EA020106B1 - Производные l-(пиперидин-4-ил)пиразола в качестве модуляторов gpr119 - Google Patents

Производные l-(пиперидин-4-ил)пиразола в качестве модуляторов gpr119 Download PDF

Info

Publication number
EA020106B1
EA020106B1 EA201190280A EA201190280A EA020106B1 EA 020106 B1 EA020106 B1 EA 020106B1 EA 201190280 A EA201190280 A EA 201190280A EA 201190280 A EA201190280 A EA 201190280A EA 020106 B1 EA020106 B1 EA 020106B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
methyl
cyano
carboxylate
sts
piperidine
Prior art date
Application number
EA201190280A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201190280A1 (ru
Inventor
Винсент Масситти
Ким Фрэнсис Макклюр
Майкл Джон Манчхоф
мл. Ральф Пелтон Робинсон
Майкл Пол Денинно
Кентаро Футацуги
Кун Дэниел Вей-Шун
Брюс Аллен Лефкер
Original Assignee
Пфайзер Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Пфайзер Инк. filed Critical Пфайзер Инк.
Publication of EA201190280A1 publication Critical patent/EA201190280A1/ru
Publication of EA020106B1 publication Critical patent/EA020106B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/12—Ophthalmic agents for cataracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

В изобретении описаны соединения формулы I, которые модулируют активность G-белоксопряженного рецептора GPR119, и их применения в лечении заболеваний, связанных с модуляцией G-белоксопряженного рецептора GPR119 у животных.

Description

Настоящее изобретение относится к новому классу цианопиразолов, фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, и к их применению для модулирования активности Сбелоксопряженного рецептора (ОРСК) - СРК119.
Предшествующий уровень техники
Сахарный диабет представляет собой расстройства, при которых наблюдаются высокие уровни глюкозы в крови вследствие нарушения гомеостаза глюкозы. Самыми распростаненными формами диабета являются диабет I типа (также известный как инсулинозависимый сахарный диабет) и диабет II типа (также известный как инсулинонезависимый сахарный диабет). Диабет II типа, к которому относится примерно 90% всех случаев диабета, представляет собой серьезное прогрессирующее заболевание, которое приводит к микрососудистым осложнениям (включающим ретинопатию, невропатию и нефропатию), а также макрососудистым осложнениям (включающим ускоренный атеросклероз, коронарную болезнь сердца и инсульт).
В настоящее время не существует лекарства от диабета. Стандартные способы лечения заболевания ограничены и нацелены на контролирование уровней глюкозы в крови с целью минимизации или отсрочки осложнений. Существующие способы лечения нацелены либо на инсулинорезистентность (метформин, тиазолидиндионы), либо на высвобождение инсулина из β-клеток (сульфонилмочевины, эксенатид). Сульфонилмочевины и другие соединения, которые действуют через деполяризацию β-клеток, вызывают гипогликемию, так как они стимулируют секрецию инсулина независимо от концентраций циркулирующей глюкозы. Одно из разрешенных лекарственных средств - эксенанид - стимулирует секрецию инсулина только в присутствии высоких уровней глюкозы, но должен вводиться посредством инъекции вследствие недостаточной пероральной биодоступности. Ситаглиптин - ингибитор дипептидилпептидазы IV - представляет собой новое лекарственное средство, которое увеличивает в крови уровни инкретиновых гормонов, которые могут увеличивать секрецию инсулина, уменьшать секрецию глюкагона и оказывают другие, в меньшей степени охарактеризованные эффекты. Однако ситаглиптин и другие ингибиторы дипептидилпептидазы IV могут влиять также на уровни других гормонов и пептидов в тканях, и долгосрочные последствия этого более широкого эффекта до конца не изучены.
При диабете II типа мышечные, жировые и печеночные клетки не могут нормально отвечать на инсулин. Это состояние (инсулинорезистентность) может быть следствием сниженных количеств клеточных рецепторов инсулина, нарушения клеточных сигнальных путей, или того и другого. Вначале βклетки компенсируют инсулинорезистентность путем увеличения продукции инсулина. Однако в конце концов β-клетки становятся неспособными продуцировать достаточное количество инсулина для поддержания нормальных уровней глюкозы (эугликемия), что указывает на развитие диабета II типа.
При диабете II типа наблюдается гипергликемия натощак вследствие инсулинорезистентности в сочетании с дисфункцией β-клеток. Существуют два аспекта дефектной дисфункции β-клеток: 1) увеличенное базовое высвобождение инсулина (происходящее при низких, нестимулирующих концентрациях глюкозы). Его наблюдают на характеризующихся ожирением инсулинорезистентных преддиабетических стадиях, а также при диабете II типа, и 2) в ответ на гипергликемический стимул, неспособность увеличить высвобождение инсулина сверх уже увеличенного базового уровня. Это не наблюдается на преддиабетических стадиях и может служить сигналом перехода от нормогликемических инсулинорезистентных состояний в выраженный диабет II типа. Существующие способы лечения последнего аспекта включают в себя ингибиторы АТФ-чувствительных калиевых каналов β-клеток для инициирования высвобождения запасов эндогенного инсулина и введение экзогенного инсулина. Ни один из способов лечения не достигает правильной нормализации уровней глюкозы в крови, и оба несут риск индуцирования гипогликемии.
Таким образом, существовал большой интерес в разработке агентов, которые функционируют глюкозозависимым образом. Физиологические сигнальные пути, которые функционируют таким образом, хорошо известны, включая кишечные пептиды СЬР-1 (глюкагоноподобный пептид) и СР (глюкозозависимый инсулинотропный полипептид). Эти гормоны передают сигнал через когнатные Сбелоксопряженные рецепторы для стимулирования продукции цАМФ в β-клетках поджелудочной железы. Увеличенный уровень цАМФ, по-видимому, не приводит к стимулированию высвобождения инсулина натощак или в препрандиальном (до приема пищи) состоянии. Однако целый ряд биохимических мишеней цАМФ, включая АТФ-чувствительный калиевый канал, потенциал-чувствительные калиевые каналы и экзоцитозный аппарат, модулируются таким образом, что секреция инсулина вследствие постпрандиальной стимуляции глюкозы значительно увеличивается. Поэтому агонистические модуляторы новых, функционирующих схожим образом, СРСКк β-клеток, включая СРК119, также будут стимулировать высвобождение эндогенного инсулина и способствовать нормализации уровней глюкозы у пациентов с диабетом II типа. Также было показано, что повышенный уровень цАМФ, например, в результате стимуляции СЬР-1, активирует пролиферацию β-клеток, ингибирует гибель β-клеток и таким образом увеличивает массу островка Лангерганса. Этот положительный эффект на массу β-клеток должен быть полезным при диабете II типа, при котором продуцируется недостаточное количество инсулина.
- 1 020106
Хорошо известно, что метаболические заболевания оказывают отрицательные эффекты и на другие физиологические системы, и частно существует совместное возникновение множества болезненных состояний (например, диабет I типа, диабет II типа, нарушенная толерантность к глюкозе, инсулинорезистентность, гипергликемия, гиперлипидемия, гипертриглицеридемия, гиперхолестеролемия, дислипидемия, ожирение или сердечно-сосудистое заболевание в синдроме X) или вторичных заболеваний, которые возникают вторично относительно диабета, такие как заболевание почек и периферическая невропатия. Таким образом, лечение диабетического состояния должно быть полезным для таких взаимосвязанных болезненных состояний.
Краткое изложение сущности изобретения
Согласно настоящему изобретению был открыт новый класс модуляторов СРК119. Эти соединения могут быть представлены формулой I, как показано ниже:
I
где X представляет собой
Υ представляет собой О;
т равно 1 или 2;
Ζ представляет собой -С(О)-О-К6;
К1 представляет собой водород;
К2а представляет собой водород;
К2Ь представляет собой водород;
каждый К3 независимо представляет собой гидрокси, галоген, циано, СТ3, ОСТ3, С1-С4алкил, С1С4алкокси, -§О2-К , -Р(О)(ОК )(ОК ), -СО-ΝΚ К или 5-6-членную гетероарильную группу, содержащую 1, 2, 3 или 4 гетероатома, каждый из которых независимо выбран из кислорода и азота, где атом углерода в указанной гетероарильной группе возможно замещен К4а, или атом азота в указанной гетероарильной группе возможно замещен К4Ь;
К4а представляет собой водород, С1-С4алкил, С1-С4алкокси, С1-С4галогеноалкил или галоген, где указанный алкил возможно замещен гидроксилом или С1-С4алкокси;
К4Ь представляет собой водород, С1-С4алкил, -СН2-С1-С3галогеноалкил, -С2-С4алкил-ОН или -СН2С1-С4алкокси;
К6 представляет собой С1-С4алкил или С3-С6циклоалкил, где один атом углерода указанной циклоалкильной группировки возможно может быть замещен метилом или этилом;
К7 представляет собой С1-С4алкил, С3-С6циклоалкил, ΝΝ2 или -(СН2)2-ОН;
К8 представляет собой водород или С1-С4алкил и
К9 представляет собой водород, С1-С4алкил, С3-С6циклоалкил, -(СН2)2-ОН, -(СН2)2-О-СН3, -(СН2)3ОН, -(СН2)3-О-СН3, 3-оксетанил или 3-гидроксициклобутил;
8 9 8 9 или когда К представляет собой -С(О)-ИК. К , тогда К и К могут быть взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием азетидинового, пирролидинового, пиперидинового или морфолинового кольца;
или их фармацевтически приемлемыми солями.
Более того, настоящее изобретение направлено на соединения:
1-метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоил-3 -фторфенокси)метил]-5-циано-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1-карбоксилат;
1-метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоил-2-фторфенокси)метил]-5-циано-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[4-(1Н-пиразол-1-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилат;
-метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,3-дифторфенокси)метил] -1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилат;
-метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,5-дифторфенокси)метил] -1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 - 2 020106 карбоксилат;
-метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил] -1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилат;
изопропил-4-[5-циано-4-({2-фтор-4-[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-тетразол-5-ил]фенокси}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат;
изопропил-4-[5-циано-4-({2-фтор-4-[2-(2-гидроксиэтил)-2Н-тетразол-5-ил]фенокси}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-2-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат;
1-метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(4-цианофенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1карбоксилат;
-метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоилфенокси)метил] -5-циано-1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилат;
1-метилциклопропил-4-(5-циано-4-{[4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат;
1-метилциклопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-{5-циано-4-[(2,4-дифторфенокси)метил] -1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 -карбоксилат;
1-метилциклопропил-4-(5-циано-4-{[(2-метилпиридин-3-ил)окси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-[5-циано-4-({[2-метил-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиридин-3-ил]окси}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат;
изопропил-4-[5-циано-4-({[2-метил-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиридин-3-ил]амино}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат;
изопропил-4-[5-циано-4-({[2-метил-6-(метилсульфонил)пиридин-3-ил]амино}метил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилат;
изопропил-4-{5-циано-4-[(2-метилфенокси)метил]-1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 -карбоксилат; изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(2-метил-2Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{ [(2-метилпиридин-3 -ил)амино] метил}-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{1-[(2-метилпиридин-3-ил)окси]этил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилат;
изопропил-4-[5-циано-4-({[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]амино}метил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{1-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]этил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]пропил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]этил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин1-карбоксилат;
изопропил-4-{5-циано-4-[(4-циано-2-фторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 -карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[4-(диметоксифосфорил)-2-фторфенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{ [(2-метилпиридин-3 -ил)окси]метил}-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилат;
изопропил-4-[5-циано-4-({2-фтор-4-[(2-гидроксиэтил)сульфонил]фенокси}метил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1Н-тетразол-1-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[4-(1Н-тетразол-1-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилат;
изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пипе
- 3 020106 ридин-1 -карбоксилат;
или их фармацевтически приемлемые соли.
Соединения формулы I модулируют активность С-белоксопряженного рецептора. Более конкретно, соединения модулируют СРК119. Как таковые указанные соединения являются полезными для лечения заболеваний, таких как диабет, при которых активность СРК.119 вносит вклад в патологию или симптомы указанного заболевания. Примеры таких состояний включают в себя гиперлипидемию, диабет I типа, сахарный диабета II типа, идиопатический диабет I типа (тип 1Ь), латентный аутоиммунный диабет взрослых (БАОА), диабет 2 типа с ранним началом (ΕΘΌ), юношеский атипичный диабет (ΥΘΆΌ), диабет взрослого типа у молодых (ΜΘΌΥ), диабет, связанный с недостаточностью питания, гестационный диабет, коронарную болезнь сердца, ишемический инсульт, рестеноз после ангиопластики, заболевание периферических сосудов, перемежающуюся хромоту, инфаркт миокарда (например, некроз и апоптоз), дислипидемию, постпрандиальную липемию, состояния нарушенной толерантности к глюкозе (ЮТ), состояния нарушенной гликемии в плазме натощак, метаболический ацидоз, кетоз, артрит, ожирение, остеопороз, гипертензию, застойную сердечную недостаточность, гипертрофию левого желудочка, заболевание периферических артерий, диабетическую ретинопатию, дегенерацию желтого пятна, катаракту, диабетическую нефропатию, гломерулосклероз, хроническую почечную недостаточность, диабетическую невропатию, метаболический синдром, синдром X, предменструальный синдром, коронарную болезнь сердца, стенокардию, тромбоз, атеросклероз, преходящие ишемические атаки, инсульт, сосудистый рестеноз, гипергликемию, гиперинсулинемию, гиперлипидемию, гипертриглицеридемию, инсулинорезистентность, нарушенный метаболизм глюкозы, состояния нарушенной толерантности к глюкозе, состояния нарушенной гликемии в плазме натощак, ожирение, эректильную дисфункцию, расстройства кожи и соединительной ткани, изъязвления стопы и неспецифический язвенный колит, эндотелиальную дисфункцию и нарушенную растяжимость сосудов. Данные соединения могут быть использованы для лечения неврологических расстройств, таких как болезнь Альцгеймера, шизофрения и нарушенные когнитивные способности. Данные соединения будут также полезны при желудочно-кишечном заболевании, таком как воспалительное заболевание кишечника, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, синдром раздраженного кишечника и т.д. Как указано выше, данные соединения также могут быть использованы для стимулирования потери массы у пациентов с ожирением, особенно у пациентов, страдающих диабетом.
Другое воплощение изобретения направлено на фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы I. Такие препараты обычно будут содержать соединение формулы I в смеси по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым эксципиентом. Такие препараты также могут содержать по меньшей мере один дополнительный фармацевтический агент. Примеры таких агентов включают в себя агенты против ожирения и/или противодиабетические агенты. Дополнительные аспекты изобретения относятся к применению соединений формулы I для получения лекарственных средств для лечения диабета и родственных состояний, как описано в данной заявке.
Следует понимать, что и предшествующее краткое изложение сущности изобретения, и последующее подробное описание являются лишь иллюстративными и пояснительными и не ограничивают изобретение, заявленное в формуле изобретения.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение может стать более понятным посредством ссылки на следующее подробное описание иллюстративных воплощений изобретения и примеров, включенных в данное описание.
Следует понимать, что данное изобретение не ограничивается конкретными синтетическими способами получения, которые, разумеется, могут варьироваться. Следует также понимать, что терминология, используемая в данной заявке, предназначена лишь для описания конкретных воплощений и не предназначена быть ограничивающей. Множественное число и единственное число следует рассматривать как взаимозаменяемые, в отличие от обозначения числа:
а) галоген относится к атому хлора, фтора, йода или брома;
б) С1-С5алкил относится к алкильной группе с разветвленной или прямой цепью, содержащей от 1 до 5 атомов углерода, такой как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, пентил и т.д.;
в) С1-С5алкокси относится к алкоксигруппе с прямой или разветвленной цепью, содержащей от 1 до 5 атомов углерода, такой как метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, пентокси и т.д.;
г) С3-С6циклоалкил относится к неароматическому кольцу, которое является полностью гидрированным и существует в виде отдельного кольца. Примеры таких карбоциклических колец включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил;
д) 5-10-членный гетероарил означает карбоциклическую ароматическую систему, имеющую в целом от 5 до 10 кольцевых атомов и содержащую один, два, три или четыре гетероатома, независимо выбранных из кислорода, азота и серы, и имеющую одно, два или три кольца, где такие кольца могут быть конденсированы. Термин конденсированный означает, что второе кольцо присутствует (т.е. присоединено или образовано) за счет двух смежных атомов, которые являются общими (т.е. разделенными) с первым кольцом. Термин конденсированный эквивалентен термину слитый. Термин гетероарил
- 4 020106 охватывает ароматические радикалы, такие как пиридин, пиридазин, пиразин, пиримидин, имидазо[1,2а]пиридин, имидазо[1,5-а]пиридин, [1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин, [1,2,4]триазоло[4,3-Ь]пиридазин, [1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин и [1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин;
е) терапевтически эффективное количество означает количество соединения по настоящему изобретению, которое (1) лечит или предупреждает конкретное заболевание, состояние или расстройство, (2) ослабляет, облегчает или устраняет один или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, или (3) предупреждает или замедляет возникновение одного или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, описанного в данной заявке;
ж) пациент относится к теплокровным животным, таким как, например, морские свинки, мыши, крысы, песчанки, кошки, кролики, собаки, обезьяны, шимпанзе и люди;
з) лечить охватывает как превентивное, т.е. профилактическое, так и паллиативное лечение, т.е. уменьшение, ослабление или замедление развития заболевания (или состояния) пациента или любого повреждения тканей, ассоциированного с данным заболеванием;
и) термины модулированный, модулирующий или модулирует(ют), как использовано в данной заявке, если не указано иное, относятся к активации С-белоксопряженного рецептора СРК119 посредством соединений по настоящему изобретению;
к) фармацевтически приемлемый обозначает, что вещество или композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, содержащимися в препарате, и/или с млекопитающим, которого этим лечат;
л) соли относятся к фармацевтически приемлемым солям и солям, подходящим для применения в промышленных способах, таких как получение соединения;
м) фармацевтически приемлемые соли относятся либо к фармацевтически приемлемым солям присоединения кислот, либо к фармацевтически приемлемым солям присоединения оснований, в зависимости от фактической структуры соединения;
н) фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот относятся к любым нетоксичным органическим или неорганическим солям присоединения кислот щелочных соединений, представленных формулой I, или к любым их промежуточным соединениям. Типичные неорганические кислоты, которые образуют подходящие соли, включают в себя соляную, бромисто-водородную, серную и фосфорную кислоту и кислотные соли металлов, такие как моногидроортофосфат натрия и гидросульфат калия. Типичные органические кислоты, которые образуют подходящие соли, включают в себя моно-, ди- и трикарбоновые кислоты. Примерами таких кислот являются уксусная, гликолевая, молочная, пировиноградная, малоновая, янтарная, глутаровая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, малеиновая, гидроксималеиновая, бензойная, гидроксибензойная, фенилуксусная, коричная, салициловая, 2феноксибензойная, п-толуолсульфоновая кислота и сульфоновые кислоты, такие как метансульфоновая кислота и 2-гидроксиэтансульфоновая кислота. Такие соли могут существовать либо в гидратированной, либо по существу в безводной форме. Обычно соли присоединения кислот этих соединений являются растворимыми в воде и различных гидрофильных органических растворителях;
о) фармацевтически приемлемые соли присоединения оснований относятся к любым нетоксичным органическим или неорганическим солям присоединения оснований соединений, представленных формулой I, или к любым их промежуточным соединениям. Типичные основания, которые образуют подходящие соли, включают в себя гидроксиды щелочных и щелочноземельных металлов, такие как гидроксиды натрия, калия, кальция, магния или бария; аммиак, и алифатические, алициклические или ароматические органические амины, такие как метиламин, диметиламин, триметиламин и пиколин.
п) соединение формулы I, соединения по изобретению и соединения используются взаимозаменяемо во всей заявке и должны рассматриваться как синонимы;
р) изомер означает стереоизомер и геометрический изомер, как определено ниже. Стереоизомер относится к соединениям, которые имеют один или более хиральных центров, и каждый центр может существовать в К- или δ-конфигурации. Стереоизомеры включает в себя все диастереомерные, энантиомерные и эпимерные формы, а также рацематы и их смеси. Геометрический изомер относится к соединениям, которые могут существовать в цис-, транс-, анти-, син-, сгИдсдсп (Е) и хщатшсп (Ζ) формах, а также к их смесям.
Некоторые из соединений формулы (I) могут существовать в виде геометрических изомеров. Соединения формулы (I) могут иметь один или более асимметрических центров, таким образом существуя в виде двух или более стереоизомерных форм. Настоящее изобретение включает в себя все индивидуальные стереоизомеры и геометрические изомеры соединений формулы (I) и их смеси. Индивидуальные энантиомеры могут быть получены посредством хирального разделения или с использованием соответствующего энантиомера в синтезе.
Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут существовать в несольватированных, а также сольватированых формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и тому подобное. Обычно сольватированные формы считаются эквивалентными несольватированным формам для целей настоящего изобретения. Соединения также могут существовать в одном или более кристаллических состояниях, т.е. в виде сокристаллов, полиморфных модификациях, или они могут
- 5 020106 существовать в виде аморфных твердых веществ. Все такие формы охвачены изобретением и формулой изобретения.
В одном из воплощений по данному изобретению каждый В3 независимо представляет собой фторо, метил, циано, -Ο(Θ)ΝΚ8Κ9, -§02-В7, тетразол, пиразол, имидазол или триазол.
В другом воплощении соединения по данному изобретению каждый В3 независимо представляет собой фторо, метил, циано, -0(0)ΝΒδΒ9, -§О2-В7,
или
каждый из В4а и В4 независимо представляет собой водород, С1-С4алкил или С2-С4алкил-ОН.
В другом воплощении в соединениях по данному изобретению В6 представляет собой изопропил или 1-метилциклопропил.
В другом воплощении в композиции по данному изобретению указанная композиция также включает по меньшей мере один дополнительный фармацевтический агент, выбранный из группы, состоящей из агента против ожирения и противодиабетического агента. Типичные агенты против ожирения включают в себя дирлотапид, митратапид, имплитапид, В56918 (СЛ8 № 403987), СЛ8 № 913541-47-6, лоркасерин, цетилистат, ΡΥΥ3-36, налтрексон, олеоил-эстрон, обинепитид, прамлинтид, тесофенсин, лептин, лираглутид, бромокриптин, орлистат, эксенатид, Ά0Ό-9604 (СЛ8 № 221231-10-3) и сибутрамин. Типичные противодиабетические агенты включают в себя метформин, ацетогексамид, хлорпропамид, диабинезе, глибенкламид, глипизид, глибурид, глимепирид, гликлазид, глипентид, гликвидон, глизоламид, толазамид, толбутамид, тендамистат, трестатин, акарбозу, адипозин, камиглибозу, эмиглитат, миглитол, воглибозу, прадимицин-О. салбостатин, балаглитазон, циглитазон, дарглитазон, энглитазон, изаглитазон, пиоглитазон, росиглитазон, троглитазон, эксендин-3, эксендин-4, тродусквемин, резерватрол, гиртиосаловый экстракт (Ιινιΐίοβαΐ ех!тас1), ситаглиптин, вилдаглиптин, алоглиптин и саксаглиптин.
В другом воплощении способа по данному изобретению соединения или композиции по изобретению могут быть введены в эффективном количестве для лечения состояния, выбранного из группы, состоящей из гиперлипидемии, диабета I типа, сахарного диабета II типа, идиопатического диабета I типа (типа Ш), латентного аутоиммунного диабета взрослых (ЬАОА), диабета 2 типа с ранним началом (Ε0Ό), юношеского атипичного диабета (Υ0ΛΌ), диабета взрослого типа у молодых (Μ0ΌΥ), диабета, связанного с недостаточностью питания, гестационного диабета, коронарной болезни сердца, ишемического инсульта, рестеноза после ангиопластики, заболевания периферических сосудов, перемежающейся хромоты, инфаркта миокарда (например, некроза и апоптоза), дислипидемии, постпрандиальной липемии, состояний нарушенной толерантности к глюкозе (ЮТ), состояний нарушенной гликемии в плазме натощак, метаболического ацидоза, кетоза, артрита, ожирения, остеопороза, гипертензии, застойной сердечной недостаточности, гипертрофии левого желудочка, заболевания периферических артерий, диабетической ретинопатии, дегенерации желтого пятна, катаракты, диабетической нефропатии, гломерулосклероза, хронической почечной недостаточности, диабетической невропатии, метаболического синдрома, синдрома X, предменструального синдрома, коронарной болезни сердца, стенокардии, тромбоза, атеросклероза, инфаркта миокарда, преходящих ишемических атак, инсульта, сосудистого рестеноза, гипергликемии, гиперинсулинемии, гиперлипидемии, гипертриглицеридемии, инсулинорезистентности, нарушенного метаболизма глюкозы, состояний нарушенной толерантности к глюкозе, состояний нарушенной гликемии в плазме натощак, ожирения, эректильной дисфункции, расстройств кожи и соединительной ткани, изъязвлений стопы и неспецифического язвенного колита, эндотелиальной дисфункции и нарушенной растяжимости сосудов, гипер-апо-В-липопротеинемии, болезни Альцгеймера, шизофрении, нарушенных когнитивных способностей, воспалительного заболевания кишечника, неспецифического язвенного колита, болезни Крона и синдрома раздраженного кишечника.
В другом воплощении способ также включает в себя введение второй композиции, содержащей по меньшей мере один дополнительный фармацевтический агент, выбранный из группы, состоящей из агента против ожирения и противодиабетического агента, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент. Этот способ может быть использован для введения композиций одновременно или последовательно и в любом порядке.
- 6 020106
В еще одном воплощении соединения по данному изобретению являются полезными в изготовлении лекарственного средства для лечения заболевания, состояния или расстройства, которое модулирует активность О-белоксопряженного рецептора ОРК119. Более того, соединения являются полезными в изготовлении лекарственного средства для лечения диабета или осложнений, ассоциированных с указанным диабетом.
Синтез
Для иллюстративных целей, в реакционных схемах, изображенных ниже, предложены потенциальные пути синтеза соединений по настоящему изобретению, а также ключевых промежуточных соединений. Для более детального описания отдельных реакционных стадий см. ниже раздел Примеры. Специалистам в данной области будет понятно, что для синтеза соединений по изобретению могут быть использованы и другие синтетические пути. Хотя конкретные исходные вещества и реагенты изображены в схемах и обсуждаются ниже, они легко могут быть заменены другими исходными веществами и реагентами с получением разнообразных производных и/или реакционных условий. Кроме того, многие из соединений, полученных способами, описанными ниже, могут быть дополнительно модифицированы в свете настоящего описания с использованием традиционной химии, хорошо известной специалистам в данной области техники.
Соединения по изобретению могут быть синтезированы синтетическими путями, которые включают процессы, аналогичные процессам, хорошо известным в области химии, особенно, в свете описания, имеющегося в данной заявке. Исходные вещества обычно доступны из коммерческих источников, таких как А1бпсБ СБет1са1з (Мй^аикее, λ¥Ι), или могут быть легко получены с использованием способов, известных специалистам в данной области техники (например, могут быть получены способами, в основном описанными в Ьошз Б. Пезег апб Магу Пезег, Кеадеп1з £ог Огдашс 8упШез1з, ν. 1-19, \¥11еу, Ие^ ¥огк (1967-1999 еб.), или Вейз1ешз НапбЬисБ бег огдашзсйеп Сйет1е, 4, Лий. еб. 8ргтдег-Уег1ад, Вегйп, включая приложения (также доступные через базу данных Вейз1еш в режиме онлайн).
Соединения формулы Ι могут быть получены с использованием способов, аналогичных способам, известным в данной области техники для получения простых эфиров. Внимание читателя направляют на такие тексты, как: 1) НидБез, И. Б.; Огдашс Кеасбопз 1992, 42 НоЬокеп, N6, Ипйеб 81а1ез; 2) Т1каб, А.; КоиНег, 8.; Акззйа, М.; Бедег, 6.-М.1; баггу, С; Ош11аите1, О. 8уп1ей 2006, 12, 1938-42; и 3) БокзЕа, Υ. М; О1оЬ1зсЕ, И.; Ребегзеп, Е. В.; Ба Со11а, Р.; Со11и, О.; Боббо, К. б. НеЕ СБет. 2008, 45, 1161-6, в которых такие реакции описаны более подробно.
1. На стадии 1 соединения формулы С могут быть получены посредством реакции конденсации соедине- 7 020106 ний формулы А и коммерческого соединения В (81дта-А1бт1сй) в широком спектре растворителей, включая, но не ограничиваясь этим, этанол, толуол и ацетонитрил, при температурах, варьирующихся от 22 до 130°С, в зависимости от используемого растворителя в течение периода времени от 1 до 72 ч. В случаях, когда соединения формулы А представляют собой соли соляной или трифторуксусной кислоты, для нейтрализации этих солей могут быть добавлены щелочные модификаторы, такие как ацетат натрия или бикарбонат натрия, в количестве от одного до трех эквивалентов. Реакция может быть осуществлена в полярных протонных растворителях, таких как метанол и этанол, при температурах, варьирующихся от 22 до 85°С. Типичные условия для этой трансформации включают применение 3 эквивалентов ацетата натрия в этаноле, нагреваемом при 85°С в течение 3 ч.
Соединения формулы А могут быть получены посредством четырехстадийной процедуры, начиная с гидрохлоридных солей замещенного или незамещенного 4-пиперидинона (1. Меб. СНет. 2004, 47, 2180). Сначала эти соли обрабатывают подходящим алкилхлорформиатом или бис(алкил)дикарбонатом в присутствии избытка основания с образованием соответствующего алкилкарбамата. Затем кетоновую группу конденсируют с трет-бутоксикарбонилгидразидом с образованием соответствующего Ы-(третбутокси)карбонил-(ВОС) защищенного гидразонового производного. Затем его восстанавливают до соответствующего ВОС-защищенного гидразинового производного с использованием восстанавливающих агентов, таких как цианоборгидрид натрия или триацетоксиборгидрид натрия. Наконец, Ы-(третбутокси)карбонильную группу удаляют в кислотных условиях, таких как трифторуксусная кислота или соляная кислота, с получением соединений формулы А, которые обычно выделяют и используют в виде соответствующих солей (например, дигидрохлоридной соли).
На стадии 2 соединения формулы Ό могут быть получены из соединений формулы С посредством образования промежуточных диазониевых солей с помощью реакции Зандмейера (Сотр. Отд. ЗуШ11. 1991, 6, 203). Эти соли могут быть получены посредством диазотирования соединений формулы С нитритом натрия и водными кислотами, такими как соляная, бромисто-водородная, серная, азотная, фосфорная и уксусная, отдельно или в комбинациях. Эту реакцию обычно осуществляют в воде при температуре от 0 до 100°С. Альтернативно, могут быть использованы безводные условия с использованием алкилнитритов, таких как трет-бутилнитрит, с растворителями, такими как ацетонитрил (1. Меб. СНет. 2006, 49, 1562), при температурах, варьирующихся от 0 до 95°С. Эти диазониевые промежуточные соединения затем оставляют реагировать с солями меди, такими как бромид меди(11), бромид меди(1), или с трибромметаном с образованием соединений формулы Ό. Типичные условия для этого превращения включают применение трет-бутилнитрита, бромида меди(11) в ацетонитриле при 65°С в течение 30 мин.
На стадии 3 соединения формулы Е может быть получены из соединений формулы Ό с использованием восстанавливающих агентов, таких как алюмогидрид лития, боргидрид натрия, боргидрид лития, боран-диметилсульфид, боран-тетрагидрофуран, в полярных апротонных растворителях, таких как тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, 1,4-диоксан или 1,2-диметоксиэтан, при температурах, варьирующихся от 0 до 110°С, в течение периода времени от 1 до 24 ч. Типичные условия включают применение борандиметилсульфида в тетрагидрофуране при 70°С в течение 14 ч.
Для того чтобы получить соединения формулы Е из соединений формулы Е, следует ввести цианогруппу (стадия 4). Это может быть достигнуто с помощью различных условий. Одним из способов введения цианогруппы может быть применение соли меди, такой как цианид меди, в полярном апротонном растворителе, таком как Ν,Ν-диметилформамид (ЭМЕ), Ν-метилпирролидинон (ΝΜΡ), Ν,Νдиметилацетамид (ЭМА), при температурах, варьирующихся от 22 до 200°С, в течение периода времени от 1 до 24 ч. Цианид меди в Ν,Ν-диметилформамиде, нагреваемый при 165°С в течение 5 ч, является типичным протоколом для этого превращения.
Альтернативно, на стадии 4, для добавления цианогруппы в этот субстрат могут быть использованы цианидные соли щелочных металлов, такие как цианид калия или натрия, совместно с катализаторами, такими как 18-краун-6 (И8 2005020564) и/или бромид тетрабутиламмония (1. Меб. СНет. 2003, 46, 1144), в полярных апротонных растворителях, таких ацетонитрил и диметилсульфоксид, при температурах, варьирующихся от 22 до 100°С.
Наконец, распространенным является применение металлического катализа для превращения, изображенного на стадии 4. Распространенные цианидные соли, используемые в каталитических процедурах, включают в себя цианид цинка, цианид меди, цианид натрия и гексацианоферрат(П) калия. Металлические катализаторы могут представлять собой медные катализаторы, такие как йодид меди, и/или палладиевые катализаторы, такие как трис(дибензилиденацетон)дипалладий (Рб2(бЬа)3), тетракистрифенилфосфинпалладий (Рб(РРН3)4) или дихлор(дифенилфосфиноферроцен)палладий (Рб(бррЦС12). Эти катализаторы могут быть использованы отдельно или в любой комбинации с любой из вышеуказанных цианидных солей. В эти реакции могут быть добавлены лиганды, такие как 1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен (бррЦ, или металлические добавки, такие как металлический цинк или медь. Реакции осуществляют в полярных апротонных растворителях, таких как NМΡ, ЭМЕ, ЭМА, с водой или без воды в качестве добавки. Реакции осуществляются при температурах, варьирующихся от 22 до 150°С, посредством традиционного или микроволнового нагревания в течение периода времени от 1
- 8 020106 до 48 ч и могут осуществляться в закрытом герметично или незакрытом реакционном сосуде. Типичные условия для стадии 4 включают применение цианида цинка, Рй2(йЬа)3, йрр£ и цинковой пыли в ΌΜΆ, нагретом при 120°С в микроволновом реакторе в течение 1 ч (1. Мей. С1ет. 2005, 48, 1132).
На стадии 5 соединения формулы С, где X, Ζ и В2а являются такими, как определено для соединений формулы I, могут быть синтезированы из соединений формулы Р с помощью реакции Мицунобу. Реакция Мицунобу была описана в литературе по синтезу (например, С1ет. Аыап. 1. 2007, 2, 1340; Еиг. 1. Огд. С1ет. 2004, 2763; 8. С1ет. Еиг. 1. 2004, 10, 3130), и могут быть использованы многочисленные протоколы синтеза, перечисленные в этих обзорах. Применение реакции Мицунобу подразумевает использование азодикарбоксилатов, таких как диэтилазодикарбоксилат (ΌΕΆΌ), ди-третбутилазодикарбоксилат (ΤΒΑΌ), диизопропилазодикарбоксилат (ΌΙΆΌ), и фосфиновых реагентов, таких как трифенилфосфин (РР13), трибутилфосфин (РВи3) и трифенилфосфин на полимерной подложке (Р8РР113). которые объединяют с соединениями формулы Р и соединением общей структуры Х-ОН, где X является таким, как определено для соединений формулы I. Растворители, используемые в этой реакции, могут включать в себя апротонные растворители, такие как толуол, бензол, ТНР, 1,4-диоксан и ацетонитрил, при температурах, варьирующихся от 0 до 130°С, в зависимости от растворителя и используемых азодикарбоксилатов. Типичными условиями для этого превращения являются применение ΌΕΑΌ с Р8-РР13 в 1,4-диоксане при 22°С в течение 15 ч.
Альтернативой реакции Мицунобу для получения соединений формулы С, где X, Ζ и В2а являются такими, как определено для соединений формулы I, является превращение соединений формулы Р в соответствующие метансульфонатные или пара-толуолсульфонатные производные с использованием метансульфонилхлорида или пара-толуолсульфонилхлорида, соответственно, в присутствии основания, такого как триэтиламин или пиридин. Промежуточное соединение сульфонатный сложный эфир затем объединяют с соединеним общей формулы Х-ОН, где X является таким, как определено для соединений формулы I, в присутствии основания, такого как карбонат калия, гидрид натрия или трет-бутилат калия, с получением соединений формулы С, где X, Ζ и В2а являются такими, как определено для соединений формулы I.
На стадии 6 (схема 1) соединения формулы Н образуются посредством процедуры окисления, включающей применение от 1 до 20 экв. активированного диоксида марганца в растворителях, включающих, но не ограничивающихся этим, дихлорметан, ацетонитрил, гексан или ацетон, отдельно или в комбинациях, в течение периода времени от 1 до 72 ч при температуре от 22 до 80°С. Альтернативно, это окисление может быть осуществлено с помощью от 1 до 3 эквивалентов трихлоризоциануровой кислоты в присутствии от 0,1 до 1 эквивалента 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила (ТЕМРО) в дихлорметане или хлороформе при температурах, варьирующихся от 0 до 22°С, в течение периода времени от 0,1 до 12 ч. Типичные условия для этого превращения включают применение трихлоризоциануровой кислоты в присутствии 0,1 экв. ТЕМРО в дихлорметане при 22°С в течение 1 ч.
В определенных случаях можно изменять порядок стадий, показанных на схеме 1. Например, на схеме 1 иногда можно вводить цианогруппу в пиразольное кольцо на последней стадии, т.е. изменяя порядок проведения стадий 4 и 5. Также в некоторых случаях предпочтительным является введение или модификация заместителей В3 на группе X (где В3 и X являются такими, как определено для соединений формулы I) позднее в ходе синтеза, даже на последней стадии. Например, когда В3 представляет собой 8О2В7, группа 8О2В7 может быть образована на последней стадии путем окисления соответствующего соединения, несущего заместитель общей формулы 8-В7.
Как вполне очевидно специалисту в данной области техники, может быть необходима защита удаленных функциональных групп (например, первичного или вторичного амина) промежуточных соединений. Необходимость в такой защите будет варьироваться в зависимости от природы удаленных функциональных групп и условий способов получения. Подходящие защитные группы для амино (ΝΗ-Рд) включают в себя ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (ВОС), бензилоксикарбонил (ί'ΒΖ) и 9флуоренилметиленоксикарбонил (РтоВ). Аналогично, защитная группа для гидрокси относится к заместителю гидроксигруппы, который блокирует или защищает гидроксифункциональную группу. Подходящие защитные группы для гидроксила (О-Рд) включают в себя, например, аллил, ацетил, силил, бензил, пара-метоксибензил, тритил и тому подобное. Необходимость такой защиты легко определяется специалистом в данной области техники. Для общего описания защитных групп и их применения см. Т. Сгеепе, Рго1есйуе Сгоирк ίη Отдашс 8уи1йе818, 1о1т \УПеу & 8ои§, №\ν Уотк, 1991.
Как указано выше, некоторые из соединений по данному изобретению являются кислотными и образуют соли с фармацевтически приемлемыми катионами. Некоторые из соединений по данному изобретению являются щелочными и образуют соли с фармацевтически приемлемыми анионами. Все такие соли включены в объем данного изобретения и могут быть получены традиционными способами, такими как объединение кислотных и щелочных группировок, обычно, в стехиометрическом соотношении, либо в водных, либо в неводных или частично водных средах подходящим образом. Соли выделяют либо путем фильтрации, осаждения нерастворителем с последующей фильтрацией, выпаривания растворителя, либо, в случае водных растворов, путем лиофилизации подходящим образом. Соединения получают в
- 9 020106 кристаллической форме согласно процедурам, известным в данной области техники, таким как растворение в подходящем(их) растворителе(ях), таких как этанол, гексаны или смеси вода/этанол.
Как указано выше, некоторые из соединений существуют в виде изомеров. Эти изомерные смеси могут быть разделены на их индивидуальные изомеры на основе их физическо-химических различий способами, хорошо известными специалистам в данной области техники, такими как хроматография и/или фракционная кристаллизация. Энантиомеры могут быть разделены путем превращения энантиомерной смеси в диастереомерную смесь путем взаимодействия с подходящим оптически активным соединением (например, с хиральным вспомогательным соединением, таким как хиральный спирт или хлорид кислоты Мошера), разделения диастереоизомеров и превращения (например, гидролиза) индивидуальных диастереоизомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Энантиомеры также могут быть разделены с использования хиральной колонки НРЬС. Альтернативно, специфические стереоизомеры могут быть синтезированы с использованием оптически активного исходного вещества путем асимметрического синтеза с использованием оптически активных реагентов, субстратов, катализаторов или растворителей, или путем превращения одного стереоизомера в другой посредством асимметрического превращения.
Настоящее изобретение также охватывает меченые изотопами соединения по настоящему изобретению, которые являются идентичными соединениям, перечисленным в данной заявке, за исключением того факта, что один или более атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличные от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по изобретению, включают в себя изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора, йода и хлора, такие как 2Н, 3Н, С. 13С, 14С, 13Ν, 15Ν, 15О,
О, О, Р, Р, 8, г, 1, 1 и С1, соответственно.
Некоторые меченые изотопами соединения по настоящему изобретению (например, соединения, меченые 3Н и 14В) являются полезными для анализов распределения соединения и/или субстрата в тканях. Некоторые меченые изотопами лиганды, включающие тритий, 14С, 358 и 1251, могут быть полезными для анализов связывания радиолигандов. Изотопы тритий (т.е. 3Н) и углерод-14 (т.е. 14С) являются особенно предпочтительными из-за простоты их получения и детекции. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (т.е. 2Н), может давать некоторые терапевтические преимущества, являющиеся следствием большей метаболической стабильности (например, увеличенного периода полувыведения ίη νίνο или требований уменьшенных дозировок) и, следовательно, может быть предпочтительным в некоторых обстоятельствах. Позитрон-испускающие изотопы, такие как О, Ν, С и Г, являются полезными для исследований методом позитронно-эмиссионной томографии (РЕТ) для изучения занятости рецепторов. Меченые изотопами соединения по настоящему изобретению обычно могут быть получены с помощью процедур, аналогичных процедурам, изложенным на схемах и/или в примерах ниже в данной заявке, путем замены немеченого изотопом реагента на меченый изотопом реагент.
Некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать в более чем одной кристаллической форме (обычно называемые полиморфными модификациями). Полиморфные модификации могут быть получены путем кристаллизации в различных условиях, например, с использованием различных растворителей или различных смесей растворителей для перекристаллизации; кристаллизации при различных температурах; и/или различных режимов охлаждения, варьирующихся от очень быстрого до очень медленного охлаждения во время кристаллизации. Полиморфные модификации также могут быть получены путем нагревания или плавления соединения по настоящему изобретению с последующим постепенным или быстрым охлаждением. Присутствие полиморфных модификаций может быть определено посредством твердофазной ЯМР-спектроскопии, ИК-спектроскопии, дифференциальной сканирующей калориметрии, рентгеновской дифракции на порошке или других подобных методов.
Медицинское применение
Соединения по настоящему изобретению модулируют активность С-белоксопряженного рецептора СРК119. Как таковые указанные соединения являются полезными для профилактики и лечения заболеваний, таких как диабет, при которых активность СРК119 вносит вклад в патологию или симптомы данного заболевания. Поэтому другой аспект настоящего изобретения включает способ лечения метаболического заболевания и/или связанного с метаболизмом расстройства у индивидуума, который включает введение индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по изобретению, соли указанного соединения или фармацевтической композиции, содержащей такое соединение. Метаболическое заболевание и связанные с метаболизмом расстройства выбраны, но не ограничивается этим, из гиперлипидемии, диабета 1 типа, сахарного диабета 11 типа, идиопатического диабета 1 типа (типа 1Ь), латентного аутоиммунного диабета взрослых (ЬАОА), диабета 2 типа с ранним началом (ЕОИ), юношеского атипичного диабета (ΥΟΑΌ), диабета взрослого типа у молодых (ΜΟΌΥ), диабета, связанного с недостаточностью питания, гестационного диабета, коронарной болезни сердца, ишемического инсульта, рестеноза после ангиопластики, заболевания периферических сосудов, перемежающейся хромоты, инфаркта миокарда (например, некроза и апоптоза), дислипидемии, постпрандиальной липемии, состояний нарушенной толерантности к глюкозе (1СТ), состояний нарушенной гликемии в плазме натощак, метаболического ацидоза, кетоза, артрита, ожирения, остеопороза, гипертензии, застой
- 10 020106 ной сердечной недостаточности, гипертрофии левого желудочка, заболевания периферических артерий, диабетической ретинопатии, дегенерации желтого пятна, катаракты, диабетической нефропатии, гломерулосклероза, хронической почечной недостаточности, диабетической невропатии, метаболического синдрома, синдрома X, предменструального синдрома, коронарной болезни сердца, стенокардии, тромбоза, атеросклероза, инфаркта миокарда, преходящих ишемических атак, инсульта, сосудистого рестеноза, гипергликемии, гиперинсулинемии, гиперлипидемии, гипертриглицеридемии, инсулинорезистентности, нарушенного метаболизма глюкозы, состояний нарушенной толерантности к глюкозе, состояний нарушенной гликемии в плазме натощак, ожирения, эректильной дисфункции, расстройств кожи и соединительной ткани, изъязвлений стопы, эндотелиальной дисфункции, гипер-апо-В-липопротеинемии и нарушенной растяжимости сосудов. Кроме того, соединения могут быть использованы для лечения неврологических расстройств, таких как болезнь Альцгеймера, шизофрения и нарушение когнитивных способностей. Соединения также будут полезны при желудочно-кишечных заболеваниях, таких как воспалительное заболевание кишечника, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, синдром раздраженного кишечника и т.д. Как указано выше, соединения также могут быть использованы для стимулирования потери массы у пациентов с ожирением, особенно у пациентов, страдающих диабетом.
В соответствии с вышесказанным, в настоящем изобретении также предложен способ предупреждения или облегчения симптомов любого из описанных выше заболеваний или расстройств у субъекта, нуждающегося в этом, который включает введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению. Другие аспекты изобретения включают изготовление лекарственных средств для лечения диабета и связанных с ним сопутствующих осложнений.
Для демонстрации терапевтических свойств, описанных выше, соединения следует вводить в количестве, достаточном для модулирования активации С-белоксопряженного рецептора СРК119. Это количество может варьироваться в зависимости от конкретного заболевания/состояния, которое лечат, тяжести заболевания/состояния пациента, самого пациента, конкретного вводимого соединения, пути введения и наличия других основных болезненных состояний у пациента и т.д. При системном введении соединения обычно демонстрируют свой эффект в диапазоне дозировок от примерно 0,1 мг/кг/сут. до примерно 100 мг/кг/сут. для любого из заболеваний или состояний, перечисленных выше. Многократное суточное введение может быть желательным и будет варьироваться в зависимости от состояний, перечисленных выше.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить различными путями. Их можно вводить перорально. Соединения также можно вводить парентерально (т.е. подкожно, внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно или интратекально), ректально или местно.
Совместное введение
Соединения по данному изобретению также могут быть использованы совместно с другими фармацевтическими агентами для лечения заболеваний, состояний и/или расстройств, описанных в данной заявке. Поэтому также предложены способы лечения, которые включают введение соединений по настоящему изобретению в комбинации с другими фармацевтическими агентами. Подходящие фармацевтические агенты, которые могут быть использованы в комбинации с соединениями по настоящему изобретению, включают в себя агенты против ожирения (включая средства для подавления аппетита), противодиабетические агенты, анти-гипергликемические агенты, гиполипидемические агенты и антигипертензивные агенты.
Подходящие противодиабетические агенты включают в себя ингибитор ацетил-КоА-карбоксилазы2 (АСС-2), ингибитор диацилглицерин-О-ацилтрансферазы 1 (ИСЛТ-1), ингибитор фосфодиэстеразы (РИЕ)-10, сульфонилмочевину (например, ацетогексамид, хлорпропамид, диабинезе, глибенкламид, глипизид, глибурид, глимепирид, гликлазид, глипентид, гликвидон, глизоламид, толазамид и толбутамид), меглитинид, ингибитор α-амилазы (например, тендамистат, трестатин и ЛЬ-3688), ингибитор αглюкозидгидролазы (например, акарбозу), ингибитор α-глюкозидазы (например, адипозин, камиглибозу, эмиглитат, миглитол, воглибозу, прадимицин-Э и салбостатин), агонист РРЛКу (например, балаглитазон, циглитазон, дарглитазон, энглитазон, изаглитазон, пиоглитазон, росиглитазон и троглитазон), агонист РРЛК α/ γ (например, СЬХ-0940, С\-1536, С\-1929, С\-2433, ККР-297, Ь-796449, ЬК-90, МК-0767 и 8В-219994), бигуанид (например, метформин), агонист глюкагоноподобного пептида 1 (СЬР-1) (например, эксендин-3 и эксендин-4), ингибитор протеинтирозинфосфатазы-1В (РТР-1В) (например, тродусквемин, гиртиосаловый экстракт и соединения, указанные в Ζ1ιαη§. 8., с1 а1., Итид И18соуегу Тобау. 12 (9/10), 373-381 (2007)), ингибитор 81К.Т-1 (например, резерватрол), ингибитор дипептидилпептидазы IV (ИРР-ΐν) (например, ситаглиптин, вилдаглиптин, алоглиптин и саксаглиптин), агент, увеличивающий секрецию инсулина, ингибитор окисления жирных кислот, антагонист А2, ингибитор с-щп аминоконцевой киназы (1ΝΚ), инсулин, миметик инсулина, ингибитор гликогенфосфорилазы, агонист рецептора νΓΆΕ2 и ингибитор 8СЬТ2 (ингибиторы натрий-зависимого глюкозного транспортера, такие как дапаглифлозин и др.). Предпочтительными противодиабетическими агентами являются метформин и ингибиторы ИРР-ΐν (например, ситаглиптин, вилдаглиптин, алоглиптин и саксаглиптин).
Подходящие агенты против ожирения включают в себя ингибиторы 11 β
- 11 020106 гидроксистероиддегидратазы-1 (11β-Η8Ό типа 1), ингибитор стеароил-КоА-десатуразы-1 (8С'О-1), агонисты МСЕ-4, агонисты холецистокинина-А (ССК-А), ингибиторы обратного захвата моноаминов (такие как сибутрамин), симпатомиметические агенты, в3-адренергические агонисты, агонисты дофамина (такие как бромокриптин), аналоги меланоцит-стимулирующего гормона, агонисты 5НТ2с, антагонисты меланин-концентрирующего гормона, лептин (ОВ белок), аналоги лептина, агонисты лептина, антагонисты галанина, ингибиторы липазы (такие как тетрагидролипстатин, т.е. орлистат), аноректические агенты (такие как агонист бомбезина), антагонисты нейропептида-Υ (например, антагонисты ΝΡΥ Υ5), ΡΥΥ3-36 (включая его аналоги), тиреомиметические агенты, дегидроэпиандростерон или его аналог, глюкокортикоидные агонисты или антагонисты, орексиновые антагонисты, агонисты глюкагоноподобного пептида1, цилиарные нейтрофические факторы (такие как Ахокшс™, доступный от Рсдспсгоп РйагтассиПсаК 1пс., Тапу1ота, ΝΥ и Ртос1ст & СатЬ1с Сотрапу, С1пс1ппа11, ОН), ингибиторы человеческого агутисвязанного белка (АСЕР), антагонисты грелина, антагонисты или обратные агонисты гистамина 3, агонисты нейромедина и, ингибиторы МТР/АроВ (например, селективные для кишечника ингибиторы МТР, такие как дирлотапид), опиоидный антагонист, орексиновый антагонист и тому подобное.
Предпочтительные агенты против ожирения для применения в комбинированных аспектах настоящего изобретения включают в себя селективные для кишечника ингибиторы МТР (например, дирлотапид, митратапид и имплитапид, Е56918 (СА8 № 403987) и СА8 № 913541-47-6), агонисты ССКа (например, №бензил-2-[4-(1Н-индол-3-илметил)-5-оксо-1-фенил-4,5-дигидро-2,3,6,10Ь-тетрааза-бензо[е]азулен6-ил]-№изопропил-ацетамид, описанный в публикация РСТ № УО 2005/116034 или публикации США № 2005-0267100 А1), агонисты 5НТ2с (например, лоркасерин), агонист МСЕ4 (например, соединения, описанные в И8 6818658), ингибитор липазы (например, цетилистат), ΡΥΥ3-36 (как использовано в данной заявке, ΡΥΥ3-36 включает в себя аналоги, такие как пэгилированный ΡΥΥ3-36, например, описанные в публикации США 2006/0178501), опиоидные антагонисты (например, налтрексон), олеоил-эстрон (СА8 № 180003-17-2), обинепитид (ТМ30338), прамлинтид (8ут1ш®), тесофенсин (N82330), лептин, лираглутид, бромокриптин, орлистат, эксенатид (Вусйа®), АОЭ-9604 (СА8 № 221231-10-3) и сибутрамин. Предпочтительно соединения по настоящему изобретению и комбинированные лекарственные препараты вводят совместно с упражнениями и разумной диетой.
Все перечисленные выше патенты и публикации США включены в данную заявку посредством ссылки.
Фармацевтические препараты
В настоящем изобретении также предложены фармацевтические композиции, которые содержат терапевтически эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли в смеси по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым эксципиентом. Композиции включают в себя композиции в форме, адаптированной для перорального, местного или парентерального применения, и могут быть использованы для лечения диабета и связанных с ним состояний, как описано выше.
Композиция может быть приготовлена для введения любым путем, известным в данной области техники, таким как подкожный, ингаляционный, пероральный, местный, парентеральный и т.д. Композиции могут находиться в любой форме, известной в данной области техники, включая, но не ограничиваясь этим, таблетки, капсулы, порошки, гранулы, пастилки или жидкие препараты, такие как пероральные или стерильные парентеральные растворы или суспензии.
Таблетки и капсулы для перорального введения могут быть представлены в виде стандартной дозы и могут содержать традиционные эксципиенты, такие как связывающие агенты, например, сироп, камедь, желатин, сорбит, трагакант или поливинилпирролидон; наполнители, например, лактозу, сахар, кукурузный крахмал, фосфат кальция, сорбит или глицин; смазывающие агенты для таблетирования, например, стеарат магния, тальк, полиэтиленгликоль или диоксид кремния; разрыхлители, например, картофельный крахмал; или приемлемые увлажняющие агенты, такие как лаурилсульфат натрия. Таблетки могут быть покрыты согласно способам, хорошо известным в обычной фармацевтической практике.
Пероральные жидкие препараты могут находиться в форме, например, водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров, или могут быть представлены в виде сухого продукта для растворения водой или другим подходящим носителем перед применением. Такие жидкие препараты могут содержать традиционные добавки, такие как суспендирующие агенты, например, сорбит, метилцеллюлоза, глюкозный сироп, желатин, гидроксиэтилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, гель стеарата алюминия или гидрогенизированные пищевые жиры, эмульгирующие агенты, например, лецитин, сорбитанмоноолеат или гуммиарабик; неводные носители (которые могут включать пищевые масла), например, миндальное масло, сложные эфиры масел, такие как глицерин, пропиленгликоль или этиловый спирт; консерванты, например, метил- или пропил-п-гидроксибензоат или сорбиновую кислоту, и, при желании, традиционные ароматизаторы или красители.
Жидкие стандартные лекарственные формы для парентерального введения получают с использованием соединения и стерильного носителя, причем вода является предпочтительной. Соединение, в зависимости от используемого носителя и концентрации, может быть либо суспендировано, либо растворено в носителе или другом подходящем растворителе. При приготовлении растворов соединение можно рас
- 12 020106 творить в воде для инъекций и простерилизовать на фильтре перед тем, как поместить в подходящий флакон или ампулу и герметично закрыть. Предпочтительно агенты, такие как местные анестетики, консерванты и буферные агенты и т.д., могут быть растворены в носителе. Для увеличения стабильности композицию можно заморозить после помещения во флакон, а воду удалить под вакуумом. Затем сухой лиофилизированный порошок герметизируют во флаконе, и сопровождающий флакон с водой для инъекций может поставляться для восстановления жидкости перед применением. Парентеральные суспензии получают по существу таким же образом, за исключением того, что соединение суспендируют в носителе вместо растворения, и стерилизация не может быть достигнута путем фильтрации. Соединение можно стерилизовать, подвергая воздействию этиленоксида перед суспендированием в стерильном носителе. Предпочтительно в композицию включено поверхностно-активное вещество или увлажняющий агент для облегчения однородного распределения соединения.
Композиции могут содержать, например, от примерно 0,1 до примерно 99 мас.% активного вещества, в зависимости от способа введения. Когда композиции включают дозовые единицы, тогда каждая единица будет содержать, например, от примерно 0,1 до 900 мг активного ингредиента, типично от 1 до 250 мг.
Соединения по изобретению могут быть приготовлены в виде препаратов для введения любым удобным путем для применения в человеческой или ветеринарной медицине, по аналогии с другими противодиабетическими агентами. Такие способы известны в данной области техники и были рассмотрены выше. Для более детального обсуждения, касающегося получения таких препаратов, см. Кеттд!ои'к Рйагтасеибса1 8с1еисек. 21к1 ЕбШои, Ьу итуегкйу оГ 1Пе 8с1еисек ίη РЫ1абе1рЫа.
Воплощения настоящего изобретения проиллюстрированы следующими примерами. Однако следует понимать, что воплощения изобретения не ограничиваются конкретными деталями этих примеров, поскольку другие их вариации будут известны или очевидны в свете настоящего описания среднему специалисту в данной области техники.
Примеры
Если не указано иное, исходные вещества обычно доступны из коммерческих источников, таких как А1бпс11 Сйетюа1к Со. (Мй^аикее, XVI). Еаисайет 8уи1йек1к, 1ис. (Χνίηάΐιηιη. ΝΗ), Асгок Отдашск (Еал1а\уп. N1), МауЬпбде Сйет1са1 Сотраиу, Ь1б. (Соти^аИ, Еид1аиб), Тудег 8с1еи11йс (Ртшсе1ои, N1) и Ак!га2еиеса РйаттасеибсаП (Ьоибои, Еид1аиб), МаЛтсктоб! Вакег (РЫШркЬитд N1); ΕΜΌ (С1ЬЬк1о^и, N1).
Общие экспериментальные процедуры
Спектры ЯМР регистрировали на Уапаи ИиИу™ 400 (Ό0400-5 зонд) или 500 (Ό0500-5 зонд - оба производства Уапаи 1ис., Ра1о А1!о, СА) при комнатной температуре при 400 или 500 МГц, соответственно, для протонного анализа. Химические сдвиги выражены в миллионных долях (дельта) относительно остаточного растворителя в качестве внутреннего стандарта. Формы пиков обозначены следующим образом: к, синглет; б, дублет; бб, дублет дублетов; !, триплет; ср квартет; т, мультиплет; Ьк, уширенный синглет; 2к, два синглета.
Масс-спектры с химической ионизацией при атмосферном давлении (АРС1) получали на спектрометре νη^ΓΚ™ (Мютотакк ΖΜΌ, газ-носитель: азот) (производство Vаΐе^к Согр., МбГогб, МА, И8А) при скорости потока 0,3 мл/мин и с использованием элюентной системы вода/ацетонитрил 50:50. Массспектры с ионизацией электрораспылением (Е8) получали на жидкостном хроматомасс-спектрометре Vаΐе^к™ (прибор Мютотакк ΖΟ или ΖΜ^ (газ-носитель: азот) ^а!етк Согр., МйГотб, МА, И8А) с использованием градиента 95:5-0:100 воды в ацетонитриле с 0,01% муравьиной кислоты, добавленной в каждый растворитель. В этих приборах использовали колонку Уапаи Ро1апк 5 С18-А20х2,0 мм (Уапаи 1ис., Ра1о А1!о, СА) при скоростях потока 1 мл/мин в течение 3,75 мин или 2 мл/мин в течение 1,95 мин.
Колоночную хроматографию осуществляли с использованием силикагеля либо на колонках Е1акй 40 Вю1аде™ (18С, 1ис., 8йейои, СТ), либо на картридже Вю1аде™ 8NАР КРкй или Кебйер КГ с силикагелем (Те1ебуие 1ксо 1иВ) в атмосфере азота. Препаративную НРЬС осуществляли с использованием системы Vаΐе^к ЕтасбоиТуих с фотодиодной матрицей ^а!етк 2996) и масс-спектрометрической (\νπ1етк/М1стотакк ΖΟ) схемой детекции. Работу с аналитической НРЬС осуществляли на Vаΐе^к 2795 А111аисе НРЬС или Vаΐе^к АС’ОШТУ ИРЬС с фотодиодной матрицей, со схемами детекции одноквадрупольным масс-спектрометром или испарительным детектором светорассеяния.
Концентрация в вакууме относится к выпариванию растворителя при пониженном давлении с использованием роторного испарителя.
Если не указано иное, химические реакции осуществляли при комнатной температуре (примерно 23 °С). Также, если не указано иное, химические реакции осуществляли в атмосфере азота.
Фармокологические данные
Полезность изобретения для лечения заболеваний, модулируемых агонистической активацией Сбелоксопряженного рецептора СРК119 с помощью соединений по изобретению, может быть подтверждена активностью в одном или более функциональных анализах, описанных в данной заявке ниже. Фирма-производитель указана в скобках.
Функциональные анализы 1и уйто
- 13 020106 β-лактамаза
В анализе агонистов СРК119 используют клеточную (β-лактамаза 11СРК119 НЕК293-СКЕ) репортерную конструкцию, где агонистическая активация человеческого СРК119 сопряжена с продукцией βлактамазы через цАМФ-отвечающий элемент (СКЕ от англ. сусйс АМР гекропке с1сшсп1). Активность ОРК.119 затем измеряют с использованием РКЕТ-активированного β-лактамазного субстрата, ССЕ4-АМ (Ыуе В1ахег РКЕТ-В/С Ьоабшд кй, 1пуйтодеп, кат. № К1027). Конкретно, β-лактамазные клетки ЙОРК.119-НЕК-СКЕ (1пуйгодеп 2,5х107/мл) брали из хранилища с жидким азотом и разбавляли в среде для посева (среда Игла в модификации Дульбекко с высокой концентрацией глюкозы (ИМЕМ; С|Ьсо. кат. № 11995-065), 10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки (Н1ЕВ8; §1дта, кат. № Е4135), 1Х МЕМ заменимые аминокислоты (01Ьсо, кат. № 15630-080), 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,0 (01Ьсо, кат. № 15630-080), 200 нМ клавуланата калия (§1дта, кат. № Р3494). Концентрацию клеток корректировали с использованием среды для посева клеток и 50 мкл этой клеточной суспензии (12,5х104 жизнеспособных клеток) добавляли в каждую лунку черного, с прозрачным дном, покрытого поли-близином 384-луночного планшета (Стешет Вю-Опе, кат. № 781946) и инкубировали при 37°С во влажной окружающей среде, содержащей 5% диоксида углерода. Через 4 ч среду для посева удаляли и заменяли на 40 мкл среды для анализа (среда для анализа представляет собой среду для посева без клавуланата калия и Н1ЕВ8). Затем добавляли варьирующиеся концентрации каждого тестируемого соединения в объеме 10 мкл (конечная концентрация ДМСО < 0,5%) и клетки инкубировали в течение 16 ч при 37°С во влажной окружающей среде, содержащей 5% диоксида углерода. Планшеты удаляли из инкубатора и оставляли достигать комнатной температуры в течение приблизительно 15 мин. В каждую лунку добавляли 10 мкл 6 X ССЕ4/АМ рабочего красящего раствора (полученного согласно инструкциям в наборе Ыуе В1ахег РКЕТ-В/С Ьоабшд кй, 1пуйгодеп, кат. № К1027) и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 ч в темноте. Флуоресценцию измеряли посредством флуориметрического планшета-ридера ЕпУШоп, возбуждение 405 нм, испускание 460 нм/535 нм. Определения ЕС50 проводили из анализа кривых агонист-ответ, проанализированных с помощью программы аппроксимации, с использованием 4параметрического логарифмического уравнения доза-ответ.
цАМФ
Активность агониста СРК119 также определяли с помощью клеточного анализа с использованием набора для детекции цАМФ посредством НТКР (однородная флуоресценция с разрешением во времени) (цАМФ бупапйс 2 Аккау Кй; С18 Вю, кат. № 62АМ4РЕВ), который измеряет уровни цАМФ в клетке. Способ представляет собой конкурентный иммуноанализ между нативным цАМФ, продуцируемым клетками, и цАМФ, меченым красителем б2. Связывание метки визуализируют с помощью МаЬ (моноклональное антило) против цАМФ, меченого Сгур1а1е. Специфический сигнал (т.е. перенос энергии) обратно пропорционален концентрации цАМФ либо в стандарте, либо в образце.
Конкретно, β-лактамазные клетки 11СРК119 НЕК-СКЕ (1пуйгодеп 2,5х107/мл; та же клеточная линия, что и линия, используемая в анализе β-лактамазы, описанном выше) брали из криохранилища и разбавляли в ростовой среде (среда Игла в модификации Дульбекко с высокой концентрацией глюкозы (ИМЕМ; 01Ьсо, кат. № 11995-065), 1% обработанной декстраном на угле фетальной бычьей сыворотки (СИ сыворотка; НуС1опе, кат. № 8Н30068.03), 1хМЕМ заменимые аминокислоты (01Ьсо, кат. № 15630080) и 25 мМ НЕРЕ8 рН 7,0 (01Ьсо, кат. № 15630-080)). Концентрацию клеток доводили до 1,5х105 клеток/мл и 30 мл этой суспензии добавляли во флакон Т-175 и инкубировали при 37°С во влажной окружающей среде с 5% диоксида углерода. Через 16 ч (в течение ночи) клетки удаляли из флакона Т-175 (путем постукивания по стенке флакона), центрифугировали при 800х д и затем ресуспендировали в среде для анализа (1хНВ88+СаС12+МдС12 (01Ьсо, кат. № 14025-092) и 25 мМ НЕРЕ8 рН 7,0 (01Ьсо, кат. № 15630-080)). Концентрацию клеток доводили до 6,25х105 клеток/мл с помощью среды для анализа и 8 мкл этой клеточной суспензии (5000 клеток) добавляли в каждую лунку белого 384-луночного планшета для анализа с малым объемом лунок Отешет (У^К, кат. № 82051-458).
Различные концентрации каждого тестируемого соединения разбавляли буфером для анализа, содержащим 3-изобутил-1-метилксантин (1ВМХ; §1дта, кат. № 15879), и добавляли в лунки аналитического планшета в объеме 2 мкл (конечная концентрация 1ВМХ составляла 400 мкМ, а концентрация конечная ДМСО составляла 0,58%). После 30 мин инкубации при комнатной температуре в каждую лунку аналитического планшета добавляли 5 мкл меченого б2 цАМФ и 5 мкл антитела против цАМФ (оба разбавляли 1:20 в буфере для лизиса клеток; как описано в протоколе анализа от производителя). Затем планшеты инкубировали при комнатной температуре и через 60 мин считывали изменения сигнала НТКР с помощью планшет-ридера Епу18юп 2104 тц1й1аЬе1 с использованием возбуждения при 330 нм и испусканий при 615 и 665 нм. Необработанные данные переводили в нМ цАМФ путем интерполяции со стандартной кривой цАМФ (как описано в протоколе анализа от производителя), и определения ЕС50 осуществляли из кривых агонист-ответ, анализируемых с помощью программы аппроксимации кривых, с использованием 4-параметрического логарифмического уравнения доза-ответ.
Следует понимать, что цАМФ ответы вследствие активации СРК119 могут индуцироваться в клетках, отличных от специфической клеточной линии, используемой в данном тесте.
- 14 020106 β-аррестин
Активность агониста 6РК119 также определяли с помощью клеточного анализа с использованием технологии анализа β-аррестина клеток ОксоуетХ Ра1ЬНип1ег и β-аррестиновой клеточной линии И2О8 16РК119 (Э|5СОуегХ. кат. № 93-О356С3). В этом анализе активацию агониста определяют путем измерения агонист-индуцированного взаимодействия β-аррестина с активированным 6РК119. Небольшой, состоящий из 42 аминокислот, фрагмент фермента, называемый РгоЫпк, присоединяли к С-концу 6РК119. Аррестин подвергали слиянию с более крупным фрагментом фермента, называемым ЕА (акцептор фермента). Активация 6РК119 стимулирует связывание аррестина и ускоряет комплементацию двух фрагментов фермента, что приводит к образованию функционального фермента β-галактозидазы, способного гидролизовать субстрат и генерировать хемилюминесцентный сигнал.
Конкретно, β-аррестиновые клетки И2О8 16РК119 (Э|5СОуегХ 1х107/мл) брали из криохранилища и разбавляли ростовой средой (минимальная питательная среда (МЕМ; 61Ьсо, кат. № 11095-080), 10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки (Н1ЕВ8; 81дта, кат. № Е4135-100), 100 мМ пирувата натрия (81дта, кат. № 88636), 500 мкг/мл 6418 (81дта, кат. № 68168) и 250 мкг/мл гигромицина В (1пу11тодеп, кат. № 10687-010). Концентрацию клеток доводили до 1,66х105 клеток/мл и 30 мл этой суспензии добавляли во флакон Т-175 и инкубировали при 37°С во влажной окружающей среде с 5% диоксида углерода. Через 48 ч клетки удаляли из флакона Т-175 с помощью не содержащего ферментов буфера для диссоциации клеток (61Ьсо, кат. № 13151-014), центрифугировали при 800х д и затем ресуспендировали в среде для посева (Орй-МЕМ I (1пуЦгодеп/ВВЕ кат. № 31985-070) и 2% обработанной декстраном на угле фетальной бычьей сыворотки (СЭ сыворотка; НуС1опе, кат. № 8Н30068.03). Концентрацию клеток доводили до 2,5х105 клеток/мл с помощью среды для посева и 10 мкл этой клеточной суспензии (2500 клеток) добавляли в каждую лунку белого 384-луночного аналитического планшета с малым объемом лунок бгетет (У^К, кат. № 82051-458) и планшеты инкубировали при 37°С во влажной окружающей среде с 5% диоксида углерода.
Через 16 ч (в течение ночи) аналитические планшеты удаляли из инкубатора и различные концентрации каждого тестируемого соединения (разбавленного в буфере для анализа (1хНВ88 +СаС12+МдС12 (61Ьсо, кат. № 14025-092), 20 мМ НЕРЕ8 рН 7,0 (61Ьсо, кат. № 15630-080) и 0,1% БСА (81дта, кат. № А9576)) добавляли в лунки аналитического планшета в объеме 2,5 мкл (конечная концентрация ДМСО составляла 0,5%). После 90-минутной инкубации при 37°С во влажной окружающей среде с 5% диоксида углерода в каждую лунку аналитического планета добавляли 7,5 мкл β-галактозидазного субстрата 6а1ас1оп 81ат (РаШНиШет ОеЮсЕоп Κίΐ (ПщсоуеКх, кат. № 93-0001); полученного, как описано в протоколе анализа от производителя). Планшеты инкубировали при комнатной температуре и через 60 мин изменения люминесценции считывали с помощью планшет-ридера Епукюп 2104 ти1й1аЬе1 с 0,1 с на лунку. Определения ЕС50 осуществляли из кривых агонист-ответ, анализируемых с помощью программы аппроксимации кривых, с использованием 4-параметрического логарифмического уравнения доза-ответ.
Экспрессия 6РК119 с использованием ВасМат и анализ связывания 6РК119
Человеческий 6РК119 дикого типа (фиг. 1) амплифицировали с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) (РЕи ТигЬо Ма1ет М1х, 81та1адепе, Ьа 1о11а, СА), используя р1КЕ8-риго-й6РК119 в качестве матрицы и следующие праймеры:
16РК119 ВатН1, вышележащий
5'-ТАААТТ66АТССАССАТ66ААТСАТСТТТСТСАТТТ66А6-3' (вставки ВатН1 сайт на 5'-конце) 16РК119 ЕсоК1, нижележащий 5'-ТАААТТ6ААТТСТТАТСА6ССАТСАААСТСТ6А6С-3' (вставки ЕсоК1 сайт на 3'-конце)
Амплифицированный продукт очищали (О|ас.|шск Κίΐ, 61адец Уа1епс1а, СА) и переваривали с помощью ВатН1 и ЕсоК1 (Лете Епд1апб ВюЬаЬк, 1р5\\1ск МА) согласно протоколу производителя. Вектор рЕВ-У8У6-СМУ-ро1у (фиг. 2) переваривали с помощью ВатН1 и ЕсоК1 (Лете Епд1апб ВюЬаЬк, [рктетсН, МА). Переваренную ДНК разделяли посредством электрофореза на 1%-ном агарозном геле; фрагменты вырезали из геля и очищали (О|ас.|шск Κίΐ, 61адеп, Уа1епс1а, СА). Вектор и генные фрагменты лигировали (Кар1б Ь1да8е Κίΐ, Восйе, Р1еа5ап1оп, СА) и трансформировали в клетки Опе81ю1 ЭН5а Т1К (1пуйтодеп, СаткЬаф СА). Восемь ампициллин-устойчивых колоний (клоны 1-8) выращивали для минипрепаративного анализа (61адеп М1шртер Κίΐ, 61адеп, Уа1епс1а, СА) и секвенировали для подтверждения идентичности и правильной ориентации вставки.
Конструкцию рЕВ-У8У6-С’МУ-ро1у-116РК119 (клон №1) трансформировали в клетки Опе81ю1 ЭН10Вас (1пу1йодеп, СатНЬаф СА) согласно протоколам производителя. Восемь положительных (т.е. белых) колоний пересевали штрихом для подтверждения статуса положительных и затем выращивали для выделения бакмиды. Рекомбинантную бакмиду 16РК119 выделяли с помощью модифицированной процедуры щелочного лизиса с использованием буферов от 61адеп Мйиргер Κίΐ (Р1адеп, Уа1епс1а, СА). Кратко, осажденные клетки лизировали в буфере Р1, нейтрализовали в буфере Р2 и осаждали буфером N3. Осадок осаждали посредством центрифугирования (17900хд в течение 10 мин) и супернатант объе
- 15 020106 диняли с изопропанолом для осаждения ДНК. ДНК осаждали посредством центрифугирования (17900хд в течение 30 мин), однократно промывали 70%-ным этанолом и ресуспендировали в 50 мкл буфера ЕВ (Трис-НСЬ, рН 8,5). Для подтверждения присутствия вставки ЕСРК119 в бакмиде использовали полимеразную цепную реакцию (ПЦР) с коммерчески доступными праймерами (М13Е, М13К, [пуЬгодсп. СагкЬаб, СА).
Создание рекомбинантного бакуловируса ИСРК119
Создание вирусного материала Р0
Суспензию адаптированных клеток 8Г9, выращенных в среде 8Г900П (Iην^ΐ^οдеη, СагкЬаб, СА), трансфицировали 10 мкл бакмидной ДНК ИСРК119 согласно протоколу производителя (СеПГесНп, ^1(годсп, СагкЬаб, СА). Через пять суток инкубации кондиционированную среду (т.е. вирусный материал Р0) центрифугировали и фильтровали через 0,22-мкм фильтр (81епГНр, М1Шроге, ВШепса, МА).
Создание замороженного (ВИВ) вирусного материала
Для долгосрочного хранения и создания рабочего (т.е. Р1) вирусного материала создавали замороженный ВПС (инфицированные бакуловирусом клетки насекомых) материал: суспензию адаптированных клеток 8Г9 выращивали в среде 8Г900П Цпуйгодеп, СагкЬаб, СА) и инфицировали вирусным материалом ЬСРК119 Р0. Через 24 ч роста инфицированные клетки осторожно центрифугировали (приблизительно 100хд), ресуспендировали в среде для замораживания (10% ДМСО, 1% альбумина в среде 8Г900П) до конечной плотности 1 х 107 клеток/мл и замораживали согласно стандартным протоколам замораживания в аликвотах по 1 мл.
Создание рабочего (Р1) вирусного материала
Суспензию адаптированных клеток 8Г9, выращенных в среде 8Г900П (Iην^ΐгодеη, СагкЬаб, СА), инфицировали разведением 1:100 оттаянного материала ЬСРК119 ВПС и инкубировали в течение нескольких суток (27°С со встряхиванием). Когда жизнеспособность клеток достигала 70%, тогда кондиционированную среду собирали центрифугированием и титр вируса определяли с помощью ЕБ18А (Васи1оЕ1ка Κίΐ, С1оп1ес11, МошИат У|е\\·, СА).
Сверхэкспрессия ЬСРК119в клетках НЕК 293ЕТ, адаптированных к суспензии
Клетки НЕК 293ЕТ (Iην^ΐгодеη, СагкЬаб, СА) выращивали во встряхиваемом флаконе в среде 293Егеейу1е (Iпν^ΐгодеп), дополненной 50 мкг/мл неомицина и 10 мМ НЕРЕ8 (37°С, 8% диоксида углерода, встряхивание). Клетки осторожно центрифугировали (приблизительно 500хд, 10 мин) и осадок ресуспендировали в смеси РВ8 Дульбекко (минус Мд++/-Са++), дополненной 18% фетальной бычьей сыворотки (81дта А1бпс11) и Р1 вируса так, чтобы множественность заражения (МОЦ составляла 10, и конечная плотность клеток составляла 1,3х106/мл (общий объем 2,5 л). Клетки переносили в 5-литровый биореактор \Уауе ВюгеасЮг ХУауеЬад (\Уауе ТесНпо1од1е5, МА) и инкубировали в течение 4 ч при 27°С (17 встряхиваний/мин, угол платформы 7°); в конце инкубационного периода добавляли равный объем (2,5 л) среды 293Егеейу1е, дополненной 30 мМ бутирата натрия (81дта А1бпс11) (конечная концентрация = 15 мМ), и клетки выращивали в течение 20 ч (37°С, 8% СО2 [0,2 л/мин], 25 встряхиваний/мин, угол платформы 7°). Клетки собирали посредством центрифугирования (3000хд, 10 мин), однократно промывали на ЭРВ8 (минус Са++/Мд++), ресуспендировали в 0,25 М сахарозе, 25 мМ НЕРЕ8, 0,5 мМ ЕЭТА, рН 7,4 и замораживали при -80°С.
Получение мембран для анализов связывания радиолиганда
Замороженные клетки оттаивали на льду и центрифугировали при 700хд (1400 об/мин) в течение 10 мин при 4°С. Клеточный осадок ресуспендировали в 20 мл забуференного фосфатами физиологического раствора и центрифугировали при 1400 об/мин в течение 10 мин. Затем клеточный осадок ресуспендировали буфере для гомогенизации (10 мМ НЕРЕ8 (С1Ьсо № 15630), рН 7,5, 1 мМ ЕЭТА (В1о8о1ийоп5, № ВЮ260-15), 1 мМ ЕСТА (81дта, № Е-4378), 0,01 мг/мл бензамидина (81дта № В 6506), 0,01 мг/мл бацитрацина (81дта № В 0125), 0,005 мг/мл лейпептина (81дта № Ь 8511), 0,005 мг/мл апротинина (81дта № А 1153)) и инкубировали на льду в течение 10 мин. Затем клетки лизировали с помощью 15 плавных перемещений в плотно пригнанном стеклянном гомогенизаторе Даунса (Эонпсе). Гомогенат центрифугировали при 1000хд (2200 об/мин) в течение 10 мин при 4°С. Супернатант переносили в свежие центрифужные пробирки на льду. Клеточный осадок ресуспендировали в буфере для гомогенизации и снова центрифугировали при 1000хд (2200 об/мин) в течение 10 мин при 4°С, после чего супернатант удаляли и осадок ресуспендировали в буфере для гомогенизации. Эту процедуру повторяли третий раз, после чего супернатанты объединяли, добавляли бензоназу (№уадеп № 71206) и МдС12 (Е1ика № 63020) до конечной концентрации 1 ед./мл и 6 мМ, соответственно, и инкубировали на льду в течение1 ч. Затем раствор центрифугировали при 25000хд (15000 об/мин) в течение 20 мин при 4°С, супернатант удаляли и осадок ресуспендировали в свежем буфере для гомогенизации (минус бензоназа и МдС12). После повторения стадии центрифугирования при 25000хд конечный осадок мембран ресуспендировали в буфере для гомогенизации и замораживали при -80°С. Концентрацию белка определяли с использованием набора для анализа белка Р1егсе ВСА (реагенты Р1егсе А № 23223 и В № 23224).
- 16 020106
Синтез и очистка [3Н] -Соединения А
(катализатор Крэбтри)
Соединение А СН С1 [ Н]-Соединенне А
Соединение А (изопропил-4-(1-(4-(метилсульфонил)фенил)-3а,7а-дигидро-1Н-пиразоло[3,44]пиримидин-4-илокси)пиперидин-1-карбоксилат, как показано выше) (4 мг, 0,009 ммоль) растворяли в 0,5 мл дихлорметана и полученный раствор обрабатывали гексафторфосфатом (1,5циклооктадиен)(пиридин)(трициклогексилфосфин)иридия (I) (I. 0гдапоте!а1. СНет. 1979, 168, 183) (5 мг, 0,006 ммоль). Реакционный сосуд герметично закрывали и раствор перемешивали в атмосфере газообразного трития в течение 17 ч. Реакционный растворитель удаляли при пониженном давлении и полученный остаток растворяли в этаноле. Очистку неочищенного [3Н]-Соединения А осуществляли посредством препаративной НРЬС с использованием следующих условий.
Колонка: Αΐΐαηΐίβ, 4,6x150 мм, 5 мкм
Подвижная фаза А: вода/ацетонитрил/муравьиная кислота (98/2/0,1)
Подвижная фаза В: ацетонитрил
Градиент:
Время %В
0,00 - 30,0
1,00 - 30,0
13,00 - 80,0
Время прогона (Вип Оте): 16 мин
Время восстановления колонки (Рое! Рте): 5 мин
Скорость потока: 1,5 мл/мин
Инж. объем: 20-50 мкл
Инж. растворитель: ДМСО
Детекция: УФ при 210 и 245 нм
Специфическую активность очищенного [3Н]-Соединения А определяли посредством массспектроскопии, и она составляла 70 Ки/ммоль.
Альтернативно, анализ связывания может быть осуществлен с [3Н]-Соединением В.
Синтез и очистка [3Н] -Соединения В
Соединение В (катализатор Крабтри) (3Н]-Соединение В
СН2С12
Соединение В (трет-бутил-4-( 1 -(4-(метилсульфонил)фенил)-1Н-пиразоло [3,4-4]пиримидин-4илокси)пиперидин-1-карбоксилат, как показано выше) (5 мг, 10,6 мкмоль) растворяли в 1,0 мл дихлорметана и полученный раствор обрабатывали катализатором Крэбтри (СгаЫгее) (5 мг, 6,2 мкмоль). Реакционный сосуд герметично закрывали и раствор перемешивали в атмосфере газообразного трития в течение 17 ч. Реакционный растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный остаток растворяли в этаноле. Очистку неочищенного [3Н]-Соединения В осуществляли посредством флэшхроматографии на колонке с силикагелем, элюируя смесью 70% гексаны/30% этилацетат, с последующей флэш-хроматографией на колонке с силикагелем, элюируя смесью 60% петролейный эфир/40% этилаце тат.
Специфическую активность очищенного [3Н]-Соединения В определяли посредством массспектроскопии, и она составляла 57,8 Ки/ммоль.
Анализ связывания радиолиганда СРВ119
- 17 020106
Тестируемые соединения последовательно разбавляли в 100% ДМСО (1.Т. Вакег #922401). 2 мкл каждого разведения добавляли в подходящие лунки 96-луночного планшета (каждая концентрация в трех повторностях). Немеченое соединение А (или соединение В) в конечной концентрации 10 мкМ использовали для определения неспецифического связывания.
[3Н]-Соединение А (или [3Н]-Соединение В) разбавляли в буфере для связывания (50 мМ Трис-НС1, рН 7,5 (81§та #Т7443), 10 мМ МдС12 (Ийка 63020), 1 мМ ΕΌΤΑ (Вю8о1и1юп8 #В1О260-15), 0,15% бычьего сывороточного альбумина (81дта #А7511), 0,01 мг/мл бензамидина (81дта #В 6506), 0,01 мг/мл бацитрацина (81дта #В 0125), 0,005 мг/мл лейпептина (81дта #Ь 8511), 0,005 мг/мл апротинина (81дта #А 1153)) до концентрации 60 нМ и 100 мкл добавляли во все лунки 96-луночного планшета (Иа1де Иипс # 267245).
Мембраны, экспрессирующие ОРК119, оттаивали и разбавляли до конечной концентрации 20 мкг/100 мкл на лунку в буфере для связывания, и 100 мкл разбавленных мембран добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета.
Планшет инкубировали в течение 60 мин при встряхивании при комнатной температуре (приблизительно 25°С). Анализ останавливали вакуумной фильтрацией на фильтр-планшетах СБ/С (Раскагб # 6005174), предварительно смоченных 0,3%-ным полиэтиленамином, используя коллектор Раскагб. Затем фильтры промывали шесть раз, используя буфер для промывки (50 мМ Трис-НС1, рН 7,5, выдерживая при 4°С). Затем фильтр-планшеты сушили на воздухе при комнатной температуре в течение ночи. В каждую лунку добавляли 30 мкл сцинцилляционной жидкости (Кеабу 8а£е, Весктап Соикет # 141349), планшеты герметично закрывали и измеряли радиоактивность, связанную с каждым фильтром, с использованием сцинцилляционного счетчика для планшетов Аа11ас Ттбих М1стоВе1а.
Кб для [3Н]-Соединения А (или [3Н]-Соединения В) определяли путем проведения насыщающего связывания, с анализом данных с помощью нелинейной регрессии, подгонкой к гиперболе связывания в одном сайте (опе-збе БурегЬо1а) (Старк Раб Ргбт). Определения 1С50 проводили из кривых конкуренции, анализируемых с помощью фирменной программы для аппроксимации кривых (81СНТ8) и 4параметрического логарифмического уравнения доза-ответ. Значения К1 вычисляли из значений 1С50 с использованием уравнения Ченга-Прусоффа.
- 18 020106
Следующие результаты получили для β-лактамазных и β-аррестиновых функциональных анализов.
Пример В-лакгамаза Число функциональных экспериментов В-лактамаза человека Функциональная ЕС50 (нМ) Внутренняя активность* (%) В-аррестии Число функциональных экспериментов В-аррестин человека Функциональная ЕС50 (нМ) Внутренняя активность* (%)
Пример 1 6« 100
122 101
Пример 2 17 93
2 17 84
9 100
Пример 3 8 98 1 4 111
2 11 105
6 96
Пример 4 15 97
2 16 95
Пример 5 1 250 100
2 227 88
395 104
Пример 6 1 6 31
Пример 7 1 622 98
Пример 8 20 100 1 16 80
2 39 102
64 94
64 94
Пример 9 56 98
2 89 93
Пример 10 34 100
2 38 94
Пример 1] 782 98
Пример 12 5200 100**
Пример 1 217 119
Пример V 495 109
Пример 15 63 104
Пример 16 1 472 87
2 420 100**
Пример 17 1 161 67
Пример 19 4000 100**
4810 100**
Пример 20 61 107
2 131 100**
Пример 21 688 100
2 201 96
Пример 24 141 103 1 52 129
Пример 27 1870 102
2 3400 100
Пример 28 5 27
2 3 22
Пример 29 1 ЗОЮ 100*·
Пример 30 136 113
2 166 76
Пример 31 1 155 92
Пример 32 1 281 86
Пример 33 1 1330 100**
Пример 3- 1 270 102
Пример 35 1 76 83
2 125 101
Пример 36 1 848 100
Пример 3 1 328 114
2 805 105
*Внутренняя активность представляет собой процент максимальной активности тестируемого соединения относительно активности стандартного агониста СРКТ19, 4-[[6-[(2-фтор-4 метилсульфонилфенил)амино]пиримидин-4-ил]окси]пиперидин-1карбоновой кислоты изопропилового эфира (νθ 2005121121), в конечной концентрации 10 мкМ.
**кривая экстраполирована к 100% для вычисления ЕС50.
- 19 020106
Следующие результаты получили для цАМФ и анализов связывания.
Пример цАМФ Число функциональных экспериментов цАМФ человека Функциональная ЕС50 (нМ) Внутренняя активность* (%) Связывание Число экспериментов Человек Κί связывания (нМ)
Пример 1 1 217 56 1 47
2 180 37 2 45
Пример 2 1 29 60 1 19
2 29 63 2 13
3 27 60 3 40
4 10
5 10
6 10
Пример 3 1 13 86 1 5
2 214 91 2 10
3 239 74 3 37
4 152 79
5 11 84
Пример 4 1 10 80 1 5
2 9 60
Пример 5 I 442 39 1 939
2 650 34 2 1710
Пример 6 1 >10000 17 1 >6100
2 >6100
Пример 7 1 225 80 1 293
2 256 74 2 283
3 169 85
Пример 8 1 9 89 1 1
2 6 75 2 58
- 20 020106
Пример 11АМФ Число функциональных экспериментов цАМФ человека Функциональная ЕС50 (нМ) Внутренняя активность* (%) Связывание Число экспериментов Человек Κί связывания (нМ)
3 7 74 3 43
4 47
5 14
Пример 9 1 35
2 42
Пример 10 1 87 62 1 28
2 98 57 2 30
Пример 11 1 163 61 1 530
2 98 74
3 154 62
Пример 12 1 >10000 31 1 1700
Пример 13 1 180 95 1 149
2 112 87
Пример 14 1 436 74 1 723
2 494 78
Пример 15 1 198 102 1 268
2 106 112 2 160
3 129 131
Пример 16 1 204 105
2 165 102
3 316 119
Пример 17 1 39 95
2 26 91
Пример 18 1 67 80 1 153
2 69 75
Пример 19 1 4480 100** 1 >6100
2 4550 99 2 >6100
Пример 20 1 59 123 1 41
2 90 107 2 144
Пример 21 1 44 33 1 58
2 32 31 2 128
3 57 34
Пример 22 1 147 29 1 159
2 161 29
- 21 020106
Пример цАМФ Число функциональных экспериментов цАМФ человека Функциональная ЕС50 (нМ)
Пример 23 1 1640
2 1470
Пример 24 1 27
2 29
Пример 25 1 57
2 111
Пример 26 1 254
Пример 27 1 394
Пример 28 >10000
Пример 29 1 >10000
2 648
Пример 30 1 256
2 245
Пример 31 1 56
2 52
Пример 32 1 66
2 64
3 58
Пример 33 1 244
2 274
Пример 34 1 55
2 70
Пример 35 1 18
2 31
Пример 36 1 281
2 256
Пример 37 1 1160
Внутренняя активность* (%> Связывание Число экспериментов Человек Κί связывания (нМ)
100** 1 150
юо**
111 1 54
100
88 1 418
114
62
27 1 1640
2 528
>6100
2 >6100
27 1 1550
33 2 3380
68 1 2020
60
107 1 462
109
66 1 514
78
60
85
92
94 1 87
78
76 1 31
66 2 29
51 1 521
76 2 1450
56 1 416
*Внутренняя активность представляет собой процент максимальной активности тестируемого соединения относительно активности стандартного агониста
СРК119, 4-[[6-[(2-фтор-4 метилсульфонилфенил)амино]пиримидин-4-ил]окси]пиперидин-1-карбоновой кислоты изопропилового эфира (\УО 2005121121), в конечной концентрации 10 мкМ;
**кривая экстраполирована к 100% для вычисления ЕС50.
Получение исходных веществ
Подготовительный пример 1. Изопропил-4-гидразинопиперидин-1-карбоксилата дигидрохлоридная соль
Изопропил-4-{2-(трет-бутоксикарбонил)гидразинил}пиперидин-1-карбоксилат (полученный, как описано в \УО 2008137436) (20,2 г, 67,02 ммоль) растворяли в абсолютном этаноле (250 мл) и раствор перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре. Медленно добавляли концентрированную водную соляную кислоту (27,9 мл, 335 ммоль). Раствор перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали до белого твердого вещества, которое содержало некоторое количество исходного вещества. Твердое соединение обрабатывали 4 М раствором хлористого водорода в 1,4-диоксане (100 мл, 400 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 14 ч при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением белого твердого вещества, которое обрабатывали гептаном (100 мл) и снова концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (15 г, 81%).
Ή ЯМР (400 МГц, метанол-б4) дельта 4.9 (т, 1Н), 4.1 (т, 2Н), 3.2 (т, 1Н), 2.9 (т, 2Н), 2.0 (т, 2Н), 1.4 (т, 2Н), 1.2, (б, 6Н); ЬСМ8 (Е8+): 202 (М+1).
- 22 020106
Подготовительный ил]пиперидин-1 -карбоксилат
Смесь изопропил-4-гидразинопиперидин-1-карбоксилата дигидрохлоридной соли (7,08 г, 25,8 ммоль), этил-2-циано-3-этоксиакрилата (4,81 г, 28,4 ммоль), ацетата натрия (6,49 г, 77,5 ммоль) и этанола (80 мл) перемешивали при 85°С в течение 3 ч. Смесь концентрировали до примерно трети первоначального объема. Добавляли воду (50 мл), насыщенный бикарбонат натрия (50 мл) и рассол (50 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом и сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали под ва куумом с получением неочищенного указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (9,8 г), которое использовали на следующей стадии без очистки. Аналитический образец получали в результате очистки посредством хроматографии на силикагеле, элюируя 30-60%-ным раствором этилацетата в гептане.
Ή ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.26 (б, 6Н), 1.35 (ΐ, 3Н), 1.86-1.95 (т, 2Н), 2.04-2.17 (т, 2Н), 2.84-2.96 (т, 2Н), 3.89-3.98 (т, 1Н), 4.28 (ф 2Н), 4.25-4.40 (т, 2Н), 4.89-4.97 (т, 1Н), 5.06 (8, 2Н), 7.64 (8, 1Н); ЬСМ8 (Е8+): 325,1 (М+1).
Подготовительный пример 3. Изопропил-4-[5-бром-4-(этоксикарбонил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1 -карбоксилат
Чистый трет-бутилнитрит (4,8 мл, 39,3 ммоль) медленно добавляли к перемешиваемой смеси изопропил-4-[5-амино-4-(этоксикарбонил)-1Н-пиразол-1 -ил] -пиперидин-1 -карбоксилата (подготовительный пример 2) (8,5 г, 26,2 ммоль) и бромида меди(П) (3,7 г, 16 ммоль) в ацетонитриле (100 мл) при комнатной температуре. Наблюдали значительный экзотермический эффект, причем смесь нагревалась до примерно 50°С. После продолжения нагревания при 65°С в течение 30 мин реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем концентрировали под вакуумом. Добавляли избыток 10%-ного водного аммиака и смесь экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали водой и рассолом и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле, элюируя от 30 до 70% этилацетата в гептане с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла, которое было примерно на 70% чистым согласно ЯМР и ЬСМ8. Вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
’НЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.23 (ά, 6Н), 1.34 (ΐ, 3Н), 1.84-1.95 (т, 2Н), 2.01-2.15 (т, 2Н), 2.82-2.98 (т, 2Н), 4.25-4.36 (т, 2Н), 4.30 (ф 2Н), 4.45-4.56 (т, 1Н), 4.86-4.96 (т, 1Н), 7.95 (8, 1Н); ЬСМ8 (Е8+): 387,9 (М+1).
Подготовительный пример 4. Изопропил-4-[5-бром-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1 -карбоксилат
К раствору изопропил-4-[5-бром-4-(этоксикарбонил)-1Н-пиразол-1 -ил]пиперидин-1 -карбоксилата (3,59 г, 6,5 ммоль) в тетрагидрофуране (32 мл), охлажденному до 0°С, добавляли 2 М раствор боранметилсульфидного комплекса в тетрагидрофуране (14,6 мл, 29,2 ммоль). Реакционную смесь нагревали при температуре флегмообразования в течение 21 ч и затем перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Смесь охлаждали до 0°С и добавляли метанол. Полученный раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 10 мин. Раствор снова охлаждали до 0°С и добавляли по каплям водный 2 М раствор гидроксида натрия (10 мл). Полученную смесь разбавляли этилацетатом и энергично перемешивали в течение 30 мин. Слои разделяли и водную фазу дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали последовательно водой и рассолом и затем сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. В результате хроматографии на силикагеле с элюцией 55-70%-ным этилацетатом в гептане получали указанное в заголовке соединение в виде масла (1,89 г, 84%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.23 (ά, 6Н), 1.87-1.95 (Ьг т, 3Н), 2.06 (ςά. 2Н), 2.89 (Ьг ΐ, 2Н), 4.29 (Ьг 8, 2Н), 4.39 (й, 1Н), 4.50 (ά, 2Н), 4.90 (т, 1Н), 7.58 (8, 1Н); ЬСМ8 (Е8+): 348,0 (М+1).
- 23 020106
Подготовительный пример 5. Изопропил-4-[5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1ил]пиперидин-1 -карбоксилат
Изопропил-4-[5-бром-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилат (1,42 г, 4,10 ммоль), трис-(дибензилиденацетон)дипалладий (156 мг, 0,170 ммоль), 1-1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (192 мг, 0,346 ммоль), цинковую пыль (68,8 мг, 1,06 ммоль), цианид цинка (497 мг, 4,23 ммоль) и Ν,Ν-диметилацетамид (20 мл) объединяли во флаконе для микроволновой обработки. Флакон продували азотом, герметично закрывали и нагревали при 120°С в течение 1 ч в микроволновом реакторе (Вю1аде [ηίΙίαΙΟΓ 2.2). Реакционную смесь пропускали через набивку Εΐοήδίΐ™, разбавляли этилацетатом и затем добавляли воду. Водную фазу экстрагировали 3 раза этилацетатом и объединенные органические слои сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат упаривали под вакуумом. В результате хроматографии на силикагеле с элюцией 55-70%-ным этилацетатом в гептане получали указанное в заголовке соединение в виде зеленого масла, которое отверждалось при стоянии (1,06 г, 88%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.24 (б, 6Н), 1.99 (Ьг б, 2Н), 2.06-2.17 (т, 3Н), 2.93 (Ьг ΐ, 2Н), 4.31 (Ьг 8, 2Н), 4.48 (ΐΐ, 1Н), 4.71 (б, 2Н), 4.92 (т, 1Н), 7.60 (8, 1Н); ЬСМ8 (Ε8+): 293,1 (М+Н).
Подготовительный пример 6. 2-Фтор-4-[(2-гидроксиэтил)тио]фенол
К раствору 4-бром-2-фторфенола (0,75 мл, 6,8 ммоль) и диизопропилэтиламина (3,5 мл, 20,09 ммоль) в 1,4-диоксане (35 мл) добавляли 9,9-диметил-4,5-бис(дифенилфосфино)ксантен (415 мг, 0,717 ммоль), бис(дибензилиденацетон)палладий (322 мг, 0,351 ммоль) и 2-меркаптоэтанол (0,46 мл, 6,86 ммоль) и темно-коричневый реакционный раствор нагревали при 110°С в течение 16 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, разбавляли водой и четыре раза экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением темно-бордового масла, которое очищали посредством хроматографии на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения (985 мг, 76%) в виде темно-бордового твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 3.00 (ΐ, 2Н, 1=5,95 Гц), 3.69 (б, 2 ч, 1=3,71 Гц), 6.896.95 (т, 1Н), 7.11 (ббб, 1 ч, 1=8,39, 2,15, 1,17 Гц), 7.17 (бб, 1 ч, 1=10,54, 2,15 Гц).
Подготовительный пример 7. 4-[(2-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2-фторфенол
К раствору 2-фтор-4-[(2-гидроксиэтил)тио]фенола (985 мг, 5,24 ммоль) и имидазола (371 мг, 5,30 ммоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (5 мл) порциями добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (814 мг, 5,24 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток разбавляли водой с последующей экстракцией этилацетатом три раза. Объединенные органические экстракты промывали рассолом и сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде оранжевого масла (1,43 г, 90%), которое использовали без дополнительной очистки. ЬСМ8 (Ε8+): 301,1 (М-1).
Подготовительный пример 8. 1-[4-(Бензилокси)-3-фторфенил]-1Н-тетразол
К суспензии 4-(бензилокси)-3-фторанилина (1,04 г, 4,8 ммоль) (\УО 2005030140) в атмосфере азота добавляли уксусную кислоту (2,3 мл, 38,3 ммоль), триэтилортоформиат (2,44 мл, 14,4 ммоль) и азид натрия (0,34 г, 5,3 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 95°С в течение 2,5 ч. Затем раствор оставляли охлаждаться до комнатной температуры и добавляли воду с последующей экстракцией этилацетатом три раза. Экстракты объединяли и промывали рассолом и сушили над сульфатом магния. Смесь фильт
- 24 020106 ровали и концентрировали при пониженном давлении и неочищенное вещество очищали посредством хроматографии на силикагеле (20-40% этилацетата в гептане) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (1,12 г, 86%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерометанол) дельта 9.65 (8, 1Н), 7.73-7.68 (бб, 1Н, 1=11, 2,5 Гц), 7.60-7.57 (т, 1Н), 7.47-7.45 (т, 2Н), 7.40-7.30 (т, 5Н), 5.24 (8, 2Н); ЬСМ8 (Е8+): 271,1 (М+1).
Подготовительный пример 9. 2-Фтор-4-(1Н-тетразол-1-ил)фенол
К 1-[4-(бензилокси)-3-фторфенил]-1Н-тетразолу (1,12 г, 4,14 ммоль) в шейкерной колбе Парра добавляли этанол (40 мл) и раствор продували газообразным азотом. Добавляли 10%-ный палладий на углероде (0,30 г) и реакционную смесь гидрировали в шейкерном аппарате Парра при 40 фунтах на кв. дюйм (275,8 кПа) водорода в течение 30 мин. Затем смесь фильтровали через микропористый фильтр и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (0,67 г, 90%), которое использовали без очистки.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерометанол) дельта 9.62 (8, 1Н), 7.65-7.62 (бб, 1Н, 1=11, 2,5 Гц), 7.50-7.46 (т, 1Н), 7.47-7.45 (бб, 1Н, 1=9,0, 9,0 Гц); ЬСМ8 (Е8+): 181,1 (М+1).
Подготовительный пример 10. Изопропил-4-(5-циано-4-((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Изопропил-4-(5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (подготовительный пример 5) (75 мг, 0,24 ммоль) растворяли в 1 мл безводного дихлорметана и добавляли триэтиламин (0,1 мл, 0,74 ммоль). Реакционную смесь охлаждали в ледяной бане и затем добавляли метансульфоновый ангидрид (62 мг, 0,34 ммоль). Раствор удаляли из ледяной бани и перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного водного бикарбоната натрия и слои разделяли. Водный слой еще три раза экстрагировали дихлорметаном. Органические экстракты объединяли и промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали с получением масла (75 мг, выход 100%). Неочищенное вещество использовали на последующих стадиях без дополнительной очистки.
Подготовительный пример 11. трет-Бутил-4-гидразинопиперидин-1-карбоксилата гидрохлоридная соль
В раствор трет-бутил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (50 г, 0,25 ммоль) в метаноле (500 мл) в автоклаве добавляли моно-гидрохлорид гидразина (17,2 г, 0,25 ммоль) в воде (100 мл). Белую смесь перемешивали в атмосфере аргона с последующим добавлением 5%-ной платины на углероде (750 мг) в виде суспензии в воде. Автоклав герметично закрывали и заполняли водородом до достижения давления 60 атм (6,08 МПа) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 ч. После завершения реакционную смесь фильтровали через СеШе® и набивку промывали метанолом. Это получение проводили шесть раз. Объединенные фильтраты концентрировали при пониженном давлении и полученный белый осадок побочного продукта (ди-трет-бутил-4,4'-гидразин-1,2-диилдипиперидин-1-карбоксилата) собирали путем фильтрации и несколько раз промывали водой. Водный фильтрат затем концентрировали при пониженном давлении с получением желаемого продукта (221 г, 59%) в виде бесцветного твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 4.13 (Ьг 8, 2Н), 3.32 (Ьг 1, 1Н), 2.77 (Ьг 1, 2Н), 2.16 (т, 2Н), 1.66 (т, 2Н), 1.43 (8, 9Н).
Подготовительный пример 12. трет-Бутил-4-[5-амино-4-(этоксикарбонил)-1Н-пиразол-1ил]пиперидин-1 -карбоксилат
Смесь трет-бутил-4-гидразинопиперидин-1-карбоксилата гидрохлоридной соли (221 г, 880 ммоль), этил-2-циано-3-этоксиакрилата (153 г, 880 ммоль), тригидрата ацетата натрия (477 г, 352 ммоль) и этанола (2000 мл) перемешивали при 85°С в течение 8 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток растворяли в этилацетате и воде. Слои разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом.
- 25 020106
Затем объединенные органические экстракты сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали посредством фильтрации через короткую набивку силикагеля, элюируя 40%-ным этилацетатом в гептане, с получением продукта в виде бледно-желтого твердого вещества (214 г, 72%).
'Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 7.60 (з, 1Н), 5.27 (Ьг з, 2Н), 4.23 (Ьг с.|. 4Н), 3.91 (т, 1Н), 2.81 (Ьг 8, 2Н), 2.04 (т, 2Н), 1.86 (т, 2Н), 1.44 (з, 9Н), 1.29 (1, 3Н).
Подготовительный пример 13. трет-Бутил-4-[5-бром-4-(этоксикарбонил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилат
К раствору бромида меди(11) (1,69 г, 770 ммоль) в ацетонитриле (1000 мл) медленно добавляли трет-бутилнитрит (112 мл, 960 ммоль) и раствор нагревали до 65°С. К этому добавляли по каплям раствор трет-бутил-4-[5-амино-4-(этоксикарбонил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (215 г, 640 ммоль) в ацетонитриле (650 мл) в течение 30 мин. Через 4 ч реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и затем вливали в 2 М соляную кислоту (1500 мл) во льду. Смесь три раза экстрагировали этилацетатом и объединенные органические экстракты промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия и затем сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством фильтрации через короткую набивку силикагеля, элюируя сначала 10% гептана в дихлорметане, затем дихлорметаном, с получением указанного в заголовке соединения (137 г, 53%) в виде желтого масла, которое отверждалось при стоянии.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 7.95 (з, 1Н), 4.48 (т, 1Н), 4.28 (Ьг с.|. 4Н), 2.86 (Ьг з, 2Н), 2.06 (т, 2Н), 1.90 (т, 2Н), 1.44 (з, 9Н), 1.34 (1, 3Н).
Подготовительный пример 14. трет-Бутил-4-[5-бром-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилат н<
К раствору трет-бутил-4-[5-бром-4-(этоксикарбонил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (137 г, 0,34 моль) в тетрагидрофуране (1300 мл), охлажденному до 0°С, медленно добавляли боранметилсульфид (97 мл, 1,02 моль). Раствор оставляли нагреваться до комнатной температуры и затем нагревали при температуре флегмообразования в течение 15 ч. Затем реакционную смесь охлаждали в ледяной бане и добавляли по каплям метанол (40 мл). Затем раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Добавляли 2 М водный гидроксид натрия (1200 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом и объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над сульфатом магния и растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством фильтрации через короткую набивку силикагеля, элюируя 30%-ным этилацетатом в гептане, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества (61,4 г, 50%). Загрязненное вещество после этой очистки дополнительно очищали посредством вышеуказанной хроматографической процедуры с получением второй партии указанного в заголовке соединения (22 г, 18%) в виде бесцветного твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 7.59 (з, 1Н), 4.52 (з, 2Н), 4.37 (т, 1Н), 4.25 (Ьг з, 2Н), 2.86 (Ьг з, 2Н), 2.06 (т Ьг з, 2Н), 1.89 (т, 2Н), 1.45 (з, 9Н).
Подготовительный пример 15. трет-Бутил-4-[5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилат
Цианид меди(1) (2,97 г, 33,3 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору трет-бутил-4-[5-бром4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (10 г, 27,8 ммоль) в дегазированном диметилформамиде (100 мл). Затем реакционную смесь нагревали при 165°С в течение 4 ч и оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Затем ее охлаждали в ледяной бане и добавляли раствор этилендиамина (5,5 мл) в воде (20 мл) с последующим разведением дополнительным количеством воды (70 мл). Затем смесь экстрагировали этилацетатом и слои разделяли. Органический слой промывали последовательно водой и рассолом и затем сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат концен- 26 020106 трировали при пониженном давлении. Эту процедуру осуществляли в 8 партиях. Конечные неочищенные остатки объединяли и очищали посредством повторной хроматографии на колонке с силикагелем, элюируя 40%-ным этилацетатом в гептане, с получением указанного в заголовке соединения (11,6 г, 17%) в виде бесцветного твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) 7.59 (8, 1Н), 4.71 (8, 2Н), 4.45 (т, 1Н), 4.26 (Ьг 8, 2Н), 2.88 (Ьг ΐ, 2Н), 2.08 (т, 2Н), 1.98 (т, 2Н), 1.48 (8, 9Н); ЬСМ8 (Е8+): 207,1 (М-Вос+Н).
Подготовительный пример 16. трет-Бутил-4-(5-циано-4-((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата (202 мг, 0,659 ммоль) в дихлорметане (6,6 мл) добавляли триэтиламин (0,18 мл, 1,32 ммоль), затем метансульфоновый ангидрид (189 мг, 1,1 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 4,5 ч, затем разбавляли дихлорметаном и насыщенным водным бикарбонатом. Слои разделяли и водный слой экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением трет-бутил-4-(5-циано-4-((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата в виде масла, которое использовали без дополнительной очистки.
Подготовительный пример 17. 2-Фтор-4-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-тетразол-5ил)фенол и 2-фтор-4-(2-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразол-5-ил)фенол
A) 4-(Бензилокси) -3 -фторбензонитрил
К перемешиваемому раствору 3-фтор-4-гидроксибензонитрила (1,00 г, 7,30 ммоль) в 20 мл ацетонитрила порциями добавляли карбонат калия (2,02 г, 14,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 10 мин, затем добавляли бензилбромид (1,33 мл, 10,9 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 70 ч, затем ее разбавляли этилацетатом и водой. Органическую фазу отделяли и промывали водой, рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 5 до 20% этилацетата в гептане, с получением 4-(бензилокси)-3-фторбензонитрила в виде белого твердого вещества (1,33 г).
Б) 5-(4-(Бензилокси)-3-фторфенил)-1Н-тетразол и 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-2Н-тетразол
Флакон, содержащий 4-(бензилокси)-3-фторбензонитрил (250 мг, 1,10 ммоль), азид натрия (214 мг, 3,30 ммоль), хлорид аммония (176 мг, 3,30 ммоль) и 3 мл Ν,Ν-диметилформамида, нагревали при 110°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и этилацетатом и рН корректировали до 3 водной 1 н. соляной кислотой. Органическую фазу отделяли и промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке содинения в виде белого твердого вещества (270 мг). Это вещество использовали на последующих стадиях без очистки.
B) 5-(4-(Бензилокси)-3-фторфенил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-тетразол и 5-(4(бензилокси)-3-фторфенил)-2-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразол
К раствору 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-1Н-тетразола и 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-2Нтетразола (270 мг, 1 ммоль), растворенных в тетрагидрофуране, четырьмя порциями добавляли гидрид натрия (44 мг, 1,1 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Затем добавляли (2-(хлорметокси)этил)триметилсилан (0,19 мл, 1,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили путем добавления воды и добавляли этилацетат. Органическую фазу отделяли и водную фазу дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. В результате очистки посредством флэш-хроматографии с элюцией градиентом этилацетата и гептана (от 5 до 20% этилацетата) получали желаемый продукт в виде белого твердого вещества (270 мг, выход 67%).
Г) 2-Фтор-4-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-тетразол-5-ил)фенол и 2-фтор-4-(2-((2(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразол-5-ил)фенол
- 27 020106
К раствору 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-тетразола и 5(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-2-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразола (140 мг, 0,35 ммоль), растворенных в смеси 2 мл этанола и 2 мл тетрагидрофурана, добавляли черный палладий (56 мг, 0,53 ммоль) и муравьиную кислоту (0,14 мл, 3,5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем фильтровали через набивку СеШе®. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученное неочищенное вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Подготовительный пример 18. 5-(4-(Бензилокси)-3-фторфенил)-1-(2-(триметилсилилокси)этил)-1Нтетразол и 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-2-(2-(триметилсилилокси)этил)-2Н-тетразол
К раствору 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-1Н-тетразола и 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-2Нтетразола (подготовительный пример 17, стадия Б) (550 мг, 2 ммоль), растворенных в Ν,Νдиметилформамиде (8 мл), двумя порциями добавляли гидрид натрия (163 мг, 4 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Затем добавляли (2бромэтокси)триметилсилан (1,3 мл, 6 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение 16 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь гасили путем добавления воды и добавляли этилацетат. Органическую фазу отделяли и водную фазу дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэшхроматографии, элюируя градиентом этилацетата и гептана (от 5 до 30% этилацетата), с получением 5(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-1-(2-(триметил силилокси)этил)-1Н-тетразола (100 мг, выход 12%) и 5-(4(бензилокси)-3-фторфенил)-2-(2-(триметилсилилокси)этил)-2Н-тетразола (600 мг, выход 69%).
Подготовительный пример 19. 2-Фтор-4-(2-(2-(триметилсилилокси)этил)-2Н-тетразол-5-ил)фенол
К раствору 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-2-(2-(триметилсилилокси)этил)-2Н-тетразола (подготовительный пример 18) (230 мг, 0,54 ммоль), растворенного в смеси 6 мл этанола и 6 мл тетрагидрофурана, добавляли черный палладий (86 мг, 0,806 ммоль) и муравьиную кислоту (0,215 мл, 5,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем фильтровали через набивку Се111е®. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученное неочищенное вещество (180 мг) использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Подготовительный пример 20. 2-Фтор-4-(1-(2-(триметилсилилокси)этил)-1Н-тетразол-5-ил)фенол
К раствору 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-1-(2-(триметилсилилокси)этил)-1Н-тетразола (подготовительный пример 18) (130 мг, 0,30 ммоль), растворенного в смеси 2 мл этанола и 2 мл тетрагидрофурана, добавляли черный палладий (48 мг, 0,45 ммоль) и муравьиную кислоту (0,12 мл, 3 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем фильтровали через набивку СеШе®. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученное неочищенное вещество (94 мг) использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Подготовительный пример 21. 2-Фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенол
А) 5-(4-(Бензилокси)-3-фторфенил)-1-метил-1Н-тетразол и 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-2
- 28 020106 метил-2Н-тетразол
К перемешиваемому раствору 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-1Н-тетразола и 5-(4-(бензилокси)-3фторфенил)-2Н-тетразола (подготовительный пример 17, стадия Б) (1,50 г, 5,55 ммоль) в 30 мл тетрагидрофурана добавляли двумя порциями гидрид натрия (444 мг, 11,1 ммоль) при комнатной температуре. Через 5 мин добавляли йодметан (1,04 мл, 16,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота в течение 15 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляли водой и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэшхроматографии, элюируя 10-40%-ным этилацетатом в гептане, с получением 5-(4-(бензилокси)-3фторфенил)-2-метил-2Н-тетразола в виде белого твердого вещества (1,1 г) и 5-(4-(бензилокси)-3фторфенил)-1-метил-1Н-тетразола в виде белого твердого вещества (450 мг).
5-(4-(Бензилокси)-3 -фторфенил)-1-метил-1Н-тетразол
Ή ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 4.15 (в, 3Н), 5.23 (в, 2Н), 7.15 (!, 1=8,39 Гц, 1Н), 7.317.48 (т, 6Н), 7.52 (44, 1=11,13, 2,15 Гц, 1Н). ЬСМ8 (М+1): 285,1.
Б) 2-Фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенол
К раствору 5-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-1-метил-1Н-тетразола (500 мг, 1,76 ммоль) в 6 мл этанола и 6 мл тетрагидрофурана добавляли муравьиную кислоту (0,7 мл, 17,6 ммоль), затем черный палладий (281 мг, 2,64 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь фильтровали через С.'е14е® и фильтрат концентрировали в вакууме с получением 2фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенола в виде белого твердого вещества (330 мг), которое использовали в последующих реакциях без дополнительной очистки.
Подготовительный пример 22. 4-(1-Метил-1Н-тетразол-5-ил)фенол
В колбу, содержащую тионилхлорид (0,35 мл, 4,82 ммоль), добавляли раствор коммерчески доступной 4-бензилоксибензойной кислоты (1,00 г, 4,38 ммоль) в 10 мл дихлорметана и 0,01 мл Ν,Νдиметилформамида при 0°С при перемешивании. Ледяную баню удаляли и раствор перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Смесь концентрировали в вакууме с получением белого твердого вещества. Это твердое вещество растворяли в 10 мл метиламина (2 Μ в тетрагидрофуране) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 70 ч. Смесь разбавляли этилацетатом и водой и органический слой отделяли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением белого твердого вещества. Это твердое соединение перекристаллизовывали из этилацетата и гептана с получением 4-(бензилокси)-№метилбензамида в виде белых игл (850 мг).
Б) 5-(4-(Бензилокси)фенил)-1-метил-1Н-тетразол
К перемешиваемому раствору 4-(бензилокси)-№метилбензамида (200 мг, 0,829 ммоль) в 3 мл ацетонитрила и одной капле Ν,Ν'-диметилформамида в колбе, снабженной обратным холодильником, добавляли триэтиламин (0,12 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, затем добавляли по каплям тионилхлорид (0,078 мл, 1,08 ммоль). Желтую реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Затем медленно добавляли триэтиламин (0,36 мл) с последующим добавлением тетрабутилхлорида аммония (37,4 мг, 0,12 ммоль) и азида натрия (611 мг, 1,82 ммоль). Полученную желтую суспензию энергично перемешивали в течение 70 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь разбавляли водой и этилацетатом. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 10 до 40% этилацетата в гептане, с получением 5-(4-(бензилокси)фенил)-1-метил-1Н-тетразола в виде белого твердого вещества (180 мг).
В) 4-(1-Метил-1Н-тетразол-5-ил)фенол
К перемешиваемому раствору 5-(4-(бензилокси)фенил)-1-метил-1Н-тетразола (180 мг, 0,676 ммоль) в 3 мл этанола и 3 мл тетрагидрофурана добавляли муравьиную кислоту (0,27 мл, 6,76 ммоль), затем черный палладий (108 мг, 1,01 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь фильтровали через СеШе® и фильтрат концентрировали с получением 4-(1-метил-1Нтетразол-5-ил)фенола в виде белого твердого вещества (110 мг), которое использовали в последующих реакциях без дополнительной очистки.
- 29 020106
Подготовительный пример 23. 3-Фтор-4-гидроксибензамид
Смесь коммерчески доступного 3-фтор-4-гидроксибензонитрила (500 мг, 3,65 ммоль) и гидроксида калия (1,02 г, 18,2 ммоль) в 10 мл 80%-ного этанола нагревали при температуре флегмообразования в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали в вакууме и остаток переносили в воду, подкисляли уксусной кислотой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 20 до 60% этилацетата в гептане, с получением 3-фтор-4-гидроксибензамида в виде белого твердого вещества (210 мг).
Альтернативно, 3-фтор-4-гидроксибензамид может быть получен следующим образом.
К перемешиваемому раствору гидропероксида мочевины (4,2 г, 43,8 ммоль) в 12 мл воды добавляли твердый гидроксид натрия (1,04 г, 25,5 ммоль). Полученный раствор охлаждали в ледяной бане, затем добавляли раствор 3-фтор-4-гидроксибензонитрила (1,00 г, 7,29 ммоль) в 5 мл этанола. Смесь энергично перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, затем ее разбавляли водой (100 мл) и этилацетатом (100 мл). Смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли 1 М соляную кислоту до рН 4. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали с получением белого твердого вещества. Это твердое соединение растирали с диэтиловым эфиром и гептаном (2:1, 90 мл) в течение 1 ч, затем фильтровали с получением 3-фтор-4-гидроксибензамида в виде белого твердого вещества (1,05 г).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтеродиметилсульфоксид) дельта 6.93 (1, 1=8,69 Гц, 1Н), 7.19 (Ьг. 8., 1Н), 7.53 (бб, 1=8,39, 1,95 Гц, 1Н), 7.62 (бб, 1=12,40, 2,05 Гц, 1Н), 7.77 (Ьг. 8., 1Н), 10.39 (8, 1Н). ЬСМ8 (Е8): 156,0 (М+1).
Подготовительный пример 24. 2-Фтор-4-гидроксибензамид он
К перемешиваемому раствору гидропероксида мочевины (2,1 г, 21,9 ммоль) в 6 мл воды добавляли твердый гидроксид натрия (521 мг, 12,8 ммоль). Полученный раствор охлаждали в ледяной бане, затем добавляли раствор 2-фтор-4-гидроксибензонитрила (500 мг, 3,65 ммоль) в 2 мл этанола. Смесь энергично перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, затем ее разбавляли водой (100 мл) и этилацетатом (100 мл). Смесь перемешивали в течение 5 минут, затем добавляли 1 М соляную кислоту до рН 4. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали с получением 2-фтор-4гидроксибензамида в виде белого твердого вещества.
Подготовительный пример 25. Изопропил-4-(5-циано-4-(1-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Изопропил-4-(5-циано-4-формил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (пример 9, стадия А) (51 мг, 0,18 ммоль) растворяли в 2 мл безводного тетрагидрофурана и охлаждали до -78°С в атмосфере азота. Затем добавляли по каплям метилмагнийбромид (0,070 мл, 0,21 ммоль, 3 М в диэтиловом эфире). Охлаждающую баню удаляли и смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляли 1 М водным бисульфатом калия и трижды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом этилацетата в гептане (от 20 до 100% этилацетата), с получением изопропил-4-(5-циано-4-(1гидроксиэтил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата в виде белого твердого вещества (33 мг), которое использовали на последующих стадиях без очистки.
Подготовительный пример 26. 1-Метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат
- 30 020106
А) 1-Метилциклопропанол
В 1-л колбу помещали метилат титана (100 г), циклогексанол (232 г) и толуол (461 мл). Колбу снабжали насадкой Дина-Старка и обратным холодильником. Смесь нагревали при 140°С до удаления метанола. Толуол удаляли при 180°С. Добавляли дополнительное количество толуола и этот процесс повторяли дважды. После удаления всего толуола колбу сушили под высоким вакуумом. В колбу добавляли диэтиловый эфир (580 мл) с получением 1 М раствора в диэтиловом эфире. 5-л 3-горлую колбу снабжали механической мешалкой, подводом инертного газа и уравнивающей давление капельной воронкой. Колбу продували газообразным азотом и загружали метилацетатом (60,1 мл, 756 ммоль), циклогексилоксидом титана (1 М раствор в эфире 75,6 мл) и диэтиловым эфиром (1500 мл). Раствор перемешивали, выдерживая реакционную колбу в водяной бане с комнатной температурой. В капельную воронку помещали 3 М раствор этилмагнийбромида (554 мл, 1,66 моль). Реагент Гриньяра добавляли по каплям в течение 3 ч при комнатной температуре. Смесь становилась светло-желтым раствором, и затем постепенно образовывался осадок, который в конце концов превращался в смесь темнозеленого/коричневого/черного цвета. После перемешивания в течение еще 15 мин после добавления реактива Гриньяра смесь осторожно вливали в смесь 10%-ной концентрированной серной кислоты в 1 л воды. Полученную смесь перемешивали до тех пор, пока все твердые вещества не растворялись. Водный слой отделяли и экстрагировали диэтиловым эфиром 2x500 мл. Объединенные органические экстракты промывали последовательно водой, рассолом, сушили над карбонатом калия (500 г) в течение 30 мин, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме до масла. Добавляли бикарбонат натрия (200 мг) и неочищенное вещество перегоняли, собирая фракции, кипящие при примерно 100°С, с получением указанного в заголовке соединения (23 г) с метилэтилкетоном и 2-бутанолом в виде незначительных примесей.
'Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.45 (каж. ΐ, 1=6,59 Гц, 2Н), 0.77 (каж. 1, 1=5,61 Гц, 2Н), 1.46 (к, 3Н).
Получение указанного в заголовке соединения также описано в \УО 09105717.
Б) 1 -Метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат
Раствор 1-метилциклопропанола (10 г, 137 ммоль), 4-нитрофенилхлорформиата (32 г, 152 ммоль) и нескольких кристаллов 4-диметиламинопиридина (150 мг, 1,2 ммоль) в дихлорметане (462 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли по каплям триэтиламин (36,5 г, 361 ммоль). Через 10 мин ледяную баню удаляли и реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 14 ч. Реакционную смесь дважды промывали насыщенным водным карбонатом натрия. Водную фазу экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэшхроматографии на силикагеле, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане (от 0 до 5% этилацетата в течение первых 10 мин, затем изократическим градиентом с 5% этилацетата до гептана) с получением 20,8 г желаемого карбоната в виде прозрачного масла. Это масло отверждалось при стоянии.
'Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.77 (каж. 1, 1=6,59 Гц, 2Н), 1.09 (каж. 1, 1=7,07 Гц, 2Н), 1.67 (к, 3Н), 7.40 (каж. Й1, 1=9,27, 3,17 Гц, 2Н), 8.29 (каж. Й1, 1=9,27, 3,17 Гц, 2Н).
Альтернативно, 1-метилциклопропанол может быть получен следующим образом. 1-Метилциклопропанол
2000-мл 4-горлую колбу снабжали механической мешалкой, подводом инертного газа, термометром и двумя выравнивающими давление капельными воронками. Колбу продували азотом и загружали 490 мл диэтилового эфира, затем 18,2 мл (30 ммоль) тетра(2-этилгексилоксида) титана. В одну из капельных воронок помещали раствор, полученный из 28,6 мл (360 ммоль) метилацетата, разбавленного до 120 мл эфиром. Во вторую капельную воронку помещали 200 мл 3 М раствора этилмагнийбромида в эфире. Реакционную колбу охлаждали в бане с ледяной водой для поддержания внутренней температуры на уровне 10°С или ниже. В колбу добавляли 40 мл раствора метилацетата. Затем добавляли по каплям реагент Гриньяра из капельной воронки при скорости примерно 2 капли в с и не быстрее чем 2 мл в мин. После того как были добавлены первые 40 мл реагента Гриньяра, добавляли дополнительную порцию 20 мл раствора метилацетата в эфире. После того как были добавлены вторые 40 мл реагента Гриньяра, добавляли следующую порцию 20 мл раствора метилацетата в диэтиловом эфире. После того как были добавлены третьи 40 мл реагента Гриньяра, добавляли следующую порцию 20 мл раствора метилацетата в эфире. После того как были добавлены четвертые 40 мл реагента Гриньяра, добавляли последнюю порцию 20 мл раствора метилацетата в эфире.
Смесь перемешивали в течение еще 15 мин после завершения добавления реагента Гриньяра. Затем смесь вливали в смесь 660 г льда и 60 мл концентрированной серной кислоты при быстром перемешивании для растворения всех твердых веществ. Фазы разделяли и водную фазу снова экстрагировали 50 мл диэтилового эфира. Объединенные эфирные экстракты промывали 15 мл 10%-ного водного карбоната натрия, 15 мл рассола и сушили над 30 г сульфата магния в течение 1 ч при перемешивании. Затем эфирный раствор фильтровали. Добавляли три-н-бутиламин (14,3 мл, 60 ммоль) и мезитилен (10 мл). Большую часть диэтилового эфира удаляли путем отгонки при атмосферном давлении с использованием
- 31 020106 снабженной кожухом колонки ^дгеих 2,5 смх30 см. Оставшуюся жидкость переносили в меньшую перегонную колбу с использованием двух 10 мл порций гексана для облегчения переноса. Отгонку при атмосферном давлении продолжали через снабженную кожухом колонку ^дгеих 2 смх20 см. Жидкость, отгонявшуюся при 98-105°С, собирали с получением 14 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветной жидкости.
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.42-0.48 (т, 2Н), 0.74-0.80 (т, 2Н), 1.45 (8, 3Н), 1.86 (Ьг.8., 1Н).
Подготовительный пример 27. 2-Фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)фенол
А) 5-(3 -Фтор-4-метоксифенил) -1 -метил-1Н-имидазол
2-Фтор-4-броманизол (0,216 мл, 1,63 ммоль), три(2-фурил)фосфин (25,9 мг, 0,108 ммоль) и карбонат калия (300 мг, 2,17 ммоль) помещали во флакон для микроволновой обработки и растворяли в безводном Ν,Ν-диметилформамиде (4,8 мл). Смесь дегазировали потоком газообразного азота в течение 10 мин, добавляли 1-метилимидазол (0,087 мл, 1,1 ммоль) и ацетат палладия (II) (12,4 мг, 0,054 ммоль) и смесь дегазировали в течение еще 10 мин. Сосуд помещали в микроволновой реактор при 140°С в течение 2 ч. Смесь разбавляли этилацетатом, фильтровали через СеШе и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали посредством хроматографии, элюируя 25-100%-ным этилацетатом в гептане, затем градиентом 0-10% метанола в дихлорметане, с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (210 мг).
1Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 3.57 (8, 3Н), 3.85 (8, 3Н), 6.95-6.98 (т, 2Н), 7.00-7.07 (т, 2Н), 7.42 (8, 1Н). Протонный сдвиг при 7,42 является признаком желаемого имидазольного изомера, как известно из литературы (Еиг. Б Огд. сйет., 2008, 5436 и Еиг. Б Огд., 2006, 1379).
Б) 2-Фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)фенол
К раствору 5-(3-фтор-4-метоксифенил)-1-метил-1Н-имидазола (101,8 мг, 0,494 ммоль) в дихлорметане (2,0 мл) добавляли раствор бромида бора(111) (0,50 мл, 1,0 М раствор в гептане) при -30°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Затем смесь охлаждали до -30°С и в нее добавляли метанол (2 мл). Смесь концентрировали в вакууме и остаток растворяли в воде и нейтрализовали 1 М гидроксидом натрия. Раствор концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (90 мг). Это соединение использовали далее без очистки.
Подготовительный пример 28. 2-Фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-2-ил)фенол
А) 2-(3-Фтор-4-метоксифенил)-1-метил-1Н-имидазол
2-Фтор-4-броманизол (0,256 мл, 1,93 ммоль) и йодид меди(1) (375 мг, 1,93 ммоль) помещали во флакон для микроволновой обработки и растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (4,8 мл). Смесь дегазировали в течение 10 мин потоком газообразного азота, добавляли 1-метилимидазол (0,078 мл, 0,96 ммоль) и ацетат палладия (II) (11 мг, 0,048 ммоль) и смесь дегазировали в течение еще 10 мин. Сосуд помещали в микроволновой реактор при 140°С на 2 ч. Смесь разбавляли этилацетатом (3 мл), вливали в насыщенный водный раствор хлорида аммония, перемешивали на открытом воздухе в течение 30 мин и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали посредством хроматографии, элюируя градиентной смесью от этилацетата до гептана (от 25 до 100% этилацетат/гептан, затем 0-10% метанола в дихлорметане), с получением 2-(3-фтор-4-метоксифенил)-1-метил1Н-имидазола в виде желтого масла (35,8 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 3.66 (8, 3Н), 3.88 (8, 3Н), 6.90 (8, 1Н), 6.96 (т, 1Н), 7.10 (8, 1Н), 7.24-7.33 (т, 2Н). Протонный ЯМР указывает на желаемый имидазольный изомер, как сравнили с протонным ЯМР 5-(3-фтор-4-метоксифенил)-1-метил-1Н-имидазола (подготовительный пример 27) и литературой (Еиг. Б Огд. сйет., 2008, 5436 и Еиг. Б Огд., 2006, 1379).
Б) 2-Фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-2-ил)фенол
2-Фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-2-ил)фенол получали из 2-(3-фтор-4-метоксифенил)-1-метил-1Нимидазола, следуя процедуре, аналогичной процедуре из подготовительного примера 27 (Б), с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества (33,4 мг). Неочищенное вещество использовали далее без очистки.
- 32 020106
Подготовительный пример 29. 2-Фтор-4-(метилсульфонил)-1-(проп-1-ен-2-ил)бензол
о
К раствору 1-бром-2-фтор-4-(метилсульфонил)бензола (199 мг, 0,790 ммоль) и изопропенилтрифторбората калия (300 мг, 2,57 ммоль) в 2-пропаноле (10 мл) последовательно добавляли катализатор 1,1'бис-(дифенилфосфино)ферроценпалладия дихлорид (67 мг, 0,089 ммоль) и триэтиламин (0,17 мл, 1,20 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 15 ч и затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Затем добавляли воду и этилацетат и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты объединяли, промывали рассолом и сушили над сульфатом натрия. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (от 10 до 100% этилацетата в гептане) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (130 мг, 80%).
1Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 2.17 (8, 3Н), 3.08 (8, 3Н), 5.29-5.43 (т, 2Н), 7.51 (ΐ, 1=7,56 Гц, 1Н), 7.64 (бб, 1=9,88, 1,59 Гц, 1Н), 7.70 (бб, 1=8,05, 1,71 Гц, 1Н).
Пример 1. Изопропил-4-[5-циано-4-({2-фтор-4-[(2-гидроксиэтил)сульфонил]фенокси}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат
А) Изопропил-4-[4-({4-[(2-([трет-бутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2-фторфенокси}метил)-5циано-1Н-пиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат
К раствору изопропил-4-[5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1 -ил]пиперидин-1 -карбоксилата (54,4 мг, 0,19 ммоль), 4-[(2-{[трет-бутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2-фторфенола (64 мг, 0,21 ммоль) и трифенилфосфина на полимерной подложке (3 ммоль/г, 310 мг, 0,93 ммоль) в 1,4-диоксане (1,7 мл) добавляли по каплям диэтилазодикарбоксилат (0,033 мл, 0,205 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 16 ч в атмосфере азота. Полимер отфильтровывали и фильтрат затем упаривали под вакуумом. Остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле, элюируя от 20 до 70% этилацетата в гептане, с получением указанного в заголовке соединения в виде масла (44 мг, 41%).
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.02 (8, 6Н), 0.86 (8, 9Н), 1.24 (б, 1=6,3 Гц, 6Н), 2.00 (Ьг б, 2Н), 2.06-2.17 (т, 2Н), 2.86-3.01 (т, 4Н), 3.72-3.77 (т, 2Н), 4.10-4.22 (т, 2Н), 4.45-4.53 (т, 1Н), 4.90 (т, 1Н), 5.06 (8, 2Н) 6.90-6.96 (т, 1Н), 7.05-7.10 (т, 1Н), 7.12-7.16 (т, 1Н), 7.65 (8, 1Н).
Б) Изопропил-4-[5-циано-4-({2-фтор-4-[(2-гидроксиэтил)сульфонил]фенокси}метил)-1Н-пиразол-1ил]пиперидин-1-карбоксилат
К раствору изопропил-4-[4-({4-[(2-{ [трет-бутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2-фторфенокси}метил)-5-циано-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (44 мг, 0,076 ммоль) в дихлорметане (2 мл) добавляли 4 М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (0,2 мл, 0,76 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Растворитель упаривали и остаток сушили под вакуумом. Остаток переносили в дихлорметан (1 мл) и добавляли 3-хлорпербензойную кислоту (48 мг, 0,21 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и органическую фазу промывали насыщенным водным раствором карбоната натрия и затем рассолом. Органическую фазу сушили над сульфатом магния и фильтровали. Фильтрат упаривали при пониженном давлении и остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (от 70 до 100% этилацетата в гептане) с получением указанного в заголовке соединения в виде масла (15 мг, 40%).
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.24 (б, 1=6,3 Гц, 6Н), 2.02 (Ьг б, 2Н), 2.07-2.19 (т, 2Н), 2.94 (Ьг ΐ, 2Н), 3.30-3.36 (т, 2Н), 3.97-4.03 (т, 2Н), 4.31 (Ьг 8, 2Н), 4.47-4.56 (т, 1Н), 4.93 (т, 1Н), 5.18 (8, 2Н), 7.14-7.22 (т, 1Н), 7.63-7.74 (т, 3Н); ЬСМ8 (Е8+): 495,0 (М+Н).
- 33 020106
Пример 2. Изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
А) Изопропил-4-(5-бром-4-{ [2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-
Это соединение получали из 2-фтор-4-(метилсульфонил)фенола (\УО 2007054668) и изопропил-4[5-бром-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 4) способом, аналогичным способу, описанному для получения изопропил-4-[4-({4-[(2-{[третбутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2-фторфенокси}метил)-5-циано-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1карбоксилата (пример 1, стадия А, реакция Мицунобу). Соединение очищали посредством хроматографии на силикагеле (60% этилацетата в гексане).
Ή ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 7.70 (ббб, 1Н), 7.67 (8, 1Н), 7.65 (бб, 1Н), 7.18 (1, 1Н), 5.03 (8, 2Н), 4.92 (т, 1Н), 4.43 (т, 1Н), 4.31 (Ьг 8, 2Н), 3.03 (8, 3Н), 2.91 (Ьг 1, 2Н), 2.09 (т, 2Н), 1.92 (Ьг б, 2Н), 1.25 (б, 6Н).
Б) Изопропил-4-(5-циано-4-{ [2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат
Смесь изопропил-4-(5-бром-4-{[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата (237 мг, 0,46 ммоль) и цианида меди (82 мг, 0,91 ммоль) в безводном Ν,Νдиметилформамиде (4,0 мл) нагревали при 165°С в течение 24 ч в атмосфере аргона. Полученную темнокоричневую смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и затем осторожно вливали в перемешиваемый раствор гексагидрата хлорида железа(11) (618 мг, 2,29 ммоль), концентрированной водной соляной кислоты (2 мл) и воды (10 мл). Добавляли этилацетат (10 мл) и полученную смесь перемешивали при 65°С в течение 30 мин. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и затем трижды экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты промывали последовательно 2 М водным раствором соляной кислоты, 2 М водным раствором гидроксида натрия, водой и рассолом и затем сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде коричневого масла, которое очищали посредством хроматографии на силикагеле (60% этилацетата в гексане) с получением изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4(метилсульфонил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата в виде бледно-желтого масла, которое отверждалось при стоянии (77 мг, 36%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 7.72-7.70 (т, 1Н), 7.69 (8, 1Н), 7.67 (бб, 1Н), 7.18 (1, 1Н), 5.18 (8, 2Н), 4.92 (т, 1Н), 4.52 (т, 1Н), 4.31 (Ьг 8, 2Н), 3.04 (8, 3Н), 2.93 (Ьг 1, 2Н), 2.12 (т, 2Н), 2.01 (Ьг б, 2Н), 1.25 (б, 6Н); ЬСМ8 (Е8+): 465.06 (М+1).
Пример 3. Изопропил-4-(5-циано-4-{ [2-фтор-4-(1Н-тетразол-1 -ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1 ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Это соединение получали из 2-фтор-4-(1Н-тетразол-1-ил)фенола (подготовительный пример 9) и изопропил-4-[5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 5) способом, аналогичным способу, описанному для получения изопропил-4-[4-({4-[(2{[трет-бутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2-фторфенокси}метил)-5-циано-1Н-пиразол-1ил]пиперидин-1-карбоксилата (пример 1, стадия А, реакция Мицунобу). Неочищенный продукт очищали посредством хроматографии на силикагеле (от 50 до 70% этилацетата в гептане).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.24 (б, 1=6,3 Гц, 6Н), 2.01 (Ьг б, 2Н), 2.07-2.18 (т, 2Н), 2.93 (Ьг 1, 2Н), 4.32 (Ьг 8, 2Н), 4.46-4.56 (т, 1Н), 4.91 (8ер1е1, 1Н), 5.18 (8, 2Н), 7.16-7.26 (т, 1Н), 7.427.49 (т, 1Н), 7.49-7.58 (т, 1Н), 7.69 (8, 1Н), 8.93 (8, 1Н); ЬСМ8 (Е8+): 455,1 (М+Н).
- 34 020106
Пример 4. Изопропил-4-(5-циано-4-([4-(1Н-тетразол-1-ил)фенокси]метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Это соединение
изопропил-4-[5-циано-4(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 5) способом, аналогичным способу, описанному для получения изопропил-4-[4-({4-[(2-{[третбутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2-фторфенокси}метил)-5-циано-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1карбоксилата (пример 1, стадия А, реакция Мицунобу). Неочищенный продукт очищали посредством хроматографии на силикагеле с использованием градиента от 50 до 70% этилацетата в гептане.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.24 (б, 6=6.3 Гц, 6Н), 2.02 (Ьг б, 2Н), 2.07-2.20 (т, 2Н), 2.94 (Ьг ΐ, 2Н), 4.32 (Ьг 8, 2Н), 4.47-4.56 (т, 1Н), 4.88-4.97 (т, 1Н), 5.11 (8, 2Н), 7.11-7.16 (т, 2Н), 7.597.65 (т, 2Н), 7.68 (8, 1Н), 8.90 (8, 1Н); ЬСМ8 (Ε8+): 437,0 (М+Н).
Пример 5. Изопропил-4-(5-циано-4-{[(2-метилпиридин-3-ил)окси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Это соединение получали из 2-метилпиридин-3-ола и изопропил-4-[5-циано-4-(гидроксиметил)-1Нпиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 5) способом, аналогичным способу, описанному для получения изопропил-4-[4-({4-[(2-{[трет-бутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2фторфенокси}метил)-5-циано-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (пример 1, стадия А, реакция Мицунобу). Неочищенное вещество очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке РНепотепех Сетии С18 21,2x150 мм, 0,005 мм, элюируя градиентом воды в метаноле (0,1% гидроксида аммония в качестве модификатора).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.25 (б, 1=6,4 Гц, 6Н), 2.02 (Ьг б, 2Н), 2.06-2.21 (т, 2Н), 2.52 (8, 3Н), 2.94 (Ьг ΐ, 2Н), 4.33 (Ьг 8, 2Н), 4.47-4.57 (т, 1Н), 4.91 (т, 1Н), 5.06 (8, 2Н), 7.11-7.22 (т, 2Н), 7.66 (8, 1Н), 8.11-8.19 (т, 1Н); ЬСМ8 (Ε8+): 384,1 (М+Н).
Пример 6. Изопропил-4-(5-циано-4-{ [(2-метилпиридин-3-ил)амино]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
В колбу, содержащую изопропил-4-(5-циано-4-формил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (пример 9, стадия А) (50 мг, 0,17 ммоль) и 2-метилпиридин-3-амин (19 мг, 0,17 ммоль), добавляли 2 мл дихлорэтана, затем Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,03 мл, 0,17 ммоль). Колбу продували газообразным азотом и добавляли изопропилат титана (97,8 мг, 0,34 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 19 ч, затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (75,2 мг, 0,34 ммоль). Смесь перемешивали в течение 24 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и добавляли насыщенный водный бикарбонат. Смесь фильтровали через набивку СеШе®. Слои фильтрата разделяли и водную фазу один раз экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане (от 60 до 80% этилацетата). Протонный ЯМР показал, что вещество представляло собой имин. Затем имин растворяли в 2 мл метанола и 1 мл тетрагидрофурана и смесь охлаждали до 0°С. Добавляли боргидрид натрия (10 мг, 0,26 ммоль) и ледяную баню удаляли. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем добавляли насыщенный водный бикарбонат натрия. Смесь частично концентрировали в вакууме и водную смесь один раз экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты концентрировали в вакууме и остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане (от 80 до 100% этилацетата) с получением указанного в заголовке соединения (24 мг, выход 63%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.15-1.33 (т, 6Н), 1.93-2.04 (т, 2Н), 2.11 (с.|б, 6=12,2, 4,6 Гц, 2Н), 2.43 (8, 3Н), 2.84-2.99 (т, 2Н), 3.94 (ΐ, 1=5,2 Гц, 1Н), 4.31 (Ьг. 8., 2Н), 4.37 (б, 1=5,5 Гц, 2Н), 4.41-4.54 (т, 1Н), 4.86-4.98 (т, 1Н), 6.78-6.87 (т, 1Н), 6.96-7.07 (т, 1Н), 7.52-7.62 (т, 1Н), 7.87-7.97 (т, 1Н). ЬСМ8 (Ε8+): 383,1 (М+1).
- 35 020106
Пример 7. Изопропил-4-(5-циано-4-{ [4-(диметоксифосфорил)-2-фторфенокси]метил}-1Н-пиразол1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
А) Изопропил-4-{4-[(4-бром-2-фторфенокси)метил] -5-циано-1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилат
Это соединение получали из 4-бром-2-фторфенола и изопропил-4-[5-циано-4-(гидроксиметил)-1Нпиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 5) способом, аналогичным способу, описанному для получения изопропил-4-[4-({4-[(2-{[трет-бутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2фторфенокси}метил)-5-циано-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (пример 1, стадия А, реакция Мицунобу). Неочищенное соединение очищали посредством хроматографии на силикагеле, элюируя от 0 до 100% этилацетата в гептане.
'Н ЯМР (дейтерохлороформ): дельта 1.35 (6Н, б), 2.1 (2Н, т), 2.2 (2Н, т) 3.0 (2Н, т), 4.3 (2Н, т), 4.5 (1Н, т), 4.95 (1Н, т), 5.15 (2Н, з), 6.95 (1Н, б,б), 7.2 (1Н,б), 7.3 (1Н, б), 7.7 (1Н, з); ЬСМ8 (Е8+): 464,8 (М-1).
Б) Изопропил-4-(5-циано-4-{[4-(диметоксифосфорил)-2-фторфенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат
Изопропил-4-{4-[(4-бром-2-фторфенокси)метил]-5-циано-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1карбоксилат (200 мг, 0,711 ммоль) растворяли в дегазированном тетрагидрофуране (5 мл). Добавляли тетракистрифенилфосфинпалладий(0) (170 мг, 0,144 ммоль) и диметилфосфит (0,084 мл, 0,875 ммоль), затем триэтиламин (0,152 мл, 1,09 ммоль). Сосуд закрывали пробкой и реакционную смесь нагревали при 75°С в течение 5 ч. Растворитель упаривали под вакуумом и неочищенный продукт очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке Аа1етз ХВпбде С18 19x100 мм, 5 мкм, элюируя смесью 80% вода/20% ацетонитрил до 100% ацетонитрил (0,03% гидроксида аммония в качестве модификатора). Аналитическая ЬСМ8: время удерживания 1,06 мин (колонка Асдибу Н88 Т3 2,1x50 мм, 1,8 мкм; линейный градиент от 95% вода/ацетонитрил до 5% вода/ацетонитрил в течение 1,8 мин, выдерживали при 5% вода/ацетонитрил в течение 2,0 мин; 0,05% трифторуксусной кислоты в качестве модификатора; скорость потока 1,3 мл/мин); ЬСМ8 (Е8+): 495,1 (М+Н).
Пример 8. Изопропил-4-{5-циано-4-[(4-циано-2-фторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин1-карбоксилат
Это соединение получали из 4-циано-3-фторфенола и изопропил-4-[5-циано-4-(гидроксиметил)-1Нпиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 5) способом, аналогичным способу, описанному для получения изопропил-4-[4-({4-[(2-{[трет-бутил(диметил)силил]окси}этил)тио]-2фторфенокси}метил)-5-циано-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (пример 1, стадия А, реакция Мицунобу). Неочищенный продукт очищали посредством препаративной НРЬС на колонке Аа1етз ХВпбде С18 19x100 мм, 5 мкм, элюируя градиентом воды в ацетонитриле (0,03% гидроксида аммония в качестве модификатора). Аналитическая ЬСМ8: время удерживания 3,39 мин (колонка Абапбз С18 4,6x50 мм, 5 мкм; линейный градиент от 80% Н2О/ацетонитрил до 5% вода/ацетонитрил в течение 4,0 мин; 0,05% трифторуксусной кислоты в качестве модификатора; скорость потока 2,0 мл/мин); ЬСМ8(Е8+): 412 (М+Н).
Пример 9. Изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]этил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
- 36 020106
Стадия А. Изопропил-4-(5-циано-4-формил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
В раствор изопропил-4-[5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 5) (400 мг, 1,37 ммоль) в безводном дихлорметане (10 мл) при 0°С добавляли трихлоризоцианмочевую кислоту (379 мг, 1,63 ммоль) и 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил (ТЕМРО, 22 мг, 0,14 ммоль). Желтую смесь удаляли из ледяной бани и перемешивали при комнатной температуре в течение 45 мин. Реакционную смесь фильтровали через набивку Се1йе™, которую промывали дихлорметаном. Фильтрат объединяли с насыщенным водным бикарбонатом натрия и слои разделяли. Водный слой экстрагировали дихлорметаном. Оба органических раствора объединяли и промывали рассолом и сушили над сульфатом натрия. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением маслянистой смеси, которую очищали посредством хроматографии на силикагеле (5100% этилацетата в гептане) с получением изопропил-4-(5-циано-4-формил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин1-карбоксилата в виде прозрачного масла, которое частично отверждалось под вакуумом (311 мг, 78%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 10.0 (8, 1Н), 8.06 (8, 1Н), 4.99-4.94 (т, 1Н), 4.65-4.59 (т, 1Н), 4.37 (т, 2Н), 2.98-2.95 (т, 2Н), 2.23-2.15 (т, 2Н), 2.06-2.04 (т, 2Н), 1.28 (ά, 6Н, 1=6,3 Гц); ЬСМ8 (Е8+): 290,1 (М+).
Стадия Б. Изопропил-4-(5-циано-4-этинил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
В раствор изопропил-4-(5-циано-4-формил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (50 мг, 0,17 ммоль) в безводном метаноле (1,5 мл) добавляли (1-диазо-2-оксо-пропил)фосфоновой кислоты диметиловый эфир (40 мг, 0,21 ммоль) и порошковый карбонат калия (48 мг, 0,35 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3,5 ч и затем гасили путем добавления избытка насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Слои разделяли и водный слой дважды экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением масла, которое очищали посредством хроматографии на силикагеле (от 10 до 100% этилацетата в гептане) с получением изопропил-4-(5-циано-4этинил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата в виде бледно-желтого твердого вещества (18 мг, 37%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 7.68 (8, 1Н), 4.96-4.94 (т, 1Н) 4.52-4.48 (т, 1Н), 4.34 (т, 2Н), 3.34 (8, 1Н), 2.95-2.93 (т, 2Н), 2.16-2.10 (т, 2Н), 2.03-2.01 (т, 2Н), 1.28 (ά, 6Н, 1=6,3 Гц); ЬСМ8 (Е8+): 287,5 (М+1).
Стадия В. Изопропил-4-(5-циано-4-{(2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]этинил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Раствор йодида меди (1,5 мг, 0,008 ммоль), дихлор-бис(трифенилфосфин)палладия(П) (4,0 мг, 0,006 ммоль), 1-бром-2-фтор-4-(метилсульфонил)бензола (21 мг, 0,083 ммоль) и триэтиламина (0,028 мл, 0,19 ммоль) в дегазированном Ν,Ν-диметилформамиде (0,5 мл) добавляли в колбу, содержащую изопропил-4(5-циано-4-этинил-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1-карбоксилат (18 мг, 0,063 ммоль) в дегазированном Ν,Ν-диметилформамиде (1,0 мл). Колбу, содержащую исходный раствор, промывали дегазированным Ν,Ν-диметилформамидом (0,5 мл), который затем добавляли в реакционную смесь. Желтый раствор нагревали при 90°С в течение 1,5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч. Реакционную смесь распределяли между водой и этилацетатом и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом и органические экстракты объединяли и промывали последовательно водой и рассолом и затем сушили над сульфатом натрия. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении до масла янтарного цвета, которое очищали посредством хроматографии на силикагеле (10-90% этилацетата в гептане) с получением изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4(метилсульфонил)фенил]этинил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата в виде бледно-желтого твердого вещества (20 мг, 69%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 7.75 (8, 1Н), 7.73-7.68 (т, 3Н), 4.94-4.91 (т, 1Н) 4.524.48 (т, 1Н), 4.33 (т, 2Н), 3.07 (8, 3Н), 2.97-2.91 (т, 2Н), 2.16-2.09 (т, 2Н), 2.09-2.01 (т, 2Н), 1.25 (ά, 6Н, 1=6,3 Гц); ЬСМ8 (Е8+): 459,0 (М+1).
- 37 020106
Стадия Г. Изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]этил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат
Изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]этинил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин1-карбоксилат (15 мг, 0,033 ммоль) растворяли в этилацетате (5,0 мл) и гидрировали в поточном реакторе Н-СиЬе (ΤΙιαΙοδΝαηο, и.К.) в режиме полного водорода со скоростью потока 1 мл/мин через картридж 10% Рб/С. Продукт, собранный в этилацетате, концентрировали при пониженном давлении с получением изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]этил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилата в виде высокочистого белого твердого вещества (14 мг, 91%).
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 7.69-7.63 (т, 2Н), 7.39-7.34 (т, 1Н), 4.98-4.93 (т, 1Н) 4.48-4.41 (т, 1Н), 4.33 (т, 2Н), 3.08 (8, 3Н), 3.06-3.03 (ί, 2Н, 1=7,6 Гц), 2.96-2.93 (т, 4Н), 2.16-2.10 (т, 2Н), 2.08-1.98 (т, 2Н), 1.28 (б, 6Н, 1=6,3 Гц); ЬСМ8 (Е8+): 463,1 (М+1).
Пример 10. Изопропил-4-[5-циано-4-({ [2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]амино}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат
К перемешиваемому раствору изопропил-4-(5-циано-4-формил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилата (пример 9, стадия А) (43 мг, 0,15 ммоль) в 1,5 мл дихлорэтана добавляли 2-фтор-4(метилтио)анилин (24 мг, 0,15 ммоль), затем 0,01 мл уксусной кислоты. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч в атмосфере азота, затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (52 мг, 0,24 ммоль). Через 115 ч реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и насыщенным водным бикарбонатом натрия. Слои разделяли и водный слой дважды экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентной смесью от этилацетата до гептана (от 0 до 50% этилацетата) с получением 45 мг промежуточного сульфида. Часть этого вещества (23 мг, 0,053 ммоль) растворяли в 1 мл дихлорметана и добавляли одной порцией мета-хлорпербензойную кислоту (36 мг, 0,16 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 ч, затем ее разбавляли дихлорметаном и насыщенным водным раствором карбоната натрия. Органический слой отделяли и промывали насыщенным водным раствором карбоната натрия, рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Образец очищали посредством НРЬС с обращенными фазами (колонка: ^а1ег8 ХВпбдс С]8 19 х100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,03% гидроксида аммония в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,03% гидроксида аммония в ацетонитриле (об./об.); градиент: линейный от 90% вода/10% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,5 мин, выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 10,0 мин. Поток: 25 мл/мин. ЬСМ8 (М8 Е8+): 464,2.
Пример 11. Изопропил-4-{5-циано-4-[(2,4-дифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1карбоксилат
Изопропил-4-(5-циано-4-((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (подготовительный пример 10) (166,5 мг, 0,449 ммоль), 2,4-дифторфенол (0,052 мл, 0,539 ммоль) и карбонат цезия (293 мг, 0,898 ммоль) помещали во флакон для микроволновой обработки, растворяли в ацетонитриле (3 мл) и нагревали в микроволновом реакторе при 110°С в течение 20 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом, разбавляли 1 н. раствором гидроксида натрия и трижды экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Неочищенное вещество очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке \Уа1ег8 А11ап118 С18 4,6x50 мм, 0,005 мм, элюируя градиентом воды в ацетонитриле (0,05% трифторуксусной кислоты в качестве модификатора), с получением изопропил-4-{5-циано-4-[(2,4-дифторфенокси)метил]-1Нпиразол-1-ил}пиперидин-1-карбоксилата. Аналитическая ЬСМ8: время удерживания: 3,62 мин (^а1ег8 А11ап118 С18 4,6x50 мм, 0,005 мм; линейный градиент от 95% вода/ацетонитрил до 5% вода/ацетонитрил в течение 4,0 мин; 0,05% трифторуксусной кислоты в качестве модификатора; скорость потока 2,0 мл/мин); ЬСМ8 (Е8 +): 405,18 (М+Н).
- 38 020106
Пример 12. Изопропил-4-{5-циано-4-[(2-метилфенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1карбоксилат
К перемешиваемому раствору орто-крезола (21 мг, 0,19 ммоль) и изопропил-4-(5-циано-4((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 10) (60 мг, 0,16 ммоль) в ацетонитриле (1,6 мл) добавляли карбонат цезия (106 мг, 0,32 ммоль). Смесь нагревали при температуре флегмообразования в течение 15 ч. После охлаждения до комнатной темпе ратуры неочищенное вещество концентрировали досуха в вакууме и остаток переносили в воду и трижды экстрагировали этилацетатом (каждая экстракция по 20 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали досуха в вакууме с получением желто-коричневого остатка (0,065 г, 100%). Неочищенный образец растворяли в диметилсульфоксиде (1 мл) и очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке \Уа1сг8 §ипйге С18 19x100 мм, 0,005 мм, элюируя линейным градиентом от 80% вода/ацетонитрил до 0% вода/ацетонитрил за 8,5 мин, затем 1,5 мин при 0% вода/ацетонитрил (0,05% трифторуксусной кислоты в качестве модификатора); скорость потока: 25 мл/мин. Аналитическая ЬСМ8: время удерживания 3,82 мин (колонка \Уа1ег8 Л11ап118 С18 4,6x50 мм, 0,005 мм; линейный градиент от 95% вода/ацетонитрил до 5% вода/ацетонитрил в течение 4,0 мин, затем 1 мин при 5% вода/ацетонитрил; 0,05% трифторуксусной кислоты в качестве модификатора; скорость потока: 2,0 мл/мин); ЬСМ8 (Е8+): 383,2 (М+1).
Пример 13. 1 -Метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,5-дифторфенокси)метил] -1Н-пиразол-1 ил}пиперидин-1-карбоксилат
A) трет-Бутил-4-(5-циано-4-((2,5-дифторфенокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилат
К перемешиваемому раствору 2,5-дифторфенола (54 мг, 0,39 ммоль) и трет-бутил-4-(5-циано-4((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 16) (126 мг, 0,33 ммоль) в 3 мл ацетонитрила добавляли карбонат цезия (214 мг, 0,66 ммоль). Смесь нагревали при температуре флегмообразования в течение 15 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом и водой. Слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением трет-бутил-4-(5-циано-4-((2,5дифторфенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата, который использовали на следующей стадии без очистки.
Б) 4-((2.5 -Дифторфенокси)метил)-1 -(пиперидин-4-ил) -1Н-пиразол-5 -карбонитрил
К раствору трет-бутил-4-(5-циано-4-((2,5-дифторфенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилата (137 мг, 0,33 ммоль) в 5 мл дихлорметана добавляли 0,82 мл соляной кислоты (4 М в 1,4диоксане). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем смесь концентрировали в вакууме с получением 4-((2,5-дифторфенокси)метил)-1-(пиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-5-карбонитрила, который использовали на следующей стадии без очистки.
B) 1 -Метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,5-дифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилат
К перемешиваемому раствору 4-((2,5-дифторфенокси)метил)-1-(пиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-5карбонитрила (104 мг, 0,33 ммоль) в 3,3 мл дихлорметана добавляли триэтиламин (0,18 мл, 1,3 ммоль), затем 1-метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат (см. подготовительный пример 26 и \УО 09105717) (171 мг, 0,72 ммоль) при комнатной температуре. Полученную ярко-желтую смесь перемешивали в течение 15 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и водой. Слои разделяли и водную фазу экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия, рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением 225 мг неочищенного вещества. Часть (45 мг) этого вещества растворяли в диметилсульфоксиде (0,9 мл) и очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке \Уа1ег8 ХВпбде С18 19x100 мм, 0,005 мм, элюируя градиентом воды в ацетонитриле (0,03% гидроксида аммония в качестве модификатора). Аналитическая ЬСМ8: время удерживания 3,60 мин (колонка Л11ап118 С18 4,6x50 мм, 5 мкм; линейный градиент от 95% вода/ацетонитрил до 5% вода/ацетонитрил в течение 4 мин; 0,05% трифторуксусной кислоты в качестве модификатора; скорость
- 39 020106 потока 2,0 мл/мин; ЬСМ8 (Е8+): 417,1 (М+Н).
Пример 14. 1 -Метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,3-дифторфенокси)метил] -1Н-пиразол-1 ил}пиперидин-1-карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием коммерчески доступного 2,3дифторфенола, следуя процедурам, аналогичным для примера 13.
Неочищенное вещество (49 мг) растворяли в диметилсульфоксиде (0,9 мл) и очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке ^а1ег8 ХВпбде С18 19x100 мм, 0,005 мм, элюируя градиентом воды в ацетонитриле (0,03% гидроксида аммония в качестве модификатора). Аналитическая ЬСМ8: время удерживания 3,62 мин (колонка А11апб8 С18 4,6x50 мм, 5 мкм; линейный градиент от 95% вода/ацетонитрил до 5% вода/ацетонитрил в течение 4 мин; 0,05% трифторуксусной кислоты в качестве модификатора; скорость потока 2,0 мл/мин; ЬСМ8 (Е8+): 417,2 (М+Н).
Пример 15. 1 -Метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоил-2-фторфенокси)метил] -5 -циано-1Н-пиразол1 -ил}пиперидин-1 -карбоксилат
A) трет-Бутил-4-(4-((4-карбамоил-2-фторфенокси)метил)-5-циано-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилат
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 15) (200 мг, 0,65 ммоль), 3-фтор-4гидроксибензамида (подготовительный пример 23) (100 мг, 0,64 ммоль) и трифенилфосфина (188 мг, 0,72 ммоль) в 3 мл 1,4-диоксана добавляли по каплям диэтилазодикарбоксилат (0,11 мл, 0,69 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 30 до 70% этилацетата в гептане с получением трет-бутил-4-(4-((4-карбамоил-2-фторфенокси)метил)-5-циано-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата в виде белого твердого вещества (215 мг).
Б) 4-((5-Циано-1-(пиперидин-4-ил)1Н-пиразол-4-ил)метокси)-3-фторбензамид
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(4-((4-карбамоил-2-фторфенокси)метил)-5-циано-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (215 мг, 0,48 ммоль) в 2 мл дихлорметана добавляли 1 мл трифторуксусной кислоты при комнатной температуре. Через 1 ч раствор концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентной смесью от 1 до 15% метанола в дихлорметане, содержащей 2% водного аммиака, с получением 4-((5-циано-1-(пиперидин-4-ил)-1Нпиразол-4-ил)метокси)-3-фторбензамида в виде белого твердого вещества (150 мг).
B) 1-Метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоил-2-фторфенокси)метил]-5-циано-1Н-пиразол-1ил}пиперидин-1-карбоксилат
К перемешиваемому раствору 4-((5-циано-1-(пиперидин-4-ил)-1Н-пиразол-4-ил)метокси)-3фторбензамида (40 мг, 0,12 ммоль) в 1 мл дихлорметана добавляли триэтиламин (0,036 мл, 0,26 ммоль), затем 1-метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат (подготовительный пример 26 и νθ 09105717) (60 мг, 0,26 ммоль) при комнатной температуре. Полученную ярко-желтую смесь перемешивали в течение 2 ч в атмосфере азота при 65°С. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали дважды дихлорметаном. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным бикарбонатом натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 40 до 90% этилацетата в гептане с получением 1-метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоил-2-фторфенокси)метил]-5циано-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1-карбоксилата в виде белого твердого вещества (34 мг).
'Н-ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.59-0.67 (т, 2Н), 0.83-0.92 (т, 2Н), 1.54 (8, 3Н), 2.02 (б, 6=4,10 Гц, 2Н), 2.04-2.22 (т, 2Н), 2.91 (Ьг. 8., 2Н), 4.11-4.43 (т, 2Н), 4.44-4.55 (т, 1Н), 5.15 (8, 2Н), 7.03-7.10 (т, 1Н), 7.52-7.62 (т, 2Н), 7.68 (8, 1Н).
1Н ЯМР показал присутствие менее 10% соединения, которое, как полагают, представляет собой соответствующее производное изопропилкарбамата (из изопропил-4-нитрофенилкарбоната, загрязняющего 1-метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат). ЬСМ8 (Е8): 442,4 (М+1).
Пример 16. 1-Метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоилфенокси)метил]-5-циано-1Н-пиразол-1ил}пиперидин-1-карбоксилат
- 40 020106
Указанное в заголовке соединение получали с использованием коммерчески доступного 4гидроксибензамида, следуя процедурам, аналогичным для примера 15.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.57-0.67 (т, 2Н), 0.84-0.91 (т, 2Н), 1.56 (к, 3Н), 1.932.05 (т, 2Н), 2.05-2.19 (т, 2Н), 2.91 (ΐ, 1=15,62 Гц, 2Н), 4.26 (Ьг. к., 2Н), 4.44-4.55 (т, 1Н), 5.09 (к, 2Н), 6.96-7.04 (т, 2Н), 7.66 (к, 1Н), 7.75-7.82 (т, 2Н).
'Н ЯМР показал присутствие менее 10% соединения, которое, как полагают, представляет собой соответствующее производное изопропилкарбамата (из изопропил-4-нитрофенилкарбоната, загрязняющего 1-метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат). ЬСМ8 (Е§): 424,4 (М+1).
Пример 17. 1 -Метилциклопропил-4-(5 -циано-4-((4-цианофенокси)метил)-1Н-пиразол-1 ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием коммерчески доступного 4гидроксибензонитрила, следуя процедурам, аналогичным для примера 15. Очистку неочищенной реакционной смеси осуществляли посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане (от 0 до 100% этилацетата).
'Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.60-0.70 (т, 2Н), 0.84-0.94 (т, 2Н), 1.23-1.31 (т, 1Н), 1.56 (к, 3Н), 2.01-2.15 (т, 4Н), 2.93 (т, 2Н), 4.11-4.37 (т, 1Н), 4.49-4.55 (т, 1Н), 5.10 (к, 2Н), 7.03 (б, 1=8,78 Гц, 2Н), 7.63 (б, 1=8,78 Гц, 2Н), 7.67 (к, 1Н).
Пример 18. Изопропил-4-(4-((4-(1Н-пиразол-1-ил)фенокси)метил)-5-циано-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-(1Н-пиразол-1-ил)фенола (\УО 2003072547), следуя процедуре, аналогичной для примера 12. Очистку неочищенной реакционной смеси осуществляли посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане (от 0 до 100% этилацетата).
'Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.28 (б, 1=6,34 Гц, 6Н), 2.01-2.09 (т, 2Н), 2.17 (т, 2Н), 2.91-2.99 (т, 2Н), 4.37 (т, 2Н), 4.50-4.58 (т, 1Н), 4.93-4.98 (т, 1Н), 5.11 (к, 2Н), 6.47 (ΐ, 1=2,07 Гц, 1Н), 7.07 (б, 7=9,03 Гц, 2Н), 7.64 (б, 1=9,03 Гц, 2Н), 7.70 (к, 1Н), 7.72 (б, 1=1,71 Гц, 1Н), 7.86 (б, 1=2,44 Гц, 1Н). ЬСМ8 (Е8): 435,4 (М+1).
Пример 19. Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат и изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
А) Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-тетразол-5ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат и изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилат
К перемешиваемому раствору изопропил-4-(5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата (94 мг, 0,322 ммоль), 2-фтор-4-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Нтетразол-5-ил)фенола и 2-фтор-4-(2-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразол-5-ил)фенола (подготовительный пример 17) (100 мг, 0,322 ммоль) и трифенилфосфина (110 мг, 0,42 ммоль) в 5 мл 1,4
- 41 020106 диоксана добавляли по каплям диэтилазодикарбоксилат (0,060 мл, 0,39 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 10 до 40% этилацетата в гептане с получением изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-тетразол-5ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата и изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилата (140 мг, выход 74%).
Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат.
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта -0.05-0.01 (т, 9Н), 0.90-1.00 (т, 2Н), 1.18-1.27 (т, 6Н), 2.02 (Ьг. к., 2Н), 2.13 (т, 2Н) 2.93 (Ьг. к., 2Н), 3.63-3.78 (т, 2Н), 4.30 (б, 1=7,22 Гц, 2Н), 4.46-4.58 (т, 1Н), 4.86-4.98 (т, 1Н), 5.16 (к, 2Н), 5.89 (к, 2Н), 7.09-7.18 (т, 1Н), 7.69 (к, 1Н), 7.88-7.96 (т, 2Н). ЬСМ8 (Е8): 585,1 (М+1).
Б) Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат и изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-тетразол-5ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1-карбоксилат и изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилат (220 мг, 0,38 ммоль) растворяли в этаноле (3 мл) и добавляли по каплям 2 М водный раствор соляной кислоты (3 мл). Полученную смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Полученное белое твердое вещество промывали этилацетатом и гептаном (объем 1/1) и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 47%).
1Н ЯМР (400 МГц, дейтеродиметилсульфоксид) дельта 1.16 (б, 1=6,25 Гц, 6Н), 1.76-1.90 (т, 2Н), 1.98 (бб, 1=14,45, 3,12 Гц, 2Н), 2.99 (Ьг. к., 2Н), 4.04 (б, 1=15,81 Гц, 2Н), 4.59-4.71 (т, 1Н), 4.70-4.82 (т, 1Н), 5.27 (к, 2Н), 7.47-7.57 (т, 1Н), 7.80-7.83 (т, 1Н), 7.83-7.87 (т, 1Н), 7.90 (к, 1Н). ЬСМ8 (Е8): 455,0 (М+1).
Пример 20. Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат и
Пример 21. Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2-метил-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
К раствору изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата и изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (70 мг, 0,15 ммоль) при комнатной температуре в тетрагидрофуране (2 мл) двумя порциями добавляли гидрид натрия (14 мг, 0,31 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 5 мин. Затем добавляли йодметан (0,03 мл, 0,46 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 16 ч. Реакционную смесь гасили путем добавления воды и смесь разбавляли этилацетатом. Органическую фазу отделяли и водную фазу дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане (от 30 до 60% этилацетата) с получением изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (10 мг, выход 14%) и изопропил-4-(5циано-4-((2-фтор-4-(2-метил-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (30 мг, выход 42%).
Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат (пример 20).
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.18-1.28 (т, 6Н), 1.95-2.06 (т, 2Н), 2.13 (т, 2Н), 2.85-3.02 (т, 2Н), 4.17 (к, 3Н), 4.36 (б, 1=10,15 Гц, 2Н), 4.46-4.57 (т, 1Н) 4.92 (кр!, 1Н), 5.19 (к, 2Н), 7.177.24 (т, 1Н), 7.48-7.58 (т, 2Н), 7.70 (к, 1Н). ЬСМ8 (Е8): 469,0 (М+1).
Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2-метил-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат (пример 21).
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.24 (б, 1=6,25 Гц, 6Н), 1.95-2.05 (т, 2Н), 2.13 (т, 2Н), 2.93 (!, 1=12,59 Гц, 2Н), 4.31 (Ьг. к., 2Н), 4.37 (к, 3Н), 4.51 (т, 1Н), 4.92 (т, 1Н), 5.16 (к, 2Н), 7.09-7.16
- 42 020106 (т, 1Н), 7.69 (в, 1Н), 7.83-7.87 (т, 1Н), 7.87-7.90 (т, 1Н). ЬСМ8 (Ε8): 469,0 (М+1).
Пример 22. Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2-(2-гидроксиэтил)-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1-карбоксилат
А) Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2-(2-(триметилсилилокси)этил)-2Н-тетразол-5-ил)фенокси) метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
К перемешиваемому раствору изопропил-4-(5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 5) (78 мг, 0,266 ммоль), 2-фтор-4-(2-(2(триметилсилилокси)этил)-2Н-тетразол-5-ил)фенола (подготовительный пример 19) (90 мг, 0,27 ммоль) и трифенилфосфина (77 мг, 0,29 ммоль) в 5 мл 1,4-диоксана добавляли по каплям диэтилазодикарбоксилат (0,046 мл, 0,28 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 15 ч при комнатной температуре, затем смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 5 до 40% этилацетата в гептане с получением изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2-(2(триметилсилилокси)этил)-2Н-тетразол-5 -ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1-карбоксилата (140 мг, выход 86%).
Б) Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2-(2-гидроксиэтил)-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(2-(2-(триметилсилилокси)этил)-2Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (140 мг, 0,228 ммоль) растворяли в метаноле (2 мл) и добавляли по каплям раствор 4 М соляной кислоты (1 мл) в 1,4-диоксане. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток (160 мг) разделяли и приблизительно 50 мг неочищенного продукта очищали посредством НРЬС с обращенными фазами с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, 26%) (колонка: Аа1егв ХВп4де С18 19x100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,03% гидроксида аммония в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,03% гидроксида аммония в ацетонитриле (об./об.); градиент: линейный от 85% вода/15% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,5 мин, выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 10,0 мин. Поток: 25 мл/мин. Детекция: 215 нм. ЬСМ8 (Ε8+): 499,5 (М+1).
Пример 23. Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-тетразол-5ил)фенокси)метил) -1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
А) Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-(2-(триметилсилилокси)этил)-1Н-тетразол-5-ил)фенокси) метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1-карбоксилат
К перемешиваемому раствору изопропил-4-(5-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата (43 мг, 0,15 ммоль), 2-фтор-4-(1-(2-(триметилсилилокси)этил)-1Нтетразол-5-ил)фенола (подготовительный пример 20) (50 мг, 0,15 ммоль) и трифенилфосфина (43 мг, 0,16 ммоль) в 3 мл 1,4-диоксана добавляли по каплям диэтилазодикарбоксилат (0,025 мл, 0,16 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 30 до 70% этил ацетата в гептане, с получением изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-(2-(триметилсилилокси)этил)-1Нтетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (50 мг, выход 55%).
Б) Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
Изопропил-4-(5-циано-4-((2-фтор-4-(1-(2-(триметилсилилокси)этил)-1Н-тетразол-5-ил)фенокси)метил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (50 мг, 0,082 ммоль) растворяли в метаноле (2 мл) и добавляли по каплям 4 М раствор соляной кислоты (1 мл) в 1,4-диоксане. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток (60 мг) очищали посредством НРЬС с обращенными фазами с получением указанного в заголовке соединения (20 мг, выход 49%) (колонка: Аа1егв ХВп4де С18 19x100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,03% гидроксида аммония в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,03% гидроксида аммония в ацетонитриле (об./об.); градиент: линейный от 80% вода/20% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,5 мин,
- 43 020106 выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 10,0 мин. Поток: 25 мл/мин. Детекция: 215 нм. ЬСМ8 (Е8+): 499,4 (М+1).
Пример 24. 1-Метилциклопропил-4-(5-циано-4-{ [2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5ил)фенола (подготовительный пример 21), следуя процедурам, аналогичным для примера 15.
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.58-0.67 (т, 2Н), 0.83-0.92 (т, 2Н), 1.57 (8, 3Н), 1.942.05 (т, 2Н), 2.05-2.21 (т, 2Н), 2.92 (1, 1=12,98 Гц, 2Н), 4.17 (8, 3Н), 4.32 (Ьг. 8., 2Н), 4.43-4.56 (т, 1Н), 5.19 (8, 2Н), 7.17-7.24 (т, 1Н), 7.48-7.58 (т, 2Н), 7.70 (8, 1Н).
1Н ЯМР показал присутствие менее 10% соединения, которое, как полагают, представляет собой соответствующее производное изопропилкарбамата (из изопропил-4-нитрофенилкарбоната, загрязняющего 1-метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат). ЬСМ8 (Е8): 481,6 (М+1).
Пример 25. 1-Метилциклопропил-4-(5-циано-4-{ [4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Нпиразол-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенола (подготовительный пример 22), следуя процедурам, аналогичным процедурам для примера 15.
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.60-0.67 (т, 2Н), 0.83-0.91 (т, 2Н), 1.58 (8, 3Н), 1.962.06 (т, 2Н), 2.06-2.21 (т, 2Н), 2.84-3.00 (т, 2Н), 4.16 (8, 3Н), 4.33 (Ьг. 8., 2Н), 4.45-4.57 (т, 1Н), 5.12 (8, 2Н), 7.10-7.15 (т, 2Н), 7.68 (8, 1Н), 7.69-7.74 (т, 2Н).
1Н ЯМР показал присутствие менее 10% соединения, которое, как полагают, представляет собой соответствующее производное изопропилкарбамата (из изопропил-4-нитрофенилкарбоната, загрязняющего 1-метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат). ЬСМ8 (Е8): 463,5 (М+1).
Пример 26. 1-Метилциклопропил-4-(4-((4-карбамоил-3-фторфенокси)метил)-5-циано-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-фтор-4-гидроксибензамида (подготовительный пример 24), следуя процедурам, аналогичным для примера 13.
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.57-0.65 (т, 2Н), 0.82-0.89 (т, 2Н), 1.53 (8, 3Н), 1.922.04 (т, 2Н), 2.10 (дб, 1=12,14, 4,20 Гц, 2Н), 2.90 (Ьг. 8., 2Н), 4.32 (Ьг. 8., 2Н), 4.49 (11, 1=11,25, 4,37 Гц, 1Н), 5.02-5.09 (т, 2Н), 6.00 (Ьг. 8., 1Н), 6.51-6.64 (т, 1Н), 6.69 (бб, 1=13,66, 2,54 Гц, 1Н), 6.84 (бб, 1=8,78, 2,54 Гц, 1Н), 7.64 (8, 1Н), 8.07 (1, 1=9,08 Гц, 1Н). 1Н ЯМР показал присутствие менее 10% соединения, которое, как полагают, представляет собой соответствующее производное изопропилкарбамата (из изопропил-4нитрофенилкарбоната, загрязняющего 1-метилциклопропил-4-нитрофенилкарбонат). ЬСМ8 (Е8): 442,4 (М+1).
Пример 27. Изопропил-4-(5-циано-4-{1-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]этил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
О
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-фтор-4-(метилсульфонил)фенола и изопропил-4-(5-циано-4-(1-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 25), следуя процедурам, аналогичным для примера 15. Образец очищали посредством НРЬС с обращенными фазами (колонка: \а1ег8 ХВпбде С18 19x100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,03% гидроксида аммония в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,03% гидроксида аммония в ацетонитриле (об./об.); гра
- 44 020106 диент: линейный от 80% вода/20% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,5 мин, выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 10,0 мин. Поток: 25 мл/мин. ЬСМ8 (Е8+): 479,2 (М+1).
Пример 28. Изопропил-4-(5-циано-4-{1-[(2-метилпиридин-3-ил)окси]этил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-метилпиридин-3-ола и изопропил4-(5-циано-4-(1-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 25), следуя процедурам, аналогичным для примера 15. Образец очищали посредством №ЬС с обращенными фазами (колонка: Уа1сг8 ХВпбдс С18 19x100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,03% гидроксида аммония в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,03% гидроксида аммония в ацетонитриле (об./об.); линейный градиент: от 85% вода/15% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,5 мин, выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 10,0 мин. Поток: 25 мл/мин. ЬСМ8 (Е8+): 398,2 (М+1).
Пример 29. Изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]пропил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
A) Изопропил-4-(5-циано-4-винил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
К перемешиваемой смеси (метил)трифенилфосфония бромида (323 мг, 0,88 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) при -78°С добавляли по каплям н-бутиллитий (0,360 мл, 0,89 ммоль, 2,5 М в гексаны). Полученную желтую смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин и затем добавляли раствор изопропил4-(5-циано-4-формил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (пример 9, стадия А) (171 мг, 0,59 ммоль) в тетрагидрофуране (2,5 мл). Охлаждающую баню и реакционную смесь перемешивали в течение 3,75 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным водным хлоридом аммония и смесь дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты промывали последовательно водой и рассолом и затем сушили над сульфатом натрия. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане (от 10 до 100%) с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачного масла (116 мг, 68%).
1Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.88 (б, 1=6,10 Гц, 6Н), 1.55-1.67 (т, 2Н), 1.68-1.84 (т, 2Н), 2.43-2.73 (т, 2Н), 3.95 (Ьг. 8., 2Н), 4.04-4.21 (т, 1Н) 4.44-4.67 (т, 1Н), 5.02 (б, 1=11,22 Гц, 1Н), 5.43 (б, 1=17,81 Гц, 1Н), 6.20 (бб, 1=17,81, 11,22 Гц, 1Н), 7.27 (8, 1Н).
Б) (Е,2)-Изопропил-4-(5-циано-4-(2-(2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил)проп-1-енил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат
К раствору изопропил-4-(5-циано-4-винил-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (116 мг, 0,4 ммоль) и 2-фтор-4-(метилсульфонил)-1-(проп-1-ен-2-ил)бензола (подготовительный пример 29) (43 мг, 0,20 ммоль) в безводном дихлорметане (2 мл) добавляли катализатор Ховейды-Граббса (Ноусуба-СгиЬЬ8) второго поколения (коммерчески доступный от А1бпс11) (12,5 мг, 0,020 ммоль). Зеленый раствор нагревали при 40°С в течение 72 ч, периодически добавляя дихлорметан. Вещество концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (от 10 до 100% этилацетата в гептане) с получением продукта в виде загрязненного масла (8 мг, 8%). Это вещество использовали как оно есть. ЬСМ8 (АΡСI): 473,2 (М-1).
B) Изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]пропил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилат
Раствор (Е,2)-изопропил-4-(5-циано-4-(2-(2-фтор-4-(метилсульфонил)-фенил)проп-1-енил)-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (8 мг, 0,02 ммоль) в этилацетате (3 мл) гидрировали в Н-СиЬс™ в режиме полный водород с использованием картриджа с 10% палладия на углероде при скорости потока 1 мл/мин. Вещество концентрировали в вакууме и остаток (4 мг) очищали посредством №ЬС с обращенными фазами (колонка: Уа1сг8 ХВпбдс С18 19x100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,03% гидроксида аммония в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,03% гидроксида аммония в ацетонитриле (об./об.); градиент: от 80% вода/20% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,5 мин, выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 10,0 мин. Поток: 25 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (1,9 мг, 23%): ЬСМ8 (Е8+): 477,2 (М+1).
- 45 020106
Пример 30. 1-Метилциклопропил-4-(5-циано-4-{[(2-метилпиридин-3-ил)окси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-метилпиридин-3-ола, следуя процедурам, аналогичным для примера 13. Неочищенное вещество очищали посредством флэшхроматографии, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане (от 60 до 100% этилацетата), с получением 77 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.60-0.66 (т, 2Н), 0.83-0.90 (т, 2Н), 1.55 (8, 3Н), 1.962.05 (т, 2Н), 2.05-2.20 (т, 2Н), 2.49 (8, 3Н), 2.84-2.98 (т, 2Н), 4.11-4.42 (т, 2Н), 4.46-4.55 (т, 1Н), 5.04 (8, 2Н), 7.06-7.16 (т, 2Н), 7.65 (8, 1Н), 8.12 (άά, 1=4,49, 1,56 Гц, 1Н).
Пример 31. 1-Метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1ил}пиперидин-1-карбоксилат
А) трет-Бутил-4-(5-циано-4-((2,3,6-трифторфенокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилат трет-Бутил-4-(5-циано-4-((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат (подготовительный пример 16) (87,8 мг, 0,228 ммоль), 2,3,6-трифторфенол (51,7 мг, 0,342 ммоль) и карбонат цезия (149 мг, 0,456 ммоль) помещали во флакон для микроволновой обработки и растворяли в ацетонитриле (3 мл). Флакон нагревали в микроволновом реакторе при 110°С в течение 20 мин. Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток переносили в 1 н. раствор гидроксида натрия (5 мл) и трижды экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали посредством хроматографии, элюируя градиентом от 0 до 30% этилацетата в гептане, с получением 36,2 мг трет-бутил-4-(5-циано-4-((2,3,6-трифторфенокси)метил)-1Нпиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата в виде прозрачного масла.
Б) 1-Метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин1-карбоксилат
-Метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил] -1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1карбоксилат получали с использованием коммерчески доступного 2,3,6-трифторфенола, следуя процедурам, аналогичным для примера 13 (Б и В). Неочищенное вещество (17,1 мг) очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке 8ерах 2-Е11у1 Рупбте 250x21,2 мм, 0,005 мм, элюируя градиентом этанола в гептане. Аналитическая ЬСМ8: время удерживания 11,769 мин (колонка Р1епотепех Ьипа (2) С18 150x3,0 мм, 5 мкм; линейный градиент от 95% вода/метанол до 100% метанола в течение 12,5 мин; 0,1% муравьиной кислоты в качестве модификатора; скорость потока 0,75 мл/мин; ЬСМ8 (Е8+): 456,9 (М+Ла).
'Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 0.64-0.66 (т, 2Н), 0.88-0.91 (т, 2Н), 1.57 (8, 3Н), 2.00 (ά, 1=10,49 Гц, 2Н), 2.07-2.18 (т, 2Н), 2.91-2.95 (т, 2Н), 4.18 (Ьг. 8., 1Н), 4.36 (Ьг. 8., 1Н), 4.50 (ΐΐ, 1=11,34, 4,15 Гц, 1Н), 5.19 (8, 2Н), 6.83-6.90 (т, 2Н), 7.67 (8, 1Н).
Пример 32. Изопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин1-карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием коммерчески доступного 2,3,6трифторфенола, следуя процедурам, аналогичным для примера 11. Неочищенное вещество очищали посредством колоночной хроматографии, элюируя градиентом от 0 до 25% этилацетата в гептане, с получением изопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилата в виде прозрачного масла.
'Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.26 (ά, 1=6,10 Гц, 6Н), 2.01 (ά, 1=11,22 Гц, 2Н) 2.13 (дй, 1=12,28, 4,64 Гц, 2Н), 2.88-3.01 (т, 2Н), 4.32 (Ьг. 8., 2Н), 4.51 (й, 1=11,34, 4,15 Гц, 1Н), 4.90-4.98 (т,
- 46 020106
1Н), 5.18 (8, 2Н), 6.82-6.92 (т, 2Н), 7.67 (δ, 1Н); ЬСМ8 (Е8+): 423,4 (М+Н).
Пример 33. Изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-2-ил)фенокси]метил)-1Нпиразол-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали из 2-фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-2-ил)фенола (подготовительный пример 28) и изопропил-4-(5-циано-4-((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 10), следуя процедурам, аналогичным для примера 11. Неочищенное вещество очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке 8ерах 8Шса 250x21,2 мм, 0,005 мм, элюируя градиентом этанола в гептане. Аналитическая ЬСМ8: время удерживания 8,598 мин (колонка РЬепотепех Ьипа (2) С18 150x3,0 мм, 5 мкм; линейный градиент от 95% вода/метанол до 100% метанола в течение 12,5 мин; 0,1% муравьиной кислоты в качестве модификатора; скорость потока 0,75 мл/мин; ЬСМ8 (Е8 +): 467,0 (М+Н).
'Н ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.27 (б, 6=6,10 Гц, 6Н), 1.97-2.09 (т, 2Н), 2.16 (т, 2Н), 2.93-2.98 (т, 2Н), 3.76 (8, 3Н), 4.25-4.43 (т, 2Н), 4.50-4.57 (т, 1Н), 4.91-4.99 (т, 1Н), 5.17 (8, 2Н), 6.97 (8, 1Н), 7.11 (8, 1Н), 7.12-7.15 (т, 1Н), 7.42 (бб, 1=11,71, 1,95 Гц, 1Н), 7.38-7.44 (т, 1Н), 7.72 (8, 1Н).
Пример 34. Изопропил-4-(5-циано-4-{ [2-фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)фенокси]метил}-1Нпиразол-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали из 2-фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)фенола (подготовительный пример 27) и изопропил-4-(5-циано-4-((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 10), следуя процедурам, аналогичным для примера 11. Неочищенное вещество очищали посредством препаративной НРЬС с обращенными фазами на колонке 8ерах 8Шса 250x21,2 мм, 0,005 мм, элюируя градиентом этанола в гептане. Аналитическая ЬСМ8: время удерживания 8,797 мин (колонка РЬепотепех Ьипа (2) С18 150x3,0 мм, 5 мкм; линейный градиент от 95% вода/метанол до 100% метанола в течение 12,5 мин; 0,1% муравьиной кислоты в качестве модификатора; скорость потока 0,75 мл/мин; ЬСМ8 (Е8 +): 467,0 (М+Н).
Ή ЯМР (500 МГц, дейтерохлороформ) дельта 1.27 (б, 1=6,34 Гц, 6Н), 2.03 (б, 1=11,22 Гц, 2Н), 2.112.20 (т, 2Н), 2.95 (Ьг. 8., 2Н), 3.66 (8, 3Н), 4.34 (Ьг. 8., 2Н), 4.50-4.57 (т, 1Н), 4.94 (б1, 1=12,44, 6,22 Гц, 1Н), 5.15 (8, 2Н), 7.07 (8, 1Н), 7.10-7.17 (т, 3Н), 7.51 (8, 1Н), 7.71 (8, 1Н).
Пример 35. Изопропил-4-[5-циано-4-({ [2-метил-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиридин-3-ил]окси}метил)-1Н-пиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-метил-6-(1Н-1,2,4-триазол-1ил)пиридин-3-ола, следуя процедурам, аналогичным для примера 12. Образец очищали посредством НРЬС с обращенными фазами (колонка: \Уа1ег8 ХВпбде С18 19x100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,03% гидроксида аммония в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,03% гидроксида аммония в ацетонитриле (об./об.); градиент: линейный от 80% вода/20% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,0 мин, выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 9,5 мин. Поток: 25 мл/мин. ЬСМ8 (М8 Е8+): 451,1.
Пример 36. Изопропил-4-[5-циано-4-({[2-метил-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиридин-3-ил]амино}метил)-1Н-пиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат
- 47 020106
К перемешиваемому раствору изопропил-4-(5-циано-4-((метилсульфонилокси)метил)-1Н-пиразол1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (подготовительный пример 10) (44 мг, 0,12 ммоль) в 0,75 мл тетрагидрофурана добавляли Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,042 мл, 0,24 ммоль), затем 2-метил-6-(1Н-1,2,4 триазол-1-ил)пиридин-3-амин (21 мг, 0,12 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч, затем ее охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой и рассолом. Затем смесь трижды экстрагировали 15 мл этилацетата. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением 52 мг желтой пены. Образец очищали посредством НРЬС с обращенными фазами (колонка: ^а1егк 8иийге С18 19x100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,05% трифторуксусной кислоты в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,05% трифторуксусной кислоты в ацетонитриле (об./об.)); градиент: линейный от 90% вода/10% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,5 мин, выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 10,0 мин. Поток: 25 мл/мин. ЬСМ8 (М8 Е8+: 450,1).
Пример 37. Изопропил-4-[5-циано-4-({[2-метил-6-(метилсульфонил)пиридин-3-ил]амино}метил)1Н-пиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилат
Указанное в заголовке
использованием 2-метил-6(метилсульфонил)пиридин-3-амина, следуя процедурам, аналогичным для примера 36. Образец очищали посредством НРЬС с обращенными фазами (колонка: ^а1егк XΒπάде С18 19x100, 5 мкм; подвижная фаза А: 0,03% гидроксида аммония в воде (об./об.); подвижная фаза В: 0,03% гидроксида аммония в ацетонитриле (об./об.); градиент: линейный от 85% вода/15% ацетонитрил до 0% вода/100% ацетонитрил за 8,5 мин, выдерживали при 0% вода/100% ацетонитрил до 10,0 мин. Поток: 25 мл/мин. ЬСМ8 (Е8+): 461,0 (М+1).
В этой заявке приведены ссылки на различные публикации. Описания этих публикаций во всей их полноте включены в данную заявку посредством ссылки для всех целей.
Специалистам в данной области техники будет очевидно, что в настоящем изобретении могут быть осуществлены различные модификации и вариации без отклонения от объема и сущности изобретения изобретения. Другие воплощения изобретения будут очевидны специалистам в данной области техники в результате анализа описания и практического осуществления изобретения, изложенного в данной заявке. Предполагают, что описание и примеры должны рассматриваться лишь как иллюстративные, при этом фактическая сущность изобретения указана в следующей ниже формуле изобретения.

Claims (11)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение, имеющее формулу I ζ
    I где X представляет собой (к3),,,
    Υ представляет собой О;
    т равно 1 или 2;
    Ζ представляет собой -С(О)-О-В6;
    В1 представляет собой водород;
    В2а представляет собой водород;
    В2Ь представляет собой водород;
    - 48 020106 каждый К3 независимо представляет собой гидрокси, галоген, циано, СБ3, ОСБ3, С1-С4алкил, С1С4алкокси, -8О2-К7, -Р(О)(ОК8)(ОК9), -СО-ИК8К9 или 5-6-членную гетероарильную группу, содержащую 1, 2, 3 или 4 гетероатома, каждый из которых независимо выбран из кислорода и азота, где атом углерода в указанной гетероарильной группе возможно замещен К4а, или атом азота в указанной гетероарильной группе возможно замещен К4Ь;
    К4а представляет собой водород, С1-С4алкил, С1-С4алкокси, С1-С4галогеноалкил или галоген, где указанный алкил возможно замещен гидроксилом или С1-С4алкокси;
    К4Ь представляет собой водород, С1-С4алкил, -СН2-С1-С3галогеноалкил, -С2-С4алкил-ОН или -СН2С1-С4алкокси;
    К6 представляет собой С1-С4алкил или С3-С6циклоалкил, где один атом углерода указанной циклоалкильной группировки возможно может быть замещен метилом или этилом;
    К7 представляет собой С1-С4алкил, С3-С6циклоалкил, ИН2 или -(СН2)2-ОН;
    К8 представляет собой водород или С1-С4алкил и
    К9 представляет собой водород, С1-С4алкил, С3-С6циклоалкил, -(СН2)2-ОН, -(СН2)2-О-СН3, -(СН2)3ОН, -(СН2)3-О-СН3, 3-оксетанил или 3-гидроксициклобутил;
    или когда К3 представляет собой -С(О)-ИК8К9, тогда К8 и К9 могут быть взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием азетидинового, пирролидинового, пиперидинового или морфолинового кольца;
    или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Соединение по п.1, где каждый К3 независимо представляет собой фторо, метил, циано, -С(О)ИК8К9 , -8О2-К7, тетразол, пиразол, имидазол или триазол.
  3. 3. Соединение по пп.1 или 2, где каждый К3 независимо представляет собой фторо, метил, циано, -С(О)ИК8К9, -8О2-К7, и каждый из К4а и К4Ь независимо представляет собой водород, С1-С4алкил или С2-С4алкил-ОН.
  4. 4. Соединение по любому из пп.1-3, где К6 представляет собой изопропил или 1-метилциклопропил.
  5. 5. Соединение, выбранное из 1-метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоил-3-фторфенокси)метил]-5-циано-1Н-пиразол-1-ил}пипери- дин-1-карбоксилата;
    1-метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоил-2-фторфенокси)метил]-5-циано-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5 -циано-4- {[4-(1 Н-пиразол-1 -ил)фенокси] метил} -1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилата;
    1 -метилциклопропил-4- {5 -циано-4-[(2,3-дифторфенокси)метил] -1 Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилата;
    1 -метилциклопропил-4- {5 -циано-4-[(2,5-дифторфенокси)метил] -1 Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилата;
    1-метилциклопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1карбоксилата;
    изопропил-4-[5-циано-4-({2-фтор-4-[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-тетразол-5-ил]фенокси}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилата;
    изопропил-4-[5-циано-4-({2-фтор-4-[2-(2-гидроксиэтил)-2Н-тетразол-5-ил]фенокси}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилата;
    изопропил-4-(5 -циано-4- {[2-фтор-4-( 1 -метил-1 Н-имидазол-2-ил)фенокси] метил} -1Н-пиразол-1 ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    1 -метилциклопропил-4- {5 -циано-4-[(4-цианофенокси)метил] -1 Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилата;
    1-метилциклопропил-4-{4-[(4-карбамоилфенокси)метил]-5-циано-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1карбоксилата;
    1-метилциклопропил-4-(5-циано-4-{[4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    1-метилциклопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н
    - 49 020106 пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-{5-циано-4-[(2,3,6-трифторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1-ил}пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-{5-циано-4-[(2,4-дифторфенокси)метил] -1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 -карбоксилата;
    1-метилциклопропил-4-(5-циано-4-{[(2-метилпиридин-3-ил)окси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-[5-циано-4-({[2-метил-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиридин-3-ил]окси}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилата;
    изопропил-4-[5-циано-4-({[2-метил-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиридин-3-ил]амино}метил)-1Нпиразол-1 -ил] пиперидин-1 -карбоксилата;
    изопропил-4-[5-циано-4-({[2-метил-6-(метилсульфонил)пиридин-3-ил]амино}метил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилата;
    изопропил-4-{5-циано-4-[(2-метилфенокси)метил]-1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 -карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(2-метил-2Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{ [(2-метилпиридин-3 -ил)амино] метил}-1Н-пиразол-1 -ил)пиперидин-1 карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{1-[(2-метилпиридин-3-ил)окси]этил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилата;
    изопропил-4-[5-циано-4-({[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]амино}метил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{1-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]этил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]пропил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1Н-тетразол-5-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{2-[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил]этил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин1-карбоксилата;
    изопропил-4-{5-циано-4-[(4-циано-2-фторфенокси)метил]-1Н-пиразол-1 -ил}пиперидин-1 карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{[4-(диметоксифосфорил)-2-фторфенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{[(2-метилпиридин-3-ил)окси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилата;
    изопропил-4-[5-циано-4-({2-фтор-4-[(2-гидроксиэтил)сульфонил]фенокси}метил)-1Н-пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(1Н-тетразол-1-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    изопропил-4-(5-циано-4-{[4-(1Н-тетразол-1-ил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилата или изопропил-4-(5-циано-4-{[2-фтор-4-(метилсульфонил)фенокси]метил}-1Н-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата;
    или его фармацевтически приемлемая соль.
  6. 6. Фармацевтическая композиция, модулирующая активность С-белоксопряженного рецептора СРК119, содержащая соединение по любому из пп.1-5, присутствующее в терапевтически эффективном количестве, в смеси по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым эксципиентом.
  7. 7. Способ лечения диабета, включающий введение эффективного количества соединения по любому из пп.1-5 пациенту, нуждающемуся в этом.
  8. 8. Способ лечения метаболического или связанного с метаболизмом заболевания, состояния или расстройства, включающий стадию введения пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-5.
  9. 9. Способ лечения состояния, выбранного из группы, состоящей из гиперлипидемии, диабета I типа, сахарного диабета II типа, идиопатического диабета I типа (типа 1Ь), латентного аутоиммунного диабета взрослых (ЬАОА), диабета 2 типа с ранним началом (ЕОЭ). юношеского атипичного диабета (ΥΟΑΌ), диабета взрослого типа у молодых (ΙΗΟΟΥ), диабета, связанного с недостаточностью питания, гестационного диабета, коронарной болезни сердца, ишемического инсульта, рестеноза после ангиопластики, заболевания периферических сосудов, перемежающейся хромоты, инфаркта миокарда (например, некро
    - 50 020106 за и апоптоза), дислипидемии, постпрандиальной липемии, состояний нарушенной толерантности к глюкозе (ЮТ), состояний нарушенной гликемии в плазме натощак, метаболического ацидоза, кетоза, артрита, ожирения, остеопороза, гипертензии, застойной сердечной недостаточности, гипертрофии левого желудочка, заболевания периферических артерий, диабетической ретинопатии, дегенерации желтого пятна, катаракты, диабетической нефропатии, гломерулосклероза, хронической почечной недостаточности, диабетической невропатии, метаболического синдрома, синдрома X, предменструального синдрома, коронарной болезни сердца, стенокардии, тромбоза, атеросклероза, инфаркта миокарда, преходящих ишемических атак, инсульта, сосудистого рестеноза, гипергликемии, гиперинсулинемии, гиперлипидемии, гипертриглицеридемии, инсулинорезистентности, нарушенного метаболизма глюкозы, состояний нарушенной толерантности к глюкозе, состояний нарушенной гликемии в плазме натощак, ожирения, эректильной дисфункции, расстройств кожи и соединительной ткани, изъязвлений стопы и неспецифического язвенного колита, эндотелиальной дисфункции и нарушенной растяжимости сосудов, гипер-апо-Влипопротеинемии, болезни Альцгеймера, шизофрении, нарушенных когнитивных способностей, воспалительного заболевания кишечника, неспецифического язвенного колита, болезни Крона и синдрома раздраженного кишечника, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-5.
  10. 10. Применение соединения по пп.1-5 для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, состояния или расстройства, которое модулирует активность С-протеинсопряженного рецептора СРК119.
  11. 11. Применение соединения по любому из пп.1-5 для изготовления лекарственного средства для лечения диабета или ассоциированных с ним осложнений.
    1 АТС САА Т_А Т.Л ТТС ТСА ТТТ ССА СТС АТС стт сст СТС СТС СсС ТСС СТС АТС АТТ сст 61 АСТ ДАС АСА СТА зтс ССТ СТС сст СТС СТС стс ТТС АТС САС ДАС ДАТ САТ сст стс АСТ 121 СТС тсс. ттс А С ТТС ДАТ СТС сст СТС сст САС АСС ТТС АТ сст стс Сгг АТС Т Л - 1 81 СТА СТС АСА сдс САС СТС тсс АСС сСТ тст 1 СС С Си АСА САС ААС ЯСС СТС тсс АС_. Л С 241 ССС АТС ССА ТТТ СТС АСТ тсс тсс ССА сст ссс тст СТС СТС АСС СТС АТС стс АТ? АЛ 301 ТТТ САС АСЗ ТАЗ СТТ С С С АТС ААС САС ссс ТТС ссс ТА С ТТС ААС АТС АТС АСТ С ^1.т ТТС СТС ССС ССС ссс тсс АТТ ссс ссс СТС тсс ТТА стс ТСТ ТАС стс АТТ ССС ттз СТ? -\:а Ί21 СТС СОА АТС С’с АТС ТТС САС СЛС АСТ ссс тле АДА ССС САС СС лее ТТС ТТТ сст СТА 481 ТТТ САС сст САС ТТС СТС СТС АСС СТС тсс тсс стт ССС ТТС ТС ССА С'., С АТС стс стс С41 ТТТ СТС ттс ТТ ’ ТАС тсс еде АТС ГТ г ДАС АТТ с гс тег АТС где АСГ САС где А ГТ СА 601 ААС Αΐυ САА А1 дСА ССА ссс А1С С С ί ССА СС1 1А1 ССА 1- с С А ССС АС1 сс. Αϋ. ,А·. ^61 1ТС ААА ст X .лт Αί Т СТС ТСТ ί_ΊΤ стс АТТ ссс АС С Т Г ССТ ГТА Тсс тсс А г с 721 ттс стт АТС дзг ССи АТТ С ГС сдс стс ссс тсс САС САС ТС _АС СТС ТАС СТА СТ.л ТС 781 САА ТАЗ зте 1СС стс стс ссс стс ссс ААС ТСС СТС стс ААС ССА стс АТС ТАТ 841 ГАТ тсс С АС ААС САи СТС ССА СТС сдс стс тле С АС АТС 6СС СТА ССА его ААС ААС СТС 401 СТС’ АС г ТС А ТТ ’ СТ г СТС ТТТ СТС тсс ссс лес ДАТ ТСТ ссс ССА САС лес С^’С лес ЗАЛ 461 дет Тег тст СД’ АТС СТС АСТ АТС ТСС АСС ТСА САС ТТТ СД ССС ТАА
EA201190280A 2009-06-05 2010-05-27 Производные l-(пиперидин-4-ил)пиразола в качестве модуляторов gpr119 EA020106B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US18435509P 2009-06-05 2009-06-05
US25762109P 2009-11-03 2009-11-03
PCT/IB2010/052377 WO2010140092A1 (en) 2009-06-05 2010-05-27 L- ( piperidin-4-yl) -pyrazole derivatives as gpr 119 modulators

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201190280A1 EA201190280A1 (ru) 2012-09-28
EA020106B1 true EA020106B1 (ru) 2014-08-29

Family

ID=42358441

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201190280A EA020106B1 (ru) 2009-06-05 2010-05-27 Производные l-(пиперидин-4-ил)пиразола в качестве модуляторов gpr119

Country Status (33)

Country Link
US (1) US20110020460A1 (ru)
EP (1) EP2438051A1 (ru)
JP (1) JP2012528847A (ru)
KR (1) KR20120061063A (ru)
CN (1) CN102459222B (ru)
AP (1) AP2799A (ru)
AR (1) AR076985A1 (ru)
AU (1) AU2010255422B2 (ru)
BR (1) BRPI1014636A2 (ru)
CA (1) CA2764021C (ru)
CL (1) CL2011003085A1 (ru)
CO (1) CO6470897A2 (ru)
CR (1) CR20110623A (ru)
CU (1) CU20110225A7 (ru)
DO (1) DOP2011000371A (ru)
EA (1) EA020106B1 (ru)
EC (1) ECSP11011493A (ru)
GE (1) GEP20135907B (ru)
GT (1) GT201100308A (ru)
HN (1) HN2011003195A (ru)
IL (1) IL216772A0 (ru)
MA (1) MA33334B1 (ru)
MX (1) MX2011013034A (ru)
NI (1) NI201100204A (ru)
NZ (1) NZ596467A (ru)
PE (1) PE20120399A1 (ru)
SG (1) SG175995A1 (ru)
SV (1) SV2011004063A (ru)
TN (1) TN2012000073A1 (ru)
TW (1) TWI411611B (ru)
UY (1) UY32683A (ru)
WO (1) WO2010140092A1 (ru)
ZA (1) ZA201108481B (ru)

Families Citing this family (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20120046188A (ko) 2009-06-24 2012-05-09 뉴로크린 바이오사이언시즈 인코퍼레이티드 신규 화합물, 약제학적 조성물 및 이에 관련된 방법
WO2010149685A1 (en) 2009-06-24 2010-12-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh New compounds, pharmaceutical composition and methods relating thereto
WO2011113947A1 (en) 2010-03-18 2011-09-22 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination of a gpr119 agonist and the dpp-iv inhibitor linagliptin for use in the treatment of diabetes and related conditions
PT2547679E (pt) 2010-03-19 2016-01-27 Pfizer Derivados de 2,3-di-hidro-1h-indeno-1-il-2,7-diazaspiro[3.6]nonano e sua utilização como antagonistas ou agonistas inversos do receptor de grelina
KR20150006899A (ko) 2010-10-29 2015-01-19 화이자 인코포레이티드 N1/N2-락탐 아세틸-CoA 카복실라아제 억제제
EP2643310A1 (en) * 2010-11-23 2013-10-02 Pfizer Inc 4- (5-cyano-pyrazol-1-yl) -piperidine derivatives as gpr 119 modulators
ME02312B (me) 2011-04-22 2016-06-20 Pfizer DERIVATI PIRAZOLOSPIROKETONA, NAMIJENJENI UPOTREBI KAO INHIBITORI ACETIL-CoA-KARBOKSILAZE
EP2718279B1 (en) 2011-06-09 2016-08-10 Rhizen Pharmaceuticals SA Novel compounds as modulators of gpr-119
WO2013011402A1 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Pfizer Inc. Gpr 119 modulators
EP2734503B1 (en) 2011-07-22 2015-09-16 Pfizer Inc. Quinolinyl glucagon receptor modulators
ES2605565T3 (es) 2011-08-31 2017-03-15 Pfizer Inc Compuestos de hexahidropirano [3,4-D][1,3]tiazin-2-amina
EP2776405A1 (en) 2011-11-11 2014-09-17 Pfizer Inc 2-thiopyrimidinones
KR20140137404A (ko) 2012-04-06 2014-12-02 화이자 인코포레이티드 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제 2 억제제
US8889730B2 (en) 2012-04-10 2014-11-18 Pfizer Inc. Indole and indazole compounds that activate AMPK
EP2841070B1 (en) * 2012-04-24 2018-07-25 Board Of Trustees Of Northern Illinois University Design and synthesis of novel inhibitors of isoprenoid biosynthesis
ES2585262T3 (es) 2012-05-04 2016-10-04 Pfizer Inc Compuestos heterocíclicos de hexahidropiran[3,4-d][1,3]tiazin-2-amina sustituidos como inhibidores de PPA, BACE1 y BACE2
EP2872127A1 (en) 2012-07-11 2015-05-20 Elcelyx Therapeutics, Inc. Compositions comprising statins, biguanides and further agents for reducing cardiometabolic risk
EP2897964A1 (en) 2012-09-20 2015-07-29 Pfizer Inc. Alkyl-substituted hexahydropyrano [3,4-d][1,3]thiazin-2-amine compounds
CA2893256A1 (en) 2012-12-11 2014-06-19 Pfizer Inc. Hexahydropyrano [3,4-d][1,3]thiazin-2-amine compounds as inhibitors of bace1
WO2014097038A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Pfizer Inc. CARBOCYCLIC- AND HETEROCYCLIC-SUBSTITUTED HEXAHYDROPYRANO[3,4-d][1,3]THIAZIN-2-AMINE COMPOUNDS
WO2014125394A1 (en) 2013-02-13 2014-08-21 Pfizer Inc. HETEROARYL-SUBSTITUTED HEXAHYDROPYRANO [3,4-d][1,3] THIAZIN-2-AMINE COMPOUNDS
US9233981B1 (en) 2013-02-15 2016-01-12 Pfizer Inc. Substituted phenyl hexahydropyrano[3,4-d][1,3]thiazin-2-amine compounds
CA2926568C (en) 2013-10-09 2017-09-05 Pfizer Inc. Antagonists of prostaglandin ep3 receptor
DK3119757T3 (en) 2014-03-17 2018-06-18 Pfizer DIACYLGYLERIC-ACYL TRANSFERASE-2 INHIBITORS TO USE IN THE TREATMENT OF METABOLIC AND RELATED DISEASES
CU24406B1 (es) 2014-04-04 2019-05-03 Pfizer 1-{[(2s,3s,4s)-3-etil-4-fluoro-5-oxopirrolidin-2-il]metoxi}-7 -metoxiisoquinolin-6-carboxamida
AP2016009493A0 (en) 2014-04-10 2016-10-31 Pfizer 2-AMINO-6-METHYL-4,4a,5,6-TETRAHYDROPYRANO[3,4-d][1,3]THIAZIN-8a(8H)-YL-1,3-THIAZOL-4-YL AMIDES
JP2017119628A (ja) * 2014-05-09 2017-07-06 日産化学工業株式会社 置換アゾール化合物及び糖尿病治療薬
WO2016092413A1 (en) 2014-12-10 2016-06-16 Pfizer Inc. Indole and indazole compounds that activate ampk
JP2017538769A (ja) 2014-12-22 2017-12-28 ファイザー・インク プロスタグランジンｅｐ３受容体の拮抗薬
PT3265126T (pt) 2015-03-03 2021-08-30 Saniona As Formulação combinada de tesofensina e metoprolol
WO2016178113A1 (en) 2015-05-05 2016-11-10 Pfizer Inc. 2-thiopyrimidinones
WO2016193844A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Pfizer Inc. Novel heterocyclic compounds as inhibitors of vanin-1 enzyme
KR102426986B1 (ko) 2015-06-17 2022-07-28 화이자 인코포레이티드 삼환형 화합물 및 포스포다이에스터라제 억제제로서 이의 용도
WO2016203335A1 (en) 2015-06-18 2016-12-22 Pfizer Inc. Novel pyrido[2,3-b]pyrazinones as bet-family bromodomain inhibitors
AU2016305590A1 (en) 2015-08-13 2018-02-15 Pfizer Inc. Bicyclic-fused heteroaryl or aryl compounds
CA2996389C (en) 2015-08-27 2020-04-07 Pfizer Inc. Bicyclic-fused heteroaryl or aryl compounds as irak4 modulators
WO2017037567A1 (en) 2015-09-03 2017-03-09 Pfizer Inc. Regulators of frataxin
JP2018534251A (ja) 2015-09-24 2018-11-22 ファイザー・インク Ｂａｃｅ阻害剤として有用なｎ−［２−（３−アミノ−２，５−ジメチル−１，１−ジオキシド−５，６−ジヒドロ−２ｈ−１，２，４−チアジアジン−５−イル）−１，３−チアゾール−４−イル］アミド
EP3353183A1 (en) 2015-09-24 2018-08-01 Pfizer Inc N-[2-(2-amino-6,6-disubstituted-4, 4a, 5, 6-tetrahydropyrano [3,4-d][1,3]thiazin-8a (8h)-yl) -1, 3-thiazol-4-yl]amides
JP2018531924A (ja) 2015-09-24 2018-11-01 ファイザー・インク テトラヒドロピラノ［３，４−ｄ］［１，３］オキサジン誘導体、およびｂａｃｅ阻害剤としてのその使用
SG11201804363UA (en) 2015-12-29 2018-07-30 Pfizer Substituted 3-azabicyclo[3.1.0]hexanes as ketohexokinase inhibitors
US10155766B2 (en) 2016-06-14 2018-12-18 Board Of Trustees Of Northern Illinois University Pyrazolopyrimidine antibacterial agents
KR20190026902A (ko) 2016-07-14 2019-03-13 화이자 인코포레이티드 바닌-1 효소의 억제제로서의 신규 피리미딘 카르복스아미드
AR109179A1 (es) 2016-08-19 2018-11-07 Pfizer Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2
WO2019133445A1 (en) 2017-12-28 2019-07-04 Inception Ibd, Inc. Aminothiazoles as inhibitors of vanin-1
CR20210110A (es) 2018-08-31 2021-05-13 Pfizer Combinaciones para tratamiento de ehna/ehgna y enfermedades relacionadas
WO2020102575A1 (en) 2018-11-16 2020-05-22 Inception Ibd, Inc. Heterocyclic aminothiazoles and uses thereof
CA3140972C (en) 2019-05-20 2024-06-18 Pfizer Inc. Combinations comprising benzodioxol as glp-1r agonists for use in the treatment of nash/nafld and related diseases
TW202115086A (zh) 2019-06-28 2021-04-16 美商輝瑞大藥廠 Bckdk抑制劑
JP7498199B2 (ja) 2019-06-28 2024-06-11 ファイザー・インク 種々の疾患を処置するために有用なｂｃｋｄｋ阻害剤としての５－（チオフェン－２－イル）－１ｈ－テトラゾール誘導体
TWI771766B (zh) 2019-10-04 2022-07-21 美商輝瑞股份有限公司 二醯基甘油醯基轉移酶２ 抑制劑
JP2022058085A (ja) 2020-02-24 2022-04-11 ファイザー・インク ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２阻害剤とアセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ阻害剤との組合せ
MX2022015706A (es) 2020-06-09 2023-01-24 Pfizer Antagonistas del receptor de melanocortina 4 y usos de estos.
WO2023026180A1 (en) 2021-08-26 2023-03-02 Pfizer Inc. Amorphous form of (s)-2-(5-((3-ethoxypyridin-2-yl)oxy)pyridin-3-yl)-n-(tetrahydrofuran-3- yl)pyrimidine-5-carboxamide
IL312296A (en) 2021-12-01 2024-06-01 Pfizer 3-PHENYL-1-BENZOTHIOPEN-2-CARBOXYLIC ACID DERIVATIVES AS INHIBITORS OF BRANCHED ALPHA KETO ACID DEHYDROGENSIS KINASE FOR THE TREATMENT OF DIABETES, KIDNEY DISEASES, NASH AND HEART
CA3241470A1 (en) 2021-12-06 2023-06-15 Pfizer Inc. Melanocortin 4 receptor antagonists and uses thereof
WO2023169456A1 (en) 2022-03-09 2023-09-14 Gasherbrum Bio , Inc. Heterocyclic glp-1 agonists
WO2023198140A1 (en) 2022-04-14 2023-10-19 Gasherbrum Bio, Inc. Heterocyclic glp-1 agonists
WO2024075051A1 (en) 2022-10-07 2024-04-11 Pfizer Inc. Hsd17b13 inhibitors and/or degraders
WO2024084360A1 (en) 2022-10-18 2024-04-25 Pfizer Inc. Patatin-like phospholipase domain-containing protein 3 (pnpla3) modifiers
WO2024118524A1 (en) 2022-11-28 2024-06-06 Cerevel Therapeutics, Llc Azaindole compounds and their use as phosphodiesterase inhibitors
WO2024125602A1 (en) 2022-12-15 2024-06-20 Gasherbrum Bio, Inc. Salts and solid forms of a compound having glp-1 agonist activity
WO2024127297A1 (en) 2022-12-16 2024-06-20 Pfizer Inc. 3-fluoro-4-hydroxybenzmide-containing inhibitors and/or degraders and uses thereof

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009014910A2 (en) * 2007-07-19 2009-01-29 Metabolex, Inc. N-azacyclic substituted pyrrole, pyrazole, imidazole, triazole and tetrazole derivatives as agonists of the rup3 or gpr119 receptor for the treatment of diabetes and metabolic disorders
WO2009123992A1 (en) * 2008-03-31 2009-10-08 Metabolex, Inc. Oxymethylene aryl compounds and uses thereof

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1383501B1 (en) 2001-02-28 2007-04-04 Merck & Co., Inc. Acylated piperidine derivatives as melanocortin-4 receptor agonists
MXPA04008298A (es) 2002-02-27 2004-11-26 Pfizer Prod Inc Procesos e intermedios utiles en la preparacion de agonistas de receptor beta-3 adrenergico.
US20040220170A1 (en) 2003-05-01 2004-11-04 Atkinson Robert N. Pyrazole-amides and sulfonamides as sodium channel modulators
AR045047A1 (es) * 2003-07-11 2005-10-12 Arena Pharm Inc Derivados arilo y heteroarilo trisustituidos como moduladores del metabolismo y de la profilaxis y tratamiento de desordenes relacionados con los mismos
WO2005007658A2 (en) * 2003-07-14 2005-01-27 Arena Pharmaceuticals, Inc. Fused-aryl and heteroaryl derivatives as modulators of metabolism and the prophylaxis and treatment of disorders related thereto
EP2612853A1 (en) 2003-09-26 2013-07-10 Exelixis Inc. c-Met modulators and methods of use
JP4069159B2 (ja) 2004-05-25 2008-04-02 ファイザー・プロダクツ・インク テトラアザベンゾ［ｅ］アズレン誘導体及びそれらのアナログ
DOP2006000008A (es) * 2005-01-10 2006-08-31 Arena Pharm Inc Terapia combinada para el tratamiento de la diabetes y afecciones relacionadas y para el tratamiento de afecciones que mejoran mediante un incremento de la concentración sanguínea de glp-1
DOP2006000009A (es) * 2005-01-13 2006-08-15 Arena Pharm Inc Procedimiento para preparar eteres de pirazolo [3,4-d] pirimidina
PA8660701A1 (es) 2005-02-04 2006-09-22 Pfizer Prod Inc Agonistas de pyy y sus usos
WO2007039177A2 (en) * 2005-09-29 2007-04-12 Sanofi-Aventis Phenyl- and pyridinyl- 1, 2 , 4 - oxadiazolone derivatives, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
GB0522846D0 (en) 2005-11-09 2005-12-21 Peakdale Molecular Ltd Process
US20100022457A1 (en) * 2006-05-26 2010-01-28 Bristol-Myers Squibb Company Sustained release glp-1 receptor modulators
EP2139888A2 (en) 2007-03-28 2010-01-06 Array Biopharma, Inc. Imidazoý1,2-a¨pyridine compounds as receptor tyrosine kinase inhibitors
EP2152707B1 (en) 2007-05-04 2012-06-20 Bristol-Myers Squibb Company [6,5]-bicyclic gpr119 g protein-coupled receptor agonists
CA2716330A1 (en) 2008-02-22 2009-08-27 Irm Llc Compounds and compositions as modulators of gpr119 activity
EP2311822A4 (en) * 2008-08-01 2011-08-31 Nippon Chemiphar Co GPR119 AGONIST

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009014910A2 (en) * 2007-07-19 2009-01-29 Metabolex, Inc. N-azacyclic substituted pyrrole, pyrazole, imidazole, triazole and tetrazole derivatives as agonists of the rup3 or gpr119 receptor for the treatment of diabetes and metabolic disorders
WO2009123992A1 (en) * 2008-03-31 2009-10-08 Metabolex, Inc. Oxymethylene aryl compounds and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
GT201100308A (es) 2013-11-11
ECSP11011493A (es) 2011-12-30
HN2011003195A (es) 2013-03-11
SV2011004063A (es) 2012-01-04
CN102459222A (zh) 2012-05-16
EA201190280A1 (ru) 2012-09-28
WO2010140092A1 (en) 2010-12-09
DOP2011000371A (es) 2012-04-30
CA2764021A1 (en) 2010-12-09
MA33334B1 (fr) 2012-06-01
CN102459222B (zh) 2014-06-04
AU2010255422A1 (en) 2011-12-22
NZ596467A (en) 2014-01-31
CA2764021C (en) 2014-04-22
UY32683A (es) 2011-01-31
BRPI1014636A2 (pt) 2016-04-05
EP2438051A1 (en) 2012-04-11
GEP20135907B (en) 2013-08-12
TN2012000073A1 (fr) 2013-09-19
JP2012528847A (ja) 2012-11-15
AP2799A (en) 2013-11-30
AU2010255422B2 (en) 2014-04-10
MX2011013034A (es) 2012-02-08
AR076985A1 (es) 2011-07-20
NI201100204A (es) 2012-05-22
AP2011006020A0 (en) 2011-12-31
IL216772A0 (en) 2012-03-01
TW201109314A (en) 2011-03-16
CR20110623A (es) 2012-01-04
US20110020460A1 (en) 2011-01-27
KR20120061063A (ko) 2012-06-12
CL2011003085A1 (es) 2012-09-07
TWI411611B (zh) 2013-10-11
CO6470897A2 (es) 2012-06-29
SG175995A1 (en) 2011-12-29
PE20120399A1 (es) 2012-04-24
CU20110225A7 (es) 2013-01-30
ZA201108481B (en) 2013-02-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA020106B1 (ru) Производные l-(пиперидин-4-ил)пиразола в качестве модуляторов gpr119
EP2401265B1 (en) Derivatives of 1-pyri(mid)in-2-yl-pyrazole-4-carboxylic acid which are useful for therapy or prophylaxis of cardiovascular diseases
TWI490202B (zh) 昇糖素受體調節劑
JP6404332B2 (ja) 新規な、ＮＩＫ阻害剤としての３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン誘導体
JP6402179B2 (ja) 新規な、ＮＩＫ阻害剤としての１−（４−ピリミジニル）−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン誘導体
US20120095028A1 (en) 3-oxa-7-azabicyclo[3.3.1]nonanes
TW201040168A (en) TGR5 agonists
WO2012138648A1 (en) Compositions and methods for modulating lpa receptors
TWI433843B (zh) Ｇｐｒ１１９調節子
EA020921B1 (ru) Производные циклогексиламида и их применение в качестве антагонистов рецептора crf-1
EA032304B1 (ru) Спироциклические соединения в качестве ингибиторов триптофангидроксилазы
US20130217715A1 (en) Derivatives of pyrazolophenyl-benzenesulfonamide compounds and use thereof as antitumor agents
US20210317092A1 (en) Tetrazole containing compounds
WO2010116282A1 (en) 4, 5-dihydro-lh-pyrazole compounds and their pharmaceutical uses
US20130085161A1 (en) Piperidinyl substituted 1,3-dihydro-benzoimidazol-2-ylideneamine derivatives
TW201910325A (zh) 吲哚衍生物及其用途
OA16400A (en) 4-(5-cyano-pyrazol-1-yl)-piperidine derivatives as GPR 119 modulators.

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU