DK149630B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af tripeptidamider eller -estere eller fysiologisk acceptable syreadditionssalte deraf - Google Patents

Analogifremgangsmaade til fremstilling af tripeptidamider eller -estere eller fysiologisk acceptable syreadditionssalte deraf Download PDF

Info

Publication number
DK149630B
DK149630B DK116380AA DK116380A DK149630B DK 149630 B DK149630 B DK 149630B DK 116380A A DK116380A A DK 116380AA DK 116380 A DK116380 A DK 116380A DK 149630 B DK149630 B DK 149630B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
phe
arg
mmol
tlc
pro
Prior art date
Application number
DK116380AA
Other languages
English (en)
Other versions
DK149630C (da
DK116380A (da
Inventor
Karl Goeran Claeson
Leif Roger Simonsson
Salo Arielly
Original Assignee
Kabi Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kabi Ab filed Critical Kabi Ab
Publication of DK116380A publication Critical patent/DK116380A/da
Publication of DK149630B publication Critical patent/DK149630B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK149630C publication Critical patent/DK149630C/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • C07K5/0823—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

149630
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte bradykininhæmmende tri peptidamider eller -estere eller fysiologisk acceptable syreadditionssalte deraf.
Proteolytiske enzymer's, navnlig kallikrein's indvirkning på plasmaproteinet kininogen frigiver nonapeptidet bradykinin med formlen:
Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg
Bradykinin (BK) udviser stærk farma kodynamisk aktivitet. I ekstremt lave doser bevirker BK også vasodilation, indsnævring af bron-kierne, permeabilitetsforøgelse i kapillærkarrene, smerte ved påvirkning af nerveenderne, kontraktion eller relaksation af extravasale glatte muskler, f.eks. i tarme og uterus, akkumulering af leucocytter.
De mekanismer, hvorved bradykinin er aktiv, kendes kun ufuldstændigt, men der er sandsynligvis flere forskellige receptorer på de forskellige målorganer. Nogle af BK's virkninger kan sandsynligvis også formidles ved frigørelse af andre aktive forbindelser, såsom prosta-glandiner.
BK er sandsynligvis involveret ved en række forskellige sygdomme, f.eks. ved inflammatoriske processer, chok af forskellige årsager, rheumatoid arthritis, gigt, pancreatitis, carcinoid, migræne, arvelig angioneurotisk ødem, forbrændinger, allergier.
Det er sandsynligt, at behandling med en passende antagonist mod BK ville være fordelagtig for de sygdomme, hvor BK-niveauet forøges.
I mange år har videnskabsmænd søgt efter specifikke BK-hæmmere, men imidlertid uden held på trods af, at der er syntetiseret et meget stort antal BK-fragmenter og -analoger.
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af tripeptidamider eller -estere med den almene formel:
H-D-X-Phe-Arg-Y
hvor X betegner Pro eller Phe, og Y betegner O-R^ eller NH-R2, hvor R.| betegner en lige eller forgrenet alkylgruppe med 1-12 carbonatomer, og R2 betegner H eller en lige, forgrenet eller cyklisk alkylgrup- 2 149630 pe med 1-12 carbonatomer eller fysiologisk acceptable syreadditionssalte heraf, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at de i peptidet indeholdte aminosyrer i vilkårlig rækkefølge og på inden for peptidkemien sædvanlig måde kondenseres til dannelse af et peptid med den ønskede aminosyresekvens, hvorefter eventuelle beskyttelsesgrupper fraspaltes, og det opnåede peptid om ønsket overføres i et syreadditionssalt deraf. Det har vist sig, at de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede tripeptidforbindelser giver specifik hæmning af brady kinin.
Til syntese af de hidtil ukendte BK-antagonister anvendes traditionelle, indenfor peptidkemifagområdet velkendte metoder med beskyttende grupper og kobling. De C-terminale ester- eller amidgrupper kobles ligeledes ved syntesemetoder, der er velkendte indenfor organisk kemi. Rensningen af mellem- og slutprodukter udføres ved præcipitation, omkrystallisation eller gel kromatografisk separation.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen illustreres af de efterfølgende eksempler.
Forkortelser.
Aminosyrer (med mindre andet angives menes L-konfiguration).
Arg = arginin
Phe = phenylalanin
Pro = prolin
Andre
AcOH = eddikesyre
Boc = t-butyloxycarbonyl
Cbo = carbobenzoxy DCCI = dicyclohexylcarbodiimid DMF = dimethylforamid DMSO = dimethylsulphoxid
EtgN = triethylamin
EtOAc = ethyl acetat
EtOH = ethanol F^O = destilleret vand HBT = N-hydroxybenzotriazol
MeOH = methanol
OpNP = p-nitrophenoxy i-PrOH = isopropy lal kohol TFA = trifluoreddikesyre TLC = tyndtlagskromatografi 149630 3 T yndtl ag s kromatog raf i
Til TLC-analyserne anvendes færdigt fremstillede glasplader med silicagel "F2g4"(Merck) som absorbens. Der anvendes følgende solvent-systemer (volumenforhold): 5 A = n-butanol:AcOH:vand (3:2:1) = chloroform:MeOH (9:1)
Pa = chloroform:MeOH:AcOH (17:2:2)
Pag = chloroform:MeOH:AcOH:H20 (34:4:9:2) 10 M = n-butanol:AcOH:1^0:pyrldln (30:6:24:20) Når kromatografien er færdig, undersøges pladen i UV-lys (254 nm), og den fremkaldes med chlor/-o-toluidinreagens ifølge den traditionelle metode. De anførte R^-værdier er resultatet af separate kromatografibehandlinger.
15
EKSEMPEL I
H-D-Pro-Phe-Arg-0-heptyl*2HCI.
M.w. (molekylvægt) = 589,6.
20 la. Cbo-Phe-Arg(N02)-OMe. M.w. = 514,5.
27g (0,10 mol) H-Arg(N02)-OMe*HCI opløst i 4 ml DMF neutraliseres, når det er afkølet, med 18 ml Et^N. Det dannede Et^NHCI fjernes ved filtrering, og derefter tilsættes 42g (0,105 mol) Cbo-Phe-OpNP.
Reaktionen får lov til at fortsætte natten over, og derefter inddampes 25 reaktionsblandingen under vakuum til en olie, som opløses i 500 ml
EtOAc. EtOAc-fasen vaskes i rækkefølge med 2% NaHCOg i HgO, HgO, HCI fortyndet med og F^O. Efter tørring med NagSO^ inddampes
EtOAc-fasen til ca. 200 ml og præcipiteres ved tilsætning af ether. Det krystallinske præcipitat vaskes med ether og tørres. Ifølge TLC er det 30 rent.
Udbytte: 37,6g (73%) la TLC: Rf = 0,52 (P1)
Ib. Cbo-Phe-Arg(N02)-OH. M.w. = 500.5.
35 3,1 g (6,0 mmol) la opløses i ca. 150 ml MeOH, og derefter tilsættes 7,3 mmol (7,3 ml/l M NaOH i HgO). Efter ca. 4 timer inddampes reaktionsblandingen under vakuum, opløses i et lille volumen F^O og vaskes to gange med EtOAc. Η,,Ο-Fasen gøres sur med FICI til pH = 2, og det derefter dannede Cbo-Phe-Arg(N02)-OH ekstraheres med EtOAc (3 149630 4 gange). EtOAc-fasen vaskes med 10% NaCI i Η.,0, tørres med NagSO^ og inddampes til tørhed. Efter udvaskning med ether tørres de dannede krystaller. Ifølge TLC er produktet rent.
Udbytte: 2,86g (95%) Ib 5 TLC: Rf = 0,14 (Pa).
lc. Cbo-Phe-Arg(N02)-0-heptyl. M.w. = 598,7.
0,60 ml SOCI2 (destilleret) tilsættes til 10 ml 1-heptanol under fugtfrie betingelser og med køling i et isbad. Efter omrøring i 1 time ved 10 stuetemperatur tilsættes 1,00g (2,0 mmol) Ib. Reaktioen er afsluttet efter en time, og reaktionsblandingen er da en tyk, hvid masse. Reaktionsblandingen fortyndes med ether, og de resulterende, tunge krystaller filtreres fra. Krystalmassen opløses i MeOH og præcipiteres med H20 (fjerner dannet HCI). De opnåede krystaller filtreres fra. TLC 15 viser fuldstændigt rent heptylester.
Udbytte: 962 mg (80%) Ic.
TLC: Rf = 0,60 (P1).
ld. Boc-D-Pro-Phe-Arg(N02)-0-heptyI. M.w. = 661,8.
20 600 mg (1,0 mmol) Ic opløses i 2ml HOAc, og der tilsættes 1,4 ml 5,6M
HBr i HOAc. Reaktionsblandingen hældes derefter ud i ca. 100 ml tør ether. Det dannede præcipitatat filtreres fra og vaskes med tør ether og tørres under vakuum over NaOH. Det opnåede HBr-salt af H-Phe-Arg(N02)-0-heptyl opløses i 2 ml DMF og neutraliseres ved lav 25 temperatur (-10°C) med EtgN indtil basisk reaktion. Det opnåede
EtgN^Br filtreres fra. Til reaktionsblandingen tilsættes 215 mg (1,0 mmol) Boc-D-Pro-OH og 135 mg (1,0 mmol) HBT og ved lav temperatur 250mg (ca. 1,2 mmol) DCCI. Reaktionen får lov til at fortsætte natten over, og det fremkomne DCU filtreres fra (efter afkøling), og reak-30 tionsblandingen inddampes under vakuum til en olie. Olien æltes med en lille mængde 2% NaHCO, i H«0. Den opnåede masse opløses i en lille 3 £ g mængde MeOH og kromatograferes på en søjle med Sephadex LH-20 i MeOH med MeOH som et elueringsmiddel. Den fraktion, der består af rent Id, opløses med vand, og MeOH afdampes under vakuum. Id 35 præcipiteres som et tungt pulver, som genvindes og tørres under vakuum.
Udbytte: 570 mg(86%) Id TLC: Rf = 0,65 (Pa), 0,52 (P1).
149630 5 I. H-D-Pro-Phe-Arg-0-heptyI*2HCI. M.w. = 589,6.
Fra 400 mg (0,6 mmol) Id fjernes beskyttelsen med 30 ml HF ved 0°C i en time i nærværelse af 0,4 ml anisol. Efter inddampning under vakuum opløses produktet i 20ml 2% HOAc i HgO og vaskes flere gange med en 5 lille mængde ether. H?0-Fasen kromatograferes pi en søjle med @ **
Sephadex G-15 i 2% HOAc med det samme medium til eluering. Den fraktion, der indeholder det let kontaminerede acetat af I, frysetørres og ionbyttes på en søjle med ,,QAE-2511 (Phamacia Fine Chemicals) i chloridform i 50% EtOH-50% H20 med det samme medium til eluering. Der 10 opnås en fraktion med fuldstændigt rent I.
Udbytte: 318 mg (89%) I
TLC: Rf = 0,27 (A) viser kun en plet.
Aminosyreanalyse:
Arg 1,00, Phe 1,02, Pro 0,99.
15
Eksempel II
H-D-Pro-Phe-Arg-NH-heptyl^HCI. M.w. = 588,6.
Ila. Cbo-Phe-Arg(N02)-NH-heptyl. M.w. = 597,7.
20 1/0 g (2,0 mmol) Cbo-Phe-Arg(N02)-OH (Ib) og 0,27 mg (2,0 mmol) HBT opløses i 5,0 ml DMF, og derefter tilsættes 0,50 g (ca. 2,4 mmol) DCCI med afkøling i et isbad. Efter ca. 1 time tilsættes 0,33 ml (2,2 mmol) heptylamin. Reaktionen får lov til at fortsætte med omrøring natten over, og derefter filtreres det dannede DCU fra, og reaktions-25 blandingen inddampes under vakuum til en olie. Olien æltes med HgO, 2% NaHCOg, H20, 2% KHSO^, og endeligt med HgO. Den opnåede masse krystalliseres fra MeOH + H20. TLC viser et mindre biprodukt Rf = 0,54 (Pa) sammen med hovedproduktet Rf = 0,58 (Pa). Udbytte: 1,13g (94%) Ila.
30 1 Ib. Boc-D-Pro-Phe-Arg(N02)-NH-heptyl. M.w. = 660,8.
For 1,0g (1,67 mmol) Ila fjernes beskyttelsen med 4 ml HOAc og 2,8 ml HBr på samme måde som le i eksempel I. TLC af HBr-saltet af H-Phe-Arg(N02)-NH-heptyl er kontamineret med en mindre mængde af 35 et biprodukt R^. = 0,72 (Pag) sammen med hovedproduktet. R^ = 0,61 (Pag). HBr-saltet ionbyttes på en søjle med QAE-25 i chloridform i 90% EtOH-10% H20 med samme medium til eluering. Der opnås en fraktion med rent hovedprodukt i chloridform, 496 mg (1,0 mmol), som opløses i 2 ml DMF og neutraliseres med 0,15 ml EtgN. Derefter tilsættes 215 mg 6
1 <496 3 O
(1,0 mmol) Boc-D-Pro-OH, 135 mg (1,0 mmol) HBT og under kølige betingelser 250 mg (ca. 1,2 mmol) DCCI. Reaktionen afsluttes efter 20 timer, og derefter filtreres reaktionsblandingen og inddampes under vakuum til en olie, som æltes med 2% NaHCOg i HgO og HgO. Den 5 opnåede masse opløses i MeOH og kromatograferes på en søjle med Sephadex LH-20 i MeOH med MeOH som elueringsmiddel. Fraktionen med rent flb inddampes under vakuum og udvaskes med HgO. Den opnåede krystalmasse tørres under vakuum.
Udbytte: 457 mg (69¾) I Ib 10 TLC: Rf = 0,35 (PI).
II. H-D-Pro-Phe-Arg-NH-heptyl^HCI. M.w. = 588,6.
Fra 300 mg I Ib fjernes beskyttelsen på samme måde som i Id i eksempel I. Yderligere rensning udføres pi samme mide som i eksempel I.
15 Udbytte: 263 mg (98%) II.
TLC: R.p = 0,25 (A) viser kun en plet.
Aminosyreanalyse:
Arg 1,00, Phe 0,97, Pro 0,98.
20 Eksempel 111.
H-D-Pro-Phe-Arg-NH2-2HCI. M.w. = 490,5.
Illa. Boc-D-Pro-Phe-OMe. M.w. = 376,4.
4,2g (19,5 mmol) Boc-D-Pro-OH og 2,7 g (20,0 mmol) HBT opløses i 50 25 ml DMSO. Under omrøring og under kølige betingelser tilsættes 4,4 g (ca. 21 mmol) DCCI. Til reaktionsblandingen tilsættes en opløsning af 4,3 g (20,0 mmol) H-Phe-OMe-HCI i 50 ml DMF, som tidligere under kølige betingelser er neutraliseret med 2,8 ml (20,0 mmol) Et^N og derefter filtreret. Reaktionen får lov til at fortsætte natten over, og 30 derefter frafiltreres det dannede DCU. Reaktionsblandingen inddampes under vakuum til en olie, som opløses i 300 ml EtOAc. EtOAc-opløs-ningen vaskes i rækkefølge med 2% NaHCOg i H20, HgO, 2% KHSO^ i H20 og endelig H20, og tørres derefter med Na^O^. EtOAc-opløs-ningen inddampes under vakuum til tørhed, og den opnåede krystal-35 masse behandles med petroleumsether, filtreres og vaskes med petro-leumsether. Krystalmassen tørres under vakuum.
Udbytte: 5,5 g (75%) 11 la TLC: Rf = 0,53 (P1).
149630 7
Hib. Boc-D-Pro-Phe-OH. M.w. = 362,4.
4,5 g (12,0 mmol) Illa opløses i 50 ml MeOH, og der tilsættes 15 ml 1N NaOH (15 mmol). Efter 2 til 3 timers omrøring ved stuetemperatur udføres inddampning til tørhed. Den opnåede masse opløses i 100 ml 5 HgO og vaskes to gange med 50ml ether, og derefter gøres den vandige fase sur med KHS04 til pH = 3. Efter omrøring ved 0°C i 30 minutter filtreres det dannede præcipitat og vaskes med en lille mængde koldt vand. Præcipitatet tørres derefter under vakuum.
Udbytte: 3,2 g (74%) 11 Ib 10 TLC: Rf = 0,81 (Pag).
I Ile. Boc-D-Pro-Phe-Arg(N02)-NH2. M.w. = 562,6.
0,65 g (1,8 mmol) 11 Ib og 0,26 g (1,9 mmol) HBT opløses i 10 ml DMF.
Under omrøring og kølige betingelser tilsættes 0,38 g (ca. 1,8 mmol) 15 DCCI. Til reaktionsblandingen tilsættes en opløsning af 0,6 g (2 mmol) H-Arg(N02)-NH2*HBr i 10 ml DMF (må opvarmes og afkøles igen før neutralisering), som først neutraliseres under kølige betingelser med 0,3 ml (2,2 mmol) EtgN og derefter filtreres. Reaktionen får lov til at fortsætte natten over, og derefter filtreres det dannede DCU fra.
20 Reaktionsblandingen inddampes under vakuum til en olie, som opløses i kogende EtOAc (100 ml). Ved afkøling opnås et præcipitat, og det vas kes med EtOAc og ether. Præcipitatet (ca. 0,5g) opløses i en større mængde EtOAc og vaskes i rækkefølge med 2% NaHCOg, HgO, H20, 2% KHSO^ og endelig HgO. EtOAc-opløsningen tørres med NagSO^ og 25 inddampes derefter under vakuum til tørhed.
Udbytte: 480 mg (48%) I Ile.
TLC: Rf = 0,73 (Pag).
III. H-D-Pro-Phe-Arg-NH2*2HCI. M.w. = 490,5.
30 Fra 160 mg (0,28 mmol) I Ile fjernes beskyttelsen med ca. 10 ml HF ved 0°C i 50 minutter i nærværelse af 0,3 ml anisol. Efter inddampning under vakuum opløses substansen i ca. 6 ml 50% EtOH-50% HgO og ionbyttes på en søjfe, der indeholder "QAE-2511 i chloridformen i 50% EtOH-50% HgO med det samme medium til eluering. Fraktionen med III
35 inddampes under vakuum, opløses i ca. 5 ml MeOH og kromatograferes
(D
på en søjle med Sephadex LH-20 i MeOH med MeOH som medium til eluering. Fraktionen med rent III frysetørres.
Udbytte: 100 mg (71%) III
149630 δ TLC : Rj. = 0,34 (M) viser kun en plet.
Aminosyreanalyse:
Arg 1,00 , Phe 1,01, Pro 0,98.
5 Eksempel IV
H-D-Pro-Phe-Arg-0-i-Pr*2HCI. M.w. = 533,5.
IVa. H-Arg(N02)-0-i-Pr-HCI. M.w. = 297,8.
5,5g (25 mmol) Arg(N02) opløses i 250 ml isopropanol, og forestring 10 opnås derefter ved gentagne behandlinger med tør HCI-gas på sædvanlig måde. Når reaktionen skønnes at være afsluttet, inddampes reaktionsblandingen til tørhed under vakuum. Esteren (IVa) opnås ved krystallisering ved opløsning af den inddampede masse i en lille mængde varm isopropanol og derefter udfældning med tør ether, når solventen 15 har kølet af. De indvundne krystaller vaskes 3 gange med tør ether. Udbytte: 5,8 g (78%) IVa Smeltepunkt: 179-181°C.
IVb. Boc-D-Pro-Phe-Arg(N02)-0-i-Pr. M.w. = 605,7.
20 Fremgangsmåde, reagenser og mængder er de samme som i eksempel I Ile, men der anvendes 0,60 g (2,0 mmol) IVa i stedet for H-Arg(N02)-NH2*HBr.
Udbytte: 440 mg (40%) IVb TLC: Rf = 0,41 (P1).
25 IV. H-D-Pro-Phe-Arg-O-i-Pr. M.w. = 533,5.
Fra 300 mg (0,50 mmol) IVb fjernes beskyttelsen med HF i nærværelse af anisol pi samme mide som i eksempel I. Produktet renses og ionbyttes på samme måde som i eksempel I.
30 Udbytte: 180 mg (68%) IV
TLC: R^ = 0,21 (A) viser kun en plet.
Aminosyreanalyse:
Arg 1,00, Phe 1,00, Pro 0,98.
35 Eksempel V.
H-D-Phe-Phe-Arg-NH2*2HCI. M.w. = 540,5.
Va. Cbo-D-Phe-Phe-OMe, M.w. = 460,5.
Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel 11 la, men med 149630 9 6.0 g (20 mmol) Cbo-D-Phe-OH i stedet for Boc-D-Pro-OH.
Udbytte: 6,2 g( 67%) Va TLC: Rf = 0,60 (PI).
5 Vb. Cbo-D-Phe-Phe-OH M.w. = 446,5.
6.0 g (13,0 mmol) Va hydrolyseres med NaOH på nøjagtig samme måde som i eksempel 11 Ib.
Udbytte: 4,9 g (84%) Vb TLC: Rf = 0,85 (Pag).
10
Vc. Cbo-D-Phe-Phe-Arg(N02)-NH2. M.w. = 646,7.
Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel I Ile, men med 0,89 g (2,0 mmol) Vb i stedet for lllb.
Udbytte: 505mg ( 39% ) Vc 15 TLC: Rf = 0,80 (Pag).
V. H-D“Phe-Phe-Arg-NH2‘2HCI. M.w. = 540,5.
Fra 400 mg (0,62 mmol) Vc fjernes beskyttelsen, og dette produkt renses og ionbyttes på samme måde som i eksempel I.
20 Udbytte: 296 g (88%) V.
TLC: R^ = 0,37 (M) viser kun en plet.
Ami nosy reanalyse:
Arg 1,00, Phe 1,97.
25 Eksempel VI
H-D-Phe-Phe-Arg-NH-heptyl·2ΗΟ. M.w. = 638,7.
Via. Cbo-D-Phe-Phe-Arg(N02)-NH-heptyl, M.w. = 744,9.
Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel I Ib, men med 30 Cbo-D-Phe-OH i stedet Boc-D-Pro-OH.
Udbytte: 470 mg (63%) Via.
TLC: Rf = 0,42 (PI).
VI. H-D-Phe-Phe-Arg-NH-heptyl-2HCI. M.w. = 638,7.
35 De beskyttende grupper fjernes fra 300 mg (0,40 mmol) Via, dette produkt renses og ionbyttes på samme måde som i eksempel I.
Udbytte: 176 mg (59%) VI
TLC: Rf = 0,28 (A) viser kun en plet.
Aminosyreanalyse:
Arg 1,00, Phe 1,98.
149630 10
Eksempel VII.
H-D-Pro-Phe-Arg-NH-lauryl *2HCI. M.w. = 658,7
Vila. Cbo-Phe-Arg(N02)-NH-Iauryl. M.w. = 667,8.
5 Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel Ila, men med 0,41g (2,2 mmol) laurylamin som amin i stedet for heptylamin.
Udbytte: 1,17 g (88%) Vila TLC: = 0,60 (Pa) er homogen.
10 Vllb. Boc-D-Pro-Phe-Arg(N02)-NH-lauryl. M.w. = 730,9.
Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel I Ib, men med 0,67g (1,0 mmol) Vila som udgangspeptid i stedet for 1,67 mmol Ila i eksempel llb. Ydermere kan HBr-saltet af H-Phe-Arg(N02)-NH-lauryl anvendes uden yderligere rensning på ionbytteren.
15 Udbytte: 585 mg (80%) Vllb TLC: Rf = 0,39 (P1).
VII. H-D-Pro-Phe-Arg-NH-lauryl*2HCI. M.w. = 658,7.
Fra 300 mg (0,41 mmol) Vllb fjernes beskyttelsen, dette produkt renses 20 og ionbyttes på samme måde som i eksempel I.
Udbytte: 230 mg (85%) VII.
TLC: R^, = 0,27 (A) viser kun en plet.
Aminosyreanalyser:
Arg 1,00, Phe 0,98, Pro 0,99.
25
Eksempel VI11 H-D-Phe-Phe-Arg-NH-i-Pr-2HCI. M.w. = 582,6.
Villa. Cbo-Phe-Arg(N02)-NH-i-Pr. M.w. = 541,6.
30 Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel lia, men med 130 mg (2,2 mmol) isopropylamin som amin i stedet for heptylamin.
Udbytte: 0,95 mg (88%) Villa.
TLC: R.J. = 0,51 (Pa) viser en plet.
35 VII Ib. Cbo-D-Phe-Phe-Arg(N02)-NH-i-Pr. M.w. = 688,8.
Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel Via, men med 0,54 g (1,0 mmol) Villa som beskyttet dipeptid i stedet for Ila.
Udbytte: 470mg (68%) VII Ib.
TLC: Rf = 0,38 (P1) 149630 11 VIII. H-D-Phe-Phe-Arg-NH-i-Pr*2HCI. M.w. = 582,6.
Fra 300 mg (0,44 mmol) VII Ib fjernes beskyttelsen, dette produkt renses og ionbyttes på samme mide som i eksempel I.
Udbytte: 205mg (80%) VIII 5 TLC: Rj. = 0,23 (A) viser kun en plet.
Aminosyreanalyse:
Arg 1,00, Phe 1,97.
Eksempel IX.
10 H-D-Phe-Phe-Arg-NH-cyclohexyl^HCI. M.w. = 622,7 IXa. Cbo-Phe-Arg(N02)-NH-cyclohexel. M.w. = 581,7.
Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel Ila, men med 218mg (2,2 mmol) cyclohexylamin som amln i stedet for heptylamin.
15 Udbytte: 0,90g (77%) IXa TLC: R^ = 0,60 (Pa) viser en plet.
IXb. Cbo-D-Phe-Phe-ArgiNC^^NH-cyclohexyl. M.w. = 728,8.
Fremgangsmåde, reagenser og mængder som i eksempel Via, men med 20 0,58g (1,0 mmol) IXa som beskyttet dipeptid i stedet for Ila.
Udbytte: 520mg (71%) IXb TLC: Rf = 0,49 (PI).
IX. H-D-Phe-Phe-Arg-NH-cyclohexyl^HCI. M.w. = 622,7.
25 Fra 300 mg (0,41 mmol) IXb fjernes beskyttelsen, dette produkt renses og ionbyttes på samme måde som i eksempel I.
Udbytte: 185mg (72%) IX.
TLC: Rf = 0,28 (A)
Aminosy reanalyser: 30 Arg 1,00, Phe 1,96.
De hidtil ukendte tripeptidforbindelsers bradykininhæmmende aktivitet fremgår af følgende omtale af den biologiske evaluering på isolerede organer. Den bradykininhæmmende aktivitet undersøges på isoleret 35 rottelivmoder. Rotterne forbehandles subkutant med 0,2 mg/kg diethylstilbestrol, 12-15 timer før forsøget. Musklen fra livmoderen, som deles på langs i to halvdele, anbringes i et bad for glat muskulatur med de Jalon's buffer (de Jaion et al., Farmacother. Acta, Vol. 3, p. 313, 1945), oxygeneret med carbogengas (5% carbondioxyd, 95% oxygen).
149630 12
Temperaturen holdes på 35°C. Musklen strækkes med træk svarende til 0,5 g. Det isometriske træk miles med en "Grass" (FT 03C) krafttransmitter, der er forbundet med en "Grass" polygraf.
Muskel kontraktioner som er fremkaldt af brady kinin i badkon- -11 -fi 5 centrationer på 10 til 10 M (mol/iiter), registreres, og derefter evalueres den koncentration af brady kinin, som inducerer 70% maximal muskel kontraktion (ED^q). Den bradykininhæmmende aktivitet undersøges derefter med tripeptidforbindelserne i bad koncentrationer på 10 -7 -Æ 10 , 10 og 10 M mod EDyg for bradykinin for den pågældende 10 muskel. For hver koncentration inkuberes tripeptidforbindelserne med livmodervævet 5 henholdsvis 10 minutter før tilsætningen af bradykinin.
Den bradykininhæmmende aktivitet udtrykkes som den tid i minutter, der kræves, indtil bradykinin igen giver den oprindelige kontraktion.
Hver bradykinintilsætning efterfølges af vask med bufferen.
13 149630 5 i ro ε "S g
C Ifl ΙΛ 1Λ 1Λ LO O O lO LO LO O O LO LO LO
O) C r- t— T— 00 I- N 00 'i r r η lO
L. E ro ffi > s: 10 2 <*>
-Q
(I- — <*- O) ro o o o o lo lo o o lo lo o o ooo
c C T- T- O O r-T-OO i— T- O O r- OJ LO
*—· f* T“ Έ“” Γ“ T" c c £ S ffi > 15 1 -ol ro s_ > ro -s. -π L_ ~ α \ o 00 N (O ΙΛ CO N (O lA CO S (fl 1Λ S (O 1Π ·“ c I I I i iill i i i i I I i
. e O O O O O O O O O O O O OOO
u r— r- t-* r~ r- r— r— τ- τ- r- τ- c-· r·* r- 20 c -u 0 ro
_j ^ XI
LU
CO
< l.
μ C
® ro 5» Q - - - > 2- E “ z - cc- r ro
CO W
ro _ > is +* & α α ® 5 J ~ έ ro> X X ·=
Ό 0) O Z Z O
c ro i i > t 30 S ro g D) D) σι 1 c < < < < $ 15 ro ro ro ro £ s_ x: .c x £
,£ o OL CL CL CL
r- St t 1 1 I
.t Ό O O o o _5C j3 £- JL S_ i.
> Q Q- Q. 0. Q.
tj ro * 1 * JL
ro α Q Ω Ω Ω
35 (Dpi I I I
U 149630 s- i ro £ Ό rj)
fl) r LD
£ in o m m m ίο uo o in in in in in i—
U) C t- CM CM CO T-CM
Έ E ro «
> X
2 o\° J3 +r » ·* *s D) ni m o in in m o o in o ino o tn o CCr-CO CM CO O O t— t— O 00 t-t-00 C Έ I > I Ό i ro s.
> 0) /•“s l- —
+> Q. CO
ro λν m tv. co i in tv.com n in N cd in in ·— H i r ι ι o ι i i ι ι ι ι i i
jr1 c: o O O O r- O O O O O O O O O
O U ^ <“ r- t- · r- t-t-T- t-r- τ-r-c- ^ c -o m ^ O flj
_j ^ X
UJ CO
< s-
Η C
ro ω j® o. _ — ~ t i > > > > χ in ro _ £ > U -2 & I ^ > jz 12 υ CM ι 1 I 1
(U X X X XX
o <j) X X X X X
c <n « * i ' '
ro on O) O) O) p P
c ® s_ t. s- i· s- | Ί2 < < <C < <
S c I I I I I
to n ro ro ro ro ro
•j; s_ x X £ x jC
c o cl Q- o. tt· tt- ·= <t- I I I I 1 t t φ ro o ro ro
V* '£j _C JZ C* X X
> Q CL 0. CL CL CL
ti ro * 1 * 1 » > ro Q O Q O Ω Ωχ t. ·— ι ι ι i 'ro
CQ+3XX X XXX
DK116380A 1978-07-18 1980-03-18 Analogifremgangsmaade til fremstilling af tripeptidamider eller -estere eller fysiologisk acceptable syreadditionssalte deraf DK149630C (da)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE7807937 1978-07-18
SE7807937 1978-07-18
SE7900157 1979-01-08
PCT/SE1979/000157 WO1980000252A1 (en) 1978-07-18 1979-07-16 Bradykinin-inhibiting tripeptide derivatives

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK116380A DK116380A (da) 1980-03-18
DK149630B true DK149630B (da) 1986-08-18
DK149630C DK149630C (da) 1987-01-26

Family

ID=20335467

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK116380A DK149630C (da) 1978-07-18 1980-03-18 Analogifremgangsmaade til fremstilling af tripeptidamider eller -estere eller fysiologisk acceptable syreadditionssalte deraf

Country Status (8)

Country Link
US (1) US4242329A (da)
EP (1) EP0009010B1 (da)
JP (1) JPS55500520A (da)
AT (1) AT387393B (da)
DE (1) DE2964956D1 (da)
DK (1) DK149630C (da)
SU (1) SU1034603A3 (da)
WO (1) WO1980000252A1 (da)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3164437D1 (en) * 1980-08-25 1984-08-02 Kabivitrum Ab Peptide substrates for determination of protease activity
US4448715A (en) * 1981-11-02 1984-05-15 University Of Miami Tagged pyroglu-L-Phe-L-Arg derivatives, substrates and assays for kallikrein
NZ214543A (en) * 1984-12-14 1990-03-27 Australian Commercial Research Amino acid and peptide derivatives that inhibit human leucocytic elastase enzyme (hle)
GB8622090D0 (en) * 1986-09-12 1986-10-22 Wellcome Found Pharmacologically active compounds
US5648333A (en) * 1988-11-24 1997-07-15 Hoechst Aktiengesellschaft Peptides having bradykinin antagonist action
GB9019558D0 (en) * 1990-09-07 1990-10-24 Szelke Michael Enzyme inhibitors
CA2106768C (en) 1991-04-19 2000-09-19 Donald J. Kyle Bradykinin type peptides
US6770741B1 (en) 1991-04-19 2004-08-03 Scios Inc. Bradykinin antagonist peptides
AU1873992A (en) * 1991-04-19 1992-11-17 Nova Technology Limited Partnership Bradykinin antagonist peptides
WO1993011789A1 (en) 1991-12-12 1993-06-24 Scios Nova Inc. Modified position (7) bradykinin antagonist peptides
TW199863B (da) * 1991-12-21 1993-02-11 Hoechst Ag
US5686565A (en) * 1992-10-08 1997-11-11 Scios Inc. Bradykinin antagonist pseudopeptide derivatives of aminoalkanoic acids and related olefins
US5610142A (en) * 1992-10-08 1997-03-11 Scios Inc. Bradykinin antagonist pseudopeptide derivatives of substituted 4-keto-1,3,8-triazaspiro[4.5]decan-3-alkanoic acids
US5541286A (en) * 1992-10-08 1996-07-30 Scios Nova Inc. Bradykinin antagonist pseudopeptide derivatives of olefinic aminoalkanoic acids
US5521158A (en) * 1992-10-08 1996-05-28 Scios Nova Inc. Pseudopeptide bradykinin receptor antagonists
IL108031A0 (en) * 1992-12-22 1994-04-12 Procter & Gamble Difluoro pentapeptide derivatives and pharmaceutical compositions containing them
WO1994019372A1 (en) * 1993-02-17 1994-09-01 Scios Nova Inc. Cyclic bradykinin antagonist peptides
US5510380A (en) * 1993-02-19 1996-04-23 Sterling Winthrop, Inc. Nonpeptide bradykinin antagonists
US5817756A (en) * 1993-09-09 1998-10-06 Scios Inc. Pseudo- and non-peptide bradykinin receptor antagonists
US5486623A (en) 1993-12-08 1996-01-23 Prototek, Inc. Cysteine protease inhibitors containing heterocyclic leaving groups
WO1995024422A1 (en) * 1994-03-09 1995-09-14 Cortech, Inc. Bradykinin antagonist peptides incorporating n-substituted glycines
FR2794974B1 (fr) * 1999-06-16 2001-08-17 Exsymol Sa Composition cosmetique pour l'amincissement a base de l-arginine, d'un analogue de l-arginine ou d'un de leurs derives, applicable par voie topique

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL6808554A (da) * 1967-06-30 1968-12-31
JPS5035061B1 (da) * 1970-08-07 1975-11-13
JPS5010569B1 (da) * 1970-08-12 1975-04-22
SE380257B (sv) * 1972-05-02 1975-11-03 Bofors Ab Nya diagnostiskt verksamma substrat med hog specificitet till trombin och andra proteolytiska enzymer av typen peptidyl-peptid-hydrolaser
DE2527932C2 (de) * 1974-07-02 1983-04-21 Pentapharm AG, 4052 Basel Säureadditionssalze von Tripeptidderivaten und deren Verwendung als Substrate zur Bestimmung von Plasmakallikrein
SE407571B (sv) * 1975-07-11 1979-04-02 Kabi Ab Nya kromogena enzymsubstrat for serinproteaser
NL7607683A (nl) * 1976-07-12 1978-01-16 Akzo Nv Werkwijze ter bereiding van nieuwe peptiden en peptide-derivaten en de toepassing hiervan.

Also Published As

Publication number Publication date
DK149630C (da) 1987-01-26
EP0009010A1 (en) 1980-03-19
US4242329A (en) 1980-12-30
SU1034603A3 (ru) 1983-08-07
JPS55500520A (da) 1980-08-14
WO1980000252A1 (en) 1980-02-21
DK116380A (da) 1980-03-18
EP0009010B1 (en) 1983-03-02
AT387393B (de) 1989-01-10
DE2964956D1 (en) 1983-04-07
ATA905679A (de) 1988-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK149630B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af tripeptidamider eller -estere eller fysiologisk acceptable syreadditionssalte deraf
JPS6328440B2 (da)
HU189757B (en) Process for producing peptides of psichopharmaceutical activity
JPS6340199B2 (da)
CN108440653A (zh) 一种布舍瑞林化合物的合成方法
SU772481A3 (ru) Способ получени пентапептидов или их эфиров или их амидов или их солей
CS235072B2 (en) Method of l-tyrosyl-d-alanyl-glycyl-l-phenylalanylamide&#39;s new derivatives production
FR2557114A1 (fr) Nouveaux derives de la gonadoliberine, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant
WO2022097540A1 (ja) ジケトピペラジン形成による欠損を抑制するペプチド合成方法
SU993816A3 (ru) Способ получени октапептидов
Ariyoshi et al. The synthesis of a sweet peptide, α-l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester, without the use of protecting groups
JPS61191696A (ja) 血清胸腺因子ペプチド類似体
US3272790A (en) Polypeptides
Meldal et al. Synthesis of a proposed antigenic hexapeptide from Escherichia coli K88 protein fimbriae
US3300469A (en) L-lysyl-l-phenylalanyl-l-isoleucyl-glycyl-l-leucyl-l-methioninamide, derivatives thereof and intermediates in the preparation thereof
US3247180A (en) Nonadecapeptides and intermediates for the preparation thereof
Poojary et al. Synthesis, characterization and biological evaluation of cyclic peptides: viscumamide, yunnanin A and evolidine
US3341510A (en) L-alanyl-l-phenylalanyl-l-isoleucyl-glycyl-l-leucyl-l-methioninamide and a protectedderivative thereof
US3417072A (en) Intermediates in the synthesis of secretin
US4199568A (en) Tetrapeptide amides
US3767639A (en) Process for the preparation of secretin
Pettit et al. Structural biochemistry. XI. Synthesis of tobacco mosaic virus protein sequence 81--85
US3812092A (en) Intermediates in the preparation of secretin
JPS62187489A (ja) リゾチ−ム由来のペプチド
JPH04221394A (ja) ペプチド脂質

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed