EA009126B1 - Микроорганизмы для обработки почвы и способ их получения - Google Patents
Микроорганизмы для обработки почвы и способ их получения Download PDFInfo
- Publication number
- EA009126B1 EA009126B1 EA200400309A EA200400309A EA009126B1 EA 009126 B1 EA009126 B1 EA 009126B1 EA 200400309 A EA200400309 A EA 200400309A EA 200400309 A EA200400309 A EA 200400309A EA 009126 B1 EA009126 B1 EA 009126B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- microorganisms
- soil
- microorganism
- tillage
- strain
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 140
- 239000002689 soil Substances 0.000 title claims abstract description 90
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title abstract description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 title description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 31
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 74
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 40
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 35
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 25
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 22
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 22
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 22
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 22
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 14
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 12
- 238000003971 tillage Methods 0.000 claims description 12
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 11
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 11
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 11
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 11
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 11
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 11
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 10
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 10
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- -1 ferro Chemical compound 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 5
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 5
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 5
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 4
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 4
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 claims 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 claims 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 10
- 241000589938 Azospirillum brasilense Species 0.000 abstract 1
- 241000589149 Azotobacter vinelandii Species 0.000 abstract 1
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 abstract 1
- 241000194105 Paenibacillus polymyxa Species 0.000 abstract 1
- 241000589540 Pseudomonas fluorescens Species 0.000 abstract 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 73
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 32
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 29
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 21
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 21
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 241000894007 species Species 0.000 description 13
- 238000003359 percent control normalization Methods 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 11
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 11
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 11
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 10
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000011161 development Methods 0.000 description 9
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 9
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000589 Siderophore Substances 0.000 description 8
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 8
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 7
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 230000003570 biosynthesizing effect Effects 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 5
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 5
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 5
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 5
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 5
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 5
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101100480484 Rattus norvegicus Taar8a gene Proteins 0.000 description 4
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 4
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 4
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 4
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 4
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 4
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008121 plant development Effects 0.000 description 4
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 4
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 4
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 3
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 3
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 3
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- IXORZMNAPKEEDV-OBDJNFEBSA-N gibberellin A3 Chemical class C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)[C@H]1C(O)=O)C[C@H]2[C@]2(C=C[C@@H]3O)[C@H]1[C@]3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-OBDJNFEBSA-N 0.000 description 3
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 239000003864 humus Substances 0.000 description 3
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 230000001483 mobilizing effect Effects 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 3
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 3
- 150000003018 phosphorus compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 3
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 239000005980 Gibberellic acid Substances 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 229920001397 Poly-beta-hydroxybutyrate Polymers 0.000 description 2
- 229920000331 Polyhydroxybutyrate Polymers 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 2
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000010433 feldspar Substances 0.000 description 2
- IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N gibberellic acid GA3 Natural products OC(=O)C1C2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C=CC3O)C1C3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 238000004172 nitrogen cycle Methods 0.000 description 2
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 229910001577 potassium mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019731 tricalcium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000391 tricalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940078499 tricalcium phosphate Drugs 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N vitamin A aldehyde Natural products O=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 1
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 description 1
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000219357 Cactaceae Species 0.000 description 1
- 101100173447 Caenorhabditis elegans ger-1 gene Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 241001327708 Coriaria sarmentosa Species 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229930191978 Gibberellin Natural products 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 241000208818 Helianthus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- 102100039121 Histone-lysine N-methyltransferase MECOM Human genes 0.000 description 1
- 101001033728 Homo sapiens Histone-lysine N-methyltransferase MECOM Proteins 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 1
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010020943 Nitrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N Potassium ion Chemical compound [K+] NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020001027 Ribosomal DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 1
- CCAZWUJBLXKBAY-ULZPOIKGSA-N Tutin Chemical compound C([C@]12[C@@H]3O[C@@H]3[C@@]3(O)[C@H]4C(=O)O[C@@H]([C@H]([C@]32C)O)[C@H]4C(=C)C)O1 CCAZWUJBLXKBAY-ULZPOIKGSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003451 Vitamin B1 Natural products 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- CUJRVFIICFDLGR-UHFFFAOYSA-N acetylacetonate Chemical compound CC(=O)[CH-]C(C)=O CUJRVFIICFDLGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002363 auxin Substances 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004177 carbon cycle Methods 0.000 description 1
- 230000035425 carbon utilization Effects 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000002975 chemoattractant Substances 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- VIEXQFHKRAHTQS-UHFFFAOYSA-N chloroselanyl selenohypochlorite Chemical compound Cl[Se][Se]Cl VIEXQFHKRAHTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002361 compost Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- YGANSGVIUGARFR-UHFFFAOYSA-N dipotassium dioxosilane oxo(oxoalumanyloxy)alumane oxygen(2-) Chemical compound [O--].[K+].[K+].O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O YGANSGVIUGARFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N disodium;3,7-dioxido-2,4,6,8,9-pentaoxa-1,3,5,7-tetraborabicyclo[3.3.1]nonane Chemical compound [Na+].[Na+].O1B([O-])OB2OB([O-])OB1O2 UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004362 fungal culture Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003448 gibberellin Substances 0.000 description 1
- 239000001056 green pigment Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000002515 guano Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- RXPAJWPEYBDXOG-UHFFFAOYSA-N hydron;methyl 4-methoxypyridine-2-carboxylate;chloride Chemical compound Cl.COC(=O)C1=CC(OC)=CC=N1 RXPAJWPEYBDXOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003617 indole-3-acetic acid Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000010445 mica Substances 0.000 description 1
- 229910052618 mica group Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 229910052627 muscovite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000004175 phosphorus cycle Methods 0.000 description 1
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 1
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229930195732 phytohormone Natural products 0.000 description 1
- 239000004476 plant protection product Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003112 potassium compounds Chemical class 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 230000021749 root development Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- XHFLOLLMZOTPSM-UHFFFAOYSA-M sodium;hydrogen carbonate;hydrate Chemical compound [OH-].[Na+].OC(O)=O XHFLOLLMZOTPSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000000000 soil microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 229960005137 succinic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- HPGGPRDJHPYFRM-UHFFFAOYSA-J tin(iv) chloride Chemical compound Cl[Sn](Cl)(Cl)Cl HPGGPRDJHPYFRM-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000011345 viscous material Substances 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/22—Bacillus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/27—Pseudomonas
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/28—Streptomyces
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/11—Bacillus megaterium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/12—Bacillus polymyxa ; Paenibacillus polymyxa
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/265—Micrococcus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/38—Pseudomonas
- C12R2001/39—Pseudomonas fluorescens
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
- C12R2001/47—Streptomyces albus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Fertilizers (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
- Soil Conditioners And Soil-Stabilizing Materials (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к продукту(ам), содержащему(им) микроорганизм(ы), приемлемому для обработки почвы, микроорганизмам, размножающимся при различных климатических и природных условиях, а также способу получения продуктов и, кроме того, способу обработки почвы и растений продуктами. Более подробно, изобретение относится к способу получения продуктов из любого из микроорганизмов, указанных конкретно ниже, или из их смеси. Кроме того, изобретение относится к способу получения культур микроорганизмов, которые должны быть использованы. Предметом изобретения являются также сами микроорганизмы. Более подробно, изобретение относится к способу обработки почвы и растений продуктом, содержащим по меньшей мере один из микроорганизмов Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM/P/В 001293), Azotobacter vinelandii spp. M657 (NCAIM/P/В 001292), Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM/P/В 001296), Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM/P/В 001295/, Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM/P/В 001301/ и, кроме того, продуктам, содержащим перечисленные микроорганизмы, размножающихся и существующих в среде рассматриваемого растения и их получению.
Description
Настоящее изобретение относится к продукту(ам), содержащим живой микроорганизм(ы), подходящий для обработки почвы, микроорганизмам, размножающимся при различных климатических и природных условиях, а также к способу получения продуктов, а кроме того, к способу обработки почвы и растений такими продуктами.
Более подробно изобретение относится к способу получения продуктов из любых микроорганизмов, указанных ниже, или из их смеси.
Кроме того, изобретение относится к способу создания культур микроорганизмов, которые должны быть использованы. Предметом изобретения являются также сами микроорганизмы.
Более подробно изобретение относится к способу обработки почвы и растений продуктом, содержащим по меньшей мере один из микроорганизмов Λζοφίπΐΐιιιη Ьтакйеике ккр. 8\ν51 (Ν0ΛΙΜ /Р/ В 001293), Άζο^α^τ У1ие1аийй крр. Μ657 (Ν0ΛΙΜ /Р/ В 001291), Ркеийотоиак Пиотексеик уат. 8XV11 (Ν0ΛΙΜ /Р/ В 001296), ВасШик ро1утуха уат. 8ν17 (Ν0ΛΙΜ /Р/ В 001295), ВасШик теда1епит уат. Μ326 (Ν0ΛΙΜ /Р/ В 001301), а кроме того, к продуктам размножающихся и существующих в окружающей среде рассматриваемого растения перечисленных микроорганизмов и их получению.
Предпосылки создания изобретения
Природная среда почвы представляет собой саморегулирующуюся экосистему растений и микроорганизмов в природных условиях, причем существование растений определяет существование микроорганизмов. Когда баланс, развитый в ходе эволюции, изменяется в результате деятельности человека (глубокая вспашка, внесение природных и искусственных удобрений, использование средств защиты растений и т.д.), в его структуре и функции могут иметь место изменения непредвиденного действия. Для развития популяций микроорганизмов, необходимых для оптимального культивирования конкретного культивируемого растения на различных почвах и при различных климатических условиях, необходимо время селекции, длящееся в течение многих лет. Однако детерминантные микроорганизмы благоприятной популяции микроорганизмов, которые могут быть перенесены в почву и окружающую среду, необходимые для оптимальной культивации, могут быть созданы за 1-2 дня. Результатом этого является более высокий урожай без пагубного нарушения природной экосистемы. Полезные и доминантные микроорганизмы, существующие в окружающей среде конкретного растения, важного с экономической точки зрения, могут быть определены лабораторными экспериментами и могут быть индивидуально размножены, получены промышленными способами и могут быть возвращены в почву в подходящей пропорции.
В экосистеме почвы и микроорганизмов можно обнаружить важные закономерности. Количество микроорганизмов является различным, и различные виды могут быть идентифицированы в непосредственной окружающей среде корневой системы живых растений (ризосфере) и прорастающих семенах (сперматосфере), в сравнении с более удаленными от них участками. На размножение бактерий в окружающей среде корней влияет много факторов. Эти факторы зависят от региона, качества почвы, состава популяции микроорганизмов и климатических условий.
Источник углерода, который может быть обнаружен в почве, образуется, прежде всего, и в преобладающем количестве посредством использования солнечной энергии, в результате фотосинтеза.
Цикл азота является более сложным, чем цикл углерода. На превращение азота оказывают влияние биологические и химические процессы. В природе газообразный азот в так называемом инертном состоянии является доминантным, а так называемый фиксированный азот (нитрат, нитрит, аммиак) присутствует в ограниченном количестве.
За минерализацию газообразного азота, прежде всего, несет ответственность связывание биологического азота. Так как на 1 га количество молекулярного азота составляет 6-7х 108 т, это означает наличие неисчерпаемого источника для связанного азота. Интерес экспертов направлен в сторону связывающих азот живых организмов, т.е. в сторону живых организмов, которые могут восстановить молекулярный азот в аммиак, так как среди прочего знание таких микроорганизмов и адекватное использование их свойств может обеспечить благоприятным для окружающей среды образом прекращение распространенного в мире голода.
Некоторые связывающие азот бактерии фиксируют азот в свободном живом состоянии, но многочисленные бактерии способны фиксировать азот только в комбинации с другими, высшими растениями.
Фосфорный цикл, в противоположность циклу азота, является практически закрытым в природных условиях. Вход и вывод являются одинаковыми, поток является слабым, и воздух не может быть загрязнен фосфором. Наконец, данный элемент аккумулируется в водных источниках, морях и только небольшое количество его возвращается в почву (например, в форме гуано).
В живых клетках почвы фосфор аккумулируется в органических соединениях, минерализация их происходит с высокой скоростью (3-8 г/м2/год). Растворимость, а таким образом, их доступность для растений, образующихся соединений фосфора является различной, только 5% из 400-1200 мг фосфора, обнаруживаемого в каждом 1 кг средних почв, является доступным. Круговорот некоторых соединений фосфора составляет 500-2000 лет.
В результате переноса некоторых фосфонолитических групп микроорганизмов в почву комплексные фосфорные соединения, которые являются недоступными для растения, могут быть переведены в раствор. Если указанные микроорганизмы выполняют «функцию» почвы и минеральное содержание почвы является удовлетворительным, использование удобрений, содержащих фосфат, не является необ
- 1 009126 ходимым или может быть значительно снижено.
Для роста растений необходимо, а особенно во время созревания сельскохозяйственной культуры, значительное количество калия. Земледельцы, возделывающие растения, вносят калий в почву путем внесения удобрения, содержащего калий. Такое удобрение может быть сделано доступным из минеральных соединений калия при помощи микроорганизмов, высвобождающих ион калия.
Когда речь идет о растениях, микроорганизмы, размножающиеся в почве, биосинтезируют физиологически активные соединения, среди которых наиболее важными являются фитогормоны, ауксины (индол-3-уксусная кислота), этилен, гиббереллины, кинетины и т.д. Некоторые группы Ркеибошоиак в присутствии небольшого количества железа продуцируют так называемые сидерофоры, которые могут собирать железо. Вследствие этого другие, фитопатогенные бактерии и грибы, которые не могут использовать железо из сидерофоров, испытывают ингибирование вследствие отсутствия железа, а, с другой стороны, эти сидерофоры в почве с отсутствием железа значительно стимулируют рост растений, так как, связывая железо, они непосредственно обеспечивают растения железом.
Для решения указанных выше проблем было разработано несколько технических решений; несколько микроорганизмов описано в специальной литературе во всех подробностях.
Авторы венгерских патентов описали получение порошкообразных культур нитрификации (патент Венгрии НИ 143391), культур ЛхоЬае1ег сйгоососсиш и ВЫхоЬшт теШой (патент Венгрии НИ 188434), культур водорослей (патент Венгрии НИ 195068) и снова культур ЛхоЬас1ег сйгоососсиш, а также получение культур микроорганизмов ВасШик шедаБегшш (патент Венгрии НИ 207751). ЛхоЬас1ег сйгоососсиш депонирован под № 00238, 1Не ВасШик тедаБегшт под № ΝΟΆΙΜ/Р/В 1140. Более подробно в патентах Венгрии НИ 188434 и Ни 207751 авторы описали ферментацию, при которой получают смесь депонированных выше микроорганизмов. Согласно патенту Венгрии НИ 213163 авторы дополнили культуру микроорганизмов патента НИ 207751 карбоксиметилцеллюлозой. Авторы патента Венгрии НИ 1671/96 описали культуры, содержащие микроорганизмы ЛхокрйШит НроГегит ккр., ЛхоЬас1ег уше1аибп кр., Ркеиботопак йиогексеик ккр. и ВасШик тедаБегшт ккр.
Применение и действие микроорганизмов, применяемых в указанных способах, ограничиваются тем фактом, что они при различных условиях культивирования, в почвах различного состава, в различных климатических условиях остаются живыми только в течение короткого промежутка времени, окружающая среда и ризосфера различных растений не всегда создает оптимальные условия.
Описание изобретения
Основной целью изобретения является получение таких культур почвенных микроорганизмов, которые, с точки зрения культивирования растений и экономической точки зрения, оказывают благоприятное действие и которые, в то же самое время, могут выживать, размножаться и проявлять свое благоприятное действие в различных почвах и на различных растениях в различных климатических условиях и условиях культивирования.
Неожиданным образом было обнаружено, что размножение и выживание микроорганизмов, благоприятно влияющие на развитие растения, фиксацию азота, мобилизацию фосфата, стимуляцию роста растения, улучшения структуру почвы при культивировании в лабораторных условиях, варьируют в зависимости от характера почвы, температурных условий в непосредственной близости от растений. Различные группы микроорганизмов проявляют свое действие в черноземной почве, в почве с низким содержанием гумуса, в лёссе, в усадебной почве или, например, в глинистой почве. В ходе экспериментов авторами данного изобретения было доказано, что, как это ни было неожиданно, другие группы микроорганизмов могут размножаться в ризосфере различных растений или вблизи от нее и проявлять свое действие там в течение длительного времени.
Поэтому проводили эксперименты для выделения таких микроорганизмов, которые оказывают благоприятное действие в среде конкретного растения, что является важным с экономической точки зрения, поскольку речь идет о его культивировании. Кроме того, проводили также эксперименты для выделения микроорганизмов, которые могут мобилизовать ионы калия, и для получения таких микроорганизмов, выделенных из почвы и измененных процедурами мутации в лабораторных условиях, которые могут также размножаться во время введения их в почву, а также при низкой температуре и которые, как бы ни было также неожиданным даже для эксперта, могут оказывать благоприятное действие.
Кроме того, авторами заявлено в ходе экспериментов, что некоторые микроорганизмы, продуцирующие полисахариды, неожиданным образом изменяют структуру почвы благоприятно с сельскохозяйственной точки зрения, таким образом повышая устойчивость к засухе.
Подводя итоги экспериментальной работы, авторы изобретения указывают, что их целью было выделение таких микроорганизмов, которые передают азот, фосфор, калий в растения, биосинтезируют растительные гормоны роста, биосинтезируют полисахариды, улучшающие структуру почвы, и которые способны также размножаться в период посева и в странах с более холодным климатом, а также проявляют их действие в различных почвах и растениях. Кроме того, авторы изобретения намеревались получить такие препараты с таким содержанием микроорганизма в среде растения, в ризосфере или непосредственно среди растительных клеток посредством фиксации и мобилизации элементов жизненной важности, а также посредством продуцирования растительных факторов роста и полисахаридов в конкретном растительном окружении, которое активирует развитие конкретного растения или семейства растений,
- 2 009126 вследствие чего можно экономить, таким образом, защищая окружающую среду, применяемые удобрения.
Предметом настоящего изобретения является способ культивирования, относящийся к перечисленным микроорганизмам, препараты, содержащие их, кроме того, применение препарата(ов), содержащего(их) микроорганизм(ы), и, конкретно, микроорганизмы.
Настоящее изобретение основано на том, что для получения рассматриваемых препаратов наиболее подходящими язляются микроорганизмы Λζοδρίπΐΐιιιη Ьга811еи8е 88р. 8^51 (Ν0ΆΙΜ /Р/ В 001293), Лхо1оЬас1сг уше1апбп 8рр. М657 (Ν0ΆΙΜ /Р/ В 001292), Р8еиботопа8 Диоге8сеи8 уаг. 8^11 (Ν0ΆΙΜ /Р/ В 001296), ВасШи8 ро1утуха уаг. 8^17 (Ν0ΆΙΜ /Р/ В 001295), ВасШи8 тедаЮгшт уаг. М326 (Ν0ΆΙΜ /Р/ В 001291), М1сгососси8 го8еи8 8рр. А21 (Ν0ΛΙΜ /Р/ В 001294), В^аάу^ЫζоЬ^ит _)арошсит уаг. РН25 (Ν0ΛΙΜ /Р/ В 001302) и 81гер1отусе8 а1Ьи8 уаг. 0003 ЬР (Ν0ΛΙΜ /Р/ В 001301), которые могут размножаться при низкой температуре в период сева, которые поставляют азот растениям, мобилизуют фосфор, калий, биосинтезируют гормоны роста и полисахариды, следовательно, авторы изобретения выделили их и разработали для них способ выращивания.
В свете указанного выше, между 1998 и 1999гг. авторы изобретения выделили в Европе из почвы и среды вокруг корней некоторых растений микроорганизмы, испытали ίη νίΙΐΌ их способность фиксировать азот, солюбилизировать фосфат и калий, продуцировать полисахарид и биосинтезировать растительные гормоны, идентифицировали систематически выбранные микроорганизмы, мутационной обработкой получили такие варианты, которые интенсивно размножаются при температурах ниже 20°С, а также разработали технологию выращивания для их культивирования и из их культур получили препараты и показали их действие на развитие растений и урожаи при помощи экспериментов в оранжерее и в полевых условиях.
Были выделены виды и подвиды Λζо8р^^^11ит, ΛζоΐоЬасΐе^, В^аάу^ЫζоЬ^ит, Р8еиботопа8, Вас111и8, 81гер1отусе8 и Мюгососсш.
Наименее известным видом Λζо8р^^^11ит являются бактерии грамотрицательного вариабельного окрашивания, живущие в почве, которые в микроаэрофильных условиях (в присутствии 1-2% кислорода) в тесной связи с корневой системой растений могут восстанавливать азот воздуха до аммиака и затем переносить его к растениям. Некоторые группы биосинтезируют также растительные гормоны.
Эти группы Λζо8р^^^11ит были выделены из окружения корней кукурузы, пшеницы, ячменя, ржи, выращиваемых на различных сельскохозяйственных угодьях Европы, в различных почвах, и травы сенокосных угодий. Суспензию бактерий, полученную из пробы почвы, диспергировали на культуральные среды ΝίΕ(ΙΙ) и ММ состава, указанного ниже, затем культивировали в микроаэрофильных условиях. Спустя 72 ч культуры Λζо8р^^^11ит идентифицировали. Культуры (колонии) Λζо8р^^^11ит, отличающиеся от других небольших культур бактерий и грибов, достигают размера приблизительно 3 мм.
Культуры Λζо8р^^^11ит 8р., экспоненциально растущие в среде мягкого агара с жидкими ММ и №(ΙΙ), состав которых приведен ниже, проявляют морфологию, характерную для клеток Λζо8р^^^11ит. Клетки являются виброидными и имеют 8-форму и размер 1-2х2-4 мкм. Для их роста они нуждаются в биотине. На основе микроскопического наблюдения установлено, что они могут быстро перемещаться. Их подвижность может быть связана с их полярными жгутиками. В их клетках они аккумулируют гранулы поли-бета-гидроксибутирата и каротины. Исчезновение красноватого цвета может быть объяснено старением культуры. Для усиления их роста они могут использовать также органические кислоты, такие как малеиновая кислота, молочная кислота, пирорацемическая кислота и бутандиовая кислота. Фиксация азота воздуха имеет место в микроаэрофильных условиях. В экстремальных условиях, таких как в случае засухи, при низкой или высокой величине рН, в отсутствие источника азота или углерода, клетки будут трансформироваться в цисты, на которых не имеется жгутиков, но которые содержат гранулы поли-бетагидроксибутирата и окружены капсулярным полисахаридом. Спектр утилизации источника углерода микроорганизмов варьирует в зависимости от вида: А. Аиимопеп8е утилизирует глюкозу (+), сахарозу (+), инозит (+), А. Вга811еп8е утилизирует глюкозу (+), сахарозу (+) и не утилизирует инозит (-), А. Еакегъе утилизирует глюкозу (+) и сахарозу (+), но не инозит (-), наконец, А. Ь1роГегит утилизует только глюкозу. В среде без азота спектр утилизации источника углерода отличается до значительной степени, так что вышеуказанные четыре вида могут быть другими. Спектр утилизации источника углерода выделенного авторами изобретения микроорганизма частично отличается от неотипа АТСС 29,731 А. Ь1роГеггит, А. Λтаζоηеη8е, А. Вга8Шеп8е и А. Еакете (Ной, 1.6. апб со11аЬога1ог8. Вегдеу8 Мапиа1 оГ Ие1егттаДуе Вас1епо1оду. 9'1' ебйюп, 1994). В противоположность другим группам этого типа, они надлежащим образом растут в присутствии 3,5% хлорида натрия в мягком агаре (это будет описано ниже), их микроскопические картины различаются в различные периоды культивирования, их продуцирование пигмента является более интенсивным, например, в картофельном агаре.
Некоторые выделенные Λζо8р^^^1^ит являются близкими к видам Λζо8р^^^11ит НроГешт, Λζо8р^^^11ит атаζсηеη8е, Λζо8р^^^11ит Ьга811еп8е, а также виду Λζо8р^^^11ит пакеп8е, авторы изобретения провели дополнительные эксперименты на Λζо8р^^^11ит, выбрав одну из групп Λζо8р^^^11ит Ьга811еп8е.
Из вышеуказанных почвенных образцов микроорганизмы ΛζоΐоЬасΐе^ выделяли на ИГЬ(П)-мягком агаре, с селективным культивированием, затем на ММ и среде Федорова распределением и отбором одного из подвидов на основе его способности фиксировать азот и сохраняли его для дальнейших экспериментов.
- 3 009126
Клетки данной группы являются плейоморфными, имеют коккоидную форму. В присутствии кислорода они передвигаются быстро. Они являются грамотрицательными. На среде без азота указанные микроорганизмы образуют флуоресцирующий, желтовато-зеленый пигмент, они хорошо утилизируют рамнозу и мезоинозит.
Как хорошо известно, ΚΙιίζοΝιιιη образуют клубеньки на корнях мотыльковых, и затем распространяясь среди растительных клеток, они непосредственно переносят фиксированный азот в растения. С разными мотыльковыми разные виды К1ШоЬшт вступают в связь, например с соей вступает в связь группа Вгабуг1ШоЬшт. Поскольку эта группа является единственным таким видом К1ШоЬшт. который погибает после сбора урожая сельскохозяйственных культур, т.е. она не остается в большом количестве в почве, рекомендуется использовать эту группу для обработки почвы. Авторы выделили группу Вгабуг1ШоЬшт 13-го июля в растениях сои в 8иЬаза около 8ζедеά-Κ^зкиηάо^оζзта. Из растений, растущих в лёссе, выбирали хорошо развивающееся растение и отделяли хорошо развитые клубеньки от его корней. Психрофильный вариант микроорганизма, выделенный, как приведено в примере, депонировали.
В собранных пробах почвы авторы изобретения проводили поиск на фосфатмобилизующие микроорганизмы и тестировали выбранные микроорганизмы с систематической точки зрения. Доказано, что часть микроорганизмов является видом Рзеиботопаз, доказано, что другая является видом ВасШиз.
Рзеиботопаз являются грамотрицательными аэробными клетками, имеющими форму тонких палочек, они продуцируют на большинстве сред флуоресцентный пигмент и являются сапрофитом. Не удалось наблюдать продуцирование каротина, они не растут при температуре выше 40°С. На желатиновом агаре можно было видеть разжижение. Глюкоза утилизируется выделенными авторами группами, а крахмал не утилизируется. Хотя варианты групп фосфоресцирующих Рзенбошопаз находятся систематически в тесной связи, некоторую систематическую гетерогенность можно наблюдать между микроорганизмами авторов и типовыми группами: микроорганизм авторов, что характерно для Рзенбошопаз. хорошо утилизирует глюкозу, галактозу, уксусную кислоту, мальтозу, глицерин и пирорацемическую кислоту. Он не утилизирует фруктозу, И-арабинозу, мальтозу, лактозу, крахмал и инулин. Однако, в противоположность типовым группам, они способны расти на ксилозе, сахарозе и в некоторой степени на сорбите. В качестве единственного источника углерода они могут утилизировать глицин.
На основе вышеуказанного, один из микроорганизмов авторов изобретения был идентифицирован как вид Рзеиботопаз Ниогезсеп!, и обнаружено, что он может быть помещен вблизи вариантов, принадлежащих к группе Вюуаг III. Авторы назвали группу как Рзеиботопаз Ниогезсеп! ззр.
На основе систематических характеристик клеток ВасШиз, которые могут растворять нерастворимый фосфат, доказано, что некоторые являются ВасШиз ро1утуха, доказано, что некоторые являются ВасШиз теда!егшт. Некоторые группы были отобраны для дальнейших экспериментов.
Для выделения микроорганизмов, способных мобилизовать ионы калия, из минералов калия микроорганизмы выделяли с поверхности минералов, содержащих калий, полевого шпата и мусковита, затем тестировали, как указано в примерах, на твердой, не содержащей калий среде для доказательства мобилизации калия. Посредством использования процедуры, приведенной в примерах, при помощи мутационных обработок был получен и депонирован микроорганизм, индентифицированный как 8!гер!отусез рзусйгорЫйс.
Авторы изобретения выделили также микроорганизм, который, как было доказано после систематических, морфологических тестов и теста рибосомной ДНК, является Мюгососсиз гозеиз и обнаруживает чрезвычайно благоприятное действие в ходе растительных тестов. Одна из групп этого микроорганизма была депонирована, эта группа была трансформирована в лабораторных условиях.
Изобретение основано также на том факте, что микроорганизмы с благоприятным действием, высаженные в почву, могут также размножаться так быстро, насколько это возможно, во время начального развития посевов и растений, в климатических условиях осени и ранней весны, а также в странах более холодного климата. Таким образом, микроорганизмы обрабатывали, выделяли и выдерживали в соответствии с вышеописанным, как указано в примере № 4. При помощи общепринятых процедур выделяли мутанты и варианты, размножающиеся при низких температурах, а также затем их депонировали в Национальную коллекцию сельскохозяйственных и промышленных микроорганизмов.
Изобретение относится к таким препаратам и способам, посредством применения которых повышается урожай растительных культур. Получение сопровождается также культивированием микроорганизмов, выделенных и тестированных из различных пахотных земель, из среды различных растений, существующих в среде конкретного семейства растений в течение длительного времени, размножающихся при низких температурах в различных почвах, и внесением препарата, содержащего культуру, на рассматриваемые культуры, на семена или в пахотные земли для них. В соответствии с изобретением препараты могут быть использованы для обработки почвы, растений или семян растений препаратом, который содержит по меньшей мере один из следующих микроорганизмов: Αζозр^^^11ит Ьгазйепзе ззр. 8ν51 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001293), ΑζоΐоЬасΐе^ уше1апбп зрр. М657 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001292), Рзеиботопаз Ниогезсепз уаг. 8\ν 11 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001296), ВасШиз ро1утуха уаг. 8ν17 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001295), ВасШиз теда1епит уаг. М326 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001291), Мюгососсиз гозеиз зрр. Α21 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001294), Вгабуг^оЬшт _)арошсит уаг. РН25 (Ν0ΑΙΜ /Р/ Р 0012...) и 81гер1отусез а1Ьиз уаг. 0003 ЬР (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 0012...).
В результате обработки развитие растений будет ускориваться, они будут более устойчивыми к патогенам, водоснабжение структуры почвы и растений будет улучшаться и будут обеспечиваться высокие
- 4 009126 урожаи даже при пониженном использовании удобрения или в отсутствие любого удобрения.
Одним из более важных преимуществ способа по данному изобретению является то, что при осуществлении его в ходе культивирования растения применение удобрений на основе азота, фосфата и калия может быть практически ненужным или может быть снижено в значительной степени. Загрязняющее действие удобрения на окружающую среду является очевидным. Соединения, биосинтезирующиеся в клетках микроорганизмов, стимулирующих развитие растений, ускоряют развитие обработанного растения, развитие корней, и в то же самое время с этим будет улучшаться водоснабжение растений, развивающиеся микроорганизмы подавляют развитие фитопатогенных микроорганизмов, полисахариды, биосинтезирующиеся в клетках некоторых из полученных авторами микроорганизмов, особенно благоприятно улучшают структуру почвы, водный баланс и жизнь почвы. Препараты по данному изобретению, их получение и применение, в противоположность известным препаратам и способам получения для такой же цели и применения, основаны на использовании микроорганизмов с различными, другими действиями, выделенных из различных почв, оказывающих специальное действие на рассматриваемое экономически важное культивируемое растение, а также микроорганизмов, которые могут размножаться при низких температурах осенью и ранней весной и на ареалах с более холодным климатом.
Микроорганизмы по изобретению могут быть культивированы на среде, содержащей в качестве источника углерода, например, глюкозу, крахмал, сахарозу или мелассу, в качестве источника азота жидкость после замочки кукурузы, казеин, дрожжевой экстракт или аммониевые соли, кроме того, другие неорганические соли и соли, диссоциирующие на ионы микроэлементов, но, как это очевидно для специалистов, можно было использовать любые ассимилируемые источники углерода и азота, неорганические соли, которые делают возможным размножение бактерий данного изобретения.
Культура, содержащая микроорганизмы настоящего изобретения, может быть добавлена непосредственно в почву, которая должна быть обработана, или к растениям в среде, используемой для культивирования, но могут быть также приготовлены препараты, сохраняющие биологический потенциал этого микроорганизма, в том числе препараты, содержащие носители, фиксирующие бактерии на семенах посредством сил адгезии. Количество бактерий, внесенных в почву, может варьировать между 5х10п и 5х 1015 клеток на гектар, благоприятное количество клеток составляет от 1012 до 1013.
В соответствии с Будапештским соглашением (ВибарсЧ Лдгссшсп!) авторы депонировали выделенные, идентифицированные из различных растительных сред микроорганизмы, которые могли также размножаться при низкой температуре, в Национальную коллекцию сельскохозяйственных и промышленных микроорганизмов, где эти микроорганизмы зарегистрированы под следующими номерами депозитов:
Λζοφίπΐΐιιιη Ьга811еп8е 88р. 8^51 (Νί’ΑΙΜ /Р/ В 001293),
ΑζоΐоЬасΐе^ уше1апбн 8рр. М657 (Νί,’ΛΙΜ /Р/ В 001292),
Р8еибошопа8 Диоге8сеп8 гаг. 8^11 (Νί’ΑΙΜ /Р/ В 001296),
Васй1и8 ро1утуха гаг. 8^17 (Νί’ΑΙΜ /Р/ В 001295),
Васй1и8 теда(егшт гаг. М326 (Νί’ΑΙΜ /Р/В 001291),
М1сгососси8 го8еи8 8рр. Α21 (Νί’ΑΙΜ /Р/В 001294),
Вгабуг1ШоЬшт_]арошсит гаг. РН25 (Νί’ΑΙΜ /Р/ В 001302) и 8(гер(отусе8 а1Ьи8 гаг. 0003 ЬР (Νί’ΑΙΜ /Р/ В 001301).
Область защиты распространяется на депонированные группы, а также на их искусственные и природные мутанты, варианты или на линии групп вышеуказанных микроорганизмов, полученных любым известным способом.
Авторы иллюстрируют изобретение примерами без ограничения ими области защиты.
В примерах проценты выражены в массовых процентах, если не оговорено особо.
Лучший способ выполнения изобретения
Пример 1. Выделение микроорганизмов, фиксирующих азот воздуха, из различных почв и из среды окружения различных растений и подтверждение их фиксирующей азот способности.
Виды Αζо8р^^^11ит являются бактериями грамотрицательного вариабельного окрашивания, которые способны восстановить азот воздуха до аммиака при микроаэрофильных условиях (в присутствии 1-2% кислорода) и сделать его доступным для растений.
Виды Αζо8р^^^11ит выделили из различных почвенных проб (гумуса, лёсса, натриевой почвы, бурой почвы и черной почвы и т.д.), из среды, окружающей корни различных растений (злаковых, подсолнечника, кукурузы, травы и т.д.). Химические аттрактанты, такие как органические кислоты и сахара, привлекают группы Αζо8р^^^11ит за счет хемотаксиса. При помощи их жгутиков бактерии двигаются по направлению к корням и, достигнув их, заселяют.
Из 10-, 100-, 1000- и 10000-кратных разведений данной пробы почвы, приготовленных со стерильной, дистиллированной водой, 100-100 мкл суспензии распределяли на чашках Петри, содержащих ММи ХГЬ(П)-мягкий агар. Состав ММ-среды был следующим.
К2НРО4 1,65 г/л
КН2РО4 0,87 г/л
Μ§8Ο4χ7Η2Ο 0,29 г/л
- 5 009126 №С1
СаС12х2Н2О
БеС13х6Н2О №МоО4х2Н2О
Ми8О4хН2О
2и8О4х7Н2О
Си8О4х5Н2О
С08О4Х7Н2О
Н3ВО3
Глюкоза
Сахароза
Бактоагар
0,18 г/л
0,07 г/л
0,01 г/л
0,005 г/л
0,00014 г/л
0,007 г/л
0,000125 г/л
0,00014 г/л
0,00003 г/л 5,0 г/л 5,0 г/л
20,0 г/л
Глюкозу стерилизовали отдельно от других компонентов ММ-среды в автоклаве (121°С, 30 мин), затем смешивали с другими компонентами после охлаждения до температуры 60°С. рН стерильной смеси устанавливали до 7,4 стерильным 1н. раствором ЫаОН.
Состав Ы1Ь(11)-среды был следующим.
Ь-Яблочная кислота
Дикалийгидрофосфат
Сульфат магниях7Н2О
Хлорид натрия
Хлорид кальция
Раствор микроэлементов*
Бромтимоловый синий (водный раствор
0,5% материала, растворенного в 0,2н. КОН)
Раствор 1,564% Бе-ЕИТА
Раствор витаминов**
Агар
5,0
0,5
0,2
0,1 г
г г г
0,02 г 2,0 мл
2,0 мл
4,0 мл
1,0 мл
1,75 г
Устанавливали рН среды до 6,8 при помощи 1н. водного раствора КОН.
* Состав раствора микроэлементов был следующим. Ферро-11-сульфатх7Н2О Ферро-111-сульфатх6Н2О
Сульфат марганцахН2О
Сульфат меди(11)х5Н2О №МоО4х2Н2О
Хлорид кобальтах 6Н2О
Сульфат цинках 7Н2О
Тетраборат натриях 10Н2О
Р;О. 24\\'О; 11;О
Нитрат висмутах5Н2О
Хлорид олова
Хлорид селена
Иодид калия
Лимонная кислота
Дистиллированная вода
200 мг мг мг мг мг мг мг мг
0,5 мг
0,1 мг
0,01 мг
0,01 мг мг
100 мг
1000 мл **Состав раствора витаминов был следующим.
Витамин С
Витамин В1
Витамин Е
Витамин А
Биотин
Дистиллированная вода мг мг мг мг мг
100 мл
Бактерии, внесенные в среду, которые должны быть обнаружены на ММ-планшетах, помещали в анаэробные термостаты заменой воздушного пространства термостата на азот, затем устанавливали концентрацию кислорода 1,6% с использованием достаточного количества воздуха. Планшеты инкубировали при температуре 32°С, затем спустя 72 ч организмы Λζοφίπΐΐιιιη идентифицировали. В соответствии с
- 6 009126 линией разведения на планшете, на котором распределяли суспензию с 10-кратным разведением, образовалось непрерывное поле бактерий, тогда как суспензия с 10000-кратным разведением обычно давала 3050 колоний (культур). Колонии Λζοδρίπΐΐιιιη. отличающиеся от других небольших бактерий и культур грибов, достигали размера приблизительно 3 мм. Из этих культур несколько культур были морфологически подобными культурам Αζοφίπΐΐιιιη. Из них некоторые дополнительно изучались авторами изобретения.
Культуры на МЪ(П)-мягком агаре помещали в аэробный термостат в указанной выше среде, и в указанных выше условиях культивирования первыми из всех размножились Αζοφίπΐΐιιιη с узнаваемой характеристичной морфологией.
Различные группы бактерий Αζο8ρ^^^11ит, полученные на ММ- и Ы1Ь(11)-среде, выращивали в соответствии с микробиологической практикой таким образом, что первичную культуру бактерий наносили 2 раза на одну культуру на полной среде ТАд. Группы бактерий Αζοφίπΐΐιιιη очищали распределением 2 раза на одной культуре в жидкой среде ТАд и сохраняли в групповой культуре. Суспензию бактерий при температуре -80°С считали групповой культурой и все эксперименты начинали из этой культуры.
Состав среды ТАд был следующим.
Бактотриптон (Όίίεο) 1,0%
Экстракт дрожжей (Όίίεο) 0,1%
ЫаС1 0,5%
Агар 2,5%
После стерилизации добавляли водные растворы следующих соединений со следующей конечной концентрацией:
0,1% 0,1М СаС12х6Н2О
0,1% 0,1М МдС12х6Н2О
0,2% глюкозы (отдельно стерилизованной)
После стерилизации рН среды регулировали до 7,0-7,2.
Корневую колонизацию можно определить простым экспериментом. На корнях кукурузного и пшеничного растений, обработанных бактериями Αζο8ρ^^^11ит, высеянными в стерильном перлите (сосуд диаметром 15 см) с клетками равного количества (1 х 1010 клеток на сосуд), микроскопический подсчет показал, что было выявлено существенно больше клеток Αζο8ρ^^^11ит, чем в контролях. Колонизация на корнях происходит на основе специфичного механизма распознавания. В ходе колонизации клетки Λζοδρίπΐΐιιιη проникают в матрикс корней, и здесь они, посредством их активной фиксации азота, могут компенсировать часть азота, необходимую для основного растения (ассоциативная фиксация азота). Это доказали ростом большего количества зеленой массы кукурузы и пшеницы, инкубированных с группами Αζο8ρ^^^11ит, в ходе лабораторных экспериментов авторов, результаты которых приводятся подробно далее. Αζοφίπΐΐιιιηδ продуцируют также растительные гормоны и материалы, стимулирующие рост. Увеличение этих материалов и их благотворное влияние на основное растение может быть доказано повышенной герменативной эффективностью и более интенсивным ростом растения в экспериментах, проводимых в лабораторных условиях.
Морфологические характеристики выделенных видов Αζοδρίπΐΐιιιη находятся в общей части описания.
При селективном культивировании на МЪ(П)-мягком агаре, в отличие от селективного культивирования на ММ-среде без азота, микроорганизмы Αζοφίπΐΐιιιη выделяли из образцов пахотной почвы. Было обнаружено, что эти группы в соответствии с систематическими характеристиками и спектром утилизации источника углерода являются Αζοφίπΐΐιιιη Ъгакйеике, фиксирующими молекулярный азот воздуха в большей степени, чем 8^5-01-07, затем, как описано ниже, выделили также варианты, размножающиеся при низких температурах и биосинтезирующие полисахарид, и один из них депонировали.
Для выделения группы ΑζοΙοΒ-ιοΙΟΓ кроме использования ΝίΒ(ΙΙ)- и ММ-среды, состав которых приведен выше, образцы почвы культивировали также в среде Федорова, где ΑζοΙοΒ-ιοΙΟΓ обнаружили характеристичные морфологические свойства. Среда Федорова имеет следующий состав.
Дигидрофосфат калия 0,03%
Гидрофосфат кальция 0,02%
Сульфат калия 0,02%
Сульфат магниях7Н2О 0,03%
Карбонат кальция 0,5%
Хлорид натрия 0,05%
Хлорид железа(Ш) 0,02%
Молибденат натрия 0,0002%
Маннит 2,0%
Бактоагар 2,0% рН среды перед стерилизацией регулировали 1н. раствором гидроксида натрия до 7,0.
При селективном культивировании на МЪ(П)-мягком агаре, затем на среде ММ без азота и среде Федорова при селективном культивировании микроорганизмы АюЮЬаеГОг выделили из почвенных об
- 7 009126 разцов пахотных участков. Было обнаружено, что эти группы в соответствии с систематическими характеристиками и спектром утилизации источника углерода являются Лхо1сЬас1сг уте1апбн. фиксирующим молекулярный азот воздуха в большей степени. чем М65-01-34, затем. как описано ниже. выделили также варианты. размножающиеся при низких температурах. и один из них был депонирован авторами.
Способность фиксировать азот группами Λζοδρίπΐΐιιιη и ЛхоЬасЮг определяли также способом восстановления ацетилена. В соответствии со способом (Όί1\\ΌΠ1ι М.Г. 1. Вюсйет. Вюрйуз. Ас1а. 27. 285. 1996) ацетилен вводили инъекцией шприцем в культуру в закрытой чашке. затем после инкубации 12 ч 0.25 мл газовой смеси впрыскивали в колонку Ргорак N газового хроматографа Регкш-Е1тег. Концентрацию ацетилена и этилена газовой смеси определяли детектором с ионизацией водородным пламенем. Из высоты пиков ацетилена и этилена можно определенно сделать вывод по ферментной комплексной активности нитрогеназы. Группы АгозрггШит и Аго1оЬас1ег авторов восстанавливали за 1 ч ацетилен в количестве между 15 и 85 нмоль в этилен.
Группу ВгабубЛоЬннп выделили 13 июля 2000 из растений сои в 8иЬаза. вблизи от ^едебК^зкиηбο^οζзта. Из растений. выращенных в лёссе. отбирали хорошо развивающееся растение и из его корней удаляли хорошо развитые клубеньки. Клубеньки промывали стерильной. дистиллированной водой. измельчали. затем частицы суспендировали в физиологическом солевом растворе. Из суспензии в стерильных условиях готовили серийные разведения и распределяли их на полной среде. Способность фиксировать азот растущих культур после инкубации 48 ч так называемым тестом для симбиотических растений определяли следующим образом: поверхность семян коммерческой люцерны (Мебкадо заДуа) стерилизовали термообработкой 2 ч при температуре 72°С и осторожным промыванием 20% раствором Нуро. затем давали им возможность прорасти в среде дистиллированной воды. содержащей 1% агара. Проростки помещали в 1.5% косой агар С1Ьзоп (см. ниже) и выращивали в теплице в течение недели. Растения возраста 1 недели инокулировали клетками каждой культуры бактерий и выращивали в теплице в течение дополнительных 8 недель. Из групп. относящихся к трем растениям. проявляющим заметное оптимальное развитие (масса в сухом состоянии частей растений выше корней 22-26 мг. в противоположность массе контрольных растений 3-5 мг). отбирали три и на основе их свойств. важных с точки зрения морфологии и систематики. авторы назвали их ВгабубГОоЬшт )аропкит уаг. РН-2-1-3.
Пример 2. Выделение фосфат- и калийсолюбилизирующих микроорганизмов.
Образцы почвы собирали в разных частях света. водные суспензии образцов распределяли по среде ТАд (см. выше). затем тестировали выделенные материалы культур Рзеиботопаз и ВасШиз и клеточную морфологию.
Различные группы Рзеиботопаз и ВасШиз очищали в соответствии с микробиологической практикой распределением первичной культуры бактерий несколько раз на единственной культуре на полной среде ТАд. Группы бактерий выращивали и сохраняли очищенными с распределением в жидкой и твердой средах ТАд.
Свойства микроорганизмов по мобилизации фосфата испытывали в среде питательного агара (Охо1б). содержащего 1% гидроксиапатита и дополненного модифицированной средой Р1коузкауа (НР) и 10% трикальцийфосфата и глюкозой (0.2%).
Состав среды. используемой в ходе экспериментов. является следующим.
Модифицированная среда Р1коузкауа:
Гидроксиапатит 1.0% (ΝΗ4)28Ο4 0.05% №101 0.02%
КС1 0.02%
Мд8О4х7Н2О 0.01%
Экстракт дрожжей 0.05%
Агар 1.5%
Глюкоза (стерилизованная отдельно) 1.0%
После стерилизации к среде добавляли растворы следующих соединений:
1% 20 мг/100 мл Ге8О4х7Н2О
1% 40 мг/100 мл Мп8О4хН2О
Перед стерилизацией рН среды устанавливали до 7.2.
№юхд: питательный агар (Охо1б). приготовленный в соответствии с инструкциями производителя. +0.2% глюкозы.
Во время тестирования солюбилизирующей фосфат способности групп. выбранных в ходе предварительных экспериментов в среде Р1коузкауа (НР) культуры. выращиваемые на протяжении 3-4 дней при температуре 30°С. давали кольца растворения 29 и 38 мм. Клеточные суспензии одинаковых групп. полученные из ТАд-скошенного агара с 1 мл дистиллированной воды. прикапывали в отверстия. сделанные на планшетах №охд. дополненных 10% трикальцийфосфатом (0.1 мл/отверстие). При инкубации культур при температуре 30°С на протяжении 2-3 дней можно было наблюдать хорошо видимые кольца растворения. Размер их был 24 мм при использовании групп Рзеиботопаз. тестированных детально. и 26 мм. когда авторы использовали группы ВасШиз. средний размер был до 34 мм.
Доказано. что каждая индивидуальная группа Рзеиботопаз и некоторые группы ВасШиз обладают
- 8 009126 интенсивными солюбилизирующими фосфат свойствами. Эти группы несут оба варианта неорганического фосфата, хорошо детектируемые по растворению, так что можно утверждать, что они обладают превосходными солюбилизирующими фосфаты свойствами.
На основе систематических характеристик и спектра утилизации углерода было обнаружено, что 14 микроорганизмов Рзеиботопаз и 25 микроорганизмов ВасШиз, выбранных на основе тестов, являются Рзеиботопаз Йиогезсепсе и ВасШиз ро1утуха, а также ВасШиз теда!епит, которые обозначены в следующем порядке: 1-1-14, 8Ш17-1-15 и М32-1-10, затем, как указано ниже, были также выделены и депонированы варианты, размножающиеся при низкой температуре и биосинтезирующие полисахариды в больших количествах.
Выделение микроорганизмов, мобилизующих ионы калия, выполняли, как описано выше, с отличием, заключающемся в исключении хлорида калия из среды Р1коузкауа (НР) состава, приведенного выше, и добавлении 1% полевого шпата, измельченного в мелкий порошок, и слюдяного сланца вместо гидроксиапатита.
В окружающих микроорганизм культурах, превращающих минералы, не растворимые в воде, полностью или частично в растворимую форму, будет образовываться прозрачная зона.
Некоторые из них были выбраны, и на основе систематических характеристик, морфологических свойств и спектра утилизации источника углерода было показано, что они являются ВасШиз и 81гер1отусез, 15 групп авторов были обозначены как № 1-015-0003, и затем, как описано ниже, были также выделены варианты, размножающиеся при низкой температуре, и один из них был депонирован.
Пример 3. Выделение микроорганизмов, продуцирующих сидерофоры и растительные гормоны.
Способность групп, выделенных, как описано в примерах 1 и 2, продуцировать сидерофоры и гормоны, тестировали с использованием среды Кшд В. Среда имеет следующий состав.
Пептон 2%
Глицерин 1%
К2НРО4 0,15%
Мё8О4х7Н2О 0,15%
Агар 2%
Перед стерилизацией рН среды устанавливали до 7,2 раствором гидроксида натрия.
Группы Рзеиботопаз, продуцирующие сидерофоры, также фиксируют ионы железа, которые они переносят к растениям в бедной железом почве. Кроме того, они ингибируют размножение некоторых фитопатогенных микроорганизмов, таких как 1-гмина сага!оуога, так как они не могут утилизировать фиксированное железо. Авторы тестировали продуцирование сидерофор ингибированием роста группы МС1061 ЕзсйепсЫа со11. Клеточные суспензии двух групп из агаровой культуры получали с дистиллированной водой, затем культивировали прикапыванием на не содержащий железо и содержащий железо (1 мкМ ГеС13х7Н2О) планшет Кшд В (30-50 мкл) в течение 48 ч при температуре 28°С с последующим опрыскиванием планшета культурой Е. со11 МС1061, полученной из ТАд-агара, и продолжением инкубации в течение дополнительных 28 ч при температуре 28°С. Вокруг культур можно было наблюдать различные зоны ингибирования. Результаты средних четырех экспериментов показаны в табл. 1. В качестве отрицательного контроля использовали ВасШиз теда!епит, в качестве положительного контроля использовали Рзеиботопаз йиогезсепз.
Таблица 1 МикроорганизмЕ1К1пд В
Зона ингибированияОКхпд В + 1 мкМ ГеС1з
Зона ингибированияШЗИ1-1-б,
8М1-1-12
Р. £1иогез.
В. тедабег.□++++ ++ +
□□ □*Степень ингибирования: - отсутствие, + низкое, ++ и +++ высокое и очень высокое
В ходе тестирования продуцирования сидерофор с тоЪ4 и группой положительного контроля наблюдали значительную зону ингибирования, которая исчезала в присутствии ионов железа.
Как указано выше, некоторые группы Рзеиботопаз продуцируют растительные гормоны. Выбранные микроорганизмы тестировали на то, способны ли они биосинтезировать гиббереллиновую кислоту в
- 9 009126
ТАд-среде приведенного выше состава. Тесты проводили с использованием стандарта А гиббереллиновой кислоты (81дта) тонкослойной хроматографией на силикагеле (Мегск) (40 г/мл), экстракцией культур этилацетатом и последующей экстракцией двойным объемом раствора гидроксидкарбонат натрия, затем снова раствором с этилацетатом с рН 2,5. В остатке выпаривания экстракта найдены следующие группы величин КР пятен около стандарта.
Таблица 2
Группа | Кг | Размер пятна (мм2) |
Стандарт | 0,41 | 24 |
3Ν1-1-6 | 0,46 | 17 |
М32-1-9 | 0,42 | 27 |
Р. Пиог. | 0,49 | 14 |
В. шедаС. | 0,57 | 7 |
Были выбраны группы, обозначенные 8^1-1-6 и М32-1-9 (они продуцируют приблизительно 3-15 г гормона на миллиметр).
Группы, описываемые в общей части, тестировали и идентифицировали с систематической точки зрения.
Пример 4. Выделение микроорганизмов, продуцирующих экстрацеллюлярный полисахарид.
4А. Отбор Вгас1уг1п/о1шпп.
Группы ВгайугЫ/оЫиш РН2-1-3 распределяли в ТАд-среде, содержащей 1% глюкозы и 1% сахарозы (см. выше), и тестировали количество полисахарида (слизи) вокруг культур. Были выбраны группы РН2-11 и -2, биосинтезирующие полисахарид.
4В. Выделение ВасШиз.
Группы ВасШиз М32-1-10 и 8^17-1-15 распределяли в ТАд-среде, содержащей 1% глюкозы и 1% сахарозы (см. выше), и тестировали количество полисахарида (слизи) вокруг культур. Были выбраны группы М32-1-6,8 и -10 и 8^17-1-7,11 и -15, биосинтезирующие полисахарид.
На полной среде, содержащей глюкозу и сахарозу, биосинтезирующей большие количества полисахарида, трансформирующего культуральную среду в вязкий материал, доказано, что микроорганизм является М1сгососсиз гозеиз.
Выбранные группы в соответствии с тестами авторов биосинтезируют растворимый полисахарид сукциноглюконового типа известной структуры.
Пример 5. Выделение микроорганизмов, выносящих холод.
Микроорганизмы, отобранные в соответствии с примерами 1-4, обрабатывали агентом, вызывающим мутации, и радиацией. Суспензии микроорганизмов, полученные с дистиллированной водой, обрабатывали 0,01, 0,1, 1,0, 10 и 100 г/мл нитрозогуанидина в течение 1, 3, 5, 10 и 30 мин. После обработки клеточную суспензию центрифугировали, промывали 2 раза дистиллированной водой, затем клетки распределяли на культуральной среде ТАд, обработку повторяли выдерживанием клеточной суспензии в дистиллированной воде, содержащей 109 микроорганизмов на миллиметр, в течение 1, 3, 5, 10 и 30 мин под УФ-лампой 15 Вт на расстоянии от нее 10 см. Клеточные суспензии распределяли на культуральной среде ТАд с серийным разведением.
ТАд-культуры инкубировали при температуре 18 °С в течение 192 ч с последующим выделением самых больших культур на ТАд-скошенных агарах, инкубированных при температуре 18°С.
После выращивания культуры контролировали и сохраняли.
После выделения отобранные и выдерживающие холод микроорганизмы отделяли и депонировали:
А/озршПит ЬгазПепзе ззр. 8^51 (ИСА1М /Р/ В 001293),
А/о1оЬас1ег уте1апйи зрр. М657 (ХСА1М /Р/ В 001292),
Рзеийотопаз йиогезсепз уаг. 8\\'11 (ИСА1М /Р/ В 001296),
ВасШиз ро1утуха уаг. 8Ш7 (ИСА1М /Р/ В 001295),
ВасШиз теда!епит уаг. М326 (ИСА1М /Р/ В 001291),
М1сгососсиз гозеиз зрр. А21 (ИСА1М /Р/ В 001294),
ВгадугЫ/оЬшт щрошсти уаг. РН25 (ИСА1М /Р/ В 001302) и 81гер1отусез а1Ьиз уаг. 0003 ГР (ИСА1М /Р/ В 001301).
Пример 6. Культивирование микроорганизмов.
6А. Культивирование на полной культуральной среде.
Из ТАд-культуральной среды были получены культуры на скошенном агаре, затем инкубированы при температуре 30°С в течение 48 ч. Культуры А/озр1п11шп, А/о1оЬас1ет, ВасШиз, Вгауг1и/оЬшт, Рзеидотопаз, 81гер1отусез или Мюгососсиз инокулировали в культуральной средой, обозначенной Та11 и имеющей следующий состав.
Глюкоза (отдельно стерилизованная в 50% водном растворе 0,5%
Меласса 1,5%
Жидкость после замочки кукурузы (50% сухого вещества) 1,5%
- 10 009126
Экстракт дрожжей С|51сх
Кислотный казеин
Сульфат аммония
Нитрат аммония
Карбонат кальция
Дигидрофосфат калия
Хлорид натрия
Сульфат магниях7Н2О
Пальмовое масло
0,2%
0,1%
0,1%
0,1%
0,3%
0,1%
0,1%
0,1%
0,2%
100-100 мл части культуральной среды вносили в 500 мл колбы Эрленмейера, затем стерилизовали при температуре 121°С в течение 30 мин. Стерильную культуральную среду инокулировали микроорганизмами, выращенными на культурах скошенного агара, и культивирование культур проводили при температуре 25°С на вращающемся столе, действующем при вращении 260 об./мин, в течение 36 мин. Наблюдение за ростом проводили микроскопическим тестом, затем с использованием количества 5% инокулума проводили инокуляцию основной ферментативной культуральной среды ТаИ, имеющей следующий состав.
Глюкоза (отдельно стерилизованная в 50% водном растворе) 1,5%
Меласса 2,5%
Жидкость после замочки кукурузы (50% сухого вещества) 1,5%
Экстракт дрожжей Ск1сх 0,4%
Кислотный казеин 0,4%
Сульфат аммония 0,2%
Нитрат аммония 0,2%
Карбонат кальция 0,3%
Дигидрофосфат калия 0,2%
Хлорид натрия 0,1%
Сульфат магниях7Н2О 0,2%
Раствор микроэлементов* 0,45%
Пальмовое масло 0,2% *Состав раствора микроэлементов приводится в примере 1.
Культуральную среду стерилизовали в колбах Эрленмейера на 100 мл, а ферментацию проводили в лабораторных ферментерах с общим объемом 10 л и эффективным объемом 5 л в условиях, указанных выше.
Культуры, помещенные в колбы, культивировали на вращающемся столе, тогда как в ферментерах культивирование проводили обычным образом с введением воздуха (объем/объем) и проведением турбосмешивания двойным вводом и вращением 360 об./мин, в течение 24 ч, когда число клеток на миллиметр, в зависимости от бактерий, достигало величин 4х108-1,3х109.
Для получения культур в больших количествах 10 л культур получали на культуральной среде Та11, имеющей указанный выше состав, в вышеуказанных условиях ферментации, затем 100 л стерилизованной культуральной среды Та11 и 100 л культуральной среды ТаИ инокулировали каждую 5-5 л. Культивирование продолжали в течение 24 ч в указанных выше условиях ферментации, затем культуры выращивали на культуральной среде Та1И в почве, 50 л культуры, выращенной на культуральной среде Та11, использовали для инокуляции 1000 л стерилизованной культуральной среды Та1И. Культивирование проводили в указанных выше условиях ферментации в течение 24 ч, после чего, как показала проверка, культура была готова для использования. В случае необычно интенсивного вспенивания в качестве противопенящегося агента добавляли 0,01% пропиленгликоля.
6В. Культивирование на полуминимальной культуральной среде.
Процедуру, указанную в примере 6, повторяли с тем отличием, что, вместо культуральной среды Та1И, использовали культуральную среду Та2И следующего состава.
Глюкоза (отдельно стерилизованная в 50% водном растворе) 1,5%
Меласса 0,5%
Кислотный казеин 0,1%
Сульфат аммония 0,7%
Нитрат аммония 0,5%
Карбонат кальция 0,3%
Дигидрофосфат калия 0,3%
Хлорид натрия 0,1%
Сульфат магниях7Н2О 0,2%
Раствор микроэлементов* 0,35%
Пальмовое масло 0,2% *Состав раствора микроэлементов находится в соответствии с составом раствора в примере 1.
- 11 009126
После завершения культивирований культуры содержат, в зависимости от бактерий, 1-7х108 клеток на миллилитр.
Пример 7. Эксперименты улучшения структуры почвы и культивирования растений.
7А. Эксперименты для улучшения структур почвы.
Песчаную почву, собранную у ИапиЬе, около 8ош1уоз71§е1, и глинистые почвы из Ез^егдош помещали в лотки 90x90 см при толщине слоя 25 см. Песчаную почву обрабатывали 10 г нитрата аммония и 5 г фосфата кальция на лоток. В лоток высевали кукурузу в количестве 104 семян на лоток. При оценке авторы не брали данные пяти самых больших и пяти самых неразвитых растений. Измеряли массу корней, промытых дистиллированной водой с последующим высушиванием 2 дня при температуре 45 °С. Лоток № 1 обильно поливали, лоток № 2 при посеве обильно поливали, но совсем не поливали позднее. Лотки, обозначенные «а», инокулировали применяемыми в качестве микроорганизмов, биосинтезирующих полисахариды, культурами групп микроорганизмов ВасШиз ро1утуха уаг. 8^17 (ΝϋΆΙΜ /Р/ В 001295), ВасШиз шеда1епиш уаг. Μ326 (ΝϋΆΙΜ /Р/ В 001291), Мюгососсиз гозеиз зрр. А21 (ΝΟΑΙΜ /Р/ В 001294) и ВгабугЫ/оЬшт )аротсит уаг. РН25 (ΝΟΑΙΜ /Р/ В 001302), депонированных в Национальной коллекции сельскохозяйственных и промышленных микроорганизмов и полученных в соответствии с примером 6, в количестве 108 клеток на 1 м2 из каждой бактерии. Обозначенные «Ь» лотки не обрабатывали микроорганизмами.
В табл. 3 показаны результаты, полученные на 33-й день после засевания. Результаты выражены как средние величины, вычисленные для одного растения.
Таблица 3
Почва | Лоток | Обработка | Высота растения (см) | Масса корневой системы (мг) |
Песчан. | №1 | А В | 24 17 | 945 634 |
№2 | А В | 18 11 | 8 66 757 | |
Глинист. | №1 | А В | 27 23 | 1095 1213 |
№2 | А В | 20 19 | 1012 689 |
В табл. 4 показана степень рассыпания и растрескивания неполитых песчаных и глинистых почв (лоток № 2). Термином «степень рассыпания» авторы обозначают, что основная часть фрагментов почвы рассыпалась на листе бумаги и не распадающиеся в ходе слабого встряхивания комочки имеют размер ниже 2 мм (-), между 2-5 мм (+) или больше 5 мм (++). Степень растрескивания поверхности почвы обозначают так, что отсутствие растрескиваний отмечают ++, слабое растрескивание обозначают +, тогда как в присутствии больших линий растрескивания характеристику растрескивания сухих почв обозначают -.
Таблица 4
Почва | Обработка | Степень рассыпания | Степень растрескивания |
Песчан. | А | + | + |
В | - | - или + . | |
Глинист. | А | ++ | + |
В | ++ . | ++ |
Из данных табл. 3 и 4 можно видеть, что присутствие микроорганизмов, биосинтезирующих полисахариды, улучшает развитие растений и является благоприятным для структуры почвы.
7В. Эксперименты на полях.
Эксперименты проводили на 1шргоуешеп1 апб СиШуайоп Тесйпо1о§1са1 81айоп о£ Μозоптадуа^оνа^ итуегзйу в 2000г. с 10 л смеси микроорганизмов на гектар, при случайном размещении в виде блоков и повторе 4 раза, с 10 л смеси микроорганизмов на гектар.
Тип экспериментальной почвы: регион ИапиЬе, толщина слоя 120-140 см, содержание гумуса 2,4%, количество осадков бедное.
Яровая пшеница
Содержание белка, % | |
Контроль | 11,80 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 11, 87 |
ВасйоГИ А | 11,96 |
Содержание белка, корректированное на сухое вещество, % | |
Контроль | | 13,84 |
- 12 009126
ΝΡΚ 200, кг/га | 13,91 |
ВасбоЕН А | 14,00 |
Сырой глютен, % | |
Контроль | 32,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 31,1 |
ВасбоЕН А | 31,1 |
Масса тысячи зерен (г) | |
Контроль | 36, 4 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 36,8 |
ВасЬоЕН А | 36,4 |
Дробление, % | |
Контроль | 50,5 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 50,0 |
ВасбоЕН А | 49, 8 |
Величина падения (сек) | |
Контроль | 278,3 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 281,5 |
ВасбоЕН А | 272,5 |
Разравнивание глютена (см) | |
Контроль | 2,75 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 3,25 |
ВасбоЕН А | 2,75 |
Удлинение глютена (см) | |
Контроль | 12,5 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 11, 8 |
ВасЪоЕН А | 12,3 |
Индекс ге!епу | |
Контроль | 30,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 30,3 |
ВасЬоЕН А | 30,8 |
Способность поглощать воду на приборе Уа1ог1дгарИ (мл) | |
Контроль | 31,3 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 31,6 . |
ВасЬоЕН А | 31,4 |
Величина, полученная на УаТоггдгарИ | |
Контроль | 57,3 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 53,1 |
ВасбоЕН А | 48,0 |
Объем листьев (см3) | |
Контроль | 962, 5 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 977,5 |
ВасбоЕН А | 1055,0 |
Морфологический | коэффициент хлеба |
Контроль | 2,38 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 2,46 |
ВасбоЕН А | 2,32 |
Выход белка (кг/га) | |
Контроль | 469, 8 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 498, 6 |
ВасбоЕН А | 510,3 |
Высота растения (см) | |
Контроль | 56,3 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 57,7 |
ВасбоГИ А | 55,4 |
Урожай зерна, вычисленный для 13% влажности | |
Урожай зерна % контроля т/га | |
Контроль | 3,366 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 3,552 105,5 |
ВасЬоЕН А | 3,617 107,5 |
Урожай зерна | |
Урожай зерна % контроля т/га | |
Контроль | 3,398 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 3,584 105,5 |
ВасбоЕН А | 3,646 107,3 |
Содержание влаги урожая пшеницы, % | |
Контроль | | 14,08 |
- 13 009126
ΝΡΚ 200, кг/га | 14,00 |
ВасЬоЕП А | 13,93 |
Масса для тестирования (кг) | |
Контроль | 69, 8 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 70,4 |
Кукуруза
Сырой урожай сердцевины кукурузного початка (кг/участок) | ||
Сырой урожай сердцевины кукурузного початка (т/га) | % контроля | |
Контроль | 5,725 | 100, 3 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 6, 848 | 119, 6 |
ВасбоЕН А | 6, 495 | 113, 4 |
Урожай зерна, вычисленный на 14% влаги | ||
Урожай зерна (т/га) | % контроля | |
Контроль | 5, 496 | 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 6, 614 | 120,3 |
ВасРоЕН А | 6,175 | 112,3 |
Содержание влаги зерен, % | ||
Контроль | 18,40 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 17,78 | |
ВасбоЕН А | 19,63 | |
Масса стебля | ||
Масса стебля (т/га) | % контроля | |
Контроль | 2,672 | 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 3,016 | 112, 9 |
ВасбоРИ А | 2, 886 | 108,0 |
Содержание влаги стебля, % | ||
Контроль | 26,1 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 25, 6 | |
ВасбоЕН А | 25, 9 | |
Масса стебля, вычисленная на 14% влаги | ||
Масса стебля (т/га) | % контроля | |
Контроль | 2,416 | 100, 0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 2,740 | 113, 4 |
ВасбоЕН А | I 2,613 | 108,2 |
Число стеблей (тысяча шт/га) | ||
Контроль | 38,41 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 39,13 | |
ВасЬоЕН А | 39,86 | |
Число стержней кукурузного початка на стебель (шт/участок) | ||
Контроль | 1, 04 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 1,10 | |
ВасбоЕН А | 1,05 | |
Число стержней кукурузного початка (тысяча шт/га) | ||
Контроль | 39,86 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 42,93 | |
ВасбоЕН А | 42,03 | |
Масса тысячи сырых зерен (г) | ||
Контроль | 255,2 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 259,2 | |
ВасбоЕН А | 263,3 . .... . . | |
Масса тысячи зерен при 14% влажности (г) | ||
Контроль | 245, 6 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 250, 9 | |
ВасбоЕН А | 251, 0 | |
Масса | сырого материала для тестирования (кг) | |
Контроль | 65,9 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 65,1 | |
ВасбоЕН А | 64,6 | |
Масса одного стержня кукурузного початка (кг) при 14% | ||
влажности | ||
Контроль | 0,121 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 0,136 | |
ВасбоЕН А | 0,131 | |
Число | зерен на стержень кукурузного початка | |
Контроль | 493,5 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 545,1 | |
ВасЬоЕН А | 523,1 |
- 14 009126
Содержание влаги стержня кукурузного початка, % | ||
Контроль | 19,4 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 20,7 | |
ВасЕоЕН А | 18,9 . . 1 | |
Масса стержня кукурузного початка (г) | ||
Контроль | 22,3 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 22,3 | |
ВасДоЕН А | 22,4 | |
Индекс урожая | ||
Контроль | 44,1 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 41,5 | |
ВасЬоЕН А | 42,3 |
Сахарная свекла
Число плодов свеклы/га | ||
Контроль | 79891 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 81159 | |
ВасЪоЕН А | 83696 | |
Урожай верхней части свеклы | ||
Урожай верхней части (т/га) | % контроля | |
Контроль | 13,41 | 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 13,96 | 104,1 |
ВасЪоЕН А | 15,38 | 114,7 |
Урожай корней | ||
Урожай корней (т/га) | % контроля | |
Контроль | 30,46 | 100, 0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 36, 74 | 120, 6 |
ВасГоЕН А | 39,35 | 129, 2 |
Отношение верхняя часть/корни | ||
Отношение верхняя часть/корни | % контроля | |
Контроль | 0,443 | 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 0,381 | 85,9 |
ВасРоЕН А | 0,391 | 88,2 |
Средняя масса корней | ||
| Средняя масса корней (дкг) | | % контроля |
Контроль | 38,2 | 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 45,3 | 118,6 |
ВасДоЕН А | 47,1 | 123, 5 |
% усвоения | ||
% усвоения | Контроль | |
Контроль | 11,61 | 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 11,07 | 95,3 |
ВасЕоЕН А | 10,59 | 91,3 |
Содержание Иа (мг/100 г свеклы) | ||
Контроль | 1, 94 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 2,28 | |
ВасЬоЕН А | 2,08 | |
Содержание альфа-амино-Ν (мг/100 г свеклы) | ||
Контроль | 1,20 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 1,02 | |
ВасйоЕН А | 1,02 ........ ...... ... 1 | |
Содержание К (мг/100 г свеклы) | ||
Контроль | 2,52 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 1,89 | |
ВасЬоЕН А | 2,10 | |
Потери, % | ||
Контроль | 2,95 | |
ΝΡΚ 200, кг/га | 2,68 | |
ВасЕоЕН А | 2, 68 | |
Содержание очищенного сахара | ||
Содержание очищенного сахара, % | % контроля | |
Контроль | 8,66 | 100, 0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 8,39 | 96, 9 |
ВасЬоЕН А | 7,92 | 91,4 |
Брутто-выход сахара | ||
Брутто-выход сахара (т/га) | % контроля | |
Контроль | 3,557 | 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 4,081 | 114,7 |
- 15 009126
ВасГоРИ А | 4,181 | 117,5 |
Нетто-урожай сахара (т/га) | Контроль | |
Контроль | 2,656 | 100,0 |
ΝΡΚ 200, кг/га | 3,091 | 116,4 |
ВасЪоРИ А | 3,125 | 117,7 |
Пример 8. Получение препаратов, содержащих микроорганизмы настоящего изобретения.
А. Получение смеси микроорганизмов.
Культуры Αζозр^^^11ит ЬгазПепзе ззр. 8ν51 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001293), ΑζоΐоЬасΐе^ уте1апПп зрр. М657 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001292), РзеиПотопаз Ниогезсепз уаг. 8ν11 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 0С1296), ВасШиз ро1утуха уаг. 8ν17 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001295), ВасШиз те§а!епит уаг. М326 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001291), Мюгососсиз гозеиз зрр. Α21 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001294), ВгаПу1^оЬшт заротсит уаг. РН25 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001302) и 81гер1отусез а1Ьиз уаг. 0003 Б-Р (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001301), полученные в соответствии с примером 6, смешивали, оптимально в равных пропорциях, и вносили в почву, которую нужно было обработать, в количестве между 5 и 50 л, оптимально в количестве 12 л/га в любой период года без заморозков, оптимально между мартом и октябрем.
8В. Получение для обработки однодольных растений.
Получение проводили по процедуре примера 6 с тем отличием, что применяли следующие микроорганизмы: Αζозр^^Шит ЬгазПепзе ззр. 8ν51 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001293), ΑζоΐоЬасΐе^ уте1апПп зрр. М657 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001292), РзеиПотопаз Ниогезсепз уаг. 8ν11 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001296), ВасШиз ро1утуха уаг. 8ν17 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001295), ВасШиз те§а!епит уаг. М326 (Ν0ΑΙΜ /Р/ В 001291) и 81гер1отусез а1Ьиз уаг. 0003 РР (ΝϋΑΙΜ /Р/ В 001301).
8С. Получение для обработки двудольных растений.
Получение проводили по способу примера 6 изобретения с тем отличием, что применяли следующие микроорганизмы: Αζозр^^Шит ЬгазПепзе ззр. 8ν51 (NСΑIΜ /Р/ В 0С1293), ΑζоΐоЬасΐе^ уте1апПп зрр. М657 (Νί'ΆΙΜ /Р/ В 0С1292), РзеиПотопаз Ниогезсепз уаг. 8ν11 (Νί'ΆΙΜ /Р/ В 001296), ВасШиз ро1утуха уаг. 8ν17 (NСΑIΜ /Р/ В 001295), ВасШиз те§а!епит уаг. М326 (NСΑIΜ /Р/ В 001291), Мюгососсиз гозеиз зрр. Α21 (NСΑIΜ /Р/ В 001294), ВгаПу1^оЬшт заротсит уаг. РН25 (NСΑIΜ /Р/ В 001302).
8Ό. Получение препарата, высушенного в условиях замораживания.
л водной суспензии микроорганизмов по примеру 6 лиофилизировали в оборудовании для лиофилизации Ое1тап 8Р54, действуя по инструкциям эксплуатации оборудования. Порошок сухих микроорганизмов использовали как таковой или, в зависимости от применения, смешивали с карбонатом кальция, крахмалом, глюкозой или целлюлозой в пропорции между 1:1 и 1:100, затем препарат хранили до использования при температуре между 4 и 10°С.
8Е. Получение препарата, содержащего носитель.
В оптимальном случае равную пропорцию культур, полученных на культуральной среде в соответствии с примером 6, смешивали с органическим компостом, соевой мукой (общий размер гранул 4 меш), метилцеллюлозой или картофельным крахмалом так, чтобы препарат содержал 5х108-1010, оптимально 5х109 клеток микроорганизмов, затем сырой препарат или препарат, высушенный при температуре ниже 40°С, в количестве 2-20, оптимально в количестве 5 кг/га, вводили в почву, которую нужно было обработать. Оптимально в почву вводили по меньшей мере 1013 клеток микроорганизмов на гектар.
Резюме
Предметом изобретения являются продукты и способ обработки почвы бактериями для повышения роста растений и для повышения урожая, способы получения продуктов, исходных микроорганизмов, служащих в качестве основы продуктов, размножающихся при низкой температуре, биосинтезирующих полисахариды, и способы их получения. Клетки одного из микроорганизмов по изобретению или их соединение будет переноситься в почву или фиксироваться в семенах растений.
По способу настоящего изобретения продукт доставляют в почву, причем продукт содержит по меньшей мере одну из групп почвенных бактерий, превращающих азот воздуха в соединения, доступные для растений, солюбилизирующих минерализованные фосфатные соединения и соединения калия и биосинтезирующие материалы, улучшающие развитие растений, продуцирующих полисахариды, оптимально влияющие на структуру почвы, причем микроорганизмы выделены из различных почв и изменены в лабораторных условиях так, чтобы можно было достичь удовлетворительных урожаев и практически исключить применение дорогих удобрений.
Claims (15)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Штамм микроорганизма Αζозр^^Шит ЬгазПепзе ззр. 8ν51 (NСΑIΜ/Р/Β 001293), оптимально размножающийся при температурах ниже 20°С и рН 5, используемый для получения препаратов для обработки почвы.
- 2. Штамм микроорганизма ΑζоЬасΐе^ уте1апПп ззр. М657 (NСΑIΜ/Р/Β 001292), оптимально раз- 16 009126 множающийся при температурах ниже 20°С и рН 5, используемый для получения препаратов для обработки почвы.
- 3. Штамм микроорганизма Р8еийотопа8 Пиоге8сеп8 гаг. 8XV11 (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001296), оптимально размножающийся при температурах ниже 20°С и рН 5, используемый для получения препаратов для обработки почвы.
- 4. Штамм микроорганизма ВасШи8 ро1утуха гаг. 8ν17 (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001295), оптимально размножающийся при температурах ниже 20°С и рН 5, используемый для получения препаратов для обработки почвы.
- 5. Штамм микроорганизма ВасШи8 тедЯепит гаг. Μ326 (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001291), оптимально размножающийся при температурах ниже 20°С и рН 5, используемый для получения препаратов для обработки почвы.
- 6. Штамм микроорганизма Μκιό^^^ го8еи8 88р. Α21 (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001294), оптимально размножающийся при температурах ниже 20°С и рН 5, используемый для получения препаратов для обработки почвы.
- 7. Штамм микроорганизма Вгайуг1ШоЬшт _]арошсит гаг. РН25 (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001302), оптимально размножающийся при температурах ниже 20°С и рН 5, используемый для получения препаратов для обработки почвы.
- 8. Штамм микроорганизма 81гер1отусе8 а1Ьи8 гаг. 0003 ЬР (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001301), оптимально размножающийся при температурах ниже 20°С и рН 5, используемый для получения препаратов для обработки почвы.
- 9. Способ получения микроорганизмов по любому из пп.1-8, заключающийся в обработке исходных микроорганизмов нитрозо-гуанидином и ультрафиолетовым облучением в качестве мутагенов и выделении нужных штаммов, размножающихся при низкой температуре.
- 10. Препарат, используемый для обработки почвы, содержащий по меньшей мере один из штаммов микроорганизмов по любому из пп.1-8, в количестве 5х106-10п клеток на грамм препарата, и сырой или сухой приемлемый сельскохозяйственный носитель, нетоксичный для микроорганизмов.
- 11. Препарат по п.10, в котором носитель представляет собой воду, и/или соевую муку, и/или крахмал, и/или целлюлозу, и/или глюкозу, или их производные.
- 12. Способ получения препарата, используемого для обработки почвы по любому из пп.10-11, заключающийся в раздельном или совместном культивировании на питательной среде, содержащей источник углерода и азота и неорганические соли по меньшей мере одного из штаммов микроорганизма по любому из пп.1-8 до достижения числа клеток каждого штамма между 5х107 и 5х109 на миллилитр, и, при необходимости, смешивании полученных культур в определенных пропорциях, и, при необходимости, нанесении культуры (культур) на носитель или смешивании с ним, и, при необходимости, лиофилизации полученного препарата.
- 13. Способ по п.12, где в качестве источника углерода используют глюкозу, и/или сахарозу, и/или мелассу, в качестве источника азота используют хлорид аммония, и/или нитрат аммония, и/или сульфат аммония, и/или жидкость после замачивания кукурузы, и/или гидролизат казеина и в качестве неорганических солей используют карбонат кальция и соли, диссоциирующие на натрий-, калий-, магний-, кальций-, ферро-, нитрат-, хлорид-, сульфат-, карбонат-, фосфат-ионы, и, при необходимости, микроэлементы.
- 14. Способ обработки почвы препаратом по любому из пп.10-11, характеризующийся нанесением препарата на почву или введением препарата в почву в период без заморозков из расчета от 1010 до 1014 клеток на гектар.
- 15. Способ улучшения или сохранения структуры почвы, характеризующийся в обработке почвы препаратом по любому из пп.10-11, где микроорганизм выбран из числа микроорганизмов, продуцирующих полисахариды, предпочтительно из числа микроорганизмов, продуцирующих сукциноглюкон, таких как ВасШи8 ро1утуха гаг. 8ν17 (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001295), ВасШи8 теда!егшт гаг. Μ326 (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001291), Μκιό^^^ го8еи8 88р. А21 (ΝΟΑΙΜ/Р/В 001294), ВгайуйШоЬшт _)арошсит гаг. РН25 (Νί,ΑΙΜ/Р/В 001302) и их смесей.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
HU0103294A HU230555B1 (hu) | 2001-08-13 | 2001-08-13 | Környezetbarát mikroorganizmus-készítmény és annak előállítása |
PCT/HU2002/000081 WO2003016241A1 (en) | 2001-08-13 | 2002-08-12 | Micro-organisms for the treatment of soil and process for obtaining them |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA200400309A1 EA200400309A1 (ru) | 2004-08-26 |
EA009126B1 true EA009126B1 (ru) | 2007-10-26 |
Family
ID=90001687
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA200400309A EA009126B1 (ru) | 2001-08-13 | 2002-08-12 | Микроорганизмы для обработки почвы и способ их получения |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7842494B2 (ru) |
EP (2) | EP2233458B1 (ru) |
JP (1) | JP2005500413A (ru) |
KR (1) | KR100940615B1 (ru) |
CN (1) | CN1315758C (ru) |
AU (1) | AU2009200523B2 (ru) |
BR (1) | BR0211920B1 (ru) |
CA (1) | CA2457154A1 (ru) |
CO (1) | CO5560603A2 (ru) |
EA (1) | EA009126B1 (ru) |
ES (1) | ES2451341T3 (ru) |
HR (1) | HRP20040126B1 (ru) |
HU (1) | HU230555B1 (ru) |
MX (1) | MXPA04001383A (ru) |
PL (1) | PL217740B1 (ru) |
RS (1) | RS52487B (ru) |
UA (1) | UA86178C2 (ru) |
WO (1) | WO2003016241A1 (ru) |
ZA (1) | ZA200401142B (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104945078A (zh) * | 2014-05-12 | 2015-09-30 | 山东沃地丰生物肥料有限公司 | 一种保根生物活菌株修复剂 |
Families Citing this family (47)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100577717B1 (ko) * | 2004-06-12 | 2006-05-10 | 대한민국 | 작물생장을 촉진시키는 미생물 바실러스 메가테리움kr076(kacc91049) 및 이를 함유하는 미생물 제제 |
KR101118485B1 (ko) * | 2004-07-26 | 2012-03-12 | 충북대학교 산학협력단 | 고정화된 인산 가용화 미생물을 포함하는 비료 조성물의 제조방법 |
CN100370005C (zh) * | 2005-01-13 | 2008-02-20 | 中国科学院水生生物研究所 | 土壤藻类对荒漠半荒漠土壤的改良方法 |
KR100755509B1 (ko) * | 2006-05-29 | 2007-09-04 | 대한민국(관리부서:농촌진흥청) | 질소고정력 및 작물생장촉진 효과가 있는 신균주 아조스피릴룸 브라실렌스 cw301, 이를 이용한 생물비료 및 그 제조방법 |
ES2307391B1 (es) * | 2006-07-26 | 2009-09-28 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | Microorganismos recombinantes que contienen un gen de resistencia a estres salino y sus aplicaciones. |
PL2150610T3 (pl) * | 2007-04-21 | 2014-01-31 | Manuel Gidekel | Preparat bionawozu |
WO2008155514A2 (en) * | 2007-06-20 | 2008-12-24 | Ultra Biotech Limited | Microbial formulation and method of using the same promote plant growth |
CN101182478B (zh) * | 2007-12-07 | 2010-05-19 | 华南农业大学 | 一种根瘤固氮菌株系bdyd1及其应用 |
BRPI0906761A2 (pt) | 2008-01-15 | 2015-07-14 | Univ Michigan State | Formulações polimicrobianas para aumentar produtividade de planta |
JP5020839B2 (ja) * | 2008-01-30 | 2012-09-05 | 新日本製鐵株式会社 | 新規微生物および新規微生物を用いた化合物の製造方法 |
WO2010109436A1 (en) * | 2009-03-25 | 2010-09-30 | Carepro Bioscience (P) Ltd | Microbial formulation for widespread uesd in agricultural practices |
JP5714603B2 (ja) * | 2009-12-22 | 2015-05-07 | ラントメネン・バイオアグリ・アーベー | 植物の出芽および生長を増強するためのシュードモナス・アゾトフォルマンス(pseudomonasazotoformans)種の新規蛍光シュードモナス菌 |
WO2011099019A1 (en) * | 2010-02-09 | 2011-08-18 | Patel, Babubhai, C. | Composition and method of preparation of bacterial based product that fix atmospheric nitrogen from air and makes available to plant |
WO2011154962A1 (en) * | 2010-06-09 | 2011-12-15 | Patel, Babubhai C. | Advance material and method of preparation of bacterial formulation using plant growth promoting bacteria for providing nutrition essential for promoting plant growth |
WO2011154963A1 (en) * | 2010-06-09 | 2011-12-15 | Patel, Babubhai C. | Advance material and method of preparation of bacterial formulation using phosphorus solubilizing bacteria that makes phosphorous available to plant which are unavailable due to higher soil ph |
RU2464308C2 (ru) * | 2010-11-11 | 2012-10-20 | Государственное научное учреждение Татарский научно-исследовательский институт агрохимии и почвоведения Российской академии сельскохозяйственных наук | ШТАММ БАКТЕРИЙ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM 5 V(e), ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ АЗОТФИКСИРУЮЩЕГО УДОБРЕНИЯ ДЛЯ ЗЕРНОВЫХ И КОРМОВЫХ КУЛЬТУР |
CN102021133B (zh) * | 2010-11-25 | 2012-12-19 | 甘肃农业大学 | 一种燕麦根际微生物复合接种剂及其制备方法 |
HUP1100008A2 (en) | 2011-01-07 | 2013-03-28 | Saniplant Biotechnologiai Kutato Es Fejlesztoe Kft | Serum for soil |
CN102174436B (zh) * | 2011-01-24 | 2012-06-27 | 领先生物农业股份有限公司 | 一株高效固氮的大豆慢生根瘤菌及其培养方法与它的用途 |
WO2013035032A2 (en) * | 2011-09-11 | 2013-03-14 | Chaudhari Sharad N | Capsulated formulation with beneficial microbes for healthy plant growth |
CA3202904A1 (en) | 2011-12-13 | 2013-06-20 | Monsanto Technology Llc | Plant growth-promoting bacillus thuringiensis strain and uses thereof |
CN102636613B (zh) * | 2012-03-22 | 2014-10-15 | 叶春 | 一种人工湿地填料生物膜活性的测定方法 |
CN102826895B (zh) * | 2012-08-01 | 2014-04-23 | 邓振山 | 一种多元复合微生物菌肥及其制备方法 |
MA35581B1 (fr) * | 2013-04-05 | 2014-11-01 | Valorhyze | Procédé de formulation stable d'un produit biofertilisant à base d'une souche fixatrice d'azote atmosphérique, azospirillum basillence lr11 |
WO2015114552A1 (en) * | 2014-01-29 | 2015-08-06 | University Of Pretoria | Plant growth promoting rhizobacterial strains and their uses |
HU231353B1 (hu) | 2014-02-10 | 2023-03-28 | BioFil Mikrobiológiai, Géntechnológiai és Biokémiai Kft | Stressztalajok oltására szolgáló talajbaktériumok |
KR101743607B1 (ko) | 2015-01-28 | 2017-06-05 | (주)케이케이티생명자원개발연구소 | 에스-아바(엡시스산) 추출물 제조방법 |
CN104830724B (zh) * | 2015-05-05 | 2018-01-23 | 浙江省环境保护科学设计研究院 | 一株根瘤菌菌株及其应用 |
WO2017089641A1 (es) * | 2015-11-24 | 2017-06-01 | Biobab R&D, S.L | Composiciones bioestimulantes de plantas que comprenden cepas de microorganismos |
CN105565978B (zh) * | 2015-12-23 | 2019-04-02 | 湖北翔农化肥有限公司 | 一种聚合碳微球肥料缓释增效剂及其制备方法 |
WO2018182555A2 (en) * | 2016-10-05 | 2018-10-04 | Yedi̇tepe Sağlik Hi̇zmetleri̇ Anoni̇m Şi̇rketi̇ | Microorganisms which are effective for preventing plant's cold stress |
US20200138038A1 (en) | 2017-05-09 | 2020-05-07 | Taxon Biosciences Inc. | Plant growth-promoting microbes, compositions, and uses |
CN108456058A (zh) * | 2018-02-28 | 2018-08-28 | 北京沃土天地生物科技股份有限公司 | 一种液体复合微生物肥料及其制备方法 |
RU2678755C1 (ru) * | 2018-03-23 | 2019-01-31 | Общество с ограниченной ответственностью "Органик парк" | Биологический агент для стимуляции ростовых процессов в растениях |
RU2675503C1 (ru) * | 2018-04-05 | 2018-12-19 | Светлана Александровна Ибрагимова | Способ получения биологического препарата для стимуляции роста и защиты растений от заболеваний |
CN110358698B (zh) * | 2018-04-11 | 2021-06-25 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 巨大芽孢杆菌在增强植物抗干旱胁迫能力中的应用 |
CN108559721A (zh) * | 2018-05-15 | 2018-09-21 | 北京师范大学 | 一种净化空气的复合微生物菌剂及其应用 |
WO2019236672A1 (en) * | 2018-06-06 | 2019-12-12 | Agrinos AS | Microbial consortia producing dipicolinic acid and methods for selecting microbes for co-formulation with carriers |
US20210400985A1 (en) | 2018-10-10 | 2021-12-30 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Plant growth-promoting microbes, compositions, and uses |
ES2789973B2 (es) * | 2019-04-26 | 2022-02-07 | Probelte S A U | Biofertilizante liquido que comprende cepas de azospirillum brasilense y pantoea dispersa y metodo de obtencion del mismo |
CN110317087A (zh) * | 2019-07-25 | 2019-10-11 | 南京林业大学 | 适用于南方贫瘠土壤的解磷固氮复合菌肥、制备方法及其应用 |
CN110885771B (zh) * | 2019-11-22 | 2023-05-16 | 云南省烟草公司临沧市公司 | 用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂 |
CN110885693A (zh) * | 2019-12-05 | 2020-03-17 | 吉林省电力科学研究院有限公司 | 一种煤泥晾晒方法 |
US11505509B2 (en) * | 2020-01-22 | 2022-11-22 | Larry D. Mohr | Agricultural additive composition for improving soil health and method of use |
CN111849842B (zh) * | 2020-08-17 | 2022-05-03 | 南昌师范学院 | 解钾菌、包括其的解钾菌菌剂及应用 |
CN116694526B (zh) * | 2023-06-16 | 2024-04-09 | 临沂大学 | 一种促进生根的复合微生物菌剂及其制备方法 |
CN117229957B (zh) * | 2023-09-19 | 2024-05-03 | 中化化肥有限公司临沂农业研发中心 | 一种链霉菌、发酵液及其应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1984001686A1 (en) * | 1982-10-28 | 1984-05-10 | Biotech General Corp | Novel strains of azospirillum, methods of growing the strains, compositions containing them and use thereof as biofertilizer |
WO1996034840A1 (es) * | 1995-05-04 | 1996-11-07 | Consejo Superior Investigaciones Científicas | Fertilizante bacteriano y procedimiento de obtencion |
WO1998037038A2 (de) * | 1997-02-25 | 1998-08-27 | Pollak Arpad | Methode der stickstoffbindung aus der luft, mobilisation der phosphorverbindungen und der zersetzung des ölsedimentes |
WO1999009834A2 (en) * | 1997-08-27 | 1999-03-04 | Phylaxia Pharma Rt. | Method for improving soil microorganism population |
WO2000034440A1 (en) * | 1998-12-10 | 2000-06-15 | Tatko Biotech, Inc. | Microorganisms for improving plant productivity |
Family Cites Families (36)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2355453A1 (fr) * | 1976-06-21 | 1978-01-20 | Gist Brocades Nv | Application de streptomyces albus en agronomie et dans l'industrie alimentaire |
HU188434B (en) | 1983-03-02 | 1986-04-28 | Phylaxia Oltoanyagtermeloe Vallalat,Hu | Process for preparing a bacterial substance for the inoculation of soil |
US4900348A (en) * | 1983-08-02 | 1990-02-13 | The Ohio State University Research Foundation | Production of disease suppresive compost and container media, and microorganism culture for use therein |
HU195068B (en) | 1984-02-24 | 1988-04-28 | Varosepitesi Tudomanyos | Method for grafting by alga and forming respectively increasing the productivity of soil |
US4663162A (en) * | 1984-03-14 | 1987-05-05 | The Regents Of The University Of California | Method of using Bacillus polymyxa 9A to protect plants against verticillium wilt |
US4647533A (en) * | 1984-09-14 | 1987-03-03 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Method for screening bacteria and application thereof for field control of Pythium spp. on small grain crops |
EP0210734A1 (en) * | 1985-06-14 | 1987-02-04 | BURNS, PHILP & COMPANY LIMITED | Mushroom blotch control agent |
CA1335363C (en) * | 1985-07-02 | 1995-04-25 | Imperial Oil Limited | Emergence-promoting rhizobacteria |
US4711656A (en) * | 1986-08-01 | 1987-12-08 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Enhancement of nitrogen-fixation with rhizobial tan variants |
CA1335366C (en) * | 1986-08-19 | 1995-04-25 | Joseph Kloepper | Plant growth promoting rhizobacteria for agronomic nonroot crops |
CA1335364C (en) * | 1986-12-17 | 1995-04-25 | Joseph Wayne Kloepper | Beneficial, direct-acting soil bacteria |
US4863866A (en) * | 1987-03-12 | 1989-09-05 | Lipha Chemicals, Inc. | Bradyrhizobium japonicum mutants exhibiting superior soybean nodulation |
CA1327333C (en) * | 1988-08-03 | 1994-03-01 | Jennifer L. Parke | Biological inoculant effective against aphanomyces |
US5021076A (en) * | 1989-03-17 | 1991-06-04 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Enhancement of nitrogen fixation with Bradyrhizobium japonicum mutants |
CA2035738C (en) * | 1990-02-07 | 2001-04-24 | Zongling Liu | Biological agent for control of crop fungal disease |
HU207751B (en) | 1991-02-08 | 1993-05-28 | Phylaxia Oltoanyagtermeloe | Process for producing composition for utilizing nitrogen of the air and phosphorous of the soil for plant |
GB9107678D0 (en) * | 1991-04-11 | 1991-05-29 | Ici Plc | Antifungal micro-organism |
US5348742A (en) * | 1991-05-24 | 1994-09-20 | Ciba-Geigy Corporation | Anti-pathogenic bacterial strains of Pseudomonas fluorescens |
IT1248095B (it) * | 1991-06-20 | 1995-01-05 | Ministero Dell Uni E Della | Ceppi batterici di pseudomonas (ncimb 40403, ncimb 40376, ncimb 40375,ncimb 40377, ncimb 40402, ncimb 40379) in grado di controllare le infezioni fungine. |
FR2678281A1 (fr) * | 1991-06-26 | 1992-12-31 | Agronomique Inst Nat Rech | Moyens pour ameliorer la croissance des plantes. |
GB9207352D0 (en) * | 1992-04-03 | 1992-05-13 | Ici Plc | Method to control fungal disease |
HU213163B (en) | 1993-12-07 | 1997-02-28 | Phylaxia Rt | Method for preparation of a composition and use for recultivation of soil |
CN1056959C (zh) * | 1994-03-28 | 2000-10-04 | 北京大学 | 高效花生增产剂及其制备方法 |
JPH08322556A (ja) * | 1995-03-28 | 1996-12-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 新規なシュードモナス・フルオレッセンス |
US5650372A (en) * | 1995-05-30 | 1997-07-22 | Micro Flo Company | Plant treatment with bacillus strain ATCC |
JP2835598B2 (ja) * | 1996-05-20 | 1998-12-14 | 多木化学株式会社 | 育苗培土及びその製造方法並びに耐病性苗の育成方法 |
JP3119349B2 (ja) * | 1997-04-15 | 2000-12-18 | 多木化学株式会社 | 植物成長抑制剤 |
US6228806B1 (en) * | 1997-09-09 | 2001-05-08 | Organica Inc. | Biochemical fertilizer composition |
CA2304771A1 (en) * | 1997-09-26 | 1999-04-08 | Hideaki Tateishi | Microbial pesticides |
US6277625B1 (en) * | 1997-11-20 | 2001-08-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Transgenic strains of Pseudomonas for biocontrol of plant root diseases |
CA2238289C (en) * | 1998-05-20 | 2013-08-06 | The Governors Of The University Of Alberta | Biocontrol agent and fungicide for blackleg disease |
AUPP589798A0 (en) * | 1998-09-14 | 1998-10-08 | Charles Sturt University | Novel bacterial strains and methods of controlling fungal pathogens |
EP1021954B1 (de) * | 1998-12-24 | 2002-10-02 | Gabriele Dr. Berg | Rhizobakterienisolate zur Anwendung gegen phytopatogene Bodenpilze und Verfahren zur Anwendung der Rhizobakterienisolate |
AU1928901A (en) * | 1999-11-24 | 2001-06-04 | University Of Maryland | Improved inoculant strains of bradyrhizobium japonicum |
CN1275551A (zh) * | 2000-06-19 | 2000-12-06 | 韩承民 | 环保生物菌肥及其生产方法 |
EP1241247A1 (en) * | 2001-03-13 | 2002-09-18 | C.C.H. S.A. | Isolated bacteria for the protection of plants against phytopathogenic fungi and bacteria |
-
2001
- 2001-08-13 HU HU0103294A patent/HU230555B1/hu unknown
-
2002
- 2002-08-12 US US10/486,747 patent/US7842494B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-08-12 CA CA002457154A patent/CA2457154A1/en not_active Abandoned
- 2002-08-12 CN CNB028203003A patent/CN1315758C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-08-12 EP EP09005034.5A patent/EP2233458B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-08-12 WO PCT/HU2002/000081 patent/WO2003016241A1/en active Application Filing
- 2002-08-12 BR BRPI0211920-0A patent/BR0211920B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-08-12 KR KR1020047002210A patent/KR100940615B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2002-08-12 EA EA200400309A patent/EA009126B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-08-12 JP JP2003521170A patent/JP2005500413A/ja active Pending
- 2002-08-12 ES ES09005034.5T patent/ES2451341T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-08-12 PL PL369237A patent/PL217740B1/pl unknown
- 2002-08-12 MX MXPA04001383A patent/MXPA04001383A/es unknown
- 2002-08-12 EP EP02755388A patent/EP1919848A1/en not_active Withdrawn
- 2002-08-12 RS YU14004A patent/RS52487B/en unknown
- 2002-12-08 UA UA2004021085A patent/UA86178C2/ru unknown
-
2004
- 2004-02-06 HR HRP20040126AA patent/HRP20040126B1/hr not_active IP Right Cessation
- 2004-02-12 ZA ZA200401142A patent/ZA200401142B/en unknown
- 2004-02-13 CO CO04012433A patent/CO5560603A2/es not_active Application Discontinuation
-
2009
- 2009-02-11 AU AU2009200523A patent/AU2009200523B2/en not_active Ceased
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1984001686A1 (en) * | 1982-10-28 | 1984-05-10 | Biotech General Corp | Novel strains of azospirillum, methods of growing the strains, compositions containing them and use thereof as biofertilizer |
WO1996034840A1 (es) * | 1995-05-04 | 1996-11-07 | Consejo Superior Investigaciones Científicas | Fertilizante bacteriano y procedimiento de obtencion |
WO1998037038A2 (de) * | 1997-02-25 | 1998-08-27 | Pollak Arpad | Methode der stickstoffbindung aus der luft, mobilisation der phosphorverbindungen und der zersetzung des ölsedimentes |
WO1999009834A2 (en) * | 1997-08-27 | 1999-03-04 | Phylaxia Pharma Rt. | Method for improving soil microorganism population |
WO2000034440A1 (en) * | 1998-12-10 | 2000-06-15 | Tatko Biotech, Inc. | Microorganisms for improving plant productivity |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104945078A (zh) * | 2014-05-12 | 2015-09-30 | 山东沃地丰生物肥料有限公司 | 一种保根生物活菌株修复剂 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BR0211920B1 (pt) | 2012-02-07 |
AU2009200523A1 (en) | 2009-03-05 |
UA86178C2 (ru) | 2009-04-10 |
WO2003016241A1 (en) | 2003-02-27 |
ES2451341T3 (es) | 2014-03-26 |
PL369237A1 (en) | 2005-04-18 |
EA200400309A1 (ru) | 2004-08-26 |
EP2233458A2 (en) | 2010-09-29 |
EP2233458B1 (en) | 2013-12-11 |
YU14004A (sh) | 2006-08-17 |
MXPA04001383A (es) | 2005-06-06 |
US20050060930A1 (en) | 2005-03-24 |
CO5560603A2 (es) | 2005-09-30 |
BR0211920A (pt) | 2004-10-26 |
KR20040032915A (ko) | 2004-04-17 |
CA2457154A1 (en) | 2003-02-27 |
EP1919848A1 (en) | 2008-05-14 |
AU2009200523B2 (en) | 2012-01-12 |
HRP20040126B1 (hr) | 2014-02-14 |
CN1315758C (zh) | 2007-05-16 |
US7842494B2 (en) | 2010-11-30 |
KR100940615B1 (ko) | 2010-02-05 |
HUP0103294A2 (en) | 2003-05-28 |
JP2005500413A (ja) | 2005-01-06 |
RS52487B (en) | 2013-02-28 |
EP2233458A3 (en) | 2011-02-23 |
CN1568296A (zh) | 2005-01-19 |
HRP20040126A2 (en) | 2004-06-30 |
HU230555B1 (hu) | 2016-12-28 |
ZA200401142B (en) | 2005-04-18 |
PL217740B1 (pl) | 2014-08-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EA009126B1 (ru) | Микроорганизмы для обработки почвы и способ их получения | |
RU2628411C2 (ru) | Микробные инокулянты и содержащие их композиции удобрений | |
KR101016859B1 (ko) | 연작 바나나의 시들음병을 방지하기 위한 길항세균 및 그것의 미생물 유기질 비료 | |
AU775195B2 (en) | Liquid nutrient plant formulation with microbial strains | |
CN109650986B (zh) | 一种改良退化蔬菜地土壤的炭基生物有机肥及其应用 | |
CN107164261B (zh) | 一株促进毛叶苕子增长的根瘤菌及其应用 | |
CN110616171B (zh) | 一株耐盐碱太平洋芽孢杆菌及其活菌制剂与应用 | |
CN101372425A (zh) | 一种微生物肥料及其制备方法 | |
WO2010022517A1 (en) | Use of gluconacetobacter with reduced use of nitrogen fertilizer to improve beet crop production | |
KR20130056585A (ko) | 물억새 뿌리로부터 분리한 미생물을 이용한 식물 생장 촉진방법 | |
CN108409411B (zh) | 一种增强水稻抗逆性的生物壮秧剂及其制备方法 | |
CN108841761B (zh) | 促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的方法及其所用菌剂 | |
CN112624818B (zh) | 一种杀虫促生的粪便堆酵沤解剂及其应用 | |
KR100690816B1 (ko) | 신규 미생물 마이크로박테리움 아우룸 ma-8 및 이를 이용한 마 영양번식체 생산방법 | |
KR20060021162A (ko) | 신규한 항진균성 작물생육촉진 미생물 바실러스아밀로리퀴파시엔스 mj-3 및 이를 이용한 미생물 상토 | |
Tiwari et al. | Associative diazotrophs of pearl millet (Pennisetum glaucum) from semi arid region-Isolation and characterization | |
KR102660548B1 (ko) | 옥신 생산능, 인산 가용화능, 및 질산염 또는 아질산염 제거능을 갖는 바실러스 노발리스 kt24 균주 및 이의 용도 | |
CN115029259B (zh) | 一株能够降解豆粕的暹罗芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用 | |
CN108531428A (zh) | 一种速生弗兰克氏菌菌粉的制备方法 | |
RU2760337C1 (ru) | Препарат для увеличения урожайности яровой пшеницы | |
CN108841762B (zh) | 一株耐酸的三叶草根瘤菌及其应用 | |
CN116656532A (zh) | 一种利用牛粪污沼液制备解淀粉芽孢杆菌生防菌剂的方法及其使用方法 | |
AU2002321675A1 (en) | Micro-organisms for the treatment of soil and process for obtaining them | |
Mona | Crack-entry invasion of wheat roots by Azospirillumbrasilensevia chemical-enzyme treatment: a way facilitating para-nodule formation and forced association for proper crop yield |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ KG MD TJ TM |
|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): BY KZ |
|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): RU |