EA018404B1

EA018404B1 - Способ получения сорбента, сорбент, полученный этим способом, и использование сорбента в качестве кормовой добавки и медицинского средства

Info

Publication number: EA018404B1
Application number: EA200900003A
Authority: EA
Inventors: Виктория Алексеевна Лапина; Александр Евгеньевич Донцов; Игорь Викторович Насонов
Original assignee: Государственное Научное Учреждение "Институт Физики Им. Б.И. Степанова" Национальной Академии Наук Беларуси
Priority date: 2006-07-11
Filing date: 2007-07-10
Publication date: 2013-07-30
Also published as: BRPI0714131A2; WO2008006186A2; US8871283B2; EA200900003A1; EP2038057A2; AR061877A1; JP2009542434A; WO2008006186B1; WO2008006186A3; US20100015097A1

Abstract

Настоящее изобретение относится к способу получения сорбента, который включает измельчение плодовой оболочки вызревших семян подсолнечника, их кислотный гидролиз, промывку водой, сушку и формирование определенной структуры, состоящей из лигнина, целлюлозы и меланина, где кислотный гидролиз проводят 0,1-36% раствором кислоты в течение 1,5-4,5 ч в режиме кипения под давлением 3 атм. Промывку водой осуществляют 0,1-1,0% раствором щелочи и затем умягченной водой с последующей сушкой продукта. Сорбент представляет собой пористую многоуровневую матрицу на основе лигнина, целлюлозы и меланина. Изобретение далее раскрывает сорбент и его применение для профилактики и лечения заболеваний животных, вызванных микотоксинами, пестицидами, вирусными и бактериальными инфекциями, и в качестве добавки к корму в виде пищевых волокон. Заявляемый способ характеризуется сокращением технологического цикла за счет оптимизации режимов и подбора реагентов для обработки исходного растительного сырья.

Description

Изобретение относится к способу получения сорбента, сорбенту, полученному этим способом и использованию сорбента в качестве кормовой добавки и медицинского средства, в частности, в ветеринарии в качестве лечебно-профилактического средства.

Известен ряд сорбентов и способов их получения. Сорбенты имеют или органическое происхождение и получены из отходов лигноцеллюлозного сырья сельскохозяйственного производства: жмыха свеклы, соломы, шелухи риса, из опилок различных пород древесины, пшеничных отрубей и т.д. или неорганического происхождения. Известно применение различных сорбционных материалов для связывания и выведения из живых организмов экотоксикантов, таких, как микотоксины, тяжелые металлы, органические соединения и др. Однако известные сорбенты имеют некоторые недостатки.

Неорганические сорбенты (глины, алюмосиликаты (н-р, препарат Хаметокс), бентониты, вермикулиты и др.) имеют узкий спектр действия, понижают плотность рациона животных и частично ухудшают деятельность желудочно-кишечного тракта из-за непостоянства химического состава и неизбежного присутствия вредных примесей, в зависимости от места происхождения.

Так, известен сорбент и способ его получения из жмыха - отхода процесса переработки семян тыквы (1). Согласно способу жмых-отход отмывают водой, выдерживают 15-20 мин, затем сливают водный слой, вновь добавляют воду, перемешивают, отстаивают, повторно сливают воду и процесс повторяют до получения неокрашенной промывной воды. Затем остаток сушат при температуре 100-150°С до постоянной массы, измельчают, рассеивают и отбирают фракцию 0,2-2,0 мм. Полученный сорбент характеризуется насыпной массой 0,4-0,6г/см³, содержит не менее 4,5 мас.% азота по Кьельдалю и не менее 4 мас.% клетчатки. Недостатком способа является относительная сложность технологии, а сорбент имеет ограниченные возможности при сорбции пестицидов, микотоксинов и подобных потенциально опасных вредных веществ.

Известен способ и сорбент, получаемый из полисахаридного сырья (2). Согласно способу полисахаридное сырье - растительные отходы или биомассу микроорганизмов (пшеничные отруби, свекловичный жмых, биомассы ЛкретдШш Гоейбщ М-45, ТпеНобсгша ушбе 13/10 и др.) измельчают до размера частиц менее 3 мм, готовят суспензию с гидромодулем 10-20 (концентрация 5-10%) и рН 3,5-11,0 и осуществляют обработку паром при избыточном давлении 1-1,5 атм в течение 0,5-4,0 ч. Твердую массу промывают и сушат. Полученный сорбент применяют при промышленной очистке питьевой воды для удаления радионуклидов и тяжелых металлов и в медицинских целях. Недостатком способа является низкий выход сорбента, большой расход воды и энергоемкость процесса, обусловленная необходимостью пропарки исходного сырья. Сорбент, полученный этим способом, имеет не высокую сорбционную емкость и узкий спектр применения.

Известен также пищевой сорбент и способ его получения из плодовой оболочки семян подсолнечника НИ 2255803 С1. (3). Способ включает удаление балластных веществ из плодовой оболочки семян подсолнечника путем экстракции растворителем при температуре 45-55°С в течение 30-100 мин. В качестве растворителя используют экстракционный бензин, петролейный эфир, нефрас в соотношении плодовая оболочка семян подсолнечника - растворитель (1:5) - (1:20) с последующим отделением оболочки семян подсолнечника от раствора балластных веществ в растворителе отстаиванием. Отделенную твердую фазу оболочки семян разбавляют водой и полученную смесь выдерживают в течение 10-60 мин и далее подвергают замораживанию и выдержке при температуре (-4)-(-20)°С в течение 30-240 мин с последующим размораживанием при температуре 25-100 С. Затем продукт сушат при температуре 100200°С и получают сорбент для очистки темноокрашенных растительных масел. Недостатком сорбента является сложность получения и ограниченный спектр действия.

Другие органические сорбенты (Био-Мос, Микосорб, Микофикс-Плюс), активированные угли органического происхождения и др. как правило, также дороги и имеют ограниченный спектр действия.

Известен гемосорбент углеродный КАУ для лечения острых отравлений, приготовленный из растительного сырья (2). Сорбент получают из дробленых фруктовых косточек или скорлупы орехов и характеризуется высокими гидродинамическими и кинетическими свойствами, обусловленными большим объемом макропор, что гарантирует поглощение токсических веществ со средней и высокой молекулярной массой. Гемосорбент КАУ показан в качестве средства экстрапоральной детоксикации крови организма при острых отравлениях промышленными и бытовыми ядами, лекарственными препаратами, грибными токсинами, пестицидами и некоторыми другими заболеваниями. Недостатком сорбента является низкая сорбционная способность и селективность.

Сорбент, описанный в патенте КН 2060818 С1, эффективен для очистки водопроводной воды от ионов Са² В этом случае, если начальная концентрация ионов кальция в воде (21±4)-100^-4т^-3, то после пропускания через колонку с сорбентом, их концентрация, измеренная с помощью Арсеназо III, была (0,8±0,1)-10^-4т^-3. Этот сорбент представляет собой натуральный водонерастворимый полимер, содержащий в своем составе углерод, водород, азот, серу и кислород в определенном процентном соотношении. Сорбент адсорбирует ряд тяжелых металлов, радионуклидов и эффективно работает в интервале рН 28.5. Сырая нефть, связанная сорбентом, остается на поверхности воды в течение длительного времени без использования любых поверхностно-активных веществ. Сорбент может использоваться в пищевой

- 1 018404 промышленности, в экологии, в частности для удаления радионуклидов из растворов, нефтепродуктов, а также в сельском хозяйстве для удаления тяжелых металлов из организма животных.

Недостатком данного сорбента является его ограниченная сорбционная способность, а также то, что он содержит только один биологически активный компонент- меланин, что также ограничивает его практическое применение.

Способ получения сорбента, представленный в патенте КН 2060818 С1 включает в себя измельчение шелухи подсолнечника в муку, кислотный гидролиз 9-12 н. соляной кислотой в течение не менее 3545 суток при температуре 20°С, промывку водой с последующей сушкой продуктов гидролиза.

Для гидролиза может быть использована также серная кислота в концентрации 35-50%. Гидролиз серной кислотой проводится при температуре 100°С в течение 3-6 ч. Шелуха также измельчается до муки, которую затем обрабатывают кислотой в соотношении твердая фаза-жидкая 1: 8-10. Полученный продукт гидролиза сначала отмывают дистиллированной водой при нормальных условиях, затем горячей дистиллированной водой при 80°С до удаления остаточных количеств ионов §О₄ ^2- в проточных водах. Перед сушкой продукт дополнительно промывают этиловым спиртом, а затем сушат и получают готовый сорбент.

Недостатком известного способа получения сорбента является низкая технологического процесса, вызванная большим расходом концентрированной кислоты, расходом промывных вод и высокой энергоемкостью, обусловленной длительностью процесса гидролиза. К недостаткам метода также можно отнести высокие концентрации используемых минеральных кислот, ограниченный выбор кислот, необходимость использования специфического режима гидролиза для каждого типа кислот, что ограничивает эффективность применяемого метода. Метод также имеет низкую производительность: 35-45 дней при 20°С или 3-6 ч при 100°С, а также необходимость использования большого количества дистиллированной воды, включая горячую дистиллированную воду, что увеличивает потребление электроэнергии. Использование такого процесса промывки существенно увеличивает стоимость всего процесса, а также приводит к удалению при отмывке потенциально полезных биологически активных веществ, что связано, в конечном счете, с неоптимальным использованием исходного растительного сырья.

Целью изобретения является создание способа получения сорбента свободного от указанных недостатков и с более широким спектром действия.

Предлагаемое изобретение включает в себя способ получения сорбента, состоящий из следующих операций:

измельчения шелухи семян подсолнечника;

кислотный гидролиз с экстракцией водорастворимых балластных веществ и формированием структуры определенного состава, состоящей из лигнина, целлюлозы и меланина;

промывки водой;

сушки, где кислотный гидролиз проводят 0,1-36% раствором кислоты, преимущественно между 1 и 36%, более преимущественно 1 и 10% и наиболее преимущественно между 1 и 5% в течение 0,3-4,5 ч, преимущественно между 1,5 и 4,5 ч в кипящем режиме при давлении в интервале 0,1-0,7 Мпа (1-7 атм) и преимущественно в интервале от давления насыщенных паров смеси до 3 атм, промывку осуществляют водой или 0,1-1,0% щелочным раствором и затем умягченной водой, а последующую сушку ведут с возможностью формирования пористой многоуровневой матрицы на основе лигнина, целлюлозы и меланина с интегральной пористостью (0,04-50) мкм.

Техническим результатом является создание способа получения сорбента, характеризующегося сокращенным технологическим циклом производства за счет оптимизации режимов и подбора реагентов для обработки исходного растительного сырья - плодовой оболочки вызревших семян подсолнечника, плодовой оболочки семян гречихи, бобов, других окрашенных оболочек семян, шелухи (кожицы) различных ягод с темной окраской, таких как кожура слив, вишен, черной смородины, черники, голубики, темных сортов винограда и т.д.

Основным требованием к исходному растительному сырью является присутствие в нем природного пигмента меланина. Сорбент, полученный таким образом, обладает универсальными сорбционными свойствами в отношении широкого класса потенциально опасных химических веществ и микроорганизмов. Например, он способен адсорбировать такие опасные химические вещества, как пестициды, микотоксины, полихлорированные бифенилы, вирусы, патогенные бактерии и сложные углеводороды. Указанный эффект обеспечивается пористой многоуровневой структурой сорбента с полимодальным распределением пор (микро-, мезо-, макро-), наличием на поверхности химически активных центров и биологически активных ингредиентов, что позволяет сорбировать молекулы различных размеров, геометрии и химической природы.

Гидролиз проводят серной или соляной или ортофосфорной кислотой.

Промывку продукта гидролиза проводят раствором гидроокиси аммония или гидроокиси натрия или гидроокиси калия до достижения значения рН 3,5-4,5.

До начала промывки продукта гидролиза раствором щелочи дополнительно возможно проводить промывку водой в режиме кипения в течение 10-15 мин.

- 2 018404

Промывку продукта гидролиза умягченной водой проводят до достижения рН 4,5-6,4.

Альтернативно, возможно проводить промывку питьевой водой, дистиллированной (конденсатом) или деионизованной водой.

Следует отметить, что данный способ получения сорбента позволяет получать стерильный продукт, который имеет длительный срок хранения.

Согласно представленному техническому решению, далее способ включает в себя модифицирование сорбента путем импрегнирования ионами серебра и/или иммобилизацией микробной биомассой бактерий пробиотиков.

Модификацию продукта гидролиза импрегнированием или иммобилизацией проводят непосредственно после его промывки, либо после сушки.

Импрегнирование ионами серебра проводят путем обработки продукта в статических условиях водорастворимой солью серебра, например, нитратом серебра при равновесной концентрацией ионов серебра, а величину сорбции ионов задают по формуле Фрейндлиха:

где г - величина сорбции, ммоль/г;

К, И(_1>2) - константы;

С - концентрация ионов серебра, г/л.

Альтернативно, сорбент может быть иммобилизован путем инкубирования продукта с микробной взвесью бактерий пробиотиков, например, ВасШик 8иЫт1ш8 или ЬасФЬасШик или ВШбоЬаСстшт (или их смесью) с микробной концентрацией не менее 10⁸ КОЕ при модуле твердая/жидкая фаза 1:10 в течение не менее 1 ч с последующим отделением и сушкой твердой фазы в изотермических условиях при температуре +37°С в течение суток.

Поставленная цель достигается также тем, что сорбент, включающий углеродсодержащий гетерополимер, полученный путем гидролиза плодовой оболочки вызревших семян подсолнечника, содержит лигнин, целлюлозу и меланин структурированные в пористую многоуровневую матрицу при следующем соотношении компонентов, мас.%:

- Лигнин 25 - 70%

- Целлюлоза 20 - 65%

- Меланин ] -10% .

Кроме того, согласно предлагаемому способу, сорбент может содержать

- Лигнин 39.9-58.8 %

- Целлюлоза 40.6-50.9 %

- Меланин 1,0 - 8,0 % .

Сорбент может дополнительно включать биологически активные углеродсодержащие вещества, состоящие из: биофлавоноиды полисахариды (глюкозу, фруктозу, сахарозу), пектины, лейкоантоцианы, катехины, фенолкарбоновые кислоты, дубильные вещества и их смесь.

Эти продукты могут присутствовать в сорбенте в следующих соотношениях:

Биофлавоноиды: 142.6-615.5 мг/%,

полисахариды (глюкозу, фруктозу _? сахарозу ):	0.195-р.444%,
пектины:	0.499-1.912%,
лейкоантоцианы:	0.1-2.76%,
катехины:	0.2-146.6 мг/%,
фенолкарбоновые кислоты:	212.5-697.9 мг/%,
таннины:	0.58-0.83%;

где, 1 мг/%, = 10 ррт.

Пористая многоуровневая матрица главным образом включает физически и химически связанные между собой подструктуры из частиц лигнина ленточно - спиральной формы с размерами пор 0,1-15 мкм, волокна целлюлозы продольно-вытянутой формы с размерами пор 5-50 мкм и частиц меланина различной формы в виде отдельных трубок правильной цилиндрической формы до агломератов размером от 5- 400 мкм.

Сорбент может содержать ионы серебра или микробную массу пробиотических бактерий.

Ионы серебра могут присутствовать в сорбенте в форме активно связанных центров с константой сильной связи в интервале п₁=(0,013-0,019) ммол/г при К= (2,5-2,11)-10⁴ М^-1 и константой слабой связи в

- 3 018404 интервале η₂= (0,064 - 0,074) ммол/г при Κ=(1,8-2,0)·10³ М^-1.

Микробная биомасса пробиотических бактерий содержит бактерии рода ВасШиз 8иЬШшз или ЬасГоЬасШиз или ВйбоЬаШепит в количестве не менее 10⁹ КОЕ на 1 г сорбента.

С другой стороны, изобретение относится к способу использования сорбента в качестве лечебнопрофилактического средства, в частности в ветеринарной медицине, для профилактики и лечения токсикозов, свободно-радикальных патологий, диарейных синдромов, вызванных экотоксикантами, вирусными и бактериальными инфекциями, для профилактики и лечения болезней животных, вызванных микотоксинами, пестицидами, кормами плохого качества (с высоким перекисным числом) для всех видов животных.

Для профилактики экотоксикозов и отравлений недоброкачественным кормом препарат дают вместе с кормом в количестве (0,15-2,0) мас.% корма в зависимости от степени зараженности корма.

Для профилактики и комплексного медикаментозного лечения инфекционных заболеваний, вызванных бактериями 8а1топе11а еп1етШ1з, ЕзсйепсШа сой, ОозИзШа, Раз!еиге11а, СатрШоЬас!епа, 8!арйу1ососс1, 81гер1ососсг вирусами болезни Ньюкасла, Гамборо, инфекционного бронхита и инфекционного ларинготрахеита препарат вводят в желудочно-кишечный тракт (ЖКТ) вместе с кормом в количестве (0,2-1,5) г/кг массы тела (1-2) раза в сутки в течение (5-14) суток до исчезновения клинических признаков заболевания.

Антимикробное действие сорбента возможно усилить введением ионов серебра посредсвом сорбции ионов серебра из раствора нитрида серебра с концентрацией (9,7· 10^-4 - 0,97) г/л Ад⁺ или введением пробиотических бактерий в количестве не менее 10⁹ КОЕ/1 г сорбента. В качестве пробиотических бактерий используют бактерии рода ВасШиз 8иЫШиз или Ьас!оЬасШиз или ВйбоЬас!етшт.

Сорбент может также использоваться для увеличения содержания волокон в корме в качестве пищевой добавки, так как при обработке исходного материала в процессе получения сорбента концентрация растительных волокон увеличивается до 98%.

Изобретение поясняется фиг. 1-22.

Фиг. 1 - фото микроструктуры лигнина;

фиг. 2 - фото микроструктуры целлюлозы;

фиг. 3 - фото микроструктуры меланина;

фиг. 4 - фото морфологии поверхности сорбента (увеличение в 9000 раз);

фиг. 5, 6, 7 - графики изотерм адсорбции бензола, метанола и воды соответственно лигнином (1), целлюлозой (2) и меланином (3) соответственно;

фиг. 8 - график изотермы сорбции и зависимость степени извлечения от концентрации серебра, где С- равновесная концентрация серебра, цмоль/л, г -сорбция серебра, цмоль/г сорбента, ν - степень извлечения серебра, %;

фиг. 9 - фото морфологии поверхности сорбента (увеличение в 5000 раз);

фиг. 10 - фото морфологии поверхности сорбента (увеличение в 1000 раз);

фиг. 11 - фото морфологии поверхности сорбента, модифицированного микробной биомассой пробиотических бактерий (увеличение в 1000 раз);

фиг. 12 - диаграмма сравнения ингибирующей активности сорбента на скорость пероксидации внутренних сегментов фоторецепторов, индуцированную ионами Ее⁺² в присутствии аскорбата;

фиг. 13 - динамика остаточных количеств линдана в печени цыплят;

фиг. 14 - динамика остаточных количеств линдана в мышцах цыплят;

фиг. 15, 16 - хромматограммы, свидетельствующие о способности и эффективности сорбции пестицидов сорбентом;

фиг. 17 - тушение хемилюминесценции люминола сорбентом;

фиг. 18. - активность α-амилазы в слизистой оболочке тощей кишки;

фиг. 19 - содержание малонового диальдегида в сыворотке крови цыплят;

фиг. 20 - содержание гидроперекисей в сыворотке крови цыплят;

фиг. 21 - кислотное число жира цыплят через 30 дней после начала опыта;

фиг. 22 - содержание МДА в мозге цыплят через 30 дней после начала опыта.

Примеры способа получения сорбента, сорбент и также его использование приведены ниже.

Разработанный способ согласно изобретению обеспечивает на стадии измельчения разрушение клеточных оболочек с образованием микрочастиц, доступных для химических реагентов. Гидролиз измельченного сырья кислотными реагентами с концентрацией 0,1-36% (серной или соляной или ортофосфорной кислотой) производится в режиме кипения при повышенном давлении (в интервале: 0,1-0,7 МПа). Продолжительность процесса гидролиза существенно уменьшается (от 0,3 до 4,5 ч ) в отличие от прототипа, а также сокращает процесс уменьшается расход кислоты. При этом происходит эффективное расщепление лигноуглеводного комплекса, частичная деполимеризация целлюлозы и образование в присутствии кислорода сильнокислых, карбоксильных, фенольных, карбонильных, гидроксильных и поверхностных групп. Промывка продукта гидролиза 0,1-1,0% раствором гидроокиси аммония, или гидроокиси натрия, или гидроокиси калия до достижения значения рН 3,5-4,5 позволяет эффективно нейтрализовать

- 4 018404 остатки кислоты и создать оптимальный баланс биологически активных углеродсодержащих веществ состава: биофлавоноиды в количестве (142,6-615,5) мг/%, полисахариды (глюкозу, фруктозу, сахарозу) (0,195-0,444)%, пектины - (0,499-1,912)%, лейкоантоцианы - (0,1-2,76)%, катехины - (0,2-146,6) мг/%, фенолкарбоновые кислоты - (212,5-697,9) мг/%, дубильные вещества - (0,58-0,83)%. При такой промывке щелочью в отличие от прототипа существенно снижается последующий расход воды на промывку продукта гидролиза и уменьшается энергоемкость процесса в целом. Для улучшения эффективности промывки перед обработкой продукта щелочным раствором возможно дополнительно промыть продукт гидролиза водой в режиме кипения в течение 10-15 мин, что уменьшает расход щелочи для нейтрализации остаточной кислоты.

Пористая многоуровневая матрица на основе лигнина, целлюлозы и меланина с интегральной пористостью (0,04-50) мкм представлена на фиг. 1-3, 4, 9, 10. Матрица сорбента представляет собой гетерополимер нерегулярного строения из подструктур с широким полимодальным распределением пор. Подструктуры физико-химически связаны между собой и сформированы частицами лигнина ленточноспиральной формы (фиг. 1) с размером пор 0,04-15 мкм, волокнами целлюлозы продольно-вытянутой формы (фиг. 2) с размерами пор 5-50 мкм и агломератами меланина (фиг. 3) размером до 400 мкм из частиц трубчатоподобной формы длиной до 5 мкм. Наличие средних и крупных транспортных пор, а также указанные выше особенности химической природы внутренней поверхности матрицы гетерополимера, в сочетании с оптимальным балансом биологически активных веществ и меланином, обеспечивают как адсорбционные характеристики (фиг. 4, 6, 12), так и высокую антиоксидантную и антирадикальную активность сорбента, что обеспечивает его медико-биологическую активность.

Важной особенностью химической природы внутренней поверхности матрицы гетерополимера сорбента является наличие протогенных (карбоксильные и гидроксильные) ионообменных групп, благодаря чему он является слабым катионообменником.

Как структурированные в пористую многоуровневую матрицу химические компоненты гетерополимера, лигнин, целлюлоза и меланин, обладающие эффективными адсорбционно-структурными характеристиками, так и наличие химических групп кислотного характера (гидроксильные, карбонильные, карбоксильные и др.) на поверхности сорбента позволяют использовать полученную матрицу для модификации энтеросорбента различными микроэлементами металлов, например, серебром или антагонистически активной биомассой пробиотических бактерий.

Сорбент может быть по 1-варианту модифицирован путем импрегнирования ионами серебра, как описано выше.

Модификация путем иммобилизации антагонистически активной биомассой пробиотических бактерий основана на их способности проникать в поры сорбента, размножаться в них, давать рост дочерним микробным клеткам и образовывать конгломераты пробиотиков различных форм и размеров, в зависимости от места их посадки в структуре многоуровневой матрицы. Иммобилизацию осуществляют инкубированием микробной взвесью бактерий пробиотиков, например, ВасШик 8иЫШик или ЬасЧоЬасШик или ВШбоЬасЧегшш. После высушивания до воздушно-сухого состояния, сорбент, представляет собой комплексный антибактериальный препарат, гетерополимер, с высокой антагонистической активностью к ряду патогенных микроорганизмов. Преимуществом сорбента, полученного таким способом, является его высокая приживаемость в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ), сохранение жизнеспособности в течение длительного времени после высушивания, что обеспечивает пролонгирование действия на всем протяжении ЖКТ.

Ниже приведены примеры реализации изобретения и результаты исследований сорбента, полученного разработанным способом.

Пример 1 (столбец 2 табл. 1).

Исходное сырье - плодовую оболочку семян подсолнечника измельчают до 0,5-3,5 мм и обрабатывают 36% раствором соляной кислоты при модуле твердое/жидкое 1:7 в режиме кипения под давлением 3 атм в течение 2,0 ч. Далее продукт гидролиза промывают водой с одновременным кипячением в течение 10 мин, затем отделяют твердую фазу и промывают ее 1% раствором гидроокиси аммония до достижения рН 4,5 потом вновь отделяют твердую фазу и продолжают ее промывку умягченной водой до достижения в промывной воде значения рН 6,2- 6,4. Полученный продукт сушат до влажности 22% и получают готовый сорбент, который подвергают контрольным исследованиям. Показатели полученного сорбента представлены в табл. 1 (столбец 2).

Пример 2 (столбец 3 табл. 1).

Измельченное как и в примере 1 исходное сырье обрабатывают 28% раствором серной кислоты при модуле твердое/жидкое 1:7 в течение 1,5 ч при кипении под давлением 3 атм, промывают водой с последующим кипячением под давлением в течение 15 мин, затем отделяют твердую фазу и промывают ее 0,5% раствором гидроокиси калия до достижения рН 4,0 и продолжают промывку умягченной водой до достижения в промывной воде значения рН 5,8- 6,3. Полученный продукт сушат до влажности 12,5% и готовый сорбент подвергают контрольным исследованиям. Результаты исследований представлены в табл. 1 (столбец 3).

- 5 018404

Показатели	(*) Примеры реализации изобретения
1	2	3	4	5	6	7
1	2	3	4	5	6	7	8
М±т	М+т	М±т	М±т	М±т	М+т	М±т
Глюкоза %	0,155±О,ООЗ	0,185+0,003	0,2210,005	0,2110,007	0,205+0,0!	0,2010,007	0,27510,003
Фруктоза %	0,08510,01	0,0710,01	0,11510,003	0,08410,003	0,07810,002	0,16510,003	0,16510,003
Сахароза %	0,11810,002	0	0	0	0	0	0,01910,0005
Сумма раствор, сахаров %	0,36+0,003	0,265+0,01	0,3410,003	0,29310,005	0,29+0,007	0,29+0,005	0,4410,004
Клетчатка (целлюлоза) %	47,6910,03	46,5+0,35	50,45+0,37	44,45+0,09	50,95+0,1	40,5+0,07	47,5+0,03
Гидропектин %	0,5510,004	0,15+0,001	0,1210,001	0,11+0,004	0,59+0,009	0,65+0,008	0,9910,008
Протопектин %	0,44+0,002	0,3410,008	0,45+0,001	0,38+0,004	0,51+0,004	1,2710,009	0,5110,008
Сумма пектиновых в-в%	0,98510,007	0,49+0,004	0,5710,002	0,49+0,009	1,110,0	1,9110,002	1,5+0,002
Лейкоантоцианы мг%	1,6710,16	0	0	0	2,7610,06	1,7210,14	1,6210,09
Катехины мг%	105,012,8	0	146,6±4,15	0	127,4+3,45	104,018,67	96,213,47
Флавонолы мг%	287,511,5	343,7+0,02	615,4516,0	514,4+1,5	226,914,5	310,010,01	235,810,004
Фенолкарб. кислоты мг%	350,8412,78	236,66+3,34	697,93+1,95	540,014,45	324,1812,78	299,2+0,56	391,6810,01
Дубильные вещества %	0,83+0,004	0,67+0,007	0,77+0,015	0,6710,007	0,6710,01	0,58+0,007	0,7910,007
Лигнин %	46,7710,33	52,810,54	58,1210,67	51,510,63	42,3511,02	35,6810,96	39,9310,084

(*) Примечание: состав сорбента может незначительно варьироваться в зависимости от сорта семян подсолнечника, места и климатических условий его произростания

Пример 3 (столбец 4 табл. 1).

Измельченное исходное сырье подвергают гидролизу 20% раствором серной кислоты с модулем твердое/жидкое 1: 6 в течение 1,5 ч при температуре кипения под давлением 2 атм, отделяют твердую фазу и промывают 0,1% раствором гидроокиси калия до получения рН 4,5 с последующей промывкой умягченной водой до рН 5,2, сушат до влажности 7,8% и проводят контроль полученного сорбента. Электронная фотография характерной микроструктуры поверхности многоуровневой матрицы представлена на фиг. 10 (увеличение в х1000 раз).

Пример 4 (столбец 5 таблицы 1).

Исходное сырье подвергают гидролизу 16% раствором соляной кислоты с модулем твердое/жидкое 1: 7 в течение 1,5 ч при температуре кипения под давлением 1 атм, отделяют твердую фазу и промывают 1% раствором гидроокиси аммония до получения рН 3,5, с последующей промывкой умягченной водой до рН 4,9, сушат до влажности 10,4% и проводят контроль полученного сорбента.

Пример 5 (столбец 6 табл. 1).

Исходное сырье подвергают гидролизу 5% раствором ортофосфорной кислоты с модулем твердое/жидкое 1: 3 в течение 4,5 ч при температуре кипения под давлением 1,5 атм, отделяют твердую фазу и промывают 0,1% раствором гидроокиси калия до получения рН 4,5, с последующей промывкой умягченной водой до рН 5,0, сушат до влажности 8,5%. Полученный сорбент имеет показатели, представленные в таблице.

Пример 6 (столбец 7 таблицы 1).

Исходное сырье подвергают гидролизу 0,3% раствором серной кислоты с модулем твердое/жидкое 1: 8 в течение 4,5 ч при температуре кипения под давлением 2,5 атм, отделяют твердую фазу и промывают 0,5% раствором гидроокиси натрия до получения рН 4,2, с последующей промывкой умягченной водой рН 5,8, сушат до влажности 0,8% и проводят контрольные исследования. Полученный сорбент имеет показатели, представленные в табл. 1.

Пример 7 (столбец 8 таблицы 1).

Исходное сырье подвергают гидролизу 10% раствором серной кислоты с модулем твердое/жидкое 1: 8 в течение 0,5 ч при температуре кипения под давлением 2 атм, отделяют твердую фазу и промывают 0,1% раствором гидроокиси аммония до получения рН 4,2 с последующей промывкой умягченной водой до получения рН 5,9, сушат до влажности 19,8% и проводят контрольные исследования, сорбент имеет показатели, представленные в табл. 1.

Пример 8. Получение сорбента, модифицированного серебром

Сорбент, полученный согласно любому из примеров 1-7, возможно импрегнировать ионами серебра следующим образом. В раствор АдЫСЬ с концентрацией ионов серебра С=0,057 г/л вводят сорбент, полученный согласно примеру 3, в виде суспензии с концентрацией 100 г/л и величиной рН = 6,3. Далее смесь перемешивают и выдерживают в статических условиях до установления равновесной концентрации в течение 30-40 мин. Величину сорбции ионов задают по формуле Фрейндлиха: г = К-С^п, где г - величина сорбции, ммоль/г; К, П(_1>2) - константы; С - равновесная концентрация ионов серебра, М^-1. Затем жидкую фазу отделяют фильтрацией, твердый остаток промывают дистиллированной или умягченной

- 6 018404 водой и высушивают при температуре 100°С. Полученный сорбент имеет следующие характеристики:

Влажность, мас.%19,1

Удельная емкость, г/л240

Кислотность экстракта, рН2,35

Остаток после прокаливания, %0,6

Сорбционная способность по метиленовому голубому(рН

7,0), мг/г56,0

Число ионов серебра с активно связанными центрами с сильной связи, π, (Κ=2,5·10’⁴Μ’¹), ммол/г 0,0130,019

Число ионов серебра с активно связанными центрами с константой слабой связи, п, (К=1,8«10’³М·'), ммол/г 0,064 0,074

Пример 9. Получение сорбента, модифицированного микробной биомассой пробиотических бактерий.

Сорбент, полученный по 4-му варианту, прогревают в сушильном шкафу при температуре +80°С в течение 2-х ч. Готовят взвесь пробиотических бактерий. Для чего с суточного роста бактерий ВасШик 8иЬй1ш8 или Ьас1оЬасШи8 или ВШйоЬас1егшт (их соответствующего штамма) на плотной среде делают соскоб в физиологический раствор и по оптическому стандарту мутности доводят до 100 млн (10⁸) колониеобразующих единиц (КОЕ)/мл. Далее сорбент инкубируют с полученной микробной взвесью в течение 1 ч при модуле твердая/жидкая фаза 1:10. При выбранных параметрах 1,0 г сорбента содержит порядка 10⁹ КОЕ пробиотических бактерий, что соответствует разовой лечебно-профилактической дозе, при условии 100%-ной сорбции их из микробной взвеси. Затем твердую фазу отделяют от жидкой и высушивают при температуре +37°С. Готовый сорбент испытывают на сорбцию, а также контролируют жизнеспособность адсорбированных бактерий по стандартной методике.

Адсорбционные и структурные свойства сорбентов, полученных согласно примерам 3, 8 и 4, 9, представлены в табл. 2, 3 соответственно.

Таблица 2

Приме Р	а_т, ммоль/г	кДж/моль	А, м²/г	V, см³/г	V ' /ηΐΊ см³/г
Н₂О	с₆н₆	Н₂О	с₆н₆	Н₂О	С₆Нб	Н₂О	с₆н₆	Н₂О	С₆Н₆
№3	1,85	0,23	5,7	5,9	117	56	0,225	0,151	0,028	0,015
№8	1,98	0,23	6,5	5,1	125	55	0,^29	0,133	0,029	0,014

где а_т, ммоль/г - емкость монослоя, Οι λ кДж/моль - чистая теплота адсорбции;

А, м²/г - удельная поверхность;

V, см³/г - общий объем пор;

У_т1, см³/г - объем микропор.

Таблица 3

Пример	@т> ммоль/г	С	βι-λ, кДж/моль	А, м²/г	К, см³/г
Н₂О	с₆н₆	Н₂О	с₆н₆	Н₂О	С₆Н₆	н₂о	С₆Н₆	Н₂О	С₆Н₆
8	1.85	0.23	10	11	5.7	5.9	139	55	0.23	0.15
№9	2.50	0.089	20	51	7.3	9.6	ι 188	16	0.25	0.097

где С - константа уравнения БЭТ.

Разработанный сорбент и способ его получения испытан в условиях опытного производства. Новый препарат хорошо себя зарекомендовал в качестве лечебно-профилактической кормовой добавки к кормам сельскохозяйственных животных, а также при остром и хроническом отравлении птиц пестицидами, микотоксинами, недоброкачественными кормами и заражении некоторыми бактериями и вирусами.

В опытах ίη-νίίτο и ίη-νίνο определены оптимальные биологически активные дозы и разработаны схемы применения сорбента в качестве фармацевтического средства.

Ниже приведены примеры реализации изобретения.

Пример 10. Эффективность сорбции микотоксинов в условиях ίη νίίτο

В табл. 4 проиллюстрирована эффективность связывания различных микотоксинов сорбентами в сравнении с известным в ветеринарной практике препаратом Микосорб, (адсорбция, % микотоксинов).

Как видно из табл. 4, сорбционная активность сорбента выше, чем широко используемого коммерческого препарата для сорбции микотоксинов, Микосорб.

- 7 018404

Таблица 4

Вид сорбента	Микотоксины
Афяотоксин В1	Зеараленон	Охратоксин А	Т-2 токсин
Меланинсодержащий фитосорбент	(*)Ю0	(*)99,67±0,3	(**)77,87±12,3	(*)93,6+6,4
Меланинсодержащий фитосорбент +Ад	(*)100	(*)100	64,73+	(*)95,45±4,6
Микосорб	(*)80,57±8,9	(*)76,56±18,2	(***)77,31+1,8	(*)85,95±14,1

Примечание: (*) время сорбции - 15 мин;

(**) время сорбции - 30 мин;

(***) время сорбции - 60 мин в условиях конкурентного связывания.

Пример № 11. Антибактериальная активность сорбентов в условиях ίη νίίτο Таблица 5

Вид сорбента	Экспозиция	ЕйарЬ.аигеиз штамм «Соуап I»	Е. соН штамм «А-М»	Раз1. Ми11ос\|ба штамм КМИЭВ-26
Исходный	30 мин.	99,8	21,5	9,9
сорбент	24 часа	100,0	95,8	41,0
Сорбент с ионами серебра	30 мин.	100,0	91,9	50,2
24 часа	100,0	100,0	100,0

Как видно из табл. 5, сорбент с ионами серебра уже в первые 30 мин экспозиции эффективно подавляет рост колоний бактериальных культур микроорганизмов §1арй.аигеи8 штамм Τοναη I, Е. сой штамм А-М и Рак!. МиИошба штамм КМИЭВ-26. Такой эффект обусловлен совместным комплексообразующим, биохимическим и каталитическим действием биологически активной формы сорбента обогащенного серебром, на бактериальные ферменты, белки и мембранные структуры энтеропатогенных микробов.

Сорбционная активность сорбента в отношении микробиальных клеток по сравнению с подобными сорбентами, используемыми в ветеринарии, представлены ниже.

По степени увеличения чувствительности к действию сорбента исследованные микроорганизмы располагаются в следующем порядке: РайеитеПа ши11ос1ба, ЕксйепсЫа сой, 81арйу1ососси5 аитеик. При этом установлено, что грамположительная микрофлора более чувствительна к действию сорбента, нежели грамотрицательная.

В табл. 6. приведена сравнительная сорбционная емкость сорбентов по отношению к микробным клеткам в сравнении с применяемыми в ветеринарной практике аналогами.

Таблица 6

Сорбенты	Адсорбировано метиленового голубого, г на 1 г сорбента	Перерасчет на микробные клетки, млн/г
СВ-1	0,0226	226
СВ-2	0,0220	220
«Микосорб»	0,0066	66
«Лигнасорб»	0,0103	103

Как видно из табл. 6, сорбционная емкость сорбента к микробным клеткам в 3,3-3,4 раза превышает сорбционную емкость Микосорба и в 2,1-2,2 раза - Лигнасорба (коммерческие сорбенты).

Пример № 12. Антивирусная активность сорбента в условиях ίη νίίΐΌ

Экспериментально установлена антивирусная активность сорбента в отношении широко распространенных вирусов болезней птиц, вируса Ньюкаслской болезни (НБ), инфекционной бурсальной болезни (ИББ) - болезнь Гамборо и инфекционного бронхита кур (ИБК) и приведена в табл. 7, 8, 9.

- 8 018404

Защитное действие сорбента выявлялось на различных линиях перевиваемых культур клеток: РЬ (амнион человека), СПЭВ (почка эмбриона свиньи), МДВК (почка быка), РКНК-4 (почка эмбриона зеленой мартышки); и первично-трипсинизированных: ФЭК (фибробласты эмбриона кур).

В качестве инфекционного материала использовали живые сухие вакцины против Ньюкаслской болезни птиц (штамм Ла Сота), инфекционного бронхита кур (штамм Н-120) и болезни Гамборо (штамм КМИЭВ-13), которые растворяли в физиологическом растворе. Инфекционную дозу вируса определяли титрованием культуральной жидкости выше указанных культур клеток.

В табл. 7 представлены результаты влияния концентрации сорбента на титры вирусов ИББ и ИБК в культурах клеток РЬ и СПЭВ.

Таблица 7

Концентра ция сорбента, мг/мл	Снижение титра вируса ИББ в опыте по сравнению с контролем, 1§ ТЦД50	Снижение титра вируса ИБК в опыте по сравнению с контролем, 1д ТЦД50
РЬ	СПЭВ	РЬ	СПЭВ
0,325	0,75	0,5	1,0	0,75
0,650	1,5	1,25	1,5	1,25
1,25	2,5	2,0	2,5	1,5
2,5	2,75	2,25	3,25	2,75
5,0	3,25	3,0	3,75	3,25
10,0	3,0	2,5	3,25	2,25
20,0	2,75	2,5	2,0	1,75

Как видно из табл. 7, сорбент эффективно предохраняет культуру клеток РЬ и СПЭВ от развития ИББ и ИБК. Под его действием снижается титр вируса в опыте по сравнению с контролем на 0,5-3,75 1д ^ТЦД50/мл.

В табл. 8 представлено подавление инфекционной активности вирусов ИБК и ИББ сорбентом в зависимости от сроков его внесения на монослой клеток СПЭВ.

Таблица 8

Сроки внесения сорбента	Концентрация сорбента, мг/мл	Титр вируса, ТЦД50/мл	Снижение титра вируса в опыте по сравнению с конт-ролем, 1§ ТЦД_5О/_НЛ
За 1 час до инфицирования клеток вирусом ИБК	5,0	0±0,23	4,5
За 1 час до инфицирования клеток вирусом ИББ	5,0	0±0,12	3,75
Через 1 час после инфицирования клеток вирусом ИБК	5,0	3,0±0,52	1,5
Через 1 час после инфицирования клеток вирусом ИББ	5,0	2,5±0,41	1,25
Контроль вируса ИБК (титр, 1д ТЦД 50/мл)		4,5±0,65	-
Контроль вируса ИББ (титр, 1д ТЩЕо/мл)		3,75±0,37	-

Как видно из табл. 8, обработка вирусной суспензии сорбентом приводит к подавлению инфекционной активности вируса ИБК и зависит от продолжительности времени обработки. Так, внесение на монослой клеток смеси сорбента с вирусной суспензией после 30 или 60-минутной экспозиции приводит к полному подавлению инфекционной активности вируса ИБК, что выражается в отсутствии ЦПД (цитопатический эффект) в опыте по сравнению с контролем, где наблюдается 100%-ная дегенерация монослоя клеток.

В табл. 9 приведены данные по влиянию сорбента на титр вируса Ньюкаслской болезни птиц.

- 9 018404

Таблица 9

Концентрация сорбента, мг/мл	0	0,325	0,65	1,25	2,5
Титр вируса НБ в РГА, 1од₂	8,0	4,0	2,0	0	0

Титр вируса НБ без добавления сорбента составляет 8,0 1од₂. При добавлении сорбента в концентрации 1,25 и 2,5 мг/мл вируссодержащего материала вирус в РГА не выявлялся. В концентрациях 0,325 и 0,65 мг/мл наличие вируса отмечается, но в более низких титрах, чем в контроле.

Таким образом, в исследованиях ίη νίίτο подтверждено защитное действие сорбента в культурах клеток БЬ и СПЭВ, инфицированных вирусами инфекционной бурсальной болезни птиц (болезнь Гамборо) и инфекционного бронхита кур, проявляющееся в снижении титра вирусов на 3,25-3,0 1д ТЦД_50/млпри инфекционной бурсальной болезни птиц и на 3,75-3,25 1д ТЦД_50/мл при инфекционном бронхите кур по сравнению с контролем.

Пример 13· Антиоксидантная активность сорбента в условиях ίη νίίτο

Антиоксидантная активность (АОА) сорбента (суспензия в фосфатном буфере) изучалась методом тушения хемилюминесценции люминола. Реакционная среда (общий объем 3 мл) содержала 50 тМ Кфосфатный буфер (рН 7.4), 100 μΜ ЭДТА, 2 μ М человеческого гемоглобина. 90 μΜ люминола и различные концентрации сорбента. В контрольном эксперименте 0,1 М К-фосфатный буфер был использован вместо сорбента. Хемилюминесценция инициировалась добавлением 130 μΜ перекиси водорода в реакционную среду. Типичная картина тушения хемилюминесценции люминола представлена на фиг. 17 (степень тушения люминесценции люминола после добавления гомогенной суспензии сорбента в фосфатном буфере при концентрациях 170, 250, 410, 810 мг/мл, кривые 2-6 соответственно, кривая 1 контроль). Очевидно, что сорбент проявляет АОА, эффективность которой зависит от концентрации сорбента. Вычисления АОА сорбента относительно известного антиоксиданта аскорбата дали следующий результат: антиоксидантная активность сорбента равна 0,04± 0,01 ммоль аскорбата на 1 г сухого сорбента.

Пример 14. Сорбционная активность сорбента по отношению к пестицидам в условиях ίη νίίτο

Эффективность связывания различных пестицидов сорбентом в условиях ίη νίίτο проиллюстрирована на фиг. 15, 16. На фиг. 15 представлены хроматограммы 2, 4-ДБЭ. Перед (а) и после (б) адсорбции сорбентом при рН »7, объем экстракта 2 мл. График (б) имеет шкалу 1: 16. Пик при времени удерживания: 12,88 мин - 2, 4-ДБЭ. На фиг. 16 представлены хроматограммы смеси пестицидов СЬР-206 до (а) и после адсорбции (б) сорбентом при рН » 7, объем экстракта 2 мл. График (б) имеет шкалу 1:10. Пики при временах удерживания: 1-3мин - примеси в экстрагенте (гексане); 5-7 мин - продукты разложения пестицидов; 11,44 мин - γ-гексахлорциклогексан, γ-ГХЦГ, (линдан); 12,28-гептахлор; 13,29 - альдрин; 17,88диэльдрин, 18,59- эндрин; 20,05 - ДДД; 20,67 - ДДТ.

Таким образом, можно сделать вывод, что сорбент эффективно связывает экологически опасные пестициды.

Пример 15. Профилактика микотоксикозов

Испытания проводили на цыплятах-бройлерах по следующей схеме: три группы цыплят по 25 голов в каждой размещали в одном виварии в одинаковых условиях микроклимата. Исследования проводили в течение 30 дней до достижения птицей 45-и дневного возраста. Цыплята 1-й группы получали гроуэрный рацион бройлеров с содержанием микотоксинов Т-2 в количестве 100 мкг/кг массы корма и охратоксин А-62 в количестве 62 мкг/кг массы корма. Цыплята 2-ой группы получали аналогичный рацион, при этом в корм дополнительно вводили сорбент в количестве 1% к массе корма. Цыплята 3-й группы получали гроуэрный рацион в чистом виде без микотоксинов и сорбента. Перекисное число жира всех кормов соответствовало норме и не превышало 0,1% к массе корма. В процессе испытаний контролировали каждые 15 дней массу цыплят, каждый день проверялись клинические отклонения, в эти же сроки делался забор крови из подкрыльцовой вены для определения сыворотки, гематологических и биохимических показателей. По окончании испытаний птица была убита и проведено патологоанатомическое вскрытие с отбором образцов печени и почек для токсикологических исследований. Также отбирали сердце, печень, селезенку, Фабрициеву сумку, железистый желудок для определения их массы и гистологических исследований. В табл. 10 приведены токсико-биологические показатели печени и почек исследованных птиц.

- 10 018404

Таблица 10

Группа животных	Кол-во проб, шт.	Показатели
К-во инфузорий в 1,0см³х10⁴, М±т	Относительная биологическая ценность, %, М+гп	Токсичность
ПЕЧЕНЬ
Первая	3	309,6±2,25	69,9+1,02	Выражена
Вторая	3	438,1+4,35	98,9+0,15	Нет
Третья	3	443,0+3,46	100,0+0,21	Нет
ПОЧКИ
Первая	3	327,4+3,24	70,1+0,24	Выражена
Вторая	3	416,1+2,56	89,1+0,35	Слабо выражена
Третья	3	467,0+2,26	100,0+0,43	Нет

Как следует из табл. 10, токсичность проб печени и почек 1-й группы хорошо выражена и соответственно наблюдается низкая относительная биологическая ценность продуктов (69,9 и 70,1% соответственно). В пробах продуктов 2-й группы птиц, которые получали сорбент, этот показатель выше (98,9 и 89,1% соответственно) и приближается к 3-ей контрольной группе, а токсичность отсутствует или слабо выражена. Динамика изменения массы показывает, что во 2-й группе цыплят, которые получали сорбент, среднесуточный привес был выше на 11,2%, чем в контрольной 3-й группе. Профилактическую эффективность при микотоксикозе, вызываемом зеараленоном, изучали в аналогичных условиях. Исследования проводили на молодняке свиней начального периода доращивания.

Были сформированы три группы здоровых поросят 1,5-месячного возраста по 5 голов в каждой. Предварительно у 3-х животных из каждой группы была проведена операция по наложению фистулы на тощую кишку с целью дальнейшего анализа кишечного содержимого и изучения роли сорбента в процессе пищеварения при микотоксикозе.

Поросятам 1-й группы в течение 3-х недель скармливали корм, пораженный микотоксином зеараленон в концентрации 0,38-0,40 мг/кг корма с перекисным числом жира, равным 0,1-0,25% иода. Определение токсичности корма проводили еженедельно. Животным 2-й группы скармливали корм, пораженный зеараленоном с добавлением СВ-1 в количестве 1,5 г на 1 кг корма. Поросята 3-й группы служили контролем, им скармливали доброкачественный корм.

В течение всего эксперимента проводили полное клиническое исследование животных, в начале опыта и на 7-е, 14-е и 21-е сутки (окончание эксперимента) брали пробы крови для гематологических и биохимических исследований. Взятие крови производили из орбитального венозного синуса. В начале и на 21-е сутки проводили контрольное взвешивание поросят для определения среднесуточного прироста.

Наряду с вышеуказанным проводили исследование тонкокишечного пищеварения, для чего содержимое тонкой кишки брали через фистулу при помощи зонда. О характере кишечного пищеварения судили по активности альфа-амилазы. При этом альфа-амилазу определяли в жидкой части кишечного содержимого, в биоптате на поверхности слизистой оболочки, в трех десорбируемых фракциях и в ткани слизистой оболочки.

На 21-е сутки опыта проводили диагностический убой экспериментальных поросят с целью морфологического и гистологического исследования органов и тканей, ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и внутренних органов.

В эксперименте показано, что потребление животными недоброкачественного корма с повышенным содержанием зеараленона (0,38-0,40 мг/кг корма) вызывало патологический процесс, характеризовавшийся развитием острого воспаления и воспалительно-дистрофическим поражением печени. В дальнейшем процесс принимал хроническое течение, и появлялись признаки развивающейся почечной недостаточности. Добавление в корм сорбента в количестве 1,5 г/кг корма (животные 2-й группы) оказывало выраженный защитный эффект, который проявлялся в снижении интенсивности показателей, характеризующих данный патологический процесс. При этом перехода заболевания в хроническую форму и симптомов почечной недостаточности обнаружено не было, способствовал меньшему угнетению процессов тонкокишечного пищеварения, с последующим его восстановлением;

улучшении биологической ценности мясных продуктов: зеараленон при поступлении внутрь с кормом значительно нарушал функциональное состояние печени и почек, что сказывалось на относительной биологической ценности этих органов. При добавлении в корм содержащий микотоксины сорбента их биологическая ценность снижалась незначительно в сравнении со здоровыми животными.

Таким образом, показано, что процессы пищеварения в тонком отделе кишечника, оцененные по активности α-амилазы, снижены, при этом применение сорбента способствует предотвращению угнетения процессов пищеварения, что проиллюстрировано на фиг. 18. Функциональное состояние печени и почек также значительно нарушается, но применение сорбента способствует сохранению их биологической ценности в сравнении со здоровыми животными.

- 11 018404

Пример 16. Лечение диарейного синдрома у птиц

Для определения эффективности лечения было сформировано 3 группы цыплят 10-дневного возраста: 2 опытные и 1 контрольная группы по 10 голов в каждой. Цыплята всех групп перед началом исследований были взвешены. В течение 5 дней цыплятам 1-ой опытной группы давали комбикорм с добавлением 1% сорбент-пробиотического комплекса (СПК) от массы корма; цыплятам 2-ой группы - давали корм с добавлением 10 мл (0,02 г) базового пробиотика - аналога, препарат бациллярный субтилис БПС-44 (ТУ У 24.4-00497360-691- 2003), серия 030804 согласно наставлению: разовая суточная доза 0,02/10 гол. (10 КОЕ/гол) в 10 мл воды; цыплята 3-й группы (контрольная) получали комбикорм без добавок препаратов. Затем цыплят всех групп взвесили и заразили перорально взвесью бактерий Екс11спс1иа со11 (патогенный птичий штамм СМ) по 1,2 мл в концентрации 250 млн. КОЕ/мл (1 заражающая доза - 300 млн. КОЕ). Наблюдение проводили за зараженными цыплятами и дальнейшее применение препаратов по вышеприведенной схеме вели еще 5 дней. Динамика привесов цыплят на равных этапах хода исследований отражена в табл. 11.

Таблица 11

Группа	Масса, г (фон)	Через 5 дней (заражение)	Через 10 дней
Масса, г	% привеса от фона	Масса, г	% привеса от фона/от заражения
1.СПК	104,0	151,9	46,1	239,8	130,6/57,9
2. БПС-44	148,4	42,7	236,9	127,8/59,6
3. (контроль)	132,5	27,4	216,4	108,1/63,3

За весь период наблюдения цыплята в двух первых группах не заболели, были клинически здоровы, активно потребляли корм и воду. В контрольной группе цыплят отмечены угнетение, потеря аппетита, снижение потребления воды, в 2-х случаях понос, на 4-й день пал один цыпленок. Как видно из табл. 11, сорбент-пробиотический комплекс (СПК) оказывает эффективное ростостимулирующее действие, превосходящее по действию базовый препарат БПС-44. По сравнению с базовым препаратом применение нового комплекса СПК в профилактический и лечебный период увеличило привесы цыплят на 2,8-3,4%. На фиг. 11 представлена поверхность сорбента, обогащенного микробиальной массой пробиотических бактерий (увеличение х 1000).

Пример 17. Изучение лечебно-профилактической эффективности сорбент-пробиотического комплекса при диарейных синдромах у поросят

Для изучения лечебно-профилактической эффективности сорбент-пробиотического комплекса при диарейных синдромах у поросят были сформированы группы поросят 1,5-месячного возраста по 7 голов в каждой. Диарейные синдромы были вызваны посредством заражения всех экспериментальных поросят культурой 8а1. С1ю1сгас в дозе 2-10⁹ КОЕ на 1 кг массы животного. Данная культура была выбрана для заражения животных, так как сальмонеллез является одной из самых опасных токсикоинфекций, приводящих к вспышкам пищевых инфекций у людей, одним из клинических признаков которого являются диарейные синдромы животных.

После появления и развития симптомов сальмонеллеза поросятам 1-й группы внутримышечно вводили антибиотик кобактан в дозе 0,5 мл на 10 кг массы поросенка и антитоксическую сыворотку в дозе 30 мл на животное.

Поросятам 2-й группы в качестве лечения внутримышечно вводили антибиотик кобактан в дозе 0,5 мл на 10 кг массы поросенка и внутрь задавали сорбент в дозе 1 г/кг массы животного. Животным 3-й группы внутримышечно вводили антибиотик кобактан в дозе 0,5 мл на 10 кг массы поросенка и внутрь задавали сорбент-пробиотик в дозе 1 г/кг массы животного. Поросятам 4-й группы внутрь задавали сорбент в дозе 1 г/кг массы животного. Животным 5-й группы - антибиотик кобактан в дозе 0,5 мл на 10 кг массы поросенка. Поросятам 6-й группы внутрь задавали сорбент-пробиотик в дозе 1 г/кг массы животного. Препараты животным вводили один раз в сутки в течение 5 дней. За 5 дней до заражения поросятам 6-й группы внутрь задавали сорбент-пробиотик один раз в сутки в дозе 1 г/кг живой массы.

Животным 7-й группы никакого лечения не оказывалось, они служили контролем.

В течение всего эксперимента проводили полное клиническое исследование животных, а также в начале, на 4-е и 10-е сутки (окончание эксперимента) брали пробы крови для гематологических и биохимических исследований. На 10-е сутки опыта провели диагностический убой экспериментальных поросят с целью морфологического, гистологического, бактериологического исследования органов и тканей, ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и внутренних органов.

Было установлено, что методы лечения молодняка свиней с применением кобактана и антитоксической сыворотки (1), кобактана и сорбента (2), кобактана и сорбента-пробиотика (3) при лечении поросят, больных сальмонеллезом, способствуют быстрому, на 5-е сутки, исчезновению клинических симптомов заболевания, ликвидации инфекционно-воспалительного процесса, состояния токсикоза и восстановлению функции печени.

У поросят, которым применяли с профилактической целью сорбент-пробиотик, на протяжении все

- 12 018404 го эксперимента (группа 6) достоверных изменений, указывающих на развитие инфекционновоспалительных процессов не отмечалось.

Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса и органов туш экспериментальных животных показала, что применение препаратов, использованных в эксперименте, не оказывает влияния на химический состав мышечной ткани убойных животных.

Физико-химические показатели мяса поросят всех групп достоверных различий не имели и находились в пределах нормы. Однако рН мяса животных 6-й группы был несколько ниже, что способствует лучшему созреванию и хранению мяса, показатели биологической ценности мяса животных подопытных и контрольной групп достоверных различий не имели. Проявлений токсичности не было установлено ни в одной из исследуемых проб, значительные сдвиги были обнаружены при определении биологической ценности и безвредности паренхиматозных органов животных, печени и почек. Наблюдалось некоторое снижение биологической ценности продукта в группах 4 и 5. В пробах данных групп также была выявлена слабо выраженная токсичность, которая проявлялась снижением степени размножения инфузорий на 10%, изменением их формы и наличием погибших инфузорий.

Таблица 12

Группа животных	Показатели
Количество инфузорий з 1,0 см³ *10⁴, М ± т	Относительная биологическая ценность %, М ± т	Токсичность
1	249.0 ±2.15	98.1 ± 1.30	Нет
2	252.2 ±3.25	98.2 ± 0.25	Нет
3	257.0 ±3.42	100.0 ±0.12	Нет
4	250.2 ±2.15	99.1 ±2.14	Слабо выражена
5	249.3 ± 3.54	97.5 ±1.58 !	Слабо выражена
6	260.0 ±2.15	100.0 ±0.24	Нет

В пробах 1-й, 2-й, 3-й и 6-й групп изменений вышеуказанных показателей не наблюдалось (см. табл 2.6.5, 2.6.4).

В пробах 1-й, 2-й, 3-й и 6-й групп изменений вышеуказанных показателей не наблюдалось. Токсические и биологические параметры мяса представлены в табл. 12, а печени в табл. 13.

Таблица 13

Группа животных	Показатели
Количество инфузорий в 1,0 см³ *10⁴, М±т	Относительная биологическая ценность, %, М±т	Токсичность
1-я	458,1 ±2,15	98,0 ± 1,25	Нет
2-я	438,1 ±4,35	98,9± 0,15	Нет
З-я	443,0 ± 3,46	100,0±0,21	Нет
4-я	309,6 ± 2,25	89,9 ± 1,02	Слабо выражена
5-я	312,6 ±4,45	86,2 ± 2,42 '	Слабо выражена
6-я	453,0 + 4,12	100,0 ±0,51	Нет

Пример 18. Лечебно-профилактическое действие меланинсодержащего сорбента при заражениях птиц вирусами Ньюкаслской болезни (НБ), инфекционного ларинготрахеита и инфекционного бронхита кур (ИБК) ίη νίνο.

Для изучения влияния сорбента на вирус болезни Ньюкасла в условиях ίη νίνο было сформировано 2 группы СПФ-цыплят (свободных от патогенных факторов, 8РР) 12-дневного возраста по 10 голов в каждой группе. Цыплята группы 1 (опыт) получали с кормом сорбент из расчета 1% в течение 5 дней до заражения и далее в течение 10 дней после заражения вирусом болезни Ньюкасла. Цыплята группы 2 (контроль) получали корм без сорбента. Заражение цыплят обеих групп проводили методом внутримышечной инъекции референтного вирулентного штамма Т-53 вируса болезни Ньюкасла в дозе 1000 ЭЛД₅₀\_мл в объеме 0,2 мл. Наблюдение за цыплятами вели в течение 10 дней после заражения.

На 4-й день после заражения в группе 2 (контроль) отмечено заболевание 2-х цыплят с характерными клиническими признаками: паралич задних конечностей, тремор головы. 2 цыпленка погибли. На 5

- 13 018404 день в группе 1 (опыт) заболел с характерными признаками 1 цыпленок. В группе 2 (контроль) заболело 3 цыпленка. В течение дня все заболевшие цыплята погибли. На 6 день в группе 2 (контроль) отмечено заболевание и гибель еще 2 цыплят. На 7 день после заражения в каждой группе заболело и погибло по 2 цыпленка. На 8 день в группе 1 заболел и погиб 1 цыпленок, в группе 2 заболел 1 (последний) цыпленок, который погиб на 9 день после заражения. В группе 1 при последующем наблюдении в течение 5 дней заболевания и гибели цыплят не наблюдалось. Данные по динамике заболеваемости и гибели цыплят приведены в табл. 14.

По данным табл. 14 в группе 2 наблюдалась 100% заболеваемость и гибель цыплят. В группе 1 (опыт) 60% цыплят не заболели.

Таблица 14

День после зараже НИЯ	Г руппа 1 ( опыт)	Группа 2 (контроль)
Заболело	Пало	Заболело	Пало
4	-	-	2	2
5	1	1	3	3 2
6	-	-	2
Ί	2	2	2	2
8	1	1	1	-
9	-	-	-	1
10	-	-	-	-
Итого	4	4	10	10
%	40	40	100	100

Все погибшие цыплята вскрывались и подвергались патологоанатомическому обследованию. У всех погибших цыплят наблюдали геморрагическое воспаление двенадцатиперстной кишки с некротическими очагами, выступающими над слизистой оболочкой, у 3 цыплят из группы 2, кроме того, наблюдались кровоизлияния в области перехода мышечного желудка в железистый.

Для изучения влияния сорбента на вирус инфекционного бронхита кур в условиях ίη νίΐτο было сформировано 2 группы СПФ-цыплят 12-дневного возраста по 10 голов в каждой группе. Цыплята группы 1 (опыт) получали с кормом сорбент из расчета 1% в течение 5 дней до заражения и далее в течение 10 дней после заражения вирусом инфекционного бронхита кур. Цыплята группы 2 (контроль) получали корм без сорбента. Заражение цыплят обеих групп проводили интраназальным методом референтным вирулентным штаммом Чапаевский вируса инфекционного бронхита кур в дозе 10000 ЭИД_50/мл в объеме 0,2 мл. Наблюдение за цыплятами вели в течение 10 дней после заражения. Взвешивание цыплят проводили до начала опыта (фон), через 5 дней (заражение) и через 15 дней (завершение опыта).

В течение периода наблюдения в опытной группе заболело 5 цыплят, в контрольной -8, гибели цыплят не наблюдалось. Заболевание протекало в легкой форме с респираторным синдромом (конъюнктивиты, риниты). На 10 день после заражения птица обеих групп была убита и подвергнута патологоанатомическому вскрытию. У больных птиц отмечали серозный катаральный экссудат в трахее. При исследовании сывороток крови на 10 день после заражения методом ИФА в опытной группе отсутствие антител выявлено в 30%, а в контроле в 10% случаев.

Прирост массы в опытной группе (табл. 15) за 10 дней после заражения составил 355,9 г, в контроле 302,3 г из расчета на 1 цыпленка.

Таблица 15

Группы	Фон	Через 5 дней	Через 15 дней
1 (опыт)	178,2+6,7	279,1+9,8	635,0+11,3
2 (контроль)	163,7+7,4	267,7+8,5	570,0+10,4

Для изучения влияния сорбента на вирус инфекционного ларинготрахеита птиц было сформировано 2 группы СПФ-цыплят 25-дневного возраста по 10 голов в каждой группе. Цыплята группы 1 (опыт) получали с кормом сорбент из расчета 1% в течение 5 дней до заражения и далее в течение 10 дней после заражения вирусом инфекционного ларинготрахеита. Цыплята группы 2 (контроль) получали корм без сорбента. Заражение цыплят обеих групп проводили интратрахеальным методом референтным вирулентным штаммом Богатищевский вируса инфекционного бронхита кур в дозе 10000 ЭИД₅₀.,_1;| в объеме 0,2 мл. Наблюдение за цыплятами вели в течение 10 дней после заражения. Взвешивание цыплят проводили перед заражением через 10 дней (завершение опыта).

В течение периода наблюдения в опытной группе заболело 6 цыплят, в контрольной -8, гибели цыплят не наблюдалось. Заболевание протекало в легкой форме с воспалением конъюнктивы. На 10 день после заражения птица обеих групп была убита и подвергнута патологоанатомическому вскрытию. У больных птиц отмечали фибринозное воспаление конъюнктивы. При исследовании сывороток крови на 10 день после заражения методом ИФА в опытной группе отсутствие антител выявлено в 20%, а в контроле в 10% случаев.

- 14 018404

Таблица 16

Группы	Фон (заражение)	Через 10 дней
1 (опыт)	734,4+11,0	1520+12,3
2 (контроль)	715,6+9,9	1480+12,8

Прирост массы в опытной группе (табл. 3) за 10 дней после заражения составил 785,6 г, в контроле 764,4 г из расчета на 1 цыпленка.

Таким образом, отмечена высокая лечебно-профилактическая эффективность сорбента при заражении цыплят вирусом болезни Ньюкасла: сохранность в опыте - 60%, в контроле - 0. Высокая эффективность сорбента по отношению к данному вирусу связана с его основной локализацией в тонком и толстом отделах кишечника.

Менее высокая эффективность сорбента наблюдалась при заражении цыплят вирусами инфекционного бронхита и инфекционного ларинготрахеита птиц, что связано с их основной локализацией в респираторных органах.

Пример 19. Лечение поросят, больных токсической гепатодистрофией.

Лечение проводили на двух группах поросят по 15 голов в каждой, больных токсической гепатодистрофией. Поросятам первой группы (подопытной) в качестве основного лечебного препарата задавался сорбент с ионами серебра вместе с кормом в дозе 0,5 г массы поросенка ежедневно до выздоровления. Животные второй группы (контрольной) находились в аналогичных условиях кормления и содержания с подопытными, а лечение проводилось стандартным препаратом - антибиотиком геомицин.

В процессе лечения у всех животных устанавливали клинический статус. В первые, 3, 6, и 9-е сутки лечения у 5-и поросят каждой группы брали кровь для биохимического исследования. В табл. 5 приведена динамика некоторых показателей жирового, пигментного, белкового и углеводного обменов под влиянием лечения (М± т, Р).

Как видно по результатам исследований у животных подопытной группы, получавших в процессе лечения меланинсодержащий сорбент с ионами серебра, уже на 3-й и тем более на 9-е сутки лечения происходит восстановление антитоксической функции печени, оптимизируются жировой и пигментный обмены. После курса лечения препаратом отмечаются процессы репаративной регенерации печеночных структур, что выражается в уменьшении количества очагов некробиоза гепатоцитов, дискомплексации печеночных балок и незначительном количестве пролифератов.

Таблица17

Показатели	Группы поросят	До лечения	Дни лечения
3	6	9
Холестерин, ммоль/л	Подопыт.	4,5+0,03	3,2+0,02	2,3+0,07	2,2+0,05*
Контролен.	4,6+0,04	4,5+0,03	4,0+0,01	3,4+0,05**
Билирубин, мкмоль/л	Подопыт.	6,36+0,12	5,25+0,10	4,53+0,05	2,81+0,052*
Контрольн.	6,0+0,06	6,1+0,063	5,60+0,05	4,43+0,070
Общие ЛИПИДЫ, моль/л	Подопыт.	3,7+0,08	3,3+0,01	2,9+0,07	2,6+0,03*
Контрольн.	3,6+0,06	3,5+0,01	3,6+0,04	3,6+0,03
Ь-липопорт., г/л	Подопыт.	1,2+0,03	0,8+0,06	0,7+0,02	0,7+0,03*
Контролен.	1,2+0,03	1,1+0,05	1,0+0,02	1,1+0,04
Альбумины, г/л	Подопыт.	21,8+0,49	22,3+0,51	23,2+0,17	24,8+0,02**
Контролен.	20,9+0,82	21,4+0,67	21,5+0,63	21,9+0,49
Общий белок, г/л	Подопыт.	64,8+0,27	63,2+0,10	59,5+0,33	56,7+0,25**
Контролен.	64,9+0,08	65,1+0,10	64,9+0,10	64,8+0,10
Глюкоза, ммоль/л	Подопыт.	4,0+0,07	3,7+0,02	3,3+0,01	3,3+0,02*
Контролен.	4,1+0,09	4,0+0,03	3,7+0,03	3,5+0,03**

Примечание: * - Р < 0,001 в сравнении с животными до лечения; ** - Р < 0,01 в сравнении с животными до лечения.

Пример 20. Влияние сорбента на систему антиокислительной защиты организма цыплят бройлеров при вскармливании корма с высоким содержанием переокисленных липидов.

Для проведения опыта было сформировано 6 групп цыплят-бройлеров 15-дневного возраста. Продолжительность опыта составила 30 суток. Соевое масло добавляли в корм из расчета 4 мл на 100 г корма, при этом кислотное число корма на протяжении опыта находилось в пределах от 26 до 30,0 мг КОН, а перекисное число от 0,45 до 0,59% йода при норме не более 20,0 мг % КОН и не более 0,3% йода соответственно. Корм с испорченным жиром получали цыплята первой, второй, третьей и четвертой групп. При этом первой группе цыплят в корм добавляли испытуемый сорбент из расчета 0,5% к массе корма второй - 1%, третьей - 1,5%, четвертой -2%. Пятая группа цыплят получала обычный корм (рецепта 5Б) для цыплят-бройлеров с нормальными перекисными и кислотными числами жира (кислотное число жира

- 15 018404

20,0 мг КОН, а перекисное число жира - 0,06% йода.) Шестая группа цыплят получала аналогичный корм с добавлением соевого масла с показателями окисления, как в 1-4 группах.

На протяжении опыта за птицей всех групп велось ежедневное наблюдение. Учитывалось клиническое состояние птицы, поедаемость корма, поведение. Перед началом опыта (фон), а также через на 15-е и 30-е сутки опыта проводили взвешивание птицы и взятие крови (цельной и на сыворотку). В крови определяли показатели перекисного окисления липидов - малоновый диальдегид (МДА), гидроперекиси липидов, активность супероксиддисмутазы (СОД).

По окончании опыта был проведен убой птицы и отбор проб внутреннего жира и мозга. Во внутреннем жире было определено кислотное и перекисное число. В мозге определяли концентрацию МДА.

В опыте отмечается достоверно более низкая активность СОД на 30 сутки опыта в 2-4 группах цыплят по сравнению с группой 6, не превышая таковой в группе 5 (корм с нормальным жиром). Это свидетельствует о снижении интенсивности процессов ПОЛ в опытных группах по сравнению с контрольными. Защитное действие сорбента подтверждается и достоверным снижением концентрации гидроперекисей в опытных группах на 30 сутки опыта, а концентрации малонового диальдегида на 15 и 30 сутки опыта.

Изучение других биохимических и гематологических параметров показало, что сорбент оказывает ярко выраженный защитный эффект в условиях ίη νίνο от негативного воздействия кормов с повышенным содержанием продуктов перекисного окисления. Так, концентрация МДА в крови цыплят опытных групп была меньше на 16-18%, активность СОД - ниже на 10-12,5%, содержание гидроперекисей - на 2835% ниже по сравнению с цыплятами, получавшими окисленный корм без сорбента. При этом данные показатели в опытных группах выходили на уровень таковых у цыплят из группы, получавшей нормальный корм. Кислотное число внутреннего жира цыплят, получавших сорбент в различных дозах, было ниже на 26-30%, достоверно не отличаясь от группы цыплят с нормальным кормом.

Концентрация МДА в мозге цыплят опытных групп была ниже на 42-56% по сравнению с цыплятами, получавшими окисленный корм без сорбента, что проиллюстрировано на фиг. 19, 20, 21, 22, 7, 8, 9,

10.

Таким образом, применение сорбента оказывает нормализующее влияние на основные показатели перекисного окисления липидов. При этом препарат следует добавлять в корм на протяжении всего периода скармливания кормов с повышенной степенью окисления.

Пример 21. Лечение сорбентом животных при остром и хроническом отравлениях пестицидами

Испытания при остром отравлении цыплят-бройлеров гербицидом 2,4-Д и инсектицидом - линданом (1,2,3,4,5,6 - гексахлорциклогексан) проводились следующим образом. Цыплята-бройлеры 30дневного возраста были сформированы в две партии в каждой по 2 группы по 25 голов в каждой группе. В каждой партии одна группа цыплят получала с кормом сорбент из расчета 1% к массе корма. Вторая группа получала корм без сорбента. На вторые сутки после начала опыта цыплятам вводили однократно в зоб с помощью зонда гамма-изомер в первой партии гербицид 2,4-Д в дозе 500 мг/кг массы тела, во второй партии - линдан в дозе 15 мг/кг массы тела. За птицей велось ежедневное наблюдение с учетом клинического состояния. Через 1, 2, 3, 4, 5 суток после введения пестицидов производили убой пяти цыплят из каждой группы в каждой партии с отбором мышц и печени для определения остаточных количеств пестицидов.

Характер динамики остаточных количеств гербицида 2,4-Д и линдана представленный на диаграммах (фиг. 13-14), иллюстрирует эффективность применения сорбента при остром отравлении птицы пестицидами. Из печени цыплят гербицид 2,4 практически выводится на 4-е сутки, линдан - на 5-е сутки, при этом наблюдаются более сглаженные клинические признаки отравления по сравнению с контрольными группами птиц, не получавших сорбент.

Эффективность применения сорбента при хроническом отравлении гербицидом 2,4-Д и линданом соответственно иллюстрируется в табл. 13 и 14, где приведена динамика массы тела цыплят, получавших сорбент.

Для проведения исследований было сформировано две партии по 4 группы цыплят 120-дневного возраста по 25 голов в каждой. В первой партии цыплятам 1,2,3 групп вводили гербицид 2,4-Д в дозе 200 мг/кг массы тела.

Группа 4 служила контролем, а во второй партии ежедневно в течение 20 дней с помощью зонда в зоб цыплятам первой, второй и третьей групп вводили инсектицид линдан в дозе 5мг/кг массы тела. Группа 4 в каждой партии служила контролем. В каждой партии первая группа получала сорбент из расчета 1% к массе корма. Вторая группа получала с кормом сорбент из расчета 2%. Третья и четвертая группы содержались на обычном рационе без сорбента. За птицей в каждой партии всех групп велось ежедневное наблюдение с учетом клинического состояния. Определение массы тела, взятие крови для проведения гематологических и биохимических исследований проводили в следующие сроки: фон, 10 и 20 дней.

- 16 018404

Таблица 18

№ группы	Масса тела цыплят по срокам исследований, г	Среднесуточный привес, г
фон	10 дней	20 дней
1(1% сорб)	1120±16,0	1525±21,0	1696±20,0	28,8
2(2% сорб)	1110+14,0	1640+19,5	1745+21,0	31,75
3(без сорб)	1100+15,0	1325+16,8*	1446±18,2*	17,3’
4(контроль)	1100±14,0	1520+22,0	1650+17,5	27,5

Таблица 19

№ группы	Масса тела цыплят по срокам исследований, г	Среднесуточный привес, г
фон	10 дней	20 дней
1(1% сорб)	808±12,0	1157+20,0	1395+20,0	29,3
2(2% сорб)	764±10,0	1120+14,5	1425±23,0	33,05
3(без сорб)	788±15,0	1032+18,5*	1270±15,4*	25,4*
4(контроль)	762+11,0	1138+20.0	1390+17,5;	31,4

⁽*⁾ достоверные отличия с группой 4 (Р < 0,01)

При хроническом отравлении пестицидами у цыплят, получавших с кормом сорбент из расчета 1 и 2% к массе корма, не отмечено достоверных отличий по динамике прироста массы тела, гематологическим и биохимическим показателям по сравнению с контрольными цыплятами, содержащимися на обычном рационе. Цыплята, не получавшие сорбент, при хроническом отравлении пестицидами, отставали в росте и развитии от цыплят контрольных групп. Также наблюдались отклонения по некоторым гематологическим и биохимическим показателям от цыплят контрольной группы. Таким образом, применение сорбента способствует быстрому выведению пестицидов при острых отравлениях и нормализует клиническое состояние и обменные процессы при хронических отравлениях

Пример 22. Влияние сорбента на продуктивность кур-несушек в процессе их содержания и качество продуктов птицеводства.

Влияние сорбента на качество яйца изучалось на 4-х группах кур несушек породы Хайсекс белый 160-дневного возраста по 25 голов в каждой группе. Продолжительность испытаний - 30 дней. Первая группа птиц получала стандартный корм рецепта ПК 1Б. Вторая группа - получала аналогичный корм с добавкой окисленного соевого масла из расчета 1% к массе корма, перекисное число жира корма находилось в пределах 0,4-0,5% йода. Третья группа получала такой же корм, как и 2-я группа, но с дополнительным введением фитосорбента из расчета 2% к массе корма. Четвертая группа - контрольная получала комбикорм ПК1Б с добавлением доброкачественного соевого масла из расчета 2% к массе корма. В процессе испытаний вели ежедневный учет яйценоскости птиц по группам, определяли кислотное число желтка яиц, а также содержание витамина А; каратиноидов; морфологических показателей (индексформа, масса, толщина скорлупы и т.д.). В желтке яиц определяли наличие антител к вирусу болезни Ньюкасла в РТГА и инфекционной бурсальной болезни в реакции диффузионной преципитации РПД, против которых птицы были вакцинированы в 120-и дневном возрасте.

Показатели, иллюстрирующие влияние меланинсодержащего сорбента на яйценоскость, динамику кислотного числа желтка, качество яиц по стандартным показателям и уровень трансовариальных антител в желтке яиц представлены в табл. 20-23.

По данным табл. 20 наибольшая яйценоскость наблюдалась в группе 3, в которой птица получала недоброкачественный корм с сорбентом, и в группе 4, которая получала корм с добавлением доброкачественного жира. Наименьшая яйценоскость отмечена в группе 2, где птица получала недоброкачественный корм без сорбента.

Таблица 20

Группы птиц	Количество яиц по срокам исследований	Всего яиц за период опыта	Колво яиц на 1 голову
1 декада	2 декада	3 декада
1	200	220	227	467	25,9
2	200	225	212	636	25,5
3	212	241	220	674	27,0
4	175	191	191	557	26,8

- 17 018404

Таблица 21

Группы птиц	Кислотное число желтков яиц (мг КОН) по срокам исследования
1 декада	2 декада >	3 декада
1	6,45±0,3	7,10±0,4	7,58+0,3
2	6,84±0,3	7,60+0,3	7,72+0,4
3	6,03±0,4*	5,90±0,3*	6,40±0,4*
4	6,40 ±0,3	6,80+0,2	7,60±0,4

*Различия достоверны при Р<0,05

Таблица 22

Группы птиц	Кислотное число желтков яиц (мг КОН) по срокам исследования
1 декада	2 декада	3 декада
1	6,45±0,3	7,10+0,4	7,58+0,3
2	6,84+0,3	7,60±0,3	7,72±0,4
3	6,03+0,4*	5,90±0,3*	6,40±0,4*
4	6,40 +0,3	6,80+0,2	7,60±0,4

*Различия достоверны при Р<0,05

По данным табл. 21, кислотное число желтка яиц, полученных от птицы из группы № 3, было достоверно ниже, чем таковое во 2-й группе, что свидетельствует о положительном влиянии сорбента на этот качественный показатель яиц при скармливании птице кормов с высокой степенью окисления жира.

По данным табл. 22 показатели качества яйца, полученных от птиц всех групп, находились в пределах нормы. Однако такие ключевые показатели, как содержание витамина А, каротиноидов и средней массы яиц достоверно выше в 3 группе. При этом наибольшая разница наблюдается по сравнению с группой 2: содержание витамина А- на 4,6%, каротиноидов - на 21,8%, средняя масса - 1,6%.

Данные табл. 23 свидетельствуют, что титры трансовариальных антител к вирусам НБ и ИББ (болезнь Г амборо) в желтке яиц, полученных от птицы, которой скармливали недоброкачественный комбикорм (группа 2), значительно ниже таковых в других группах.

Таблица 23

№ группы	Титры антител, 1о§2
	к вирусу НБ	к вирусу ИББ
I	4,1+0,2	1,8±0,1
II	2,6±0,1 *	0*
III	4,0±0,2	1,6±0,1
IV	3,8±0,1	2,0±0,1

Таким образом, введение в основной рацион кур-несушек сорбента из расчета 1% к массе корма восстанавливает яйценоскость и качественные показатели пищевого яйца, нарушенные в результате скармливания птице кормов с прогорклым жиром, при этом сорбента нормализует трансовариальный иммунный ответ.

Сорбент прошел необходимые тесты в качестве лечебно-профилактического средства и может быть рекомендован для широкого использования на фармацевтическом рынке с целью использования в промышленном животноводстве и птицеводстве. Его использование может быть особенно эффективно при использовании в полном рационе в качестве добавки к корму с целью уменьшения отрицательного влияния экотоксикантов на организм животных на территориях постоянного или временного техногенного загрязнения и в зонах эпизоотий для профилактики болезней и токсических состояний животных, для уменьшения или исключения необходимости использования антибиотиков или других опасных веществантидотов.

Одним из основных преимуществ нового препарата является его высокая технологичность, эффективность использования широкий спектр действия и дешевизна по сравнению с существующими аналогами.

Источники информации

1. ки 2253510 С1, МПК⁷ В 01Э 20/24, (22) 04.02.2004, (45) 10.06.2005, Бюл. №16, (54) Способ получения сорбента на растительной основе.

2. КИ 2062647 С1, МПК⁶ В 01Э 20/22, 20/24, 20/30, С 12Ν 1/14, (22) 29.07.1993, (46) 27.06.1996, Бюл. № 18, (54) Способ получения сорбентов радионуклидов и тяжелых металлов.

3. КИ 2255803 С1, МПК⁷ В 01Э 20/24, (22) 30.12.2003, (45) 10.07.2005, Бюл. №19, (54) Способ по

- 18 018404 лучения пищевого сорбента из растительного сырья.

4. КИ 2067328 С1, МПК⁶ В 011 20/30, (22) 21.05.1993, (46) 27.09.1996. (54) Способ удаления радионуклидов из водных растворов.

5. КИ 2060818 С1, МПК⁶ В 011 20/30, 20/24, (22) 04.01.1994, (46) 27.05.1996, (54) Способ получения меланинсодержащего фитосорбента и меланинсодержащий фитосорбент (прототип).

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ получения сорбента, включающий измельчение плодовой оболочки вызревших семян подсолнечника, их кислотный гидролиз, промывку водой и сушку, отличающийся тем, что гидролиз проводят 1-28% раствором серной, или соляной, или ортофосфорной кислоты в течение 1,5-4,5 ч в режиме кипения под давлением 0,3 МПа, промывку осуществляют 0,1-1,0% раствором щелочи и затем умягченной водой, последующую сушку ведут до образования биоактивного углеродсодержащего комплекса, представляющего собой пористую многоуровневую матрицу с интегральной пористостью 0,04-50 мкм, содержащую лигнин, целлюлозу, меланин, глюкозу, фруктозу, фенолкарбоновые кислоты и дубильные вещества.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что промывку продукта гидролиза проводят раствором гидроокиси аммония или гидроокиси натрия или гидроокиси калия до достижения значения рН 3,5-4,5.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что до начала промывки продукта гидролиза раствором щелочи дополнительно проводят промывку водой в режиме кипения в течение 10-15 мин.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что промывку продукта гидролиза умягченной водой проводят до достижения рН 4,5-6,4.
5. Способ получения сорбента, включающий измельчение плодовой оболочки вызревших семян подсолнечника, их кислотный гидролиз, промывку водой и сушку, отличающийся тем, что гидролиз проводят 1-28% раствором серной, или соляной, или ортофосфорной кислоты в течение 1,5-4,5 ч в режиме кипения под давлением 0,3 МПа, промывку осуществляют 0,1-1,0% раствором щелочи и затем и умягченной водой, последующую сушку ведут до образования биоактивного углеродсодержащего комплекса, представляющего собой пористую многоуровневую матрицу с интегральной пористостью 0,04-50 мкм, содержащую лигнин, целлюлозу, меланин, глюкозу, фруктозу, фенолкарбоновые кислоты и дубильные вещества, затем полученный продукт модифицируют путем импрегнирования ионами серебра или иммобилизацией биомассой бактерий пробиотиков.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что промывку продукта гидролиза проводят раствором гидроокиси аммония, или гидроокиси натрия, или гидроокиси калия до достижения значения рН 3,5-4,5.
7. Способ по п.5, отличающийся тем, что до начала промывки продукта гидролиза раствором щелочи проводят промывку водой в режиме кипения в течение 10-15 мин.
8. Способ по п.5, отличающийся тем, что промывку продукта гидролиза умягченной водой проводят до достижения рН 4,5-6,4.
9. Способ по п.5, отличающийся тем, что импрегнирование продукта гидролиза ионами серебра проводят путем обработки в статических условиях водорастворимой солью серебра.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что соль серебра представляет собой нитрат серебра.
11. Способ по п.5, отличающийся тем, что иммобилизацию продукта гидролиза осуществляют инкубированием продукта с микробной взвесью бактерий-пробиотиков, с микробной концентрацией не менее 10⁸ КОЕ при модуле твердая/жидкая фаза 1:10 в течение не менее 1 ч с последующим отделением и сушкой твердой фазы в изотермических условиях при температуре +37°С в течение суток.
12. Способ по п.11, отличающийся тем, что бактерии-пробиотики выбраны из группы: ВакШик 8иЬШшк или ЬасЮЬасШик или ВШбоЬас1егшт.
13. Сорбент, полученный способом, охарактеризованным в пп.1-12, представляющий собой биоактивный углеродсодержащий комплекс в виде пористой многоуровневой матрицы с интегральной пористостью 0,04-50 мкм, содержащий лигнин, целлюлозу, меланин, глюкозу, фруктозу, фенолкарбоновые кислоты и дубильные вещества.
14. Сорбент по п.13, отличающийся тем, что пористая многоуровневая матрица содержит химически связанные между собой подструктуры из частиц лигнина ленточно-спиральной формы с размерами пор 0,1-15 мкм, волокна целлюлозы продольно-вытянутой формы с размерами пор 5-50 мкм и частицы меланина различной формы в виде отдельных трубок правильной цилиндрической формы до агломератов размером от 5-400 мкм.
15. Сорбент по п.13, отличающийся тем, что он импрегнирован ионами серебра или иммобилизован биомассой пробиотических бактерий.
16. Сорбент по п.15, отличающийся тем, что биомасса пробиотических бактерий содержит бактерии рода ВасШик киЫШик, или ЬасЮЬасШик, или В1йбоЬас1егшт в количестве не менее 10⁹ КОЕ на 1 г сорбента.
17. Применение сорбента по любому из пп.13-16 для профилактики и лечения заболеваний животных, вызванных микотоксинами, пестицидами, вирусными и бактериальными инфекциями.

- 19 018404
18. Способ лечения заболеваний животных, вызванных микотоксинами, пестицидами, вирусными и бактериальными инфекциями, заключающийся в том, что сорбент задают из расчета 0,2-1,5 г/кг веса тела 1-2 раза в день до исчезновения клинических признаков болезни.
19. Применение сорбента по любому из пп.13-16 в качестве добавки к корму.