DK3085770T3 - Fremgangsmåde til påvisning af staphylococci i mælk - Google Patents

Claims (14)

1. Fremgangsmåde til lysering af en staphylococcus, der findes i mælk, omfattende: trinnet med at blande et lyseringsmiddel indeholdende lysostaphin, et amfoly-tisk overfladeaktivt stof og et ikke-ionisk overfladeaktivt stof med mælken for at lysere en staphylococcus, der findes i mælken, hvor slutkoncentrationen af det amfolytiske overfladeaktive stof i trinnet med at blande lyseringsmidlet med mælken for at lysere en staphylococcus, der findes i mælken, ikke er lavere end 0,03% og ikke højere end 0,2%.

2. Lyseringsfremgangsmåde ifølge krav 1, hvor det amfolytiske overfladeaktive stof er valgt blandt et dimethylammoniopropansulfonat, et dode-cyldimethylammoniobutyrat, laurylbetain og amidopropylbetain; og/eller det ikke-ioniske overfladeaktive stof er valgt blandt en polyoxyethylenalkylphe-nylether og en polyoxyethylensorbitan-fedtsyreester.

3. Lyseringsfremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvor slutkoncentrationen af lysostaphin i trinnet med at blande lyseringsmidlet med mælken for at lysere en staphylococcus, der findes i mælken, ikke er lavere end 0,1 mg/μΙ og ikke højere end 200 mg/μΙ; og/eller slutkoncentrationen af det ikke-ioniske overfladeaktive stof i trinnet med at blande lyseringsmidlet med mælken for at lysere en staphylococcus, der findes i mælken, ikke er lavere end 0,03% og ikke højere end 10%.

4. Fremgangsmåde til påvisning af en staphylococcus indeholdt i mælk, omfattende: 1. trinnet med at blande et lyseringsmiddel indeholdende lysostaphin, et am-folytisk overfladeaktivt stof og et ikke-ionisk overfladeaktivt stof med mælken for at lysere en staphylococcus, der findes i mælken, hvor slutkoncentrationen af det amfolytiske overfladeaktive stof ikke er lavere end 0,03% og ikke højere end 0,2%, 2. trinnet med at fjerne mælkefedtperler, der er indeholdt i mælken, ved anvendelse af materiale med hulrum, der muliggør fjernelse af mælkefedtperler, der er indeholdt i mælken, og 3. trinnet med påvisning af et specifikt stof, der stammer fra indersiden af nævnte staphylococcus og frigives ved lysis, og trinnene udføres i rækkefølgen 1,2 og 3.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 4, hvor det amfolytiske overfladeaktive stof er valgt blandt et dimethylammoniopropansulfonat, et dodecyldimethylammonio-butyrat, laurylbetain og amidopropylbetain; og/eller det ikke-ioniske overfladeaktive stof er valgt blandt en polyoxyethylenalkylphe-nylether og en polyoxyethylensorbitan-fedtsyreester.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 4 eller 5, hvor, i trin 1, slutkoncentrationen af lysostaphin ikke er lavere end 0,1 mg/μΙ og ikke højere end 200 mg/μΙ; og/eller i trin 1, slutkoncentrationen af det ikke-ioniske overfladeaktive stof ikke er lavere end 0,03% og ikke højere end 10%.

7. Påvisningsfremgangsmåde ifølge et af kravene 4-6, hvor trin 2 og 3 udføres ved hjælp af en immunokromatografisk fremgangsmåde.

8. Påvisningsfremgangsmåde ifølge krav 7, hvor den immunokromatografiske fremgangsmåde omfatter: (1) trinnet med at bringe mælken, der indeholder det specifikke stof, i kontakt med en teststrimmel med en første del, der indeholder et mærket første antistof rettet mod det specifikke stof eller det specifikke stof, der er mærket, en andel del, der er anbragt nedstrøms for den første del, på hvilken et andet antistof rettet mod det specifikke stof er immobiliseret, og en tredje del, der er anbragt opstrøms for den første del eller den anden del, og som har hulrum, der muliggør fjernelse af mælkefedtperler indeholdt i mælken, ved den tredje del eller en del, der befinder sig opstrøms derfor, og (2) trinnet med at lade mælken strømme op til den anden del eller en del, der befinder sig nedstrøms derfor, til opnåelse af et påviseligt signal af mærket af den anden del eller en del, der befinder sig nedstrøms derfor.

9. Påvisningsfremgangsmåde ifølge krav 8, hvor det mærkede første antistof, der er rettet mod det specifikke stof, er indeholdt i den første del.

10. Påvisningsfremgangsmåde ifølge krav 8 eller 9, hvor den tredje del udgøres af to eller flere typer af elementer, som har hulrum, der kan fjerne mælkefedtperler med forskellige partikelstørrelser.

11. Påvisningsfremgangsmåde ifølge krav 10, hvor den tredje del udgøres af et første element, der er anbragt nedstrøms, og et andet element, der er anbragt opstrøms, og tilbageholdelsespartikelstørrelsen af det andet element er større end tilbageholdelsespartikelstørrelsen af det første element.

12. Lyseringsmiddel ifølge et af kravene 1 til 3, til anvendelse i en fremgangsmåde til lysering af en staphylococcus, der er indeholdt i mælk.

13. Lyseringsmiddel til anvendelse ifølge krav 12, hvor fremgangsmåden er en fremgangsmåde til diagnosticering af mastitis hos et besætningsdyr.

14. Kit til påvisning af en staphylococcus indeholdt i mælk, omfattende: lyseringsmidlet ifølge krav 12 eller 13, og immunokromatografisk indretning til påvisning af et specifikt stof, der er indeholdt i mælk, som omfatter en teststrimmel med en første del, der indeholder et mærket første antistof rettet mod det specifikke stof eller det specifikke stof, der er mærket, en andel del, der er anbragt nedstrøms for den første del, på hvilken et andet antistof rettet mod det specifikke stof er immobiliseret, og en tredje del, der er anbragt opstrøms for den første del eller den anden del, og som har hulrum, der muliggør fjernelse af mælkefedtperler indeholdt i mælken.