KR20120004511A

KR20120004511A - 비닐 인다졸릴 화합물

Info

Publication number: KR20120004511A
Application number: KR1020117026320A
Authority: KR
Inventors: 다오홍 ?b; 홍-유 리; 겐쉬 짜오
Original assignee: 일라이 릴리 앤드 캄파니
Priority date: 2009-05-07
Filing date: 2010-05-04
Publication date: 2012-01-12
Also published as: HRP20130323T1; MX2011011342A; IL216004A; ECSP11011441A; TWI382982B; WO2010129509A1; MY160390A; AU2010246114B2; EA201171367A1; IL216004A0; BRPI1013748A2; EP2427449B1; CA2760535A1; AU2010246114A1; KR101373910B1; TW201105652A; JP5555314B2; CO6450624A2; UA104756C2; CN102421769B

Abstract

본 발명은 암의 치료에 유용한 비닐 인다졸릴 화합물을 제공한다.
<화학식 I>

Description

비닐 인다졸릴 화합물 {VINYL INDAZOLYL COMPOUNDS}

섬유모세포 성장 인자 (FGF)는 많은 생리학상 과정, 예컨대 발달 및 혈관신생 동안 형태형성의 중요한 매개인자(mediator)로서 인식되어 왔다. 섬유모세포 성장 인자 수용체 (FGFR) 패밀리는 세포외 이뮤노글로불린 (Ig)-유사 도메인, 소수성 막횡단 영역 및 티로신 키나제 도메인을 함유하는 세포질 부분으로 구성된 당단백질인 네 개의 구성원 (FGFR1-FGFR4)으로 이루어져 있다. FGF 결합은 FGFR 이량체화를 유발하고, 이어서 수용체 자기인산화 및 하류 신호전달 경로의 활성화를 유발한다. 수용체 활성화는 세포 성장, 세포 대사 및 세포 생존과 같은 다양한 과정의 조절에 참여하는 특정 하류 신호전달 파트너를 모집 및 활성화하기 위해 충분하다. 따라서, FGF/FGFR 신호전달 경로는 종양 세포 증식, 이동, 침습 및 혈관신생에 중요한 많은 생물학적 과정에서 다면발현성 효과를 갖는다.

비닐 인다졸은 당업계에서 암 치료용으로 알려져 있다. 예를 들면, WO0210137 및 WO2003101968을 참조한다. FGFR 억제제도 당업계에 알려져 있다. 예를 들면, WO2002022598을 참조한다.

본 발명은 암과 같은 증식성 장애, 특히 FGF 및/또는 FGFR 조절곤란에 의해 매개된 장애의 치료를 위한 임상 용도를 갖는다고 여겨진 신규한 비닐 인다졸릴 화합물을 제공한다.

게다가, 본 발명의 특정 화합물은 이전에 공지된 특정 FGFR 억제제에 비해 우수한 FGFR1 및 FGFR3 효능을 갖는다.

본 발명은 (E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

본 발명은 또한 (R)-(E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

본 발명은 본 발명의 유효량의 화합물 또는 염을 유방암, 비-소세포 폐 (NSCL) 암, 방광암, 위암, 췌장암, 전립선암, 결장암, 다발성 골수종, 간암, 흑색종, 두부 및 경부암, 갑상선암, 신장 세포암, 교아세포종 및 고환암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암의 치료를 필요로 하는 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 상기 암의 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 또한, 본 발명의 화합물 또는 염을 하나 이상의 제약상 허용되는 담체, 희석제, 또는 부형제와 함께 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 하나 이상의 다른 치료제를 추가로 포함한다.

본 발명은 또한 요법에 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 염을 제공한다. 게다가, 본 발명은 암을 치료하기 위한 의약의 제조에서 본 발명의 화합물 또는 염의 용도를 제공한다. 특히 상기 암은 유방암, 폐암, 방광암, 위암, 췌장암, 전립선암, 결장암, 다발성 골수종 AML, 간암, 흑색종, 두부 및 경부암, 갑상선암, 신장 세포암, 교아세포종 및 고환암으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 보다 특히, 상기 암은 유방암, 비-소세포 폐암, 방광암, 위암, 췌장암, 전립선암, 결장암, 다발성 골수종, 간암, 흑색종, 두부 및 경부암, 갑상선암, 신장 세포암, 교아세포종 및 고환암으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 가장 특히, 상기 암은 비-소세포 폐암이다. 가장 특히 암은 위암이다. 가장 특히 암은 다발성 골수종이다. 게다가, 본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 화합물 또는 염을 포함하는, 유방암, 비-소세포 폐암, 방광암, 위암, 췌장암, 전립선암, 결장암, 다발성 골수종, 간암, 흑색종, 두부 및 경부암, 갑상선암, 신장 세포암, 교아세포종 및 고환암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암을 치료하기 위한 제약 조성물을 제공한다.

당업자는 라세미체 (E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올이, (S)-1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에탄올 대신에 라세미체 1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에탄올로부터 출발하여 본질적으로 (R)-(E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올에 대해 기재된 바와 같이 제조될 수 있다는 것을 이해할 것이다. 게다가, 당업자는 (E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올이 한 개의 키랄 중심을 함유한다는 것을 이해할 것이다. (E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올이 단일 거울상이성질체로서 존재하는 것은 바람직하다. 단일 거울상이성질체는 키랄 시약을 시작으로 또는 입체선택적이거나 입체특이적인 합성 기술에 의해 제조될 수 있다. 별법으로, 단일 거울상이성질체는 표준 키랄 크로마토그래피 또는 결정화 기술에 의해 혼합물로부터 단리될 수 있다.

본 발명의 모든 화합물은 염을 형성할 수 있다는 것이 당업자에 의해 이해될 것이다. 본 발명의 화합물은 아민이고, 따라서 임의의 수많은 무기산 및 유기산과 반응하여 제약상 허용되는 산 부가염을 형성한다. 상기 제약상 허용되는 산 부가염 및 이들을 제조하기 위한 통상적인 방법론은 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들면 문헌[P. Stahl, et al., HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2008); S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol 66, No. 1, January 1977]을 참조한다.

본 발명의 화합물은 하기 제조 및 실시예에 예시한 바와 같이 제조될 수 있다. 하기 제조 및 실시예의 명명은 켐드로우(ChemDraw)(등록상표)울트라 10.0에서의 스트럭트=네임(Struct=Name) 명명 특징을 사용하여 수행하였다.

제조 1

1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에탄올

3구 12 L 둥근 바닥 플라스크에 테트라히드로푸란 (THF, 3 L) 및 디이소프로필아민 (DIPA, 315 mL, 2.24 mol)을 첨가하고, -78℃로 냉각하였다. n-부틸리튬 (헥산 중 1.6 M, 1400 mL, 2.24 mol)을 서서히 첨가하였다. 첨가 완료 후, 온도를 -78℃에서 고정시키고, 3,5-디클로로피리딘 (296.7 g, 2.00 mol)의 용액을 서서히 첨가하자 즉시 황색 용액이 형성되고 녹(rust)색 현탁액으로 변했다. 첨가 완료 후, 온도를 -78℃에서 고정시키고, THF (600 mL) 중 아세트알데히드 (230 mL, 4.05 mol)를 서서히 첨가하였다. -78℃에서 교반을 계속하였다. 3 시간 후, 드라이 아이스 조(bath)를 제거하고, 포화 수성 염화암모늄 (1 L)의 적가에 의해 반응물을 켄칭시키기 시작하였다. 반응물을 실온(RT)으로 가온하면서 밤새 교반하였다. 혼합물을 메틸-tert-부틸에테르 (MTBE, 2 L), 포화 수성 염화암모늄 (1 L) 및 물 (2 L)로 희석시켰다. 분배시키고 유기물을 포화 수성 염화나트륨 (염수)으로 세척하였다. 수성 상을 MTBE (1.5 L)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 [헥산 중 25% 에틸아세테이트 (EA)]에 의해 정제하여 표제 화합물을 적색 오일로서 수득하였다. 수율: 352 g (90%). MS (ES) m/z 192 [M+1]⁺.

제조 2

(S)-1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에탄올

90% 헵탄/10% 에탄올로 용리시키는 키랄팩(등록상표) AD-H 컬럼에서 상기 반응 중 수득된 입체이성질체의 혼합물을 분리하였다. 피크 2는 목적하는 거울상이성질체였다. CDCl₃ 중 생성물의 샘플 (최종 농도 100 mg/mL)을 용해하여 절대 배열을 수립하였다. BaF₂ 영역(window) 및 100 mm의 경로 길이가 장착된 IR 셀을 가진 키랄IR FT VCD 분광계 (바이오툴스 인크, BioTools Inc(등록상표))를 사용하여 4 cm-1의 해상도를 갖는 진동 원편광 이색성 (VCD) 및 적외선 (IR) 스펙트럼을 수득하였다. 6시간 동안 150 μL의 샘플에서 VCD 및 IR을 수집하였다. 보정(smoothing) 또는 추가의 데이터 가공(processing) 없이 데이터를 나타냈다. 리눅스 클러스터(Linux cluster)에서 B3PW91/6-31G** 수준에서 가우스(Gaussian)에 의해 최저의 에너지 이형태체(conformer)를 최적화함에 의해 진동 빈도 및 흡수 및 VCD 강도를 수득하였고, 진동 원편광 이색성의 6 cm-1의 로렌쯔(Lorentzian) 대역폭을 사용하여 상응하는 스펙트럼을 시뮬레이션하였다. 상기 분석은 생성물이 S-이성질체임을 나타내었다. 수율: 84.37 g (27%). MS (ES) m/z 192 [M+1]⁺.

제조 3

(S)-1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에틸 메탄술포네이트

디클로로메탄 (DCM, 100 mL) 중 (S)-1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에탄올 (5.02 g, 26.14 mmol)을 용해시키고, 얼음 조에서 플라스크를 냉각시켰다. 트리에틸아민 (TEA, 3.5 mL, 25.11 mmol)을 첨가하고, 이어서 메탄술포닐 클로라이드 (2.2 mL, 28.42 mmol)를 적가하였다. 얼음 조를 제거하고, 반응을 실온으로 가온하였다. 4 시간 후, 반응물을 물 (100 mL)로 켄칭시키고, 층을 분리하였다. DCM (50 mL)으로 수성층을 추출하고, 이어서 20% 이소프로필 알콜 (IPA)/클로로포름 (50 mL)으로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 수율: 7.15 g, (100%). MS (ES) m/z 270 [M+1]⁺.

제조 4

4-요오도-1-(2-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-1H-피라졸

마그네틱 교반 바, 질소 블랭킷(blanket) 및 내부 온도 프로브(probe)가 장착된 1 L 3구 플라스크에서 아세토니트릴 (ACN, 400 mL) 중 2-(2-브로모에톡시)테트라히드로-2H-피란 (34 g, 156 mmol)을 용해시켰다. 4-요오도피라졸 (29.34 g, 149.74 mmol)을 첨가하고, 이어서 탄산세슘 (73.4 g, 223.02 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 필터 케이크(filter cake)를 ACN으로 세척하고, 여과물을 농축하여 금색 오일을 수득하였다. 추가 정제 없이 사용하였다. 수율: 47.819 g (99%). MS (ES) m/z 323 [M+1]⁺.

제조 5

5-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-1H-인다졸

10 L 반응 용기를 N,N-디메틸포름아미드 (DMF, 2.50 L), 5-히드록시인다졸 (150.20 g, 1.12 mol) 및 1H-이미다졸 (114.35 g, 1.68 mol)로 충진하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, tert-부틸디메틸클로로실란 (253.16 g, 1.68 mol)을 0.5 시간에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 18℃에서 3시간 동안 교반하였다. 5℃에서 얼음 조에서 반응물에 물 (2.5 L)을 서서히 첨가시켜서 내부의 온도를 20℃ 주위에서 유지시켰다. 혼합물을 분별 깔때기로 전달하고, EA (2 x 2.5 L)로 추출하였다. 추출물을 합하고, 물 (3 x 2.5 L) 및 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨으로 유기 용액을 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 적색 오일을 수득하였다. 실리카겔 패드를 통해 오일을 통과시키고, 용리액 (헥산 중 0% 내지 30% EA)으로 용리시켜서 표제 화합물을 오렌지색 오일로서 수득하고, 이를 결정화하였다. 수율: 300 g (100%). MS (ES) m/z 249 [M+1]⁺.

제조 6

5-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸

DCM (4.00 L) 중 5-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-1H-인다졸 (300.00 g, 1.21 mol)의 용액을 10 L 쟈켓(jacketed) 반응기 용기에서 10℃로 냉각시켰다. 생성된 용액에 N-요오도숙신이미드 (298.89 g, 1.33 mol)를 0.5시간에 걸쳐 나누어 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하여 액체 크로마토그래피 질량 분광측정법 (LC-MS) 및 박층 크로마토그래피 (TLC)에 의해 표시된 바와 같이 완전하게 전환하였다. 혼합물을 10℃로 냉각시키고, 물 (2.5 L)로 켄칭시켰다. 혼합물을 분별 깔때기로 전달하고, 수성층을 DCM (2.5 L)에서 추출하였다. 합한 유기 추출물을 10% 수성 나트륨 티오술페이트 용액 (5 L) 및 염수로 세척하였다. 황산마그네슘으로 유기 용액을 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켜서 표제 화합물을 오렌지색 고체로서 수득하였다. 수율: 388 g (90%). MS (ES) m/z 375 [M+1]⁺.

제조 7

5-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-요오도-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-인다졸

DCM (2.50 L) 및 THF (1.00 L) 중 5-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-요오도-1H-인다졸 (387.00 g, 1.08 mol)의 용액을 10 L 쟈켓 반응기 용기에서 10℃로 냉각시켰다. 생성된 혼합물에 메탄술폰산 (14.0 mL, 216.02 mmol)을 첨가하고, 이어서 3,4-디히드로-2H-피란 (296 mL, 3.24 mol)을 0.5 시간에 걸쳐서 첨가하고, 경미한 발열을 관찰하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응물을 10℃로 냉각시키고, 포화 수성 중탄산나트륨 (2 L)으로 켄칭시켰다. 혼합물을 물 (2 L)로 희석시키고, 수성층을 DCM (2 L)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 (2 L) 및 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨으로 유기 혼합물을 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 용리액 (0 내지 10% EA/헥산)을 갖는 실리카겔 패드를 통해 잔류물을 용리시켜서 표제 화합물을 수득하였다. 수율: 150 g (31%). MS (ES) m/z 459 [M+1]⁺.

제조 8

(E)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-3-(2-(1-(2-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)비닐)-1H-인다졸-5-올

마그네틱 교반기, 온도 프로브 및 격막(septa)을 갖는 응축기가 장착된 500 mL 3구 둥근 바닥 플라스크에서 10분 동안 DMF (150 mL) 중 5-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-요오도-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-인다졸 (14 g, 30.54 mmol)의 혼합물에 질소를 살포하였다. 생성된 용액에 트리부틸아민 (TBA, 6.7 g, 36.1 mmol) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-비닐-1,3,2-디옥사보롤란 (7.0 g, 43.18 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 살포를 계속하였다. 생성된 혼합물에 비스(트리페닐포스핀) 팔라듐 (II) 클로라이드 (0.45 g, 0.63 mmol)를 첨가하고, 추가의 0.5시간 동안 살포를 계속하였다. 95-100℃에서 18시간 동안 혼합물을 가열하였다. 반응 혼합물을 40℃ 미만으로 냉각시키고, 4-요오도-1-(2-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-1H-피라졸 (9.8 g, 30.42 mmol)으로 충진하였다. 생성된 혼합물에 수산화바륨 8수화물 (19.3 g, 60.3 mmol) 및 물 (13 mL)을 첨가하고, 10분 동안 살포를 계속하였다. 반응물에 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 팔라듐 (II) 클로라이드 DCM 착체 (1.3 g, 1.56 mmol)를 첨가하고 0.5 시간 살포를 지속하였다. 혼합물을 95℃에서 질소 하에 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EA로 희석시키고, 셀라이트(등록상표) 패드를 통해 여과하였다. 상기 패드를 염수 (400 mL)로 세척하고, 여과물 층을 분리하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 합한 수성층을 EA로 추출하였다. 유기 용액을 합하고,농축하여 갈색 오일을 수득하였다. DCM (100 mL) 중 오일을 용해시키고, 실리카겔 패드에 첨가하였다. 용리액 (헥산 중 50% EA에 이어서 헥산 중 70% EA임)으로 패드를 용리시켜서 옅은 갈색 오일을 수득하였다. MTBE (100 mL)로 분쇄하여 표제 화합물을 고체로서 수득하였다. 수율: 5 g (37%). MS (ES) m/z 439 [M+1]⁺.

제조 9

5-((R)-1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-3-((E)-2-(1-(2-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)비닐)-1H-인다졸

내부 온도 프로브, 환류 응축기, 질소 블랭킷 및 마그네틱 교반 바가 장착된 3구 250 mL 둥근 바닥 플라스크에서, (E)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-3-(2-(1-(2-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)비닐)-1H-인다졸-5-올 (10.0 g, 22.83 mmol) 및 탄산세슘 (7.88 g, 23.94 mmol)을 ACN (92 mL) 중에 슬러리화하고, 60℃로 가온하였다. 현탁액에 (S)-1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에틸 메탄술포네이트 (7.03 g, 26.02 mmol)를 첨가하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 여과하고 ACN으로 고체를 세척하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (2-4% (메탄올 중 2 M 암모니아)/DCM)에 의해 정제하였다. 생성물 분획을 합하고, 진공하에 농축하여 백색 포말체를 수득하였다. 수율: 12.5 g (86%). MS (ES) m/z 612 [M+1]⁺.

실시예 1

(R)-(E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올

적하 깔때기, 질소 주입구, 내부 온도 프로브 및 마그네틱 교반기가 장착된 3구, 250 mL 둥근 바닥 플라스크에 메탄올 (57 mL)을 충진하고, 얼음 조에서 냉각시켰다. 생성된 용액에 아세틸 클로라이드 (20 mL, 281.03 mmol)를 적하 깔때기를 통해서 서서히 첨가하였다. 상기 용액에, 메탄올 (40 mL) 중 용해시킨 5-((R)-1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-3-((E)-2-(1-(2-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)비닐)-1H-인다졸 (7.1 g, 11.59 mmol)을 적하 깔때기를 통해서 첨가하였다. 첨가 완료 후, 얼음 조를 제거하고, 실온으로 가온하고, 혼합물을 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켜서 황색 포말체를 수득하였다. 메탄올 (10 mL) 중 황색 포말체를 용해시키고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (120 mL)에 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 고체를 물 (100 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조하였다. 고온의 EA/메탄올/헥산으로부터 고체를 재결정화하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수율: 2.1 g (41%). MS (ES) m/z 444 [M+1]⁺.

FGF/FGFR 경로의 비정상적 조절은 인간 악성종양 (malignancy)의 많은 형태에서 나타난다. FGFR 및 FGF는 다수의 암에서 종종 과-발현되고, 그들의 발현은 종종 나쁜 예후와 연관되어 있다. FGFR 키나제 도메인에서 활성화 돌연변이는 유방, NSCLC, 방광, 위, 전립선, 결장, 및 다발성 골수종을 비롯한 여러가지 유형의 종양에서 발견된다. FGFR 유전자좌의 게놈의 증폭은 또한 많은 유방암, 위암, 및 다발성 골수종 암 환자에서 검출되었다. FGFR 및 FGF의 과-발현은 또한 많은 상이한 유형의 종양, 예컨대 방광, 다발성 골수종, 전립선, 및 폐암에서 발견되었다. FGFR 패밀리 경로 억제제 요법으로부터 이익을 얻을 수 있는 다른 암은 AML, 간암, 흑색종, 두부 및 경부암, 갑상선암, 췌장암, 신장 세포암, 교아세포종 및 고환암을 포함한다. 또한, FGF 및 FGFR은 종양 형성 및 진행에서의 그들의 역할에 더하여, 특히 종양 성장 동안 혈관신생의 핵심 조절자(key regulator)이다. FGF/FGFR 축은 또한 다른 종양 기질의 세포, 예컨대 암 관련 섬유모세포를 늘리는데 중요한 역할을 한다. FGF의 상향-조절은 또한 항혈관신생 및 다른 화학-요법에 대한 내성을 유발한다. 최종적으로, FGFR의 소분자 억제제는 여러 임상전 종양 모델에서 항종양 활성을 입증하였고, 임상에서 탐구되었다. 종합하면, FGF/FGFR 경로는 암 세포에서 여러가지 중요한 세포 과정에 필수적이다. 이러한 이유로, FGFR 및/또는 FGF 신호전달을 표적화하는 요법은 종양 세포에 직접적으로, 및 종양 혈관신생 둘 다에서 영향을 미칠 수 있다.

예시된 모든 화합물은 본질적으로 하기 검정의 하나 이상에서 다음에 기재된 바와 같이 시험하였다: FGFR1 효소 검정 (필터 결합), FGFR3 효소 검정 (필터 결합), RT-112 세포 기반 검정에서 FGF9 유도 p-ERK (BSA의 존재 하), 인간 제대 정맥 내피 세포 (HUVEC) 세포 기반 검정에서 ERK 인산화 (Thr202/Tyr204)의 알파스크린 슈어파이어(AlphaScreen SureFire) 검출, 생체내 FGFR 표적 억제 검정, 및 RT112 인간 방광 및 다른 암 이종이식편 모델. 상기 검정은 시험 화합물이 FGFR 패밀리 경로 억제제이고, 항암 활성을 갖는다는 것을 입증한다.

FGFR1 및 FGFR3 효소 검정 (필터 결합)

FGFR1 또는 FGFR3 키나제 (0.15 ng/μL 인간 FGFR1 또는 0.32 ng/μL 인간 FGFR3)를 10 mM 4-(2-히드록시에틸)-1-피페라진에탄-술폰산 (HEPES) pH 7.5, 8 mM 트리스(히드록시메틸)아미노메탄 (트리스-HCl), pH 7.5, 5.0 mM 디티오트레이톨 (DTT), 10.0 μM 아데노신 트리포스페이트 (ATP), 10 mM MnCl₂, 150 mM NaCl, 0.01% 트리톤(TRITON)(등록상표) X-100, 0.5 μCi ³³P-ATP, 및 0.05 μg/μL 폴리(Glu-Tyr)를 함유하는 50 μL의 완충액 중에서 인큐베이션하였다. 반응을 실온에서 30 분 동안 50 μL의 부피에서 수행한 다음, 130 μL의 10% H₃PO₄를 첨가하여 켄칭시켰다. 반응물 (120 μL)을 96 웰 1.0 μm 유리 섬유 필터 플레이트로 전달하고, 실온에서 20-30분 동안 인큐베이션시킨 다음, 0.5% H₃PO₄로 티터텍(TITERTEK)(등록상표) 줌 상에서 3회 세척하였다. 40 μL의 마이크로사인트(MicroScint)^TM20 (패커드, Packard)을 첨가하기 전에 웰을 공기 건조시킨 다음, 왈락 마이크로베타(Wallac Micobeta) 계수기에서 계수하였다. 화합물 억제를 위해, 화합물을 디메틸 술폭시드 (DMSO) 중 10 mM 스톡(stock)으로서 제공하였다. 화합물을 20% DMSO에서 1:3으로 단계적으로 희석하여 10-포인트(point) 농도-반응 곡선을 만들고, 필터 플레이트에서 반응 혼합물의 첨가 전에 반응 플레이트에서 1:5로 희석 (4% 최종 DMSO 농도 중 최종 20 μM 내지 0.001 μM)하여 화합물 활성을 결정하였다. 0.1 M 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA)을 함유하는 대조군 웰에 의해 기저선(baseline)이 수립되는 반면에 대조군 웰은 4% DMSO만을 함유하였다. 10개의 농도에 대한 각각의 백분율 억제 값은 각각의 플레이트 상에서 대조군 웰로부터 계산되고, 10 포인트 농도 반응 데이터는 그 후에 생성된 곡선 핏(fit)으로부터 추정된 절대 IC₅₀ 값 및 4-파라미터 로지스틱 방정식을 사용하는 액티비티베이스(ActivityBase) 소프트웨어 (IDBS)를 사용하여 분석하였다. FGFR1 및 FGFR3 효소 검정은 각각 1.38 및 1.47로 평가되는 IC₅₀에 대해 최소 유의 비율(Minimum Significant Ratios, MSR)을 가졌다. 상기 검정에서 FGFR1 및 FGFR3에 대한 실시예 1의 IC₅₀ 결과는 각각 0.0077 및 0.0064 μM로 평가되었다. 상기 데이터는 본 발명의 특정 화합물이 강력한 FGFR1 및 FGFR3 효소 억제제라는 것을 입증한다.

BSA 를 갖는 FGF9 유도 p- ERK

인간 RT112 방광암종 세포를 셀바인드(CELLBIND)(등록상표) 96 웰 플레이트 (코닝(Corning) 3340)에서 10% 우태 혈청 (FBS, 깁코(Gibco) 10082-147) 및 1%의 페니실린/스트렙토마이신 용액 (깁코 15140-122)이 보충된 100 μL RPMI 1640 (깁코 11875-085)에서 웰 마다 5,000 개의 세포 밀도로 시딩하고, 37℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 다음날 아침, 성장 배지를 제거하고, 20 mg/mL 소 혈청 알부민 (BSA)이 보충된 100 μL RPMI 1640으로 대체하였다. 37℃에서 3시간 인큐베이션한 후, 6% DMSO 중 20 mg/mL BSA를 갖는 RPMI 1640에서 3회 단계적으로 희석된 화합물 20 μL를 각 웰에 첨가하였다. 이로써 1% DMSO 중 10-0.005 μM 범위의 10 포인트 투여량-반응 곡선을 얻었다. 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션을 지속하였다. 세포를 혈청 무함유 RPMI에서 50 μg/mL FGF9 (R&D 시스템즈(Systems) 273-F9) 용액 50 μL로 자극하여 500 ng/mL FGF9의 최종 농도를 수득하였다. 포스페이트 완충 염수 (PBS) (3.7% 포름알데히드 최종 농도)에서 30 μL의 25% 포름알데히드 용액의 첨가에 의해 세포를 고정시키고, 30분 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 세포를 PBS로 3회 세척하고, 이어서 100 μL의 냉 메탄올을 첨가하고, -20℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 메탄올을 제거하고, 0.1% 트리톤(TRITON)(등록상표) X-100 (PBST)를 함유하는 PBS로 세포를 처리하고, PBS로 3회 세척하고, 15분 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 이어서 세포를 2% BSA, 0.01% 포스파타제 억제제 칵테일(Cocktail) 1 (시그마(Sigma) P2850), 0.01% 포스파타제 억제제 칵테일 2 (시그마 P5726), 및 0.01% 프로테아제 억제제 칵테일 (시그마 P8340)이 보충된 PBS 중 p-p44/42 MAPK 1차 항체 (세포 신호전달 9101S)의 1:400 희석액 50 μL에서 부드럽게 진탕하며 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 다음날 아침, 플레이트를 PBST로 2회 및 PBS로 2회 세척하고, 이어서 1% BSA 및 0.1%의 포스파타제 억제제 칵테일 1, 0.01% 포스파타제 억제제 칵테일 2, 및 0.01% 프로테아제 억제제 칵테일을 갖는 PBS 중 80 uL의 알렉사 플루오르(Alexa Fluor) 488 염소 항-래빗 IgG H+L 2차 항체 (인비트로겐(Invitrogen) A11034)의 1:1000 희석액에서 암조건에서 1 시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 세포를 PBS로 3회 세척하고, 이어서 PBS 중 프로피디엄 요오다이드 (PI) (몰레큘라 프로브(Molecular Probe) P-3566)의 1:200 희석액 100 μL를 첨가한 다음, 1시간 동안 암조건에서 인큐베이션하였다. 웰 마다 p-ERK 양성 세포 및 총 세포를 각각 알렉사(Alexa) 488 및 PI에 대해 광학 필터 500-530 nM 및 575-640 nM를 이용하여 아큐멘 익스플로러(ACUMEN EXPLORER)™ (TTP 랩테크 엘티디(LabTech Ltd))로 확인하였다. 알렉사 488 값을 사용하는 pERK/웰에 대한 총 평균 강도는 그 후에 동일한 플레이트 상에서 수행되는 MIN (DMSO 중 10 μM 양성 대조군 화합물) 및 MAX (DMSO 단독) 대조군으로부터 얻어진 값을 사용하는 백분율 억제로 전환되었다. 백분율 억제 값 및 10-포인트 농도 반응 데이터는 그 후에 4-파라미터 S형 투여량 반응 방정식을 사용하여 분석하였고, 상대적 IC₅₀ 값은 생성된 곡선으로부터 평가하였다. BSA 검정에서의 FGF9 유도 p-ERK는 2.7의 추정 IC₅₀에 대한 최소 유의 비율 (MSR)을 가졌다. 상기 검정에서 실시예 1의 IC₅₀은 0.0004 μM로 평가되었다. 상기 데이터는 본 발명의 특정 화합물이 인간 암 세포에서 FGF9 유도 ERK 인산화의 강력한 억제제라는 것을 입증한다.

인간 제대 정맥 내피 세포 ( HUVEC )에서 ERK 인산화 ( Thr202 / Tyr204 )의 알파스크린 슈어파이어 검출

FGF 수용체 1의 억제에서 화합물의 효과는 인간 제대 내피 세포 (HUVEC)에서의 염기성-섬유모세포 성장 인자 (b-FGF) 자극에 대한 반응으로 ERK (pERK)의 인산화를 모니터링하여 측정하였다. 형성된 pERK의 수준은 알파스크린(등록상표) 슈어파이어 (등록상표) 시스템 (TGR 바이오사이언시스(Biosciences), TGRES50K)을 사용하여 측정하였다. 이것은 인산화 분석대상물(analyte)의 면역-샌드위치 캡쳐를 이용하고, 이어서 항체-코팅된 알파스크린(등록상표) 비드 (퍼킨 엘머, Perkin Elmer)를 사용하는 검출을 이용하여 증폭된 신호를 생성하는 균일 검정 포맷이다.

HUVEC 세포를 회수하고, 10% FBS 0.4% 소 뇌 추출물 0.1% 히드로코르티손, 0.1% 겐타마이신 술페이트 암포테리신-B, 및 0.1% 표피 성장 인자, 계대 7까지의 인간 재조합물로 보충된 내피 세포 기저 매질 (클로네틱스(Clonetics), CC-3132)로 이루어진 성장 배지에서 유지하였다. 검정의 경우, 세포를 표준 절차에 의해 얻은 다음 계수하였다. 세포 (20,000/웰)를 100 μL의 성장 배지에서 96 웰 폴리-D-라이신 코팅된 플레이트 (BD, 354640)로 플레이팅하였다. 플레이트를 37℃, 5% CO₂에서 밤새 인큐베이션하였다.

검정 당일에, 세포를 37℃, 5% CO₂에서 3시간 동안 1.5% FBS 및 20 mg/mL BSA를 함유하는 100 μL EBM (내피 세포 기저) 배지 중 혈청을 결핍시킨 다음, 37℃에서 1시간 동안 결핍 배지 중 단계적으로 3회 희석된 20 μM의 화합물로 처리하였다. 이로써 1% DMSO 중 10-0.005 μM 범위의 10 포인트 농도-반응 곡선을 얻었다. 화합물 처리 1시간 후, 37℃에서 15분 동안 세포를 50 μL b-FGF (시그마(Sigma), F0291, 최종 b-FGF 농도 50 ng/mL)로 자극하였다. 세포 및 50 μL 자극제 b-FGF를 함유하는 웰에서 MAX 신호가 생성되었고, 10 μM 양성 대조군 화합물 및 50 ul 자극제 b-FGF를 갖는 세포에서 MIN이 생성되었다. 이어서 배지를 제거하고, 50 μL 의 1x 슈어파이어(SUREFIRE)(등록상표) 용해 완충액 (TGR 바이오사이언시스 슈어파이어 (등록상표) 키트 성분)를 각 웰 당 첨가하고, 부드럽게 진탕하며 10분 동안 실온에서 인큐베이션을 지속하였다. pERK 검출을 위해, 6 μL 용해물 및 10 μL 반응 혼합물 (60 부 반응 완충액/10 부 활성화 완충액/0.6 부 각각의 공여체 및 수용체 비드, 퍼킨 엘머(Perkin Elmer), 6760617R)을 384 웰 프록시플레이트 (퍼킨 엘머, 6006280)로 전달하였다. 플레이트를 밀봉하고, 부드럽게 진탕하며 2시간 동안 실온에서 인큐베이션한 다음, 표준 알파스크린(등록상표) 세팅 (Ex_680nm 및 Em₅₂₀ _-620 _nm)을 사용하는 터보모듈(TurboModule)이 장착된 퍼킨 엘머 엔비젼(EnVision) 플레이트 판독기 상에서 판독하였다. 방출 데이터를 각각의 플레이트 상에서 MAX (DMSO 단독) 및 MIN (DMSO 중 10 μM 양성 대조군 화합물) 대조군으로부터 결정된 백분율 억제로 전환한 다음, 10-포인트 화합물 농도 데이터를 액티비티베이스(ACTIVITYBASE)(등록상표) 4.0를 사용하는 4-파라미터 로지스틱 방정식에 적용하여 IC₅₀을 평가하였다. ERK 인산화 ((Thr202/Tyr204) 검정의 알파스크린(등록상표)슈어파이어(등록상표) 검출은 2.1의 IC₅₀에 대한 최소 유의 비율 (MSR)을 가졌다. 상기 검정에서 실시예 1의 IC₅₀은 0.0006 μM로 평가되었다. 상기 데이터는 본 발명의 특정 화합물이 인간 제대 내피 세포에서 bFGF 유도 ERK 인산화의 강력한 억제제라는 것을 입증한다.

FGFR 생체내 표적 억제 검정

암컷 누드 마우스 (CD1/nu/nu)를 처리하기 전 1주일 동안 순응시켰다. 동물을 양성 대조군, 음성 대조군 및 화합물 처리군으로 그룹화하였다. 화합물 (10% 아카시아 중 제제화함), 양성 대조군 (10% 아카시아), 및 음성 대조군 (10% 아카시아)을 경구 위관영양법(gavage)에 의해 투여하였다. 화합물 투여량은 0.15 내지 25 mg/kg의 범위였다. 2시간 후, 화합물 처리군 및 양성 대조군을 정맥내로 투여된 염수에서 갓 준비된 마우스 bFGF (6 μg/동물, 바이오소스(Biosource) PMG0033)로 처리하였다. 음성 대조군을 정맥내로 투여된 염수로 처리하였다. 마우스를 정맥내 투여 10분 후에 희생시켰다. 동물 심장을 수득하고, 1:100로 희석된 억제제 (포스포타제 억제제 칵테일 I 시그마 P2850; 포스포타제 억제제 칵테일 II 시그마 P5726 및 프로테아제 억제제 칵테일 시그마 P8340)를 함유하는 300 μL의 빙냉 용해 완충제 (RIPA; 보스톤 바이오프로덕트(Boston BioProduct) BP-115)에서 10초 동안 균질화하였다. 균질액을 14,000 RPM에서 15분 동안 원심분리하고, 상등액을 96-웰 플레이트에 전달하였다. 단백질 수준을 쿠마시 플러스(COOMASSIE PLUS)™ 단백질 검정 방법 (피어스(Pierce)#1856210)에 의해 결정하였다. 검정 절차는 제조사의 추천과 동일하다 (검정 키트에 포함된 사용 설명서 참조).

심장 조직 균질액을 MSD(등록상표) 포스포-Erk 엘리사(ELISA) (메조 스케일 디스커버리(Meso Scale Discovery), 목록 번호 N41CB-1)를 사용해서 분석하여 조직 포스포-Erk 수준을 결정하였다. 엘리사 절차는 제조사의 추천과 동일하다 (검정 키트에 포함된 사용 설명서 참조; 유일한 변형은 0.2% 나트륨 도데실 술페이트를 용해 완충제에 첨가한 것임). 최소 포스포-Erk 억제 (0%)로서 양성 대조군이 사용되었고, 최대 포스포-Erk 억제 (100%)로서 음성 대조군이 사용되었다. 화합물 처리군의 백분율 억제를 최대 및 최소 억제군에 대해 상대적으로 계산하였다. TEC₉₀은 투여량 반응 연구로부터 계산되었으며, 상기 시점에서 90% 억제를 달성하기 위해 필요한 농도이다. 예를 들면, 실시예 1의 화합물은 28 nM의 TEC₉₀으로 평가되었다. 상기 데이터는 본 발명의 특정 화합물이 생체내 bFGF 유도 ERK 인산화의 강력한 억제제라는 것을 입증한다.

Kdr에 대한 상기 화합물의 활성을 평가하기 위해, 암컷 누드 마우스 (CD1/nu/nu)를 순응시키고, VEGF를 제외하고 상기 기재된 바와 같이 처리하여 Kdr 자가인산화 {VEGF (6 ug/동물, R & D 시스템즈(Systems) 493-MV/CF)를 유발하였다. 심장 조직을 수집하고 상기 기재한 바와 같이 균질화하였다. 생성된 균질액을 MSD(등록상표) 포스포-Kdr 엘리사 (메조 스케일 디스커버리, 목록 번호 N41ZA-1)를 사용하여 분석하여 조직 포스포-Kdr 수준을 결정하였다. 엘리사 절차는 제조사의 추천과 동일하다 (검정 키트에 포함된 사용 설명서 참조; 유일한 변형은 0.2% 나트륨 도데실 술페이트를 용해 완충제에 첨가한 것임). 양성 대조군을 정맥내로 투여된 염수 중 VEGF (동물 한 마리당 96 ug)로 처리하였다 (0%의 최소 p-KDR 억제로서 처리함). 음성 대조군을 정맥내로 투여된 염수로 처리하였다 (100%의 최대 p-KDR 억제로서 처리함). 화합물 처리군의 백분율 억제를 최대 및 최소 억제군에 대해 상대적으로 계산하였다. TED₅₀은 투여량 반응 연구로부터 계산하고, 상기 시점에서 50% 억제를 달성하기 위해 필요한 투여량이다. 예를 들면, 실시예 1의 화합물은 1.34 mg/kg의 TED₅₀으로 평가되었다. TEC₉₀은 투여량 반응 연구로부터 계산되었으며, 상기 시점에서 90% 억제를 달성하기 위해 필요한 농도이다. 예를 들면, 실시예 1의 화합물은 252 nM의 TEC₉₀으로 평가되었다. 상기 데이터는 본 발명의 특정 화합물이 특정한 기존의 공지된 FGFR 억제제에 비해 생체내 VEGF 유도 Kdr 인산화의 덜 강력한 억제제라는 것을 입증한다.

이종이식편 종양 모델

인간 방광암 세포 RT112 (유로피안 컬렉션 오브 셀 컬쳐스, European Collection of Cell Cultures), 인간 다발성 골수종 세포 OPM-2 (저먼 컬렉션 오브 마이크로오가니즘스 앤드 셀 컬쳐스, German Collection of Microorganisms and Cell Cultures), 인간 비-소세포 폐암 (NSCL) 세포 NCI-H460 (아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션, American Type Culture Collection), 인간 췌장암 세포 BxPC-3 (아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션) 또는 인간 위암 세포 SNU-16 (아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션)중 한가지를 한국 세포주 은행(KOREAN CELL LINE BANK, KCLB)의 추천에 따라 배양 중 확장시키고, 수거하고, 누드 마우스의 후방 측면에 피하로 주사하였다. 종양이 수립되었을 때 (이식 후 7-21일), 동물을 랜덤화하고, 대조군 및 시험군으로 그룹화하였다. 시험 화합물을 적절한 비히클 중 제조하고 (즉, 10% 아카시아 중 제제화함), 시험 화합물 및 비히클 대조군을 경구 위관영양법(gavage)에 의해 투여하였다. 종양 반응은 처리 과정 동안 일주일에 두 번 수행된 종양 부피 측정에 의해 결정하고, 종양 부피 대 비히클 대조군의 백분율 억제로서 보고되었다. 실시예 1의 화합물은 여러 이종이식편 종양 모델에서 투여량 의존 항종양 활성을 입증하였다. 예를 들면, 방광 종양 모델 (RT-112)에서 3 mg/kg (21일 동안 QD)로 투여되는 경우, 41.3% 억제를 달성하였고; 3 mg/kg (21일 동안 BID)로 투여되는 경우, 85.9% 억제를 달성하였다. 위 종양 모델 (SNU-16)에서 3 mg/kg (17일 동안 QD)로 투여되는 경우, 62% 억제를 달성하였고; 3 mg/kg (17일 동안 BID)로 투여되는 경우, 83% 억제를 달성하였다. 다발성 골수종 종양 모델 (OPM-2)에서, 3 mg/kg (21일 동안 QD)로 투여되는 경우, 68% 억제를 달성하였고; 3 mg/kg (21일 동안 BID)로 투여되는 경우, 84% 억제를 달성하였다. NSCLC 종양 모델 (NCI-H460)에서, 3 mg/kg (17일 동안 QD)로 투여되는 경우, 46% 억제를 달성하였고; 3 mg/kg (17일 동안 BID)로 투여되는 경우, 69% 억제를 달성하였다. 췌장 종양 모델 (BxPC-3)에서, 3 mg/kg (21일 동안 QD)로 투여되는 경우, 1% 억제를 달성하였고; 3 mg/kg (21일 동안 BID)로 투여되는 경우, 55% 억제를 달성하였다. 상기 데이터는 본 발명의 특정 화합물이 여러 동물 모델에서 이종이식편 인간 종양 성장의 억제제라는 것을 입증한다.

본 발명의 화합물은 바람직하게는 다양한 경로에 의해 투여되는 제약 조성물로서 제제화된다. 가장 바람직하게는, 상기 조성물은 경구 또는 정맥내 투여용이다. 상기 제약 조성물 및 제약 조성물을 제조하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들면, 문헌 [REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY (D. Troy, et al., eds., 21^st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005)]을 참조한다.

본 발명의 화합물은 일반적으로 광범위한 투여량에 대해 효과가 있다. 예를 들어 일일 투여량은 통상적으로 1 kg의 체중 당 약 0.5 내지 약 100 mg의 범위 내에서 존재한다. 몇몇 경우에서, 상기한 범위의 하한 미만의 투여량 수준이 더 적절할 수 있는 반면에 다른 경우에서는 더 많은 투여량이 임의의 유해한 부작용을 야기하지 않고 사용될 수 있고, 따라서 상기 투여량 범위는 어떠한 방식으로든지 본 발명의 범위를 제한하고자 함은 아니다. 실제로 투여되는 화합물의 양은 처리될 조건, 선택된 투여 경로, 투여된 실제 화합물 또는 화합물들, 나이, 체중 및 개별 환자의 반응, 및 환자의 증상의 증증도를 비롯한 관련된 상황에 비추어, 의사에 의해 결정될 것이라는 점이 이해될 것이다.

Claims

(E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, (R)-(E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-디클로로피리딘-4-일)에톡시)-1H-인다졸-3-일)비닐)-1H-피라졸-1-일)에탄올인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항 또는 제2항의 화합물 또는 염을 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제와 함께 포함하는 제약 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 요법에 사용하기 위한 화합물 또는 염.
제1항 또는 제2항에 있어서, 암을 치료하기 위한 화합물 또는 염.
제5항에 있어서, 암이 비-소세포 폐암인 화합물.
제5항에 있어서, 암이 위암인 화합물.
제5항에 있어서, 암이 다발성 골수종인 화합물.