EA002723B1

EA002723B1 - Способы и промежуточные продукты, полезные для получения антифолатов

Info

Publication number: EA002723B1
Application number: EA200000829A
Authority: EA
Inventors: Чарльз Джексон Барнетт; Стивен Юджин Данлэп; Майкл Эдвард Кобьерски; Джон Арнольд Вернер
Original assignee: Эли Лилли Энд Компани
Priority date: 1998-02-11
Filing date: 1999-01-27
Publication date: 2002-08-29
Also published as: BR9907876A; TR200002352T2; IL137685A0; AU2345299A; EA200000829A1; EP1054859A4; AU739292B2; HRP20000537A2; PL342161A1; NO20004026D0; KR20010040836A; WO1999041230A1; EP1054859A1; JP2002503648A; NO20004026L; CA2319424A1; NZ505406A; AR018538A1; US6426417B1; HUP0100869A2

Abstract

Данное изобретение относится к промежуточным продуктам и способам, относящимся к ним и начинающимся с них, ряду производных пиримидина формулы (V)которые являются промежуточными продуктами для получения полезных антифолатных соединений или сами представляют собой полезные антифолатные соединения.

Description

Данное изобретение относится к синтетической органической химии. Конкретно, изобретение относится к способу получения промежуточных продуктов, полезных в синтезе ценных антифолатных соединений.

Соединения, известные как обладающие антифолатной активностью, признаны в качестве химиотерапевтических агентов для лечения рака. Ряд производных Х-(6-амино-(пирроло (2,3-ά) пиримидин-3 -ил)ацил)-глутаминовой кислоты формулы V

в которой Υ представляет СН=СН, О или 8;

К³ представляет водород, хлор или фтор;

К⁴ представляет гидрокси, карбоксизащитную группу или КНС*Н(С(О)К⁵)СН₂СН₂С(О)К⁵;

К⁵ представляет водород или карбоксизащитную группу;

К⁶ представляет водород или аминозащитную группу;

К⁷ представляет гидрокси или амино;

и конфигурация около атома углерода, обозначенная *, представляет 8;

и их фармацевтические соли описаны в качестве антифолатов или промежуточных продуктов для антифолатов в патентах США № 4684653 и 4882334.

Ключевая стадия в синтезе соединений формулы V, описанном в патентах США '334 и '653, представляет собой гидрирование соединений формулы VI

VI;

в которой Ζ¹ и Ζ², оба, представляют водород или взятые вместе образуют связь; К^4' представляет карбоксизащитную группу или КНС*Н(С(О)К⁵')СН2СН2С(О)К⁵';

К^5' представляет карбоксизащитную группу и

К^6' представляет аминозащитную группу, дающее изомерную смесь соединений формулы ν(α):

диастереомеры формулы V могут выделяться механически с помощью хроматографии или предпочтительно индивидуальные диастереомеры могут выделяться путем образования диастереомерных солей с хиральными кислотами, такими как камфорсульфоновая кислота, с последующей селективной кристаллизацией одного из диастереомеров.

В патентах США '334 и '653 указывается, что соединения формулы VI могут быть получены сначала сочетанием соединения формулы VII с соединением формулы VIII

VII VIII где Х представляет бром или иод, в присутствии катализатора типа палладий/тризамещенный фосфин, описанного 8акашо!о в 8уп1йе818, 1983, 312 и далее.

Синтез, описанный выше, страдает многими недостатками. При проведении синтеза в промышленном масштабе использование катализатора на основе благородного металла является дорогостоящей операцией, приводит к проблемам очистки загрязненной окружающей среды. Количество катализатора может быть непостоянным вследствие варьирующих количеств драгоценного металла, который находится в ионном виде в растворе и в комплексной (каталитической) форме. Кроме того, если далее следует предпочтительная процедура разделения кристаллизацией, указанная выше, после выделения диастереомера фильтрованием фильтрат будет содержать смесь двух диастереомеров. Данный фильтрат часто не поддается дальнейшему разделению с помощью кристаллизации и, таким образом, для эффективности разделения обращаются к нежелательному хроматографическому разделению. В некоторых случаях, например, когда Υ представляет 8, К³ представляет водород, К⁴ представляет

ХНС*Н(С(О)К⁵)СН2СН2-С(О)К⁵ и К⁷ представляет гидрокси, не менее 80% целевого изомера, (изомер с более высокой антифолатной активностью) может быть найдено в смеси фильтрат/фракции.

Усовершенствование по сравнению с известным уровнем техники состоит в том, что для получения соединений формулы VI можно обойтись без катализа с применением драгоценных металлов и можно повысить абсолютные выходы целевого диастереомера формулы VI из смесей, содержащих оба диастереомера, с помощью кристаллизации.

Настоящее изобретение относится к соединению формулы III ν(β)

Получаемое соединение формулы ν(α) может необязательно иметь защитные группы, удаляемые для получения изомерной смеси соединений формулы V. В патентах США '334 и '653 далее указывается, что индивидуальные

	.Νκν
сощ	ίι 3
1 “	\|\| к

ЫС		к'
	III;

в которой Υ представляет СН=СН, О или 8;

К представляет С1-С₆-алкил;

К¹ и К² независимо представляют С₁-С₆алкил или, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют гетероцикл;

К³ представляет водород, хлор или фтор;

К⁴ представляет гидрокси, карбоксизащитную группу или №С*Н(С(О)К⁵)СН₂СН₂С(О)К⁵, где конфигурация у атома углерода, обозначенного *, представляет 8; и

или к его соли или сольвату.

Настоящее изобретение относится также к соединению формулы IV

IV;

в которой К⁶ представляет водород или амино защитную группу;

К⁷ представляет гидрокси или амино;

или к его соли или сольвату.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу получения соединений формулы IV

который включает взаимодействие соединения формулы 111(а)

в которой К⁴ представляет карбоксизащитную группу или НИС*Н(С(О)К⁵')СН2СН2С(О)К⁵', где конфигурация у атома углерода, обозначенного *, представляет 8; и

К⁵ представляет карбоксизащитную груп

н

У(Ь) или его соли или сольвата с окисляющим реагентом в присутствии подходящего растворителя.

Соединения

В общих формулах настоящего изобретения общие химические термины имеют их обычные значения. Например, термин «С₁-С₄алкил» относится к метилу, этилу, пропилу, изопропилу, циклопропилу, н-бутилу, вторбутилу, трет-бутилу и циклобутилу. Термин «С₁-С₆-алкил» охватывает термины, перечисленные для С₁-С₄-алкила, в дополнение к алифатическим, неразветвленным, разветвленным или циклическим, одновалентные фрагменты, имеющие пять или шесть атомов углерода, и включают, но не ограничиваются ими, пентил, циклопентил, гексил, циклогексил, 2метилпентил и аналогичные. Термин «С₁-С₄алкокси» относится к С1-С4-алкильной группе, присоединенной через атом кислорода.

Термин «галоген» или «галогенид» относился к хлору, брому или иоду.

Термин «гетероцикл» относится к 5- или 6членному насыщенному, частично ненасыщенному или ароматическому гетероциклическому кольцу, которое содержит атом азота и может необязательно содержать дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, 8 или О.

Термин «карбоксизащитная группа» относится к заместителю карбонила, который обычно используют для блокирования или защиты карбоксильной функциональной группы, когда реакции проводят на других функциональных группах соединения. Данный заместитель, когда он взят вместе с карбонилом, к которому он присоединен, может образовывать сложный эфир, например, С₁-С₆-алкиловый, замещенный С₁-С₆-алкиловый, С₂-С₆-алкениловый, замещенный С2-С6-алкениловый, бензиловый, замещенный бензиловый, бензгидриловый, замещенный бензгидриловый, тритиловый, замещенный тритиловый и триалкилсилиловый эфир. Точный тип карбоксизащитной группы не является критическим, пока дериватизированная карбоксигруппа стабильна по отношению к условиям последующей реакции (реакций) и может быть удалена в соответствующую точку без разрушения остальной части молекулы. Когда К⁴ содержит карбоксизащитную группу, защитная группа предпочтительно представляет С₁-С₄-алкокси или бензилокси. Наиболее предпочтительными защитными группами являются метокси, этокси и бензилокси. Карбоксизащитная группа, «удаляемая каталитическим гидрированием», включает, например, бензильные защитные группы.

пу;

с 2,4-диамино-6-гидроксипиримидином в присутствии подходящей кислоты и растворителя.

Кроме того, данное изобретение относится также к способу получения соединения формулы IV или его соли или сольвата, который включает взаимодействие соединения формулы νφ)

Другие примеры этих групп описываются в Т.^. Сгееие «Рго1еейуе Сгоирз ίη Огдаше 8уиЛез15», 1оки ХУИехг аиб 8оиз, №\ν Уогк, Ν.Υ., (2'¹ еб., 1991) (в дальнейшем обозначается Сгееие), екар1ег 5.

Термин «С₂-С₆-алкенил» относится к мононенасыщенному, одновалентному, углеводородному фрагменту, содержащему от 2 до 6 атомов углерода, который может быть в разветвленной или неразветвленной конфигурации цепи. Примерами данного фрагмента являются, но не ограничиваются ими, такие как этиленил, пропиленил, аллил, бутиленил и пентиленил.

Термины «замещенный С1-С₆-алкил» и замещенный «С₂-С₆-алкенил» относятся к С₁-С₆алкильной и С2-С6-алкенильной группе, соответственно, замещенной от 1 до 3 раз, независимо, галогеном, фенильной, три (С₁-С₄-алкил) силильной или замещенной фенилсульфонильной группой.

Термины «замещенный бензил», «замещенный бензгидрил» и «замещенный тритил» относятся к бензильной, бензгидрильной и тритильной группе, соответственно замещенной от 1 до 5 раз независимо нитро, С₁-С₄-алкокси, С₁С₆-алкильной или гидрокси(С₁-С₆-алкильной) группой. Эти заместители могут иметь место только в стерически возможном случае, так, чтобы этот фрагмент был химически стабилен.

Термин «триалкилсилил» относится к одновалентной силильной группе, замещенной 3 раза независимо С1 -С6-алкильной группой.

Термин «замещенный фенилсульфонил» относится к фенилсульфонильной группе, в которой фенильный фрагмент является паразамещенным группой С₁-С₆-алкил, нитро или галоген.

Термин «аминозащитная группа», используемый в описании, относится к заместителю аминогруппы, обычно используемому для блокирования или защиты функциональной аминогруппы, при реакции других функциональных групп соединения. Аминозащитная группа, когда она взята с азотом, к которому она присоединена, может образовывать циклический имид, например фталимидо и тетрахлорфталимидо; карбамат, например метил-, этил- и 9-фторенилметилкарбамат; или амид, например Ν-формил и Ν-ацетиламид. Точный род и вид используемой аминозащитной группы не является критическим, пока дериватизированная аминогруппа стабильна к условиям последующей реакции (реакциям) в других положениях промежуточной молекулы и может селективно удаляться в соответствующей точке без разрушения остальной части молекулы, включающей любую другую аминозащитную группу (группы). В общем, предпочтительны аминозащитные группы удаляемые кислотным гидролизом, т.е. предпочитаются те, которые лабильны к кислоте. Так, предпочтительной аминозащитной группой является 2,2-диметил-1-оксопропил. Дополни тельные примеры групп и способов, относящихся к вышеуказанным терминам, описываются в Сгееие е1 екар1ег 7.

Термин «фармацевтическая соль» и «соль», используемый здесь, относится к солям, получаемым взаимодействием соединений данного изобретения с минеральной или органической кислотой (например, хлористо-вородной, бромисто-водородной, иодисто-водородной или п-толуолсульфоновой кислотой) или с неорганическим основанием (например гидроксидом, карбонатом или бикарбонатом натрия, калия, лития и магния). Такие соли известны как кислотно-аддитивные и основно-аддитивные соли. Для дальнейшей иллюстрации этих солей примерами см., например, Вегде, 8.М. В1дЫеу, Ь.Э., аиб Моиккоизе, Э.С., 1. Ркагш. 8ек, 66, 1, 1977.

Термин «сольват» представляет агрегат, который включает одну или несколько молекул растворенного вещества, такого как соединение формулы III или IV с одной или несколькими молекулами растворителя.

Реагенты

Термин «подходящий растворитель» относится к любому растворителю или смеси растворителей, инертных к проводимой реакции, которые достаточно растворяют реагенты, чтобы создать среду, подходящую для проведения желаемой реакции.

Термин «подходящая кислота» относится к кислоте, показатель К_а которой является достаточно низким, чтобы провести желаемую реакцию без значительного прохождения любых нежелательных реакций.

Термин «окисляющий реагент» относится к реагенту, окислительный потенциал которого достаточно высок для проведения желаемой реакции без значительного прохождения любых нежелательных реакций. Подходящие окислители включают металлы, такие как никель, палладий, платина и аналогичные; металлы на твердых носителях, такие как палладий или платина на угле и аналогичные; комплексные соединения металлов, таких как ртуть (II), диоксид марганца или ацетат меди (II), и окислители на основе бензохинона, такие как 2,3-дихлор5,6-дициано-1,4-бензохинон (ЭЭР) и тетрахлор1,4-бензохинон (хлоранил) и аналогичные.

Термин «термодинамическое основание» относится к основанию, которое обеспечивает обратимое депротонирование кислотного субстрата или представляет протоновую ловушку для тех прогонов, которые могут получаться в качестве побочных продуктов заданной реакции, и достаточно реакционноспособен для проведения желаемой реакции без значительного прохождения любых нежелательных реакций. Примеры термодинамических оснований включают, но не ограничиваются ими, ацетаты, дигидраты ацетата, карбонаты, бикарбонаты, С1С₄-алкоксиды и гидроксиды (например, ацетат, дигидрат ацетата, карбонат, бикарбонат, С₁-С₄7 алкоксид или гидроксид лития, натрия или калия), три(С1-С₄-алкил)амины или ароматические азотсодержащие гетероциклы (например, имидазол и пиридин).

Синтез

Соединения формулы III могут быть получены из соединений формул I и II, как показано на приведенной ниже схеме 1, где Ьд представляет хлор, бром, иод, О8О₂Ме, О8О₂-фенил или О8О₂-п-толуенил и К, К¹, К², К³, К⁴, К⁴' и Υ имеют определенные выше.

Соединение формулы I может добавляться к соединениям формулы II растворенным или суспендированным в подходящем растворителе, в присутствии термодинамического основания, с образованием соединений формулы Ш(а). Предпочтительным и удобным растворителем является дихлорметан. Предпочтительным и удобным основанием является триэтиламин. Предпочтительно применяется один эквивалент основания и соединения формулы I относительно соединения формулы II, но допустимы небольшие избытки порядка от 0,01 до 0,1 эквивалента. Реакция может проводиться при температуре между -78°С и комнатной температурой, но предпочтительно ее проводят при температура между -25 и -20°С. Реакция типично завершается за период от 30 мин до 18 ч, но когда ее проводят при предпочтительной температуре, она завершается в пределах от 1 до 3 ч. Предпочтительным галогенидом в соединениях формулы I является хлорид. К предпочтительно представляет С1-С₄-алкил, особенно метил или этил. К¹ и К² предпочтительно представляют С1-С4-алкил, но особенно предпочтительно, когда оба представляют либо метил, либо этил. Предпочтительно, чтобы К⁴ представлял карбоксизащитную группу и чтобы такой защитной группой была С1-С₄-алкокси, особенно метокси или этокси, или группа, способная удаляться каталитическим гидрированием, например бензилокси (как в приведенной ниже схеме 3). На ₃ всем протяжении данного описания К предпочтительно представляет водород и Υ предпочтительно представляет СН=СН или 8.

Хотя получаемое соединение формулы

Ш(а) может иметь свою карбоксизащитную группу, удаляемую, как указывается в Сгеепе, для целей проведения общего процесса схем 13, карбоксизащитная группа предпочтительно оставляется незатронутой при проведении реакции (реакций) схемы 2.

Соединения формулы IV могут получаться из соединений формулы Ш(а) новым способом, иллюстрированным в приведенной ниже схеме 2, где К, К¹, К², К³, К⁴, К⁴', К⁶, К⁷ и Υ имеют значения, определенные выше.

Таутомерная смесь 2,4-диамино-6-гидроксипиримидина или 2,4-диаминопиримидин-6она (называемого в дальнейшем 2,4-диамино-6гидроксипиримидином) может добавляться к соединению формулы Ш(а), растворенному или суспендированному в подходящем растворителе, в присутствии подходящей кислоты, давая соединения формулы ^(а). Удобным и предпочтительным растворителем является смесь ацетонитрила и воды приблизительно 1:1 (об.:об.). Отношение ацетонитрила к воде не является критическим, но предпочтительно, чтобы отношение было подходящим для образования раствора, когда изначально смешивают все реагенты. Удобной и предпочтительной кислотой является уксусная кислота. Кислоту в типичном случае используют в молярном избытке. Например, обычно используют примерно от 2 до 4 эквивалентов по отношению к соединению формулы Ш(а), при этом обычно предпочтительно использование 3 эквивалентов. Применяемое число эквивалентов 2,4-диамино6-гидроксипиримидина по отношению к соединению формулы Ш(а) не является критическим, но предпочтительно применение от около 1 до около 2 эквивалентов. Еще более предпочтительное количество составляет от около 1 до около 1,5 и наиболее предпочтительное количество составляет от около 1 до около 1,1 эквивалента. Реакцию можно проводить при температурах, варьирующихся от комнатной температуры до температуры дефлегмации смеси, но предпочтительно ее проводят при температуре дефлегмации смеси. Кроме того, реакция может занимать от 12 до около 48 ч в зависимости от температуры реакции. Когда реакцию проводят при температуре дефлегмации смеси, она, по существу, завершается обычно за время около 18 ч. К предпочтительно представляет С1-С4алкил, особенно метил или этил. К¹ и К² пред9 почтительно представляют С1-С4-алкил, но особенно предпочтительно, когда оба представляют либо метил, либо этил. К³ предпочтительно представляет водород. Как указывалось ранее, предпочтительно, когда К⁴ представляет карбоксизащитную группу и такая защитная группа представляет С₁-С₄-алкокси, особенно метокси или этокси, или когда она способна удаляться каталитическим гидрированием (как в схеме 3).

Соединения формулы IV, в которой К⁷представляет аминогруппу, могут получаться из соединений формулы ^(а), как указано в ранее включенном для сведения патенте США № 4882334, но предпочтительно, чтобы К⁷представлял гидрокси.

Соединения формулы IV, в которой К⁵представляет аминозащитную группу, могут получаться из соединений формулы Е(а). как указывается в Сгеепе или как обсуждается в приведенном ниже получении 8. Кроме того, необходимо, чтобы при К⁶ присутствовала аминозащитная группа, предпочтительно группа, удаляемая кислотным гидролизом, как в приведенной ниже схеме 5, например 2,2-диметил-1оксопропил, или чтобы аминогруппа протонировалась перед проведением гидрирования, описанного ниже, в схеме 3. Кроме того, хотя соединения формулы ΐν(ίΐ) могут иметь карбоксизащитные группы, удаляемые, как указано в Сгеепе, для целей проведения общего процесса схем 2-3, предпочтительно, чтобы карбоксизащитная группа оставалась незатронутой при проведении реакции схемы 3.

Изомерная смесь соединений формулы νφ) может получаться из соединений формулы ΐνφ), как показано на приведенной ниже схеме 3, где К³, К⁴, К⁶, К⁷ и Υ имеют значения, определенные выше.

Соединения формулы ΐνφ), полученные, как описано в схемах 1 и 2, могут гидрироваться, по существу, как описано в патентах США № 4684653 и 4882334, описание каждого из которых приводится здесь для сведения. Для облегчения ознакомления со ссылками соединения формулы ΐνφ) в данном изобретении соответствуют соединения формулы III в патенте США '653 и соединениям формулы II в патенте США '334. Предпочтительно, чтобы аминозащитная группа у К не удалялась, как указано в Сгеепе, а оставлялась незатронутой при продолжении процесса до процедур разделения, обсуждаемых ниже в схемах 4 и 5.

Если процесс схемы 3 проводится с соединениями формулы ГУф) с предпочтительной группой у К⁴, т.е. карбоксизащитной группой, и эта карбоксизащитная группа способна удаляться каталитическим гидрированием, то такая защитная группа будет удаляться в условиях гидрирования по реакции схемы 3. Такое удаление, образующее соединения формулы νφ), в которой К⁴ представляет гидрокси, облегчает введение группы К⁴, обнаруженной в антифолатных конечных продуктах, т.е. обсуждаемой ниже хиральной глутаминовой кислоте.

Соединения формулы ν, которые обладают антифолатной активностью, являются соединениями, в которых К⁴ представляет ПНС*Н(С(О)К⁵)СН2СН2С(О)К⁵ и К⁶ представляет водород (в дальнейшем называемыми «конечными продуктами»), и, таким образом, эти соединения предпочтительны. Хотя глутаматная боковая цепь может вводиться в любой точке общего процесса данного изобретения, когда процессы схем 1, 2, 3 проводятся последовательно с указанными выше предпочтительными группами, предпочтительным временем для введения глутаматного остатка является время после проведения гидрирования, описанного в схеме 3. Это достигается путем сочетания соединения формулы ν или νφ), в которой К⁴представляет гидрокси, с производным карбоксизащищенной глутаминовой кислоты формулы 1Ь\С*11(С(())1<^5,)С1ЬС1ЬС(())К⁵' способом, в общем описанным в заявке РСТ Ж) 86/05181, с использованием общепринятых методик, конденсации для образования пептидных связей. Эти методики включают активацию карбоксигруппы через образование смешанного ангидрида или хлорангидрида кислоты, обработку дициклогексилкарбодиимидом или использование дифенилхлорфосфоната. Для дальнейшего руководства по общим методам образования данной амидной связи, см., например, Вобап8/ку, М., Рппс1р1е8 о£ Рерббе 8упШе818, 2^пб Еб., 8р^^пде^-Vе^1ад, Вегйп, Не1бе1Ьегд, 1993. Предпочтительно, чтобы присутствовала глутаматная боковая цепь и чтобы группы К⁵, обнаруженные в этой боковой цепи, были обе карбоксизащитными группами, например С₁-С₆алкокси, при проведении процессов схем 4 и 5. Все обсуждения и структуры, относящиеся к приведенным ниже схемам 4 и 5, относятся к случаю, когда присутствуют предпочтительные заместители у К⁴, но эти заместители не требуются для процессов схемы 4 и 5, чтобы последних можно было проводить.

Из конечных продуктов соединений формулы ν предпочтительны соединения формулы

У(с)(К), приведенные ниже, вследствие повышенной антифолатной активности относительно соединений формулы νφ)(8). Эти индивиду11 альные диастереомерные конечные продукты, полученные, как описано выше, или в приведенных ранее для сведения патентах США № 4684653 и 4892334, можно разделять, как указано в этих патентах, например, хроматографией или предпочтительно перекристаллизацией. Например, для образования смеси диастереомерных солей, более пригодных для селективной перекристаллизации одного диастереомера, как показано на приведенной ниже схеме 4, где К³, К⁵, К⁶, К⁷ и Υ имеют значения, определенные выше, может использоваться соответственно выбранная хиральная кислота.

Чтобы осуществить разделение по схеме 4, необходимо, чтобы К⁶ в соединениях формулы У(е) был водородом. Если процесс схемы 4 про6 водят с предпочтительной группой у К , т.е. защитной группой, удаляемой кислотным гидролизом, такой как 2,2-диметил-1-оксопропил, то такая защитная группа будет удаляться добавлением хиральной кислоты, и отдельная стадия для удаления ее не будет необходимой. Таким образом, соединения формулы У(с), в которой К⁶ представляет водород, не обязательно должны получаться отдельной стадией перед проведением процесса разделения по схеме 4. Устранение необходимости в этой дополнительной стадии является причиной того, что предпочтительны лабильные аминозащитные группы.

Первой стадией в схеме 4 является добавление хиральной кислоты к смеси соединений формулы У(с), растворенных или суспендированных в подходящем растворителе. Данное добавление осуществляет две функции: хиральная кислота удаляет аминозащитную группу у К⁶ и образует диастереомерную кислотно-аддитивную соль соединения формулы У(б). Когда Υ представляет СН=СН, предпочтительной кислотой для этой цели является (18)(+)-камфорсульфоновая кислота. Когда Υ представляет О или 8, предпочтительной кислотой является (1К)-(-)-камфорсульфоновая кислота.

Предпочтительным растворителем для удаления защитной группы и образования соли является низший спирт, предпочтительно этанол.

После того как образуется соль, разделение или перекристаллизация стадии 2 проводится путем суспендирования соединений формулы У(б) в подходящем растворителе, нагревания смеси до тех пор пока не образуется раствор и затем оставления раствора для охлаждения, чтобы выпал в осадок целевой изомер. Важными параметрами при хиральном разделении в общем и при конкретном разделении соединений формулы У(б) являются система растворителей, скорость перемешивания и температура. Предпочтительными системами растворителей являются смеси низшего спирта предпочтительно этанола и воды. Отношение этанола к воде по объему может быть от около 0,33 до около 3:1, но предпочтительна смесь 1:1. Отношение растворителя к растворенному веществу должно быть от около 10 до около 20 к 1, но предпочтительное отношение составляет около 15 к 1. Скорость перемешивания во время кристаллизации может оказывать заметное влияние на разделение. Предпочтительно после того, как соли образуются и растворяются нагреванием в растворителе для кристаллизации, чтобы образцы не перемешивались при охлаждении. Температура также может оказывать влияние на разделение. Непрерывное охлаждение ниже комнатной температуры может повысить выход продукта, но за счет эффективности разделения. Предпочтительно, чтобы кристаллизация проходила при температуре между около 20 и 34°С, причем наиболее предпочтительна комнатная температура (около 22°С).

Чтобы избежать гидролиза эфиров на глутаматном остатке вследствие водных кислотных условий разделения, предпочтительно используют буфер, такой как ацетат натрия. Количество ацетата натрия, приблизительно равное избытку кислоты, предпочтительно добавляют после завершения сольволиза аминозащитной группы.

Фильтрат, полученный по схеме 4, содержит смесь диастереомерных солей формулы У(б). Данная смесь обогащена диастереомером формулы У(б)(8), т.е. кислотно-аддитивной солью У(б)(8), которая не кристаллизуется. Эта обогащенная смесь обычно не пригодна для дальнейшего разделения кристаллизацией. Поэтому большое количество целевого изомера до сих пор не поддавалось выделению дальнейшей кристаллизацией. Схема 5, приведенная ниже, где К³, К⁴, К⁶, К⁷ и Υ имеют значения, определенные выше, иллюстрирует еще один новый способ получения соединений формулы IV, который облегчает дальнейшее разделение этой смеси с помощью кристаллизации.

Схема 5

Если процесс схемы 5 предполагается проводить с использованием содержимого фильтрата из схемы 4 в качестве источника исходных материалов, предпочтительно, чтобы сначала экстрагировались из этой смеси соединения формулы У(с) в виде свободных оснований. Это легко достигается путем разбавления смеси не смешиваемым с водой органическим растворителем и обработки смеси слабым основанием, растворенным в воде, таким как раствор бикарбоната натрия в воде. Для этой цели предпочтительными реагентами являются дихлорметан и водный бикарбонат натрия. Например, обработка фильтрата дихлорметаном (около 0,33 мл/г фильтрата) и приблизительно 2 эквивалентами 1 М водного бикарбоната натрия в течение около 30 мин при комнатной температуре дает две прозрачные, легко разделяемые фазы. Органическая фаза отделяется и предпочтительно сушится обычным осушающим агентом или агентами перед дальнейшим проведением процесса. Последовательная промывка рассолом и 1 М водным бикарбонатом натрия является предпочтительной процедурой сушки.

После проведения процедуры экстракции Τ') 6 аминозащитная группа снова вводится у К или аминогруппу следует протонировать до проведения процесса, иллюстрированного на схеме 5. Повторное введение защитной группы предпочтительно и может достигаться, как указано в Нгеепе, цитированной выше, или как обсужда ется ниже в получении 9. Предпочтительно, чтобы аминозащитная группа была способна удаляться кислотным гидролизом, например 2, 2-диметил-1-оксопропилзащитной группой. Получаемые соединения формулы У(е) затем разделяют следующим образом.

Отдельные диастереомеры или смеси соединений формулы У(е) в любом соотношении могут растворяться или суспендироваться в подходящем растворителе и добавляется окисляющий реагент, давая соединения формулы 1У(Ь). Выбор растворителя, температур реакции и времени обычно зависит от используемого окисляющего реагента.

НЭЦ является предпочтительным окисляющим агентом. Когда ПЭЦ или хлоранил используют в качестве окисляющего агента, подходящими растворителями являются углеводороды, такие как пентан, гексан, толуол и аналогичные; низшие спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол и аналогичные; или хлорированные углеводороды, такие как хлороформ, дихлорметан и аналогичные. Предпочтительными являются хлорированные углеводороды, особенно дихлорметан. Когда окисление проводят в предпочтительных условиях на предпочтительных соединениях формулы У(е), хроматография для очистки получаемых соединений формулы 1У(Ь) не обязательна. См., например, приведенный ниже пример 6.

Реакцию обычно проводят при температурах между 0 и 200°С в течение от около 30 мин до около 24 ч. Реакцию предпочтительно проводят при температурах между 15 и 80°С. Более предпочтительно, когда реакцию проводят при температуре между 20 и 40°С и наиболее предпочтительно - при комнатной температуре в течение от 20 мин до 1 ч.

Количество окисляющего реагента варьирует в зависимости от используемого окислителя, но обычно оно составляет от около 0,1 эквивалента до около 5 эквивалентов по отношению к соединению формулы У(е). Когда применяют НЭЦ, предпочитается от около 1,1 до около 3 эквивалентов. Еще более предпочтительным является от 1,8 до около 2,2 эквивалента и наиболее предпочтительно - от 1,9 до около 2,1 эквивалента.

Карбокси- и/или аминозащитные группы в соединениях формулы 1У(Ь) предпочтительно не удаляют, как указано в Нгеепе. Вместо этого, предпочтительным действием является восстановление соединений формулы 1У(Ь) обратно в диастереомерную смесь 50:50 соединений формулы У(е), чтобы провести разделение с хиральной кислотой, как указано на схеме 4.

Гидрирование может проводиться путем растворения или суспендирования соединения формулы 1У(Ь) в подходящем растворителе в присутствии катализатора гидрирования и подвержения смеси действию атмосферы водорода.

Удобным предпочтительным растворителем является смесь около 4:1 по объему тетрагидрофурана и этанола. Удобным и предпочтительным катализатором гидрирования является 5% палладий на угле. Катализатор типично используют по отношению к массе соединений формулы 1У(Ь) в интервале примерно от 10 до 200%. Предпочтительный интервал составляет от около 20 до около 75%, причем предпочтительно около 25%. Обычно предпочтительно создание атмосферы водорода, в которой давление водорода равно давлению окружающей среды или выше, чем давление окружающей среды. Типичный диапазон давления составляет от около давления окружающей среды до около 7,03 атм (100 пси) водорода. Более предпочтительно давление атмосфера водорода между 2,812 атм (40 пси) и около 4,219 атм (60 пси), наиболее предпочтительно 3,515 атм (50 пси). Реакция может проводиться при температурах в интервале от комнатной температуры до примерно температуры дефлегмации смеси. При 3,515 атм (50 пси) водорода предпочтительная температура реакции составляет около 100°С, при этих условиях реакция обычно, по существу, завершается за период менее чем 4 ч.

После того как образовалась смесь 1:1 соединений формулы У(е), как описано на схеме 5, она может быть разделена, как обсуждалось на приведенной выше схеме 4. Этот цикл может повторяться столько раз, сколько желает экспериментатор для повышения до максимума выхода диастереомера формулы У(б)(К).

2,4-Диамино-6-гидроксипиримидин, защищенные глутаминовые кислоты формулы Н₂ЫС*Н(С(О)К⁵')СН₂СН₂С(О)К⁵' и соединения формулы I и II известны в данной области, но такие соединения свободно синтезируются с помощью стандартных процедур, обычно применяемых в данной области, но со степенью, не доступной в промышленном масштабе. См., например, приведенные ниже получения 1-6.

Оптимальное время проведения реакций схем 1-5 можно определить с помощью контроля за ходом протекания реакции общепринятыми хроматографическими приемами. Выбор растворителя обычно не является критическим до тех пор, пока используемый растворитель инертен к проводимой реакции и достаточно растворяет реагенты, обеспечивая среду, в которой проводят желаемую реакцию. Если не оговорено особо, все описанные здесь реакции предпочтительно проводят в инертной атмосфере. Предпочтительной инертной атмосферой является азот.

Следующие получения и примеры являются только иллюстративными и никоим образом не предназначаются для ограничения объема данного изобретения. Термины и аббревиатуры, используемые в данных примерах, имеют их обычные значения, если не оговорено особо. Например, «°С», «н», «ммоль», «г», «мг», «д.и.», «мл», «М», «ВЭЖХ», «т. пл.», «ЭА», «МС(ЕИ)», «МС(НК)», «ИК» и «Н ЯМР» относятся к градусам Цельсия, нормальному или нормальности, миллимолю, грамму, миллиграмму, диастереомерному избытку, миллилитру, молярному или молярности, высокоэффективной жидкостной хроматографии, точке плавления, элементному анализу, полевой десорбционной массспектрометрии, масс-спектрометрии высокого разрешения, инфракрасной спектроскопии и спектроскопии протонного ядерного магнитного резонанса соответственно. Кроме того, максимумы поглощения, перечисленные для ИКспектра, представляют только максимумы, представляющие интерес, а не все наблюдаемые максимумы.

Получение 1. 5-(3-[1,3-Диоксолан-2-ил] пропил)-2-тиофенкарбоновая кислота.

К раствору 64,8 г (640 ммоль, 83,9 мл) диизопропиламина в 400 мл тетрагидрофурана, который охлаждают до -15°С, по каплям на протяжении 25 мин добавляют 400 мл (640 ммоль) 1,6 М н-бутиллития в гексане, поддерживая температуру реакции ниже -5°С. После 15 мин перемешивания по каплям в течение 30 мин добавляют раствор 5-метил-2-тиофенкарбоновой кислоты (41,4 г, 291 ммоль) в 150 мл тетрагидрофурана, снова поддерживая температуру ниже -5°С. Получаемый темно-зеленый раствор дианиона перемешивают при температуре от -15 до -10°С в течение 90 мин. К данному раствору добавляют по каплям в течение 15 мин 2-(2бромэтил)-1,3-диоксолан (57,9 г, 320 ммоль) и окрашенную в пурпурный цвет смесь перемешивают в течение 3 ч при температуре от -1 0 до -5°С. Анализ ВЭЖХ (30% ацетонитрила/70% 1%-ного водного раствора уксусной кислоты, 2 мл/мин, колонка С-18 30 см, λ = 280 нм) в данный момент времени показывает присутствие 9,0% 5-метил-2-тиофенкарбоновой кислоты и 88,5% указанного в заголовке соединения. Реакцию гасят 600 мл воды и подкисляют до рН 3 6 н. водной хлористо-вородной кислотой. Желтую смесь экстрагируют три раза 500 мл третбутилметилового эфира, и объединенные органические экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт растирают с 300 мл гептана и твердое вещество фильтруют, промывают гептаном и сушат с отсосом на фильтре, получая 58,21 г (82,5%) указанного в заголовке соединения, которое содержит меньше чем 3% исходного материала (по данным ¹Н ЯМР). 'Н ЯМР (300 МГц, СЭС1_;) δ 1,81 (м, 4Н), 2,91 (т, 1 = 7,4 Гц, 2Н), 3,92 (м, 4Н), 4,90 (т, 1 = 4,4 Гц, 1Н), 6,84 (д, 1 = 3,7 Гц, 1Н), 7,72 (д, 1 = 3,7 Гц, 1Н).

Получение 2. Метил-5-(3-[1,3-диоксолан-2ил] пропил)-2-тиофенкарбоксилат.

К раствору 5-(3-[1,3-диоксолан-2-ил]пропил)-2-тиофенкарбоновой кислоты (58,0 г, 239 ммоль) в 300 мл диметилформамида добавляют карбонат калия (41,4 г, 299 ммоль), затем ме17 тилиодид (51,0 г, 359 ммоль). Суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 17 ч и затем выливают в 600 мл воды. Получаемую суспензию экстрагируют два раза 500 мл трет-бутилметилового эфира и объединенные экстракты промывают водой, сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют на роторном испарителе, получая 57,84 г (94,3%) указанного в заголовке соединения, которое имеет достаточную чистоту для использования в получении 3.

ИК (СНС1₃, см^-1) 3021, 1707, 1541, 1463, 1296, 1101.

'|| ЯМР (300 МГц, СИС1₃) δ 1,75 (м, 4Н),

2.84 (т, 1 =7,4 Гц, 2Н), 3,81 (с, 3Н), 3,82 (м, 2Н), 3,92 (м, 2Н), 4,84 (т, 1 = 4,3 Гц, 1Н), 6,76 (д, 1 = 3,9 Гц, 1Н), 7,58 (д, 1 =3,7 Гц, 1Н).

Получение 3. Метил-5-(бутан-4-аль)-2-тиофенкарбоксила.

Метил-5 -(3-[1,3 -диоксолан-2 -ил] пропил)-

2- тиофенкарбоксилат (10,0 г, 39,0 ммоль) и 1,0 мл концентрированной хлористо-вородной кислоты растворяют в 120 мл смеси 2:1 уксусная кислота/вода и получаемый желтый раствор нагревают на масляной бане при 60°С в течение 2 ч. Раствор оставляют охладиться до 25°С и выливают в 120 мл воды. После перемешивания в течение 15 мин смесь экстрагируют два раза 125 мл трет-бутилметилового эфира. Объединенные органические экстракты промывают два раза водой и два раза насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют до 8,24 г (99,5%) указанного в заголовке соединения, которое является достаточно чистым для использования в получении 4.

'|| ЯМР (300 МГц, СИС1₃) δ 2,01 (м, 2Н), 2,50 (т, 1 = 7,4 Гц, 2Н), 2,87 (т, 1 = 7,5 Гц, 2Н),

3.84 (с, 3Н), 6,79 (д, 1 = 3,7 Гц, 1Н), 7,61 (д, 1 = 4,0 Гц, 1Н), 9,75 (с, 1Н).

Получение 4. Метил-5-(4-диэтиламинобут-

3- енил)-2-тиофенкарбоксилат.

Метил-5 -(бутан-4 -аль) -2-тиофенкарбоксилат (16,7 г, 78,6 ммоль) охлаждают до 0-5°С при перемешивании и обрабатывают диэтиламином (11,5 г, 157 ммоль) в течение 5 мин. Охлаждающую баню убирают и в виде одной порции добавляют 27,6 г карбоната калия. Оранжевую смесь нагревают при 60°С в течение одного часа и затем оставляют для охлаждения до 25°С. Реакционную смесь разбавляют 50 мл дихлорметана и фильтруют через НуДо®, промывая избытком дихлорметана. Фильтрат концентрируют до 19,6 г (93,4%) указанного в заголовке соединения, которое является достаточно чистым для использования в получении 5.

'|| ЯМР (300 МГц, СИС1₃) δ 1,01 (т, 1 = 7,1

Гц, 6Н), 2,28 (к, 1 = 7,4 Гц, 2Н), 2,68 (м, 2Н), 2,91 (к, 1 = 7,1 Гц, 4Н), 3,89 (с, 3Н), 4,12 (м, 1Н), 5,84 (д, 1 = 13,9 Гц, 1Н), 7,23 (д, 1 = 8,1 Гц, 2Н), 7,94 (д, 1 = 8,1 Гц, 2Н).

Получение 5. Натриевая соль метил-1гидроксиметиленцианоацетата.

Металлический натрий (11,8 г, 0,511 моль) растворяют в 450 мл метанола и к данному теплому раствору добавляют раствор этилформиата (104 г, 1,41 моль) и метилцианоацетат (43,8 г, 0,440 моль) в течение 2 мин. Во время добавления образуется небольшое количество осадка. Реакционную смесь нагревают до кипения с обратным холодильником (дефлегмации) и поддерживают этот режим в течение 1,5 ч. Густую белую суспензию оставляют для охлаждения до 20-25°С и осадок отфильтровывают, промывают диэтиловым эфиром и сушат в вакууме при 45°С, получая 40,4 г (61,6%) указанного в заголовке соединения, которое является достаточно чистым для использования в получении 6.

Получение 6. Метилхлорметиленцианоацетат.

К суспензии натриевой соли метил-1гидроксиметиленцианоацетата (19,0 г, 127 ммоль) в 200 мл дихлорметана добавляют пентахлорид фосфора (26,5 г, 127 ммоль) в виде одной порции. Реакционную смесь оставляют для экзотермического нагревания до температуры дефлегмации и затем выдерживают при кипячении с обратным холодильником в течение 4

ч. Получаемую светло-желтую суспензию оставляют для охлаждения до 23°С и затем выливают в 400 мл холодной воды. Смесь перемешивают в течение 15 мин и фазы разделяют. Водный слой экстрагируют 100 мл дихлорметана и объединенные органические слои промывают два раза водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют до 16,8 г указанного в заголовке соединения, которое является достаточно чистым для использования в примере 1.

' Н ЯМР (300 МГц, СИС1₃) δ 3,88 (с, 3Н), 7,58 (с, 0,35Н), 8,04 (с, 0,65Н).

Получение 7. Соль (К-К-Ь) (1К)-(-)-10камфорсульфоновой кислоты и диэтилового эфира И-[[5-[2-[(6К)-2-амино-3,4,5,6,7,8-гексагидро-4-оксопиридо-(2,3-б)-пиримидин-6-ил] этил] -2-тиенил]карбонил]-Ь-глутаминовой кислоты.

Смесь диэтилового эфира Ν-[[5-[2-[2-[(2,2диметил-1-оксопропил)амино]-3,4,5,6,7,8-гексагидро-4-оксопиридо-(2,3-б)-пиримидин-6-ил] этил]-2-тиенил]карбонил]-Ь-глутаминовой кислоты (456,1 г, 0,748 моль) и безводной (1К)-(-)10-камфорсульфоновой кислоты (197,6 г, 0,84 моль) в 3,4 л абсолютного этанола нагревают при кипении с обратным холодильником. Через 28 ч анализ ВЭЖХ (колонка С18 при 40°С, ацетонитрил/буфер, 40:60, скорость потока 2,0 мл/мин, детекция 280 нм, буфер = смесь ледяная уксусная кислота:триэтиламин:вода, 1:0,3:100) обнаруживает, что реакция завершается. Смесь оставляют для охлаждения до 68°С и добавляют 6,34 г ацетата натрия, 3,4 л воды и 23 г активированного угля. Смесь, охлажденную до 46°С с помощью добавлений, оставляют для переме19 шивания в течение 20 мин, затем фильтруют через Нуйо®. Получаемый раствор перемешивают, охлаждают до 34°С и вносят затравку. Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 12 ч без перемешивания для образования кристаллов. Кристаллы собирают фильтрованием и сушат. Фильтрат отставляют на ночь, вызывая дополнительную кристаллизацию. Кристаллы из фильтрата собирают, объединяют с первым осадком и сушат, получая 292,2 г указанного в заголовке соединения К-КЬ. Частично очищенную соль перекристаллизовывают два раза из 15-кратной по ее массе смеси 1:1 этанол-вода. Получают 101,9 г (35,6% от теории) указанного в заголовке соединения в виде моногидрата, 95,4% д.и. по данным анализа ВЭЖХ. Т. пл. 207-210°С. МС (ГО) т/ζ 505 (М⁺ [а]589 -52,8°, [а]365 -267,7°С (с 1,0, ДМСО). ЭА вычислено для С₃₃Н₄₇Х₅О1₀8₂ Н₂О (755,90): С 52,44; Н 6,53; N 19,26. Найдено: С 52,31; Н 6,35; N 19,20.

Получение 8. Выделение смеси 2:3 К-Ь- и 8-Ь-диастереомеров диэтилового эфира N-[[5[2-[2-амино-3,4,5,6,7,8-гексагидро-4-оксопиридо (2.3-6) пиримидин-6 -ил] этил] -тиен-2-ил] карбонил]-Ь-глутаминовой кислоты из фильтрата получения 7.

Раствор 1 М водного бикарбоната натрия добавляют к перемешиваемой смеси фильтрата из получения 7 (1000 г, около 1,93% указанных в заголовке соединений (мас./мас.)) и дихлорметана (333 г), значение рН доводят от 5,0 до приблизительно 7 дополнительным 1 М водным бикарбонатом натрия (50,0 г). Получаемую смесь перемешивают в течение 1 ч. Фазы разделяют, получая 392,9 г прозрачной, желтооранжевой фазы. Раствор промывают 0,5 М водным бикарбонатом натрия (50 г) в течение 30 мин. Фазы разделяют, получая 341,3 г слегка мутной желто-оранжевой фазы. 5 г хранящегося в сосуде образца удаляют и оставшийся раствор промывают 10% водным раствором хлорида натрия (100 г) в течение 15 мин. После 1 ч разделения фаз выделяют 293,4 г слабо-мутной желтой органической фазы. 5 г образца удаляют и раствор концентрируют до получения пены роторным испарением. Остаток снова растворяют в дихлорметане (100 г) и концентрируют снова до пены. Вакуумная сушка в течение 18 ч при 45°С/5 мм рт.ст. дает 17,86 г желтой пены (крепость 90,6% смеси 36,8:63,2 указанных в заголовке соединений, соответственно выход 88,7% в расчете на анализ крепости в первоначальном фильтрате, выход 90,0% в расчете на массовый баланс продукта в водном и органическом слоях). Данный материал переносим на процедуру рециркуляции примеров 6 и 7 без дополнительной очистки.

Получение 9. Смесь 2:3 К-Ь и 8-Ь диастереомеров диэтилового эфира Ν-[[5-[2-[2-[(2,2диметил-1-оксопропил)амино]-3,4,5,6,7,8-гексагидро-4-оксопиридо-(2,3-б)-пиримидин-6-ил] этил] -2-тиенил]карбонил]-Ь-глутаминовой кислоты.

Безводный пиридин (50,9 г, 642,9 ммоль) добавляют к смеси 2:3 К-Ь и 8-Ь диастереомеров диэтилового эфира №[[5-[2-[2-амино3,4,5,6,7,8-гексагидро-4-оксопиридо-(2,3-б)пиримидин-6 -ил] этил]-2-тиенил] карбонил] -Ьглутаминовой кислоты (24,7 г, 49,0 ммоль) из получения 8 и 4-диметиламинопиридина (1,49 г, 12,2 ммоль). После нагревания до 100° при перемешивании остается желтый раствор. В течение 4 мин добавляют пиваловый ангидрид (19,0 г, 102,8 ммоль) с добавлением каждой капли образуется и затем диспергируется белое твердое вещество. Спустя 4,5 ч реакционную смесь охлаждают до 50°С (предостережение: при низкой температуре отверждается), переносят в делительную воронку и добавляют дихлорметан (500 мл), затем 1 н. водную хлористоводородную кислоту (660 мл). Органический слой отделяют и экстрагируют 1 н. водной хлористо-водородной кислотой (250 мл), плюс дихлорметаном (100 мл) для предотвращения помутнения. Получаемый органический слой промывают рассолом (200 мл), снова требуется дополнительный дихлорметан (100 мл) для предотвращения помутнения, затем сушат над сульфатом магния. Растворитель частично удаляют при вакууме 26,5 дюйма (673 мм рт.ст.) и 40° до тех пор, пока испарение почти не прекратится. К оставшемуся раствору добавляют в течение 35 мин безводный диэтиловый эфир (300 мл), получая белую смесь. Спустя 15 мин перемешивания твердое вещество собирают вакуумным фильтрованием, промывают два раза диэтиловым эфиром (100 мл). Примечание: фильтрование требует 15-30 мин, осадок перемешивают после каждого добавления диэтилового эфира. Вакуумная сушка при 4°С/5 мм рт.ст. в течение 2 ч дает 27,88 г сырого продукта. Остаток кипятят с обратным холодильником в этилацетате (700 мл) до тех пор, пока не получится светло-желтый раствор. Содержимое оставляют для уравновешивания до комнатной температуры с перемешиванием в течение 1 ч. Белую смесь помещают на ледяную баню и перемешивают 1,5 ч. Продукт выделяют вакуумным фильтрованием, промывают три раза холодным этилацетатом (50 мл) и один раз диэтиловым эфиром (100 мл). Вакуумная сушка при 40°С/5 мм рт.ст. дает 19,40 г (68%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Т.пл. 169-170°С. [а]²⁰ _с -0,2° (с 1,01, Ме-ОН). ЭА вычислено для

0₂₈Η₃₉Ν₅0₇8: С 57,03; Н 6,67; N 11,88; О 18,99; 8 5,44. Найдено: С 57,05; Н 6,47; N 11,66; О 19,16; 8 5,66.

Пример 1. Метил-5-(3-[2-циано-2-карбоэтоксиэтенил]-4-диэтиламино-бут-3-енил)-2-тиофенкарбоксилат.

К раствору метил-5-(4-диэтиламинобут-3енил)-2-тиофенкарбоксилата (19,4 г, 72,4 ммоль) и триэтиламина (7,3 г, 72,4 ммоль) в 160 мл дихлорметана, охлажденному до -25°С, добавляют по каплям в течение 25 мин раствор метилхлорметиленцианоацетата (10,5 г, 72,4 ммоль) в 40 мл дихлорметана, поддерживая температуру резервуара ниже -20°С. Мутный оранжевый раствор перемешивают при температуре от -25 до -20°С в течение 2 ч и затем оставляют подогреваться до 20°С. Реакционную смесь разбавляют 150 мл воды и два слоя перемешивают вместе в течение нескольких минут и разделяют. Органический слой сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют до оранжевого масла. Масло растирают с диэтиловым эфиром, вызывая кристаллизацию целевого продукта. Получаемое твердое вещество отфильтровывают, промывают простым эфиром и сушат, получая 19,6 грамм (72%) указанного в заголовке соединения, которое является достаточно чистым для использования в примере 2. МС т/ζ 377 (М+Н).

ЭА вычислено для С₁₉Н₂₄Ы₂О₄8: С 60,62; Н 6,43; N 7,44. Найдено: С 61,67; Н 6,85; N 7,33.

Пример 2. 2-Амино-1,4-дигидро-6-(2-[2карбометокситиофен-5-ил]этил)-4-оксопиридо [2,3-6] пиримидин.

К раствору метил-5-(3-[2-циано-2-карбоэтоксиэтенил]-4-диэтиламинобут-3-енил)-2-тиофенкарбоксилата (10,0 г, 26,56 ммоль) в 50 мл ацетонитрила добавляют 2,4-диамино-6гидроксипиримидин (3,35 г, 26,56 ммоль), 45 мл воды и 5 мл уксусной кислоты. Получаемую суспензию нагревают до кипения с обратным холодильником в течение 18 ч и затем дают охладиться до 25°С. Реакционную смесь нейтрализуют до рН 6,7 2 н. водным гидроксидом натрия, вызывая загустение осадка. Твердое вещество отфильтровывают, промывают смесью 1:1 ацетонитрил/вода и сушат в вакууме при 50°С, получая 5,96 грамм (68%) указанного в заголовке соединения.

Пример 3. 2-Амино-1,4-дигидро-6-(2-[2карбокситиофен-5 -ил] этил) -4-оксопиридо [2,3-6] пиримидин.

2-Амино-1,4-дигидро-6-(2-[2-карбометокситиофен-5 -ил] этил)-4 -оксопиридо [2,3-6] пиримидин (5,4 г, 16,35 ммоль) растворяют в 54 мл 2 н. водного гидроксида натрия и нагревают до 40°С при перемешивании. Анализ ВЭЖХ (30 % ацетонитрила/70% 1%-ного водного раствора уксусной кислоты, 1 мл/мин, колонка С8 25 см, 1 = 280 нм) показывает полный гидролиз метилового эфира. Раствор разбавляют 81 мл этанола и подкисляют до рН 3 6 н. водной хлористоводородной кислотой. Получаемый осадок отфильтровывают, промывают смесью 1:1 этанол/вода и сушат в вакууме при 50°С, получая 5,02 г (97%) указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества.

' Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-бе) δ 2,97 (т, 1 =

7,2 Гц, 2Н), 3,15 (т, 1 = 7,2 Гц, 2Н), 6,89 (д, 1 =

3,6 Гц, 1Н), 7,50 (д, 1 = 3,6 Гц, 1Н), 0,05 (д, 1 =

2,3 Гц, 1Н), 8,45 (д, 1 = 1,8 Гц, 1Н).

Пример 4. 2-[(2,2-Диметил-1-оксопропил) амино]-1,4-дигидро-6-(2-[2-карбокситиофен-5ил]этил)-4-оксопиридо[2,3-6]пиримидин.

К суспензии 2-амино-1,4-дигидро-6-(2-[2карбокситиофен-5-ил]этил)-4-оксопиридо[2,36]пиримидина (0,93 г, 2,94 ммоль) в 20 мл пивалового ангидрида добавляют диметиламинопиридин (0,036 г, 0,294 ммоль) и смесь нагревают до 150°С в течение 18 ч, во время которых реакционная смесь значительно разжижается. Реакционную смесь оставляют для охлаждения до 25°С и продукт осаждают добавлением 100 мл диэтилового эфира. Осадок отфильтровывают с отсосом и промывают эфиром. Получаемое твердое вещество суспендируют и 10 мл воды и обрабатывают 1 н. водным раствором гидроксида натрия до тех пор, пока не образуется раствор. Раствор подкисляют до рН 4 6 н. водной хлористо-водородной кислотой, вызывая осаждение продукта. Твердый продукт отфильтровывают, промывают водой, затем метанолом и сушат в вакууме при 50°С, получая 0,84 г (71%) указанного в заголовке соединения в виде рыжевато-коричневого твердого вещества.

'|| ЯМР (300 МГц, ДМСО-б₆) δ 1,23 (с, 9Н), 3,14 (м, 4Н), 6,90 (д, 1 = 3,6 Гц, 1Н), 7,48 (д, 1 = 3,6 Гц, 1Н), 8,27 (с, 1Н), 8,70 (с, 1Н), 11,37 (шир. с, 1Н), 12,25 (с, 1Н).

Пример 5. Диэтиловый эфир Ν-[[5-[2-[2[(2,2-диметил-1-оксопропил)амино]-1,4-дигидро-4-оксопиридо[2,3-6]пиримидин-6-ил]этил]-2тиенил] карбонил]-Ь-глутаминовой кислоты.

К смеси 2-[(2,2-диметил-1-оксопропил) амино]-1,4-дигидро-4-оксопиридо-6-(2-[2-карбокситиофен-5-ил]этил)[2,3-6]пиримидина (0,54 г, 1,35 ммоль) и Ν-метилморфолина (0,41 г, 4,05 ммоль) в 5 мл диметилформамида добавляют 2хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазин (0,31 г, 1,75 ммоль) в виде одной порции. Получаемую суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. В это время добавляют диэтиловый эфир Ь-глутаминовой кислоты (0,36 г, 1,48 ммоль) и перемешивание продолжают при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь распределяют между 30 мл метиленхлорида и 30 мл воды и затем два слоя вместе перемешивают и оставляют для разделения. Органический слой концентрируют до янтарного масла, которое растирают с этанолом, вызывая образование твердого осадка. Твердое вещество отфильтровывают, промывают этанолом и сушат в вакууме при 50°С, получая 0,59 г (75%) указанного в заголовке соединения. Т. пл. 7276°С.

'|| ЯМР (300 МГц, ДМСО-бе) δ 1,14 (м,

6Н), 1,22 (с, 9Н), 2,04 (м, 2Н), 2,38 (т, 1 = 7,3 Гц,

2Н), 3,12 (м, 4Н), 4,05 (м, 4Н), 4,34 (м, 1Н), 6,88 (д, 1 = 3,6 Гц, 1Н), 7,63 (д, 1 = 3,7 Гц, 1Н), 8,24 (с, 1Н), 8,61 (д, 1 = 7,3 Гц, 1Н), 8,72 (с, 1Н), 10,85 (Очень шир. с, 2Н).

Пример 6. Диэтиловый эфир Ν-[[5-[2-[2[(2,2-диметил-1-оксопропил)амино]-1,4-дигидро-4-оксопиридо-[2,3-б]-пиримидин-6-ил] этил]-2-тиенил]карбонил]-Ь-глутаминовой кислоты.

Дихлорметан (350 мл) добавляют к смеси 2:3 диастереомеров К-Ь и 8-Ь диэтилового эфира №[[5-[2-[2-[(2,2-диметил-1-оксопропил)амино]-3,4,5,6,7,8-гексагидро-4-оксопиридо-(2,3-б)пиримидин-6-ил ]этил]-2-тиенил] карбонил] -Ьглутаминовой кислоты (17,0 г, 28,9 ммоль) из получения 9 и перемешивают 30 мин до тех пор, пока не образуется светло-желтый раствор. Добавляют 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохинон (ΟϋΟ) (13,4 г, 59,2 ммоль) в твердом виде. Раствор сначала становится пурпурным, затем после перемешивания в течение 30 мин при комнатной температуре превращается в светлорозовую смесь. Розовое твердое вещество удаляют фильтрованием, промывают три раза дихлорметаном (25 мл). Фильтрат перемешивают три раза в течение 30 мин с насыщенным раствором бикарбоната натрия (200 мл) и отделяют. Конечный органический слой перемешивают в течение 30 мин с бикарбонатом натрия (100 мл) и водой (100 мл) и отделяют. Органический слой промывают рассолом (100 мл) и сушат над сульфатом магния. Удаление растворителя при пониженном давлении дает 14,7 г (87,1%) указанного в заголовке соединения. Т. пл. 57-87°С.

ИК (СНС1₃): 3690-3025, 2978, 3000, 1736, 1677, 1629, 1558, 1449, 1245, 1147, 1022, 811 см¹. МС (НК) вычислено для С₂₈Н₃₅Н₅О₇8: 586, 234100. Найдено: 586, 233546.

Пример 7. Смесь 1:1 диастереомеров К-Ь и К-8 диэтилового эфира Ν-[[5-[2-[2-[(2,2диметил-1-оксопропил)амино]-3,4,5,6,7,8-гексагидро-4-оксопиридо-(2,3-б)-пиримидин-6-ил] этил ]-2-тиенил] карбонил]-Ь-глутаминовой кислоты.

Диэтиловый эфир Ν-| |5-|2-|2-|(2,2-диметил-1-оксопропил)-амино]-1,4-дигидро-4-оксопиридо-[2,3-б]-пиримидин-6-ил]-этил]-2-тиенил]карбонил]-Ь-глутаминовой кислоты (1,0 г, 1,8 ммоль), применяемый в качестве катализатора 5% палладий на угле (0,26 г), этанол (4,0 мл) и тетрагидрофуран (16,0 мл) добавляют в сосуд для гидрирования. В получаемую смесь три раза вводят под давлением азот 0,703 атм (10 фунт./кв.дюйм) и выпускают. Затем в смесь три раза подают водород под давлением 3,515 атм (50 фунт./кв.дюйм) и выпускают. Давление водорода затем устанавливают до 3,515 атм (50 фунт./кв.дюйм) и температуру повышают до 100°С. Через 22 ч по данным ВЭЖХ остается 7% исходного материала, реакционную смесь оставляют для уравновешивания до комнатной температуры и катализатор удаляют фильтрованием через целит и промыванием смесью 4:1 тетрагидрофуран/этанол. Фильтрат упаривают, снова растворяют в дихлорметане (25 мл), экстрагируют водным бикарбонатом натрия (25 мл), сушат над сульфатом магния и упаривают. Остаток перемешивают в этилацетате (10 мл) при кипячении с обратным холодильником. Через 1 ч смесь оставляют для охлаждения до комнатной температуры и затем перемешивают на ледяной бане в течение 30 мин. После холодного перемешивания реакционную смесь фильтруют и фильтровальный осадок промывают холодным этилацетатом (3 мл). Фильтровальный осадок сушат в вакууме при 40°С/5 мм рт.ст., получая 940 мг (83%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Т.пл. 169170°С.

ЭА вычислено для С₂₈Н₃^₅О₇8: С 57,03; Н 6,67; N 11,88; О 18,99; 8 5,44. Найдено: С 57,26; Н 6,45; N 11,86; О 18,73; 8 5,74.

Данное изобретение было описано подробно, включая его предпочтительные варианты. Однако при рассмотрении данного изобретения для специалистов в данной области должно быть понятно, что могут быть сделаны модификации и/или усовершенствования, которые находятся в пределах сущности и объема изобретения, представленных в следующей формуле изобретения.

Хотя соединения формул III и 111а изображены на протяжении данного описания как имеющие только одну конкретную ориентацию около их двух двойных связей, все возможные изомеры включены в объем данного изобретения.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы III

III;

в которой Υ представляет СН=СН, О или 8;

К предоставляет С₁-С₆-алкил;

_К1 и К² независимо представляют С₁-С₆алкил или взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют гетероцикл;

К³ представляет водород, хлор или фтор;

К⁴ представляет гидрокси, карбоксизащитную группу или NНС*Н(С(О)К⁵)СН2СН2С(О)К⁵, в которой конфигурация у атома углерода, обозначенного *, представляет 8; и

К⁵ представляет водород или карбоксизащитную группу;

или его соль или сольват.
2. Соединение по п.1, в котором Υ представляет СН=СН или 8, К представляет С1-С4алкил, _К ¹ и К² независимо представляют С₁-С₄алкил, К³ представляет водород и К⁴ представ25 ляет С₁-С₄-алкокси или бензилокси; или его соль или сольват.
3. Соединение по п.2, в котором К представляет метил или этил, К¹ и К², оба, представляют метил или этил и К⁴ представляет метокси, этокси или бензилокси; или его соль или сольват.
4. Соединение формулы IV в которой Υ представляет СН=СН, О или 8;

К³ представляет водород, хлор или фтор;

К⁴ представляет гидрокси, карбоксизащитную группу или КНС*Н(С(О)К⁵)СН₂СН₂С(О)К⁵, в которой конфигурация у атома углерода, обозначенного *, представляет 8;

К⁵ представляет водород или карбоксизащитную группу;

К⁶ представляет водород или аминозащитную группу; и

К⁷ представляет гидрокси;

или его соль или сольват.
5. Соединение по п.4, в котором Υ представляет СН=СН или 8 и К³ представляет водород; или его соль или сольват.
6. Соединение по п.5, в котором К⁴ представляет метокси, этокси, бензилокси или КНС*Н(С(О)К⁵) СН2СН2С(О)К⁵; К⁵ представляет С₁-С₆-алкил; К⁶ представляет аминозащитную группу и К⁷ представляет гидрокси; или его соль или сольват.
7. Соединение по п.6, в котором К⁴ представляет КНС*Н(С(О)К⁵)СН₂СН₂С(О)К⁵; или его соль или сольват.
8. Способ получения соединения формулы IV

к⁷ , О Η —У IV;

в которой Υ представляет СН=СН, О или 8;

К³ представляет водород, хлор или фтор;

К⁴ представляет гидрокси, карбоксизащитную группу или №С*Н(С(О)К⁵)СН₂СН₂С(О)К⁵, в которой конфигурация у атома углерода, обозначенного *, представляет 8;

К⁵ представляет водород или карбоксизащитную группу;

К⁶ представляет водород или аминозащитную группу и

К⁷ представляет гидрокси или амино;

или его соли или сольвата;

включающий (а) реакцию соединения формулы Ш(а) где К представляет С₁-С₆-алкил;

К¹ и К² независимо представляют С₁-С₆алкил или взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют гетероцикл;

К^4' представляет карбоксизащитную группу или КНС*Н(С(О)К⁵)СН₂СН₂С(О)К⁵, в которой конфигурация у атома углерода, обозначенного *, представляет 8;

К^5' представляет карбоксизащитную группу;

с 2,4-диамино-5-гидроксипиримидином в присутствии подходящей кислоты и растворителя;

b) необязательное введение аминозащитной группы у К⁶; и

c) необязательное удаление любых карбоксизащитных групп у К^4'.
9. Способ по п.8, в котором соединением формулы IV является соединение, в котором К⁷представляет гидрокси, Υ представляет СН=СН или 8 и К³ представляет водород; или его соль или сольват.
10. Способ по п. 9, в котором соединением формулы Ш(а) является соединение, в котором К^4' представляет метокси, этокси или бензилокси; или его соль или сольват; и проводят стадию Ь) по п.7.
11. Способ по п.10, в котором соединением формулы IV является соединение, в котором К⁶представляет 2,2-диметил-1-оксопропил; или его соль или сольват.
12. Способ по п.8, в котором кислотой является уксусная кислота, а растворителем - ацетонитрил.
13. Способ получения соединения формулы IV

IV;

в которой Υ представляет СН=СН, О или 8;

К³ представляем водород, хлор или фтор;

К⁴ представляет гидрокси, карбоксизащитную группу или №С*Н(С(О)К⁵)СН₂СН₂С(О)К⁵, в которой конфигурация у атома углерода, обозначенного *, представляет 8; и

К⁵ представляет водород или карбоксизащитную группу;

К⁶ представляет водород или аминозащитную группу; и

К⁷ представляет гидрокси или амино;

или его соли или сольвата, включающий

а) реакцию соединения формулы У(Ь) в которой К⁴ представляет карбоксизащитную группу или №С*Н(С(О)К⁵')СН₂СН₂С(О)К⁵'; и

К⁵ представляет карбоксизащитную груп^пу;

или его соли или сольвата с окисляющим реагентом в присутствии подходящего растворителя и

Ь) необязательное удаление любых карбоксизащитных групп у К⁴ и/или у К⁶;

при условии, что, если К⁶ представляет водород в соединении формулы У(Ь), тогда соединение формулы У(Ь) должно быть кислотноаддитивной солью.
14. Способ по п.13, в котором соединением формулы ГУ является соединение, в котором Υ представляет СН=СН или 8 и К³ представляет водород; или его соль или сольват.
15. Способ по п.14, в котором соединением формулы У(Ь) является соединение, в котором К⁴представляет №С*Н(С(О)К⁵')СН2СН2С(О)К⁵', К⁵' представляет С1-С₆-алкил, К⁶ представляет аминозащитную группу и К⁷ представляет гидрокси; или его соль или сольват.
16. Способ по п.15, в котором соединением формулы У(Ь) является соединение, в котором К⁵ представляет метил или этил и К⁶ представляет 2,2-диметил-1-оксопропил; или его соль или сольват.
17. Способ по п.13, в котором окисляющим агентом является 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4бензохинон, а растворителем дихлорметан.
18. Способ получения соединения форму- в которой Υ представляет СН=СН или 8;

К³ представляет водород;

К⁴ представляет гидрокси, карбоксизащитную группу или КНС*Н(С(О)К⁵)СН₂СН₂С(О)К⁵, в которой конфигурация у атома углерода, обозначенного *, представляет 8;

К⁵ представляет водород или карбоксизащитную группу;

К⁶ представляет аминозащитную группу; и

К⁷ представляет гидрокси;

или его соли или сольвата, включающий:

а) взаимодействие соединения формулы У(Ь) в которой К⁴ представляет NНСН(С(О) К⁵')СН2СН2С(О)К⁵' и К⁵' представляет С_ГС6алкил;

или его соли или сольвата с окисляющим агентом в присутствии подходящего растворителя;

b) необязательное удаление карбокси за- щитных групп при К ; и

c) необязательное гидрирование соединения формулы ГУ в подходящем растворителе; с получением смеси, включающей соединения формулы У(1)(К) и У(1)(8) он

V{ί) (5) ;

или соль или сольват каждого из них.