DK155934B

DK155934B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af cis-bicyclo-oe3.3.0aaoctanderivater

Info

Publication number: DK155934B
Application number: DK513982A
Authority: DK
Inventors: Horst Boehlke; Gerriet Loschen; Gudrun Michel; Bernd Mueller
Original assignee: Gruenenthal Gmbh
Priority date: 1981-11-21
Filing date: 1982-11-18
Publication date: 1989-06-05
Also published as: PL137185B1; DD207196A5; SU1225482A3; DE3262233D1; AU556560B2; PT75694A; GR77643B; YU42604B; PL239099A1; IE53785B1; EP0080061A1; JPH0336821B2; DE3146278A1; EP0080061B1; HK40488A; AU8881382A; IE822252L; DE3146278C2; DK155934C; ZA826928B

Description

DK 155934 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogi fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte cis-bicyclo[3.3.0] octanderivater med den almene formel I: ho""^C-X ch ^ \ H COOR, / 1 C=C (I) 1 o H XC-R0 /\2

H ^-OH

hvor phenylgruppen med hensyn til dobbeltbindingen udviser EZ- eller E-konfiguration, og der véd det 15 gruppen R2 bærende C-atom foreligger RS- eller S- konfiguration, og hvor er et hydrogenatom, en ligekædet eller forgrenet al-kylgruppe med 1-4 C-atomer eller en farmaceutisk ac-20 ceptabel kation, og R2 er en cyclohexylgruppe, en 4-methylcyclohexylgruppe eller en 1-adamantylgruppe med strukturen: R3 R5 30 hvor R3, R^ og R5 er ens eller forskellige og er hydrogen eller methyl, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav 1's kendetegnende del anførte.

Gruppen R^ er fortrinsvis et hydrogenatom, en me-35 thyl*· eller ethylgruppe eller en natrium- eller kaliumion. Andre egnede kationer er navnlig kendt fra prostaglandin- eller prostacyclinkemien.

Gruppen R2 er fortrinsvis en gruppe: 2

DK 155934 B

-O* 5 hvor R er hydrogen eller methyl, og en særligt foretrukket gruppe repræsenteret ved R2 er en usubstitueret cyclo-hexylgruppe.

Forbindelserne med formlen I har værdifulde farmakologiske virkninger, gåledes virker de navnlig thrombo-10 cytaggregationshæmmende, men derudover også blodtryksænkende, og de er således af lignende virkningstype som for eksempel prostacyclin, men de udmærker sig sammenlignet med prostacyclin for eksempel ved en betydelig højere stabilitet.

15 Der er tidligere beskrevet kemisk relativt stabile analoge til prostacyclin, såsom carbacyclin (der ligesom forbindelserne med formlen I er afledt af cis-bicyclo-· [3.3.0]octan), men også disse forbindelser har in vivo ligesom prostacyclin kun en kort virkningsvarighed [jf.

20 f.eks. Whittle et al., Prostaglandins 19 (1980), 605-627, navnlig side 623]. Sammenlignet med disse kendte forbindelser viser forbindelserne med formlen I overraskende ikke blot en væsentlig længere varende virkning, men også en betydelig større afstand mellem de doser, der hen-25 holdsvis bevirker aggretationshæmning og bevirker blodtryksænkning. Forbindelserne med formlen I er derfor anvendelige både til sygdomstilstande, hvor der ønskes en aggregationshæmning uden ledsagende blodtryksænkning (f. eks. hyperaggregabilitet ved coronar hjertesygdom), og i 3Q højere doser ved sygdomstilstande, hvor en ledsagende karudvidende (blodtryksænkende) virkning foruden thrombo-cytaggregationshæmningen er hensigtsmæssig (f.eks. perifere arterielle lukkesygdomme);, De beskrevne virkninger kan godtgøres for eksempel gennem de nedenfor anførte 35 eksperimentelt fundne værdier.

Fra belgisk patentskrift nr. 887.721 (Eksempel 13) kendes henholdsvis E·*· og Z-formen af 1,5-inter-m-phenylen- 2,3,4-trinorcarbacyclin, dvs. af 3-(m-carboxybenzyliden)- 3

DK 155934 B

6β-(3'S-hydroxy-1Έ-octenyl)-7a-hydroxy-cis-bicyclo- [3.3.0]octan. EZ-Formen af denne forbindelse (nedenfor betegnet "Forbindelse A") er i nogle af de her beskrevne forsøg anvendt som yderligere sammenligningsforbindelse, 5 hvorved der overraskende viste sig en overlegen thrombo-cytaggregationshæmmende og blodtryksænkende virkning for forbindelserne med formlen I, navnlig dem, hvor er en cyclohexylgruppe, sammenlignet med "Forbindelse A".

Enzymet adenylatcyclase katalyserer dannelsen af 10 cyclisk 31,5'-adenosinmonophosphat (c-AMP) ud fra adeno-sin-triphosphat (ATP). Hvis adenylatcyclase i thrombocy-ter stimuleres af forbindelser, såsom prostacyclin, indtræder der en betydelig stigning af c-AMP-spejlet i thrombocyterne, hvorved en aggregation af thrombocyterne 15 modvirkes. Følgende Tabel 1 angiver stimulationsgraden for adenylatcyclase i hestethrombocyter med nogle af forbindelserne med formlen I sammenlignet med den med 5,6’-dihydroprostacyclin eller Forbindelse A udløste effekt; 20

Tabel I

. Forbindelse . EC.2:QQg..[ymo.l/l.]. .Relativ virkning 5,6-Dihydro- 25 prostacyclin 15,0 1,0

Forbindelse A 0,40 37,5

Eksempel le 0,15 100,0

Eksempel 2 0,13 115,4

Eksempel 3e 0,18 83,3 30 --- *Den dosis, der bevirker 3-dobbelt stimulering af c-AMP-dannelse ud fra ATP.

Den af arachidonsyre in vitro bevirkede aggregation af humanthrombocyter kan for eksempel hindres af pro-35 stacyclin. Nedenstående Tabel II angiver IC^-værdien (dvs. den koncentration, der under forsøgsbetingelserne bevirker en 50% hæmning af thrombocytaggregationen) og‘ den på basis af virkningen af prostacyclin beregnede relative virkning for nogle kendte forbindelser samt for 4

DK 155934B

produkterne fra eksemplerne le og 2:

Tabel II

5 Forbindelse IC^q Relativ virkning

Prostacyclin 0,0078 1,0 5,6-Dihydro- prostacyclin 0,18 0,043

Forbindelse A 0,12 0,065 ^ Eksempel le 0,08 0,098

Eksempel 2 0,07 0,11 I denne sammenhæng skal bemærkes, at Whittle et al.

15 (loc. cit., side 611) for carbacyclin fandt, at dette som inhibitor for thrombocytaggregation in vitro ved den af arachidonsyre inducerede aggregation kun viste en virkning på 0,02 gange prostacyclinvirkningen.

Tabel III angiver virkningen af nogle forbindelser 20 over for den ADP-inducerede thrombocytopeni in vivo på narkotiserede rotter (urethannarkose) ved intravenøs anvendelse af forsøgsforbindelserne.

Tabel III

25 )__i_ . Forbindelse . Relativ virkning

Dihydroprosta- cyclin 1,0

Forbindelse A.....0,1 ^ Eksempel le 1,0

Eksempel 2 1,0

Af tabellerne I-III fremgår den overlegne thrombocyt-

35 aggregationshæmmende virkning af forbindelserne med formlen I i forhold til forbindelse A. Son allerede nævnt virker disse forbindelser imidlertid først ved højere dosering blodtryksænkende, således son det fremgår af tabellerne IVa og IVb (hvori ED2Q

DK 155934B

5 er den dosis, der bevirker en sænkning af det diastoli-ske blodtryk på 20 mm Hg):

Tabel IVa 5 Blodtryksænkende virkning på voksne, spontant hypertone rotter (måling over permanent kateter, intravenøs anvendelse af forsøgsforbindelserne):

Forbindelse EJD20' Relativ virkning 5,6-Dihydro- prostacyclin 0,005 1,0

Forbindelse A 1,9 0,003

Eksempel le 0,073 0,068

Eksempel 2 0,094 0,053 15 Eksempel 3 e >1,0 . .... < 0,005

Tabel IVb

Blodtryksænkende virkning på med pentobarbital 20 narkotiserede rotter (intravenøs anvendelse af . forsøgsforbindelserne):

Forbindelse ED20 . Relativ virkning

Prostacyclin 0,16 1,0 25 Eksempel. 2...........5,39 . 0,03

Det ses, at forbindelserne med formlen I har overlegen blodtryksænkende virkning i forhold til for-30 bindelse A.

Prostacyclin og carbacyclin bliver in vivo hurtigt omsat til uvirksomme produkter og viser derfor kun en meget kort virkningsvarighed. Sammenlignet hermed virker forbindelserne med formlen I betydeligt 35 længere, hvilket fremgår af følgende tabel: 6

DK 155934 B

Tabel V

Efter intravenøs anvendelse af en supramaksimal hypo tensiv dosis (1 mg/kg). på med pentobarbital narkotiserede rotter fandtes følgende nedtrap-5 ningskarakteristik for den blodtryksænkende virk ning;

Forbindelse Nedtrapningskvote Halveringstid for for blodtryksæn- blodtryksænkende ..............kende, virkning. . . . virkning.......

1Q -----

Prostacyclin 11,0%/min« 5,89 min.

Eksempel. 2.........2.,.6.%./min......... .2.5.,.9.6. min.

Heraf fremgår, at produktet fra Eksempel 2 virker 15 ca. 5 gange længere end prostacyclin. Også hvad angår den thrombocytaggregationshæmmende virkning kunne den væsentlig længere virkningsvarighed for produktet fra Eksempel 2 påvises eksperimentelt. Hertil blev forbindelsen i en dosis på 4,64 mg/kg indgivet oralt på ure-20 than-narkotiserede rotter,' og derefter bestemtes tidsforløbet for den thrombocytaggregationshæmmende virkning (ADP-aggregation in vivo, måleparameter: ADP-induceret sænkning af thrombocyttallet, målt med Technicon Auto-counterl. Følgende tabel angiver den procentuelle aggre-25 gationshæmning på de forskellige måletidspunkter:

Tid efter anvendelse (min,I

..................3.0......6.0. . ' . . 1.50.....

. %. Aggr.e.g.ationshæmning. . . .3.8......2.6.......2.2.....

30 -—:-—---

Efter oral indgift kunne der således observeres en i hvert fald over 2,5 timer varende udpræget thrombocytaggregationshæmmende virkning af produktet fra Eksempel 35 2, mens det for eksempel for prostacyclin er kendt, at det er uvirksomt efter oral anvendelse.

DK 155934 B

7

Da forbindelserne med formlen I ikke blot udmærker sig ved overraskende værdifulde biologiske egenskaber, men også ved god kemisk stabilitet, egner de sig både til parenteral og til oral anvendelse til hæmning af 5 thrombocytaggregation hos mennesker, og således til forebyggelse og behandling af sygdomstilstande, hvor thrombocytaggregation og/eller en hyperaggregabilitet patogenetisk er af betydning. Sådanne sygdomsbilleder er for eksempel arterielle thromboser ved endothellæsioner, 10 atherosclerose, hæmostatiske arterielle og venøse thromboser samt myocardinfarkt. På grund af deres virkning på blodtrykket kommer forbindelserne med formlen I også i betragtning til behandling af pulmonale og systemiske højtryk. De hidtil ukendte forbindelser kan også med for-15 del anvendes til formindskelse af aggregabiliteten ved ekstrakorporale blodkredsløb (kunstig nyre, hjerte-lunge-maskiner osv,)., hvor forbindelserne sættes til patientblodet i mikromolære koncentrationer.

Forbindelserne med formlen I bevirker endvidere en 2Q formindskelse af mavesyr©sekretionen. De kommer derfor også i betragtning til behandling af sygdomme med forhøjet mavesyresekretidn, såsom mave’- og tarimilcus, men også til behandling af ulcussygdomme af anden art, såsom anti-phlogisticaulcus.

25 Forbindelserne med formlen I anvendes derfor til fremstilling af lægemidler, der som virksomt stof indeholder én eller flere af forbindelserne. Indholdet af virksomt stof pr♦enkeltdosis ligger på 0,01-50 mg, nemlig ved præparatformer til parenteral anvendelse på 0,01-30 10 mg og ved præparater til oral anvendelse på 0,1-50 mg.

Lægemidler til parenteral anvendelse kan være opløsninger eller suspensioner eller også sprayprodukter, f.eks. til intranasal anvendelse, men der kan også være tale om let rekonstituerbare tørpræparater, såsom i enkeltpakning 35 lyofiliserede natriumsalte af forbindelserne med formlen I.

Til oral anvendelse kan der være tale om tabletter, dragéer eller kapsler, hvorhos det virksomme stof eventu-

DK 155934B

8 elt kan være blandet eller forarbejdet med sædvanlige bærematerialer, tabletsprængmidler og bindemidler. Sådanne orale præparatformer kan også på sædvanlig måde være fremstillet således, at de frigiver det virksomme 5 stof forhalet for over et længere tidsrum at sikre en ensartet forsyning af patienten med det virksomme stof.

I dette tilfælde er det muligt at forhøje de ovennævnte enkeltdoser, f.eks. til 100 eller 250 mg pr.enkeltform af retardpræparatet, forudsat at frigøringshastigheden 10 er en sådan, at blodspejlet for virksomt stof ikke ligger højere end ved oral anvendelse af en ikke-retarderet præparatform,

Fremstillingen af disse lægemidler foregår på i og for sig kendt måde, idet der naturligvis ved fremstillin- 15 gen af parenteralt anvendelige præparater må sørges for sterilitet og - når de foreligger i flydende form - iso-toni.

Forbindelserne med formlen I fremstilles ifølge opfindelsen ved, at en forbindelse med den almene formel 20 II: /^'\

Rs°'° ’

c=c' (III

/ \ H C-R, 25

H OH

hvor R2 er som ovenfor defineret, og Rg er et hydrogenatom eller en under milde betingelser fraspaltelig beskyttelsesgruppe , 30 under udelukkelse af fugtighed og oxygen, i nærværelse af et aprotisk opløsningsmiddel ved temperaturer fra ca.

0°C til ca. 100°C omsættes med en forbindelse med formlen III: 35 <C6Hs)3P=CH-^\ (III) COOR^ 9

DK 155934B

hvor R.j er som ovenfor defineret, hvorefter, når Rg er forskellig fra hydrogen, beskyttelsesgruppen Rg fraspaltes, hvorpå der om nødvendigt på den vundne forbindelse med formlen I, når R^ deri er et hy-5 drogenatom, foretages forestring af carboxylgruppen til en gruppe COOR^, hvor R^ er en (C^-C^alkylgruppe, eller når R., deri er en (C^-C^)alkylgruppe, foretages forsæbning af gruppen COOR^ til en carboxylgruppe, og et vundet produkt (med R^=H), om ønsket, derefter overføres i et farmaceutisk 10 acceptabelt salt.

Foretrukne beskyttelsesgrupper repræsenteret ved Rg i formlen II er en tetrahydropyranylgruppe eller en trialkylsilylgruppe, der i alkylgrupperne ialt indeholder 3-6 C-atomer, men også for eksempel en benzoyl- el-15 ler p-phenylbenzoylgruppe og andre inden for prostaglan-dinkemien sædvanlige beskyttelsesgrupper kommer i betragtning .

Omsætningen af forbindelsen med den almene formel II med forbindelsen med formlen III foregår under omhyg-20 gelig udelukkelse af fugtighed og under en atmosfære af beskyttelsesgas (egnede beskyttelsesgasser er navnlig argon eller nitrogen), i nærværelse af indifferente, apro-tiske opløsningsmidler, såsom benzen, toluen, dimethyl-sulfoxid eller dimethylformamid ved temperaturer· fra 25 ca. 0°C til ca. 100°C, fortrinsvis i benzen og ved temperaturer fra 20°C til 60°C og hensigtsmæssigt under tilsætning af en egnet mængde af en svagt sur forbindelse, såsom thio-phenol, p-chlortriophenol eller thiocresol.

Herved vindes forbindelsen med formlen I i form af 30 en EZ-isomerblanding. Hvis R^ deri er en (C^-C^)alVylgruppe, kan gruppen COOR^, eventuelt efter forudgående isomerad-skillelse, forsæbes til en carboxylgruppe (R^ = H), hvorefter det herved vundne produkt, om ønsket, overføres i et farmaceutisk acceptabelt salt. Det er også muligt 35 først at gennemføre forsæbningen eller saltdannelsen og først derefter adskille de isomere. Hvis imidlertid er hydrogen, og der ønskes produkter med formlen I, hvor 10

DK 155934 B

er en alkylgruppe som ovenfor defineret, kan det først først vundne produkt, eventuelt efter forudgående isomer-adskillelse, forestres på sædvanlig måde.

Adskillelsen af de E- og .Z-isomere foregår fortrinsvis ved 5 hjælp af højtryksvæskechromatografi ("HPLC") på sædvanlig måde under anvendelse af for eksempel methanol/vand (80:20). som elueringsmiddel.

Phosphinalkylenerne med den almene formel III kan fremstilles ved omsætning af et på i og for sig kendt måde 10 [jf. f.eks. Houben-Weyl "Methoden der organischen Chemie", bind 5/4, Stuttgart 1960, side 337, eller R.C.Fuson et al., J.Am.Chem.Soc. 6_2 (1940) 1180] vundet phosphonium-salt med formlen: 15 (C6H5)3P®-CH2—^ ^ Hal® _ COOR1 hvor R^ er som ovenfor defineret, og Hal er f.eks. chlor 20 eller brom, med en stærk base, såsom kalium-tert.butylat, methansul-finyl-natrium, -kalium eller -lithium eller navnlig natrium-bis- (trimethylsilyl) -amid, idet der arbejdes i omhyggeligt tørrede opløsningsmidler, såsom benzen, toluen, 25 dimethylsulfoxid, hexamethylphosphorsyretriamid eller tetra-hydrofuran ved temperaturer fra 0UC'til ca. 100°C, fortrinsvis 20 til 80°C. Herved er det ikke nødvendigt at isolere forbindelserne med formlen III forud for omsætningen med forbindelsen med formlen II.

30 Fremstillingen af de udgangsforbindelser med den almene formel II, hvor Rg er hydrogen, foregår .fortrinsvis ved den nedenfor skematisk'.‘viste reaktionsfølge (idet Z i de anførte formler med undtagelse af hydrogen har samme betydning som Rg, og R2 er som ovenfor defineret):

DK 155934 B

11 z-°--<lX3 rv

CHO

{CH30)2P0-CH2-C0-R2 V V

2-°--<ιΧ3 "

CH = CH

o=c-r2

NaBHA

Ζ-°~<ΧΧ0] VII

/ CH=CH \ / 1 \h / j-j C R 2 z'X-y°] °H H0--n>0 I ' 0 VIII II (RS) Tu-ru

CH=CH CH-CH

I \ / I

H — C —R, \ H / H^C—R2 i \ / ^

OH \ / OH

HO---<^I Vo V^'y II (S)

CH =CH I

h-c-r2

0H

12

DK 155934 B

Hertil skal føjes følgende forklaringer:

Aldehydet IV med for eksempel Z = tert.butyl-di-methylsilyl, dvs. 3,3-ethylendioxy-6|3-formyl-7a-tert.bu-tyl-dimethylsilyloxy-cis-bicyclo[3.3.0]octan (Nicolaou et 5 al., J.Chem.Soc., Chem.Commun. 1978, 1067) omsættes på i og for sig kendt måde med et phosphonat med den almene formel V til en keton med den almene formel VI. Reaktionen foregår under omhyggelig udelukkelse af fugtighed og under en beskyttende atmosfære, såsom argon eller nitro-10 gen. Som opløsningsmiddel tjener f.eks. benzen, toluen, dimethoxyethan, dioxan eller tetrahydrofuran. Reaktionen foregår ved temperaturer mellem ca. -20°C og 100°C, fortrinsvis mellem 0°C og 25°C inden for et tidsrum på ca.

2-24 timer.

15 Reduktionen af de således vundne ketoforbindelser VI foregår ved omsætning med komplekse borhydrider, såsom natriumborhydrid, idet tilsætning af Cer-III-salte er fordelagtig. Reaktionen foregår mellem -40°C og 60°C, fortrinsvis mellem 0°C og 25°C.

20 Den vundne epimerblanding VII kan ved søjlechroma- tografi på silicagel 60 med en egnet elueringsmiddelblanding opdeles i henholdsvis S- og R-formen, hvoraf sidstnævnte her er uden interesse.

Fraspaltningen af beskyttelsesgrupperne, dvs. ke-25 talgruppen og den for Z foretrukne tert.butyldimethyl-silylgruppe, foregår i eddikesurt medium (iseddike/vand/ tetrahydrofuran 3:1:1) ved ca. 25°C [Corey et al., J. Amer.chem.Soc. 94, 6190 (1972), Nicolaou et al., J.Chem.

Soc., Chem.Commun. 1978, 1067], Herved vindes S-formen 30 for forbindelserne med den almene formel II.

Det er imidlertid også muligt først fra epimerblan-dingen VII at fjerne beskyttelsesgrupperne og derefter opdele epimerblandingen med den almene formel II(RS) ved søjlechromatografi, f.eks. på silicagel 60, til opnåelse 35 af den isomere II(S). Til fremstilling af 3'-RS-formen af forbindelserne med formlen I anvendes isomerblandingen II(RS) som udgangsmateriale, eventuelt efter indføring af en beskyttelsesgruppe Rg, og denne omsættes med forbindelsen med formlen III.

DK 155934 B

13

Til fremstilling af en forbindelse med formlen II, hvor gruppen Rg er en af de definerede beskyttelsesgrupper, kan for eksempel i en forbindelse med formlen VII eller VIII ethylendioxygruppen spaltes selektivt. Det er 5 imidlertid også muligt at gå frem på den måde, at en beskyttelsesgruppe Rg på sædvanlig måde indføres i en forbindelse med formlen II, hvori Rg er hydrogen.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen beskrives nærmere gennem følgende eksempler. Ved disses gennemførelse 10 blev der ikke lagt vægt på opnåelse af maksimale udbytter. Alle temperaturer er ukorrigerede.

Reaktionerne fulgtes i tyndtlagschromatogram (DC) (færdigplader, silicagel 60, E.Merck).

Til søjlechromatografien anvendtes, såfremt ikke 15 andet er angivet, silicagel 60, kornstørrelse 0,040-0,063 mm (230-400 mesh ASTM) fra Macherey-Nagel.

Blandingsforholdene for elueringsmidlet ved chroma tograf imetoden er i volumen/volumen.

Ether (hvorved der overalt skal forstås diethyl-20 ether) blev destilleret før anvendelsen i elueringsmid- delblandinger til søjlechromatografi.

1 13 H-NMR'-Spektrene blev optaget ved 60 MHz og C- NMR-spektrene ved 15,08 MHz med apparatet WP-60 fra firmaet Bruker. Den kemiske forskydning er angivet i ppm.

25

Eksempel 1 a)_ 3,3-Ethylendioxy-6p- (3 1 -oxo-3 ' -cyclohexyl-1 ’E-prope-nyl). -7 α-tert. butyl-dimethylsilyloxy-cis-bicyclo[3.3,0]-octan, 30 Almen formel VI; R2 = cyclohexyl Z = tert.butyl-dimethylsilyl.

Til en suspension af 28,3 mg natriumhydrid-disper-sion (50%’s i olie) i 15 ml absolut dimethoxyethan blev der under omrøring og under argon som beskyttelsesgas 35 ved stuetemperatur dråbevis sat en opløsning af 139 mg 2-oxo-2-cyclohexyl-ethanphosphonsyredimethylester i 2 ml absolut dimethoxyethan, og der blev omrørt 45 minutter ved stuetemperatur. Derefter blev der dråbevis tilsat en 14

DK 155934 B

opløsning af 194 mg 3,3-ethylendioxy-6fi-formyl-7a-tert.-butyldimethylsilyloxy-cis-bicyclo[3.3.OJoctan i 1 ml absolut dimethoxyethan, og der blev omrørt videre under argonbeskyttelse og ved stuetemperatur. Efter ca. tre 5 timer blev der tilsat en opløsning af 34,4 μΐ iseddike i 400 yl ether, og blandingen blev inddampet i vakuum. Den vundne, svagt gullige olie blev optaget i 10 ml ether, og den etheriske opløsning blev vasket med 5 ml mættet natriumbicarbonatopløsning samt med 5 ml mættet natrium-10 chloridopløsning og tørret over natriumsulfat, og opløsningen blev inddampet i vakuum.

Den olieagtige inddampningsrest blev renset ved søjlechromatografi. Med ether/hexan (3:2) vandtes 188 mg (73% af det teor.) af titelforbindelsen.

15 C25H42Si04: 434'702 1H-NMR (CDCI3): 6,75 (2d, IH), 6,15 (d, IH), 3,93 (s, 4H), 3,89 (s, IH), 20 0,95 (s, 9H) , 0,8 (s, 6H) .

b) 3,3-Ethylendioxy-6£-(3'S-hydroxy-3'-cyclohexyl-1Έ-propenyl)-7a-tert.butyl-dimethylsilyloxy-cis-bicyclo- [3.3.0]octan.

25 Almen formel VIII: = cyclohexyl Z = tert.butyl-dimethylsilyl.

Til en opløsning af 1,36 g af det i Eksempel la vundne produkt i 18 ml methanol blev der sat 7,8 ml af en 0,4M methanolisk Cer-III-chloridopløsning, og der blev 30 under omrøring og afkøling med is, i små portioner tilsat 118,5 mg natriumborhydrid, Efter endt tilsætning blev der omrørt i yderligere fem minutter under isafkøling og derefter henstillet ved stuetemperatur med omrøring. Efter ca, 30 minutter blev der indrørt 31 ml pH 7-puffer 35 og tilsat ca. 80 ml methylenchlorid samt 50 ml mættet kaliumnatriumtartratopløsning, og den organiske fase blev fraskilt, og den vandige fase blev ekstraheret yderligere tre gange med hver gang ca. 50 ml methylenchlorid. De samlede methylenchlo- i

DK 155934 B

15 ridopløsninger blev vasket med ca. 25 ml mættet natrium-chloridopløsning, den organiske fase blev tørret over natriumsulfat, og opløsningen blev inddampet i vakuum.

Den olieagtige inddampningsrest blev renset ved 5 søjlechromatografi. Med ether/petroleumsether (l.tl) vandtes· 516.2 mg (38% af det teor.) af titelforbindelsen, 111,4' mg (8% af det teor.) af den tilsvarende 3'R-isomere samt 472.3 mg (35% af det teor.) af 3’RS-isomerblandingen, der ved fornyet chromatografi kunne opdeles yderligere.

10 C25H44Si04: 436,718 1H-NMR (CDC13): 5,48 (m, 2H), 3,90 (s, 4H), 3,76 (m, 2H), 0,91 (s, 9H), 15 0,6 (s, 6H).

c) 6β-(3'S-Hydroxy-3'-cyclohexyl-1Έ-propenyl)-7a-hydro-xy-cis-bicyclo[3.3.0]octan-3-on.

Almen formel II: R2 = cyclohexyl.

20 Af forbindelsen vundet ifølge Eksempel lb blev 516,2 mg sat til 5 ml af en blanding af iseddike/tetra-hydrofuran/vand (3:1:1), og der blev omrørt ca. 20 timer ved stuetemperatur. (Til reaktionskontrol anvendtes som DC-elueringsmiddel ether/acetone 2:1.) Derefter blev der 25 forsigtigt tilsat 20 ml mættet natriumbicarbonatopløsning samt fast natriumbicarbonat, indtil eddikesyren var neutraliseret, hvorefter der blev ekstraheret tre gange med hver gang 10 ml methylenchlorid, de samlede methylenchlo-ridopløsninger blev vasket med 10 ml mættet natriumchlo-30 ridopløsning, den organiske fase blev tørret over natriumsulfat, og opløsningen blev inddampet i vakuum.

Den olieagtige inddampningsrest blev renset ved søjlechromatografi. Med ether/acetone (2:1) vandtes 301 mg (92% af det teor.) af titelforbindelsen som farveløs 35 olie, der ved stuetemperatur langsomt krystalliserede.

Smp.: 96-97,5°C.

16

DK 155934 B

C17H26°3: 278,395 1H-NMR (CDC13) : 5,48 (m, 20.), 3,88 (m, 20).

5 13C-NMR (methanol-d4): 222,52, 134,76, 133,78, 79.01, 78,34, 58,49, 46,63, 45,04, 44,31, 43,52, 42,43, 36,28, 30.01, 27,70, 27,21.

10 d) 3-(m-Methoxycarbonyl-benzyliden)-6β-(31S-hydroxy-31 -cyclohexyl-1 Έ-propenyl) -7a-hydroxy-cis-bicyclo [3.3 .0] octan.

Almen formel I: R^ = CH^, R2 = cyclohexyl.

15 Til en suspension af 2,141 g natrium-bis-(trime- thylsilyll-amid i 20 ml absolut benzen blev der under omrøring, ved stuetemperatur samt under udelukkelse af fugtighed og under nitrogen som beskyttelsesgas sat 5,743 g m-methoxycarbonylbenzyltriphenylphosphoniumbromid. Der 20 blev omrørt 30 minutter ved stuetemperatur og opvarmet en time til let kogning under tilbagesvaling. Der blev henstillet til afkøling til stuetemperatur, hvorefter der blev tilsat en opløsning af 224,3 mg af det i Eksempel lc vundne produkt i 5 ml absolut benzen samt 154 yl 25 thiophenol. Der blev omrørt først en time ved stuetemperatur og derefter en uge ved 50-60°C (DC-elueringsmiddel: ether/ethylacetat 4:1).

Reaktionsblandingen blev udrørt med 100 ml vand, benzenlaget blev fraskilt, det vandige lag blev ekstrahe-30 ret tre gange med hver gang 25 ml ether, de samle de organiske faser blev vasket med 25 ml mættet natrium-chloridopløsning, tørret over natriumsulfat, og opløsningen blev inddampet i vakuum.

Den olieagtige inddampningsrest blev renset ved 35 søjlechromatografi. Med ethe^/ethylacetat (4:1) vandtes 145 mg (44% af det teor.) af 3EZ-formen af titelforbin-delsen som farveløs olie.

DK 155934B

17 1H-NMR (CDC13): 7,77 (m, 2H), 7,32 (m, 2H), 6.37 (s, udvidet, IH), 5,49 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,70 (m, 2H) .

5 En opdeling i de Z- og E-isomere blev opnået ved HPLC på en Reversed Phase-søjle [LiChrosorb RP 80 10 ym (Knaur) som søjlemateriale, søjlediameter 4,6 mm, gennemstrømningshastighed 2 ml/min]. Med methanol/vand (8:2) som elueringsmiddel vandtes ud fra 65 mg EZ-blanding 15,6 10 mg af den Z-isomere og 28,2 mg af den ønskede E-isomere af titelforbindelsen, der havde smp. 126,5-128°C og viste følgende spektrumværdier: ^26^34^4* 410,559 15 hl-NMR (CDC131; 7,77 (m, 2H), 7,32 (m, 2H) , 6.37 (s udbredt, 1 H), 5,49 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,70 (m, 2H).

20 ^C-NMR (methanol-d4): 148,39, 140,30, 134,82, 134,33, 134,09, 131,23, 130,31, 129,40, 127,94, 122,58, 78,58, 78,34, 25 57,76, 52,59, 45,71, 45,04, 42,79, 41,15, 39,87, 38,90, 30,13, 27,70, 27,21.

30 e) SEZ-im-Carboxy-benzylidenJ-ep-P'S-hydroxy-S'-cyclo-hexyl-l'E-propenyl)-7a-hydroxy-cis-bicyclo[3.3.0]-octan.

Almen formel I; = H, R3 = cyclohexyl.

Til en opløsning af 145 mg af det i Eksempel ld 35 vundne produkt i 3EZ-formen i 5 ml methanol blev der sat 2 ml IN natriumhydroxidopløsning,og der blev omrørt 2 timer ved stuetemperatur (DC-elueringsmiddel: ether/acetone 9:1). Der blev henstillet natten over ved stuetem-

DK 155934 B

18 peratur, under omrøring tilsat 2,2 ml IN saltsyre, ekstraheret tre gange med hver gang 10 ml methylenchlorid, de samlede methylenchloridopløsninger blev vasket med 10 ml mættet natriumchloridopløsning, tørret over natri- 5 umsulfat, og opløsningen blev inddampet i vakuum.

Der vandtes 106 mg (76% af det teor.) af titelforbindelsen som farveløs olie, der ved stuetemperatur lancf-somt blev fast.

10 ^25^32^4: 396,532 1H-NMR (CDC13): 7,85 (m, 2H), 7,37 (m, 2H), 6,33 (s udbredt, IH), 5,46 (m, 2H), 3,67 (m, 2H), 15 3,08 (s, 3H, udvekslelig med D20).

f) Denne forbindelse kan overføres i dens natriumsalt (R-^ = Na) som nedenfor angivet:

Til en opløsning af 70,2 mg af carboxyforbindelsen 20 i 5 ml methanol blev der under omrøring sat en opløsning af 29,8 mg natriumbicarbonat i 3 ml vand, og der blev henstillet natten over og opvarmet en time ved 60°C. Opløsningen blev inddampet i vakuum, og til inddampnings-resten blev der sat yderligere 10 ml methanol, og der 25 blev igen inddampet i vakuum. Den tørre inddampningsrest blev ekstraheret tre gange med hver gang 5 ml methanol, den methanoliske opløsning blev filtreret, og filtratet blev inddampet i vakuum.

Der vandtes 70,5 mg (95% af det teor.) af natrium-30 saltet i form af let gullige krystaller, C25H31°4Nai 418t514 ^H-NMR (methanol-d41; 6,44 (s udbredt, IH), 35 5,49 (m, 2H).

DK 155934 B

19

Eksempel 2 3E-(m-Carboxy-benzyliden)-60-(3'S-hydroxy-31-cyclohexyl-l'E-propenyl)-*7a-hydroxy-cis-bicyclo [3.3.0]octan.

Almen formel I: R^ = H, R£ = cyclohexyl.

5 Ud fra 86 mg af det i Eksempel ld vundne produkt i 3E-formen i 12 ml methanol og 3 ml IN natriumhydroxidopløsning vandtes analogt med Eksempel le 78,5 mg (95% af det teor.l af titelforbindelsen som farveløs olie, der krystalliserede ved stuetemperatur. Smp.: 161-164°C.

10 C25H32°4: 396'532 1H'-NMR (CDC13); 7,90 (m, 2H) , 7,43 (m, 2H) , 6,37 (s udbredt, IH), 15 5,51 (m, 2H), 3,78 (m, 3H).

Eksempel 3 al 3,3^-Ethylendioxy-60- [3 ’ -oxo-31 - (l"-adamantyl) -11E-propeny1]-7a-tert.buty1-dimethy1silyloxy-c is-bicyclo-20 [3.3.0]octan.

Almen formel VI: R2 = 1-adamantyl Z = tert.butyl~dimethylsilyl.

242,6 mg Natriumhydrid-dispersion (50%·s i olie) i 20 ml absolut toluen blev analogt med Eksempel la omsat 25 med 1,47 g 2'-oxo-2-*-(l,-*adamantyll-ethanphosphonsyredi-methylester i 40 ml absolut toluen samt 1,5 g 3,3-ethyl-endioxy^63-formyl^7a^tert.butyl^dimethylsilyloxy-cis-bi-cyclo[3.3,0]octan i 5 ml absolut toluen. Der blev imidlertid her omrørt 6 timer og henstillet natten over i 30 køleskab (DC-elueringsmiddel: ether/hexan 1:1).

Efter søjlechromatografi med petroleumsether/ether (4;11 vandtes 999,1 mg (45% af det teor.) af titelforbindelsen, 35 C29H46Si04i 486'778 20

DK 155934 B

•hl-NMR (CDC13): 6,61 (m, 2H) , 3,88 (s, 4H) , 3,76 (m, IH), 0,88 (s, 9H), 0,03 (s, 6H) .

5 Den ovenfor anvendte 2-oxo-2-(l,-adamantyl)-ethan- phosphonsyredimethylester vandtes på følgende måde:

Til 45 ml tør ether blev der under omrøring i en nitrogenatmosfære ved ca. -70°C dråbevis sat 77,5 ml af en 15%1 s opløsning af n-butyllithium i hexan, hvorefter 10 der blev tilsat en opløsning af 10,8 ml methanphosphon-syredimethylester i 50 ml tør tetrahydrofuran. Der blev omrørt i 15 minutter, dråbevis tilsat en opløsning af 10,4 g 1-adamantancarboxylsyreethylester i 50 ml tør tetrahydrofuran ved -75°C og omrørt i 3 timer. Reaktions-15 blandingen fik i nattens løb lov at nå 0°C, og der blev ved forsigtig tilsætning af 4N saltsyre ved 0°C indstillet på pH 4-5.

Opløsningen blev inddampet i vakuum, inddampnings-resten blev optaget i 100 ml ethylacetat og vasket tre 20 gange med hver gang 30 ml mættet natriumchloridopløsning.

De samlede vaskevæsker blev ekstraheret to gange med hver gang 10 ml ethylacetat, og de organiske faser blev samlet. Der blev tørret over natriumsulfat, og opløsningen blev inddampet i vakuum. Den olieagtige inddampnings-25 rest blev destilleret i vakuum, hvorved vandtes 10,4 g (72% af det teor.) af produktet som farveløs olie.

Kp.: 170-171°C/0,2 mm Hg 30 1H-NMR (CDC13): 3,86 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,31 (s, IH), 2,96 (s, lH), 1,94 (m, 15H).

b) 3,3-Ethylendioxy-6β-[3'S-hydroxy-3'-(l"-adamantyl)-35 l'E-propenyl]-7a-tert.butyl-dimethylsilyloxy-cis-bi-cyclo[3.3.0]octan.

Almen formel VIII: R2 = 1-adamantyl Z = tert.butyl-dimethylsilyl.

DK 155934 B

21

Analogt med Eksempel lb vandtes ud fra 422,5 mg af produktet fra Eksempel 3a i 5 ml methanol og 2,6 ml 0,4M methanolisk Cer-III-chloridopløsning samt 51,3 mg natri-umborhydrid efter søjlechromatografi med petroleumsethei/ 5 ether (2:1) 314,1 mg (74% af det teor.) af titelforbindelsen og 56,9 mg (13% af det teor.) af den tilsvarende 3'E-isomere, der blev bortkastet.

C29H48Si04; 488'794 10 S’S-’-Isomer: 1H-NMR (CDC13): 5,50 (m, 2H), 3,93 (s, 4H), 3,70 (m, 2H), 0,93 (s, 9H), 15 0,08 (s, 6H).

13C-NMR (methanol-d4); 134,88, 130,37, 119,97 82,05, 80,28, 65,37, 64.76, 58,07 43,95, 20 43,10, 42,49, 40,91, 39,26, 38,29, 37,80, 36.77, 29,58, 26,48, 18,81.

25 c). 6p-[3’S-Hydro.xy-3,-(l"-adamantyl)-l,E-propenyl]-7a- hydroxy-cis-bicyclo[3,3,0]octan-3-on.

Almen formel II; r2 = 1-adamantyl.

Analogt med Eksempel 1c vandtes ud fra 314,1 mg af produktet fra Eksempel 3b efter søjlechromatografi med 30 ether/acetone (3:1) 192,2 mg af titelforbindelsen som hvide krystaller.

Smp.: 142-143,5°C (af diisopropylether).

35 C21H30°3* 330'471 1H-NMR (CDC13); 5,52 (m, 2H), 3,95 (m, IH), 3,53 (m, IH).

DK 155934 B

22 d) 3EZ-(m-Methoxycarbonyl-benzyliden)-63“[31S-hydroxy-31 -(l"-adamantyl)-1Έ-propenyl]-7ot-hydroxy-cis-bi-cyclo[3.3.0]octan.

Almen formel I: R^ = CH3, R2 = 1-adamantyl.

5 Analogt med Eksempel ld blev 195,9 mg af det i

Eksempel 3c vundne produkt, 2,91 g m-methoxycarbonyl-benzyl-triphenylphosphoniumbromid og 1,09 g natrium-bis-(trimethy1silyl)-amid omsat indbyrdes. Efter søjlechro-matografi med ether/acetone (4:1) vandtes 114,4 mg af 10 titelforbindelsen (42% af det teor.) som fast stof.

^30^38^4* 46>2,636 1H-NMR (CDCI3): 7,86 (m, 2H), 7,36 (m, 2H), 15 6,35 (s udbredt, IH), 5,50 (m, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,80 (m, 2H), e) . 3EZ-(m-Carboxy-benzyliden) -6β- [31 S-hydroxy-3' ~ (1 ” — 20 adamantyl)-1Έ-propenyl]-7a-hydroxy-cis~bicyclo- [3.3.0]octan.

Almen formel I: R^ = H, R2 = 1-adamantyl.

Analogt med Eksempel le vandtes ud fra 110,4 mg af produktet vundet i Eksempel 3d i 10 ml methanol og 3 ml 25 IN natriumhydroxidopløsning 79,3 mg af titelforbindelsen (74% af det teor.) som fast stof, C29H36°4: 448'609 30 '•H-NMR (CDC1,): 7,83 (m, 2H)., 7,37 (m, 2H) , 6,37 (s udbredt, IH), 5,48 (m, 2H) , 3,47 (m, 2H)., 3,25 (s, 3H, udvekslelig med D20).

3 5 Eksempel 4

Der anvendtes samme fremgangsmåde som-i eksemplerne 1-3 og vandtes ud fra de tilsvarende udgangsmaterialer; 23

DK 155934B

a) 3E-(m-Ethoxycarbonyl-benzyliden)-6β-(3'S-hydroxy-3'-cyclohexyl^l’E^propenyl)-7a-hydroxy-cis-bicyclo- [3.3.0]octan,

Almen formel I; = C2H,-, ^2 = cycl°hexyl.

5 C27H36°4: 424/586 Smp.: 115-116°C, 10 1H-NMR (CDC13); 7,78 (m, 2H), 7,30 (m, 2H) , 6,31 (s udbredt, IH), 5,48 (m, 2H) , 4,23 (q, 2H) , 3,70 (m, 2H), 1,38 (t).

15 bl 3E^ [m- (n~Propyloxycarbonyl) »-benzyliden] -63-(3 ' S-hydroxy ^3 ’"cyclohexyl-l’E^propenyl)-7 a-hydroxy-cis-bicyclo[3.3,0]octan.

Almen formel I; R^ = ηΚ^Η^, R2 = cyclohexyl.

20 C2gH3804; 438,613

Smp.; 68-71°C.

1H-NMR (CDCI3I; 7,78 (m, 2H1, 7,32 (m, 2H), 25 6,33 (s udbredt, IH), 5,43 (m, 2H1, 4,23 (t, 2H), 3,64 (m, 2H).

cl Natrfurosalt af 3E-*-(m,''carboxybenzyliden)~6P-(3,S-hy-30 droxy-3 ' ^cyclohexyl^-1'E-propenyl) -7a-hydroxy-cis- blcyclo [3,3,0] octan..

Almen formel I; R-^ = Na, R2 = cyclohexyl C25H31°4Na; 418'514 35 1H-NMR (methanol-d4); 6,44 (s udbredt, IH), 5,51 (m, 2H1.

DK 155934B

24 d) 3E-(m-Carboxybenzyliden)-63-[31S-hydroxy-3'-(adaman-tyl-l")-1 Έ-propenyl]-7a-hydroxy-cis-bicyclo[3.3.0]-octan.

Almen formel I: R^ = H, R2 = -1-adamantyl 5 C29H36°4: 448'609 1H-NMR (methanol-d4): 7,78 (m, 2H), 7,37 (m, 2H), 6,38 (s udbredt, IH), 10 5,50 (m, 2H).

e) 3EZ-(m-Carboxybenzyliden)-6β-[3'S-hydroxy-31- (3",5"-dimethyladamantyl-1")-1Έ-propenyl]-7a-hydroxy-cis-bicyclo[3.3.0]octan.

15 Almen formel X: = H, R2 = 3,5-dimethyladamantyl-l.

C31H40°4! 476'663 1H-NMR (CDC13): 7,78 (m, 2H), 7,32 (m, 2H), 20 6,30 (s, udbredt, IH), 5,41 (m, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,65 (m, 2H).

f) 3E-[m-(tert.-Butyloxycarbonyl)-benzyliden]-6β-(3'S-hydroxy-3'-cyclohexyl-1Έ-propenyl)-7a-hydroxy-cis- 25 bicyclo[3.3.0]octan.

Almen formel I: R^ = (CH^J^C-, R2 = cyclohexyl.

^29^40^4: 4^2,635 ^H-NMR (CDCl^): (optaget ved 300 MHz): 30 7,88 (s, IH), 7,80 (m, IH), 7,37 (m, 2H), 6,43 (s, udbredt, IH), 5,55 (m, 2H), 3,77 (m, 2H), 1,60 (s, 9H).

g) 3E-(m-Carboxybenzyliden)-6β-[3 * S-hydroxy-3'-(4"- 35 methyl-cyclohexyl)-1Έ-propenyl]-7a-hydroxy-cis- bicyclo[3.3.0]octan.

Almen formel I: = H, R2 = 4-methylcyclohexyl.

Claims

10 Almen formel I: = K, R2 = cyclohexyl C25H31OK: 434'624 ^H-NMR (methanol-d4) : 6,44 (s, udbredt, IH), 5,51 (m, 2H). 15

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af cis-bicyclo- [3.3.0]octanderivater med den almene formel I: 20 /—V HO —/ 1 y= CH \ C=C'B COOR, (I) H" >*2 o. /\

25. OH hvor phenylgruppen med hensyn til dobbeltbindingen udviser EZ- eller E-konfiguration, og der ved det gruppen R2 bærende carbonatom foreligger RS- eller S-konfigu-30 ration, og hvor R1 er et hydrogenatom, en ligekædet eller forgrenet al-kylgruppe med 1-4 C-atomer eller en farmaceutisk acceptabel kation, og R2 er en cyclohexylgruppe, en 4-methylcyclohexylgruppe 35 eller en 1-adamantylgruppe med strukturen: DK 155934 B R3 R5 hvor R3, R4 og R,- er ens eller forskellige og er hydrogen eller methyl, 10 kendetegnet ved, at en forbindelse med den almene formel II: Re°"^X> °

15 C=(TH (III Λ*2 H OH hvor: 20 1*2 er som ovenf°r defineret, og Rg er et hydrogenatom eller en under milde betingelser fraspaltelig beskyttelsesgruppe, under udelukkelse af fugtighed og oxygen, i nærværelse af et aprotisk opløsningsmiddel ved temperaturer fra ca. 25 0°C til ca. 100°C omsættes med en forbindelse med formlen III: (c6h5)3p=ch.Q (III)

30 COOR-l hvor R1 er som ovenfor defineret, hvorefter, når Rg er forskellig fra hydrogen, beskyttelsesgruppen Rg fraspaltes, hvorpå der om nødvendigt på den 35 vundne forbindelse med formlen I, når R^ deri er et hydrogenatom, foretages .forestring af carboxylgruppen til en gruppe COOR-j , hvor er en (C^C^alkylgruppe, eller når- R1 deri er en (c -] -C4) alkylgruppe, foretages forsæbning af gruppen DK 155934B COOR.J til en carboxylgruppe, og et vundet produkt (med R^=H), om ønsket, derefter overføres i et farmaceutisk acceptabelt salt.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at reaktionen gennemføres under tilsætning af en svagt sur forbindelse, navnlig en eventuelt substitueret thiophenol.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kende-10 tegnet ved, at Rg er en tert.butyldimethylsilyl-gruppe.