DK150305B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af tetrahydrothiopyrano (3,2-b)indol-derivater - Google Patents

Description

150305

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmide til fremstilling af hidtil ukendte tetrahydrothiopyrano[3,2-b]indol-deri-vater eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf.

Fra fransk patentskrift nr. 2.426.689 kendes tetrahydrothiopy-05 rano[2,3-b]indolderivater med analgetisk og antipyretisk virkning.

Det har imidlertid vist sig, at disse forbindelser i modsætning til forbindelserne fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen har en alvorlig bivirkning i form af en LSD-lignende hallucinogen virkning.

10 Fra USA patentskrift nr. 4.003.913 kendes pyran- og thiopyra- no[3,4-b]- og [4,3-b]indolderivater med anden farmakologisk virkning. Disse forbindelser har en antidepressiv virkning og virkning mod mavesår, men har ingen analgetisk virkning.

Endvidere kendes tetrahydrothiopyranol[3,2-b]indoler, som er u-15 substituerede på thiopyranringen fra Croisy et al., Chemistry Letters, side 5-10, 1976, hvilke forbindelser dog ikke er angivet at have farmakologisk virkning.

De omhandlede tetrahydrothiopyrano[3,2-b]indol-derivater og de farmaceutisk acceptable salte deraf er værdifulde lægemidler, som 20 udviser analgetiske, anti-inflammatoriske og anti-depressive virkninger, hvilke derivater har den alemene formel (I):

GgQ , 25 T „/R2 R1 “iKp hvori R betegner hydrogen, C(1-6)alkyl eller C(2-6)alkenyl, og 2 3 30 R og R hver især betegner hydrogen eller C(1-6)alkyl, eller er farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf,

De følgende definitioner gives for forskellige udtryk, som anvendes i den foreliggende beskrivelse.

Udtrykket "C(1-6)alkyl11 refererer til ligekædede eller forgrene-35 de alifatiske grupper med fra en til seks carbonatomer, herunder f.eks. methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, t-butyl og pentyl og lignende.

2 150305

Udtrykket "C(2-6)alkenyl" refererer til en gruppe med en dobbeltbinding i den ovennævnte ligekædede eller forgrenede alkylkæde, f.eks. vinyl, allyl, butenyl, isobutenyl, pentenyl, isopentenyl og lignende.

05 De omhandlede forbindelser (der i det følgende omtales som for bindelse (I)) omfatter 4-(substituerede eller usubstituerede-amino)-methyl-2,3,4,5-tetrahydrothiopyrano[3/2-b]indo|er, der eventuelt har en substituent i 5-stillingen. Endvidere omfatter de omhandlede forbindelser de farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af forbin- 10 delse (l),f.eks. hydrochlorider, hydrobromider, hydroiodider, sulfater, phosphater, methansulfonater, acetater, citrater, oxalater, fu-marater, maiater, succinater, maleater, phthalater, cinnamater, ben-zoater, ascorbater og lignende.

Forbindelserne (I) er hidtil ukendte. Naturligvis er det derfor 15 heller ikke kendt, at forbindelserne (I) besidder analgetisk, anti-inflammatorisk og/eller anti-depressiv virkning.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man underkaster en forbindelse med den almene formel (II)

Ri CHO

hvor R har den ovenfor angivne betydning, omsætning med ammoniak eller en primær eller sekundær amin med den almene formel HNR2R3, 2 3 25 hvori R og R har den ovenfor angivne betydning, under samtidig eller efterfølgende reduktion, og hvis R1 er hydrogen, eventuelt C(1_6)alkylerer eller C(2_6)alkenylerer det fremstillede produkt, hvorefter om ønsket en fremstillet forbindelse omdannes til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

30 Udgangsforbindelsen (II) kan fremstilles som vist nedenfor.

:0oT -a— fer> 7 i1 IV ix 8 R i„2 ™ 35 s i»

—^ øjO

R1 CHO

XX

3 150305 i hvori R har den ovenfor anførte betydning.

(1) Udgangsforbindelse (IV) 05 Thiolderivatet (IV) kan fremstilles ved hjælp af Harris' s metode, jf. Tetrahedron Letters, 1969, 4465. Således behandles indol eller tilsvarende 1-substitueret indol med thiourinstof i nærværelse af iod-kalium iodid, og det resulterende isothiuroniumsalt hydrolyseres ved hjælp af base. løvrigt er 3-indolylthiol blevet fremstillet af Harris, 10 og 1-methyl-3-indolyithioi af Marches, jf. Chim. Ind. (Milan.), 51_, 41 (1969).

(2) Fremstilling af forbindelse (III) [trin (a)].

Forbindelse (III) kan fremstilles ved, at man omsætter forbin-15 delse (IV) med 4-halogeno-2-butyn-1-ol i nærværelse af et dehydro-halogeneringsmiddel. Omsætningen udføres i et inert organisk opløsningsmiddel ved stuetemperatur eller under opvarmning.

(3) Fremstilling af forbindelse (II) [trin (b)].

20 Forbindelse (II) kan fremstilles ved ringslutning af forbindelse (III) under opvarmning. Omsætningen kan udføres i et inert opløsningsmiddel (f.eks. benzen, toluen, xylen, dimethylformamid, dime-thylsulfoxid, alkoholer, pyridin, dimethylanilin og lignende).

25 Formylgruppen i 4-stillingen af forbindelse (II) omdannes til substitueret aminomethyl, ved at man omsætter forbindelse (II) med en primær eller sekundær amin under reduktive betingelser eller, om ønsket, efterfulgt af reduktion. Omsætningen af forbindelse (II) og en amin kan udføres i et inert organisk opløsningsmiddel, f.eks.

30 benzen eller alkoholer, ved stuetemperatur eller under opvarmning.

Den resulterende base behandles med et reduktionsmiddel såsom metal-hydrid, natrium-alkohol, myresyre og lignende. Myresyre anvendes fortrinsvis, når en sekundær amin omsættes. Reduktionen kan forløbe uden isolering af den resulterende base. Endvidere kan omsætning 35 af forbindelse (II) foretages med en amin under reduktive betingelser, nemlig i nærværelse af et reduktionsmiddel til dannelse af den ønskede forbindelse (I).

i 150305 4 R med en anden betydning end hydrogen kan indføres i en i fremstillet forbindelse (I), hvori R betegner hydrogen ved alkyle-ring eller alkenylering. Som eksempel pi alkyleringsmiddel kan anvendes en alkalimetalforbindelse (f. eks. natriumhydrid, kaliumhy-05 droxid) og et alkylhalogenid (f. eks. methyliodid) i et inert organisk opløsningsmiddel (f. eks. dimethylformamid, dioxan, dimethylsulfoxid).

Endvidere kan det resulterende produkt omdannes til et ønsket salt. Saltdannelsen udføres på konventionel måde.

Nogle typiske forbindelser fremstillet ifølge opfindelsen under-10 søgtes for fysiologiske egenskaber. Resultaterne er vist i det følgende: 1. Testmetode.

(1) Anti-inflammatorisk aktivitet (Carrageenin-ødem-metode).

15 En 0,9 % saltopløsning (0,05 ml) indeholdende 1,0 % carra- geenin anvendes som phlogistisk middel. Efter 30 minutter administreres oralt til JLC-Wistar rotter af hunkøn (180 - 200 g legemsvægt) en testforbindelse, og det phlogistiske middel injiceres subkutant i rotternes fodsåler. Opsvulmningsvolumenet måles 3 timer senere, og 20 anti-ødem-aktiviteten bestemmes ved at beregne et forhold (%) mellem det ødemiske volumen for en behandlet fod og en ubehandlet fod.

(2) Analgetisk aktivitet (eddikesyre-vridningsmetode).

DS mus af hankøn (20-23 g legemsvægt) behandles med en intraperitoneai injektion af 0,1 ml/10 g 0,6 % eddikesyre 30 minutter 25 efter oral administrering af en testforbindelse. Antallet af vridninger i 10 minutter tælles, og ED^q beregnes.

(3) Akut toxicitet.

DS mus (20-23 g, hankøn) administreres oralt en suspen-30 sion af testforbindelse med gummiarabicum. Dødeligheden efter 72 timer bestemmes, og LD^q beregnes.

5 150305 2. Resultater:

Resultaterne er vist i tabel (I).

.... Test Test Test T§5£-Struktur - (1) (2) (3) furbln- addi- ED ED5„ LD50 delse tions- R R^ R·* salt mg/kg mg/kg mg/kg 1 Me2^ Me H HCI 9,4 6,4 400 2 Et3) Me H oxalat 9,4 13,3 800 3 Me Me Me oxalat 28,3 17,8 400 4 CH2-CH=CH2 Me H oxalat 17,5 11,3 700

Aminopyrin 24 58 800

Noter: 1) (O) V»

^ S

i1 ch2n^3 2) Me = methyl 3) Et = ethyl

Som vist i tabel (I) har de ovenfor testede forbindelser analge-tiske og anti-inflammatoriske egenskaber. Den analgetiske aktivitet er meget stærkere end for det kommercielt tilgængelige analgetikum, aminopyrin. Andre forbindelser (I) fremstillet ifølge opfindelsen har næsten kvantitativt samme aktiviteter. Endvidere er det blevet pivist, 150305 6 at forbindelserne (I) har anti-depressiv aktivitet. Forbindelserne (I) kan derfor anvendes som analgetisk, anti-inflammatorisk eller anti-depressrvt middel. I praksis kan forbindelserne (I) og farmaceutisk acceptable salte deraf anvendes til behandling af forskellige for-05 mer for smerter hos mennesker og dyr.

De omhandlede forbindelser kan administreres alene eller i kombination med farmaceutisk acceptable bærere og andre lægemidler, om nødvendigt, oralt, perkutant eller ved injektion. Fortrinsvis anvendes forbindelserne i kombination med en eller flere bærere, som TO er egnede til den ønskede administreringsvej. Eksempler pi faste bærere til intern eller ekstern brug er laktose, saccarose, stivelse, dextrin, natriumbicarbonat, lakridspulver, talkum, kaolin, bentonit, calciumcarbonat, paraffin og lignende og som gel eller flydede bærere gelatine, vand, ethanol, isopropanol, chloroform, glycerol og lignende.

15 Praktiske eksempler på egnede farmaceutiske præparatformer af forbindelserne (I) er tabletter, kapsler, piller, salver, granulater, pulvere, suppositorier, aerosoler og injicerbare opløsninger.

Et terapeutisk præparat kan indeholde 1 til 500 mg af en eller flere forbindelser (I) med eller uden e'n farmaceutisk acceptabel bæ-20 rer. Forbindelserne (I) administreres i almindelighed til voksne personer med ca. 3 til ca. 500 mg pr. dag, idet dog mængden kan variere betydeligt afhængigt af forskellige betingelser som f.eks. patientens sygdomshistorie, alder og køn, administreringsvej og lignende. Forbindelserne kan administreres til mennesker enten i enkelte eller 25 opdelte doser. Forbindelserne kan administreres på en gang i akutte tilfælde. Forbindelserne kan også anvendes til behandling af dyr, hvorved man til dyret administrerer en effektiv mængde af en forbindelse (I).

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses i det følgende nærme-30 re ved eksempler.

7 150305

Eksempel 1 A-(1) 1-ethyl-3-indolylthiol

En opløsning af 1-ethyiindol (25 g) og thiourinstof (15,7 g) i 05 methanol (400 ml) blandes med en vandig opløsning (250 ml) af kalium-iodid (34,4 g) og iodid (26,3 g) og får lov at henstå ved stuetemperatur i 2 timer. Blandingen omrøres i 1 time og koncentreres til opnåelse af S-(1-ethyl-2-indolyl)isothiuroniumiodid: smp. 225,5-228°C (decomp.) Til produktet sættes 5% vandig natriumhydroxidop-10 løsning (200 ml). Blandingen opvarmes til 90°C i 10 minutter i argonatmosfære, vaskes med ether, gøres sur med fortyndet saltsyre og ekstraheres umiddelbart efter med ether. Ekstrakten vaskes med ether, tørres og inddampes til dannelse af titelforbindelsen som en gul olie: Udbytte 58,4%.

15 IR: vCHCI3 2540 cm"1 max NMR: 5CDCI3 1,35t (J=7, 3H) 2,82d (J-2, IH, D20 forsvinder) 4,02q(J=7, 2H) 20 B-(1) 4-formyl-5-methyl-2,3,4,5-tetrahydrothiopyrano[3,2-b] -indol

Efter successiv tilsætning af 1-methyl-3-indolylthiol (15,5 g), 25 [Marches, Chim.lnd. (Milan),51, 41 (1969)], 4-chlor-2-butyn-1-ol (8,72 g) og kaliumcarbonat (12,1 g) til acetone (300 ml) omrøres blandingen ved stuetemperatur i nitrogenatmosfære i 16 timer. Bundfaldet frafiltreres, og filtratet koncentreres ved en temperatur under 40°C. Diethylamin (5 ml) sættes til remanensen. Blandingen får lov 30 at henstå i 1 time ved stuetemperatur, hvorefter der tilsættes vand og ekstraheres med chloroform. Ekstrakten tørres og inddampes til tørhed. Remanensen underkastes silicagelchromatografering, elueres med benzen/petroleumsether (4:1) og dernæst benzen - benzen/ether (20:1). Sidsnævnte fraktioner giver 1-methyl-3-(4-hydroxy-2-buty-35 nylthio)indol (17,7 g) som en gul orange olie: Udbytte 78,4%.

8 150305 IR: vCHCI3 360o, 2210 cn)-1 max NMR: 6CDCI3 1,57brs (IH) 3,47t (J=2, 2H)3,68s (3H) 4,l8brt (2H) 05 6d5-py 3,50s(3H) 3,63t(J=2, 2H) 4,51t (J =2, 2H) ΤΠ tør toluen (200 ml), sættes ovennævnte produkt (17,5 g) og tør pyridin (17,5 ml), og blandingen tilbagesvales i 15 timer i nitrogenatmosfære og inddampes til tørhed. Remanensen underkastes søjle-chromatografi pi silicagel, efueres med benzen/petroieumsether (8:1) 10 til dannelse af titelforbindelsen (13,3 g): smp. 100-101°C; Udbytte 76,0%. Omkrystailisation fra benzen/petroleumbenzin giver krystaller, der smelter ved 105,5-102°C.

IR: vCHCI3 1730 cm'1 max 15 NMR: 6CDCI3 3,50s(3H) 3,76m(1H) 9,67d(J=2, IH) B-(2) Følgende forbindelser opnås analogt med ovenfor beskrevne fremgangsmåde.

4-formyl-5-ethyl-2,3,4,5-tetrahydrothiopyrano[3,2-b]indol: 20 en bleggul olie, IR: vCHCI3 1720 cm"1 max NMR: 6CDCI3 1,29t (J=7, 3H) 3,79m(1H) 4,07q(J=7, 2H) 9,96d(J=2, 1H) 25 C-(1) 4-methy laminomethy I-5-methy I-2,3,4,5-tetrahyd rothiopy rano-[3,2-b]indoi

Til en opløsning af 4-formyI-5-methyl-2,3,4,5-tetrahydrothio-pyrano[3,2-b]indol (1,2 g) i benzen (12 ml) sættes 10% opløsning 30 (3,2 g) af methylamin i benzen. Blandingen omrøres ved stuetempe ratur i 2½ time og inddampes derefter til dannelse af 4-methylimino-methyl-5-methyl-2,3,4,5-tetrahydrothiopyrano[3,2-b]indol som en olie.

IR: vCHCl3 1675 cm"1 max 35 NMR: 6CDCI3 3,25brs(3H). 3,60s(3H) 9 150305

Ovennævnte produkt opløses i methanol (15 ml), og natriumbor-hydrld tilsættes dråbevis med omrøring under afkøling. Blandingen får lov at henstå ved stuetemperatur i 2 timer og inddampes til tørhed. Remanensen opløses i chloroform, vaskes med vand, tørres og 05 inddampes til dannelse af titelforbindelsen (1,16 g): Udbytte 90,8%. Omkrystallisation fra benzen/petroleumbenzin giver krystaller, der smelter ved 125-128°C.

NMR: 6CDCI3 2,40s(3H) 3,63(3H)

Analyse beregnet for C-]4H18N2S: C, 68,25; H, 7,36; N, 11,37 10 Fundet: C, 68,56; H, 7,18; N, 11,54

Ovennævnte produkt opløses i acetone, og ether/saltsyre tilsættes gradvis. De bundfældede krystaller opsamles ved filtrering til dannelse af hydrochloridet: smp. 248-250°C (decomp.)

Analyse beregnet for C^H^gNgSCI: C, 59,45; H, 6,77; N, 9,90 15 Fundet: C, 59,35; H, 6,87; N, 9,67 (2) Analoge fremgangsmåder som beskrevet ovenfor giver forbindelserne nr. 1-2 - 1-6 i tabel 2.

20 Eksempel 2 (1) 4-dimethylaminomethyl-5-methyl-2,3,4,5-tetrahydrothiopy- rano[3,2-b]indol

Til 50% vandig opløsning (610 mg) af dimethylamin sættes successivt 99% myresyre (575 mg) og benzen. Blandingen inddampes for at 25 fjerne vandet ved azeotropisk distillation og derefter benzenen. En opløsning af 4-formyl-5-methyl-2,3,4,5-tetrahydrothiopyrano[3,2-b]in-dol (1,2 g) i benzen (15 ml)sættes. dråbevis til nævnte opløsning i løbet af 10 minutter under opvarmning. Blandingen tilbagesvales i 5 timer, gøres derefter basisk med natriumhydroxid under isafkøling 30 og ekstraheres med ether. Ekstrakten vaskes med en saltopløsning, tørres og inddampes til dannelse af titelforbindelsen (780 mg): Udbytte 57,5%. Omkrystallisation fra petroleumbenzin giver krystaller, der smelter ved 81-83°C.

NMR: 6CDCI3 2,25s(6H) 3,55s(3H) 35 Analyse beregnet for C^HgQNgS: C, 69,19; H, 7,74; N, 10,76 Fundet: C, 69,31; H, 7,73; N, 10,58

Oxalat: smp. 228-229,5°C (decomp.) 10 150305 (2) Analoge fremgangsmåder som beskrevet ovenfor giver forbindelse nr. 2-2 -2-3 i tabel 2.

Eksempel 3 05 (1) 4-dimethylaminomethyi-5-isopropyl-2,3,4,5-tetrahydrothio- pyrano[3,2-b]indol

En opløsning af 4-dimethylaminomethyl-2,3,4,5-tetrahydrothiopy-rano[3,2-b]indol (1,00 g) i tør dimethylformamid (25 ml) blandes med 50% natriumhydrid (293 mg) under omrøring, og blandingen får TO lov at henstå ved 40°C i 1 time. Derefter blandes reaktionsblandingen med en opløsning af isopropyliodid (1,63 g) i dimethylformamid (2 ml) og holdes ved 40°C i 2 timer og i yderligere 20 timer efter tilsætning af reagenset. Reaktionsblandingen blandes successivt med ether og isvand ved en temperatur under 5°C, og etheriaget fraskil-15 les. Det vandige lag ekstraheres yderligere med ether. De forenede etherlag ekstraheres med en fortyndet saltsyreopløsning. Ekstrakten gøres basisk og ekstraheres med methylenchlorid. Ekstrakten vaskes med vand, tørres og inddampes til dannelse af titelforbindelsen (910 mg) som en olie: Udbytte 77,8%.

20 NMR: 6CDCI3 1,52d (J=7 1,66d(J=7) 2,27s(6H) 4,56 m(J=7,1H)

OxaJat: smp. 135-138°C (decomp.)

Analyse beregnet for c-|gH26N2°4S: C, 60,29; H, 6,92; N, 7,40

Fundet: C, 60,26; H, 6,86; N, 7,22 11 150305 ϋ co r- σ> m σ> οο σ> ot οο -¾- σ> οο V ·» ·» ** »fc Ο) Γ'» 0>. !> Ι''· Γ"· ί"· « ζ > ς(· <3- (13 Ο Ο

C OJ CM

Π3 χ X

4J CM 00 ω CM ^(0 ·Μ- 00 00 ΐδ α>.. υ 7°ί υ ο 'Ί” c oSl (I) ^ ιό ™ <α<ο I tc J· ζ~ ~ Έ-iSi? ο cm Η “®ffl τ-00 1-00 χ00 CM oo <Λ r- co wl in ω 7.7 z -* ο ,, , r co co . Γ O) 03 o «I' lull U U mm U in in cm m in

X

in r- /-s U Ό /"•'L Vs_> O xi m v ·- oo 'fl- o _ +J 00 +£ CM ti 1~

(13 CM JO CM JO CM

£· U 5o 50 5 » E o * co 25 cm 25 o (/) ^ O cvj O CM Ocvj 7 ^ ^ σ to £ χ X ^cm π 5 s <° £7

O _jn ** t T

UU ft m jT ω ft X X

‘O -r ^ -3 00 CM

• •U +Jtn Ό in +j in * q;s-> coin r-· in oo r n

^ 03 ·· O CD O CO CM II

z — q; » ~ - ' «-^-3 Z <U —. r- 00 r- 00 r-CM'w' "ά t? ¢33 t- <33 -3 .Q +J 00 xf ¢33 03 ¢33

+J

c oo ω a. χ χ x

4J

£ (/)

JD

<3 £

CM *> JJ

o: uj .15

03 dl +J

CM

Φ £ -9 s- CM co «3·

,(0 Ο Ο I I I

I- U. C r- r- r- 12 150305 ϋ r- Ο Ο CO χ- Γ"- CM Ο

Tf 00 Γ*· ΙΟ " ν V. ·. Ο Ο Q) 2 Γ"-· D~ σι CD χ— τ- ιη >· +-> ^ ω « - Ο

C £,¾ CM

CD X

[VI CVI^f CD CO coin Π .. § U ®°> «« oo (/) CO CO w «>00 w 00 00

® £ CM CM CM

Sc- 2 2 Z

T ,9 rr cm g cn co σ> m ·£* coco O. =% CMCM ^ r-m % <=co

X U ^ ,r~ O O , Γ O O , Γ" O CD

οι Ό U coco CJ Γ-. U co in ^ £2 jj co ^ iun ra® in cd a a ra · raT_ ® 7 £ XgO co Λ

O CM O — ^ CD CO

co E C £ X X X T

- u g ω co «ο « ft

Q rC ®V frx ^ xV

U CJ ιΓ η» -oco ^ co ii ό x 3 33 ^ ^3

- U σ’ Ό « +j v) C

CE s- > co coco co co mom c- cu · t— o co oun co co p· s — a; - - - ^ -.v 2d) — Pf r-j- O CO p-CM'i "0 +j 0,p m o m r- —» ^ m **» ^ ««* ** J£jj in in 04 os 0> 00 00 +->

C CO 4_> <D

2} ££ I X uj S

4J

+J

10

A

£ t

CVJ jj 4_> O

^ o: uj .L ui Σ Π3 10

ίΐ 4-» 4-* Ji +J

O ^ LU Lii S UJ

CM

g J3 -Q s- · in co cm co

/D O O i I i I

f— U- C r- x— CM CM

150305 13 ΰ

Is" γ-

ΓΟ ν- r“ Γ“ Osi CO

s s O OO CD CO

_ r- ^ O) Z r- r- CDOO 0000

W

> (0 c ro — — IS CD to CJ CD (J CD 00

ro © .· I 'Vt X

c D)®1 o) ^ (0 ^ W ^ 2 Q) Ό CVI CVi CVi ε fe ξ Z Z z ^ ®,? oo cm

λ\ CQ LL ^ CM CM

/sc *r li) r t (MØ ·τ- r αε woo oo o ^ oo r>

O U , Γ CO 00 , Γ" r- OJ .’“OJCVJ

LULL U CD CD (J CD CD U CD CD

- » Il li

Q> I _ I

9* U CO (j ^ M oo

E o r- if σ> if O

(Λ Ns./ I X ^ X CM

iO

»s /""N N

~ Stf ri?

Tj" S i ~^3 -I” Ω _« = %g = ¾ ·

U u é ΙΛ v^co w1^· I

«o-ι- wS_ W f co ·· U ro co -Q _ -Q 4-> c—, cc s- > cvjai ldcoC1 oo oo i'' £ cd ·· co- i-, co X oo o) il £ — o; -o - -CO - -“5 Z 0) - CVI T— O r- ^ O O ^ ro

LD

CO

cvT

•Q P °X° LO O O

—, ^ Q) - - - —’ XI £> CO LD o O) C7) 05 4-1 C CO Cl)

ω OL S X X

£ CL

p ε “ δ •2 © D (1) (Λ Ό

OJ 0) Q) 4J

Q OL s 2 UJ II

<0 TJ

ro 1-1 J-4 7. +-> -»-» - o ^ x ω LU r- q_ o:

V

CM

S Å in Wco © -9 i- CM i * n ft O O i O O 5

}— X C CO ^ r- Z