EA025572B1 - Лекарственные формы отамиксабана с улучшенной стабильностью - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к водной фармацевтической композиции для инъекций, содержащей от 0,1 до 60 мг/мл метил (2R,3R)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата и от 1 до 1000 ммоль/л кислотного реакционного соединения, где кислотное реакционное соединение выбрано из группы, состоящей из лимонной кислоты, винной кислоты, янтарной кислоты, малеиновой кислоты или фосфорной кислоты, или солей указанных кислот, или смеси одного или нескольких из указанных кислотных реакционных соединений, причем рН данной композиции доведен до значений от около рН 3 до около рН 5,0 добавлением указанного кислотного реакционного соединения. Указанная композиция применяется для лечения острого инфаркта миокарда, инфаркта миокарда без подъема ST-сегмента, нестабильной стенокардии, тромбоэмболии, резкой закупорки сосуда, связанной с тромболитической терапией, чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластики, преходящих нарушений мозгового кровообращения, инсульта, перемежающейся хромоты и рестеноза.

Description

(57) Изобретение относится к водной фармацевтической композиции для инъекций, содержащей от 0,1 до 60 мг/мл метил (2К,ЗК)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4ил)бензоил]амино}бутаноата и от 1 до 1000 ммоль/л кислотного реакционного соединения, где кислотное реакционное соединение выбрано из группы, состоящей из лимонной кислоты, винной кислоты, янтарной кислоты, малеиновой кислоты или фосфорной кислоты, или солей указанных кислот, или смеси одного или нескольких из указанных кислотных реакционных соединений, причем рН данной композиции доведен до значений от около рН 3 до около рН 5,0 добавлением указанного кислотного реакционного соединения. Указанная композиция применяется для лечения острого инфаркта миокарда, инфаркта миокарда без подъема δΤ-сегмента, нестабильной стенокардии, тромбоэмболии, резкой закупорки сосуда, связанной с тромболитической терапией, чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластики, преходящих нарушений мозгового кровообращения, инсульта, перемежающейся хромоты и рестеноза.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим метил (2К,3К)2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноат или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемое кислотное реакционное соединение, или к водному раствору или дисперсии указанных композиций, а также к способу их получения, способам применения указанных композиций для лечения субъектов, страдающих от состояний, которые могут быть облегчены введением ингибитора фактора Ха.

Предшествующий уровень техники

Метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноат (Регистрационный номер СА§ 193153-04-7) имеет международное непатентованное название Отамиксабан и структуру, соответствующую формуле 1

Метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноат используют для получения лекарственных средств, предназначенных для лечения пациентов, страдающих от или подверженных состояниям, которые могут быть облегчены введением ингибитора фактора Ха, как было раскрыто в \УО 7/24118.

Фактор Ха является предпоследним ферментом в коагуляционном каскаде. Фактор Ха (фХа) - это ключевая сериновая протеаза, функционирующая на этапе, объединяющем внутренний и внешний пути в каскаде свертывания крови. Фактор Ха катализирует превращение протромбина в тромбин через образование протромбиназного комплекса. Его исключительная роль в образовании тромбина в сочетании с потенцирующими эффектами на процесс формирования тромба делают его привлекательной мишенью для терапевтического вмешательства.

Как свободный фактор Ха, так и фактор Ха в составе протромбиназного комплекса (фактор Ха, фактор Уа, кальций и фосфолипид), ингибируются Отамиксабаном. Ингибирование фактора Ха происходит путем образования комплекса напрямую между ингибитором и ферментом, что делает этот процесс независимым от плазматического ко-фактора антитромбина III. Эффективное ингибирование фактора Ха достигается введением соединения путем непрерывной внутривенной инфузии, болюсным внутривенным введением, или любым другим парентеральным путем, таким, что он обеспечивает желаемый эффект предотвращения фактор Ха-индуцированного образования тромбина из протромбина.

Эксперименты ίη νίνο продемонстрировали, что Отамиксабан высоко эффективен на моделях тромбоза у грызунов, собак и свиней. Кроме того, недавние клинические испытания показали, что Отамиксабан является эффективным, безопасным и хорошо переносится организмом человека, и, таким образом, имеет значительный потенциал для лечения острого коронарного синдрома (К.К. Снейп апб Υοη§-Μί СЬоц 2007; Сиггеп! Мебюша1 Скеш181гу, т. 14, № 23; с. 2471-2481). Данные клинических испытаний по определению оптимальной дозы свидетельствуют о том, что Отамиксабан уменьшал содержание фрагментов протромбина 1+2 в значительно большей степени, чем нефракционированный гепарин при самом высоком режиме дозирования (Сокеп е! а1., Скси1а1юп, т. 115, № 20, май 2007, сс. 2642-2651), но данные указанные клинические испытания не отражают зависимость от возраста или почечной недостаточности. Дальнейшие клинические исследования продемонстрировали, что Отамиксабан вызывает дозозависимое, быстрое прямое ингибирование фактора Ха у пациентов со стойким заболеванием коронарных артерий, принимающих также свои обычные медикаменты, и в том числе у пациентов, имеющих легкую степень почечной недостаточности (Ишбег е! а1., Скшса1 Ркагшасо1о§у апб Ткегареиксз, т. 80, № 6, 2006, сс. 691702).

Для использования в клинических исследованиях были разработаны способы инъекции и инфузии фармацевтической композиции для метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата. Одно из наблюдений, сделанных в процессе конечной стерилизации (автоклавирования) и анализа стабильности, заключалось в сильном повышении содержания двух продуктов разложения. Один из указанных продуктов разложения представляет собой (2К,3К)2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановую кислоту и имеет структуру, показанную формулой II:

- 1 025572

Второй из указанных продуктов разложения является метиловым эфиром (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты и имеет структуру, показанную формулой III

В водной фармацевтической композиции, содержащей метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноат, при рекомендованных условиях хранения достигается также повышенное содержание (2К, 3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты и метилового эфира (2К,3К)-2-(3карбамоил-бензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты.

Задача настоящего изобретения и состоит в том, чтобы найти хранящуюся в течение длительного времени стабильную фармацевтическую композицию для метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата, не имеющую недостатков, связанных с повышенными концентрациями (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты и метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты, возникающими в процессе конечной стерилизации или длительного хранения.

Было установлено, что образование (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4ил)бензоиламино]бутановой кислоты и метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты при длительном хранении лекарства определяется противоположными эффектами.

В процессе автоклавирования содержание метилового эфира (2К, 3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4(1-окси-пиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты значительно возрастает с повышением рН жидкой фармацевтической композиции, тогда как сильного влияния рН жидкой лекарственной формы на образование (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты в процессе автоклавирования обнаружено не было.

В заключение: чем ниже рН фармацевтической композиции, тем лучше.

В процессе длительного хранения содержание (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты значительно возрастает с понижением рН жидкой фармацевтической композиции, тогда как сильного влияния рН жидкой лекарственной формы на образование метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты в процессе длительного хранения обнаружено не было. В заключение: чем выше рН фармацевтической композиции, тем лучше.

Было установлено, что более предпочтительными являются жидкие фармацевтические композиции для метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли, имеющие рН ниже 5, ввиду ограничения повышения содержания как (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты, так и метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]бутановой кислоты, связанного с противоположно направленными эффектами автоклавирования и длительного хранения.

рН ниже 5 дает очевидное преимущество фармацевтическим композициям по данному изобретению, являющимся (I) длительно стабильными фармацевтическими композициями и (II) стерильными растворами для инъекций за счет автоклавирования (стерилизации паром) - простого, экономичного и безопасного способа стерилизации.

Сущность изобретения

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения.

- 2 025572

В настоящем изобретении предложена также стерильная фармацевтическая композиция метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил} -3-{[4-(1 -оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения.

Подробное описание предпочтительного варианта осуществления

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения.

Значения использованных здесь терминов приведены в данном описании.

Фармацевтически приемлемое кислотное реакционное соединение обозначает нетоксичное соединение, способное создавать рН ниже 5 в водном растворе или дисперсии метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли. Типичными кислотными реакционными соединениями являются лимонная кислота, уксусная кислота, гликолевая кислота, адипиновая кислота, молочная кислота, пировиноградная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, глутаровая кислота, глюкуроновая кислота, фумаровая кислота, яблочная кислота, винная кислота, аскорбиновая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, бензойная кислота, гидроксибензойная кислота, гиалуроновая кислота, ацетилсалициловая кислота или неорганические кислоты, такие как хлористо-водородная кислота или соли минеральных кислот, такие как дигидрофосфат калия или аминокислоты, такие как глицин и их соли, или смеси одного или более из указанных фармацевтически приемлемых кислотных реакционных соединений. Предпочтительным кислотным реакционным соединением является лимонная кислота.

Количество фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения, необходимое для создания рН ниже 5 в водном растворе или дисперсии метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли, зависит от конкретного соединения и может быть определено специалистом в этой области, например, путем суспендирования или растворения образца, содержащего приблизительно 1 мг метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата, примерно в 1 мл очищенной воды, и добавления надлежащего количества фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения, такого, что измеряемое значение рН в супернатанте станет ниже 5. рН супернатанта измеряют с помощью рН-метра или индикатора рН.

Буферный раствор обозначает водный раствор, состоящий из смеси слабой кислоты и сопряженного с ней основания или слабого основания и сопряженной с ним кислоты. Он обладает тем свойством, что при добавлении к нему небольших количеств сильной кислоты или щелочи рН раствора изменяется незначительно. Буферные растворы используют в качестве средства поддержания рН на практически неизменном уровне в большом количестве задач в области химии.

Продукт разложения обозначает любые вещества на основе лекарства, образовавшиеся после получения фармацевтической композиции в соответствии с данным изобретением. Анализ примесей и продуктов разложения производится с помощью метода обращено-фазной ВЭЖХ образцов, как известно в данной области.

Сушка вымораживанием, также называемая лиофилизация, обозначает способ дегидратации. Сушка вымораживанием осуществляется путем замораживания вещества, последующего понижения наружного давления и добавления достаточного количества тепла, что позволяет замерзшей воде в веществе сублимироваться непосредственно из твердой фазы в газовую фазу.

ΐ.ν. означает внутривенную инъекцию или инфузию, т.е. введение жидких веществ непосредственно в вену. Слово внутривенно означает просто в вену.

Длительный относится к срокам от 1 до 3 месяцев.

Длительное хранение означает хранение фармацевтической композиции в течение 1-3 месяцев при температуре 40°С и относительной влажности 75%.

Очень длительный относится к срокам от 3 до 6 месяцев.

Очень длительное хранение означает хранение фармацевтической композиции в течение 3-6 месяцев при температуре 40°С и относительной влажности 75%.

мл обозначает миллилитр, равный одной тысячной литра, также часто обозначаемый в соответствии с международной системой единиц СИ как кубический сантиметр.

Инфаркт миокарда без подъема 8Т-сегмента соответствует определению инфаркта миокарда на основе АСС/АНА, Е8С и ^НР консенсусов; см. также Рекомендации по диагностике и лечению острых коронарных синдромов без подъема 8Т-сегмента; Еиг Неай I, 2007, 28 (13): 1598-1660.

Физиологический раствор или изотонический раствор относится к 0,9% водному раствору хлорида натрия, имеющему осмолярность около 308 мОсмоль/л, практически равную осмолярности плазмы крови.

Отамиксабан является международным непатентованным названием метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата.

Пациент относится к приматам, таким как люди, или теплокровным животным, таким как, напри- 3 025572 мер, крыса, мышь, собаки, кошки или морские свинки.

Патологическое состояние обозначает заболевания, расстройства или состояния у пациентов, в частности те, в которых фактор Ха может играть определенную роль.

рН обозначает показатель кислотности или основности раствора. Он приблизительно соответствует, но не равен, р[Н], отрицательному логарифму (с основанием 10) молярной концентрации растворенных ионов водорода (Н+). Определение рН в твердой фармацевтической композиции, соответствующей изобретению, осуществляют путем суспендирования или растворения образца, содержащего приблизительно 1 мг Отамиксабана указанной фармацевтической композиции примерно в 1 мл очищенной воды. рН супернатанта определяют с помощью рН-метра или индикатора рН. рН может быть измерен с использованием либо индикаторов рН, таких как фенолфталеин, в форме раствора или рН-полосок, или потенциометрическим способом. Полоски широко используются для измерения рН, если требуется точность 0,2-0,5 единиц рН. Единственным вариантом для измерения рН с более высокой точностью является рН-метр. Потенциометрические способы основаны на вычислении разницы между известным потенциалом электрода сравнения и потенциалом измерительного электрода. Потенциал измерительного электрода зависит от активности ионов гидроксония. Эта зависимость описывается уравнением Нернста, так что по измеренному потенциалу можно рассчитать активность. В первом приближении активность равна концентрации ионов. рН-метр - это устройство, используемое для потенциометрических измерений рН. рН-метр - это не что иное, как точный вольтметр, подключенный к измерительному электроду, и масштабированный таким образом, что он показывает не измеренный потенциал, а уже значение рН.

Фармацевтически приемлемой солью является любая соль основного соединения метил (2К,3К)2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата с кислотой, которая может быть введена в фармацевтические композиции для доклинического и клинического использования. Типичными неорганическими кислотами, образующими подходящие соли, являются соли минеральных кислот, таких как соляная кислота, фосфорная кислота и сульфаминовая кислота; и органические кислоты, такие как уксусная кислота, лимонная кислота, молочная кислота, винная кислота, малоновая кислота, бензойная кислота, аминокислоты и тому подобные.

Предпочтительнее, чтобы соль присоединения кислоты была производным минеральной кислоты, желательно соляной кислоты.

ОВ означает относительная влажность; относительная влажность воздухо-водяной смеси определяется как отношение парциального давления водяного пара в смеси к давлению насыщенного пара воды при данной температуре.

Стерилизация относится к любому способу, при котором в фармацевтической композиции эффективно уничтожаются или устраняются инфекционные агенты, такие как грибы, бактерии, вирусы или споры. Стерилизацию можно осуществить, например, с помощью нагревания, химических веществ, облучения, высокого давления или фильтрацией, или комбинацией этих способов.

Стерилизация паром обозначает широко используемый способ тепловой стерилизации в автоклаве. Автоклавы обычно используют пар, нагретый до 121, 134°С. При температуре 121°С эффективное время достижения стерильности составляет не менее 15 мин, а при 134°С - как минимум 3 мин. Надлежащее автоклавирование инактивирует все грибы, бактерии, вирусы и также бактериальные споры, которые могут быть весьма устойчивы.

Стерилизация фильтрованием обозначает способ, обычно применяемый для жидкостей, которые разрушаются при нагревании, облучении или химической стерилизации. Фильтр с размером пор 0,2 мкм будет эффективно удалять бактерии. Если также должны быть удалены вирусы, необходим фильтр с гораздо меньшим размером пор, примерно 20 нм.

Терапевтически эффективное количество обозначает такое количество соединения, которое является эффективным для лечения упомянутого расстройства или состояния.

Тоничность означает меру осмотического давления двух растворов (поскольку определяется водным потенциалом двух растворов), разделенных полупроницаемой мембраной. Этот термин широко используют для описания реакции живых клеток, погруженных во внешний раствор. Как и осмотическое давление, тоничность определяется только растворенными веществами, не способными пересекать мембрану, поскольку только они оказывают влияние на осмотическое давление. Растворенные вещества, способные свободно пересекать мембрану, не влияют на тоничность, потому что через некоторое время их концентрация оказывается равной по обе стороны мембраны.

Лечение подразумевает любое лечение, включая, но не ограничиваясь, облегчением симптомов, устранением причины симптомов, либо временным, либо постоянным, или предупреждением или замедлением появления симптомов и прогрессирования названного расстройства или состояния.

Синтез метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{ [4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата был описан, и осуществляется способами, хорошо известными специалистам в этой области. К примеру, способы синтеза приведены в международной заявке νθ 97/24118.

Примерами кислотных реакционных соединений являются органические кислоты, такие как лимонная кислота, уксусная кислота, гликолевая кислота, молочная кислота, пировиноградная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, глутаровая кислота, фумаровая кислота, яблочная кислота, винная

- 4 025572 кислота, аскорбиновая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, бензойная кислота, гидроксибензойная кислота, фенилуксусная кислота, гиалуроновая кислота, ацетилсалициловая кислота, коричная кислота, салициловая кислота, 2-феноксибензойная кислота, п-толуолсульфоновая кислота и сульфоновые кислоты, такие как метансульфоновая кислота и 2-гидроксиэтансульфоновая кислота или их соли или смесь одной или нескольких из указанных органических кислот и их солей. Кроме того, кислотными реакционными соединениями являются минеральные кислоты, такие как хлористо-водородная кислота или фосфорная кислота или соли минеральных кислот, такие как дигидрофосфат калия, или аминокислоты и их соли или смесь одной или нескольких из указанных минеральных кислот, аминокислот и их солей. Предпочтительнее, чтобы в качестве кислотных реакционных соединений использовались лимонная кислота или цитрат натрия или их смесь.

В следующем варианте осуществления изобретения добавление кислотного реакционного соединения в Отамиксабан создает в фармацевтической композиции, соответствующей данному изобретению, от около рН 3 до около рН 4,5 или от около рН 3,7 до около рН 4,3, или от около рН 3,8 до около рН 4,3, или от около рН 4,0 до около рН 4,2 или около рН 4,0. Измерение рН осуществляют после отбора пробы из указанной фармацевтической композиции. Значение рН определяют с помощью рН-метра или индикатора рН.

Еще один вариант осуществления изобретения относится к водной фармацевтической композиции для инъекций, содержащей:

а) от 0,1 мг/мл до 60 мг/мл (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4ил)бензоил]амино}бутаноата или от 1,5 до 50 мг/мл, или от 5 до 25 мг/мл,

б) от 1 ммоль/л до 1000 ммоль/л кислотного реакционного соединения или его соли или их смеси, или от 20 до 25 мМоль, или от 4 до 6 мМоль, а также

в) имеющей рН ниже 5,0.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой водную фармацевтическую композицию, содержащую от 0,8 до 30 мг/мл (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата, или от 0,9 до 26 мг/мл, или от 0,9 до 6 мг/мл. Еще один вариант осуществления настоящего изобретения относится к водной фармацевтической композиции, содержащей от 2,0 до 30 мг/мл (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4ил)бензоил]амино}бутаноата, или от 2,0 до 25 мг/мл, или от 16 до 25 мг/мл или от 3,0 до 6 мг/мл.

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения относится к водной фармацевтической композиции, в которой в качестве кислотного реакционного соединения используют буферный раствор, способный создавать рН ниже 5,0 в водном растворе или дисперсии указанной композиции метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил} -3-{[4-(1 -оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли. В этом дополнительном варианте за счет добавления буферного раствора в Отамиксабан в водной фармацевтической композиции создают рН от около рН 3 до около рН 5,0, или от около рН 3 до около рН 4,7, или от около рН 3,5 до около рН 4,6, или от около рН 3,6 до около рН 4,3, или от около рН 3,6 до около рН 4,2, или от около рН 3,6 до около рН 4,1.

Иллюстративные примеры подходящих буферов включают такие буферные вещества, как лимонная кислота и ее натриевая или калиевая соль, фосфорная кислота и ее натриевая или калиевая соль или гидрофосфат, или двухосновный фосфат натрия, уксусная кислота и ее натриевая соль, молочная кислота и ее соли, янтарная кислота и ее соли, винная кислота и ее соли, аскорбиновая кислота и ее соли, аспарагиновая кислота и ее соли, бензойная кислота и ее соли, адипиновая кислота и ее соли, глюкуроновая кислота и ее соли, или минеральные кислоты, такие как хлористо-водородная кислота или соли, аминокислоты и их соли, например глицин или серин, или смеси таких буферных веществ. Предпочтительными являются смеси лимонной кислоты и цитрата натрия. Примерами таких смесей являются смеси лимонной кислоты с цитратом натрия (цитрат натрия, ди-натрий цитрат) и лимонной кислоты или дигидрофосфата калия и гидрофосфата.

В еще одном варианте осуществления изобретения концентрация буферного раствора, создающего рН ниже 5,0 в водной фармацевтической композиции, составляет от 1 до 1000 ммоль/л или от 20 до 25 мМоль, или от 4 до 6 мМоль.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения к жидкой фармацевтической композиции по изобретению может быть добавлен дополнительный регулятор тоничности для получения раствора с осмолярностью от 260 до 350 мОсмоль/л или около 308 мОсмоль/л, имеющего осмолярность почти равную осмолярности плазмы крови.

Типичными примерами регуляторов тоничности являются соли, такие как хлорид натрия, или сахара, такие как глюкоза, или сахарные спирты, такие как маннитол. В случае стерилизации в автоклаве предпочтительнее соли или сахарные спирты, такие как маннитол. Концентрация солей может составлять от 0 до 20 мг/мл, в зависимости от концентрации Отамиксабана и кислотного реакционного соединения. Концентрация глюкозы или сахарных спиртов, таких как маннитол, может составлять от 0 до около 60 мг/мл, в зависимости от концентрации Отамиксабана и кислотного реакционного соединения. Тоничность конечного раствора не должна превышать значения осмолярности от 260 до 350 мОсмоль/л.

Водные фармацевтические композиции по данному изобретению могут быть получены путем со- 5 025572 единения метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и кислотного реакционного соединения в соответствующих требуемых количествах с водой и, при необходимости, с различными другими компонентами, перечисленными здесь, с последующим перемешиванием в течение требуемого времени.

В еще одном варианте изобретение относится к стерильной фармацевтической композиции метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил} -3-{[4-(1 -оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения в виде водного раствора или дисперсии указанной композиции.

В еще одном варианте изобретение относится к стерильной водной фармацевтической композиции метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли, фармацевтически приемлемого кислого реакционного соединения и воды при рН ниже 5,0 или дисперсии указанной композиции.

Стерильная фармацевтическая композиция может быть получена путем стерилизации фармацевтической композиции в соответствии с изобретением. Стерилизация относится к любому способу, эффективно уничтожающему или устраняющему инфекционные агенты, такие как грибы, бактерии, вирусы или споры в фармацевтической композиции. Стерилизацию можно осуществить с помощью нагревания, химических веществ, облучения, высокого давления или путем фильтрования. Стерилизация паром является предпочтительным способом стерилизации и относится к способу тепловой стерилизации в автоклаве. В автоклавах обычно используют пар, нагретый до 121, 134°С. При температуре 121°С для достижения стерильности требуется по меньшей мере 15 мин, при 134°С - 3 мин. Дополнительное время может потребоваться для стерилизации жидкостей и инструментов в случае, если ампулы с раствором или порошком сверх того завернуты в слои ткани, поскольку требуется больше времени для достижения нужной температуры.

Стерильная жидкая фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть получена путем соединения метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения с требуемым количеством воды и, при необходимости, с различными другими компонентами, перечисленными здесь, с последующей стерилизацией. Стерилизация может быть осуществлена с помощью нагревания, химических веществ, облучения, высокого давления или путем фильтрования.

Обычно дисперсии могут быть получены путем включения стерилизованного метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения в стерильный носитель, содержащий дисперсионную среду и другие компоненты, перечисленные здесь.

Порошки для инъекций или инфузий представляют собой твердые, стерильные вещества или смеси веществ, включающие метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4ил)бензоил]амино}бутаноат и фармацевтически приемлемое кислотное реакционное соединение, распределенные в контейнеры для готовой лекарственной формы, которые при встряхивании в предписанном объеме соответствующей стерильной жидкости быстро образуют прозрачные и практически свободные от частиц растворы. После растворения они удовлетворяют требованиям для инъекций или инфузий. Смешивание веществ может быть осуществлено любым методом смешивания, известным в данной области.

Лиофилизированные препараты для парентерального применения рассматриваются как порошки для инъекций или инфузий.

В том случае, если композиции Отамиксабана и фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения имеют твердые формы, Отамиксабан и фармацевтически приемлемое кислотное реакционное соединение и,в некоторых случаях другие компоненты фармацевтической композиции по изобретению, могут быть смешаны в виде порошков. Такое смешивание может быть осуществлено любыми методами перемешивания, известными в данной области. Смешивание предпочтительно осуществляют с использованием смесителя с большим усилием сдвига, У-образного смесителя (или другого двукорпусного смесителя), бункерного смесителя или смесителя-качалки ТигЬи1а. Перемешивание обычно проводят в течение времени, достаточного для полного смешивания. Как только получают смесь, производят твердую форму лекарственного препарата по методикам, известным в данной области.

В случае стерильных порошков для получения стерильных фармацевтических композиций предпочтительные способы получения могут включать в себя вакуумную сушку и лиофилизацию, метод, который может давать порошок метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли, и фармацевтически приемлемого кислотного реакционного соединения и, в некоторых случаях, включающий также любые дополнительные компоненты, перечисленные здесь, в том числе из предварительно стерильно профильтрованного раствора или раствора, стерилизованного паром. Стерилизация приготовленного порошка может быть осуществлена с помощью нагревания, химических веществ или облучения. Стерилизация паром является предпочтительным способом стерилизации, это способ тепловой стерилизации в автоклаве. Порошок стерилизуют в подходящей ампуле или носителе.

- 6 025572 стерилизуют в подходящей ампуле или носителе.

Стерильный порошок может храниться до момента получения стерильного инъецируемого раствора путем добавления предварительно стерилизованного подходящего растворителя, такого как вода, с последующим смешиванием композиции. Кроме того, можно добавить предварительно стерилизованный подходящий растворитель и хранить подготовленную жидкую фармацевтическую композицию.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции для инъекций с максимальным содержанием примеси (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты, не превышающим около 8,0% после длительного хранения. В некоторых вариантах осуществления изобретения максимальное содержание примеси (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты составляет от 0,3 до 4,0%, или от 0,4 до 3,0%, или от 0,4 до 1,8%, или от 0,4 до 0,8%, или от 0,43 до 0,7%.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции для инъекций, с максимальным содержанием примеси метилового эфира (2К,3К)-2-(3карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты, не превышающим около 5,0% после длительного хранения. В некоторых вариантах осуществления изобретения максимальное содержание примеси метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4ил)бензоиламино]масляной кислоты составляет от 0,7 до 4,5% или от 0,8 до 4,0%, или от 0,9 до 3,5%, или от 1,2 до 2,2%, или от 1,4 до 2,0%.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции для инъекций, с максимальным общим содержанием примесей, не превышающим около 13%. В некоторых вариантах осуществления изобретения общее содержание примесей составляет от 1,0 до 8,5% или от 1,1 до 8,0% или от 1,3 до 6,0% или от 1,6 до 4,0% или от 1,8 до 3,5%.

Относительные количества метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата и противоионая кислоты в их солях может варьировать и зависит, например, от выбранной кислоты и способов, примененных для получения солей. Предпочтительно, чтобы соли в настоящем изобретении содержали около одного эквивалента кислоты на практически каждый эквивалент метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата.

Соли присоединения кислоты метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата могут быть получены путем растворения нейтрального основания в водном или водно-спиртовом растворе или других подходящих растворителях, содержащих соответствующую кислоту, или в которые добавляется соответствующая кислота, и выделения соли выпариванием раствора, либо взаимодействием нейтрального основания и кислоты в органическом растворителе, в этом случае соль можно выделить непосредственно и/или получить концентрированием раствора.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, могут использоваться для ингибирования фактора Ха. Исходя из этого, в настоящем изобретении предложены способы лечения или предупреждения патологического состояния, модулирование которого может быть осуществлено ингибированием продукции фактора Ха.

Примерами патологических состояний, которые могут быть подвержены лечению фармацевтическими композициями, соответствующими настоящему изобретению, представляют собой острый инфаркт миокарда (острый ИМ), инфаркт миокарда без подъема 8Т-сегмента, нестабильная стенокардия, тромбоэмболия, резкая закупорка сосуда, связанная с тромболитической терапией, чрескожная транслюминальная коронарная ангиопластика (ЧТКА), преходящие нарушения мозгового кровообращения, инсульт, перемежающаяся хромота и рестеноз.

Таким образом, описанные здесь фармацевтические композиции могут применяться в том числе для ингибирования свертывания крови ввиду их основной способности ингибировать предпоследний фермент в коагуляционном каскаде, фактор Ха, а не тромбин. Фармацевтические композиции в рамках настоящего изобретения могут проявлять выраженные фармакологические активности, устанавливаемые в соответствии с описанными в литературе тестами, в том числе в ίη νίνο и ίη νίΐΓΟ тестах, данные последних, как полагают, коррелируют с данными по фармакологической активности у человека и других млекопитающих. Например, как свободный фактор Ха, так и фактор Ха в составе протромбиназного комплекса (фактор Ха, фактор Уа, кальций и фосфолипид) могут быть ингибированы. Ингибирование фактора Ха может быть достигнуто за счет формирования комплекса напрямую между ингибитором и ферментом, и поэтому оно не зависит от плазматического кофактора антитромбина III. Эффективное ингибирование фактора Ха может быть достигнуто введением фармацевтической композиции в соответствии с изобретением путем непрерывной внутривенной инфузии, болюсным внутривенным введением или любым другим подходящим способом, таким, который сможет обеспечить желаемый эффект предотвращения фактор Ха-индуцированного образования тромбина из протромбина.

Помимо использования в антикоагуляционной терапии ингибиторы фактора Ха могут применяться для лечения или предупреждения других заболеваний, в которых образование тромбина может играть

- 7 025572 патологическую роль. Например, предполагается, что тромбин, ввиду его способности регулировать различные типы клеток посредством специфического расщепления и активации рецептора тромбина на поверхности клетки, может вносить свой вклад в заболеваемость и смертность от таких хронических и дегенеративных заболеваний, как артрит, рак, атеросклероз и болезнь Альцгеймера. Ингибирование фактора Ха может эффективно блокировать образование тромбина и следовательно блокировать образование тромбина на различные типы клеток.

Способы парентерального введения инъецируемой водной фармацевтической композиции хорошо известны в данной области. Например, инъецируемая водная фармацевтическая композиция может быть введена внутривенно в специальной лекарственной форме. Указанная лекарственная форма может быть введена путем внутривенной инфузии.

В общем для взрослого населения подходящие инфузионные дозы метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата могут колебаться от 0,07 мг/кг массы тела/ч до 0,14 мг/кг массы тела/ч. Также подходящие дозы могут варьировать от 0,08 мг/кг массы тела/ч до 0,12 мг/кг массы тела/ч. Указанная лекарственная форма также может быть введена внутривенно болюсной дозой. В общем для взрослого населения подходящие инфузионные дозы метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил} -3-{[4-(1 -оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата могут составлять от 0,07 мг/кг массы тела до 0,14 мг/кг массы тела. Также подходящей дозой, удовлетворяющей требованиям безопасности пациента и эффективности, будет доза, близкая к 0,1 мг/кг массы тела/ч после внутривенного болюсного введения около 0,08 мг/кг массы тела.

Указанная инъецируемая лекарственная форма может быть введена совместно с другими лекарственными препаратами, такими как ингибиторы гликопротеина 1ГЬ/11а, нефракционированный гепарин, низкомолекулярные гепарины, эноксапарин или клопидогрель. Кроме того, указанную инъецируемую лекарственную форму можно сочетать с препаратами, разжижающими кровь, включая, но не ограничиваясь кумадином, варфарином или аспирином.

Жидкие инъецируемые фармацевтические композиции в соответствии с данным изобретением могут быть получены путем соединения метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и кислотного реакционного соединения или необходимого количества буфера с водой и при необходимости с различными другими компонентами, перечисленными здесь, с последующим смешиванием в течение установленного времени.

Жидкие фармацевтические композиции могут также содержать другие компоненты, обычно используемые при создании фармацевтических композиций. Одним из примеров таких компонентов является лецитин. В композиции по данному изобретению он используется в качестве эмульгирующего агента и его содержание может варьировать от около 0,05 до около 1 мас.%, со всеми возможными комбинациями и подкомбинациями интервалов и конкретно указанных количеств в пределах данного интервала. Предпочтительнее, чтобы содержание эмульгирующих агентов находилось в интервале от около 0,1 до около 0,5 мас.%. Другими примерами используемых компонентов являются противомикробные консерванты, такие как бензойная кислота или парабены; суспендирующие вещества, такие как Полисорбат 80. Выбор таких дополнительных компонентов и их содержание в композициях данного изобретения может легко определить специалист в данной области, и это станет более понятным из рабочих примеров, приведенных ниже.

В общем, вода, подходящее масло, солевой раствор и гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль, могут использоваться в качестве растворителей в жидких фармацевтических композициях. Подходящие для жидких фармацевтических композиций растворы могут быть получены путем растворения метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил} -3 -{[4-( 1 -оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли и кислотного реакционного соединения в растворителе и, при необходимости, добавления веществ с буферными свойствами. Дополнительно, по отдельности или вместе, могут быть добавлены антиоксиданты, такие как бисульфит натрия, сульфит натрия или аскорбиновая кислота. Также может быть использован натрия ЭДТА.

Используемые фармацевтические лекарственные формы для введения метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли могут быть проиллюстрированы следующим образом.

Инъецируемая форма

Парентеральная композиция, готовая для введения путем инъекции, может быть получена путем размешивания от 1 мг до 30 мг/мл по массе метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата или его фармацевтически приемлемой соли в объеме от 1 до 200 мл воды и добавления при перемешивании от 2 до 4 мг/мл по массе цитрата натрия и от 2 до 4 мг/мл моногидрата лимонной кислоты и от 5 до 8 мг/мл хлорида натрия. В конце рН доводят до значения 4 добавлением гидроксида натрия или соляной кислоты. Полученный раствор фильтруют и разливают в подходящие ампулы. Раствор и ампулу стерилизуют способом паровой стерилизации в автоклаве. В автоклавах обычно используют пар, нагретый до 121 или 134°С. Для достижения стерильности при этом необходимо минимум 15 мин.

- 8 025572

Следующие неограничивающие примеры иллюстрируют способы получения и применения фармацевтических композиций, соответствующих настоящему изобретению, и являются предпочтительными.

Примеры

Пример 1. Получение соединения (V)

ТзОН - это п-толуолсульфоновая кислота, имеющая формулу СНзС₆Н4§ОзН. ТзОН представляет собой моногидрат. В реакционный сосуд вносили соединение (IV) (100,0 г) и безводный тетрагидрофуран (ТГФ) (320 г). Полученную суспензию охлаждали до -20 ± 3°С и к ней в течение 55 мин добавляли гексаметилдисилазид лития (ЫНМЭЗ) (475,6 г, 1,3М раствор в ТГФ) и перемешивали в течение 20 мин при -20±3°С. Затем в реакционную смесь вносили в течение 40 мин раствор α-бромо-м-толунитрила в ТГФ (65,1 г в 181 г ТГФ), поддерживая температуру на уровне -20±3°С, и перемешивали еще в течение 30 мин. Бензойную кислоту (126,6 г) вносили в реакционный сосуд в твердом виде. Далее добавляли воду (1000 г) и смесь перегоняли при температуре рубашки 65±3°С и пониженном давлении 200-233 мбар. После перегонки до постоянной температуры в перегонном кубе, равной 57°С, и постоянной температуры приемника, равной 45°С, перегонку прекращали. Толуол (432 г) добавляли к горячему раствору и перемешивали, охлаждая до 10±2°С. Полученную суспензию в дальнейшем фильтровали и осадок на фильтре промывали водой (250 г) и толуолом (432 г). Соединение (V) сушили при 45-50°С и давлении -350 мбар в вакууме в потоке азота в течение 24 ч до постоянной массы. Выделенное твердое вещество весило 76,0 г (выход 62,0%).

Пример 2. Получение соединения (VII)

Соединение (V) распределяли между дихлорметаном и водным раствором карбоната натрия. Органическую фазу (содержащую нейтральное основание (V)) дополнительно промывали водным раствором карбоната натрия, перегоняли при пониженном давлении и заменяли растворитель на диметилформамид (ΏΜΓ). В этом растворе анализировали содержание по массе (V). К суспензии (VI) (1,0 экв. в сравнении с (V)) в ΏΜΓ добавляли 2 экв. 4-метилморфолина (МММ) и 1,1 эквивалента О-бензтриазол-1-ил-П,К,К',К'тетраметилурония тетрафторбората (ТВТИ). Эту смесь перемешивали при температуре окружающей среды до завершения активации эфира (около 90 мин). Далее добавляли раствор соединения (V) в ΏΜΓ (1 экв.) и полученный раствор перемешивали в течение ночи, после чего о завершении реакции свидетельствовала ВЭЖХ. Добавляли воду при 75°С и смесь охлаждали для кристаллизации продукта. Смесь охлаждали до 5°С, фильтровали и осадок на фильтре промывали водой. Продукт сушили при пониженном давлении при 70°С.

Пример 3. Получение соединения (VIII)

В реакторе с хорошим перемешиванием 45 г соединения (VII) в 450 мл дихлорметана взаимодействовали на протяжении минимум 5 ч с 61 г монопероксифталата магния (ММРР) (66,4% в пересчете на свободный кислород, 1,5 экв.) в 450 г воды до завершения реакции. Фазы разделяли и органическую фазу последовательно промывали равными объемами воды, 5% водного раствора бикарбоната натрия и воды. Полученный раствор концентрировали до около 40% раствора (по массе) и разбавляли 180 г метилизобутилкетона (МТОК). В результате дальнейшей перегонки для удаления остаточного дихлорметана с затравкой подходящими кристаллами и охлаждения получали продукт в виде кристаллического твердого вещества. Кристаллы фильтровали, промывали 30 г МЮК и высушивали при 50°С при пониженном давлении для получением 41,8 г соединения (VIII) (выход 89,3%).

- 9 025572

Пример 4. Получение соединения (IX)

В 200-мл реакционную колбу с рубашкой вносили соединение (VIII) (50,0 г, 116 ммоль) и метанол (50 мл). Эту смесь охлаждали до -5°С и закупоривали после создания частичного вакуума (около 100 мм рт.ст.). Безводный НС1 (52,2 г, 1,43 моль) добавляли, поддерживая температуру реакционной смеси ниже 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0±1°С в закрытом состоянии. Через 16 ч реакция проходила до конца (менее 2 А% (VIII) по данным ВЭЖХ). К раствору промежуточного продукта добавляли безводный метанол (100 мл), поддерживая температуру ниже 5°С. Раствор обрабатывали ΝΗ₃ (27,7 г, 1,62 моль), поддерживая температуру ниже 0°С. Прежде чем допускали нагревание смеси до комнатной температуры, проверяли рН в аликвоте, растворенной в дистиллированной воде (рН 8-10 свидетельствует о достаточном количестве аммиака). Для завершения реакции реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение ночи.

Пример 5. Процесс производства жидкой фармацевтической композиции

Жидкую фармацевтическую композицию получали следующим образом:

I. Метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{ [4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноат (количества приведены в табл. 1) растворяли в воде для инъекций при перемешивании в сосуде, изготовленном из инертного материала (например, нержавеющей стали или стекла).

II. Хлорид натрия, моногидрат лимонной кислоты и цитрат натрия (дигидрат) (количества приведены в табл. 1) растворяли в воде для инъекций при перемешивании в сосуде, изготовленном из инертного материала (например, нержавеющей стали или стекла) до полного растворения. Раствор метил (2К,3К)-2{3- [амино(имино)метил] бензил} -3-{[4-(1 -оксидопиридин-4 -ил)бензоил] амино}бутаноата, полученный на стадии I, добавляли к данному раствору при перемешивании.

При необходимости, значение рН доводили с помощью раствора гидроксида натрия (например, 1М гидроксида натрия) или разбавленной соляной кислоты (например, 1М соляной кислотой). Для доведения до конечной массы добавляли воду для инъекций.

III. Фильтрование для снижения нагрузки частицами:

Раствор, полученный на стадии II, фильтровали с использованием стерилизованного мембранного фильтра (например, из поливинилидендифторида, полиэфирсульфона или полиамида) с номинальным размером пор 0,2 мкм.

IV. Раствор, полученный на стадии III, помещали в стерилизованные бесцветные ампулы для инъекций.

Ампулы для инъекций далее закрывали стерилизованными обжимными колпачками с вставленными уплотняющими дисками или укупорочными пробками и фланцевыми колпачками с отрывными крышками.

V. Герметичные контейнеры стерилизовали насыщенным паром в автоклаве в соответствии с РН. Еиг./υδΡ (например, >15 мин при >+121°С).

VI. Стерилизованные контейнеры проверяли на предмет грубых загрязнений, повреждения уплотнителя и частиц.

Способы стерилизации используемого оборудования Оборудование для фильтрования (как принадлежащее к оборудованию, непосредственно контактирующему с продуктом), укупорочные пробки, обжимные колпачки с вставленными уплотняющими дисками стерилизовали паром, например, >+121°С в течение не менее 15 мин (РйЕит./υδΡ).

Состав полученной жидкой фармацевтической композиции приведен в табл. 1.

Таблица 1

пример	А	В	С
отамиксабан (мг)	1,000	5, 000	50,000
моногидрат лимонной	2, 53	2, 53	2,53
кислоты (мг)
дигидрат натриевой	3, 15	3, 15	3,15
соли лимонной
кислоты
хлорид натрию (мг)	7, 00	7, 00	7,00
вода для инъекций	до 1,007 мл	до 1, 007 мл	до 1, 007 мл

- 10 025572

Пример 6. Содержание примесей в зависимости от рН и от многократного автоклавирования

Жидкие фармацевтические композиции получали, как описано в примере 5, с содержанием Отамиксабана 1 мг/мл. рН доводили до соответствующего значения с помощью раствора гидроксида натрия (1М гидроксидом натрия) или разбавленной соляной кислотой (1М соляной кислотой).

Содержание метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты и (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты анализировали с помощью ВЭЖХ, эти данные представлены в табл. 2 и 3.

Таблица 2. Увеличение содержания метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %

рН	количество операций автоклавирования
0	1	2	3
2,5	0, 39	0,71	1, 02	1,32
3,0	0, 39	0,74	1, 09	1,43
3,2	0, 39	0,76	1, 13	1,50
3,5	0, 39	0,81	1,23	1, 65
3,7	0, 39	0,87	1,33	1,80
3,7	0, 39	0,84	1,28	1,71
4,0	0, 39	0,95	1, 48	2,02
4,2	0, 39	1,08	1,75	2,42
4,5	0, 39	1,40	2,37	3,36
4,7	0, 39	1,84	3,20	4,58

Таблица 3. Увеличение содержания (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4ил)бензоиламино]масляной кислоты; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %.

рН	количество операций автоклавирования
0	1	2	3
2,5	0,10	0, 33	0, 56	0,79
3,0	0,08	0, 18	0, 26	0,36
3,2	0,08	0, 15	0, 21	0,27
3,5	0,08	0, 12	0, 17	0,21
3,7	0,08	0, 11	0, 16	0,20
3,7	0,08	0, 12	0, 16	0,19
4,0	0,08	0, 12	0, 16	0, 19
4,2	0,07	0, 13	0, 18	0,22
4,5	0,08	0, 15	0, 24	0,30
4,7	0,08	0,20	0, 32	0,43

Содержание метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты было минимальным при минимальном значении рН, тогда как содержание (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты было минимальным при рН 4.

Конечная стерилизация

Конечную стерилизацию проводили в автоклаве при стандартных условиях (> 15 мин./ >+121°С).

Определение содержания Отамиксабана, метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты и (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты проводили градиентной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), как указано ниже:

- 11 025572

Неподвижная фаза: Материал колонки:

Длина колонки: Внутренний диаметр колонки:

Уравновешивание колонки

Хранение колонки:

НР йогЬах 5В-С 18, 3,5 мкм

Нержавеющая сталь

150 мм

4, б мм

Перед введением образца колонку необходимо промыть подвижной фазой В (%В=25) в течение по меньшей мере 60 минут при скорости потока 1 мл/мин.

Колонку можно хранить в смеси ацетонитрил/вода=20/80 (об/об)

Подвижная фаза А.

Обычно 8,16 г безводного дигидрофосфата калия помещали в химический стакан. Добавляли 2000 мл воды и с помощью фосфорной кислоты (около 4 мл) доводили значение рН до 2,15, используя рНметр. Подвижную фазу фильтровали через 1,5 мкм фильтр.

Стабильность подвижной фазы А: 1 месяц при комнатной температуре

Подвижная фаза В.

Обычно 500 мл подвижной фазы А добавляют к 500 мл ацетонитрила. Перемешивают и дегазируют.

Стабильность подвижной фазы В: 1 месяц при комнатной температуре Градиент:

Время (мин)	Подвижная фаза А (%)	Подвижная фаза В (¾)
0	75	25
25	69	31
45	20	80
50	75	25
60	75	25

В случае анализа стандартов и проверки пригодности системы (но не для отрицательного контроля) градиент может быть изменен следующим образом:

Время (мин) Подвижная фаза А (%) Подвижная фаза В (%)

0	75	25
25	69	31
25, 01	20	80
30	75	25
36	75	25

Методика:

Скорость потока:

Объем введения:

Температура автосамплера:

Температура колонки:

Детекция:

Общее время хроматографирования (обычно):

мл/мин

0 мкл

Установить температуру автосамплера на +12°С Установить температуру печи на + 40°С

230 нм (УФ) мин

- 12 025572

Время удержания: отамиксабан около 17,2 мин метиловый эфир (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты около 34,9 мин (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляная кислота около 7,6 мин

Пример 7. Содержание примесей в зависимости от концентрация Отамиксабана и автоклавирования

Жидкие фармацевтические композиции получали, как описано в примере 5, с содержанием Отамиксабана 1, 5 или 50 мг/мл. рН доводили до соответствующего значения с помощью раствора гидроксида натрия (1М гидроксидом натрия) или разбавленной соляной кислотой (1М соляной кислотой).

Содержание метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты анализировали с помощью ВЭЖХ, как описано в примере 6. Эти данные представлены в табл. 4.

Таблица 4. Увеличение содержания метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %.

рн	отамиксабан (мг/мл)	объем флакона (мл)	условия стерилизации	количество операций автоклавирования
0	1	2	3
4,2	5	5	20 мин при 123°С	0, 3	1,0	1,8	2,6
4,2- 4,3	5	5	20 мин при 123°С	0, 2	0,9	1,7	2, 5
4,2	50	5	20 мин при 123°С	0, 3	1,1	1,9	2,7
4,2	1	50	20 мин при 127°С	0,4	1,3	2,3	нет данных
4,2	1	50	20 мин при 125°С	0,4	1,3	нет данный	нет данных
4,2	5	50	20 мин при 125°С	0,4	1,4	нет данных	нет данных

Содержание метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты не зависело от концентрации Отамиксабана или объема ампулы. Дополнительное автоклавирование влечет за собой увеличение содержания метилового эфира (2К,3К)-2-(3карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты, не зависящее от концентрации Отамиксабана и объема ампулы.

Пример 8. Содержание примесей в зависимости от рН и времени хранения

Жидкие фармацевтические композиции получали, как описано в примере 5, с содержанием Отамиксабана 1 мг/мл. рН доводили до соответствующего значения с помощью раствора гидроксида натрия (1М гидроксидом натрия) или разбавленной соляной кислотой (1М соляной кислотой). Полученные ампулы подвергали однократной обработке в автоклаве и хранили при 40°С и 75% ОВ (относительной влажности).

Содержание метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты и (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты анализировали с помощью ВЭЖХ, как описано в примере 6. Эти данные представлены в табл. 5 и 6.

Таблица 5. Увеличение содержания метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %

- 13 025572

3,5	0, 81	0, 91	1,06	1, 32
3,7	0, 87	0, 96	1,15	1, 43
4,0	0, 95	1,04	1,23	1, 53
4,2	1, 08	1,20	1,39	1, 71
4,5	1, 40	1,52	1,76	2, 13
4,7	1, 84	1,97	2,24	2, 65

Таблица 6. Увеличение содержания (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4ил)бензоиламино]масляной кислоты; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %

РН	время хранения (месяцы)
0	1	3	6
2, 5	0,33	1,47	3, 73	7,10
3, 0	0,18	0, 58	1, 39	2,61
3,2	0, 15	0,41	0, 93	1,74
3, 5	0,12	0,27	0, 55	0,99
3,7	0,11	0,22	0, 42	0,72
4, 0	0, 12	0, 18	0, 32	0,52
4,2	0,13	0, 18	0, 27	0,43
4, 5	0, 15	0,20	0, 30	0,44
4,7	0,20	0,25	0, 36	0,52

Содержание (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты возрастало быстрее при более низком значении рН, тогда как содержание метилового эфира (2К,3К)-2-(3 -карбамоилбензил)-3-[4-( 1 -оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты изменялось параллельно при различных значениях рН, что свидетельствует об одинаковом наклоне графиков и скорости нарастания изменений в продолжение времени хранения.

Пример 9. Содержание примесей в зависимости от кислотного реакционного соединения и времени хранения

Жидкие фармацевтические композиции получали, как описано в примере 5, с содержанием Отамиксабана 1 мг/мл. Вместо моногидрата лимонной кислоты и дигидрата цитрата натрия, как в примере 5, использовали винную кислоту, янтарную кислоту, яблочную кислоту и фосфорную кислоту с концентрацией 22,8 ммоль/л. Также, в качестве контрольных образцов были взяты образцы, не содержащие кислотного реакционного соединения. рН доводили до соответствующего значения (в том числе и в образцах, не содержащих кислотного реакционного соединения) с помощью раствора гидроксида натрия (1М гидроксидом натрия) или разбавленной соляной кислотой (1М соляной кислотой). Полученные ампулы подвергали однократной обработке в автоклаве и хранили при 40°С и 75% ОВ (относительной влажности).

Конечная стерилизация

Конечную стерилизацию проводили в автоклаве при стандартных условиях (> 15 мин./ >+121°С). Определение содержания Отамиксабана, метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты и (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты проводили градиентной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), как указано ниже (и как показано в табл. 7):

НР йогЬах 5В-С 18, 3,5 мкм

Неподвижная фаза; Материал колонки;

Длина колонки;

Внутренний диаметр колонки;

Уравновешивание колонки:

Нержавеющая сталь

150 мм

4,6 мм

Перед введением образца колонку необходимо промыть подвижной фазой В (%В=17) в течение по крайней мере 60 минут при скорости потока 1 мл/мин.

Подвижная фаза А.

- 14 025572

Поместить 6,8 г безводного дигидрофосфата калия в химический стакан и добавить 2000 мл воды. рН довести до значения 3,1 с помощью фосфорной кислоты (около 0,5 мл), используя рН-метр.

Подвижная фаза В.

Добавить 200 мл подвижной фазы А к 800 мл ацетонитрила, далее перемешать и дегазировать. Стабильность подвижной фазы В 1 месяц при комнатной температуре:

Градиент:

Время (мин)	Подвижная фаза А (¾)	Подвижная фаза В (%)
0	83	17
18	78	22
25	44	56
28	20	80
29	20	80
30	83	17
36	83	17

Методика:

Скорость потока:

Объем вкола:

Температура автосамплера:

Температура колонки:

Детекция:

Общее время хроматографирования (обычно):

Время удержания:

Отамиксабан метиловый эфир (2К,ЗК)-2-(3карбамоил-бензил)-3-[4-(1-оксипиридин- 4 -ил) бензоиламино]масляной кислоты (2К,ЗК)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-окси-пиридин-4ил)бензоиламино]-масляная кислота мл/мин

0 мкл

Установить температуру автосамплера на +12°С Установить температуру печи на + 2 5°С

300 нм (УФ)

6 мин

Около 15 мин

Около 24 мин

Около 6,9 мин

- 15 025572

Таблица 7. Содержание соединений, имеющих формулы II и III, в начале и спустя месяц хранения;

значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %.__

кислотное реакционное соединение	рН	формула II	формула III	всего примесей
в начале	1 месяц	в начале	1 месяц	в начале	1 месяц	в начале	1 месяц
винная кислота	3,0	3, 1	0,14	0,51	0,56	0, 63	0,82	1, 27
винная кислота	3,5	3, 6	0,07	0,20	0, 65	0,73	0,85	1,06
винная кислота	4,0	4,1	0,07	0,13	0,82	0, 91	1,02	1,16
винная кислота	4,6	4,6	0,14	0,18	1,37	1,47	1,63	1,78
винная кислота	5,1	5,1	0,50	0,57	2,24	2,42	2,87	3, 11
винная кислота	5, 9	6, 0	1,64	2,11	12,99	13, 35	15,02	15, 91
фосфорная кислота	3,1	з, 1	0,11	0,42	0, 64	0,71	0,88	1,26
фосфорная кислота	3, 6	3, б	0,07	0,19	0,70	0,78	0,89	1, 10
фосфорная кислота	4,2	4,2	0,08	0,14	0, 91	1, 00	1,11	1, 27
фосфорная кислота	4, 6	4,7	0,13	0,19	1,29	1, 40	1,53	1, 71
фосфорная кислота	5,1	5,1	0,25	0,34	2,44	2,56	2,80	3, 03
фосфорная кислота	6,1	6,1	1,65	2,14	14,67	14,59	16, 72	17,18
янтарная кислота	3,1	3, 1	0,12	0,43	0,55	0, 63	0,79	1, 19
янтарная кислота	3, 6	3,6	0,06	0,18	0, 60	0, 68	0,77	0, 99
янтарная кислота	4,0	4,1	0,06	0,11	0,77	0, 86	0,95	1,09
янтарная кислота	4,5	4,6	0,10	0,14	1,24	1,34	1,47	1, 61
янтарная кислота	5,0	5,1	0,28	0,35	2,83	2,94	3,23	3, 42
янтарная кислота	6, 0	6, 1	2,20	2,65	18,88	19,21	21, 66	22,54
яблочная кислота	3, 0	3,2	0,14	0,50	0,58	0, 65	0,85	1, 28
яблочная кислота	3, 6	3,7	0,07	0, 19	0, 65	0,73	0,83	1, 04
яблочная кислота	4, 0	4,1	0,07	0, 12	0,82	0, 91	1,01	1, 16
яблочная кислота	4,5	4,6	0,11	0, 16	1,31	1,44	1,55	1,72
яблочная кислота	5, 0	5,1	0,31	0,38	3,03	3, 04	3,46	3, 54
яблочная кислота	6,1	6,1	2,17	2,66	17,7 9	18,17	20,54	21,49
без кислотного	3, 2	3,3	0,09	0,30	0,52	0, 59	0,73	1,02
соединения
без кислотного	3, 7	3,8	<0,05	0,14	0,57	0, 66	0,69	0, 92
соединения
без кислотного	4, 8	5,5	0,09	0,23	1,07	1, 36	1,27	1, 72
соединения
без кислотного	5, 1	5,5	0,27	0,37	2,52	2,51	2,91	3, 02
соединения
без кислотного	5, 6	5,7	0,28	0,59	2,45	2,53	2,86	3, 24
соединения
без кислотного	5, 5	5,8	0,45	0, 84	3,78	4,52	4,35	5,54
соединения

Таблица 8. Содержание соединений, имеющих формулы II и III, в начале и спустя 2 месяца хранения; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %

кислотное реакционное соединение	рН	формула II	формула III	всего примесей
в начале	2 месяца	в начале	2 месяца	в начале	2 месяца	в начале	2 месяца
винная кислота	3, 0	3, 0	0, 14	0, 97	0, 56	0,73	0,82	1, 82
винная кислота	3, 5	3, 5	0, 07	0, 36	0, 65	0,85	0,85	1,33
винная кислота	4, 0	4,0	0, 07	0, 20	0, 82	1,06	1,02	1, 37
винная кислота	4, 6	4,5	0,14	0, 22	1, 37	1,62	1,63	1, 97
винная кислота	5, 1	5,0	0, 50	0, 69	2, 24	2,91	2,87	3, 73
винная кислота	5, 9	6,1	1, 64	2, 63	12,99	13, 75	15, 02	16, 91
фосфорная кислота	3,1	3, 0	0, 11	0, 82	0, 64	0,81	0,88	1, 76
фосфорная кислота	3, 6	3, 6	0, 07	0, 33	0, 70	0,89	0,89	1,35
фосфорная кислота	4, 2	4,2	0, 08	0, 20	0, 91	1,11	1,11	1, 44
фосфорная кислота	4, 6	4,7	0, 13	0, 26	1, 29	1,59	1,53	1, 98

- 16 025572

значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %

Таблица 9. Содержание соединений, имеющих формулы II и III, в начале и спустя 3 месяца хранения;

кислотное реакционное соединение	рН	формула II	формула III	всего примесей
в начале	3 месяца	в начале	3 месяца	в начале	3 месяца	в начале	3 месяца
винная кислота	3, 0	3, 0	0,14	1, 37	0, 56	0, 81	0, 82	2,30
винная кислота	3, 5	3, 5	0,07	0, 50	0, 65	0, 94	0, 35	1,56
винная кислота	4, 0	4, 0	0,07	0, 26	0у 32	1, 20	1, 02	1, 63
винная кислота	4, 6	4, б	0,14	О, 27	1, 37	1, 76	1, 63	2,15
винная кислота	5, 1	5, 1	0,50	0, 78	2, 24	3, Об	2, 87	3, 95
винная кислота	5, 9	6, 0	1, 64	Зу 24	12,99	14,16	15,02	18,01
фосфорная кислота	3, 1	з, 1	0,11	1, 17	О, 64	0, 39	0, 83	2,24
фосфорная кислота	3, б	3, б	0,07	0, 46	0у 70	0, 99	0, 89	1,57
фосфорная кислота	4,2	4,2	0,03	О, 26	0, 91	1, 21	1, 11	1,59
фосфорная кислота	4, б	4,7	0,13	0, 34	1, 29	1, 69	1, 53	2,20
фосфорная кислота	5, 1	5, 1	0,25	0у 58	2, 44	2, 91	2, 30	3, 61
фосфорная кислота	6, 1	6, 0	1, 65	Зу 44	14,67	16,22	16,72	20,33

- 17 025572

янтарная кислота	3, 1	3, 1	0,12	1,16	0, 55	0, 80	0, 79	2,09
янтарная кислота	3, 6	3, 5	0,06	0, 46	0, 60	0, 36	0, 77	1,44
янтарная кислота	4, 0	4, 0	0,06	0, 23	0, 77	1, 07	0, 95	1,42
янтарная кислота	4, 5	4, 5	0,10	0, 24	1, 24	1, 62	1, 47	1, 98
янтарная кислота	5, 0	5, 0	0,28	0, 54	2, 83	3, 31	3, 23	3, 97
янтарная кислота	6, 0	6, 0	2,20	3, 70	18,88	19, 85	21,66	24,44
яблочная кислота	3, 0	3, 0	0,14	1, 33	0, 53	0, 80	0, 85	2,32
яблочная кислота	3, 6	3, б	0,07	0, 47	0, 65	0, 92	0, 83	1,51
яблочная кислота	4, 0	4, 0	0,07	0, 24	0, 82	1, 12	1, 01	1,49
яблочная кислота	4,5	4,5	0,11	0, 25	1, 31	1, 70	1, 55	2,08
яблочная кислота	5, 0	5, 1	0,31	0, 56	3, 03	3, 49	3, 46	4,18
яблочная кислота	6, 1	б, 1	2,17	3, 84	17,79	18,77	20,54	23,48
без кислотного соединения	3, 2	3, 2	0,09	0, 80	0, 52	0, 76	0, 73	1, 69
без кислотного соединения	3, 7	3, 3	<0,05	0, 32	0, 57	0, 33	0, 69	1,28
без кислотного соединения	5, 1	5, 3	0,27	0, 94	2, 52	2, 92	2, 91	3, 98
без кислотного соединения	4, 3	5,7	0,09	0, 50	1, 07	1, 66	1, 27	2,29
без кислотного соединения	5, б	5, 3	0,28	1, 26	2, 45	3, 12	2, 86	4,50
без кислотного соединения	5, 5	6, 1	0,45	2,13	3, 73	5, 40	4,35	7,85

Содержание (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты возрастало быстрее при более низком/высоком значении рН, тогда как содержание метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты изменялось параллельно при различных значениях рН, что свидетельствует об одинаковом наклоне графиков и скорости нарастания изменений в продолжении времени хранения. Обе закономерности не зависели от использованного кислотного реакционного соединения.

Пример 10. Содержание примесей в зависимости от лимонной кислоты и времени хранения

Жидкие фармацевтические композиции получали, как описано в примере 9, с содержанием Отамиксабана 1 мг/мл. Лимонную кислоту использовали в концентрации 22,8 ммоль/л. рН доводили до соответствующего значения с помощью раствора гидроксида натрия (1М гидроксидом натрия) или разбавленной соляной кислотой (1М соляной кислотой). Полученные ампулы подвергали однократной обработке в автоклаве и хранили при 40°С и 75% ОВ (относительной влажности).

Содержание (2К,3К)-2-(3 -карбамимидоил-бензил) -3-[4-(1окси-пиридин-4-ил)бензоиламино]-масляной кислоты (формула II) и метилового эфира (2К,3К)-2(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты (формула III) анализировали с помощью ВЭЖХ, как описано в примере 9, результаты приведены в табл. 9.

Таблица 10. Содержание соединений, имеющих формулы II и III, в начале и спустя 1 месяц хранения; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %

лимонная кислота	рН	формула II	формула III	всего примесей
в начале	1 месяц	в начале	1 месяц	в начале	1 месяц	в начале	1 месяц
	3, 0	3, 1	0,15	0, 55	0, 58	0, 65	0, 87	1,33
	3, б	3, б	0,09	0, 22	0, 62	0, 70	0, 83	1, 06
	4,0	4, 1	0,06	0, 13	0, 77	0, 91	0, 98	1, 17
	4, б	4, 6	0,11	0, 15	1, 25	1, 39	1, 51	1,75
	5, 1	5, 1	0,32	0, 40	3, 12	3,28	3, 57	3, 80
	б, 1	6, 1	2,78	3, 25	23,43	23, 87	27, 12	28,16

Таблица 11. Содержание соединений, имеющих формулы II и III, в начале и спустя 2 месяца хранения; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %.

лимонная кислота	рН	формула	II	формула III	всего п	римесей
в начале	2 месяца	в начале	2	месяца	в начале	2 месяца	в начале	2 месяца
	3, 0	3, 0	0,15	1,03	0, 58	0, 75	0, 87	1, 92
	3, 6	3, 5	0, 08	0,39	0, 62	0, 80	0, 83	1, 33
	4, 0	4, 0	0, Об	0,21	0, 77	1, 06	0, 98	1, 40
	4, 6	4, 5	0, 11	0,20	1,25	1, 53	1, 51	1, 94
	5, 1	5, 1	0, 32	0,49	3, 12	3, 45	3, 57	4, 08
	б, 1	6, 1	2, 78	3,82	23, 43	24,36	27, 12	29, 39

- 18 025572

Таблица 12. Содержание соединений, имеющих формулы II и III, в начале и спустя 3 месяца хранения; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %

лимонная кислота	рн	формула II	формула III	всего примесей
в начале	3 месяца	в начале	3 месяца	в начале	3 месяца	в начале	3 месяца
	3, 0	3, 0	0/ 15	1/48	0/58	О, 82	0, 87	2, 43
	3, 6	3, 5	0, 08	0, 55	0, 62	0, 90	0, 83	1, 58
	4, 0	4/0	0, 06	0, 27	0,77	1/ 12	0, 98	1, 53
	4, 6	4/5	0, 11	0, 26	1,25	1, 68	1, 51	2, 13
	5, 1	5, 1	0, 32	0, 59	3,12	3, 69	3, 57	4, 41
	6/ 1	6/ 1	2, 78	4,37	23, 43	24, 52	27,12	30,23

Пример 11. Содержание примесей в зависимости от кислотного реакционного соединения, рН и многократного автоклавирования

Жидкие фармацевтические композиции получали, в целом, как описано в примере 5, с содержанием Отамиксабана 1 мг/мл. Вместо моногидрата лимонной кислоты и дигидрата цитрата натрия, как в примере 5, использовали винную кислоту, янтарную кислоту, яблочную кислоту, лимонную кислоту и фосфорную кислоту в концентрации 22,8 ммоль/л. Также в качестве контрольных образцов были взяты образцы, не содержащие кислотного реакционного соединения. рН доводили до соответствующего значения с помощью раствора гидроксида натрия (1М гидроксидом натрия) или разбавленной соляной кислотой (1М соляной кислотой). Полученные ампулы 1 и 2 раза подвергали обработке в автоклаве в процессе конечной стерилизации. Конечную стерилизацию проводили в автоклаве при стандартных условиях (> 15 мин/ > +121°С).

Содержание (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты (формула II) и метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4ил)бензоиламино]масляной кислоты (формула III) анализировали с помощью ВЭЖХ, как описано в примере 9, результаты приведены в табл. 10 и 11.

Таблица 13. Содержание соединения, соответствующего формуле II, в начале и после однократного и двукратного автоклавирования; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %.

кислотное реакционное соединение	ρΗ/количество операций автоклавирования	соединение формулы 11/количество операций автоклавирования
начало	1	2	начало	1	2
винная кислота	3,1	3,0	3,1	<0,05	0, 14	0,24
винная кислота	3, 6	3,5	3,5	<0,05	0, 07	0, 12
винная кислота	4,1	4,0	4,0	<0,05	0, 07	0, 13

- 19 025572

винная кислота	4,6	4,6	4,6	<0,05	0, 14	0,24
винная кислота	5,1	5,1	5,0	0, 29*	0, 50	0,79
винная кислота	6, 0	5,9	5,9	<0,05	1, 64	2,94
фосфорная кислота	3,1	3,1	3,1	<0,05	0, 11	0,19
фосфорная кислота	3,7	3,6	3,6	<0,05	0, 07	0,12
фосфорная кислота	4,2	4,2	4,2	<0, 05	0, 03	0,14
фосфорная кислота	4,7	4,6	4,7	<0,05	0,13	0,24
фосфорная кислота	5,1	5,1	5,1	<0, 05	0,25	0,47
фосфорная кислота	6, 1	6,1	6, 0	<0, 05	1, 65	2/ 95
янтарная кислота	3,2	3,1	3,1	<0,05	0,12	0,22
янтарная кислота	3,7	3,6	3, 6	<0, 05	0, 06	0/11
янтарная кислота	4,1	4,0	4,1	<0, 05	0, 06	0/10
янтарная кислота	4, 6	4,5	4,5	<0,05	0,10	0,18
янтарная кислота	5,1	5,0	5,1	<0, 05	0, 23	0/55
янтарная кислота	6, 0	6, 0	6, 0	<0, 05	2, 20	3/79
яблочная кислота	3,1	3,0	3,1	<0, 05	0,14	0/24
яблочная кислота	3, 6	3,6	3, 6	<0, 05	0, 07	0/12
яблочная кислота	4,1	4,0	4,1	<0,05	0, 07	0,11
яблочная кислота	4,6	4,5	4, 6	<0,05	0, 11	0,22

- 20 025572

яблочная кислота	5,1	5,0	5,1	<0,05	0, 31	0,60
яблочная кислота	6,1	6,1	6, 0	<0,05	2, 17	3,81
лимонная кислота	3, 0	3,0	3,1	<0,05	0, 15	0,28
лимонная кислота	3, 6	3,6	3,6	<0,05	0, 08	0,13
лимонная кислота	4,0	4,0	4,1	<0,05	0, 06	0,11
лимонная кислота	4,6	4, 6	4, 6	<0,05	0,11	0,19
лимонная кислота	5,1	5,1	5, 1	<0,05	0, 32	0, 60
лимонная кислота	6,1	6,1	6, 1	<0,05	2,78	4, 64
без кислотного соединения	3,2	3,2	3, 3	<0,05	0, 09	0,12
без кислотного соединения	3,7	3,7	3, 8	<0,05	<0,05	0,09
без кислотного соединения	5,1	5,1	6, 4	<0,05	0, 27	0,53
без кислотного соединения	4,8	4,8	5, 6	<0,05	0, 09	0,18
без кислотного соединения	5,6	5, 6	5, 9	<0,05	0,28	0, 60
без кислотного соединения	5,5	5,5	5,7	<0,05	0, 45	0, 96

< означает менее чем * выпадающая точка

- 21 025572

Таблица 14. Содержание соединения, соответствующего формуле III, в начале и после однократного и двукратного автоклавирования; значения были получены с помощью ВЭЖХ и приведены в %.

кислотное реакционное соединение	рН/количество операций автоклавирования	соединение формулы ΙΙΙ/количество операций автоклавирования
начало	1	2	начало	1	2
винная ки слота	3,1	3, 0	3,1	0,20	0,56	0, 96
винная ки слота	3,6	3, 5	3, 5	0,20	0, 65	1, 14
винная кислота	4,1	4,0	4,0	0,20	0, 82	1,56
винная кислота	4,6	4,6	4,6	0,21	1,37	2,60
винная кислота	5,1	5,1	5, 0	0,27	2,24	5,09
винная кислота	6,0	5,9	5,9	0,21	12,99	23, 93
фосфорная кислота	3,1	3,1	3,1	0,20	0, 64	1,10
фосфорная кислота	3,7	3, 6	3, 6	0,20	0,70	1,26
фосфорная кислота	4,2	4,2	4,2	0,20	0, 91	1, 69
фосфорная ки слота	4,7	4,6	4,7	0,20	1,29	2,60
фосфорная кислота	5,1	5,1	5,1	0,20	2, 44	4,69
фосфорная ки слота	6,1	6, 1	6, 0	0,21	14,67	26,71
янтарная ки слота	3,2	3,1	3,1	0,20	0,55	0, 94
янтарная ки слота	3,7	3, 6	3, 6	0,20	0, 60	1, 04

- 22 025572

янтарная кислота	4,1	4, 0	4, 1	0, 20	0, 77	1,33
янтарная кислота	4,6	4,5	4,5	0, 21	1, 24	2,32
янтарная кислота	5,1	5, 0	5,1	0, 21	2, 33	5,55
янтарная кислота	б, 0	6, 0	6, 0	0, 21	18,38	32,53
яблочная кислота	3,1	3, 0	3,1	0, 20	0, 58	0,94
яблочная кислота	3,6	3, б	3, б	0, 20	0, 65	1,10
яблочная кислота	4,1	4, 0	4, 1	0, 20	0, 32	1,43
яблочная кислота	4,6	4,5	4,6	0, 20	1,31	2,55
яблочная кислота	5,1	5,0	5,1	0, 21	3, 03	5,34
яблочная кислота	б, 1	6, 1	6, 0	0, 21	17,79	31,62
лимонная кислота	3,0	3, 0	з, 1	0, 20	0, 58	0,97
лимонная кислота	3,6	3, б	3, б	0, 20	0, 62	1,07
лимонная кислота	4,0	4,0	4,1	0, 20	0,77	1,41
лимонная кислота	4, 6	4,6	4, б	0, 20	1, 25	2,41
лимонная кислота	5,1	5, 1	5, 1	0, 21	3, 12	6,01
лимонная кислота	6, 1	6, 1	6, 1	0, 21	23, 43	38,79
без
кислотного	3,2	3,2	3, 3	0, 20	0, 52	0,94
соединения
без
кислотного	3,7	3,7	3, 8	0,20	0, 57	0, 98
соединения
без
кислотного	4,8	4,8	5,6	0,21	1, 07	2,03
соединения
без
кислотного	5,5	5,5	5,7	0,21	3,78	8,03
соединения
без
кислотного	5,6	5,6	5,9	0,21	2,45	5,21
соединения
без
кислотного	5,1	5,1	6,4	0,20	2,52	4,77
соединения

Содержание соединения, соответствующего формуле III, выше, чем содержание соединения, соответствующего формуле II, и при этом возрастает практически в линейной зависимости от количества операций автоклавирования. Содержание примесей соединений с формулой II и формулой III зависит от рН исследуемой жидкой фармацевтической композиции и не зависит от использованного кислотного

- 23 025572 реакционного соединения.

Claims (13)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Водная фармацевтическая композиция для инъекций, содержащая:

   а) от 0,1 до 60 мг/мл метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4ил)бензоил] амино}бутаноата,

   б) от 1 до 1000 ммоль/л кислотного реакционного соединения, где кислотное реакционное соединение выбрано из группы, состоящей из лимонной кислоты, винной кислоты, янтарной кислоты, малеиновой кислоты или фосфорной кислоты или солей указанных кислот, или смеси одного или нескольких из указанных кислотных реакционных соединений, и

   в) рН которой доведен до значений от около рН 3 до около рН 5,0 добавлением указанного кислотного реакционного соединения.
2. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанное реакционное кислотное соединение выбрано из лимонной кислоты и цитрата натрия или их смеси.
3. 3. Водная фармацевтическая композиция по п.1 или 2, содержащая от 1,0 до 50 мг/мл метил (2К,3К)-2-{3-[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата и от 20 до 25 ммоль реакционного кислотного соединения или его соли или их смеси.
4. 4. Водная фармацевтическая композиция по п.3, содержащая от 1,0 до 5 мг/мл метил (2К,3К)-2-{3[амино(имино)метил]бензил}-3-{[4-(1-оксидопиридин-4-ил)бензоил]амино}бутаноата и от 20 до 25 ммоль реакционного кислотного соединения или его соли или их смеси.
5. 5. Фармацевтическая композиция по п.1 или 2, где водная фармацевтическая композиция характеризуется рН от около рН 3 до около рН 4,7 в водном растворе или дисперсии фармацевтической композиции.
6. 6. Фармацевтическая композиция по п.5, в которой указанное кислотное реакционное соединение создает рН от около рН 3,7 до около рН 4,3.
7. 7. Фармацевтическая композиция по п.5, в которой указанное кислотное реакционное соединение создает рН от около рН 4,0 до около рН 4,2.
8. 8. Фармацевтическая композиция по пп.1-7, содержащая после длительного хранения максимальное количество примеси (2К,3К)-2-(3-карбамимидоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4-ил)бензоиламино]масляной кислоты, не превышающее около 8,0%.
9. 9. Фармацевтическая композиция по п.8, в которой указанное максимальное количество примеси составляет от 0,3 до 4,0%, предпочтительно от 0,4 до 1,8%.
10. 10. Фармацевтическая композиция по пп.1-7, содержащая после длительного хранения максимальное количество примеси метилового эфира (2К,3К)-2-(3-карбамоилбензил)-3-[4-(1-оксипиридин-4ил)бензоиламино]масляной кислоты, не превышающее около 5,0%.
11. 11. Фармацевтическая композиция по п.10, в которой указанное максимальное количество примеси составляет от 0,7 до 4,5%, предпочтительно от 0,9 до 3,5%.
12. 12. Фармацевтическая композиция по пп.1-11, где указанная фармацевтическая композиция является стерильной.
13. 13. Фармацевтическая композиция по пп.1-12 для лечения острого инфаркта миокарда, инфаркта миокарда без подъема 8Т-сегмента, нестабильной стенокардии, тромбоэмболии, резкой закупорки сосуда, связанной с тромболитической терапией, чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластики, преходящих нарушений мозгового кровообращения, инсульта, перемежающейся хромоты и рестеноза.