EA024466B1

EA024466B1 - Гепатопротекторное средство

Info

Publication number: EA024466B1
Application number: EA201200799A
Authority: EA
Inventors: Михаил Александрович ГЕТЬМАН; Юрг ГЕРЧ
Original assignee: Михаил Александрович ГЕТЬМАН
Priority date: 2012-06-07
Filing date: 2012-06-07
Publication date: 2016-09-30
Also published as: WO2013184036A3; EA201200799A1; WO2013184036A2

Abstract

Предложен способ лечения или профилактики воспалительных заболеваний печени, при котором нуждающемуся в этом пациенту перорально вводят гепатопротекторное средство, содержащее масляный раствор β-кариофиллена в виде его cis изомера, trans изомера или их комбинации, включающий очищенные оливковое или подсолнечное масло при следующем соотношении ингредиентов, мас.%: β-кариофиллен в виде его cis изомера, trans изомера или их комбинации - 10; очищенное оливковое или подсолнечное масло - остальное, чем обеспечивают индуцирование поляризации купферовских клеток, обеспечивают доза-зависимое ингибирование внутриклеточного кальция, индуцированного липополисахаридами, предупреждают рост содержания супероксидных радикалов и перекисного окисления липидов, способствуют регрессии, около 50%, имеющегося фиброза печени, предупреждают развитие фиброза, вызванного алкогольной и жировой интоксикацией, доза вводимого упомянутого гепатопротекторного средства составляет предпочтительно от 20 до 200 мг в день.

Description

Изобретение относится к области лекарственных средств, а именно к средствам для лечения заболеваний печени.

Уровень техники

Распространенность заболеваний печени в мире составляет более 30%. Самым распространенным среди них является стеатоз или жировая болезнь печени. В Российской Федерации, по некоторым данным, в среднем, у 27% населения имеется неалкогольная жировая болезнь печени. Кроме этого, официально в России насчитывается более 10 млн человек, больных алкоголизмом. Вследствие злоупотребления алкоголем у 90-100% пациентов развивается алкогольный стеатоз, который в 10-20% случаев трансформируется в алкогольный гепатит и цирроз печени. Среди больных с патологией печени летальный исход от цирроза печени вследствие алкогольной болезни печени составляет около 44% смертельных случаев.

Причинами стеатоза, кроме злоупотребления алкоголем, являются: воздействие некоторых лекарств и токсических веществ; ожирение;

сахарный диабет; метаболический синдром;

хронические заболевания пищеварительной системы с нарушением всасывания.

Повреждения печени, вызванные гепатотоксинами, такими как, например, этанол, характеризуются различной степенью повреждения гепатоцитов, фиброзом, а также гибелью клеток по типу апоптоза или некроза.

В реакциях окисления токсины индуцируют избыточную продукцию и накопление в печеночной клетке свободных радикалов и других токсических метаболитов. В процессе оксидативного стресса происходит чрезмерная мобилизация свободных ионов железа из ферритина, что, в свою очередь, увеличивает содержание гидроксильных радикалов. Свободные радикалы запускают реакции перекисного окисления липидов и секрецию цитокинов, включая фактор некроза опухоли α (ΤΝΡ-α), интерлейкин-6 (1Ь-6) и интерлейкин-8 (1Ь-8). Эти патологические реакции приводят к некрозу гепатоцитов и развитию воспалительной клеточной инфильтрации.

Продукты перекисного окисления липидов, некроз гепатоцитов, ΤΝΡ-α, 1Ь-6, 1Ь-8 являются активаторами стеллатных клеток Но. Их стимуляция сопровождается избыточной продукцией соединительной ткани с развитием фиброза, а при длительном персистировании процесса - циррозом печени.

Процессы, приводящие к клеточной смерти, включают в себя нарушение гомеостаза цитоплазматического кальция, истощение по глутатиону, перекисное окисление липидов и связанное с этим увеличение проницаемости митохондриальной мембраны (МРТ). В свою очередь эти процессы обусловлены возникновением реакционноспособных продуктов метаболизма гепатотоксинов и появлением активных форм кислорода (ΡΟ8) во время воспалительной реакции.

В последнее время также высказано предположение о том, что предотвращение возникновения митохондриальных пор может помочь снизить гибель клеток. Т.е. воздействовать следует на ключевые моменты повреждения печени: окислительный стресс и перекисное окисление липидов.

Таким образом, в профилактике и лечении гепатотоксического повреждения печени основной стратегией является снижение количества реакционноспособных продуктов метаболизма гепатотоксинов, применение антиоксидантов, стабилизация гомеостаза цитоплазматического кальция и модулирование биологического ответа купферовских клеток.

В арсенале современных гепатопротекторных средств присутствует разнообразные лекарственные средства и биологически активные добавки, которые в той или иной степени оказывают терапевтическое действие на процессы токсической деградации клеток печени. В основном это препараты фосфолипидов, адеметионина, тиоктовой кислоты, действующих веществ расторопши пятнистой и уродезоксихолевой кислоты. Большое место в связи с практическим отсутствием противопоказаний и незначительным числом побочных эффектов занимают препараты растительного происхождения, например на основе расторопши пятнистой, артишока полевого и куркумы длинной. Общим недостатком растительных средств является низкая эффективность, зависимость от растительного сырья и вариабельность состава. При этом средства растительного происхождения с высокой вероятностью вызывают аллергические реакции.

Все перечисленные лекарственные средства являются неспецифическими гепатопротекторами, преимущественно метаболического действия. Молекулярные механизмы их фармакологической активности до конца не понятны, а терапевтическая активность недостаточно прогнозируема.

Таким образом, по-прежнему сохраняется потребность в создании новых гепатопротекторных средств.

Сущность изобретения

Задачей данного изобретения является разработка новых гепатопротекторных средств.

Данная задача решается тем, что предложено гепатопротекторное средство на основе β-кариофиллена, причем это средство пригодно для перорального введения.

- 1 024466

Предложены также способ лечения и профилактики воспалительных заболеваний печени, при котором нуждающемуся в этом пациенту вводят терапевтически активное количество β-кариофиллена, или его производного, или его фармацевтически приемлемой соли, а также фармацевтическая композиция, содержащая β-кариофиллен, или его производные или фармацевтически приемлемые соли и фармацевтически приемлемый эксципиент.

Краткое описание графических материалов

Фиг. 1 - регрессия фиброза после систематического введения β-кариофиллена циррозным крысам.

Фиг. 2 - регрессия фиброза, вызванного этанол + РИГА в течение 45 дней на фоне приема β-кариофиллена (фиг. 2а и 2б).

Фиг. 3 - индуцирование β-кариофилленом поляризации купферовских клеток при стимулировании липополисахаридами.

Фиг. 4 - доза-зависимое ингибирование β-кариофилленом индуцированного липополисахаридами (ЛПС) внутриклеточного кальция в Купферовских клетках крыс.

Фиг. 5 - ингибирование бета-кариофилленом индуцированного РМА пероксидирования в Купферовских клетках крыс.

Подробное описание изобретения

Бета-кариофиллен (кариофиллен) представляет собой сесквитерпеновый углеводород, достаточно широко распространенный в природе в составе эфирных масел таких растений как: гвоздика (3,56%), розмарин (до 8,3%), хмель (до 14,5%), каннабис (до 37,5%), черный перец (7,29%) и других.

Кариофиллен существует в виде двух изомеров: собственно кариофиллен или транс-β-кариофиллен (I) и изокариофиллен или цис^-кариофиллен (II)

Кариофиллен быстро окисляется на воздухе и очень легко, особенно под действием кислот, претерпевает превращения, связанные с перестройкой углеродного скелета.

Применение кариофиллена в основном связано с его ароматическими свойствами, поэтому основной областью использования является парфюмерная промышленность. Известная нестабильность кариофиллена существенно ограничивает возможности его применения.

Неожиданно авторами изобретения было обнаружено, что бета-кариофиллен (с18-изомер, 1таи8изомер, их комбинация) обладает сочетанием свойств, которые позволяют рационально применять его при лечении заболеваний печени, а именно кариофиллен воздействует на внутриклеточный кальций, проявляет свойства антиоксиданта и модулирует воспалительный ответ путем воздействия на купферовские клетки. Более того, оказалось, что все эти эффекты сохраняются при пероральном применении кариофиллена, что важно для лекарственного средства. Авторами изобретения показано в экспериментах на животных, что кариофиллен снижает степень существующего фиброза и позволяет предупредить развитие индуцируемого алкоголем фиброза. Это воздействие опосредуется влиянием кариофиллена на купферовские клетки, внутриклеточый кальций (восстанавливается гомеостаз кальция, нарушенный воспалительным процессом) и его антиоксидантными свойствами, что, как было отмечено выше, является основной стратегией в предупреждении и лечении стеатоза и последующего цирроза печени.

Кариофиллен используют в форме фармацевтических препаратов (лекарственных форм). Фармацевтические препараты кариофиллена могут вводиться перорально, т.е. это такие лекарственные формы как растворы, эмульсии или суспензии, а также таблетки, таблетки покрытые оболочкой, драже, твердые и мягкие желатиновые капсулы. Например, в целях предупреждения окисления и разложения кариофиллена в качестве лекарственной формы для перорального применения может быть использован масляный раствор кариофиллена, помещаемый в изолированную кишечнорастворимую капсулу.

Для получения фармацевтических препаратов (лекарственных форм) к кариофиллену добавляют терапевтически инертные, неорганические или органические носители. Лактоза, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновая кислота или ее соли и т.п. могут быть использованы, например, в качестве таких носителей для таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, драже и твердых желатиновых капсул. Подходящими носителями для мягких желатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и т.п. Подходящими носителями для получения растворов и сиропов являются, например, вода, полиолы, сахароза, инвертный сахар, глюкоза и т.п.

Кроме того, фармацевтические препараты могут содержать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие вещества, эмульгаторы, подсластители, красители, корригенты, соли для регулирования осмотического давления, буферы, маскирующие агенты или антиоксиданты и другие, необходимые для приготовления лекарственной формы, компоненты.

- 2 024466

Указанные выше вспомогательные вещества, используемые для образования лекарственных форм, будут названы далее терапевтически инертными эксципиентами. Однако лекарственные формы средства по изобретению также могут содержать и другие терапевтически активные вещества.

Кариофиллен вводят перорально в дозе от 10 до 500 мг в день. Например, 20-200 мг в день. Конкретные примеры осуществления изобретения

Индукция цирроза у крыс.

Исследования проводились на мужских особях крыс линии Вистар с циррозом печени, осложненным асцитом или без такового. Контрольная группа также состояла из мужских особей крыс линии Вистар.

Цирроз был индуцирован СС14 (тетрахлорметаном) в соответствии с ранее описанным методом (С1апа 1 апб Лтспсх V (1999) Кспа1 букГипсОоп апб акейек ίη СагЪоп-ТсйасЫопбс-шбиссб ситЬоык ίη га1к. Ιη Лксйск апб Кспа1 ИукГипсйоп ίη Пуст Ихксакс. Ра1Ьодспс818 О|адпок1к апб Тгса1тсп1 (Аггоуо V, Ошек Р, Кобск ί, апб 5сНпсг Κν сбк) р. 379-396, В1аск\ус11 §сюпсс 1пс., Ма1бсп, МА).

Циррозные крысы без асцита изучались между 11 и 12 неделями после начала программы индукции цирроза. Отсутствие асцита подтверждалось лапаротомическим методом.

Циррозные крысы с асцитом изучались между 13 и 17 неделями, когда асцит достигал полного развития.

Контрольные крысы изучались в аналогичный период на фоне введения фенобарбитала.

В примере №1 использовались асцитные крысы.

Исследование проводилось в соответствии с критериями Комитета по исследованиям и этике университета Гвадалахары.

Количественная оценка фиброза. Срезы печени (4 мкм) окрашивались 0,1% раствором Сириус красный Р3В (Сигма-Олдрич, Сент Луис, МО) в насыщенной пикриновой кислоте (Сигма-Олдрич), специфически окрашивающим коллаген. Относительная площадь фиброза (выраженная в процентах от общей площади печени) определялась посредством анализа 36 полей окрашенных Сириусом красным срезов печени на одно животное. Каждое поле помещалось в 10х апб КТ-§Нбст §РОТ цифровую камеру и анализировалось при помощи компьютеризированной морфометрической системы. Для определения относительной площади фиброза, измеряемая площадь коллагена делилась на общую площадь поля и умножалась на 100. Вычитание площади просвета сосудов из общей площади давало итоговое значение фактической площади фиброза. Для каждого животного измерялась величина фиброза в процентах и рассчитывалось среднее значение площади фиброза. Содержание коллагена определялось спектрофотометрически методом Весснера.

Изолирование купферовских клеток. Крысы анестезировались интраперитонеально Нембуталом. В брюшной полости делался вентральный разрез в срединной линии и стерильная тефлоновая канюля 24-го размера (1п1госап-\у. 240ί, Вгаип Мс1кипдсп. Мс1кипдсп. Осттапу) вводилась в портальную вену. Печень предварительно промывалась бескальциевым буферным солевым раствором Хэнка (Са'+-Ггсс ИВ§§ с низким содержанием эндотоксинов) (НуС1опс ЬаЪотайтюк. Ьодап, ИТ. И8А) при рН 7,4 и 30°С позволяя крови вытекать из разреза в нижней полой вене. Через 2 мин промывающий раствор замещался раствором коллагеназы А (0.163 и/т1 в ИМЕМ с высоким содержанием глюкозы) (ВосЬтшдсг МаппНспп. МаппНспи Осгтапу) и печень промывалась 30 с со скоростью 5 мл/мин при 35°С. После промывания печень удалялась из крысы и аккуратно диспергировалась. Печеночная суспензия из 8 крыс объединялась и инкубировалась при постоянном перемешивании при 35°С в течение 10 мин в 40 мл раствора коллагеназы, который использовался для промывания в 50 мл полипропиленовых пробирках. После этого все эксперименты проводились при 4°С. Суспензия клеток печени фильтровалась через нейлоновый фильтр (212 рт) и помещалась в 50 мл НВ§§, содержащий 0,3% В8А (фракция V. с низким содержанием эндотоксинов. §1§та, δΐ. Ьошк, МО, ИЬА) и 2 пг/мл ДНКазы (низкое содержание эндотоксинов, стерильный, ВосЬтшдсг МаппНспп, МаппНспп, Осгтапу) и центрифугировалась при 400 X в течение 15 мин. Этот буфер в дальнейшем будет называться рабочий буфер (VВ). Осадок помещался в 15,6 мл VВ и смешивался с 21 мл ИусоРтср (низкое содержание эндотоксинов, стерильный раствор Жсобсп/ с плотностью 1,150 г/мл и осмолярностью 290 миллиосмоль. Иусотпсб РЬагта. Ок1о, №г\уау). Смеси помещались в три 15 мл полипропиленовые пробирки и поверх смеси помещался 1 мл VВ. Красные кровяные клетки и тканевая масса осаждались центрифугированием при 1500 X в течение 15 мин. Клетки интерфазы, являющиеся, в основном, синусоидальными клетками, суспендировались в 50 мл VВ и дважды промывались для удаления Хусобсп/ центрифугированием при 400 X в течение 15 мин. Осадок помещался в 5 мл VВ и дальнейшее фракционирование клеток производилось методом противоточной центрифужной элютриации (ССЕ) с использованием автоклавируемого элютриаторного ротора Вссктап 1Е-5.0 с камерой Бапбсгкоп (Вссктап 1пк1гптсп1к, Ра1о АЬо, СА. υδΛ). Клеточная суспензия вводилась в элютриатор на скорости 12.

Статистический анализ результатов, когда применимо, производился с применением непарных критериев Стьюдента.

- 3 024466

Данные представлены в виде среднего значения ± δ.Ε.Μ. и считаются значимыми на уровне р 0,05 или ниже.

Результаты.

Как показано в приведенных ниже примерах, оральные дозы ВСР были эффективны при лечении цирроза печени, вызванного ССЦ.

Пример 1.

Испытуемые крысы с циррозом, вызванным ССЦ, были рандомизированы в 5 групп. Одной группе перорально вводилась питательная среда (нормальная гранулированная пища) в чистом виде, другим группам - та же питательная среда, содержащая 1 мг/кг, 3 мг/кг, 5 мг/кг и 10 мг/кг кариофиллена, соответственно, в течение 9 дней. Размер относительных площадей фиброза определялся по 30 образцам.

Как показано на фиг. 1, дневная доза 5 мг/кг показала самое значительное уменьшение относительной площади фиброза (около 50%). Таким образом, как показано в эксперименте, кариофиллен демонстрирует высокую оральную биодоступность и способность вызывать регрессию фиброза у крыс с циррозом.

Пример 2.

Испытуемые здоровые крысы были рандомизированы в 3 группы по 6 животных в каждой группе. Группа 1 получала нормальную гранулированную пищу, группа 2 получала перорально вместе с питанием 20% этанола и 15% термически окисленных полиненасыщенных жирных кислот (РИЕЛ) в течение 45 дней. Группа 3 получала вместе с питанием 20% этанол и 15% РИЕЛ вместе с 5 мг/кг кариофиллена, растворенного в этаноле, в течение 45 дней. Для сравнения действия кариофиллена, часть животных группы 3 вместо кариофллена получала 10 мг/кг другого экспериментального вещества б^УН133 в течение того же срока.

В результате эксперимента, у крыс, содержащихся в группе 2, развился фиброз, а у крыс, содержащихся к группе 3, развитие фиброза было значительно замедлено (фиг. 2а и фиг. 2б). Результаты эксперимента подтверждают высокую биодоступность кариофиллена при пероральном применении и показывают способность кариофиллена замедлять процесс развития фиброза при хронической алкогольной и жировой интоксикации.

Кроме того, как показано на фиг. 2б, селективный агонист СВ2 рецепторов б\УН133 недостаточно эффективно подавлял развитие цирроза печени, что подтверждает гипотезу о том, что только сочетание нескольких свойств, присущее кариофиллену, обеспечивает эффективное гепатопротекторное действие.

Пример 3.

Купферовские клетки крыс (макрофаги) (5х 10⁵), изолированные в соответствии с методикой описанной выше, были инкубированы в течение 30 мин с кариофилленом в дозе 100 нМ и 1 мкМ и затем стимулированы 500 мкг липополисахарида в течение 22 ч. В ходе эксперимента определялось соотношение М1 и М2 фенотипов макрофагов.

Результаты, представлены на фиг. 3, свидетельствуют, что кариофиллен эффективно индуцирует поляризацию купферовских клеток с М1 до М2 при стимулировании липополисахаридами. Из этого следует, что кариофиллен оказывает выраженное модулирующее действие на купферовские клетоки, опосредованное, по всей видимости, его агонистической активностью по отношению к эндоканнабиноидным рецепторам 2-го типа.

Пример 4. Исследование влияния на внутриклеточный кальций.

Методика. Купферовские клетки, изолированные в соответствии с методикой, описанной выше, были разделены на 3 группы: 1 группа - интактная, 2-я группа была инкубирована в течение 30 мин и затем стимулирована 500 мкг липополисахарида в течение 22 ч, 3-я группа клеток была разделена на 6 подгрупп, каждая из которых была инкубирована в течение 30 мин с кариофилленом в дозах от 5 до 100 нМ и затем стимулирована 500 мкг липополисахарида в течение 22 ч.

Клетки каждой группы были смешаны с флуорохромом Еига2-АМ и помещены на 30 мин при 37°С в среду Вильямса Е. Покровные стекла с образцами помещались в специально спроектированной пластиковой емкости (Сгоире бе Рескегске еп Тгаиврой МетЪгаиаие, Моп1ге'а1, Оие'Ъес) на полку инверсионного микроскопа (№кои И1арко1 ТМИ) и промывались буфером Кребса-Ханслайта, содержащим (в мМ) 140 ЫаС1, 25 ЫаНСО₃, 10 Нерев, 5.5 декстрозы, 3.8 КС1, 1.6 СаС1₂, 1.2 Мд§О₄, 1.2 КН₂РО₄, и 1 пирувата № (рН 7.4), насыщенный 95% О₂/5% СО₂ при 37°С. Температура емкости контролировалась. Интенсивность флуоресценции измерялась при 340 и 380 нм при помощи охлаждаемой ССИ камеры и системы визуализации Натата18и (Мобе1 С4880; 1тадшд Кевеагск, 1ис)

Измерение содержания Са²+ методом флуоресцентной спектроскопии производилось в каждой из 3-х групп клеток. Изменение содержания Са²+ рассчитывалось по отношению к содержанию Са²+ в группе 1.

Результаты представлены на фиг. 4. Как было показано, кариофиллен доза-зависимо ингибирует внутриклеточный кальций, индуцированный липополисахаридами. Причем, если в группе 2 (без кариофиллена) содержание кальция увеличилось почти 2,3 раза, в группе 3 (с добавлением кариофиллена) увеличение содержания кальция было незначительным.

- 4 024466

Пример 5. Исследование влияния кариофиллена на процесс перекисного окисления липидов.

Методика. Для изучения влияния кариофиллена на процесс перекисного окисления липидов, купферовские клетки инкубировались в 96 чашках в течение 48 ч. Кариофиллен в дозировке 500 нМ был добавлен в питательную среду перед инкубированием и через 1 ч после этого в питательную среду были добавлены липополисахариды. Для измерения супероксидов среда подвергалась аэрации, а купферовские клетки были дважды промыты сбалансированным солевым раствором Ханка (ΗΒδδ). После этого, купферовские клетки инкубировались в ΗΒδδ вместе с 1мкМ РМА (Сигма) и гомогенизировались.

Для последующих измерений были сформированы 3 группы образцов: 1 группа включала в себя интактный гомогенизат купферовских клеток, 2 группа включала в себя гомогенизат купферовских клеток, стимулированных РМА, но без добавления кариофиллена, 3 группа включала в себя гомогенизат купферовских клеток, стимулированных РМА с добвлением 500 мкМ кариофиллена.

Концентрация супероксидных радикалов изучалось по содержанию малонового диальдегида (ΜΌΑ) методом, предусматривающим использование тиобарбитуровой кислоты (ΤΒΑ). К 100 мкл гомогената купферовских клеток, изолированных в соответствии с методикой, описанной выше, было добавлено 0,4 мл 0,6% ТВА и 1,2 мл 1% ортофосфорной кислоты и смесь кипятилась в течение 40 мин. После охлаждения к смеси было добавлено 1,6 мл 1-бутанола, образцы перемешивались и центрифугировались при 1200 об/мин в течение 12 мин. Концентрация ΜΌΑ супернатанте измерялась по оптической плотности при 535 нм с использованием калибровочной кривой ТВА в качестве стандарта.

Результаты эксперимента приведены на фиг. 5 и подтверждают способность кариофиллена эффективно предупреждать рост содержания супероксидов в купферовских клетках после стимулирования РМА (разница в концентрациях супероксидов между образцами группы 1 (контроль) и группой 3 (РМА и кариофиллен) практически отсутствует, а концентрация супероксидов в образцах группы 2 (РМА без кариофиллена) более чем в 4 раза превышает аналогичный показатель в образцах группы 3 (РМА и кариофиллен).

Пример 6. Приготовление масляного раствора кариофиллена 100 мг в мягких желатиновых капсулах:

Чистый кариофиллен в количестве 100 г растворяется в 1 кг очищенного оливкового или подсолнечного масла при комнатной температуре. Полученный раствор помещается в подающую емкость коэкструзионной машины по изготовлению мягких желатиновых капсул. Мягкие желатиновые капсулы, каждая из которых содержит 100 мг кариофиллена в 1 г оливкового или подсолнечного масла, изготавливаются методом коэкструзии. Из указанного количества сырья получают 1000 мягких желатиновых капсул.

Таким образом, в ходе проведенных лабораторных экспериментов авторами было убедительно подтверждено, что кариофиллен индуцирует поляризацию купферовских клеток; доза-зависимо ингибирует внутриклеточный кальций;

предупреждает рост содержания супероксидных радикалов и перекисного окисления липидов.

При этом в опытах ίη νίνο кариофиллен способствует регрессии имеющегося фиброза печени и предупреждает развитие фиброза, вызванного алкогольной и жировой интоксикацией.

Claims

Способ лечения или профилактики воспалительных заболеваний печени, при котором нуждающемуся в этом пациенту вводят, перорально, гепатопротекторное средство, содержащее масляный раствор β-кариофиллена в виде его сР изомера, 1гап8 изомера или их комбинации, включающий очищенные оливковое или подсолнечное масло при следующем соотношении ингредиентов, мас.%: β-кариофиллен в виде его сР изомера, 1гап8 изомера или их комбинации - 10, очищенное оливковое или подсолнечное масло - остальное, чем обеспечивают индуцирование поляризации купферовских клеток, обеспечивают доза-зависимое ингибирование внутриклеточного кальция, индуцированного липополисахаридами, предупреждают рост содержания супероксидных радикалов и перекисного окисления липидов, способствуют регрессии, около 50%, имеющегося фиброза печени, предупреждают развитие фиброза, вызванного алкогольной и жировой интоксикацией, доза вводимого упомянутого гепатопротекторного средства составляет от 20 до 200 мг в день. - 5 024466

1. Контроль

1 2 3

Этиловый спирт + РиРА

Этиловый спирт + ΡΙΙΡΑ + Кариофиллен 5 мг/кг перорально

Этиловый спирт + РиРА + ЛЛ/Н133 10 мг/кг перорально

Фиг. 2б

- 6 024466

Фиг. 3 о 2.5-1

1.

1. Нормальное питание (контроль)

1 2 3

1. Контроль

2. РМА

2.

3.

2. Этиловый спирт + Р1)РА

3. Этиловый спирт + РиРА + Кариофиллен

Фиг. 2а (б

о.

ю

X

-Θга х

о со

2-|

Фиг. 1

2. Кариофиллен 1 мг/кг перорально

3. Кариофиллен 3 мг/кг перорально

4. Кариофиллен 5 мг/кг перорально

5. Кариофиллен 10 мг/кг перорально

3. РМА + Кариофиллен

Фиг. 5