DK175629B1

DK175629B1 - Syntetisk vaccine mod mund- og klovsyge, fremgangsmåde til fremstilling deraf samt farmaceutisk eller veterinærmedicinsk præparat

Info

Publication number: DK175629B1
Application number: DK198901928A
Authority: DK
Inventors: Guenther Jung; Karl-Heinz Wiesmueller; Guenter Hess
Original assignee: Aventis Pharma Gmbh
Priority date: 1988-04-22
Filing date: 1989-04-20
Publication date: 2004-12-27
Also published as: ZA892954B; IE67124B1; AR243081A1; JP2837866B2; PT90333A; AU619826B2; EP0338437B1; DE58908990D1; DE3813821A1; RU1836102C; DK192889D0; PT90333B; IE891296L; ATE118507T1; NZ228824A; DK192889A; CA1333563C; AU3326589A; JPH026410A; GR3015358T3

Description

i DK 175629 B1

Den foreliggende opfindelse angår en syntetisk vaccine mod mund- og klovsyge som angivet i krav 1-7, en fremgangsmåde til fremstilling af vacinen som angivet i krav 8 og et farmaceutisk eller veterinærmedicinsk præparat som angivet 5 i krav 9.

Mund- og klovsygen forårsager store tab ved kvægavlen til trods for, at der allerede i lang tid har været disponible vacciner. En grund til at mund- og klovsyge forekommer i vor tid er usikkerheden ved klassiske vacciner, der 10 indeholder dræbte eller inaktiverede MKS-vira: inaktiveringen af vira er undertiden ikke fuldstændig, således at "post-vaccinale" udbrud af MKS kan forekomme (jf. Bohm, Stroh-' maier, Tierårztl. Umschau 39, 3-8 (1984). Denne fare forekommer ikke ved syntetiske MKS-vacciner, da der ved de sidst-15 nævnte kun anvendes delsekvenser af bestemte virusproteiner, der ikke har et intakt virus’ funktion.

Der eksisterer ganske vist allerede syntetiske MKS-vacciner (jf. EP patentansøgning 0.204.480), der dog trænger til en forbedring.

20 Det har nu vist sig, at man ved anvendelse af membran- ankerforbindelser og bestemte delsekvenser af MKS-virus kan fremstille særligt aktive MKS-vacciner. I DE-offentliggørel-sesskrift nr. 3.546.150 Al nævnes ganske vist fremstillingen af syntetiske vacciner som en af mange anvendelsesmuligheder 25 for membrananker-aktiv forbindelse-konjugater, man kunne dog ikke forvente, at konjugater af membranankerforbindelser og delsekvenser af MKS-virus (membrananker-aktiv forbindelse-konjugater) udviser den fundne usædvanlige aktivitet ved anvendelse af relativt ringe mængder vaccine.

30 Endvidere udmærker de nævnte vacciner sig overraskende ved, at de allerede efter en enkelt overførsel giver en tilstrækkelig beskyttelse ved vaccination. I forhold til tilgængelige vacciner har de desuden den fordel, at de uden køling har en praktisk talt ubegrænset holdbarhed.

35 Opfindelsen angår derfor en syntetisk vaccine mod mund- og klovsyge, der er ejendommelig ved, at den har en

DK 175629 B1 I

virkning mod mund- og klovsyge og består af et konjugat af I

en membranankerforbindelse og en delsekvens af mund- og I

klovsygevirusset, der er kovalent forbundet med hinanden, H

idet membranankerforbindelsen har en af de nedenfor anførte I

5 formler

R-C0-0-CH2 R-O-CH? R-O-CO-CHo ' I

I I I I

R'-CO-O-CH* R'-O-CH* R’-O-CH-CH*

10 I I I I

(CH2)n {CH2)n (CH2)n I

A A A I

i i i I

15 (CH2)m (CH2)m (CH2)m I

R"-CO-NH-CH*-CO-X R"-CO-NH-CH*-CO-X R"-CO-NH-CH*-CO-X I

I. II. III. I

20

R-NH-CO-CHt R-O-CHo I

> I I

25 R'-NH-CO-CH* R'-O-CH*

(CH2)n (CH2)n B I

I I I I

A A A

30 : i I

(CH2)m (CH2)m (CH2)m a

R"-CO-NH-CH*-CO-X R"-CO-NH-CH*-CO-X R"-NH-CO-CH*-CO-X I

35 IV. V. VI.' I

DK 175629 B1 I

I 3 I

I ri-ch2 I R2-CH* i I 5 i

I · (CH2)η I

I i

I A I

I i

I 10 (CH2)m I

I R-CO-NH-CH*-CO-X I

I VII. I

I 15 I

I i hvilke A betyder svovl, oxygen, disulfid (-S-S-), methylen I

I {-CH2~) eller -NH-, I

I 20 n = 0-5, m = 1 eller 2, I

C* betyder et asymmetrisk carbonatom med R- eller S-kon- I

I figuration, I

I R, R' og R" er ens eller forskellige og betyder hydrogen I

eller en alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med 7 til 25 I

I 25 carbonatomer, der kan være substitueret med hydroxy-, I

I amino-, oxo-, acyl-, alkyl- eller cycloalkylgrupper, Bi I

formlen VI kan have betydningen for de i formlerne I-V an- I

I førte -(CH2)n-(substitueret alkyl)-grupper, og R^ og R2 er I

I ens eller forskellige og har de samme betydninger som R, R1 I 30 og R", men kan også betyde -OR, -O-COR, -COOR, -NHCOR eller -CONHR, idet X betyder en kæde på op til 10 aminosyrer, til I hvilken virussets delsekvens er bundet.

I Membranankerforbindelser er forbindelser, der kan indsluses i biologiske eller kunstige membraner.

I 35 Yderligere illustreringer af membranankerforbindel- serne findes i det allerede nævnte DE offentliggørelsesskrift I 3.546.150 og i G. Jung et al. i "Peptides, Structure and I Function", V.J. Hruby og D.H. Rich, side 179-182, Pierce I Chem. Co. Rockford, Illinois, (1983).

I 4 0 Især skal som eksempler på membranankerforbindelseme nævnes: I bakterielt lipoprotein forekommende N-terminaler såsom Y- DK 175629 B1 H Ser-Ser-Ser-Asn, Y-Ile-Leu-Leu-Ala, Y-Ala-Asn-Asn-Gln, Y-

Asn-Ser-Asn-Ser, Y-Gly-Ala-Met-Ser, Y-Gln-Ala-Asn-Tyr, Y-

Gln-Val-Asn-Asn, Y-Asp-Asn-Ser-Ser, idet Y kan være en af de under formlen I til VII anførte grupper. Disse lipopen- H 5 tapeptider kan også anvendes i forkortet form (Lipodi-, Lipo- tri- eller Lipotetrapeptider) som membranankerforbindelse.

Ganske særlig foretrukne er N-palmitoyl-S-[2,3(bispalmitoyl- oxy)propyl]-cysteinyl-seryl-serin (Pan^Cys-Ser-Ser), N-pal- H mitoyl-S- [2,3-(bispalmitoyloxy)propyl] -cysteinyl-seryl-glycin 10 og N-palmitoyl-S- [2,3-(bispalmitoyloxy)propyl] -cysteinyl- H alanyl-D-isoglutamin. Eksempler på yderligere foretrukne H membranankerforbindelser er anført i DE offentliggørelses- skrift 3.546.150.

Som delsekvenser af MKS-virusset, der er bundet til 15 membranankerforbindelsen, kan anvendes mange forskellige delsekvenser. Foretrukne er de1sekvenserne:

Delsekvens - (134-154) I - (135-154) - (134-158) 20 " (134-160) I — (141-160) I - (200-213) - (200-210) I - (161-180), I 25 idet sekvenserne af alle kendte serotyper og subtyper kan I anvendes. Som eksempler pa serotyper kan i denne sammenhæng I nævnes: DK 175629 B1 5

Serotype A: 134 160

A5 Westervaia NKYSTGGP—RRGDMGSAAARAAKQLP

161 180

ASFNYGAIRAITIHELLVRM 200 213 RHKQKIIAPARQLL

A12 USA 134 160 NKYSASGSG-VRGDFGSLAPRVARQLP l6l 180

ASFNYGAIKAETIHELLVRM 200 212 ' RHKQKIIAPGKQL

Serotype C: 13¾ l60

C1 Oberbayern TTY TAST ----RGDLAHLTAT RAGHLP

l6l 180 TSFNFGAUKAETITGLLVAM 200 213

RHKQPLVAPAKQLL

Serotype O: 134 160

0: Kaufbeuren CRYNRNAVPNLRGDLQVLAQKVARTLP

0χ Lausanne CRYSRNAVPNLRGDLQVLAQKVARTLP

02 Normandie RRYSRNAVPNVRGDLQALGQKARTLP

0 Wuppertal CLY SDARVSNVRGDLQVLAQKAERAL

0 Israel CRYGNVAVTNVRGDLQVLAQKAERALP

200 213

Kauf baueren RHKQKIVAPVKQTL

l6l 180

0χ Kaufbeuren TSFNYGAIKATRVTELLYRM

I DK 175629 B1 I

i 6 I

I Især egnede er syntetiske vacciner, der består af en I

I blanding af peptider af forskellige sero-, og/eller subtyper I

I af mund- og klovsygevirus, der hver gang er kovalent bundet I

I til membranankerforbindelsen/forbindelserne. I

I 5 Især foretrukket er syntetiske vacciner, der består I

I af en blanding af sekvenser SP1 134-160 fra serotyperne O, I

I A, c, der er bundet til membranankerforbindelsen N-palmitoyl- I

I S-[2,3-bispalmitoyloxy)propyl]-cysteinyl-seryl-serin. I

I Ved anvendelse af sekvensen 134-154 fra serotypen O I

I 10 og sekvensen 134-155 fra serotypen A kan disse, såfremt de I

I indeholder C-terminalt lysin, være bundet kovalent til mem- I

I branankerforbindelsen via e-aminogruppen. I

I Som især egnede har syntetiske vacciner ifølge opfin- H

I delsen vist sig at være, der indeholder delsekvensen VP 1 H

I 15 (135-154) fra MKS-viruset. I

I Især foretrukket er endvidere en vaccine, der består I

I af N-palmitoyl-S-[2,3-(bispalmitoyloxy)-propyl]-cysteinyl- I

I seryl-seryl-VP 1 (135-154), dvs. forbindelsen med den efter- I

I følgende formel I

I 20 I

I 135 I

I 25 T f*T ^ “ft T I

I I V ) Pro val \ ) Gin i ) I Ser Arg Arg' \-/ · .

^ I

I CH2-CH-CH2 ch2-ch ( -

I ό ό N H Gin I

I 6o c*o o*c J I

I / / / Ly*''

I 30 > > S 15L

I 35 ? / / I

DK 175629 B1 7

Membranankerforbindelsen kan i princippet forekomme som R, S-, R,R-diastereomere eller som diastereomerblanding.

Det har vist sig, at de vacciner, der indeholder en R,R-diastereomer membranankerforbindelse, udviser en særlig 5 høj aktivitet.

Opfindelsen angår endvidere en fremgangsmåde til fremstilling af en syntetisk vaccine, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at MKS-virusets delsekvenser bindes til membranankerforbindelsen ved hjælp af en konjugationsreak-10 tion. Konjugationsreaktionen kan f.eks. være en kondensation, addition, substitution, oxidation eller en disulfidbinding. Foretrukne konjugationsmetoder er anført i eksempel 1. Yderligere konjugationsmetoder er beskrevet i det allerede nævnte DE offentliggørelsesskrift 3.546.150.

15 Fremstillingen af membranankerforbindelserne er lige ledes udførligt beskrevet i det sidstnævnte DE offentliggørelsesskrift.

Den eventuelt nødvendige spaltning af diastereomerene kan ske efter forskellige metoder som det f .eks. er beskrevet 20 i Hoppe-Seyler' s 2. Physiolog. Chem. 364 (1983) 593. I eksempel 2 er en foretrukket spaltningsfremgangsmåde beskrevet.

Opbygningen af del sekvenserne af de hver gang forekommende MKS-proteiner kan udføres på forskellige i litteraturen kendte måder, jf. f.eks. Wunsch et al. i Houben-25 Weyl, bd. 15/1,2, Stuttgart, Thieme-Verlag eller Wunsch i Angew. Chem. 83/ (1971), 773, E. Gross og J. Meienhofer (udgiver), The Peptides, bind 1 (1979), 2 (1979), 3 (1981) og 5 (1983) Academic Press, New York eller DE offentliggørelsesskrift 3.546.150. I eksempel 3 illustreres en foretrukket 30 fremgangsmåde til fremstilling af en delsekvens og et kon-jugat nærmere.

Endvidere angår opfindelsen farmaceutiske eller veterinærmedicinske præparater, der har et indhold af konjugat af membranankerforbindelse og delsekvens af MKS-virus. Nor-35 malt er det ikke nødvendigt foruden et opløsningsmiddel at tilsætte yderligere hjælpe- og bærestoffer eller adjuvanser

I DK 175629 B1 I

I I

I til præparaterne ifølge opfindelsen. I mange tilfælde kan I

I det dog være værdifuldt at tilsætte sådanne hjælpe- og/eller I

I bærestoffer samt eventuelt adjuvanser til præparaterne ifølge I

I opfindelsen. Blandingen og påfyldningen af de omhandlede I

I 5 stoffer sker efter af fagfolk kendte fremgangsmåder. I

I Mængden af vaccine, der er nødvendig for en sikker I

I immunisering af et dyr, afhænger af dyrearten, membrananker- I

I forbindelsen/forbindelserne og delsekvensen/sekvenserne af . I

I MKS-virusset og kan i enkelte tilfælde måles empirisk. Til I

10 en mere sikker immunisering af et marsvin mod MKS-virus I

I serotype O^K, er det f.eks. tilstrækkeligt med en enkelt I

indgivelse af ca. 100-500 ^g af en vaccine ifølge opfindelsen I

I uden yderligere hjælpe- eller bærestoffer. I

I 15 Eksempel 1 I

I Konjugation af peptider/proteiner med Panr^Cys-Ser-Ser-OSu I

I eller PamjCys-Ser-Ser-OH I

20 1. Peptider og proteiner, der er opløselige i DMF I

2 μπιοί peptid/protein opløses i 0,5-1 ml DMF og hertil I

I sættes 8 μmol (9,2 mg) fast PamjCys-Ser-Ser-OSu. Ved I

I hjælp af en svag opvarmning og påvirkning med ultralyd I

I fås en homogen opløsning, og der tilsættes 4 μπιοί I

I 25 organisk base (N-ethylmorpholin). Efter omrøring i I

I 12 timer tilsættes 1-2 ml chloroform:methanol·(1:1), I

I og der afkøles i isbad i 2 timer. I 1

Sedimentet vaskes med 1 ml kold chloroform:methanol I

I 30 (1:1) og optages herefter i tert.butanol/vand (3:1) I

I (hvorefter der eventuelt påvirkes med ultralyd) og I

I lyofiliseres. I

I 2. Peptider og proteiner, der er opløselige vand. I

I 2 μmol peptid/protein opløses i 0,8 ml vand, og sættes I

I 35 til 4 μιποί (4,5 mg) Pam3Cys-Ser-Ser-OH. Der påvirkes I

I grundigt med ultralyd indtil der fremkommer en emul- I

DK 175629 B1 9 sion, og der indstilles på en pH-værdi på 5,0 til 5,5. Efter tilsætning af 5 ml EDC (1-(3-dimethyl-aminopropyl)-3-ethyl-carbodiimid-hydrochlorid), der er opløst i 100 μΐ H20, omrøres der i 18 timer ved 5 stuetemperatur, hvorefter der dialyseres to gange mod hver gang 1 liter destilleret H20. Indholdet i dialyseslangen lyofiliseres.

Eksempel 2 10

Spaltning af N-Palmitoyl-S-[2>3-(bispalmitoyloxy)propyl)-cystein-tert.butylester (PamjCys-OBut)'s diastereomere 2 g Pan^Cys-OBu1- opløses i 10 ml. elueringsmiddel, 15 dichlormethan/ethylacetat (20:1), hvorefter opløsningen sættes på en søjle (længde 120 cm, diameter 4 cm), der er fyldt MN-kiselgel 60, 0,063-0,2 mm/70-230 mesh ASTM. Ved en dråbehastighed på 2 dråber pr. sekund opsamles 350 fraktioner af 10 ml, og en alikvot af hver fraktion undersøges efter 20 chromatografi på kiselgel 60-plader i dichlormethan/ethylacetat (20:1) og farvning med chlor/TDM-reagens for Pan^Cys-OBut.

Fraktionerne 280-315 indeholder R,R-diastereomeren, fraktionerne 316-335 indeholder en blanding af R,R og R,S 25 og fraktionerne 336-354 indeholder R,S-diastereomeren af Pam3Cys-OBut. Efter inddampning af opløsningsmidlet på en rotationsfordamper optages remanensen i varm tert.butanol, og der lyof iliseres, hvorved der fås 600 mg R,R-, 370 mg ' blanding af R,R- og R,S- og 540 mg R,S-PamjCys-OBu^.

30

Eksempel 3

Syntese af N-palmitoyl-S-[2,3-(bispalmitoyloxy)-propyl]-cysteinyl-seryl-seryl-VP 1 (135-154) VP 1-peptidsekvensen af MKS-virus serotype O^K syn- 35

I DK 175629 B1 I

I I

I tetiseres ved hjælp af fastfase-peptidsyntesen. Der benyttes I

I Fmoc-aminosyrer. Følgende sidekædebeskyttelsesgrupper anven- I

I des: Lys(Boc), His(Fmoc), Arg(Mtr), Ser(tBu), Asp(OtBu), I

I Tyr(tBu). Idet der gås ud fra 1 g p-benzoyloxybenzylalkohol- I

I 5 harpiks, der er belastet med 0,47 mmol/g Fmoc-Lys(Boc)-OH I

I gennemløbes følgende syntesecyclusser: I

I Der foretages en N-aktivering med 55% piperidin i N- I

I methylpyrrolidon (1x2 min, 1x5 min), hvorefter der sker I

I en præaktivering af Fmoc-A-A-OH (1,5 mmol) i 6 ml N-methyl- I

I 10 pyrrolidon med 1,5 mmol diisopropylcarbodiimid og 1,5 mmol I

I 1-hydroxybenzotriazol, hvorefter der kobles i 1,5 time. I

I Efter vask med N-ethylmorpholin (5% i N-methylpyrrolidon) I

I gentages præaktivering og kobling. Blokeringen af ikke-om- H

I satte aminogrupper gennemføres med 2,5 mmol eddikesyrean- H

I 15 hydrid og 1,2 mmol diisopropylamin i N-methylpyrrolidon. H

I Efter hvert trin vaskes peptid-harpiksen flere gange med N- H

I methylpyrrolidon, dichlormethan og påny med N-methylpyr- I

I rolidon. I

I Efter syntesen af den harpiksbundne MKS-virus-se-

I 20 kvens udvindes en del af peptidet ved hjælp af trifluored- I

I dikesyrespaltning, og det undersøges ved hjælp af HPLC, MS, H

I aminosyreanalyse, analyse på chiral fase samt sekvensanalyse. H

I Herefter bindes 2 seringrupper til det til harpiksen bundne H

I peptid, hvorefter følger koblingen af tripalmitoyl-S-glyce- I

I 25 rylcystein. Efter 4 timer tilsættes 1 ækvivalent N-methyl- H

I morpholin, og efter en yderligere time vaskes lipopeptid-

I harpiksen. Lipopeptidet skilles fra harpiksen ved hjælp af I

I 2 ml trifluoreddikesyre (med 100 μΐ thioanisol) i løbet af I

I 4¾ time. Filtratet inddampes, og remanensen optages med I

I 30 eddikesyre og sættes til kold ether. Det udfældende lipopro- H

I tein vaskes tre gange med ether. Yderligere oprensning opnås

I ved omkrystallisation ud fra trifluorthanol/chloroform i H

I forholdet 1:3 med kold acetone og nogle dråber vand. Lipo- I

I peptidet lyofiliseres ud fra tert.butanol/vand i forholdet I

I 35 3:1. I

DK 175629 B1 11

Eksempel 4

Aktivicetsanalyse 5 Tilfældigt udvalgte marsvin med en vægt på 450 til 500 g vaccineres intramuskulært eller subcutant. 0,5 mg af det lyofiliserede vaccine N-palmitoyl-S-[(2R,R)-2,3-(bispal-mitoyloxy) -propyl] -cysteinyl-seryl-seryl- (135-154) emulgeres i 500 μΐ af en l:l-blanding af 0,05 M phosphatpuffer 10 og "Intralipid" (Kabi Vitrum, Sverige). Blandingen behandles med ultralyd i 10 sekunder. Fire dyr inficeres med MKS-virus, idet' de injiceres subcutant med mindst 500 marsvinenheder af et virulent O^K FMD-virus i deres venstre bagpote 21 dage efter vaccinationen. Som kontrol foretrækkes dyr, der 15 i stedet for vaccinen er blevet injiceret med membrananker-forbindelsen eller phosphatpuffer. Ved alle vaccinerede dyr fandt man en højere titer for neutraliserende antistoffer log10SN50 på 0,36. Kontroldyrene har ingen antistof-titer (blindværdi 0,17) . Titeren for de neutraliserende antistoffer 2 0 bestemmes som logaritmen af den serumfortynding, der er nødvendig, for at neutralisere 50% af de virusceller, der er indlejret i lag BHK-(Baby Hamster Kidney)-celler. Ved de vaccinerede dyr kunne ved hjælp af anti-peptid-ELISA-analyser (A492) påvises antistoffer, hvilket ikke er muligt ved de 25 ikke-vaccinerede dyr. Vaccinerede dyr har ingen sekundære læsioner, medens alle ikke-vaccinerede dyr viser et fuldt-. stændigt billede på en mund- og klovsygeinfektion.

Claims

1. Syntetisk vaccine, kendetegnet ved, at I den har en virkning mod mund- og klovsyge og består af et I konjugat af en membranankerforbindelse og en delsekvens af I 5 mund- og klovsygevirusset, der er kovalent forbundet med I hinanden, idet membranankerforbindelsen har en af de nedenfor I anførte formler I R-C0-0-CH2 r-o-ch2 . R-0-C0-CH2 |

10. I I R'-CO-O-CH* R'-O-CH* R'-O-CH-CH* ! i f I (CH2)n (CH2)n (CH2)n a

15. A A I i i il (CH2)m (CH2)m (CH2)m a R"-CO-NH-CH*-CO-X R"-CO-NH-CH*-CO-X R"-CO-NH-CH*-CO-X | 20 I. II. III-

25 R-NH-CO-CHo R-O-CHo I I I I R'-NH-CO-CH* R'-O-CH* (CH2)n (CH2)n B I

30. I I A A A I I I I |CH2)m (CH2)ra (CH2)m I

35 R"-CO-NH-CH*-CO-X R"-CO-NH-CH*-CO-X R"-NH-CO-CH*-CO-X | IV. V. VI. I DK 175629 B1 R]-CHo I * r2-ch

2. Syntetisk vaccine ifølge krav 1, kendetegnet ved, at delsekvensen af mund- og klovsygevirusset, 35 der er bundet til membranankerforbindelsen, er valgt blandt 40 -------- ------- . J DK 175629 B1 I

14 I Sekvens - (134-154) I - (135-154) I - (134-158) I - (134-160) I 5 - (141-160) ' I - (141-158) I - (200-213) - (200-210) - (161-180) I

10 I eller deres C-terminalt amiderede eller alkylamiderede for- I mer, idet sekvenserne af alle kendte serotyper og subtyper H kan anvendes.

3. Syntetisk vaccine ifølge krav 1 eller 2, k e η- I 15 detegnet ved, at delsekvensen af mund- og klovsyge- I virusset VPl (135-154) er bundet til membranankerforbindel- I sen. I

4. Syntetisk vacine ifølge ét eller flere af kravene H 1-3, kendetegnet ved, at den består af en blanding H 20 af peptider fra forskellige sero- og/eller subtyper af mund- H og klovsygevirusset, der hver er kovalent bundet til mem- I branankerforbindelsen eller membranankerforbindelser. I

5. Syntetisk vaccine ifølge et eller flere af kravene H 1-4, kendetegnet ved, at den består af en blanding · H 25 af sekvenser VP 1 134-160 fra serotyperne O, A eller C, H der er bundet til membranankerforbindelsen N-palmitoyl-S- I [2,3-(bispalmitoyloxy)-propyl]-cysteinyl-seryl-serin. ( H

5 I (CH2)n A 10 {CH2)m R-CO-NH-CH*-CO-X VII. 15 i hvilke A betyder svovl, oxygen, disulfid (-S-S-), methylen (-CH2-) eller -NH-, 20 n = 0-5, m = 1 eller 2, C* betyder et asymmetrisk carbonatom med R- eller S-kon-figuration, R, R1 og R" er ens eller forskellige og betyder hydrogen eller en alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med 7 til 25 25 carbonatomer, der kan være substitueret med hydroxy-, amino-, oxo-, acyl-, alkyl- eller cycloalkylgrupper, B i formlen VI kan have betydningen for de i formlerne I-V anførte -(CH2)n-(substitueret alkyl)-grupper, og R^ og R2 er ens eller forskellige og har de samme betydninger som R, R' og 30 R", men kan også betyde -OR, -0-C0R, -C00R, -NHCOR eller -C0NHR, idet X betyder en kæde på op til 10 aminosyrer, til hvilken virussets delsekvens er bundet.

6. Syntetisk vaccine ifølge et eller flere af kravene H 1-5, kendetegnet ved, at den består af N-palmi- - H 30 toyl-S-[2,3-(bispalmitoyloxy)-propyl]-cysteinyl-seryl-serin I VP 1 (135-154), idet membranankerforbindelsen kan forekomme I som R,S-, R,R-diastereoisomer eller som diasteromerblan- H ding. I

7. Syntetisk vaccine ifølge ét eller flere af kravene I 35 1-6, kendetegnet ved, at membranankerforbindelsen I foreligger som R,R-diastereomer. I DK 175629 B1

8. Fremgangsmåde til fremstilling af en syntetisk vaccine ifølge et eller flere af kravene 1-7, kendetegnet ved, at de på i og for sig kendt måde fremstillede t delsekvenser af mund- og klovsygevirusset bindes til membran- 5 ankerforbindelsen ved en konjugationsreaktion.

9. Farmaceutisk eller veterinærmedicinsk præparat, kendetegnet ved, at det indeholder en syntetisk vaccine ifølge et eller flere af kravene 1-8, eventuelt sammen med gængse hjælpe- og/eller bærestoffer, adjuvanser 10 og/eller yderligere vacciner.