EA016791B1

EA016791B1 - Замещенные 8-[6-амино-3-пиридил]ксантины

Info

Publication number: EA016791B1
Application number: EA200900010A
Authority: EA
Inventors: Гуокван Ванг; Роберт Д. Томпсон; Джейсон М. Ригер
Original assignee: ТРОВИС ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ ЭлЭлСи
Priority date: 2006-06-16
Filing date: 2007-06-13
Publication date: 2012-07-30
Also published as: US20080004292A1; AU2007261568B2; HUE026457T2; IL195916A0; KR20090029268A; PT2029143E; CN103145712A; MY152178A; CA2655598C; NZ597222A; US7884100B2; US8258142B2; EA200900010A1; JP5417558B2; MX2008015954A; US20110082139A1; PL2029143T3; IL195916A; EP2029143A2; JP2010500284A

Abstract

В настоящем изобретении предложены замещенные 8-[6-амино-3-пиридил]ксантины и фармацевтические композиции, которые являются селективными антагонистами Aаденозиновых рецепторов (AP). Эти соединения и композиции полезны в качестве фармацевтических агентов.

Description

Сведения о родственных заявках

В заявке на данное изобретение заявлены приоритетные преимущества предварительной заявки на патент США № 60/805030, поданной 16 июня 2006 г., и предварительной заявки на патент США № 60/805864, поданной 22 июня 2006 г., которые специально включены в описание во всей своей полноте посредством ссылки.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к замещенным 8-[6-амино-3-пиридил]ксантинам и фармацевтическим композициям, которые являются селективными антагонистами А_2В аденозиновых рецепторов (АР). Эти соединения и композиции полезны в качестве фармацевтических агентов.

Предшествующий уровень техники

Алкилксантин-теофиллин

сц, слабый неселективный аденозиновый антагонист (см. Ыибеи, 1., е! а1., Сатбюуакси1аг Вю1оду о£ Риттек, ебк. С. Вигик!оск, е! а1., 1998, р. 1-20), является терапевтически полезным для лечения астмы.

Однако его применение связано с неприятными побочными эффектами, такими как бессонница и диурез. В последние годы применение теофиллина в качестве бронходилататора для облегчения астмы было вытеснено лекарственными средствами других классов, например селективными в₂-адренергическими агонистами, кортикостероидами и, недавно, лейкотриеновыми антагонистами. Эти соединения также имеют ограничения. Таким образом, создание лекарственного средства, подобного теофиллину, с пониженными побочными эффектами по-прежнему является желательным.

Было признано, что теофиллин и его близкородственный аналог кофеин блокируют эндогенный аденозин, действуя в терапевтически полезных дозах в качестве местного модулятора аденозиновых рецепторов в мозге и других органах. Аденозин активирует четыре подтипа аденозиновых рецепторов (АР), А₁/А_2А/А_2В/А₃, связанных с белком С.

Энпрофиллин

(СН_а)₂СН₃является другим примером ксантина, который, как было описано, блокирует А2В аденозиновые рецепторы и применяется для лечения астмы.

В патенте США № 6060481 (ЪаКоие е! а1.) было также показано, что селективные аденозиновые А2В антагонисты являются полезными для улучшения у пациента чувствительности к инсулину.

Было описано, что терапевтические концентрации теофиллина или энпрофиллина блокируют А_2Врецепторы человека, и предложено, что антагонисты, селективные для этого подтипа, могут обладать потенциальным применением в качестве противоастматических агентов (см. Реок!1к!оу, I., е! а1., Рйатшасок Веу. 1997, 49, 381-402 и ВоЬеуа, А.8., е! а1., Эгид Эеу. Век. 1996, 39, 243-252). Сообщается, что энпрофиллин имеет значение К₁ 7 мкМ и является в некоторой степени селективным в отношении связывания с А_2В АР человека (см. ВоЬеуа, А.8., е! а1., Эгид Эеу. Век. 1996, 39, 243-252 и Ыибеи, 1., е! а1., Мо1. Рйатшасок 1999, 56, 705-713). А_2В АР экспрессируются в некоторых тучных клетках, таких как ВВ линия клеток мастоцитомы собаки, которые, по-видимому, ответственны за запуск острой мобилизации Са²⁺ и дегрануляции (см. Аисйатрасй, 1.А., е! а1., Мо1. Рйаттасо1. 1997, 52, 846-860 и Ротку1й, Р., е! а1., 1иПатт. Век. 1999, 48, 301-307). А2В АР также запускают мобилизацию Са²⁺ и участвуют в замедленном высвобождении 1Ь-8 (интерлейкина 8) из НМС-1 тучных клеток человека. Другими функциями, связанными с А2В АР, являются контроль роста клеток и экспрессии генов (см. Кеагу, 1., е! а1., Тгеибк Кеитокск 1996, 19, 13-18), зависимая от эндотелия вазодилатация (см. МатИи, Р.Ь., е! а1., 1. Рйаттасо1. Ехр. Тйет. 1993, 265, 248-253) и секреция жидкости из кишечного эпителия (см. 81тойте1ег, С.В., е! а1., 1. Вю1. Сйет. 1995, 270, 2387-2394). Было также описано, что действие аденозина через А_2В АР стимулирует хлоридную проницаемость в клетки, экспрессирующие транспортный регулятор кистозного фиброза (см. С1аису, 1.Р., е! а1., Ат. 1. РЬуяок 1999, 276, С361-С369).

Недавно Ыибеи е! а1. (патент США № 6545002) описали новую группу соединений и фармацевтических композиций, которые являются селективными антагонистами А2В аденозиновых рецепторов (АР).

Несмотря на то что селективные образцы в отношении подтипов аденозиновых рецепторов доступны для А₁, А_2А и А₃ АР, для А_2В-рецептора известно всего лишь несколько селективных антагонистов. Следовательно, до сих пор существует необходимость в соединениях, которые являются селективными антагонистами А2В-рецепторов.

- 1 016791

Описание изобретения

Согласно настоящему изобретению предложены замещенные 8-[6-амино-3-пиридил]ксантины или стереоизомеры или фармацевтически приемлемые соли, которые действуют в качестве антагонистов Л₂в аденозиновых рецепторов.

Согласно изобретению также предложены фармацевтические композиции, содержащие соединение по настоящему изобретению или его стереоизомер или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом.

Кроме того, согласно изобретению предложен терапевтический способ лечения патологического состояния или симптома у млекопитающего, такого как человек, где в один или более чем один симптом патологии вовлечена активность, например чрезмерная активность, А_2в аденозиновых рецепторов, и для улучшения таких симптомов желателен антагонизм (т.е. блокирование). Таким образом, согласно настоящему изобретению предложен способ лечения заболевания, включающий введение терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли, где заболевание выбрано из астмы, аллергий, аллергических заболеваний (например, аллергического ринита и синусита), аутоиммунных заболеваний (например, волчанки), диарейных заболеваний, инсулинорезистентности, диабета (например, типа I и типа II), предотвращения дегрануляции тучных клеток, связанной с ишемией/реперфузионными повреждениями, сердечного приступа, ингибирования ангиогенеза в неопластических тканях и ингибирования ангиогенеза при диабетической ретинопатии или ретинопатии, индуцированной гипербарическим кислородом.

Согласно изобретению предложено новое соединение по настоящему изобретению для применения в медицинской терапии.

Согласно изобретению также предложено применение нового соединения по настоящему изобретению для изготовления лекарственного средства для лечения патологического состояния или симптома у млекопитающего, которое связано с вредным воздействием активации или активности А_2в-рецепторов.

Изобретение также содержит способ, включающий контактирование соединения по настоящему изобретению, возможно имеющего радиоактивный изотоп (радионуклид), такой как, например, тритий, радиоактивный йод (например, ¹²⁵1 для анализов связывания или ¹²³1 для спектральной визуализации) и т.п., с сайтами-мишенями А_2в аденозиновых рецепторов, включающими указанные рецепторы, ίη νίνο или ίη νίΐτο для связывания с указанными рецепторами. Клеточные мембраны, содержащие сайты связанных А2в аденозиновых рецепторов, могут быть использованы для измерения селективности анализируемых соединений в отношении подтипов аденозиновых рецепторов или могут быть использованы в качестве средства идентификации потенциальных терапевтических агентов для лечения заболеваний или состояний, связанных с опосредованием А_2в-рецепторов, путем контактирования указанных агентов с указанными радиолигандами и рецепторами и измерения величины замещения радиолиганда и/или связывания агента.

- 2 016791

Наилучшие способы осуществления изобретения

Заявители обнаружили, что приведенные ниже замещенные 8-[6-амино-3-пиридил]ксантины могут быть полезны для лечения заболеваний или состояний, связанных с вредным воздействием активации или активности Л₂в-рецепторов.

Согласно аспекту изобретения предложено соединение, выбранное из

5 6

? 8 О -о

“ 10

13 14

- 3 016791

- 4 016791

или его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль.

В другом аспекте изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (а) терапевтически эффективное количество соединения, описанного выше; и (б) фармацевтически приемлемый эксципиент.

- 5 016791

В другом аспекте изобретения предложен терапевтический способ предотвращения или лечения патологического состояния или симптома у млекопитающего, где вовлечена активность аденозиновых Л₂в рецепторов и желателен антагонизм их действия, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению.

В другом аспекте изобретения предложен способ лечения заболевания, включающий введение терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли, где заболевание выбрано из астмы, аллергий, аллергических заболеваний (например, аллергического ринита и синусита), аутоиммунных заболеваний (например, волчанки), диарейных заболеваний, инсулинорезистентности, диабета, предотвращения дегрануляции тучных клеток, связанной с ишемией/реперфузионными повреждениями, сердечного приступа, ингибирования ангиогенеза в неопластических тканях и ингибирования ангиогенеза при диабетической ретинопатии или ретинопатии, индуцированной гипербарическим кислородом.

В другом аспекте изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения в медицинской терапии.

В другом аспекте предложено применение соединения по изобретению для изготовления лекарственного средства, полезного для лечения заболевания у млекопитающего.

Понятно, что любой аспект или признак настоящего изобретения, характеризуемый как предпочтительный или не характеризуемый как предпочтительный, может быть объединен с любым другим аспектом или признаком изобретения, где другой такой признак или характеризуют как предпочтительный, или не характеризуют как предпочтительный.

Как признано специалистом в данной области техники, имидазольное кольцо соединений по настоящему изобретению может существовать в таутомерных формах или в виде таутомеров, которые, таким образом, также включены в объем изобретения. Таутомерные изомеры представлены в виде структур (1а) и (1Ь):

(1а) <1Ь>

где Я, Я¹, Я², X и Ζ являются такими, как определено в данном описании изобретения.

Понятно, что, например, при указании названия одного из соединений или при ссылке на него в рамках настоящего изобретения также подразумевается его соответствующий таутомер.

Термины включают, например, такой как и т.п. используются в иллюстративных целях и не предназначены для ограничения настоящего изобретения.

Использованные в этом изобретении, включая формулу изобретения, термины, которые указывают на неопределенное количество, означают по меньшей мере один или один или более, если конкретно не указано иное.

Специалистам в данной области техники будет понятно, что соединения по изобретению, имеющие хиральный центр, могут существовать и могут быть выделены в оптически активных и рацемических формах. Некоторые соединения могут проявлять полиморфизм. Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает любую рацемическую, оптически активную, полиморфную или стереоизомерную форму или их смеси, соединения по изобретению, которая обладает полезными свойствами, описанными здесь; причем в данной области техники хорошо известно, как получить оптически активные формы (например, разделением рацемической формы методами перекристаллизации, посредством синтеза из оптически активных исходных материалов, хирального синтеза или хроматографического разделения с использованием хиральной неподвижной фазы) и как определить терапевтическую активность с использованием стандартных тестов, описанных здесь, или с использованием других похожих тестов, хорошо известных в данной области техники.

Термины млекопитающее и пациент охватывают теплокровных млекопитающих, которым обычно оказывают медицинскую помощь (например, людей и одомашненных животных). Примеры млекопитающих включают (а) кошек, собак, лошадей, коров и человека и (б) человека.

Термины лечащий или лечение охватывают лечение болезненного состояния у млекопитающего и включают: (а) предотвращение болезненного состояния от протекания у млекопитающего, в частности, когда такое млекопитающее предрасположено к болезненному состоянию, но еще не диагностировано, как имеющее его; (б) ингибирование болезненного состояния, например задержку его развития; (в) ослабление болезненного состояния, например, путем вызывания регрессии болезненного состояния до достижения желаемой конечной точки и/или (г) устранение болезненного состояния, например прекращение болезненного состояния и/или его эффектов. Лечение также включает улучшение симптома заболевания (например, уменьшение боли или дискомфорта), где такое улучшение может или не может непосредственно воздействовать на заболевание (например, причину, передачу, проявление и т.д.).

- 6 016791

Фармацевтически приемлемые соли относятся к производным описанных соединений, где исходное соединение модифицируют путем получения его кислых или основных солей. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают соли основных остатков, таких как амины, с минеральными или органическими кислотами; соли кислотных остатков, таких как карбоновые кислоты, с щелочами или органическими веществами и т.п., но не ограничиваются ими. Фармацевтически приемлемые соли включают традиционные нетоксичные соли или четвертичные аммониевые соли исходного соединения, образованные, например, из нетоксичных неорганических или органических кислот. Например, такие традиционные нетоксичные соли включают соли, полученные из неорганических и органических кислот, выбранных из 1,2-этандисульфоновой, 2-ацетоксибензойной, 2-гидроксиэтансульфоновой, уксусной, аскорбиновой, бензолсульфоновой, бензойной, бикарбоновой, карбоновой, лимонной, этилендиаминтетрауксусной, этандисульфоновой, этансульфоновой, фумаровой, глюкогептоновой, глюконовой, глутаминовой, гликолевой, гликолиларсаниловой, гексилрезорциновой, гидрабаминовой, бромисто-водородной, хлористо-водородной, йодисто-водородной, гидроксималеиновой, гидроксинафтойной, изетионовой, молочной, лактобионовой, лаурилсульфоновой, малеиновой, яблочной, миндальной, метансульфоновой, напсиловой (иаркуНс), азотной, щавелевой, памовой, пантотеновой, фенилуксусной, фосфорной, полигалактуроновой, пропионовой, салициловой, стеариновой, субуксусной (киЬасебс), янтарной, сульфаминовой, сульфаниловой, серной, дубильной, винной и толуолсульфоновой, но не ограничиваются ими.

Фармацевтически приемлемые соли по настоящему соединению могут быть синтезированы из исходного соединения, содержащего основную или кислотную группировку, с использованием традиционных химических методов. Как правило, такие соли могут быть получены путем взаимодействия свободных кислых или основных форм этих соединений со стехиометрическим количеством подходящего основания или кислоты в воде или органическом растворителе или в их смеси; обычно предпочтительны неводные среды, типа эфира, этилацетата, этанола, изопропанола или ацетонитрила. Списки подходящих солей представлены в Яеттд1оп'8 Рйагтасеибса1 8с1еисе5, 18⁴¹¹ еб., Маск РиЬШЫид Сотрапу, Еайоп, РА, 1990, р. 1445, описание которого таким образом включено посредством ссылки.

Терапевтически эффективное количество включает количество соединения по настоящему изобретению, которое является эффективным, когда соединение вводят само по себе или в комбинации, для лечения симптома, перечисленного в этом описании изобретения. Терапевтически эффективное количество также включает количество комбинации заявленных соединений, которое является эффективным для лечения желаемого симптома. Предпочтительно комбинация соединений является синергетической комбинацией. Синергизм, как описано, например, Сбои и Та1а1ау, Α6ν. Епхуте Яеди1. 1984, 22:27-55, имеет место, когда эффект соединений, вводимых в комбинации, больше, чем суммарный эффект соединений, вводимых самих по себе в качестве отдельных агентов. В основном синергетический эффект наиболее отчетливо проявляется при субоптимальных концентрациях соединений. Синергизм может быть выражен в уменьшенной цитотоксичности, повышенном эффекте или каком-либо другом преимущественном эффекте комбинации по сравнению с индивидуальными компонентами.

Конкретные и предпочтительные значения, перечисленные для радикалов, заместителей, и интервалы приведены только для иллюстрации; они не исключают другие определенные значения или другие значения в определенных интервалах для радикалов и заместителей.

Синтез.

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены способами, описанными в И82005/0065341, содержимое которого включено здесь посредством ссылки.

Соединения по настоящему изобретению также могут быть получены способами, описанными Р.1. 8саттеШ, е1 а1. в 1. Меб. Сбет. 37, 2704-2712 (1994). Диамино-1,3-дизамещенный урацил ацилируют 6-хлорникотиноилхлоридом в пиридине при 5°С с получением соединений формулы (5а). Полученный амид (5а) циклизуют путем нагревания с обратным холодильником в водном растворе гидроксида натрия с получением соединения А. 6-Хлорникотиноилхлорид получают путем нагревания с обратным холодильником 6-гидроксиникотиновой кислоты в тионилхлориде с использованием ДМФ (Ν,Ν-диметилформамид) в качестве катализатора, как показано на реакционной схеме 1.

Соединение А может быть алкилировано алкилбромидом или алкилйодидом с получением соединений формулы А¹. Соединения А или А¹ взаимодействуют с замещенным амином при 150-160°С в пробирке для работы под давлением с получением соединений формулы В или В¹. Соединения формулы В¹, где Я⁴ является водородом, могут взаимодействовать с ацилхлоридом с получением соединений, где Я⁴представляет собой -С(О)Я⁶(С).

- 7 016791

В данном описании изобретения используются следующие сокращения:

[¹²⁵1]АВА - [¹²⁵1]№-(4-аминобензил)аденозин;

¹²⁵1-АВОРХ - ¹²⁵1-3 -(4-амино-3 -йодбензил)-8-оксиацетат-1 -пропилксантин;

АР - аденозиновый рецептор;

СО8 21680 - 2-[4-[(2-карбоксиэтил)фенил]этиламино]-5М-Ы-этилкарбамоил аденозин;

СРХ - 8-циклопентил-1,3-дипропилксантин;

ΌΜΕΜ - модифицированная Дульбекко среда Игла;

ДМФ - Ν,Ν-диметилформамид;

ДМСО - диметилсульфоксид;

ΕΌΊΑ. - этилендиаминтетраацетат;

ΗΕΚ клетки - клетки почки эмбриона человека;

Κ₁ - равновесная константа ингибирования;

ΝΕΟΆ - 5'-(№этилкарбамоил)аденозин;

Я-Р1А - К^⁶-фенилизопропиладенозин;

ТЭА - триэтиламин;

ТСХ - тонкослойная хроматография;

ΖΜ 241385 - 4-(2-[7-амино-2-{фурил}{1,2,4}триазоло{2,3-а}{1,3,5}триазин]-5-иламиноэтил)фенол.

Соединения по настоящему изобретению можно приготавливать в виде фармацевтических композиций и вводить в организм млекопитающего, такого как пациент-человек, во множестве форм, подходящих для выбранного пути введения, например перорально или парентерально, путем внутривенного, внутримышечного, местного, ингаляционного или подкожного путей. Типичные фармацевтические композиции раскрыты в ЯепипдЮп: ТНе 8с1еисе апб РгасИсе о£ РНагтаеу. А. Оепиаго, ей., 20^4Ь еййюп, ЫрртсоИ ХУПКапъ & ХУПкпъ, РЫ1айе1рЫа, РА.

Таким образом, настоящие соединения можно вводить системно, например перорально, в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом, таким как инертный разбавитель или ассимилируемый пищевой носитель. Они могут быть заключены в желатиновые капсулы с твердой или мягкой оболочкой, могут быть спрессованы в таблетки или могут быть непосредственно включены в состав пищи диеты пациентов. Для перорального терапевтического введения активное соединение может быть объединено с одним или более эксципиентами и использовано в форме проглатываемых таблеток, трансбуккальных таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, вафель и т. п. Такие композиции и препараты должны содержать по меньшей мере 0,1% активного соединения. Процентное содержание композиций и препаратов, конечно, можно варьировать и подходящим образом может находиться между примерно 2 и примерно 60 мас.% от заданной стандартной лекарственной формы. Количество активного соединения в таких терапевтически полезных композициях является таким, чтобы был получен эффективный уровень дозы.

- 8 016791

Таблетки, пастилки, пилюли, капсулы и т.п. могут также содержать следующее: связующие вещества, такие как трагакантовая камедь, гуммиарабик, кукурузный крахмал или желатин; эксципиенты, такие как дикальцийфосфат; разрыхлитель, такой как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота и т.п.; смазывающее вещество, такое как стеарат магния; и подсластитель, такой как сахароза, фруктоза, лактоза или аспартам; или может быть добавлен корригент, такой как перечная мята, винтергриновое масло или вишневый ароматизатор. Когда стандартная лекарственная форма является капсулой, она может содержать, в дополнение к веществам, подобным вышеприведенным, жидкий носитель, такой как растительное масло или полиэтиленгликоль. Многие другие вещества могут присутствовать в виде покрытий или с целью модификации физической формы твердой стандартной лекарственной формы иным образом. Например, таблетки, пилюли или капсулы могут быть покрыты желатином, воском, шеллаком или сахаром и т.п. Сироп или эликсир может содержать активное соединение, сахарозу или фруктозу в качестве подсластителя, метил- или пропилпарабены в качестве консервантов, краситель и корригент, такой как вишневый или апельсиновый ароматизатор. Конечно, любой материал, используемый в приготовлении любой стандартной лекарственной формы, должен быть фармацевтически приемлемым и, по существу, нетоксичным в применяемых количествах. Кроме того, активное соединение может быть включено в препараты и устройства замедленного высвобождения.

Активное соединение также можно вводить внутривенно или внутрибрюшинно путем инфузии или инъекции. Растворы активного соединения или его солей могут быть приготовлены в воде, возможно, смешанной с нетоксичным поверхностно-активным веществом. Дисперсии могут быть также приготовлены в глицерине, жидких полиэтиленгликолях, триацетине и их смесях и в маслах. В обычных условиях хранения и применения эти препараты содержат консервант для предотвращения роста микроорганизмов.

Фармацевтические лекарственные формы, подходящие для инъекции или инфузии, могут включать стерильные водные растворы, или дисперсии, или стерильные порошки, содержащие активный ингредиент, которые приспособлены для немедленного приготовления стерильных инъецируемых или инфузируемых растворов или дисперсий, возможно, инкапсулированные в липосомы. Во всех случаях конечная лекарственная форма должна быть стерильной, текучей и стабильной в условиях изготовления и хранения. Жидким носителем или наполнителем может быть растворитель или жидкая дисперсионная среда, включающие, например, воду, этанол, высокомолекулярный спирт (например, глицерин, пропиленгликоль, жидкие полиэтиленгликоли и т.п.), растительные масла, нетоксичные сложные эфиры глицерина и их подходящие смеси. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, путем образования липосом, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий или путем использования поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов может быть осуществлено с помощью различных противобактериальных и противогрибковых средств, например парабенов, хлорбутанола, фенола, сорбиновой кислоты, тимеросала и т.п. Во многих случаях предпочтительным будет включение изотонических агентов, например сахаров, буферов или хлорида натрия. Пролонгированная абсорбция инъецируемых композиций может быть осуществлена путем использования в композициях агентов, замедляющих абсорбцию, например моностеарата алюминия и желатина.

Стерильные инъецируемые растворы приготавливают путем включения активного соединения в необходимом количестве в подходящий растворитель со многими другими перечисленными выше ингредиентами, по требованию, с последующей стерилизацией фильтрованием. В случае использования стерильных порошков для приготовления стерильных инъецируемых растворов предпочтительными способами приготовления являются методы вакуумной сушки и сублимационной сушки, которые приводят к порошку активного ингредиента и любого дополнительного желаемого ингредиента, присутствующего в предварительно отфильтрованных с целью стерилизации растворах.

Для местного введения настоящие соединения могут быть использованы в чистой форме, т.е. когда они являются жидкостями. Однако в основном их применение по отношению к коже будет желательным в виде композиций или препаратов в комбинации с дерматологически приемлемым носителем, который может быть твердым веществом или жидкостью.

Полезные твердые носители включают мелкоизмельченные твердые вещества, такие как тальк, глина, микрокристаллическая целлюлоза, диоксид кремния, оксид алюминия и т.п. Полезные жидкие носители включают воду, спирты или гликоли или смеси вода-спирт/гликоль, в которых настоящие соединения могут быть растворены или диспергированы в эффективных концентрациях, возможно, с помощью нетоксичных поверхностно-активных веществ. С целью оптимизации свойств для заданного применения могут быть добавлены адъюванты, такие как ароматизирующие вещества и дополнительные противомикробные средства. Получающиеся в результате жидкие композиции могут быть нанесены с гигроскопических прокладок, используемых для пропитки повязок и других перевязочных материалов, или могут быть распылены на пораженную область с использованием распылителей насосного типа или аэрозольных распылителей.

- 9 016791

С жидкими носителями также могут быть использованы загустители, такие как синтетические полимеры, жирные кислоты, соли и эфиры жирных кислот, жирные спирты, модифицированные целлюлозы или модифицированные минеральные материалы, с образованием легко намазывающихся паст, гелей, мазей, мыл и т.п. для непосредственного нанесения на кожу пациента.

Примеры полезных дерматологических композиций, которые могут быть использованы для доставки соединений по настоящему изобретению на кожу, известны в данной области техники; например, см. 1асцие1 с1 а1. (патент США № 4608392), Оспа (патент США № 4992478), 8тйй с1 а1. (патент США № 4559157) и ХУойхтап (патент США № 4820508). Полезные дозы соединений по настоящему изобретению могут быть определены путем сравнения их активности ίη νίΐτο и активности ίη νινο на животных моделях. Методы экстраполяции эффективных доз для мышей и других животных в отношении людей известны в данной области техники; например, см. патент США № 4938949.

Обычно концентрация соединения(й) по настоящему изобретению в жидкой композиции, такой как лосьон, будет (а) примерно 0,1-25 мас.% и (б) примерно 0,5-10 мас.%. Концентрация в полутвердой или твердой композиции, такой как гель или порошок, будет (а) примерно 0,1-5 мас.% и (б) примерно 0,5-2,5 мас.%.

Количество соединения или его активной соли или производного, требуемое для применения в лечении, будет варьировать не только в зависимости от конкретного соединения или выбранной соли, но также и от пути введения, природы состояния, подвергаемого лечению, и возраста и состояния пациента и, разумеется, будет на усмотрение лечащего врача или клинического врача. В основном, однако, подходящая доза будет в интервале (а) примерно 1,0-100 мг/кг массы тела в день; (б) примерно 10-75 мг/кг массы тела в день и (в) примерно 5-20 мг/кг массы тела в день.

Соединение можно легко вводить в стандартной лекарственной форме; например, в таблетках, каплетах и т.д., содержащих (а) примерно 4-400 мг; (б) примерно 10-200 мг и (в) примерно 20-100 мг активного ингредиента в одной стандартной лекарственной форме.

Идеально, активный ингредиент следует вводить для достижения пиковых концентраций активного соединения в плазме (а) примерно 0,02-20 мкМ; (б) примерно 0,1-10 мкМ и (в) примерно 0,5-5 мкМ. Эти концентрации могут быть достигнуты, например, путем внутривенной инъекции 0,005-0,5%-ного раствора активного ингредиента или путем перорального введения в виде болюса, содержащего примерно 4-400 мг активного ингредиента.

Соединения по изобретению также можно вводить путем ингаляции из ингалятора, инсуффлятора, пульверизатора или упаковки под давлением или других средств доставки аэрозольного спрея. Упаковки под давлением могут содержать подходящий пропеллент, такой как диоксид углерода или другой подходящий газ. В случае аэрозоля под давлением единица дозы может быть установлена путем предусмотрения значения, соответствующего доставке дозированного количества. Ингаляторы, инсуффляторы, пульверизаторы полностью описаны в фармацевтических справочниках, таких как ЯетшдШп'х Рйагтасеийса1 8с1епсе§, Уо1ите§ 16 (1980) или 18 (1990), Маск РиЫшЫпд Со.

Желаемая доза может быть легко представлена в однократной дозе или в виде разделенных доз, вводимых в подходящие интервалы времени, например в виде двух, трех, четырех или более субдоз в день. Кроме того, сама субдоза может быть разделена, например, для введения несколько раз через неопределенные интервалы, такого как многократные ингаляции из инсуффлятора или путем нанесения большого количества капель в глаз.

Все патенты, патентные заявки, книги и литература, цитируемые в данном описании, включены таким образом посредством ссылки во всей их полноте. В случае каких-либо несоответствий настоящее описание, включая любые приведенные здесь определения, будет иметь преимущественную силу.

Изобретение было описано со ссылкой на разнообразные конкретные и предпочтительные воплощения и методики. Однако следует понимать, что можно сделать множество вариаций и модификаций, оставаясь при этом в пределах сущности и объема изобретения.

- 10 016791

Примеры

Фармакология.

Способность соединений по изобретению действовать в качестве антагонистов Л₂в аденозиновых рецепторов может быть определена с использованием фармакологических моделей, хорошо известных специалистам в данной области техники, или с использованием методик анализа, описанных ниже.

кДНК А_2в-рецептора крысы субклонировали в экспрессионную плазмиду рЭоиЫсТгоиЫс. используя методики, описанные РоЬсса. А. е! а1. в Вюейеш. Рйаттасо1., 51, 545-555 (1996). Плазмиду амплифицировали в компетентных клетках 1М109 и плазмидную ДНК выделяли с использованием колонок Αί/агб Медаргер (Рготеда Со трота! ίο η, Майкоп, XVI). А_2в аденозиновые рецепторы вводили в клетки НЕК-293 посредством липофектина, как описано Ее1дпег, Р.Ь. е! а1. в Ргос. №111. Асай. Зс1. ИЗА, 84, 74137417 (1987).

Клеточная культура.

Трансфицированные клетки НЕК выращивали в увлажненной атмосфере 5% СО₂/95% О₂ при температуре 37°С. Колонии отбирали по росту клеток в 0,6 мг/мл С418. Трансфицированные клетки хранили в среде ΌΜΕΜ с добавлением питательной смеси Натк Е12 (1/1), 10% сыворотки новорожденного теленка, 2 мМ глутамина и содержащей 50 МЕ (международных единиц)/мл пенициллина, 50 мг/мл стрептомицина и 0,2 мг/мл генетицина (С418, Воейгшдег Маппйет). Клетки культивировали в круглых чашках диаметром 10 см и субкультивировали, когда достигался сплошной рост (примерно через 72 ч).

Исследования связывания радиолиганда.

На А_2в-рецепторах: Сливающиеся монослои клеток НЕК-А_2в промывали РВЗ (фосфатно-буферный раствор), а затем охлажденным на льду буфером А (10 мМ НЕРЕЗ (№-гидроксиэтилпиперазин-№-2сульфоновая кислота), 10 мМ ЕЭТА, рН 7,4) с ингибиторами протеаз (10 мкг/мл бензамидина, 100 мкМ фенилметансульфонилфторида и по 2 мкг/мл апротинина, пепстатина и лейпептина). Клетки гомогенизировали в гомогенизаторе Ро1у!гоп (вппктапп) в течение 20 с, центрифугировали при 30000хд и осадки дважды промывали буфером НЕ (10 мМ НЕРЕЗ, 10 мМ ЕЭТА, рН 7,4 с ингибиторами протеаз). Конечный осадок ресуспендировали в буфере НЕ с добавлением 10% сахарозы и замораживали по аликвотам при -80°С. Для анализов связывания мембраны оттаивали и разводили в 5-10 раз буфером НЕ до конечной концентрации белка приблизительно 1 мг/мл. Для определения концентраций белков, мембраны и стандарты бычьего сывороточного альбумина растворяли в 0,2% №аОН/0,01% ЗЭЗ и белок определяли, используя флуоресценцию флуоресцамина. З!о^е11, С.Р. е! а1.. Апа1. вюсйет. 85, 572-580 (1978).

Анализы насыщения связывания для А_2в аденозиновых рецепторов крысы проводили с [³Н]2М 214385 (17 Ки/ммоль, Тостк Сооккоп, вгк!о1 ИК) (Л, X. е! а1, Эгид ЭеЛдп Эксоу., 16, 216-226 (1999)) или ¹²⁵1-АвОРХ (2200 Ки/ммоль). Для получения ¹²⁵1-АвОРХ, 10 мкл 1 мМ АВОРХ в метаноле/1 М №аОН (20:1) добавляли к 50 мкл 100 мМ фосфатного буфера, рН 7,3. Добавляли 1 или 2 мКи №а¹²⁵1, а затем 10 мкл 1 мг/мл хлорамина-Т в воде. После инкубирования в течение 20 мин при комнатной температуре добавляли 50 мкл 10 мг/мл метабисульфита натрия в воде, чтобы погасить реакцию. Реакционную смесь наносили на колонку С18 для ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография), элюируя смесью метанола и 5 мМ фосфата, рН 6,0. После 5 мин при 35% метанола концентрацию метанола линейно увеличивали до 100% за 15 мин. Непрореагировавший АВОРХ элюировал через 11-12 мин; ¹²⁵1-АВОРХ элюировал на 18-19 мин с выходом 50-60% по отношению к исходному ¹²⁵1.

В анализах равновесного связывания отношение ¹²⁷1/¹²⁵1-АВОРХ составляло 10-20/1. Эксперименты по связыванию радиолиганда проводили в трех повторениях с 20-25 мкг белка мембран в общем объеме 0,1 мл буфера НЕ с добавлением 1 ед./мл аденозиндеаминазы и 5 мМ МдС12. Время инкубирования составляло 3 ч при 21°С. Неспецифическое связывание измеряли в присутствии 100 мкМ №ЕСА. Эксперименты по конкурированию проводили с использованием 0,6 нМ ¹²⁵1-АВОРХ. Мембраны фильтровали на фильтрах Айа1шап СЕ/С с использованием коллектора клеток вгапйе1 (СаЛЛегкЬигд, МЭ) и промывали 3 раза в течение 15-20 с охлажденным на льду буфером (10 мМ Ттк (тригидроксиметиламинометан), 1 мМ МдС12, рН 7,4). Значения в_тах и К_в рассчитывали путем нелинейной интерполяции Марквардта по методу наименьших квадратов для единичных моделей связывания сайта. Магс.|иагй1 Э.М., 1. Зос. 1пйик!. Арр1. Ма!Л. 11. 431-441.21 (1963). Значения К₁ для различных соединений выводили из значений 1С₅₀, как описано Ьшйеп, 1. в 1. Сус1. №ис1. Век., 8, 163-172 (1982). Данные повторяющихся экспериментов сводятся в таблицу в виде средних величин ± стандартная ошибка среднего (ЗЕМ).

На других аденозиновых рецепторах: [³Н]СРХ (вЛтк, В.Е. е! а1., №шпуп-Зс111шейеЬегс|'к АтсЛ РйаттасоЕ. 335, 59-63 (1987)), ¹²⁵1-2М 241385 и ¹²⁵1-АвА использовали в анализах связывания радиолиганда с мембранами, полученными из клеток НЕК-293, экспрессирующих рекомбинантные А!, А2А и А3 АР крысы соответственно. Связывание [³Н]В-№⁶-фенилизопропиладенозина (ЗсйтаЬе, и. е! а1., №аипуп-Зсйт1ейеЬетд'к АтсЛ РйаттасоЕ, 313, 179-187 (1980)) ([³Н]В-Р1А, Атеткйат, СЫсадо, 1Ь) с А1 рецепторами из кортикальных мембран мозга крысы и связывание [³Н]ССЗ 21680 (1атук, М.Е. е! а1., 1., Р11агтасо1. Ехр. Тйетар. 251, 888-893 (1989)) (Эироп! №Е№, вок!оп, МА) с А_2А-рецепторами из стриарных мембран крысы проводили, как описано. Аденозиндеаминаза (3 ед./мл) присутствовала во время получения мембран мозга, во время преинкубирования в течение 30 мин при 30°С и во время инкубирования с

- 11 016791 радиолигандами. Все нерадиоактивные соединения сначала растворяли в ДМСО и разводили буфером до конечной концентрации, где количество ДМСО никогда не превышало 2%. Инкубирования прерывали быстрым фильтрованием через фильтры \νΐι;·ιΙιη;·ιη СБ/В с использованием коллектора клеток Вгапбе11 (Вгапбе11. СаййегаЬитд. МИ). Каждую пробирку ополаскивали 3 раза буфером по 3 мл.

Использовали по меньшей мере шесть различных концентраций конкурента. охватывая 3 порядка значений. подобранных соответствующим образом для 1С₅₀ каждого соединения. Значения 1С₅₀. рассчитанные по методу нелинейной регрессии, выполненному в Старй-Раб Рпып. 8ап И1едо. СА. превращали в кажущиеся значения К₁. как описано Ьшбеп. 1. в 1. Сус1. Иис1. Век.. 8:163-172 (1982). Коэффициенты Хилла анализируемых соединений были в интервале от 0.8 до 1.1.

Функциональный анализ.

Клетки НЕК-А_2В из одного Т75 матраса со сплошным ростом клеток ополаскивали фосфатнобуферным раствором Дульбекко (РВ8) без Са²⁺ и Мд²' и затем инкубировали в НВ88 (сбалансированный солевой раствор Хенка) без Са²⁺ и Мд²⁺ с 0.05% трипсина и 0.53 мМ ЕИТА до тех пор. пока клетки не отделялись. Клетки ополаскивали дважды центрифугированием при 250хд в РВ8 и ресуспендировали в 10 мл НВ88. состоящего из 137 мМ ИаС1. 5 мМ КС1. 0.9 мМ Мд8О₄. 1.4 мМ СаС1₂. 3 мМ ИаНСО₃. 0.6 мМ Иа₂НРО₄. 0.4 мМ КН₃РО₄. 5.6 мМ глюкозы и 10 мМ НЕРЕ8. рН 7.4 и чувствительного к Са²⁺флуоресцентного красителя тбо-1-АМ (5 мкМ). при 37°С в течение 60 мин. Клетки ополаскивали один раз и ресуспендировали в 25 мл НВ88 без красителя с добавлением 1 ед./мл аденозиндеаминазы и выдерживали при комнатной температуре. Добавляли антагонисты аденозиновых рецепторов. приготовленные в виде 100-кратных исходных растворов в ДМСО или наполнителе и клетки переносили в баню при 37°С на 2 мин. Затем клетки (1 млн в 2 мл) переносили в кювету с перемешиванием. удерживаемую при 37°С в Атшсо 8ЬМ 8000 спектрофлуориметре (8МЬ шкйитепй. ИтЬапа 1Ь). Отношения флуоресценции ίηάο-1. полученные при 400 и 485 нм (возбуждение. 332 нм). регистрировали с использованием щели с шириной 4 нм. После 100-секундного периода уравновешивания добавляли ИЕСА.

Накопление циклического АМФ (аденозинмонофосфата).

Получение циклического АМФ осуществляли в буфере ИМЕМ/НЕРЕ8 (среда ИМЕМ. содержащая 50 мМ НЕРЕ8. рН 7.4. 37°С). Каждую лунку с клетками дважды промывали буфером ИМЕМ/НЕРЕ8 и затем добавляли 100 мкл аденозиндеаминазы (конечная концентрация 10 МЕ/мл) и 100 мкл растворов ролипрама и цилостамида (каждый в конечной концентрации 10 мкМ). а затем 50 мкл анализируемого соединения (в подходящей концентрации) или буфера. Через 15 мин инкубирование при 37°С заканчивали путем удаления среды и добавления 200 мкл 0.1 М НС1. Кислые экстракты хранили при -20°С до момента исследования. Количества циклического АМФ определяли. следуя протоколу. который использовал цАМФ-связывающий белок (РКА) [уап бет Vеηбеη е1 а1.. 1995]. со следующими незначительными изменениями. Буфер для анализа состоял из 150 мМ К₂НРО₄/10 мМ ЕИТА/0.2% В8А БУ при рН 7.5. Образцы (20 мл) инкубировали в течение 90 мин при 0°С. После инкубирования препараты фильтровали через фильтры СБ/С из микростекловолокна в коллекторе клеток Вгапбе1 М-24. Фильтры дополнительно ополаскивали 4 раза 2 мл 150 мМ К₂НРО₄/10 мМ ЕИТА (рН 7.5. 4°С). После 2 ч экстракции фильтры. через которые были пропущены препараты. подсчитывали на Раскагб ЕтикШет 8аГе сцинцилляционной жидкости.

Было показано. что репрезентативные соединения по настоящему изобретению являются активными в вышеприведенном исследовании аффинности.

Синтез и определение характеристик.

Протонную ядерную магнитно-резонансную спектроскопию проводили на спектрометре Уалап-300 МГц; спектры снимали в ДМСО-б₆. Если не отмечено особо. химические сдвиги выражены в виде млн^-1 в сторону слабого поля относительно млн^-1 ДМСО (2.5 млн^-1). Масс-спектрометрию (МС) с ионизацией электрораспылением (ИЭР) проводили на масс-спектрометре ТйегтоБтшдап ЬСф.

- 12 016791

С использованием ТСХ (силикагель 60 Т₂₅₄, 0,25 мм, основа из алюминия, ЕМ 8с1епсе, Οίό05ΐο\νη. N1) и ВЭЖХ (Ынтабхи) с использованием аналитической колонки Уайап С18 5 мкм (4,6x150 мм) с линейным градиентом системы растворителей при скорости потока 1 мл/мин был сделан вывод, что все производные ксантина были гомогенными. Использованная система растворителей представляла собой МеОН (0,1% муравьиная кислота): Н₂О (0,1% муравьиная кислота). Пики обнаруживали посредством поглощения в ультрафиолетовом (УФ) диапазоне при 300 и 254 нм. Было показано, что ЯМР- и массспектры согласуются с заданной структурой.

Общие методики получения хлорзамещенных пиридильных соединений А.

6-Хлорникотиноилхлорид, полученный из 6-гидроксиникотиновой кислоты (1,444 г, 10,4 ммоль), в СН₂С1₂ (20 мл) по каплям добавляли к раствору 5,6-диамино-1,3-дизамещенного урацила (8 ммоль) в сухом пиридине (8,2 мл), поддерживаемом при 5°С. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 3 ч. Чтобы погасить реакцию, добавляли воду (50 мл). Растворитель выпаривали с получением масла темного цвета. Масло нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч в 2н. ΝαΟΗ (20 мл). После охлаждения рН осторожно доводили до 7 с помощью концентрированной НС1. Образовавшееся твердое вещество собирали и промывали водой (20 мл), эфиром (20 мл) и хлороформом (20 мл) с получением не совсем белого твердого вещества. Продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

2Δ

1А. 1,3-Дипропил-8-(6-хлор-3 -пиридил)ксантин.

'Н ЯМР (ДМСО, б₆): δ 0,89 (т, 6Н), 1,59 (т, 2Н), 1,73 (т, 2Н), 3,88 (1, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,00 (1, 2Н, 1=7,2 Гц), 7,68 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,50 (бб, 1Н, 1_г=2,4 Гц, 1₂=8,4 Гц), 9,07 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 348 (М+Н)⁺.

2А. 1-Циклопропил-3 -пропил-8-(6-хлор-3 -пиридил)ксантин.

'|| ЯМР (ДМСО, б₆): δ 0,72 (т, 2Н), 0,91 (1, 3Н, 1=7,8 Гц), 1,03 (т, 2Н), 1,72 (т, 2Н), 2,63 (т, 1Н),

3,98 (1, 2Н, 1=7,8 Гц), 7,68 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,46 (бб, 1Н, ^=2,4 Гц, 1₂=8,4 Гц), 9,07 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 346 (М+Н)⁺.

3А. 1,3-Диаллил-8-(6-хлор-3 -пиридил)ксантин.

'|| ЯМР (ДМСО, б₆): 4,56 (б, 2Н, 1=5,1 Гц), 4,70 (б, 2Н, 1=5,1 Гц), 5,15 (т, 4Н), 5,98 (т, 2Н), 7,74 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,50 (бб, 1Н, 1₁=2,4 Гц, 1₂=8,4 Гц), 9,12 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 344 (М+Н)⁺.

- 13 016791

Общие методики получения аминозамещенных пиридильных соединений В.

Соединение А (40 мг) и соответствующий замещенный амин (0,5 мл или 0,5 г) помещали в пробирку для работы под давлением (добавляли 4 мл этанола в качестве растворителя, если амин является твердым веществом). Пробирку для работы под давлением продували аргоном, герметично закрывали и содержимое перемешивали при 160°С в течение 48-60 ч. После охлаждения добавляли эфир (10 мл). Полученное твердое вещество собирали и очищали на колонке с силикагелем или препаративной ТСХ (растворитель А: СН₂С1₂:МеОН, от 20:1 до 10:1 или растворитель В: СН₂С1₂:МеОН:ТЭА, от 20:1:0,1 до 4:1:0,1).

- 14 016791

1В. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-метиламино-3-пиридил]ксантин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,72 (т, 2Н), 0,91 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,03 (т, 2Н), 1,71 (т, 2Н), 2,62 (т, 1Н), 2,81 (б, 3Н, 1=4,5 Гц), 3,96 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 6,52 (б, 1Н, 1=9,0 Гц), 7,07 (б, 1Н, 1=4,5 Гц), 8,01 (бб, 1Н, 1₁=2,4 Гц, 1₂=9,0 Гц), 8,73 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 341 (М+Н)⁺.

2В. 1,3-Дипропил-8-[6-(2-метоксиэтил)амино-3 -пиридил] ксантин.

Ή ЯМР (ДМСО, бе): δ 0,93 (т, 6Н), 1,63 (т, 2Н), 1,78 (т, 2Н), 3,38 (₈, 3Н), 3,53 (₈, 4Н), 3,91 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,05 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 6,65 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,24 (₈ (Ьг), 1Н), 8,06 (бб, 1Н, ^=2,4 Гц, 1₂=8,7 Гц), 8,71 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 387 (М+Н)⁺.

3В. 1-Циклопропил-3 -пропил-8-[6-(2-метоксиэтил)амино-3 -пиридил]ксантин.

Ή ЯМР (ДМСО, бе): 0,74 (т, 2Н), 0,94 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,06 (т, 2Н), 1,75 (т, 2Н), 2,65 (т, 1Н), 3,32 (8, 3Н), 3,52 (8, 4Н), 4,00 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 6,64 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,23 (8(Ьг), 1Н), 8,04 (бб, 1Н, ^=2,4 Гц, 1₂=8,7 Гц), 8,76 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 385 (М+Н)⁺.

4В. 1,3-Диаллил-8-[6-(2-метоксиэтил)амино-3 -пиридил] ксантин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 3,32 (8, 3Н), 3,52 (8, 4Н), 4,55 (б, 2Н, 1=5,1 Гц), 4,68 (б, 2Н, 1=5,1 Гц), 5,15 (т, 4Н), 5,95 (т, 2Н), 6,64 (б, 1Н, 1=9,0 Гц), 7,25 (8(Ьг), 1Н), 8 05 (бб, 1Н, Д=2,4 Гц, 1₂=9,0 Гц), 8,77 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 383 (М+Н)⁺.

5В. 1-Циклопропил-3 -пропил-8-[6-(2-морфолиноэтил)амино-3-пиридил]ксантин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,74 (т, 2Н), 0,94 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,06 (т, 2Н), 1,75 (т, 2Н), 2,46 (ΐ, 4Н, 1=4,5 Гц), 2,52 (т, 2Н), 2,65 (т, 1Н), 3,46 (т, 2Н), 3,63 (ΐ, 4Н, 1=4,5 Гц), 4,00 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 6,62 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,23 (ΐ, 1Н, 1=5,4 Гц), 8,04 (бб, 1Н, φ=2,4 Гц, 1₂=8,7 Гц), 8,75 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 440 (М+Н)⁺.

6В. 1-Циклопропил-3 -пропил-8-[6-(2-(пиперидин-1 -ил)этиламино)-3-пиридил] ксантин.

Ή ЯМР (ДМСО, бе): 0,74 (т, 2Н), 0,94 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,07 (т, 2Н), 1,44 (т, 2Н), 1,57 (т, 4Н), 1,75 (т, 2Н), 2,51 (т, 6Н), 2,65 (т, 1Н), 3,48 (т, 2Н), 4,00 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 6,63 (б, 1Н, 1=9,0 Гц), 7,05 (ΐ, 1Н), 8,05 (бб, 1Н, φ=2,4 Гц, 1₂=9,0 Гц), 8,76 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 438 (М+Н)⁺.

7В. 1-Циклопропил-3 -пропил-8-[6-(2-(пирролидин-1 -ил)этиламино)-3-пиридил] ксантин.

МС т/ζ 424 (М+Н)⁺.

Общие методики получения амидных соединений (1-33).

Аминозамещенное пиридильное соединение В (50 мг) растворяли в пиридине (25 мг) при 80-100°С. После охлаждения до комнатной температуры добавляли желаемый хлорангидрид (4-6 экв.) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24-60 ч. Реакцию гасили льдом, растворитель удаляли и остаток очищали на колонке с силикагелем (СН₂С1₂:МеОН = 96:4) с образованием соединений 1-36 и 46-51 с 60-80%-ным выходом.

1. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(К-[6-(трифторметил)никотиноил]-И-метиламино)-3-пиридил]ксантин.

Условия ВЭЖХ: МеОН 40-95%, градиент за 10 мин, затем МеОН 95%.

Время удерживания 9,77 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, бе): 0,72 (т, 2Н), 0,89 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,01 (т, 2Н), 1,71 (т, 2Н), 2,62 (т, 1Н), 3,53 (8, 3Н), 3,96 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 7,53 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,88 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,00 (бб, 1Н, φ=1,8 Гц, 1₂=7,8 Гц), 8,38 (бб, 1Н, φ=2,4 Гц, 1₂=8,4 Гц), 8,70 (8, 1Н), 8,94 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 514 (М+Н)⁺.

2. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(И-[6-(трифторметил)никотиноил]-И-этиламино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 10,13 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,70 (т, 2Н), 0,88 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,02 (т, 2Н), 1,19 (3Н, 1=7,2 Гц), 1,69 (т, 2Н), 2,61 (т, 1Н), 3,95 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,08 (ф 2Н, 1=7,5 Гц), 7,46 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,85 (б, 1Н, 1=8,1 Гц), 7,96 (бб, 1Н, 1₁=8,1 Гц, 1₂=2,1 Гц), 8,36 (бб, 1Н, Д₁=8,7 Гц, 1₂=2,1 Гц), 8,66 (8, 1Н), 8,96 (б, 1Н, 1=2,1 Гц).

МС: т/ζ 528 (М+Н)⁺.

3. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(К-[6-(трифторметил)никотиноил]-И-пропиламино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 10,80 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,71 (т, 2Н), 0,91 (т, 6Н), 1,03 (т, 2Н), 1,57-1,73 (т, 4Н), 2,61 (т, 1Н), 3,924,04 (т, 4Н), 7,47 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,85 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,95 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,36 (бб, 1Н, Д=8,7 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,66 (8, 1Н), 8,95 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

- 15 016791

МС: т/ζ 542 (М+Н)⁺.

4. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(Ы-[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-(2-метоксиэтил)амино)-3пиридил] ксантин.

Время удерживания 10,08 мин.

'|| ЯМР (ДМСО, бе): 0,71 (т, 2Н), 0,88 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,05 (т, 2Н), 1,70 (т, 2Н), 2,62 (т, 1Н), 3,19 (8, 3Н), 3,62 (ΐ, 2Н, 1=5,4 Гц), 3,96 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,21 (ΐ, 2Н, 1=5,4 Гц), 7,47 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,87 (б, 1Н, 1=8,1 Гц), 7,96 (б, 1Н, 1=8,1 Гц), 8,34 (бб, 1Н, 6=8,7 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,66 (8, 1Н), 8,95 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 558 (М+Н)⁺.

5. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(К-(6-фторникотиноил)-Ы-(2-метоксиэтил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 9,32 мин.

'Н ЯМР (ДМСО, бе): 0,74 (т, 2Н), 0,92 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,06 (т, 2Н), 1,73 (т, 2Н), 2,65 (т, 1Н), 3,19 (8, 3Н), 3,64 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 3,99 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,22 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 7,18 (бб, 1Н, 6=8,4 Гц, .6=2,4 Гц), 7,41 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,91 (ϊ6, 1Н, 6=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,18 (б, 1Н, 1=2,4 Гц), 8,36 (бб, 1Н, 61=8,4 Гц, 6=2,1 Гц), 8,76 (б, 1Н, 1=2,1 Гц).

МС: т/ζ 508 (М+Н)⁺.

6. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(М-никотиноил-Ы-(2-метоксиэтил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 8,53 мин.

МС: т/ζ 490 (М+Н)⁺.

7. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(М-никотиноил-Ы-(циклопропилметил)амино)-3-пиридил]ксантин. Условия ВЭЖХ: МеОН 40-95%, градиент за 10 мин, затем МеОН 95%.

Время удерживания 9,77 мин.

МС: т/ζ 486 (М+Н)⁺.

8. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(М-никотиноил-Ы-(циклопропил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 8,67 мин.

МС: т/ζ 472 (М+Н)⁺.

9. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(Ы-[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-(циклопропилметил)амино)3-пиридил] ксантин.

Время удерживания 10,71 мин.

'|| ЯМР (ДМСО, б₆): 0,19 (т, 2Н), 0,41 (т, 2Н), 0,72 (т, 2Н), 0,91 (ΐ, 3Н, 1=7,2 Гц), 1,00-1,16 (т, 3Н), 1,70 (т, 2Н), 2,62 (т, 1Н), 3,96 (т, 4Н), 7,47 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,86 (б, 1Н, 1=8,1 Гц), 7,97 (бб, 1Н, 6=2,1 Гц, 6=8,1 Гц), 8,36 (бб, 1Н, 6=2,1 Гц, 1₂=8,4 Гц), 8,68 (8, 1Н), 8,98 (б, 1Н, 1=2,1 Гц).

МС: т/ζ 554 (М+Н)⁺.

10. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(К-[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-(тетрагидрофуранилметил)амино)-3 -пиридил] ксантин.

Время удерживания 10,31 мин.

'|| ЯМР (ДМСО, б₆): 0,71 (т, 2Н), 0,88 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,02 (т, 2Н), 1,54-1,96 (т, 6Н), 2,61 (т, 1Н), 3,57 (6ϊ, 2Н, 6=6,9 Гц, 1₂=3,0 Гц), 3,96 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,04-4,18 (т, 3Н), 7,48 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,85 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,95 (бб, 1Н, 6=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,34 (бб, 1Н, 6=8,4 Гц, 6=2,4 Гц), 8,66 (8, 1Н), 8,93 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 584 (М+Н)⁺.

11. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(Ы-никотиноил-Ы-этиламино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 8,93 мин.

'|| ЯМР (ДМСО, б₆): 0,72 (т, 2Н), 0,91 (ΐ, 3Н, 1=7,2 Гц), 1,04 (т, 2Н), 1,19 (ΐ, 3Н, 1=7,2 Гц), 1,70 (т, 2Н), 2,61 (т, 1Н), 3,95 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,06 (ф 2Н, 1=7,2 Гц), 7,33 (т, 2Н), 7,80 (6ϊ, 1Н, 6=1,5 Гц, 6>=8,1 Гц), 8,31 (бб, 1Н, 6=2,4 Гц, 6=8,4 Гц), 8,44 (б, 1Н, 1=2,1 Гц), 8,53 (бб, 1Н, 6=2,1 Гц, 6=4,8 Гц), 8,99 (б, 1Н, 1=2,1 Гц).

МС: т/ζ 460 (М+Н)⁺.

12. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(Ы-никотиноил-Ы-пропиламино)-3-пиридил]ксантин.

'|| ЯМР (ДМСО, б₆): 0,72 (т, 2Н), 0,88 (ΐ, 6Н, 1=7,5 Гц), 1,02 (т, 2Н), 1,57-1,74 (т, 4Н), 2,62 (т, 1Н), 3,97 (т, 4Н), 7,31 (бб, 1Н, 6=7,8 Гц, 6=0,9 Гц), 7,34 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,68 (6ϊ, 1Н, 6=7,8 Гц, 6=1,8 Гц), 8,30 (бб, 1Н, 6=8,4 Гц, 6=2,4 Гц), 8,42 (б, 1Н, 1=2,4 Гц), 8,51 (бб, 1Н, 1₁=4,8 Гц, 6=1,5 Гц), 8,99 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

Время удерживания 9,7 мин.

- 16 016791

МС: т/ζ 474 (М+Н)⁺.

13. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(№[6-фторникотиноил]-Ы-циклопропилметил]амино)-3пиридил]ксантин.

Время удерживания 10,09 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО, ά₆): 0,15 (т, 2Н), 0,39 (т, 2Н), 0,72 (т, 2Н), 0,89 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,00-1,20 (т, 3Н), 1,71 (т, 2Н), 2,63 (т, 1Н), 3,95 (т, 4Н), 7,13 (άά, 1Н, 11=8,4 Гц, 1₂=2,1 Гц), 7,37 (ά, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,88 (т, 1Н), 8,16 (8, 1Н), 8,33 (άά, 1Н, ^=8,4 Гц, 1₂=2,1 Гц), 9,00 (ά, 1Н, 1=2,1 Гц).

МС: т/ζ 504 (М+Н)⁺.

14. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(№[6-фторникотиноил]-Ы-метиламино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 9,00 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, άβ): 0,72 (т, 2Н), 0,90 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,03 (т, 2Н), 1,72 (т, 2Н), 2,63 (т, 1Н), 3,51 (8, 3Н), 3,97 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 7,17 (άά, 1Н, 1₁=8,1 Гц, 1₂=2,1 Гц), 7,45 (ά, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,93 (т, 1Н), 8,20 (8, 1Н), 8,36 (άά, 1Н, 1₁=7,5 Гц, 1₂=2,1 Гц), 8,99 (8, 1Н).

МС: т/ζ 464 (М+Н)⁺.

15. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(№никотиноил-Ы-аллиламино)-3 -пиридил]ксантин.

Время удерживания 9,28 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, άβ): 0,71 (т, 2Н), 0,88 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,03 (т, 2Н), 1,68 (т, 2Н), 2,61 (т, 1Н), 3,95 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,67 (ά, 2Н, 1=4,5 Гц), 5,16 (т, 2Н), 5,92 (т, 1Н), 7,37 (т, 2Н), 7,73 (ά, 1Н, 1=7,8 Гц), 8,32 (ά, 1Н, 1=8,7 Гц), 8,48 (8, 1Н), 8,54 (ά, 1Н, 1=3,9 Гц), 9,0 (8, 1Н).

МС: т/ζ 472 (М+Н)⁺.

16. 1 -Циклопропил-3-пропил-8-[6-(№[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-аллиламино)-3пиридил] ксантин.

Время удерживания 10,37 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, άβ): 0,73 (т, 2Н), 0,91 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,03 (т, 2Н), 1,72 (т, 2Н), 2,66 (т, 1Н), 3,99 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,73 (ά, 2Н, 1=4,8 Гц), 5,15-5,30 (т, 2Н), 5,91-6,00 (т, 1Н), 7,53 (ά, 2Н, 1=8,4 Гц), 7,91 (ά, 1Н, 1=8,1 Гц), 8,03 (ά, 1Н, 1=8,1 Гц), 8,40 (άά, 1Н, ф=8,4 Гц, 1₂=2,1 Гц), 8,73 (8, 1Н), 8,95 (ά, 1Н, 1=2,1 Гц).

МС: т/ζ 540 (М+Н)⁺.

17. 1 -Циклопропил-3 -пропил-8-[6-(Ц-никотиноил-И-(2- [пиперидин-1 -ил] этил)амино)-3пиридил] ксантин.

Время удерживания 4,90 мин.

МС: т/ζ 543 (М+Н)⁺.

18. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(№[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-(2-[пиперидин-1ил] этил)амино)-3-пиридил] ксантин.

Время удерживания 6,63 мин.

МС: т/ζ 611 (М+Н)⁺.

19. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(№никотиноил-Н-(2-морфолиноэтил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Условия ВЭЖХ: МеОН 20-70%, градиент за 10 мин, затем МеОН 70%.

Время удерживания 9,44 мин.

МС: т/ζ 545 (М+Н)⁺.

20. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(Ц-[6-(трифторметил)никотиноил]-Н-(2-морфолиноэтил)амино)3-пиридил] ксантин.

Время удерживания 6,36 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, άβ): 0,73 (т, 2Н), 0,91 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,05 (т, 2Н), 1,73 (т, 2Н), 2,36 (т, 4Н), 2,63 (т, 3Н), 3,39 (т, 4Н), 3,99 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,20 (ΐ, 2Н, 1=6,0 Гц), 7,43 (ά, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,90 (ά, Н, 1=8,1 Гц), 8,00 (ά, 1Н, 1=8,1 Гц), 8,34 (άά, 1Н, ^=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,70 (8, 1Н), 8,99 (ά, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 613 (М+Н)⁺.

21. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(№[6-фторникотиноил]-Ы-(2-[пиперидин-1-ил]этил)амино)-3пиридил]ксантин.

Условия ВЭЖХ: МеОН 20-52%, градиент за 10 мин, затем МеОН 52%.

Время удерживания 13,9 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, ά₆): 0,74 (т, 2Н), 0,92 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,06 (т, 2Н), 1,45-1,84 (т, 8Н), 2,65 (т, 1Н),

2,99 (т, 2Н), 3,35 (т, 2Н), 3,59 (т, 2Н), 3,99 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,45 (т, 2Н), 7,20 (άά, 1Н, 1₁=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 7,43 (ά, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,97 (άΐ, 1Н, 1₁=8,1 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,23 (ά, Н, 1=2,4 Гц), 8,35 (άά, 1Н, 11=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 9,12 (ά, 1Н, 1=2,4 Гц), 10,13 (8, 1Н).

МС: т/ζ 561 (М+Н)⁺.

- 17 016791

22. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(К-[6-фторникотиноил]-Ы-(2-морфолиноэтил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 10,13 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО, б₆): 0,73 (т, 2Н), 0,89 (1, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,03 (т, 2Н), 1,73 (т, 2Н), 2,34 (т, 4Н), 2,62 (т, 3Н), 3,39 (т, 4Н), 3,96 (1, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,16 (т, 2Н), 7,14 (бб, 1Н, 1₁=8,7 Гц, 1₂=2,4 Гц), 7,31 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,89 (1б, 11=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,16 (б, 1Н, 1=2,4 Гц), 8,29 (бб, 1Н, 11=8,7 Гц, 1₂=2,4 Гц), 9,00 (8, 1Н).

МС: т/ζ 563 (М+Н)⁺.

23. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(Н-никотиноил-Ы-(2-[пирролидин-1-ил]этил)амино)-3пиридил]ксантин.

Время удерживания 4,62 мин.

МС: т/ζ 529 (М+Н)⁺.

24. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(Н-[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-(2-пирролидин-1-ил]этил)амино)-3 -пиридил] ксантин.

Время удерживания 6,43 мин.

МС: т/ζ 597 (М+Н)⁺.

25. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-[(Н-никотиноил-Ы-[(тиофен-2-ил)метил]амино)]-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 10,10 мин.

МС: т/ζ 528 (М+Н)⁺.

26. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(Н-[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-изобутиламино)-3пиридил] ксантин.

Время удерживания 11,06 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,71 (т, 2Н), 0,88 (т, 9Н), 1,02 (т, 2Н), 1,68 (т, 2Н), 1,91 (т, 1Н), 2,61 (т, 1Н),

3.95 (т, 4Н), 7,48 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,83 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,92 (б, 1Н, 1=8,1 Гц), 8,35 (бб, 1Н, 6=8,4 Гц, 1₂=2,1 Гц), 8,64 (8, 1Н), 8,94 (б, 1Н, 1=2,1 Гц).

МС: т/ζ 556 (М+Н)⁺.

27. 1,3-Дипропил-8-[6-(Н-никотиноил-Ы-(циклопропилметил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 10,63 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,18 (т, 2Н), 0,42 (т, 2Н), 0,89 (т, 6Н), 1,15 (т, 1Н), 1,60 (т, 2Н), 1,74 (т, 2Н), 3,87 (1, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,01 (т, 4Н), 7,34 (т, 2Н), 7,71 (б, 1Н, 1=7,8 Гц), 8,31-8,54 (т, 3Н), 8,69 (8, 1Н).

МС: т/ζ 488 (М+Н)⁺.

28. 1,3-Дипропил-8-[6-(Н-[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-(циклопропилметил)амино)-3пиридил] ксантин.

Время удерживания 11,46 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,18 (т, 2Н), 0,42 (т, 2Н), 0,89 (т, 6Н), 1,16 (т, 1Н), 1,60 (т, 2Н), 1,74 (т, 2Н), 3,87 (1, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,01 (т, 4Н), 7,49 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,87 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,97 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,38 (бб, 1Н, 11=8,4 Гц, 12=2,4 Гц), 8,69 (8, 1Н), 9,00 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 556 (М+Н)⁺.

29. 1,3-Дипропил-8-[6-(Н-[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-(2-метоксиэтил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 10,91 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,87 (т, 6Н), 1,60 (т, 2Н), 1,73 (т, 2Н), 3,19 (8, 3Н), 3,62 (1, 3Н, 1=5,1 Гц), 3,86 (1, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,00 (1, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,31 (1, 2Н, 1=5,1 Гц), 7,48 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,87 (б, 1Н, 1=8,4 Гц),

7.96 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,36 (бб, 1Н, 11=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,66 (8, 1Н), 8,95 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 560 (М+Н)⁺.

30. 1,3-Дипропил-8-[6-(Н-(6-фторникотиноил)-Ы-(2-метоксиэтил)амино)-3-пиридил)ксантин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,88 (т, 6Н), 1,57 (т, 2Н), 1,72 (т, 2Н), 3,18 (8, 3Н), 3,60 (1, 2Н, 1=5,7 Гц), 3,86 (1, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,00 (1, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,19 (1, 2Н, 1=5,7 Гц), 7,14 (бб, 1Н, 11=8,7 Гц, 1₂=2,7 Гц), 7,39 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,88 (б1, 1Н, 11=8,4 Гц, 1₂=2,7 Гц), 8,15 (б, 1Н, 1=2,7 Гц), 8,34 (бб, 1Н, 11=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,99 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

Время удерживания 10,18 мин.

МС: т/ζ 510 (М+Н)⁺.

- 18 016791

31. 1,3-Диаллил-8-[6-(Ы-[6-(трифторметил)никотиноил]-Х-(2-метоксиэтил)амино)-3-пиридил]ксантин.

¹Н ЯМР (ДМСО, б₆): 3,18 (8, 3Н), 3,60 (ΐ, 2Н, 1=5,4 Гц), 4,21 (ΐ, 2Н, 1=5,4 Гц), 4,50 (б, 2Н, 1=4,5 Гц), 4,64 (б, 2Н, 1=4,5 Гц), 5,02-5,15 (т, 4Н), 5,83-6,00 (т, 2Н), 7,48 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,86 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,95 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,35 (бб, 1Н, 1₁=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,67 (б, 1Н, 1=1,5 Гц), 8,95 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

Время удерживания 9,81 мин.

МС: т/ζ 556 (М+Н)⁺.

32. 1,3-Диаллил-8-[6-(К-[6-фторникотиноил]-Ы-(2-метоксиэтил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 9,00 мин.

МС: т/ζ 506 (М+Н)⁺.

33. 1.3-Диаллил-8-[6-(П-никотиноил-Ы-(2-метоксиэтил)амино)-3-пиридил] ксантин.

Время удерживания 8,28 мин.

МС: т/ζ 488 (М+Н)⁺.

34. 1,3-Дипропил-8-[6-(Х-пиперазинил)-3-пиридил]ксантин.

Соединение 34 может быть образовано из соединения 1А посредством конденсации с пиперазином. Условия ВЭЖХ: МеОН 20-75%, градиент за 10 мин, затем МеОН 75%.

Время удерживания 9,24 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,87 (ф 6Н, 1=7,5 Гц), 1,56 (т, 2Н), 1,72 (т, 2Н), 2,78 (ΐ, 4Н, 1=4,5 Гц), 3,52 (ΐ, 4Н, 1=4,5 Гц), 3,85 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 3,99 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 6,88 (б, 1Н, 1=9,0 Гц), 8,13 (бб, 1Н, ф=9,0 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,80 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 398 (М+Н)⁺.

35. 1,3-Дипропил-8-[6-(Х-(6-фторникотиноил)-Ы-(метил)амино)-3 -пиридил] ксантин.

Время удерживания 10,01 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, б₆): 0,88 (т, 6Н), 1,57 (т, 2Н), 1,72 (т, 2Н), 3,50 (8, 3Н), 3,86 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,00 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 7,16 (бб, 1Н, ф=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 7,45 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,92 (6ϊ, 1Н, φ=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,19 (б, 1Н, 1=2,4 Гц), 8,36 (бб, 1Н, ф=8,7 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,99 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

МС: т/ζ 466 (М+Н)⁺.

36. 1,3-Дипропил-8-[6-(Х-[6-(трифторметил)никотиноил]-Ы-(этил)амино)-3-пиридил]ксантин.

Время удерживания 10,87 мин.

Ή ЯМР (ДМСО, бе): 0,92 (т, 6Н), 1,24 (ΐ, 3Н, 1=6,9 Гц), 1,55-1,78 (т, 4Н), 3,90 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,03 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,12 (ф 2Н, 1=6,9 Гц), 7,51 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,90 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,00 (бб, 1Н, 1₁=8,4 Гц, 1₂=1,8 Гц), 8,41 (бб, 1Н, 1₁=8,4 Гц, 1₂=2,1 Гц), 8,71 (8, 1Н), 9,01 (б, 1Н, 1=1,8 Гц).

¹³С ЯМР (ДМСО, б6): 10,95, 11,11, 13,10, 20,79, 20,78, 42,181, 43,12, 44,46, 108,22, 120,26, 120,45, 120,97, 122,87, 135,71, 136,06, 137,75, 146,44, 146,55, 147,00, 148,25, 149,03, 150,61, 154,08, 155,11, 166,48.

МС: т/ζ 530 (М+Н)⁺.

Общие методики получения мочевина-замещенных пиридильных соединений 37-41.

Соединение В (50 мг) и соответствующий замещенный изоцианат (3 экв.) помещали в сосуд для работы под давлением и растворяли в сухом ТГФ (тетрагидрофуран) (приблизительно 5-10 мл). Сосуд для работы под давлением продували азотом, герметично закрывали и содержимое перемешивали при 80°С в течение 24-72 ч. После охлаждения смесь концентрировали под вакуумом и очищали градиентной хроматографией на силикагеле или препаративной ВЭЖХ.

37. 1-(5-(1-Циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-1- (2-метоксиэтил)-3-(3-метоксифенил)мочевина.

Время удерживания 12,80 мин.

МС: т/ζ 534 (М+Н)⁺.

- 19 016791

38. 1-(5-(1-Циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-3(3-фторфенил)-1-(2-метоксиэтил)мочевина.

Время удерживания 12,94 мин.

+ ЯМР (ДМСО, й₆): 0,77 (т, 2Н), 0,95 (ΐ, 3Н, 1=7,2 Гц), 1,07 (й, 2Н, 1=6,3 Гц), 1,77 (й, 2Н, 1=6,9 Гц), 2,67 (т, 1Н), 3,31 (8, 3Н), 3,65 (ΐ, 2Н, 1=5,4 Гц), 4,03 (ΐ, 2Н, 1=6,6 Гц), 4,23 (ΐ, 2Н, 1=5,4 Гц), 6,91 (т, 1Н), 7,37 (т, 2Н), 7,59 (т, 2Н), 8,47 (й, 1Н, 1=8,7 Гц), 9,14 (8, 1Н), 11,20 (8, 1Н).

МС: т/ζ 522 (М+Н)⁺.

39. 11-(5-(1-Циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-3(2-фторфенил)-1-(2-метоксиэтил)мочевина.

Время удерживания 13,28 мин.

МС: т/ζ 522 (М+Н)⁺.

40. 3 -(3 -Хлорфенил)-1-(5-( 1-циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3 -пропил-1Н-пурин-8ил)пиридин-2-ил)-1-(2-метоксиэтил)мочевина.

Время удерживания 13,55 мин.

+ ЯМР (ДМСО, й₆): 0,77 (т, 2Н), 0,95 (ΐ, 3Н, 1=7,2 Гц), 1,07 (т, 2Н), 1,77 (μ, 2Н, 1=7,2 Гц), 2,67 (т, 1Н), 3,30 (8, 3Н), 3,65 (ΐ, 2Н, 1=5,4 Гц), 4,04 (ΐ, 2Н, 1=6,3 Гц), 4,22 (ΐ, 2Н, 1=5,4 Гц), 7,12 (йй, 1Н, 1=1,5 Гц, 8,4 Гц), 7,37 (ΐ, 2Н, 1=8,1 Гц), 7,55 (μ, 2Н, 1=9,0 Гц), 7,80 (ΐ, 1Н, 1=2,1 Гц), 8,46 (йй, 1Н, ^=2,7 Гц, Э₂=9,3 Гц), 9,15 (й, 1Н, 1=2,4 Гц), 11,14 (8, 1Н).

МС: т/ζ 538 (М+Н)⁺.

41. 1-(5-(1-Циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-3(3-(трифторметил)фенил)-1-(2-метоксиэтил)мочевина.

Время удерживания 13,30 мин.

'Н ЯМР (ДМСО, й₆): 0,76 (т, 2Н), 0,98 (ΐ, 3Н, 1=7,2 Гц), 1,07 (μ, 2Н, 1=7,2 Гц), 1,77 (μ, 2Н, 1=7,2 Гц), 2,67 (т, 1Н), 3,29 (8, 3Н), 3,65 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 4,04 (ΐ, 2Н, 1=6,3 Гц), 4,31 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 7,42 (й, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,59 (т, 3Н), 7,84 (й, 1Н, 1=8,1 Гц), 8,09 (8, 1Н), 8,47 (йй, 1Н, ^=2,4 Гц, 1₂=8,7 Гц), 9,15 (8, 1Н), 11,14 (8, 1Н).

МС: т/ζ 572 (М+Н)⁺.

Общие методики получения амид-замещенных пиридильных соединений 42-45.

Соединение В (50 мг) и соответствующий ангидрид или хлорангидрид (более 10 экв.) помещали в сосуд для работы под давлением и растворяли в сухом пиридине (приблизительно 5-10 мл). Для реакций с ангидридом добавляли ДМАП (4-диметиламинопиридин) в каталитических количествах. Сосуд для работы под давлением продували азотом, герметично закрывали и содержимое перемешивали при 80°С в течение 24-72 ч. После охлаждения смесь концентрировали под вакуумом и очищали градиентной хроматографией на силикагеле или препаративной ВЭЖХ.

42. Х-(5-(1-Циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-Ы(2-(пиридин-2-ил)этил)ацетамид.

Время удерживания 12,80 мин.

МС: т/ζ 474 (М+Н)⁺.

43. Х-(5-(1-Циклопропил-2,6-диоксо-3-пропил-2,3,6,7-тетрагидро-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-Ыфенетилбензамид.

Время удерживания 12,63 мин.

+ ЯМР (ДМСО, й₆): 0,72 (т, 2Н), 0,91 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,02 (т, 2Н), 1,70 (μ, 2Н, 1=7,5 Гц), 2,61 (т, 1Н), 2,97 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 3,96 (ΐ, 2Н, 1=6,3 Гц), 4,23 (ΐ, 2Н, 1=7,2 Гц), 7,04 (й, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,25 (т, 4Н), 7,49 (т, 2Н), 7,62 (т, 1Н), 7,95 (т, 2Н), 8,18 (йй, 1Н, ^=2,7 Гц, 1₂=8,7 Гц), 9,03 (й, 1Н, 1=1,8 Гц).

МС: т/ζ 535 (М+Н)⁺.

- 20 016791

44. Х-(5-(1-Циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-Ы(циклопропилметил)бензамид.

Время удерживания 11,95 мин.

'|| ЯМР (ДМСО, бе): 0,19 (т, 2Н), 0,41 (т, 2Н), 0,75 (т, 2Н), 0,92 (ΐ, 3Н, 1=7,2 Гц), 1,05 (т, 2Н), 1,67 (т, 1Н), 1,75 (д, 2Н, 1=7,5 Гц), 2,65 (т, 1Н), 3,97 (т, 4Н), 7,18 (б, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,37 (т, 3Н), 7,57 (т, 2Н),

7,99 (т, 1Н), 8,26 (бб, 1Н, ^=2,7 Гц, 1₂=8,7 Гц), 9,07 (б, 1Н, 1=1,8 Гц).

МС: т/ζ 485 (М+Н)⁺.

45. Х-(5-(1-Циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-Ы(2-(пиридин-3 -ил)этил)пиваламид.

Время удерживания 9,80 мин.

МС: т/ζ 516 (М+Н)⁺.

46. 1,3-Дипропил-8-[6-(Ы-[6-фторникотиноил]метиламино)-3-пиридил]ксантин.

'Н ЯМР (ДМСО, бе): 0,88 (т, 6Н), 1,57 (т, 2Н), 1,72 (т, 2Н), 3,50 (8, 3Н), 3,86 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,00 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 7,16 (бб, 1Н, ^=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 7,45 (б, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,92 (6ϊ, 1Н, ^=8,4 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,19 (б, 1Н, 1=2,4 Гц), 8,36 (бб, 1Н, ^=8,7 Гц, 1₂=2,4 Гц), 8,99 (б, 1Н, 1=2,4 Гц).

Время удерживания 10,01 мин.

МС: т/ζ 466 (М+Н)⁺.

47. 3-Бензил-1-(5-(2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-1,3-дипропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-1-(2морфолиноэтил)мочевина.

'|| ЯМР (ДМСО, бе): 0,77 (т, 2Н), 0,95 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,08 (т, 2Н), 1,77 (т, 2Н), 2,45 (т, 4Н), 2,56 (т, 2Н), 2,65 (т, 1Н), 3,47 (т, 4Н), 4,03 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,15 (ΐ, 2Н, 1=6,0 Гц), 4,46 (б, 2Н, 1=6,0 Гц), 7,307,40 (т, 5Н), 7,60 (б, 1Н, 1=9,0 Гц), 8,40 (бб, 1Н, Д₁=9,0 Гц, 1₂=2,4 Гц), 9,02 (б, 1Н, 1=2,4 Гц), 9,45 (ΐ, 1Н, 1=5,4 Гц).

Условия ВЭЖХ: МеОН 20-75%, градиент за 10 мин, затем МеОН 75%.

Время удерживания 10,33 мин.

МС: т/ζ 573 (М+Н)⁺.

48. 3-Бензил-1-(5-(1-циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин2-ил)-1-(2-метоксиэтил)мочевина.

'|| ЯМР (ДМСО, б₆): 0,74 (т, 2Н), 0,95 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,08 (т, 2Н), 1,77 (т, 2Н), 2,67 (т, 1Н), 3,30 (8, 3Н), 3,59 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 4,03 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,19 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 4,46 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 7,267,40 (т, 5Н), 7,58 (б, 1Н, 1=9,0 Гц), 8,41 (бб, 1Н, ^=9,0 Гц, 1₂=2,4 Гц), 9,02 (б, 1Н, 1=2,4 Гц), 9,18 (ΐ, 1Н, 1=5,7 Гц).

Время удерживания 11,31 мин.

МС: т/ζ 518 (М+Н)⁺.

49. 1-(5-(1-Циклопропил-2,3,6,7-тетрагидро-2,6-диоксо-3-пропил-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил)-1(2-метоксиэтил)-3-(4-метоксифенил)мочевина.

'|| ЯМР (ДМСО, б₆): 0,77 (т, 2Н), 0,96 (ΐ, 3Н, 1=7,5 Гц), 1,08 (т, 2Н), 1,79 (т, 2Н), 2,68 (т, 1Н), 3,33 (8, 3Н), 3,65 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 3,79 (8, 3Н), 4,04 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 4,24 (ΐ, 2Н, 1=5,7 Гц), 6,94 (бб, 2Н, 11=6,9 Гц, 1₂=2,1 Гц), 7,50 (бб, 2Н, ^=6,9 Гц, 1₂=2,1 Гц), 7,57 (б, 1Н, 1=9,0 Гц), 8,44 (бб, 1Н, ^=9,0 Гц, 1₂=2,4 Гц), 9,11 (б, 1Н, 1=2,4 Гц), 10,90 (8, 1Н).

Время удерживания 11,47 мин.

МС: т/ζ 534 (М+Н)⁺.

50. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(3-(3,4-дифторфенил)-1-(2,3-дигидроксипропил)уреидо)-3пиридил]ксантин:

К раствору 1 -аллил-1-[5-(1-циклопропил-2,6-диоксо-3-пропил-2,3,6,7-тетрагидро-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил]-3-(3,4-дифторфенил)мочевины (0,102 г, 0,1956 ммоль) в ацетоне и воде (15 мл) добавляли тетраоксид осмия (0,0780 мг, 0,3068 ммоль) и 4-метилморфолин-Ы-оксид (0,046 мг, 0,3927 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 72 ч, после чего нагревали до 40°С и реакционную смесь перемешивали в течение еще 48 ч. Продукт очищали с использованием колонки из 43 г диоксида кремния и градиента ДХМ (дихлорметан)/МеОН 0-8%. Фракции концентрировали, фильтровали и промывали МеОН с получением белого твердого вещества.

Условия ВЭЖХ: МеОН 40-95%, градиент за 10 мин, затем МеОН 95% в течение 5 мин.

Время удерживания 11,98 мин.

МС: т/ζ 556 (М+Н)⁺.

- 21 016791

51. 1-Циклопропил-3-пропил-8-[6-(3-трифтор-м-толил)-1-(2,3-дигидроксипропил]уреидо)-3- пиридил]ксантин.

К раствору 1-аллил-1-[5-(1-циклопропил-2,6-диоксо-3-пропил-2,3,6,7-тетрагидро-1Н-пурин-8-ил)пиридин-2-ил]-3-(3-трифторметилфенил)мочевины (0,098 г, 0,1770 ммоль) в ацетоне и воде (15 мл) добавляли тетраоксид осмия (0,055 г, 0,2163 ммоль) и 4-метилморфолин-№оксид (0,036 г, 0,3073 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 72 ч, после чего нагревали до 40°С и реакционную смесь перемешивали в течение еще 48 ч. Продукт очищали с использованием колонки из 43 г диоксида кремния и градиента ДХМ/МеОН 0-8%. Фракции концентрировали, фильтровали и промывали МеОН с получением белого твердого вещества.

Время удерживания 13,23 мин.

МС: т/ζ 588 (М+Н)⁺.

В свете приведенного выше описания возможны многочисленные модификации и вариации настоящего изобретения. Таким образом, следует понимать, что изобретение в объеме прилагаемой формулы изобретения на практике может быть осуществлено иначе, чем конкретно описано здесь.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, выбранное из группы или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, где соединение представляет собой или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Фармацевтическая композиция, содержащая:

(а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1 или 2 и (б) фармацевтически приемлемый эксципиент.

- 22 016791
4. Терапевтический способ лечения патологического состояния или симптома у млекопитающего, где вовлечена активность аденозиновых А2В-рецепторов и желателен антагонизм их действия, включающий введение млекопитающему эффективного количества соединения по п.1 или 2.
5. Способ лечения астмы, аллергий, аллергических заболеваний или аутоиммунного заболевания, включающий введение эффективного количества соединения по п.1 или 2 млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.
6. Способ лечения диарейных заболеваний, инсулинорезистентности, диабета, рака, ишемии/реперфузионных повреждений, диабетической ретинопатии или ретинопатии, индуцированной гипербарическим кислородом, включающий введение эффективного количества соединения по п.1 или 2 или его фармацевтически приемлемой соли млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.
7. Применение соединения по п.1 или 2 в лечении патологического состояния или симптома, где вовлечена активность аденозиновых А2В-рецепторов.
8. Применение соединения по п.1 или 2 для изготовления лекарственного средства, полезного для лечения заболевания у млекопитающего, такого как человек, где вовлечена активность аденозиновых А2В-рецепторов.
9. Применение по п.8, где заболевание выбрано из астмы, аллергий, аллергических заболеваний и аутоиммунного заболевания.
10. Применение по п.8, где заболевание выбрано из диарейных заболеваний, инсулинорезистентности, диабета, рака, ишемии/реперфузионных повреждений, диабетической ретинопатии и ретинопатии, индуцированной гипербарическим кислородом.
11. Способ лечения астмы, включающий введение эффективного количества соединения по п.1 или 2 млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.
12. Способ лечения диабетической ретинопатии, включающий введение эффективного количества соединения по п.1 или 2 млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.