EA011034B1

EA011034B1 - Соединения карбонилбензоксазина для усиления глутаматергических синаптических ответов

Info

Publication number: EA011034B1
Application number: EA200400584A
Authority: EA
Inventors: Гари А. Роджерс; Мэттью Аллан; Клейтон Харрис; Джианджи Хуанг; Кристофер М. Маррс; Рудольф Мюллер; Станислав Рахвал
Original assignee: Кортекс Фармасеутикалс, Инк.
Priority date: 2001-11-26
Filing date: 2002-11-25
Publication date: 2008-12-30
Also published as: WO2003045315A3; SK2292004A3; MA26233A1; CA2463592A1; US7799913B2; ZA200403729B; WO2003045315A2; AU2002352886A1; US20040259871A1; EA200400584A1; MXPA04004815A; JP2005510532A; KR20040054777A; HUP0402279A2; JP4620349B2; CN1620440A; KR100915176B1; EP1448537A2; NO20041590L; HRP20040424A2

Abstract

Настоящее изобретение относится к предупреждению и лечению церебральной недостаточности, включающему увеличение рецепторов, функционирующих в синапсах в сетях мозга, отвечающих за поведение более высокого порядка. Эти сети мозга отвечают за когнитивные функции, относящиеся к расстройству памяти, которые наблюдаются при разных видах слабоумия, а также за дисбаланс нейрональной активности между различными областями мозга, возникающий при таких заболеваниях, как болезнь Паркинсона, шизофрения и эмоциональные заболевания. В частности, настоящее изобретение относится к соединениям, используемым для лечения таких состояний, а также способам применения этих соединений для такого лечения.

Description

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к соединениям, фармацевтическим композициям и способам их использования для профилактики и лечения церебральной недостаточности, включая усиление рецепторов, функционирующих в синапсах в сетях головного мозга, ответственных за поведение более высокого порядка. Эти сети головного мозга, которые участвуют в формировании познавательных способностей, связаны с ухудшением памяти, наблюдаемым при различных видах слабоумия, а также с дисбалансом нейрональной активности между различными областями головного мозга, который, как считается, вызывает такие заболевания, как болезнь Паркинсона, шизофрения и аффективные расстройства или заболевания, влияющие на настроение. В частности, настоящее изобретение касается соединений, используемых для лечения таких состояний, и способов использования этих соединений для такого лечения.

Предпосылки создания изобретения

Высвобождение глутамата в синапсах на многих участках в переднем мозге млекопитающих стимулирует два класса постсинаптических, ионотропных рецепторов. Эти классы обычно упоминаются как рецепторы АМРА/квисквалат и Ν-метил-О-аспарагиновой кислоты (ΝΜΌΑ). Рецепторы АМРА/квисквалат опосредуют независимую разность потенциалов быстрого эксцитатного постсинаптического тока (быстрого ЭПСТ), тогда как рецепторы ΝΜΌΑ генерируют зависимую разность потенциалов, медленный эксцитатный ток. Исследования, выполненные в срезах гиппокампа или коры, показывают, что быстрый ЭПСТ, опосредованный АМРА-рецепторами, в основном, является безусловным доминирующим компонентом в большинстве глутаматергических синапсов.

АМРА-рецепторы не распределяются равномерно по головному мозгу, а в значительной степени ограничиваются конечным мозгом и мозжечком. Эти рецепторы обнаружены в высоких концентрациях в поверхностных слоях коры головного мозга, в каждой из главных синаптических зон гиппокампа, и в стриарном комплексе, как указывают Мопадйаи е! а1., ίη Вгат Кезеагсй 324: 160-164 (1984). Исследования на животных и человеке показывают, что эти структуры организовывают сложные перцепционныемоторные процессы и обеспечивают основу для поведения более высокого порядка. Таким образом, АМРА-рецепторы опосредуют передачу в тех сетях головного мозга, которые отвечают за познавательную активность хозяина.

По вышеприведенным причинам лекарства, которые модулируют и, тем самым, усиливают функционирование АМРА-рецепторов, могут существенно способствовать познавательной и интеллектуальной работе. Такие лекарства должны также облегчать кодирование памяти. Экспериментальные исследования, как указывают Ага1 апб Ьупсй, Вгат Кезеагсй 598: 173-184 (1992), показывают, что увеличение параметра опосредованного АМРА-рецептором синаптического ответа усиливает индукцию долгосрочного потенцирования (ИДП). ИДП - устойчивое увеличение силы синаптических контактов, которые следуют за повторной физиологической активностью известного типа, происходящей в головном мозге во время обучения.

Соединения, которые усиливают функционирование глутаматных рецепторов формы АМРА, облегчают ИДП и усвоение изученных задач, что было измерено с помощью множества образцов. См., например, Сгаидег е! а1., 8упарзе 15: 326-329 (1993); 8!аиЬ11 е! а1., ΡΝΑ8 91: 777-781 (1994); Ага1 е! а1., Вгат Кез. 638: 343-346 (1994); 81аиЬй е! а1., ΡΝΑ8 91: 11158-11162 (1994); 8йог8 е! а1., №шо8с1. Ье!. 186: 153156 (1995); Ьагзоп е! а1., 1. №иго8С1. 15: 8023-8030 (1995); Сгапдег е! а1., 8упарзе 22: 332-337 (1996); Ага1 е! а1., 1ΡΕΤ 278: 627-638 (1996); БупсН е! а1., 1п!ета!. Сйп. Рзусйорйагт. 11: 13-19 (1996); БупсН е! а1., Ехр. №иго1оду 145: 89-92 (1997); 1пдуаг е! а1., Ехр. №иго1оду 146: 553-559 (1997); Натрзоп е! а1., 1. №иго8с1. 18: 2748-2763 (1998); апб Ь-упсН апб Кодегз, патент США 5747492. Имется значительное количество свидетельств, показывающих, что ИДП является основой памяти.

Например, составы, которые блокируют ИДП, препятствуют формированию памяти у животных, а некоторые лекарства, которые нарушают процесс обучения у человека, противодействуют стабилизации ИДП, как описывает бе1 Сегго апб Еупсй, №иго8с1епсе 49: 1-6 (1992).

Прототип соединения, который усиливает функцию АМРА-рецептора, описан 1!о е! а1., 1. Рйузю. 424: 533-543 (1990). Эти авторы обнаружили, что ноотропный препарат анирацетам (№анизоил-2-пирролидинон) усиливает токи, опосредованные АМРА-рецепторами мозга, экспрессированными в ооцитах Ксенопуса, не затрагивая ответов γ-аминомасляной кислоты (САВА), каиновой кислоты (КА) или ΝΜΌΑ-рецепторов. Инфузия анирацетама в срезы гиппокампа также существенно увеличивала величины быстрых синаптических потенциалов без изменения мембранных свойств в состоянии покоя. С тех пор считалось, что анирацетам усиливает синаптические ответы на нескольких участках в гиппокампе и что он не оказывает никакого эффекта на потенциалы, опосредованные ΝΜΌΑ-рецепторами (8!аиЬй е! а1., Р8усйоЬю1оду 18: 377-381 (1990) апб Х1ао е! а1., Нрросатриз 1: 373-380 (1991)).

Обнаружено, что анирацетам имеет чрезвычайно быстрое начало действия, и быстро выводится, и может применяться неоднократно без очевидных длительных эффектов, которые являются желательными свойствами для лекарств, предназначенных для лечения нарушений поведения. Однако аницетам, действительно, имеет ряд недостатков. Периферийное введение анирацетама не влияет на мозговые рецепторы. Препарат действует только при высоких концентрациях (приблизительно 1000 мкМ), и приблизительно 80% препарата преобразуются в анизоил-САВА после периферийного введения у человека

- 1 011034 (Сисп/ί апб ΖαηοΙΙί. 1. Сйгота!одг. 530: 397-406 (1990)). Обнаружен метаболит, анизоил-ОЛБЛ, обладающий меньшей синаптической активностью, чем анирацетам.

Описан класс соединений, модулирующих АМРА-рецепторы, которые не проявляют низкую эффективность и характерную для анирацетама неустойчивость (Ьупсй апб Водегк, И8 Ра1еп1 5747492). Эти соединения, называемые Атрактек®, можно заменить на бензамиды, которые включают, например, 1(хиноксалин-б-илкарбонил)пиперидин (СХ516; Атра1ех®). Как правило, они химически более устойчивы, чем анирацетам, и проявляют улучшенную биодоступность. СХ516 оказывает действие при экспериментах на животных, используемых для обнаружения эффективных лекарств для лечения нарушений памяти, шизофрении и депрессии. В трех отдельных клинических испытаниях СХ516 проявил эффективность в улучшении различных форм человеческой памяти (Ьупсй е! а1., 1п1егпа1. Сйп. Ркусйорйагт. 11: 1319 (1996); Ьупсй е! а1., Ехр. №иго1оду 145: 89-92 (1997); 1пдуаг е! а1., Ехр. ЫешЫоду 146: 553-559 (1997)).

Обнаружено, что бензоксазины - другой класс ампакинов, проявили очень высокую активность в моделях 1п У1!го и ш у1уо при оценке вероятности их воздействия на усиление процесса познания (Водегк апб Ьупс11; патент США № 5736543). Замещенные бензоксазины представляют собой твердые аналоги бензамидов с различными рецепторами, модулирующими свойства гибкого бензамида, СХ516.

Неожиданно было обнаружено, что определенные замещенные бензофуразановые и бензотиадиазоловые соединения действуют значительно сильнее в животной модели шизофрении, чем предыдущие соединения, и что они также эффективны в усилении процесса познания. Структурно эти соединения подобны описанным в Еупсй апб Водегк, патент США № 5736543.

Ранее описанные структуры, которые содержат 1,3-бензоксазин-4-он фармакофоры, замещали на части бензола такими гетероатомами, как азот или кислород (патенты США №№ 5736543 и 5962447), замещенными группами алкила (патенты США №№ 5650409 и 5783587) или незамещенными группами алкила (международная заявка ХУО 99/42456). Еще один класс соединений 1,3-бензоксазина содержит внешний к кольцу оксазина карбонил (патент США № 6124278), но не как заместитель на структуре кольца бензола. Недавно был обнаружен новый класс карбонилзамещенных соединений бензоксазина, которые проявляют существенную активность на синаптические ответы гиппокампа и нейрональные токи целых клеток, опосредованные АМРА-рецепторами, а также в животных моделях познания и памяти. Карбонилзамещенные 1,3-бензоксазин-4-он структуры являются первыми молекулами, которые проявили активность как модуляторы АМРА-рецептора и которые имеют 2 тяжелых атома, разветвляющихся от одного и того же альфа-атома до кольца бензола в 6- или 7-положении.

Биологическая активность 6- или 7-карбонилзамещенных 1,3-бензоксазинов была неожиданной, а эффективность в АМРА-рецепторе была удивительно высока; причем наиболее сильнодействующие 1,3бензоксазины являются членами этого класса соединений. Эти соединения описываются далее.

Краткое изложение существа изобретения

Настоящее изобретение включает, с одной стороны, соединение, представленное структурой I и описанное в разделе II полного описания, которое следует далее. Обнаружено, что введение соединений этого класса усиливает синаптические ответы, опосредованные АМРА-рецепторами. Неожиданно было обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению являются значительно более эффективными, чем ранее описанные соединения, для усиления функции АМРА-рецепторов в первичных нейрональных культурах и в срезах гиппокампа крыс и в усилении когнитивной деятельности, например быстродействии в радиальном лабиринте с 8 ответвлениями. Эта неожиданная активность переносится на фармацевтические соединения и соответствующие способы применения, включая способы лечения, при которых используются значительно более низкие концентрации (из расчета моль-на-моль) настоящих соединений по сравнению с соединениями, известными из предшествующей области техники.

Способность соединений согласно изобретению усиливать ответы, опосредованные АМРА-рецептором, позволяет использовать эти соединения для различных целей. Эти цели включают содействие изучению моделей поведения, зависимых от глутаматных рецепторов, рассмотрение состояний, при которых АМРА-рецепторы или синапсы, использующие эти рецепторы, имеют пониженное количество или эффективность, а также увеличение эксцитатной синаптической активности для восстановления дисбаланса между мозговыми подобластями или увеличение уровня нейротропных факторов.

С другой стороны, изобретение включает способ лечения относящегося к млекопитающим субъекта, страдающего от гипоглутаматергического состояния, или от дефицита количества или интенсивности эксцитатных синапсов, или от количества АМРА-рецепторов, которые вызывают нарушения памяти или других познавательных функций. Такие состояния могут также вызывать кортикальный/стриарный дисбаланс, приводящий к шизофрении или поведению, подобному форме шизофрении. Согласно данному способу лечение такого субъекта проводят путем назначения эффективного количества соединения,

- 2 011034 представленного структурой I и описанного в следующем далее разделе II подробного описания, в фармацевтически приемлемом носителе.

Эти и другие цели и особенности изобретения становятся более очевидными из следующего ниже подробного описания изобретения с сопровождающими его чертежами.

Краткое описание чертежей

На прилагаемой фигуре изображены четыре соединения согласно настоящему изобретению, наряду с одним соединением из предшествующей области техники, которые были протестированы на активность и описаны в экспериментальном разделе и в табл. 1 и 2, инфра.

Подробное описание изобретения

I. Определения.

Нижеприведенные термины имеют следующие определения, если не указано иначе. Другие термины, которые используются для описания настоящего изобретения, имеют те же самые определения, поскольку эти термины обычно используются специалистами в данной области техники.

Используемый здесь термин алкил относится к полностью насыщенному одновалентному радикалу, содержащему углерод и водород и который может быть прямой цепью, разветвленной или циклической цепью. Примерами алкилированных групп являются метил, этил, н-бутил, н-гептил, изопропил, 2метилпропил, циклопропил, циклопропилметил, циклобутил, циклопентил, циклопентилэтил и циклогексил.

Термин замещенный алкил относится к описанному выше алкилу, включающему одну или более функциональных групп, таких как низшие алкилы, содержащие 1-6 атомов водорода, арил, замещенный арил, ацил, галоген (т.е. алкилированные галогены, например, СР₃), гидрокси, алкокси, алкоксиалкил, амино, алкил и диалкиламино, ациламино, ацилокси, арилокси, арилоксиалкил, карбоксиалкил, карбоксиамидо, тио, тиоэфиры, как насыщенные, так и ненасыщенные циклические углеводороды, гетероциклы и т. п.

Термин арил относится к замещенному или незамещенному одновалентному ароматическому радикалу, имеющему одно кольцо (например, фенил) или кратные конденсированные кольца (например, нафтил). Другие примеры включают гетероциклические ароматические кольцевые группы, имеющие 1 или более атомов азота, кислорода или атомы серы в кольце, например имидазолил, фурил, пирролил, пиридил, тиенил и индолил.

Термин замещенный арил относится к вышеописанному арилу, который содержит одну или более функциональных групп, таких как низший алкил, ацил, арил, галоген, алкилгалогены (например, СР₃), гидрокси, алкокси, алкоксиалкил, амино, алкил и диалкиламино, ациламино, ацилокси, арилокси, арилоксиалкил, карбоксиалкил, карбоксамидо, тио, тиоэфиры, например как насыщенные, так и ненасыщенные циклические углеводороды, гетероциклы и т.п.

Термины гетероцикл или гетероциклический относится к карбоциклическому кольцу, где 1 или более атомов углерода замещены 1 или более гетероатомами, такими как азот кислород или сера. Примеры гетероциклов включают, но не ограничены, такими, как пиперидин, пирролидин, морфолин, тиоморфолин, пиперазин, тетрагидрофуран, тетрагидропиран, 2-пирролидинон, δ-велеролактам, δ-велеролактон и 2-кетопиперазин.

Термин замещенный гетероцикл относится к вышеописанному гетероциклу, который содержит одну или более функциональные групп, таких как низший алкил, ацил, арил, циано, галоген, гидрокси, алкокси, алкоксиалкил, амино, алкил и диалкиламино, ациламино, ацилокси, арилокси, арилоксиалкил, карбоксиалкил, карбоксамидо, тио, тиоэфиры, например как насыщенные, так и ненасыщенные циклические углеводороды, гетероцикл и т. п.

Используемый здесь термин соединение относится к любому конкретному описанному здесь химическому соединению. В пределах его использования в контексте, термин, в целом, относится к отдельному соединению, но в некоторых случаях он может также относиться к стереоизомерам и/или оптическим изомерам (включая рацемические смеси) описанных соединений.

Термин эффективное количество относится к количеству выбранного соединения формулы I, которое используется для усиления глутаматергического синаптического ответа при повышении активности АМРА-рецептора. Точное используемое количество варьируется в зависимости от специфического выбранного соединения и его планируемого применения, возраста и веса субъекта, способа введения и т.д. и может быть легко определено обычными экспериментами. В случае лечения состояния или стадии заболевания эффективное количество - это то количество, которое используют для эффективного лечения специфического состояния или стадии заболевания.

Термин фармацевтически приемлемый носитель относится к носителю или наполнителю, который имеет допустимую токсичность по отношению к субъекту, которому его вводят. Фармацевтически приемлемые наполнители описаны подробно Е.^. Магйи, ίη РстшЦопА Рйагтасеи11са1 8с1епсе5.

Фармацевтически приемлемая соль соединения амина, которая рассматривается в настоящем изобретении, является солью аммония, имеющей в качестве противоиона неорганический анион, например хлорид, бромид, йодид, сульфат, сульфит, нитрат, нитрит, фосфат и т.п., или органический анион, например ацетат, малонат, пируват, пропионат, фумарат, циннамат, тозилат и т.п.

- 3 011034

Используемый везде в описании термин пациент или субъект для описания животного, в основном, млекопитающего животного, включает человека, который подвергается лечению с использованием соединения или композиции согласно настоящему изобретению. Для лечения или применения с/или теми состояниями или заболеваниями, которые являются специфическими для определенного животного (в частности, например, человека в качестве субъекта или пациента), термин пациент или субъект относятся к такому специфическому животному.

Термин сенсорные моторные нарушения используют для описания нарушения, которое появляется у пациента или объекта из-за неспособности интегрировать внешнюю информацию, получаемую от пяти известных органов чувств таким образом, чтобы посылать соответствующие физические ответы, приводящие к движению и действию.

Термин когнитивная задача или когнитивная функция используется для описания усилий или процесса, совершаемых пациентом или субъектом, при которых требуются мышление или знание. Разнообразные функции совокупности париетальных, темпоральных и фронтальных долей коры головного мозга, которые составляют приблизительно 75% всей ткани мозга человека, отвечают за большую часть обработки информации, которая происходит между сенсорным входом и моторным выходом. Разнообразные функции совокупности коры головного мозга зачастую называют познавательной способностью, которая буквально означает процесс, с помощью которого мы познаем мир. Выборочное проявление внимания к специфическому стимулу, распознавание и идентификация этих релевантных особенностей стимула, а также планирование и испытание ответа на опыте представляют некоторые из процессов или способностей, опосредованных человеческим мозгом, которые связаны с познанием.

Термин сеть головного мозга используется для описания различных анатомических областей мозга, которые связаны друг с другом через синаптическую активность нейронных клеток.

Термин АМРА-рецептор относится к совокупности белков, обнаруженных в некоторых мембранах, которые позволяет положительным ионам пересекать мембрану в ответ на связывание глутамата или АМРА (ПЬ-а-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовая кислота), но не ΝΜΌΑ.

Термин эксцитатный синапс используется для описания соединения клетка-клетка, в котором высвобождение химического посредника одной клеткой приводит к деполяризации внешней мембраны другой клетки. Эксцитатный синапс описывает постсинаптический нейрон, имеющий обратный потенциал, который является более позитивным, чем пороговый потенциал, и, следовательно, в таком синапсе нейромедиатор усиливает вероятность того, что эксцитатный постсинаптический потенциал приведет к результату (нейрон запустит генерацию потенциала действия). Обратные потенциалы аннулирования и пороговые потенциалы определяют постсинаптическое возбуждение и ингибирование. Если обратный потенциал для постсинаптического потенциала (ПСП) является более позитивным, чем порог потенциала действия, то эффект медиатора является эксцитатным и продуцирует эксцитатный постсинаптический потенциал (ЭПСП) и запуск потенциала действия нейроном. Если обратный потенциал для постсинаптического потенциала является более негативным, чем порог потенциала действия, то медиатор является ингибиторным и может генерировать ингибиторные постсинаптические потенциалы (ИПСП), таким образом сокращая вероятность того, что синапс запустит потенциал действия. Общее правило для постсинаптического действия: если обратный потенциал является более позитивным, чем пороговый, то происходит возбуждение; ингибирование происходит, если обратный потенциал является более отрицательным, чем пороговый. См., например, Сйар!ег 7, ΝΕυΡΟ8ί.ΊΕΝί.Έ. ебйеб Ьу Эа1е Ригуек, 81паиег Л550С1а!е5, 1пс., 8иибег1аиб, ΜΑ 1997.

Термин моторная задача используется для описания усилия, предпринимаемого пациентом или субъектом, которое приводит к движению или действию.

Термин перцепцивная задача используется для описания действия пациента или субъекта, при котором внимание направлено на сенсорные входы.

Термин синаптический ответ используется для описания биофизических реакций в одной клетке как последствия высвобождения химических посредников другой клеткой, с которой она находится в близком контакте.

Термин гипоглутаматергическое состояние используется для описания состояния или нарушения, при котором передача, опосредованная глутаматом (или связанная с эксцитатными аминокислотами), ниже нормальных уровней. Передача состоит в высвобождении глутамата, связывании с постсинаптическими рецепторами и открытии каналов, объединеных с этими рецепторами. Конечной точкой гипоглутаматергического состояния является сниженный эксцитатный постсинаптический ток. Это может быть результатом любой из трех вышеуказанных фаз передачи. Состояния или заболевания, которые считаются гипоглутаматергическими состояниями и которые можно лечить, используя соединения, композиции и способы согласно настоящему изобретению, включают, например потерю памяти, слабоумие, депрессию, нарушение внимания, сексуальную дисфункцию, нарушения движения, включая болезнь Паркинсона, шизофрению или поведение, подобное шизофрении, нарушения памяти и способности к обучению, включая те заболевания, которые являются следствием старения, травмы, удара и нейродегенеративных нарушений, а также состояния, обусловленные действием лекарственных средств, нейротоксическими агентами, болезнью Альцгеймера и старением. Эти состояния легко распознаются и диагностируются

- 4 011034 специалистами в данной области техники.

Термин кортикостриарный дисбаланс используется для описания состояния, в котором баланс нейронной активности во взаимосвязанных коре головного мозга и основном стриарном комплексе отклоняется от обычного. Активность может быть оценена путем электрической регистрации или молекулярными биологическими методами. Дисбаланс может быть установлен путем применения этих методов измерения к двум структурам или с помощью функциональных (поведенческих или физиологических) критериев.

Термин аффективное расстройство или расстройство настроения описывает состояние, когда печаль или восторг чрезмерно интенсивны и продолжаются сверх ожидаемого воздействия стрессового события жизни или возникают внутри организма. Используемый здесь термин аффективное растройство охватывает все типы расстройства настроения, как описано, например, в Ωίαβηοδίίο апб δίαΐίδΐίοαΐ Мапиа1 о£ Меп!а1 Обогбсп,. ΕοιιΠίι Εάίίίοη (Ό8Μ IV), радек 317-391.

Термин шизофрения используют для описания состояния, которое является обычным типом психоза, характеризующимся нарушением процессов мышления, таким как бред и галлюцинации, экстенсивным уходом интереса индивидуума от других людей и внешнего мира и сосредоточением на собственном я. В настоящее время шизофрению рассматривают как группу умственных болезней, а не одну отдельную категорию, и проводят различие между реактивной шизофренией и вялотекущей шизофренией. Используемый здесь термин шизофрения или форма, подобная шизофрении включает все типы шизофрении, включая амбулаторную шизофрению, кататоническую шизофрению, гебефреническую шизофрению, скрытую шизофрению, вялотекущую шизофрению, псевдоневротическую шизофрению, реактивную шизофрению, простую шизофрению, и связанные с ней психотические расстройства, которые подобны шизофрении, но которые не обязательно диагностируются как шизофрения сами по себе. Шизофрения и другие психотические расстройства могут быть диагностированы путем использования основополагающих принципов, изложенных, например, в руководстве И1адпо8Дс апб 81а118(1са1 Мапиа1 о£ МеПа1 Ищогбега, Еоийй Εάίίίοη (Ό8Μ IV) 8есДоп§ 293.81, 293.82, 295.10, 295.20, 295.30, 295.40, 295.60, 295.70, 295.90, 297.1, 297.3, 298.8.

Термин функция мозга используют для описания комбинированных задач восприятия, интегрирования, фильтрования и ответа на внешние стимулы и внутренние мотивационные процессы.

Термин нарушенный используют для описания функции, работающей на уровне, который является ниже нормального уровня. Нарушенные функции могут оказывать значительное влияние, поскольку функция, которая выполняется слабо, фактически не существует либо работает в режиме, который является значительно ниже нормального. Нарушенные функции могут также быть субоптимальными. Серьезность нарушения функции зависит от состояния пациента и заболевания, подлежащего лечению.

II. Соединения, которые усиливают функцию АМРА-рецепторов.

Настоящее изобретение относится, с одной стороны, к соединениям, имеющим свойство усиливать функции АМРА-рецептора. Эти соединения имеют структуры !а или !Ь, которые приведены ниже:

в которых

О и О' независимо обозначают водород, -СН₂-, -О-, -8-, алкил или замещенный алкил,

В¹ обозначает водород, алкил или вместе с О может быть кольцом циклоалкила,

В² может отсутствовать или, если присутствует, может быть -СН₂-, -СО-, -СН₂СН₂-, -СН₂СО-, -СН₂О-, -СВВ'- и -ΟΟΝΒ-,

Υ обозначает водород или -ΟΒ³ или служит для связывания ароматического кольца с А как с единственной связью, =Ν- или -ΝΒ-,

В³ обозначает водород, алкил, замещенный алкил или служит для связывания присоединенного кислорода с А, являющимся низшим алкиленом, таким как метилен или этилен, или замещенным низшим алкиленом, например -СВВ'-, связывающий ароматическое кольцо с А для образования замещенного или незамещенного 6-, 7- или 8-членного кольца или связи, связывающей кислород для образования 5- или 6членного кольца,

А обозначает -ΝΒΒ', -ΟΒ, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, арил, замещенный арил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, например кислород, азот или серу,

Β обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилкалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил,

Β' отсутствует или обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или может быть соединен с Β для обра

- 5 011034 зования 4-8-членного кольца, которое может быть замещено X и может быть связано с Υ для образования 6-членного кольца и которое может произвольно содержать 1 или 2 гетероатома, например кислород, азот или серу,

X и X' обозначают независимо В, гало, -СО₂В, -ΟΝ, -ΝΒΒ', -ΝΒΟΟΒ', -ΝΟ₂, -Ν₃ или -ΘΒ.

Синтез 1,3-бензоксазин-4-он структур, замещенных карбонильными половинами в 6- или 7-положении, предпочтительно осуществляют следующими методиками: 1) 6-карбонилзамещенные 1,3-бензоксазин-4-он структуры могут быть синтезированы триалкилалюминий-вспомогательным селективным аминолизисом эфиров 4-гидроксиизофталата, сопровождаемым замыканием кольца, с использованием альдегида. Дальнейшие реакции, известные специалистам в данной области техники, могут выполняться на эфире, остающемся в 6-положении, для преобразования эфира в различные другие карбонилы, содержащие, но не ограниченные половинами, такими как амиды, альдегиды, кетоны, оксимы или другие эфиры.

Подобным способом можно синтезировать 7-карбонилзамещенные 1,3-бензоксазин-4-он структуры свободным прямым аминолизисом эфиров 2-гидрокситерефталата с последующей реакцией с альдегидом, как показано. Преобразование непрореагировавшего эфира с другим карбонилом, содержащим половины, как описано выше для 6-положения, входит в пределы объема изобретения. Все соединения, описанные в настоящей заявке, можно синтезировать вышеописанным способом, используя аналогичные синтетические стадии, которые специально представленны в описанных здесь примерах, а также те, которые известны специалистам в данной области техники. Выделение стерео- и/или оптических изомеров в чистом виде можно осуществлять способами, которые известны специалистам в данной области техники.

III. Способ лечения.

Согласно одному аспекту изобретения предлагается способ лечения млекопитающего субъекта, страдающего от гипоглутаматергического состояния или от недостатка количества или интенсивности эксцитатных синапсов или количества АМРА-рецепторов. У такого субъекта может наблюдаться расстройство памяти или других познавательных функций или может произойти кортикально/стриарный дисбаланс, приводящий к потере памяти, слабоумию, депрессии, расстройству внимания, сексуальной дисфункции, нарушению движения, шизофрении или поведению, подобному шизофрении. Расстройство памяти и способности к обучению, которые поддаются лечению согласно настоящему изобретению, включают те нарушения, которые являются следствием старения, травмы, удара и нейродегенеративных нарушений. Примеры нейродегенеративных нарушений включают, но не ограничены теми, которые вызываются лекарственными препаратами, нейротоксическими агентами, болезнью Альцгеймера и старением. Эти состояния могут сразу распознавать и диагностировать специалитсы в данной области техники и проводить лечение путем введения пациенту эффективного количества одного или более соединений согласно настоящему изобретению.

Согласно настоящему изобретению способ лечения нуждающегося в лечении субъекта включает введение в фармацевтически приемлемом носителе эффективного количества соединения формулы

где

Β' обозначает водород, алкил или вместе с О может быть кольцом циклоалкила,

Β² может отсутствовать или, если присутствует, может быть -СН₂-, -СО-, -СН₂СН₂-, -СН₂СО-, -СН₂О-, -ΟΒΒ'- или -ΟΟΝΒ-,

Υ обозначает водород или -ΟΒ³ или служит для связывания ароматического кольца с А как единственной связью, =Ν- или -ΝΒ-,

Β³ обозначает водород, алкил, замещенный алкил, или низший алкилен, например метилен или этилен, или замещенный низший алкилен, например -ΟΒΒ'-, соединяющий ароматическое кольцо с А для

- 6 011034 образования замещенного или незамещенного 5-, 6- или 7-членного кольца, или связь, соединяющую ароматическое кольцо с А для образования 5- или 6-членного кольца,

А обозначает -ΝΚΚ', -ОК, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, арил, замещенный арил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, например кислород, азот или серу;

К обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил,

К' обозначает водород, арил, арилкалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или может быть присоединен к К для образования 4-8-членного кольца, которое может замещаться К или X или связываться с Υ через К³ и которое может произвольно содержать 1 или 2 гетероатома, например кислород, азот или серу,

X и X' независимо обозначают К, гало, -СО₂К, -ИКК/, -МКСОК', -ΝΟ₂, -Ν₃ или -ОК.

Как указано выше, лечение субъекта способом согласно изобретению способствует усилению активности АМРА-рецепторов, и поэтому его можно применять для облегчения изучения зависимости различных видов поведения от АМРА-рецепторов и проводить лечение таких заболеваний, как расстройство памяти, при котором снижено количество или эффективность АМРА-рецепторов, или синапсов, использующих эти рецепторы. Способ также используют для усиления эксцитатной синаптической активности для восстановления дисбаланса между мозговыми подобластями, который может проявиться при шизофрении, или подобном шизофрении поведении, или другом вышеописанном поведении. Обнаружено, что соединения, вводимые в соответствии с настоящим способом, являются более эффективными, чем ранее описанные соединения, в усилении эффективности АМРА-рецептора, как показано в ίη νίίτο и ίη νίνο описанных ниже тестах.

IV. Биологическая активность.

А. Усиление функции АМРА-рецепторов.

Согласно способу по настоящему изобретению синаптические ответы, опосредованные АМРА-рецепторами, усиливаются при использовании описанных здесь соединений. Эти соединения представлены в следующих ниже примерах и являются значительно более сильнодействующими, чем ранее описанные соединения в усилении опосредованных АМРА токов в здоровых клетках в культурах нейронов и функции АМРА-рецептора в срезах гиппокампа крысы. Тесты ίη νίίτο описаны далее, а также ниже в примере 64.

Известно, что область ЭПСП (эксцитатного постсинаптического потенциала), зарегистрированная в области СА1 после возбуждения СА3 аксонов, обычно опосредуется АМРА-рецепторами, которые присутствуют в синапсах (Кекк1ег е1 а1., Вгаш Кек. 560: 337-341 (1991)). Лекарственные препараты, которые избирательно блокируют рецептор, избирательно блокируют область ЭПСП (Ми11ег е1 а1., 8с1епсе, выше). Анирацетам, который, как обнаружено, повышает среднее время открытия канала АМРА-рецептора, также увеличивает амплитуду синаптического тока и продлевает его продолжительность (Тапд е1 а1., 8с1епсе, выше). Эти эффекты отображены в области ЭПСП (см., например, 81аиЬй е1 а1., РкусйоЬю1оду, выше; Х1ао е1 а1., Нрросатрик, выше; 81аиЬй е1 а1., Шрросатрик 2: 4958 (1992)). Сообщается, что подобные результаты получены для ранее описанных стабильных бензамидных аналогов анирацетама (Ьупсй апй Кодегк, международная публикация РСТ № 94/02475).

Для получения данных, показанных в табл. 1, биполярный нихромный стимулирующий электрод помещали в древовидный слой (МгаШт гай1а1ит) гиппокампальной подобласти СА1 близко к границе подобласти СА3, как описано в примере 64. Импульсы тока (0,1 мс) через стимулирующий электрод активизировали популяцию комиссурального волокна Шаффера, которая возникает из нейронов в подотделе СА3 и заканчивается в синапсах на дендритах СА1 нейронов. Активация этих синапсов заставляет их высвобождать глутамат медиатора. Глутамат связывается с постсинаптическими АМРА-рецепторами, которые затем временно открывают связанный с ионами канал и позволяют току натрия входить в постсинаптическую клетку. Этот ток создает разность потенциалов во внеклеточном пространстве (область ЭПСП), которую регистрируют с помощью записывающего электрода высокого сопротивления, помещенного в середине к1га1ит гаШаШт СА1.

Интенсивность тока возбуждения регулировали для получения полумаксимальных ЭПСП (как правило, приблизительно 1,5-2,0 мВ). Парные импульсы возбуждения подавали каждые 40 с с межпульсным интервалом в 200 мс, как описано далее в примере 64.

Срезы гиппокампа сохраняли в регистрирующей камере, непрерывно перфузируемой искусственной цереброспинальной жидкостью (ИЦСЖ). В течение 15-30-минутных интервалов перфузионную среду переключали на другую среду, содержащую тестируемые соединения различной концентрации. Ответы, собранные сразу до перфузии лекарственного препарата и в конце, накладывали для вычисления процента увеличения в амплитуде ЭПСП.

Соединение 1А согласно изобретению (самый активный изомер продукта по примеру 1, как показано на прилагаемой фигуре) и эталонное соединение СХ516, описанное в патенте США № 5747492, были протестированы в системе физиологического тестирования, описанной выше. Первая колонка данных табл. 1, ниже, показывает оценку концентрации каждого тестируемого соединения, которое должно было бы потребоваться для увеличения амплитуды области ЭПСП до значения 10% выше основного уровня.

- 7 011034

Таблица 1

Соединение №	Атр¹ (мкм)	ЕС _2х ² (мкм)	МЭД с³ (мг/кг)
СХ516*	80	830	12.5
Пример 1А	0.3	0.12	0.05 ‘

*Пример № XIII из патента США № 5747492.

¹ Концентрация соединения, вызывающая 10% увеличение амплитуды области ЭПСП в области СА1 среза гиппокампа крысы.

концентрация соединения, вызывающая, по меньшей мере, удвоение стационарного тока, индуцированного в корковых нейронах в первичной культуре с помощью 300 мкМ глутамата.

^Минимальная эффективная доза (МЭД), приводящая к статистически существенному улучшению работы в лабиринте с 8 ответвлениями для повышения познания/памяти.

‘Для этого теста использовали нерастворенный продукт по примеру I.

ХЭ=Не определено.

Как свидетельствуют данные в табл. 1, соединение согласно настоящему изобретению способствует увеличению амплитуды 1ЭПСП в гиппокампе и эффективно при таких низких концентрациях, как 0,3 мкМ. Эффективность настоящего соединения для клеточных токов, опосредованных АМРА-рецепторами, также оценивали в первичной культуре нейронов, в которых концентрации, сниженные до 0,12 мкМ, вызывали удвоение стационарного тока в культурах нейронов, генерируемого при помощи 500 мкМ глутамата. Большинство тестируемых соединений показывали одинаковую либо большую эффективность в усилении функции АМРА-рецептора по сравнению с эталонными соединениями, СХ516 и СХ559, в котором бензоксазин замещен гетероатомом, как показано в табл. 2.

Таблица 2

ПРИМЕР	АМР¹ (мкМ)	ЕС 2х² (мкМ)
СХ516*	80	830
СХ559 **	300	> 10
1А¹	0.3	0.12
1В“	30	> 10
2	>10	2.6
5	10	2
6	100	1.4
11	1	0.09
18	100	4
21	10	1.8
22	10	0.2
27	10	1
28	10	6
38	30	15
46	3	2. 4

‘Концентрация модулятора, который увеличивает амплитуду 1ЭПСП на 10%.

²Концентрация модулятора, необходимого для удвоения устойчивого уровня потока, индуцированного 300 мкМ глутамата на культуральных нейронах.

*Пример № XIII патента США № 5747492.

**Пример № 4 Патента США №5962447 (показан на прилагаемой фигуре).

‘Более активный энантиомер примера 1.

‘‘Менее активный энантиомер примера 1.

- 8 011034

Исследования, в которых сравнивали воздействие АМРА модуляторов на моносинаптический (как описано здесь) и полисинаптический ответы, продемонстрировали, что 10% увеличение амплитуды моносинаптического поля ЭПСП давало 300% увеличение на трисинаптических ответах (8сгу10 с! а1., №иго5с1спсс 74: 1025-1035 (1996)). Кроме того, обнаружено, что концентрация модулятора, который вызывал эти ответы, присутствует в плазме, начиная с поведенчески релевантных доз ((Сгапдсг с! а1., 8упар§с, выше). Таким образом, концентрация сединения, достаточного для получения 10% увеличения амплитуды моносинаптического поля ЭПСП, как показано в табл. 1 и 2, вероятно, представляет собой поведенчески релевантную плазменную концентрацию.

В. Поведенческое тестирование.

Соединения согласно изобретению являются эффективными при поведенческом тестировании релевантных животных, при лечении различных заболеваний, таких как шизофрения, а также в моделях когнитивной работы, например деятельности в радиальном лабиринте с 8 ответвлениями.

Третья колонка данных показывает МЭД для получения эффективного улучшения выполнения задачи с радиальным лабиринтом с 8 ветвями, в которой тестируется улучшение памяти и познания (МЭД_С). Эта задача была описана ранее (81аиЫ1 с! а1., ΡΝΑ8 91: 777-781 (1994), а также Ьупсй апй Яодсгх. РСТ публикация международной заявки \УО94/02475). В этом тесте соединение по примеру 1 действовало в 250 раз сильнее, чем СХ516.

V. Введение, дозировки и составление композиций.

Как отмечено выше, соединения и способ согласно изобретению повышают опосредованные АМРАрецептором ответы и применяются для лечения гипоглутаматергических состояний. Их также применяют для лечения таких нарушений, как ухудшение памяти или других познавательных функций, вызванных дефицитом количества или интенсивности эксцитатных синапсов или количества АМРА-рецепторов. Их также можно использовать для лечения шизофрении или поведения, подобного шизофрении, вызываемого кортикально/стриарным дисбалансом, а также для облегчения изучения поведения, зависимого от АМРА-рецепторов.

У субъектов, которых подвергают лечению настоящими соединениями, фармацевтическими составами и способом согласно изобретению, может быть повреждена память или другие познавательные функции либо может возникнуть кортикально/стриарный дисбаланс, приводящий к потере памяти, слабоумию, депрессии, нарушениям внимания, сексуальной дисфункции, нарушениям движения, шизофрении или подобному шизофрении поведению. Нарушения памяти и нарушения поведения, которые поддаются лечению согласно настоящему изобретению, включают нарушения, являющиеся последствием старения, травмы, удара и нейродегенеративных расстройств. Примеры нейродегенеративных рассройств включают, но не ограничиваются, состояниями, вызываемыми лекарственными препаратами, нейротоксическими агентами, болезнью Алцгеймера и старением. Эти состояния сразу распознают и диагностируют специалисты в данной области техники и проводят лечение путем введения пациенту эффективного количества одного или более соединений согласно настоящему изобретению.

В целом, дозировки и способы введения настоящего соединения определяются в зависимости от размера субъекта и его состояния согласно стандартным фармацевтическим методам. Используемые уровни доз могут широко варьироваться и могут быть легко определены специалистами в данной области техники. Как правило, используются количества, измеряемые от миллиграммов до граммов. Соединения можно вводить субъекту различными способами, т.е. перорально, трансдермально, периневрально или парентерально, то есть путем внутривенной, подкожной, внутрибрюшинной или внутримышечной инъекции, также включая трансбуккальное, ректальное и трансдермальное введение. Субъекты, подлежащие лечению способом согласно изобретению, включают людей, домашних животных, лабораторных животных и т. п.

Композиции, содержащие соединения согласно настоящему изобретению, могут иметь форму твердого вещества, полутвердого вещества, лиофилизированного порошка или жидких форм дозировки, такую как, например, таблетки, капсулы, порошки, композиции с задержанным высвобождением, растворы, суспензии, эмульсии, суппозитории, кремы, мази, лосьоны, аэрозоли, бляшки или т.п., предпочтительно в формах единиц дозировки, приемлемых для простого введения точных дозировок.

Фармацевтические соединения согласно настоящему изобретению, как правило, включают обычный фармацевтический носитель или наполнитель и могут дополнительно включать другие лекарственные средства, например носители, адъюванты, добавки и т.п. Предпочтительно соединение должно составлять приблизительно от 0,5 до 75 вес.% соединения или соединений согласно изобретению с остатком, состоящим, в основном, из приемлемых фармацевтических наполнителей. Для перорального введения такие наполнители включают фармацевтически чистые маннит, лактозу, крахмал, стеарат магния, сахарин натрия, тальк, целлюлозу, глюкозу, желатин, сахароз, карбонат магния и т.п. По желанию, композиция может также содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачивающие вещества, эмульгирующие вещества, или буферы.

Жидкие композиции можно получать растворением или диспергированием соединений (приблизительно от 0,5 до 20 вес.% или более) и дополнительных фармацевтических адъювантов в носителе, таком как, например, водный соляной раствор, водная декстроза, глицерин или этанол, для получения раствора или суспензии. Для применения в пероральном жидком лекарственном средстве композицию можно получать в виде раствора, суспензии, эмульсии или сиропа, поставляемого как в жидкой, так и в сухой

- 9 011034 форме, подходящей для гидратации в водном или нормальном соляном растворе.

Когда соединение используется в форме твердых препаратов для перорального введения, препараты могут быть таблетками, гранулами, порошками, капсулами или т.п. Для состава таблетки композицию обычно изготавливают с добавками, т.е. такими наполнителями, как препараты сахаридов или целлюлозы, связующим веществом, например пастой крахмала или метилцеллюлозой, наполнителем, дизинтегратором, и другими добавками, обычно используемыми при изготовлении медицинских препаратов.

Композиция для инъекции для парентерального введения, как правило, содержит соединение в виде приемлемого внутривенного раствора, например стерильного физиологического раствора соли. Композицию можно также получать в виде суспензии в липидной или фосфолипидной, в липосомальной суспензии либо в водной эмульсии.

Способы получения подобных форм дозировки известны или очевидны специалистам в данной области техники; например, см. ЯетшДоп'к Рйагтасеибса1 8с1епсек (17(Н Еб., Маск РиЬ. Со, 1985). Вводимая композиция будет содержать выбранное соединение в фармацевтически эффективном количестве для получения у субъекта повышенных токов АМРА-рецепторов.

Следующие далее примеры иллюстрируют, но никоим образом не ограничивают изобретение. Если не указано иначе, все температуры приводятся в градусах Цельсия. Если не указано иначе, все спектры ЯМР представляют спектры ¹Н ЯМР и получены в дейтерохлороформе или дейтеризованном диметилсульфоксиде при использовании в качестве растворителя тетраметилсилана как внутренний стандарт. Инфракрасные (ΙΚ.) спектры были зарегистрированы как тонкие пленки на кристалле Френеля, на ЫаС1 кристаллах или в КВг грануле в ΑΤΙ Майкоп Сеш1ш в серии ΕΤΙΚ.. Все названия соединений соответствуют ГОРАС классификации, как предусмотрено программным обеспечением Сйеш1к!гу 4-Ό Эппс™ РгоЗ.0 Сйет1ппоуайоп 8оП\саге. 1пс.

Пример 1. (К,8),(К,8)-3аН,9аН-Пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,1-2',3'](1,3-оксазино)[5',6'-2,1] бензо[4,5-е]-1,3-оксапергидроин-6,12-дион.

о

Метод А.

2,5-Дигидрокситерефталевую кислоту (3,75 г, 18,9 ммоль) добавляли к раствору карбонилдиимидазола (6,20 г, 38,2 ммоль) в 50 мл безводного диметилформамида. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, в течение этого времени добавляли 4-аминобутиральдегид диэтилацеталь (6,30 г, 39,0 ммоль). Раствор дополнительно перемешивали в течение 24 ч при комнатной температуре и затем быстро нагревали до 80°С. Растворитель удаляли вакуумной дистилляцией и остаток очищали флэш-хроматографией (гексан:этилацетат 2:1) на силикагеле для получения 4,0 г сырого бис-ацеталь/амида. Промежуточный продукт растворяли в 125 мл метиленхлорида, к которому добавляли 2,0 мл трифторуксусной кислоты кислота, 20 мг камфорсульфоновой кислоты и активизированные 4 А молекулярные сита. Как показала тонкослойная хроматография, реакция быстро завершилась. Неочищенный продукт хроматографировали на силикагеле (гексан:этилацетат 95:5) для получения 1,9 г твердого вещества, которое растворяли в метиленхлориде (250 мл) и фильтровали. Концентрированный раствор 50 мл растворяли с диэтиловым эфиром, стимулирующим кристаллизацию. Раствор охлаждали до 0°С и собирали фильтрацией 1,06 г (19%) белого твердого вещества. Т.пл.=270-271°С. ΙΚ.: 2977, 2880, 1667, 1453, 1422, 1335, 1181, 1073 и 780 см^-1. ^!Н ЯМР (500 МГц) δ 7,55 (1Н, к) 7,53 (1Н, к), 5,47 (2Н, т) 3,86 (2Н, т), 3,62 (2Н, т), 2,44 (2Н, т), 2,27 (2Н, т), 2,12 (2Н, т) и 1,96 ррт (2Н, т).

Метод В.

Диэтил 2,5-дигидрокситерефталат (500 мг, 1,97 ммоль) и 4-аминобутилальдегид диэтилацеталь (>90%) (1,30 г, >7,2 ммоль) комбинировали и нагревали с флегмой в течение 90 с. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и затем растворяли 10 мл СН₂С1₂. Трифторуксусную кислоту (2,0 мл) и 5 А молекулярные сита добавляли к реакционной смеси, которые быстро нагревали с флегмой и оставляли в течение 2 ч. Эту смесь концентрировали на силикагеле при пониженном давлении и элюировали с этилацетатом. Фракции концентрировали при пониженном давлении для получения 420 мг (71%) продукта в виде белого твердого вещества с физическими и спектроскопическими характеристиками, в основном, идентичными описанным для продукта, полученного методом А, выше.

Пример 2. (К,8),(К,8)-3аН,6аН-Пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,1-3',2'](1,3-оксазино)[6',5'-2,1] бензо[4,5-е]-1,3-оксапергидроин- 10,12-дион.

К горячей (40°С) суспензии 2, 4-дигидроксиизофталевой кислоты (500 мг, 2,5 ммоль) в растворе 8ОС1₂ (8,0 мл, 100 ммоль) и 2 мл сухого СНС1₃ добавляли 3 капли ΌΜΕ. Реакционную смесь нагревали в

- 10 011034 течение 1,5 ч, в течение этого времени она становилась прозрачной. Раствор концентрировали при пониженном давлении, растворяли с СН₂С1₂ и переконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в 10 мл сухого СНС1₃, к которому добавляли по каплям 4-аминобутиральдегид диэтилацеталь (1,00 г, 6,2 ммоль). После охлаждения раствора до 0°С к смеси добавляли 2,0 мл триэтиламина, который оставляли нагреваться до температуры окружающей среды. Через 1 ч раствор разбавляли СН₂С1₂, промывали последовательно 10% НС1, насыщенным №1НСО₃. насыщенным №1С1 и затем высушивали над Ыа₂8О₄. Полученное масло концентрировали при пониженном давлении и повторно растворяли в 10 мл сухого СНС1₃, к которому добавляли 30 мг камфорсульфоновой кислоты. Реакционную смесь перемешивали в течение 12 ч и затем концентрировали на силикагеле при пониженном давлении. После элюирования с Е1ОАс/МеОН (99:1) получили 270 мг (36%) белого прозрачного порошка со следующими свойствами. Т.пл.=248-252°С. Ж: 1673, 1432, 1356 и 1138 см^-1. Ή ЯМР (500 МГц) δ 8,58 (0,5Н, 8), 8,52 (0,5Н, 8), 6,51 (1Н, т), 5,50 (2Н, т) 3,80-3,85 (2Н, т), 3,60-3,65 (2Н, т), 2,40-2,45 (2Н, т), 2,20- 2,30 (2Н, т), 2,052,15 (2Н, т) и 1,90-2,00 ррт (2Н, т).

Пример 3. (В,8)-Метил-9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазапергидроин-6-карбоксилат.

Триметилалюминий (2,0 мл 2М толуола, 4,0 ммоль) добавляли к раствору 810 мг диметилгидрокситерефталата (3,85 ммоль) в 15 мл сухого СНС1₃, который перемешивали в течение 20 мин. Добавляли 4аминобутиральдегид диэтилацеталь (750 мг, 4,65 ммоль), и реакционную смесь нагревали с флегмой в течение 6 ч. Трифторуксусную кислоту (2,0 мл) и 5 А молекулярные сита добавляли к охлажденному раствору, который быстро нагревали с флегмой и выдерживали в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали на силикагеле при пониженном давлении и элюировали с гексан/Е1ОАс (1:1) с получением 387 мг указанного бензоксазина в виде белого твердого вещества. Т.пл.=76-78°С. Ш: 1725, 1672, 1439, 1291, 1212 и 1088 см^-1. '11 ЯМР (200 МГц) δ 8,01 (1Н, 6, 1=8,0 Гц), 7,77 (1Н, 66, 1=8,0, 1,5 Гц), 7,64 (1Н, 6, 1=1,5 Гц), 5,3 (1Н, 1, 1=5,7 Гц), 3,94 (3Н, 8), 3,80-3,92 (3Н, т) и 1,80-2,60 ррт (3Н, т).

Пример 4. (В,8)-Метил-9-оксо-3аН-бензо[3,4-е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксапергидроин-7-карбоксилат.

Диметил 4-гидроксиизофталат (1,00 г, 4,8 ммоль) и 4-аминобутиральдегид диэтилацеталь (1,60 г, 10 ммоль) комбинировали и нагревали с флегмой в течение 90 с. Смесь охлаждали до температуры окружающей среды и растворяли в 10 мл СНС1₃. К раствору добавляли трифторуксусную кислоту (1,0 мл) и 5 А молекулярные сита, которые перемешивали в течение 2 ч. После концентрации на силикагеле при пониженном давлении и элюировании с гексан/ЕЮАс (2:1) получили 500 мг (42%) белого твердого вещества. Т.пл.=164166°С. !К: 1711, 1669, 1615, 1445 и 1285 см^-1. Ή ЯМР (200 МГц) δ 8,62 (1Н, 6, 1=2,2 Гц), 8,12 (1Н, 66, 1=8,7 и 2,2 Гц), 7,02 (1Н, 6, 1=8,6 Гц), 5,55 (1Н, 1, 1=5,66 Гц), 3,92 (3Н, 8), 3,50-3,90 (3Н, т) и 1,80-2,60 ррт (3Н, т).

Пример 5. (В,8)-6-(Пиперидилкарбонил)-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксапергидроин-9-он.

(В,8)-Метил-9-оксо-3аН-бензо [е]пирролидино [2,1-Ь]-1,3-оксазапергидроин-6-карбоксилат (пример 3, выше) (387 мг, 1,56 ммоль) растворяли в 10 мл сухого СНС1₃, к которому добавляли триметилалюминий (2,0 мл 2М в толуоле, 4,0 ммоль), затем 400 мг пиперидина (4,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали с флегмой в течение 3 ч, охлаждали до температуры окружающей среды и гасили уксусной кислотой. После концентрации на силикагеле при пониженном давлении и элюировании с Е1ОАс/МеОН (99:1) получили 300 мг белого прозрачного твердого вещества. Т.пл.=149-151°С. ΙΒ: 1670, 1632 и 1440 см^-1. 'Н ЯМР (200 МГц) δ 7,96 (1Н, 6, 1=7,9 Гц), 7,12 (1Н, 6, 1=7,9 Гц), 7,00 (1Н, 8), 5,51 (1Н, 1, 1=5,6 Гц), 3,50-4,00 (4Н, т), 3,15-3,40 (2Н, т), 1,80-2,60 (4Н, т) и 1,40-1,60 ррт (6Н, т).

Пример 6. (В,8)-6а-Гидро-3аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2',1'3]хиназолино[7,6-е]-1,3-оксазапергидроин-6,12-дион.

о

- 11 011034

Гидрокситерефталевую кислоту (4,0 г, 22 ммоль) растворяли в 200 мл тетрагидрофурана, к которому добавляли избыток диазометана в диэтиловом эфире. Реакционную смесь гасили уксусной кислотой, растворяли СН₂С1₂, концентрировали на силикагеле при пониженном давлении и элюировали гексаном/ЕЮАс (4:1) с получением 4,40 г продукта в виде воскового твердого вещества. Т.пл.=69-75°С. ΙΒ: 1720, 1678, 1436, 1319, 1212 и 1109 см^-1.

Диметилгидрокситерефталат (3,00 г, 14,3 ммоль) охлаждали до 5°С и перемешивали с 7 мл кипящей азотной кислоты в течение 40 мин. Реакционную смесь наливали на лед и экстрагировали с этилацетатом. Органический слой промывали рН 7 фосфатным буфером, насыщенным ЫаС1 и высушивали над безводным Ыа₂8О₄. Растворитель удаляли при пониженном давлении для получения 3,0 г неочищенного диметил-2-гидрокси-4-нитротерефталата. ΙΚ: 1739, 1688, 1549, 1442, 1338 и 1254 см^-1.

Диметил-2-гидрокси-4-нитротерефталат (3,0 г, 11,8 ммоль) восстанавливали в 25 мл МеОН в бутыли гидрирования Парра при 90 мг 10% Рб-С под водородом (70 фунтов на кв.дюйм) в течение 3 ч. Катализатор удаляли фильтрацией и раствор концентрировали на силикагеле при пониженном давлении. После элюирования с гексаном/ЕЮАс (2:1) получали 1,20 г диметил 2-амино-4-гидрокситерефталата в виде желтого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки.

РОС13 (0,95 г, 6,2 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 2-пирролидинона (1,00 г, 11,8 ммоль) в 10 мл сухого бензола. Через 2 ч добавляли 1,20 г диметил 2-амино-4-гидрокситерефталата (5,3 ммоль) и смесь нагревали с флегмой в течение 5 ч. Реакционную смесь растворяли с СН2С12, промывали насыщенным ЫаНСОз и концентрировали при пониженном давлении на силикагеле. После элюирования с ЕЮАс/МеОН (99:1) получали 537 мг 9-карбоксиметил-8-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-пирроло[2,1-Ь][1,3]хиназолин-6-она в виде белого вещества. ΙΚ: 1691, 1678, 1471, 1440 и 1249 см^-1. 'Н ЯМР (200 МГц) δ 10,60 (1Н, 8), 8,21 (1Н, 8), 7,80 (1Н, δ), 4,19 (2Н, ΐ, 1=7,2 Гц), 4,02 (3Н, δ), 3,15 (2Н, ΐ, 1=7,9 Гц) и 2,20-2,40 ррт (2Н, т).

9-Карбоксиметил-8-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-пирроло[2,1-Ь][1,3]хиназолин-6-он (530 мг, 2,0 ммоль) и 4-аминобутиральдегид диэтилацеталь (1,00 г, 6,2 ммоль) комбинировали и нагревали с флегмой в течение 90 с. Охлажденную реакционную смесь растворяли с СН₂С1₂, к которому добавляли 2,0 мл трифторуксусной кислоты и 5 А молекулярные сита. Смесь перемешивали в течение 1 ч, концентрировали на силикагеле при пониженном давлении и элюировали с Е1ОАс/МеОН (90:10). В результате обесцвечивания раствора древесным углем в СНС13/МеОН и удаления растворителей при пониженном давлении получали 600 мг продукта (99%) в виде белого вещества. Т.пл.=245-250°С. ΙΒ: 1681, 1660, 1464, 1209 и 1137 см^-1. 'Н ЯМР (200 МГц) δ 8,21 (1Н, δ), 7,80 (1Н, δ), 5,58 (1Н, ΐ, 1=5,8 Гц), 4,20 (2Н, ΐ, 1=7,3 Гц), 3,75-3,95 (1Н, т), 3,55-3,70 (1Н, т), 3,19 (2Н, ΐ, 1=8,0 Гц) и 1,90-2,60 ррт (6Н, т).

Пример 7. (К,8)-Этил 7-гидрокси-9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-карбоксилат.

О

Диэтил 2,5-дигидрокситерефталат (7,00 г, 27,5 ммоль) и 4-аминобутиральдегид диэтилацеталя (7,00 г,

43,4 ммоль) помещали в большую пробирку и обезвоживали в течение 5 мин. Реакционную смесь наливали в разделительную воронку и полностью перемешивали с 800 мл ЕЮАс и 100 мл 6Н НС1. Через 30 мин органический слой высушивали над №ь8О₄ и растворитель выпаривали до получения желтого масла, которое очищали на силикагеле до получения 4,90 г (64%) бесцветных, пушистых кристаллов указанного соединения. Т.пл.=139-141°С. ΙΒ: 1676, 1454, 1240 и 1200 см^-1. '11 ЯМР (200 МГц) δ 10,48 (1Н, δ), 7,54 (1Н, δ), 7,47 (1Н, δ), 5,46 (1Н, ΐ, 1=5,6 Гц), 4,42 (2Н, φ 1=7,2 Гц), 3,75-3,95 (1Н, т), 3,50-3,70 (1Н, т), 1,802,60 (4Н, т) и 1,42 ррт (3Н, ΐ, 1=7,2 Гц).

Пример 8. (К,8)-7-(Пиперидилкарбонил)-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазапергидроин-9-он.

Триметилалюминий (1,1 мл 2М в толуоле, 2,2 ммоль) и 400 мг пиперидина (4,7 ммоль) добавляли к раствору 500 мг метил 9-оксо-3аН-бензо[3,4-е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-7-карбоксилата (2,0 ммоль) в 10 мл сухого СНС13. Реакционную смесь нагревали с флегмой в течение 4 ч, охлаждали до температуры окружающей среды и гасили уксусной кислотой. Смесь концентрировали на силикагеле при пониженном давлении и элюировали с гексаном/ЕЮАс (1:1) для получения 537 мг (90%) белого твердого вещества. Т.пл.=134-136°С. ΙΒ: 1673, 1626, 1434 и 1255 см^-1. '11 ЯМР (200 МГц) δ 7,96 (1Н, б, 1=2,0 Гц), 7,53 (1Н, бб, 1=8,4, 2,2 Гц), 7,00 (1Н, б, 1=8,4 Гц), 5,52 (1Н, ΐ, 1=5,7 Гц), 3,20-4,00 (6Н, т) и 1,40-2,60 ррт (10Н, т).

- 12 011034

Пример 9. (К,8)-(7-Метокси-9-оксо(3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-ил))-Ы,М-диметилкарбоксамид.

К 1,6 г (5 ммоль) диметиламингидрохлорида в 60 мл сухого СН₂С1₂ добавляли 10 мл 2,0М А1Ме₃ в толуоле при перемешивании под Аг. Затем добавляли 5 ммоль (1,4 г) эфира по примеру 7 в 40 мл СН₂С1₂и дефлегмировали в течение 0,5 ч, в течение этого времени СН₂С1₂ дистиллировали и замещали 40 мл сухого толуола. После дефлегмирования в течение другого часа реакционную смесь смешивали с 50 мл 3М НС1. После отделения слоев водный слой экстрагировали с 3x50 мл СН₂С1₂. Объединенные органические слои высушивали над Ыа8О₄ и растворитель удаляли в вакууме для получения 810 мг фенолического амида (58% выхода). ГК.: 1652 см^-1. С.Ч-М8 277,2 ати (М+Н). К продукту амида, полученному выше, (810 мг, 2,9 ммоль) в 40 мл безводного диметилформамида под аргоном сразу добавляли 174 мг (4,35 ммоль) 60% №1Н при хорошем перемешивании. Через 10 мин при комнатной температуре температуру ванны повышали до 65°С и сразу добавляли 0,25 мл ΜΕΊ (11,6 ммоль). Через 2 ч реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и гасили 5 мл воды. Воду и диметилформамид затем удаляли под вакуумом и остаток хроматографировали на 150 г силикагеля с ЕЮАс. Объединенные фракции дали 600 мг (71%). I.: 1666 и 1620 см^-1. СГМ8 291.2 (М+Н). '11 ЯМР (500 МГц) δ 7,43 (1Н, 8), 6,88 (1Н, δ), 5,49 (1Н, т), 3,86 (3Н, 8), 3,84 (1Н, т), 3,68 (1Н, т), 3,11 (3Н, 8), 2,84 (3Н, 8), 2,49 (1Н, т), 2,24 (1Н, т), 2,16 (1Н, т) и 1,95 ррт (1Н, т).

Пример 10. (К,8)-Ы-(2-Гидроксиэтил)(7-гидрокси-9-оксо(3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазапергидроин-6-ил))карбоксамид.

Этил 7-гидрокси-9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-карбоксилат (пример 7 выше) (1,20 г, 4,83 ммоль) и этаноламин (1,00 г, 16,3 ммоль) комбинировали и нагревали с флегмой в течение 90 с. Охлажденную реакционную смесь разбавляли СНС13, окисляли уксусной кислотой и концентрировали на силикагеле при пониженном давлении. После элюирования с СН₂С1₂/МеОН (95:5) получали

1,50 г гидроксиэтиламида в виде воскового твердого вещества. Ш.: 3000-3500, 1650, 1562, 1470, 1344, 1264, 1211 и 1066 см^-1.

Пример 11. (К,8),(К,8)-2Н,3Н,12аН,6аН-1,3-Оксазолидино[2,3-Ь]пирролидино[2,1-2',3'](1,3-оксазино)[5',6'-2,1]бензо[4,5-е]-1,3-оксапергидроин-4,10-дион.

М-(2-Гидроксиэтил)(7-гидрокси-9-оксо(3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазапергидроин-6-ил)) карбоксамид (продукт из примера 10) (1,50 г, 5,13 ммоль) суспендировали в 20 мл сухого СНС13 вместе с

4,6 мл триметилортоформата (43 ммоль) и 1,0 мл 96% муравьиной кислоты (21 ммоль) и нагревавали с флегмой в течение 6 ч. Охлажденную реакционную смесь нейтрализовали карбонатом калия и концентрировали на силикагеле при пониженном давлении. После элюирования с гексаном/ЕЮАс (1:1) и перекристаллизации из этилацетата получали 430 мг белого вещества. Т.пл.=285-287°С. I.: 1675, 1458 и 1421 см^-1. '|| ЯМР (200 МГц) δ 7,66 (0,5Н, 8), 7,64 (0,5Н, 8), 7,54 (0,5Н, 8), 7,51 (0,5Н, 8), 6,22 (0,5Н, 8), 6,21 (0,5Н, 8), 5,45-5,53 (1Н, т), 4,20-4,40 (3Н, т), 3,75-3,95 (1Н, т), 3,55-3,70 (2Н, т) и 1,90-2,58 ррт (4Н, т).

Пример 12. (К,8),(К,8)-2Н,3Н,8Н,9Н,12аН,6аН-1,3-Оксазолидино[2,3-Ь]-1,3-оксазолидино[2'',3''-2',3'] (1,3-оксазино)[5',6'-2,1]бензо[4,5-е]-1,3-оксапергидроин-4,10-дион.

Диэтил 2,5-дигидрокситерефталат и этаноламин смешивали и нагревали с флегмой в течение 90 ч.

- 13 011034

Охлажденную смесь растворяли с хлороформом, метанолом и уксусной кислотой и концентрировали на силикагеле при пониженном давлении. Элюирование с СН₂С1₂/МеОН (90:10) дало 1,20 г неочищенного бис-амида. Неочищенный амид суспендировали в 20 мл сухого СНС1₃ вместе с 4,6 мл триметилортоформиата (43 ммоль) и 1,0 мл 96% муравьиной кислоты (21 ммоль) и дефлегмировали в течение 6 ч. Охлажденную смесь нейтрализовывали с карбонатом калия и концентрировали на силикагеле при пониженном давлении. Продукт элюировали и кристаллизовали из этилацетата для получения 88 мг белого порошка (3,5%). Т.пл.=305-306°С. ΙΚ: 1675, 1458 и 1421 см^-1. ^!Н ЯМР (200 МГц) δ 7,62 (0,5Н, к), 7,60 (0,5Н, к), 6,24 (0,5Н, к), 6,23 (0,5Н, к), 4,20-4,42 (6Н, т) и 3,50-3,70 ррт (2Н, т).

Пример 13. (К,8),(К,8)-11аН,4аН-Пиперидино[2,1-Ь]пиперидино[2,1-2,3'](1,3-оксапергидроино) [5',6'-4,5]бензо [е]-1,3-оксазин-7,14-дион.

О

Синтез проводили в основном, как в примере 1, метод А, за исключением замены 5-аминопентанал диэтилацеталя на 4-аминобутиральдегид диэтилацеталь. ¹Н ЯМР (200 МГц) δ 7,502 (к), 7,493 (к), 5,19 (2Н, бб, 6=4,18 и 9,6 гц), 4,47 (2Н, бт, 1=14 Гц), 2,78 (2Н, 1т, 1=13 Гц), 2,24 (2Н, т), 1,85 (6Н, т) и 1,51 ррт (4Н, т).

Пример 14. Получение (К,8)-6-(морфолин-4-илкарбонил)-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-9-она.

К раствору метил 9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазапергидроин-6-карбоксилата (соединение примера 3) в 20 мл метанола в колбе Эрленмейера объемом 125 мл добавляли 20 мл 1Ν №ОН. После энергичного перемешивания в течение 30 мин раствор окисляли до рН 2 с 1Ν НС1. Полученный белый преципитат отфильтровывали и промывали 25 мл воды. Это твердое вещество повторно растворяли в этилацетате/метаноле (1/1) и высушивали над безводным №₂8О₄. Раствор концентрировали с получением 703 мг (81%) белого твердого вещества. ΙΚ: 1712 и 1637 см^-1.

К суспензии 9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-карбоновой кислоты (300 мг, 1,29 ммоль) в СН2С12 добавляли 1,1'-карбонилдиимидазол (209 мг, 1,29 ммоль) в колбу с круглым основанием объемом 25 мл. Через 2 ч добавляли морфолин через шприц. Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин и затем промывали 1Ν НС1, насыщенным NаНСΟ₃ и соляным раствором. Затем органический слой высушивали над №₂8О₄, отфильтровывали и концентрировали для получения 375 мг пены. Продукт очищали хроматографией на силикагеле при элюировании с этилацетатом с получением 330 мг серовато-белых кристаллов (85%). Т.пл.= 184-186°С. ΙΚ: 1669 и 1636 см^-1. ¹Н ЯМР δ 7,98 (1Н, б, 1=7,5 Гц), 7,10 (1Н, б, 1=8,9 Гц), 6,99 (1Н, б, 1=1,4 Гц), 5,51 (1Н, 1, 1=6 Гц), 3,85 (1Н, т), 3,78 (4Н, Ьк), 3,60 (1Н, т), 3,60 (2Н, Ьк), 3,40 (2Н, Ьк), 2,45 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,13 (1Н, т) и 1,98 ррт (1Н, т).

Пример 15. Получение (К,8)-6-[(4-Гидроксипиперидил)карбонил]-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-

1,3-оксазин-9-она.

О

К суспензии 9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-карбоновой кислоты (160 мг, 0,689 ммоль) в 2 мл дихлорметана в грушевидной колбе объемом 25 мл добавляли 1,1'-карбонилдиимидазол (112 мг, 0,689 ммоль). Перемешивание проводили при положительном давлении аргона и в течение 1 ч достигали полного растворения. Раствор перемешивали дополнительные 2 ч и затем медленно добавляли к перемешиваемому раствору через шприц 4-гидроксипиперидин (148 мг, 3,44 ммоль) в 5 мл СН₂С1₂. Полученную реакционную смесь промывали 1Ν НС1, насыщенным NаНСΟ₃ и соляным раствором. Органический слой высушивали над безводным Ν₂8Ο₄, отфильтровывали и концентрировали для получения 174 мг белой пены. Пену кристаллизовали из СН₂С1₂/Е1₂О с получением 158 мг белого твердого вещества (72%). Т.пл.= 130-135°С. ΙΚ: 3400, 1657 и 1619 см^-1. ^!Н ЯМР δ 7,96 (1Н, б, 1=7,6 Гц), 7,10 (1Н, б, 1=7,6 Гц), 7,00 (1Н, к), 5,51 (1Н, 1, 1=6,0 Гц), 4,16 (1Н, Ьк), 3,99 (1Н, т), 3,86 (1Н, т), 3,63 (1Н, т), 3,60 (1Н, Ьк), 3,42 (1Н, Ьк), 3,17 (1Н, Ьк), 2,45 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,13 (1Н, т), 2,0 (1Н, Ьк), 1,99 (1Н, т), 1,61

- 14 011034 (2Н, Ь8) и 1,49 ррт (1Н, Ь8).

Пример 16. Получение (В,8)-6-[(4-метилпиперазинил)карбонил]-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3оксазин-9-она.

О

Следуя методике получения соединения по примеру 14, производили замену 1-метилпиперазина на морфолин для получения 378 мг (94%). ΙΒ: 1666 и 1633 см^-1. Ή ЯМР δ 7,97 (1Н, б), 7,10 (1Н, б), 7,00 (1Н, 8), 5,51 (1Н, 1), 3,86 (1Н, т), 3,79 (2Н, Ьб), 3,62 (1Н, т), 3,39 (1Н, Ьб), 2,48 (4Н, т), 2,32 (3Н, 8), 2,25 (2Н, т), 2,13 (1Н, т) и 1,96 ррт (1Н, т).

Пример 17. Получение (В,8)-6-[(4-аминопиперидил)карбонил]-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3оксазин-9-она.

О

Колбу с круглым основанием с 3 горловинами, снабженную термометром, наполняли азидом натрия (3,25 г, 50,0 ммоль) и теплой Н₂О (3,25 мл). Полученную пасту энергично перемешивали по мере добавления 20 мл бензола. Полученный гетерогенный раствор охлаждали до 5°С и затем по каплям добавляли Н₂8О₄ (1,34 мл, 25,0 ммоль). Температуру раствора поддерживали ниже 10°С и перемешивание продолжали в течение дополнительных 5 мин. Органический слой фильтровали в колбе Эрленмейера, высушивали над безводным Ыа80₄ и использовали в следующей реакции.

Диизопропилазодикарбоксилат добавляли через шприц к раствору 4-гидроксипиперидина (2,0 г, 20 ммоль) и трифенилфосфина (6,75 г, 25,7 ммоль) в СН₂С1₂.

Сначала добавляли часть раствора гидразойной кислоты из вышеупомянутого полученного кипящего раствора и поэтому раствор охлаждали в ледяной ванне во время добавления остатка. Перемешивание продолжали в ледяной ванне, которую оставляли нагреваться до температуры окружающей среды. После перемешивания при температуре окружающей среды в течение 16 ч раствор промывали Н2О, далее 1Ν НС1. Кислый раствор промывали Е1₂О/Е1ОАс (2/1), а с помощью 1Н ΝαΟΗ затем получали основной раствор до рН 9. Полученный мутный водный раствор экстрагировали с СН₂С1₂. Органический слой высушивали над №₂8О₊ фильтровали и концентрировали с получением 1,05 г желтого масла (42%). ΙΒ: 2092 см^-1.

Неочищенный продукт использовали без дальнейшей очистки в следующей стадии, которая следовала за процедурой по примеру 14 выше с замещением 4-азидопиперидина для морфолина. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле элюированием с 3/1 гексаном/этилацетатом, получая 304 мг 6-[(4-азидопиперидил)карбонил]-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-9-он в виде пены (73%). ΙΒ: 2095, 1670 и 1636 см^-1.

В колбу Парра объемом 50 мл, предварительно продутую аргоном, добавляли 10% Рб/С (90 мг), затем раствор 304 мг 6-[(4-азидопиперидил)карбонил]-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-9-она (0,891 ммоль) в 5 мл МеОН. Полученный раствор обрабатывали водородом при 25 фунтов на кв. дюйм в течение 2 ч, фильтровали через целит и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с 15/1 СН₂С1₂/МеОН (1% Ν^Ο^ с получением 220 мг чистого продукта. ¹Н ЯМР (500 МГц) δ 7,96 (1Н, б, 1=7,7 Гц), 7,09 (1Н, б, 1=8,5 Гц), 6,99 (1Н, 8), 5,51 (1Н, 1, 1=5,9 Гц), 4,57 (1Н, Ьб), 3,85 (1Н, т), 3,67 (1Н, Ь8), 3,63 (1Н, т), 3,04 (1Н, Ь8), 2,98 (1Н, т), 2,94 (1Н, Ь8), 2,45 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,13 (1Н, т), 1,95 (1Н, т), 1,95 (1Н, Ь8), 1,77 (1Н, Ь8), 1,39 (1Н, Ь8) и 1,26 ррт (1Н, Ь8).

Пример 18. Получение (В,8)-6-[(4-метилпиперидил)карбонил]-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3оксазин-9-она.

О

В колбу с круглым основанием с 2 горловинами объемом 100 мл, снабженную дефлегматором, добавляли этил 9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксапергидроин-6-карбоксилат (343 мг, 1,41 ммоль) и 20 мл СН2С12 под атмосферой аргона. Перемешиваемый раствор наполняли триметилалюминием (1,5 мл, 3,0 ммоль) и через 30 мин добавляли через шприц 4-метилпиперидин (0,19 мл, 2,9 ммоль). После того, как раствор нагревали с флегмой в течение 24 ч и выдерживали при температуре окружающей среды в

- 15 011034 течение дополнительных 72 ч, его гасили Н₂О, затем медленно добавляли 6Ν НС1. Органический слой изолировали, а водный слой экстрагировали тремя 50 мл частями СН₂С1₂, которые комбинировали с органическим слоем и промывали водой, соляным раствором, высушивали над №₂8О₄, отфильтровывали и концентрировали. Полученное масло очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с 1:1 гексаном/ этилацетатом. Чистые фракции концентрировали для получения 323 мг пены (54%) 1В: 1668 и 1625 см^-1. 'Н ЯМР (500 МГц) δ 7,96 (1Н, б, 1=7,5 Гц), 7,09 (1Н, б), 6,99 (1Н, к), 5,51 (1Н, !, 1=6,0 Гц), 4,66 (1Н, Ьб), 3,86 (1Н, т), 3,62 (2Н, т), 2,96 (1Н, Ь!), 2,76 (1Н, Ь!), 2,44 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,12 (1Н, т), 1,94 (1Н, т), 1,77 (1Н, Ьб), 1,65 (2Н, т), 1,22 (1Н, т), 1,08 (1Н, т) и 0,98 ррт (3Н, б, 1=6,3 Гц).

Пример 19. Получение (В,8)-1-[(9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-ил)карбонил]пиперидин-4-карбонитрила.

Следуя методике для получения соединения из примера 14, за исключением замещения 4-цианопиперидина на морфолин, получали 1-[(9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-ил)карбонил]пиперидин-4-карбонитрил в виде белого кристаллического вещества (61%). Т.пл.= 154-156°С. 1В: 1667 и 1633 см^-1. Ή ЯМР δ 7,98 (1Н, б, 1=7,5 Гц), 7,08 (1Н, б, 1=7,4 Гц), 6,98 (1Н, к), 5,52 (1Н, !, 1=5,96 Гц), 3,92 (1Н, Ьк), 3,86 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,14 (1Н, т), 1,96 (1Н, т) и 1,85 ррт (4Н, Ьк).

Пример 20. Получение (В,8),(В,8)-3-(гидроксиметил)-6аН-хромано[7,6-е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3оксазин-4,10-диона.

О

Изоксазолин согласно примеру 18 (570 мг, 2,00 ммоль) растворяли в 100 мл метанола. Добавляли раствор борной кислоты (1,00 г) в 20 мл воды и 1,00 г никеля Ренея и полученную смесь обрабатывали водородом при 1 атм в течение 2 ч при комнатной температуре. Метанол выпаривали и остаток экстрагировали с 200 мл Е!ОАс, который высушивали над №₂8О₄. Выпаривание растворителя дало 420 мг масла, которое очищали на силикагеле элюированием 20% гексана/Е!ОАс. В результате кристаллизации из элюирующего растворителя получили 202 мг кетона в виде желтого твердого вещества. Т.пл.=189-190°С. М8: 290,1 (М⁺¹). 1В: 1667 и 1450 см^-1. Ή ЯМР (500 МГц) δ 7,57 (1Н, к), 7,56 (1Н, к), 7,47, (2Н, к), 5,43-5,46 (2Н, т), 4,39-4,62 (4Н, т), 3,99-4,06 (4Н, т), 3,60-3,88 (4Н, т), 3,00-3,05 (2Н, т) и 1,92-2,47 ррт (8Н, т), подтверждающие структуру соединения.

Пример 21. Получение 3,8-диэтил-2Н,7Н-1,3-оксазапергидроино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазин-4,9-диона.

О

К 840 мг (3,0 ммоль) диэтил 2,5-дигидрокситерефталата в 100 мл безводного СНС1₃ под аргоном при 0°С добавляли при перемешивании 10 мл (20 ммоль) 2,0М А1Ме3 в толуоле. Затем также добавляли 5,0 мл (77 ммоль) безводного этиламина. В течение обоих добавлений происходило выделение газа в большом количестве. Реакционную смесь медленно нагревали с флегмой и затем дефлегмировали под аргоном в течение 3 ч. В этой точке не было обнаружено никакого исходного материала с помощью тонкослойной хроматографии (1:1 Е!ОАс/гексан). Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и наливали в 200 мл 3М НС1. Слои отделяли, а водный слой экстрагировали с 3x100 мл Е!ОАс. Комбинированные органические слои высушивали над №₂8О₄ и растворитель удаляли в вакууме для получения 600 мг диамида (79% выход). 'Н ЯМР (500 МГц) δ 11,61 (2Н, к), 6,94 (2Н, к), 6,28 (2Н, Ьк),

3,51 (4Н, ф и 1,28 ррт (6Н, !).

К 4,9 г (19,4 ммоль) накопившегося диамида 5,0 г (56 ммоль) триоксана и 4,6 г (20 ммоль) камфорсульфоновой кислоты в 340 мл растворителя (17% тетрагидрофуран/СС1₄) добавляли 10 капель концентрированной Н₂8О₄. Затем бесцветную реакционную смесь помещали с флегмой под аргоном при перемешивании. Воду удаляли азеотропно из реакционной смеси во время дефлегмирования при включении 250 мл дополнительной трубки с боковым ответвлением с 3 А молекулярными ситами (100 г) в паровом канале. Через 18 ч молекулярные сита заменяли, добавляли дополнительные 3,6 г (40 ммоль) триоксана и быстро продолжали дефлегмирование. На следующий день сита вновь заменяли, добавляли 3,8 г (42 ммоль)

- 16 011034 триоксана и реакционную смесь дефлегмировали с течение следующих 4 ч. Исходное вещество не содержалось в реакционной смеси кофейного цвета, которую охлаждали до 10-15°С в ледяной ванне, и затем смешивали с 200 мл ледяного 0,5М ΝαΟΗ. Отделенный органический слой промывали 100 мл Н₂О и высушивали над Να₂8Ο₄. После удаления растворителя в вакууме получили 2,5 г неочищенного материала, который хроматографировали на 150 г силикагеля, используя 2 л ЕЮАс, с получением 1,5 г (28%) продукта. Т.пл.=236-237°С. После перекристаллизации из 3:1 Εΐ₂Ο/ΟΗ₂Ο1₂ получили 1,09 г (20%) из 3,8диэтил-2Н,7Н-1,3-оксапергидроино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазин-4,9-диона. С1М8 т/х=220.1 и 277,2 ати. ^!Н ЯМР (500 МГц) δ 7,57 (1Н, к), 5,16 (2Н, к), 3,60 (2Н, ф 1=7,23 Гц) и 1,25 (3Н, !, 1=7,23 Гц).

Пример 22. Получение (Β,§)-3-меτил-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо [е]- 1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

О

К 1,4 г (5,1 ммоль) этил 7-гидрокси-9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-карбоксилата (продукт из примера 7) в 120 мл сухого СНС1₃ (0°С водной ванны) добавляли 5,0 мл (10 ммоль) 2,0М А1Ме₃ в СΥ₂С1₂ и 6,0 мл (12 ммоль) 2,0М раствора метиламина в тетрагидрофуране. Через 15 мин стабильного выделения газа водную ванну заменяли масляной ванной и реакционную смесь дефлегмировали в течение 1,5 ч, затем быстро перемешивали при комнатной температуре. После того, как добавляли дополнительные 6,0 мл (12 ммоль) А1Ме3 раствора и 6,0 мл (12 ммоль) метиламина в тетрагидрофуране, реакционную смесь дефлегмировали в течение 2 ч и наливали в 200 мл 3М НС1 с полным перемешиванием. Отделенный водный слой экстрагировали с 3x100 мл СНС1₃, а комбинированные органические слои высушивали над Μ§8Ο₄. Растворители удаляли в вакууме для получения 1,2 г фенольного амида в 91% выхода в виде воскового твердого вещества. С1 М8: 263,3 ати (М+1). ΙΒ: 3319, 1652, 1608 и 1455 см^-1.

К 1,0 г (3,8 ммоль) вышеупомянутого фенольного амида в 300 мл безводного СНС13 под аргоном при перемешивании добавляли 900 мг (10,0 ммоль) к-триоксана, затем 2,0 г Н₂§Ο₄. Реакционную смесь быстро дефлегмировали, охлаждали до комнатной температуры и затем промывали 200 мл насыщенного ИаНСЮ^ Водный слой возвращали экстракцией с 4x100 мл СН₂С1₂, а комбинированные органические слои высушивали над Мд^^ Растворитель удаляли в вакууме для получения 900 мг бледно-желтого остатка, который хроматографировали на 400 г силикагеля (ЕЮАс), с получением 800 мг (77%) бесцветного порошка. Т.пл.=195-196°С. ΙΒ 1672 и 1454 см^-1. С1-М8 ати (М+1). ¹Н-ЯМР (500 МГц) δ 7,57 (1Н, к), 7,54 (1Н, к), 5,47 (1Н, !, 1=5,7 Гц), 5,16 (2Н, т), 3,83 (1Н, т), 3,65 (1Н, т), 3,12 (3Н, к), 2,45 (1Н, т), 2,26 (1Н, т), 2,14 (1Н, т) и 1,96 ррт (1Н, т).

Пример 23. Получение (Β,§)-3-эτил-2Н,6аН-пирролидино[2,Γ'-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-

1,3-оксапергидроин-4,10-диона.

О

Синтез 3-этил-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин4,10-диона проводили, в основном, как описано выше для примера 22, с замещением безводного этиламина на раствор метиламина. Неочищенный материал наносили на 50 г силикагеля и элюировали с ЕЮАс с получением чистого продукта в 61% выхода. Т.пл.= 197-198°С. ΙΒ: 1667 и 1451 см^-1. С1-М8 289,2 ати (М+Н). Ή ЯМР (500 МГц) δ 7,57 (1Н, к), 7,54 (1Н, к), 5,47 (1Н, !, 1=6,0 Гц), 5,18 (2Н, т), 3,66 (1Н, т), 3,65 (2Н, т), 2,48 (1Н, т), 2,26 (1Н, т), 2,17 (1Н, т), 1,94 (1Н, т) и 1,22 ррт (3Н, !, 1=7,2 Гц).

Пример 24. Получение (Β,§)-3-пропил-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо

Синтез 3-пропил-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин4,10-диона проводили, в основном, как описано выше для примера 22 с замещением н-пропиламина на раствор метиламина для получения воскового остатка, который хроматографировали на силикагеле с получением бесцветного твердого вещества. Т.пл.=153-154°С. ΙΒ (№1С1) 1667 и 1454 см^-1. С1-М8 303,1 ати

- 17 011034 (М+1). Ή ЯМР δ 7,58 (1Н, к), 7,54 (1Н, к), 5,45 (1Н, ί, 1=6,1 Гц), 5,17 (2Н, т), 3,87 (1Н, т), 3,65 (1Н, т),

3,52 (2Н, т), 2,48 (1Н, т), 2,30 (1Н, т), 2,15 (1Н, т), 1,97 (1Н, т), 1,69 (1Н, т), 1,68 (2Н, т) и 0,99 ррт (3Н, ί, 1=7,5 Гц).

Пример 25. Получение (Β,8)-3-(меτилэτил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5] бензо [е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

О

Синтез 3-(метилэтил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона проводили, в основном, как описано выше для примера 22, с замещением изопропил амина на раствор метиламина.

Заключительную очистку проводили колоночной хроматографией на силикагеле (35% выход). Т.пл.=204-205°С. Ш: 1664 и 1452 см^-1. СГМ8 303,3 ати (М+1). '11 ЯМР (500 МГц) δ 7,58 (1Н, к), 7,53 (1Н, к), 5,49 (1Н, ί, 1=5,9 Гц), 5,14 (2Н, т), 4,87 (1Н, керД 1=4,9 Гц), 3,88 (1Н, άί, 1=11,6 и 7,3 Гц), 3,65 (1Н, т), 2,45 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,13 (1Н, т), 1,96 (1Н, т) и 1,26 ррт (6Н, т).

Пример 26. Получение (Β,8)-3-циклопенτил-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5] бензо [е]-1,3-оксапергидроин-4,10-диона.

Синтез (Β,8)-3-циклопентил-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона проводили, в основном, как описано выше для примера 22, со следующими исключениями: неразбавленный циклопентиламин замещали на раствор метиламина в тетрагидрофуране; толуол использовали как растворитель для реакции; вместо дефлегмации раствор быстро нагревали до 80°С. Окончательную очистку проводили хроматографией на колонке силикагеля (56% выхода). Т.пл.=184-188°С. СГМ8 329,1 ати (М+1). Ή-ЯМР (500 МГц) δ 7,58 (1Н, к), 7,53 (1Н, к), 5,47 (1Н, ί, 1=6 Гц), 5,14 (2Н, к), 4,94 (1Н, р, 1=8,5 Гц), 3,85 (1Н, т), 3,63 (1Н, т), 2,45 (1Н, т), 2,26 (1Н, т), 2,13 (1Н, т), 1,99 (1Н, т), 1,75 (1Н, т), 1,66 (1Н, т) и 1,53 ррт (1Н, т).

Пример 27. Получение (Β,8)-3-[3-(2-оксопирролидинил)пропил]-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-

1,3-оксазино [5',6'-4,5]бензо [е]- 1,3-оксапергидроин-4,10-диона.

О

Синтез проводили, в основном, как описано для соединения в примере 22, за исключением того, что на заключительной стадии циклизации использовали 5 экв. камфорсульфоновой кислоты. Т.пл.=189190°С. ΣΒ: 1667 см^-1. СГМ8 386,3 ати (М+1). '11 ЯМР (500 МГц) δ 7,5 (2Н, к), 5.47 (1Н, ί, 1=6,0 Гц), 5,22 (2Н, к), 3,85 (1Н, т), 3,64 (1Н, т), 3,52 (2Н, т), 3,42 (2Н, т), 3,37 (2Н, т), 2,46 (1Н, т), 2,41 (2Н, т), 2,26 (1Н, т), 2,14 (1Н, т), 2,05 (2Н, т) и 1,87-2,0 ррт (3Н, т).

Пример 28. Получение (Β,8)-3-(2Н-бензо[ά]-1,3-диоксолен-5-илмеτил)-2Н,6аН-пирролидино[2,13',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

О

Синтез 3-(2Н-бензо[й]-1,3-диоксолен-5-илметил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5] бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона проводили, в основном, тем же способом, как описано выше для примера 22, за исключением того, что пиперониламин замещали метиламином. IΒ-спектроскопия (№С1): 1680 и 1445 см^-1. СГМ8 395,3 ати (М+Н). '11 ЯМР (500 МГц) δ 7,62 (1Н, к), 7,53 (1Н, к), 6,87 (1Н, к), 6,78 (1Н, к), 6,79 (1Н, к), 5,96 (2Н, к), 5,49 (1Н, т), 5,14 (2Н, т), 4,70 (2Н, άά), 3,88 (1Н, т), 3,65 (1Н, т), 2,48 (1Н, т), 2,24 (1Н, т), 2,15 (1Н, т) и 1,97 ррт (1Н, т).

Пример 29. Получение (Β,8)-3-(2,2,2-τрифτороэτил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино

- 18 011034 [5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

О

Методика для синтеза 3-(2,2,2-трифтороэтил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона была, в основном, такой же, как для примера 22, за исключением того, что трифтороэтиламин замещали метиламином.

Процедуру для триоксана проводили по шкале 5 ммоль с получением 1,2 г очищенного трифтороэтилбензоксазина, 70% выход с т.пл. 179-180°С. Ш-спектроскопия (ЫаС1): 1672 и 1454 см^-1. СГМ8, 343,1 (М+ Н). ‘Н ЯМР (500 МГц) δ 7,58 (1Н, к), 7,57 (1Н, к), 5,48 (1Н, т), 5,29 (2Н, т), 4,21 (2Н, т), 3,84 (1Н, т), 3,67 (1Н, т), 2,52 (1Н, т), 2,30 (1Н, т), 2,18 (1Н, т) и 2,00 ррт (1Н, т).

Пример 30. Получение (В,8)-4-этил-2Н,3Н,7аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо [ί]-1,4-оксазапергидроэпин-5,11-диона.

о

Серийно выпускаемый диэтиловый эфир 2,5-дигидрокситерефталевой кислоты (7,00 г, 27,5 ммоль) и 4-аминобутиральдегид диэтилацеталь (7,00 г, 43,4 ммоль) помещали в пробирку и нагревали с флегмой в течение 5 мин. Реакционную смесь наливали в разделительную трубку с 800 мл Е‘ОАс и 100 мл 6М НС1. Через 30 мин органический слой отделяли, высушивали над Ыа₂8О₄ и растворитель выпаривали для получения желтого масла. Флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат/гексан 80/20) получали 4,90 г (64%) бесцветных, пушистых кристаллов со следующими свойствами. Т.пл.=139-141°С. 'Н ЯМР (300 МГц, СЭСЕ,) δ 10,41 (1Н, к), 7,49 (1Н, к), 7,44 (1Н, к), 5,41 (1Н, ‘, 1=5,7 Гц), 4,38 (2Н, д, 1=7,2 Гц), 3,86-3,76 (1Н, т), 3,64-3,53 (1Н, т), 2,46-2,33 (1Н, т), 2,25-2,02 (2Н, т), 1,99-1,82 (1Н, т), 1,38 ррт (3Н, ‘, 1=7,2 Гц).

К раствору 2,0 г (7,21 ммоль) промежуточного фенола в 50 мл толуола добавляли 15 мл 1,2-дибромэтана и 2,4 г (17,4 ммоль) К₂СО₃. Смесь дефлегмировали в течение 48 ч до полного использования исходного материала. Растворитель выпаривали и добавляли 200 мл Е‘ОАс и 100 мл воды. Органическую фазу высушивали над Ыа₂8О₄ и растворитель выпаривали. Флэш-хроматографией на силикагеле (Е‘ОАс/ гексан 60/40) получали бесцветное масло, которое кристаллизовалось через 1 ч (2,1 г, 76%). Т.пл.=9899°С. ‘Н ЯМР (300 МГц, С1)С1_;) δ 7,47 (1Н, к), 7,36 (1Н, к), 5,46 (1Н, ‘, 4=5,9 Гц), 4,45-4,30 (4Н, т), 3,893,79 (1Н, т), 3,66 (2Н, ‘, 1=6,0 Гц), 3,69-3,57 (1Н, т), 2,50-2,38 (1Н, т), 2,31-2,06 (2Н, т), 2,05-1,87 (1Н, т), 1,39 ррт (3Н, ‘, 1=7,1 Гц).

720 мг (1,87 ммоль) промежуточного бромида растворяли в 30 мл этанола. Добавляли раствор 350 мг КОН (6,25 ммоль) в 10 мл воды. Реакция завершалась через 10 мин. Добавляли 100 мл воды и 200 мл Е‘ОАс и смесь подкисляли НС1 до рН 2. Органическую фазу высушивали над Ыа₂8О₄ и растворитель выпаривали, получая бесцветное масло (700 мг).

Масло растворяли в 50 мл тетрагидрофурана, и добавляли 1 мл Н₂ИЕ‘, и смесь перемешивали в течение 72 ч при комнатной температуре. Растворитель выпаривали и остаток повторно растворяли в 50 мл тетрагидрофурана. К раствору добавляли 253 мг (1,87 ммоль) НОВТ, 228 мг (1,87 ммоль) ОМАР, 189 мг (1,87 моль) ИЕ‘₃ и 1,08 г (5,61 ммоль) ЕОС1 и смесь перемешивали в течение 24 ч. Растворитель выпаривали и добавляли 100 мл Е‘ОАс и 100 мл водной НС1 (рН 2). Органическую фазу высушивали над Ыа₂8О₄и выпаривали. Флэш-хроматографией на силикагеле (Е‘ОАс/гексан 75/25) получали 335 мг бесцветного масла (59%). Кристаллизацией из Е‘ОАс/гексана получали 283 мг белых кристаллов со следующими свойствами. Т.пл.=180-181°С. Ш: 1670, 1631, 1475, 1443, 1034 см^-1. Ή ЯМР (500 МГц, С1ЯЪ) δ 7,58 (1Н, к), 7,36 (1Н, к), 5,47 (1Н, ‘, 1=6 Гц), 4,36 (1Н, ййй, 1=10,9, 8,5 и 4,1 Гц), 4,29 (1Н, ййй, 1=10,9, 4,6 и 4,2 Гц), 3,88-3,81 (1Н, т), 3,66 (2Н, д, 1=7,1 Гц), 3,65-3,58 (1Н, т), 3,52 (1Н, ййй, 1=15,8, 8,5 и 4,2 Гц), 3,40 (1Н, ййй, 1=15,8, 4,6 и 4,1 Гц), 2,48-2,41 (1Н, т), 2,30-2,22 (1Н, т), 2,17-2,08 (1Н, т), 2,00-1,90 (1Н, т), 1,26 ррт (3Н, ‘, 1=7,1 Гц).

Пример 31. Получение (В,8)-3-(4-оксопирролидинилбутил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино [5',6'-4,5]бензо [е]- 1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

О

К 4,8 г (20 ммоль) СВ2-0АВА (Огд. 8уи. Υο1. III, Рд. #167) в 50 мл СНС1₃ добавляли 3,5 г (22 ммоль)

- 19 011034

ΓΌΙ под атмосферой аргона при перемешивании. Через 1 ч добавляли 5 мл (избыток) пирролидина. Реакционную смесь перемешивали в течение следующего часа, затем ее промывали 100 мл 1М водного НС1, 100 мл насыщенного водного ЫаНСОз и высушивали над Ыа₂8О₄. Концентрацией в вакууме получали 6,0 г промежуточного амида (одно пятно на тонкослойной хроматографии, ЕЮАс). Амид растворяли в 50 мл ЕЮН и сразу гидрогенизировали при 30 фунтов на кв.дюйм с 800 мг 10% Рб/С. После удаления растворителя получали 3,5-граммовый промежуточный амин в виде бледно-желтой восковой жидкости.

К 1,3 г (5,22 ммоль) промежуточного продукта салициловой кислоты (см. пример 33 ниже для его синтеза), суспендированного в 40 мл диметилформамида, добавляли 930 мг (5,74 ммоль) ί'ΌΙ. Через 10 мин суспензия стала прозрачным коричневым раствором, и его нагревали при 60-80°С в течение 4 ч. Затем раствор охлаждали до комнатной температуры перед добавлением 1,5 г (10 ммоль) промежуточного амина. Реакционную смесь сразу перемешивали перед удалением растворителя при давлении масляного насоса (40°). Остаток растворяли в 200 мл СН₂С1₂, промывали 50 мл 1М НС1, а 50 мл насыщенного №НСО₃ высушивали над Ыа₂8О₄ и концентрировали в вакууме с получением 1,1 г промежуточного амида (одно пятно на тонкослойной хроматографии).

К 1,1 г (2,9 ммоль) промежуточного амида в 150 мл 33% СН₂С1₂/СНС1₃ добавляли 5,4 г (60 ммоль) триоксана, 2,3 г (100 ммоль) камфорсульфоновой кислоты и 10 капель Н₂8О₄ при перемешивании под атмосферой аргона. Полученную двухфазную систему нагревали с флегмой и воду удаляли при 50 г 4 А молекулярного сита, находящегося в 125 мл дополнительной воронке с боковым ответвлением. После того, как смесь быстро дефлегмировали, сита заменяли и дефлегмирование продолжали следующие 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и встряхивали с 100 мл 1М №ЮН. Водный слой экстрагировали с 3x100 мл СН₂С1₂. Комбинированные органические слои промывали 200 мл воды, высушивали над Ыа₂8О₄ и концентрировали в вакууме для получения 1,5 г неочищенного продукта. Флэш-хроматографией на 150 г силикагеля с 20% ЕЮН в ЕЮАс получали 750 мг продукта (63%) в виде бледно-зеленого прозрачного вещества, 98% чистого при ЬС-М8 (М+Н)=400 ати со следующими свойствами. ΙΚ: 1666, 1638, 1454, 1428 см^-1. Ή ЯМР (300 МГц, ГОСТ) δ 7,54 (1Н, 8), 7,53 (1Н, 8), 5,46 (1Н, 1, 1=5,6 Гц), 5,21 (2Н, 8), 3,85 (1Н, т), 3,62 (1Н, т), 3,61 (2Н, 1, 1=7,0 Гц), 3,40 (4Н, т), 2,44 (1Н, т), 2,33 (2Н, 1, 1=6,9 Гц), 2,26 (1Н, т), 2,13 (1Н, т), 2,0 (4Н, т), 1,96 (1Н, т) и 1,85 ррт (2Н, т).

Пример 32. Получение (К,8)-3-(3-морфолин-4-илпропил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино [5',6'-4,5]бензо [е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

Синтез 3-(3-морфолин-4-илпропил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1''-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-

1,3-оксазапергидроин-4,10-диона проводили, в целом, как указано выше для примера 22. В частности, к 1,15 г (4,0 ммоль) этил 7-гидрокси-9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-карбоксилата (продукт из примера 7) в 30 мл СН₂С1₂ под аргоном добавляли 3,0 мл (6,0 ммоль) А1Ме₃ при перемешивании. Добавляли 1-(3-аминопропил)морфолин (0,45 мл; 3,0 ммоль) и полученную смесь сразу перемешивали при комнатной температуре. Дополнительные 0,6 мл из 1-(3-аминопропил)морфолина добавляли в течение периода 3,5 ч, после чего смесь дефлегмировали. Поскольку, как показала тонкослойная хроматография, реакция не завершалась, то реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли 1,0 мл (2,0 ммоль), 2,0М А1Ме₃ в толуоле. Смесь дефлегмировали в течение следующих 2 ч, после чего тонкослойная хроматография показывала завершение. Реакционную смесь охлаждали до 5°С и затем гасили осторожным добавлением 12М НС1 при перемешивании. рН смеси устанавливали до 7 с помощью 10М ЫаОН и экстрагировали с 2x250 мл тетрагидрофурана. Раствор высушивали над Ыа₂8О₄ и после выпаривания растворителя получали 1,8 г неочищенного фенолического амида только со следами первичного амина.

К 1,8 г неочищенного промежуточного продукта в 75 мл 88% муравьиной кислоты добавляли 400 мл бензола и полученную двухфазную систему дефлегмировали под аргоном. После удаления 350 мл бензола дистилляцией добавляли дополнительные 400 мл бензола и реакционную смесь сразу дефлегмировали при перемешивании под аргоном. Весь бензол удаляли дистилляцией при атмосферном давлении и затем добавляли 2x200 мл бензола и впоследствии удаляли в вакууме для получения 2,2 г масляного остатка. Остаток обрабатывали 50 мл триэтиламина, который затем удаляли в вакууме. Остаток из этой процедуры пропускали через короткую колонку (50 г кремнезема, 50% Е1ОН/Е1Ас) для удаления любого первичного амина. После удаления растворителя из хроматографических фракций в вакууме помещали 1,5 г остатка в 1,0 л Е1ОАс, и затем промывали 2x50 мл 1,0М ЫаОН, 2x50 мл соляного раствора, и затем высушивали над №1₃8О₄. Растворитель удаляли в вакууме с получением 700 мг густого коричневого остатка, который хроматографировали на 75 г силикагеля (Е1ОН/Е1ОАс, 2:3) для получения бесцветного твердого вещества. Т.пл.= 153-155°С. ΙΚ-спектроскопия (ЫаС1): 1665 и 1454 см^-1. С1-М8 388 ати (М+1). 'Н ЯМР (500 МГц) δ 7,56 (1Н,8), 7,54 (1Н, 8), 5,47 (1Н, т), 5,22 (2Н, бб), 3,85 (1Н, 8), 3,71 (5Н, т), 3,66 (3Н,

- 20 011034

т), 2,50 (6Н, т), 2,28 (1Н, т), 2,18 (1Н, т), 2,01 (1Н, т) и 1,87 ррт (2Н, т).

Пример 33. Получение (К,8)-метил 2-(4,10-диоксо-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино

К 2,5 г (9,0 ммоль) эфира (продукт из примера 7) в 50 мл тетрагидрофурана/МеОН 1:1 добавляли 50 мл 1,0М водного №1ОН. Полученный желтый раствор нагревали до 40°С в течение 1 ч под аргоном при перемешивании. Тонкослойная хроматография показала отсутствие исходного эфира. Реакционную смесь концентрировали до 20 мл в вакууме, затем охлаждали до 4°С в ледяной ванне и устанавливали рН до 4 с помощью концентрированной НС1. Обильный белый осадок собирали в воронке Бухнера, промывали несколькими небольшими порциями холодной воды и сразу высушивали под вакуумом. Выход составлял 1,3 г (54%) промежуточного продукта салициловой кислоты в виде мелкодисперсного бесцветного твердого вещества.

Вышеупомянутую салициловую кислоту суспендировали в 20 мл сухого диметилформамида при перемешивании под атмосферой аргона. К сухой суспензии добавляли 0,92 г (5,7 ммоль) 0ΌΙ и перемешиваемую смесь нагревали до 50°С в течение 1 ч, в этом промежутке времени образовывался желтый раствор. К этому раствору добавляли 1,0 г (8,0 ммоль) глицин метиловый эфир гидрохлорида, затем 5 мл (28,7 ммоль) диизопропилэтиламина при 42°С при перемешивании. Реакционную смесь быстро перемешивали при 40-45°С под аргоном. Концентрацией раствора получали остаток, который помещали под вакуумом в течение 16 ч при 0,1 мм Нд. Сухой остаток (5,8 г) растворяли в 500 мл Е!ОАс, промывали 100 мл 3М НС1, 2x100 мл воды, высушивали над №₂8О₄ и затем фильтровали через 200 г силикагеля. Силикагель промывали 1500 мл Е!ОАс. Выпариванием Е!ОАс из очищенного промежуточного продукта фенольного амида получали 1,2 г (72%) белого твердого вещества. 0Ί-Μ8 321, (М+1); 362 ати, (Μ+СНзСN+Н).

К 2,0 г фенольного амида (комбинированный выход двух порций) в 300 мл 33% СН₂С1₂/СНС1₃ добавляли 4,6 г (20 ммоль) камфорсульфоновой кислоты и 2,0 г (22 ммоль) триоксана. Полученный раствор дефлегмировали в течение 3 ч. К реакционной смеси добавляли 5 капель концентрированной Н₂8О₄, после чего ее дефлегмировали в течение следущих 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до 10°С с помощью ледяной ванны, затем наливали в 100 мл 1М №1ОН при перемешивании. Водный слой отделяли и экстрагировали с 3x50 мл СН₂С1₂. Затем комбинированные органические слои промывали 100 мл воды, высушивали над Μд8Ο₄ и растворитель удаляли в вакууме, получая 1,1 г сырого бис-бензоксазина в виде воскового твердого вещества. Неочищенный продукт хроматографировали на 150 г силикагеля кварца с Е!ОАс как элюента для получения 650 мг (31%) прозрачного вещества. Т.пл.=161-162°С. ΙΚ (№1С1): 1748, карбониловый эфир; 1665, карбонилы амида и 1453 см^-1 С-О. ΟΊ-Μ8 333 ати, (М+1). ¹Н ЯМР (СЭСЕ) δ 7,60 (1Н, 8), 7,58 (1Н, 8), 5,5 (1Н, т), 5,30 (2Н, т), 4,35 (2Н, т), 4,89 (1Н, т), 3,78 (3Н, з), 3,68 (1Н, з), 2,50 (1Н, т), 2,39 (1Н, т), 2,15 (1Н, т) и 1,90 ррт (1Н, т).

Пример 34. Получение (К,8)-3-(2-оксо-2-пирролидинилэтил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

К 450 мг (1,2 ммоль) (К,8)-метил 2-(4,10-диоксо-2Н,6аН-пирролидино[2,1''-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5] бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-3-ил)ацетата (пример 33) в 80 мл сухого СНС1₃ добавляли 0,15 мл (1,8 ммоль) пирролидина, затем 0,9 мл (1,8 ммоль) 2,0М Α1Μе₃ в толуоле. Добавление проводили при комнатной температуре под атмосферой аргона при энергичном перемешивании. Реакционную смесь дефлегмировали в течение 1 ч, затем сразу перемешивали при комнатной температуре. Добавляли пирролидин (0,3 мл,

3,6 ммоль), затем 1,8 мл (3,6 ммоль) 2,0М АМез в толуоле. Реакционную смесь дефлегмировали в течение 5 ч, в течение этого периода времени тонкослойная хроматография не обнаруживала исходного вещества. Реакционную смесь охлаждали до 5°С и затем перемешивали с 50 мл 1М НС1. Водный слой отделяли и экстрагировали с 3x50 мл СН₂С1₂. Комбинированные органические слои промывали 50 мл насыщенного водного NаНСΟ₃, высушивали над №ь8О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенный амид (600 мг) хроматографировали на 150 г силикагеля при элюировании с 10% Е!ОН в Е!ОАс, затем проводили кристаллизацию из 10 мл Е!ОАс, для получения 458 мг (99%) прозрачного порошка. Т.пл.=257259°С. ΙΚ (№С1): 1748 карбонил, 1665 амид карбонил и 1453 см^-1 С-О. ϋΙ-Μ8 372 (М+Н); 394 (Μ+№), 435 ати (Μ+№+€Η₃€Η). Ή-ЯМР (500 МГц, СОС1₃) δ 7,56 (1Н, з), 7,55 (1Н, з), 5,50 (1Н, т), 5,41 (2Н, т), 4,38 (2Н, т), 3,87 (1Н, т), 3,68 (1Н, т), 3,52 (4Н, т), 2,49 (1Н, т), 2,28 (1Н, т), 2,18 (1Н, т), 2,08 (2Н, т), 2,03 (1Н, т) и 1,95 ррт (1Н, т).

- 21 011034

Пример 35. Получение 7-(циклогексилкарбонил)-3-(2-метоксиэтил)-2Н-бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4-она.

Серийно выпускаемый 3-гидроксибензальдегид (10,0 г, 81,9 ммоль) растворяли в 40 мл СН₂С1₂ и 40 мл НС(ОЕ!)₃ при комнатной температуре, затем добавляли 3,0 мл 1М раствора ВС1₃ в гексане. После того, как смесь перемешивали в течение 30 мин, ее фильтровали через 3 см силикагеля и силикагель промывали смесью 150 мл гексана и 250 мл ЕЮАс. Полученное оранжевое масло, которое получали после удаления растворителя, растворяли в 40 мл тетрагидрофурана и 3,5 г №1Н (~87 ммоль, ~60% в минеральном масле) добавляли по частям. Смесь нагревали до 170°С в стальном цилиндре в присутствии СО₂ (600 фунтов на кв. дюйм) в течение 2 ч. После охлаждения и удаления избытка СО₂ смесь распределяли между 150 мл ЕЮАс и 200 мл воды. Водную фазу обрабатывали Н₂8О₄ (рН 2), экстрагировали с 250 мл ЕЮАс и высушивали над №₂8О₄. Растворитель выпаривали до получения 9,2 г темно-коричневого масла.

Темно-коричневое масло (9,2 г, ~38 ммоль) растворяли в 80 мл СН₂С1₂ и добавляли 9,2 г (56,7 ммоль) ΓΌΙ по частям. После активного перемешивания в течение 90 мин при комнатной температуре добавляли

6,8 г (90,5 ммоль) Н^(СН₂)₂ОМс и смесь перемешивали в течение дополнительных 10 ч. Смесь распределяли между 200 мл воды и 200 мл ЕЮАс. Органическую фазу высушивали над №₂8О₄ и после удаления растворителя получили темно-коричневое масло. После флэш-хроматографии на силикагеле (ЕЮАс/гексан 30/70) получали 5,0 г (21%) почти бесцветного масла. ¹Н ЯМР (300 МГц, СЭС1₃) δ 12,30 (1Н, 8), 7,35 (1Н, й, 1=8,3 Гц), 7,10 (1Н, й, 1=1,5 Гц), 6,97 (1Н, йй, 1=8,3 и 1,5 Гц), 6,67 (1Н, Й8), 5,44 (1Н, 8), 3,69-3,35 (8Н, т), 3,40 (3Н, 8) и 1,28-1,20 ррт (6Н, т).

Защищенный альдегид (5,0 г, 16,8 ммоль) растворяли в 100 мл этанола. Добавляли 40 мл воды и 1 мл 12Ν НС1. Растворитель удаляли полностью через 30 мин, получив в результате альдегид в виде красноватобежевого твердого вещества (3,6 г). Неочищенный альдегид растворяли в 60 мл СН₂С1₂, затем добавляли 10 г (111 ммоль) триоксана и 10 г Си8О₄. При энергичном перемешивании добавляли по каплям 1,3 мл концентрированной Н₂8О₄. Через 30 мин смесь продуктов фильтровали через силикагель, далее промывали 300 мл ЕЮАс. Комбинированный органический раствор промывали 30 мл 1М №1ОН и высушивали над №ь8О₄. Удаление растворителя проводили флэш-хроматографией на силикагеле (ЕЮАс/гексан 40/60^60/40), получая 1,7 г (43%) бесцветных кристаллов со следующими свойствами. Т.пл.=71-73°С. ^!Н ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 10,01 (1Н, 8), 8,12 (1Н, й, 1=8,1 Гц), 7,61 (1Н, йй, 1=8,1 и 1,5 Гц), 7,46 (1Н, й, 1=1,5 Гц), 5,31 (2Н, 8), 3,76 (2Н, !, 1=4,8 Гц), 3,60 (2Н, !, 1=4,8 Гц) и 3,36 ррт (3Н, 8).

К 500 мг (20,6 ммоль) магния в 10 мл тетрагидрофурана под атмосферой азота добавляли кристаллы Ι₂, 0,2 мл 1,2-дибромэтана и 1 мл раствора 2,45 г (15 ммоль) бромоциклогексана в 10 мл тетрагидрофурана. Остаток раствора добавляли по частям в течение 5 мин после начала реакции Гриньярда. Реакционную смесь сохраняли при комнатной температуре и перемешивали в течение 45 мин, после чего в осадок выпадали несколько солей магния. Раствор надосадочной жидкости добавляли к раствору промежуточного альдегида (1,7 г, 7,22 ммоль) в 20 мл тетрагидрофурана. Получали желтый раствор, который перемешивали в течение дополнительных 5 мин. Добавляли 20 мл воды, затем медленно 200 мл ЕЮАс и небольшое количество НС1 (достаточного для растворения солей магния). Органическую фазу высушивали над №₂8О₄и концентрировали для получения желтого масла. Флэш-хроматографией на силикагеле (ацетон/толуол 20/80) получали 1,3 г (56%) слегка желтоватого масла (который кристаллизовалось через несколько дней) со следующими свойствами, Т.пл.=78-79°С. ΙΒ: 3431, 2926, 2852, 1657, 1620, 1438, 1117, 780 см^-1. ¹Н ЯМР (300 МГц, СОС1_;) δ 7,85 (1Н, й, 1=7,8 гц), 7,00 (1Н, йй, 1=7,8 и 1,5 Гц), 6,91 (1Н, й, 1=1,5 Гц), 5,24 (2Н, 8), 4,39 (1Н, й, 1=6,6 Гц), 3,74-3,68 (2Н, т), 3,58 (2Н, !, 1=4,8 Гц), 3,35 (3Н, 8), 2,28 (1Н, Й8), 1,94-0,90 ррт (11Н, т).

Промежуточный спирт (1,0 г, 3,1 ммоль) растворяли в 50 мл СН₂С1₂, к которому добавляли 1,6 г (7,4 ммоль) РСС. После перемешивания 50 мл смесь фильтровали через 3 см силикагеля, который промывали смесью 175 мл ЕЮАс/75 мл гексана. Концентрацией и флэш-хроматографией на силикагеле (ЕЮАс/гексан 40/60^50/50) получали 700 мг (70%) бесцветного масла со следующими свойствами. ΙΒ: 2930, 2854, 1677, 1449, 1427, 1314, 986 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, СОС1_;) δ 8,03 (1Н, й, 1=7,8 Гц), 7,62 (1Н, йй, 1=7,8 и 1,5 Гц), 7,49 (1Н, й, 1=1,5 Гц), 5,28 (2Н, 8), 3,75 (2Н, !, 1=5,0 Гц), 3,59 (2Н, !, 1=5,0 Гц), 3,35 (3Н, 8), 3,27-3,15 (1Н, т) и 1,95-1,25 ррт (10Н, т).

Пример 36. Получение 7-(циклопентилкарбонил)-3-этил-2Н-бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4-она.

О

- 22 011034

Синтез проводили, в основном, как для примера 35 со следующими исключениями: этиламин замещали 2-метоксиэтиламином, а бромоциклопентан замещали бромоциклопентаном. Флэш-хроматографией на силикагеле (Е1ОАс/гексан 40/60) получали бесцветное масло, которое кристаллизовали из МТВЕ/гексана для получения белых кристаллов со следующими свойствами. Т.пл.=53-54°С. ΙΚ.: 1677, 1664, 1491, 1427, 1316 см^-1. '11 ЯМР (300 МГц, 0Ό01₃) δ 8,04 (1Н, б, 1=8,3 Гц), 7,66 (1Н, бб, 1=8,3 и 1,5 Гц), 7,53 (1Н, б, 1=1,5 Гц), 5,23 (2Н, 8), 3,72-3,58 (1Н, т), 3,62 (2Н, ф 1=7,2 Гц), 1,98-1,60 (8Н, т) и 1,26 ррт (3Н, 1, 1=7,2 Гц).

Пример 37. Получение 3-этил-7-(пергидро-2Н-пиран-4-илкарбонил)-2Н-бензо[е]-1,3-оксапергидроин-4-она.

Синтез проводили, в основном, как для примера 36, за исключением замещения 4-хлоротетрагидропирана на бромоциклопентан. Т.пл.=93-94°С. ΙΚ: 1682, 1663, 1430, 1311 см^-1. 'Н ЯМР (300 МГц, 0Ό01₃) δ 8,06 (1Н, б, 1=8,1 Гц), 7,63 (1Н, бб, 1=8,1 и 1,5 Гц), 7,50 (1Н, б, 1=1,5 Гц), 5,23 (2Н, 8), 4,10-4,00 (2Н, т), 3,62 (2Н, φ 1=7,2 Гц), 3,60-3,38 (3Н, т), 1,94-1,73 (4Н, т) и 1,26 ррт (3Н, 1, 1=7,2 Гц).

Пример 38. Получение 7-(циклогексилкарбонил)-3-этил-2Н-бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4-она.

Синтез проводили, в основном, как для примера 36, за исключением замещения бромоциклогексана на бромоциклопентан. Кристаллизацией из Е1ОАс/гексана получали белые кристаллы со следующими свойствами: Т.пл.=69-70°С. ΙΚ: 2932,1678, 1667,1427, 1316 см^-1. Ή ЯМР (300 МГц, 0Ό01₃) δ 8,04 (1Н, б, 1=8,1 Гц), 7,63 (1Н, бб 1=8,1 и 1,8 Гц), 7,49 (1Н, б, 1=1,8 Гц), 5,22 (2Н, 8), 3,62 (2Н, ф 1=7,2 Гц), 3,25-3,14 (1Н, т), 1,94-1,25 (10Н, т) и 1,26 ррт (3Н, 1, 1=7,2 Гц).

Пример 39. Получение 7-(2-циклогексилацетил)-3-этил-2Н-бензо[е]1,3-оксазапергидроин-4-она.

Синтез выполняли, в основном, как для примера 36, за исключением замещения бромометилциклогексана на бромоциклопентан. Кристаллизацией из МТВЕ/гексана получали белые кристаллы со следующими свойствами. Т.пл.=55-58°С. ΙΚ: 2924, 2851, 1670, 1667,1428, 1317, 894 см^-1. Ή ЯМР (300 МГц, 0Ό01₃) δ 8,04 (1Н, б, 1=8,1 Гц), 7,63 (1Н, бб, 1=8,1 и 1,5 Гц), 7,50 (1Н, б, 1=1,5 Гц), 5,22 (2Н, 8), 3,62 (2Н, ф 1=7,5 Гц), 2,80 (2Н, б, 1=6,6 Гц), 2,03-1,88 (1Н, т), 1,80-0,92 (10Н, т) и 1,26 ррт (3Н, 1, 1=7,5 Гц).

Пример 40. Получение (К,8),(Я,8)-3-этил-7-[(2-гидроксициклогексил)карбонил]-2Н-бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4-она.

Промежуточный альдегид синтезировали, как в примере 36. К 1,2 г (5,85 ммоль) альдегида в 40 мл этанола добавляли раствор 1,04 г (15 ммоль) Н₂ЫОН-НС1 и 1,59 г Ыа₂СО₃ (15 ммоль) в 50 мл воды. Раствор перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре, а белый полученный осадок повторно растворяли, нагревая раствор до 50°С. Через дополнительные 30 мин водный этанол удаляли выпариванием при комнатной температуре, и добавляли 50 мл воды. Смесь экстрагировали с 1x200 мл и 1x100 мл Е1ОЛс. Органическую фазу высушивали над Ыа₂8О₄ и выпариванием растворителя получали оксим в виде слегка желтого твердого вещества.

Оксим (1,2 г, 5,45 ммоль) растворяли в 30 мл диметилформамида, к которому добавляли 800 мг (6,0 ммоль) N08 и 30 мл НС1 газа. Смесь перемешивали в течение 60 мин при комнатной температуре до полного использования исходного вещества. Смесь разбавляли 300 мл Е1ОЛс и экстрагировали с 2x150 мл воды. Органическую фазу высушивали над №₂8О₄. при этом объем уменьшался до 100 мл. К этой смеси добавляли 5 мл диметилформамида, 25 мл циклогексана и раствор 1,5 мл №1₃ в 25 мл СН₂СН₂ (сразу по

- 23 011034 каплям). Растворитель выпаривали и добавляли 150 мл воды. Смесь экстрагировали с 250 мл ЕЮАс и органическую фазу концентрировали после высушивания над Ыа₂8О₄. Флэш-хроматографией на силикагеле (ЕЮАс/гексан 50/50) получали бесцветное масло (800 мг, 49%), которое кристаллизовали из ЕЮАс/гексана. Т.пл.=102-104°С. !Р: 2934, 1664, 1621, 1432, 1314, 838 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 7,98 (1Н, б, 1=8,1 Гц), 7,42 (1Н, бб, 6=8,1 и 1,5 Гц), 7,31 (1Н, б, 1=1,5 Гц), 5,21 (2Н, к), 4,55-4,50 (1Н, т), 3,61 (2Н, φ 1=6,9 Гц), 3,27-3,20 (1Н, т), 2,31-1,20 (8Н, т) и 1,25 ррт (3Н, !, 1=6,9 Гц).

К вышеупомянутому раствору изоксазолина (749 мг; 2,49 ммоль) в метаноле в 100 мл добавляли 1,2 г В(ОН)₃ в 70 мл воды и 1 г никеля Ранея. После гидрирования в течение 4 ч смесь отфильтровывали, концентрировали и распределяли между 50 мл соляного раствора и 200 мл ЕЮАс. Эти две фазы отделяли и водный слой экстрагировали с дополнительными 200 мл ЕЮАс. Комбинированные органические слои высушивали над №ь8О₄ и концентрировали. Флэш-хроматографией на силикагеле с ЕЮАс/гексаном (50/50) получали 522 мг (69%) бесцветного масла. Кристаллизацией из ЕЮАс/гексана получали 250 мг белого твердого вещества со следующими свойствами. Т.пл.= 106-108°С. ΙΡ: 3460, 2933, 1661, 1431, 1319, 988 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, С1)С1₃) δ 8,06 (1Н, б, 1=8,1 Гц), 7,61 (1Н, бб, 1=8,1 и 1,5 Гц), 7,48 (1Н, б, 1=1,5 Гц), 5,23 (2Н, к), 4,30-4,25 (1Н, т), 3,62 (2Н, ф 1=7,2 Гц), 4,33-4,27 (1Н, т), 2,05-1,35 (8Н, т) и 1,26 ррт (3Н, !, 1=7,2 Гц).

Пример 41. Получение 7-(циклогексилкарбонил)-3-метил-2Н-бензо[е]-1,3-оксапергидроин-4-она.

Синтез проводили, в основном, как для примера 38, за исключением замещения метиламина на этиламин. Т.пл.=99-101°С. Ж: 2934, 2855, 1676, 1665, 1574, 1497, 1426, 1350, 1263, 984 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, С1ХЧ₃) δ 8,04 (1Н, б, 1=8,1 Гц), 7,63 (1Н, бб, 1=8,1 и 1,5 Гц), 7,49 (1Н, б, 1=1,5 Гц), 5,21 (2Н, к), 3,23-3,15 (1Н, т), 3,15 (3Н, к) и 1,93-1,20 ррт (10Н, т).

Пример 42. Получение 7-(циклогексилкарбонил)-3-(метилэтил)-2Н-бензо [е]-1,3-оксазапергидроин4-она.

о

Синтез проводили, в основном, как для примера 38, за исключением замещения изопропиламина на этиламин. Кристаллизацией из МТВЕ/гексана получали белые кристаллы со следующими свойствами: Т.пл.=88-90°С. !Р: 2931, 2854, 1676, 1654, 1450, 1427, 1335, 1218, 991 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 8,04 (1Н, б, 1=8,1 Гц), 7,62 (1Н, бб, 1=8,1 и 1,5 Гц), 7,49 (1Н, б, 1=1,5 Гц), 5,19 (2Н, к), 4,96-4,82 (1Н, т), 3,25-3,14 (1Н, т), 1,95-1,20 (10Н, т) и 1,26 ррт (6Н, б, 1=6,9 Гц).

Пример 43. Получение (Я,8)-6-(циклогексилкарбонил)-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазапергидроин-9-она.

Синтез проводили, в основном, как для примера 38, со следующими исключениями: 4-аминобутиральдегид замещали на этиламин, получая масло, которое обрабатывали НВг/НОАс в метиленхлориде с получением промежуточного альдегида. Конечный продукт имел следующие свойства. Т.пл.= 110111°С. !Р: 2927, 2855, 1676, 1665, 1439, 1078 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 8,00 (1Н, б, 1=7,8 Гц), 7,63 (1Н, бб, 1=7,8 и 1,5 Гц), 7,50 (1Н, б, 1=1,5 Гц), 5,52 (1Н, !, 1=6,0 Гц), 3,91-3,82 (1Н, т), 3,67-3,59 (1Н, т), 3,23-3,13 (1Н, т), 2,53-2,42 (1Н, т), 2,35-2,22 (1Н, т), 2,20-2,07 (1Н, т) и 2,05-1,20 ррт (12Н, т).

Пример 44. Получение 6-(циклогексилкарбонил)-3-этил-2Н-бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4-она.

5-Формилсалициловую кислоту (2,8 г, 16,8 ммоль) растворяли в 150 мл метанола и добавляли по каплям 10 мл тионилхлорида. После перемешивания раствора в течение 18 ч при комнатной температуре добавляли по каплям другие 5 мл тионилхлорида и смесь дефлегмировали в течение 5 ч. Растворитель выпаривали и оставшуюся смесь фильтровали через силикагель, который промывали 300 мл ЕЮАс/гек

- 24 011034 сана (1:1). Концентрацией соответствующих фракций получали 3,0 г оранжевого твердого вещества, которое растворяли в 30 мл СН₂С1₂. Добавляли этиламин (5,0 г) и раствор перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуры. Растворитель выпаривали и добавляли 100 мл водной НС1 до рН 1. Смесь экстрагировали с ЕЮАс (250 мл и 100 мл), высушивали над №ь8О₄ и концентрировали для получения

1,4 г желтого амида.

Неочищенный амид растворяли в 40 мл СН₂С1₂, содержащем 6,0 г триоксана (67 ммоль) и 5,0 Си8О₄. Полученную смесь энергично перемешивали добавлением по каплям 1,0 мл концентрированной Н₂8О₄. Через 30 мин смесь отфильтровывали через силикагель, который промывали 250 мл ЕЮАс. Органическую фазу концентрировали, получая бежевое твердое вещество. Флэш-хроматографией на силикагеле (ЕЮАс/гексан 50/50) получали 550 мг бесцветного масла, которое застывало через 1 ч. Промежуточный альдегид имел следующие свойства: Т.пл.=47-50°С . ¹Н ЯМР (300 МГц, СЭСЕ,) δ 9,97 (1Н, к), 8,47 (1Н, й, 1=1,8 Гц), 8,0 (1Н, йй, 1=8,4 и 1,8 Гц), 7,9 (1Н, й, 1=1,8 Гц), 5,28 (2Н, к), 3,63 (2Н, ф 1=7,2 Гц) и 1,27 ррт (3Н, ΐ, 1=7,2 Гц).

Преобразование альдегида в циклогексилкетон завершали, в основном, согласно методике по примеру 38. 1К: 2933, 2855, 1683, 1614, 1494, 1463, 1372, 1311, 1247, 1209, 978 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, СОС1_;) δ 8,53 (1Н, й, 1=2,1 Гц), 8,09 (1Н, йй, 1=8,7 и 2,1 Гц), 7,03 (1Н, й, 1=8,7 Гц), 5,25 (2Н, к), 3,63 (2Н, ф 1=7,2 Гц), 3,37-3,25 (1Н, т), 1,92-1,20 (10Н, т) и 1,27 ррт (3Н, ΐ, 1=7,2 Гц).

Пример 45. Получение (38)-3-бензил-(К,8)-2Н,3Н,4Н,7аН-пирроилидино[2,1-2',3']-оксазапергидроино [5',6'-5,4] бензо [Р]-1,4-оксазепин-5,11-диона.

Серийно выпускаемый карбонилбензилоксифенилаланин (10,0 г, 33,4 ммоль) растворяли в 150 мл СН₂С1₂. Добавляли СЭ1 (8,0 г, 49,3 ммоль) и перемешивали смесь в течение 60 мин при комнатной температуре. Добавляли метанол (25 мл) и перемешивали смесь в течение следующих 60 мин при комнатной температуре. Растворитель выпаривали, добавляли 150 мл воды, а смесь экстрагировали с 250 мл ЕЮАс. Органическую фазу высушивали над №ь8О₄ и концентрировали, получая бесцветное масло (10,1 г).

Метиловый эфир карбонилбензилоксифенилаланина растворяли в 120 мл тетрагидрофурана и добавляли 1,2 г (55 ммоль) Ь1ВН₄, вызывая нагревание смеси до 60°С. Смесь дефлегмировали в течение 5 мин до полного использования исходного вещества. Реакцию гасили медленным добавлением 25 мл 2Ν НС1, затем 100 мл метанола. После концентрации раствора добавляли 100 мл соляного раствора и смесь экстрагировали с 2x200 мл ЕЮАс/гексана (1:1). Органическую фазу высушивали над №ь8О₄ и концентрировали, получая 9,1 г (31,9 ммоль) белого твердого вещества со следующими свойствами. Т.пл.: 85-87°С. ¹Н ЯМР (300 МГц, СОС1_;) δ 7,35-7,15 (10Н, т), 5,07 (2Н, к), 5,02-4,93 (1Н, т), 4,00-3,89 (1Н, т), 3,74-3,54 (2Н, т) и 2,86 ррт (2Н, й, 1=6,9 Гц).

Вышеупомянутый спирт растворяли в 80 мл пиридина, затем при 400 мг ОМАР и 4,6 г (40,1 ммоль) СН₃8О₂С1 при 0°С. После перемешивания смеси в течение 18 ч при комнатной температуре добавляли 700 мл ЕЮАс и раствор экстрагировали с 3x200 мл 2Ν НС1. Органическую фазу высушивали над №ь8О₄и концентрировали, получая 9,7 г бежевого твердого вещества со следующими свойствами. Т.пл.: 8285°С. ^!Н ЯМР (300 МГц, СОС1_;) δ 7,35-7,18 (10Н, т), 5,08 (2Н, 8), 5,00-4,94 (1Н, т), 4,29-4,10 (3Н, т), 2,96 (3Н, к) и 2,95-2,84 ррт (2Н, т).

К раствору 1,5 г (5,4 ммоль) фенола (синтезируемого, как в примере 30) в 100 мл толуола добавляли 2,0 г К2СО3 и 1,0 г метилсульфоната. Смесь дефлегмировали в течение 7 ч, затем добавляли 2,0 г К2СО3 и

2,5 г метилсульфоната. Смесь дефлегмировали в течение 18 ч, затем добавляли 2,0 г К₂СО₃ и 5,0 г метилсульфоната и затем дефлегмировали смесь в течение 24 ч. Добавляли воду (100 мл) и экстрагировали смесь с ЕЮАс (250 мл и 150 мл). Органическую фазу высушивали над №ь8О₄ и растворитель выпаривали. После флэш-хроматографии на силикагеле (ЕЮАс/гексан 45/55, затем 66/34) получали 1,6 г слегка желтоватого масла со следующими свойствами. ¹Н ЯМР (300 МГц, СЭС1₃) δ 7,44-7,18 (12Н, т), 5,88-5,80 (1Н, т), 5,46 (0,5Н, ΐ, 1=6 Гц), 5,44 (0,5Н, ΐ, 1=6 Гц), 5,10 (2Н, к), 4,39 (2Н, ф 1=6,9 Гц), 4,29-4,00 (2Н, т), 3,96-3,77 (2Н, т), 3,65-3,56 (1Н, т), 3,13-2,96 (2Н, т), 2,50-2,37 (1Н, т), 2,30-1,86 (3Н, т) и 1,38 ррт (3Н, ΐ, 1=6,9 Гц).

Это масло растворяли в 100 мл метанола. Добавляли Рй/С (600 мг) и гидрогенизировали смесь в течение 2 ч. Смесь фильтровали и растворитель выпаривали. Полученное масло нагревали до 150°С в течение 5 мин. После флэш-хроматографии полученного масла на силикагеле (ЕЮАс/гексан 85/15) получали желтоватое масло (250 мг). Кристаллизацией от ЕЮАс/МТВЕ получали 175 мг белых кристаллов со следующими свойствами. Т.пл .= 159-162°С. 1К: 1670, 1442 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, СОС1_;) 87,64-7,13 (7Н, т), 6,28-6,20 (1Н, т), 5,46 (1Н, ΐ, 1=6 Гц), 4,29-4,14 (2Н, т), 3,90-3,77 (2Н, т), 3,66-3,58 (1Н, т), 2,96-2,76 (2Н, т), 2,50-2,39 (1Н, т), 2,31-2,06 (2Н, т) и 2,03-1,87 ррт (1Н, т).

- 25 011034

Пример 46. Получение (В,8),(В,8)-2Н,3Н,3аН,9аН-1,2-оксазолидино[3,2-Ь]пирролидино[2,1-3',2'] (1,3-оксазино)[5',6'-5,4]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-6,12-диона.

о

К раствору Ν-гидроксифталимида (7,5 г, 44,6 ммоль) в 200 мл диметилформамида, который обрабатывали газом аргоном, добавляли 2,14 г 60% гидрида натрия (53,5 ммоль) по частям в течение 1 ч. Полученный раствор нагревали до 80°С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. К этому раствору добавляли хлоропропиональальдегид диэтилацеталь (11,2 мл, 66,9 мммоль) и йодид натрия (10,0 г, 66,9 ммоль). Полученную суспензию нагревали до 80°С в течение 4 ч. Раствор охлаждали до комнатной температуры и затем распределяли между 1,5 л Н2О/0,5 л Е!2О. Органический слой промывали соляным раствором, высушивали над №₂8О₄, отфильтровывали и выпаривали в вакууме. После флэш-хроматографии остатка (Е!ОАС:гексан 1:4) получали 9,3 г (71%) белого твердого вещества. Промежуточный продукт растворяли в 250 мл безводного этилового спирта, к которому добавляли безводный гидразин (1,99 мл, 63,4 ммоль). Наблюдалось немедленное осаждение пушистого белого твердого вещества. Через 2 ч смесь фильтровали для удаления осажденного вещества, которое промывали этиловым спиртом. Комбинированные растворы этилового спирта выпаривали в вакууме и полученный остаток разделяли между СН2С12/Н2О. Органический слой промывали соляным раствором, высушивали над №₂8О₄, фильтровали и выпаривали в вакууме. Полученное масло дистиллировали под вакуумом (2 мм Нд, 65°С), получая 3,25 г (63%) промежуточного амина. 1В: 2974, 2930, 2876, 1126 и 1059 см^-1. 'Н ЯМР (500 МГц) δ 5,37 (2Н, к), 4,63 (1Н, !, 1=6,0 Гц), 3,74 (2Н, !, 1=6,5 Гц), 3,65 (2Н, т), 3,51 (2Н, т), 1,91 (2Н, ф 1=6,2 Гц) и 1,21 ррт (6Н, !, 1=7,1 Гц).

Аргон барботировали в раствор 7,5 г (27 ммоль) этил 7-гидрокси-9-оксо-3аН-бензо[е]пирролидино [2,1-Ь]-1,3-оксазин-6-карбоксилата (соединение примера 7) в 75 мл 1:1 МеОН:1М №1ОН. Полученный раствор сразу перемешивали и затем удаляли МеОН в вакууме. рН раствора ярко-желтого цвета регулировали до получения 4,0 концентрированной соляной кислоты. Тяжелый белый осадок собирали в воронке Бухнера и промывали небольшими частями воды, получая 6,6 г промежуточной салициловой кислоты (98%) после высушивания в течение нескольких часов при 0,2 мм Нд.

К суспензии промежуточной салициловой кислоты (400 мг, 1,59 ммоль) в 10 мл сухого диметилформамида добавляли 1,1'-карбонилдиимидазол (257 мг, 1,59 ммоль). Реакционная смесь становилась гомогенной через 5 мин. После перемешивания при комнатной температуре в течение 18 ч к раствору добавляли амин (0,45 мл, 2,7 ммоль). Далее реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре и затем промывали Е!ОАс/Н2О. Органический слой промывали пятью 50 мл частями Е!ОАс. Комбинированные органические фазы промывали 1Ν НС1, насыщенным NаНСОз и соляным раствором, высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. После высушивания при пониженном давлении в течение 1 ч флэш-хроматографией остатка (Е!ОАс:гексан, 1:1) получали чистое вещество. Этот промежуточный продукт растворяли в 5 мл СН₂С1₂, и обрабатывали 3 каплями Н₂8О₄, и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем реакционную смесь промывали насыщенным NаНСОз, высушивали над №₂8О₄, фильтровали и выпаривали в вакууме. Твердое вещество кристаллизовали из СН₂С1₂/Е!₂О для получения 240 мг (32%) не совсем белого порошка. Т.пл.: 245250°С. 1В: 1666 и 1458 см^-1. Ή ЯМР (500 МГц) δ 7,58 (0,5Н, к), 7,56 (0,5Н, к), 7,54 (0,5Н, к), 7,52 (0,5Н, т), 5,76 (1Н, т), 5,47 (1Н, ф 1=5,7 Гц), 4,31 (1Н, т), 4,24 (1Н, т), 3,85 (1Н, т), 3,62 (1Н, т), 2,80 (1Н, т), 2,71 (1Н, т), 2,45 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,14 (1Н, т) и 1,96 ррт (1Н, т).

Пример 47. Получение (В,8),(В,8)-6-[(2-этоксипирролидинил)карбонил]-7-гидрокси-3аН-бензо[е] пирролидино [2,1 -Ь]-1,3-оксазапергидроин-9-она.

К суспензии промежуточной салициловой кислоты (см. пример 46) (411 мг, 1,65 ммоль) в 10 мл сухого диметилформамида добавляли 1,1'-карбонилдиимидазол (267 мг, 1,65 ммоль). Реакционная смесь сразу становилась гомогенной. После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч к раствору добавляли О-3,3-диэтоксипропил гидроксиамин (344 мкл, 2,06 ммоль). Через 1 ч реакционную смесь промывали 1Ν НС1, насыщенным №ьНСО₃ и соляным раствором, высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Промежуточный продукт растворяли в 15 мл сухого СН2С12 и обрабатывали камфорсульфоновой кислотой (100 мг, 0,430 ммоль). Через 0,5 ч реакционную смесь промывали насыщенным NаНСО₃, высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали. После флэшхроматографии масляного остатка (СН₂С1₂:МеОН, 50:1) получали 220 мг (38%) желтого твердого вещества. Т.пл.: 138-140°С. 1В: 1667 и 1451 см^-1. Ή ЯМР (500 МГц) δ 10,83 (0,5Н, к), 10,79 (0,5Н, к), 7,78 (0,5Н, к), 7,76 (0,5Н, к), 7,52 (0,5Н, к), 7,50 (0,5Н, т), 6,02 (1Н, т), 5,46 (1Н, т), 4,34 (1Н, т), 3,99 (0,5Н,

- 26 011034

т), 3,93 (0,5Н, т), 3,84 (1Н, т), 3,78 (1Н, т), 3,70 (1Н, т), 3,63 (1Н, т), 2,51 (1Н, т), 2,43 (1Н, т), 2,38 (1Н, т), 2,23 (1Н, т), 2,12 (1Н, т), 1,93 (1Н, т) и 1,25 ррт (3Н, т).

Пример 48. Получение (К,8),(К,8)-6-[(3-гидроксипирролидинил)карбонил]-3аН-бензо[е]пирролидино [2,1 -Ь]-1,3-оксапергидроин-9-она.

о

Раствор 3-гидроксипирролидина (1,0 г, 11,5 ммоль) и имидазола (1,72 г, 25,2 ммоль) в 20 мл СН₂С1₂получали в 100 мл колбе с 3 ответвлениями, снабженной термометром, и затем охлаждали до 0°С. Раствор трет-бутилдиметилсилилхлорида (3,80 г, 25,2 ммоль) в 15 мл СН₂С1₂ добавляли через шприц с насосом в течение 1 ч. Раствор перемешивали при комнатной температуре, отмечая медленное осаждение белого твердого вещества (гидрохлорид имидазола). Через 18 ч осадок отфильтровывали и промывали СН₂С1₂. Затем раствор концентрировали в вакууме и полученное оранжевое масло повторно растворяли в метаноле. После перемешивания спиртового раствора в течение 2 ч раствор вновь выпаривали в вакууме и затем распределяли между СН2С12/Н2О. Органический слой промывали соляным раствором, высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали. Остаток высушивали под вакуумом в течение нескольких часов, получая 1,9 г (83%) 3-гидроксипирролидин трет-бутилдиметилового эфира в виде вязкого оранжевого масла. ΙΚ: 3150, 2953, 2928, 2888, 1413 и 1255 см^-1.

К суспензии промежуточной салициловой кислоты (см. пример 46 для его синтеза) (430 мг, 1,84 ммоль) в 10 мл сухого СН₂С1₂ добавляли 1,1'-карбонилдиимидазола (373 мг, 2,30 ммоль). Реакционная смесь становилась гомогенной очень медленно, и выделение газа СО2 также происходило медленно. Через 1 ч при комнатной температуре добавляли раствор 3-гидроксипиррилидин трет-бутилдиметилового эфира (556 мг, 2,76 ммоль) в 3 мл СН2С12. Через 16 ч реакционную смесь концентрировали в вакууме при комнатной температуре. Остаток распределяли между ЕЮАс/Ш НС1 и органический слой промывали насыщенным №НСО₃. соляным раствором, высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматографией неочищенного твердого вещества (ЕЮАс: гексан, 1:1-1,5) получали 648 мг (84%) силилового эфира в виде чистого масла. ΙΚ: 1671, 1630 и 1434 см^-1.

К раствору силилового эфира (598 мг, 1,43 ммоль) в 10 мл тетрагидрофурана добавляли тетраэтиламмоний фторид гидрат (321 мг, 2,15 ммоль). Через 1 ч реакционную смесь выпаривали в вакууме и полученный остаток разделяли между СН₂С1₂/Н₂О. Органический слой промывали соляным раствором, высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии остатка (СНС1₂:МеОН, 30:1) получали 323 мг (75%) спиртового продукта в виде белого твердого вещества. Т.пл.: 187-188°С. ΙΚ: 3400, 1668, 1620 и 1430 см^-1. Ί1 ЯМР: 7,98 (1Н, т), 7,20 (1Н, т), 7,10 (1Н, т), 5,50 (1Н, т), 4,60 (0,5Н, δ), 4,47 (0,5Н, δ), 3,86-3,38 (7Н, т), 2,45 (1Н, т), 2,27 (1Н, т) и 2,15-1,92 ррт (4Н, т).

Пример 49. Получение (К,8),(К,8)-2-метил-13аН,7аН-пиперазино[2,1-Ь][2,Г'-3',2'](оксазапергидроино)[5',6'-5,4] бензо [е]-1,3-оксазин-3,5,11 -триона.

о

Концентрированную смесь эфира этилсалициловой кислоты (пример 7) (632 мг, 2,28 ммоль) и Ν2,2-диметоксиметил-Ы-метилглицинамида (2,0 г, 11,3 ммоль) нагревали до 130°С. Из смеси получали гомогенный расплав, который нагревали в течение 10 мин. Остаток хроматографировали (ЕЮАс), а промежуточный продукт растворяли в 20 мл СН₂С1₂ и обрабатывали 6 каплями концентрированной Н₂8О₄. Через 6 ч реакционную смесь нейтрализовали насыщенным NаНСО₃, экстрагировали с СН₂С1₂, высушивали над №₂8О₄, фильтровали и выпаривали. После флэш-хроматографии остатка (ЕЮАс) получали 325 мг (42%) белого твердого вещества. Т.пл.: 253-256°С. ΙΚ: 1660 и 1459 см^-1. '11 ЯМР (500 МГц) δ 7,57 (0,5Н, δ), 7,56 (0,5Н, δ), 7,56 (0,5Н, δ), 7,54 (0,5Н, т), 5,57 (1Н, бб, 1=4,2/6,8 Гц), 5,48 (1Н, ф 1=6,1 Гц), 4,45 (1Н, бб, 1=6,1/17 Гц), 4,26 (1Н, б, 1=17 Гц), 4,23 (1Н, б, 1=17 Гц), 3,86 (2Н, т), 3,76 (1Н, т), 3,62 (1Н, т), 3,10 (1,5Н, δ), 3,10 (1,5Н, δ), 2,45 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,14 (1Н, т) и 1,96 ррт (1Н, т).

Пример 50. Получение (К,8),(К,8)-5-нитро-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,Г'-3',2'] (1,3-оксазапергидроино)[5',6'-2,1]бензо[4,5-е]-1,3-оксазин-6,12-диона.

Метод А.

К 300 мг (1 ммоль) (К,8),(К,8)-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,1-2',3'](1,3-оксазино)

- 27 011034 [5',6'-2,1]бензо[4,5-е]-1,3-оксазапергидроин-6,12-диона (продукт из примера 1) в 30 мл уксусного ангидрида добавляли по каплям 3,5 мл (43 ммоль) 90% азотной кислоты более чем в течение 10 мин при комнатной температуре. Через 30 мин реакционную смесь распределяли между 100 мл СН₂С1₂ и 200 мл насыщенного водного NаНСΟз. Водную фазу экстрагировали с 3x100 мл СН₂С1₂ и объединенные органические слои высушивали с Мд§О₄. Концентрацией раствора в вакууме получали 408 мг коричневой пены через 4 ч под вакуумом при 0,1 мм Нд. Хроматографией на 200 г кремнезема (элюируемого с ЕЮАс) получали 220 мг продукта, который повторно растворяли в двух пятнах с подобными значениеми КГ при экспериментах тонкослойной хроматографии с использовании ЕЮАс. Анализ ЬС/Μδ (С-18) показал два пика, содержащих 95,5% вещества: 346 (М+1). ΙΚ: 1778, 1548, 1463 и 1426 см^-1.

Метод В.

К 900 мг (3,0 ммоль) продукта из примера 1 в 20 мл 0°С Н₂8О₄ добавляли по каплям свыше 10 мин 2 мл 90% НNΟз. Через 30 мин реакционную смесь наливали в 200 мл холодной воды, а органические продукты экстрагировали с 3x50 мл СН₂С1₂. Комбинированные органические слои промывали 100 мл воды и высушивали над Мд§О₄. Растворитель удаляли в вакууме для получения 1,1 г 5-нитро-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,1-3',2'](1,3-оксазапергидроино)[5',6'-2,1]бензо[4,5-е]-1,3-оксазин-6,12-диона.

В результате такой нитрации на основе серной кислоты получали продукт нитрации, состоящий, главным образом, из менее мобильного пятна тонкослойной хроматографии, т.е. двух более полярных из четырех возможных диастереомеров. Вышеописанный процесс повторяли с 800 мг (2,7 ммоль) исходного вещества, получая дополнительно 1,0 г продукта. Комбинированное неочищенное нитросоединение (2,1 г) фильтровали через 40 г силикагеля в 50 мл ЕЮАс, затем 300 мл ЕЮАс для получения 1,9 г бесцветного вещества, которое давало пену при высушивании. Кристаллизацией из минимального объема ЕЮАс получали 450 мг очищенного более полярного изомера (86%), по оценке ЯМР. Материнский раствор давал менее полярный изомер (2:1) в виде бесцветного твердого вещества после его выдержки в течение ночи.

Пример 51. Получение (К,8),(К,8)-5-амино-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,1-3',2'] (1,3-оксазино)[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-6,12-диона.

К 400 мг (1,15 ммоль) (К,8),(К,§)-5-нитро-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,1-3',2'](1,3оксазапергидроино)[5',6'-2,1]бензо[4,5-е]-1,3-оксазин-6,12-диона (продукт из примера 50, метод А) в 40 мл ЕЮАс добавляли 200 мг 10% Рб/С при окуривании аргоном. Полученную суспензию сразу обрабатывали водородом при 50-60 фунтов на кв.дюйм в гидрогенаторе Парра. Катализатор удаляли вакуумной фильтрацией при помощи целита, а фильтрат концентрировали до твердого вещества в вакууме. После хроматографии силикагелем на остатке с 25% ЕЮАс в СН₂С1₂ получали 253 мг (70% выход) бесцветного твердого вещества со следующими свойствами: ΙΚ: 3447, 3333, 1670, 1654, 1595, 1431, 1388, 1341, 1079 и 775 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, СЭСГ) δ 6,73 (1Н, к), 6,72 (1Н, к), 6,04 (2Н, Ьк к), 5,46 (1Н, 1, 1=6,0 Гц), 5,38 (1Н, 1, 1=6,0 Гц), 3,81 (2Н, т), 3,58 (2Н, т), 2,43 (2Н, т), 2,29 (2Н, т), 2,15 (2Н, т) и 1,94 ррт (2Н, т).

Пример 52. Получение (К,8),(К,§)-5-амино-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,Г'-3',2'] (1,3-оксазино)[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-6,12-диона.

К 450 мг (1,30 ммоль) продукта из примера 50, метод В, в 80 мл СН₂С1₂ добавляли 180 мг 10% Рб/С под аргоном. Полученную суспензию сразу гидрогенизировали при 50-60 фунтах на кв.дюйм в гидрогенаторе Парра. Катализатор удаляли фильтрованием через прокладку целита и раствор концентрировали для получения 470 мг неочищенного продукта. После хроматографии на силикагеле, используя 25% Е1ОАс в СН₂С1₂, получали 380 мг (93%) в виде бесцветного твердого вещества со следующими свойствами. ΙΚ: 3470, 3329, 1673, 1650, 1592, 1542, 1429, 1388, 1340, 1224, 1098, 1079 и 775 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц,

СОС1_;) δ 6,72 (1Н, к), 6,05 (2Н, Ьг к), 5,46 (1Н, 1, 1=6,0 Гц), 5,38 (1Н, 1, 1=6,0 Гц), 3,80 (2Н, т), 3,61 (2Н, т), 2,42 (2Н, т), 2,23 (2Н, т), 2,10 (2Н, т) и 1,96 ррт (2Н, т).

Пример 53. Получение (К,8),(К,§)-5-амино-11-бром-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино [2,1-3',2'](1,3-оксазино)[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-6,12-диона.

- 28 011034

К 450 мг (1,5 ммоль) продукта из примера 50 в 60 мл Е1ОАс добавляли 200 мг Р6/С под аргоном и полученную суспензию гидрогенизировали в гидрогенаторе Парра в течение 18 ч при давлении 50-60 фунтов на кв. дюйм. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли в вакууме с получением 212 мг (0,67 ммоль, 45%) анилинового промежуточного продукта в виде прозрачного желтого твердого вещества. Тонкослойная хроматография (Е1ОАс) указывает на полное превращение. ЯМР указывает (1:1:1:1) на наличие смеси диастереомеров. Анализ БС-М8 указывает на 98,2% чистоту при полном токе ионов с (М+Н)=315,9 как доминирующим пиком и совместимым со структурой.

Анилин растворяли в 25 мл СН₂С1₂ (безводный), и 450 мг (2,8 ммоль) Вг₂ добавляли при 0°С под атмосферой аргона. Первая капля Вг₂ немедленно обесцвечивалась. Через 15 мин при 0-5°С реакционную смесь растворяли в 50 мл СН₂С1₂. Органическую фазу промывали 20 мл 10% водного бисульфита натрия и 30 мл насыщенного водного ЫаНСО₃, высушенного над Ыа₂8О₄, и концентрировали в вакууме для получения 240 мг (91%) бледно-зеленого твердого вещества, которое имело следующие свойства. ΙΒ: 3473, 3333, 2977, 2883, 1652, 1591, 1527, 1451 и 1386 см^-1. Ή ЯМР (300 МГц, СЭС1₃) δ 6,1 (2Н, Ьг 8), 3,94 (1Н, т), 3,83 (1Н,т), 3,53 (2Н, т), 2,42 (2Н, т), 2,28 (2Н, т), 2,11 (2Н, т) и 1,99 ррт (2Н, т).

Пример 54. Получение (В,8),(В,8)-М-(6,12-диоксо-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,13',2'](1,3-оксазино)[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-5-ил)ацетамида.

К 850 мг анилина (промежуточный продукт примера 53) в 20 мл Ас₂О добавляли 1 каплю Н₂8О₄. Через 1 ч реакционную смесь перемешивали с 50 мл ледяной воды. Полученные твердые вещества выделяли фильтрацией, промывали несколькими небольшими частями воды и высушивали воздухом для получения 700 мг неочищенного ацетамида. Это неочищенное вещество кристаллизовали из 10% Е1ОН в Е1ОАс для получения 400 мг бесцветного твердого вещества (1:1 изомерная композиция БС-М8) со следующими свойствами: Ж: 3279, 2983, 1651,1464, 1428, 1391, 1246,1080 и 777 см^-1. '11 ЯМР (300 МГц, СЭС1₃) δ 9,76 (0,5Н, 8), 9,67 (0,5Н, 8), 7,40 (0,5Н, 8), 7,38 (0,5Н, 8), 5,63 (0,5Н, 1, 1=6,0 Гц), 5,46 (1Н, т), 5,40 (0,5Н, 1, 1=6,0 Гц), 3,84 (2Н, т), 3,60 (2Н, т), 2,41 (2Н, т), 2,22 (2Н, т), 2,20 (3Н, 8), 2,15 (2Н, т) и 1,96 ррт (2Н, т).

Материнский раствор из кристаллизации этилацетата концентрировали в вакууме, а остаток хроматографировали на 100 г силикагеля с 10% Е1ОН в Е1ОАс для получения 160 мг более подвижного изомера. Это вещество обладало следующими свойствами: Чистота: 98,8% с изомерным составом 50:1 при С18 БС/М8; (М+Н)=357,9. Ж: 3272, 1656, 1466, 1421, 1367, 1243, 1080 и 779 см^-1. '11 ЯМР (300 МГц,

СЭС1₃) δ 9,76 (1Н, 8), 7,38 (1Н, 8), 5,63 (1Н, 1, 1=5,4 Гц), 5,46 (1Н, 1, 1=6,0 Гц), 3,86 (2Н, т), 3,60 (2Н, т),

2,46 (2Н, т), 2,27 (2Н, т), 2,20 (3Н, 8), 2,05 (2Н, т) и 1,91 ррт (2Н, т).

Пример 55. Получение (В,8),(В,8)-М-(11-хлоро-6,12-диоксо-3аН,9аН-пирролидино[2,1-Ь]пирролидино[2,1-3',2'](1,3-оксазино)[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-5-ил)ацетамида.

О С1

В раствор 250 мг (0,70 ммоль) продукта из примера 54 в 50 мл СН₂С1₂ барботировали С1₂ из колбы в течение 2 с. Реакционную смесь промывали 50 мл 20% водного №1Н8О₃ и 50 мл насыщенного водного ЫаНСО₃, высушивали над Мд8О₄ и концентрировали в вакууме. После перекристаллизации из Е1ОАс выход составлял 250 мг (64%) бесцветного твердого вещества со следующими свойствами: БС-М8 (С-18) указывают на чистоту на 96,3% (М(³⁵С1)+Н)=391,8, (М(³⁷С1)+Н)=393,8. Ж: 3272, 1673, 1458, 1422, 1246, 1064 и 732 см^-1.

Пример 56. Получение (К,8)-3-(3-оксо-3-пирролидинилпропил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1''-3',2']1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

О

К 2,5 г (10 ммоль) промежуточного продукта салициловой кислоты (см. пример 46 для гидролиза

- 29 011034 эфира салициловой кислоты этила из примера 7) в 40 мл диметилформамида добавляли 1,8 г (11 ммоль) ί,ΌΙ под атмосферой аргона при перемешивании. Полученную суспензию нагревали до 85-100°С, при которой она становилась гомогенным коричневым раствором. Через 5 ч при той же температуре добавляли 3,0 г β-аланин НС1, далее 5 мл диизопропилэтиламина и полученный раствор сразу перемешивали при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали при 1 мм Нд/40°С, а остаток разделяли между 200 мл СН₂С1₂ и 100 мл 1М водного НС1. Водный слой промывали 3x50 мл СН₂С1₂. Комбинированные органические слои промывали 100 мл воды, высушивали над №₂8О₄ и концентрировали в вакууме для получения 3,8 г коричневого масла. Хроматографией на 75 г силикагеля с 1 л Е1ОАс получали

1,2 г (34%) промежуточного эфира в виде бесцветного твердого вещества со следующими свойствами: С1-М8, М+1=390 ати.

К 1,2 г (3,5 ммоль) эфира, суспендированного в 90 мл Е1ОН, добавляли 10 мл Е1ОН, затем 10 мл воды и 1,0 мл (10 ммоль) 10Ν №1ОН. Через 5 мин получали ярко-желтый раствор, а через 30 мин исходного вещества не оставалось (тонкослойная хроматография, Е1ОАс). Реакционную смесь концентрировали в вакууме и водный остаток экстрагировали с 100 мл Е1ОАс, окисляли до рН 3,0 с помощью 6Ν НС1 и затем экстрагировали с 3 x100мл Е1ОАс. Органические слои комбинировали, высушивали над Мд8О₄ и концентрировали в вакууме для получения 1,0 г промежуточного продукта карбоновой кислоты (91%).

К 1,0 г (3,1 ммоль) карбоновой кислоты в 20 мл диметилформамида добавляли 0,55 г (3,4 ммоль) СЭЕ затем 12 мг (0,1 ммоль) ОМАР, под атмосферой аргона при перемешивании. Через 4 ч добавляли 2 мл пирролидина и реакцию сразу продолжали. Диметилформамид удаляли в вакууме, а остаток разделяли между 100 мл СН₂С1₂ и 50 мл 1М НС1. После высушивания над Мд8О₄ растворитель удаляли в вакууме для получения 1,2 г неочищенного промежуточного продукта амида. Колоночной хроматографией на 50 г силикагеля (Е1ОАс) получали 700 мг чистого промежуточного продукта амида (54%).

К 0,60 г (1,9 ммоль) амида в 200 мл 40% СН₂С1₂/СНС1₃ (безводный) добавляли 11 г триоксана (122 ммоль), затем 4,6 г (20 ммоль) камфорсульфоновой кислоты и 18 капель Н₂8О₄. Реакционную смесь перемешивали с флегмой под атмосферой аргона. Воду, образующуюся в ходе реакции, удаляли при 100 г 3 А молекулярного сита, находящегося в боковом ответвлении дополнительной воронки. Через 4 ч реакция завершалась (тонкослойная хроматография, 10% Е1ОН в Е1ОАс). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и промывали 100 мл ледяного холодного 1М №1ОН. Водный слой промывали 2x100 мл СНС1₃. Комбинированные органические слои промывали 100 мл воды, высушивали над №₂8О₄ и концентрировали в вакууме. После быстрого высушивания образца под вакуумом (0,1 мм Нд) получали 600 мг неочищенного бис-бензоксазина.

Хроматографией на 75 г силикагеля с Е1ОАс получали 360 мг бесцветного твердого вещества. Твердое вещество повторно кристаллизовали, растворяя его в 1 мл СНС1₃ и медленно добавляя 30 мл эфира. Выход составлял 260 мг (36%) бесцветных кристаллов со следующими свойствами. Т.пл.= 170171°С. ΙΒ (тонкая пленка): 1665, 1638 и 1453 см^-1. Ί1 ЯМР (500 МГц, СИСЕ) δ 7,53 (8, 1Н), 7,52 (1Н, 8), 5,34 (1Н, 1, 1=6,0 Гц), 5,33 (2Н, т), 3,84 (1Н, т), 3,85 (2Н, т), 3,63 (1Н, т), 3,45 (2Н, 1, 1=6,7 Гц), 3,38 (2Н, 1, 1=6,6 Гц), 2,71 (2Н, т), 2,42 (1Н, т), 2,23 (1Н, т), 2,14 (1Н, т), 1,97 (2Н, т), 1,95 (1Н, т) и 1,85 ррт (2Н, т).

Пример 57. Получение (К,8)-3-(гидроксиметил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'4,5]бензо[е]-1,3-оксазапергидроин-4,10-диона.

Продукт (2,7 г, 10 ммоль) из примера 7 нагревали под атмосферой аргона при перемешивании до 180-200°С в течение 3 мин с 8,0 г (48,4 ммоль) 2,4-диметоксибензиламина. После охлаждения реакционной смеси до 100°С ее растворяли в 100 мл СНС1₃ и промывали 100 мл 3М НС1 и 100 мл воды. Органический раствор высушивали над Мд8О₄ и концентрировали в вакууме для получения 10 г неочищенного промежуточного продукта (одно пятно на тонокслойной хроматографии с Е1ОАс). Неочищенный промежуточный продукт растворяли в 50 мл ТРА под атмосферой аргона. Через 2 ч тонкослойная хроматография не показывала наличие исходного вещества. Раствор ТРА наливали медленно в 300 мл насыщенного водного NаНСΟ, а осадок собирали фильтрацией. После быстрого высушивания на вакуумной линии выход промежуточного продукта салициламида составлял 3,0 г.

К 3,0 г салициламида в 20 мл 37% водного формальдегида добавляли 20 мл муравьиной кислоты и полученную суспензию помещали с флегмой под атмосферой аргона. Полученный раствор дефлегмировали в течение 3 ч, после чего большую часть растворителя дистиллировали. После того, как полученный остаток охлаждали до комнатной температуры, его суспендировали в 200 мл холодного 1М №1ОН. Продукт экстрагировали из водного раствора с 5x150 мл СНС1₃. Комбинированные органические фракции высушивали над №18О₄ и концентрировали в вакууме для получения 1,7 г неочищенного продукта (глав

- 30 011034 ным образом, одно пятно на тонкослойной хроматографии с ЕЮАс). Хроматографией с 1:1 СНС1₃/ЕЮАс на 200 г силикагеля получали 1,1 г продукта (одно пятно на тонкослойной хроматографии), который кристаллизовали от СНС1₃/диэтитового эфира для получения 900 мг продукта со следующими свойствами. Т.пл.=194-196°С. ΙΒ (КВг) 3373, 1677, 1485, 1454 и 1291 см^-1. Ή ЯМР (500 МГц С1)С1_;) δ 7,49 (1Н, к), 7,45 (1Н, к), 5,46 (1Н, !, 1=6.0 Гц), 5,32 (2Н, к), 5,04 (2Н, к), 4,05 (1Н, Ьг к), 3,84 (1Н, т), 3,62 (1Н, т), 2,44 (1Н, т), 2,26 (1Н, т), 2,14 (1Н, т) и 1,95 ррт (1Н, т).

Пример 58. Получение ^,8)-2^3^684-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3оксазапергидроин-4,10-диона.

О

В 40 мл сухого толуола суспендировали 158 мг (0,54 ммоль) продукта из примера 58 под атмосферой аргона при перемешивании. После дефлегмирования в течение 1 ч реакционную смесь охлаждали и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в 20 мл гексана и восстанавливали вакуумной фильтрацией с получением 135 мг (95%) продукта, который имел следующие свойства. Т.пл.=270-275°С бес. ΙΒ: (КВг) 3183, 3055, 1695, 1677, 1664, 1454 и 1069 см^-1. ^!Н ЯМР (300 МГц, С1)С1_;) δ 7,57 (1Н, к), 7,56 (1Н, к), 6,42 (1Н, Ьг к), 5,47 (1Н, !, 1=6,0 Гц), 5,22 (1Н, к), 5,21 (1Н, к), 3,83 (1Н, т), 3,63 (1Н, т), 2,45 (1Н, к), 2,25 (1Н, к), 2,14 (1Н, к) и 1,96 ррт (1Н, к). Ь8-МС: (С-18) показывает отдельный пик (М+Н) 261.

Пример 59. Получение 3,8-бис(2-гидроксиэтил)-2Н,7Н-1,3-оксазапергидроино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3оксазин-4,9-диона.

К 40 мл безводного этаноламина добавляли 4,0 г (15,7 ммоль) диэтил-(2,5)-дигидрокситерефталата. Полученный раствор дефлегмировали в течение 18 ч под атмосферой аргона. Реакционную смесь охлаждали до 100°С и затем наливали в 200 мл 3Ν НС1. Горячий кислый раствор медленно охлаждали до комнатной температуры с образованием большого количества бледно-желтых кристаллов. Твердые вещества собирали вакуумной фильтрацией, промывали 3x50 мл холодной воды и затем сразу высушивали в вакууме (200 мкг Нд) для получения 2,5 г (56%) промежуточного продукта диамида в виде бледно-желтого твердого вещества со следующими свойствами: СВМ8 (т+1), 285,1 ати; Б8-МС (ПС) указывают на 100% чистоту.

Диамид растворяли в 20 мл дефлегмированного безводного НСО2Н, а раствор обрабатывали 40 мл безводного СН₂С1₂, 6,0 г (66,7 ммоль) триоксана, 1,0 г ί'ιι8Ο.·ι и 5 капель Н₂8Ο₄. Полученную суспензию сохраняли и сразу дефлегмировали под атмосферой аргона. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь обрабатывали целитом, растворяли 300 мл СН₂С1₂ и затем фильтровали. Фильтрат промывали 3x100 мл насыщенного водного NаНСΟ₃, высушивали над Ν-πδΟ.^ и высушивали в вакууме для получения затвердевающегося остатка. Хроматографией на силикагеле остатка в ЕЮАс получали 1,9 г (33%) диформиата вышеупомянутого бис-бензоксазина в виде бесцветного прозрачного твердого вещества со следующими свойствами: С.Ч-М8 (т+1) 364,9 ати.

К 1,9 г (5,2 ммоль) диформита в 200 мл горячего МеОН добавляли 12 капель 10Н водного №ЮН. Полученный раствор перемешивали и дефлегмировали в течение 6 ч под атмосферой аргона, затем охлаждали до комнатной температуры. Твердые вещества, которые образовывались после охлаждения, собирали и промывали 3x20 мл холодного МеОН, затем высушивали под вакуумом в течение 18 ч при комнатной температуре (200 мкг Нд). Это дало 580 мг бис-бензоксазиндиола (36%). Белые волокнистые иглы имели следующие свойства. Т.пл.=237-238°С. ΙΒ: 3443, 2953, 1659, 1494, 1452, 1299, 1167, 1050, 1028, 906, 770, 748. БС-М8 (О) указывают на 100% чистоту (ПС) с т+1 при 309,0 ати: ¹Н ЯМР (300 МГц, диметилсульфоксид б⁶) δ 7,37 (1Н, к), 5,32 (4Н, к), 4,86 (2Н, к) и 3,55 ррт (8Н, к). ¹³С ЯМР (75,45 МГц, диметилсульфоксид б⁶) δ 159,81, 152,00, 123,15, 114,72, 78,95, 59,07 и 47,21 ррт. Другие 450 мг менее чистого диола восстанавливали после концентрации материнских растворов, получая выход гидролиза до 83%.

Пример 60. Получение 3,8-бис(2-метоксиэтил)-2Н,7Н-1,3-оксазапергидроино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3оксазин-4,9-диона.

- 31 011034

К 405 мг (1,31 ммоль) диола (продукт из примера 60) в 15 мл безводного диметилформамида добавляли 120 мг (3 ммоль) 60% диспергированного маслом ИаН, затем 5 мл (81 ммоль) Ме! Наблюдали значительное выделение газа, сопровождаемое обильным осаждением. Твердые вещества повторно растворяли в течение более 20 мин для получения светлого желтого раствора. Тонкослойная хроматография (1:1, гексан: ЕЮАс) не показывала наличия исходного вещества. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток повторно кристаллизовали из 15 мл толуола. Таким образом, получали 250 мг (57%) продукта со следующими свойствами. Т.пл.= 149-150°С. РНК. 2922, 1672, 1487, 1455, 1305, 1103, 1019, 747 см^-1. СРМ8: (т+1) 336,9 ати. ^!Н ЯМР (500 МГц, СИСЕ) δ 7,56 (2Н, 8), 5,23 (4Н, 8), 3,74 (4Н, 1, 1=5,1 Гц), 3,58 (4Н, 1, 1=5,1 Гц) и 3,35 ррт (6Н, 8).

Пример 61. Получение 3-этил-9а-гидро-2Н-1,3-оксазапергидроино[6,5-д]пирролидино[2,1-Ь]хиназолин-4,10-диона.

О

К тщательно перемешиваемому раствору 20 г (84 ммоль) диэтилгидрокситерефталата в 200 мл безводного СНС13 добавляли 80 мл (160 ммоль) 2,0М раствора А1Ме3 в толуоле. Добавление проводили медленно под атмосферой аргона, а для контроля температуры использовали силиконовую масляную ванну комнатной температуры. После прекращения довольно энергичного выделения газа (СН₄) реакционную смесь нагревали с флегмой. После дефлегмирования в течение 18 ч и охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь наливали в 500 мл ледяного холодного 3Ν НС1 и полученную суспензию перемешивали в течение 30 мин. После разделения слоев водный слой экстрагировали с 3x200 мл ЕЮАс. Комбинированные органические слои высушивали над Иа₂8О₄ и концентрировали в вакууме с получением 17 г (86%) промежуточного продукта фенолического диамида. Это вещество было одним пятном на тонкослойной хроматографии (ЕЮАс) и имело следующие характеристики: РПК 3283, 1638, 1598, 1552 см^-1, КВг.

К 6,5 г (27 ммоль) фенолического диамида в 200 мл безводного СН₂С1₂ добавляли 6,5 г Си8О₄, 2,3 г (10 ммоль) камфорсульфоновой кислоты, 36 г (400 ммоль) триоксана и 10 капель Н₂8О₄ при быстром перемешивании. Полученную суспензию нагревали с флегмой под атмосферой аргона и дефлегмировали в течение 72 ч. Реакционную смесь концентрировали до 100 мл простой дистилляцией, при этом тонкослойная хроматография ЕЮАс не показывала наличия исходного материала. Реакционную смесь разбавляли до 400 мл с помощью СН₂С1₂ и затем фильтровали через целит. Фильтрат промывали 100 мл 1Ν ИаОН, высушивали над Иа₂8О₄ и концентрировали в вакууме, получая 6,0 г неочищенного промежуточного продукта бензоксазина. Неочищенный бензоксазин хроматографировали на 200 г силикагеля (ЕЮАс), получая 4,0 г (59%) промежуточного продукта с одним пятном на тонкослойной хроматографии и следующими характеристиками: РНК. 3327, 1664, 1641, 1552, 1428, 1329.

Нитрование промежуточного продукта бензоксазина проводили следующим образом. К 50 мл Н₂8О₄ в 10°С добавляли 2,5 г (10 ммоль) бензоксазина под атмосферой аргона. Через 30 мин при 10°С получали гомогенный раствор и добавляли по каплям 20 мл (443 ммоль) 90% НИО₃. Через 45 мин при той же температуре исходное вещество не обнаруживалось с помощью тонкослойной хроматографии (1:1, гексан/ЕЮАс), а в реакционной смеси образовывалось очищенное твердое вещество. Реакционную смесь наливали в 200 мл размельченного льда. После того, как лед растаял, смесь экстрагировали с 4х 100 мл СНС1₃. Затем слой хлороформа промывали 200 мл водного ИаНСО₃, высушивали над Иа₂8О₄ и концентрировали в вакууме для получения 2,8 г бледно-желтого твердого вещества. Твердое вещество повторно кристаллизовали растворением его в 30 мл горячего хлороформа и разбавлением раствора до 150 мл эфиром. После охлаждения до комнатной температуры 2,3 г (78%) твердого промежуточного продукта нитробензоксазина собирали вакуумной фильтрацией. Продукт имел следующие характеристики: одно пятно на тонкослойной хроматографии (1:1 гексан/ЕЮАс). 'Н ЯМР (500 МГц, СОС1₃) δ 8,47 (1Н, 8), 7,06 (1Н, 8), 6,33 (1Н, т), 5,30 (2Н, 8), 3,59 (2Н, ф 1=4,32 Гц), 3,50 (2Н, ф 1=4,22 Гц), 1,28 (3Н, 1, 1=4,62 Гц) и 1,26 ррт (3Н, 1, 1=4,35 Гц).

К 2,0 г (6,6 ммоль) нитробензоксазина в 60 мл 20% НОАс/ОАс2 медленно добавляли 15 г (220 ммоль) ИаИО₂. Добавление проводили по 2 ч небольшими частями при тщательном перемешивании при 5-10°С. Реакционную смесь оставляли при 0°С в течение 18 ч, в этот момент времени тонокослойная хроматография (1% Е1ОН/Е1ОАс) показывала полное использование исходного вещества. Смесь разбавляли до 500 мл с помощью насыщенного водного ИаНСО₃, затем экстрагировали с 4x100 мл СН₂С1₂, который высушивали над Иа₂8О₄ и концентрировали в вакууме. Выход составлял 1,9 г (98%) твердого эфира нитробензоксазина. Это вещество имело следующие характеристики: РНК. 1725,1679, 1532, 1342 см^-1. СК М8: (т+1) 295 ати. Ή ЯМР (500 МГц, СОСР) δ 8,90 (1Н, 8), 7,14 (1Н, 8), 5,35 (2Н, 8), 3,99 (2Н, φ 1=4,2 Гц), 3,66 (2Н, ф 1=4,3 Гц), 1,27 (3Н, 1, 1=4,4 Гц) и 1,12 ррт (3Н, 1, 1=4,3 Гц).

К 1,0 г (3,4 ммоль) эфира нитробензоксазина в 40 мл окуриваемого аргоном Е1ОАс добавляли 500 мг

- 32 011034

10% Ρά/С катализатор и полученную суспензию гидрогенизировали в течение 2 ч при 50-60 фунтах на кв.дюйм. Катализатор удаляли фильтрацией, а растворитель удаляли в вакууме, поскольку тонкослойная хроматография не указывала на наличие исходного вещества. 900 мг (100%) бесцветного твердого анилинового промежуточного продукта были на 91% чистыми БС-М8 СПС), и тонкослойная хроматография указывала на одно пятно.

К 400 мкл (5 ммоль) 2-пирролидина в 15 мл безводного толуола под атмосферой аргона добавляли капельным способом 250 мкл РОСЕ при перемешивании. Через 1 ч при комнатной температуре добавляли 1,1 г (4,2 ммоль) анилина (объединенного) и реакционную смесь дефлегмировали под атмосферой аргона в течение 6 ч, в этот промежуток времени согласно данным тонкослойной хроматографии (ЕЮАс) исходное вещество не присутствовало. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и обрабатывали 50 мл насыщенного NаНСΟз. Водный слой экстрагировали с 5x50 мл СНС1₃ и органические слои комбинировали, высушивали над Мд8О₄ и концентрировали в вакууме для получения 1,3 г полутвердого неочищенного продукта. Неочищенный продукт хроматографировали на 50 г силикагеля для получения 400 мг (33%) бледно-коричневого продукта со следующими характеристиками. Т.пл.=252253°С. ΕΠΒ 1659, 1453 и 1294 см^-1. СГМ8 (т+1) 286 ати. Ή ЯМР (500 МГц, СЕС1_;) δ 8,27 (1Н, к), 7,80 (1Н, к), 5,26 (2Н, к), 4,19 (2Н, ί, 4=7,3 Гц), 3,65 (2Н, ф 1=7,2 Гц), 3,18 (2Н, ί, 1=7,6 Гц), 2,30 (2Н, т, 1=7,6 Гц) и 1,28 ррт (3Н, ί, 1=7,2 Гц).

Пример 62. Получение (Β,8)-6-(пирролидинилкарбонил)-3аН-бензо[е]пирролидино[2,1-Ь]-1,3-оксазин-9-она.

К 1,5 г (6 ммоль) продукта из примера 3 в 40 мл сухого, комнатной температуры, толуола добавляли под атмосферой аргона 0,75 мл пирролидина (9 ммоль), затем 4,5 мл 2,0 молей Ме₃А1 в гексане (9,0 ммоль). После перемешивания в течение 0,5 ч, реакционную смесь нагревали и дефлегмировали в течение 3 ч, причем в этом промежутке времени исходного материала не оставалось (тонкослойная хроматография, ЕЮАс). Реакционную смесь охлаждали до 10°С и перемешивали с 50 мл 1М НС1 вместе с 200 мл ЕЮАс. Водный слой экстрагировали с 3x100 мл ЕЮАс. Комбинированные органические слои промывали 50 мл соляного раствора, 50 мл 1М водного №1ОН, 2x50 мл соляного раствора и затем высушивали над Мд8О₄. После удаления растворителя и хроматографии на 100 г силикагеля выход составлял 0,700 г (70%).

Примеры 63-76: следующие соединения синтезировали в соответствии с методиками, в основном, похожими на те, которые использовались в ранее описанных примерах для получения родственных соединений, где применялись реакции и методы, известные специалистам в данной области техники. Обнаружено, что все продукты проявляют желаемую активность на электрофизиологическом экране для активности АМРА-рецептора, как описано выше. Во всех случаях молекулярное значение для ЕС_2х (как описано в табл. 2 выше) было менее 10 мкМ.

Пример 63. (Β, 8)-2,2,3-Триметил-6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазапергидроино[5',6'-4,5]бензо [е]-1,3-оксазин-4,10-дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СЕС1_;) δ 7,54 (1Н, к), 7,46 (1Н, к), 5,47 (1Н, ί, 1=5,8 Гц), 3,83 (1Н, т), 3,61 (1Н, т), 3,07 (3Н, к), 2,45 (1Н, т), 2,26 (1Н, т), 2,14 (1Н, т), 1,96 (1Н, т), 1,65 (3Н, к) и 1,59 ррт (3Н, к).

Пример 64. (Β,8)-3-Циклопропил-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазапергидроино[5',6'-5,4] бензо [е]-1,3-оксазин-4,10-дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СЕС1_;) δ 7,57 (1Н, к), 7,51 (1Н, к), 5,45 (1Н, ί, 1=5,8 Гц), 5,17 (2Н, к), 3,83 (1Н, т), 3,62 (1Н, т), 2,69 (1Н, т), 2,44 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,13 (1Н, т), 1,95 (1Н, т), 0,95 (2Н, т) и 0,81 ррт (2Н, т).

Пример 65. (Β,8),(Β,8)-8-Ε идрокси-3 -метил-2Н,6аН-пирролидино [2,1-3 ',2']- 1,3-оксазапергидроино [5',6'-5,4]бензо[е]-1,3-оксазин-4,10-дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СЕС1_;) δ 7,55 (1Н, к), 7,49 (1Н, к), 5,51 (1Н, άά, 1=3 Гц и 6,6 Гц), 5,16 (2Н, т), 4,54 (1Н, т), 4,05 (1Н, т), 3,60 (1Н, άά, 1=4,5 Гц и 12,6 Гц), 3,12 (3Н, к) и 2,42-2,66 ррт (2Н, т).

Пример 66. (Β,8),(Β,8)-2-[(2-Оксопирролидинил)меτил]-2Н,3Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']оксазапергидроино[5',6'-4,5]бензо[е]-1,3-оксазин-4,10-дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СЕС1_;) δ 7,553 (0,5Н, к), 7,543 (0,5Н, к), 7,540 (0,5Н, к), 7,524 (0,5Н, к), 7,120 (0,5Н, Ьг к), 7,084 (0,5Н, Ьг к), 5,464 (1Н, ίά, 1=6,3 Гц, 1=1,2 Гц), 5,40 (1Н, т), 3,5-4,0 (6Н, т), 2,4-2,55 (3Н, т) и 1,90-2,34 ррт (5Н, т).

Пример 67. (3Β),(Β,8)-3-Бензил-2Н,7аН-пирролидино[2,1-2',3']-1,3-оксазапергидроино[5',6'-5,4]бензо [£]-1,4-оксазепин-5,11 -дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СЕС1_;) δ 7,63-7,15 (7Н, т), 6,23 (1Н, ΝΉ), 5,46 (1Н, ί, 1=5,9 Гц), 4,28-4,16 (2Н, т), 3,88-3,80 (2Н, т), 3,66-3,58 (1Н, т), 2,96-2,76 (2Н, т), 2,48-2,39 (1Н, т) и 2,31-1,90 ррт (3Н, т).

- 33 011034

Пример 68. (К,8)-4-Метил-2Н,3Н,7аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазапергидроино[5',6'-4,5]бензо [ί]-1,4-оксазепин-5,11 -дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 7,57 (1Н, 8), 7,35 (1Н, 8), 5,47 (1Н, 1, 1=5,9 Гц), 4,43-4,27 (2Н, т), 3,883,80 (1Н, т), 3,66-3,52 (2Н, т), 3,44-3,36 (1Н, т), 3,22 (3Н, 8), 2,50-2,40 (1Н, т) и 2,32-1,87 ррт (3Н, т).

Пример 69. (В,8)-2Н,3Н,4Н,7аН-Пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазапергидроино[5',6'-4,5]бензо[1]1,4-оксазепин-5,11-дион.

'11 ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 7,61 (1Н, 8), 7,46 (1Н, 8), 6,81 (1Н, ΝΉ), 5,47 (1Н, 1, 1=5,7 Гц), 4,40-4,27 (2Н, т), 3,89-3,80 (1Н, т), 3,66-3,58 (1Н, т), 3,51-3,38 (2Н, т), 2,49-2,40 (1Н, т) и 2,32-1,88 ррт (3Н, т).

Пример 70. (3К),(К, 8)-3-((18)-1-Гидрокси-2-метоксиэтил)-6аН-хромано[7,6-е]пирролидино[2,1-Ь]1,3-оксазапергидроин-4,10-дион.

Ή ЯМР ( 300 МГц, СОС1₃) δ 7,56 (1Н, 8), 7,46 (1Н, 8), 5,44 (1Н, 1, 1=5,7 Гц), 4,62-4,57 (1Н, т), 4,424,34 (1Н, т), 4,23-4,15 (1Н, т), 3,89-3,80 (1Н, т), 3,66-3,55 (2Н, т), 3,40 (3Н, 8), 3,24-3,04 (2Н, т), 2,502,40 (1Н, т) и 2,30-1,87 ррт (3Н, т).

Пример 71. (К,8)-3-(2-Метоксиэтил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']-1,3-оксазапергидроино[5',6'-

5.4] бензо [е]- 1,3-оксазин-4,10-дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 7,55 (1Н, 8), 7,52 (1Н, 8), 5,46 (1Н, 1, 1=5,9 Гц), 5,23 (2Н, 8), 3,84 (1Н, б1, 1=12,1 и 7,0 Гц), 3,73 (2Н, т), 3,63 (1Н, т), 3,57 (2Н, 1, 1=4,8 Гц), 3,35 (3Н, 8), 2,44 (1Н, т), 2,25 (1Н, т), 2,14 (1Н, т) и 1,96 ррт (1Н, т).

Пример 72. (К,8)-3-(2-Фенилэтил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-2',3']-1,3-оксазапергидроино[5',6'-5,4] бензо [е]-1,3-оксазин-4,10-дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 7,55 (1Н, 8), 7,48 (1Н, 8), 7,23 (5Н, т), 5,45 (1Н, 1, 1=5,9 Гц), 4,87 (2Н, 8), 3,83 (1Н, т), 3,78 (2Н, 1, 1=7,3 Гц), 3,61 (1Н, т), 2,95 (2Н, 1, 1=7,3 Гц), 2,44 (1Н, т), 2,24 (1Н, т), 2,12 (1Н, т) и 1,95 ррт (1Н, т).

Пример 73. (К,8)-3-(3-Имидазолилпропил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-2',3']-1,3-оксазапергидроино [5',6'-5,4]бензо [е]-1,3-оксазин-4,10-дион.

'11 ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 7,56 (1Н, 8), 7,55 (1Н, 8), 7,53 (1Н, 8), 7,08 (1Н, 8), 6,98 (1Н, 8), 5,47 (1Н, 1, 1=5,9 Гц), 5,11 (1Н, б, 1=11,4 Гц), 5,08 (1Н,б, 1=11,0 Гц), 4,04 (2Н, 1, 1=7,0 Гц), 3,85 (1Н, б1, 1=11,7 и 7,3 Гц), 3,62 (1Н, т), 3,53 (2Н, т), 2,45 (1Н, т), 2,26 (1Н, т), 2,14 (2Н, 1, 1=7,0 Гц), 2,13 (1Н, т) и 1,95 ррт (1Н, т).

Пример 74. (К,8)-3-(2-(2-Пиридил)этил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-2',3']-1,3-оксазапергидроино [5',6'-5,4]бензо[е]-1,3-оксазин-4,10-дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 8,54 (1Н, б, 1=4,4 Гц), 7,60 (1Н, 1б, 1=7,3 и 1,5 Гц), 7,54 (1Н, 8), 7,47 (1Н, 8), 7,17 (2Н, т), 5,45 (1Н, 1, 1=5,9 Гц), 4,97 (2Н, 8), 3,97 (2Н, 1, 1=7,0 Гц), 3,84 (1Н, б1, 1=11,7 и 7,3 Гц), 3,61 (1Н, т), 3,15 (2Н, 1, 1=7,0 Гц), 2,44 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,13 (1Н, т) и 1,96 ррт (1Н, т).

Пример 75. (К,8)-3-(2-(2-Тиенил)этил)-2Н,6аН-пирролидино[2,1-3',2']1,3-оксазапергидроино[5',6'-

5.4] бензо [е]- 1,3-оксазин-4,10-дион.

Ή ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 7,56 (1Н, 8), 7,50 (1Н, 8), 7,16 (1Н, б, 1=5,1 Гц), 6,92 (1Н, т), 6,86 (1Н, б, 1=3,7 Гц), 5,46 (1Н, 1, 1=5,9 Гц), 4,93 (2Н, 8), 3,84 (1Н, т), 3,80 (2Н, 1, 1=6,6 Гц), 3,62 (1Н, т), 3,20 (2Н, 1, 1=6,6 Гц), 2,44 (1Н, т), 2,27 (1Н, т), 2,12 (1Н, т) и 1,96 ррт (1Н, т).

Пример 76. (К,8)-3-(2-(3-Пиридил)этил)-2Н,6аН-пирролидино[2'',1''-2',3']-1,3-оксазапергидроино [5',6'-5,4]бензо [е]-1,3-оксазин-4,10-дион.

'11 ЯМР (300 МГц, СОС1₃) δ 8,50 (2Н, т), 7,58 (1Н, δ, 1=7,7, 2,2 и 1,6 Гц), 7,55 (1Н, 8), 7,51 (1Н, 8), 7,24 (1Н, δ, 1=7,9, 4,9 и 0,9 Гц), 5,46 (1Н, 1, 1=5,9 Гц), 4,98 (1Н, б, 1=10,2 Гц), 4,96 (1Н, б, 1=10,2 Гц), 3,80 (3Н, т), 3,62 (1Н, т), 2,97 (2Н, 1, 1=7,0 Гц), 2,44 (1Н, т), 2,28 (1Н, т), 2,13 (1Н, т) и 1,97 ррт (1Н, т).

Пример 77. Энантиомерное обратное растворение соединения по примеру 1.

Обратного растворения трех компонентов из примера 1 достигали комбинацией фракционной кристаллизации и колоночной хроматографии на хиральном носителе. 0,7 г образца растворяли в 20 мл СН2С12 и разбавляли 7 мл СС14. Объем снижали до 25 мл, нагревая и далее растворяя 4 мл СС14. Раствор выпаривали нагреванием, пока не начиналась кристаллизация, и затем оставляли охлаждаться до температуры окружающей среды. Собранные кристаллы промывали СС14/СН2С12 и СС14. Вес преимущественно мезоформы составлял 165 мг. Материнский раствор далее концентрировали и разбавляли СС14, чтобы вызвать кристаллизацию второй партии вещества, которую собирали и промывали СС1₄, для получения 178 мг вещества, которое содержало только приблизительно 8% мезоформы.

Вещество (19,8 мг) из второй партии выше растворяли в 2 мл теплого этанола, из которого 0,5 мл вводили на колонку (20 ммх250 см) СЫга1рак АО (Эа1се1) и элюировали с градиентом 25-40% этанол/гексан в 3 мл/мин. Фракции из многократных инъекций объединяли и кристаллизовали для получения 5,84 мг первого энантиомера (1А), который был активен на АМРА-рецепторе при электрофизиологическом анализе, и 3,51 мг второго энантиомера (1В), который демонстрировал значительно меньшую активность, чем первый элюированный энантиомер.

Пример 78. Физиологическое тестирование ίη νίίτο.

Физиологическое действие соединений согласно изобретению тестировали ίη νί1το на первичных

- 34 011034 культурах корковых нейронов крыс, как описано Нат111, О.Р., е! а1. в РДидегз АгсН. 391: 85-100 (1981) или на срезах гиппокампа крысы согласно следующей методике. Эксцитатные ответы (поле ЭПСП) измеряли в срезах гиппокампа, которые находились в регистрирующей камере, непрерывно перфузируемой искусственной цереброспинальной жидкостью (ИЦСЖ). В течение 15-30-минутного интервала, перфузируемую среду переключали на одну из них, содержащую различные концентрации тестируемых соединений. Ответы, собранные сразу перед этим и в конце перфузии препарата, были наложены для вычисления процентного увеличения в ЭПСП амплитуде.

Для проведения этих исследований гиппокамп удаляли под анестезией у 2-месячных крыс линии 8ргадие-Оа^1еу и препарировали срезы ш уйго (400 мкм толщины), которые содержали в интерфейсной камере при 35°С, используя обычные методики (см., например, Оип\у|бб1е апб Ьупсй, I. Рйузю1. 276: 353367 (1978)). Камеру постоянно перфузировали при 0,5 мл/мин с АС8Р, содержащем (в мМ): №1С1 124, КС1 3, КН₂РО₄ 1,25, Μд8Ο₄ 2,5, СаС1₂ 3,4, NаΗСΟ₃ 26, глюкозу 10 и Ь-аскорбат 2. Биполярный стимулирующий электрод из нихрома помещали в дендритный слой (з!га!ит габ1а!ит) гиппокампальной подобласти СА1 близко к границе подобласти СА3.

Импульсы тока (0,1 мс) через стимулирующий электрод активизировали популяцию комиссуральных волокон Шаффера, которые образуются из нейронов в пересечении СА3 и заканчиваются в синапсах на дендритах СА1 нейронов. Активация этих синапсов заставляет их высвобождать глутамат передатчика. Глутамат связывается с постсинаптическими АМРА-рецепторами, которые затем быстро открывают взаимодействующий с ионами канал и позволяют току натрия входить в постсинаптическую клетку. Этот ток вызывает разность потенциалов во внеклеточном пространстве (область ЭПСП), которая регистрируется высоким импедансом регистрирующего электрода, помещенного в середине з!га!ит габ1а!ит СА1.

Для экспериментов, собранных в таблице, интенсивность потока возбуждения была отрегулирована для получения полумаксимальных ЭПСП (типично приблизительно 1,5-2,0 мВ). Парный пульс возбуждения подавали каждые 40 с с интервалом межпульсов 200 мс (см. ниже). Область ЭПСПов второго ответа переводили в цифровую форму и анализировали для определения амплитуды. Если ответы были стабильными в течение 15-30 мин (основание), то тестируемые составы добавляли к перфузионным линиям на период приблизительно 15 мин. Затем перфузию изменяли обратно на обычный ИЦСЖ.

Использовали возбуждение парного пульса после возбуждения комиссуральных волокон Шаффера, в частности активизировали межнейроны, которые вырабатывают ингибиторный постсинаптический потенциал (ИПСП) в пирамидальных клетках СА1. Такой ИПСП передачи сигналов по каналу прямой связи обычно устанавливается после того, как ЭПСП достигает своего пика. Это ускоряет реполяризацию и сокращает стадию распада ЭПСП и таким образом может частично маскировать действие тестируемых соединений. Одна из релевантных особенностей передачи сигналов по каналу прямой связи ИПСП состоит в том, что он не может быть реактивирован на нескольких сотен миллисекунд после импульса возбуждения. Это явление можно использовать для устранения ИПСП путем подачи парного импульса с интервалом в 200 мс и используя для анализа данных второй ответ (помеченный значком прим).

Первая колонка данных табл. 1 показывает оценку концентрации каждого тестируемого соединения, которое должно было увеличивать амплитуду области ЭПСП на 10% выше значения основного уровня. В большинстве случаев значения оценивали интерполяцией, но путем экстраполяции из определенных значений для остальных.

Пример 79. Поведенческое тестирование.

Третья колонка данных в табл. 1 показывает МЭД для эффективного улучшения выполнения задания в радиальном лабиринте с 8 ответвлениями, с помощью которого проводят тестирование на улучшение памяти и познания (МЭД_С). Это тестирование ранее было описано 8!аиЬ11 е! а1., ΡNΑ8 91: 777-781 (1994) и Ьупсй и Кодегз, патент США № 5747492.

Хотя изобретение описано со ссылками на определенные способы и примеры осуществления, следует понимать, что могут быть сделаны различные модификации, которые не выходят за рамки изобретения.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединения, имеющие структуру 1а или 1Ь где О и О' обозначают независимо водород, -СН₂-, -О-, -8-, алкил, гидроксиалкил или алкоксиалкил, К¹ обозначает водород, алкил или вместе с О может быть кольцом циклоалкила,

К² может отсутствовать или, если присутствует, может быть -СН₂-, -СО-, -СН₂СН₂-, -СН₂СО-, -СН₂О-, -СКК'- и -СОХЕ-,

- 35 011034

Υ обозначает водород или -ОК³ или служит для связывания ароматического кольца с А или А' как единственной связью, =Ν- или -ΝΚ-,

К³ обозначает водород, алкил, замещенный алкил или служит для связывания присоединенного кислорода с А, когда обозначает низший алкилен, такой как метилен или этилен, или замещенный низший алкилен, такой как -СКК'-, связывая ароматическое кольцо с А для образования замещенного или незамещенного 6-, 7- или 8-членного кольца или связи, связывающей кислород с А для образования 5- или 6членного кольца,

А обозначает -ΝΚΚ', -ОК, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, арил, замещенный арил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, таких как кислород, азот или сера,

А' обозначает -ΝΚΚ',

К обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилкалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил,

К' отсутствует или обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или может быть соединен с К для образования 4-8-членного кольца, которое может быть замещено X и может быть связано с Υ для образования 6-членного кольца и которое может произвольно содержать 1 или 2 гетероатома, например кислород, азот или серу,

X и X' обозначают независимо К, гало, -СО₂К, -ΟΝ, -ΝΡΡ'. -МИСОК', -ЫО₂, -Ν₃ или -ОК.
2. Соединение по п.1 со структурой 1а, как указано выше, где β и 0' обозначают независимо водород, -СН₂-, -О-, -8-, алкил, гидроксиалкил или алкоксиалкил,

К¹ обозначает водород, алкил или вместе с О может быть кольцом циклоалкила,

К² может отсутствовать или, если присутствует, может быть -СН₂-, -СО-, -СН₂СН₂-, -СН₂СО-, -СН₂О- или -СОНК-,

Υ обозначает водород или -ОК³ или служит для связывания ароматического кольца с А как единственной связью, =Ν- или -ΝΠ-,

К³ обозначает водород, алкил, замещенный алкил или служит для связывания присоединенного кислорода с А, когда является низшим алкиленом, таким как метилен или этилен, или замещенным низшим алкиленом, таким как -СКК'-, связывая ароматическое кольцо с А для образования замещенного или незамещенного 6-, 7- или 8-членного кольца или связи, связывающей кислород с А для образования 5- или 6-членного кольца,

А обозначает -ИКК', -ОК, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, арил, замещенный арил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, таких как кислород, азот или сера;

К обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил,

К' отсутствует или обозначает водород, арил, арилкалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или может быть присоединен к К для образования 4-8-членного кольца, которое может замещаться X или связываться с Υ и которое может произвольно содержать 1 или 2 гетероатома, таких как кислород, азот или сера,

X и X' обозначают независимо К, гало, -СО₂К, 6Ν, -ΝΗΕ', -ХКСОК', -ЫО₂, -Ν₃ или -ОК.
3. Соединение по п.1 со структурой 1Ь, как указано выше, где β и 0' обозначают независимо водород, -СН₂-, -О-, -8-, алкил, гидроксиалкил или алкоксиалкил,

К¹ обозначает водород, алкил или вместе с О может быть кольцом циклоалкила,

К² может отсутствовать или, если присутствует, может быть -СН₂-, -СО-, -СН₂СН₂-, -СН₂СО-, -СН₂О- или -СОХК-,

Υ обозначает водород или -ОК³ или служит для связывания ароматического кольца с А как единственной связью, =Ν- или -ΝΠ-,

К³ обозначает водород, алкил, замещенный алкил или служит для связывания присоединенного кислорода с А', когда является низшим алкиленом, таким как метилен или этилен, или замещенным низшим алкиленом, таким как -СКК'-, связывая ароматическое кольцо с А' для образования замещенного или незамещенного 6-, 7- или 8-членного кольца или связи, связывающей кислород с А' для образования 5- или 6-членного кольца,

А' обозначает -ХКК',

К обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил,

К' обозначает водород, арил, арилкалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или может быть присоединен к К для образования 4-8-членного кольца, которое может замещаться X или связываться с Υ для образования 6-членного кольца и которое может произвольно содержать 1 или 2 гетероатома, таких как кислород, азот или сера,

X и X' обозначают независимо К, гало, -СО₂К, -СК, -ККК', -ККСОК', -КО₂, -Ν₃ или -ОК.
4. Соединение по любому из пп.1-3, в котором О и 0' обозначают -СН₂-, а К² обозначает -СН₂-.

- 36 011034
5. Соединение по любому из пп.1-4, в котором В¹ обозначает водород.
6. Соединение по любому из пп.1-3 или 5, в котором О и 0' обозначают -СН₂-, а В² обозначает -СН2СН2-.
7. Соединение по любому из пп.1-3 или 5, в котором 0' обозначает -СН₂-, В² обозначает -СН₂- и О обозначает -О- или -8-.
8. Соединение по любому из пп.1-3, 5 или 7, в котором О обозначает -О-.
9. Соединение по любому из пп.1-3, в котором О и 0' обозначают алкил, а В² отсутствует.
10. Соединение по любому из пп.1-3, в котором О и 0' обозначают алкил, В² отсутствует, а В¹ обозначает водород.
11. Соединение по любому из пп.1-2 или 10, в котором Υ обозначает -ОВ³ и А обозначает -ЫВВ', -ОВ, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалакилалкил, арил, замещенный арил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, таких как кислород, азот или сера.
12. Соединение по любому из пп.1-2 или 11, в котором А обозначает алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, арил, замещенный арил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, таких как кислород, азот или сера.
13. Соединение по любому из пп.1-2 или 12, в котором А обозначает алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 гетероатом, такой как кислород, азот или сера.
14. Соединение по любому из пп.1-13, в котором А или А', если имеется, обозначает -ЫВВ', В обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил, В' обозначает водород, арил, арилалкил, замещенный арил, замещенный арилалкил, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или может быть присоединен к В для образования 4-8-членного кольца, которое может замещаться X и связываться с Υ с помощью В³ и которое может произвольно содержать 1 дополнительный гетероатом, такой как кислород, азот или сера, а X и X' обозначают независимо В, гало, -СО₂В, -СЫ, -ЫВВ', -ЫВСОВ', -ЫО₂, -Ы₃ или -ОВ.
15. Соединение по любому из пп.1-13, в котором А или А', если имеется, обозначает -ЫВВ', В обозначает алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил, В' обозначает водород, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил или может быть присоединен к В для образования 4-8-членного кольца, которое может замещаться X и связываться с Υ с помощью В³ и которое может произвольно содержать 1 дополнительный гетероатом, такой как кислород, азот или сера, а X и X' независимо обозначают В, гало, -СО₂В, -СЫ, -ЫВВ', -ЫВСОВ', -ЫО₂, -Ы₃ или -ОВ.
16. Соединение по п.15, в котором А или А', если имеется, обозначает -ЫВВ' и В' присоединен к В для образования 4-8-членного кольца, которое может замещаться X и связываться с Υ с помощью В³ и которое может произвольно содержать 1 дополнительный гетероатом, такой как кислород, азот или сера, а X и X' обозначают независимо В, гало, -СО₂В, -СЫ, -ЫВВ', -ЫВСОВ', -ЫО₂, -Ы₃ или -ОВ.
17. Соединение по п.16, в котором А или А', если имеется, обозначает -ЫВВ', и В' присоединен к В для образования 5-членного кольца, которое может замещаться X и связываться с Υ с помощью В³ и которое может произвольно содержать 1 дополнительный гетероатом, такой как кислород, азот или сера, а X и X' обозначают независимо В, гало, -СО₂В, -СЫ, -ЫВВ', -ЫВСОВ', -ЫО₂, -Ы₃ или -ОВ.
18. Соединение по п.17, в котором А или А', если имеется, обозначает -ЫВВ', и В' присоединен к В для образования 5-членного кольца, которое может замещаться X и связываться с Υ с помощью В³ и которое может произвольно содержать 1 дополнительный гетероатом, такой как кислород, азот или сера, а X и X' обозначают независимо В, гало, -СО₂В, -СЫ, -ЫВВ', -ЫВСОВ', -ЫО₂, -Ы₃ или -ОВ.
19. Соединение по п.16, в котором А или А', если имеется, обозначает -ЫВВ', а В' присоединен к В для образования 5-членного кольца, которое связывается с Υ с помощью В³.
20. Соединение по п.16, в котором А или А', если имеется, обозначает -ЫВВ', а В' присоединен к В для образования 6-членного кольца, которое может замещаться X и связываться с Υ с помощью В³ и которое может произвольно содержать 1 дополнительный гетероатом, такой как кислород, азот или сера, а X и X' обозначают независимо В, гало, -СО₂В, -СЫ, -ЫВВ', -ЫВСОВ', -ЫО₂, -Ы₃ или -ОВ.
21. Соединение по любому из пп.1-10, в котором Υ обозначает -ОВ³.
22. Соединение по п.21, в котором В³ обозначает водород.
23. Соединение по любому из пп.1-3, в котором Υ обозначает водород.
24. Соединение по любому из пп.1-3, в котором Υ обозначает =Ы- или -ЫВ-.
25. Соединение по любому из пп.1-3, в котором Υ обозначает =Ы-.
26. Соединение по п.23, в котором А обозначает -ОВ, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, таких как кислород, азот или сера.
27. Соединение по п.23, в котором А или А', если имеется, обозначает -ЫВВ'.
28. Соединение по п.21, в котором А обозначает -ОВ, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероцикл или замещенный гетероцикл, содержащий 1 или 2 ге

- 37 011034 тероатома, таких как кислород, азот или сера, и А' отсутствует.
29. Соединение по п.21, в котором А или А', если имеется, обозначает -ΝΡΡ'.
30. Соединение по п.4, в котором Υ обозначает -ОВ³ или А или А', если имеется, обозначает -ΝΡΒ.
31. Соединение по п.30, в котором В' обозначает водород.
32. Способ лечения млекопитающего субъекта, страдающего от гипоглутаматергического состояния или дефицита количества или интенсивности эксцитатных синапсов или количества АМРАрецепторов, что приводит к нарушению памяти или других когнитивных функций, который включает введение указанному субъекту в фармацевтически приемлемом носителе эффективного количества соединения согласно любому из пп.1-31.
33. Способ лечения млекопитающего, в котором субъекту, страдающему от гипоглутаматергического состояния или дефицита количества или интенсивности эксцитатных синапсов или количества АМРА-рецепторов, в результате чего возникает кортиально/стриарный дисбаланс, приводящий к шизофрении или подобному шизофрении поведению, вводят в фармацевтически приемлемом носителе эффективное количество соединения согласно любому из пп.1-31.
34. Способ по п.33, в котором указанное состояние является шизофренией.
35. Способ по п.33, в котором указанное состояние является болезнью Паркинсона.
36. Фармацевтическая композиция для лечения млекопитающего субъекта, страдающего от гипоглутаматергического состояния или недостатка количества или интенсивности эксцитатных синапсов или количества АМРА-рецепторов, что приводит к нарушению памяти или других познавательных функций, включающая эффективное количество соединения согласно одному из пп.1-31 в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, добавкой или наполнителем.
37. Композиция по п.36, в котором указанное соединение включает приблизительно от 0,5 до 75 вес.% указанного соединения, а указанный носитель, добавка или наполнитель включают приблизительно от 25 до 95,5% указанной композиции.
38. Применение соединения по любому из пп.1-31 для изготовления лекарства для использования при лечении млекопитающего субъекта, страдающего от гипоглутаматергического состояния или недостатка количества или интенсивности эксцитатных синапсов или количества АМРА-рецепторов, что приводит к нарушению памяти или других познавательных функций.
39. Применение соединения по любому из пп.1-31 для изготовления лекарства для применения при лечении шизофрении.
40. Применение соединения по любому из пп.1-31 для изготовления лекарства для применения при лечении болезни Паркинсона.