DK171487B1 - Kationiske komplekser med technetium-99m, komplekserne til anvendelse som hjerteafbildende midler og ligander, der er anvendelige i sådanne komplekser - Google Patents

Description

i DK 171487 B1

Opfindelsen angår hidtil ukendte kationiske komplekser af technetium-99m (Tc-99m), der er nyttige som kropsafbildende midler. Opfindelsen angår endvidere hidtil ukendte ligander, der er anvendelige i sådanne 5 komplekser, og komplekserne til anvendelse som hjerte-afbildende midler.

Radiofarmaceutika kan benyttes som diagnostiske eller terapeutiske midler på grund af de fysiske egenskaber af de heri indgående radionuclider. Deres anven-10 delse er således ikke baseret på nogen form for farmakologisk virkning. De fleste klinisk anvendte medikamenter af denne type er diagnostiske midler, der indeholder et γ-strålende nuclid, der på grund af de fysiske eller metaboliske egenskaber af de hertil koordi-15 nerede ligander lokaliserer sig i et bestemt organ efter intravenøs indsprøjtning. De opnåede billeder herfra kan afspejle struktur eller funktion af organet. Disse billeder opnås ved hjælp af et γ-kamera, der påviser fordelingen af ioniserende stråling udsendt af de 20 radioaktive molekyler. Den vigtigste isotop, der i øjeblikket anvendes i klinisk diagnostisk nucleærmedicin, er metastabil technetium-99m (halveringstid 6 timer).

Det er velkendt, at neutrale bidentate ligander af den almene type R2Q(CH2)nQR2 (hvori Q kan være phos-25 phor eller arsen, og n er 2) danner stabile veldefinerede kationiske komplekser med 99Tc og Ad skillige patenter, deriblandt US 4 481 184, US 4 387 087, US 4 489 054, US 4 374 821, US 4 451 450 og US 4 526 776 beskriver forskellige ligandarter, 30 hvori de koordinerende atomer er phosphor eller arsen med hovedsagelig alkyl- og/eller alkylsubstituenter.

Man har overraskende fundet, at kationiske kom- ' plekser med Tc-99m, der indeholder neutrale, bidentate donorligander baseret på phosphor og med indhold af et-35 herkæder, har overraskende egenskaber, der gør dem til overlegne kropsafbildende midler i rotter eller marsvin, især f tf i l k DK 171487 B1 2 hjerteafbildende midler, i forhold til tilsvarende komplekser, der ikke indeholder etherkæder.

I overensstemmelse hermed er et kationisk tech-netium-99m kompleks ifølge opfindelsen ejendommeligt ved, 5 at det er med en ligand med formlen: Y2PZPY2 hvori 10 grupperne Y, der er ens eller forskellige, be tegner hver H eller C^-Cg mættet carbonhydrid med eventuelt indhold af op til 3 etheroxygenatomer, z betegner en -CC-, -CCC- eller -COC-kæde, der eventuelt er substitueret med mindst én C^-Cg mættet car-15 bonhydridgruppe eller mættet fluorcarbonhydridgruppe, der eventuelt indeholder op til 3 etheroxygenatomer, forudsat, at liganden indeholder mindst én -COC-etherkæde.

20 En ligand ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at den har formlen: Y'jPZ'PY^ 25 hvori grupperne Y', der er ens eller forskellige, betegner hver mættet carbonhydrid, og Z' betegner en -CC-, -CCC- eller -COC-kæde, der eventuelt er substitueret med mindst én C^-Cg mættet carbonhy-30 dridgruppe eller mættet fluorcarbonhydridgruppe, der eventult indeholder op til 3 etheroxygenatomer. forudsat, at liganden indeholder mindst én -COC-ether-kæde.

Liganden indeholder foretrukket 2 eller 3 -COC-35 etherkæder.

Eksempler på C1-C8 mættede carbonhydridgrupper, der eventuelt indeholder op til 3 etheroxygenatomer, er DK 171487 B1 3 alkyl, cycloalkyl, alkoxy, alkoxyalkyl, alkoxyalkoxy-alkyl, alkoxyalkoxyalkoxyalkyl, -CH2OC(CH3)2OCH2-, -CH2CH2OCH2CH2-, og 2-tetrahydrofuryl.

Mættede fluorcarbonhydridgrupper kan f.eks. være 5 en hvilken som helst af de ovennævnte grupper, hvori et eller flere hydrogenatomer er erstattet med fluoratomer .

I det følgende vil grupperne Y og Y' samt Z og Z' blive sammenfattet under betegnelserne Y og Z.

10 Grupperne Y er ens eller forskellige, og hver er foretrukket H eller C^-C^ alkyl, der eventuelt er substitueret med alkoxy. Grupper Y, der ikke in deholder etheroxygenatomer, er foretrukket H, methyl eller ethyl. Z er foretrukket en -CC-, -CCC- eller 15 -COC-kæde, der eventuelt er substitueret, med C1-C4 alkoxy, alkoxyalkyl eller spirocyclisk ether.

Mere foretrukket er Z en -CC- eller -CCC-kæde, hvert Y er H eller methyl, og enten én eller flere methoxysubstituenter er bundet til én eller flere grup-20 per Y, eller én eller flere methoxymethyl eller -COC-spirocycliske ethergrupper er bundet til et carbonatom i Z.

Det kationiske kompleks har foretrukket formlen: 2 5 [Το(ΝΟ)η^2]+Α“ eller [TcL3]+A~ hvori X er en monodentat ligand for Tc, A er en anion, n er 1 eller 2, og m er tilsvarende 1 eller 0, og 30 L er liganden.

I de kationiske komplekser er X en monodentat ligand for Tc, almindeligvis et halogenid såsom F, Cl,

Br eller I, eller et pseudohalogenid såsom SCN, N3, CN eller RS.

35 A er en anion, hvis art ikke er kritisk, men som bekvemt kan udvælges blandt de, der ovenfor er nævnt for X.

DK 171487 B1 4

Liganden indeholder som nævnt i det mindste en -COC-etherkæde. Dette kan opnås ved hjælp af en -COC-kæde, der sammenbinder de to phosphoratomer. Mere ofte tilvejebringes etherkæden ved hjælp af en alkoxy eller 5 alkoxyalkylsubstituent på en eller flere af grupperne Y og Z. Z er foretrukket en -CC- eller -CCC-kæde, hvert Y er H eller methyl, og en eller flere methoxy eller methoxymethylsubstituenter er bundet til en eller flere af grupperne Y eller Z. Der er muligheder for forskel-10 lige substitionsmønstre, f.eks.: a) Substition i grundskelettet, enkel eller multipel, f.eks.: CMe MeO OMe rS Ps

Me2? ?Me2 Me2P ?Me2 (i) (ii) b) Funktionalisering af phosphor, der kan være 20 asymmetrisk eller symmetrisk, f.eks.: CH? — CH2 CHj — C«2

II II

yt— P P — Me Pfc — P P—M* I I ‘ '

Me-O-CH? M« HeOCH2 CHj»« 25 (i) (li) c) En blanding af funktionalisering ved phos-phoratomet og i grundskelettet.

d) Den spirocycliske type, f.eks.: 30 . Λ

Me2P PMe2 5 DK 171487 Bl

Som det ses i de nedenstående eksempler, er disse kationiske komplekser af Tc-99m af interesse som hjerteafbildende midler. Man kan vælge størrelsen af grupperne Y og Z og antallet og størrelsen af alkoxy, 5 alkoxyalkyl eller de spirocycliske ethersubstituenter til opnåelse af, at kompleksen bliver så lipofilt, som det ønskes til dette formål (eller til et hvilket som helst andet formål, hvortil komplekserne skal anvendes). Etherkæderne er ikke blot til stede til op-10 nåelse af en ønsket hydrofil/lipofil balance. Man har overraskende fundet, at komplekser dannet af ligander med en etherkæde har et betydeligt større optag i hjertet i rotter eller marsvin end tilsvarende hydrofobe korrplekser . dannet af tilsvarende ligander uden et etherkæde. Det synes, at 15 etherkæderne i liganden modificerer den biologiske opførsel af Tc-99m komplekset, når man sammenligner med den usubstituerede analog, idet det hurtigere udskilles fra blod og lever, hvilket er essentielt til opnåelse af et godt forhold mellem optag i det ønskede organ og 20 baggrund.

Foretrukne kationiske komplekser af technetium-99m med bidentate ligander ifølge opfindelsen har formler: a) [Tc(N0)XL2]+A“ 25 hvori X er en monodentat ligand for Tc, A er en anion, og L er en ligand med formlen

MeO*—^ , — OMe

PS

Me2P PMe2 b) [TcL3]+A" 35 6 DK 171487 Bl hvori L er en ligand med formlen

MeO—* 0 OMe

Me2P ?Me2

Skønt opfindelsen beskæftiger sig mere med resultater end med mekanismer, vil ansøgeren foreslå det følgende som en mulig forklaring på mekanismerne.

10 I brede træk eksisterer der for forbindelser med nogenlunde ens struktur en sammenhæng mellem lipofili-tet og binding til protein. Forbindelser med høj lipo-filitet bindes kraftigere til proteiner end forbindelser med lav lipofilitet. For 9^mTc kationer er virknin-15 gen af stærk binding til protein, at de findes længe i kredsløbet, hvilket medfører, at billedet af hjertemusklen, foretaget en rimelig tid efter injektionen, sløres af aktiviteten i blodet. En yderligere alment observeret tendens for de mere lipofile kationer er, at 20 de udskilles langsomt gennem det hepatobiliære system, hvorfor afbildning af hjertet kan forstyrres af aktivitet i leveren.

En tydelig vækst i hydrofiliteten for et ^^Tc kompleks har den ønskede virkning at reducere binding 25 til protein, men reducerer også optag i hjertet. Det synes imidlertid, at der er en region med middelstor lipofilitet, hvor der stadig er godt optag i hjertet, men ingen eller kun ringe proteinbinding, så komplekset hurtig udskilles fra blodet. Der synes også at være en 30 rangfølge i bidrag til polaritet, hvor TcO er større end MeO, der igen er større end EtO. Med dette som baggrund kan det være muligt at opnå den ønskede lipofile/ hydrofile balance, idet de additive hydrofile virkninger af oxygensubstituenterne udbalancerer de lipofile 35 virkninger af carbonhydriddelene i molekylet.

Sådanne phosphinligander er ikke lette at fremstille. De er giftige, forbindelserne eller pre-curso- 7 DK 171487 Bl rerne derfor er ofte selvantændelige i luften, og der er ved deres fremstilling ofte risiko for eksplosioner, eller det kan være svært at kontrollere reaktionerne.

Det kan være nødvendigt omhyggeligt at vælge reaktions-5 betingelser for at undgå sidereaktioner.

Man kender følgende reaktionsskemaer: A. MeP(CH20Me)-(CH2)2-P(Me) (CH2OMe) 10 THF Λ _ s 0 0» i) MePH-(CH2)2-PHMe + 2MeLi _MeP-(CH2)2-PMe

RT

© . TK?

ii) MeP-(CH2) 2-?Me + 2BrCH20Me _^ A

15 : -785C

Denne reaktionsvej kan benyttes for andre symmetriske ligander, der er monosubstituerede ved hvert P atom.

20 B. Me2P-(CH2)2-P(Me) (CH20Me) NH3(1) <s>

Me2P-(CH2)2-PHMe + MeLi _^ Me2P-(CH2)2>PMe

25 -78°C

eller ether _ 3

Me2P-(CH2)2-PHMe + MeLi _^ Me2P-(CH2)2~PMe NH3(1)

30 Ke2P-(CH2)2^Me + CICHgOMe _v B

-78°C

Denne reaktionsvej kan benyttes for andre asym-^5 metriske ligander, der er monosubstituerede på et P atom.

DK 171487 B1 8 C. Me2P-CH2-CH(CH2OMe)-CH2-PMe2 NH3(1) 5 i) Me-PH ♦ n-BuLi _LiPMe2 -60°C 7 NH3(1)

ii) LiPMe2 + ClCH2-CH(CH20Me)-CH2C1_.C

-60°C 7 10 Denne reaktionsvej kan benyttes for andre li gander, hvor grundskelettet er substitueret med alkoxy, alkoxyalkyl eller spirocyclisk ether.

Disse og andre reaktionsveje beskrives mere detaljeret i eksemplerne l, 2 og 8-12 nedenfor.

15 De kationiske komplekser med Tc-99m kan frem stilles ifølge kendt teknik. For eksempel: - Komplekser af typen [ΤοΧ2Ι*2]+Α- kan fremstilles ved fremgangsmåder som beskrevet i US patentskrifterne nr. 4 387 087 og 4 489 054.

20 - Komplekser af typen [Tc(NO)nXmL2]+A- kan frem stilles ved fremgangsmåder som beskrevet i EPO offentliggørelsesskrift nr. 304239.

- Komplekser af typen [TcLg]+A“ kan fremstilles ved fremgangsmåder som beskrevet i US patentskrift nr.

25 4 481 184.

Syntese af methylethersubstituerede diphosphiner.

30

Alle reaktioner og manipulationer blev udført under vakuum eller i en oxygenfri nitrogenatmosfære. Opløsningsmidler blev tørret og afluftet ved gennem-bobling med nitrogen eller ved frysning/optøning før 35 anvendelse. Reagenserne BrCH20Me og ClCH20Me blev købt eller opnået fra Amersham (BrCH2OMe og ClCH2OMe blev DK 171487 B1 9 destilleret før anvendelse) og blev deoxygeneret ved frysning og optøning. MeLi blev fremstillet ud fra MeCl i diethylether og blev analyseret og benyttet opløst i diethylether. Ammoniak blev tørret ved destillation 5 fra natrium. Phosphinerne MePH-(CH2)2-HPMe [Ref. 1] og Me2P-PMe2 [Ref. 2] blev fremstillet ifølge kendt teknik. Me2P(CH2)2P(H)Me [Ref. 3] blev fremstillet ud fra Me2P(CH2)2PH2 [Ref. 4]. Følgende forkortelser benyttes: THF = tetrahydrofuran; ST = stuetemperatur; ether = 10 diethylether = Et20; Me = methyl.

Eksempel 1

MeP(CH20Me)-(CH2)2-(Me)P(CH2OMe) 15 (Se reaktionsskema A ovenfor)

Fremgangsmåde: I en 250 ml trehalset rundbundet kolbe forsynet 20 med tilbagesvaler, en tilførselstragt med trykudligning og magnetisk omrører anbragte man 6,76 g (5,53 x 10-2 mol) af phosphinen MePH-(CH2)2-PHMe i 35 ml THF. Man anbragte MeLi (11,67 x 10”2 mol i etheropløsning) i tilførselstragten og satte den dråbevis til phosphinen 25 under omrøring ved stuetemperatur, idet opløsningen herved blev lysegul. Man skyllede tilførselstragten med 10 cm3 THF og anbragte heri 13,83 g BrCH20Me (11,07 x 10~2 mol) i 20 ml THF. Man afkølede reaktionskolben til 0 -78 C og tilsatte opløsningen af BrCH20Me dråbevis un-30 der omrøring, fortsatte omrøringen ved denne temperatur i 1 time, og lod kolben selv opvarme til stuetemperatur. Man hydrolyserede den dannede suspension, fraskilte det organiske lag og tørrede det over magnesiumsulfat natten over. Man destillerede det tørrede orga- 35 niske lag, og idet man lod temperaturen stige langsomt, 0 fradestilleredes ether sammen med THF ved 38-70 C. En- 10 DK 171487 Bl o delig destillerede produktet over ved 74-82 C under dynamisk vakuum (ca. 0,1 mm Hg) som en farveløs væske. Udbytte = 2,96 g (25,5%).

5 Eksempel 2

Me2P-(CH2)2-P(Me)(CH2OMe) (Se reaktionsskema B ovenfor).

10

Fremgangsmåde 1: I en 250 ml trehalset rundbundet kolbe forsynede man tøriskondensator (med et T-rør øverst som tilførsel og udledning for N2), en tilførselstragt med trykudlig-15 ning og magnetisk omrører, kondenserede man ca. 150 ml vandfri flydende ammoniak.

Man holdt den flydende ammoniak ved -78°C og overførte 2,06 g (1,51 x 10“2 mol) af phosphinen Me2P-(CH2)2-PHMe til reaktionskolben. Man tilsatte den 20 nødvendige mængde MeLi (1,51 x 10~2 mol) dråbevis fra tilførselstragten, hvorved man opnåede en dyb orange farve. Man rensede tilførselstragten med 10 ml ether, og anbragte heri en opløsning af 1,22 g ClCH2OMe (1,51 x 10-2 mol) i 20 ml ether. Denne opløsning blev sat 25 dråbevis til reaktionsblandingen, indtil den mørk orange farve forsvandt. Man lod reaktionsblandingen varme sig til stuetemperatur og tilsatte, efter bortfordampning af ammoniakken, ca. 50 ml ether, hvorefter man hydrolyserede den dannede opslæmning. Man fjernede ether-30 laget, tørrede det over magnesiumsulfat natten over, og destillerede det tørrede etherlag. Efter fjernelse af ether destillerede produktet ved ca. 80°C under dynamisk vakuum (0,1 mm Hg) som en farveløs væske.

Udbytte = 0,61 g (22,5%).

DK 171487 B1 11

Fremgangsmåde 2:

Bemærk: Da udgangsphosphinen Me2P-(CH2)2-PHMe var forurenet med en lille mængde Me2P-(CH2)2-PMe2, rensede man den ved udfældning af saltet Me2P-(CH2)2-PMeLi ved 5 reaktion med MeLi i ether, hvorved Me2P-(CH2)2-PMe2 kunne holdes i opløsning og let fjernes.

I en 500 ml trehalset kolbe forsynet med en tøriskondensator (med et T-rør øverst som system for tilførsel og udgang for N2), en tilførselstragt med tryk-10 udligning og en magnetisk omrører, anbragte man 4,9 g (3,6 x 10-2 mol) af phosphinen Me2P-(CH2)2-PHMe i 30 ml ether. Man satte dråbevis MeLi (3,6 x 10~2 mol i ether) fra tilførselstragten til phosphinopløsningen. Da der ikke foregik en øjeblikkelig udfældelse, bortfordampede 15 man hovedparten af etheren til opnåelse af udfældelse.

Man frafiltrerede resten af opløsningen og vaskede bundfaldet to gange med 10 ml portioner ether. Nu af- 0 kølede man reaktionskolben til -78 C og kondenserede ca. 200 ml vandfri flydende ammoniak i reaktionskolben.

20 Det udfældede farveløse faste stof danner en orange opslæmning ved kontakt med flydende ammoniak. Man rensede tilførselstragten med 10 ml portioner af ether, og anbragte heri 2,9 g af en opløsning af ClCH2OMe (3,60 x 10-2 mol) i 20 ml ether. Denne opløsning blev sat drå-25 bevis til den omrørte orange opslæmning, indtil farven netop forsvandt. Man lod reaktionsblandingen opvarme:; til stuetemperatur og satte efter fuldstændig bortfordampning af ammoniak ca. 50 ml ether hertil, hvorefter man hydrolyserede den dannede opslæmning. Man fraskilte 30 etherlaget, tørrede det over magnesiumsulfat natten over og destillerede det tørrede etherlag. Efter fjer- 0 nelse af ether destillerede produktet ved ca. 80 C /dynamisk vakuum (0,1 mm Hg) som en farveløs væske.

Da produktet indeholdt spor af vand, tørrede man 35 det over KOH i 4 timer og destillerede igen.

Mængde = 1,7 g (26%).

DK 171487 B1 12

Referencer 1. M. Baake, O. Stelzer og V. Wray, Chem. Ber. , 113, 1356 (1980); eller ved tilsætning af Mel (2 mol 5 ækvivalenter) til H2P(CH2)2PH2 i methanol eller ethanol fulgt af isolering af diphosphoniumsaltet [Me2P(H2)-(CH2)2_p(H2^Me32+'21- °9 frigivelse af den frie disekundære phosphin ved neutralisering.

2. D.W. Meek et al., Inorg. Synth., 14, 15 (1973).

10 3. Fremstilles ved deprotonisering af Me2P(CH2)2PH2 med enten MeLi eller BundnLi i ether eller carbonhy-dridopløsningsmidler fulgt af dannelse af den nødvendige tertiære-sekundære phosphin ved tilsætning af Mel.

4. R.B. King og J.C. Cl oyd, J. Amer. chem. Soc., 15 97, 46 (1975). R. C. Taylor og D.B. Walters, Inorg.

Synth., 1973, 14, 10.

1H NMR data (360 MHz) 20 1H NMR spektre blev optaget på en Bruker WH360 ved 360 MHz og med reference til protiourenheden i CgDg, der blev benyttet som opløsningsmiddel (7,27 ppm).

DK 171487 B1 13

Henførinq til phosphiner P-Me P-CH20 ?-CH2-CH2-P O-Me 5 MeOCH2P(Me)-(CH2)2-P(Me) (CH2OMe) 1,05H 3,551 1,551. 1,821 3,22(s)

6H 4H 4H 6H

10

Me2P-(CH2)2-P(Me) (CHjOMe) ,92(d) 3,522 1,35 - 1,51 3,24(s) 6H 2H 14H 3H- 15 1,01(d)

3H

1. Kompliceret multiplet 2. Kvintet 14 DK 171487 Bl

Massespektrometriske data MeOCH2P(Me)-(CH2)2-P(Me) (CHgOMe) 5 MW = 210 M.* 210 M-15 [MeOCH2P(Me)-(CH2)2*P(CH2OMe)3* 195 10 M-45 [MeOCH2P(Me)-(CH2)2-P(Me)3+ 165 M-105 [MeOCH2P(Me)-CH23+ 105 15 M-165 [MeOCH23+ 45 basistop IR Data 20

MeOCH2P(Me)-(CH2)2-P(Me) (CH20Me) ( Ren) 25 2900(a) 2810(a) 1465(w) I450(w) 1^25(o) 1310(w) 1280(w) 1180(a) 1090(s) ?5:-(m) 30 700(m) DK 171487 B1 15 B. Syntese og egenskaber af kationisk technetium-99m komplekser med ligander fra eksemplerne 1 og 2_

Eksempel 3 5 [TcX2L2]+ technetium (III)diphosphin,dihalogenid-kompleks L - Μ· M· in ^

10 P P

/ \

MeOCH2 CH20M«

Materialer 15 8 mg EGTA

120 mg NaCl

3 mg FeCl3/6 yl L/l ml EtOH

1,1 ml "mTc04“ Na generatoreluat (med 1,49 GBq/ml) 20

Disse komponenter blev anbragt i en forseglet glasbeholder under N2 og opvarmet til 120°C i 70 minutter, hvorefter man tilsatte 3 ml 50% EtOH-saltvand og 0,15 ml 1M KHCO3 opløsning, slutværdi for pH = 6. Man 25 analyserede den dannede opløsning på forskellige måder som nævnt nedenfor.

Chromatoqrafiske data 30 Den ovenfor nævnte opløsning indeholder ikke frit "mTc04“ og ingen kolloider, et tegn på, at tech-netiumkomplekset findes i opløsningen i ca. 95% udbytte .

16 DK 171487 Bl

Saltvand rf = 0,88

Methylethylketon rf = +0,76

Acetonitril/vand 50:50 rf = 0,80 (bred) 5 Gelelektroforesedata

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod katoden rf = -0,5 3 (- betegner en bevægelse mod katoden) .

10 HPLC data

Forbindelsen eluerer som et enkelt bånd med en opholdstid på ca. 7,0 minutter.

15

Eksempel 4

Syntese af [Tc(NO)X(L)2]+X~ nitrosyl 20 Kompleks X = CL, L =

Me Me \ /-v /

P P

/ \ 25 MeOCH2 CHjOMe

Materialer NH2OH,HCl 2,5 mg

SnF2 0,8 ml i 6,6 x 10~5 M vandig opløsning 30 L 5 yl 99mTc04Na generatoreluat med 316 mCi/ml

Saltvand 0,4 ml 17 DK 171487 Bl

Fremgangsmåde

Man blandede komponenterne i en forseglet N2 0 gennemskyllet beholder og opvarmede den til 120 C i 1 5 time. Man underkastede råpræparatet en rensning ved HPLC, samlede den vigtigste komponent (opholdstid 6,3 minutter), fjernede eventuelt overskud af THF og analyserede den opnåede opløsning på sædvanlig måde. En prøve af dette materiale blev benyttet til forsøg med 10 biofordeling i dyr, slut pH = 7,4.

Chromatografi

Det dannede præparat indeholdt intet kolloid el-15 ler frit Tc04~, et tegn på at det ønskede kompleks fandtes i ca. 85% udbytte.

Saltvand rf = 0,02

Methylethylketon rf = 0,69 20 Acetonitril:vand 50:50 rf = 1,0

Gelelektroforese

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod 25 katoden rf = -0,75 (- betegner bevægelse mod katoden).

HPLC data

Komplekset elueres som enkelt bånd med en re-30 tentionstid på ca. 6,3 minutter.

Data for biofordeling i dyr Se tabel I.

DK 171487 B1 18

Tabel I

Ctci(no)x(l)2]+ci'

Data for blofordelinq 1 rotter 5 L · Me y Me \/-\/ \p p / \

MeOCH2 CB20Me 10

Tid p.i.

in vivo 2 min 60oin T· in.jiceret dosis/orqan ^ n ad m ad

Hjerte 1,71 0,40 1,42 0,18

Blod 6,63 3,09 0,79 0,08

Muskler 22,0 7, 7 2 7,1 1,8

Lunge 1,8 5 0,18 0,83 0,12

Lever 12,6 3,2 1,53 0,06

Lever+GI 33,5 7,2 40,1 0,2 2Q Lunge+U 10,9 2,0 12,86 1,2

Forhold tællinaer/aram

Hjerte/Blod 4,19 1,81 25, 7 6,4

Hjerte/Muskler 6,61 1 r 15 5,4 6 0,42

Hjerte/Lever 1,81 0,72 10,8 1,4

Hjerte/Lunge 1,5 0,1 2,6 0,2

Eksempel 5 30 Syntese af [Tc(L)3]+X- trisphosphinkompleks x-ci Mev /Me \/—v P p

MeOCH2 bjOH« DK 171487 B1 19

Materialer

Ethanol 2ml

NaOH 0,05 ml, 10M vandig opløsning

Saltvand 0,6 ml 5 L 20 μΐ 99mTco4Na Generatoreluat 0,4 ml med 3,73 GBq/ml

Fremgangsmåde 10 Man blandede komponenterne i en forseglet behol- 0 der, gennemskyllet med N2, og opvarmede den til 120 C i 30 minutter. Derefter fortyndede man opløsningen med 3 ml 66% saltvand/ethanol og tilpassede pH til 6 med 0,1M HC1. Man analyserede den dannede opløsning chromatogra-15 fisk og ved biofordeling i dyr.

Chromatoqrafiske data

Det dannede præparat indeholdt intet frit Tc04“ 20 eller reduceret technetiumkolloid, et tegn på at den ønskede forbindelse findes i opløsning med ca. 90% udbytte .

Saltvand rf = 0,00 25 Methylethylketon rf = 0,75 (bred)

Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,98 HPLC data 30 Komplekset elueres som et skarpt bånd ved ca.

8,1 minutter (en mindre komponent, ca. 10%, eluerer ved ca. 6 minutter).

Data for biofordeling i dyr 35 Se tabellerne II og III.

20

Tabel II

[Tci(L)3]+X“ biofordeling i rotter DK 171487 Bl L Me Me 5 \/-\ / p r I 1

MeOCH2 CH20Me 10 Tid p.i. · in vivo 2 min 60min Τ» injiceret dosis/organ id ed a ed 15 Hjerte 1,28 0,08 1,06 0,12

Blod 5,60 0,45 0,5 8 0,20

Muskler 21,4 2,4 19,6 3,9

Lunge 2,79 0,10 1,1 7 0,3 7

Lever 25,3 1,7 9,32 0,60

Lever+GI 42,6 3,1 50,2 4,5

Lunge+U 9,78 1,15 14,1 2,0 20 ______

Fnrhnlri Ta-ll i ngpj-/gram

Hjerte/Blod 3,12 0,37 30,5 5,4

Hjerte/Muskler 6,09 0,9 7 6,43 0,82

Hjerte/Lever 0,60 0,06 1,50 0,30 25 H.jerte/Lunge 0,7 0,0 1,7 0,3 DK 171487 Bl 21

Tabel III

[Tc(L)3]+x~ biofordeling i marsvin _ Me

5 L » ' \ J

> p Ηβοοζ CH2OMe

Tid p.i. 2 min 60 min *,n vivo ¾ injiceret dosis /organ » gsn. st. afv. gsn. st. afv.

Hjerte 0,98 0,23 0,83 0,13

Bind 14,4 2,6 1,83 0,36 ^5 Muskler 16,3 3,7 26,5 7,6

Lunge 3,54 0,68 0,88 0,17

Lever „ 24,0 4,0 13,3 1,6

Lever+ GI 40,4 5,5 47,3 5,4 20

Lunge + Urin 1 1,6 2,3 16,3 0,4

Forhold tællinger/gram

Hjerte/B lod 1,63 0,21 j 10,5 1,2 0 25 Hjerte/Muskler 8,18 1,78 ! 4,29 1,60

j I

Hjerte/Lever 0,82 0,50 j 0,72 0,08 : Hjerte/Lunge I 0,2 ! 0,00 0,9 0,1 DK 171487 B1 22

Eksempel 6

Syntese af [Tc(NO)X(L)2]+X" nitrosylkompleks hvor X = Cl, L = 5 Me Me \r-i/

p P

/ \

Me CH2OMe 10 Materialer NH20H,HC1 25 mg

SnF2 1,0 ml, 8 yg/ml L 10 μ1 99mTco4Na 1,2 ml med 243 mCi/ml (generatoreluat) 15

Fremgangsmåde

Man blandede komponenterne i en forseglet beholder, der var gennemskyllet med N2, og opvarmede til 20 120°C i 1 time. Man rensede råpræparatet ved hjælp af HPLC, indsamlede den vigtigste komponent (opholdstid 6,5 minutter), fjernede eventuelt tilbageværende THF og analyserede den dannede opløsning på sædvanlig måde.

Man udtog en prøve af dette materiale til undersøgelse 25 for biofordeling i dyr, slut pH = 7,4.

Chromatografi

Det dannede præparat indeholder intet reduceret 30 technetiumkolloid eller frit Tc04~, et tegn på at det ønskede kompleks findes i ca. 95% udbytte.

Saltvand rf = 0,04

Methylethylketon rf = 0,86 35 Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,90 DK 171487 B1 23

Gelelektroforesedata

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd med katoden rf = -0,78 (- betegner en bevægelse mod kato-5 den).

HPLC data

Komplekset eluerer som et enkelt bånd med en 10 opholdstid på ca. 6,5 minutter.

Data for biofordelinq i dyr Se tabel IV.

DK 171487 B1 24

Tabel IV

Data for biofordeling i dyr [Tc(N0)C1(L)2]+ (i rotter)

Me _ Me

L - · P P

/ \

Me CH2OMe 10 Tid P*i* 2 min160 min in vivo o/ injiceret dosis/organ · ~ ........ ‘ ",** 1 11 " "I *V'·· 1 "-*· ·" y gsn. st. afv. gsn. st. afv.

Hjerte 0,96 0,05 0,94 0,11 15 Blod 1,77 0,18 0,26 0,02

Muskler 2 1,83 0,88 23,70 2,30

Lunge 0,92 0,15 0,63 0,1 7

Lever 20,45 1,28 1,62 0,39 20

Lever + GI 43,70 2,96 51,1 1 5,8

Lunge + Urin 1 5,40 1,31 14,48 0,49

Forhold tellinger/gram 25 Hjerte/Blod ^t05 8,10 49,63 3,7 4

Hjerte/Muskler 4,9 9 4,58 4,17 0,3 4

Hjerte/Lever 0,57 0,62 7,26 0,7 5

Hjerte/Lunge 30 -'---

Syntese af [Tc(L)3]+X~ tris-phosphinkompleks DK 171487 B1 25

Eksempel 7 5 \n/ L y* , X « Cl

Me CH20Me 10 Materialer

Ethanol 1 ml

NaOH 0,05 ml, 10M vandig opløsning

Saltvand 2 ml L 10 yl 15 ^mTc04Na Generatoreluat 0,5 ml med 2,66 GBq/ml

Fremgangsmåde

Man blandede komponenterne i en forseglet behol-20 der, der var gennemskyllet med N2, og opvarmede til

O

120 C i 30 minutter, hvorefter man tilpassede pH af opløsningen til 7-8 med 0,1M HCl. Man underkastede den dannede opløsning chromatografisk analyse og undersøgelse over biofordeling i dyr.

25

Chromatografi

Det opnåede præparat indeholder intet frit Tc04~ eller reduceret technetiumkolloid, et tegn på at det 30 ønskede kompleks findes i ca. 95% udbytte.

Saltvand rf = 0,00

Methylethylketon rf = 0,67

Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,75 DK 171487 B1 26 HPLC data

Komplekset eluerer som en skarp top ved ca. 8,4 minutter (der findes 5% mindre betydelige komponenter, 5 der eluerer mellem 4,5-6 minutter).

Data for biofordelinq i dyr Se tabellerne V og Vi.

DK 171487 Bl 27

Tabel v

Data for biofordeling i rotter [Tci(L)3]+X- 5 Me ^^ L - P X Cl VA CHjOMe ^ Tid p.i. 2 min i 60 min in vivo % injiceret dosis/organ gsn. st. afv. gsn. st.afv.

Hjerte 1,37 0,07 0,95 0,12 15 Blod 6,19 0,45 0,50 0,07

Muskler 25,7 1,9 18,4 0,26

Lunge 3,08 0,24- 1,22 0,26

Lever 20,5 1,5 10,3 1,0 20

Lever + GT 34,7 2,7 47,7 0,8

Lunge +· Grin· 11,0 1,2 16,0 1,3

Forhold tallinger/gram 25 Hjerte/Blod 2,99 0,58 29,5 4,5

Hjerte/Muskler 5,32 1,02 5,90 0,99

Hjerte/Lever 0,87 0,14 1,41 0,21

Hjerte/Lunge 0,60 0,20 1,2 0,2 DK 171487 B1 28

Tabel VI

Data for biofordeling i marsvin [Tc(L)3]+X-

Me Me 5 \ I I / L - X « Cl

Me CHjOMe 10 Tid p.i. 2 min j 60 min ia vivo v injiceret dosis/organ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 0,96 0,34 0,43 0,11 15 Blod . 15,24 2,79 1,24 0,23

Muskler 1 2,98 2,0 12,03 4,00

Lunge 3,58 0,52 0,74 0, 17

Lever 24,85 2,28 26,13 5,02 20

Lever + GI 40,7 3, 18 61,7 6,03

Lunge + Urin 13,6 4,56 17,1 2,77

Forhold tcllinger/gram 25 Hjerte/Blod 0,41 7,82 1,0 7

Hjerte/Muskler 9,19 0,60 4,60 0,58

Hjerte/Lever 0,51 0,08 0,30 0,12

Hjerte/Lunge 0,28 0,04 0,44 0,08 DK 171487 B1 29

Data til sammenligning

Den bidentate phosphinligand di(dimethylphos-phino)ethan (dmpe) er velkendt, og man har foreslået 5 forskellige Tc-99m komplekser til anvendelse som hjer-teafbildende midler. I de følgende tabeller vil og vm sammenlignes data for biofordeling for to sådanne komplekser ifølge kendt teknik med data givet ovenfor for komplekserne fra eksemplerne 4, 5, 6 og 7 (med ligan-10 derne fra eksemplerne 1 og 2). Fra tabellerne kan man slutte følgende.

Fra tabel VII, komplekset dannet med liganden fra eksempel 1 viser: i) et tydelig højere optag i hjertet og en læn- 15 gere retention ved 2 minutter og 60 minutter, ii) reduceret opholdstid i leveren ved 60 minutter, og iii) et tydelig forøget hjerte/leverforhold ved 60 minutter.

20 Fra tabel VIII, komplekset dannet af liganden fra eksempél 1 viser: i) et større optag i hjertet og større retention ved 2 minutter og 60 minutter, og ii) et meget lavere ophold i leveren ved 60 mi- 25 nutter, og iii) bedre hjerte/blod, hjerte/muskler og hj erte/leverforhold ved 60 minutter.

Komplekser dannet med liganden fra eksempel 2 viser det samme generelle forløb.

DK 171487 B1 30

Tabel VII

[Tc(NO)Cl2L2]~ i rotter

Organ 5 Ligand eller forhold 2min p.i. 60 min p.i.

X injiceret dosis dmpe Hjerte 0,46 0f32

Lever 24,92 3,05 10__

Forhold tællinger/gram Hjerte/Blod 1*71 24,18

Hjerte/Muskler 1,84 2,08

Hjerte/Lever 0,24 1,52 X injiceret dosis

Ex. 1 Hjerte * 1/71 1*42

Lever 12,6 1,53 20--

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 4,19 25,7

Hjerte/Muskler 6,61 5,46

Hjerte/Lever 1,81 10,8 25__ X injiceret dosis !

Ex. 2 Hjerte 0,96 0,94

Lever 20,45 1,62 i 30 Forhold tællinger/gram i

Hjerte/Blod 9,05 49,63

Hjerte/Muskler 4,99 4,17 ^ Hjerte/Lever 0,57 7,26 DK 171487 B1 31

Tabel VIII [TcLg]+ i marsvin

Organ 5 Ligand eller forhold 2min p.l. 60 min p.i.

% injiceret dosis dope Hjerte 0,53 0,38

Lever 38,0 36,8 10

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 0,42 3»27

Hjerte/Muskler 6,11 4,12 15 Hjerte/Lever 0,30 0,13 % injiceret dosis

Ex. 1' Hjerte 0,98 0,83

Lever 24,0 13,3 20__

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 1,63 10,5

Hjerte/Muskler 8,18 4,29

Hjerte/Lever 0,82 0,72 25 % injiceret dosis

Ex. 2 Hjerte 0,96 0,43

Lever 24,85 26,13 30-------

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 1,59 7,82

Hjerte/Muskler 9,19 4,60

Hjerte/Lever 0,51 0,30 35---- , . _ DK 171487 B1 32 C. Syntese af diphospinligander substitueret i grund-skelettet^_

Eksempel 8 5

Fremstilling af bis(dimethylphosphinomethyl)ether.

i) Bis(brommethyl) ether 10 Denne forbindelse blev fremstillet ved frem gangsmåden ifølge Stephen et al., J. Chem. Soc., 1920, 117, 515.

ii) Bis(dimethylphosphinomethyl)ether 15

Til en opløsning af 5 g dimethylphosphin i 110

a O

cnr3 diethylether satte man ved -70 C portioner af en opløsning af n-butyllithium (2,5M i hexan), indtil dannelsen af phosphidanionen var fuldstændig (kontrolleret 20 ved ^lp nmr spektroskopi) . Man holdt blandingen under 0 omrøring i 10 minutter ved -70 C, hvorefter man tilsatte 5 g bis(brommethyl)ether. Blandingen varmedes til stuetemperatur, og man holdt den under omrøring ved denne temperatur i adskillige timer, hvorefter man 25 ekstraherede blandingen med portioner af 2M fortyndet saltsyre og vaskedes de kombinerede vandige ekstrakter med diethylether. Man gjorde det vandige lag let basisk med 30% vandig natriumhydroxid, hvorefter man ekstraherede det med chloroform. Fjernelse af opløsningsmid- 0 30 let fra chloroformlaget under reduceret tryk (40 C, 150 mm Hg) gav 2,8 g af diphosphinen på i det væsentlige ren form.

$31P (CDC13) -51,1 35 £13C <CDC13) 10,0(d, J=12), 74,2(dd, J=11, 5) 33

Eksempel 9 DK 171487 B1

Fremstilling af 1,3-bis(dimethylphoshino)-2,2-bis(meth-oxymethyl)propan.

5 i) 1,3-Dibrom-2/2-bis(methoxymethyl)propan.

Til 100 g 2,2-bis(brommethyl)propan-l,3-diol satte man 80 g natriumbicarbonat og 170 g dimethylsul- 10 fat og holdt blandingen under omrøring og opvarmning 0 til 100 C. Efter ca. 30 minutter ved denne temperatur blev reaktionen pludselig meget voldsom (pas på!). Efter yderligere 2 timers opvarmning under omrøring var blandingen blevet meget viskos. Man afkølede blandin-15 gen, gjorde den let basisk ved tilsætning af natriumbicarbonat, hvorefter man ekstraherede den med 4 x 200 cm3 chloroform. Man kombinerede chloroformekstrakterne og fjernede opløsningsmidlet under reduceret tryk til opnåelse af et råprodukt. En gentagen destillation un-20 der reduceret tryk gav 25 g rent produkt som en farve-

O

løs væske (kp. 65-70 C ved 0,1 mmHg).

$13C (CDC13) 3M<x2), *»3,7, 58,9<x2), 71,0(x2) 25 ii) 1,3-Bis(dimethylphosphinyl)-2,2-bis(methoxymethyl)-propan._

Til en omrørt opløsning af 24 cm3 dimethylphos- O 0

phin i 150 cirr vandfri diethylether satte man ved -40 C

30 44 cm3 af en opløsning af n-butyllithium (2,5M i hexan). Efter ca. 30 minutters forløb var temperaturen 0 steget til 20 C, og man tilsatte 15 g 1,3-dibrom-2,2-bis(methoxymethyl)propan, hvorved der foregik en exotherm reaktion. Man lod reaktionsblandingen varme sig 35 til stuetemperatur og lod den henstå natten over under omrøring. Man ekstraherede etheropløsningen med adskil- DK 171487 B1 34 lige portioner 2M fortyndet saltsyre, gjorde de kombinerede vandige ekstrakter basisk med vandig natriumhydroxidopløsning og ekstraherede de frigjorte phos-phiner med chloroform. NMR spektroskopi viste både dan-5 nelsen af den ønskede diphosphin og en betydelig mængde 2,2-bis(methoxymethyl)propyldimethylphosphin. Tilsæt ning af et overskud af 6% vandig hydrogenperoxidopløs-ning omdannede begge phosphiner til deres tilsvarende oxider. Man fraskilte det vandige lag og inddampede det 10 under reduceret tryk. Den opnåede viskose olie blev renset ved chromatografi på Plorisil under anvendelse af methanol/ethylacetatblandinger som elueringsmiddel.

Man kunne isolere 2,8 g rent 1,3-bis(dimethylphosphi-nyl)-2,2-bis(methoxymethyl)propan som et delvis kry-15 stallinsk materiale.

£1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11P (CDClj) 41,8 $13C (CDC13) 19,Md, J=69), 19,45(d, J=69), 33/9( dd, J=68, 5), **3,1(t, J*5) 58,7(s), 58,7(s), 75,5(t, J=8) 20 iii) 1,3-Bis(dimethylphosphino)-2,2-bis(methoxymethyl)-propan._

Man satte 2,7 g af det tidligere fremstillede 2 bis(phosphinoxid) til 3,0 g lithiumaluminiumhydrid i 3 200 cm3 dioxan og holdt blandingen under tilbagesvaling 4 i 2¼ time. Efter afkøling hydrolyserede man blandingen 5 ved forsigtig tilsætning af 25 cm3 vandig dioxan (1:1) 6 og derefter 4 cm3 vandig 50% natriumhydroxidopløsning.

7

Man filtrerede den opnåede blanding og fjernede hoved 8 parten af opløsningsmidlet under reduceret tryk (60°C, 9 100 mmHg) til opnåelse af diphosphinen. 7P NMR viste 10 ingen tilstedeværelse af andre phosphorholdige forbin- 11 delser.

DK 171487 B1 35 (CDCl^/dioxan ) -63

Sl3C (CDClj) 15,7(m), 38,3(dd, J=16, 10), H2,2(t, J*10), 58,7(s), 76,7(t, J*9) : 5 Man opdannede diphosphinen til det tilsvarende krystallinske disulfidderivat til analyse.

Fundet: C, 41,9; H, 8,3% ^11H26^2P2S2 kræver C, 41,75; H, 8,3%.

10 Eksempel 10

Fremstilling af 1,3-dimethoxy-l,3-bis(dimethylphosphi-no)propan.

15 i) 1,3-Dichlor-l,3-dimethoxypropan

Til 10 g omrørt 1,1,3,3-tetramethoxypropan satte man forsigtigt 10 g thionylchlorid i løbet af 10 minutter. Reaktionsblandingen blev derefter holdt under 20 omrøring ved stuetemperatur, indtil reaktionen var løbet til ende (kontrolleret ved NMR spektroskopi). Et overskud af thionylchlorid blev fjernet under reduceret tryk (20 mmHg), og man destillerede remanensen til opnåelse af 7,7 g af dichloridet (kp. 40°C, 5 mmHg). NMR 25 spektroskopi viste tilstedeværelse af omtrent lige store mængder af de to diastereoisomere.

*13C (COClj) U8,3(x2), 48,7(x2), 57,5(x4), 96,2<x2), 96,U(x2)' 30 Man fandt, at dette materiale blev nedbrudt ved henstand, hvorfor det blev fremstillet umiddelbart før det skulle anvendes.

DK 171487 Bl 36 ii) 1,3-Dimethoxy-l,3-bis(dimethylphosphino)propan.

Man satte ved -50°C til en omrørt opløsning af 18 cm·* dimethylphosphin i 150 cm3 hexan en opløsning af 5 37 cm3 n-butyllithium (2,5M i hexan). Under udfældning af phosphidanionen blev blandingen meget viskos og svær at omrøre. Efter ca. 15 minutters forløb tilsatte man 7,7 g 1,3-dichlor-l,3-dimethoxypropan og lod blandingen varme sig til stuetemperatur. Man holdt den viskose 10 blanding under omrøring ved gennembobling med vandfri nitrogen, og lod den derefter henstå natten over. Man ekstraherede den opnåede blanding med portioner af fortyndet 2M saltsyre, gjorde de kombinerede vandige ekstrakter basisk med vandig natriumhydroxidopløsning og 15 ekstraherede de frigjorte phosphiner med chloroform. Fjernelse af chloroformen under reduceret tryk gav en blanding af de to diastereoisomere af l,3-dimethoxy- 1,3-bis(dimethylphosphino)propan med tilfredsstillende udbytte.

20 $31P (CDC13) -143,6 og. -144,6 él3C (c:ci3) 8,2(d, J=14), 9,2(d, J-14), 9;«(x2)(d, J s 14), 32,6(t, Js13), 32,8(t, Js13), 58,7-59,0(m), 25 79,0(dd, J = 10 , 8), 80,0(cc, J = l2, 9) : 37

Eksempel 11 DK 171487 B1

Fremstilling af 1,3-bis(dimethylphosphino)-2-(2'-meth- oxyethoxymethyl)-2-(methoxymethyl)propan._ 5 i) 5,5-Bis(brommethyl)-2-phenyl-l,3-dioxan.

Man satte 250 g 2,2-bis(brommethyl)propan-l,3-diol og 110 g benzaldehyd til 500 cm3 benzen med ind-10 hold af 2 cm3 koncentreret svovlsyre og opvarmede blandingen til kogning. Man fjernede vand under anvendelse af en Dean-Stark fælde, og reaktionen var fuldstændig efter ca. 6 timers forløb. Nu afkølede man blandingen og neutraliserede svovlsyren ved tilsætning af et over-15 skud af natriumbicarbonat. Man filtrerede den dannede opløsning og fjernede benzen under reduceret tryk til opnåelse af en olie, der ved henstand blev fast. Omkrystallisering fra petroleumsether gav 296 g af 1,3- 0 dioxanen som et hvidt fast stof (smp· 66 C).

20 i13C (CDC13) 39,9, 36,0, 37,2, 71,7(x2), 102,1, 125,9(x2), 128,2(x2),% 129,2, 137,2.

ii) 5-Brom-5-(2'-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-l,3- 25 dloxan._

Man satte 3,3 g natrium til 50 cm3 2-methoxy-propanol og holdt blandingen under omrøring og opvarmning, indtil metallet var opløst, hvorefter man tilsat-30 te 50 g 5,5-bis(brommethyl)-2-phenyl-l,3-dioxan i 150 cm3 2-methoxypropanol. Blandingen blev holdt under tilbagesvaling i 24 timer under vandfri nitrogen, hvorefter man fjernede overskud af 2-methoxypropanol under reduceret tryk og tilsatte 550 cm3 diethylether. Man 35 frafiltrerede natriumbromid og fjernede ether under reduceret til opnåelse af 49,3 g af produktet som en olie DK 171487 B1 38 (95%). Dette materiale var tilstrækkelig rent til anvendelse uden yderligere rensning i den næste reaktion.

*13C (CDC13) 36,1, 38,3, 58,8, 70,7(x2), 70,9, 71,1, 71,6, 101,8, 125,8(x2), 128,0(x2), 5 128,8, 137,7.

iii) 5-(21-Methoxyethoxymethyl)-5-(methoxymethy1)-2- phenyl-1,3-dioxan._ 10 Man opløste 1,4 g natrium i 20 cm3 vandfri me thanol og anbragte opløsningen i en teflonforet autoklav (Berghof, 150 ml) sammen med 20 g 5-brom-5-(2'-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-l,3-dioxan i 30 cm3 vandfri methanol, og man holdt derefter reaktionsbian- 0 15 dingen opvarmet til 150 C i 6 dage. Man fjernede opløsningsmidlet herfra under reduceret tryk og optog den organiske remanens i ether. Natriumbromid blev frafiltreret, og man fjernede ether under reduceret tryk til opnåelse af 17 g råprodukt. Dette materiale var til-20 strækkelig rent til yderligere anvendelse uden rensnings .

i13c (CDC13) 38,7, 58,8, 59,1, 69,8(x2), 70,9, 71,0, 71,2, 71,6, 101,5, 125,9(x2), 128,1 (x2), 128,7. 158,2.

25 iv) 2-(2'-Methoxyethoxymethyl)-2-(methoxymethy1)propan- 1,3-diol_

Man opvarmede 17 g 5-(2'-methoxyethoxymethyl)-5-30 (methoxymethyl)-2-phenyl-l,3-dioxan til tilbagesvaling i 4 timer med en blanding af 130 cm3 ethanol, 50 cm3 vand og 1,5 cm3 koncentreret svovlsyre, hvorefter man afkølede blandingen, neutraliserede ved tilsætning af natriumbicarbonat, filtrerede og reducerede rumfanget 35 til ca. 50 cm3 under reduceret tryk. Man ekstraherede den vandige remanens med methylenchlorid og tørrede det DK 171487 B1 39 organiske lag over vandfri natriumsulfat. Fjernelse af flygtige komponenter under reduceret tryk gav 9,5 g af en olie, som man kunne påvise i det store hele var den ønskede diol. Denne blev anvendt uden yderligere rens-5 ning.

<13C (CDC13) 44,9, 58,8, 59,4, 64,Mx2), 70,6, 71,5, 72,1, 74,3.

v) 1,3-Dichlor-2-(2'-methoxyethoxymethyl)-2-(methoxy- 10 methyl)propan._

Man opvarmede 5,5 g 2-(2-methoxyethoxymethyl)-2-(methoxymethyl)propan-1,3-diol, 24 g triphenylphosphin og vandfri carbontetrachlorid under tilbagesvaling un-15 der vandfri nitrogen i ca. 2½ time til fuldstændig reaktion, hvorefter man afkølede blandingen, filtrerede og vaskede den faste remanens med carbontetrachlorid.

Man kombinerede carbontetrachloridopløsningerne og fjernede opløsningsmidlet under reduceret tryk. Man q 0 20 satte petroleumsether (250 cm , kp. 40-60 C) til remanensen og filtrerede den dannede suspension. Fjernelse af petroleumsether under reduceret tryk gav 6 g råprodukt som en olie. Man isolerede dichloridet ved chroma-tografi på kiselgel 60 (Merck) med ethylacetat/petro-25 leumsetherblandinger som elueringsmiddel. Endelig rensede man ved destillation under reduceret tryk. Man kunne isolere 1,4 g rent dichlorid som en olie (kp.

97 C, 0,06 mmHg).

$13C <CDC13) 4M,7(x2), 45,7, 58,8, 59,2, 30 68,9, 70,4, 70,8, 71,6.

DK 171487 B1 40 vi) 1,3-Bis(dimethylphosphino)-2-(2'-methoxyethoxyme-thy1)-2-(methoxymethy1)propan._

Til 5 cm3 af en omrørt opløsning af dimethyl-5 phosphin i 80 cm3 vandfri flydende ammoniak satte man 10 cm3 af en opløsning af n-butyllithium (2,5M i hexan). Denne blanding blev holdt under omrøring ved -60°C i 10 minutter, hvorefter man tilsatte 1,4 g 1,3-dichlor-2-(2'-methoxyethoxymethyl)-2-(methoxymethyl)-10 propan i en smule vandfri diethylether. Den opnåede blanding blev holdt under omrøring i 15 minutter ved -60°C, hvorefter man lod den langsomt varme sig til stuetemperatur. Efter bortfordampning af ammoniak tilsatte man 150 cm3 diethylether og ekstraherede blan-15 dingen med portioner af fortyndet 2M saltsyre. De kombinerede vandige ekstrakter blev gjort basisk med vandig natriumhydroxid, og man ekstraherede den frigjorte phosphin i chloroform. Man fjernede opløsningsmidlet fra de kombinerede chloroformekstrakter under reduceret 20 tryk til opnåelse af 0,4 g af den ønskede phosphin.

\ i31P <CDC13) -63,1 &13C (CDC13) 15,5(t, J=5), 15,9(t, J*5), 38,Kdd, J * 16 , 11), 42,2(t, Js10), 58,6(3), 25 58,8(3), 70,3(s), 71,6(3), 74,0(t, J*9), 76,5(t, J=9).

41

Eksempel 12 DK 171487 B1

Fremstilling af 4,4-bis(dimethylphosphinomethyl)tetra-hydropyran.

5 i. 4,4-Bis(ethoxycarbonyl)tetrahydropyran.

Man opløste 10 g natrium i 300 cm3 vandfri ethanol, hvorefter man langsomt tilsatte 30 g diethyl-10 malonat. Efter omrøring af blandingen i 15 minutter tilsatte man 35 g bis (2-chlorethyl) ether dråbevis. Blandingen blev holdt under tilbagesvaling i 72 timer, hvorefter man afkølede den til stuetemperatur. Efter filtrering fjernede man opløsningsmidlet fra reaktions-15 blandingen under reduceret tryk til opnåelse af et råprodukt. En første rensning blev foretaget ved chro-matografi på aluminiumoxid (aktivitet 4) under anvendelse af ethylacetat/petroleumsetherblandinger som elueringsmiddel. Man isolerede 11,3 g rent produkt ved 20 destillation under reduceret tryk som en olie (kp. 106-108°C, 0,03 mmHg).

£13C (CDC13) 1 3,8(x2} , 30,8(x2), 52,1, 61;3(x2), 64,5(x2), 170,6(x2).

25 ii) 4,4-Bis(hydroxymethyl)tetrahydropyran.

Man satte langsomt 11 g 4,4-bis(ethoxycarbonyl)-tetrahydropyran i 50 cm3 vandfri diethylether til en omrørt suspension af 2 g lithiumaluminiumhydrid i 15 30 cm3 vandfri diethylether, men så hurtigt, at der stadig foregik en svag kogning. Efter tilsætningen opvarmede man blandingen under tilbagesvaling i yderligere 1 time, hvorefter man lod den afkøle. Man tilsatte langsomt først 4 cm3 ethylacetat, så 1,8 cm3 vand, derefter 1,8 35 cm3 vandig natriumhydroxidopløsning (15%) og endelig 5 cm3 vand. Man filtrerede blandingen og vaskede det fa- DK 171487 Bl 42 ste stof med diethylether. De kombinerede etherekstrak-ter blev tørret over vandfri natriumsulfat, og man fjernede etheren til opnåelse af 5,5 g af diolen.

$13C (CDC13) 29,1(x2), 36,0, 63,3(x2), 67,Mx2) ! 5 ' iii) 4,4-Bis(chlormethyl)tetrahydropyran.

Man holdt 5,5 g 4,4-bis(hydroxymethyl)tetrahy-dropyran, 19,8 g triphenylphosphin, 100 cm3 vandfri 10 carbontetrachlorid og 15 cm3 chloroform under tilbagesvaling og kogning i en atmosfære af vandfri nitrogen indtil fuldstændig reaktion (ca. 8 timer påvist med NMR spektroskop!). Man fjernede flygtige komponenter under reduceret tryk og ekstraherede den faste remanens med 0 15 petroleumsether (kp. 40-60 C). Bortfordampning af pe- troleumsetheren fra ekstrakterne gav det rå dichlorid.

Man opnåede en prøve på 1,2 g rent dihalogenid ved 0 vakuumdestillation (kp. 60 C, 0,05 mmHg) fulgt af chro-matografi på kiselgel 60 (Merck) med ethylacetat/petro-20 leumsetherblandinger som elueringsmiddel.

S13C (CDC13) 31,4(x2), 37,2, 48,H(x2), 63,0(x2) iv) 4,4-Bis(dimethylphosphinomethyl)tetrahydropyran.

25 Til 5 cm3 af en omrørt opløsning af dimethyl- phosphin i 60 cm3 vandfri flydende ammoniak satte man 10,5 cm3 af en opløsning af n-butyllithium (2,4M i 0 hexan) . Efter 10 minutter ved 60 C tilsatte man l g 4,4-bis(chlormethyl)tetrahydropyran i en smule diethyl-30 ether. Efter yderligere 15 minutter ved lav temperatur lod man blandingen langsomt varme sig til stuetemperatur. Efter bortfordampning af ammoniak tilsatte man 150 cm3 diethylether og ekstraherede den opnåede blanding med fortyndet 2M saltsyre. Man gjorde de kombinerede 35 vandige ekstrakter basiske med vandig natriumhydroxid og ekstraherede den frigjorte phosphin med chloroform.

DK 171487 Bl 43

Man fjernede opløsningsmidlet fra de kombinerede chlo-roformekstrakter under reduceret tryk til opnåelse af 0,3 g af phosphinen.

S31P (CDClj) -62,5 5 $13C (CDC13) 15,7(x2)(t,‘J=M), l6,1(x2)(t, J=4), J*12), 37,S(x2)( v, J=8), U3,«(x2)(dd, J s16* 12), 63,5(x2)(s).

Eksempel 13 10 Ved fremgangsmåder der svarer til, hvad der er beskrevet i eksemplerne 8-12, fremstillede man følgende ligander.

DK 171487 Bl 44 /\ _ OEt ( ] PI 28 \ PI 39

Me2P PMe2 f ^

MeaP PMe2 i 5 OM« Λ P129 ^

Me2P PMe2 EtO O OEt

Λ PLIO

M*Ov/\.OMe Me2P PM«2 10 || PI 30

Me^P PMe* H^cOTbEt A pui Λ PL 31 ^ ΡΜβ2

Et2P PEt2

Et O OEt 15 ' é OMe X Plt2 ! PL34 Me2P PMe2

Me,P PMe2 _

MeO 0^v>~ O OMe 20 x rS Pl« CT Ό Me2P PMe2 1 J piqc MeO-v. /-OMe JXj 135 Μ,ο>°·χ-°<οΜ,

Me2P PMe2 Me2P PMe2

MeO O O-v^-0 O OMe

Me2P PMe2 PL37 fS PLL5 2 2 Me2P PMe2 γλλ/λ A/\rv, ,—v

EtO O 0 0E* MeO-^^-O OMe 30 il PL38 Γ1 PU6

Me2P PMe2 Me2P PMe2 DK 171487 B1 45

FH^o^b-M< JC

5 Me2P PM«j ^51 rtr2A« As Mej P,°5

MeC,/V^ °^X^" o/N/^OMe MeO^P~P^OMe P48 I

Me2P PMe2 PL47 j 10 EtO P P. OEt /—v /—v ^ ^ P50

MeO OMe V PM^ M 'O^Oe' n1 15 f J MeO^^P P^^OMe V' PU9 / \ p« .X Me Me

Me2P PMe2 vi 1 , Me θ' V P/ \)Me M*°wVp Pv°w0Me Pi6 \\ Nh P63 20 "uCnOu* p“ γν^Γ~κ~νΎ |_ X N PB9

MeO 0 0 N* P^ 0 0 OMe 057 _ i 25 vl-\y EtO^^P P'^^OEt

MeO^P P^OMe P30 / \ pgg vl 1 s Me0-V , __^-OMe > P; OMe P38 >“NlL^“\

/ \/ P P IVfVJV

/ \ P92 30 46

Eksempel 14 DK 171487 B1 f Tc(I)]+ technetium(I),diphosphinkompleks

Me^P PM«2 L = liganden fra eksempel 8.

10 Materialer 10 mg Na2S204 1 ml saltvand

2 ml EtOH

0,05 ml 10M NaOH

15 20 μΐ L

1 ml "mTc04_ Na generatoreluat (2,9 GBq/ml)

Fremgangsmåde 20 Man blandede komponenterne i en forseglet behol der, der var gennemskyllet med N2, og opvarmede til 120°C i 30 minutter. Efter afkøling tilpassede man pH til 6,5 med 0,1M HCl og fortyndede med 4 ml saltvand.

Den opnåede opløsning blev analyseret chromatografisk 25 og benyttet til undersøgelse over biofordeling i dyr.

Chromatoqrafiske data

Det opnåede præparat indeholdt intet frit Tc04-30 eller reduceret technetiumkolloid, et tegn på at det ønskede kompleks findes i opløsning i ca. 85% udbytte.

Saltvand rf = 0,09

Methylethylketon rf = 0,60 (bred) 35 Acetonitrilrvand 50:50 rf = 0,90 DK 171487 Bl 47 HPLC data

Komplekset eluerer som et skarpt bånd efter ca.

18,3 minutter (ca. 15% af en mindre betydelig forbin-5 delse ved 17,0 minutter).

Resultat af biofordeling Se tabellerne IX og X.

48

Tabel IX

Data for biofordeling i rotter DK 171487 B1 5 Tid p.i. 2 min 60 min in vivo_% injiceret dosis/organ_ gsn. st. afv. gsn. st. afv.

Hjerte 0,84 0,07 0,35 0,01 10 Blod 3,23 0,06 0,39 0,02

Muskler 29,1 4,0 26,3 3,7

Lunge 0,86 0,06 0,44 0,02

Lever 22,2 0,7 9,32 0,41 15 Lever + GI 37,0 1,3 8,52 4,66

Nyre + Urin 8,69 0,37 58,7 1,9

Hjerne "~

Forhold tællinger/gram 20 Hjerte/Blod 3,92 0,67 13,6 1,1

Hjerte/Muskler 3,32 1,00 1,51 0,38

Hjerte/Lever 0,53 0,08 0,50 0,04

Hjerte/Lunge 1,4 0,3 1/2 0,0 DK 171487 B1 49

Tabel X

Data for biofordeling i marsvin Tid p.i. 2 min 60 min 5 in yjvo_% injiceret dosis/organ_ gsn. st. afv. gsn. st. afv.

Hjerte 0,18 0,03 10 Blod ^»39 0,43

Muskler 13,5 2,5

Lunge 0,21 0,01

Lever 11/3 3,0

Lever + GI

15 Nyre + Urin 7,23 1,29

Hjérne 3,2

Forhold tcllinger/gram

Hjerte/Blod 3,58 1,47

Hjerte/Muskler 1,90 0,14

Hjerte/Lever 0,23 0,09

Hjerte/Lunge 0,2 50

Eksempel 15 DK 171487 B1

Syntese af [Tc(NO)X(L)2]+X“ nitrosylkompleks m«2P PMe* X = Cl * L = ligand fra eksempel 8.

10 Materialer NH2OH,HCl = 25 mg

SnF2 = 1,0 ml, 6,6 x 10-5M vandig opløsning L = 10 μΐ 99mTco4-Na 0,7 ml, generatoreluat med 3,58 GBq/ml 15 Saltvand 0,3 ml

Fremgangsmåde

Man blandede komponenterne i en forseglet behol- 20 der, der var gennemskyllet med N2, og opvarmede til 0 120 C i 1 time. Efter afkøling filtrerede man præparatet gennem et filter (acrodisc 0,2 pm) . Den opnåede opløsning blev underkastet chromatografisk analyse og undersøgelse over biofordeling i dyr.

25

Chromatografi

Det opnåede præparat indeholdt intet kolloid eller frit Tc04-, et tegn på at det ønskede kompleks fin-30 des med ca. 90% udbytte.

Saltvand rf = 0,04

Methylethylketon rf = 0,62

Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,98 DK 171487 B1 51 HPLC data

Komplekset elueres som en skarp top efter ca.

17,4 minutter.

5

Gelelektroforese

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod katoden, rf = -0,89 (- betegner en bevægelse mod kato-10 den).

Resultater af biofordelinq Se tabel XI.

52

Tabel XI

Data for biofordeling i rotter DK 171487 B1

Tid p.l. 2 min 60 min i 5 in vivo_% injiceret dosis/organ_j gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 0,21 0,03 0,09 0,01

Blod 4,93 0,77 0,IH 0,02 10 Muskler 19,5 1,4 7,0 0,2

Lunge 0,70 0,06 0,09 0,01

Lever 26,1 0,7 5,72 1,31

Lever + GI 37,5 0,7 58,2 1,3

Nyre + Urin ‘3,7 1,5 30,3 1,2 15

Hjerne ----- ------ ---- -----

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 0,65 0,07 9,38 1,28 2Q Hjerte/Muskler *1,21 0,15 1 ,37 0,19

Hjerte/Lever 0,10 0,01 0,19 0,05

Hjerte/Lunge 0,5 0,1 1;5 0,2 53

Eksempel 16 DK 171487 B1

Syntese af [Tc(L)3]+ technetium(I)trisdiphosphinkom-pleks .

5 Me®___

Me2P PMe2 L = ligand fra eksempel 10.

10

Materialer 2 ml EtOH

1 ml SnF2 2,64 x 10-4M vandig opløsning

10 μΐ L

15 2 ml Tc04“/saltvand 99rnTc04- Na generatoreluat med 0,72 GBq/ml.

Fremgangsmåde 20 Man blandede komponenterne i en forseglet behol der, der var gennemskyllet med N2, og opvarmede til 120°C i 1 time. Efter afkøling underkastede man præparatet studier over biofordeling i dyr.

25 Chromatografi

Det opnåede præparat indeholdt intet kolloid eller frit Tc04“, et tegn på at det ønskede kompleks fandtes i ca. 70% udbytte.

30

Saltvand rf = 0,02

Methylethylketon rf = 0,69 (70%) 0,03 (30%)

Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,98 DK 171487 B1 54 HPLC data

Komplekset elueres som et enkelt bånd med en opholdstid på ca. 19,8 minutter (to mindre bånd ved 14 5 minutter og 18 minutter).

Gelelektroforese

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod 10 katoden rf = -0,53 (to mindre betydelige komponenter findes med rf = +0,04 og -1,07, hvor - betegner en bevægelse mod katoden).

Resultater af biofordelinq 15 Se tabel XII og XIII.

55

Tabel XII

Data for biofordeling i rotter DK 171487 B1 5 Tid p.i. 2 min 60 min in vivo_% injiceret dosis/organ_ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 1,30 0,19 0,99 0,04 10Blod 7,15 0,39 0,64 0,03

Muskler 29,1 2,9 17,1 5,3

Lunge 3,57 0,l8 1,79 0,54

Lever 17;4 °»9 M1 °»97

Lever+GI 31,5 1,8 43,3 3,5

Nyre+Urin 9,33 1,34 25,7 1,0

Hjerne ----- ------ ---- -----

Forhold tællinger/gram 20 Hjerte/Blod 2,78 0,37 22,1 3,0 H jerte/Muskler 5,01 0,72 6,4 1,65

Hjerte/Lever 1,14 0,24 1,64 0,21

Hjerte/Lunge 0,5 0,1 0,7 0,2 56

Tabel XIII

Data for biofordeling i marsvin DK 171487 B1

Tid p.l. 2 min 60 min 5 in vivo % iniiceret dosis/organ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 0,57 0,19

Blod 2,03 0,51 10 Muskler 20,7 5,7

Lunge 1,01 0,24

Lever 10,0 0,7

Lever+GI 48,6 1,1

Nyre+Urin 23,3 4,0 15

Hjerne ----- ------ ---- -----

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 7,08 1,35 20 Hjerte/Muskler 3,98 1,26

Hjerte/Lever 0,94 0,04

Hjerte/Lunge Or** 0,1 57

Eksempel 17 DK 171487 B1 [τ^Νοαχη^Γα" X s Cl

MeO OMe 5

Me2P PMe2 L = ligand fra eksempel 10.

10 Materialer NH2OH, HCl 25 mg

SnF2 1 ml 6,6 x 10-5 vand opløsning

Saltvand 2,0 ml L 10 μΐ 15 ^^mTc04~Na+ 2,0 ml generatoreluat (6,1 GBq/ml)

Fremgangsmåde

Man blandede komponenterne i en forseglet behol-20 der, der var gennemskyllet med nitrogen, og opvarmede til 120°C i 1 time. Man filtrerede det afkølede præparat gennem et 0,2 μπι acrodisk filter (Gelman) og fortyndede med 8 ml saltvand. Den opnåede opløsning blev analyseret chromatografisk, og man undersøgte bioforde-25 lingen i dyr.

Chromatoqrafi

Det opnåede præparat indeholdt intet kolloid og 30 frit Tc04", et tegn på at det ønskede kompleks fandtes med ca. 80% udbytte.

DK 171487 B1 58

Saltvand rf = 0,06

Methylethylketon rf = 0,74 (80%) 0,01 (20%)

Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,99 5

Gelelektroforese

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod katoden rf = -0,78 (- betegner en bevægelse mod 10 katoden).

Resultater af biofordeling Se tabellerne XIV og XV.

59

Tabel XIV

Data for biofordeling i rotter DK 171487 B1

Tid p.i. 2 min 60 min 5 in vivo % injiceret dosis/organ gsn st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 11 ^3 0,11

Blod O'"1* °'07 10 Muskler 22,5 2,7

Lunge 0,72 0,12

Lever 6>°3 0,5*1

Lever+GI **7»9 1,9 _ _ Nyre+Urin 15,8 1,1 15

Hjerne

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 39,1 t,9 20hjerte/Muskler 3,51 0,89

Hjerte/Lever 2,47 °» 1 1

Hjerte/Lunge 2,7 ^'3 60

Tabel XV

Data for biofordeling i marsvin DK 171487 B1

Tid p.i. 2 min 60 min 5 in vivo % injigeret dosis/organ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 0,70 0,06

Blod 1t31 0,13

Muskler 5>7

Lunge °»55 0,14

Lever 2,76 0,28

Lever+GI 57,1 5,0 15 Nyre+Urin 17 0»^

Hjerne

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod ^3,9 2,2 20 Hjerte/Muskler - 6,81 2,31

Hjerte/Lever **|21 1f10

Hjerte/Lunge °>2 61

Eksempel 18 DK 171487 B1

Syntese af [Tc(I)(L)3]+ technetiumtridiphosphinkompleks

Me Me

5 I I

o o / /

H prS

M«2P PMe2 L = ligand fra eksempel 9.

Materialer 15 EtOH 0,5 ml

Saltvand 3 ml L 10 yl 99mTc04Na 0,3 ml generatoreluat med 4,17 GBq/ml 20 Fremgangsmåde

Man blandede komponenterne i en forseglet beholder, der var skyllet med N2, og opvarmede til 120°C i 1 time. Efter afkøling analyserede man præparatet chroma-25 tografisk og undersøgte biofordelingen i dyr.

Chromatografi

Det opnåede præparat indeholdt intet kolloid el-30 ler frit Tc04“, et tegn på at det ønskede kompleks fandtes med ca. 90% udbytte.

Saltvand rf = 0,06

Methylethylketon rf = 0,72 35 Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,99

Komplekset eluerer som et bredt bånd med en op holdstid på ca. 7,1 minutter.

62 DK 171487 B1 HPLC data 5

Gelelektroforese

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod katoden rf = -0,27 (- betegner en bevægelse mod 10 katoden).

Resultater af biofordelinq Se tabellerne XVI og xvii.

DK 171487 Bl 63

Tabel XVI

Data for biofordeling i rotter

Tid p.i. 2 min 60 ain 5 in vivo_% injiceret dos i s/organ _ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 1,87 0,12 1,41 0,04 10 Blod 2,85 0,44 0, 14 0,00

Muskler 26,3 5,4 19,4 2,6

Lunge 2,59 0,31 0,75 0,17

Lever 16,3 1,1 2,45 0,90

Eever+GI 36,4 4,9 49,92 3,1 15 Nyre+Urin 10,6 1,1 12,2 2,1

Hjerne ------ ---- -----

Forhold tællinger/gram H jerte/Blod 10,4 0,7 152 9,0 20 , Λ r H jerte/Muskler 8,4 5 1,2 8,36 1,59

Hjerte/Lever 1,68 0,22 8,42 3,86

Hjerte/Lunge 1,2 0,2 3,2 0,6 64

Tabel XVII

Data for biofordeling i marsvin DK 171487 B1

Tid p.i. 2 min 60 min 5 in vivo_% injiceret dosis/organ_ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 1,2 0,12 1,06 0,11

Blod 5,U 0,62 0,46 0,08 10 Muskler 27,4 8,7 23,7 2,8

Lunge 1,65 019 0,56 0,06

Lever 17,3 2,8 2,6 0,25

Lever+GI 36,9 3,2 53,3 2,1 15 Nyre+Urin 1^/5 1,6 15,0 1,0

Hjerne ----- ------ ---- -----

Forhold tællinger/gram H jerte/Blod 5,7 0,22 56,1 7,2 20 Hjerte/Muskler 6,5 2,4 9 6,14 1,07

Hjerte/Lever 1,12 0,07 5,63 0,36

Hjerte/Lunge 0,6 0,1 1,9 0,3 65

Eksempel 19 DK 171487 B1

Syntese af [Tc1(NC)X(L)2]+Cl technetiumnitrosyldiphos-phinkompleks 5 MeO^^£^^OMe ^*2^ PMeg L = ligand fra eksempel 9.

10

Materialer NH20H,HC1 25 mg

Saltvand 3,7 ml L 10 μΐ 15 99mTc04Na 0,3 ml generatoreluat med 8,75 GBq/ml

Fremgangsmåde

Man blandede komponenterne i en forseglet behol- 0 20 der, der var skyllet med N2, og opvarmede til 120 C i 1 time. Efter afkøling filtrerede man præparatet gennem 0,2 pm acrodisk (Gelman). Det opnåede præparat blev derefter analyseret chromatografisk og undersøgt for biofordeling i dyr.

25

Chromatoqrafi

Det opnåede præparat indeholdt intet kolloid eller frit Tc04”, et tegn på at det ønskede kompleks 30 fandtes med ca. 90% udbytte.

Saltvand rf = 0,01

Methylethylketon rf = 0,78

Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,99 DK 171487 B1 66 HPLC data

Komplekset eluerer som et enkelt bånd med en opholdstid på ca. 6,7 minutter (der findes et mindre bånd 5 ved ca. 5,8 minutter).

Gelelektroforese

Komplekset bevæger sig som enkelt bånd mod kato-10 den rf = -0,64 (- betegner en bevægelse mod katoden).

Resultater af biofordelinq Se tabellerne XVIII og XIX.

67

Tabel XVIII

Data for biofordeling i rotter DK 171487 B1 5 Tid p.i. 2 min 60 min in vivo % injiceret dosis/organ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 1,56 0,02 1,M7 0,15 10 Blod 2,05 0,33 0,1H 0,09

Muskler 35,2 4,8 28,2 0,6

Lunge 1,33 0,16 0,68 0,11

Lever 13,2 2,0 1,03 0flM

Lever+GI 35,3 M ^5,5 2,2 15 Nyre+Urin 8,9¾ 1,1*» 11,0 0,7

Hjerne .----- ------ ---- -----

Forhold tællinger/gram 2Q Hjérte/Blodr 10,9 0,8 192 97,2 H jerte/Muskler 4,57 0,12 5,6 0,68 H jer te'/Lever 1 ,56 0,35 17,2 3,0

Hjerte/Lunge 1,8 0,2 3,6 0,2 68

Tabel XIX

Data for biofordeling i marsvin DK 171487 B1

Tid p.i. 2 Din 60 min 5 in vivo_% injiceret dosis/organ_ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 1,36 '0,10 1,05 0,10 10Blod 3,77 0,81 0,U8 0,05

Muskler 38,6 5,0 30,6 12,7

Lunge 1,57 0,32 0,52 0,09

Lever 11,0 2,8 0,92 0,16

Lever+GI 35,0 2,9 ^5,9 3,1* 15 Nyre+Urin 15,5 3,8 18,1 2,8

Hjerne

Forhold tællinger/gram H jerte/Blod 8,66 1,26 *»9,6 3,2 20 Hjerte/Muskler 4,65 0,13 4,77 1,57

Hjerte/Lever 2,20 0,50 17,5 3,3

Hjerte/Lunge 0,9 0,1 2,0 0,4

Syntese af [Tc(I)(L)3]+X“ technetium(I)tridiphosphin- kompleks —

F MeO

69

Eksempel 20 DK 171487 B1 l ΓΛ OMe r^i

Me2P PMe2 10 L = ligand fra eksempel 11.

Materialer

EtOH 0,5 ral

Saltvand 3 ml 15 L 15 yl 99mTCQ4Na 0,355 ml generatoreluat med 4,26 GBq/ml

Fremgangsmåde 20 Man blandede komponenterne i en forseglet behol der, der var skyllet med N2, og opvarmede til 60°C i 1 time. Efter afkøling analyserede man præparatet chro-matografisk og benyttede det til undersøgelse af biofordeling i dyr.

25

Chromatografi

Det opnåede præparat indeholdt intet kolloid eller frit Tc04“, et tegn på at det ønskede kompleks 30 fandtes med ca. 90% udbytte.

Saltvand rf = 0,00

Methylethylketon rf = 0,71

Acetonitril:vand 50:50 rf = 0,01 DK 171487 B1 70 HPLC data

Komplekset eluerer som en enkelt top med en opholdstid på ca. 6,3 minutter.

5

Gelelektroforese

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod katoden rf = -0,60 (- betegner en bevægelse mod kato-10 den).

Resultat af biofordelinq Se tabellerne XX og XXII.

71

Tabel XX

Data for biofordeling i marsvin DK 171487 B1 5 Tid p.i. 2 min 60 min in vivo_% injiceret dosis/organ gsn. st.afv. gon. st.afv.

Hjerte 1,21 *0,35 1,03 0,11 IC Blod 2,81 0,11 0,46 0,12

Muskler 23,0 10,2 2U, 3 7,7

Lunge 1j17 0,23 0,35 0,06

Lever 16,7 3,0 1,11 0,17

Lever+GI 46,3 4,1 50,8 5,8

Nyre+Urin 15,7 2,4 17 r 9 3,7

Hjerte ----- ------ ---- -----

Forhold tællinger/gram 2Q hjerte/Blod 11,9 1,3 55,8 10,3 H jerte/Muskler 9,61 5,2 6,12 2,15

Hjerte/Lever 1,12 0,32 12,7 3,3

Hjerte/Lunge 1,5 0,4 1,1 0,1 72

Tabel XXI

Data for biofordeling i rotter DK 171487 Bl

Tid p.i. 2 min 60 min 5 In vivo_% injiceret dosis/organ_ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

Hjerte 1,87 0,33 1,77 0,26

Blod 1,82 0,04 0,09 0,01 10 i f * t

Muskler 34,3 10,8 33,9 0,5

Lunge 1,38 0,21 0,51 0,14

Lever 14;9 3,4 1,66 0,10

Lever+GI 34,6 2,6 45,0 2,0 15 Nyre+Urin 8,59 2,28 12,0 1,3

Hjerne ----- ------ ---- -----

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 14,0 4,8 345 64,2 20 Hjerte/Muskler 5,73 2,5 6,58 C,85

Hjerte/Lever 1,82 0,97 17,1 3,6

Hjerte/Lunge 1,3 0,4 4,8 0,9 73

Eksempel 21 DK 171487 Bl

Fremstilling af P46: (MeOC^OCHj iMePC^PMe (CHgOC^OMe)

Reaktionsskema: i) MeOOPCgHjjPOOMe 2n-BuLl , LUCMePCJ^PMe) benzin 10 SO^OC^OCi^Cl li) Li2CMePC2HuPMe] _ PU6

Eksperimentelt: 15

Alle reaktioner og manipulationer blev udført under vakuum eller i en oxygenfri nitrogenatmosfære.

Man tørrede og afluftede solventer ved gennemskylning med nitrogen før anvendelse. CH3OCH2CH2OH2CI og n-BuLi 20 blev købet fra Aldrich. Me(H)PC2H4P(H)Me blev fremstillet ifølge en offentliggjort fremgangsmåde^1*.

1. M Baake, O Stelzer, og V Wray. Chem. Ber. 113, 1356 (1980).

25 Fremgangsmåde: I en 250 cm3 trehalset rundbundet kolbe forsynet med en tøriskondensator, tilførselstragt med trykudjævning og en teflonovertrukket omrører anbragte man 30 en opløsning af 3,18 g Me(H)PC2H4P(H)Me (26,06 mmol) i benzin (40-60 C, 50 cm3). Til denne opløsning satte man 35 ml n-BuLi (57,0 mmol, l,6M i hexan) ved -78 C.

Efter opvarmning til stuetemperatur kunne man frafiltrere et hvidt bundfald, som man vaskede ved 2 x 25 cm3 O o 35 benzin (40-60 C). Nu kondenserede man 150 cnr vandfri ammoniak tørret over natrium i den ovenfor nævnte reak- DK 171487 B1 74 tionsbeholder til dannelse af en orange opløsning. Hertil satte man dråbevis en opløsning af 6 cm3 CH3OC2H4OCH2CI (52,1 mmol) i 20 cm3 diethylether, indtil den orange farve netop forsvandt. Man lod ammoniak-5 ken fordampe bort ved stuetemperatur og tilsatte 30 cm3 diethylether til opnåelse af en hvid opslæmning. Derefter hydrolyserede man, fraskilte det organiske lag og tørrede det over vandfrit magnesiumsulfat. Man fjernede diethylether ved destillation ved atmosfærisk tryk og 10 fjernede de øvrige flygtige materialer ved destilla- 0 tion under vakuum ved 120 C. Den farveløse tilbageværende væske var ifølge NMR ren. Udbytte = 4,7 g, 50,3% NMR 31P(H) = 39,54 ppm og -39,65 ppm, sinaletter.

1H s 0,95 t(6H), 2J P-H ♦ 5JP-H s 3,0 Hz * p-Me 15 5 1»79b(«»H) = PCJiJP

3,37 £(6H) , CWe

* 3.U6 0(8) = OC^O

* 3,65 t(UH) 2JP-H ♦ 5JP-H = 6,2 Hz r pqy) 20 Eksempel 22 . . P46 · Q)i CH<» CTc(pn6)3r é_v / 3

P P

25 «βΧ2Η4<ΧΗ2 ^ ^CH^H^CMe

Materiale 1,5 ml SnF2, vandig opløsning 32 yg/ml 2 ml Ethanol

30 0,05 ml 10M NaOH

10 yl P46 2 ml Tc"m04 (“ ^Na^ + ) generatoreluat med 1,78 GBq/ml DK 171487 Bl 75

Fremgangsmåde

Man blandede komponenterne i en forseglet beholder, der var gennemskyllet med N2, og lod den stå ved 5 stuetemperatur i 2 timer. Derefter tilpassede man pH til 7 med fortyndet 1M HC1. Den opnåede opløsning blev analyseret chromatografisk, og man undersøgte den for biofordeling i dyr.

10 Chromatografiske data

Den ovenfor nævnte opløsning indeholdt intet kolloid eller fri Tc"m04~, et tegn på at Tc komplekset i opløsning er ca. 70% rent.

15

Saltvand rf = 0,00

Methylethylketon rf = 0,00 (30%) rf = +0,62 (70%)

Acetonitril:vand 50:50 rf = +0,98 20 HPLC data

Komplekset eluerer som en skarp top ved ca. 6,7 minutter, og der findes også toppe ved 5,5 og 6 minut-25 ter.

Gelelektroforesedata

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod 30 katoden rf = -0,34 (- betegner en bevægelse mod katoden).

Resultat af biofordeling Se tabel XXII og XXIII.

DK 171487 B1 76

Eksperimenterne vedrørende chromatografi, elek-troforese, HPLC og biofordeling in vivo udføres nøjagtigt som tidligere beskrevet.

DK 171487 B1 77

Tabel XXII

Data for biofordeling i rotter (P46) [TcL3]+ L = P46 5 Tid p.i. 2 aln 60 aln in vivo X injiceret dosis/organ .

gsn. st.afv. gsn. st.afv.

1C Hjerte 1,4 4 0,26 1,18 0,03

Blod 5,06 0,35 0,61 0,05

Muskler 27,2 2,3 23,8 7,0

Lunge 2 ,07 0,34 0,1)9 0,12 3^5 Lever 1 8, 1 1,1 5,62 0,62

Lever + GI 35,1 2,8 48,2 5,6

Nyre Π,7 ’, 1 3,37 0, 1 4

Nyre + Urin 11,8 1,2 17,3 2,4

Hjerne 0,05 0,00 0,02 0,00 20_

Forhold tsellinger/gram

Hjerte/Blod 4,33 0,23 30,7 2,0

Hjerte/Muskler 6,04 1, 1 1 6,39 2,64

Hjerte/Lever 1,13 0,25 2,82 0,28

Hjerte/Lunge 1,1 0,1 4,3 0,9 DK 171487 B1 78

Tabel XXIII

Data for biofordeling i marsvin [Tc(P46)q]+ 5 2 odn 60 min

Tid in ViVO % injiceret dosis/organ gsrr st.afv. gsn. st.afv.

10 _______:______

Hjerte 0,89

Blod 1,89

Muskler 31,9 15

Lunge 0,64

Lever 7,03

Lever + GI ' 39,8 20 Nyre 9,31

Nyre + Urin 19,9

Hjerne 0,00 _i__ 25 Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blad 11,2

Hjerte/Muskler 3,60

Hjerte/Lever 1,74 30

Hjerte/Lunge 1*2 DK 171487 B1 79

Eksempel 23 [TcCl2L2]+ technetium III diphosphin-dichlorkompleks L = P46 5 C«3 CH3 J V P ' / \

MeOC2H40CH2/ CHjOCaHtCMe 10

Materialer n

5mg FeC1^.6H20 15mg EGTA

2ml Ethanol i sat til I00mg NaCl 10μ1 P46 1,7ml saltvand 15 1,3ml "“TcO^Na generatoreluat ved 5; 37 GBq/ml EGTA = ethylenglycol-0,0'-bis(2-aminoethyl)-N,N,N',N'-tetraeddikesyre.

20

Fremgangsmåde Først blandede man FeCl3,6H20 og P46 i ethanol i en P6 beholder til dannelse øjeblikkelig af en purpur-25 opløsning. Denne purpurfarvede opløsning blev derpå overført til en Pli beholder, der indeholdt NaCl, EGTA, saltvand og 99mTCQ Man opvarmede nu reaktionsblandingen til 120°C i 60 minutter (pH = 4). Den dannede opløsning blev analyseret på forskellige måder som vist 30 nedenfor: DK 171487 B1 80

Chromatoqrafidata

Den ovenfor nævnte opløsning indeholdt intet kolloid eller frit ^mTc04, et tegn på at technetium-5 komplekset findes i opløsning med ca. 80% udbytte.

Saltvand rf = 0,01

Methylethylketon rf = 0,59, 0,02

Acetonitril/vand rf = 0,99 10 HPLC data

Komplekset eluerer som skarp top efter ca. 7,3 minutter, og der findes to små toppe ved 5,2 og 6,1 mi-15 nutter.

Gelelektroforesedata

Komplekset bevæger sig som et enkelt bånd mod 20 katoden rf = -0,67 (- betegner en bevægelse mod kato den) .

Resultat af biofordeling Se tabel XXIV.

DK 171487 B1 81

Tabel XXIV

Data for biofordeling i rotter 'P46· · C»3 CM* N ,-s / 5 / \ H«OC2H40CH2 CH2OC2H4OH· ^_ ._ / * ^ 2 mLn 60 ødn 10 Tid — ‘ in vivo % injiceret dosis/organ gsn. st.afv. gsn. st.afv.

^Hjerte 1,48 0 »23 1,26 0,17

Blod 4,70 0,14 0,47 0,20

Muskler 23,0 2,3 22,6 3,8 2q Lunge 1,67 0,21 0,44 0,06

Lever 16,6 ! 1»6 5,79 0,90

Lever + GI 34,6 3,1 38,6 0,6

Nyre + Urin 12,4 0,7 26,1 1,8 25 Hjerne 0,03 0,04 0,02 0,01

Forhold tællinger/gram

Hjerte/Blod 4,49 0,48 47,2 17,3 30 Hjerte/Muskler $,87 1,31 6,64 1,15

Hjerte/Lever 1,26 0,14 3,49 0,43

Hjerte/Lunge 1,0 0,1 3,5 0,4 DK 171487 Bl 82

Eksempel 24

Ved fremgangsmåder som alment beskrevet i eksemplerne 14-20 benyttede man liganderne, der er opregnet i eksempel 13, til fremstilling af kationiske 5 technetium-99m komplekser, der blev afprøvet for biofordeling i rotter. Resultaterne heraf ses i de følgende tabeller XXV og XXVI.

Tabel XXV

Resultat af biofordeling i rotter 10 r : — -

2 HJERTE HJERTE/BLOD HJERTE/LEVER

I_2' 60·_2* 60 *_2· 60* 15 PL28 0,84 0,35 3,92 13,6 0,53 0,50 PL29 1,30 0,92 2,92 34,3 0,98 1,81 PL30 1,30 0,99 2,78 22,1 5.01 6,4 PL31 0,77 0,05 1,61 1,37 0,39 0,03 PL.34 1 , 1 1 0,82 5,75 62,1 0,8 2 3,61 20 PL35 0,88 0,55 4,07 35,3 0,46 1,65 PL37 1,87 1,41 10,4 152 1,68 8,42 PL-38 1,31 1 ,01 18,8 156 0,78 3,79 pl39 1,87 1,42 6,56 36,7 1,39 2,68 PL40 1,21 0,82 5,68 106 0,54 2,23 25 PL41 1,08 1,02 7,83 122 0,83 4,65 PL42 0,96 0,76 2,35 56,0 0,38 1,47 PL43 1,79 1,46 18,9 350 1,72 17,7 PL44 1,58 1,19 16,6 204 1,31 3,9 30 PL45 0,62 0,40 5,90 94,1 o,26 2,*74 PLU6 1.S7 1,77 14,0 345 1,82 17,1 PL1|7 1,20 1,15 5,33 113 0,64 2,49 PL1,8 \29 0,98 2, 1 14,4 0,99 2,09 DK 171487 B1 83

Tabel XXVI

Resultat af biofordeling i rotter 5 [Tc(NO)L?Cl]+

C HJERTE HJERTE/BLOD HJERTE/LEVER

Ligand_2' 60»_2' 60*_2* 60* PL28 0,21 0,09 0,65 9,38 0,10 0,19 PL29 0,68 0,55 3,11 51,6 0,55 2,75 10 PL30 -- 1,23 — 39, 1 — 2,47 PL31 1,40 1,22 4,19 75,4 0,97 4,88 PL34 0,48 0,19 0,60 6,52 0,28 0,56 PL.37 2,26 1,83 19,4 277 3,33 20,2 PL38 ' 1,12 0,65 4,55 62,9 0,64 1,05 15 pL39 1,26 1,15 5,63 84,3 1,38 8,12' PL40 1,30 1,01 10,3 83,4 0,9 3,88 pL**2 1,22 0,95 3,14 36,1 0,82 3,58 PL43 0,83 0,59 3,60 40,6 0,49 0,89 20 PL41i M3 0,96 6,23 40.5 1,2 1,92 PL45 0,46 0,22 1,14 6,84 0,18 0,36 pL47 1,52 1,32 7,87 40.6 1,32 3,30 PL48 0,66 0,51 1,00 1?99 0,4 1,07 PL49 0,32 0,18 1,13 131 0,11 0,24 DK 171487 B1 84

Beskrivelse af eksperimenter

Teknikken ved udførelse af eksperimenter, der benyttes til at karakterisere og vurdere disse nye ra-5 diofarmaceutiske komplekser, beskrives nedenfor:

Chromatoqrafi

Ved hjælp af en nål satte man prøver ca. 2,5 cm 10 fra bunden af to Gelman ITLC/SG striber (2,5 cm x 20 cm) og en Whatman nr. l stribe (2,5 cm x 20 cm), hvorefter man øjeblikkelig anbragte dem i klargjorte fremkaldertanke til opadstigende chromatografi, der indeholdt 1 cm af frisk opløsningsmiddel nemlig: a) salt-15 vand, b) methylethylketon og c) 50:50 acetonitril:vand.

Efter 15 cm's eluering fjernes striberne, man markerer fronten for opløsningsmidlet, tørrer og bestemmer fordelingen af aktivitet under anvendelse af passende udstyr.

20

Elektroforese

Man kørte en 0,1 g agarose/10 cm^ phosphatpuf-ger pH 7,4 gel med et påført potential på 300V i ca. 35 25 minutter under anvendelse af bromphenolblåt som indikator (denne indikator bevæger sig mod katoden). Man bestemte den opnåede fordeling af aktivitet under anvendelse af passende udstyr.

30 HPLC

Til eksemplerne 3-7 og 18-23 benyttede man et solventgradient HPLC system sammen med: a) 20 mM phosphatpuffer pH 7,4, og 35 b) tetrahydrofuran (THF).

Prøverne påsættes i begyndelsen ved 100% (a), og gradienten ændres til 100% (b) i løbet af ca. 17 minutter .

DK 171487 B1 85

Flowhastighed = 2 ml/min, Hamilton PRP kolonne (15 cm x 4,0 mm), stuetemperatur. Man benyttede identiske HPLC systemer for 99mTc og 99Tc bestemmelser.

99mTc blev bestemt ved stråling og 99Tc blev bestemt 5 via en væskescintillationsfremgangsmåde.

For eksemplerne 14-17 var systemet det samme, idet dog solventgradientsystemet bestod af (a) 100 nM natriumacetat pH 5,5, og (b) acetone.

10 Prøverne påføres ved 100% (a), denne koncen tration holdes i 5 minutter, hvorefter gradienten ændres til 100% (b) i løbet af 20 minutter, og man holder ved 100% (b) i yderligere 5 minutter. Flowhastighed = 2 ml/min, Hamilton PRP kolonne.

15

Biofordelinq i dyr In vivo studier 20 In vivo biofordeling: Man indsprøjtede 0,1 ml

Tc99m præparat i.v. i en lateral halevene på 6 bedøvede rotter.

2 Minutter og 60 minutter efter indsprøjtningen aflivede man 3 rotter ved at skære hovedet af dem, man 25 tappede blod fra halsen og dissekerede dem. Ved dissektionen fjernede man følgende organer: nyre, blære (+ urin), lunge, lever, milt, mave, tyndtarm, tyktarm, hjerne (vejet), hjerte (vejet), thyroid og blodprøver (vejet) og muskler (vejet), resten af kroppen og 30 halen (injektionssted). Prøver blev i rækkefølge talt i en automatisk tvillingkrystal-y-tæller.

Man beregnede procent af biofordelingen for det indsprøjtede materiale (efter korrektion for baggrund) for alle organer under anvendelse af formlen: DK 171487 B1 86 tællinger/organ_ % injiceret dosis -(total tælling for dyr - tælling for halen )

Da man kun udtog prøver af muskler og blod bere-5 gnede den procentiske andel i disse væv, idet man antog, at blod og muskler, henholdsvis skulle repræsentere 5,8 og 43% af dyrets totale vægt og under anvendelsen af formlen: 10 tællinger/gram vægt x CF x krops- % injiceret dosis = vægt x 100_ i væv (total tælling for dyr - tælling i halen) 15 hvori CF = 0,058 for blod 0,43 for muskler

Referencer 1. Deutsch, E. , Libson, K., Jurisson, S., Lindoy, 20 L.F., Technetium Cgemistry and Technetium Radiopharmaceuticals Prog. Inorg. Chem. 1982, Vol. 30, side 175.

Claims (22)

1. Kationisk kompleks af technetium-99m, kendetegnet ved, at det er med en ligand med formlen: 5 Ϊ2ΡΖΡΥ2 hvori grupperne Y, der er ens eller forskellige, betegner hver H eller C^Cg mættet carbonhydrid med eventuelt indhold af op til 3 etheroxygenatomer, 10. betegner en -CC-, -CCC- eller -COC-kæde, der eventuelt er substitueret med mindst én C^-Cg mættet carbonhydrid-gruppe eller mættet fluorcarbonhydridgruppe, der eventuelt indeholder op til 3 etheroxygenatomer. forudsat, at liganden indeholder mindst én -COC-ether-15 kæde.

2. Kationisk kompleks ifølge krav 1, kendetegnet ved, at grupperne Y, der er ens eller forskellige, hver er H eller Cj-C^ alkyl, der eventuelt er substitueret med C1-C4 alkoxy, og Z er en -CC-, -CCC- 20 eller -COC-kæde, der eventuelt er substitueret med C2-C4 alkoxy, alkoxyalkyl eller spirocyclisk ether.

3. Kationisk kompleks ifølge krav l, kendetegnet ved, at Z er en -CC- eller -CCC-kæde, hvert Y er H eller methyl, og én eller flere methoxy- 25 substituenter er bundet til én eller flere Y-grupper, eller én eller flere methoxymethyl eller -COC-spirocycliske ethergrupper er bundet til et carbonatom på z.

4. Kationisk kompleks ifølge krav l, kende-30 tegnet ved, at liganden har formlen: DK 171487 B1 Me i—^ \ p i I

5 MeOCH2 CH2OMe

5. Kationisk kompleks ifølge krav 1, kendetegnet ved, at liganden har formlen: io Me j ^Me P P I I Me CH20Me

6. Kationisk kompleks ifølge krav 1, kende tegnet ved, at liganden har formlen:

20 A

20 Me2P PMe2

7. Kationisk kompleks ifølge krav ^kendetegnet ved, at liganden har formlen: 25 MeO-^v^-O^OMe A Me2P PMe2 30

8. Kationisk kompleks ifølge et hvilket som helst af kravene 1-7, kendetegnet ved, at det har formlen: 35 DK 171487 B1 [Τθ(ΝΟ)ην2]+Α- eller [TcL3]+a“ hvori 5. er en monodentat ligand for Tc, A er en anion, n er 1 eller 2, og m er tilsvarende l eller 0, og L er en ligand som defineret i et vilkårligt af kravene 1-7.

9. Kationisk kompleks ifølge krav 8, ken detegnet ved, at det har formlen: [Tc(NO)XL2]+A- hvori L er en ligand med formlen:

15 MeO—"v >— OMe rS Me2P PMe2

10. Kationisk kompleks ifølge krav 8, ken detegnet ved, at det har formlen [Tcl3]+a~ hvori L er en ligand med formlen 25 MeO-v^-O^OMe MejP PMe2

11. Kationisk kompleks ifølge et vilkårligt af kravene 1-10 til anvendelse som hjerteafbildende middel .

12. Ligand, kendetegnet ved, at den har formlen: Y^PZ'PY'j hvori 35 DK 171487 B1 grupperne Y', der er ens eller forskellige, hver betegner mættet carbonhydrid, og Z' betegner en -CC-, -CCC- eller -COC-kæde, der eventuelt er substitueret med mindst én Cj-Cg mættet car-5 bonhydridgruppe eller mættet fluorcarbonhydridgruppe, der eventuelt indeholder op til 3 etheroxygenatomer. forudsat, at liganden indeholder mindst én -COC-ether-kæde.

13. Ligand ifølge krav 12, kendetegnet 10 ved, at Z' er en -CC-, -CCC- eller -COC-kæde, der er substitueret med en ¢^¢4 alkoxy, alkoxyalkyl eller spirocyclisk ethergruppe.

14. Ligand ifølge krav 12, kendetegnet ved, at Z' er en -CC- eller -CCC-kæde, og at én eller 15 flere methoxymethyl eller -COC-spirocycliske ethergrup-per er bundet til et carbonatom på Z'.

15. Ligand ifølge krav 12, kendetegnet ved, at den har formlen:

20 MeO— Λ Me2P PMe2 25

16. Ligand ifølge krav 12, kendetegnet ved, at den har formlen:

30 MiO-^z-cT'oMe Me2P PMe2 35