EA018149B1 - Винилиндазолильные соединения - Google Patents

Винилиндазолильные соединения Download PDF

Info

Publication number
EA018149B1
EA018149B1 EA201171367A EA201171367A EA018149B1 EA 018149 B1 EA018149 B1 EA 018149B1 EA 201171367 A EA201171367 A EA 201171367A EA 201171367 A EA201171367 A EA 201171367A EA 018149 B1 EA018149 B1 EA 018149B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
cancer
compound
cells
mixture
compounds
Prior art date
Application number
EA201171367A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201171367A1 (ru
Inventor
Даохун Чэнь
Хун-Юй Ли
Гэньши Чжао
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA201171367A1 publication Critical patent/EA201171367A1/ru
Publication of EA018149B1 publication Critical patent/EA018149B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Abstract

Согласно настоящему изобретению предложены винилиндазолильные соединения, подходящие для применения для лечения рака.

Description

Фактор роста фибробластов (РОР) считается важным медиатором многих физиологических процессов, таких как морфогенез в ходе развития и ангиогенез. Семейство рецепторов фактора роста фибробластов (РОРК) состоит из четырех рецепторов (РОРК1-РОРК4), которые представляют собой гликопротеины, состоящие из внеклеточных иммуноглобулин (1д)-подобных доменов, гидрофобного трансмембранного участка и цитоплазматической части, содержащей тирозинкиназный домен. Связывание РОР приводит к димеризации РОРК с последующим аутофосфорилированием рецептора и активацией нисходящих сигнальных путей. Активация рецептора является достаточной для привлечения и активации участников специфических нисходящих сигнальных путей, которые принимают участие в регуляции целого ряда различных процессов, таких как клеточный рост, клеточный метаболизм и выживаемость клеток. Таким образом, путь передачи сигнала РОР/РОРК оказывает плеотропное действие на многие биологические процессы, имеющие важное значение для пролиферации, миграции и инвазии опухолевых клеток и ангиогенеза.
Винилиндазолы известны в данной области техники как подходящие для применения в лечении рака. См., например, публикацию международной заявки νϋ 0210137 и публикацию международной заявки \νϋ 2003101968. Ингибиторы РОРК также известны в данной области техники. См., например, публикацию международной заявки νϋ 2002022598.
Согласно настоящему изобретению предложены новые винилиндазолильные соединения, которые, как полагают, имеют клиническое применение для лечения пролиферативных нарушений, таких как рак, и, в частности, заболеваний, опосредованных нарушением регуляции РОР и/или РОРК.
Кроме того, определенные соединения согласно настоящему изобретению имеют повышенную активность по отношению к РОРК1 и РОРК3 по сравнению с некоторыми ранее известными ингибиторами РОРК.
Согласно настоящему изобретению предложено соединение, которое представляет собой (Е)-2-(4(2-(5-( 1 -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1Н-индазол-3 -ил)винил)-1Н-пиразол-1 -ил)этанол, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно настоящему изобретению также предложено соединение, которое представляет собой (К)(Е)-2-(4-(2-(5-( 1 -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1Н-индазол-3 -ил)винил)-1Н-пиразол-1-ил)этанол, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно настоящему изобретению предложен способ лечения рака у млекопитающего, где указанный рак выбран из группы, включающей рак молочной железы, немелкоклеточный рак легких (НМРЛ), рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак толстой кишки, множественную миелому, рак печени, меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, почечноклеточный рак, глиобластому и рак яичек, включающий введение нуждающемуся в указанном лечении млекопитающему эффективного количества соединения или соли согласно настоящему изобретению.
Согласно настоящему изобретению также предложены фармацевтические композиции, содержащие соединение или соль согласно настоящему изобретению в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или наполнителями. Согласно конкретному варианту реализации композиция дополнительно содержит один или более других терапевтических агентов.
Согласно настоящему изобретению также предложено соединение или соль согласно настоящему изобретению для применения в терапии. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложено применение соединения или соли согласно настоящему изобретению для получения лекарственного средства для лечения рака. В частности, указанный рак выбран из группы, включающей рак молочной железы, рак легких, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак толстой кишки, множественную миелому, острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), рак печени, меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, почечноклеточный рак, глиобластому и рак яичек. В частности, раковые заболевания выбраны из группы, включающей рак молочной железы, немелкоклеточный рак легких, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак толстой кишки, множественную миелому, рак печени, меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, почечноклеточный рак, глиобластому и рак яичек. В частности, рак представляет собой немелкоклеточный рак легких. В частности, рак представляет собой рак желудка. В частности, рак представляет собой множественную миелому. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция для лечения рака, выбранного из группы, включающей рак молочной железы, немелкоклеточный рак легких, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак толстой кишки, множественную миелому, рак печени, меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, почечно-клеточный рак, глиобластому и рак яичек, содержащая соединение или соль согласно настоящему изобретению в качестве активного ингредиента.
Специалисту в данной области техники ясно, что рацемический (Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1Н-индазол-3-ил)винил)-1Н-пиразол-1-ил)этанол может быть получен, по существу, согласно способу получения, описанному для (К)-(Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4ил)этокси)-1Н-индазол-3-ил)винил)-1Н-пиразол-1-ил)этанола из рацемического 1-(3,5-дихлорпиридин-4ил)этанола вместо (8)-1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этанола. Кроме того, специалисту в данной области
- 1 018149 техники ясно, что (Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1Н-индазол-3-ил)винил)-1Нпиразол-1-ил)этанол содержит один хиральный центр. Предпочтительно, чтобы (Е)-2-(4-(2-(5-(-(3,5дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1Н-индазол-3-ил)винил)-1Н-пиразол-1-ил)этанол существовал в виде отдельного энантиомера. Отдельный энантиомер может быть получен из хиральных реагентов или с помощью способов стереоселективного или стереоспецифического синтеза. Альтернативно, отдельный энантиомер может быть выделен из смесей с помощью стандартных способов хиральной хроматографии или кристаллизации.
Для специалиста будет понятно, что все соединения согласно настоящему изобретению способны образовывать соли. Соединения согласно настоящему изобретению представляют собой амины и, соответственно, могут вступать в реакцию с любыми из многочисленных неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты. Указанные фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты и общие способы их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, Р. 81ай1, с1 а1., ΗΑΝΌΒΟΟΚ ОЕ РНАКМАСЕиТ1САЬ 8АЬТ8: РРОРЕРТ1Е8. ЗЕЬЕСТЮЫ ΑΝΌ И8Е, (УСНАЖйеу-УСН, 2008); 8.М. Ветде, е1 а1., Рйаттасеийса1 8а118, 1оита1 οί Рйагтасеийса1 Зстеисек, νοί. 66, Νο. 1, 1аииагу 1977.
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены согласно приведенным ниже примерам получения и примерам. Названия в следующих примерах получения и примерах получены путем присвоения названия веществу по его структуре, 8!тис1=№те, с помощью программы СйетЭтак® ИНта 10,0.
Пример получения 1. 1-(3,5-Дихлорпиридин-4-ил)этанол
В трехгорлую круглодонную колбу на 12 л добавляли тетрагидрофуран (ТГФ, 3 л) и диизопропиламин (ДИПА, 315 мл, 2,24 моль) и смесь охлаждали до -78°С. Медленно добавляли н-бутиллитий (1,6 М в гексанах, 1400 мл, 2,24 моль). После завершения добавления и установления температуры при -78°С медленно добавляли раствор 3,5-дихлорпиридина (296,7 г, 2,00 моль), что сразу приводило к получению желтого раствора, который превращался в суспензию ржавого цвета. После завершения добавления и установления температуры при -78°С медленно добавляли ацетальдегид (230 мл, 4,05 моль) в ТГФ (600 мл), продолжали перемешивание при -78°С. Через 3 ч баню на основе сухого льда убирали и начинали гасить реакцию путем добавления по каплям насыщенного водного раствора хлорида аммония (1 л). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры (КТ) в течение ночи при перемешивании. Смесь разбавляли метил-трет-бутилэфиром (МТБЭ, 2 л), насыщенным водным раствором хлорида аммония (1л) и водой (2 л). После разделения органическую часть промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (солевым раствором). Экстрагировали водную фазу с помощью МТБЭ (1,5 л). Объединяли органические слои, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Очищали остаток с помощью хроматографии на силикагеле [25% этилацетата (ЭА) в гексанах] с получением названного соединения в виде красного масла. Выход: 352 г (90%). МС (ИЭР) т/ζ 192 [М+1]+.
Пример получения 2. (8)-1-(3,5-Дихлорпиридин-4-ил)этанол
Смесь стереоизомеров, полученных в результате вышеуказанной реакции, разделяли на колонке СШКАЬРАК® АЭ-Н при использовании в качестве элюента смеси 90% гептаны/10% этанол. Пик 2 соответствовал целевому энантиомеру. Для получения абсолютной конфигурации продукт растворяли в СЭС13 (конечная концентрация 100 мг/мл). Получали спектры колебательного кругового дихроизма (УСЭ) и инфракрасные спектры (ΙΚ.) с разрешением 4 см-1 с использованием спектрометра СЫга11В ЕТ УСЭ (ВюТооЕ 1ис®) с приемником инфракрасного излучения, снабженного окнами ВаЕ2, с длиной оптического пути 100 мм. Получали спектры УСЭ и ΙΡ в течение 6 ч для 150 мкл образца. Полученные данные представляли без округления или дополнительной обработки. Получали данные колебательных частот и абсорбции и интенсивности УСЭ путем поиска низкоэнергетического конформера с помощью программы Оаи881аи в приближении В3Р\У91/6-31С** на Линукс-кластере и моделировали соответствующие спектры колебательного кругового дихроизма с разрешением 6 см-1 с помощью диапазона частот Лоренца. Данные вышеуказанного анализа демонстрируют, что продукт представляет собой 8-изомер. Выход: 84,37 г (27%). МС (ИЭР) т/ζ 192 [М+1]+.
Пример получения 3. (8)-1-(3,5-Дихлорпиридин-4-ил)этилметансульфонат
Растворяли (8)-1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этанол (5,02 г, 26,14 ммоль) в дихлорметане (ДХМ, 100 мл) и охлаждали колбу на ледяной бане. Добавляли триэтиламин (ТЭА, 3,5 мл, 25,11 ммоль) с последующим добавлением по каплям метансульфонилхлорида (2,2 мл, 28,42 ммоль). Убирали ледяную баню и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Через 4 ч гасили реакцию водой (100 мл) и разделяли слои. Экстрагировали водный слой ДХМ (50 мл) с последующей экстракцией смесью 20% изопропиловый спирт (ИПС)/хлороформ (50 мл). Объединяли органические экстракты, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Выход: 7,15 г, (100%). МС (ИЭР) т/ζ 270 [М+1]+.
Пример получения 4. 4-Йод-1-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этил)-1Н-пиразол
В трехгорлой колбе, снабженной магнитной мешалкой, вводом для азота и внутренним температур
- 2 018149 ным датчиком, растворяли 2-(2-бромэтокси)тетрагидро-2Н-пиран (34 г, 156 ммоль) в ацетонитриле (АЦН, 400 мл). Добавляли 4-йодпиразол (29,34 г, 149,74 ммоль) с последующим добавлением карбоната цезия (73,4 г, 223,02 ммоль). Перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 18 ч. Фильтровали реакционную смесь через фильтр СБЫТЕ®, фильтрат промывали АЦН и концентрировали до получения масла золотистого цвета. Использовали без дополнительной очистки. Выход: 47,819 г (99%). МС (ИЭР) т/ζ 323 [М+1]+.
Пример получения 5. 5-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-1Н-индазол
Наполняли реакционный сосуд на 10 л раствором Ν,Ν-диметилформамида (ДМФ, 2,50 л), 5гидроксииндазола (150,20 г, 1,12 моль) и 1Н-имидазола (114,35 г, 1,68 моль). Охлаждали смесь до 0°С и добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (253,16 г, 1,68 моль) в течение 0,5 ч. Перемешивали смесь при 18°С в течение 3 ч. К реакционной смеси медленно добавляли воду (2,5 л) на ледяной бане при температуре 5°С для поддержания внутренней температуры примерно при 20°С. Переносили смесь в разделительную воронку и экстрагировали ЭА (2x2,5 л), Экстракты объединяли и промывали водой (3x2,5 л) и солевым раствором. Сушили органические растворы над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали до получения красного масла. Пропускали масло через пластину с силикагелем при использовании в качестве элюента 0-30% ЭА в гексане с получением титульного соединения в виде кристаллизующегося оранжевого масла. Выход: 300 г (100%). МС (ИЭР) т/ζ 249 [М+1]+.
Пример получения 6. 5-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-3-йод-1Н-индазол
Охлаждали раствор 5-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1Н-индазола (300,00 г, 1,21 моль) в ДХМ (4,00 л) до 10°С в реакционном сосуде на 10 л с рубашкой. К полученному в результате раствору порциями добавляли Ν-йодсукцинимид (298,89 г, 1,33 моль) в течение 0,5 ч. Перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 3 ч с достижением полного превращения по результатам жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии (ЖХ-МС) и тонкослойной хроматографии (ТСХ). Охлаждали смесь до 10°С и гасили реакцию водой (2,5 л), Смесь переносили в разделительную воронку и экстрагировали водный слой ДХМ (2,5 л). Промывали объединенные органические экстракты 10% водным раствором тиосульфата натрия (5 л) и солевым раствором. Сушили органический раствор над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением названного соединения в виде твердого вещества оранжевого цвета. Выход: 388 г (90%). МС (ИЭР) т/ζ 375 [М+1]+.
Пример получения 7. 5-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-3-йод-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Ниндазол
Охлаждали раствор 5-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-йод-1Н-индазола (387,00 г, 1,08 моль) в ДХМ (2,50 л) и ТГФ (1,00 л) до 10°С в реакционном сосуде на 10 л с рубашкой. К полученной в результате смеси добавляли метансульфоновую кислоту (14,0 мл, 216,02 ммоль) с последующим добавлением 3,4-дигидро-2Н-пирана (296 мл, 3,24 моль) в течение 0,5 ч, при этом наблюдали слабый экзотермический эффект. Перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 3 ч. Охлаждали реакционную смесь до 10°С и гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2 л). Разбавляли смесь водой (2 л) и экстрагировали водный слой с помощью ДХМ (2 л), Промывали объединенные органические экстракты водой (2 л) и солевым раствором. Сушили органическую смесь над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток хроматографировали на пластине с силикагелем при использовании в качестве элюента смеси 0-10% ЭА/гексаны с получением названного соединения. Выход: 150 г (31%). МС (ИЭР) т/ζ 459 [М+1]+.
Пример получения 8. (Е)-1-(Тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-3-(2-(1-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2илокси)этил)-1Н-пиразол-4-ил)винил)-1Н-индазол-5-ол
Барботировали азот через смесь 5-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-йод-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2ил)-1Н-индазола (14 г, 30,54 ммоль) в ДМФ (150 мл) в трехгорлой круглодонной колбе на 500 мл, снабженной магнитной мешалкой, температурным датчиком и холодильником с перегородкой, в течение 10 мин. К полученному раствору добавляли трибутиламин (ТБА, 6,7 г, 36,1 ммоль) и 4,4,5,5-тетраметил-2винил-1,3,2-диоксаборолан (7,0 г, 43,18 ммоль) и продолжали барботировать в течение 10 мин. К полученной в результате смеси добавляли хлорид бис(трифенилфосфин)палладия (II) (0,45 г, 0,63 ммоль) и продолжали барботировать в течение дополнительных 0,5 ч. Нагревали смесь при 95-100°С в течение 18 ч. Охлаждали реакционную смесь до температуры ниже 40°С и добавляли 4-йод-1-(2-(тетрагидро-2Нпиран-2-илокси)этил)-1Н-пиразол (9,8 г, 30,42 ммоль). К полученной в результате смеси добавляли бария гидроксид октагидрат (19,3 г, 60,3 ммоль) и воду (13 мл) и продолжали барботировать в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли смесь хлорида 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладия (II) и ДХМ (1,3 г, 1,56 ммоль) и продолжали барботировать в течение 0,5 ч. Смесь нагревали при 95°С в атмосфере азота в течение 3 ч. Смесь разбавляли ЭА и фильтровали через пластину Се1йе®. Пластину промывали солевым раствором (400 мл) и слои фильтрата разделяли. Промывали органический слой солевым раствором и экстрагировали объединенные водные слои ЭА. Объединяли органические растворы и концентрировали до получения коричневого масла. Масло растворяли в ДХМ (100 мл) и переносили на пластину с силикагелем. В качестве элюента использовали 50% ЭА в гексанах с последующим использованием 70% ЭА в гексанах с получением светло-коричневого масла. Растирали с МТБЭ (100 мл) с получением
- 3 018149 названного соединения в виде твердого вещества. Выход: 5 г (37%). МС (ИЭР) т/ζ 439 [М+1]+.
Пример получения 9. 5-((К)-1-(3,5-Дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-3((Е)-2-(1-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этил)-1Н-пиразол-4-ил)винил)-1Н-индазол
В трехгорлую круглодонную колбу на 250 мл, снабженную внутренним температурным датчиком, дефлегматором, вводом азота и магнитной мешалкой, добавляли суспензию (Е)-1-(тетрагидро-2Н-пиран2-ил)-3-(2-(1-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этил)-1Н-пиразол-4-ил)винил)-1Н-индазол-5-ола (10,0 г, 22,83 ммоль) и карбоната цезия (7,88 г, 23,94 ммоль) в АЦН (92 мл) и нагревали до 60°С. К суспензии добавляли (З)-1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этилметансульфонат (7,03 г, 26,02 ммоль) и перемешивали в течение ночи. Охлаждали реакционную смесь до комнатной температуры, фильтровали и промывали твердый остаток АЦН. Концентрировали фильтрат и очищали остаток с помощью хроматографии на силикагеле (2-4% 2 М аммоний в метаноле/ДХМ). Объединяли фракции продукта и концентрировали в вакууме до получения белой пены. Выход: 12,5 г (86%). МС (ИЭР) т/ζ 612 [М+1]+.
Пример 1. (К)-(Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-Дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1Н-индазол-3-ил)винил)-1Нпиразол-1 -ил)этанол
Наполняли метанолом (57 мл) трехгорлую круглодонную колбу на 250 мл, снабженную капельной воронкой, вводом для азота, внутренним температурным датчиком и магнитной мешалкой, и охлаждали на ледяной бане. К полученному в результате раствору медленно добавляли ацетилхлорид (20 мл, 281,03 ммоль) через капельную воронку. К раствору через капельную воронку добавляли 5-((К)-1-(3,5дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-3-((Е)-2-(1-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2илокси)этил)-1Н-пиразол-4-ил)винил)-1Н-индазол (7,1 г, 11,59 ммоль), растворенный в метаноле (40 мл). После завершения добавления убирали ледяную баню, нагревали смесь до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 ч. Концентрировали реакционную смесь в вакууме до получения желтой пены. Растворяли желтую пену в метаноле (10 мл) и медленно добавляли к насыщенному водному раствору бикарбоната натрия (120 мл). Перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 30 мин. Фильтровали смесь, промывали твердый остаток водой (100 мл) и сушили в вакууме. Перекристаллизовывали твердый остаток из горячей смеси ЭА/метанол/гексаны с получением названного соединения в виде твердого вещества белого цвета. Выход:2,1 г (41%). МС (ИЭР) т/ζ 444 [М+1]+.
Нарушенная регуляция пути ЕСЕ/ЕСЕК наблюдается при разных типах злокачественных образований у человека. При многих видах рака часто наблюдается повышенная экспрессия ЕСЕК и ЕОЕ, которая, как правило, коррелирует с неблагоприятным прогнозом. Активирующие мутации в киназном домене ЕСЕК были обнаружены при различных типах опухолей, включая опухоли молочной железы, НМРЛ, мочевого пузыря, желудка, простаты, толстой кишки и множественную миелому. Геномная амплификация локуса ЕСЕК была также обнаружена у многих пациентов, страдающих раком молочной железы, раком желудка и множественной миеломой. Повышенная экспрессия ЕСЕК и ЕСЕ также наблюдалась при многих различных типах опухолей, таких как рак мочевого пузыря, множественная миелома, рак простаты и рак легких. Другие виды рака, при лечении которых подавление сигнального пути рецепторов семейства ЕСЕК может оказывать благоприятное действие, включают ОМЛ, рак печени, меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, рак поджелудочной железы, почечноклеточный рак, глиобластому и рак яичек. Помимо участия в возникновении и прогрессировании рака, ЕСЕ и ЕСЕК также являются ключевыми регуляторами ангиогенеза, в частности во время опухолевого роста. Путь ЕСЕ/ЕСЕК также играет важную роль в стимуляции других опухолевых клеток стромального происхождения, таких как фибробласты, связанных с раком. Положительная регуляция ЕСЕ также ведет к возникновению устойчивости к антиангиогенной терапии и другим видам химиотерапии. Наконец, низкомолекулярные ингибиторы ЕСЕК демонстрировали противоопухолевую активность в некоторых доклинических моделях опухолей и исследуются в клинических анализах. Таким образом, путь ЕСЕ/ЕСЕК является существенным для некоторых важных клеточных процессов в раковых клетках. В связи с этим терапевтическое лечение, направленное на передачу сигнала ЕСЕК и/или ЕСЕ, может влиять непосредственно как на опухолевые клетки, так и на опухолевый ангиогенез.
Все приведенные в качестве примера соединения тестировали, по существу, в соответствии с приведенным ниже описанием согласно по меньшей мере одному из следующих анализов: анализ ферментативной активности ЕСЕК1 (метод связывания на фильтрах), анализ ферментативной активности ЕСЕК3 (метод связывания на фильтрах), клеточный анализ вызванного ЕСЕ9 фосфорилирования ЕКК в линии клеток КТ-112 (в присутствии БСА), клеточные анализы выявления фосфорилирования ЕКК (Т11г202/Туг204) на эндотелиальных клетках пупочной вены человека (НИУЕС) с помощью системы А1рйаЗстееп ЗитеЕйе, анализ ίη νίνο направленного подавления ЕСЕК и модели ксенотрансплантатов клеток КТ112 рака мочевого пузыря человека и других типов рака. Данные приведенных анализов указыва
- 4 018149 ют на то, что тестируемые соединения являются ингибиторами пути передачи сигнала семейства рецепторов ЕСЕК и имеют противораковую активность.
Анализ ферментативной активности ЕСЕК1 и ЕСЕК3 (связывание на фильтрах)
Киназу ЕСЕК1 или ЕСЕК3 (0,15 нг/мкл ЕСЕК1 человека или 0,32 нг/мкл ЕСЕК3 человека) инкубировали в 50 мкл буфера, содержащего 10 мМ 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновую кислоту (НЕРЕ8), рН 7,5, 8 мМ трис(гидроксиметил)аминометан (Трис-НС1), рН 7,5, 5,0 мМ дитиотреитол (ДТТ), 10,0 мкМ аденозинтрифосфат (АТФ), 10 мМ МпС12, 150 мМ ЫаС1, 0,01% ΤΚΙΤΟΝ® Х-100, 0,5 мкКи 33РАТФ и 0,05 мкг/мкл поли(С1и-Туг). Реакцию проводили в объеме 50 мкл при комнатной температуре в течение 30 мин и затем гасили путем добавления 130 мкл 10% Н3РО4. Реакционную смесь (120 мкл) переносили в 96-луночный планшет со стекловолоконными фильтрами (1,0 мкм), инкубировали при комнатной температуре в течение 20-30 мин и затем трижды промывали 0,5% Н3РО4 на аппарате Т1ТЕКТЕК® 2оот. Лунки сушили на воздухе перед добавлением 40 мкл Мюго8ст1ТМ20 (Раскагб) и затем анализировали с использованием счетчика МюоЬс1а (\Уа11ас). Для исследования подавляющей способности соединений готовили исходные растворы соединений (10 мМ) в диметилсульфоксиде (ДМСО). Готовили серийные разведения 1:3 соединений в 20% ДМСО для получения 10 точек кривой зависимости эффекта от концентрации и разведения 1:5 (конечная концентрация от 20 до 0,001 мкМ в конечной концентрации ДМСО, составляющей 4%) в реакционном планшете до добавления реакционной смеси в планшет с фильтрами для определения активности соединения. Контрольные лунки содержали только 4% ДМСО, тогда как фоновый сигнал определялся контрольными лунками, содержащими 0,1 М этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА). Значения в процентах подавления для каждой из 10 концентраций рассчитывали по сравнению с контрольными лунками на каждом планшете и данные зависимости эффекта от концентрации для 10 точек последовательно анализировали с помощью программного обеспечения АсбуйуВаке (ΙΌΒ8) с построением четырехпараметрической логистической кривой и определяли значения 1С50 на основании полученной в результате кривой. Для анализов ферментативной активности ЕСЕК1 и ЕСЕК3 минимальные значимые отношения (М8К) для оценки 1С50 составляли 1,38 и 1,47 соответственно. 1С50 в примере 1 в указанных анализах ЕСЕК1 и ЕСЕК3 составляла 0,0077 и 0,0064 мкМ соответственно. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами ферментной активности ЕСЕК1 и ЕСЕК3.
Вызванное РСР9 фосфорилирование ЕКК в присутствии БСА
Клетки рака мочевого пузыря человека КТ112 высевали с плотностью 5000 клеток на лунку в 100 мкл среды КРМ1 1640 (С1Ьсо 11875-085) с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки (ЭБС, С1Ьсо 10082-147) и 1% раствора пенициллина/стрептомицина (С1Ьсо 15140-122) в 96-луночные планшеты ΤΈΡΕΒΙΝΩ® (Согшпд 3340) и инкубировали в течение ночи при 37°С. На следующее утро ростовую среду удаляли и замещали на 100 мкл среды КРМ1 1640 с добавлением 20 мг/мл бычьего сывороточного альбумина (БСА). Через 3 ч инкубации при 37°С в каждую лунку добавляли по 20 мкл соединений в серийных трехкратных разведениях в КРМ1 1640 с добавлением 20 мг/мл БСА в 6% ДМСО. В результате получали кривую зависимости эффекта от дозы соединения в диапазоне от 10 до 0,005 мкМ в 1% ДМСО, построенную по 10 точкам. Продолжали инкубировать в течение 1 ч при 37°С. Клетки стимулировали 50 мкл раствора, содержащего 50 мкг/мл ЕСЕ9 (Κ&Ό ЗуЧспъ 273-Е9) в бессывороточной среде КРМ1, с получением конечной концентрации ЕСЕ9 500 нг/мл. Клетки фиксировали путем добавления 30 мкл 25% раствора формальдегида в фосфатном солевом буфере (ФСБ) (конечная концентрация формальдегида составляла 3,7%) и инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре. Клетки трижды промывали ФСБ с последующим добавлением 100 мкл холодного метанола и инкубировали в течение 30 мин при -20°С. Метанол удаляли и клетки обрабатывали ФСБ, содержащим 0, 1% ТритонХ100 (ΊΚΠΌΝ® X100), ФСБТ, трижды промывали ФСБ и инкубировали в течение 15 мин при комнатной температуре. Затем клетки инкубировали при слабом помешивании в течение ночи при 4°С в 50 мкл первых антител рр44/42 МАРК (Се11 8щпа1шд 91018) в разведении 1:400 на ФСБ с добавлением 2% БСА, 0,01% коктейля ингибиторов фосфатаз 1 (8фта Р2850), 0,01% коктейля ингибиторов фосфатаз 2 (81дта Р5726) и 0,01% коктейля ингибиторов протеаз (8щта Р8340). На следующее утро планшеты промывали двумя порциями ФСБТ и двумя порциями ФСБ с последующей инкубацией в течение 1 ч при комнатной температуре в темноте в 80 мкл вторичных козьих антикроличьих антител 1дС (Н+Ь) (1пуйгодеп А11034), конъюгированных с А1еха Е1иог 488, в разведении 1:1000 на ФСБ с добавлением 1% БСА и 0,01% коктейля ингибиторов фосфатаз 1, 0,01% коктейля ингибиторов фосфатаз 2 и 0,01% коктейля ингибиторов протеаз. Клетки трижды промывали ФСБ с последующим добавлением 100 мкл пропидиум иодида (Р1) (Мо1еси1аг РгоЬе Р-3566) в разведении 1:200 на ФСБ и затем инкубировали в темноте в течение 1 ч. Р-ЕККположительные клетки и общее число клеток на лунку определяли с помощью сканера АСυМЕN ЕХРЬОКЕК™ (ТТР ЬаЬТесй Ыб) с использованием оптического фильтра с длиной волны 500-530 нм и длиной волны 575-640 нм для А1еха 488 и Р1 соответственно. Общую среднюю интенсивность фосфорилирования ЕКК на лунку, определенную с использованием значений интенсивности сигнала А1еха 488, затем выражали в виде процентного подавления с использованием значений, полученных по сравнению с контролями МБ (10 мкМ соединения в ДМСО, положительный контроль) и МАХ (только ДМСО) на
- 5 018149 том же планшете. Значения процентного подавления и данные зависимости эффекта от концентрации (для 10 точек) последовательно анализировали путем построения четырехпараметрической сигмоидальной кривой зависимости эффекта от дозы, и относительные значения 1С50 определяли на основании полученной в результате кривой. Минимальное значимое отношение (М8К) для определенной 1С50 в анализе вызванного ЕСЕ9 образования р-ЕКК в присутствии БСА составляло 2,7. 1С50 для примера 1 в данном анализе составляла 0,0004 мкМ. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами вызванного ЕСЕ9 фосфорилирования ЕКК на раковых клетках человека.
Определение интенсивности фосфорилирования ЕКК (ТЬг202/Туг204) на эндотелиальных клетках пупочной вены человека (НиУЕС) с помощью тест-системы А1рЬа8сгееп 8игеЕ1ге
Подавляющее действие соединения на рецептор ЕСЕ 1 измеряли путем наблюдения фосфорилирования ЕКК (рЕКК) в ответ на стимуляцию основным фактором роста фибробластов (Ь-ЕСЕ) на эндотелиальных клетках пупочной вены человека (НИУЕС). Количество рЕКК измеряли с использованием системы АЬРНАЗСКЕЕХ 8ИКЕЕ1КЕ® (ТСК Вю5С1Спес5. ТСКЕ850К), которая представляет собой аналитическую систему для равномерного иммунного захвата по сэндвич-методу фосфорилированного анализируемого вещества с последующим выявлением с помощью покрытых антителами ядер ЛИРНА8СКЕЕЫ® (Реткш Е1тег) для генерации усиленного сигнала.
Клетки НИУЕС отмывали и культивировали до 7 пассажа в ростовой среде, состоящей из минимальной среды для эндотелиальных клеток (С1опейс8, СС-3132) с добавлением 10% ЭБС, 0,4% экстракта бычьего мозга, 0,1% гидрокортизона, 0,1% сульфата гентамицина-амфотерицина-В и 0,1% рекомбинантного эпидермального фактора роста человека. Для анализа клетки собирали с помощью стандартных процедур и затем подсчитывали. Клетки (20000/лунку) сажали в 100 мкл ростовой среды в 96-луночные планшеты с покрытием поли-Э-лизином (ΒΌ, 354640). Планшеты инкубировали в течение ночи при 37°С, 5% СО2.
В день проведения анализа клетки инкубировали в отсутствие сыворотки в 100 мкл среды ЕВМ (минимальной среды для эндотелиальных клеток), содержащей 1,5% ЭБС и 20 мг/мл БСА, в течение 3 ч при 37°С, 5% СО2, затем обрабатывали 20 мкл серийных трехкратных разведений соединений в бессывороточной среде в течение 1 ч при 37°С. В результате получали кривую зависимости эффекта от концентрации в диапазоне от 10-0,005 мкМ в 1% ДМСО, построенную по 10 точкам. Через 1 ч после обработки соединением клетки стимулировали 50 мкл Ь-ЕСЕ (81дта, Е0291, конечная концентрация Ь-ЕСЕ 50 нг/мл) при температуре 37°С в течение 15 мин. В лунках, содержащих клетки и 50 мкл стимулятора ЬЕСЕ, наблюдали МАХ сигнал, а в лунках положительного контроля, содержащих клетки, 10 мкМ соединения и 50 мкл стимулятора Ь-ЕСЕ, наблюдали ΜΙΝ сигнал. Среду затем удаляли и добавляли 50 мкл на лунку 1х лизирующего буфера 8ИКЕЕ1КЕ® (компонента набора 8ИКЕЕ1КЕ®, ТСК Вюкшепсер и продолжали инкубировать при комнатной температуре в течение 10 мин при слабом помешивании. Для выявления рЕКК 6 мкл лизата и 10 мкл реакционной смеси (60 частей реакционного буфера/10 частей активирующего буфера/0,6 частей ядер донора и ядер акцептора, Реткш Е1тег, 6760617К) переносили в 384луночный планшет Ртох1Р1а1е (Реткш Е1тег, 6006280). Планшет запечатывали и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 ч при слабом помешивании и затем анализировали на планшетном анализаторе Реткш Е1тег Епущюп, снабженном системой ТигЬоМойи1е с использованием стандартных параметров ЛИРНАЗСКЕЕХ (Ех680[|м и Ет520-620нм). Данные интенсивности излучения выражали в виде значения процентного подавления, определяемого по сравнению с контролями МАХ (только ДМСО) и ΜΙΝ (10 мкМ соединения в ДМСО, положительный контроль) на каждом планшете. Затем на основании данных для 10 концентраций соединения строили четырехпараметрическую логистическую кривую с использованием программы АСТ1У1ТУВА8Е® 4,0 и определяли значения 1С50. Минимальное значимое отношение (М8К) для 1С50 в анализе определения интенсивности фосфорилирования ЕКК ((Тйт202/Тут204) с помощью системы АИРНАЗСКЕЕХ 8ИКЕЕ1КЕ® составляло 2,1. Рассчитанная 1С50 для примера 1 в указанном анализе составляла 0,0006 мкМ. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами вызванного ЬЕСЕ фосфорилирования ЕКК в эндотелиальных клетках пупочной вены человека.
Исследование направленного подавления ЕСЕК ΐπ νίνο
Самок бестимусных мышей (СО1/пи/пи) акклиматизировали в течение 1 недели до проведения лечения. Животных распределяли в группу положительного контроля, группу отрицательного контроля и группу, получающую лечение соединением. Соединение (приготовленное в 10% камеди), положительный контроль (10% камедь) и отрицательный контроль (10% камедь) вводили путем принудительного кормления через рот. Дозы соединения находились в пределах от 0,15 до 25 мг/кг. Через 2 ч животным из группы, получающей лечение соединением, и группы положительного контроля вводили внутривенно свежеприготовленный раствор мышиного ЬЕСЕ (6 мкг/животное, Вюкоигсе РМС0033) в физиологическом растворе. Группа отрицательного контроля получала лечение физиологическим раствором путем внутривенного введения. Мышей умерщвляли через 10 мин после внутривенного введения дозы. Сердца животных собирали и гомогенизировали в течение 10 с в 300 мкл ледяного лизирующего буфера (КЕРА;
- 6 018149
Войоп ВюРтобис! ВР-115), содержащего ингибиторы в разведении 1:100 (коктейль ингибиторов фосфатаз I, 81дта Р2850; коктейль ингибиторов фосфатаз II, 8щша Р5726, и коктейль ингибиторов протеаз, 8щта Р8340). Гомогенаты центрифугировали при 14000 об./мин в течение 15 мин и супернатанты переносили в 96-луночный планшет. Количество белка определяли с помощью набора для белкового анализа СООМА881Е РЬи8™ (Р1егсе # 1856210). Анализ проводили в соответствии с рекомендациями производителя (см. инструкцию, прилагаемую к набору для проведения анализа).
Гомогенаты ткани сердца анализировали с использованием М8Б® рйозрйо-Етк ЕЬ18А (Мезо 8са1е Бксоуету, номер по каталогу Ы41СВ-1) для определения уровня фосфо-Егк в ткани. Процедуры ИФА проводили в соответствии с рекомендациями производителя (см. инструкцию по эксплуатации, прилагаемую к набору для проведения анализа; единственная модификация заключалась в добавлении 0,2% додецилсульфата натрия к лизирующему буферу). Положительный контроль соответствовал минимальному подавлению фосфо-Егк (0%), а отрицательный контроль соответствовал максимальному подавлению фосфо-Егк (100%). Процентное подавление в группах, получающих лечение соединением, рассчитывали по отношению к значениям для групп с максимальным и минимальным подавлением. Значение ТЕС90 рассчитывали на основании данных зависимости эффекта от дозы; оно представляло собой концентрацию, необходимую для достижения подавления на 90% в данный момент времени. Рассчитанная ТЕС90 для соединения примера 1 составляла 28 нМ. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами вызванного ЬЕСЕ фосфорилирования ЕВК ίη у1уо.
Для оценки активности указанного соединения по отношению к Кбг самок бестимусных мышей (СБ1/пи/пи) акклиматизировали и лечили согласно приведенному выше описанию за исключением использования УЕСЕ для стимуляции аутофосфорилирования Кбг (УЕСЕ, 6 мкг/животное, В & Б Зуйепъ 493-МУ/СЕ). Ткани сердца собирали и гомогенизировали, как описано выше. Полученные в результате гомогенаты анализировали с использованием набора для ИФА М8Б® рйозрйо-Кбт ЕБ18А (Мезо 8са1е Бксоуету, каталожный номер Ν41ΖΑ-1) для определения уровня в ткани фосфорилированного Кбг. Процедуры ИФА проводили в соответствии с рекомендациями производителя (см. инструкцию, прилагаемую к набору для проведения анализа; единственная модификация заключалась в добавлении 0,2% додецилсульфата натрия к лизирующему буферу). Группа положительного контроля получала лечение УЕСЕ (96 мкг/животное) в физиологическом растворе путем внутривенного введения (соответствовала минимальному подавлению фосфорилирования КБВ, 0%). Группа отрицательного контроля получала лечение физиологическим раствором путем внутривенного введения (соответствовала максимальному подавлению фосфорилирования КБВ, 100%). Процентное подавление в группах, получающих лечение соединением, рассчитывали по отношению к группами максимального и минимального подавления. Значения ТЕБ50 рассчитывали на основании данных зависимости эффекта от дозы, оно представляло собой дозу, необходимую для достижения подавления на 50% в данный момент времени. Рассчитанная ТЕБ50 для соединения примера 1 составляла 1,34 мг/кг. Значение ТЕС90 рассчитывается на основании данных зависимости эффекта от дозы и представляет собой концентрацию, необходимую для достижения подавления на 90% в этой точке времени. Рассчитанная ТЕС90 для соединения примера 1 составляет 252 нМ. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются менее активными ингибиторами вызванного УЕСЕ фосфорилирования Кбг ίη у1уо по сравнению с конкретными ранее известными ингибиторами ЕСЕВ.
Модели ксенотрансплантатов опухоли
Клетки рака мочевого пузыря человека ВТ112 (Европейская коллекция клеточных культур), клетки множественной миеломы человека ОРМ-2 (Германская коллекция микроорганизмов и культур клеток), клетки немелкоклеточного рака легких (НМРЛ) человека N0-4460 (Американская коллекция типовых культур), клетки рака поджелудочной железы человека ВхРС-3 (Американская коллекция типовых культур) или клетки рака желудка человека δΝυ-16 (Американская коллекция типовых культур) наращивали в культуре согласно рекомендациям Корейского банка клеточных линий (КСЕВ), собирали и вводили подкожно в область спины бестимусным мышам. После формирования опухоли (через 7-21 день после имплантации) животных рандомизировали и распределяли в контрольные группы и экспериментальные группы. Тестируемые соединения готовили в соответствующем плацебо (т.е. готовили в 10% камеди). И тестируемое соединение, и контроль плацебо вводили путем принудительного кормления через рот. Ответ опухоли на лечение определяли путем измерения объема опухоли, которое проводили дважды в неделю во время периода проведения лечения, и описывали как процентное подавление объема опухоли по сравнению с контрольной группой, получающей плацебо. Для соединения примера 1 была показана дозозависимая противоопухолевая активность на некоторых моделях ксенотрансплантатов опухоли. Например, на модели опухоли мочевого пузыря (ВТ-112) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 41,3%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 85,9%. На модели опухоли желудка (8Νυ-16) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 17 дней) наблюдалось подавление на 62%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 17 дней) наблюдалось подавление на 83%. На модели множественной миеломы
- 7 018149 (ОРМ-2) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 68%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 84%. На модели опухоли НМРЛ (ΝΟΙ-Η460) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 17 дней) наблюдалось подавление на 46%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 17 дней) наблюдалось подавление на 69%. На модели опухоли поджелудочной железы (ВхРС-3) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 1%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 55%. Указанные данные демонстрируют, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются ингибиторами опухолевого роста человеческих ксенотрансплантатов на различных животных моделях.
Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно входят в состав фармацевтических композиций, вводимых различными способами. Наиболее предпочтительно указанные композиции представляют собой композиции для перорального или внутривенного введения. Указанные фармацевтические композиции и способы их приготовления хорошо известны в данной области техники. См., например, ΒΕΜΙΝΟΤΟΝ: ΤΗΕ δΟΙΕΝΟΕ ΆΝΏ РКАСТ1СЕ ΘΡ ΡΗΆΚΜΆΟΥ (Ό. Тгоу, е1 а1., еЙ8., 2Г‘ еб., Ьгрргисой \νί11ίηΜΟ & νίΙΚίηδ. 2005).
Соединения согласно настоящему изобретению в общем случае эффективны в широком диапазоне дозировок. Например, дневная доза в норме составляет от примерно 0,5 до примерно 100 мг/кг массы тела. В некоторых примерах меньшая нижней границы вышеуказанного диапазона доза может являться более чем достаточной, тогда как в других случаях могут применяться дозы, превышающие верхнюю границу диапазона, не имеющие при этом какого-либо неблагоприятного побочного действия. Следовательно, вышеприведенный диапазон доз никоим образом не ограничивает объем изобретения. Необходимо понимать, что конкретное количество вводимого соединения определяется врачом с учетом значимых факторов, включая заболевание, которое необходимо лечить, выбранный способ введения, конкретное вводимое соединение или соединения, возраст, массу тела и ответ на лечение конкретного пациента, а также выраженность симптомов заболевания у вышеуказанного пациента.

Claims (7)

1. Соединение, представляющее собой (Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1Ниндазол-3-ил)винил)-1Н-пиразол-1-ил)этанол или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения.
2. Соединение по п.1, представляющее собой (В)-(Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)1Н-индазол-3-ил)винил)-1Н-пиразол-1-ил)этанол или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения.
3. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение или соль по п.1 или 2 в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем.
4. Применение соединения или соли по п. 1 или 2 для лечения рака.
5. Применение по п.4, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой немелкоклеточный рак легких.
6. Применение по п.4, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой рак желудка.
7. Применение по п.4, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой множественную миелому.
EA201171367A 2009-05-07 2010-05-04 Винилиндазолильные соединения EA018149B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US17629009P 2009-05-07 2009-05-07
US30141610P 2010-02-04 2010-02-04
PCT/US2010/033487 WO2010129509A1 (en) 2009-05-07 2010-05-04 Vinyl indazolyl compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201171367A1 EA201171367A1 (ru) 2012-04-30
EA018149B1 true EA018149B1 (ru) 2013-05-30

Family

ID=42238704

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201171367A EA018149B1 (ru) 2009-05-07 2010-05-04 Винилиндазолильные соединения

Country Status (35)

Country Link
US (1) US8268869B2 (ru)
EP (1) EP2427449B1 (ru)
JP (1) JP5555314B2 (ru)
KR (1) KR101373910B1 (ru)
CN (1) CN102421769B (ru)
AR (1) AR078411A1 (ru)
AU (1) AU2010246114B2 (ru)
BR (1) BRPI1013748A2 (ru)
CA (1) CA2760535C (ru)
CL (1) CL2011002781A1 (ru)
CO (1) CO6450624A2 (ru)
CR (1) CR20110580A (ru)
DK (1) DK2427449T3 (ru)
EA (1) EA018149B1 (ru)
EC (1) ECSP11011441A (ru)
ES (1) ES2408117T3 (ru)
HK (1) HK1163665A1 (ru)
HN (1) HN2011002809A (ru)
HR (1) HRP20130323T1 (ru)
IL (1) IL216004A (ru)
JO (1) JO2860B1 (ru)
MA (1) MA33244B1 (ru)
ME (1) ME01462B (ru)
MX (1) MX2011011342A (ru)
MY (1) MY160390A (ru)
NZ (1) NZ595553A (ru)
PE (2) PE20120812A1 (ru)
PL (1) PL2427449T3 (ru)
PT (1) PT2427449E (ru)
RS (1) RS52795B (ru)
SG (1) SG175909A1 (ru)
SI (1) SI2427449T1 (ru)
TW (1) TWI382982B (ru)
UA (1) UA104756C2 (ru)
WO (1) WO2010129509A1 (ru)

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JO3062B1 (ar) * 2010-10-05 2017-03-15 Lilly Co Eli R)-(e)-2-(4-(2-(5-(1-(3، 5-داي كلورو بيريدين-4-يل)إيثوكسي)-1h-إندازول-3-يل)?ينيل)-1h-بيرازول-1-يل)إيثانول بلوري
US8754114B2 (en) 2010-12-22 2014-06-17 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of FGFR3
US9481911B2 (en) 2012-03-08 2016-11-01 Astellas Pharma Inc. Methods for detecting FGFR3/TACC3 fusion genes
EP3822273B1 (en) 2012-06-13 2024-04-10 Incyte Holdings Corporation Substituted tricyclic compounds as fgfr inhibitors
US20150203589A1 (en) 2012-07-24 2015-07-23 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Fusion proteins and methods thereof
WO2014026125A1 (en) 2012-08-10 2014-02-13 Incyte Corporation Pyrazine derivatives as fgfr inhibitors
US9266892B2 (en) 2012-12-19 2016-02-23 Incyte Holdings Corporation Fused pyrazoles as FGFR inhibitors
KR20150129847A (ko) 2013-03-15 2015-11-20 더 트러스티스 오브 컬럼비아 유니버시티 인 더 시티 오브 뉴욕 융합 단백질 및 이들의 방법
SG10201708520YA (en) 2013-04-19 2017-12-28 Incyte Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CN103819396B (zh) * 2014-02-26 2016-06-15 四川大学 一种手性的1-（3,5-二氯吡啶-4-基）-乙醇的合成方法
US10851105B2 (en) 2014-10-22 2020-12-01 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
EP3237452A4 (en) 2014-12-23 2018-12-05 The Trustees of Columbia University in the City of New York Fusion proteins and methods thereof
WO2016134294A1 (en) 2015-02-20 2016-08-25 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr4 inhibitors
MX2017010673A (es) 2015-02-20 2018-03-21 Incyte Corp Heterociclos biciclicos como inhibidores de receptores del factor de crecimiento fibroblastico (fgfr).
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
CN105906621A (zh) * 2015-04-06 2016-08-31 四川百利药业有限责任公司 用作fgfr抑制剂的乙醇类化合物
WO2016187767A1 (en) * 2015-05-25 2016-12-01 Hutchison Medipharma Limited Pharmaceutical compositions and use thereof
EP3333157B1 (en) * 2015-08-07 2020-12-23 Harbin Zhenbao Pharmaceutical Co., Ltd. Vinyl compounds as fgfr and vegfr inhibitors
US10214515B2 (en) 2015-08-20 2019-02-26 Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd. Substituted pyrazoles as inhibitors of fibroblast growth factor receptor
CN107459519A (zh) 2016-06-06 2017-12-12 上海艾力斯医药科技有限公司 稠合嘧啶哌啶环衍生物及其制备方法和应用
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
CN112867716A (zh) 2018-05-04 2021-05-28 因赛特公司 Fgfr抑制剂的固体形式和其制备方法
CN112566912A (zh) 2018-05-04 2021-03-26 因赛特公司 Fgfr抑制剂的盐
WO2020185532A1 (en) 2019-03-08 2020-09-17 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an fgfr inhibitor
WO2021007269A1 (en) 2019-07-09 2021-01-14 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
AU2020366006A1 (en) 2019-10-14 2022-04-21 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
US11566028B2 (en) 2019-10-16 2023-01-31 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
WO2021088859A1 (zh) * 2019-11-06 2021-05-14 暨南大学 吲唑类化合物及其药用组合物和应用
KR20220131900A (ko) 2019-12-04 2022-09-29 인사이트 코포레이션 Fgfr 억제제의 유도체
EP4069696A1 (en) 2019-12-04 2022-10-12 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2021138391A1 (en) * 2019-12-30 2021-07-08 Tyra Biosciences, Inc. Indazole compounds
WO2022033472A1 (zh) * 2020-08-11 2022-02-17 河南迈英诺医药科技有限公司 Fgfr抑制剂化合物及其用途
US11939331B2 (en) 2021-06-09 2024-03-26 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as FGFR inhibitors

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002010137A2 (en) * 2000-07-31 2002-02-07 Signal Pharmaceuticals, Inc. Indazole derivatives as jnk inhibitors
EP1510516A1 (en) * 2002-05-31 2005-03-02 Eisai Co., Ltd. Pyrazole compound and medicinal composition containing the same

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1650203T3 (da) 2000-09-11 2008-06-02 Novartis Vaccines & Diagnostic Quinolinonderivater som tyrosinkinaseinhibitorer
EP1447405A4 (en) * 2001-10-17 2005-01-12 Kirin Brewery QUINOLINE OR QUINAZOLINE DERIVATIVES INHIBITING THE AUTOPHOSPHORYLATION OF FIBROBLAST GROWTH FACTOR RECEPTORS
DE10342503A1 (de) * 2003-09-12 2005-04-14 Merck Patent Gmbh Benzyl-Benzimidazolylderivate
EP1753763B1 (en) 2004-05-26 2008-08-13 Pfizer Limited Indazole and indolone derivatives and their use as pharmaceuticals
WO2007058626A1 (en) 2005-11-16 2007-05-24 S*Bio Pte Ltd Indazole compounds
JP2009531274A (ja) * 2005-12-07 2009-09-03 オーエスアイ・ファーマスーティカルズ・インコーポレーテッド キナーゼ阻害性ピロロピリジン化合物
DK2120932T3 (da) 2006-12-20 2014-10-13 Nerviano Medical Sciences Srl Indazolderivater som kinasehæmmere til behandling af kræft
US7737149B2 (en) * 2006-12-21 2010-06-15 Astrazeneca Ab N-[5-[2-(3,5-dimethoxyphenyl)ethyl]-2H-pyrazol-3-yl]-4-(3,5-dimethylpiperazin-1-yl)benzamide and salts thereof
BRPI0812450A2 (pt) 2007-06-05 2019-09-24 Schering Corp derivados de indazol policíclicos e seu uso como inibidores de erk para o tratamento de câncer
DE102007028521A1 (de) 2007-06-21 2008-12-24 Merck Patent Gmbh Indazolamidderivate
EP2265270A1 (en) * 2008-02-04 2010-12-29 OSI Pharmaceuticals, Inc. 2-aminopyridine kinase inhibitors

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002010137A2 (en) * 2000-07-31 2002-02-07 Signal Pharmaceuticals, Inc. Indazole derivatives as jnk inhibitors
EP1510516A1 (en) * 2002-05-31 2005-03-02 Eisai Co., Ltd. Pyrazole compound and medicinal composition containing the same

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20130323T1 (en) 2013-05-31
MX2011011342A (es) 2011-11-18
IL216004A (en) 2014-01-30
ECSP11011441A (es) 2011-12-30
TWI382982B (zh) 2013-01-21
WO2010129509A1 (en) 2010-11-11
MY160390A (en) 2017-03-15
AU2010246114B2 (en) 2012-12-06
EA201171367A1 (ru) 2012-04-30
IL216004A0 (en) 2012-01-31
BRPI1013748A2 (pt) 2016-04-05
EP2427449B1 (en) 2013-04-03
CA2760535A1 (en) 2010-11-11
AU2010246114A1 (en) 2011-11-03
KR101373910B1 (ko) 2014-03-12
TW201105652A (en) 2011-02-16
JP5555314B2 (ja) 2014-07-23
CO6450624A2 (es) 2012-05-31
UA104756C2 (ru) 2014-03-11
CN102421769B (zh) 2014-04-02
HK1163665A1 (en) 2012-09-14
SI2427449T1 (sl) 2013-05-31
ME01462B (me) 2014-04-20
PE20120812A1 (es) 2012-07-08
JO2860B1 (en) 2015-03-15
RS52795B (en) 2013-10-31
CL2011002781A1 (es) 2012-05-25
CA2760535C (en) 2014-01-14
US20100286209A1 (en) 2010-11-11
DK2427449T3 (da) 2013-04-22
AR078411A1 (es) 2011-11-09
NZ595553A (en) 2013-05-31
CR20110580A (es) 2012-01-06
PL2427449T3 (pl) 2013-08-30
MA33244B1 (fr) 2012-05-02
CN102421769A (zh) 2012-04-18
PE20160124A1 (es) 2016-02-24
US8268869B2 (en) 2012-09-18
ES2408117T3 (es) 2013-06-18
SG175909A1 (en) 2011-12-29
HN2011002809A (es) 2013-07-22
PT2427449E (pt) 2013-05-06
KR20120004511A (ko) 2012-01-12
EP2427449A1 (en) 2012-03-14
JP2012526126A (ja) 2012-10-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA018149B1 (ru) Винилиндазолильные соединения
CN111819173B (zh) Cd73抑制剂
JP5940547B2 (ja) 結晶（（ｒ）−（ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールおよびｆｇｆｒ阻害剤としての使用
RU2701193C2 (ru) Арилхиназолины
TW202104231A (zh) 用於治療kit 及pdgfra 介導之疾病的組合物及方法
CN110903283B (zh) 一种取代的喹唑啉类化合物、包含该化合物的药物组合物和该化合物的用途
EA021241B1 (ru) ОКСАЗОЛО[5,4-b]ПИРИДИН-5-ИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ
EA041789B1 (ru) Ингибиторы cd73

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): BY KG MD TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KZ TJ RU