке раствора в органическом растворителе либо над сульфатом натрия, либо над сульфатом магния, с последующим фильтрованием и удалением растворителя из фильтрата (как правило, при пониженном давлении и при температуре, подходящей для стабильности получаемого материала).

Колоночную хроматографию обычно выполняли с использованием методики флеш-хроматографии (8Ш1, А.С. е1 а1., ί. Огд. СЬет., 43:2923 (1978)), или с заполненными силикагелем картриджами с использованием хроматографии среднего давления на приборе Псо (Те1е1упе СотротаЬоп), элюируя указанным

- 26 025863 растворителем или смесью растворителей. Препаративную высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) проводили с использованием колонки с обращенной фазой (^а1ег8 §ипРпе С₁₈, \Уа1сг5 ХВпйдс С₁₈, РНЕЫОМЕХЕХ® Ах1а С₁₈, УМС 85 ОЭ8 или тому подобное) с размером, соответствующим количеству материала для разделения, как правило, элюируя с градиентом возрастающей концентрации метанола или ацетонитрила в воде, также содержащим 0,05 или 0,1% трифторуксусной кислоты или 10 мМ ацетата аммония, со скоростью элюирования, подходящей для размера колонки и разделения, которое должно быть достигнуто. Хиральное сверхкритическое жидкостное хроматографическое разделение энантиомеров или пар диастереомеров проводили с использованием условий, описанных для отдельных случаев. Масс-спектральные данные были получены с помощью жидкостной хроматомассспектрометрии с электрораспылительной ионизацией. Данные рентгеноструктурного анализа были собраны с помощью системы Вгикег АХ8-АРЕХ2 ССЭ с использованием излучения Си Κα (X = 1.5418 А). Индексация и обработка измеренных данных значений интенсивности проводились с АРЕХ2 комплектом программного обеспечения/пакетом программ (см. руководство пользователя АРЕХ2, ν1.27; Вгикег АХ8, Шс., XVI 53711 И8А). Когда это оговорено, кристаллы охлаждали в холодном потоке ОхГотД Сгуо8у81ет8 стуокДеат соо1ег (СоДег, 1. е1 а1., 1. Арр1. Сгуй., 19:105 (1986)) в процессе сбора данных. Структуры были решены прямыми методами и уточнены на основе наблюдаемых отражений с помощью кристаллографического пакета программ 8НЕЬХТЬ (см. руководство пользователя АРЕХ2, ν1.27; Вгикег АХ8, Ыс., VI 53711 И8А).

Полученные параметры атомной кристаллической решетки (координаты и температурные факторы) корректировались посредством методики наименьших квадратов в полноматричном приближении. Функция, минимизированная в этих корректировках, представляла собой Е„(|Р_о| - |Р_с|)² К определяли как Σ ||Ро| - |Рс||/Е |Ро|, при этом К„ = [Е„(|Ро| - |Рс|)²/Е„ |Ро|²]^1/2, где ν представляла собой соответствующую функцию веса с учетом отклонений наблюдаемых интенсивностей. Разностные карты обследовали на всех стадиях корректировки. Атомы водорода вводились на идеализированных позициях с изотропными температурными факторами, при этом никакие параметры атомов водорода не изменялись. Параметры элементарной ячейки были получены в соответствии с методикой, описанной в 81он1 е1 а1., Х-Кау §Дис1нге Пе1егт1паДои: А РтасДса1 Ошйе, МасМШаи (1968).

Химические наименования были определены с использованием СНЕМ^ΚАV® ИИта, версия 9.0.5 (СатЪДйде8ой). Используются следующие сокращения.

Сокращения.

€ΌΙ карбонилдиимидазол

ОСМ дихлорметан

ΏΙΕΑ диизопропилэтиламин

ί)ΜΙ- Ν,Ν-диметилформамид

Г)М80 диметилсульфоксид брр Г 1,1 '-бис(дифенилфосфино)ферроцен

Г)$С дифференциальная сканирующая калориметрия ϋΤΤ дитиогреитол

РГ)С 1 -[3-(диметиламино)пропил]-3-Этил-карбодиимид гидрохлорид

ΕϋΤΑ этилендиамин тетраацегат

ЕЮАс этилацетат

ЕЮН этанол г грамм(ы) ч час(ы)

НАТи О-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-теграметилуроний гексафторфосфат

НОВТ 1 -гидроксибензогриазол гидрат

НР1.С жидкостная хроматография высокого давления

ΙΡΑ изопропанол

Ме метил

МеСЫ ацетонитрил

МеОН метанол мин минута(ы) ммоль милимоль(и)

1-бутил третичный бутил

ТРА трифторуксусная кислота

ТНР теграгидрофуран

- 27 025863

Промежуточное соединение 1. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-8-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Промежуточное соединение 1А. 2-Амино-^(3-бром-2-метилфенил)-3-фторбензамид

Раствор 8-фтор-1Н-бензо[6][1,3]оксазин-2,4-диона (2.00 г, 11.0 ммоль) и 3-бром-2-метиланилина (4.11 г, 22.1 ммоль) в диоксане (20 мл) в герметично закрытых реакционных виалах нагревали при 110°С в течение 4 дней. Охлажденную смесь обрабатывали 10% водного К₂СО₃ и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь 3 раза экстрагировали ЭСМ и объединенные органические фазы промывали водой, высушивали и концентрировали. Остаток растирали с простым эфиром с получением серого твердого вещества (2.50 г). Маточный раствор концентрировали и остаток снова растирали с простым эфиром с получением серого твердого вещества (230 мг). Два твердых вещества объединяли с получением 2-амино-^(3-бром-2-метилфенил)-3-фторбензамида в виде серого твердого вещества (2.73 г, выход 78%). Масс-спектр т/ζ 323, 325 (М+Н)+.

Альтернативный способ.

Суспензию 8-фтор-1Н-бензо[6][1,3]оксазин-2,4-диона (3.00 г, 16.6 ммоль) в ксилолах (50 мл) обрабатывали 3-бром-2-метиланилином (3.08 г, 16.6 ммоль) и нагревали до кипения с обратным холодильником. Через 6 ч смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры на протяжении ночи. Полученную в результате суспензию разбавляли гексанами и осадок собирали фильтрованием, прополаскивали гексанами и высушивали на воздухе с получением 2-амино-^(3-бром-2-метилфенил)-3-фторбензамида в виде белого твердого вещества (4.50 г, выход 84%). Масс-спектр т/ζ 323, 325 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ 7.69 (6, 1=7.9 Гц, 1Н), 7.65 (Ьг. 5., 1Н), 7.50-7.46 (т, 1Н), 7.32 (6, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.19-7.11 (т, 2Н), 6.73-6.64 (т, 1Н), 5.69 (Ьг. 5., 2Н), 2.44 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 1.

Раствор 2-амино^-(3-бром-2-метилфенил)-3-фторбензамида (5.70 г, 17.6 ммоль) в ТНР (100 мл) обрабатывали бис(трихлорметил)карбонатом (трифосген) (6.28 г, 21.2 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение 15 мин. Смесь разбавляли Е1ОАс, осторожно обрабатывали насыщенным водным NаΗО₃ и перемешивали при комнатной температуре, пока не прекратилось выделение газа. Отделенную органическую фазу последовательно промывали насыщенным водным NаΗСО₃, водой и рассолом и высушивали и концентрировали. Остаток растирали с простым эфиром с получением 3-(3-бром2-метилфенил)-8-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде не совсем белого твердого вещества (6 г, выход 97%). Масс-спектр т/ζ 349, 351 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 2. 8-Фтор-1-метил-3-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Промежуточное соединение 2А. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-8-фтор-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)дион

- 28 025863

Раствор 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (4.80 г, 13.8 ммоль) в ΌΜΡ (25 мл) обрабатывали Ск₂СО₃ (13.44 г, 41.2 ммоль). Суспензию перемешивали при комнатной температуре и обрабатывали по каплям (но быстро) иодометаном (4.30 мл, 68.7 ммоль) и перемешивали быстро при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь разбавляли ЕЮАс и водой (200 мл). Органическую фазу отделяли и промывали последовательно водой и рассолом, затем высушивали и концентрировали с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-фтор-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде желтоватокоричневого стекловидного твердого вещества (4.80 г, выход 96%). Масс-спектр т/ζ 363, 365 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 2.

Смесь 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-фтор-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (4.8 г, 13.2 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (4.36 г, 17.2 ммоль), ацетата калия (3.89 г, 39.6 ммоль) и аддукта РйС1₂(йрр£) ЭСМ (0.540 г, 0.661 ммоль) в диоксане (65 мл) нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали через СЕЫТЕ® и твердые вещества прополаскивали ЕЮАс. Фильтрат разбавляли ЕЮАс, промывали водой и высушивали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (80 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 20-50%), с получением 8-фтор-1-метил-3-(2-метил-3-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде белого твердого вещества (4.61 г, выход 85%). Масс-спектр т/ζ 411 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 8.14-8.08 (т, 1Н), 7.93 (άά, 1=7.5, 1.3 Гц, 1Н), 7.48 (άάά, 1=14.0, 8.0, 1.5 Гц, 1Н), 7.34 (ί, 1=7.6 Гц, 1Н), 7.27-7.20 (т, 2Н), 3.88 (ά, 1=7.9 Гц, 3Н), 2.36 (к, 3Н), 1.36 (к, 12Н).

Промежуточные соединения 3 и 3А. 8-Фтор-1-метил-3-(§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион и 8-фтор-1-метил-3-(К)-(2-метил-3-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Порцию рацемического 8-фтор-1-метил-3-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 2] отделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: (К,К)-АНЕЬК-О® 1 (5x50 см, 10 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (76:24) при 290 мл/мин, 100 бар, 40°С; подготовка образца: 100 мг/мл в ОСМ-ГРА (6:4); объем вводимой пробы: 10.0 мл. Первый пик, элюируемый из колонки, соответствует (§)-изомеру, 8-фтор-1-метил-3-(§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диону [промежуточное соединение 3] в виде белого твердого вещества. Масс-спектр т/ζ 411 (М+Н)+.

Второй пик, элюируемый из колонки, соответствует (К)-изомеру, 8-фтор-1-метил-3-(К)-(2-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диону [промежуточное соединение 3А] в виде белого твердого вещества. Масс-спектр т/ζ 411 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 8.13-8.08 (т, 1Н), 7.93 (άά, 1=7.5, 1.3 Гц, 1Н), 7.48 (άάά, 1=13.9, 8.1, 1.5 Гц, 1Н), 7.37-7.31 (т, 1Н), 7.27-7.20 (т, 2Н), 3.88 (ά, 1=7.9 Гц, 3Н), 2.36 (к, 3Н), 1.36 (к, 12Н).

Промежуточное соединение 4. 7-(2-Гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] (3.00 г, 8.64 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (2.19 г, 8.64 ммоль) и ацетата калия (2.12 г, 21.6 ммоль) в диоксане (30 мл) барботировали азотом в течение 5 мин. Добавляли аддукт РάС1₂(άррί) ЭСМ (0.353 г, 0.432 ммоль) и смесь барботировали азотом в течение еще 5 мин. Реакционный сосуд гер- 29 025863 метично закрывали и нагревали при 90°С на протяжении ночи. Охлажденную смесь разбавляли ЭСМ, дважды промывали водой, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г + 12 г колонки, расположенные друг над другом), элюируя ΕίΘΛοгексанами, с получением 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Нкарбазол-1-карбоксамида в виде светло-желтого твердого вещества (2.79 г, выход 82%). Масс-спектр т/ζ 377 (М+Н-Н₂О)+.

Промежуточное соединение 5. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-8-фтор-1-метил(й₃)хиназолин-2,4(1Н,3Н)дион

Смесь 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 1] (203 мг, 0.581 ммоль) и С5₂СО₃ (379 мг, 1.16 ммоль) в ΌΜΡ (2.25 мл) обрабатывали иодометаном-б₃(0.054 мл, 0.872 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч. Смесь разбавляли водой (приблизительно 20 мл) и полученное в результате вещество растирали и перемешивали при комнатной температуре, образуя растворенное твердое вещество. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали под вакуумом с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-фтор-1метил(б₃)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде не совсем белого твердого вещества (189.5 мг, выход 90%). Масс-спектр т/ζ 366, 368 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά₃) δ 7.93 (ά, 1=7.0 Гц, 1Н), 7.79-7.69 (т, 2Н), 7.39-7.25 (т, 3Н), 2.12 (5,

3Н).

Промежуточное соединение 6. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-8-метокси-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)дион

Промежуточное соединение 6А. 2-Амино-Ы-(3-бром-2-метилфенил)-3-метоксибензамид

Смесь 3-бром-2-метиланилина (482 мг, 2.59 ммоль) и 8-метокси-1Н-бензо[б][1,3]оксазин-2,4-диона (500 мг, 2.59 ммоль) в толуоле (20 мл) обрабатывали 2М триметилалюминия в толуоле (3.24 мл, 6.47 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, затем нагревали при 70°С на протяжении ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, обрабатывали 1М водной НС1 и 3 раза экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические фазы последовательно промывали насыщенным водным ЫаНСО₃ и водой, высушивали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-100%), с получением 2-амино-Ы(3-бром-2-метилфенил)-3-метоксибензамида в виде белого твердого вещества (302 мг, выход 35%). Массспектр т/ζ 335, 337 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 7.72 (ά, 1=7.3 Гц, 2Н), 7.46 (άά, 1=8.0, 0.8 Гц, 1Н), 7.17-7.10 (т, 2Н), 6.90 (άά, 1=7.9, 0.9 Гц, 1Н), 6.72-6.66 (т, 1Н), 5.88 (Ьг. 5., 2Н), 3.92 (5, 3Н), 2.43 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 6В. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-8-метоксихиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Раствор 2-амино-Ы-(3-бром-2-метилфенил)-3-метоксибензамида (302 мг, 0.901 ммоль) и трифосгена (321 мг, 1.08 ммоль) в ТНР (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь осто- 30 025863 рожно обрабатывали насыщенным водным ЫаНСО₃ и перемешивали до прекращения выделения газа. Смесь дважды экстрагировали ИСМ и объединенные органические фазы промывали водой, высушивали и концентрировали с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-метоксихиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (339 мг). Масс-спектр т/ζ 361, 363 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 6. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-8-метокси-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)дион.

Смесь 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-метоксихиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (535 мг, 1.48 ммоль), иодометана (0.185 мл, 2.96 ммоль) и С5₂СО₃ (965 мг, 2.96 ммоль) в ТНР (20 мл) перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в ИСМ, последовательно промывали насыщенным водным ЫаНСО₃ и водой, высушивали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-100%), с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-метокси-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (442 мг). Масс-спектр т/ζ 375, 377 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ 7.90 (йй, 1=7.2, 2.3 Гц, 1Н), 7.66 (йй, 1=8.0, 1.2 Гц, 1Н), 7.31-7.22 (т, 2Н), 7.22-7.19 (т, 1Н), 7.17-7.13 (т, 1Н), 3.97 (5, 3Н), 3.89 (5, 3Н), 2.23 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 7. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-6-фтор-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Промежуточное соединение 7А. 2-Амино-Ы-(3-бром-2-метилфенил)-5-фторбензамид

Смесь 3-бром-2-метиланилина (1.50 г, 8.06 ммоль) и 6-фтор-1Н-бензо[й][1,3]оксазин-2,4-диона (1.46 г, 8.06 ммоль) в толуоле (40 мл) охлаждали на бане лед-вода и обрабатывали порциями 2М триметилалюминия в толуоле (10.1 мл, 20.2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем нагревали при 70°С на протяжении ночи. Смесь охлаждали до 0°С, осторожно обрабатывали 1М водной НС1 и экстрагировали 3 раза ЕЮАс. Объединенные органические фазы последовательно промывали насыщенным водным ЫаНСО₃ и водой, высушивали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (120 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 5-40%), с получением 2-амино-Ы-(3-бром-2-метилфенил)-5-фторбензамида (0.893 г, чистота 87%, выход 30%). Массспектр т/ζ 323, 325 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, МеОН-й₄) δ 7.54 (1Н, йй, 1=8.03, 0.99 Гц), 7.48 (1Н, йй, 1=9.68, 3.08 Гц), 7.33 (1Н, й, 1=7.26 Гц), 7.16 (1Н, ΐ, 1=7.92 Гц), 7.04-7.12 (1Н, т), 6.83 (1Н, йй, 1=9.02, 4.62 Гц), 2.39 (3Н, 5).

Промежуточное соединение 7В. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-6-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Раствор 2-амино-Ы-(3-бром-2-метилфенил)-5-фторбензамида (0.893 г, 2.76 ммоль) и трифосгена (0.984 г, 3.32 ммоль) в ТНР (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь осторожно обрабатывали насыщенным водным ЫаНСО₃ и перемешивали до прекращения выделения газа. Смесь дважды экстрагировали ИСМ. Объединенные органические фазы промывали водой, высушивали и концентрировали. Остаток растирали с ИСМ с получением белого твердого вещества, выделенного фильтрованием. Фильтрат концентрировали и подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-80%), с получением дополнительного твердого вещества. Два твердых вещества объединяли с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-6-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)диона в виде белого твердого вещества (845 мг, выход 87%). Масс-спектр т/ζ 349, 351 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 7.

Смесь 3-(3-бром-2-метилфенил)-6-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (742 мг, 2.13 ммоль), иодометана (0.159 мл, 2.55 ммоль) и С5₂СО₃ (1.04 г, 3.19 ммоль) в ТНР (20 мл) перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в ИСМ и

- 31 025863 последовательно промывали насыщенным водным №-1НСО₃ и водой, высушивали и концентрировали с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-6-фтор-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (742 мг, выход 96%). Масс-спектр т/ζ 363, 365 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 8. (2)-4-((3-Бром-2-хлорфенил)имино)-1-метил-1Н-бензо[й][1,3]оксазин-2(4Н)-он

Промежуточное соединение 8А. ^(3-Бром-2-хлорфенил)-2-(метиламино)бензамид

Смесь 3-бром-2-хлоранилина [получен в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8242260] (240 мг, 1.16 ммоль) и толуола (10 мл) при 0°С медленно обрабатывали 2М триметилалюминия в толуоле (0.99 мл, 1.98 ммоль). Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 мин. Медленно добавляли неполную суспензию 1-метил-1Н-бензо[й][1,3]оксазин-2,4диона (300 мг, 1.52 ммоль) в толуоле (4 мл). Полученную в результате смесь нагревали при 50°С в течение 4 ч, охлаждали до 0°С и обрабатывали по каплям 1М водной НС1, пока не переставало наблюдаться выделение газа. Смесь перемешивали в течение 2 ч до нагревания до комнатной температуры, затем экстрагировали ЕЮАс. Органическую фазу последовательно промывали №-1НСО₃ и рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (80 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-30%), с получением ^(3-бром-2-хлорфенил)-2-(метиламино)бензамида в виде желтого твердого вещества (110 мг, выход 28%). Масс-спектр т/ζ 339 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ 10.00 (к, 1Н), 7.78 (йй, 1=7.9, 1.5 Гц, 1Н), 7.67 (йй, 7=8.1, 1.5 Гц, 1Н), 7.57 (йй, 7=8.0, 1.4 Гц, 1Н), 7.53 (й, 7=1.3 Гц, 1Н), 7.38 (ййй, 7=8.4, 7.1, 1.4 Гц, 1Н), 7.32 (1, 7=8.0 Гц, 1Н), 6.70 (й, 7=8.4 Гц, 1Н), 6.68-6.61 (т, 1Н), 2.79 (й, 7=5.1 Гц, 3Н).

Промежуточное соединение 8. (2)-4-((3-Бром-2-хлорфенил)имино)-1-метил-1Н-бензо[й][1,3] оксазин-2(4Н)-он.

Раствор ^(3-бром-2-хлорфенил)-2-(метиламино)бензамида (150 мг, 0.442 ммоль) в ТНР (15 мл) охлаждали до 0°С и обрабатывали трифосгеном (197 мг, 0.663 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем охлаждали до 0°С и обрабатывали водой до прекращения выделения газа. Смесь концентрировали и остаток растворяли в ЕЮАс и последовательно промывали насыщенным водным NаНСΟз, водой и рассолом и высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-50%), с получением (Ζ)4-((3-бром-2-хлорфенил)имино)-1-метил-1Н-бензо[й][1,3]оксазин-2(4Н)-она в виде бежевого твердого вещества (130 мг, выход 81%).

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ 8.33 (йй, 7=7.8, 1.4 Гц, 1Н), 7.72-7.61 (т, 1Н), 7.41 (йй, 7=7.9, 1.5 Гц, 1Н), 7.36-7.28 (т, 1Н), 7.16-7.08 (т, 2Н), 7.07-7.01 (т, 1Н), 3.55 (к, 3Н).

Промежуточное соединение 9. 3-(3-Бром-2-хлорфенил)-8-фтор-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Промежуточное соединение 9А. 2-Амино-^(3-бром-2-хлорфенил)-3-фторбензамид

- 32 025863

Смесь 3-бром-2-хлоранилина [получен в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8242260] (600 мг, 2.91 ммоль) и толуола (10 мл) охлаждали до 0°С и медленно обрабатывали 2М триметилалюминия в толуоле (2.47 мл, 4.94 ммоль). Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 мин. Далее добавляли одной порцией 8-фтор-1Н-бензо[б][1,3]оксазин-2,4дион (684 мг, 3.78 ммоль) и смесь нагревали до 50°С в течение 16 ч. Смесь охлаждали до 0°С и обрабатывали по каплям 1М водной НС1, пока не прекратилось выделение газа, и перемешивали в течение 2 ч, оставляя нагреваться до комнатной температуры. Смесь экстрагировали 3 раза ЕЮАс. Объединенные органические фазы последовательно промывали насыщенным водным ЫаНСО₃ и рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (24 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-30%), с получением 2-амино-Ы-(3-бром-2-хлорфенил)-3-фторбензамида в виде бледно-желтого твердого вещества (350 мг, выход 35%). Масс-спектр т/ζ 343 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 8.46 (бб, 1=8.4, 1.3 Гц, 1Н), 8.42 (Ьг. к., 1Н), 7.43 (бб, 1=8.0, 1.4 Гц, 1Н), 7.34 (б, 6=8.1 Гц, 1Н), 7.22 (ί, 1=8.3 Гц, 1Н), 7.15 (ббб, 1=11.0, 8.0, 1.2 Гц, 1Н), 6.69 (1б, 1=8.0, 5.1 Гц, 1Н), 5.72 (Ьг. к., 2Н).

Промежуточное соединение 9В. 3-(3-Бром-2-хлорфенил)-8-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Трифосген (453 мг, 1.53 ммоль) добавляли одной порцией к раствору амино-Ы-(3-бром-2хлорфенил)-3-фторбензамида (350 мг, 1.02 ммоль) в ТНР (10 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем охлаждали до 0°С и обрабатывали водой, пока не прекращалось наблюдаемое выделение газа. Смесь концентрировали и остаток растворяли в ЕЮАс, последовательно промывали насыщенным водным ЫаНСО₃, водой и рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (24 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-50%), с получением 3-(3-бром-2-хлорфенил)-8-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде желтого твердого вещества (320 мг, выход 85%). Масс-спектр т/ζ 369 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 8.54 (Ьг. к., 1Н), 7.97 (б, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.77 (бб, 1=6.8, 2.6 Гц, 1Н), 7.46 (ббб, 1=9.8, 8.3, 1.2 Гц, 1Н), 7.36-7.29 (т, 2Н), 7.24 (1б, 1=8.0, 4.8 Гц, 1Н).

Промежуточное соединение 9.

Иодометан (0.102 мл, 1.623 ммоль) добавляли медленно к смеси 3-(3-бром-2-хлорфенил)-8фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (300 мг, 0.812 ммоль), ИМР (5 мл) и Ск₂СО₃ (529 мг, 1.62 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем разбавляли ЕЮАс, промывали последовательно водой и рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (24 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-30%), с получением 3-(3-бром-2-хлорфенил)-8-фтор-1-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде желтого твердого вещества (280 мг, выход 90%). Масс-спектр т/ζ 383 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 8.09 (бй, 1=7.8, 0.8 Гц, 1Н), 7.79-7.71 (т, 1Н), 7.49 (ббб, 1=13.9, 8.1, 1.5 Гц, 1Н), 7.32-7.29 (т, 2Н), 7.29-7.22 (т, 2Н), 3.88 (к, 1.5 Н), 3.86 (к, 1.5Н).

Промежуточное соединение 10. 2-(3-Бром-2-метилфенил)-5-метокси-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин1,3(2Н)-дион

Промежуточное соединение 10А. Этил 2-(3-метоксипиридин-2-ил)ацетат

- 33 025863

Перемешанный раствор диизопропиламина (0.385 мл, 2.70 ммоль) в ТНР (2 мл) при 0°С медленно обрабатывали 1.6М н-бутиллития в гексанах (1.69 мл, 2.70 ммоль). Смесь перемешивали в течение 15 мин, затем добавляли с помощью шприца на протяжении 5 мин к перемешанному раствору 3-метокси-2пиколина (0.133 г, 1.08 ммоль) и диэтилкарбоната (0.262 мл, 2.16 ммоль) в ТНР (5 мл) при -78°С. После перемешивания в течение еще 45 мин охлаждающую баню удаляли и продолжали перемешивание на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь обрабатывали насыщенным водным ИН₄С1 и разбавляли ЕЮАс. Органическую фазу отделяли, последовательно промывали насыщенным водным ИаНСО₃ и рассолом и высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (12 г), элюируя 50% ЕЮАс-гексаны, с получением этил 2-(3-метоксипиридин-2ил)ацетата в виде масла (0.17 г, выход 81%). Масс-спектр т/ζ 196 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 10В. 2-(3-метоксипиридин-2-ил)ацетат натрия

Перемешанный раствор этил 2-(3-метоксипиридин-2-ил)ацетата (0.17 г, 0.871 ммоль) в ТНР (2.5 мл) при комнатной температуре обрабатывали 3М водного ИаОН (0.581 мл, 1.74 ммоль). Через 7 ч смесь концентрировали для удаления ТНР и водный остаток замораживали на сухом льду и лиофилизировали с получением 2-(3-метоксипиридин-2-ил)ацетата натрия в виде белого твердого вещества. Предполагался количественный выход, и вещество использовали без дополнительной очистки. Масс-спектр т/ζ 168 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 10С. И-(3-Бром-2-метилфенил)-2-(3-метоксипиридин-2-ил)ацетамид

Смесь 2-(3-метоксипиридин-2-ил)ацетата натрия (0.166 г, 0.871 ммоль), 3-бром-2-метиланилина (0.118 мл, 0.958 ммоль), ОША (0.608 мл, 3.48 ммоль) и НАТИ (0.397 г, 1.045 ммоль) в ΌΜΡ (4.0 мл) перемешивали при комнатной температуре. Через 1 ч смесь разбавляли ЕЮАс и дважды промывали 10% водным ЫС1, затем рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением И-(3-бром-2-метилфенил)-2-(3-метоксипиридин-2ил)ацетамида в виде бледно-желтого твердого вещества (0.213 г, выход 73%). Масс-спектр т/ζ 335, 337 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 10.

Смесь И-(3-бром-2-метилфенил)-2-(3-метоксипиридин-2-ил)ацетамида (0.136 г, 0.406 ммоль) и СТО (0.263 г, 1.62 ммоль) в толуоле (2 мл) нагревали при 110°С. Через 4 ч смесь охлаждали, разбавляли ЕЮАс и промывали последовательно водой и рассолом. Органическую фазу высушивали и концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (24 г), элюируя 40% ЕЮАс-гексаны, с получением 2-(3-бром-2-метилфенил)-5-метокси-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)диона в виде желтого твердого вещества (0.0729 г, выход 50%). Масс-спектр т/ζ 361, 363 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 11. 2-(3-Бром-2-метилфенил)-6-метокси-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин1,3(2Н)-дион

Указанное промежуточное соединение синтезировали из 4-метокси-2-метилпиридина, следуя общему пути синтеза, описанного для промежуточного соединения 10. Масс-спектр т/ζ 361, 363 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 12. 2-(3-Бром-2-метилфенил)-7-метокси-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин1,3(2Н)-дион

- 34 025863

Указанное промежуточное соединение синтезировали из 3-метокси-6-пиколина, следуя общему пути синтеза, описанного для промежуточного соединения 10. Масс-спектр т/ζ 361, 363 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 13. 5-Хлор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)-1Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион (рацемический)

Промежуточное соединение 13А. Диэтил 2-(3-хлорпиридин-2-ил)малонат

Смесь 3-хлор-2-фторпиридина (5.00 г, 38.0 ммоль), диэтилмалоната (14.61 г, 91 ммоль) и С§₂СО₃(29.7 г, 91 ммоль) в ΌΜδΟ (42 мл) нагревали при 100°С в течение 7 ч. После перемешивания на протяжении ночи при комнатной температуре смесь разбавляли ЕЮАс и дважды промывали водой, затем рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали ЕЮАс, объединенные органические фазы высушивали и концентрировали с получением сырого диэтил 2-(3-хлорпиридин-2-ил)малоната в виде бесцветного масла, используемого без дополнительной очистки. Масс-спектр т/ζ 272 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 13В. Этил 2-(3-хлорпиридин-2-ил)ацетат

Смесь диэтил 2-(3-хлорпиридин-2-ил)малоната (10.32 г, 38 ммоль), хлорида натрия (5.55 г, 95 ммоль) и воды (3.4 мл, 190 ммоль) в ΌΜδΟ (40 мл) нагревали при 145°С в течение 8 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс и дважды промывали водой, затем рассолом. Органическую фазу высушивали и концентрировали с получением сырого этил 2-(3-хлорпиридин-2-ил)ацетата, используемого без дополнительной очистки. Масс-спектр т/ζ 200 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 13С. 2-(3-Хлорпиридин-2-ил)ацетат натрия

Раствор этил 2-(3-хлорпиридин-2-ил)ацетата (7.59 г, 38 ммоль) в ТНР (76 мл) обрабатывали при комнатной температуре 3М водного ЫаОН (25.3 мл, 76 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи и концентрировали для удаления ТНР. Водный остаток замораживали на сухом льду и лиофилизировали с получением 2-(3-хлорпиридин-2-ил)ацетата натрия в виде не совсем белого твердого вещества, используемого без дополнительной очистки. Масс-спектр т/ζ 172, (М+Н)+.

Промежуточное соединение 13Ό. Ы-(3-Бром-2-метилфенил)-2-(3-хлорпиридин-2-ил)ацетамид

Смесь 2-(3-хлорпиридин-2-ил)ацетата натрия (7.39 г, 38 ммоль), 3-бром-2-метиланилина (4.7 мл, 38.4 ммоль), О1ЕЛ (13.3 мл, 76 ммоль) и НАТИ (14.59 г, 38.4 ммоль) в ΌΜΡ (127 мл) перемешивали при комнатной температуре. Через 90 мин смесь разбавляли ЕЮАс и дважды промывали 10% ЫС1, затем

- 35 025863 рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали ЕίΟΑс и объединенные органические фазы высушивали и концентрировали до небольшого объема. В раствор вносили затравку с кристаллом из более ранней порции и выдерживали на протяжении ночи с получением осадка, который собирали фильтрованием и промывали 50% ЕίΟΑс-гексанами с получением белого твердого вещества. Фильтрат концентрировали и перекристаллизовывали подобным образом три раза с получением дополнительного твердого вещества. Твердые вещества объединяли с получением Ы-(3-бром-2-метилфенил)-2-(3-хлорпиридин-2ил)ацетамида в виде белого твердого вещества (11.43 г, выход 89%). Масс-спектр т/ζ 339, 341 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 9.76 (Ьг. 5., 1Η), 8.52 (ά, 1=3.5 Гц, 1Η), 7.92 (ά, Σ=7.9 Гц, 1Η), 7.80 (άά, 1=8.1, 1.1 Гц, 1Н), 7.36 (ά, Σ=7.9 Гц, 1Η), 7.32-7.23 (т, 1Η), 7.06 (ί, Σ=8.0 Гц, 1Η), 4.16 (5, 2Н), 2.39 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 13Е. 2-(3-Хлорпирндин-2-ил)-Ы-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)ацетамид

Смесь N-(3-бром-2-метилфенил)-2-(3-хлорпнрндин-2-ил)ацетамида (4.0 г, 11.8 ммоль) и 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (3.29 г, 13.0 ммоль) в ΌΜ8Ο (5 мл) и диоксане (25 мл) барботировали аргоном в течение 7 мин, с последующим добавлением ацетата калия (2.89 г, 29.4 ммоль). Барботирование аргоном продолжали в течение 7 мин, после чего добавляли аддукт ΡάΟ₂(άρρΓ) ИСМ (0.481 г, 0.589 ммоль). Смесь нагревали при 90°С в течение 7 ч. Охлажденную смесь разбавляли ЕίΟΑс и фильтровали через СЕЬ^Е®. Фильтрат промывали последовательно водой и рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали ЕίΟΑс и объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток перекристаллизовывали из ЕίΟΑс с получением белого твердого вещества. Маточный раствор концентрировали и остаток перекристаллизовывали из ЕίΟΑс. Два твердых вещества объединяли с получением 2-(3-хлорпнридин-2-ил)-N-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)ацетамида в виде белого твердого вещества (3.88 г, выход 85%). Масс-спектр т/ζ 387, 389 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 13.

Смесь 2-(3-хлорпиридин-2-ил)-М-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил) ацетамида (0.192 г, 0.497 ммоль) и Ста (0.322 г, 1.99 ммоль) в толуоле (2 мл) нагревали при 110°С. Через 5 ч охлажденную смесь разбавляли ЕίΟΑс и промывали последовательно водой и рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали ЕίΟΑс и объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя ЕίΟΑсгексанами, с получением рацемического 5-хлор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)-1Η-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона в виде ярко-желтого твердого вещества (0.133 г, выход 65%). Масс-спектр т/ζ 413 (М+Н)+.

Промежуточные соединения 14 и 15. 5-Хлор-2-(К)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Η-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион (Ш14) и 5-хлор-2-(§)-(2-метил-3(4,4,5,5-теΊраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Η-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион (Ш15)

Порцию рацемического 5-хлор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)1Η-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 13] отделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: ^ИЕЬК-О® КК (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (55:45) при 200 мл/мин, 100 бар, 35°С; подготовка образца: 96 мг/мл в МеСЫ-ЭСМ (1:4); объем вводимой пробы: 5 мл. Первый пик, элюируемый из колонки, соответствовал 5-хлор-2-(Κ)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Η-пнридо [1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диону [промежуточное соединение 14]. Второй пик, элюируемый из колонки, соответствовал 5-хлор-2-(§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Η-пнридо [1,2-с] пиримидин-1,3(2Н)-диону [промежуточное соединение 15]. Масс-спектр и ¹Н ЯМР для обоих

- 36 025863 энантиомеров были такими же, как и для промежуточного соединения 13.

Абсолютная конфигурация промежуточного соединения 15 была подтверждена рентгеноструктурным анализом монокристаллов для кристаллов, полученных растворением соединения в избытке ацетона и медленным выпариванием растворителя при комнатной температуре. Постоянные решетки: а = 19.6161(8) А, Ь = 9.1411(4) А, с = 12.7541(6) А, α = 90°, β = 113.165(2)°, γ = 90°; пространственная группа: С2; молекулы промежуточного соединения 35/асимметричная ячейка (Ζ'): 1; плотность, рассчитано г-см^-3: 1.304. Дробные атомные координаты при комнатной температуре приведены в табл. 1, и изображение структуры приведено на фиг. 1.

Таблица 1

Дробные атомные координаты для промежуточного соединения 15 при комнатной температуре

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
СП	-0.1755	-0.1003	0.3365	С21	0.0166	-0.2724	0.3622
О1	0.2261	0.6937	0.2037	03	-0.0487	0.3988	0.3318
С1	0.2132	0.8050	0.1156	04	0.1356	0.0809	0.3596
С2	0.1347	0.7655	0.0313	Н1	0.1356	0.3551	0.5384
02	0.1028	0.6968	0.1045	Н2	0.2203	0.5422	0.5706
В1	0.1597	0.6467	0.1980	НЗ	0.2313	0.6587	0.4179
СЗ	0.1403	0.4028	0.4772	Н4	0.0388	0.8624	-0.0807
С4	0.1906	0.5142	0.4966	Н5	0.1101	0.9509	-0.0687
С5	0.1012	0.4308	0.2727	Н6	0.0796	0.9586	0.0279
С6	0.1966	0.5843	0.4048	Н7	0.0613	0.2788	0.1461
С7	0.0966	0.3615	0.3668	Н8	0.0655	0.4356	0.0994
С8	0.1517	0.5466	0.2926	Н9	0.0019	0.3967	0.1400
С9	0.0863	0.8966	-0.0281	НЮ	0.1556	0.5689	-0.0231
СЮ	0.0532	0.3809	0.1539	Н11	0.1519	0.6967	-0.1073
С11	0.1298	0.6565	-0.0585	Н12	0.0787	0.6339	-0.1029
С12	0.2226	0.9474	0.1724	Н13	0.1871	0.9571	0.2066
С13	0.2710	0.7829	0.0643	Н14	0.2151	1.0241	0.1175

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
N1	0.0457	0.2404	0.3528	Н15	0.2718	0.9545	0.2304
С14	0.0746	0.1035	0.3564	Н16	0.3176	0.8231	0.1147
N2	0.0270	-0.0148	0.3551	Н17	0.2550	0.8312	-0.0083
С15	-0.0287	0.2712	0.3397	Н18	0.2769	0.6801	0.0543
С16	-0.0453	0.0086	0.3467	Н19	-0.1208	0.1615	0.3296
С17	-0.0720	0.1477	0.3375	Н20	0.1039	-0.1652	0.3637
С18	0.0561	-0.1540	0.3608	Н21	-0.0838	-0.3378	0.3584
С19	-0.0563	-0.2557	0.3562	Н22	0.0370	-0.3652	0.3671
С20	-0.0863	-0.1218	0.3472	-	-	-	-

В качестве альтернативы порцию рацемического 5-хлор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 13] отделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: ^НЕЬК-О® КК (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-СН₃СЫ (55:45) при 200 мл/мин, 100 бар, 35°С; подготовка образца: 96 мг/мл в МеСЫ-ИСМ (1:4); объем вводимой пробы: 5 мл. Первый пик, элюируемый из колонки, соответствовал одному атропоизомеру 5-хлор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 15]. Вещество может быть дополнительно очищено путем растворения в ТНР/гексанах и сбором полученного в результате желтого твердого вещества.

Промежуточное соединение 16. 4-Фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион

- 37 025863

Промежуточное соединение 16А. ^(3-Бром-2-метилфенил)-2-(пиридин-2-ил)ацетамид

Смесь 3-бром-2-метиланилина (2.36 мл, 19.1 ммоль), пиридин-2-ил-уксусной кислоты гидрохлорида (3.32 г, 19.1 ммоль), БОС (5.50 г, 28.7 ммоль), НОВТ (0.146 г, 0.956 ммоль) и ΌΙΕΆ (13.4 мл, 76 ммоль) в

1,2-дихлорэтане (70 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь разбавляли ЭСМ и дважды промывали водой. Объединенные водные слои экстрагировали ЭСМ. Объединенные органические фазы высушивали и концентрировали до меньшего объема, затем разбавляли гексаном. Выпавшие в осадок кристаллы собирали фильтрованием. Фильтрат концентрировали и перекристаллизовывали из ЭСМ-гексана с получением дополнительного твердого вещества. Две порции твердого вещества объединяли с получением ^(3-бром-2-метилфенил)-2-(пиридин-2-ил)ацетамида в виде рыжеватокоричневого твердого вещества (4.78 г, выход 82%). Масс-спектр т/ζ 305, 307 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 16В. ^(3-Бром-2-метилфенил)-2-фтор-2-(пиридин-2-ил)ацетамид

Смесь ^(3-бром-2-метилфенил)-2-(пиридин-2-ил)ацетамида (0.5 г, 1.64 ммоль) и 1-(хлорметил)-4фтор-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-бис-(тетрафторборат) [δΕΕΕΟΓΡΕυΘΚ®] (0.871 г, 2.46 ммоль) в

1,2-дихлорэтане (8.0 мл) нагревали при 90°С на протяжении ночи. Добавляли дополнительный §ЕЬЕСТΡΕυΘΚ® (300 мг) и смесь нагревали на протяжении ночи при 60°С. Добавляли третью порцию §ЕЬЕСТΡΕυΘΚ ® (150 мг) и нагревание продолжали в течение еще 3 ч. Охлажденную смесь разделяли между ЕЮАс и водой. Органическую фазу промывали рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (80 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (35%, затем 50%), с получением ^(3-бром-2-метилфенил)-2-фтор-2-(пиридин-2-ил)ацетамида в виде светлокоричневого твердого вещества (0.177 г, выход 33%).

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 8.84 (Ьг. 5., 1Н), 8.67 (б!, 1=4.8, 0.9 Гц, 1Н), 7.91-7.79 (т, 2Н), 7.60 (б, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.44-7.35 (т, 2Н), 7.08 (!, 6=8.1 Гц, 1Н), 6.08-5.93 (т, 1Н), 2.41 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 16С. 2-Фтор-^(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-

Смесь ^(3-бром-2-метилфенил)-2-фтор-2-(пиридин-2-ил)ацетамида (0.122 г, 0.378 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (0.105 г, 0.415 ммоль) и ацетата калия (0.093 г, 0.944 ммоль) в ЭМ^О (0.6 мл) и диоксане (3.0 мл) барботировали азотом в течение 5 мин с последующим добавлением аддукта РбС1₂(брр£) ЭСМ (0.015 г, 0.019 ммоль). После барботирования азотом в течение еще 5 мин смесь нагревали при 90°С на протяжении ночи. Охлажденную смесь разбавляли Е!ОАс, дважды промывали водой, высушивали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии

- 38 025863 на силикагеле (40 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (30%, затем 50%), с получением 2-фтор-Ы-(2-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-2-(пиридин-2-ил)ацетамида в виде бледноокрашенного масла (0.11 г, выход 79%). Масс-спектр т/ζ 371 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 16.

Смесь 2-фтор-Ы-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-2-(пиридин-2ил)ацетамида (0.155 г, 0.419 ммоль) и СЭ! (0.272 г, 1.675 ммоль) в толуоле (3.0 мл) перемешивали при 110°С в течение 6 ч. Охлажденную смесь разделяли между ЕЮАс и водой и водный слой экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические слои промывали рассолом, высушивали и концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя ЕЮАс-гексанами, с получением 4-фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона в виде желтого твердого вещества (43.1 мг, выход 26%). Масс-спектр т/ζ 397 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 17. 6-(2-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)5Н-тиазоло [3,2-с] пиримидин-5,7 (6Н)-дион

Промежуточное соединение 17А. Ы-(3-Бром-2-метилфенил)-2-(тиазол-2-ил)ацетамид

Смесь 3-бром-2-метиланилина (0.764 мл, 6.20 ммоль), 1,3-тиазол-2-илуксусной кислоты (0.74 г, 5.17 ммоль) и ЭГОА (1.63 мл, 9.30 ммоль) в ΌΜΡ (15 мл) обрабатывали НАТи (2.36 г, 6.20 ммоль). После перемешивания на протяжении ночи смесь разбавляли ЕЮАс, дважды промывали 10% водным НС1 с последующим рассолом и объединенные водные слои экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические слои высушивали и концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя ЕЮАс-гексанами, с получением Ы-(3-бром-2-метилфенил)-2-(тиазол-2-ил)ацетамида в виде белого твердого вещества (0.681 г, выход 42%).

^!Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 9.84-9.65 (т, 1Н), 7.91 (ά, ί=7.9 Гц, 1Н), 7.84 (ά, 1=3.3 Гц, 1Н), 7.42-7.35 (т, 2Н), 7.07 (ί, ί=8.0 Гц, 1Н), 4.18 (5, 2Н), 2.38 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 17В. Ы-(2-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил) фенил) -2 -(тиазо л-2 -ил)ацетамид

Смесь Ы-(3-бром-2-метилфенил)-2-(тиазол-2-ил)ацетамида (0.53 г, 1.70 ммоль) 4,4,4',4',5,5,5',5'октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (0.476 г, 1.87 ммоль) и ацетата калия (0.418 г, 4.26 ммоль) в ΌΜδΘ (1.6 мл) и диоксане (8 мл) барботировали азотом в течение 5 мин с последующим добавлением аддукта Р0С1₂ (άρρί) ИСМ (0.070 г, 0.085 ммоль). После барботирования азотом в течение еще 5 мин смесь нагревали при 90°С в течение 7 ч. Охлажденную смесь разбавляли ЕЮАс и фильтровали через СЕПТЕ®. Фильтрат промывали последовательно водой и рассолом и высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя 50% ЕЮАсгексаны, с получением М-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-2-(тиазол-2ил)ацетамида в виде не совсем белого твердого вещества (0.45 г, выход 74%). Масс-спектр т/ζ 359 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 17.

Смесь М-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-2-(тиазол-2-ил)ацетамида (0.45 г, 1.26 ммоль) и СЭ! (0.815 г, 5.02 ммоль) в толуоле (6.5 мл) нагревали при 110°С в течение 2 ч. Охлажденную смесь разделяли между ЕЮАс и водой. Органический слой промывали рассолом, и объеди- 39 025863 ненные водные слои экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические слои высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя 70% ЕЮАс-гексаны, с получением 6-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-5Нтиазоло[3,2-с]пиримидин-5,7(6Н)-диона в виде рыжевато-коричневого твердого вещества (выход 34%). Масс-спектр т/ζ 385 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 18. 5-Фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)-1Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион (рацемический)

Промежуточное соединение 18А. Диэтил 2-(3-фторпиридин-2-ил)малонат

Смесь 2,3-дифторпиридина (2.00 г, 17.4 ммоль), С§₂СО₃ (13.59 г, 41.7 ммоль) и диэтилмалоната (6.68 г, 41.7 ммоль) в ИМ§О (19 мл) нагревали при 100°С в течение 4.5 ч. Смесь выливали на лед, разбавляли ЕЮАс и органическую фазу отделяли, промывали последовательно водой и рассолом, и высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (80 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (последовательно 10%, 20% и 30%), с получением диэтил 2-(3фторпиридин-2-ил)малоната в виде бледно-окрашенного масла (2.68 г, выход 60%).

¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 8.42 (άΐ, 1=4.6, 1.3 Гц, 1Н), 7.43 (άάφ 1=9.4, 8.3, 1.4 Гц, 1Н), 7.30 (άΐ, 1=8.5, 4.3 Гц, 1Н), 5.09 (ά, 1=1.1 Гц, 1Н), 4.30 (ц, 1=7.0 Гц, 4Н), 1.33-1.26 (т, 6Н).

Промежуточное соединение 18В. Этил 2-(3-фторпиридин-2-ил)ацетат

Смесь диэтил 2-(3-фторпиридин-2-ил)малоната (2.68 г, 10.5 ммоль), хлорида натрия (0.675 г, 11.6 ммоль) и воды (0.378 мл, 21.0 ммоль) в ИМ§О (15 мл) нагревали при 145°С в течение 4.5 ч. Смесь охлаждали, разбавляли ЕЮАс и промывали последовательно водой и рассолом. Органическую фазу высушивали и концентрировали с получением этил 2-(3-фторпиридин-2-ил)ацетата в виде бледно-окрашенного масла (1.9 г, выход 99%). Масс-спектр т/ζ 184 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 18С. Натрий 2-(3-фторпиридин-2-ил)ацетат

р (1-18С)

Перемешанный раствор этил 2-(3-фторпиридин-2-ил)ацетата (1.90 г, 10.4 ммоль) в ТНР (26 мл) обрабатывали 3М водного ЫаОН (6.9 мл, 20.7 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь концентрировали для удаления ТНР и оставшийся водный раствор замораживали и лиофилизировали с получением натрий 2-(3-фторпиридин-2-ил)ацетата в виде белого твердого вещества, используемого без дополнительной очистки. Масс-спектр т/ζ 156 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 18Ό. Ы-(3-Бром-2-метилфенил)-2-(3-фторпиридин-2-ил)ацетамид

Смесь натрий 2-(3-фторпиридин-2-ил)ацетата (1.85 г, 10.4 ммоль), 3-бром-2-метиланилина (1.4 мл, 11.4 ммоль), ОША (5.4 мл, 31.1 ммоль) и НАТИ (4.73 г, 12.4 ммоль) в ЭМЕ (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1.25 ч. Смесь разбавляли ЕЮАс и дважды промывали 10% водным

- 40 025863

ЫС1, затем рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали Е1ОАс и объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток растворяли в горячем ЕЮАс, оставляли охлаждаться и полученное в результате белое твердое вещество собирали фильтрованием и промывали 60% ЕЮАсгексаны. Объединенные фильтраты концентрировали и остаток перекристаллизовывали дважды используя ту же самую методику. Остаток от концентрирования конечного фильтрата очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя ЕЮАс-гексанами, с получением твердого вещества, которое объединяли с перекристаллизованными порциями с получением ^(3-бром-2-метилфенил)-2-(3фторпиридин-2-ил)ацетамида в виде белого твердого вещества (2.029 г, выход 61%). Масс-спектр т/ζ 323, 325 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 18Е. 2-(3-Фторпиридин-2-ил)-^(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-

Смесь ^(3-бром-2-метилфенил)-2-(3-фторпиридин-2-ил)ацетамида (4.2 г, 13.6 ммоль) и 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (3.80 г, 14.9 ммоль) в диоксане (40 мл) барботировали азотом в течение 10 мин. К смеси добавляли ацетат калия (3.33 г, 34.0 ммоль), барботирование продолжали в течение еще 5 мин и добавляли аддукт Р6С1₂ (6ρρί) ЭСМ (0.555 г, 0.679 ммоль). Смесь нагревали при 100°С на протяжении ночи. Охлажденную смесь разбавляли ЕЮАс. промывали последовательно водой и рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя ЭСМ-метил трет-бутиловым эфиром, с получением 2-(3фторпиридин-2-ил)-^(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)ацетамида в виде белого твердого вещества (3.80 г, выход 76%). Масс-спектр т/ζ 370 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 18.

Смесь 2-(3-фторпиридин-2-ил)-^(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил) ацетамида (9.01 г, 24.3 ммоль) и С’Э! (15.78 г, 97 ммоль) в толуоле (97 мл) нагревали при 120°С в течение 7 ч. Охлажденную смесь разбавляли ЕЮАс и промывали последовательно водой и рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали ЕЮАс и объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (220 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 20-100%), с получением 5-фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона в виде желтого твердого вещества (6.26 г, выход 65%). Масс-спектр т/ζ 397 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ 8.11 (66, 1=7.6, 0.8 Гц, 1Н), 7.94 (66, 1=7.5, 1.3 Гц, 1Н), 7.35 (1, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.23 (66, 1=7.8, 1.4 Гц, 1Н), 6.85-6.76 (т, 1Н), 6.35 (16, 1=7.4, 5.0 Гц, 1Н), 6.09 (5, 1Н), 2.36 (5, 3Н), 1.36 (5, 12Н).

Промежуточные соединения 19 и 20. 5-Фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан2-ил)фенил)-1Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин- 1,3(2Н)-дион (отдельные энантиомеры)

Рацемический 5-фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Нпиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион [промежуточное соединение 18] (7.50 г) отделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: СНГРАЕСЕЬ® ОЭ-Н (5x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (76:24) при 280 мл/мин, 100 бар, 40°С; подготовка образца: 62.5 мг/мл в ЭСМ-МеОН (1:1); объем вводимой пробы: 0.83 мл.

Первый пик, элюируемый из колонки, соответствовал одному энантиомеру 5-фтор-2-(2-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диону [промежуточное соединение 19] в виде желтого твердого вещества (3.20 г, хиральная чистота 99.3%).

Второй пик, элюируемый из колонки, соответствовал другому энантиомеру 5-фтор-2-(2-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диону [промежуточное соединение 20] в виде желтого твердого вещества (2.98 г, хиральная чистота 98.6%).

- 41 025863

Масс-спектр и 'Н ЯМР для обоих энантиомеров были такими же, как и для промежуточного соединения 18.

Промежуточное соединение 21. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-1-(4-фторфенил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)дион

Промежуточное соединение 21А. Метил 3-(4-метоксибензиламино)-2-(фенилселанил)пропаноат

Суспензию фенилгипобромселеноита (5.54 г, 23.5 ммоль) и хлорида цинка(11) (1.27 г, 9.29 ммоль) в ЭСМ (116 мл) обрабатывали метилакрилатом (2.1 мл, 23.2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем обрабатывали (4-метоксифенил)метанамином (6.4 мл, 48.8 ммоль) с образованием густой суспензии. После перемешивания в течение 16 ч осадок удаляли фильтрованием, промывали ЕЮАс и объединенные фильтраты концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (120 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-50%), с получением метил 3-(4-метоксибензиламино)-2-(фенилселанил)пропаноата в виде светло-коричневого масла (3.68 г, выход 42%). Масс-спектр т/ζ 380 (М+Н)+.

^!Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ 7.53-7.49 (т, 2Н), 7.39-7.28 (т, 3Н), 7.18 (ά, 1=8.6 Гц, 2Н), 6.88-6.82 (т, 2Н), 3.89 (άά, 1=8.8, 5.9 Гц, 1Н), 3.73 (5, 3Н), 3.61 (5, 2Н), 3.55 (5, 3Н), 2.93-2.78 (т, 2Н).

Промежуточное соединение 21В. 1-Бром-3-изоцианато-2-метилбензол

Раствор трифосгена (2.25 г, 7.58 ммоль) в толуоле (27 мл), охлажденный на бане лед-вода, медленно обрабатывали раствором 3-бром-2-метиланилина (3.00 г, 16.1 ммоль) и Э1ЕА (5.6 мл, 32.2 ммоль) в толуоле (5.4 мл). Полученную в результате суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Осадок удаляли фильтрованием и промывали ЕЮАс. Объединенные фильтраты разбавляли ЕЮАс, промывали рассолом, высушивали и концентрировали с получением 1-бром-3-изоцианато-2метилбензола в виде коричневого масла (3.68 г, 98%).

^!Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ 7.49 (άά, 1=8.1, 0.9 Гц, 1Н), 7.31 (άά, 1=7.9, 0.7 Гц, 1Н), 7.15 (ΐά, 1=8.0, 0.7 Гц, 1Н), 2.38 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 21С. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-1-(4-метоксибензил)-5-(фенилселанил) дигидропиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион

Смесь метил 3-((4-метоксибензил)амино)-2-(фенилселанил)пропаноата (3.68 г, 9.73 ммоль), 1-бром3-изоцианато-2-метилбензола (2.27 г, 10.7 ммоль) и К₂СО₃ (0.672 г, 4.86 ммоль) в ΌΜΡ (49 мл) нагревали при 65°С в течение 5 ч. Охлажденную смесь разделяли между водой и ЕЮАс. Органическую фазу промывали рассолом, высушивали и концентрировали с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-1-(4метоксибензил)-5-(фенилселанил)дигидропиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде светло-коричневого твердого вещества (5.43 г). Масс-спектр т/ζ 557, 559, 561 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 21Ό. 3-(3-Бром-2-метилфенил)-1-(4-метоксибензил)пиримидин2,4(1Н,3Н)-дион

- 42 025863

Раствор 3 -(3 -бром-2-метилфенил)-1 -(4-метоксибензил)-5-(фенилселанил)дигидропиримидин2,4(1Н,3Н)-диона (5.43 г, 9.73 ммоль) в ТНР (97 мл) обрабатывали 30% водным пероксидом водорода (5.0 мл, 48.6 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли воду и смесь экстрагировали ЕЮАс. Органическую фазу промывали рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (220 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 25-70%), с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-1-(4-метоксибензил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде белого твердого вещества (2.10 г, выход 54%). Масс-спектр т/ζ 401, 403 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ 7.95 (ά, 1=7.9 Гц, 1Н), 7.70-7.65 (т, 1Н), 7.32-7.28 (т, 2Н), 7.25-7.22 (т, 2Н), 6.96-6.91 (т, 2Н), 5.86 (ά, 1=7.9 Гц, 1Н), 4.89 (ά, 1=2.4 Гц, 2Н), 3.74 (5, 3Н), 2.02 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 21Е. 3-(3-Бром-2-метилфенил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион

Раствор 3-(3-бром-2-метилфенил)-1-(4-метоксибензил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона (0.87 г, 2.17 ммоль) в ТРА (5.5 мл) обрабатывали трифторметансульфоновой кислотой (0.55 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь медленно выливали на лед и перемешивали, одновременно нагревая до комнатной температуры. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде пурпурного твердого вещества (0.62 г, выход 96%). Масс-спектр т/ζ 281, 283 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ 11.36 (ά, 1=4.4 Гц, 1Н), 7.67 (άά, 1=6.5, 2.8 Гц, 1Н), 7.60 (άά, 1=7.7, 5.9 Гц, 1Н), 7.27-7.21 (т, 2Н), 5.72 (άά, 1=7.7, 1.3 Гц, 1Н), 2.07 (5, 3Н).

Промежуточное соединение 21.

Перемешанную суспензию ацетата меди(П) (0.543 г, 2.99 ммоль), 3-(3-бром-2метилфенил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона (0.42 г, 1.49 ммоль), (4-фторфенил)бороновой кислоты (0.418 г, 2.99 ммоль) и активированных молекулярных сит (750 мг) в сухом ЭСМ (25 мл) обрабатывали пиридином (0.363 мл, 4.48 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь разбавляли ЭСМ, фильтровали через СЕПТЕ® и твердые вещества промывали ЭСМ и ТНР. Объединенные фильтраты промывали водой, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 20-40%), с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-1-(4-фторфенил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде желтого стеклообразного твердого вещества (0.36 г, выход 43%). Масс-спектр т/ζ 375, 377 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ 7.91 (ά, 1=7.9 Гц, 1Н), 7.68 (άά, 1=7.9, 1.3 Гц, 1Н), 7.60-7.51 (т, 2Н), 7.40-7.22 (т, 4Н), 5.95 (ά, 1=7.9 Гц, 1Н), 2.21-2.12 (т, 3Н).

Промежуточное соединение 22. 4-Бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1карбоксамид

Промежуточное соединение 22А. Этил 3-гидрокси-5-метилбензоат

Раствор 3-гидрокси-5-метилбензойной кислоты (получена в соответствии с методикой Тигпег с1 а1., I. Огд. СЬет., 24:1952 (1959); 2.50 г, 16.4 ммоль) в ЕЮН (100 мл) обрабатывали серной кислотой (5 мл, 94 ммоль) и нагревали до кипения с обратным холодильником на масляной бане. Через 18 ч раствор охлаждали до комнатной температуры. Раствор концентрировали до меньшего объема (20-30 мл) и разбавляли водой (100-150 мл). Оседало смолистое вещество, которое затвердевало при перемешивании и рас- 43 025863 тирании. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали под вакуумом с получением этил 3-гидрокси-5-метилбензоата в виде не совсем белого твердого вещества (2.63 г, выход 89%). Массспектр т/ζ 181 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 7.46 (ά, 1=0.7 Гц, 1Н), 7.40 (5, 1Н), 6.90 (5, 1Н), 4.39 (ц, 1=7.0 Гц, 2Н), 2.37 (5, 3Н), 1.41 (1, 1=7.2 Гц, 3Н).

Промежуточное соединение 22В. Этил 3-гидрокси-5-метилциклогексанкарбоксилат

Раствор этил 3-гидрокси-5-метилбензоата (2.63 г, 14.6 ммоль) в Е1ОН (50 мл) объединяли с 5% родия на оксиде алюминия (0.5 г) в сосуде Парра для реакций под давлением и встряхивали в атмосфере водорода (60 ρ5ΐ (фунт на квадратный дюйм)) при комнатной температуре. Через 21.5 ч из сосуда удаляли газ и продували азотом. Смесь фильтровали через СЕЫТЕ® и твердые вещества промывали Е1ОН. Объединенные фильтраты концентрировали под вакуумом с получением этил 3-гидрокси-5метилциклогексанкарбоксилата в виде бесцветной маслянистой жидкости (2.64 г, выход 97%). Массспектр т/ζ 187 (М+Н)+, 169 (М+Н-Н₂О)+.

Промежуточное соединение 22С. Этил 3-метил-5-оксоциклогексанкарбоксилат

Раствор этил 3-гидрокси-5-метилциклогексанкарбоксилата (2.64 г, 14.2 ммоль) в ацетоне (45 мл) перемешивали на бане лед-вода и обрабатывали по каплям реактивом Джонса (4.25 мл, 14.9 ммоль), пока желтый цвет сохранялся в течение более чем 30 мин. Смесь затем обрабатывали изопропанолом (приблизительно 2 мл) и перемешивали на льду, пока желтый цвет не исчезал, и смесь не превращалась в зелено-голубую кашицу. Жидкость над осадком сливали через СЕЫТЕ®. Осадок перемешивали и несколько раз растирали его со свежим ацетоном до тех пор, пока он не превратился в большей степени в порошкообразное твердое вещество, промывной ацетон также фильтровали через СЕЫТЕ®. Объединенные фильтраты и промывные жидкости концентрировали. Остаток растворяли в простом эфире, промывали насыщенным рассолом, высушивали и концентрировали с получением этил 3-метил-5оксоциклогексанкарбоксилата в виде почти бесцветной маслянистой жидкости (2.275 г, выход 87%; смесь диастереомеров, соотношение около 95:5).

'Н ЯМР (главный изомер) (400 МГц, хлороформ-ά) δ 4.18 (ц, 1=7.3 Гц, 2Н), 2.72 (11, 1=12.7, 4.0 Гц, 1Н), 2.62-2.53 (т, 1Н), 2.50 (άά, 1=13.1, 1.0 Гц, 1Н), 2.45-2.36 (т, 1Н), 2.16 (ά11, 1=13.3, 3.5, 1.8 Гц, 1Н), 2.07-1.97 (т, 1Н), 1.97-1.82 (т, 1Н), 1.57-1.42 (т, 1Н), 1.29 (1, 1=7.2 Гц, 3Н), 1.09 (ά, 1=6.4 Гц, 3Н).

Промежуточное соединение 22Ό. 5-Бром-2-этоксикарбонил-4-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Нкарбазол-8-карбоновая кислота

Суспензию 4-бром-2-гидразинилбензойной кислоты гидрохлорида [получен в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 46-1] (605 мг, 2.26 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл) обрабатывали этил 3-метил-5-оксоциклогексанкарбоксилатом (500 мг, 2.71 ммоль), и смесь нагревали при 100-105°С. Через 6 ч температуру снижали до 95°С и продолжали перемешивание на протяжении ночи. Через 22 ч общего времени смесь охлаждали до комнатной температуры и большую часть растворителя удаляли под вакуумом. Остаток перемешивали в Е1ОАс и смесь фильтровали для удаления небольшого количества осадка. Фильтрат промывали водой, высушивали над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом с получением сырой 5-бром-2-(этоксикарбонил)-4метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-карбазол-8-карбоновой кислоты (смесь диастереомеров) в виде темнокоричневого смолистого вещества (860 мг). Масс-спектр т/ζ 380, 382 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 22Е. Этил 5-бром-8-карбамоил-4-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Нкарбазол-2-карбоксилат

- 44 025863

Раствор сырой 5-бром-2-(этоксикарбонил)-4-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-карбазол-8-карбоновой кислоты (860 мг) в ТНР (15 мл) обрабатывали 1-гидрокси-7-азабензотриазолом (369 мг, 2.71 ммоль) и ЕЭС (520 мг, 2.71 ммоль) и суспензию перемешивали при комнатной температуре. Через 2 ч смесь барботировали безводным аммиаком в течение около 2 мин с образованием густой оранжевой кашицы. Еще через 2.5 ч смесь разбавляли водой и ЕЮАс и слои разделяли. Водную фазу снова экстрагировали ЕЮАс и объединенные органические слои последовательно промывали 1М водным ЫаОН и рассолом и высушивали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (80 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 25-100%), с получением неочищенного этил 5-бром-8-карбамоил-4метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-карбазол-2-карбоксилата (смесь диастереомеров) в виде желто-рыжеватого твердого вещества (265 мг, выход 31%). Масс-спектр т/ζ 379, 381 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 22Р. Этил 5-бром-8-карбамоил-4-метил-9Н-карбазол-2-карбоксилат

Раствор неочищенного этил 5-бром-8-карбамоил-4-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-карбазол-2карбоксилата (250 мг, 0.659 ммоль) в ТНР (7 мл) обрабатывали 2,3-дихлор-5,6-дицианобензохиноном (329 мг, 1.45 ммоль) и нагревали на масляной бане при 60°С. Через 2.4 ч смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЕЮАс. Смесь фильтровали и осадок прополаскивали ЕЮАс и высушивали под вакуумом с получением очень мелкого белого твердого вещества (71.6 мг). Фильтрат четыре раза промывали насыщенным водным ЫаНСО₃, затем рассолом. Органическую фазу высушивали и концентрировали и остаток обрабатывали ультразвуком в смеси ЕЮАс и МеОН. Осадок собирали фильтрованием, промывали ЕЮАс и высушивали с получением бледно-желтого твердого вещества (50.5 мг). Этот фильтрат подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (12 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 25-100%), с получением твердого вещества, которое обрабатывали ультразвуком в минимальном количестве ЕЮАс. Осадок собирали фильтрованием, прополаскивали минимальным количеством ЕЮАс и высушивали с получением бледно-желтого твердого вещества (5.2 мг). Три порции выделенного твердого вещества объединяли с получением этил 5-бром-8-карбамоил-4-метил-9Н-карбазол-2-карбоксилата в виде бледно-желтого твердого вещества (127 мг, выход 51%). Масс-спектр т/ζ 375, 377 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ОМ§ОЦ₆) δ 12.17 (к, 1Н), 8.42 (ά, 1=1.1 Гц, 1Н), 8.25 (Ьг. к., 1Н), 7.88 (ά, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.62 (Ьг. к., 1Н), 7.59 (ά, 1=0.7 Гц, 1Н), 7.56 (ά, 1=8.1 Гц, 1Н), 4.36 (д, 1=7.0 Гц, 2Н), 3.20 (к, 3Н), 1.38 (1, 1=7.0 Гц, 3Н).

Промежуточное соединение 22. Этил 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1карбоксамид..

Суспензию этил 5-бром-8-карбамоил-4-метил-9Н-карбазол-2-карбоксилата (120 мг, 0.320 ммоль) в ТНР (2.5 мл) перемешивали при -78°С и обрабатывали по каплям 1.6М метиллития в простом эфире (0.800 мл, 1.28 ммоль) на протяжении около 2.5 мин. В течение не более 0.5 ч смесь превратилась в твердую желтую массу. Через 45 мин после завершения добавления добавляли ТНР (1 мл) и смесь нагревали достаточно (еще ниже 0°С) для достижения частичного смешения, затем снова охлаждали до -78°С. Через 90 мин после завершения добавления смесь обрабатывали насыщенным водным МН₄С1 (2 мл) и небольшим количеством воды и оставляли нагреваться до комнатной температуры с энергичным перемешиванием. Смесь дважды экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические фазы промывали насыщенным рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (12 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 40-100%), с получением 4-бром-7-(2гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида в виде не совсем белого твердого вещества (96.3 мг, выход 83%). Масс-спектр т/ζ 343, 345 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ5О^₆) δ 11.73 (к, 1Н), 8.19 (Ьг. к., 1Н), 7.82-7.73 (т, 2Н), 7.54 (Ьг. к., 1Н), 7.45 (ά, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.14 (ά, 1=0.9 Гц, 1Н), 5.03 (к, 1Н), 3.14 (к, 3Н), 1.50 (к, 6Н).

Промежуточное соединение 23. 4-Бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-8-метил-9Н-карбазол-1карбоксамид

- 45 025863

Следуя методике, применяемой для получения промежуточного соединения 22, 3-гидрокси-2метилбензойную кислоту преобразовывали в 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-8-метил-9Н-карбазол-1карбоксамид. Масс-спектр т/ζ 343, 345 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-йЭ δ 10.86 (к, 1Н), 8.38-8.26 (т, 2Н), 7.89 (й, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.67 (Ьг. к., 1Н), 7.44 (й, 1=8.1 Гц, 2Н), 5.09 (к, 1Н), 2.81 (к, 3Н), 1.63 (к, 6Н).

Промежуточные соединения 24 и 24А. 8-Фтор-1-метил(й₃)-3-(§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион (Ι-24) и 8-фтор-1-метил(й₃)-3-(К)-(2-метил3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион ^-24А)

Промежуточное соединение 24В. 8-Фтор-1-метил(й₃)-3-(К§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Смесь 3 -(3 -бром-2-метилфенил)-8-фтор-1 -метил(й₃)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 5] (3.00 г, 8.19 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (2.70 г, 10.7 ммоль) и ацетата калия (2.41 г, 24.6 ммоль) в диоксане (40 мл) барботировали аргоном с обработкой ультразвуком в течение приблизительно 2 мин, затем обрабатывали аддуктом РйС1₂ (йррГ) ЭСМ (0.335 г, 0.410 ммоль). Смесь нагревали при 90°С в течение 15.75 ч. Охлажденную смесь разбавляли ЕЮАс, фильтровали через СЕЫТЕ® и твердые вещества прополаскивали ЕЮАс. Объединенные фильтраты концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (330 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0-40%), с получением 8-фтор-1-метил(й₃)-3-(К§)-(2-метил-3-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде не совсем белого твердого вещества (3.23 г, выход 95%). Масс-спектр т/ζ 414 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ 8.14-8.07 (т, 1Н), 7.93 (йй, 1=7.4, 1.4 Гц, 1Н), 7.48 (ййй, 1=13.9, 8.1, 1.5 Гц, 1Н), 7.37-7.31 (т, 1Н), 7.27-7.19 (т, 2Н), 2.36 (к, 3Н), 1.36 (к, 12Н).

Промежуточные соединения 24 и 24А.

Порцию 8-фтор-1-метил(й₃)-3-(К§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил) хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 24В] отделяли с помощью сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: АНЕЬК-О® К,К (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (70:30) при 200 мл/мин, 100 бар, 30°С; подготовка образца: 3.7 мг/мл в МеОН; объем вводимой пробы: 4.17 мл. Первый пик, элюируемый из колонки, соответствует §-энантиомеру, 8фтор-1-метил(й₃)-3 -(§)-(2-метил-3 -(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин2,4(1Н,3Н)-диону [промежуточное соединение 24] в виде белого твердого вещества. Второй пик, элюируемый из колонки, соответствует К-энантиомеру, 8-фтор-1-метил(й₃)-3-(К)-(2-метил-3-(4,4,5,5тетраметил- 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диону [промежуточное соединение 24А] в виде белого твердого вещества. Масс-спектр и 'Н ЯМР для обоих энантиомеров были такими же, как и для промежуточного соединения 24В.

Альтернативный синтез 8-фтор-1-метил(й₃)-3-(§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 24]: промежуточное со- 46 025863 единение 24С: 8-фтор-3-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин2,4(1Н,3Н)-дион

Перемешанную смесь 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 1] (0.349 г, 1.00 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (0.305 г, 1.20 ммоль), аддукта РбС1₂ (άρρί) ЭСМ (0.041 г, 0.050 ммоль) и ацетата калия (0.245 г, 2.50 ммоль) в диоксане (20 мл) и ЭМ8О (4 мл) барботировали азотом в течение 5 мин, затем нагревали при 90°С на протяжении ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между ЕЮАс и водой. Органическую фазу последовательно промывали насыщенным водным ИаНСО₃ и рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя 20% ЕЮАс-гексаном, с получением 8-фтор-3-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона в виде белого твердого вещества (0.326 г, выход 82%). Массспектр т/ζ 397 (М+Н)+.

Ή ЯМР (500 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ 11.78 (к, 1Н), 7.80 (ά, 1=7.2 Гц, 1Н), 7.72 (άά, 1=7.4, 1.5 Гц, 1Н), 7.717.56 (т, 1Н), 7.45-7.35 (т, 1Н), 7.35-7.29 (т, 1Н), 7.29-7.16 (т, 1Н), 2.22 (к, 3Н), 1.33 (к, 12Н).

Промежуточное соединение 24Ό. 8-Фтор-3-(8)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-дион

Порцию 8-фтор-3-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 24С] отделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: СШКАЬСЕЬ® ΟΌ-Н (5x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (70:30) при 300 мл/мин, 100 бар, 40°С; подготовка образца: 103 мг/мл в ЭСМ-МсОН (44:56); объем вводимой пробы: 5.0 мл. Второй пик, элюируемый из колонки, соответствовал 8-энантиомеру, 8-фтор-3-(8)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диону, в виде белого твердого вещества. Масс-спектр т/ζ 397 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 8.19 (к, 1Н), 7.99 (ά, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.95 (άά, 1=7.3, 1.3 Гц, 1Н), 7.46 (άάά, 1=9.8, 8.3, 1.2 Гц, 1Н), 7.39-7.32 (т, 1Н), 7.28-7.18 (т, 2Н), 2.39 (к, 3Н), 1.36 (к, 12Н).

Промежуточное соединение 24.

Раствор 8-фтор-3-(8)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 24Ό] (5.42 г, 13.7 ммоль) в ТНР (100 мл) перемешивали на бане лед-вода и обрабатывали Ск₂СО₃ (6.24 г, 19.2 ммоль), затем иодометаномШ₃ (1.02 мл, 16.4 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16.25 ч. Смесь фильтровали, твердое вещество прополаскивали ЕЮАс и объединенные фильтраты концентрировали. Остаток растворяли в ЕЮАс и промывали последовательно водой и рассолом, высушивали и концентрировали с получением 8-фтор-1метил^₃)-3-(8)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)диона в виде белого твердого вещества (5.538 г, выход 98%). Масс-спектр т/ζ 414 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 8.11 (άφ 1=7.8, 0.8 Гц, 1Н), 7.93 (άά, 1=7.5, 1.3 Гц, 1Н), 7.48 (άάά, 1=13.9, 8.1, 1.5 Гц, 1Н), 7.38-7.30 (т, 1Н), 7.27-7.20 (т, 2Н), 2.36 (к, 3Н), 1.36 (к, 12Н).

Промежуточное соединение 25. 4-Бром-7-(метоксиметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид

Перемешанную суспензию 4-бром-7-(гидроксиметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [получен в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, пример 30-02] (0.5 г, 1.57 ммоль) в ТНР

- 47 025863 (10 мл) обрабатывали по каплям тионилхлоридом (0.252 мл, 3.45 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь обрабатывали МеОН (0.2 мл) и растворитель и избыток тионилхлорида удаляли под вакуумом. Остаток растворяли в МеОН (10 мл) и добавляли метоксид натрия (0.423 г, 7.83 ммоль). Смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь разбавляли ЕЮАс и промывали последовательно водой и рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали ЕЮАс и объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (градиент 0100%), с получением 4-бром-7-(метоксиметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида в виде белого твердого вещества (119 мг, выход 23%). Масс-спектр т/ζ 333, 335 (М+Н)+.

Примеры 1 и 2. 4-(3-(8-Фтор-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смеси двух взаимопревращающихся диастереомеров)

Получение 1А. 4-(3-(8-Фтор-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров).

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида (43.4 мг, 0.110 ммоль) [промежуточное соединение 4], 3-(3-бром-2-метилфенил)-8фторхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона (32 мг, 0.092 ммоль) [промежуточное соединение 1], тетракис(трифенилфосфин)палладия (5.3 мг, 4.58 мкмоль) и карбоната калия (38.0 мг, 0.275 ммоль) в ТНР (3 мл) герметично закрывали в виале и нагревали при 90°С на протяжении ночи. Охлажденную смесь очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя ПСМ-МеОН-ИН₄ОН (градиент от 90:9:1 до 97:2.7:0.3), с получением 4-(3-(8-фтор-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде белого твердого вещества (6 мг, выход 13%). Масс-спектр т/ζ 519(М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (500 МГц, хлороформ-й/МеОН-й₄) δ 7.70 (й, 1=1.5 Гц, 1Н), 7.62-7.58 (т, 1Н), 7.55-7.47 (т, 2Н), 7.46-7.42 (т, 1Н), 7.38 (й, 1=7.9 Гц, 1Н), 7.28-7.19 (т, 3Н), 7.14 (йй, 1=8.4, 1.5 Гц, 1Н), 7.10 (йй, 1=10.9, 7.9 Гц, 1Н), 1.89 (5, 3Н), 1.61 (йй, 1=10.2, 3.2 Гц, 6Н).

Ή ЯМР (400 МГц, ИМЗО-йД δ 11.85 (5, 0.5Н), 11.79 (5, 0.5Н), 11.39 (5, 1Н), 8.16 (Ьг. 5., 1Н), 7.99 (й, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.90-7.79 (т, 2Н), 7.69-7.61 (т, 1Н), 7.53-7.42 (т, 3Н), 7.35 (й1, 1=6.0, 3.3 Гц, 1Н), 7.28-7.20 (т, 1Н), 7.11-7.06 (т, 1Н), 7.03 (ΐ, 1=7.5 Гц, 2Н), 4.98 (5, 0.5Н), 4.96 (5, 0.5Н), 1.76 (5, 3Н), 1.48-1.42 (т, 6Н).

¹⁹Р ЯМР (376 МГц, :ЭМ8О-й₆) δ -129.97 (5, 1Р), -130.02 (5, 1Р).

Примеры 1 и 2.

Порцию 4-(3-(8-фтор-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) (1.2 г) разделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: СНГКАЬСЕЬ® ОЭ-Н (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-(1:1 МеОН-ацетонитрил) (45:55) при 145 мл/мин, 100 бар, 40°С; подготовка образца: 50 мг/мл в ИМЗО-МеОН (1:1); объем вводимой пробы: 3.5 мл.

Первый пик, элюируемый из колонки, соответствовал одной паре взаимопревращающихся диастереомеров 4-(3-(8-фтор-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [пример 1] в виде белого твердого вещества (603 мг).

Второй пик, элюируемый из колонки, соответствует другой паре взаимопревращающихся диастереомеров 4-(3-(8-фтор-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [пример 2] в виде белого твердого вещества (584 мг).

Масс-спектры и спектры ЯМР для обоих были такими же, как и спектры для смеси четырех диастереомеров, показанных выше. Абсолютную стереохимию примеров 1 и 2 не определяли.

Пример 3. 4-(3-(8)-(8-Фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров)

- 48 025863

Получение 3А. 4-(3-(8-Фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] (827 мг, 2.38 ммоль), 8-фтор-1-метил-3-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 2] (850 мг, 2.07 ммоль), 2М водного трикалий фосфата (3.11 мл, 6.22 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия (120 мг, 0.104 ммоль) в смеси толуола (27 мл) и ЕЮН (9 мл) нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в атмосфере азота на протяжении ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, промывали водой, высушивали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (330 г), элюируя ПСМ-МеОН-№Н₄ОН (градиент от 90:9:1 до 97:2.7:0.3), с получением 4-(3-(8-фтор-1-метил-2,4диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1 карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде белого твердого вещества (860 мг, выход 74%). Масс-спектр т/ζ 533 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 10.56 (к, 1Н), 8.15 (бб, 1=9.8, 8.7 Гц, 1Н), 7.71-7.64 (т, 2Н), 7.547.42 (т, 3Н), 7.36 (бб, 1=7.7, 1.3 Гц, 1Н), 7.28-7.24 (т, 3Н), 7.18-7.11 (т, 1Н), 6.02 (Ьг. к., 2Н), 3.91 (бб, 1=7.9, 2.9 Гц, 3Н), 1.90 (к, 3Н), 1.85 (б, 1=4.0 Гц, 1Н), 1.67 (б, 1=1.3 Гц, 6Н).

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-б₆) δ 11.40 (к, 1Н), 8.17 (Ьг. к., 1Н), 8.04-7.93 (т, 2Н), 7.84 (б, 1=1.1 Гц, 1Н), 7.74 (ббб, 1=14.4, 8.0, 1.3 Гц, 1Н), 7.54-7.42 (т, 3Н), 7.38-7.30 (т, 2Н), 7.12-7.05 (т, 1Н), 7.04-6.99 (т, 2Н), 4.99 (б, 1=1.3 Гц, 1Н), 3.75 (ί, 1=8.4 Гц, 3Н), 1.76 (к, 3Н), 1.50-1.45 (т, 6Н).

Альтернативное получение 3А.

Смесь 4-(3-(8-фтор-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) [получение 1А] (20 мг, 0.037 ммоль), иодометана (0.15 мл 35 мг/мл раствора в ЭМЕ; 5.29 мг, 0.037 ммоль) и Ск₂СО₃ (12.1 мг, 0.037 ммоль) в ЭМР (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Смесь разбавляли ЕЮАс, органические вещества последовательно промывали водой и 10% водным ЫС1 и высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (12 г), элюируя ОСМ:МеОН:ХН₄ОН (градиент от 90:9:1 до 97:2.7:0.3), с получением 4-(3-(8-фтор-1-метил-2,4диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1 карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде белого твердого вещества (19 мг, выход 93%). Масс-спектр т/ζ 533 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 10.56 (к, 1Н), 8.14 (бб, 1=9.6, 8.5 Гц, 1Н), 8.04 (к, 1Н), 7.70-7.63 (т, 2Н), 7.54-7.41 (т, 3Н), 7.35 (бб, 1=7.8, 1.2 Гц, 1Н), 7.28-7.22 (т, 3Н), 7.14 (бб, 1=7.8, 1.7 Гц, 1Н), 3.90 (бб, 1=7.9, 2.9 Гц, 3Н), 1.90 (к, 3Н), 1.66 (б, 1=1.3 Гц, 6Н).

Пример 3.

Порцию 4-(3 -(8-фтор-1 -метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) (532 мг, 0.966 ммоль) отделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: Ьих Се1-4 (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (60:40) при 85 мл/мин; подготовка образца: 6.7 мг/мл в МеОН-ацетон (9:1); объем вводимой пробы: 3 мл.

Пики 3 и 4, элюируемые из колонки, собирали вместе и концентрировали с получением 4-(3-(8)-(8фтор-1 -метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)-2-метилфенил)-7 -(2-гидроксипропан-2-ил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров) в виде светложелтого твердого вещества (230 мг). Масс-спектр т/ζ 533 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-б₆) δ 11.40 (к, 1Н), 8.16 (Ьг. к., 1Н), 8.04-7.93 (т, 2Н), 7.84 (к, 1Н), 7.78- 49 025863

7.69 (т, 1Н), 7.55-7.43 (т, 3Н), 7.39-7.30 (т, 2Н), 7.13-6.98 (т, 3Н), 4.99 (ά, 1=1.1 Гц, 1Н), 3.75 (ΐ, 1=8.4 Гц, 3Н), 1.75 (5, 3Н), 1.47 (ά, 1=4.4 Гц, 6Н).

Альтернативный синтез примера 3.

Суспензию 8-фтор-1-метил-3-(§)(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил) хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 3] (13.00 г, 31.7 ммоль), 4-бром-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2, и перекристаллизовывали из МеОН] (10.00 г, 28.8 ммоль), С5₂СО₃ (18.77 г, 57.6 ммоль), ТНР (120 мл) и воды (30 мл) барботировали азотом в течение 5 мин, затем обрабатывали аддуктом Р1С1₂ (άρρί) ИСМ (1.11 г, 1.44 ммоль). Смесь нагревали при 40°С в течение 24 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали через слой СЕЫТЕ® и твердые вещества промывали ЕЮАс. Объединенные фильтраты промывали рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (330 г), элюируя градиентом от ИСМ до ЕЮАс, с получением твердого вещества. Перекристаллизацией из ацетона получали 4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров) в виде кристаллического твердого вещества (6.80 г, выход 86%).

¹Н ЯМР (500 МГц, ОМ§О-1₆) δ 11.40 (5, 1Н), 8.17 (Ьг. 5., 1Н), 8.00 (ά, 1=7.7 Гц, 2Н), 7.95 (ά, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.84 (5, 1Н), 7.72 (άά, 1=14.3, 8.1 Гц, 1Н), 7.52-7.47 (т, 1Н), 7.50-7.44 (т, 1Н), 7.47-7.42 (т, 1Н), 7.387.34 (т, 1Н), 7.35-7.29 (т, 1Н), 7.12-7.05 (т, 1Н), 7.04-7.00 (т, 1Н), 7.04-6.98 (т, 1Н),4.99 (5, 1Н), 3.74 (άά, 1=11.9, 8.1 Гц, 3Н), 1.75 (5, 3Н), 1.47 (5, 3Н), 1.46 (5, 3Н).

Абсолютные стереохимии двух взаимопревращающихся диастереомеров примера 3 показаны на фиг. 2. Стереохимия примера 3 была подтверждена рентгеноструктурным анализом кристалла малых размеров. Было получено несколько кристаллических форм.

Кристаллическую форму §А-1 получали путем медленного выпаривания водного раствора метанола при комнатной температуре. Форма 8А-1 представляет собой смешанный сольватированный кристалл, имеющий стехиометрию, соответствующую одной молекуле метанола и одной молекуле воды для каждой молекулы примера 3.

Кристаллическую форму §В-2 получали из раствора ЕЮН/рацемический пропиленгликоль. Форма §В-2 представляет собой смешанный сольватированный кристалл, имеющий стехиометрию, соответствующую одной молекуле 1-(§)-пропиленгликоля и 0.5 молекулы воды для каждой молекулы примера 3.

Кристаллическую форму §С-3 получали путем медленного выпаривания раствора ацетона при комнатной температуре. Форма 8С-3 представляет собой смешанный сольватированный кристалл, имеющий стехиометрию, соответствующую одной молекуле ацетона и одной молекуле воды для каждой молекулы примера 3.

Кристаллическую форму 8Ό-3 получали из кашицы в ТНР. Форма 8Ό-3 представляет собой смешанный сольватированный кристалл, имеющий стехиометрию, соответствующую 1.5 молекулам ТНР и одной молекуле воды для каждой молекулы примера 3.

Кристаллическую форму §Е-2 получали путем медленного выпаривания раствора ЕЮН/ТНР при комнатной температуре. Форма 8Е-2 представляет собой смешанный сольватированный кристалл, имеющий стехиометрию, соответствующую одной молекуле этанола и 0.5 молекулы воды для каждой молекулы примера 3.

Кристаллическую форму М2-4 получали путем медленного выпаривания раствора метанола при комнатной температуре. Форма М2-4 представляет собой кристалл диметанолата.

Кристаллическую форму ΛΝ-5 получали путем медленного выпаривания раствора ацетонитрила при комнатной температуре. Форма А№5 содержит ацетонитрил.

Кристаллическую форму Н1-6 получали из кашици п-ВиОАс. Форма Н1-6 представляет собой кристалл моногидрата.

Кристаллическую форму Е-7 получали путем медленного выпаривания раствора ЕЮН/ТНР при комнатной температуре. Форма Е-7 содержит этанол.

Кристаллическую форму §Е-8 получали путем медленного выпаривания раствора ЕЮН/ТНР при комнатной температуре. Форма 8Е-8 представляет собой смешанный сольватированный кристалл.

Параметры элементарной ячейки этих кристаллических форм показаны в табл. 4, и дробные атомные координаты этих кристаллических форм показаны в табл. с 5 по 14.

Пример 4. 4-(3-(§)-(8-Фтор-1-метил(ά₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров)

- 50 025863

Получение 4А. 4-(3-(8-Фтор-1-метил(б₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (53.8 мг, 0.137 ммоль), 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-фтор-1метил(б₃)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 5] (50 мг, 0.137 ммоль) и К₂СО₃ (56.6 мг, 0.410 ммоль) в толуоле (1.2 мл) и Е!ОН (0.4 мл) барботировали аргоном в течение около 5 мин (1 мин с обработкой ультразвуком). Смесь обрабатывали тетракис(трифенилфосфин)палладием (7.9 мг, 6.83 мкмоль), нагревали при 90°С в течение 16.25 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали и остаток обрабатывали ультразвуком в МеОН, фильтровали и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (РНΕNОМΕNΕX® Ах1а С18 30x100 мм, 10-100% ацетонитрил-вода, содержащая 0.1% трифторуксусную кислоту, 10 мин, 30 мл/мин, 254 нм) в 5 объемах вводимой пробы. Соответствующие фракции объединяли, обрабатывали насыщенным водным NаНСО₃ и концентрировали под вакуумом до водной суспензии. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали под вакуумом с получением 4-(3 -(8-фтор-1 -метил(б₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде белого твердого вещества (24.3 мг, выход 31%). Масс-спектр т/ζ 536 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ОМ§О-б₆) δ 11.40 (5, 1Н), 8.17 (Ьг. 5., 1Н), 8.04-7.92 (т, 2Н), 7.84 (5, 1Н), 7.797.67 (т, 1Н), 7.55-7.42 (т, 3Н), 7.40-7.29 (т, 2Н), 7.13-6.97 (т, 3Н), 4.99 (5, 1Н), 1.76 (5, 3Н), 1.53-1.42 (25, 6Н).

Пример 4.

4-(3-(8-Фтор-1-метил(б₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров) (86 мг) отделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: Ьих Се1-4 (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (60:40) при 85 мл/мин; подготовка образца: 1.3 мг/мл в МеОН-МеС^ объем вводимой пробы: 3 мл. Пики 3 и 4, элюируемые из колонки, собирали вместе и концентрировали с получением 4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил(б₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров) (27 мг) в виде белого твердого вещества. Масс-спектр и ЯМР были идентичны спектрам смеси четырех диастереомеров.

Пример 5. 4-(2-Хлор-3-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)фенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (50 мг, 0.127 ммоль), 3-(3-бром-2-хлорфенил)-8-фтор-1метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 9] (48.6 мг, 0.127 ммоль), Е!ОН (1 мл), толуола (1 мл) и 2М водного №-ьСО₃, (0.21 мл, 0.418 ммоль) барботировали азотом в течение 5 мин и обрабатывали тетракис(трифенилфосфин)палладием (11.7 мг, 10.2 мкмоль). Смесь нагревали при 90°С в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и разделяли между Е!ОАс и водой. Органическую

- 51 025863 фазу высушивали и концентрировали, остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (12 г), элюируя МеОИ-ЭСМ. содержащим 1% триэтиламина (градиент 0-5%). Полученное в результате вещество дополнительно очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (РЖИОМЕМЕХ® Α\ί;·ι С₁₈ 30x100 мм), элюируя МеСЫ-водой, содержащей 0.1% трифторуксусной кислоты (градиент 20-100%, 10 мин, 30 мл/мин). Соответствующие фракции объединяли, обрабатывали насыщенным водным Ν;·ιΗίΌ₃ и концентрировали. Остаток растворяли в ЕίΟΑс, промывали последовательно водой и рассолом, высушивали и концентрировали с получением 4-(2-хлор-3-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)фенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде белого твердого вещества (6 мг, выход 8%). Масс-спектр т/ζ 571 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 0.55 (5, 1Η), 8.13 (ί, Σ=7.5 Гц, 1Н), 7.78-7.38 (т, 6Η), 7.20-7.08 (т, 1Η), 3.90 (5, 1.5Η), 3.88(5, 1.5Η), 1.65 (5, 6Η).

¹⁹Р ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 121.34 ррт.

Пример 6. 4-(2-Хлор-3-(1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)фенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (140 мг, 0.356 ммоль), (2)-4-((3-бром-2-хлорфенил)имино)Рметил-Ш-бензоВДС^оксазин^^НЕона [промежуточное соединение 8] (100 мг, 0.274 ммоль), К₂СО₃(151 мг, 1.09 ммоль), толуола (3 мл) и ЕίΟΗ (3 мл) барботировали азотом в течение 5 мин и обрабатывали тетракнс(трифенилфосфин)палладием (32 мг, 0.027 ммоль). Смесь нагревали при 90°С, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между водой и ЕίΟΑс и водную фазу три раза экстрагировали ЕίΟΑс. Объединенные органические фазы промывали рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (80 г), элюируя МеОН-ИСМ, содержащим 0.5% ΝΗ^Η (градиент 0-10%), с получением белого твердого вещества. Вещество дополнительно очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, элюируя МеСН-водой, содержащей ΤΡΑ (градиент 30-100%). Объединенные фракции, содержащим продукт, обрабатывали насыщенным водным Ν;·ιΗί'Ό₃ и концентрировали. Водный остаток 3 раза экстрагировали ЕίΟΑс и объединенные органические фазы промывали рассолом, высушивали и концентрировали с получением 4-(2-хлор-3-(1метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохнназолин-3(4Н)-ил)фенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде не совсем белого твердого вещества (50 мг, выход 32%). Масс-спектр т/ζ 535, 537 (М+Н-И₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ИМЗО^) δ 11.40 (5, 1Η), 8.20-8.16 (т, 1Η), 8.16 (ά, 1=1.3 Гц, 0.5Н), 8.12-8.08 (т, 0.5Η), 7.98 (ά, 1=7.9 Гц, 1Η), 7.90-7.86 (т, 0.5Η), 7.85-7.82 (т, 1.5Η), 7.74-7.70 (т, 1Η), 7.69-7.63 (т, 1Η), 7.58-7.53 (т, 2Η), 7.48 (Ьг. 5., 1Η), 7.41-7.34 (т, 1Η), 7.13-6.99 (т, 3Η), 4.99 (5, 0.5Η), 4.99 (5, 0.5Η), 3.61 (5, 1.5Η), 3.59 (5, 1.5Η), 1.47 (т, 6Η).

Пример 7. 7-(2-Гидроксипропан-2-ил)-4-(3 -(8-метокси-1 -метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (42 мг, 0.107 ммоль), 3-(3-бром-2-метилфенил)-8-метокси1-метилхиназолин-2,4(1Η,3Н)-диона [промежуточное соединение 6] (40 мг, 0.107 ммоль), аддукта Ράί'Ί₃(άρρΓ) ИСМ (8.7 мг, 10.7 мкмоль) и С5₂СО₃ (70 мг, 0.213 ммоль) в ΤΗΡ (2 мл) и воде (0.5 мл) в реакционной виале под давлением нагревали при 70°С. Через 2 ч добавляли дополнительный 7-(2гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (20 мг, 0.051 ммоль) и нагревание продолжали в еще течение 6 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и органическую фазу фильтрата отделяли и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя ЕίΟΑс, с получением 7-(2- 52 025863 гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(8-метокси-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) (54 мг, выход 85%). Массспектр т/ζ 545 (М-Н₂О+Н)+, 585 (Μ-Ха)'.

^!Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 10.55 (5, 1Н), 7.95 (άάά, 1=10.2, 6.7, 2.6 Гц, 1Н), 7.69 (5, 1Н), 7.63 (άά, 1=7.8, 1.0 Гц, 1Н), 7.52-7.46 (т, 1Н), 7.38 (άά, 1=17.4, 7.7 Гц, 2Н), 7.28-7.24 (т, 4Н), 7.10 (άά, 1=7.7, 2.0 Гц, 1Н), 3.96 (ά, 1=0.9 Гц, 3Н), 3.92 (ά, 1=1.8 Гц, 3Н), 1.88 (5, 3Н), 1.66 (ά, 1=1.8 Гц, 6Н).

Пример 8. 4-(3-(6-Фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (40 мг, 0.101 ммоль), 3-(3-бром-2-метилфенил)-6-фтор-1метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 7] (37 мг, 0.101 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия (5.9 мг, 5.07 мкмоль) и 2М водного трикалий фосфата (0.101 мл, 0.203 ммоль) в ТНР (2 мл) нагревали при 110°С в течение 10 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и органическую фазу отделяли и концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (\Ма1сг5 ΧΒπάβο С18181818, 19x150 мм, 5 мкм), элюируя МеОН-водой, содержащей 10 мМ ацетата аммония (градиент 5-95%, 20 мл/мин). Фракции, содержащие продукт, объединяли и высушивали с помощью центробежного испарителя. Вещество дополнительно очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (\Ма1сг5 ΧΒπάβο С₁₈, 19x250 мм, 5 мкм), элюируя ΜеСN-водой, содержащей 10 мМ ацетата аммония (градиент 5-95%, 20 мл/мин). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и высушивали с помощью центробежного испарителя с получением 4-(3-(6-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) (15 мг, выход 27%). Масс-спектр т/ζ 533 (М-Н₂О+Н)+.

^!Н ЯМР (500 МГц, 1)\15О-с1₆) δ 11.42 (1Н, 5), 8.19 (1Н, Ьг. 5.), 8.00 (1Н, ά, 1=7.43 Гц), 7.74-7.90 (3Н, т), 7.62 (1 Н, άά, 1=9.41, 4.46 Гц), 7.43-7.53 (3Н, т), 7.36 (1Н, ά, 1=5.95 Гц), 6.98-7.11 (3Н, т), 3.57-3.64 (3Н, т), 1.74 (3Н, 5), 1.43-1.51 (6Н, т).

Пример 9. 4-(3-(3-(4-Фторфенил)-2,6-диоксо-2,3-дигидропиримидин-1(6Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (100 мг, 0.254 ммоль), 3-(3-бром-2-метилфенил)-1-(4фторфенил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 21] (100 мг, 0.266 ммоль), С5₂СО₃(165 мг, 0.507 ммоль) и аддукта ΡάΟ₂ (άρρί) ^СΜ (20.7 мг, 0.025 ммоль) в ТНР (5.0 мл) и воде (1.3 мл) нагревали при 45°С в течение 17 ч. Нагрев увеличивали до 80°С в течение 2 ч, затем до 85°С в течение 18 ч. Смесь охлаждали, концентрировали, растворяли в ^ΜР-ΜеΟН и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ. Соответствующие фракции объединяли, обрабатывали твердым ХаНСО₃ и концентрировали до водной суспензии. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали. Фильтраты концентрировали с получением дополнительного осадка, который собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали. Две порции осадка объединяли с получением 4-(3-(3-(4-фторфенил)-2,6-диоксо-2,3дигидропиримидин-1(6Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде белого твердого вещества (59 мг, выход 41%). Масс-спектр т/ζ 545 (М+Н-Н₂О)+.

^!Н ЯМР (400 МГц, 1)\15О-с1₆) δ 11.38 (ά, 1=4.8 Гц, 1Н), 8.16 (Ьг. 5., 1Н), 7.98 (άά, 1=7.7, 2.9 Гц, 1Н), 7.91 (άά, 1=7.9, 1.1 Гц, 1Н), 7.82 (ά, 1=10.1 Гц, 1Н), 7.58 (άάά, 1=9.1, 4.9, 2.3 Гц, 2Н), 7.51-7.40 (т, 3Н), 7.39-7.28 (т, 3Н), 7.04 (5, 1Н), 6.99 (ΐ, 1=7.4 Гц, 1Н), 6.92-6.82 (т, 1Н), 5.98 (άά, 1=16.1, 7.9 Гц, 1Н), 4.984.90 (т, 1Н), 1.79 (ά, 1=4.0 Гц, 3Н), 1.49-1.36 (т, 6Н).

- 53 025863

Пример 10. 7-(2-Гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(7-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (26.4 мг, 0.067 ммоль), 2-(3-бром-2-метилфенил)-7метокси-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 12] (22 мг, 0.061 ммоль) и 2М водного Ыа₂СО₃ (0.076 мл, 0.152 ммоль) в ΌΜΡ (1.5 мл) барботировали аргоном в течение 5 мин, затем обрабатывали аддуктом РйС1₂ (άρρί) ЭСМ (2.5 мг, 3.05 мкмоль). После барботирования аргоном в течение еще 30 с виалу герметично закрывали и смесь перемешивали при 90°С в течение 4 ч. Охлажденную смесь разделяли между ЕЮАс и водой и органический слой промывали рассолом, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (24 г), элюируя ЕЮАс-гексанами (последовательно 85, 95 и 100%), с получением 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(7метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (11.6 мг, выход 34%). Масс-спектр т/ζ 531 (М+Н-Н₂О)+.

^!Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 10.53 (ά, ί=7.7 Гц, 1Н), 7.77 (ά, ί=16.5 Гц, 1Н), 7.69-7.63 (т, 2Н), 7.54-7.48 (т, 1Н), 7.45-7.33 (т, 2Н), 7.26-7.20 (т, 1Н), 7.15 (άά, ί=13.4, 7.9 Гц, 1Н), 6.98-6.92 (т, 1Н), 6.916.87 (т, 1Н), 5.84 (ά, ί=2.2 Гц, 1Н), 3.81 (5, 3Н), 1.89 (5, 3Н), 1.55 (5, 6Н).

Пример 11. 7-(2-Гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(6-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (48 мг, 0.122 ммоль), 2-(3-бром-2-метилфенил)-6-метокси1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 11] (40 мг, 0.111 ммоль) и С5₂СО₃ (72 мг, 0.221 ммоль) в ТНР (1.5 мл) и воды (0.375 мл) барботировали аргоном в течение 3 мин, затем обрабатывали аддуктом РάС1₂ (άρρί) ЭСМ (4.5 мг, 5.54 мкмоль). Барботирование аргоном продолжали в течение 1 мин и смесь затем нагревали при 45°С. Через 3.5 ч смесь охлаждали, разбавляли ЕЮАс, промывали последовательно водой и рассолом и объединенные водные слои экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (24 г), элюируя ЕЮАс, с получением нечистого вещества. Остаток дополнительно очищали с помощью препаративной ВЭЖХ. Соответствующие фракции обрабатывали насыщенным водным ЫаНСОз, объединяли и экстрагировали ЕЮАс. Органическую фазу промывали рассолом, высушивали и концентрировали с получением 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(6-метокси-1,3диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (17.7 мг, выход 28%). Масс-спектр 549 (М+Н)+.

^!Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 10.53 (ά, ί=7.3 Гц, 1Н), 8.28 (άά, ί=19.4, 8.1 Гц, 1Н), 7.69-7.62 (т, 2Н), 7.52-7.47 (т, 1Н), 7.41 (άά, ί=3.7, 1.3 Гц, 1Н), 7.37-7.34 (т, 1Н), 7.24-7.21 (т, 1Н), 7.13 (άά, ί=10.3, 7.7 Гц, 1Н), 6.19 (άάά, ί=8.0, 4.5, 2.6 Гц, 1Н), 6.06 (ά, ί=2.4 Гц, 1Н), 5.67 (ά, ί=2.0 Гц, 1Н), 3.90-3.89 (т, 3Н), 1.89-1.88 (т, 3Н), 1.65-1.62 (т, 6Н).

Пример 12. 7-(2-Гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(5-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

- 54 025863

Смесь 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-9Н-карбазол-1карбоксамида [промежуточное соединение 4] (88 мг, 0.222 ммоль), 2-(3-бром-2-метилфенил)-5-метокси1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 10] (73 мг, 0.202 ммоль) и 2М водного Ыа₂СО₃ (0.252 мл, 0.505 ммоль) в ΌΜΡ (1.5 мл) при комнатной температуре барботировали аргоном в течение 5 мин. Добавляли аддукт ΡάΟ₂ (άρρί) Οί,’Μ (8.2 мг, 10.1 мкмоль), барботирование азотом продолжали в течение еще 30 с и смесь нагревали при 90°С. Через 4 ч охлажденную смесь разбавляли Е1ОАс и промывали последовательно водой и рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали Е1ОАс. Объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя Е1ОАс, с получением коричневатого твердого вещества. Это вещество растирали в МеОН с обработкой ультразвуком, собирали фильтрованием и высушивали с получением 7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(5-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде светло-желто-коричневатого твердого вещества (29.7 мг, выход 25%). Масс-спектр 549 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ^-ά^ δ 11.38 (5, 1Н), 8.15 (Ьг. 5., 1Н), 7.98 (ά, 1=7.9 Гц, 1Н), 7.91 (ά, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.82 (5, 1Н), 7.53-7.42 (т, 3Н), 7.34 (ά, 1=7.3 Гц, 1Н), 7.07-6.98 (т, 3Н), 6.71 (ά, 1=7.5 Гц, 1Н), 6.606.54 (т, 1Н), 5.93 (5, 1Н), 4.97 (5, 1Н), 3.91 (5, 3Н), 1.73 (5, 3Н), 1.48-1.43 (т, 6Н).

Пример 13. 4-(3-(5-Хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] (23.1 мг, 0.067 ммоль), 5-хлор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2с]пиримидин-1,3(2Н)-диона (25 мг, 0.061 ммоль) [промежуточное соединение 13] и С5₂СО₃ (39.5 мг, 0.121 ммоль) в ТНР (1.5 мл) и воде (0.375 мл) барботировали аргоном в течение 3 мин. Смесь обрабатывали аддуктом ΡάΟ₂ (άρρί) ^СΜ (2.5 мг, 3.03 мкмоль), и барботирование продолжали в течение 1 мин. Смесь нагревали при 45°С в течение 3.5 ч. Охлажденную смесь разбавляли Е1ОАс, промывали последовательно водой и рассолом и объединенные водные слои экстрагировали Е1ОАс. Объединенные органические фазы высушивали и концентрировали и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Ьииа Ах1а С₁₈ 30x100 мм, 5 мкм), элюируя ΜеСN-водой, содержащей 0.1% ТРА (градиент 30-90%, 30 мл/мин) с получением 4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[ 1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (14 мг, выход 39%). Масс-спектр 553 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 10.54 (ά, 1=5.9 Гц, 1Н), 8.30 (άά1, 1=19.6, 7.6, 0.9 Гц, 1Н), 7.707.62 (т, 2Н), 7.54-7.49 (т, 1Н), 7.45-7.41 (т, 1Н), 7.37-7.33 (т, 1Н), 7.26-7.20 (т, 2Н), 7.13 (άά, 1=12.1, 7.7 Гц, 1Н), 6.37 (1ά, 1=7.3, 5.1 Гц, 1Н), 6.32 (ά, 1=3.1 Гц, 1Н), 1.89 (5, 3Н), 1.65-1.63 (т, 6Н).

Примеры 14 и 15. 4-(3-(К)-(5-Хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (14) и 4-(3-(§)-(5-хлор-1,3-диоксо-1Нпиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (15)

- 55 025863

Порцию 4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) [пример 13] разделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: первый проход: колонка: Ьих Се11и1о5е-3 (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (70:30) при 140 мл/мин, 100 бар, 35°С; подготовка образца: 13 мг/мл в МеОН; объем вводимой пробы: 4.5 мл; второй проход: колонка: СШКАЬСЕЬ® А§ (2x50 см, 10 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (55:45) при 120 мл/мин, 100 бар, 35°С.

Первый и третий пики, элюируемые из колонки, объединяли с получением смеси двух взаимопревращающихся диастереомеров 4-(3 -(К)-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [пример 14]. Масс-спектр т/ζ 553 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-6₆) δ 11.39 (6, 1=3.7 Гц, 1Н), 8.34-8.21 (т, 1Н), 8.16 (Ьг. 5., 1Н), 7.99 (66, 1=7.7, 1.5 Гц, 1Н), 7.83 (5, 1Н), 7.60 (6, 1=7.0 Гц, 1Н), 7.53-7.41 (т, 3Н), 7.35 (6, 1=7.3 Гц, 1Н), 7.09-6.94 (т, 3Н), 6.57 (16, 1=7.3, 3.6 Гц, 1Н), 6.00 (6, 1=18.9 Гц, 1Н), 4.97 (5, 1Н), 1.75 (т, 3Н), 1.46 (т, 6Н). Второй и четвертый пики, элюируемые из колонки, объединяли с получением смеси двух других взаимопревращающихся диастереомеров 4-(3-(§)-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [пример 15]. Масс-спектр т/ζ 553 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-6₆) δ 11.39 (6, 1=4.0 Гц, 1Н), 8.36-8.21 (т, 1Н), 8.16 (Ьг. 5., 1Н), 7.99 (66, 1=7.7, 1.8 Гц, 1Н), 7.83 (5, 1Н), 7.60 (6, 1=7.0 Гц, 1Н), 7.54-7.41 (т, 3Н), 7.35 (6, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.08-6.94 (т, 3Н), 6.57 (16, 1=7.3, 3.6 Гц, 1Н), 6.00 (6, 1=18.7 Гц, 1Н), 4.97 (6, 1=0.9 Гц, 1Н), 1.75 (т, 3Н), 1.46 (т, 6Н).

Альтернативный синтез примера 15. 4-(3-(§)-(5-Хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров)

Раствор 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] (0.16 г, 0.461 ммоль), 5-хлор-2-(§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо [1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона (один энантиомер) [промежуточное соединение 15] (0.209 г, 0.507 ммоль) и 3М водного К₃РО₄ (0.384 мл, 1.15 ммоль) в ТНР (3.0 мл) барботировали аргоном в течение 5 мин. Смесь обрабатывали 1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен палладий дихлоридом (15 мг, 23 мкмоль) и барботирование продолжали в течение 30 с. Реакционный сосуд герметично закрывали и подвергали трем циклам откачивания и заполнения аргоном. Смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре, затем разбавляли Е1ОАс, промывали последовательно водой и рассолом и объединенные водные слои экстрагировали Е1ОАс. Объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток объединяли с остатком после идентичной реакции, проводимой с вчетверо меньшим объемом, и очищали с помощью хроматографии с получением 4-(3-(§)-(5-хлор-1,3-диоксо-1Нпиридо [ 1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (154 мг, выход 48%).

Пример 16. 4-(3-(5-Хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7пиваламидо-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

- 56 025863

Смесь 4-бром-7-пиваламидо-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, пример 57-51] (0.062 г, 0.160 ммоль), 5-хлор-2-(2-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 13] (0.055 г, 0.133 ммоль) и Ск₂СО₃ (0.087 г, 0.267 ммоль) в ТНР (2.5 мл) и воде (0.625 мл) барботировали азотом в течение 2 мин, затем обрабатывали аддуктом ΡάΟ₂ (άρρί) ЭСМ (5.4 мг, 6.66 мкмоль). Барботирование продолжали в течение 30 с, затем смесь нагревали при 60°С в течение 5 ч и перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь разбавляли ЕЮАс, высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя ЕЮАс-гексанами, с получением 4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2метилфенил)-7-пиваламидо-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (38 мг, выход 42%). Масс-спектр т/ζ 594 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ5О^₆) δ 11.42 (ά, 1=9.0 Гц, 1Н), 9.23 (к, 1Н), 8.29-8.22 (т, 1Н), 8.15 (Ьг. к., 1Н), 8.09 (άά, 1=15.5, 1.7 Гц, 1Н), 7.96 (άά, 1=7.8, 2.1 Гц, 1Н), 7.62-7.58 (т, 1Н), 7.54-7.36 (т, 4Н), 7.02 (к, 3Н), 6.57 (άΐ, 1=9.3, 7.3 Гц, 1Н), 5.99 (ά, 1=6.2 Гц, 1Н), 1.73 (ά, 1=3.1 Гц, 3Н), 1.24 (ά, 1=1.1 Гц, 9Н).

Пример 17. 4-(3-(5-Хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7(метоксиметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(метоксиметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [промежуточное соединение 25] (31.1 мг, 0.093 ммоль), 5-хлор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Нпиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 13] (35 мг, 0.085 ммоль) и Ск₂СО₃(55.3 мг, 0.170 ммоль) в ТНР (1.5 мл) и воде (0.375 мл) барботировали аргоном в течение 3 мин. Смесь обрабатывали аддуктом ΡάΟ₂ (άρρί) ЭСМ (3.5 мг, 4.24 мкмоль) и барботирование продолжали в течение 1 мин. Смесь нагревали при 45°С в течение 5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между ЕЮАс и водой, органический слой промывали рассолом и объединенные водные слои экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические фазы высушивали и концентрировали и остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ. Фракции, содержащие продукт, обрабатывали насыщенным водным ХаНСО₃, объединяли и экстрагировали ЕЮАс. Органический слой высушивали и концентрировали и остаток дважды очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (24 г, затем 12 г), элюируя ЕЮАс, с получением 4-(3-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)7-(метоксиметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (9.7 мг, выход 20%). Масс-спектр т/ζ 539 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ5О^₆) δ 11.53-11.51 (т, 1Н), 8.33-8.28 (т, 1Н), 8.19 (Ьг. к., 1Н), 8.05-8.00 (т, 1Н), 7.67 (к, 1Н), 7.60 (ά, 1=6.6 Гц, 1Н), 7.54-7.42 (т, 5Н), 7.38 (άά, 1=7.5, 1.3 Гц, 1Н), 7.07-7.00 (т, 2Н), 6.85 (άά, 1=8.3, 1.4 Гц, 1Н), 6.61-6.53 (т, 2Н), 5.97 (к, 1Н), 4.49 (к, 2Н), 3.29 (к, 3Н).

Пример 18. 4-(3-(5-Фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7(метоксиметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(метоксиметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [промежуточное соединение 25] (0.05 г, 0.150 ммоль), 5-фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо

- 57 025863 [1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 18] (0.065 г, 0.165 ммоль) и Ск₂СО₃ (0.098 г, 0.300 ммоль) в диоксане (2.0 мл) и воде (0.5 мл) барботировали аргоном в течение 2 мин. Смесь обрабатывали аддуктом РйС1₂ (йррГ) ОСМ (6.1 мг, 7.50 мкмоль), барботировали аргоном в течение еще 30 с, затем нагревали в течение 6 ч при 50°С. Охлажденную смесь разбавляли ЭСМ-МеОН. высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя Е1ОАс-гексанами (градиент 80-100%), с получением 4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(метоксиметил)-9Н-карбазол- 1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (0.0481 г, выход 57%). Масс-спектр т/ζ 523 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, 1)\18О-с1.) δ 11.51 (а, 1=5.7 Гц, 1Н), 8.19 (Ъг. к., 1Н), 8.16-8.06 (т, 2Н), 8.02 (άά, 1=7.8, 1.9 Гц, 1Н), 7.67 (ά, 1=3.5 Гц, 1Н), 7.55-7.42 (т, 5Н), 7.38 (ά, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.23 (1, 1=8.7 Гц, 1Н), 7.05 (ά, 1=7.7 Гц, 1Н), 6.85 (άάά, 1=8.2, 3.8, 1.4 Гц, 1Н), 6.60-6.52 (т, 1Н), 5.86 (ά, 1=15.0 Гц, 2Н), 4.49 (к, 2Н), 3.29 (ά, 1=1.1 Гц, 3Н).

Пример 19. 4-(3-(4-Фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] (0.034 г, 0.097 ммоль), 4-фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 16] (0.035 г, 0.088 ммоль) и Ск₂СО₃ (0.058 г, 0.177 ммоль) в ТНР (1.5 мл) и воде (0.375 мл) барботировали аргоном в течение 3 мин. Смесь обрабатывали аддуктом ΡάίΤ ^ррГ) ОСМ (3.6 мг, 4.42 мкмоль), барботировали аргоном в течение еще 1 мин и нагревали при 45°С. Через 5 ч охлажденную смесь разбавляли Е1ОАс и промывали последовательно водой и рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали Е1ОАс и объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ. Фракции, содержащие продукт, обрабатывали насыщенным водным ЫаНСО₃, объединяли и разделяли между Е1ОАс и насыщенным водным ЫаНСО₃. Органический слой промывали рассолом, высушивали и концентрировали с получением 4-(3-(4-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с] пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (0.0109 г, выход 22%). Масс-спектр т/ζ 537 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМБО^) δ 11.39 (ά, 1=2.4 Гц, 1Н), 8.27-8.13 (т, 2Н), 7.99 (άά, 1=7.8, 2.3 Гц, 2Н), 7.83 (к, 1Н), 7.55-7.43 (т, 3Н), 7.40-7.26 (т, 2Н), 7.07-6.94 (т, 3Н), 6.64-6.55 (т, 1Н), 4.97 (ά, 1=4.8 Гц, 1Н), 1.75 (ά, 1=1.3 Гц, 3Н), 1.48-1.43 (т, 6Н).

Пример 20. 4-(3-(5,7-Диоксо-5Н-тиазоло[3,2-с]пиримидин-6(7Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] (0.040 г, 0.115 ммоль), 6-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-5Н-тиазоло[3,2-с]пиримидин5,7(6Н)-диона [промежуточное соединение 17] (0.04 г, 0.104 ммоль) и Ск₂СО₃ (0.068 г, 0.208 ммоль) в ТНР (2.0 мл) и воде (0.5 мл) барботировали аргоном в течение 3 мин, затем обрабатывали аддуктом ΡάίΤ ^ррГ) ОСМ (4.3 мг, 5.20 мкмоль). Барботирование продолжали в течение еще 30 с, затем смесь нагревали при 50°С в течение 5 ч. Охлажденную смесь разделяли между Е1ОАс и водой и органический слой промывали рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали Е1ОАс и объединенные органические фазы высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (40 г), элюируя Е1ОАс, с получением 4-(3-(5,7-диоксо-5Н-тиазоло[3,2-с]пиримидин-6(7Н)-ил)-2метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде красноватого твердого вещества (0.032 г, выход 56%). Масс-спектр т/ζ 525 (М+Н)+.

- 58 025863

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ 11.38 (ά, 1=4.8 Гц, 1Н), 8.16 (Ьг. 5., 1Н), 7.98 (άά, 1=7.8, 1.2 Гц, 1Н), 7.83 (ά, 1=1.8 Гц, 1Н), 7.75-7.64 (т, 1Н), 7.51-7.39 (т, 3Н), 7.33 (άά, 1=7.4, 1.2 Гц, 1Н), 7.07-6.92 (т, 4Н), 6.29 (ά, 1=13.6 Гц, 1Н), 4.97 (5, 1Н), 1.75-1.73 (т, 3Н), 1.47-1.43 (т, 6Н).

Пример 21. 4-(3-(5-Фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь четырех диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] (0.048 г, 0.139 ммоль), 5-фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2с]пиримидин-1,3(2Н)-диона [промежуточное соединение 18] (0.050 г, 0.126 ммоль) и С5₂СΟз (0.082 г, 0.252 ммоль) в ТНР (2.0 мл) и воде (0.5 мл) барботировали азотом в течение 2 мин. Смесь обрабатывали аддуктом ΡάΟ₂ (άρρί) ΌΟΜ (5.2 мг, 6.31 мкмоль), барботирование продолжали в течение 30 с и виалу герметично закрывали. Смесь нагревали при 50°С в течение 5 ч. Охлажденную смесь разбавляли ЕЮАс и промывали последовательно водой и рассолом. Объединенные водные слои экстрагировали ЭСМ. Объединенные органические слои высушивали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением 4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) в виде желтого твердого вещества (0.0375 г, выход 54%). Масс-спектр т/ζ 537 (М+Н)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ 11.38 (ά, 1=4.6 Гц, 1Н), 8.21-8.03 (т, 2Н), 7.98 (άά, 1=7.9, 1.5 Гц, 1Н), 7.86-7.78 (т, 1Н), 7.54-7.39 (т, 3Н), 7.35 (ά, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.23 (1, 1=8.9 Гц, 1Н), 7.09-6.92 (т, 3Н), 6.616.50 (т, 1Н), 5.86 (ά, 1=19.4 Гц, 1Н), 4.96 (ά, 1=1.8 Гц, 1Н), 1.74 (ά, 1=2.6 Гц, 3Н), 1.45 (ά, 1=4.6 Гц, 6Н).

Примеры 22 и 23. 4-(3-(5-Фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смеси двух взаимопревращающихся диастереомеров)

Порцию 4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь четырех диастереомеров) [пример 21] разделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: первый проход: колонка: СШКАЬРАК® П (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (50:50) при 150 мл/мин, 100 бар, 40°С; подготовка образца: 7 мг/мл в ΜеΟН-^СΜ (1:1) с добавлением ΌΜ8Ο; объем вводимой пробы: 2 мл; второй проход: колонка: СШКАЬСЕЬ® ΟΌ-Н (3x25 см, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (50:50) при 120 мл/мин, 100 бар, 35°С; подготовка образца: 3.7 мг/мл в МеОН-хлороформе (3:1); объем вводимой пробы: 4 мл.

Первый и второй пики, элюируемые из колонки, объединяли с получением смеси двух взаимопревращающихся диастереомеров 4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида [Пример 22]. Масс-спектр т/ζ 519 (М+Н-НЮ)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ 11.42-11.36 (т, 1Н), 8.20-8.06 (т, 2Н), 7.99 (ά, 1=7.0 Гц, 1Н), 7.83 (Ьг. 5., 1Н), 7.54-7.41 (т, 3Н), 7.35 (ά, 1=7.3 Гц, 1Н), 7.23 (1, 1=8.7 Гц, 1Н), 7.09-6.94 (т, 3Н), 6.61-6.51 (т, 1Н), 5.87 (ά, 1=19.6 Гц, 1Н), 4.97 (5, 1Н), 1.75 (5, 3Н), 1.48-1.42 (т, 6Н).

Третий и четвертый пики, элюируемые из колонки, объединяли с получением другой смеси двух взаимопревращающихся диастереомеров 4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида в виде желтого твердого вещества [пример 23]. Масс-спектр т/ζ 519 (М+Н-НЮ)+.

Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ 11.41-11.37 (т, 1Н), 8.21-8.06 (т, 2Н), 8.02-7.96 (т, 1Н), 7.83 (Ьг. 5.,

- 59 025863

1Н), 7.54-7.41 (т, 3Н), 7.35 (й, 1=7.3 Гц, 1Н), 7.23 (1, 1=8.6 Гц, 1Н), 7.08-6.95 (т, 3Н), 6.60-6.52 (т, 1Н), 5.87 (й, 1=19.6 Гц, 1Н), 4.99-4.95 (т, 1Н), 1.78-1.73 (т, 3Н), 1.48-1.43 (т, 6Н).

Альтернативный синтез примера 22.

Применяя методику альтернативного синтеза примера 15, 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Нкарбазол-1-карбоксамид [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] и 5-фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-1,3(2Н)-дион (один энантиомер) [промежуточное соединение 19] преобразовывали в 4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров) в виде желтого твердого вещества.

Альтернативный синтез примера 23.

Применяя методику альтернативного синтеза примера 15, 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Нкарбазол-1-карбоксамид [синтезирован в соответствии со способом, описанным в патенте США № 8084620, промежуточное соединение 73-2] и 5-фтор-2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиридо[1,2-с] пиримидин-1,3(2Н)-дион (один энантиомер) [промежуточное соединение 20] преобразовывали в 4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров) в виде желтого твердого вещества.

Пример 24. 4-(3-(§)-(8-Фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида [промежуточное соединение 22] (45 мг, 0.125 ммоль), 8-фтор-1-метил-3-(§)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 3] (61 мг, 0.149 ммоль) и 2.0М водного К₃РО₄ (0.187 мл, 0.374 ммоль) в ТНР (1.25 мл) в виале барботировали аргоном в течение 1 мин, в это же время вращая сосуд на ультразвуковой водяной бане. Смесь обрабатывали хлоридом 1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен палладия(П) (5.1 мг, 6.23 мкмоль) и виалу герметично закрывали и нагревали при 45°С. Через 15.25 ч смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток обрабатывали ультразвуком в ацетонитриле и надосадочную жидкость фильтровали и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (РНЕNΟΜЕNЕX® Ах1а С₁₈), элюируя МсС^-водой. содержащей 0.1% ТРА (градиент 10-100%). Фракции, содержащие продукт, обрабатывали насыщенным водным NаНСΟ₃ и концентрировали с получением водной суспензии. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали с получением 4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1 карбоксамида (смесь двух диастереомеров) в виде белого твердого вещества (49.4 мг, выход 67%). Массспектр т/ζ 547 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, МеОН-й₄) δ 8.05 (ΐ, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.91 (й, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.61 (ййй, 1=14.3, 8.1, 1.4 Гц, 1Н), 7.57 (к, 1Н), 7.54-7.48 (т, 1Н), 7.47-7.42 (т, 1Н), 7.37-7.28 (т, 2Н), 7.02 (йй, 1=7.9, 1.3 Гц, 2Н), 3.85 (2й, 1 = 3.7 Гц, 3Н), 1.92 (2к, 3Н), 1.76 (2к, 3Н), 1.61 (к, 6Н).

Пример 25. 4-(3-(§)-(8-Фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамид (единственный диастереомер)

4-(3-(§)-(8-Фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух диастереомеров) [пример 24] (42.7 мг, 0.076 ммоль) разделяли с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии при следующих условиях: колонка: Кедге АНЕЬК-О® К,К (3x25, 5 мкм); подвижная фаза: СО₂-МеОН (60:40)

- 60 025863 при 85 мл/мин, 100 бар; подготовка образца: 10.7 мг/мл в МеСИ-МеОН (9:1); объем вводимой пробы: 0.50 мл. Второй пик, элюируемый из колонки, концентрировали с получением единственного диастереомера (предполагается, что 4-(К)-(3-(8)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамид) в виде не совсем белого твердого вещества (13.0 мг). Определенная хиральная чистота составила 89%. Масс-спектр т/ζ 547 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, МеОН-ά.-ι) δ 8.04 (ά, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.90 (ά, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.65-7.55 (т, 2Н), 7.527.48 (т, 1Н), 7.47-7.41 (т, 1Н), 7.35-7.27 (т, 2Н), 7.05-6.97 (т, 2Н), 3.85 (ά, 1=7.9 Гц, 3Н), 1.91 (к, 3Н), 1.75 (к, 3Н), 1.61 (к, 6Н).

Пример 26. 4-(3-(8)-(8-Фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7(2-гидроксипропан-2-ил)-8-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-8-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида [промежуточное соединение 23] (30 мг, 0.083 ммоль), 8-фтор-1-метил-3-(8)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 3] (40.9 мг, 0.100 ммоль) и 2.0М водного К₃РО₄ (125 мкл, 0.249 ммоль) в ТНР (1 мл) в виале барботировали аргоном в течение 1 мин с обработкой ультразвуком. Смесь обрабатывали хлоридом 1,1'-бис(ди-третбутилфосфино)ферроцен палладия(П) (3.4 мг, 4.15 мкмоль), и пробирку герметично закрывали и нагревали при 45°С. Через 15.25 ч смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток обрабатывали ультразвуком в МеСИ и надосадочную жидкость фильтровали и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (РНЕИОМЕИЕХ® Ах1а С₁₈ 30x100 мм), элюируя МеСИ-водой, содержащей 0.1% ТРА (градиент 10-100%). Соответствующие фракции объединяли, обрабатывали насыщенным водным ИаНСО₃ и концентрировали с получением водной суспензии. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали под вакуумом с получением 4-(3-(8)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-8-метил-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (смесь двух взаимопревращающихся диастереомеров) в виде не совсем белого твердого вещества (33 мг, выход 70%). Масс-спектр т/ζ 547 (М+Н-Н₂О)+.

Ή ЯМР (400 МГц, МеОН-ά.-ι) δ 8.08 (άά, 1=17.3, 7.6 Гц, 1Н), 7.98 (ά, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.62 (άά, 1=14.1, 8.1 Гц, 1Н), 7.56-7.50 (т, 1Н), 7.46-7.38 (т, 2Н), 7.38-7.30 (т, 1Н), 7.23 (άά, 1=12.5, 8.6 Гц, 1Н), 7.11 (άά, 1=7.8, 1.4 Гц, 1Н), 7.05 (1, 1=8.7 Гц, 1Н), 3.88 (άά, 1=10.5, 7.8 Гц, 3Н), 2.85 (к, 3Н), 1.83 (к, 3Н), 1.71 (ά, 1=2.0 Гц, 6Н).

Пример 27. 4-(3-(8)-(8-Фтор-1-метил^₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамид (смесь двух диастереомеров)

Смесь 4-бром-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида [промежуточное соединение 22] (45 мг, 0.125 ммоль), 8-фтор-1-метил^₃)-3-(8)-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)фенил)хиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона [промежуточное соединение 24] (62 мг, 0.149 ммоль) и 2.0М водного К₃РО₄, (0.187 мл, 0.374 ммоль) в ТНР (1.25 мл) в виале барботировали аргоном в течение 1 мин с обработкой ультразвуком. Смесь обрабатывали хлоридом 1,1'-бис(ди-третбутилфосфино)ферроцен палладия(П) (5.1 мг, 6.23 мкмоль) и пробирку герметично закрывали и нагревали при 45°С. Через 16.5 ч смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток обрабатывали ультразвуком в МеСИ, фильтровали и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (РНЕИОМЕИЕХ® Ах1а С₁₈ 30x100 мм), элюируя МеСИ-водой, содержащей 0.1% ТРА (градиент 10-100%). Фракции, содержащие продукт, объединяли, обрабатывали насыщенным водным ИаНСО₃ и концентрировали до водной суспензии. Осадок собирали фильтрованием, прополаскивали водой и высушивали под вакуумом с получением 4-(3-(8)-(8-фтор-1-метил^₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (смесь двух диастереоме- 61 025863 ров) в виде не совсем белого твердого вещества (41.0 мг, выход 57%). Масс-спектр т/ζ 550 (М+Н-Н₂О)+.

Ί I ЯМР (400 МГц, МеОН-б₄) δ 8.05 (!, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.91 (б, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.61 (ббб, 1=14.3, 8.1, 1.4

Гц, 1Н), 7.57 (5, 1Н), 7.54-7.48 (т, 1Н), 7.47-7.42 (т, 1Н), 7.37-7.28 (т, 2Н), 7.02 (бб, 1=7.9, 1.3 Гц, 2Н), 1.92 (25, 3Н), 1.76 (25, 3Н), 1.61 (5, 6Н).

Соединения в табл. 2 получали с помощью методик, аналогичных описанным выше, используя промежуточные соединения, описанные или полученные с помощью методик, аналогичных описанным

Т аблица 2

30	н₃с о ^ν	ΟΟΝΗ,	549.56	550
н N „/А
1 сн₃ ГК ° сАА	1^4 Р
		н Γν	οονη₂
		X
		\=/	X /^СНз
31					578.07	579


				С1
			соын₂
		Ν-	Τι 1
	Н₃С-0	/А-	-и
		\_—/	X ^снз
32					522.53	523
				'Чн

				Р
		ζ	><χ-ΝΗ₂
		н
	Р	Ν^,
	,, _Л сн Н_яСш	ζν	о
33	но	\=/	X /^снз ιΊ 2		568.58	569.3
			и_мА.	Ч.
			(Αιφ'·
			сн₃	Р

Сравнительный пример 34. 7-(2-Гидроксипропан-2-ил)-4-(2-метил-3-(4-оксохиназолин-3(4Н)ил)фенил)-9Н-карбазол-1 -карбоксамид

- 62 025863

Сравнительный пример 34 был описан в патенте США № 8084620 как пример 76-15 и получен в соответствии с методикой, описанной в нем.

Сравнительный пример 35. 7-(2-Гидроксипропан-2-ил)-3-метил-4-(2-метил-3-(4-оксохиназолин3(4Н)-ил)фенил)-9Н-пиридо[3,4-Ь]индол-1-карбоксамид

Сравнительный пример 35 был описан в международной заявке АО 2011/159857 как пример 38 и получен в соответствии с методикой, описанной в ней.

Биологические анализы

Анализ рекомбинантного фермента В1к человека.

В 384-луночные планшеты с лунками с ν-образным дном добавляли тестируемые соединения, рекомбинантный В1к человека (1 нМ, ГН'УПКООЕЫ® СогрогаПоп), флюоресцирующий пептид (1.5 мкМ), АТР (20 мкМ) и буфер для анализа (20 мМ НЕРЕ8 рН 7.4, 10 мМ МдС1₂, 0.015% поверхностно-активное вещество Вгу 35 и 4 мМ ЭТТ в 1.6% ИМ8О) в окончательном объеме 30 мкл. После инкубирования при комнатной температуре в течение 60 мин реакцию останавливали добавлением 45 мкл 35 мМ ЕЭТА к каждому образцу. Реакционную смесь анализировали на СаНрег ЕАВСШР®® 3000 (СаНрег, НоркнИом, МА) посредством электрофоретического разделения флуоресцентного субстрата и фосфорилированного продукта. Данные ингибирования рассчитывали посредством сравнения с контрольными реакциями в случае 100% ингибирования при отсутствии фермента и контрольными реакциями в случае 0% ингибирования при отсутствии ингибитора. Кривые доза-ответ получали для определения концентрации ингибитора, которая необходима для ингибирования 50% активности киназы ОСА,,). Соединения растворяли в 10 мМ в ИМ8О и оценивали по одиннадцати концентрациям.

Анализ Като5 РЫРК.

Като5 КА1 В клетки (АТСС СКЬ-1596) при плотности 2x10 клеток/мл в среде ΚРМI без фенолового красного Дпуйгодеп 11835-030) и 50 мМ НЕРЕ8 Дпуйгодеп 15630-130), содержащей 0.1% В8А (81дта А8577) добавляли к половине объема кальциевого загрузочного буфера (ВИ объемный комплект для анализов, чувствительных к пробенециду, # 640177) и инкубировали при комнатной температуре в темноте в течение 1 ч. Обработанные красителем клетки осаждали (Весктапп О8-СКК, 1200 об/мин, при комнатной температуре, 5 мин) и ресуспендировали при комнатной температуре в среде ΚРМI без фенолового красного с 50 мМ НЕРЕ8 и 10% РВ8 до плотности 1x10 клеток/мл. 150 мкл аликвоты (150,000/лунку) высевали в 96-луночные аналитические покрытые поли-Э-лизином планшеты (ВИ 35 4640) и быстро центрифугировали (Весктапп О8-СКК 800 об/мин, 5 мин, без торможения). Затем 50 мкл разведений соединения в 0.4% ЭМЗО/РРМ! без фенолового красного + 50 мМ НЕРЕ8 + 10% РВ8 добавляли в лунки и планшет инкубировали при комнатной температуре в темноте в течение 1 ч. Аналитический планшет быстро центрифугировали, как описано выше, перед измерением уровней кальция. Используя РЫРК1 (спектрофотометр для чтения планшетов для визуализации флуоресценции) клетки стимулировали добавлением козьих антител к IдМ человека (ЗпуНгодеп АНЮ601) до 2,5 мкг/мл. Изменения внутриклеточных концентраций кальция измеряли в течение 180 с и процент ингибирования определяли относительно к пиковым уровням кальция, видимым только в присутствии стимуляции.

Анализ тирозинкиназы 1ак2.

Как было установлено, соединения, обладающие активностью по отношению к тирозинкиназе 1ак2, являются причиной тромбоцитопении, анемии и нейтропении у пациентов-людей при клинических исследованиях (см., например, Рагйаиат, А., Ьеикет1а, 26:1449 (2012)). Передача сигнала 1ак2 происходит через ЕРО и ТРО, которые контролируют пролиферацию эритроцитов и тромбоцитов соответственно. Таким образом, ингибирование активности тирозинкиназы Йак2 потенциально может приводить к побочным эффектам в клинике. Ингибиторы активности В1к с улучшенной селективностью по отношению к

- 63 025863 тирозинкиназе 1ак2 необходимы, чтобы минимизировать нецелевые побочные эффекты, связанные с ингибированием активности тирозинкиназы 1ак2.

Анализы проводили в 384-луночных планшетах с лунками с У-образным дном. Конечный объем пробы составлял 30 мкл, полученных из 15 мкл добавлений фермента и субстратов (флюоресцирующего пептида и АТР) и испытуемых соединений в буфере для анализа (100 мМ ЖРЕ§ рН 7.4, 10 мМ МдС1₂, 25 мМ β-глицерофосфата, 0.015% поверхностно-активного вещества Вгу 35 и 4 мМ ΌΤΤ). Реакцию инициировали посредством комбинирования тирозинкиназы 1ак2 с субстратами и тестируемыми соединениями. Реакционную смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 60 мин и реакцию останавливали добавлением 45 мкл 35 мМ ΞΌΤΑ к каждому образцу. Реакционную смесь анализировали на Сайрег Ε^ΑΕί-ΉΡ® 3000 посредством электрофоретического разделения флуоресцентного субстрата и фосфорилированного продукта. Данные ингибирования количественно определяли путем сравнения контрольных реакций без фермента при 100% ингибирования и реакций только с носителем при 0% ингибирования. Конечная концентрация реагентов в анализах составляла АТР, 30 мкМ; 1ак2 флюоресцентный пептид, 1.5 мкМ; 1ак2, 1 нМ; и ИМ§О, 1.6%. Кривые доза-ответ получали для определения концентрации, необходимой для ингибирования 50% активности киназы ОСА₀). Соединения растворяли в 10 мМ в ИМ§О и оценивали при одиннадцати концентрациях, каждое в двух экземплярах. Значения КА₀ получали посредством нелинейного регрессионного анализа.

Анализы ВСК-стимулированной экспрессии СЭ69 на В-клетках цельной крови.

Анализ эффективности соединений-ингибиторов В1к в подавлении экспрессии СЭ69 на В-клетках человека в цельной крови используется для прогнозирования эффективных доз в клинической практике и минимизации потенциальных побочных эффектов. Соединения, ингибирующие активность В1к, имеющие более высокую активность в анализе экспрессии СЭ69 в цельной крови, как ожидается, потребуются в более низких дозах, чем соединения, имеющие более низкую активность, и как ожидается, будут вызывать меньше нежелательных побочных эффектов (№ΡόΛΙ, СЬет. Ке5. Το\Κο1., 12, 387-395 (1999); Какауата, Эгид Ме1аЬоН5т ηηά П15ро5Йоп, 37(9): 1970-1977 (2009); §акаЙ5, СЬет. Ке5. Το\κο1. (2012)).

Для измерения ВСК-стимулированных В клеток ΑΟΌ-Α, используемый для получения цельной крови человека, обрабатывали тестируемыми соединениями при различных концентрациях и стимулировали 30 мкг/мл ΑΓΠηίΡιιΐΌ Р(аЬ')₂ фрагмента козьих антител к ^М человека Оаск5оп 109-006-1299 - эндотоксин очищеннный) и 10 нг/мл [Ш-4 человека (Рерго1есЬ 200-04) в течение 18 ч при 37°С при перемешивании. Клетки блокировали γ-глобулином человека (Джексон 009-000-002) и помечали РГГСконъюгированным мышиным антителом к СЭ20 человека (ВИ РЬагттдеп 555622) и РЕконъюгированным мышиным моноклональным антителом к СЭ69 человека (ВИ РЬагттдеп 555531), лизировали и фиксировали, затем промывали. Экспрессию СЭ69 оценивали количественно при средней интенсивности флуоресценции (МИ) после стробирования на СИ20-положительной В клеточной популяции с помощью анализа ΡΑСδ. В анализе ВСК-стимулированной экспрессии СЭ69 на В-клетках в цельной крови на повышенную эффективность соединения-ингибитора активности В1к указывает более низкое значение КА₀ при экспрессии СЭ69.

Таблица 3

- 64 025863

7	1.7	1300	760	220
8	5.8	2200	380	160
9	2.2	1000	450	210
10	1,4	1100	790	120
11	0.63	1000	1600	140
12	0.52	980	1900	140
13	0.94	1300	1400	120
14	1.0	1100	1100	78
15	0.41	1000	2400	59
16	2.1	2200	1000	220
17	1.7	1900	1100	по
18	2,3	740	320	130
19	1.6	1900	1200	140
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33	1.6 0.93 1.7 1.2 0.59 0.70 0.84 1.2 1.5 1.5 1.2 0.54 2.3 0.4	570 960 880 1000 >2000 4600 >2000 >2000 800 470 430 79 740 226	360 1000 520 830 >3400 6600 >2400 >1700 530 310 360 150 320 540	130 75 91 79 160 69 200 98 87 56 130 60 130 250
Сравнительный Пример 34	2.6	240	92	650
Сравнительный Пример 35	6.9	200	29

Соединения по настоящему изобретению, как иллюстрируется примерами с 1 по 33, сравнивали со сравнительными примерами 34 и 35, описанными патенте США 8084620 и \УО 2011/159857 соответственно, и, как было установлено, являются предпочтительными. Соединения по настоящему изобретению имеют неожиданное преимущество в сочетании ингибирующей активности в отношении Вйк и улучшенной киназной селективности ингибирующей активности в отношении Вйк по сравнению с ингибирующей активностью в отношении Йак2. Как показано в табл. 3, в представленных испытаниях примеры с 1 по 33 показывают удивительное преимущество сочетания эффективности ингибирующей активности в отношении Вйк и улучшенной киназной селективности ингибирующей активности в отношении Вйк по сравнению с ингибирующей активностью в отношении Йак2, которое характеризуется отношением значений Юзо для ингибирования Йак2/Вйк. Увеличенная селективность в отношении Вйк киназы по сравнению с Йак2 киназой выражается большим значением отношения значений Κ\₀ для ингибирования Йак2/Вйк. Примеры с 1 по 33 имели значения Κ.'₅₀ для ингибирования Вйк менее 6 нМ и отношения значений Κ\₀для ингибирования Йак2/Вйк 150 и больше. В отличие от этого, сравнительные примеры 34 и 35 имели значения Κ\₀ 2.6 и 6.9 нМ для ингибирования Вйк и соотношения значений Κ.'₅₀ для ингибирования Йак2/Вйк 92 и 29 соответственно.

Кроме того, соединения по настоящему изобретению, как проиллюстрировано на примерах от 1 до 33, также имели улучшенный потенциал в отношении ВСК-стимулированной экспрессии СЭ69 в анализе цельной крови в отличие от сравнительного примера 34. Как показано в табл. 3, в представленных испытаниях примеры от 1 до 33 показывали удивительное преимущество сочетания эффективности ингибирующей активности в отношении Вйк, улучшенной киназной селективности ингибирующей активности в отношении Вйк по сравнению с ингибирующей активностью в отношении Йак2 и улучшенный потенциал в отношении ВСК-стимулированной экспрессии СЭ69 в анализе цельной крови. Примеры с 1 по 33 имели значения Κ\₀ менее 6 нМ для ингибирования Вйк, соотношение значений Κ.'₅₀ для ингибирования Йак2/Вйк 150 и больше и значения Κ.'₅₀ для ингибирования СЭ69 250 нМ и меньше. В противоположность этому пример 34 имел значение Κ\₀ 2,6 нМ для ингибирования Вйк, соотношение значений Κ.'₅₀ для ингибирования Йак2/Вйк 92 и значения Κ\₀ для ингибирования СЭ69 650 нМ.

- 65 025863

Параметры элементарной ячейки кристаллических форм примера 3, определенные с помощью монокристальной дифрактометрии

Таблица 4

Форма	а (А)	Ь (А)	С (А)	а С)	β(°)	γ(°)	Объем	Пространственная группа	Молекулы/ асимметричная ячейка (Ζ')	Плотность, рассчитанная (г/см⁵)	Температура
5А-1	10.9201	11.5031	23.7434	90	99.2590	90	2943.7	Р2,	2	1.355	КТ
5В-2	11.5337	11.7474	23.2486	90	90.6120	90	3149.8	Р2,	2	1.340	203 К
5Е-2	11.1799	11.9237	22.9237	90	91.2000	90	3059.2	Р2,	2	1.315	203 К
8С-3	14.4552	11.8207	18.8382	90	93.829	90	3211.7	Р2,	2	1,296	203 К
5ϋ-3	14.5877	11.8964	19.2500	90	91.506	90	3339.5	Р2,	2	1.346	203 К
М2-4	11.1815	17.3429	31.6262	90	90	90	6132.9	Р2.2.2,	2	1.331	203 К
ΑΝ-5	12.9874	11.4967	20.3900	90	105.829	90	2929.0	Р2,	2	1.342	203 К
Н1-6	10.5755	11.5986	22.3697	90	90	90	2743.9	Ρ2ι2,2,	1	1.376	КТ
Е-7	9.5968	14.2611	21.6404	90	90	90	2961.7	Р2,2,2,	1	1.338	кт
5>Е-8	11.4019	11.4019	45.6578	90	90	90	5935.7	Ρ4ι2,2	1	1.376	203 К

КТ = комнатная температура

Таблица 5

Дробные атомные координаты для формы 8А-1 примера 3 при комнатной температуре

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
О1	0.8236	0.1800	0.1919	Н29	-0.0892	0.5178	-0.0396
02	0.5888	0.2021	0.2235	СЗО	0.4451	0.4402	-0.3342
03	0.0324	0.6009	-0.1143	С31	0.1424	0.7099	-0.0355
04	0.3464	0.2872	-0.1889	С32	-0.0483	0.5902	-0.0287
05	0.6503	0.0186	-0.1841	Об	0.1448	0.2717	0.6878
N1	0.3384	0.3498	0.0906	07	-0.1602	0.5390	0.6823
N2	0.4907	0.1462	-0.1900	08	0.4711	-0.0301	0.6158
N3	0.3883	0.2541	0.2099	09	-0.0937	0.3580	0.2766
N4	0.6273	0.1447	-0.2577	N5	0.1593	0.2113	0.4097
Р1	0.6959	0.2533	-0.3567	N6	0.0028	0.4150	0.6901
С1	0.5683	0.2426	-0.2839	N7	0.1054	0.3034	0.2900
С2	0.2055	0.4787	0.0211	N8	0.0263	0.2618	0.7584
сз	0.2782	0.3807	0.0370	СЗЗ	-0.1302	0.4102	0.7610
С4	0.1522	0.4914	-0,0355	С34	0,2952	0.0867	0.4801
С5	0.4001	0.2459	0.0866	С35	0.1443	0.5924	0.5604
С6	0.3005	0.2956	-0.0029	С36	0.0955	0.3131	0.4131
С7	0.3472	-0.0311	-0,0613	С37	0,0210	0.4335	0.5882
С8	0.4725	0.2953	-0.2608	С38	0.1129	0.3509	0.4712
С9	0.3804	0.2097	0.0294	С39	0.0733	0.4932	0.5467
СЮ	0.2458	0.3101	-0.0597	С40	0.2509	0.2545	0.5596
С11	0.6007	0.2942	-0.3326	С41	0.0505	0.4740	0.6440
С12	0.4714	0.1258	-0.0888	С42	0.1953	0.2667	0.5030
С13	0.5939	0.0977	-0.2090	С43	0.2194	0.1812	0.4637
С14	0.4200	0.0666	-0.0460	С44	0.0544	0.4511	0.4859
С15	0.4444	0.0844	-0.1444	С45	0.3499	0.0750	0.5368
С16	0.4878	0.2148	0.1912	С46	-0.1007	0.4603	0.7087
С17	0.5309	0.0834	0,1128	С47	-0.0217	0.5117	0.4432
С18	0.5149	0.0478	0.0566	С48	0.1692	0.6319	0.6159

- 66 025863

С19	0.7264	0.0827	-0.2808	С49	0.0218	0.3764	0.3704
С20	0.4391	0.1079	0.0138	С50	0.0065	0.3453	0.3086
С21	0.3233	-0.0708	-0.1167	С51	0.3261	0.1601	0.5753
С22	0.1725	0.4055	-0.0755	С52	-0.0378	0.4751	0.3865
С23	0.4737	0.1818	0.1303	С53	0.3755	-0.1406	0.5350
С24	0.5401	0.3901	-0.3569	С54	0.1236	0.5709	0.6583
С25	0.4288	0.2466	-0.2113	С55	-0.0619	0.3305	0.5743
С26	0.0708	0.5973	-0.0536	С56	0.4363	-0.0274	0.5548
С27	0.3714	-0.0122	-0.1586	С57	0.0635	0.3127	0.7111
С28	0.5534	0.2298	-0.0749	С58	-0.0637	0.3141	0.7856
С29	0.4119	0.3943	-0.2853	С59	-0.1804	0.3287	0.8630
С61	0.5601	-0.0082	0.5338	С60	0.0852	0.1502	0.7767
С62	-0.0939	0.2755	0.8375	НЗО	0.4092	-0.0406	0.6307
С63	-0.2462	0.4231	0.8384	Н31	0.1615	0.1723	0.3790
С64	-0.2213	0.4645	0.7866	Н32	0.1011	0.2842	0.2547
Р2	-0.0324	0.1855	0.8656	НЗЗ	0.1740	0.2955	0.3131
010	0.1182	0.2705	0.1683	Н34	0.3092	0.0313	0.4533
С65	0.0654	0.3781	0.1484	Н35	0.1753	0.6326	0.5318
011	-0.3278	0.3788	0.3082	Н36	0.2375	0.3097	0.5865
012	0.3739	0,3014	0.3316	Н37	-0.0629	0.5779	0.4527
С66	0.4261	0.1981	0.3502	Н38	0.2162	0.6987	0.6247
Η1	0.8619	0.2308	0.2148	Н39	0.3626	0.1527	0.6133
Н2	0.7472	0.1765	0.1967	Н40	-0.0892	0.5174	0.3589
НЗ	0.0906	0.6220	-0.1297	Н41	0.4328	-0.2032	0.5455
Н4	0.3374	0.3887	0.1214	Н42	0.3516	-0.1390	0.4944
Н5	0.3920	0.2718	0.2454	Н43	0.3032	-0.1519	0.5527
Н6	0.3196	0.2621	0.1867	Н44	0.1419	0.5950	0.6960
Н7	0.1928	0.5343	0.0481	Н45	-0.0631	0.3087	0.5352
Н8	0.3136	-0.0708	-0.0333	Н46	-0.1445	0.3499	0.5801
Н9	0.2588	0.2552	-0.0870	Н47	-0.0314	0.2667	0.5987
НЮ	0.5821	0.0399	0.1400	Н48	-0.1960	0.3012	0.8980
Н11	0.5562	-0.0184	0.0471	Н49	0.1472	0.1622	0.8098
Н12	0.6961	0.0583	-0.3191	Н50	0.1235	0.1184	0.7465
Н13	0.7516	0.0158	-0.2576	Н51	0.0235	0.0971	0.7859
Н14	0.7962	0.1336	-0.2806	Н52	0.5928	0.0666	0.5464
Н15	0.2748	-0.1368	-0.1257	Н53	0.5474	-0.0113	0.4930
Н16	0.1354	0.4138	-0.1134	Н54	0.6177	-0.0677	0.5491
Н17	0.5637	0.4220	-0.3895	Н55	-0.3061	0.4584	0.8563
Н18	0.3548	-0.0376	-0.1962	Н56	-0.2649	0.5278	0.7690
Н19	0.6113	0.2344	-0.1012	Н57	0.0729	0.2173	0.1548
Н20	0.5978	0.2227	-0.0368	Н58	0.0660	0.3846	0.1082
Н21	0.5035	0.2989	-0.0779	Н59	0.1128	0.4405	0.1680
Н22	0.3497	0.4290	-0.2687	Н60	-0.0185	0.3821	0.1556
Н23	0.4036	0.5045	-0.3517	Н61	-0.2515	0.3826	0.3034
Н24	0.2186	0.7106	-0.0509	Н62	-0.3662	0.3282	0.2853
Н25	0.1608	0.7135	0.0054	Н63	0.4084	0.3542	0.3511
Н26	0.0930	0.7757	-0.0497	Н64	0.3774	0.1355	0.3316
Н27	-0.1018	0.6535	-0.0430	Н65	0.4290	0.1920	0.3906
Н28	-0.0295	0.5949	0.0121	Н66	0.5088	0.1939	0.3414

- 67 025863

Таблица 6

Дробные атомные координаты для формы 8В-2 примера 3 при 203 К

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
N1	0.1020	0.3433	0.6995	нзз	0.3069	0.0707	0.0797
N2	0.1451	0.2098	0.7726	N6	0.0906	0.5778	-0.1977
С1	0.1521	0.0990	0.4257	N7	0.1038	0.3597	0.2184
N3	0.0666	0.1387	0.3886	N8	0.1832	0.4417	0.3028
О1	-0.0810	0.2000	0.3000	05	0.1472	0.1787	0.1924
02	-0.0617	0.4513	0.7014	Об	0.2653	0.4991	-0.1831
03	0.3455	-0.1959	0.4102	07	0.0530	0.5367	0.2460
04	0.2578	0.2270	0.6922	08	0.4604	-0.0547	0.0595
N4	-0.2237	0.3230	0.3182	Р2	0.3424	0.4176	0.3974
Р1	0.0929	0.1320	0.8861	сзз	0.1488	0.3750	-0.0188
С2	0.0515	0.2481	0.8039	С34	0.1851	0.4059	-0.0748
СЗ	0.0278	0.2425	0.4073	С35	0.1325	0.4955	-0.1052
С4	0.1352	0.3947	0.6451	С36	0.2185	0.2768	-0.0021
С5	0.0876	0.2715	0.4588	С37	0.0109	0.5268	-0.0219
С6	-0.0583	0.3127	0.3831	С38	0.2931	0.2545	-0.0484
С7	0.1161	0.4086	0.5430	С39	0.1671	0.5246	-0.1644
С8	-0.0236	0.3302	0.7808	С40	0.0613	0.4372	0.0086
С9	0.1733	0.2583	0.7207	С41	0.3037	0.1183	0.0472
СЮ	0.0002	0.3801	0.7252	С42	0.2346	0.2494	0.2775
С11	-0.0792	0.4148	0.4109	С43	0.0446	0.5543	-0.0770
С12	0.0235	0.2092	0.8599	С44	-0.1499	0.3417	0.1204
С13	0.1685	0.1791	0.4702	С45	0.0317	0.3707	0.1668
С14	-0.0210	0.4457	0.4609	С46	0.1598	0.2563	0.2269
С15	-0.1217	0.2756	0.3314	С47	0.0836	0.4073	0.1161
С16	0.0848	0.3536	0.5942	С48	0.0150	0.4051	0.0659
С17	0.2155	-0.0010	0.4222	С49	0.2951	0.1485	0.2878
С18	0.2117	0.4840	0.6463	С50	0.2252	0.2048	0.0453
С19	0.2403	0.5377	0.5954	С51	0.1092	0.4518	0.2562
С20	-0.1198	0.3713	0.8123	С52	-0.1004	0.3730	0.0688
С21	0.1925	0.4993	0.5443	С53	0.3741	0.1670	-0.0469
С22	0.2525	0.1567	0.5119	С54	0.3862	0.2340	0.3696
С23	0.3707	-0.1318	0.4616	С55	-0.0831	0.3399	0.1697
С24	0.2991	-0.0225	0.4636	С56	0.2060	0.4509	0.1168
С25	0.0011	0.2555	0.5954	С57	0.3254	0.3308	0.3601
С26	0.3168	0.0564	0.5080	С58	0.2470	0.3432	0.3137
С27	0.0614	0.3739	0.4866	С59	0.3800	0.0980	0.0016
С28	0.2163	0.1107	0.7897	С60	0.3714	0.1406	0.3341
С29	-0.0681	0.2470	0.8893	С61	0.4712	0.0047	0.0064
СЗО	-0.1424	0.3305	0.8659	С62	0.1864	0.5408	0.3416
С31	0.3385	-0.2087	0.5112	С63	0.5902	0.0588	0.0044

- 68 025863

С32	0.4991	-0.1042	0.4629	С64	0.4594	-0.0801	-0.0416
N5	0.2714	0.3332	-0.0921	09	0.6592	0.2259	0.2172
С65	0.5405	0.2502	0.2111	ою	0.4998	0.0747	0.1606
С66	0.5222	0.3739	0.2138	Н34	0.0070	0.6146	-0.0961
С67	0.4872	0.1973	0.1604	Н35	-0.2287	0.3217	0.1218
011	0.4252	0.3177	0.8040	Н36	0.2841	0.0856	0.2632
012	0.4975	0.3152	0.6851	Н37	0.1750	0.2162	0.0765
С68	0.5426	0.3068	0.7874	Н38	-0.1460	0.3725	0.0352
С69	0.5644	0.3351	0.7301	Н39	0.4239	0.1549	-0.0780
С70	0.5898	0.1924	0.8075	Н40	0.4390	0.2302	0.4007
013	0.3709	0.0244	0.6545	Н41	-0.1155	0.3181	0.2050
Η1	0.0414	0.1032	0.3581	Н42	0.2590	0.3881	0.1233
Η2	0.3817	-0.1684	0.3828	Н43	0.2151	0.5064	0.1476
НЗ	-0.2618	0.3012	0.2876	Н44	0.2227	0.4866	0.0802
Н4	-0.2521	0.3759	0.3402	Н45	0.4125	0.0728	0.3413
Н5	-0.1347	0.4650	0.3953	Н46	0.1296	0.5966	0.3288
Нб	-0.0372	0.5164	0.4780	Н47	0.2631	0.5747	0.3411
Н7	0.2017	-0.0531	0.3922	Н48	0.1687	0.5167	0.3803
Н8	0.2441	0.5086	0.6814	Н49	0.6017	0.1062	0.0382
Н9	0.2918	0.5997	0.5956	Н50	0.5959	0.1053	-0,0299
НЮ	-0.1682	0.4274	0.7960	Н51	0.6489	-0.0003	0.0036
Н11	0.2123	0.5355	0.5097	Н52	0.5198	-0.1372	-0.0379
Н12	0.2658	0.2082	0.5422	Н53	0.4668	-0.0414	-0.0782
Н13	0.0401	0.1886	0.6106	Н54	0.3842	-0.1166	-0.0398
Н14	-0.0267	0.2400	0.5566	Н55	0.6689	0.1560	0.2173
Н15	-0.0639	0.2745	0.6197	Н56	0.5679	0.0577	0.1687
Н16	0.3739	0.0412	0.5361	Н57	0.5018	0.2173	0.2452
Н17	0.2617	0.0856	0.7572	Н58	0.5503	0.4027	0.2503
Н18	0.1660	0.0492	0.8019	Н59	0.4401	0.3902	0.2096
Н19	0.2678	0.1320	0.8211	Н60	0.5642	0.4102	0.1828
Н20	-0.0830	0.2173	0.9261	Н61	0.4046	0.2166	0.1590
Н21	-0.2062	0.3574	0.8867	Н62	0.5232	0.2282	0.1258
Н22	0.2567	-0.2276	0.5084	Н63	0.3998	0.3805	0.7933
Н23	0.3538	-0.1698	0.5473	Н64	0.4554	0.2594	0.6917
Н24	0.3842	-0.2779	0.5096	Н65	0.5852	0.3644	0.8105
Н25	0.5434	-0.1737	04578	Н66	0.5784	0.4173	0.7298
Н26	0.5195	-0.0700	0.4996	Н67	0.6391	0.2994	0.7211
Н27	0.5167	-0.0513	0.4321	Н68	0.5471	0.1674	0.8410
Н28	0,3067	0.3359	-0.1249	Н69	0.6712	0.2002	0.8176
Н29	0.1084	0.5953	-0.2328	Н70	0.5810	0.1369	0.7769
нзо	0.0225	0.5951	-0.1844	Н71	0.3368	0.0852	0.6659
Н31	0.4940	-0.0185	0.0854	Н72	0.4340	0.0425	0.6372
Н32	-0.0480	0.5697	-0.0045	-	-	-	-

- 69 025863

Таблица 7

Дробные атомные координаты для формы 8Е-2 примера 3 при 203 К

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
N1	0.2690	0.3492	-0.0891	Р1	0.3514	0.4413	0.4010
С1	0.1409	0.3867	-0.0160	Р2	0.0923	0.1460	0.8866
С2	0.2150	0.2946	0.0017	N5	0.0597	0.1574	0.3867
СЗ	-0.0030	0.5370	-0.0211	N6	-0.2480	0.3343	0.3203
С4	0.1782	0.4192	-0.0720	N7	0.1121	0.3629	0.7002
С5	0.0480	0.4486	0.0102	N8	0.1541	0.2292	0.7742
С6	0.2943	0.2735	-0.0443	05	0.3335	-0.1808	0.4063
С7	0.1273	0.5093	-0.1029	Об	-0.1023	0.2149	0.3000
С8	0.0357	0.5670	-0.0761	07	-0.0549	0.4703	0.7013
С9	0.3179	0.1482	0.0555	08	0.2741	0.2492	0.6957
СЮ	0.3830	0.1938	-0.0416	сзз	0.0207	0.2604	0.4056
С11	0.2290	0.2281	0.0516	С34	0.1493	0.1188	0.4237
С12	0.3959	0.1303	0.0090	С35	0.0870	0.2890	0.4570
С13	0.4980	0.0463	0.0143	С36	-0.0687	0.3291	0.3821
О1	0.5032	0.0008	0.0728	С37	-0.0872	0.4313	0.4096
С14	0.6182	0.1082	0.0074	С38	-0.0219	0.4623	0.4599
С15	0.4818	-0.0461	-0.0301	С39	0.0627	0.3909	0.4852
С16	0.1734	0.5410	-0.1606	С40	0.2573	0.1731	0.5105
С17	0.0709	0.4218	0.1197	С41	0.2117	0.0177	0.4206
С18	0.0001	0.4178	0.0679	С42	0.1686	0.1974	0.4682
С19	0.0173	0.3856	0.1709	С43	0.2972	-0.0053	0.4623
С20	-0.1192	0.3851	0.0707	С44	0.3189	0.0738	0.5066
С21	-0.1701	0.3544	0.1228	С45	0.3672	-0.1156	0.4603
С22	0.1955	0.4681	0.1209	С46	0.3343	-0.1831	0.5129
С23	-0.1009	0.3536	0.1733	С47	0.4991	-0.0954	0.4605
N2	0,1014	0.5947	-0.1968	С48	-0.1409	0.2899	0.3313
02	0.2802	0.5205	-0.1728	С49	0.1457	0.4127	0.6450
N3	0.0935	0.3757	0.2230	С50	0.0935	0.3708	0.5937
N4	0.1820	0.4622	0.3063	С51	0.1985	0.5167	0.5425
С24	0.1004	0.4683	0.2597	С52	0.1215	0.4256	0.5414
С25	0.2392	0.2734	0.2804	С53	0.2234	0.5023	0.6459
С26	0.1552	0.2765	0.2299	С54	0.2494	0.5552	0.5943
С27	0.3069	0.1771	0.2886	С55	0.0102	0.2721	0.5958
С28	0.2503	0.3665	0.3170	С56	0.1861	0.2775	0.7223
С29	0,4041	0.2624	0.3710	С57	0.0544	0.2641	0.8045
СЗО	0.3352	0.3559	0.3624	С58	-0.0212	0.3473	0.7807
С31	0.3902	0.1720	0.3344	С59	0.0070	0.3983	0.7252
С32	0.1900	0.5626	0.3432	С60	0.0238	0.2235	0.8587
03	0.0382	0.5511	0.2507	С61	-0.1203	0.3859	0.8101
04	0.1433	0.2003	0.1959	С62	-0.0733	0.2600	0.8877
С63	-0.1479	0.3414	0.86397	Н31	0.3937	-0.1903	0.3863
С64	0.2274	0.1319	0.7926	Н32	-0.1449	0.4808	0.3941
09	0.6211	0.2207	0.2230	НЗЗ	-0.0356	0.5328	0.4768
С65	0.5282	0.2668	0.1881	Н34	0.2742	0.2237	0.5410
С66	0.5093	О.3861^-	0.2061	Н35	0.1952	-0.0336	0.3904
010	0.3868	0.0457	0.6545	Н36	0,3787	0.0581	0.5348

- 70 025863

011	0.5123	0.3562	0.6907	Н37	0.3623	-0.2596	0.5084
С67	0.5352	0.3390	0.7931	Н38	0.2480	-0.1831	0.5166
С68	0.5476	0.3657	0.7410	Н39	0.3713	-0.1504	0.5475
012	0.4994	0.3218	0.8483	Н40	0.5239	-0.0604	0.4969
Η1	0.3045	0.3516	-0.1225	Н41	0.5187	-0.0464	0.4284
Η2	-0.0655	0.5780	-0.0044	Н42	0.5406	-0.1663	0.4562
НЗ	-0.0011	0.6276	-0.0956	Н43	0.2166	0.5531	0.5075
Н4	0.3266	0.1051	0.0896	Н44	0.2583	0.5271	0.6813
Н5	0.4339	0.1824	-0.0732	Н45	0.3015	0.6171	0.5942
Н6	0.1770	0.2381	0.0829	Н46	0.0552	0.2052	0.6061
Н7	0.5636	-0.0392	0.0768	Н47	-0.0283	0.2619	0.5579
Н8	0.6254	0.1670	0.0365	Н48	-0.0502	0.2855	0.6248
Н9	0.6211	0.1411	-0.0312	Н49	-0.1687	0.4424	0.7935
НЮ	0.6837	0.0555	0.0125	Н50	-0.0900	0.2296	0.9244
Н11	0.5497	-0.0966	-0.0277	Н51	-0.2158	0.3658	0.8839
Н12	0.4762	-0.0137	-0.0688	Н52	0.2811	0.1118	0.7616
Н13	0.4091	-0.0872	-0.0223	Н53	0.1755	0.0689	0.8008
Н14	-0.1663	0.3840	0.0363	Н54	0.2738	0.1511	0.8273
Н15	-0.2514	0.3341	0.1238	Н55	0.6455	0.1622	0.2076
Н16	0.2522	0.4074	0.1268	Н56	0.4546	0.2238	0.1931
Н17	0.2041	0.5218	0.1524	Н57	0.5496	0.2637	0.1470
Н18	0.2110	0.5049	0.0841	Н58	0.4941	0.3890	0.2475
Н19	-0.1339	0.3316	0.2088	Н59	0.4412	0.4168	0.1846
Н20	0.1273	0.6172	-0.2303	Н60	0.5803	0.4296	0.1978
Н21	0.0277	0.6079	-0.1873	Н61	0.4585	0.0608	0.6441
Н22	0.2966	0.1156	0.2634	Н62	0.3532	0.1059	0.6667
Н23	0.4610	0.2601	0.4016	Н63	0.4440	0.3268	0.6901
Н24	0.4365	0.1070	0.3404	Н64	0.6397	0.3409	0.7359
Н25	0.1572	0.5463	0.3811	Н65	0.5425	0.4558	0.7453
Н26	0.1448	0.6232	0.3249	Н66	0.6027	0.3805	0.8196
Н27	0.2732	0.5848	0.3479	Н67	0.4475	0.3641	0.8070
Н28	0.0321	0.1221	0.3561	Н68	0.5447	0.2493	0.7977
Н29	-0.2911	0.3104	0.2909	Н69	0.5039	0.3782	0.8676
НЗО	-0.2750	0.3873	0.3425	-	-	-	-

- 71 025863

Таблица 8

Дробные атомные координаты для формы 8С-3 примера 3 при 203 К

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
N1	0.1570	0.4213	0.1942	Н31	0.8388	0.3944	1.0532
N2	-0.0315	0.2317	0.6493	N5	0.2102	0.5634	0.9042
N3	0.1903	0.4273	0.3190	N6	0.0593	0.5573	0.9433
N4	-0.2863	0.4242	0.6606	N7	0.6971	0.3629	0.9849
01	0.0906	0.5505	0.2631	05	0.7930	0.5301	1.1812
02	-0.1967	0.2858	0.7084	Об	0.1619	0.6931	0.9830
03	0.1916	-0.0998	0.6914	07	0.6951	0.1102	0.7641
04	0.2912	0.3088	0.3759	08	0.2650	0.4290	0.8319
Р1	0.1868	0.3082	0.0627	N8	0.8455	0.4206	1.0964
С1	0.0225	0.3653	0.5762	Р2	-0.1174	0.4467	0.9306
С2	0.0168	0.4667	0.5376	сзз	0.1441	0.6086	0.9460
сз	-0.0520	0.3337	0.6179	С34	0.5868	0.4989	0.9715
С4	0.1428	0.4718	0.2587	С35	0.6504	0.2448	0.8780
С5	0.2164	0.3292	0.1899	С36	0.5710	0.4167	0.9142
С6	-0.1313	0.4018	0.6225	С37	0.5080	0.4060	0.8554
С7	0.2640	0.2867	0.2506	С38	0.7036	0.5260	1.0714
С8	0.1745	0.4839	0.3863	С39	0.6570	0.6256	1.0860
С9	-0.0606	0.5343	0.5434	С40	0.0419	0.4580	0.9038
СЮ	-0.1324	0.5027	0.5846	С41	0.5416	0.6001	0.9882
С11	0.1774	0.2547	0.5587	С42	0.2994	0.6226	0.9038
С12	0.2520	0.3394	0.3195	С43	0.6416	0.3354	0.9250
С13	0.0540	0.1946	0.6299	С44	0.3059	0.7128	0.8585
С14	0.1046	0.4447	0.4266	С45	0.1117	0.4091	0.8666
С15	0.1006	0.0953	0.6492	С46	0.4640	0.7342	0.9012
С16	0.1865	0.0756	0.6231	С47	0.5177	0.3168	0.8092
С17	0.2236	0.1560	0.5784	С48	0.3607	0.4829	0.9962
С18	0.3225	0.1931	0.2478	С49	0.3897	0.7698	0.8577
С19	-0.2066	0.3654	0.6673	С50	0.4577	0.6388	0.9454
С20	0.2307	0.5743	0.4063	С51	0.5794	0.6627	1.0460
С21	0.0449	0.3462	0.4013	С52	0.2015	0.4632	0.8646
С22	0.1469	0.5952	0.5101	С53	0.3728	0.5827	0.9479
С23	0.0911	0.5015	0.4906	С54	0.5886	0.2366	0.8194
С24	0.0904	0.2761	0.5848	С55	0.5985	0.1372	0.7680
С25	0.2297	0.2717	0.1249	С56	0.7845	0.4917	1.1194
С26	0.2401	-0.0335	0.6421	С57	0.5557	0.0311	0.7987
С27	0.2159	0.6310	0.4687	С58	0.0973	0.3077	0.8283
С28	0.2850	0.1805	0.1224	С59	0.5559	0.1598	0.6932
С29	0.3313	0.1391	0.1829	С60	-0.0120	0.6151	0.9827
СЗО	0.3371	-0.0081	0.6733	С61	-0.0587	0.3033	0.8590
С31	0.2432	-0.1074	0.5760	С62	-0.0437	0.4022	0.8984
С32	0.1099	0.4735	0.1320	С63	0.0122	0.2563	0.8247
09	0.0354	0.7400	0.8156	С64	0.6671	0.4628	1.0129
С65	0.0216	0.6686	0.7680	Н32	0.6976	0.1909	0.8862
С66	-0.0656	0.6040	0.7608	НЗЗ	0.4597	0.4586	0.8472
С67	0.0918	0.6435	0.7156	Н34	0.6795	0.6699	1.1249
ою	0.4880	0.5365	0.6404	Н35	0.2546	0.7353	0.8286
С68	0.4148	0.4904	0.6227	Н36	0.5202	0.7742	0.9014
С69	0.3315	0.4914	0.6617	Н37	0.4752	0.3096	0.7694
С70	0.4115	0.4153	0.5579	Н38	0.3054	0.4936	1.0219
он	0.6355	0.6043	0.5633	Н39	0.4144	0.4767	1.0297
012	0.2797	0.2536	0.7414	Н40	0.3546	0.4143	0.9679
Н1	-0.0669	0.1956	0.6772	Н41	0.3956	0.8325	0.8276
Н2	-0.3322	0.4059	0.6859	Н42	0.5514	0.7312	1.0578
нз	-0.2919	0.4807	0.6310	Н43	0.5614	-0.0316	0.7661
Н4	0.1973	-0.0701	0.7314	Н44	0.4907	0.0448	0.8054

- 72 025863

Н5	-0.0646	0.6034	0.5188	Н45	0.5878	0.0129	0.8441
Н6	-0.1836	0.5513	0.5868	Н46	0.1463	0.2752	0.8050
Н7	0.2038	0.3068	0.5282	Н47	0.5848	0.2261	0.6737
Н8	0.0743	0.0426	0.6792	Н48	0.4898	0.1730	0.6950
Н9	0.2821	0.1424	0.5612	Н49	0.5659	0.0948	0.6632
НЮ	0.3556	0.1666	0.2891	Н50	0.0148	0.6815	1.0063
Н11	0.2785	0.5969	0.3779	Н51	-0.0346	0.5639	1.0179
Н12	0.0219	0.3588	0.3525	Н52	-0.0631	0.6378	0.9497
Н13	-0.0070	0.3392	0.4311	Н53	-0.1175	0.2691	0.8559
Н14	0.0815	0.2773	0.4042	Н54	0.0027	0.1887	0.7989
Н15	0.1369	0.6342	0.5524	Н55	-0.0992	0.6139	0.8033
Н16	0.2528	0.6936	0.4826	Н56	-0.0519	0.5245	0.7545
Н17	0-2920	0.1448	0.0784	Н57	-о.юзз	0.6314	0.7197
Н18	0.3689	0.0745	0.1805	Н58	0.1290	0.7103	0.7087
Н19	0.3338	0.0421	0.7138	Н59	0.0605	0.6212	0.6706
Н20	0.3723	0.0280	0.6375	Н60	0.1316	0.5822	0.7335
Н21	0.3674	-0.0781	0.6885	Н61	0.3302	0.4245	0.6914
Н22	0.2723	-0.1792	0.5889	Н62	0.2774	0.4920	0.6283
Н23	0.2788	-0.0695	0.5412	Н63	0.3313	0.5585	0.6913
Н24	0.1806	-0.1207	0.5559	Н64	0.4545	0.4436	0.5247
Н25	0.0724	0.5362	0.1468	Н65	0.3492	0.4154	0.5353
Н26	0.0704	0.4181	0.1070	Н66	0.4287	0.3389	0.5720
Н27	0.1555	0,5011	0.1007	Н67	0.5897	0,5822	0.5867
Н28	0.7439	0.3233	1.0024	Н68	0.6577	0.6661	0.5815
Н29	0.7221	0.1653	0.7476	Н69	0.2607	0.1931	0.7610
НЗО	0.8928	0.3998	1.1244	Н70	0.2753	0.3098	0.7699

Таблица 9

Дробные атомные координаты для формы 8Ό-3 примера 3 при 203 К

- 73 025863

С27	0.2780	0.1563	0.1099	С63	0.1938	0.4164	0.8800
С28	0.3260	0.1144	0.1673	07	0.2558	0.3752	0.8471
С29	0.3129	0.1632	0.2314	08	0.1670	0.6400	1.0005
сзо	0.2511	0.2525	0.2388	С64	-0.0123	0.5867	0.9965
С31	0.2370	0.2991	0.3072	Р2	-0.1297	0.4555	0.9291
03	0.2776	0.2680	0.3603	09	-0.0315	0.6352	0.8142
04	0.0646	0.4983	0.2621	С65	0.0467	0.6974	0.7957
С32	0.0891	0.4341	0.1312	С66	0.1015	0.6235	0.7479
Ρ1	0.1750	0.2791	0.0583	С67	0.0324	0.5369	0.7208
N5	0.7040	0.3249	0.9806	С68	-0.0545	0.5713	0.7529
сзз	0.6498	0.2923	0.9241	010	0.3335	0.6673	0.6781
С34	0.6618	0.2025	0.8794	С69	0.4290	0.6547	0.6901
С35	0.5996	0.1879	0.8240	С70	0.4507	0.5461	0.7165
С36	0.5262	0.2635	0.8159	С71	0.3638	0.4820	0.7010
С73	0.4496	0.4500	0.4861	С72	0.3053	0.5567	0.6543
ОН	0.5228	0.4477	0.5332	Н40	0.5814	0.0441	0.6734
С74	0.4039	0.3419	0.4916	Н41	0.8483	0.4767	1.1939
С75	0.4679	0.2645	0.5269	Н42	0.7643	0.5489	1.1832
С76	0.5347	0.3365	0.5613	Н43	0.2516	0.6888	0.8487
012	0.2870	0.1954	0.7523	Н44	0.3902	0.7866	0.8443
013	0.3474	0.0553	0.3973	Н45	0.5162	0.7225	0.9085
Н1	-0.0511	0.1471	0.6828	Н46	0.3150	0.4382	1.0324
Н2	0.0937	0.0021	0.6756	Н47	0.4198	0.4092	1.0229
НЗ	0.2860	0.1111	0.5450	Н48	0.3448	0.3610	0.9699
Н4	0.2007	0.2701	0.5173	Н49	-0.1420	0.2817	0.8586
Н5	-0.0773	0.5459	0.5205	Н50	-0.0273	0.1784	0.8083
Н6	-0.1860	0.4910	0.5988	Н51	0.1247	0.2376	0.8186
Н7	0.2210	-0.1974	0.6727	Н52	0.0188	0.6398	1.0272
Н8	0.2925	-0.2052	0.5718	Н53	-0.0466	0.5335	1.0238
Н9	0.2847	-0.0969	0.5241	Н54	-0.0541	0.6268	0.9652
НЮ	0.1948	-0.1583	0.5485	Н55	0.0835	0.7171	0.8372
Н11	0.3500	0.0056	0.6949	Н56	0.0283	0.7670	0.7719
Н12	0.3808	0.0155	0.6168	Н57	0.1524	0.5871	0.7733
Н13	0.3893	-0.1010	0.6563	Н58	0.1262	0.6675	0.7096
Н14	-0.3110	0.3535	0.7204	Н59	0.0268	0.5392	0.6700
Н15	-0.2788	0.4320	0.6645	Н60	0.0502	0.4609	0.7354
Н16	0.2363	0.6468	0.4684	Н61	-0.0912	0.6170	0.7203
Н17	0.2582	0.5518	0.3642	Н62	-0.0903	0.5048	0.7651
Н18	0.1247	0.5843	0.5437	Н63	0.4506	0.7117	0.7235
Н19	-0.0080	0.3181	0.3622	Н64	0.4609	0.6666	0.6466
Н20	-0.0047	0.2756	0.4402	Н65	0.4647	0.5485	0.7666
Н21	0.0709	0.2352	0.3881	Н66	0.5027	0.5131	0.6926
Н22	0.2865	0.1243	0.0659	Н67	0.3321	0.4653	0.7440
Н23	0.3667	0.0538	0.1628	Н68	0.3774	0.4111	0.6775
Н24	0.3458	0.1364	0.2706	Н69	0.3190	0.5453	0.6052
Н25	0.0511	0.4944	0.1483	Н70	0.2398	0.5441	0.6612
Н26	0.0507	0.3786	0.1076	Н71	0.4713	0.4612	0.4387
Н27	0.1327	0.4644	0.0989	Н72	0.4075	0.5113	0.4970
Н28	0.7532	0.2902	0.9956	Н73	0.3868	0.3132	0.4454
Н29	0.7110	0.1524	0.8863	Н74	0.3480	0.3497	0.5185
НЗО	0.4839	0.2530	0.7788	Н75	0.4362	0.2180	0.5608
Н31	0.4645	0.4025	0.8541	Н76	0.4974	0.2152	0.4933
Н32	0.5421	0.6785	1.0576	Н77	0.5254	0.3370	0.6115
НЗЗ	0.6708	0.6254	1.1197	Н78	0.5969	0.3093	0.5530
Н34	0.7350	0.1077	0.7576	Н79	0.2609	0.2108	0.7129
Н35	0.5709	-0.0795	0.7758	Н80	0.2777	0.2494	0.7810
Н36	0.4958	0.0007	0.8071	Н81	0.3954	0.0411	0.4226
Н37	0.5851	-0.0301	0.8517	Н82	0.3403	0.1269	0.3936
Н38	0.6074	0.1726	0.6823	-			-

- 74 025863

Таблица 10

Дробные атомные координаты для формы М2-4 примера 3 при 203 К

N1	0.5372	0.4291	0.1019	С32	0.9325	-0.0002	0.1354
N2	0.5726	0.5600	0.0850	N5	0.4286	-0.0679	0.1199
N3	0.6996	0.0893	-0.0280	N6	0.5674	-0.1011	0.0667
N4	0.5416	0.1538	-0.1474	N7	0.4644	0.1942	0.3210
01	0.6733	0.3589	0.1382	N8	0.7855	0.1073	0.3824
02	0.4046	0.4982	0.0630	05	0.0087	0.3111	0.2331
03	0.6342	0.0545	-0.1153	Об	0.2677	0.0059	0.1067
04	1.0378	0.0176	0.0699	07	0.6582	0.2053	0.3727
Р1	0.7255	0.6914	0.0979	08	0.5853	-0.1473	0.1332
С1	0.5589	0.1621	0.0046	Р2	0.6201	-0.0991	-0.0223
С2	0.6463	0.1387	0.0356	СЗЗ	0.1846	0.2541	0.2669
сз	0.7323	0.0946	0.0139	С34	0.5188	0.1246	0.3138
С4	0.6422	0.4216	0.1244	С35	0.4896	0.0118	0.2693
С5	0.5320	0.1444	-0.0718	С36	0.2813	0.2601	0.2944
С6	0.4303	0.2531	0.0462	С37	0.3916	-0.0268	0.0484
С7	0.5955	0.1301	-0.0344	С38	0.4965	-0.0642	0.0361
С8	0.8337	0.0653	0.0339	С39	0.3975	-0.0728	0.1644
С9	0.3932	0.2216	-О.ОЗОЗ	С40	0.4262	-0.0334	0.2359
СЮ	0.8501	0.0815	0.0766	С41	0.6548	0.0200	0.3192
С11	0.4690	0.3595	0.0923	С42	0.4566	-0.0253	0.1931
С12	0.4288	0.1889	-0.0685	С43	0.3635	0.2005	0.2959
С13	0.4935	0.3219	0.0544	С44	0.3174	0.0094	0.0191
С14	0.4983	0.4971	0.0822	С45	0.3554	-0.0278	0.0930
С15	0.3461	0.2264	0.0749	С46	0.6216	0.0934	0.3325
С16	0.7623	0.1235	0.0988	С47	0.3524	0.1339	0.2711
С17	0.4586	0.2101	0.0065	С48	0.5217	-0.0634	-0.0072
С18	0.3857	0.3326	0.1209	С49	0.3406	-0.0863	0.2481
С19	0.3236	0.2655	0.1119	С50	0.5909	-0.0201	0.2887
С20	0.7526	0.6232	0.1152	С51	0.3456	0.0090	-0.0228
С21	0.5738	0.1130	-0.1130	С52	0.5310	-0.1085	0.1074
С22	0.6768	0.5593	0.1095	С53	0.4526	0.0844	0.2826
С23	0.7134	0.4916	0.1297	С54	0.4490	-0.0283	-0.0361
С24	0.6617	0.1520	0.0790	С55	0.2568	0.1284	0.2432
С25	0.8171	0.4875	0.1533	С56	0.6899	0.1387	0.3640
С26	0.9628	0.0558	0.0999	С57	0.1745	0.1888	0.2411
С27	0.5853	0.3524	0.0242	С58	0.3125	-0.1258	0.1764
С28	0.8546	0.6191	0.1387	С59	0.0875	0.3163	0.2685
С29	0.8880	0.5516	0.1582	С60	0.2825	-0.1321	0.2190
СЗО	1.0293	0.1252	0.1175	С61	0.5506	0.0308	0.1786
С31	0-5394	0-6268	0.0584	С62	0.0172	0.3085	0.3092
С63	0.1406	0.3971	0.2645	Н31	-0.0321	0.2713	0.2351
С64	0.6840	-0.1358	0.0557	Н32	0.2906	0.3038	0.3116
09	0.6489	0.2289	0.1856	НЗЗ	0.7226	-О.ООЗЗ	0.3313
С65	0.5443	0.2369	0.2097	Н34	0.2474	0.0343	0.0283
010	0.8593	0.1883	0.2209	Н35	0.3215	-0.0911	0.2769
С66	0.8410	0.1261	0.2471	Н36	0.6160	-0.0698	0.2808
011	0.7082	0.3027	0.4362	Н37	0.2956	0.0337	-0.0425
С67	0.6814	0.2742	0.4743	Н38	0.4689	-0.0294	-0.0650
012	0.9373	0.2494	0.4177	Н39	0.2477	0.0847	0.2259
С68	0.9929	0.3124	0.4391	Н40	0.1104	0.1855	0.2219
Н1	0.7386	0.0640	-0.0473	Н41	0.2752	-0.1572	0.1562
Н2	0.5640	0.1387	-0.1724	Н42	0.2234	-0.1672	0.2278
НЗ	0.4985	0.1952	-0.1446	Н43	0.6220	0.0028	0.1703
Н4	1.1052	0.0112	0.0803	Н44	0.5699	0.0659	0.2015
Н5	0.8895	0.0353	0.0189	Н45	0.5207	0.0599	0.1546
Н6	0.3236	0.2520	-0.0294	Н46	-0.0431	0.3487	0.3106
Н7	0.3819	0.1972	-0.0927	Н47	0.0710	0.3134	0.3331
Н8	0.3038	0.1808	0.0689	Н48	-0.0214	0.2584	0.3101
Н9	0.7727	0.1323	0.1279	Н49	0.1799	0.4022	0.2373
НЮ	0.3714	0.3595	0.1462	Н50	0.1983	0.4053	0.2869
Н11	0.2662	0.2468	0.1310	Н51	0.0772	0.4351	0.2667
Н12	0.6043	0.1799	0.0944	Н52	0.7256	-0.1503	0.0814

- 75 025863

Н13	0.8394	0.4407	0.1661	Н53	0.7317	-0.0987	0.0401
Н14	0.5698	0.4065	0.0187	Н54	0.6712	-0.1812	0.0384
Н15	0.5812	0.3238	-0.0021	Н55	0.6553	0.2663	0.1693
Н16	0.6644	0.3467	0.0364	Н56	0.5545	0.2109	0.2366
Н17	0.9028	0.6632	0.1416	Н57	0.4775	0.2142	0.1947
Н18	0.9582	0.5494	0.1745	Н58	0.5286	0.2912	0.2146
Н19	1.1035	0.1082	0.1305	Н59	0.7953	0.2007	0.2095
Н20	0.9801	0.1507	0.1385	Н60	0.9150	0.0973	0.2499
Н21	1.0471	0.1609	0.0948	Н61	0.7798	0.0930	0.2350
Н22	0.4734	0.6127	0.0400	Н62	0.8152	0.1440	0.2746
Н23	0.6076	0.6420	0.0413	Н63	0.6689	0.2796	0.4178
Н24	0.5157	0.6695	0.0763	Н64	0.7099	0.3093	0.4960
Н25	0.8947	-0.0457	0.1237	Н65	0.7195	0.2244	0.4778
Н26	0.8782	0.0245	0.1551	Н66	0.5953	0.2684	0.4768
Н27	1.0052	-0.0149	0.1500	Н67	0.8638	0.2544	0.4197
Н28	0.4895	0.2290	0.3387	Н68	0.9414	0.3299	0.4619
Н29	0.8263	0.1335	0.4008	Н69	1.0060	0.3543	0.4193
НЗО	0.8068	0.0604	0.3760	Н70	1.0691	0.2959	0.4506

Т аблица 11

Дробные атомные координаты для формы АИ-5 примера 3 при 203 К

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
N1	0.9924	0.6814	0.0947	С29	0.4287	0.2860	0.2241
С1	1.0444	0.8258	0.1951	СЗО	0.2467	0.5974	0.7121
С2	1.0161	0.7433	0.1389	031	-0.1039	0.0566	0.5110
N2	0.2704	0.1624	0.4096	С32	0.3565	0.2030	0.1964
N3	-0.0856	0.3512	0.6256	СЗЗ	0.4392	0.3250	0.2896
N4	0.3894	0.3101	0.3969	034	0.4583	0.4081	0.4282
N5	-0.3954	0.1970	0.5396	Р1	0.5134	0.4072	0.3147
01	-0.2963	0.3045	0.6238	N6	0.2289	0.5532	0.0900
02	0.1787	0.0573	0.3196	N7	0.5870	0.3648	-0.1210

03	0.3553	0.5578	0.7487	N8	0.2074	0.5299	0.1999
04	0.3596	0.2732	0.4995	05	0.3183	0.6700	0.1776
СЗ	0.3036	0.1895	0.2999	Об	0.1487	0.1663	-0.2511
04	0.2207	0.1026	0.4556	07	0.1375	0.4413	0.0027
С5	0.0214	0.3845	0.6351	С35	0.6077	0.4649	-0.0814
С6	0.1428	-0.0166	0.5477	С36	0.3230	0.2303	-0.1785
С7	0.1268	0.1400	0.4661	С37	0.2557	0.1306	-0.2138
С8	0.0878	0.0774	0.5149	С38	0.3687	0.5793	0.0337
С9	0.2336	0.4103	0.6439	С39	0.1457	0.4328	0.1807
СЮ	0.3783	0.2770	0.3299	С40	0.4083	0.6392	-0.0146
С11	0.3417	0.2516	0.4390	С41	0.2664	0.3150	-0.1487
С12	0.0763	0.4797	0.6715	С42	0.1202	0.3970	0.1125
С13	0.0710	0.2412	0.4289	С43	0.4283	0.2447	-0.1714
С14	0.0696	0.3046	0.6030	С44	0.3527	0.7332	-0,0501
С15	-0.0111	0.2197	0.5704	С45	0.4300	0.4229	-0.1029
С16	0.2697	0.6789	0.6598	С46	0.5103	0.5026	-0.0711
С17	-0.2038	0.1910	0.5624	С47	0.4308	0.4781	0.0734
С18	0.1798	0.3155	0.6093	С48	0.7037	0.5215	-0.0556
С19	0.2459	0.1309	0.3417	С49	0.1023	0.3670	0.2238
С20	-0.1068	0.2516	0.5868	С50	0.2162	0.7098	0.0072
С21	-0.0097	0.1194	0.5318	С51	0.6074	0.6611	-0.0035
С22	0.1846	0.4911	0.6758	С52	0.2327	0.0386	-0.1643
С23	0.2767	0.0071	0.4870	С53	0.0612	0.2994	0.0903
С24	0.2368	-0.0556	0.5365	С54	0.3045	0.0704	-0.2675
С25	-0.3011	0.2350	0.5771	С55	0.4819	0.3364	-0.1343
С26	0.2975	0.1513	0.2349	С56	0.5106	0.6026	-0.0292
С27	0.1973	0.6564	0.7593	С57	0.7010	0.6216	-0.0164
С28	-0.1980	0.0929	0.5244	С58	0.2553	0.7676	-0.0395
С59	0.3212	0.4044	-0.1104	Н24	-0.2605	0.0489	0.5069
С60	0.0456	0.2675	0.2020	Н25	0.4722	0.3176	0.1985
С61	0.2545	0.5879	0.1583	Н26	-0.1042	-0.0131	0.4870

- 76 025863

С62	0.2729	0.6182	0.0426	Н27	0.3467	0.1807	0.1508
С63	0.1595	0.4650	0.0629	Н28	0.5324	0.3890	0.4318
С64	0.0194	0.2342	0.1342	Н29	0.4499	0.4229	0.4733
С65	0.2320	0.5767	0.2708	НЗО	0.4380	0.4770	0.4002
Р2	0.1269	0.3898	0.2910	Н31	0.6344	0.3260	-0.1352
С66	0.8052	0.4782	-0.0676	Н32	0.1523	0.2136	-0.2812
08	0.8000	0.4141	-0.1178	НЗЗ	0.1921	0.3084	-0.1556
N9	0.8982	0.5101	-0.0263	Н34	0.4653	0.1918	-0.1920
N10	-0.4881	0.0375	0.4096	Н35	0.3808	0.7741	-0.0813
С67	-0.5475	-0.0890	0.2994	Н36	0.4027	0.4056	0.0513
С68	-0.5145	-0.0213	0.3629	Н37	0.4236	0.4788	0.1196
Η1	0.9974	0.8929	0.1843	Н38	0.5057	0.4852	0.0746
Н2	1.1180	0.8506	0.2021	Н39	0.1510	0.7326	0.0150
НЗ	1.0364	0.7890	0.2362	Н40	0.6092	0.7284	0.0229
Н4	-0.1316	0.3880	0.6419	Н41	0.1960	0.0751	-0.1342
Н5	-0.4539	0.2212	0.5481	Н42	0.2997	0.0054	-0.1376
Н6	-0.3985	0.1480	0.5067	Н43	0.1880	-0.0224	-0.1902
Н7	0.3557	0.5357	0.7875	Н44	0.0488	0.2761	0.0447
Н8	0.1152	-0.0565	0.5794	Н45	0.2533	0.0152	-0,2940
Н9	0.3062	0.4204	0.6458	Н46	0.3696	0.0300	-0.2441
НЮ	0.0412	0.5340	0.6923	Н47	0.3205	0.1288	-0.2976
Н11	0.1218	0.3039	0.4311	Н48	0.7648	0.6631	0.0017
Н12	0.0156	0.2664	0.4494	Н49	0.2168	0.8300	-0.0643
Н13	0.0389	0.2202	0.3817	Н50	0.2843	0.4550	-0.0885
Н14	0.3070	0.7471	0.6825	Н51	0.0239	0.2208	0.2336
Н15	0.2029	0.7025	0.6279	Н52	-0.0250	0-1698	0.1184
Н16	0.3140	0.6397	0.6354	Н53	0.2810	0.6418	0.2753
Н17	0.2159	0.2594	0.5904	Н54	0.2647	0.5161	0.3029
Н18	0.3396	-0.0171	0.4765	Н55	0.1663	0.6025	0.2801
Н19	0.2735	-0.1202	0.5600	Н56	0.9575	0.4863	-0.0338
Н20	0.2522	0.0887	0.2165	Н57	0.9001	0.5548	0.0085
Н21	0.2471	0.7127	0.7859	Н58	-0.6241	-0.0805	0.2796
Н22	0.1791	0.5998	0.7895	Н59	-0.5305	-0.1704	0.3092
Н23	0.1329	0.6961	0.7337	Н60	-0.5100	-0.0607	0.2675

- 77 025863

Дробные атомные коо

Таблица 12 рдинаты для формы Η1-6 примера 3 при комнатной температуре

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
N1	0.6135	0.3022	0.1291	С31	-0.0330	0.1910	0.5041
С1	0.4861	0.2699	0.1329	03	0.2583	0.6097	0.4356
С2	0.5140	0.4378	0.1846	04	0.0757	0.3581	0.3067
сз	0.6315	0.4018	0.1603	С32	0.1334	0.5294	0.5329
С4	0.2928	0.3371	0.1767	Р1	0.0468	0.3260	0.5710
С5	0.7320	0.5647	0.2046	05	0.0547	0.2775	0.0276
С6	0.5076	0.5372	0.2202	Н1	0.6712	0.2650	0.1101
С7	0.7432	0.4642	0.1716	Н2	0.2472	0.3892	0.1998
С8	0.6172	0.5979	0.2282	НЗ	0.8030	0.6105	0.2108
С9	0.2279	0.0573	0.0899	Н4	0.6141	0.6650	0.2510
сю	0.2980	0.1613	0.1160	Н5	0.4721	0.1244	0.0847
СИ	0.4263	0.1768	0.1076	Н6	0.1480	0.2331	0.1574
С12	0.4222	0.3523	0.1670	Н7	0.0768	0.1355	0.0730
С13	0.2343	0.2429	0.1511	Н8	0.2225	-0.0310	0.0119
01	0.0939	0.0773	0.0920	Н9	0.3587	0.0122	0.0281
С14	0.8643	0.4211	0.1477	НЮ	0.2580	0.0991	0.0032
С15	0.2706	0.0322	0.0277	Н11	0.2049	-0.0285	0.1687
С16	0.2430	-0.0453	0.1308	Н12	0.3313	-0.0611	0.1363
02	0.8692	0.3628	0.1024	Н13	0.2025	-0.1111	0.1134
N2	0.9694	0.4487	0.1781	Н14	1.0421	0.4253	0.1657
С17	0.1540	0.6355	0.2977	Н15	0.9643	0.4898	0.2101
С18	0.3384	0.5117	0.2978	Н16	0.0771	0.6566	0.3146
С19	0,2228	0.5440	0.3210	Н17	0,4163	0.4214	0.3666
С20	0.4078	0.4106	0.3243	Н18	0.4902	0.4048	0.3066
С21	0.3158	0.6634	0.2252	Н19	0.3612	0.3411	0.3167
С22	0.3847	0.5718	0.2479	Н20	0.3480	0.7048	0.1931
С23	0.2007	0.6947	0.2493	Н21	0.1550	0.7554	0.2328
N3	0.1708	0,4804	0.3708	Н22	-0.0158	0.1842	0.3610
С24	0.1923	0.5250	0.4285	Н23	-0.0940	0.0839	0.4407
N4	0.1385	0.4665	0.4747	Н24	-0.0618	0.1478	0.5364
С25	0.0982	0.3838	0.3581	Н25	0.1867	0.4912	0.5615
С26	0.0546	0.3187	0.4093	Н26	0.0479	0.5303	0.5474
С27	-0.0062	0.2128	0.3995	Н27	0.1623	0.6071	0.5273
С28	0.0269	0.2925	0.5133	Н28	0.0015	0.3180	0.0477
С29	0.0754	0.3609	0.4673	Н29	0.0981	0.3219	0.0046
сзо	-0.0507	0.1524	0.4471	-	-	-	-

Таблица 13

Дробные атомные координаты для формы Е-7 примера 3 при комнатной температуре

- 78 025863

С12	0.6552	0.0284	-0.0752	Н9	0.7449	-0.0051	-0.1927
С13	0.5815	-0.0516	-0.0940	НЮ	0.7148	-0.0919	-0.2351
02	0.5447	-0.1820	-0.1647	Н11	0.4638	-0.0550	-0.2376
С14	0.3048	-0.1336	0.1871	Н12	0.4842	0.0326	-0.1948
С15	0.7209	-0.0704	-0.1931	Н13	0.3794	-0.0467	-0.1758
С16	0.4669	-0.0337	-0.1955	Н14	0.2148	-0.1898	0.2567
03	0.2688	-0.1909	0.1469	Н15	0.2921	-0.1026	0.2729
N2	0.2660	-0.1431	0.2459	Н16	0.8965	0.3781	0.0762
С17	0.6970	0.3338	0.0749	Н17	0.9840	0.2455	0.1237
С18	0.6598	0.1816	0.1177	Н18	0.8374	0.1249	0.1501
С19	0.6044	0.2621	0.0886	Н19	0.4180	0.3287	0.0884
С20	0.8376	0.3289	0.0869	Н20	0.4033	0.2194	0.0921
С21	0.8893	0.2501	0.1151	Н21	0.4415	0.2674	0.0292
С22	0.8013	0.1777	0.1306	Н22	0.5777	0.4563	-0.1337
С23	0.4533	0.2701	0.0732	Н23	0.3388	0.6831	-0.1114
N3	0.6426	0.4177	0.0452	Н24	0.4452	0.5759	-0.1760
N4	0.5461	0.5682	0.0566	Н25	0.4493	0.6677	0.1067
С24	0.6057	0.4911	0.0838	Н26	0.5777	0.7063	0.0699
С25	0.6371	0.4197	-0.0189	Н27	0.6008	0.6468	0.1300
С26	0.5645	0.5001	-0.0452	Н28	0.5538	0.2519	-0.2697
С27	0.5108	0.5688	-0.0062	Н29	0.8006	0.1353	-0.2706
С28	0.5396	0.5022	-0.1083	НЗО	0.9012	0.1771	-0.2206
С29	0.3972	0.6374	-0.0950	Н31	0.8772	0.2306	-0.2830
СЗО	0.4217	0.6349	-0.0335	Н32	0.7242	0.2357	-0.1800
С31	0.4584	0.5725	-0.1335	НЗЗ	0.7295	0.3087	-0.2337
С32	0.5432	0.6548	0.0941

Таблица 14

Дробные атомные координаты для формы 8Е-8 примера 3 при 203 К

Атом	X	Υ	Ζ	Атом	X	Υ	Ζ
С1	0.6880	0.4895	0.0251	Р1	0.8275	0.6234	0.0070
С2	0.7552	0.5380	0.0028	05	0.7464	0.6231	0.2276
СЗ	0.7467	0.4943	-0.0255	СЗЗ	0.6902	0.5401	0.2462
С4	0.6708	0.4021	-0.0316	С34	0.7150	0.5706	0.2775
С5	0.6035	0.3535	-0.0093	Об	0.6752	0.7322	0.1413
С6	0.6121	0.3972	0.0191	Н1	0.7921	0.5273	-0.0406
С7	0.3643	0.2900	0.1269	Н2	0.6650	0.3726	-0.0507
С8	0.4170	0.3504	0.1039	НЗ	0.5522	0.2911	-0.0133
С9	0.5266	0.3158	0.0938	Н4	0.6573	0.1972	0.0996
СЮ	0.5832	0.2207	0.1065	Н5	0.5688	0.0960	0.1380
С11	0.5306	0.1603	0.1294	Н6	0.3854	0.1541	0.1551
С12	0.42Ю	0.1950	0.1396	Н7	-0.0332	0.2640	0.1374
С13	0.1300	0.4652	0.1674	Н8	0.1482	0.1999	0.1202
С14	0.0286	0.4043	0.1600	Н9	0.4867	0.4668	0.1548
С15	0.0354	0.3052	0.1424	НЮ	0.5825	0.6252	0.1764
С16	0.1436	0.2669	0.1321	Н11	0.2732	0.7447	0.2073
С17	0.2450	0.3278	0.1395	Н12	0.0862	0.6034	0.1927
С18	0.2382	0.4269	0.1571	Н13	0.6506	0.7546	0.2134
С19	0.3228	0.5112	0.1682	Н14	0.5057	0.9864	0.1989
С20	0.4437	0.5229	0.1654	Н15	0.3763	0.9376	0.1959
С21	0.5007	0.6173	0.1783	Н16	0.4691	0.9135	0.1708
С22	0.4371	0.7002	0.1939	Н17	0.4861	0.7392	0.2492
С23	0.3163	0.6886	0.1967	Н18	0.3970	0.8441	0.2444
С24	0.2591	0.5942	0.1838	Н19	0.5323	0.8703	0.2489
N1	0.5788	0.3772	0.0703	Н20	-0.2559	0.4447	0.1644
С25	0.6524	0.4709	0.0765	Н21	-0.1866	0.3825	0.1410
N2	0.6947	0.5340	0.0536	Н22	0.3953	0.5254	0.0939
С26	0.5487	0.3391	0.0424	Н23	0.2744	0.4594	0.0983
N3	0.1422	0.5653	0.1839	Н24	0.3468	0.4413	0.0690
С27	0.4954	0.8081	0.2072	Н25	0.7654	0.6513	0.0825
01	0.6204	0.8022	0.2018	Н26	0.7185	0.7116	0.0535
С28	-0.0859	0.4524	0.1712	Н27	0.8383	0.6413	0.0531

- 79 025863

С29	0.4582	0.9219	0.1918	Н28	0.7944	0.5848	0.2177
СЗО	0.4759	0.8162	0.2405	Н29	0.7195	0.4611	0.2419
N4	-0.1888	0.4229	0.1571	ИЗО	0.6054	0.5410	0.2426
02	-0.0947	0.5096	0.1939	Н31	0.7976	0.5861	0.2800
С31	0.3525	0.4536	0.0900	Н32	0.6917	0.5056	0.2900
03	0.4758	0.2620	0.0383	НЗЗ	0.6700	0.6399	0.2829
04	0.6661	0.4992	0.1019	Н34	0.6529	0.7372	0.1591
С32	0.7600	0.6443	0.0614	Н35	0.6645	0.6624	0.1349

Claims

1. Соединение формулы (I) или его соль, где

О представляет собой

К! представляет собой -С(СН₃)₂ОН, -ЫНС(=О)С(СН₃)₃, -Ы(СН₃)₂ или -СН₂К_б;

или

К2 представляет собой С1 или -СН3;

К3 представляет собой Н, Р или -СН3;

Ка представляет собой Н или -СН3;

К_Ь представляет собой Н, Р, С1 или -ОСН₃; К_с представляет собой Н или Р;

ΛΌ.

Ка представляет собой -ОН, -ОСН₃, -ЫНС(=О)СН₃ или

2. Соединение по п.1 или его соль, где О представляет собой или

3. Соединение по любому из пп.1, 2 или его соль, где

Ка представляет собой -СН3;

КЬ представляет собой Р, С1 или -ОСН3;

Кс представляет собой Р.

4. Соединение по любому из пп.1-3 или его соль, где К₂ представляет собой -СН₃.

5. Соединение по любому из пп.1-4, где

О представляет собой

- 80 025863 и Κι представляет собой С(СН₃)₂ОН.

6. Соединение по любому из пп.1-4 или его соль, где О представляет собой

К₂ представляет собой -СН₃ и К₃ представляет собой Н.

7. Соединение по п.1, где указанное соединение выбрано из

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2 -ил) -9Н-карбазол-1 -карбоксамида (3);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил^₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (4);

7-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(3-(7-метокси-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2метилфенил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (10);

4-(3 -(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил) -9Н-карбазол-1 -карбоксамида (13);

4-(3-(§)-(5-хлор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (15);

4-(3-(§)-(8-фтор-1-метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2- 81 025863 гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (24);

4-(3 -(8-фтор-1 -метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (25);

4-(3 -(3)-(8-фтор-1 -метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3 (4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-8-метил-9Н-карбазол-1 -карбоксамида (26);

4-(3-(3)-(8-фтор-1-метил(0₃)-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-5-метил-9Н-карбазол-1-карбоксамида (27);

7- (ацетамидометил)-4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (30);

4-(3 -(5-хлор-1,3-диоксо-1 Н-пиридо [ 1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(пирролидин-1 илметил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (31);

4-(3-(5-фтор-1,3-диоксо-1Н-пиридо[1,2-с]пиримидин-2(3Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(метоксиметил)9Н-карбазол-1-карбоксамида (32);

8- фтор-4-(3 -(8-фтор-1 -метил-2,4-диоксо-1,2-дигидрохиназолин-3(4Н)-ил)-2-метилфенил)-7-(2гидроксипропан-2-ил)-9Н-карбазол-1-карбоксамида (33);

и его соли.

8. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

9. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли в производстве лекарственного средства для лечения аутоиммунного заболевания или хронического воспалительного заболевания.

10. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли в терапии при лечении аутоиммунного заболевания или хронического воспалительного заболевания.

- 82 025863