DK166565B1 - Kombinationer med synergistisk virkning paa frigoerelsen af vaeksthormon og fremgangsmaader til deres anvendelse - Google Patents
Kombinationer med synergistisk virkning paa frigoerelsen af vaeksthormon og fremgangsmaader til deres anvendelse Download PDFInfo
- Publication number
- DK166565B1 DK166565B1 DK009888A DK9888A DK166565B1 DK 166565 B1 DK166565 B1 DK 166565B1 DK 009888 A DK009888 A DK 009888A DK 9888 A DK9888 A DK 9888A DK 166565 B1 DK166565 B1 DK 166565B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- tyr
- phe
- gly
- ala
- polypeptides
- Prior art date
Links
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 title claims description 98
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 title claims description 93
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 title claims description 93
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 29
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 title claims description 16
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 258
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 243
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 231
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 112
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 46
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 claims description 35
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 33
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 31
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 30
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 30
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 30
- 150000004662 dithiols Chemical class 0.000 claims description 30
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 28
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 23
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 22
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 22
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 22
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 21
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 21
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 21
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 21
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 21
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 20
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 20
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 19
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 18
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 16
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 15
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 15
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 14
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 14
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 14
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 14
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 14
- WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CN=CN1 WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N 0.000 claims description 13
- FHZPGIUBXYVUOY-VWGYHWLBSA-N Dermorphin Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 FHZPGIUBXYVUOY-VWGYHWLBSA-N 0.000 claims description 13
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 13
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 13
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 13
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 claims description 13
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 claims description 13
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 12
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 claims description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 9
- 125000002237 D-aspartyl group Chemical group [H]OC(=O)[C@]([H])(N([H])[H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 8
- OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N D-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 claims description 8
- DCBDOYDVQJVXOH-UHFFFAOYSA-N azane;1h-indole Chemical compound N.C1=CC=C2NC=CC2=C1 DCBDOYDVQJVXOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 8
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 8
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 7
- 101710198286 Growth hormone-releasing hormone receptor Proteins 0.000 claims description 7
- 102100033365 Growth hormone-releasing hormone receptor Human genes 0.000 claims description 7
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 7
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 7
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 7
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 7
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 claims description 7
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 claims description 7
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 claims description 7
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 claims description 7
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 7
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 claims description 7
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 7
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 claims description 7
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 7
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 claims description 7
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims description 7
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 claims description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 claims description 7
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 claims description 7
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 claims description 7
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims description 7
- 229960001153 serine Drugs 0.000 claims description 7
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 7
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 7
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 claims description 7
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 claims description 7
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 claims description 6
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 claims description 6
- OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine amide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 6
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 claims description 6
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 claims description 5
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 5
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 claims description 5
- 125000002437 D-histidyl group Chemical group N[C@@H](C(=O)*)CC=1N=CNC1 0.000 claims description 4
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 claims description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 claims 8
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 6
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 claims 6
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 claims 6
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims 6
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 claims 6
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 claims 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 claims 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims 1
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 claims 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- UVCJGUGAGLDPAA-UHFFFAOYSA-N ensulizole Chemical compound N1C2=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C2N=C1C1=CC=CC=C1 UVCJGUGAGLDPAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 13
- 229920009537 polybutylene succinate adipate Polymers 0.000 description 13
- 101000868138 Ovis aries Somatotropin Proteins 0.000 description 12
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 12
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 10
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 10
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 9
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 8
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 7
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 7
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 7
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 7
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 6
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 6
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 6
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 6
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 5
- 101000868151 Rattus norvegicus Somatotropin Proteins 0.000 description 5
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 5
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 5
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 5
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 5
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 5
- -1 hydroxylmethyl Chemical group 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)-phenylmethanamine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(N)C1=CC=CC=C1 UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000003412 L-alanyl group Chemical group [H]N([H])[C@@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 3
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 3
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 3
- DTAFLBZLAZYRDX-UHFFFAOYSA-N OOOOOO Chemical compound OOOOOO DTAFLBZLAZYRDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 3
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 3
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 230000005737 synergistic response Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical class [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 102100033367 Appetite-regulating hormone Human genes 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 102100035861 Cytosolic 5'-nucleotidase 1A Human genes 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 101710119601 Growth hormone-releasing peptides Proteins 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000802744 Homo sapiens Cytosolic 5'-nucleotidase 1A Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical group Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N L-methionine (R)-S-oxide Chemical compound C[S@@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N 0.000 description 2
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000283903 Ovis aries Species 0.000 description 2
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010007568 Protamines Chemical class 0.000 description 2
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 2
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 229940039748 oxalate Drugs 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940070710 valerate Drugs 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 2
- WTKYBFQVZPCGAO-LURJTMIESA-N (2s)-2-(pyridin-3-ylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1=CC=CN=C1 WTKYBFQVZPCGAO-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- HPZJMUBDEAMBFI-WTNAPCKOSA-N (D-Ala(2)-mephe(4)-gly-ol(5))enkephalin Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](C)C(=O)NCC(=O)N(C)[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCCO)C1=CC=C(O)C=C1 HPZJMUBDEAMBFI-WTNAPCKOSA-N 0.000 description 1
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 2,4-diaminobutyric acid Chemical compound NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 4-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C1C(C(O)=O)N(C(=O)OC(C)(C)C)CC1NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 101150036934 Arhgef25 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100460706 Aspergillus sp. (strain MF297-2) notJ gene Proteins 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283725 Bos Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N D-alpha-aminobutyric acid Chemical compound CC[C@@H](N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- DZLNHFMRPBPULJ-GSVOUGTGSA-N D-thioproline Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 101001030232 Homo sapiens Myosin-9 Proteins 0.000 description 1
- 101000825742 Homo sapiens Somatoliberin Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000015580 Increased body weight Diseases 0.000 description 1
- 102100037644 Kelch-like protein 41 Human genes 0.000 description 1
- 108050003242 Kelch-like protein 41 Proteins 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N L-alpha-phenylglycine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N L-nitroarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(=N)N[N+]([O-])=O MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 1
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 102100038938 Myosin-9 Human genes 0.000 description 1
- 229910021204 NaH2 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- RSPISYXLHRIGJD-UHFFFAOYSA-N OOOO Chemical compound OOOO RSPISYXLHRIGJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001075370 Rattus norvegicus Gamma-glutamyl hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- PZYAYFPGUMSVJW-UHFFFAOYSA-N SSSSSSS Chemical compound SSSSSSS PZYAYFPGUMSVJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 1
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 1
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 1
- 235000007230 Sorghum bicolor Nutrition 0.000 description 1
- 235000015503 Sorghum bicolor subsp. drummondii Nutrition 0.000 description 1
- 235000006923 Sorghum x drummondii Nutrition 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 1
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000011717 all-trans-retinol Substances 0.000 description 1
- 235000019169 all-trans-retinol Nutrition 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940050390 benzoate Drugs 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000019784 crude fat Nutrition 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000011978 dissolution method Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hcl hcl Chemical compound Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000045304 human GHRH Human genes 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 229960004184 ketamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 125000005487 naphthalate group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- NPKKRSHVJIQBKU-UHFFFAOYSA-N ornogenin Natural products CC(OC(=O)C=Cc1ccccc1)C2(O)CCC3(O)C4(O)CC=C5CC(O)CCC5(C)C4CC(OC(=O)C=Cc6ccccc6)C23C NPKKRSHVJIQBKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000003752 saphenous vein Anatomy 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-IMJSIDKUSA-N trans-4-Hydroxy-L-proline Natural products O[C@@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/25—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Confectionery (AREA)
Description
DK 166565 B1
Opfindelsen angår hidtil ukendte fremgangsmåder til at fremme frigørelsen og frembringe forhøjede niveauer af væksthormon (GH) i dyrs blod samt kombinationer af polypep-tid-forbindelser, der på synergistisk måde virker til at 5 fremme frigørelsen og frembringe forhøjede niveauer af væksthormon (GH) i dyrs blod.
Det er blevet fastslået i den videnskabelige litteratur, at forhøjelsen af væksthormonniveauer i pattedyr efter indgivelse af GH-frigørende forbindelser kan føre til 10 forøget legemsvægt og til forøget mælkeproduktion, hvis der efter indgivelsen forekommer tilstrækkeligt forhøjede GH--niveauer, jfr. P.K. Baker, m.fl., J. Animal Science 59 (supplement 1), 220 (1984), W.J. Groom m.fl., J. Dairy Sci.
67 (supplement 1), 109 (1984) og S.N. McCutcheon m.fl., J.
15 Dairy Sci. 67, 2881 (1984). Det er endvidere kendt, at forøgelsen af væksthormonniveauerne i pattedyr kan udføres ved indgivelse af kendte midler, der frigør væksthormon, såsom endogene væksthormonfrigørende hormoner (GHRH, nr. 144-149), omfattet heri som medlemmer af gruppen, der betegnes som 20 "gruppe l-forbindelser", jfr. P. Brazeaum.fi., Proc. Natl. Acad. Sci. 79, 7909 (1982) og M.O. Thorner m. fl., Lancet 1,24 (1983). Forøgelsen af væksthormonniveauerne i pattedyr kan også udføres ved indgivelse af væksthormonfrigørende peptider (GRP), af hvilke nogle tidligere er beskrevet, og 25 som omfattes heri som medlemmer af gruppen, der betegnes som "gruppe 2-forbindelser", jfr. C.Y. Bowers m.fl., Endocrinology 114, 1537 (1984), F.A. Momanym.fi., Endocrinology 114, 1531 (1984) og C.Y. Bowers, 7th International Congress of Endocrinology Abstracts, 464 (1984). Antistoffer mod den 30 endogene inhibitor af væksthormonfrigørelse, somatostatin (SRIF) anvendes også til forøgelse af GH-niveauer. I det sidstnævnte tilfælde hæves vækstniveauhormonerne ved fjernelse af den endogene inhibitor af væksthormonfrigørelse (SRIF) , før den når hydrofysen, hvor den inhiberer frigørel-35 sen af GH, jfr. W. B. Wehrenberg m.fl., Endocrinology 115.
1218 (1984). Endelig er det påvist, at nogle forbindelser, DK 166565 B1 2 såsom morfin, jfr. C. Rivier m.fl., Endocrinology 100, 238 (1977), og andre alkaloider, jfr. C.Y. Bowers, Endocrinology 117, 1441 (1985) og DAla2, DLeu5-enkephalinamid, jfr. E. L.
Lien m.fl. FEBS Letters 88, 208 (1978), også frigør væksthor-5 mon ved indvirkning på hypothalamus. De heri beskrevne gruppe 3-forbindelser kan også virke på hypothalamus.
Det er et formål med den foreliggende opfindelse at tilvejebringe hidtil ukendte kombinationer af væksthormon-frigørende forbindelser, der direkte eller indirekte frem-10 bringer forhøjede niveauer af væksthormon i dyrs blod. Sådanne kombinationer af forbindelser har forbedrede stabiliteter, opløseligheder, fysisk-kemiske egenskaber og biologiske virkninger i forhold til kendte væksthormonfrigørende forbindelser. ! 15 Det er et andet formål med opfindelsen at tilvejebrin- i ge en fremgangsmåde til forhøjelse af GH-niveauerne i dyr til anvendelse i den farmaceutiske industri og i dyreprodukt- i industrierne ved indgivelse af en kombination af aktive ; bestanddele som beskrevet mere detaljeret nedenfor. i 20 Endnu et formål med opfindelsen er at tilvejebringe forskellige af hver af de tre forskelligt virkende væksthor- 1 monfrigørende forbindelser, som kan kombineres indbyrdes på ; forskellige måder, og udgør en del af forskellige sammensætninger, for at muliggøre optimering i udformningen af recep-25 ter til forskellige anvendelser, såsom forøgelse af vækst : og forbedring i produktionen af mælk, pels eller uld.
Hver af de ovenfor angivne grupper af midler og deres j analoge tjener til at fremme frigørelsen af væksthormon i 1 dyr ved forskellige mekanismer, og således er den synergis-30 tiske virkning af den heri beskrevne kombination af forbindelser med hensyn til forøgelse af GH-niveauerne in vivo usædvanlig og uventet for kombinationen af forbindelser mellem grupper som beskrevet heri. Endvidere findes størrelsen af den synergistiske GH-reaktion på en effektiv dosis 35 af kombinationen af forbindelser mellem grupper ikke i nogen enkelt forbindelse inden for en gruppe ved lignende doser.
DK 166565 B1 3
Hvordan de heri beskrevne forbindelser fungerer for at opnå deres bemærkelsesværdige synergistiske virkning, forstås ikke fuldt ud på det molekylære plan. Tydeligt nok måtte man forvente at se additive virkninger af indgivelsen 5 af kombinationer af disse forbindelser. Imidlertid vil de meget vigtige synergistiske resultater og deres anvendelse blive klare i lyset af den følgende beskrivelse. Nyt i denne redegørelse er opfindernes erkendelse af, at de heri beskrevne gruppe 1-forbindelser samvirker synergistisk med 10 gruppe 2-forbindelser til at fremme frigørelsen af meget mere GH end ækvivalente mængder af de individuelle forbindelser inden for grupperne indgivet alene. Desuden har opfinderne erkendt, at de heri beskrevne gruppe 1-forbindelser samvirker synergistisk med gruppe 3-forbindelserne til at 15 fremme frigørelsen af meget mere GH end ækvivalente mængder af de individuelle forbindelser inden for grupperne indgivet alene. Opfinderne har også erkendt, at de heri beskrevne gruppe 2-forbindelser samvirker synergistisk med gruppe 3--forbindelser til at fremme frigørelsen af meget mere GH 20 end ækvivalente mængder af de individuelle komponenter inden for grupperne indgivet alene. Endvidere har opfinderne for nylig vist, at specielle gruppe 3-forbindelser, såsom de naturligt forekommende dermorphiner, herefter betegnet som forbindelser nr. 8801 og nr. 8802, også samvirker synergis-25 tisk med både gruppe 1- og 2-forbindelser, således at en kombinationsblanding af alle tre forbindelsesgruppér er en kraftig GH-frigørende blanding.
Den foreliggende opfindelse tilvejebringer kombinationer med synergistiske GH-frigørende virkninger. Kombina-30 tionerne ifølge opfindelsen kan anvendes til forøgelse af blod-GH-niveauer i dyr, forøgelse af mælkeproduktionen hos køer, forøgelse af væksten hos dyr såsom pattedyr, f.eks. mennesker, får, okser og svin, samt fisk, fjerkræ og krebsdyr, og forøgelse af uld- og/eller pels-produktionen hos 35 pattedyr. Omfanget af væksten afhænger af dyreartens køn og alder, mængden og identiteten af den indgivne væksthormonfri- DK 166565 B1 4 gørende forbindelse og indgivelsesvejen.
Opfindelsen omfatter hidtil ukendte kombinationer af polypeptider, der på synergistisk måde virker til at fremme frigørelsen af og derved frembringe forhøjede niveauer af 5 væksthormon i dyrs blod. Opfindelsen omfatter også fremgangsmåder til anvendelse af den hidtil ukendte sammensætning.
I sit bredeste omfang tilvejebringer den foreliggende opfindelse en kombination, der er effektiv til at bevirke 10 frigørelse og forøgelse af niveauet af væksthormon i et dyrs blod, hvilken kombination omfatter en effektiv mængde polypeptider valgt fra mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptiderne, gruppe 2-polypeptiderne og gruppe 3-poly-péptiderne, der herefter beskrives mere detaljeret.
15 I overensstemmelse med den foreliggende opfindelses bredeste omfang skal udtrykket gruppe 1-polypeptider omfatte naturligt forekommende væksthormonfrigørende hormoner, f.eks. hormoner, der frigør menneske-, svine-, okse-, fåre- og rotte-væksthormon, såsom forbindelserne nr. 144 til 148 20 nedenfor og funktionelle analoge deraf. Sådanne peptider virker på den væksthormonfrigørende hormonreceptor hos pattedyr og andre hvirveldyr, krebsdyr og lignende til at bevirke frigørelsen af væksthormon. Repræsentative peptider inden for denne definition er valgt blandt ethvert af polypep-, 25 tiderne: a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1--44 (nummereret fra N-terminalen til C-terminalen): YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-SNQERGARARL-X (nr. 144) , 30 YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE- RNQEQGARVRL-X (nr. 145) , YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-X (nr. 146) , YADAIFTNS YRKILGQLS ARKLLQDIMNRQQGE -35 RNQEQGAKVRL-X (nr. 148) og DK 166565 B1 5 HADAIFTSS YRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-X (nr. 149); hvori den C-terminale aminosyre har følgende forkortede almene formel: 5 R* -NH-Cl- lO R' hvori R’ uafhængigt af hinanden betyder substituenterne i den specielle aminosyrerest, f.eks. hydrogen, 15 alkyl, aryl, amino eller en syrerest, X betegner den C-terminale gruppe og er valgt blandt -CONH2, -COOH, -COOR, -CONRR, -CH2OH og -CH2OR, hvori R betyder en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer 20 eller en aromatisk ring med op til 12 carbonatomer, og hvori de anvendte forkortelser for aminosyre-rester er i overensstemmelse med standard-pep-tidnomenklaturen: G = Gly (Glycin) 25 Y = Tyr (Tyrosin) I = Ile (L-Isoleucin) E = Glu (L-Glutaminsyre) T = Thr (L-Threonin) F = Phe (L-Phenylalanin) 30 A = Ala (L-Alanin) K = Lys (L-Lysin) D = Asp (L-Asparaginsyre) C = Cys (L-Cystein) R = Arg (L-Arginin) 35 Q = Gin (L-Glutamin) P = Pro (L-Prolin) 6 DK 166565 B1 L = Leu (L-Leucin) M = Met (L-Methionin) S = Ser (L-Serin) N = Asn (L-Asparagin) 5 H = His (L-Histidin) W = Trp (L-Tryptophan) V = Val (L-Valin) hvori alle aminosyreforkortelser med tre bogstaver med foranstillet "D" angiver D-konfigurationen af 10 aminosyreresten.
Selv om denne beskrivelse omhandler i det væsentlige stereokemisk rene D- eller L-aminosyrer, må det forstås, at der også kan anvendes blandinger af de D/L-stereoisomere af aminosyreresterne, selv om de sommetider har en reduceret 15 biologisk virkning som funktion af den relative mængde til- ; stedeværende uspecificeret konfiguration. Flere aminosyre-og peptid-forkortelser, der forekommer i hele beskrivelsen, omfatter:
Abu α-Aminosmørsyre ' 20 Aib a-Aminoisosmørsyre
Arg(N02) N-Nitro-L-arginin /3-Ala /3-Alanin (dvs. 3-aminopropansyre)
Dab 2,4-Diaminosmørsyre DOPA 3,4-Dihydroxyphenylalanin 25 Gly-ol 2-Aminoethanol
Hyp trans-4-Hydroxy-L-Prolin
Met(O) Methionin-sulfoxid
Met(0)-ol Methionin-sulfoxid-alkohol i
Nle L-Norleucin I
30 Pal 3-Pyridylalanin |
Pgl Phenylglycin !
Sar Sarcosin , j
Sar-ol Sarcosinalkohol j
Thz L-Thiazolidin-4-carboxylsyre | i 35 ; DK 166565 B1 7
Dermorphiner Enten
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 (nr. 8801) eller 5 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-
Ser-NH2 (nr. 8802) ; b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med følgende aminosyreerstatninger: 10 stilling 1 i nr. 144-148 er DTyr eller His, stilling 1 i nr. 149 er Tyr eller DHis, stilling 2 i nr. 144-149 er (NMe)DAla, Aib eller DAla, stilling 3 i nr. 144-149 er DAsp, 15 stilling 4 i nr. 144-149 er DAla, og stilling 1 + 2 i nr. 144-149 er DTyr1 + DAla2, DTyr1 + (NMe)DAla2 eller DTyr1 + Aib2; 20 c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypeptider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; d) ethvert af de under a), b) eller c) nævnte polypeptider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet med -NHC0R, og hvori R er en alkyl gruppe med 1-6 25 carbonatomer eller en aromatisk ring med indtil 12 carbonatomer; e) fragmenter af ethvert af de under a), b) , c) eller d) nævnte polypeptider, som i det mindste indeholder aminosyreresterne i stillingerne 1-29; 30 f) med følgende specifikke aminosyresekvenser i stil lingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til c--terminalen): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, 35 YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, DK 166565 B1 8 YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (lineær dithiol) og YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (cyclisk di-5 sulfid), hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, og modifikationer af enhver af disse forbindelser fra gruppe f) i overensstemmelse med de ovenfor 10 under b), c) og d) angivne modifikationer; og g) organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de under a), b) , c) , d) , e) eller f) nævnte polypeptider fra gruppe 1.
Gruppe 2-polypeptiderne, der falder inden for den 15 foreliggende opfindelse brede omfang, er valgt blandt vil- kårlige polypeptider med strukturen:
Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Gly-Tyr-NH2;
Ala-His-(formyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (DTrp er formyleret på indol-nitrogenet); 20 Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH2;
Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH2 (cyclisk disulfid);
Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH2 ; (fri dithiol); j
25 DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; I
His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; i
His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2 ? i
Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH2; 30 Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; |
Tyr-Ala-Gly-Thr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; ;
Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; i
Tyr-DAla-Gly-Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; 35 Ala-His-XTrp*-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (*XTrp er valgt blandt gruppen bestående af alle N-momomethyle- DK 166565 B1 9 rede Trp-isomere, dvs. (NaMe)Trp, (NaMe)DTrp, (indol-NMe)Trp og (indol-NMe)DTrp); Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; hvori Z er valgt fra gruppen bestående af alle naturligt 5 forekommende L-aminosyrer, Met(O), DOPA og Abu, og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 2.
Gruppe 3-polypeptider, som falder inden for den foreliggende opfindelses brede omfang er valgt blandt vilkårlige 10 polypeptider med strukturen;
Tyr-DArg-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Phe-NH2;
Tyr-DArg(N02)-Phe-NH2;
Tyr-DMet(0)-Phe-NH2; 15 Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2;
Phe-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar; 20 Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2;
Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2;
Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH2i (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2' 25 Tyr-DArg-Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-ol;
Tyr-DAla-Phe-Sar-ol;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2} 3 0 Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2;
Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-ol?
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol; 35 Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2 ? DK 166565 B1 10
Tyr-DAla-Phe-Sar;
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2;
Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2 ?
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (cyclisk disulfid); 5 Tyr-DCys-Phe-Gly-Dcys-NH2 (fri dithiol);
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyclisk disulfid);
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (fri dithiol) ;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; 10 Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; *
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; 15 Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2 og
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af vilkårlige af de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
20 I en foretrukken udførelsesform tilvejebringer den foreliggende opfindelse en kombination, der er effektiv til at bevirke frigørelsen og forøgelsen af væksthormon i et dyrs blod, hvilken kombination omfatter en effektiv mængde polypeptider valgt fra mindst to forskellige grupper af 25 gruppe 1-polypeptiderne, gruppe-2-polypeptiderne eller grup~ : pe 3-polypeptiderne som beskrevet nedenfor.
I overensstemmelse med denne foretrukne udførelsesform for den foreliggende opfindelse skal udtrykket gruppe 1-poly-peptider omfatte naturligt forekommende hormoner, der frigør 30 væksthormoner, f.eks. menneske-, svine-, okse-, fåre- og rotte-væksthormon, såsom forbindelserne nr. 144-148 nedenfor og funktionelle analoge deraf, hvilke polypeptider virker på pattedyrs og andre hvirveldyrs receptorer for væksthormonf rigørende hormon. Forbindelser inden for denne definition 35 er valgt blandt polypeptiderne: 11 DK 166565 B1 a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne l--44 (nummereret fra N-terminalen til C-termina-len) : YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-5 SNQERGARARL-CONH2 (hGHRH) (nr. 144), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-RNQEQGARVRL-CONH2 (pGHRH) (nr. 145), YADAI FTNS YRKVLGQLS ARKLLQDIMNRQQGE -RNQEQGAKVRL-CONH2 (bGHRH) (146), 10 YADAIFTNS YRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE- RNQEQGAKVRL-CONH2 (oGHRH) (nr. 148) og HADAIFTS S YRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-COOH (rGHRH) (nr. 149); hvori forkortelserne for aminosyreresterne med et 15 enkelt bogstav har de ovenfor definerede betyd ninger, herunder den ovenfor givne definition for de C-terminale aminosyrerester? b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med følgende aminosyreerstatninger: 20 stilling 1 i nr. 144-148 er DTyr eller His, stilling 1 i nr. 149 er Tyr, stilling 2 i nr. 144-149 er (NMe)DAla, Aib eller DAla, stilling 3 i nr. 144-149 er DAsp, 25 stilling 4 i nr. 144-149 er DAla, stilling 1 + 2 i nr. 144-149 er DTyr1 + DAla2; c) · ethvert af de under a) eller b) nævnte polypep tider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; d) ethvert af det under a), b) eller c) nævnte poly- 30 peptider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet med -NHCOCH3; e) fragmenter af ethvert af de under a), b), c) eller d) nævnte polypeptider, der i det mindste indeholder aminosyreresterne i stillingerne 1-29, 35 DK 166565 B1 12 f) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C-termi-nalen): YADAIFTNS YRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, 5 YADAIFTNS YRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, .
YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, i YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLS ARKLLQDIMSR-X 10 (lineær dithiol) og YADAIFTNCYRKVLCQLS ARKLLQDIMSR-X (cyclisk disulfid); hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, 15 og modifikationer af enhver af disse forbindelser fra gruppe f) i overensstemmelse med de ovenfor under b), c) og d) beskrevne modifikationerner; og g) organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de under a), b), c), d) , e) eller f) 20 nævnte polypeptider fra gruppe 1.
Gruppe 2-polypeptider, der falder inden for omfanget af denne foretrukne udførelsesform for opfindelsen, er valgt i blandt vilkårlige polypeptider med strukturen: i
His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 ? 25 DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 ? i
His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2 ? Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; 3 0 Ala-His-(formyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (DTrp er formyleret på indol-nitrogenet); Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH2; Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH2 og Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; 35 hvori Z er valgt fra gruppen bestående af alle naturligt forekommende L-aminosyrer, Met(O), DOPA og Abu, og DK 166565 B1 13 organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 2.
Gruppe 3-polypeptider, der omfattes af denne foretrukne udførelsesf orm for opfindelsen, er valgt blandt vilkårlige 5 polypeptider med strukturen:
Tyr-DArg-Phe-NH2;
Tyr-DArg(N02)-Phe-NH2;
Tyr-DMet(0)-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2; 10 Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar;
Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol;
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2; 15 Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2 ;
Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2 ?
Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; 20 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2;
Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 25 (cyclisk disulfid)?
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2; (fri dithiol);
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyclisk disulfid); 30 Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (fri dithiol);
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; 35 Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; DK 166565 B1 14
Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-S ar-Tyr-Hyp-S er-NH 2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af 5 de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
I den mest foretrukne udførelsesform tilvejebringer den foreliggende opfindelse en kombination, der er effektiv til at bevirke frigørelsen og forøgelsen af væksthormon i et pattedyrs blod, hvilken kombination omfatter en effektiv 10 mængde polypeptider valgt blandt mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptiderne, gruppe 2-polypeptiderne eller gruppe 3-polypeptiderne som beskrevet nedenfor.
I overensstemmelse med denne mest foretrukne udførelsesform af den foreliggende opfindelse skal udtrykket gruppe 15 1-polypeptider omfatte naturligt forekommende hormoner, der frigør væksthormoner, f.eks. menneske-, svine-, okse-, fåre-og rotte-væksthormon, såsom forbindelserne nr. 144-148 nedenfor og funktionelle analoge deraf, hvilke polypeptider virker på pattedyrs receptorer for væksthormonfrigørende hormon.
20 Forbindelser inden for denne definition er valgt blandt vilkårlige af polypeptiderne: a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-44 (nummereret fra N-terminalen til C-ter-minalen): 25 YADAIFTN S YRKVIGQLS ARKLLQDIMSRQQGE - SNQERGARARL-CONH2 (hGHRH) (nr. 144), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-RNQEQGARVRL-CONH2 (pGHRH) (nr. 145), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-30 RNQEQGAKVRL-CONH2 (bGHRH) (nr. 146), YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH2 (oGHRH) (nr. 148) og HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN -COOH (rGHRH) (nr. 149); 35 hvori forkortelserne for aminosyreresterne med et enkelt bogstav har de ovenfor angivne betyd- DK 166565 B1 15 ninger, herunder den ovenfor angivne definition af de C-terminale aminosyrerester; b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; 5 c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypep tider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet med -NHCOCH3? d) fragmenter af ethvert af de under a), b) eller c) nævnte polypeptider, der i det mindste inde- 10 holder aminosyreresterne i stillingerne 1-29, og e) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C-ter-minalen); 15 YADAIFTNS YRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNS YRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X,
20 YADAIFTNC YRKVLCQLS ARKLLQDIMSR-X
(lineær dithiol) og YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X, (cyclisk disulfid); hvori den C-terminale aminosyre og X har de 25 ovenfor angivne betydninger, og modifikationer af enhver af disse forbindelser af gruppe e) i overensstemmelse med de ovenfor under b), c) og d) beskrevne modifikationer; f) organiske eller uorganiske additionssalte af 30 ethvert af de under a), b), c) , d) eller e) nævnte polypeptider af gruppe 1.
De gruppe 2-polypeptider, der omfattes af den mest foretrukne udførelsesform for den foreliggende opfindelse, er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturen; 35 His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; D0PA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; DK 166565 Bl 16
His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; 5 Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 y hvori Z er valgt blandt Ala, Val, DOPA, Trp, Met, Lys, Asp,
Met(O), Leu, Abu og Arg, ! og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 2.
10 De gruppe 3-polypeptider, der omfattes af den mest foretrukne udførelsesform for den foreliggende opfindelse, er valgt blandt vilkårlige af polypeptiderne med strukturen: Tyr-DArg-Phe-NH2y Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2; 15 Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar; i
Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2y 20 Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2; ;
Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; \ 25 Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2?
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; i
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; i
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; i i 30 Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af i i de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
Opfindelsen angår også en fremgangsmåde til at bevirke 35 frigørelse og forøgelse af væksthormonet i et dyrs blod, ved hvilken der indgives en effektiv dosis af en kombination, DK 166565 B1 17 der omfatter polypeptider valgt fra mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptiderne, gruppe 2-polypeptiderne eller gruppe 3-polypeptiderne, og som herefter beskrives mere detaljeret.
5 I overensstemmelse med det brede omfang af denne udførelsesform af den foreliggende opfindelse skal udtrykket gruppe 1-polypeptider omfatte naturligt forekommende hormoner, der frigiver væksthormon, f.eks. menneske-, svine-, fåre- og rotte-væksthormon, såsom forbindelserne nr. 144-10 148 nedenfor, og funktionelle analoge deraf. Sådanne peptider virker på pattedyrs og andre hvirveldyrs, krebsdyrs og lignendes væksthormonfrigørende hormonreceptorer, hvilket bevirker frigørelsen af væksthormon. Repræsentative peptider, der omfattes af denne definition, er valgt blandt vilkårlige 15 af polypeptiderne: a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-44 (nummereret fra N-terminalen til C-ter-minalen): YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-20 SNQERGARARL-X (nr. 144), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-RNQEQGARVRL-X (nr. 145), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-X (nr. 146), 25 YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE- RNQEQGAKVRL-X (nr. 148) og HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-X (nr. 149); hvori den C-terminale aminosyre har følgende 30 forkortede almene formel: R' -NH-(j:- R' 35 hvori hvert R' uafhængigt af hinanden betyder substituenter i den specielle aminosyrerest, DK 166565 B1 18 f.eks. hydrogen, alkyl, aryl, amino eller syre, X betegner den C-terminale endegruppe og er valgt blandt -CONH2, -COOH, -COOR, -CONRR, -CH2OH og -CH2OR, 5 hvori R er en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatisk ring med indtil 12 carbonatomer ; b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med 10 stilling 1 i nr. 144-148 er DTyr eller His? stilling li nr. 149 er Tyr eller DHis; stilling 2 i nr. 144-149 er (NMe)DAla, Aib eller DAla; stilling 3 i nr. 144-149 er DAsp? 15 stilling 4 i nr. 144-149 er DAla; og stilling 1 + 2 i nr. 144-149 er DTyr1 + DAla2, DTyr1 + (NMe)DAla2 eller DTyr1 + Aib2; 20 c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypep- tider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; d) ethvert af de under a), b) eller c) nævnte polypeptider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet med -NHC0R, og hvori R er en alkyl- 25 gruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatisk ring med indtil 12 carbonatomer? e) fragmenter af ethvert af de under a), b), c) eller d) nævnte polypeptider, som i det mindste indeholder aminosyreresteme i stillingerne 1- 30 -29? f) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til c-ter-minalen): YADAIFTNS YRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, 35 YADAIFTNS YRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, DK 166565 Bl 19 YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFS S AYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (lineær dithiol), og
5 YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X
(cyclisk disulfid); hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, og modifikationer af enhver af disse forbindel-10 ser af gruppe f) i overensstemmelse med de ovenfor under b), c) og d) beskrevne modifikationer ; og g) organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de under a), b), c), d), e) eller 15 f) nævnte polypeptider fra gruppe 1.
De gruppe 2-polypeptider, der omfattes af det brede omfang af denne udførelsesform for opfindelsen, er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturen:
Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Gly-Tyr-NH2 ? 20 Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH2;
Ala-His-(formyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (DTrp er formyleret på indol-nitrogenet); Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH2 (cyclisk disulfid); 25 Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH2 (fri dithiol); DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 ; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2 i His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 ? 30 Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH2 ?
Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-Ala-Gly-Thr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys--NH2 ; 35 DK 166565 B1 20
Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-DAla-Gly-Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe--Lys-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-5 - Lys-NH2;
Ala-His-XTrp*-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (*XTrp er valgt blandt gruppen bestående af alle N-mono-methylerede Trp-isomere, dvs.(NaMe)Trp, (NaMe)DTrp, (indol-NMe)Trp og (indol-NMe)-10 DTrp); Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; hvori Z er valgt blandt alle naturligt forekommende L-aminosyrer, Met(O), DOPA og Abu, og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af 15 de nævnte polypeptider fra gruppe 2.
De gruppe 3-polypeptider, der omfattes af det brede omfang af denne udførelsesform for opfindelsen, er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturen:
Tyr-DArg-Phe-NH2; 20 Tyr-DAla-Phe-NH2?
Tyr-DArg(N02)-Phe-NH2;
Tyr-DMet(O)-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; 25 Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2;
Phe-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar;
Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2;
Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2 ? 3 0 Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2; 35 Tyr-DArg-Phe-Sar-ol;
Tyr-DAla-Phe-Sar-ol; DK 166565 B1 21
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2*
Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2·
Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2;
Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2; 5 Tyr-DAla-Phe-Gly-ol;
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2 ?
Tyr-DAla-Phe-Sar; 10 Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2;
Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2 i
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (cyclisk disulfid)? Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (fri dithiol) ; Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyclisk disulfid); 15 Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (fri dithiol);
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; 20 Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2 og 25 Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
I en foretrukken udførelsesf orm tilvejebringer opfindelsen en fremgangsmåde til at bevirke frigørelse og forøg-30 else af væksthormonet i et dyrs blod, ved hvilken der indgives en effektiv dosis af en kombination, der omfatter polypeptider valgt fra mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptiderne, gruppe 2-polypeptideme eller gruppe 3-polypeptiderne som beskrevet nedenfor.
35 I overensstemmelse med denne foretrukne udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen til at bevirke frigø- DK 166565 B1 22 relse og forøgelse af væksthormonet i et pattedyrs eller et hvirveldyrs blod skal udtrykket gruppe 1-polypeptider omfatte naturligt forekommende hormoner, der frigør væksthormoner, f.eks. menneske-, svine-, okse-, fåre- og rotte-væksthor-5 mon, såsom forbindelserne nr. 144-148 nedenfor og funktionelle analoge deraf, hvilke polypeptider virker på pattedyrs og andre hvirveldyrs væksthormonf rigørende hormonreceptorer. Forbindelser inden for denne definition er valgt blandt vilkårlige af polypeptiderne: 10 a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-44 (nummereret fra N-terminalen til C-ter-minalen): YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-SNQERGARARL-CONH2 (hGHRH) (nr. 144), 15 YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE- RNQEQGARVRL-CONH2 (pGHRH) (nr. 145), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH2 (bGHRH) (nr. 146), YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE-20 RNQEQGAKVRL-CONH2 (oGHRH) (nr. 148) og HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-COOH (rGHRH) (nr. 149); hvori forkortelserne for aminosyreresterne med et enkelt bogstav har de ovenfor angivne betyd-25 ninger, herunder de ovenstående definitioner for de C-terminale aminosyrerester; b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med følgende aminosyreerstatninger: stilling 1 i nr. 144-148 er DTyr eller His, 30 stilling 1 i nr. 149 er Tyr, stilling 2 i nr. 144 til 149 er (NMe)DAla,
Aib eller DAla, stilling 3 i nr. 144-149 er DAsp, stilling 4 i nr. 144-149 er DAla, 35 stilling 1 + 2 i nr. 144-149 er DTyr1 + DAla2; c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypep- DK 166565 Bl 23 tider med Met i stillingen 27 erstattet med Nle? d) ethvert af de under a), b) eller c) nævnte polypeptider, hvori den N-terminale -NH2 er 5 erstattet med -NHCOCH3; og e) fragmenter af ethvert af de under a), b), c) eller d) nævnte polypeptider, der i det mindste * indeholder aminosyreresterne i stillingerne 1--29; 10 f) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C-ter minalen): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, 15 YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, yadaifssayrrllaqlasrrllqellar-x , YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X, (lineær dithiol) og
20 YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X
(cyclisk disulfid); hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, og modifikationer af enhver af disse forbindelser 25 af gruppe f) i overensstemmelse med de ovenfor under b), c) og d) beskrevne modifikationer? g) organiske eller uorganiske additionssalte af et hvert af de under a), b), c), d) , e) eller f) nævnte polypeptider fra gruppe 1.
30 De gruppe 2-polypeptider, der omfattes af den fore trukne udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturen: His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 ? His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2 ? 35 Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; DK 166565 B1 24 DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
Ala-His-(formyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; (DTrp er formyleret på indol-nitrogenet); 5 Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH2;
Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH2; Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 ? hvori Z er valgt blandt alle naturligt forekommende L-amino-syrer, Met(O), DOPA og Abu, 10 og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte gruppe 2-polypeptider.
De gruppe 3-polypeptider, der omfattes af denne foretrukne udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen, ) er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturen: 15 Tyr-DArg-Phe-NH2?
Tyr-DArg(Νθ2)-Phe-NH2;
Tyr-DMet(O)-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; 20 Tyr-DArg-Phe-Sar;
Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol;
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2 ? 25 Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2?
Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2?
Tyr-DAla-Phe-Gly-ol;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2; 30 Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2?
Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2 ?
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (cyclisk disulfid); Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (fri dithiol); 35 Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyclisk disulfid);
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (fri dithiol); DK 166565 B1 25
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe~Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2 ? Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; 5 Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-Darg-Phe-Sar-Tyr-Pro~Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 ? og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af 10 de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
I den mest foretrukne udførelsesform tilvejebringer opfindelsen en fremgangsmåde til at bevirke frigørelse og forøgelse af væksthormon i et pattedyrs blod, ved hvilken der indgives en effektiv dosis af en kombination, der omfat-15 ter polypeptider valgt blandt mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptiderne, gruppe 2-polypeptiderne eller gruppe 3-polypeptiderne som beskrevet nedenfor.
I overensstemmelse med denne mest foretrukne udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen skal udtrykket 20 gruppe 1-polypeptider omfatte naturligt forekommende væksthormoner, dvs. hormoner, der frigør menneske-, svine-, okse-, fåre- og rotte-væksthormon, såsom forbindelserne nr. 144 til 148 nedenfor og funktionelle analoge deraf, hvilke polypeptider virker på pattedyrs væksthormonf rigørende hor-25 monreceptorer. Forbindelser inden for denne definition er valgt blandt vilkårlige af polypeptiderne: a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-44 (nummereret fra N-terminalen til C-ter-minalen): 30 YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE- SNQERGARARL-CONH2 (hGHRH) (nr. 144), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-RNQEQGARVRL-CONH2 (pGHRRRRRH) (nr. 145), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-35 RNQEQGAKVRL-CONH2 (bGHRH) (nr. 146), YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE- DK 166565 B1 26 RNQEQGAKVRL-CONH2 (oGHRH) (nr. 148) og HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-COOH (rGHRH) (nr. 149); hvori forkortelserne for aminosyreresterne med 5 et enkelt bogstav har de ovenfor angivne betyd ninger herunder de ovenfor angivne definitioner for de C-terminale aminosyrerester; b) ethvert af de under a) naenvnte polypeptider med Met i stilling 27 erstattet med Nle? 10 c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypep tider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet med NHCOCH3; d) fragmenter af ethvert af de under a), b) eller c) nævnte polypeptider, der i det mindste inde- 15 holder aminosyreresterne i stillingerne 1-29; e) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C-ter-minalen): YADAIFTNS YRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, 20 YADAIFTNS YRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, YS DAI FSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTN C YRKVLCQLS ARKLLQDIMSR-X 25 (lineær dithiol), og YADAIFTNCYRKVLCQLS ARKLLQDIMSR-X (cyclisk disulfid); hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, 30 og modifikationer af enhver af disse forbindel ser fra gruppe e) i overensstemmelse med de ovenfor under b), c) og d) beskrevne modifikationer; og f) organiske eller uorganiske additionssalte af 35 ethvert af de under a), b), c), d) eller e) nævnte polypeptider fra gruppe 1.
DK 166565 B1 27
De gruppe 2-polypeptider, der omfattes af den mest foretrukne udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturen : 5 His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2;
Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe~Lys-NH2;
Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; 10 Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; hvori Z er valgt blandt Ala, Val, DOPA, Trp, Met, Lys, Asp, Met(O), Leu og Arg, og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af 15 de nævnte polypeptider fra gruppe 2.
De gruppe 3-polypeptider, der omfattes af den mest foretrukne udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er valgt blandt vilkårlige af polypeptideme med strukturen: 20 Tyr-DArg-Phe-NH2?
Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar;
Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2; 25 Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2 ?
Tyr-DAla-Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2; 3 0 Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Gly-Tyr-Arg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; 35 Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; DK 166565 B1 x 28
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
5 Opfindelsen tilvejebringer endvidere specielle kom binationer af polypeptider og fremgangsmåder til anvendelse af sådanne kombinationer.
Forbindelserne ifølge opfindelsen kan syntetiseres ved sædvanlige peptidkemiske fremgangsmåder i opløsning og 10 fast fase eller ved kendte klassiske metoder. Fastfasesyn-tesen begynder fra peptidets c-terminal. Et passende udgangsmateriale kan f.eks. fremstilles ved, at den nødvendige beskyttede α-aminosyre bindes til en chlormethyleret harpiks, en hydroxymethylharpiks, en benzhydrylamin-(BHA)-harpiks 15 eller en p-methyl-benzhydrylamin- (p-Me-BHA)-harpiks. En sådan chlormethylharpiks sælges under handelsnavnet BIOBEADS SX-1 af Bio Rad Laboratories, Richmond, Californien. Fremstillingen af hydroxymethylharpiksen er beskrevet af Bodansky m.fl., Chem. Ind. (London) 38, 1597 (1966). BHA-harpiksen 20 er beskrevet af Pietta og Marshall i Chem. Comm., 650 (1970) og er kommercielt tilgængelig fra Penninsula Laboratories,
Inc., Belmont, California, eller Beckman Instruments, Inc.,
Palo Alto, California i dets hydrochloridform (BHA-HC1).
Efter bindingen i begyndelsen kan α-aminobeskyttel-25 sesgruppen fjernes med et udvalg af sure reagenser, herunder opløsninger af trifluoreddikesyre (TFA) eller saltsyre (HC1) i organiske opløsningsmidler ved stuetemperatur. Efter fjernelse af a-aminobeskyttelsesgruppen kan de øvrige beskyttede aminosyrer tilkobles trinvis i den ønskede rækkefølge. Hver 30 beskyttet aminosyre kan generelt omsættes i ca. tre ganges overskud ved anvendelse af en passende carboxylgruppeak-tivator såsom dicyclohexylcarbodiimid (DCC) i opløsning i f.eks. methylenchlorid (CH2CI2) eller dimethylformamid (DMF) og blandinger deraf.
35 Når den ønskede aminosyresekvens er fuldført, kan det ønskede peptid spaltes fra harpiksbæreren ved behandling DK 166565 B1 29 med et reagens såsom 'hydrogenfluorid (HF), der ikke blot spalter peptidet fra harpiksen, men også fraspalter de mest almindeligt anvendte sidekædebeskyttelsesgrupper. Når der anvendes en chlormethylharpiks eller hydroxylmethylharpiks, 5 fører HF-behandling til dannelsen af den frie peptidsyre.
Når der anvendes BHA- eller p-Me-BHA-harpiks, fører HF-behandling direkte til frie peptidamider.
Den ovenfor omtalte fastfase-metode er velkendt og er beskrevet af Stewart og Young i Solid Phase Peptide Syn-10 thesis (Freeman and Co., San Francisco, 1969).
Nogle af de velkendte opløsningsmetoder, der kan anvendes til syntese af peptiddelene ifølge opfindelsen er beskrevet i Bodansky m.fl. Peptide Synthesis, 2. udg., John Wiley & Sons, New York, 1976.
15 Inden for opfindelsens omfang falder sammensætninger, der som aktiv bestanddel omfatter mindst to af de heri beskrevne forbindelser eller deres analoge eller deres additionssalte eller deres farmaceutisk acceptable salte sammen med en bærer, et fortyndingsmiddel, en matrice til langsom 20 frigivelse eller et overtræk.
De organiske eller uorganiske additionssalte af de væksthormonfrigørende forbindelser og kombinationer deraf inden for den foreliggende opfindelses omfang omfatter salte med sådanne organiske rester som acetat, trifluoracetat, 25 oxalat, valerat, oleat, laurat, benzoat, lactat, tosylat, citrat, maleinat, fumarat, succinat, tartrat, naphthalat og lignende, og sådanne uorganiske rester som gruppe I (dvs. alkalimetalsalte), gruppe II (dvs. jordalkalimetalsalte), ammonium- og protaminsalte, zink, jern og lignende med mod-30 ioner såsom chlorid, bromid, sulfat, phosphat og lignende samt de ovennævnte organiske rester.
Farmaceutisk acceptable salte foretrækkes, når der påtænkes indgivelse til mennesker. Sådanne salte omfatter de inden for den farmaceutiske industri sædvanligt anvendte 35 ikke-toksiske alkalimetal-, jordalkalimetal- og ammoniumsalte, herunder natrium-, kalium-, lithium-, calcium-, mag- DK 166565 B1 30 nesiurn-, barium-, ammonium- og protaminsaltene, der fremstilles ved velkendte metoder. Udtrykket omfatter også ikke-toksiske syreadditionssalte, der generelt fremstilles ved omsætning af forbindelserne ifølge opfindelsen med en pas- ; 5 sende organisk eller uorganisk syre. Repræsentative salte omfatter hydrochloridet, hydrobromidet, sulfatet, bisulfatet, acetatet, oxalatet, valeratet, oleatet, lauratet, boratet, benzoatet, lactatet, phosphatet, tosylatet, citratet, male-inatet, fumaratet, succinatet, tartratet, napsylatet og 10 lignende.
Opfindelsen vil nu blive beskrevet mere detaljeret ved henvisning til de følgende, ikke-begrænsende eksempler.
Eksempel 1 - In vivo GH-friqørelse i rotter.
15 Ikke fuldt udviklede, hunlige Spraque-Dawley-rotter fås fra Charles River Laboratories (Wilmington, MA) . Efter ankomsten anbringes de ved 25°C med en 14:10 timers lys/mør-ke-cyclus. Vand og pur ina-rotte foder er tilgængeligt ad libitum. Unger holdes sammen med deres mødre, indtil de er 20 21 dage gamle.
Normalt saltvand med 0,1% gelatine er bæreren for subcutane (s.c.) og intravenøse (i.v.) injektioner af peptiderne. I nogle forsøg, hvori peptiderne er meget uopløselige, anvendes DMSO til opløsning af forbindelserne, med 25 fortyndinger, der derpå udføres til den angivne koncentration med normalt saltvand med 0,1% gelatine (forbindelser, for hvilke DMSO er nødvendigt for at bringe dem i opløsning, er markeret således i tabellerne). De ikke anæstetiserede rotter, der vejer 55-65 g, injiceres i.v. med den i tabellerne 30 I-IV angivne mængde væksthormonfrigørende forbindelser. Injektionen udføres med 0,2 ml opløsning via halevenen.
Alle dyrene dræbes med guillotine 10 minutter efter den sidste forsøgsinjektion, medmindre andet er angivet. Hovedblod til bestemmelse af blod-GH-niveauerne opsamles efter 35 dekapiteringen. Blodet får lov til at størkne og centrifugeres, og serummet adskilles fra klumperne. Serummet holdes DK 166565 B1 31 frosset indtil dagen for prøvefremstilling til radioimmun-analyse (RIA) af væksthormonniveauer ifølge den følgende metode, udviklet af National Institute of Arthritis, Diabetes and Digestive and Kidney Diseases (NIADDK).
5 Reagenser tilsættes generelt til RIA-analyseglassene i en enkelt omgang ved køleskabestemperatur (ca. 4° C) i følgende rækkefølge: a) puffer, b) kold (dvs. ikke-radioaktiv) standard eller 10 ukendt serumprøve, der skal analyseres, c) radio-ioderet væksthormon-antigen og d) væksthormon-antiserum.
Reagenstilsætningen udføres generelt således, at der fås en endelig fortynding i RIA-glasset på ca. 1:30.000 (antise-15 rum/totalt flydende rumfang? rumfangsforhold).
De blandede reagenser inkuberes derpå typisk ved stuetemperatur (ca. 25°C) i ca. 24 timer forud for tilsætningen af et andet antistof (dvs. gede- eller kanin-anti-abe-nr-globulin-serum), der bindes til og bevirker udfældning 20 af det kompleksbundne væksthormon-antiserum. Udfældede indhold i RIA-glassene analyseres derpå for antallet af tællinger i en specificeret tidsperiode i en Ύ-scintillations-tæller. Der udarbejdes en standardkurve ved afbildning af antallet af radioaktive tællinger mod væksthormonniveauet 25 (GH). GH-niveauer af de ukendte prøver bestemmes derpå ved sammenligning med standardkurven.
Serum-GH måles ved RIA med reagenser tilvejebragt af National Hormone and Pituitary Program,
Serumniveauer i tabellerne I-IV er angivet i.ng/ml i 30 udtryk af rotte-GH-standarden på 0,61 internationale enheder pr. mg (IU/mg). Dataene er angivet som gennemsnittet ± standardafvigelsen på gennemsnittet (SEM). Statistisk analyse udføres med Student's t-prøve.
Resultaterne med kombinationer af polypeptidforbin-35 delser fra gruppe 2 og 3 er vist i tabellerne I-III. Resultaterne med kombinationer af polypeptidforbindelser fra DK 166565 B1 32 gruppe 1 og 3 er vist i tabel IV. Resultaterne med kombinationer af polypeptidforbindelser fra gruppe 1 og 2 er vist i tabel IV. I hver af de fire tabeller er de viste resultater gennemsnittet af undersøgelser med 6 rotter.
5 33 DK 166565 B1 ft tu
4J
-3 - O ro 3 * Λα) us - * .
S ^ 1-1 fv 2 tN N - - * in M £ ., S <1> “ 4·! ft · C · ft 4l «I 41+1 _ « 3 ° q 3 SK 38 $ -
'ft O O ft r> K
ω fa λ: + u c "" •ft k -ft Ή H CO _ _ ,2 8 i rt S β ε s * s e v ΰ ti00 s ♦> ♦· ♦· ♦· «u k n' S es g « S S'0
g, o * « 2 * ®NSS
S Λ 8rlO
3 n <- — I Q> H
ft k T 7? ?? V <5w >ι Ό rt)
Cl ** Æ Φ £ Æ X ?i zT .._i f*< v..i cn ,_jojwwww w ·~ © rj ^ ^ + ^ g ri I ^ ^ £ “ ** ^ I Λ a> M Ή 0) S Z 4, 4, 4, 4, " - g g ij
ft q φ © m n rX
<U . q . Q, ri λ m >- C £ h •s^si1" 2* ~ 2 = “ O O ft (1)
Ό fa Λί + U S X
s f y D ft “
ft * I ft C
•8 t: 3 ~ N S -3 >2 °r ~ _ - ϊ s * *£ S”3« 5w W 'Z £ ft Ό « 0) .H · ft ~ & * # 5£<ϋΦΦ
o ft ft α, Λ - æ e M
JS ^ C Η 4l *1 ·< +> ♦' rt ® 0) I 8S2 s I S II s«» m · ft 4-> o) «i n æ m Λ tj -H C Η -H ft H-p ,®,.'3* Μ + ιη---ηΛΝβϊ,ί ft S k ft ^ 3 § -S C +, 4, .1 41 4. 4. *. *. 4. 41 4! +1 0 Λ g g* -¾¾ ^§g i « — S : ! ! 2 " 5 sTh ra ft
Eh +J ,3 'ί !3<UI
·* E Ή O &> λ H S tft su(d*c e e , Jr ϋ +j . - w - W M _
m ,_4P «. m o i ftt <u E
o-Cin^eciooooÆ O H Ai <u
0 Mg e" r · β- N r «Γ N N 41 *J fa £ .¾ . H
ft C 41 41 41 41 41 41 41 41 41 ©_ ©^ ©_ , f\| φ • 0Er>©©r>4rrir»r'if'.©2m S « « ^ r\j " -- " >, ω α> a>
w ^ H m ft O
tu i tn -H ft ft ft tn >i a> > 3 Λ ft, » * — «.£300000000 '—I Ό 'll Μ Ό 3 å&szsszszz---- <? o> * * *
Bl Q 3 O) -kJ q ft H
u Æ in o) O ft <n ,, « fa S >ft tn
Ιΰ £ t I -3 _ -H
, i * ϊ id Q) ~ ti Ό ><c . · , · , a , S , m c c ® H ft ft P- z: J. X -1 £· i. < 4 <i l <i * ό. rtJfttUO^ E 0+> Φ £ 5 * f 4 rit 4. r ; * r Z £ O O +1 fi in \ r-ta)tn i P-aT ®r ft 5# *7 Λ *τ Β"5 5$,^)ί,^ i+jm-h-h μ
ft fSjlOOH «t.Iiit M «!<( H OJ Λ HOl-H
q cMfttutu o*;i ;i5 Λ 4) <u u -ft tn
qtD+JftC flii-l iziu&iftls''*:·?,!·' 1·ίΜ ft ftUOO
cu CftS«-H ft Φ -Η Φ Ό tn Oftft^xi e 1¾ JsjjgJsJS^ >,, Islilo k ® 10 to μ Bi ,—i r*I 3 iJ (I) |j rl -P H 0 01 il.
ft ^ ο «ίλή ο Ό ft Ό η o s |£ί^«iiSiSiiiiiS|-i*i£aS»c.nooo ri ££<<<<<<οϋϋ< λ-hxjo) ft · ft 1ft ft Ό ~ —
Ift — m m ft Ο (ϋ O C πΐ Λ 1 1 £?8f2Se?i5S82 G ift Ό Ift .ft — - E eft rtffSnftSSfcRSSS * C5 GO) SSeee'o2kOOCD(BCB 44 * S 6 * * 0 >
•H
>
C
H
34 DK 166565 B1 ω +j v 2 01 “S cr — M * 2 2 2 * *
W < rH fV ^ ttRS
O M CN ^ Λ S
‘Π g ^ φ +'·»·: +< +i «i · C · ft t 5 m *λ fy
$ λ o y a S S RiSS
“HHG3 ks £;λ5 ,g fe X + 0 5 le ‘ίβ λ ·» _.
-h * ^ 2 2 2 K K
f) >HrHn 22 οί »
" i nj o — *© K
0 -H CO (D
v a t;ω a : : -+-+- " * 4U S S » 2 8 g $ 0 O' C 0 **
Cl S3 Γ0
n * S
H (3 ~ ~ ^ λ ^ ^ Λ ψ . CO 2 2 2 S & 2. S & 2 2 >, + _. m £ Μ Q 2 <ΐ> © ΙΛ <\l · W r~ o i-i , , ·Η ω 00 ifi V Sv^s PVJ «c i- rrj
jjj Cd) rv t\i 4f Fv Γι Γ3 « Y
S Λ O ^ S 4. 4' +, 41+1 +1 +> +; +. 4! ω 1 es: I 2 * £ = 1 g £ 1 = 1 i i 4.¾- ....... g 0 o æ ro 2 2-3 S & 2 2 2 & 2 b ’-i -n 00 ^* < γί CD — IV 4β ep ιλ kC ·>, —^ O' (D "" ro kC ·— & r- — £ -U ® -H . ft " S ® ^ C g g g - ro * o·. „ * g O s ti g1 æ 0 -cSm 't 571 Ϊ 1/1 i I * oo
o « 0 ra ^ S
ϋ w S
5 4J W
M ^ Ή _ οβ^β'βηο kD 4- sC O O
M ^ O C < K — *r ft n ft uS S j_,
Ή Η θ' Λ fl) +' +' +1 +1 +1 +1 +( +i +i +i +| +i G
_rj 2 'r*hiS. ? *i· ^ Λ." O' in Λΐ fwkn^-ino' O' •y S ^ O G H λ. in ui p- «- m w. r, o ·· ^ >e n SH «wmoe- *“ *“ _____ H t· 1-1 ^ C\)
•5 K Ή O O 3J
? ø ίο ϋ c z
e^^c ooo^tee^eekerwr^ T
ta _i e n *· M » (« n o' »· «-~ + cT o' o” b o v^, ^ ^
^ M O1 +' +1 +1 +t +·. +1 +' +1 +! +1 +> 41 41 Y
£2 *· oc^oeemrvoooooe P
o X ^ o ru i»" rsT a *i~ o'" »*." fw ko* cu N ^0----- -_ 7 0) y Q. fn >f ft ocooooooooooo ^ 6 Q^i 5 •H JS, « Jc _k fe 1 °i5o,s é é έ é é έ é é é é i έ é> d cnCiaiOH l7 T,7,T‘7*T>r*T*r'T,T'“*" o
C CN J-i iU il) ! I I I I Q
'S 0) 3 +> *0 2222222222222 ! “ ω o Ssni) Β·ιε·ι£·ιΒ·ι0·*ε·*£·ι&*&^6*8·^Β·^ε·^ ^n-n ω oStlS^ S 55 £5 RS S2.S ^ S £& S^S I2.SS2.S R κΓ S ί I ΐ i '£ |t i Ϊ i x I i I '1 J ΐ i'i i 5 { ; i J ϊ H 3_ -η 'fe'» ‘»'έ“ 5 ' ε 00 T* «CjBO^oieOipO'BO'eeieo^oiBOieE'eSice cooo
l£ <<<<C<<<C<<<< ffl o H
II ^ ^ u 3Φ ^ Hl Λ Z B π—
O CCCCCCDCODttiCDCDCDCDCDCD
>
•H
>
C
H
35 DK 166565 B1 n α)
4J
u ^ O n M * w 3 3 3 3 3 3 5 33
O CNCNfT. O S Sp "" V
^^g^eKRseSI ft s R R 5 Q) Λ* g vJ §J +! +! *< *' *' *' *' *' *' in iji-tcD © -- © © *»r>. ir> σι e> « Isil Issi * S S δ = Ό —· c ·***-> _ _ S , WH η * ΐ ΐ * «· *» ^ <ϊ<6 y K (Q O ww'ww <c (Q *0 ww> 0 ·η co <d irsr 2Γ 52ΓΧ m 4J CO Q. ►*- ιΛ *** C^CK C* 1 iw μ α ^ O · 2 +! +1 +t +1 41 41 4? 41 41 ? £ E £ 8 8 S S ft S r * - * " " ™ u * Μ § σ g * 33 - s >1 + . ® N ft ft! ^ 2 α ^ c <d R ~ ί i ® · c · a +* +i .. +· _c to O o P d +i i* η ·2 h c s 8 8 © £ ΐ -2 0 0 H «c — Q ep ' 'σ&,Λί+ϋ ·“— SSiNj H1 c— y
rH * S
g +J Η Λ g 0 S g ^ 3 3 ΐ f h! 5* « * * »S & -u ® -i-i · a ., ns n £ ft -H +1+1 u
CO 2 Ή C 3 CDCD ^ CD
jj t H K K m +F m
Li 33 Ή O ft ft *β ~
o » - S «~ S
ϊί μ *
0) 4J
h o < SS-SKft««» — v & μ p r+ '1? · +· +> +> +) +1 *' ♦: +' ♦> *h +i ♦ +· “ ny Q o) ba> J§ 2 -rj ^ g ®S!S?R5aSii*SS8 o g as +i o σ g
g ΰ « ^ δ oooooooooomoo I
jj _, «* ·» — M
« Hg ^ft--ftft----0^= « O' 2 ^ +· +i +. +i +: +> +i +· +i + + +' +· i ° -y C © © © © ©__ 0_ ©_ ©_ 0_ o ©^ 2 1 η sc » cd* o- e" æ* o' f n i « g" g" ^ ft S o R ^ i, ® t S .2^E££S2R28S822£ * ? ω θ' ·~ ^ ή1 ° a ο - D~ .Μ,Ι*Μ*? έ i ί 1 s. s w έ έ fsiffsififfi i I i \ Hdjtn £ i ί ί 2ί2ί;ί;ί;ί5ί Bi ^ cp <ia>OH *7 *7 *7 *7 1 ^ 9 m S Oftonia t% £* e* **T ^"7 i ^7 3^7 3**r 3 ^ 5 * £ ^ o § H HoSoiM Β&ο^Ο^Ο^ϋ'δίΒίιί'ί’ί'ΐίΙΠέοΛί ft'0*, 2 5^5ί5τά·τ i?353535 é-ί έ·^Λ1 (U0'§1 I Λ silisisises es es esfrsesisis i g u I SI 22*2*SS822RSR S—- o s El æ5Eæ8eæ©e!©S^^ >
•H
> c
H
36 DK 166565 B1
P
<D
4-1 4-> „ p tn P * æ ta ~ o) *5 2 es CN 5«nr-. f\jrnfvfn«r«e<r^· Λ ·Η ω σι ^ Φ Å O P S *·+:+' +i ♦' « *i Ή -H +' *! +' cd t j c 3 ^ærgtno'inowvcv^ep » ss + I ; ! i π e i ί * 1 s s c “ Ή * Λ •g ήη n ~ " I to O — 0 -WCD0) tn V5 ^ .p n- t«· »» ΙΛ |Λ (Λ >£) <w p +> co ft vD tvj «r Λ t\j tv tv &i en ^ 1 ti_i Vi 10 0*3 +1+144+1 +| +1 +1 +1 +1 +1 +1 5 §'5c5 SRSRK5 £ £ E E E 5 br w csi cw ^ ^ ^ fw m fv
6 — CM
2 M æ Ρ * s 61 h a i . < o >1
+ CO tN H
,, -η ω co o
S c 0) I
® · c · a tu ® J3 O H ft Λ *2 P r-i C 3 ft, ,2 o o p t ^ a .* + u . σι
.5 *" P
5 * ^ •g f £ 9 y p o — i o o æ tn p w -n æ >, — .. θ' ω Eh 4J ,2 -Η · ft λ ^ ^ u a p CD g *W C 3 0) 4J +* p p 51 as <w ο ω <u
O ™ O 18 « HP
*1-1 Γ!; CS >i — ® σι to η Λ £ * „. ^ .¾ Η Η ’S ή 0) *”' *"! *" ^ +‘ +' *" +I +1 C § Φ Φ η p c m o^'-crcv^ui — ei c& e- rn ω -5¾ p O 3 H rstff-tnfcrnSjn-KS- g* £ 5 <p ή o £ ? ^ -R h \ CM s ·* ϊή o tr k Λ -3 C!) 10 .¾ C «— — 20
P ^ o.c©.co©©C4r+-«ro f H
7n H^cv^c^ewrwrycveeo^ * “he οι -p
Dl Ο \ +|+, +- +1 +; +, +; Η +1 +1 +1+1 ^ +J
0 -PCOOOOOOOOOOOO O i? c ►· *. Li "Sk 1 £ h CN .«U’"’·'"’·’"’”'"'" I ft P 0 05 >, 6 CD ©©©©©©©©«-no© &1 t!
R CD CP Sh P
H, 0 3. H ,« ft q u η to e 0+1¾ ί p. A. A. i i A.'u A.7 A. A. A. X h c \ η ο to 5 5 5 5 5 ; £ — r — r r r r 3 h O' < I CD Ό H A. i i , t 5 i tv i tv i i IOS Q Λ c cs ρ α> ω Γ k m k A A « s c i « m c * i ω ρ 2 ni R id, "2 o<xc < < ηλ,— tM < i«i< 5 « “5, A pcd-h° ω CftAiffi-H A5A. 1 A. ft. X E_1 έ’ϋΐο1 H ίίί i £ i t £A ^o^cn 7! R M S P 1>,0^|OCUO ftior >>X >iO >.0 >, O fuO rw 0 tv— Σ u xs p Socdæ<2 ;Α2^Ϊ^.Ϊ^<2Α5ΑΪ*?Ϊ'?ϊ^ι!’^^^ι!'^ ΦσιχΛ fi ^ Zlil I'i ^ Ri SSLi &=? e- ^03 jJJ o-<-<>ti<<>>>< cd m rH Cn t? § 5ίί| ίΰ Λ ^ U p (D Sf.r-rvP'ifncr^rs.-f'wr'jLn 2 g φ rv rv fi cn m in m m fc w 0 ^ β| ^©ΟΟΟΟΟΟΟΟΟ©
•H
> c
H
DK 166565 B1
Vi tu 4>
+J
O n vi * co <a
CO H
•»vCMm^ji'-r^rorn —
Vi . G » Q. 4t 4i +1 41 +1 4-1 41 41 41 4! +1 ♦> *' « ££ + & ϊ S £ ^ H ^ - ^ ; Ό —
G
!q m ^ ί*ϊ <2 3 -p S a ΓΟ 4! 41 4’ 4! 41 4·! +1 41 41 41 4’ 4’ 41
S ΰ tre ΰ 55eooo?>!“'"i£rZZ
α ^ N
? n g vi * γ
Dl r4 la i.
, < O J
+ co N tn . -η dj æ i m C S i s . c . α r* “ Λ O V tt £ » o o C 2 &, Ή &i Λί + C5 Vi
•S * Q
•P 4J >-4 I
^ H O ~ μ £ 0 S « >, i-* -ro CO f-i ^ D> ® -μ ® -W · O, μ «Ή vi vi α o W ® 41 C 3 +* ii ,¾ co H S’ * tJ U r-i o « o « — oi £ g ‘θ' m “ c 4J -O · .4: 4' 41 41 4' 4> 41 41 4) 41 41 4' 41 ® Λ £ "μ O C η Λ^ίΝΐ^ιβίΛιΛ-Κ©©^ og IH S OB afg as 41 O D1 s μ ϋβ^ίΠ cOOOOOkO« ^ in ιΛ__ I ^ vj ,—i ^ ^ —·~ eT" o~ o' o es' cT es' ^
w η E cn -H
tr> g ^ 41 41 4· 41 41 41 41 41 41 41 4' 41 41 l 0 +j c oeeoooo^ ©_©_©_©_©_©_ 2 “ 1 OS!·®'**’" ''Τ' ι*Γ l— ιΛ~ tn — ev «0 tn Pi £ ™ S U — - μ Dl o « £? a to π cccepomooocc , 4-» p CO a H vi vi o a o ό O’ q >Z] Y 41
4l ^^*11 ^ ji! <D
·-< θ' νίβ,ρ,^ιιι^ΙΙιι^^ i5 ·α ε o +« « £5eeee£££|£ii 35 *5 ® 01 3 3 $ i < ; : ? Ϊ Λ 5 ; ; 5 £ o
® 111,23 - £ Is é-s e-sisé- £ BV
W O D< 3 Η Λ £4 α ^ |»2 »·. te* ^ fc» ^ ν' ^ V) i, CN
<-« rt 3 V » V I IV I fvO ftiO rwO rvo NO I> O Ni O NO Ni O Ni·- >> ·- >> VI
S é έί S=5 Ri &=? Ri S.=? R5 Ri £.¾ R5 R§ig| o S
3 Ι|££ίί5ί5««ί!ί ® & 41 I I · li *"«» ΙΕ ε
zel SSSSSSS^SS^S'S
*H
> c
M
38 DK 166565 B1
P
Q) -μ •P „ P * 00 rn ω ta 0 < ·Η *H QJ ^ ^ ^ »“· r·* K ^ ^ GO) * — tv rorwcwfw ω _Q O P ol 41 41 4I '41 41 41 +1 4·! *2 P H G D «-vomcseBr-et *2 00 p tnw«f»«e(*iin ® A .« + CP fr«rin«;jSw&
G
•H * •g <P Η ro
g I IC O
ϋ T* . 2 S kCr- — p-r.fyrury , ^ +i æ ft 5 m m m m « « *
Λ *H H A
JU j2 2 +1 +1 41 41 41 4t 41 41 a utT-co KSSSSSSg
A _ ^ *“-*·“ CM
g ro x & il * ? , < O >1 + CO N r-i ., -A ω co o g c o) 1 ¥ . c · A ω “ Λ 0 P A Λ ^ p -I C 3 Οι
,^00H I
? ϋ + o P
*-· ^-" Π5 'n * <
•g -P H Q
g P O — I
° 0 CO ro P
^ πΟ >.
m O' 0) E-i
~ ,2 -H · A
+> ^ μ μ A P
10 g 4-1 G 3 0 ω -o p
u ? mu CO
P W CJ rO H
O H CM
'Z % v *
«--££-»£ R_ P
Ή H 5 JO CU 41 41 41 41 41 41 41 41 ^ J§ g ©ο-ρ--«νβ £ -3 3 p O C —I r- — So GO v CO m 0 SR'p'woe·" · H t H s afj
ί ΚΉ O ffi S
g 0 ic a; c 2 m uoooooooo 1
-P —| -1.-- - — — P
w -Hg 0 — — — — ro ro ro Oj - ο \ ω i? P O' 4: 41 41 4! 41 41 41 41 I .
Ο m e 0 g ιΠΟΟΟ^ββΟΟ £ 1 os / It o' B oT li C *" pi
M ^ 0 --- I
5 N
6 w E-*
Ck .Λ Λ ΟΛΟΡηΟΛΟΟ I
g ω A " - ~ ~ * >, y 0 a «-i
C7I Q O
•w i ~ „ , é I i i f έ έ έ ? H O' M ►-BBBB^^^ ff<
Ί ° 3 ® S iééééiii S
0> *C I (U Ό Η Q
C CM P <D <D ‘ li ''III I
^ <D 3 -P Ό f ί ί i ί ΓΓΓ μ C <U -Ρ tn C t- _Tu * « « < 5- ru 3 ru - ru >, s s as« “η ί Π 3ism S So»l£ ru5 04S NI £ g a u 0) ij ή i6 i S o z 2 I vi S « i <e i « i oi 5 ί I Λ s a’i ά I ΙΛ < i < 4 < 4 o p LcrciicaupiurcrBro co
P >>>i>>pC »>»>>( CO
lp
I I
SEP p· co 30) ro — — cMruroton —
o sS^SSSS. I
> z z z z z z z z.
•H
> c
H
39 DK 166565 B1 ^ c Q) 4J ω ft G ft o c n o ω ft H · a ω iJ 'tj 2 hi S1 ,n mfl'-eænvin'-ff'N*? o O Λ Λ C 3 £ KSNoRv-njinM^Nii Λ -n H m nPjSn N"» .¾1 ft ^ i Ή· +1 +1 +1 +t +· +1 +1 +1 +1 +1 +1 +t +1 +1 ft ,^6· lAicrviniTtetcO^'v^Btn
0 CT Μ Η H ^ fO CO ^ ^ CO
a e g o h — ----^ a o — m + co 3 g ty ft
5P ft tM
ft O <ti <v a βώιίΟΠΙΝ'· egjJ!; æ ft ft ft ft +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +l +1 +1 .* -B æ % tv m r~ r— ι\ι iS> V O tv C> r~ tft μ ft \ P ft m - i- η Λ Λ >· uf» Λ4 — |Λ c &» · Μ *-·-*- ft ~ —
ECHO
Ό O ^ C
ω ft e u -η 0 >4 ^ C *m 0) ^cOvDOCOvr^r-w^rr^wo 0) CT»r-sJtO(l) n g S )= ΟΛ £ ·Η ιΗ Μ iH C ^ 1 ft ft -O o +1 +i +1 +1 +l +1 +1 +' +1 +· +' +l +l +l to tP CH jn E C ft ft o ·— m o - iu Λ Λ ft «μ ft ^ 0) a a 3 uno^ooouno^-ovcoo H CP OH o ®~ °_ Η·ρ>Γ N O - ft o M -s u £ «_ H tj £ "b *“ +1 +1 4! +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +' +1 (D Co co ja OC +looooftoæoooo n_o
So W H CM H r-~ ft~ ft f-" ft" {£ cf ft ft·' ft" ®~ Ό *“ ft ft O) ,3 o ooooooooogooo tl) Ό—> (r, eScnnnnnnoo«« a ο» cn *—<—** ro c a ft » a s e . iiiiiiiliiiii ft i iiiiiiiliiiii rrt β βιΟ&Φ^ΟΟΦΟΟΦ^Φ U I vowounuo^nupwouoviwownwnvo φ S έέέέεέεέέ έffέε c 3 i« iiiinninn IS <11 iiiiiiiiiiiii ft w X (juuuouininwutsuo
b> (i) O fil I i I I I I I I I I I I I
C ft i Ϊ«ϊ*5!5!|ϊϊϊί?| g c i S aftf£aaa£aaS€ ft Oft tfsilllll I I I ' · ' 2 S I i!iliiiliiliiss S 9 ° a i i t i i i i i ma £, 0 ft ftftftftt-·-*-*-*-»-*— Hft 8)
C
>1 ‘ Λ Ο00000^^ΓίΜ00β»β» g g S §S8S888SS88&§ > c
M
DK 166565 B1 40 ø — c CN c O ø +J »—1 ft Μ Ή O M ft g O’—-H tu O' & λ » — — — m — — ·— q Μ ε · ♦**♦* *> 41 *1 41 41 41 41 *1 4l 4| +ι 4-1 +ι +ι 41 +i 41 +i 41 4i 41 c tynna 2 - o δ - - λ» - SSSSSfwS 2¾ g 3CCO ,_| μ M m « iu <--Sftf<^3<t9iJiniMn3ieo C (8 | O ~ 41 4 CO - " S„ “ 03 0) c. Η Ό
s (UH
S -P ^2 r-i M 4i — O eæmm« «r - σ' 93 — _ m 0(8 cn Λ *f < *- — >- -nirSir-Ouifufufvgnrjfw^T -Hg $ .øø g 01^1-1 g +1 4| 4l 41 41 *1 4l 4| *1 «I 4141 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 ^ £j ’n Ti'gæft 5 591¾¾¾ ί5ίιϊ2!!?000ϊ1'Ό0ιηιί ή
Λ ,Γ. Pr ul ί Λ Λ ifl ιηΟΝΛ'-ίΐιΝ^-ί.^βΙΛ^-ΛιΟ IU
M 4-( >; 3 «MSM ·“ — — M ^NNN (W N - - Am o θ’ · M 1 ' 4; i« æ c Μ ϋ .. Ό u — c — 2
® ti -H §C
æ o £ < 'Ί 3 o
m *r—j s nrvO\r»«TPw^N,\M iMiTJO'^^'— «βσΐ'-ιϋιηιώ»— M -H
O' 03-1030) ·“ " 0---03^ g -H t-H M t-1 c 4| *1 41 41 41 41 4| 41 41 41 4| 4l 4l 41 4! 41 41 41 41 41 41 41 41 41 ^ _j Sj E O 0) C Ό (u m lu X H rr| o ^Γ'ί^'Γ'Ζ^Γ'^'^ίίϊ O » IV O Λ - Λ 9l M PI fl ιί Λ i« 00)
03 *“(M «fiO'-Pjpfn\*1a>-pr gH
Λ * 3 4-1 -H O . m „.
0-8ΛΑ! g* -Η M +) .“ H 2 2 o. T! h £ S « “ H t R o μ o o>
J_I 3 w ^ £ ιΛ ιΛ ιΛ ΟΟΟΟΟσ'^^ΙιΛ'Λ^νΛΟΟ^Οϋ^ΟΟβΟΟ 0) U
0 S-l ϋ) -Μ ^ cT 0~ 0~ (Μ Γμ nj~ Γ»7 ί\Γ :χΓ λΓ “θ' ~ ©~ ο' Ο — — - ο" ί\Γ — " Λ £ W £ Ο C 41 41 41 41 4| 41 41 41 41 4| 41 4| 41 4| 41 41 +ί 41 41 41 41 41 41 41 41 4> >ι Εη ^ Η V Π 4Γ_4- 4. β^Ο_ «ΤΟΟΟΟΡ^ΟΟΟΟ 0) nrv CM <Μ r*f«p.p.NM»iS>n3n ηΓ θΓ~ σΓ~ οΓ" (τί“ ι»Γ 03* ©"" θ' fi~ Β 3 ^ Ν — CM CM >· 1» 3d) 10 4-) Ό
” ft $-= 8888888888888888^888^88 SJS
a ft S« ® -H · g 5 s mm” y _„ 0 0 0 a 2 “ft ΙΟ ί 03 -H a
“ æ 4 i Ό Ό M
m . is ^3 01 g, £ '£ § A A »id c m
Cc « ? * £ I “IS
δ ^ ^ η § s § § øxq ^ ^ SSSzilOSi^SiSSzSzSc £ £ m H C ° 3 0 03 j* $ * a £ ίίϊ G 11 Ίί *>·»· >·* >·>> fe % $ SS 0 “ c
X O ø-M 0>c iiiiis.o.a.i!5oQiiiE(L££iiitti£ jjC
-μ w iiiii i i ?i é'iwiiii ? ^.H ^ w M-pøo'SSSSSosSSSi^gSSSSSSoSSSSS “jj^h H 003,04-1 LLtltttUtm ILlLlLtiiLiit øøø Μ ^ — 4. — — — h-— >1-4.1-.^.^. — — 2 *“ -Η c -Η F Λ -Η Λ W , βν^νν»\ΝΝΛ^ σ' — ^*5!=?ι5λ^οΟ 00)0 , 3Λ*^ΛΜ*\ΛΐΝΝ?Κιών^ΠΠΝΝ(νΠΛΐιΑΛνν U_i irj ΐι ι ο Μ aasaæciS'iiei'ifto-ooæciS'jiæSsSoo υ > s *“ ·“ - - * •Μ >
C
Μ DK 166565 B1 41 <u
G CN C
O dJ
s £S SSHaSSsiåSSlSS
S -S r-H ^ sl'—' 41 41 4t 41 41 41 +1 +1 +1 +1 +1 41 41 +1 41 +1 ♦* ** +· ** +l *’
5. ΰ\Λ o ί £®£vDii33S S« * ^*S5o5;55§nSS
g tTUHH T2i?!nSS?3 »S n Ji g J S J ’ 2 S ^ Λ S SC C O H — ~~ g O ~ <w + æ tn
M
0) 4J „
Mm —. (ΜποβοιβοιΛ — o ifl λ £?£!?ϊ5ϋ5ϋ2ίζ®2Ε2ϊ!ή5 1-1 0(0 csi v'-S mvo'-v «s v n ►-nn»N — — «ον .§ ’5 H tu +l +l +l +l ^ +1 +l +l +l +l +l M +l +' +l +l +l +l *' +l 4-1 +l +1 41 41 I oisg sssasKSga s5 ggssSIS-Sgssjl «i m n, to
n D> · M
m BG C M O
o c ^
Jj μ -η ®®°·0·*'“®^®'ΓΓΛ<Γ
O .0 £j < ® * o r^vcrv-ovr^ NN
-J-j- Dl Λ I W Φ +1 +1 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 4t 41 +1 4< tn 73 m < m Ό O ν«ην^-5«Λ~ν m : » RS ί N%" ’
fj Q) Di G H
^ S 3G G Ή -M O
,0 ^ O (0 J3 Ai
3 -P
r-l M
0) Φ H M +J
h 5 o τίΗ “i % u Se eom«o<KM(i< oo o^o_ o__ o__ ©_ o o_onnn- dj ^ w 40 \ —' n o ~ ~ cT eT eT cf <~ rn" ρΓ πΓν n n m -Q -P JJ Q ςϊ 41 41 41 4! 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41
Eh '‘‘S'HoOOOOiSiVCBfMO© *Λ_ ©^ ©__ om sT αΓ n o" j ν' ρΓ rT n 2~zf 25Πϊ22®"ί9'ΒΝΝΰΝ ” S ·§ ~ SSSn°8SnS ®8 88RR888888 8 8® (DG DiDi — - ft jh S3
Qj O' ®
'—' S
n cn r-1 m h ns ω ϋ · Π1 Lj Λί rrt 2d.y r <\i Cg ru Cg s fvj Cg Cg Cg Cw r CP c £ = s i 2 * cg <srs s r s = 2 r* C jS2SiS i i.2z£!S i<ih
.Zj Z φ I I I O I I >» Zzll lll^rH
d ^ ^5cwJ8Ec\j»sini.Z >> o ·— cw iruw>»>*t>id? c .< rQ2c-rjcjs>»a4 *- £ rz & m u 0JO4J ω =?9^o^7-*To 'i X 0017^^11.3 •h c°Ha)M i? iil fe jsiii| i-d > Cl o) tj H £z ϋ u i ^ζζ££α.ΰίιΐϋ Λ frt u μ Λ 1 t 1 t I · t t I IW i 1*-*JllSa.ll«lll_^ ω °η^-α fi-5 I s^i 5 5 J. J« Pi ? ? PJg e ω S Sti 21« S 9 ? 9 ^ S 'V “V ‘Y 2 S S «V S S S *V ^ -η ffjsiSiiiSu ^ SSSo sssssssssxisrssssssssisii^s & •Η 5ωΛ<2 l ί ί ί ί ί L i LZ ±>1.2 ί ίί i l ί L l l i. ±.i,L ί~ 0) c >i *-r»p»irt»ææp-CB i/i «/i αβ*«ΝΝι/ι/ιο^ι/ιΛθη uj CO Cg <7« O ^ ^CDw**^wCD^«0
• ΰπ sD O OCvw’tJ V
O u ^ ^ O C3 α»ΟΟβ® C A •—^-oo©©·'- »- »- CO c c o o > 2 *" — —
•H
>
G
M
DK 166565 B1 42 0) — c <N c O <u P Ή · ft ^ p o n a rr) O « Λ C 3 jflvno' ω -n H £ Z £ c O' —.-H tJitt ™ •r1· *d +1 +1 +1 c 3-i E ·
r IM \ j3 O ^ ^ CD O
c O' 3-1 <H <—I JT Z g i X C O ΓΗ £ ^ ^
g O V1H + CO
ta I t!* - <§ o d ^ c § o o 1 ssas +· * +·
s § S S
o O' · u " ^ ιύ a: c m o o —- c ~- <D P _
>rt 3-1 *H C
m O u < <D
μ -π 3 g »*» 03 -"3 O' O'-» 1 03 03 g Η +? tu -H rH M r-t C 0 S " U ε o ej c +1+1 ·ϋ ricn ήνή Ό o _ c O' c Η E £ -h ^ ,Q KCP-HO S -f*
«2 * U
M M **"· ο) ω o o o * H S-ι P - m
w p o ^ H S
I! L O H a h 3 ^ ε +i +i +i ft Λ p o « O o o © 2 lOCQx: O C ^ ^ cn
B >4 H
O' ^
0 <N
1 0) 00 ft « m
03 ^ li S
δ & §3 g ^ g s
S ~ 2 " ~ H
»s 3 *H g *W H J:
ftJ CO fsj „_N fs,_v rsi ^ Q
j_, . IΉ I Ή I ή »
/Mt j eri I Ή i -H
Si 2 yv m w 4-j ιλ vw 4J
5 g 3 g 38 3 ’S ^ i oi i m r in p
5 _ , >»-H Cl -Η O P .H
34 CP 3-1 IZ'OiF'Oi-'O P
n mop ω o o. u o. u ^ •η β ι-ιοω J, v >, ν i, ν; ρ > § Λ 2 ^ ^ I.S 5.s 5.2 ή 5 3 .3 SS i-3¾¾ 4¾ i 3 £2^-2 ?3?3?2 s •2 S S 3 3 >>>>>> ο
CP
Μ Q
Q) W
C m ο —. ο — >1 Ο 1¾ ω .- 8 g ~sw ^ ο a *" ·“ *“ w > ζ •Η > c Μ 43 DK 166565 B1 Λ l ft tu β -P O · ft -H ft tft <H ft ft ft ^ - Λ O rd I β P ft ίη o ft -o r-) ft <v »x 0 ft — ft ft o . ., iw -ft .-i tu ft.'-- to . >-i ·*' +l 1 ft E ft P O <\j Γ0 ro iw'v-.ftO'tf+PCO CO ®
ft p Η H CO ® P
CD IX C- ft rH -—-
ft O —' ft + CO tN
ft ft ft · ft Λ ft tu ft tu ft x> o ft β ft Ϊ S £ 0 ftftft.ft ft ££&£
Oftlftftftft r- Μ ιΛ tt 1 -π Η β ft ft ft £ <£ 2 £ CN ft— ftft ~ f) Pw •ft H d) ft w >tw — +1 +1 41 +1 <U ft E ft ft ft
ft Ift \ ft U + CO SSSS
& ft P X rft rft JESvic ft H3 β ft r-1 — tN — N N — ft O— ft + CO CN ft ft T3 φ -P o g ft tft ft — o «J i ft »moniflNitnr ri *m H+ ifi F- ^ (v.'p-p-C'^fw 3 tj) ^ Q) i f d * * 1 ® ? *1 4t 4l 41 *1 41 4l 41 41 g ft E ft Λ ft >ft 0 _ _ _
ns 4-1 \ a ft c cn ft ffftfXirJCffgC
tn ft P O ft ft SC«eSlfnæftp2 SE ft ft ft ft ft JScni^rvicnScwRn _ O ^ ft I ft *
_i vU
tu ‘rf ft ft o ω CL ft ft ft —
5 ° ^ i, 4. ^ ^ -P
ft ft— , ω ·— S
. ft g ft X) ft O ft *' c <U ft ft \ ft ft C (D 3 O _j ft <u ft P o oo ft 2 o -p Kcftftft ft 2 ^ |>r-)+J CD'-’ftlft. w h m o z c ft s ft tO ^ <u w -P „
Xiraoftfto— 8¾ B
reftxjOnSlftCN ft£J Ό
Eh 0) -ft H
-C ft ft — + ω 41 4! P
<D -Η H <D · · Q . . <u ft to ft E ftÆ ft ^ S g & J.
0Hft\ftPC>-l3 - P- p tuftsoftft — CC Ό Κ β ft m ft CO ft w « 0 ^ ft I ft. — ft W Pi o , 'g -p 5 ft ft ft 2 1,3 .2, .li »c to ft oi(j-»rffif-n40pi ft
^ S— ft· fN fsj v ft fttviRjvnffiftfa O
0 ·Η H O · 4! 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 41 *P
1 '«^Usigsss SSSSSiSitS H
β WCftft ' ' ^ ' *“ *“ ”* $ XI O — ft i · & ft ft -η p > p ^ ft 0) rft <\l <N O (V O O O © β O IN O O O C\J o
XI O oOftOftC'ftOftft’ftOCvjrvjiNOtn flJ
.¾ £j 41 41 41 4' 41 41 41 4! 4l 41 41 4| 41 41 4! 4| 4| | •P g © O O β O O β ® ft ^ Λ ^ --d, ω $ c; © en ό >1 $ ~ u 03 ^ ft " " n g1 § ft ro o o o n ro o « o ^ o o £ g o « > fB — >“ . . , -p S gw g β i " " ε H H *gg£$S;£23S22S£$g£ 11 o m * 3*222232>λρ»ιλλ«λΚνν*- « n ^ o, . χε&δδδδοοοοοοοοο— w £> * al ,q .......T T "Λ '"i ^ ^ po SSSSccccccccacccc DK 166565 B1 44 i
C
Η | 0 in —s i
1 >, Ό H
>1 Gi H tO
Ή I I U-t >
Cl Cn — Cr> H I
i Bt Ό Bt 3 tn 3 c h c tn >, tu I ft I -H Gi
GI Bt H Bt Ό I
I >1 3 >, O' Ή B in f 4->. Bt
to IH I Bt C
> cn Ό cn g i I >i >i tu Bt tn O Λ! O C >i >i i tn i -rt £h
GI C H G Η I
i cn h tn ^ Bt o> c o C tu S-l I >1 I CN CCl
C Bt ϋ Bt S I
I Æ ^ G 2 G
Bt tt tt I tn >i I oa 1 tx> «si;
Et o) as cd u i I UG S UG C Bt
Bt Gi I ft I UG
O) I O' I Bl Et tN
ω tu Bt tu tu i eg
I H rt! H W <U S
C Hl Hl UG I
tn i Bi i tu ft oi C (O tU ID Η I Bl
I H CO H S (U C
Bl < I Cl Hl UG I <U I Q) H Bt t t ft H ft H 10) i tn s tn η <dw·
<U C I C I Η I
UG 10) I ft CO) ft tN m H rd tn ih
I EG HH H C ft S
tu s Cl Cl tn i Η I I ft I g CO)
H O' Bl tn Bt H IH
I Bt >i C >i O cd H
Ό C tt I H 1 Hl
Hl G 3 C ft C Bt Bl H Bt 0) Q 10
10) 0) O 0) G) 1 C
ft CO I I Bl I
ω i S3 S3 >i G
C(U O 0) OQ) tt H
ih tn Gi tn G! O
<0 S I I Bt I
H I « 3 * cn 0) 3 C 0) CNQ) CN >i 0)
IH EG GI EC GI g GI
Bt H SI SI O I
>i i tn ^ o> tn 3 t t ft cn >i cn Bi tu tn cn Gi cn c - Gi
Bi c II II tN 1 0) I H O' H 3 EC tn C '-'Bl ^ H S >t
gH Ν' C "tf C ^ GI
0 O "tf i ^ i cn i cn I H td H Bl CN O' 3 Η 0) I Bt
»0) C "CO H C
CN-G Bt I Bt I '-'l SI SG Bt G P -tf cd
S3 10) 10) ^ H
^cur-cnr-GI hC
cn gi cn i cn i i CN I 0) 3 0) C · Bt 1 tn H 0) H H Bt 0)
H >i S GI SO G CO
^ GI I I II
h i > c - tn r- 3
'3'0'LnHin>tCNCU HBtHOHU 0) GI
C oi i in i hi
• I >1 cn >.3 S G
Bt cd O >1 O 0) H
G H O GI - O
I C -I - I CN I
r~ i <n 3 cn h td 3h
cn Bt cno) II) Id HH
0)0) >i Gi >1> CO
h co o i o i o i si η ω 3 3 Bt (0 Bi >1 Bt 0)
Bttuo)>o)Gia)Gi 0) GI
ro CO O
vO vO CD CN
cn ro CN H
CD O O H
CO Η Η H
Bt Bt Bt Bt
S S S S
DK 166565 B1 45 I tabel I ses gruppe 2-forbindelser at samvirke synergistisk med to forskellige gruppe 3-forbindelser. Der ses adskillige forskellige prøver af forbindelsen, nr. 8114, sammen med forbindelserne nr. 8801 og/eller nr. 9218, hvori 5 synergisme er evident. Der undersøgtes også mange andre kombinationer af gruppe 2-forbindelser indgivet i kombination med forbindelserne nr. 8801 og/eller nr. 9218. I hvert tilfælde for gruppe 2-forbindelser, når den af den enkelte forbindelse frigjorte kendte GH lægges til den kendte GH, 10 der frigøres af den anden forbindelse indgivet alene, er resultatet langt mindre end mængden af GH, der frigøres, når de to forbindelser indgives rotten enten samtidigt eller på forskellige steder på rotten. Der ses således synergisme for alle sådanne kombinationer. Det er også klart, at den 15 iagttagne synergisme ikke er en funktion af forudgående blanding af forbindelserne, men er et resultat af deres kombinerede virkning på den GH-frigørende mekanisme, der kræver, at begge forbindelser er til stede for at udøve den bemærkelsesværdige synergistiske virkning.
20 I tabel I vises der også adskillige eksempler på forbindelser, der er strukturelt beslægtede med, men uden for definitionen af gruppe 2-forbindelserne beskrevet i teksten.
De første ni eksempler i tabel I, betegnet ved **, som alle er strukturelt beslægtede med gruppe 2-forbindelserne, ud-25 viser ingen synergistisk reaktion, når de indgives i kombination med enten forbindelse nr. 8801 eller nr. 9118. Det ses således, at den overraskende synergistiske reaktion, der iagttages ved udførelsen af den foreliggende opfindelse, ikke er et generelt fænomen, men i stedet kun opnåes med 30 specielle forbindelser som anført i teksten under definitionerne af gruppe 1-, gruppe 2- og gruppe 3-polypeptiderne.
I tabellerne II og III ses den forbedrede frigørelse af GH til blodet forårsaget af et antal forskellige tetra-, penta- og heptapeptider fra gruppe 3 i kombination med nr.
35 8114 (gruppe 2). Selv ved lave doser ses der at opnås syner gistiske reaktioner. Desuden er der i tabel III vist et DK 166565 B1 46 antal forbindelser (markeret med *), der er strukturelt beslægtede med gruppe 3-forbindelserne, men som ikke udviser en synergistisk reaktion i kombination med gruppe 1- og/eller gruppe 2-forbindelser. Disse resultater viser, at den over-5 raskende synergistiske reaktion, der iagttages ved udøvelsen af opfindelsen, kun opnås med specielle forbindelser som beskrevet i teksten.
Tabel IV viser resultaterne af at kombinere medlemmer af gruppe 1 og 2, gruppe 1 og 3 og alle tre grupper forbin-10 delser sammen. Eftersom reaktionen på trekomponent-kombina-tionen er godt over summen af de tre individuelle reaktioner, bevirker lave doser betydelige GH-reaktioner. Ved lige store doser på 3 βg (3+3+3) som vist i tabel IV skulle man forvente en frigørelse af kun nogle hundrede ng/ml frigjort GH, hvis 15 resultatet kun var additivt. Imidlertid frigør trekomponent--blandingen faktisk ca. 2000 ng/ml GH ved disse lave doseringer.
Eksempel 2. Rottevækstforsøg 20 I tabel V ses resultatet af et forsøg, hvori rotterne behandles i 10 dage med en kombination af His-DTrp-Ala-Trp--DPhe-Lys-NH2 (forbindelse nr. 8938, gruppe 2) + hGHRH (humant væksthormonfrigørende hormon; forbindelse nr. 144-NH2, gruppe 1). En gang dagligt indgives saltvand eller 10 μg af 25 hver af nr. 8938 + nr. 144-NH2 via halevenen til bevidste hunrotter. Injektionerne begynder, når rotterne er 21 dage gamle.
Tabel V. Virkning af en gang daglig i.v. behandling med nr.
30 8938 + nr. 144-NH2 på rotters legemsvægt.
TABEL V
Legemsvægt (q±SEM)
Dag Saltvand Nr. 8938 + nr. 144-NH2 35 1 40,1 ± 1,2 42,8 ± 1,1 2 42,6 ± 1,1 46,3 ± 1,2 DK 166565 B1 47 3 45,1 ± 1,2 51,0 ± 1,3* 4 49,4 ± 1,4 54,7 ± 1,3* 5 53,2 ± 1,3 60,9 ± 1,4** 6 57,5 ± 1,5 64,4 ± 1,6** 5 7 60,2 ± 1,6 68,9 ± 1,9** 8 62,8 ± 1,5 72,7 ± 1,8** 9 67,3 ± 1,8 76,9 ± 1,8** 10 72,9 ± 1,8 81,4 ± 1,9** 10 *p<0,05 **p<0,01 mod saltvandsbehandlede kontroldyr.
Forandringen i legemsvægt på 11,7% forøgelse i forhold til kontrollerne giver afgørende evidens for virkningen af 15 kombinationsbehandlingen.
Eksempel 3 - In vivo væksthorroonfricrørelsesforsøg/lam
Hunlige lam (17-22 kg) anbringes i individuelle bure i et rum med konstant temperatur på 24°C med en 12:12 timers 20 lys/mørke-cyclus. Lammene fodres med et vedligeholdelsesfoder, der indeholder 43,3% knækket kyllingsmajs, 7,1% sojabønnemel, 38,1% bomuldsfrøskaller, 8,6% melasse og 2,9% forblanding bestående af vitaminer og mineraler.
Forskellige doser af dermorphin (forbindelse nr.
25 8801) blandes med forskellige doser af forbindelse nr. 8114
og opløses i 200 μΐ 10 mM eddikesyre og fortyndes op til 5 ml med phosphatpufret saltvand (PBS). Lam katheteriseres i halsvenen. Intravenøse infusioner udføres ved anvendelse af en flerkanalsinfusionspumpe (model 600-900, Harvard Apparatus 30 Co., Inc., Dover, Mass.), indstillet på en strømhastighed på 1,36 ml pr. minut. Blodprøver tages for hver 20 minutter begyndende 1 time forud for behandlingen og fortsættende indtil 3 til 4 timer efter behandlingen. Yderligere prøver udtages ved -10 minutter, +5 minutter og +10 minutter. Blod-35 prøverne tappes og anbringes i EDTA-behandlede glas til plasmafremstilling. EDTA-behandlet plasma analyseres for GH
DK 166565 B1 48 ved anvendelse af en standard-dobbeltantistof-RIA ifølge den følgende fremgangsmåde:
Fremgangsmåde til lammevæksthormon-radioimmunanalyse 5 Reagenser
1. Phosphat/saltvands-puffer (0,15 M NaCl og 0,012 M
phosphat) (PSB): 5,14 g NaH2P04·H20 (monobasisk) og 26,6 g natriumchlo-rid sættes til 2,95 liter destilleret vand. Der til-10 dryppes 2,0 M natriumhydroxid indtil pH 7,5. Der tilsættes 3,5 ml merthiolat som konserveringsmiddel.
Det samlede rumfang bringes op til 3 liter. Blandingen opbevares ved 4°C.
15 2. Phosphat-saltvands-puf fer med 1% okseserumalbumin (PBSA):
Kommercielt tilgængelig 30%'s opløsning af okseserumalbumin (BSA) fortyndes 30 gange med phosphat/saltvands-puffer (PSB). Blandingen opbevares ved 4°C og 20 anvendes uden yderligere fortynding.
3. Fårevæksthormon-antiserum (kanin):
Opbevares frosset i fortynding 1:10 (som opnået). Arbejdsfortyndingen er 1:20.000. Der fremstilles kun 25 tilstrækkelig opløsning til 1 uge. Den opbevares ved 4 °C.
4. Fårevæksthormon fremstilles og opbevares frosset i hætteglas (2,5 μg/0,5 ml PBSA/hætteglas).
30 5. Radioioderet fårevæksthormon (ca. 10.000 cpm/100 μΐ).
6. Gede-anti-kanin-gamma-globulin (formodede kilder, Antibodies, Inc. og Cambridge Medical Diagnostics, 35 Inc.). Opbevares frosset i portioner på 1 ml.
DK 166565 B1 49 7. 6% PEG i PSB: 6,0 g polyethylenglycol 6000 afvej es og fortyndes til 100 ml i PSB (se punkt 1) . Blandingen opbevares ved 4°C.
5 8. 0,05 M EDTA: 1,9 g ethylendiamintetraeddikesyre-tetra- natriumsalt afvej es og fortyndes til 100 ml med PSB (se punkt 1). pH indstilles på 7,5 med NaOH. Blandingen opbevares ved 4°C.
10 9. Normalt kaninserum: Opbevares frosset i portioner på 1,0 ml.
10. Normalt kaninserum: EDTA (1:400) (NRS:EDTA): 0,25 ml NRS fortyndes til 100 ml med 0,05 M EDTA (se punkt 8).
15 Blandingen opbevares ved 4°C.
Analvsemetode ffor 250 alas).
1. Daa 1. Glas på 12 x 75 mm mærkes således:- Glas 1-2 (der 20 skal anvendes til at måle ikke-specifik binding af NSB) .
Glas 3-4 (skal anvendes til at måle maksimal binding B0).
Glas 5-6 (skal anvendes til at måle totale tællinger).
25 Glas 7-18 (skal anvendes til standarderne A-F).
Ned begyndelse ved glas 19 nummereres to påfølgende glas for hver kontrol eller prøve.
2. 4,5 ml PBSA sættes til 2,5 μg/0,5 ml stamopløsning af fårevæksthormon. (Koncentrationen er nu 500 ng/ml).
30 Standarder fortyndes herefter som følger: A. 0,25 ng/100 μΐ ---> D fortyndes 1/10 (100 μΐ + 900 μΐ PBSA) B. 0,5 ng/100 βΐ/ ---> E fortyndes 1/10 (100 μΐ + 900 μΐ PBSA) 35 C. 1 ng/100 μΐ ---> F fortyndes 1/10 (100 μΐ + 900 μΐ PBSA) DK 166565 B1 50 D. 2,5 ng/100 μΐ ---> stamopløsning fortyndes 1/20 (50 μΐ + 950 μΐ PBSA) E. 5 ng/100 μΐ ---> stamopløsning fortyndes 1/10 (100 μΐ + 900 μΐ PBSA) 5 F. 10 ng/100 μΐ ---> stamopløsning fortyndes 1/5 (200 μΐ + 800 μΐ PBSA) 3. Fårevæksthormon-antiserum (fortynding 1:10) fortyndes
til 1:20.000 (25 μΐ antiserum + 49,98 ml NRS/EDTA
10 1:400).
4. 200 μΐ NRS/EDTA og 500 μΐ PBSA sættes til glassene 1 og 2 (til bestemmelse af NSB).
15 5. 500 μΐ PBSA sættes til glassene 3 og 4 (til bestem melse B0) .
6. 100 μΐ af standarderne A til F, kontrollerne eller prøverne tilsættes til de følgende glas: 20 Glas nr. Standarder, kontroller eller prøver
7,8 A
9,10 B
11,12 C
13,14 D
25 15,16 E
17,18 F
Prøve Ukendt 7. 400 μΐ PBSA sættes til standarderne A til F og alle 3 0 prøverne.
8. 200 μΐ fortyndet fårevæksthormon-antiserum sættes til alle glassene undtagen NSB (1 og 2) og totale tællinger (5 og 6).
35 9. Glassene centrifugeres, tildækkes og inkuberes ved DK 166565 B1 51 40°C i 20 timer.
2 ♦ Daa 10. 100 /il radio-ioderet fårevæksthormon sættes til alle 5 glassene (ca. 10.000 cpm/100 μΐ). Glassene centrifu geres og inkuberes ved 4°C i 20 timer.
3. Dag 11. Gede-anti-kanin-gamma-globulin fortyndes til 1:10 10 eller som angivet på beholderen med PBSA. Der tilsæt tes 200 μΐ fortyndet gede-anti-kanin-gamma-globulin til alle glassene (undtagen glas nr. 5 og 6). Glassene centrifugeres og inkuberes ved stuetemperatur i 15 minutter.
15 12. 1 ml 6% PEG i PSB sættes til alle glassene (undtagen glas 5 og 6). Der centrifugeres ved 1500-1600 g i 25 minutter.
20 13. Bundfaldet tælles for radioaktivitet ved anvendelse af en LKB gamma-scintillationstæller model 1275.
Fåre-GH af ioderingskvalitet fås fra National Pituitary Center og anvendes til iodering (chloramin T-metoden) 25 og standard. Anti-fåre-GH-serum fås også fra National Pituitary Center. Resultaterne er gengivet i tabellerne VI og VII.
DK 166565 ΒΊ 52 ft h ro ο rH 0 CO 0 ΓΟ H ft æ ft ro ro
ooft ft > + n Hinoj^rcM
• 3 · 3 ο - <π
Vl Vl Vl Vl O
C ft G ft
MHO 'T O
rH 0 GO 0 ro h ft co ft ro ft 4J m ft ft » + HI O r—t r-1
0 · 3 · 3 O ' ft ft t—l I—I rH
rH Vl S-l Vl Vl ft V G ft G ft c — — <0 ro Λ α> ω — --- Λ ft ft Η ro ft sr o * 3 η ω co ω ft
Vi Vi rH ft CO ft ro ro »rcjftcoa ft - + ro co ft co ω μ
4H · 3 3 ft - rH rH U0 ft VO
+ Vi Vi Vi Vi O
-H C ft C ft ft -w γη ω e a -- — H ft. ft ft ro > ft d h C Vi rH dl O 0 H'-'ftrHftcoftr'r' ω co a co ft co + co o i co vi Λ c « O o - - cn co co ft >, tOOVlVlVlViVlftft Ό
Eh -Η 4H G ft C ft
-P ^ — O
(0 Vi +j vi ω
4-1 Ό r-' *4H
G -H ro (0
(U 4-1 rH
0 ft O 0 4J
C 0) CO ft ft Q)
Oft COft ID IT) O U0 CO ft 4J
X 0 , 2 - rH H 4->
1 4-) Vi Vi ft -H
a ft c ft g C3 tu - co I Λ 5 <ΰ tt) B Ό r' g
CD tt) ft G
ιβ S ^ a) rH rH 0 ft ft rH ft
CO ft M
3 ft 0 • Vi co
Vi ft - ft in co Ί fli Vi C — ft rH 0
•H
τ) --- Vi
4-) S
ft > æ > 0
ft CD — rH
• CO Μ E rH
XI -H \ 0 Ocooinoo <
Vi CO ft ft Η Η H H-rHft O O ft ø Eh E I ++ * ft Q — <H — DK 166565 B1 53 G1 CN ri Γ0 ri ri O <X> ril) CO Φ CO (D m „ ooa+coa+ioaa a a comco m a a co a -+^+^ ro^tnojvo d · g .pLOLnin rioori
a cn MM MM MM
Drica G a G a ri o) --- ^ ti Ό
G G
G -H — ^ ,C X! rim lO ri
DM O CO
£t O COD + vOD _ a CO a æ a * 1 a a m m 00a
Mm -G · G ' + - riCNr-rioo °g μ μ μ M m m a d G a g a a “ •h a
G
H M ^ H ri a VO ri > g 00 \ + VO D _ a a 00 a „ g _ D c i a a a 0 00 π — . g * no m a ri a · G MM hi
Eh G D G a >1 0 a ^ ^ •h a n
a g R
g m ~ 40 H O’ H a
a 0 tJ
£ + CO (D ^ (D CO Qa _ ,.
π I Qj LO o -P
»ID *· Γ' ^ fO H CL)
0 U U ID H *P
M d c a a
e a S
a g 2 1 M 'a, ¢3
G a G1 CM G
£ ri S
tn nG ri D G
g d co a rig a a „ , 01
n, «»· CNHCNCOH
M M a M
c a 111
W M
D
_ -H
a Ό a m RS ~ « > · > a ω c 00 • m,ygrG-Hooaric') d ,Q -H^D-Hgri + + + 1 j
m w a a Eh ^ I H
0 0 G^ D < a q -- ri * 54 DK 166565 B1 I tabellerne VI og VII ses det, at en gruppe 2-forbin-delse (nr. 8114) samvirker synergistisk med en gruppe 3-for-bindelse (nr. 8801) i fåret. Hvert af de viste analyseresultater er et gennemsnit af undersøgelser af to får. I hvert 5 tilfælde, når en effektiv dosis af forbindelsen indgives dyret sammen, er den resulterende mængde frigjort væksehormon langt større, end mængderne af frigjort væksthormon af nr.
8114 og nr. 8801 indgivet individuelt.
10 Eksempel 4. - In vivo væksthormonfriaørelsesforsøq (geder)
Hunlige geder (46-60 kg) , som giver mælk, holdes i individuelle bure i et rum med konstant temperatur på 24°C med en 12:12 timers lys-mørke/cyclus. Gederne fodres med et kommercielt gedefoder, der indeholder 16% råprotein, 3,25% 15 råfedt og 8% råfibre og lucernehø.
En blanding af 5,87 Mg/kg legemsvægt af forbindelse nr. 8801 og den samme mængde af forbindelse nr. 8114 opløses i 10 mM eddikesyre og bringes op til 5 ml med phosphatpufret saltvand. Geder katheteriseres i halsvenen. Intravenøse 20 infusioner med hele den phosphatpufrede saltvandsopløsning på 5 ml udføres ved anvendelse af en flerkanålsinfusionspumpe (Model 600-900, Harvard Apparatus Co., Inc., Dover, Mass.), indstillet på en strømhastighed på 1,36 ml/minut. Blod-GH-niveauer bestemmes som beskrevet i det foregående eksempel.
25 Resultaterne er gengivet i tabel VIII.
30 35 DK 166565 B1 55
TABEL VIII
Plasma-GH-koncentration (ng/ml) hos geder, der giver mælk, behandlet med forbindelse nr. 8114 (gruppe 2) + nr. 8801 (gruppe 3). hver med 5.87 uq/ka legemsvægt_ 5 GH (ng/ml)
Gennemsnit af 4 dyr
Tid (min)_i SEM_ -10 10,8 ± 0,3 0 11,8 ± 0,3 10 +5 71,4 ± 0,9 +10 70,4 ± 1,4 +20 42,4 ± 1,8 +40 16,9 ± 0,7 +60 8,5 ± 0,3 15
De forøgede niveuer af væksthormon i serum på tidspunkterne fra +5 indtil +40 minutter i sammenligning med væksthormonniveauerne i serum på tidspunkterne -10 og 0 minutter (kontrolværdi) giver en stærk bekræftelse af den 20 gavnlige virkning af indgivelsen af kombinationen af vækst-hormonfrigørende forbindelser (nr. 8114 og nr. 8801) til drøvtyggende pattedyr, der giver mælk.
Eksempel 5 - In vivo væksthormonfriqørelsesforsøq (primater) 25 Den synergistiske frigørelse af væksthormon fremkaldt af gruppe 1-, gruppe 2- og gruppe 3-forbindelser undersøges i hanlige og hunlige subhumane primater. Vægtområdet for de hunlige rhesusaber er 5,5 ± 0,3 kg, og 7,8 ± 0,5 kg for de hanlige. Hunabernes alder er 8,0 ± 1,2 år, og hanabernes er 30 8,7 ± 0,9 år. Aberne holdes på et foder af "Purina Hi Pro
Monkey Chow".
Efter faste natten over anæstetiseres dyrene mellem kl. 9.00 og 11.30 med ketaminhydrochlorid i en dosis på 10 mg pr. kg legemsvægt. I lige store doser på hver 15, 40, 35 120 eller 360 μg angives forbindelse nr. 144-NH2 (gruppe 1), forbindelse nr. 8938 (gruppe 2) og forbindelse nr. 8801 DK 166565 B1 56 (gruppe 3) til grupper i størrelsen fra 6-18 voksne han- og 6-21 hun-rhesusaber.
Blod udtages på tidspunktet 0, og de peptider, der skal undersøges, injiceres i.v. via en steril anordning 5 indsat i en saphenvene (en vene i benet). Forsøgspeptiderne opløses i 0,1% sterilt gelatine/saltvand og injiceres i et rumfang på 0,5 ml. Derpå opsamles blod ved +10 og +20 minutter injektionen via den samme vene. Alle dyr iagttages i 1 time efter injektionen.
10 Serumet får lov til at størkne og fryses, indtil det analyseres for GH. Prøverne analyseres for GH med et nuclear-immuno-humant GH- (ICN-hGH)-analysesæt fra Immuno Nuclear Corporation, Stillwater, Minnesota. Resultaterne aflæses mod hGH-sætstandarden (1,0-30 ng/ml), og passende fortyn-15 dinger udføres med analysepuffer, når det er nødvendigt.
Resultaterne er gengivet i tabellerne IX og X.
57 DK 166565 B1 o © σ* <s* © f> _ Λ ^ R ***#* ro cvj »“ f\J w Λ ^· 7 + +i +i +i +i +i +i +) +i +i +i +| +] +|
» m 8 S “ Λ S Π 2 S 5 S
u c tt) lu Μ ΙΛ i il * r- «· d o C tø N (Π Μ N N Φ O N rt P' ^ I ♦ Ϊ * * s is s - S S δ S δ S a £ δ
•H
N r Ji η (η ΛΙ Pi - - N i- N « O +1 +1 +| +1 +1 +1 +1 £! +1 +1 +1 +1 +1 Μ M DJ β li « O !D N ^ V tn ΙΛ ' m Ό m 1,5 tj j{ 01¾ (ri 3- ω in ~ ft M M +> S B 13 §SS$$S?8§£$8 •g O > ·“ « >- *“ V Q Λ x c H 2 χ;
,-) N N N
0) ·Η K S Έ
Λ Z Z Z
(βω iii EH w "ri* "ri* "ri· η 'ri' ^
0) tH rH tH
M ...
«. H M U
O’ CCS
•H 00 t—1 M 00 H O + + + m σι .π o æ
I CO O 00 CO r-) t-l H
æ · ra co . o o o O u co k oo co co c · c ro ro ro . u ...
+ m c + u M u c c c c
CN (N + CN
æ se + æ + + + Z Z ro z
HooææirHiroroiroroæ
OoOOOOOM'O'tfOOOl'ri'OOOO ro Ό ΐιυιοιο’ιίσ^βισί'ο’οι σι Z -ΡωοοεοΗοοΗοο h ro ro ro o. c............
a. wcccccccccccc n <u H ft ft rt ft g te te te te ιβ c- ·* ιβ « N (K ιΛ < OS’ ΓΜ — — — 58 DK 166565 B1
^ ιΛ CD
+l +| +| +I +1 +1 <f| +1 +1 +1 +1 +1 +1 ^ q cv tn »fi «vj +
$ |^d-2««v2æS-r-r»iG
jj o 4.^ +| +· +l +l +l +l +l i1 i1 ΐ! S i! si « § § ° Λ i S 3 2 5 8 G + g *" Ή *\ g tn ^ c Ό
•H EC CM
^ W 6 *T +1 « * 4^
^ CO *N
o +i +i +i +i +i +i +i +i +i +j · +! +J
^cvjPucowr^cMinf'^fMVr^
O
•H
-P
tu & ssssssssssss to +J «— w <-
-H P
to tu O > Q Λ p ip OJ (0 X! <« tn oi 3.
3 ^ 01 x tu P i-i fH r-i <-i I o o o
Q) C CO CO CO
•0 m co co co <0 Λ E-t ...
•p P P P
c c c Q) to + + +
H
<u CM ι-l CM CM CM
£ 33 O S S S
S CO s 2 S
tn I H H CO I I I
•H -¾1 O O Ml* *3* Ml* p mi* co co * <3· *a< *s*
'P -HCOæPrHrtrH
i c s ··«···
o PPP+PPP
CSC C C c
CM CM
SS + + + K + + + 2 2
CO CO æ I i—I 00 00 CO I 00 CO CO
rHnnnMPonronMrnnn T3 ooioo^oiovciimfloimcji •P PCOCOCOi—1C0 C0C0COH00C0G0 3 -P
ae............
ωορρρρρρρρρρρρ &i2cccececceccc ω p a >< a
Ti 3 P
*—t tji
Cd 00 CM CM CM
4J.cDcDCOcDcDU5cOrHCOi-trPtPcO S P
< aj DK 166565 B1 59 X tabellerne IX og X er det vist, at forskellige binære og ternære kombinationer af en forbindelse fra gruppe 1 (nr. 144-NH2), gruppe 2 (nr. 8938) og gruppe 3 (nr. 8801) virker synergistisk til frigørelse af væksthormon i enten 5 han- eller hun-aber. Det samlede antal dyr i hver forsøgsgruppe er angivet i den enkelte tabel.
Eksempel 6 - In vivo væksthormonf ricrørelsesforsøg (rotter)
Den synergistiske virkning af den samme kombination 10 af forbindelser fra gruppe 1, gruppe 2 og gruppe 3, som blev undersøgt i eksempel 5 for frigørelse af væksthormon i rhesusaber, undersøges igen, denne gang i han- og hunrotter.
Den i eksempel 1 beskrevne forsøgsmetode anvendes til disse forsøg. Resultaterne er gengivet i tabellerne XI og xii.
DK 166565 B1 60 -Η Ή
-fri f—ί H ri LO H O
OOOOOO
ij® III w co
0 2 0 0 0 0 0 H
•*^1 vvvvvvo
So* jj S c 2 ° -13 λ; .2 S _ _ ιΛ f« ιΛ fv æ — wn ιβ > -η _ »Λ, . _ J B o 'r o æ σ n 4 m S ^ n δ -h E a: +1 >45. Cy. Φ O'—*— (Ϊ) r- — ιΒ ιΛ Si n n N N >* « N ii
« 2; ♦'♦'Jt1,*1 +ijti +i ♦! +i _±t ^i+i+i +i +i +i +i +i +i+i +J
t-h tt E '-•-ært r*· «· *>» βι a i rt ¢. r- r\i rt rw — « *o o -¾ u v >- cvj S m m — σι in * a rtrtco η n r· in e v >» <u cn <vi fy <— in m " « æ n eo a g, c - --------(0 H* <u Π3 ii
Ό M
H
o 2 O
H to> — m2 (T) + 7 * <5 + ” 6 OJ-H -H *-· i — m o — m © + + + mop + © — m — — m .-j S« gg " -nå -s -g Ή s t I s ft 'd % s £ c w 7 oi i + +i « vo O Ol C\]
S W IH
Z Z (ti
I I
2 *nT 4-1
^ -H
i-l T-4 C
10 d d § C c c M c s + + Φ s u
CO I 00 r-l CO
_ . cn ^ m o m Ό i o -ςτ σι co σ> Ή I CO r4 CO 00 00 a · · · .
Φ M U Μ M ^4 a 2 S 2 2 2 DK 166565 Bl 61 I-i
P -H ri S
Φ P ° ° .
4J S_i *- ** I
i* S ° § ri 0 > v o Μ I g s a ΰ
5 C
^ o (U ^ B ^ * S E Q 2 > 6 S i1 7.9.319.9. 9. *1+19. 9« 9. +1 J | 4.
2 g m <— »- r« ro o fi m « w in ^ J* £? Λ! s ι-næn Sieoco 4 n ^ Jj 5 o o> K cm »-»-o KSS ft
Pc »“ OJ *“ ir1
BJ S
h;^ S
β e s 2
ω ή tn > ° © § § <3 S
g« ·£ " 1 '""SS -"28 «5 5 «5 <5 3 ri
Htno® - ^ ^ 2 p
^ Q a S
s > 1 * S s
, H W
Λ o cn g 00+1 ^ CO «3 • m
Μ OJ
s p
+ -H
β
<\1 H CM CD
æ o m g 2 CO S <1)
I .-C 00 I C
tf O ^ c ^ 00 · <u
rH 00 Μ H O
β • · * p P + u β β β
CN CM
as + + κ + s 2 C0 I CO i~C CO I 00 co t m o n -q* n
ct-J 0^ <3* P 00 P *3* P
Η CO H CD 00 00 <H CD
•y . .....
ΦΙΜ U
ft I S S z z z z z DK 166565 B1 62
Af tabellerne XI og XII ses det, at forskellige binære og tertiære kombinationer af en forbindelse fra gruppe 1 (nr. 144-NH2) , gruppe 2 (nr. 8938) og gruppe 3 (nr. 8801) virker synergistisk til frigørelse af væksthormon i enten 5 han- eller hunrotter. Hvert resultat er gennemsnittet af undersøgelser af seks rotter.
De i tabellerne IX til XII anførte data viser klart, at den synergistiske virkning af gruppe 1-forbindelsen (nr. 144-NH2), gruppe 2-forbindelsen (nr. 8938) og gruppe 3-for-10 bindeisen (nr. 8801) ikke afhænger af de enkelte undersøgte arter eller af det undersøgte dyrs køn. Tværtimod ses den synergistiske reaktion på kombinationer ifølge opfindelsen at være bredt anvendelig med hensyn til art og køn.
Forskellige doseringskombinationer af to vilkårlige 15 af eller alle tre ovennævnte peptider (dvs. nr. 144-NH2, nr. 8938 og nr. 8801) viser en dramatisk synergistisk reaktion hos både subhumane primater (både han og hun) og rotter (både han og hun).
20 Eksempel 7 - In vivo væksthormonfriqørelsesforsøq fkøer)
Fire Holstein-køer, der ikke giver mælk (gennemsnitlig legemsvægt 543 kg) , holdes udendørs på græs og bringes ind i det store dyrelaboratorium til forsøgseksperimenter i gængse bøjlestangsbindsler. Køerne fodres med hø, græs og 25 en gang dagligt 2,27 kg "Omolene" (hvede, havre, majs, sojabønne og melasse med vitaminer og spormineraler) — Purina. Køerne er i det store dyrelaboratorium og borte fra græs i 1-1,5 timer, før forsøgene begynder. Katetere indsættes i halsvenen til udtagning af blodprøver og intravenøse injek-30 tioner af peptider. 15-20 ml saltvand bringes til strømme gennem kateteret efter hver blodtagning, og et langsomt intravenøst saltvandsdrop anvendes for at hindre blodet i at størkne i kateteret. Der opsamles blodprøver på 10 ml mellem kl. 9.00 og kl. 14.00 ved -40, -30, -10, 0, +5, +10, 35 +15, +20, +25, +30, +40, +60, +90, +120, +150 og +180. Normalt saltvand med 0,1% gelatine eller peptider opløst i DK 166565 Bl 63 0,1% gelatine/saltvand injiceres intravenøst gennem kateteret til de ikke bedøvede køer på tidspunktet 0. Saltvand/-peptidet tilføres i løbet af 3 minutter i et rumfang på 5,0. Blodet får lov til at størkne og centrifugeres, og 5 serumet adskilles fra klumperne. Serumet holdes frosset indtil den dag, der fremstilles prøver til radioimmunanalyse (RIA) af væksthormon. Serum-GH måles ved RIA med reagenser tilvejebragt af NIADDK. GH-niveauerne udtrykkes i ng/ml af et okse-GH-referencepræparat, NIH-GH-B18, der er ækvivalent 10 med 3,2 IE/mg. Data anføres som gennemsnittet ± standardafvigelsen af gennemsnittet (SEM). Statistisk analyse udføres med Student's t-prøve.
t DK 166565 B1 64 i
2 tP
Π3 G
0) U
> G
•H J3 C ' I ^ rc c o © H H t—I [> o h <m o o tn a o o o cn o o 3S-i Ό ---21-- C Qj 0 O O O O O -r-t g 04 V V V V g · C\|
Μ 2 H
a) -η g —
•©.O rHt-irHi-l O-H
YD Η O Η Ο Ο O -Η Ό G
I K OOOOOO -US-iO, G > ------ a K a •Η I OOOOOO G > 3 at a h i v v v v v v a i c 4-> o o t n s-ι O tn Ή G O'
0 I—i i—l C
tn *—* i—1 H
O G r-1 g λ: o
Ό TS II C
£ o o c d h tu sancooooo © o .c o > WHtnininioa». in > -h g h
•H CO -*«·--- a 4J+J43-P
a +i o o o cn ^ a h +j >na c G K H +1+1 +1 +1 +1 +1 +1 Ο Εϋ !D k o X og r-oooooo g in a g · γ
H a5\HHacOiOOO > >S
hk a - - ω
Hg coamooi^otn g a g cn -h Η H 10 CO G 44 H C+l 4-1 x <u a h o g λ: Y ω μ © iw p ω η μ h © £ a <u h o >OMtutn Λ tn> + a a c g tn g Λ -4 -ri h non -η £ d -H S-i
g tn + + +H a^oH
G oa oro O ro o O 4J 4->i4gO
man. -r4 Η M "-S o H £ — 10 > a g tu o tn tn i c £ æ g g æ -h §. O G -Hk ΟΚΌ ta CO c cg C) ki
T> C Η 4-> Η I 8J
C · G H t|4 <3 01 >
Ή M a Ό tu +j I
1 c — c -η a
æ 4J D 4-> G C
o + M -H H Y H W — g c a c h g s
CO 00 cQ a tn 1 3 G G H
η h oo m g w a c to CN CN 10 G O tn 44 G +1
a a co d’ qi'OdGO
c m -η a • · · Ό G 4-) 4J 4-1 I 44
C C S4 G 5 -H -HOG
CCC g <3 G 4-> C O
m u in 4-)
+ + + 4-) g G g H
C 4-1 G > G II C
ro ίο ^ ^ g a g c .c c tn HHOHHHH 44 c £tng
OtMOHHHH Ό a G °G G G G
c a co co oo oo oo c coaocc
Γ71 ΰ H C
OG·..... a C^v G
-Hocsni-ii-iMki a an (m o
4JYCCCCCC in G
Di C kl
G OG
a Hao'd’inco!^ a ra DK 166565 B1 65
De i tabel XIII gengivne data viser den synergistiske reaktion hos en malkeko, der ikke giver mælk, på kombinationer af gruppe 1- + gruppe 2-forbindelser, gruppe 2- + gruppe 3-forbindelser og gruppe l- + gruppe 2- + gruppe 3-forbin-5 delser.
Claims (16)
1. Kombination til synergistisk at bevirke frigørelse af og forøgelse af niveauet af væksthormon i et dyrs blod, kendetegnet ved, at den omfatter en effektiv 5 mængde polypeptider valgt blandt mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptider, gruppe 2-polypeptider og gruppe 3-polypeptider, hvori gruppe 1-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige af de gen-10 sidigt forekommende væksthormonfrigørende hormoner og deres funktionelle ækvivalenter, hvori de nævnte polypeptider virker på pattedyrs, andre hvirvelsdyrs og krebsdyrs receptorer for væksthormonfrigørende hormoner; gruppe 2-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypep-15 tider med strukturerne: Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Gly-Tyr-NH2; Ala-His-(formyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (DTrp er formyleret på indol-nitrogenet); Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH2;
20 Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH2 (cyclisk disulfid); Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH2 (fri dithiol); DOPA-A1a-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
25 His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-HH2; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
2. Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2; Phe-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2; Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2;
2. Tyr-DAla-Phe-NH2; Tyr-DArg(N02)-Phe-NH2; Tyr-DMet(0)-Phe-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
2. Tyr-DArg-Phe-S ar-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2; Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; 25 (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2 ? Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
30 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-S er-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
2. YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X, (cyclisk disulfid); hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, og modifikationer af enhver af disse forbindel-30 ser af gruppe e) i overensstemmelse med de oven for under b), c) og d) beskrevne modifikationer; f) organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de under a), b), c), d) eller e) nævnte polypeptider af gruppe 1; 35 gruppe 2-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturerne: DK 166565 B1 His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2? His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2 ; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
2. YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLS ARKLLQDIMSR-X (lineær dithiol) og
2. Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2 ? Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2 ?
25 Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2 ? Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2; Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-ol;
30 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2 ΐ Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2; Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 35 (cyclisk disulfid)? Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (fri dithiol); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyclisk disulfid); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 5 (fri dithiol); Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
2. C = cys (L-Cystein) R = Arg (L-Arginin) Q = Gin (L-Glutamin) P = Pro (L-Prolin) L = Leu (L-Leucin)
25 M = Met (L-Methionin) S = Ser (L-Serin) N = Asn (L-Asparagin) H = His (L-Histidin) W = Trp (L-Tryptophan)
30 V = Val (L-Valin) b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med følgende aminosyreerstatninger: stilling 1 i nr. 144-148 er DTyr eller His, stilling 1 i nr. 149 er Tyr, 35 stilling 2 i nr. 144-149 er (NMe)DAla, Aib eller DAla, DK 166565 B1 stilling 3 i nr. 144-149 er DAsp, stilling 4 i nr. 144-149 er DAla, stilling 1 + 2 i nr. 144-149 er DTyr1 + DAla2; c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypep- 5 tider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; d) ethvert af det under a) , b) eller c) nævnte polypeptider, hvori den N-terminale -NH2 et erstattet med -NHCOCH3; e) fragmenter af ethvert af de under a) , b) , c) 1° eller d) nævnte polypeptider, der i det mindste indeholder aminosyreresterne i stillingerne 1--29, f) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C-ter- 15 minalen): yadaiftnsyrkvlqqlaarkllqdimsr-x, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, YS DAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X,
20 YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (lineær dithiol), og YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (cyclisk disulfid); 25 hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, og modifikationer af enhver af disse forbindelser fra gruppe f) i overensstemmelse med de ovenfor under b), c) og d) beskrevne modifikationerner; og 30 g) organiske eller uorganiske additionssalte af et hvert af de under a), b), c), d) , e) eller f) nævnte polypeptider fra gruppe 1; gruppe 2-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturerne:
35 His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH^; DK 166565 B1 Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 ? Ala-His- (formyl) DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2' (DTrp er formyleret på indol-nitrogenet)? Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH2 i 5 His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2 ? Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH2 og Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; 10 hvori Z er valgt fra gruppen bestående af alle naturligt forekommende L-aminosyrer, Met(0), DOPA og Abu, og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider; og gruppe 3-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypep-15 tider med strukturerne: Tyr-DArg-Phe-NH2; Tyr-DArg(N02)-Phe-NH2; Tyr-DMet(0)-Phe-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
2. YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE- RNQEQGAKVRL-CONH2 (oGHRH) (nr. 148) og HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-COOH (rGHRH) (nr. 149); hvori den C-terminale aminosyre har følgende 20 forkortede almene formel; R' -NH-C-
35 R< hvori hvert R* uafhængigt af hinanden betyder DK 166565 B1 den specielle aminosyrerests substituenter, f.eks. hydrogen, alkyl, aryl, amino eller syre, X betegner C-terminalgruppen og er valgt blandt -conh2, -cooh, -coor, -conrr, -ch2oh og -ch2or, 5 hvori R betyder en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatisk ring med indtil 12 carbonatomer, og hvori de anvendte forkortelser for aminosyre-resterne er i overensstemmelse med standardpeptid-10 nomenklaturen: G = Gly (Glycin) Y = Tyr (Tyrosin) I = Ile (L-Isoleucin) E = Glu (L-Glutaminsyre)
2. Kombination ifølge krav 1, kendetegnet 20 ved, at gruppe 1-polypeptiderne er valgt blandt virkårlige af polypeptiderne: a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1--44 (nummereret fra N-terminalen til C-terminalen): YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-25 SNQERGARARL-X (nr. 144), YADAIFTNSYKKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-RNQEQGARVRL-X (nr. 145), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-X (nr. 146),
30 YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE- RNQEQGAKVRL-X (nr. 148) og HADAIFTS SYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-X (nr. 149); hvori den C-terminale aminosyre har følgende for-35 kortede almene formel: DK 166565 B1 R' -NH-C-
3. Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2; Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2 ?
35 Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2; Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2; DK 166565 B1 Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2;
3. YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE- RNQEQGARVRL-X (nr. 145), DK 166565 Bl YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-X (nr. 146), YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-X (nr. 148) og 5 HADAIFTS S YRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE- RNQEQRSRFN-X (nr. 149) ; hvori den C-terminale aminosyre har følgende forkortede almene formel:
3. Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2; Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; (NMe) Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2;
35 Tyr-DArg-Phe-Sar-ol; Tyr-DAla-Phe-Sar-ol; DK 166565 B1 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2 ? Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH27 Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
3. Kombination til frigørelse af og forøgelse af niveuet af væksthormon i et dyrs blod, kendete g-10 net ved, at den omfatter en effektiv mængde polypeptider valgt blandt mindst to forskellige grupper af gruppe 1-poly-peptider, gruppe 2-polypeptider og gruppe 3-polypeptider, hvori gruppe 1-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypep-15 tider; a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-44 (nummereret fra N-terminalen til C-termina len) ; YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-20 SNQERGARARL-CONH2 (hGHRH) (nr. 144), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-RNQEQGARVRL-CONH2 (pGHRH) (nr. 145), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH2 (bGHRH) (nr. 146),
3. YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (1 ineær dithiol) og YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (cyclisk disul-35 fid), hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor DK 166565 Bl angivne betydninger, og modifikationer af enhver af disse forbindelser fra gruppe f) i overensstemmelse med de ovenfor under b), c) og d) angivne modifikationer; og 5 g) organiske eller uorganiske additionssalte af et hvert af de under a), b) , c) , d) , e) eller f) nævnte polypeptider fra gruppe 1.
3. Tyr-Ala-Gly-Thr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp- -DPhe-Lys-NH2; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-DAla-Gly-Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
35 Ala-His-XTrp*-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (*XTrp er valgt blandt gruppen bestående af alle N-monomethylerede DK 166565 B1 Trp-isomere, dvs. (NaMe)Trp, (NaMe)DTrp, (indol-NMe)-Trp og (indol-NMe)DTrp) og Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; hvori Z er valgt blandt alle naturligt forekommende L-amino-5 syrer, Met(O), DOPA og Abu; og organiske eller uorganiske additionssalte af vilkårlige af de nævnte polypeptider fra gruppe 2; og gruppe 3-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige af poly-peptiderne med strukturerne:
4. Kombination til frigørelse af og forøgelse af niveauet af væksthormon i et pattedyrs blod, kendetegnet ved, at den omfatter en effektiv mængde polypeptider valgt blandt mindst to forskellige grupper af gruppe 20 1-polypeptider, gruppe 2-polypeptider og gruppe 3-polypep-tider, hvori gruppe 1-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige af poly-peptiderne: 25 a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-44 (nummereret fra N-terminalen til c-ter-minalen): YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-SNQERGARARL-CONH2 (hGHRH) (nr. 144),
30 YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE- RNQEQGARVRL-CONH2 (pGHRH) (nr. 145), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH2 (bGHRH) (nr. 146), YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE-35 RNQEQGAKVRL-CONH2 (oGHRH) (nr. 148) og HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE- DK 166565 B1 RNQEQRSRFN -COOH (rGHRH) (nr. 149); hvori den C-terminale aminosyre har følgende forkortede almene formel i* 5 -NH-C- hvori 10 hvert R’ uafhængigt af hinanden betyder sub- stituenterne i den specielle aminosyrerest, f.eks. hydrogen, alkyl, aryl, amino eller syre, X betegner den C-terminale gruppe og er valgt blandt -CONH2, -COOH, -COOR, -CONRR, -CH20H og 15 -ch2or, hvori R betyder en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatisk ring med indtil 12 carbonatomer , og hvori forkortelserne for arainosyreresterne 20 er i overensstemmelse med standardpeptidnomen klaturen: G = Gly (Glycin) Y = Tyr (Tyrosin) I = Ile (L-Isoleucin)
25 E = Glu (L-Glutaminsyre) T = Thr (L-Threonin) F = Phe (L-Phenylalanin) A = Ala (L-Alanin) K = Lys (L-Lysin)
30 D = Asp (L-Asparaginsyre) C = Cys (L-Cystein) R = Arg (L-Arginin) Q = Gin (L-Glutamin) P = Pro (L-Prolin)
35 L = Leu (L-Leucin) M = Met (L-Methionin) DK 166565 B1 S = Ser (L-Serin) N = Asn (L-Asparagin) H = His (L-Histidin) W = Trp (L-Tryptophan)
5 Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
5 C = Cys (L-Cystein) R = Arg (L-Arginin) Q = Gin (L-Glutamin) P = Pro (L-Prolin) L = Leu (L-Leucin)
5 Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly--NH2; Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2 ? Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (cyclisk disulfid);
5 I -NH-C- R' hvori 10 hvert R1 uafhængigt af hinanden betyder den spe cielle aminosyrerests substituenter, f.eks. hydrogen, alkyl, aryl, amino eller syre, X betegner C-terminalgruppen og er valgt blandt -CONH2, -COOH, -COOR, -CONRR, -CH2OH, og -CH2OR, 15 hvori R betyder en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatisk ring med indtil 12 carbonatomer, og hvori de anvendte forkortelser for aminosyre-resterne er i overensstemmelse med standardpep- 20 tidnomenklaturen: G = Gly (Glycin) Y = Tyr (Tyrosin) I = Ile (L-Isoleucin) E = Glu (L-Glutaminsyre)
25 T = Thr (L-Threonin) F = Phe (L-Phenylalanin) A = Ala (L-Alanin) K = Lys (L-Ly s in) D = Asp (L-Asparaginsyre)
30 C = Cys (L-Cystein) R - Arg (L-Arginin) Q = Gin (L-Glutamin) P = Pro (L-Prolin) L = Leu (L-Leucin)
35 M = Met (L-Methionin) S = Ser (L-Serin) DK 166565 B1 N = Asn (L-Asparagin) H = His (L-Histidin) W = Trp (L-Tryptophan) V = Val (L-Valin) 5 b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med følgende aminosyreerstatninger: stilling 1 i nr. 144-148 er DTyr eller His, stilling 1 i nr. 149 er Tyr, stilling 2 i nr. 144-149 er (NMe)DAla, Aib eller 10 DAla, stilling 3 i nr. 144-149 er DAsp, stiling 4 i nr. 144-149 er DAla, stilling 1 + 2 i nr. 144-149 er DTyr1 + DAla2; c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypep- 15 tider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; d) ethvert af det under a) , b) eller c) nævnte polypeptider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet med -NHCOCH3; e) fragmenter af ethvert af de under a) , b) , c) 20 eller d) nævnte polypeptider, der i det mindste indeholder aminosyreresterne i stillingerne 1--29, f) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C-ter- 25 minalen): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNS YRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, YS DAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X,
30 YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (lineær dithiol), og YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (cyclisk disulfid); 35 hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, DK 166565 B1 og modifikationer af enhver af disse forbindelser fra gruppe f) i overensstemmelse med de ovenfor under b) , c) og d) beskrevne modifikationerner; og g) organiske eller uorganiske additionssalte af et-5 hvert af de under a), b) , c) , d), e) eller f) nævnte polypeptider fra gruppe 1; gruppe 2-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturerne: His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
5 M = Met (L-Methionin) S = Ser (L-Serin) N = Asn (L-Asparagin) H = His (L-Histidin) W = Trp (L-Tryptophan)
5 Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; Tyr-DAla-Gly- (NMe) Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar;
5 Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys“NH2; Tyr-DAla-Gly-Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2? Ala-His-XTrp*-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (*XTrp er valgt blandt gruppen bestående af alle N-monomethylerede 10 Trp-isomere, dvs. (NaMe)Trp, (NaMe) DTrp, (indol-NMe)- Trp og (indol-NMe) DTrp) og Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2? hvori Z er valgt blandt alle naturligt forekommende L-amino-syrer, Met(O) , DOPA og Abu; 15 og organiske eller uorganiske additionssalte af vilkårlige af de nævnte polypeptider fra gruppe 2; og gruppe 3-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige af poly-peptiderne med strukturerne: Tyr-DArg-Phe-NH2;
5. Kombination ifølge ethvert af kravene 1-4, ken detegnet ved, at den omfatter en forbindelse fra DK 166565 B1 hver af gruppe 1-polypeptiderne og gruppe 2-polypeptiderne.
5 Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; hvori Z er valgt blandt Ala, Val, DOPA, Trp, Met, Lys, Asp, Met(O), Lfeu, Abi og Arg, og 10 organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 2; og gruppe 3-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturen: Tyr-DArg-Phe-NH2;
5 V = Val (L-Valin) b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypeptider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet 10 med -NHCOCH3; d) fragmenter af ethvert af de under a), b) eller c) nævnte polypeptider, der i det mindste indeholder aminosyreresterne i stillingerne 1-29, og 15 e) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til c-ter-minalen); YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X,
5 R' hvori R* uafhængigt af hinanden betyder substituenterne i den specielle aminosyrerest, f.eks. hydrogen, 10 alkyl, aryl, amino eller syre, X betegner den C-terminale gruppe og er valgt blandt -C0NH2, -COOH, -COOR, -CONRR, -CH2OH og -CH20R, hvori R betyder en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer 15 eller en aromatisk ring med op til 12 carbonatomer, og hvori de anvendte forkortelser for aminosyre-rester er i overensstemmelse med standard-peptid nomenklaturen: G = Gly (Glycin)
20 Y = Tyr (Tyrosin) I = Ile (L-Isoleucin) E = Glu (L-Glutaminsyre) T = Thr (L-Threonin) F = Phe (L-Phenylalanin)
25 A = Ala (L-Alanin) K = Lys (L-Lysin) D = Asp (L-Asparaginsyre) C = Cys (L-Cystein) R = Arg (L-Arginin)
30 Q = Gin (L-Glutamin) P = Pro (L-Prolin) L = Leu (L-Leucin) M = Met (L-Methionin) S = Ser (L-Serin)
35 N = Asn (L-Asparagin) H = His (L-Histidin) DK 166565 B1 W = Trp (L-Tryptophan) V = Val (L-Valin) b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med følgende aminosyreerstatninger: 5 stilling 1 i nr. 144-148 er DTyr eller His, stilling 1 i nr. 149 er Tyr eller DHis, stilling 2 i nr. 144-149 er (NMe)DAla, Aib eller DAla, stilling 3 i nr. 144-149 er DAsp, 10 stilling 4 i nr. 144-149 er DAla, og stilling 1+2 i nr. 144-149 er DTyr1 + DAla2, DTyr1 + (NMe)DAla2 eller DTyr1 + Aib2; c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypeptider 15 med Met i stilling 27 erstattet med Nle; d) ethvert af de under a) , b) eller c) nævnte polypeptider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet med -NHCOR, og hvori R er en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatisk ring med indtil 20 12 carbonatomer; e) fragmenter af ethvert af de under a) , b) , c) eller d) nævnte polypeptider, som i det mindste indeholder aminosyreresterne i stillingerne 1-29; f) med følgende specifikke aminosyresekvenser i stil- 25 lingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C- -terminalen): YADAIFTNS YRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X,
5 Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyclisk disulfid); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (fri dithiol); Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 ? Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2 ?
6. Kombination ifølge ethvert af kravene 1-4, k e n-detegnet ved, at den omfatter en forbindelse fra hver af gruppe 1-polypeptiderne og gruppe 3-polypeptiderne.
7. Kombination ifølge ethvert af kravene 1-4, ken detegnet ved, at den omfatter en forbindelse fra hver af gruppe 2-polypeptiderne og gruppe 3-polypeptiderne.
8. Kombination ifølge ethvert af kravene 1-4, kendetegnet ved, at den omfatter en forbindelse fra 10 hver af gruppe 1-polypeptiderne, gruppe 2-polypeptiderne og gruppe 3-polypeptiderne.
9. Fremgangsmåde til ikke-terapeutisk fremkaldeldelse af frigørelse af og forøgelse af niveauet af væksthormon i et dyrs blod, kendetegnet ved, at der indgives 15 en effektiv dosis af en kombination, der omfatter polypep-tider valgt blandt mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptider, gruppe 2-polypeptider og gruppe 3-polypep-tider, hvori gruppe 1-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige af de gen-20 sidigt forekommende væksthormonfrigørende hormoner og deres funktionelle ækvivalenter, hvori de nævnte polypeptider virker på pattedyrs, andre hvirvelsdyrs og krebsdyrs receptorer for væksthormonfrigørende hormoner; gruppe 2-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypep-25 tider med strukturerne; Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Gly-Tyr-NH2; Ala-His-(formyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (DTrp er formyleret på indol-nitrogenet); Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH2;
30 Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH2 (cyclisk disulfid); Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH2 (fri dithiol); DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
35 His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; DK 166565 B1 Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH2» Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-Ala-Gly-Thr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp--DPhe-Lys-NH2 i
10 M = Met (L-Methionin) S = Ser (L-Serin) N = Asn (L-Asparagin) H = His (L-Histidin) w = Trp (L-Tryptophan) 15 v = Val (L-Valin) b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypeptider , hvori den N-terminale -NH2 er erstattet 20 med -NHCOCH3; d) fragmenter af ethvert af de under a), b) eller c) nævnte polypeptider, der i det mindste indeholder aminosyreresterne i stillingerne 1-29, og 25 e) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C-ter-minalen): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNS YRKVLQQLIARKLLQDIMSR-X,
30 YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (lineær dithiol) og
35 YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X, (cyclisk disulfid); DK 166565 B1 hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, og modifikationer af enhver af disse forbindelser af gruppe e) i overensstemmelse med de oven-5 for under b) , c) og d) beskrevne modifikationer; f) organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de under a) , b) , c) , d) eller e) nævnte polypeptider af gruppe 1; gruppe 2-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypep-10 tider med strukturerne: His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2;
10 Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (fri dithiol); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyclisk disulfid); . Tyr-DCys-Gly-PherDCys-NH2 15 (fri dithiol); Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
20 Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 ? Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af 25 de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
10 DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Ala-His-(formyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; (DTrp er formyleret på indol-nitrogenet); Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH2 ?
10 V = Val (L-Valin) b) ethvert af de under a) nævnte polypeptider med følgende aminosyreerstatninger: stilling 1 i nr. 144-148 er DTyr eller His, stilling 1 i nr. 149 er Tyr eller DHis, 15 stilling 2 i nr. 144-149 er (NMe)DAla, Aib eller DAla, stilling 3 i nr. 144-149 er DAsp, stilling 4 i nr. 144-149 er DAla, og stilling 1 + 2 i nr. 144-149 er 20 DTyr1 + DAla2, DTyr1 + (NMe)DAla eller DTyr1 + Aib2; c) ethvert af de under a) eller b) nævnte polypeptider med Met i stilling 27 erstattet med Nle; d) ethvert af de under a), b) eller c) nævnte poly- 25 peptider, hvori den N-terminale -NH2 er erstattet med -NHC0R, og hvori R er en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatisk ring med indtil 12 carbonatomer; e) fragmenter af ethvert af de under a), b), c) eller 30 d) nævnte polypeptider, som i det mindste indehol der aminosyreresterne i stillingerne 1-29; f) med følgende specifikke aminosyresekvenser i stillingerne 1-29 (nummereret fra N-terminalen til C--terminalen); '
35 YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, DK 166565 B1 YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X , YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (1 ineær 5 dithiol) og YADAIFTNCYRKVLCQLS ARKLLQDIMSR-X (cyclisk disulfid) , hvori den C-terminale aminosyre og X har de ovenfor angivne betydninger, 10 og modifikationer af enhver af disse forbindelser fra gruppe f) i overensstemmelse med de ovenfor under b), c) og d) angivne modifikationer; og g) organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de under a), b) , c) , d), e) eller f) 15 nævnte polypeptider fra gruppe 1.
10 R' -NH-C- 15 hvori Rr uafhængigt af hinanden betyder substitu-enterne i den specielle aminosyrerest, f.eks. hydrogen, alkyl, aryl, amino eller syre, X betegner den C-terminale gruppe og er valgt 20 blandt -CONH2, -C00H, -COOR, -CONRR, -CH2OH og -CH2OR, hvori R betyder en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatisk ring med op til 12 carbonatomer, og hvori de anvendte forkortelser for aminosyre-25 rester er i overensstemmelse med standard-peptid- nomenklaturen: G = Gly (Glycin) Y = Tyr (Tyrosin) I = Ile (L-Isoleucin)
30 E = Glu (L-Glutaminsyre) T = Thr (L-Threonin) F = Phe (L-Phenylalanin) A = Ala (L-Alanin) K = Lys (L-Lysin)
35 D = Asp (L-Asparaginsyre) C = Cys (L-Cystein) DK 166565 B1 R = Arg (L-Arginin) Q = Gin (L-Glutamin) P = Pro (L-Prolin) L = Leu (L-Leucin)
10. Fremgangsmåde ifølge krav 9, kendetegnet ved, at gruppe 1-polypeptiderne er valgt blandt vil-30 kårlige af polypeptiderne: a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1--44 (nummereret fra N-terminalen til C-terminalen): YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-SNQERGARARL-X (nr. 144),
10 Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH27 Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (cyclisk disulfid)? Tyr-DCys-Phe-Gly-Dcys-NH2 (fri dithiol)? Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyclisk disulfid);
10 Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2? Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af 15 de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
10 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAla-PhG-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
10 Tyr-DArg-Phe-NH2 ? Tyr-DAla-Phe-NH2; Tyr-DArg(N02)-Phe-NH2; Tyr-DMet(O)-Phe-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
11. Fremgangsmåde til at frembringe frigørelse af og forøgelse af niveauet af væksthormon i et dyrs blod, kendetegnet ved, at der indgives en effektiv dosis af en kombination, der omfatter polypeptider valgt blandt 20 mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptider, gruppe 2-polypeptider og gruppe 3-polypeptider, hvori gruppe 1-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypeptider; 25 a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-44 (nummereret fra N-terminalen til C-termina-len) : YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-SNQERGARARL-CONH2 (hGHRH) (nr. 144),
30 YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE- RNQEQGARVRL-CONH2 (pGHRH) (nr. 145), YADAIFTNS YRKVLGQLS ARKLLQDIMNRQQGE -RNQEQGAKVRL-CONH2 (bGHRH) (nr. 146), YADAIFTNSYRKIIfiQLS ARKLLQDIMNRQQGE-35 RNQEQGAKVRL-CONH2 (oGHRH) (nr. 148) og HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE- DK 166565 B1 RNQEQRSRFN-COOH (rGHRH) (nr. 149) ? hvori den c-terminale aminosyre har følgende forkortede almene formel: R·
12. Fremgangsmåde til ikke-terapeutisk, synergistisk fremkaldelse af frigørelse af og forøgelse af niveauet af væksthormon i et pattedyrs blod, kendetegnet ved, at der indgives en effektiv dosis af en kombination af 30 mindst to forskellige grupper af gruppe 1-polypeptider, gruppe 2-polypeptider og gruppe 3-polypeptider, hvori gruppe 1-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige af poly-peptiderne: 35 a) med følgende aminosyresekvenser i stillingerne 1-44 (nummereret fra N-terminalen til C-ter- DK 166565 B1 minalen): YADAIFTNS YRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-SNQERGARARL-CONH2 (hGHRH) (nr. 144), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-5 RNQEQGARVRL~CONH2 (pGHRH) (nr. 145), YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH2 (bGHRH) (nr. 146), YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE- rnqeqgakvrl-conh2 (oghrh) (nr. 148) og 10 hadaiftssyrrilgqlyarkllheimnrqqge- RNQEQRSRFN -COOH (rGHRH) (nr. 149); hvori den O-terminale aminosyre har følgende forkortede almene formel R* 15 -NH-C- R' hvori 20 hvert R· uafhængigt af hinanden betyder sub- stituenterne i den specielle aminosyrerest, f.eks. hydrogen, alkyl, aryl, amino eller syre, X betegner den C-terminale gruppe og er valgt blandt -C0NH2, -COOH, -COOR, -CONRR, -CH2OH og 25 -CH2OR, hvori R betyder en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer eller en aromatiske ring med indtil 12 carbonatomer, og hvori forkortelserne for aminosyreresterne 30 er i overensstemmelse med standard-peptidnomen- klaturen: G = Gly (Glycin) Y = Tyr (Tyrosin) I = Ile (L-Isoleucin)
35 E = Glu (L-Glutaminsyre) T = Thr (L-Threonin) DK 166565 B1 F = Phe (L-Phenylalanin) A = Ala (L-Alanin) K = Lys (L-Lysin) D = Asp (L-Asparaginsyre)
13. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 9-12, kendetegnet ved, at kombinationen omfatter en 10 forbindelse fra hver af gruppe 1-polypeptider og gruppe 2--polypeptider.
14. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 9-12, kendetegnet ved, at kombinationen omfatter en forbindelse fra hver af gruppe 1-polypeptider og gruppe 3- 15 -polypeptider.
15. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 9-12, kendetegnet ved, at kombinationen omfatter en forbindelse fra hver af gruppe 2-polypeptider og gruppe 3--polypeptider.
15 Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; hvori Z er valgt blandt Ala, Val, DOPA, Trp, Met, Lys, Asp, Met(O), Leu, Abu og Arg, og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de 20 nævnte polypeptider fra gruppe 2; og gruppe 3-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypeptider med strukturen: Tyr-DArg-Phe-NH2 ? Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
25 Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2; Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
30 Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2; Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH2· (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
35 Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2? Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; DK 7GG56G J3 7 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2;
15 His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH2; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH2 og Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2; 20 hvori Z er valgt fra gruppen bestående af alle naturligt forekommende L-aminosyrer, Met(O), DOPA og Abu, og organiske eller uorganiske additionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider; og gruppe 3-polypeptiderne er valgt blandt vilkårlige polypep-25 tider med strukturerne: Tyr-DArg-Phe-NH2; Tyr-DArg(N02)-Phe-NH2; Tyr-DMet(O)-Phe-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
15 Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (fri dithiol); Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2» Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2 i Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
20 Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2 7 Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2 og 25 Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2, organiske eller uorganiske syreadditionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
15 Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2? Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2; Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol;
15 T = Thr (L-Threonin) F = Phe (L-Phenylalanin) A = Ala (L-Alanin) K = Lys (L-Ly s in) D = Asp (L-Asparaginsyre)
15 Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2 og Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2, og organiske eller uorganiske syreadditionssalte af ethvert af de nævnte polypeptider fra gruppe 3.
15 Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DThr-Phe-Gly-^NH2 ? Phe-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2;
20 Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2; Tyr-DArg(N02)-Phe-Gly-NH2; Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-ol;
25 Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2; Tyr-DArg-Phe-Sar-ol; Tyr-DAla-Phe-Sar-ol; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
30 Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2; Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2; Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
35 Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAla-Phe-Sar; DK 166565 B1 Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2; Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (cyclisk disulfid); Tyr-DCys-Phe-Gly-Dcys-NH2 (fri dithiol);
16. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravrene 9-12, kendetegnet ved, at kombinationen omfatter en forbindelse fra hver af gruppe 1-polypeptider, gruppe 2--polypeptider og gruppe 3-polypeptider.
Applications Claiming Priority (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US86196886A | 1986-05-12 | 1986-05-12 | |
| US86196886 | 1986-05-12 | ||
| US07/037,275 US4880778A (en) | 1986-05-12 | 1987-04-10 | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
| US3727587 | 1987-04-10 | ||
| PCT/US1987/001051 WO1987006835A1 (en) | 1986-05-12 | 1987-05-08 | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
| US8701051 | 1987-05-08 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK9888D0 DK9888D0 (da) | 1988-01-11 |
| DK9888A DK9888A (da) | 1988-01-11 |
| DK166565B1 true DK166565B1 (da) | 1993-06-14 |
Family
ID=26713979
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK009888A DK166565B1 (da) | 1986-05-12 | 1988-01-11 | Kombinationer med synergistisk virkning paa frigoerelsen af vaeksthormon og fremgangsmaader til deres anvendelse |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4880778A (da) |
| EP (1) | EP0305401B1 (da) |
| JP (1) | JPH01502586A (da) |
| AU (1) | AU600952B2 (da) |
| CA (1) | CA1309019C (da) |
| DE (1) | DE3781275T2 (da) |
| DK (1) | DK166565B1 (da) |
| ES (1) | ES2005224A6 (da) |
| IE (1) | IE60976B1 (da) |
| IL (1) | IL82499A0 (da) |
| NO (1) | NO173854C (da) |
| NZ (1) | NZ220257A (da) |
| RU (1) | RU2062618C1 (da) |
| WO (1) | WO1987006835A1 (da) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1222395B (it) * | 1987-07-30 | 1990-09-05 | Pierrel Spa | Composizione farmaceutica per somministrazione intranasale comprendente l'ormone ghrh,un agonista colinergico e/o un sale biliare |
| DE68922602T2 (de) * | 1988-01-28 | 1995-12-07 | Polygen Holding Corp | Polypeptide mit hormonwachstumsbefreiender wirkung. |
| JPH03502326A (ja) * | 1988-01-28 | 1991-05-30 | ポリゲン ホールディング コーポレイション | 成長ホルモン放出活性を有するポリペプチド化合物類 |
| WO1989010933A1 (en) * | 1988-05-11 | 1989-11-16 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| US5486505A (en) * | 1990-07-24 | 1996-01-23 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| EP0540626A1 (en) * | 1990-07-24 | 1993-05-12 | Eastman Chemical Company | Process for synthesizing peptides |
| IL98910A0 (en) * | 1990-07-24 | 1992-07-15 | Polygen Holding Corp | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity and pharmaceutical compositions containing them |
| US5663146A (en) * | 1991-08-22 | 1997-09-02 | Administrators Of The Tulane Educational Fund | Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity |
| DE69332826T2 (de) * | 1992-11-12 | 2004-01-29 | Sod Conseils Rech Applic | Opioidpeptide |
| WO1994011397A1 (en) * | 1992-11-13 | 1994-05-26 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Ghrh agonists |
| WO1994011396A1 (en) * | 1992-11-13 | 1994-05-26 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Ghrh agonists |
| US5550212A (en) * | 1993-12-17 | 1996-08-27 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Analogues of hGH-RH(1-29)NH2 having antagonistic activity |
| JPH10251296A (ja) * | 1997-03-06 | 1998-09-22 | American Cyanamid Co | ソマトスタチン拮抗薬として有用なペプチド |
| US5925618A (en) * | 1997-03-06 | 1999-07-20 | American Cyanamid Company | Peptides useful as somatostatin antagonists |
| CN1203846C (zh) | 1998-03-19 | 2005-06-01 | 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 | 高溶解性药物的双相控释递送系统和方法 |
| US6610496B1 (en) * | 1998-07-08 | 2003-08-26 | University Of Maryland, College Park | Prediction of growth performance and composition in animals, including cattle, from response to growth hormone releasing hormone |
| US6145919A (en) * | 1999-02-26 | 2000-11-14 | Lear Corporation | Automatic folding armrest for sliding vehicle door |
| US20040192593A1 (en) * | 1999-07-26 | 2004-09-30 | Baylor College Of Medicine | Protease resistant ti-growth hormone releasing hormone |
| US7632803B2 (en) | 1999-10-01 | 2009-12-15 | Dmi Life Sciences, Inc. | Metal-binding compounds and uses therefor |
| US7592304B2 (en) | 1999-10-01 | 2009-09-22 | Dmi Life Sciences, Inc. | Metal-binding compounds and uses therefor |
| EP1328658A2 (en) * | 2000-06-22 | 2003-07-23 | San Diego State University Foundation | Recombination modulators and methods for their production and use |
| CU23016A1 (es) * | 2002-01-24 | 2005-01-25 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Método para la estimulación del crecimiento y resimétodo para la estimulación del crecimiento y resistencia a enfermedades en organismos acuáticos y fstencia a enfermedades en organismos acuáticos y formulación veterinaria ormulación veterinaria |
| US8536120B2 (en) * | 2006-04-28 | 2013-09-17 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Ghrelin/growth hormone releasing peptide/growth hormone secretatogue receptor antagonists and uses thereof |
| CA2677045C (en) | 2007-01-31 | 2016-10-18 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized p53 peptides and uses thereof |
| AU2008232709C1 (en) | 2007-03-28 | 2015-01-15 | President And Fellows Of Harvard College | Stitched polypeptides |
| US9724381B2 (en) | 2009-05-12 | 2017-08-08 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Methods of inhibiting the ghrelin/growth hormone secretatogue receptor pathway and uses thereof |
| CA2804926C (en) | 2010-07-09 | 2019-01-08 | James Trinca Green | Combination immediate/delayed release delivery system for short half-life pharmaceuticals including remogliflozin |
| SI2603600T1 (sl) | 2010-08-13 | 2019-04-30 | Aileron Therapeutics, Inc. | Peptidomimetični makrocikli |
| TWI643868B (zh) | 2011-10-18 | 2018-12-11 | 艾利倫治療公司 | 擬肽巨環化合物 |
| KR102112373B1 (ko) | 2012-02-15 | 2020-05-18 | 에일러론 테라퓨틱스 인코포레이티드 | 펩티드모방체 마크로사이클 |
| US8987414B2 (en) | 2012-02-15 | 2015-03-24 | Aileron Therapeutics, Inc. | Triazole-crosslinked and thioether-crosslinked peptidomimetic macrocycles |
| AU2013337388B2 (en) | 2012-11-01 | 2018-08-02 | Aileron Therapeutics, Inc. | Disubstituted amino acids and methods of preparation and use thereof |
| WO2016049359A1 (en) | 2014-09-24 | 2016-03-31 | Aileron Therapeutics, Inc. | Peptidomimetic macrocycles and uses thereof |
| MX2017011834A (es) | 2015-03-20 | 2018-04-11 | Aileron Therapeutics Inc | Macrociclos peptidomimeticos y usos de los mismos. |
Family Cites Families (67)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4411890A (en) * | 1981-04-14 | 1983-10-25 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4372884A (en) * | 1975-08-06 | 1983-02-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Pharmaceutically active peptides |
| US4061626A (en) * | 1976-04-29 | 1977-12-06 | Eli Lilly And Company | Somatostatin analogs and intermediates thereto |
| US4105603A (en) * | 1977-03-28 | 1978-08-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Peptides which effect release of hormones |
| US4127523A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel undecapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said undecapeptides |
| US4127540A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel derivatives of δ-endorphins, intermediates therefor, and compositions and methods employing said derivatives |
| US4127534A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel tripeptides, intermediates therefor and pharmaceutical compositions and methods employing said tripeptides |
| US4127531A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel hexapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said hexapeptides |
| US4127530A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel heneicosapeptides, intermediates therefor and pharmaceutical compositions and methods employing said heneicosapeptides |
| US4127532A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel heptapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said heptapeptides |
| US4127529A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel eicosapeptides, intermediates therefor and pharmaceutical compositions and methods employing said eicosapeptides |
| US4127524A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel dodecapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said dodecapeptides |
| US4127541A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel decapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said decapeptides |
| US4127538A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel pentacosapeptides, intermediates therefor and pharmaceutical compositions and methods employing said pentacosapeptides |
| US4127525A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel tridecapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said tridecapeptides |
| US4127536A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel tricosapeptides, intermediates therefor and pharmaceutical compositions and methods employing said tricosapeptides |
| US4312857A (en) * | 1977-06-16 | 1982-01-26 | The United States Of America As Represented By The Veterans Administration | Novel derivatives of beta-endorphin, intermediates therefor and compositions and methods employing said derivatives |
| US4127517A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel docosapeptides, intermediates therefore and pharmaceutical compositions and methods employing said docosapeptides |
| US4127527A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel pentadecapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said pentadecapeptides |
| US4139504A (en) * | 1977-06-16 | 1979-02-13 | Coy David Howard | Novel nonapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said nonapeptides |
| US4127519A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Octadecapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said octadecapeptides |
| US4127539A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel hexacosapeptides, intermediates therefore and pharmaceutical compositions and methods employing said hexacosapeptides |
| US4127522A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel triacontapeptides, intermediates therefor and pharmaceutical compositions and methods employing said triacontapeptides |
| US4127520A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel nonadecapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said nonadecapeptides |
| US4127535A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel dipeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said dipeptides |
| US4127518A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel derivatives of gamma-endorphins, intermediates therefor, and compositions and methods employing said derivatives |
| US4127526A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel tetradecapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said tetradecapeptides |
| US4127528A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel derivatives of alpha-endorphin, intermediates therefor and compositions and methods employing said derivatives |
| US4127521A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel octacosapeptides, intermediates therefor and pharmaceutical compositions and methods employing said octacosapeptides |
| US4127537A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel tetracosapeptides, intermediates therefor and pharmaceutical compositions and methods employing said tetracosapeptides |
| US4127533A (en) * | 1977-06-16 | 1978-11-28 | Coy David Howard | Novel octapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said octapeptides |
| US4211693A (en) * | 1977-09-20 | 1980-07-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Peptides with para-substituted phenylalanine |
| US4178284A (en) * | 1978-12-11 | 1979-12-11 | American Home Products Corporation | Octapeptides |
| US4223019A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4223021A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228157A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228156A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228155A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228158A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4223020A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4226857A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-07 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4224316A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-23 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| NL8005121A (nl) * | 1979-09-20 | 1981-03-24 | Erba Farmitalia | Biologisch actieve peptiden. |
| US4316891A (en) * | 1980-06-14 | 1982-02-23 | The Salk Institute For Biological Studies | Extended N-terminal somatostatin |
| US4393050A (en) * | 1981-04-29 | 1983-07-12 | The Salk Institute For Biological Studies | Analogs of extended N-terminal somatostatin |
| US4410513A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4410512A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Combinations having synergistic pituitary growth hormone releasing activity |
| US4428942A (en) * | 1982-05-17 | 1984-01-31 | The Salk Institute For Biological Studies | Analogs of somatostatin |
| US4517181A (en) * | 1982-09-15 | 1985-05-14 | The Salk Institute For Biological Studies | Mammalian PGRF |
| US4595676A (en) * | 1983-04-26 | 1986-06-17 | The Salk Institute For Biological Studies | Rat hypothalamic GRF |
| US4563352A (en) * | 1982-10-04 | 1986-01-07 | The Salk Institute For Biological Studies | Human pancreatic GRF |
| US4529595A (en) * | 1983-01-13 | 1985-07-16 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF Analogs |
| US4491541A (en) * | 1982-11-10 | 1985-01-01 | Farmitalia Carlo Erba | Peptides |
| US4518586A (en) * | 1983-01-13 | 1985-05-21 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF Analogs III |
| US4505897A (en) * | 1983-04-18 | 1985-03-19 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Cyclic pentapeptides displaying somatostatin antagonism and method of treatment of mammals therewith |
| US4508711A (en) * | 1983-04-18 | 1985-04-02 | American Cyanamid Company | Cyclic pentapeptide displaying somatostatin antagonism and method of treatment of mammals therewith |
| US4628043A (en) * | 1983-04-26 | 1986-12-09 | The Salk Institute For Biological Studies | Hypothalamic GRF agonists |
| US4610976A (en) * | 1983-08-29 | 1986-09-09 | The Salk Institute For Biological Studies | Porcine GRF |
| US4585756A (en) * | 1983-10-12 | 1986-04-29 | The Salk Institute For Biological Studies | Bovine GRF |
| US4605643A (en) * | 1984-03-02 | 1986-08-12 | The Salk Institute For Biological Studies | Ovine GRF |
| PT79094B (en) * | 1983-08-29 | 1986-08-14 | Salk Inst For Biological Studi | Grf analogs |
| US4626523A (en) * | 1983-09-13 | 1986-12-02 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF analogs II |
| US4617149A (en) * | 1983-09-21 | 1986-10-14 | Eli Lilly And Company | Growth hormone release factor analogs |
| US4528190A (en) * | 1983-10-25 | 1985-07-09 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF Analogs IV |
| US4562175A (en) * | 1984-02-03 | 1985-12-31 | Ding Chang | Synthetic peptides |
| US4649131A (en) * | 1984-09-24 | 1987-03-10 | Hoffmann-La Roche Inc. | Growth hormone releasing factor analogs |
| US4622312A (en) * | 1984-09-24 | 1986-11-11 | Hoffmann-La Roche Inc. | Growth hormone releasing factor analogs |
-
1987
- 1987-04-10 US US07/037,275 patent/US4880778A/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-05-08 EP EP87903577A patent/EP0305401B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-05-08 DE DE8787903577T patent/DE3781275T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1987-05-08 CA CA000536667A patent/CA1309019C/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-05-08 AU AU74332/87A patent/AU600952B2/en not_active Ceased
- 1987-05-08 RU SU874613093A patent/RU2062618C1/ru active
- 1987-05-08 JP JP62503091A patent/JPH01502586A/ja active Pending
- 1987-05-08 WO PCT/US1987/001051 patent/WO1987006835A1/en active IP Right Grant
- 1987-05-11 NZ NZ220257A patent/NZ220257A/en unknown
- 1987-05-12 IE IE123187A patent/IE60976B1/en not_active IP Right Cessation
- 1987-05-12 IL IL82499A patent/IL82499A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1987-05-12 ES ES8701425A patent/ES2005224A6/es not_active Expired
-
1988
- 1988-01-11 NO NO880090A patent/NO173854C/no unknown
- 1988-01-11 DK DK009888A patent/DK166565B1/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL82499A0 (en) | 1987-11-30 |
| WO1987006835A1 (en) | 1987-11-19 |
| DE3781275T2 (de) | 1993-01-07 |
| AU7433287A (en) | 1987-12-01 |
| CA1309019C (en) | 1992-10-20 |
| IE871231L (en) | 1987-11-12 |
| AU600952B2 (en) | 1990-08-30 |
| NO880090D0 (no) | 1988-01-11 |
| DE3781275D1 (de) | 1992-09-24 |
| IE60976B1 (en) | 1994-09-07 |
| DK9888D0 (da) | 1988-01-11 |
| NO880090L (no) | 1988-01-11 |
| NZ220257A (en) | 1990-01-29 |
| JPH01502586A (ja) | 1989-09-07 |
| EP0305401A1 (en) | 1989-03-08 |
| RU2062618C1 (ru) | 1996-06-27 |
| NO173854C (no) | 1994-02-16 |
| EP0305401B1 (en) | 1992-08-19 |
| DK9888A (da) | 1988-01-11 |
| ES2005224A6 (es) | 1989-03-01 |
| NO173854B (no) | 1993-11-08 |
| US4880778A (en) | 1989-11-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK166565B1 (da) | Kombinationer med synergistisk virkning paa frigoerelsen af vaeksthormon og fremgangsmaader til deres anvendelse | |
| AU606736B2 (en) | Growth hormone releasing hormone (receptor) agonists | |
| EP0400051B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
| EP0398961B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
| Nicoll et al. | Structural features of prolactins and growth hormones that can be related to their biological properties | |
| AU662731B2 (en) | Growth hormone releasing factor analogs | |
| EP0417165B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
| RU2235099C2 (ru) | Антагонистические аналоги рилизинг-гормона гормона роста (gh-rh), ингибирующие инсулиноподобные факторы роста (igf-i и-ii) | |
| JPH0786120B2 (ja) | ポリペプチド | |
| US8143374B2 (en) | Polypeptide derivatives of parathyroid hormone (PTH) | |
| Lefrançois et al. | Identification of receptor-binding pharmacophores of growth-hormone-releasing factor in rat adenopituitary | |
| CZ85393A3 (en) | Stabilized active analogs of growth hormone releasing factors |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B1 | Patent granted (law 1993) | ||
| PBP | Patent lapsed |