DK147338B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af cephalosporinforbindelser eller salte eller biologisk acceptable estere deraf - Google Patents

Description

147338

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af cephalosporinforbindelser med den i krav l's indledning viste formel I, hvor R, Ra og Rs har de sammesteds angivne betydninger, eller salte eller biologisk acceptable estere deraf. Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del angivne.

De cephalosporinforbindelser der er omtalt i nærværende beskrivelse har fået navn ud fra stoffet "cepham" i overensstemmelse med J. Amer. Chem. Soc., 1962, 84, 3400, og benævnelsen "cephem" refererer til den fundamentale cephamstruktur med én dobbeltbinding.

2 147338

Der kendes mange cephalosporinforbindelser med antibak- 3 teriel virkning, og disse forbindelser har Δ -umættethed og er i almindelighed substitueret i 3-stillingen med en metylgruppe eller substitueret metylgruppe og i 7β-3ΐΐ11ΐ^θη med en acylamidogruppe. Det er nu almindeligt anerkendt at de antibiotiske egenskaber af en given ceph-3-em-4-karboxylsyre overvejende bestemmes af arten både af 7β-acylamidogruppen deri og af den substituent i 3-stillingen, som forbindelsen indeholder. Der er sket omfattende forskning med henblik på at finde kombinationer af sådanne grupper, der giver antibiotika med specielle egenskaber.

Cephalosporin-antibiotika anvendes udstrakt til behandling af sygdomme som bevirkes af patogene bakterier, både hos mennesker og dyr, fx til behandling af sygdomme som fremkaldes af bakterier der er resistente mod andre antibiotika såsom penicillinforbindelser, og cephalosporinforbindelser anvendes også udstrakt til behandling af penicillin-overfølsomme patienter. Det er i mange tilfælde ønskeligt at bruge en cepah-losporinforbindelse der udviser aktivitet både mod grampositive og gramnegative mikroorganismer, og omfattende forskningsprogrammer har været rettet mod udvikling af forbedrede bredspektrede cephalosporin-antibiotika.

Den praktiske udnyttelse af et betydeligt antal kendte i handelen gående eller fra forsøgsvirksomhed kendte cephalosporin-antibiotika begrænses af deres forholdsvis høje følsomhed for de β-laktamaser, der dannes af mange bakterier. En ønsket egenskab hos et bredspektret cephalosporin-antibiotikum er derfor at det skal udvise væsentlig modstandsevne mod β-laktamaser, herunder sådanne der frembringes af gramnegative mikroorganismer.

En yderligere vanskelighed ved mange cephalosporin-antibiotika beregnet til terapeutisk anvendelse består i at de kan undergå nedbrydning in vivo. Således har et betydeligt antal kendte cephalosporin-antibiotika vist sig at have den ulempe at de efter indgiften deaktiveres, ofte hurtigt, af enzymer, (fx esteraser) som er til stede i legemet.

Fra dansk patentansøgning nr. 2373/72 kendes cephalosporinforbindelser med den almene formel 3 147338 R2.C.CO.NH___/ \

1 i VI

\h3 /—Y^0

COOH

2 hvor R bl.a. kan være hydrogen, fenyl, naftyl, tienyl, furyl 3 eller pyridyl, R bl.a. alkyl, alkenyl, propinyl, cykloalkyl og fenylalkyl og Q bl.a. metyl, vinyl eller CI^OCONHCCHgJjjjX» hvor X er hydrogen eller halogen og m et tal 1-4. Formel VI omfatter således generisk de ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede forbindelser I, men den ældre ansøgning beskriver eller antyder ikke konkret nogen sådan forbindelse. De ved den foreliggende fremgangsmåde fremstillede snævert definerede N-substituerede 3-karbamoyloxymetylcephalosporiner med snævert defineret 7-sidekæde gav bedre antibiotisk virkning end de nærmeste analoger der er konkret eksemplificeret i ansøgning 2373/72.

Den nærmest beslægtede forbindelse vist i denne er den der er angivet i eksempel 53, (6R,7R)-7-[2-fenyl-2-metoxyiminoacetamido]- 3-(N-klorætylkarbamoyloxymetyl)-ceph-3-em-4-karboxylsyre. Der er foretaget sammenlignende biologisk undersøgelse af denne forbindelse med forbindelser fremstillet ifølge omstående eksempler 1/ 2, 7 og 8 i nærværende beskrivelse. Resultaterne fremgår af nedenstående tabel.

Bakterie .Mindste inhiberende koncentration, _yg/mi_

Forbindelse ifølge eksempel Forbindelse , 9 Ί q ifølge eks. 53 ___________ i ans. 2373/72 S. aureus 663 <0,125 0,25 <0,125 0,25 1,25 S. aureus 853 0,5 0,5 0,25 0,5 1,0 S. aureus 1414 0,25 0,5 0,25 0,25 1,0 E. coli TEM 4444 8 E. coli TEM+ 4844 8 S. typhimurium 804 4844 16

Pr. mirabilis 431 44 4 88

Pr. morganii 235 <0,25 <0,125 <0,125 <0,125 4 H. influenzae 1184 1 1 <0,5 <0,5 16_ U7338 4

Det ses tydeligt af tabellen at de i henhold til den foreliggende fremgangsmåde fremstillede forbindelser har højere virkning end den kendte, både mod den grampositive Staphylococcus aureus og alle de gramnegative organismer, navnlig Proteus morganii og Haemophilus influenzae.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser har således særlig god bredspektret aktivitet kombineret med de foran beskrevne ønskelige egenskaber med hensyn til høj stabilitet overfor S-laktamase og god stabilitet in vivo.

De defineres som havende syn-form (den cis-isomere form) med hensyn til konfigurationen af gruppen 0Ra i forhold til karboxamidogruppen. I nærværende beskrivelse gengives synkonfigurationen strukturelt således: R.C.CONH-

II

N

Syn-konfigurationen tilskrives forbindelserne på basis af det arbejde af Ahmad og Spencer, der er trykt i Can. J. Chem 1961, 39, 1340.

Salte der i givet fald kan dannes af de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser indbefatter både salte med uorganiske baser, fx alkalimetalsalte såsom salte med natrium og kalium samt jordalkalimetalsalte, fx med kalcium, som salte med organiske baser, fx prokain, fenylætybenzyl-amin, dibenzylætylendiamin, ætanolamin, diætanolamin, triætanol-amin og N-metylglukosamin. Saltene kan også have form af resinater, dannet fx med en polystyrenharpiks eller krydsbundet po-lystyren-divinylbenzen-kopolymerharpisk indeholdende aminogrupper eller kvaternære aminogrupper.

Når R i foranstående formel I er en furylgruppe, kan den være fur-2-yl eller fur-3-yl, og er det en tienylgruppe, kan det være tien-2-yl eller tien-3-yl. Fortrinsvis er gruppen R en fur- 2-yl-gruppe.

5 147338

Som nævnt foran er gruppen Ra i formel I en alkyl gruppe med 1-4 kulstofatomer, fx metyl eller ætyl, en alkenylgruppe eller alkynylgruppe med 2-4 kulstofatomer, fx vinyl, allyl eller propargyl, en cykloalkylgruppe med 3-7 kulstofatomer, fx cyklopentyl, eller en fenylgruppe.

Gruppen Rs i formel I kan i det omfang de respektive definitioner tillader det være identisk med eller forskellige fra gruppen Ra. Det kan således være en alkylgruppe med 1-4 kulstofatomer, fx metyl eller ætyl, en alkenylgruppe med 2-4 kulstofatomer, fx vinyl eller allyl, eller en cykloalkylgruppe med 3-7 kulstofatomer, fx cyklopentyl.

Fortrinsvis er gruppen R en fur-2-yl-gruppe og gruppen Ra en metylgruppe.

Ifølge opfindelsen fremstilles særlig hensigtsmæssigt på grund af dens bredspektrede antibiotiske egenskaber, dens stabilitet i nærværelse af humant serum, dens høje stabilitet mod Ø-laktamaser frembragt af forskellige organismer og dens modstandsevne mod indvirkning af pattedyr-esterasar (6R,7R)-7-/2-(fur-2-yl)-2-metoxyiminoacetamido7-3-N-metylkarba-moyloxymetylceph-3-em-4-karboxylsyre (syn-isomeren) med formlen

OH H

-C. CONH--h''2 N

I! ' II

N X-N Λ-CILO.CO.NHCH- \ 0 y' * OCH- υ i

3 COOH

eventuelt i form af dens natriumsalt.

Hvis i formel III eller V er en karboxylblokerende gruppe, kan det være resten af en esterdannende alkohol (ali-fatisk eller aralifatisk), fenol, silanol eller stannanol eller en symmetrisk eller blandet anhydridgruppe afledet af en passende syre.

Salte med baser af forbindelser med den almene formel I kan fx dannes ved omsætning af cephalosporinsyren med natrium- eller kalium-2-ætylhexanoat. Biologisk acceptable esterderivater kan dannes ved hjælp af konventionelle fores tringsmidler .

6 147338

Man kan kondensere et acyleringsmiddel svarende til syren med den almene formel IV med en aminoforbindelse med den almene formel III, hvor R"*" er et hydrogenatom eller en karboxyl-blokerende gruppe, eller et derivat deraf som fx et salt såsom et tosylat eller et N-silylderivat, idet kondensationen evt. udføres i nærværelse af et kondensationsmiddel og om nødvendigt efterfølges af fjernelse af den karboxylblokerende gruppe R1.

Forbindelser med den almene formel I kan således fremstilles ved at man som acyleringsmiddel bruger et syrehalogenid, navnlig et syreklorid eller -bromid, svarende til syrenIV. Sådanne acyleringer kan udføres ved en temperatur mellem -50 og +50°C, fortrinsvis ved -20 og +30°C. Acyleringen kan udføres i vandige eller ikke-vandige medier.

Acylering med et syrehalogenid kan udføres i nærværelse af et syrebindende middel, fx en tertiær amin såsom triætylamin eller dimetylanilin, en uorganisk base såsom kalciumkarbonat eller natriumbikarbonat eller et oxyran, der tjener til at binde hydrogenhalogenid frigjort ved acyleringsreaktionen. Hvor der bruges et oxyran til dette formål er det fortrinsvis et lavere 1,2-alkylenoxyd såsom ætylenoxyd eller propylenoxyd.

Den fri syreform af en forbindelse med den almene formel IV kan selv anvendes som acyleringsmiddel. Sådanne acyleringer udføres hensigtsmæssigt i nærværelse af fx karbodiimid såsom N,Ν'-diætyl-, -dipropyl- eller -diisopropylkarbodiimid, N,N'-dicyklohexylkarbodiimid eller N-ætyl-N'-dimetylaminopropyl-karbodiimid; en karbonylforbindelse såsom karbonyldiimidazol; eller et isoxazoliniumsalt såsom N-ætyl-5-fenylisoxazolinium-3'-sulfonat eller N-t-butyl-5-metylisoxazolimiumperklorat. Konden-sationsreaktionen udføres hensigtsmægsigt i et vandfrit reaktionsmedium som fx metylenklorid, dimetylformamid eller aceto-nitril.

Acyleringen kan også udføres med andre amiddannende derivater af den fri syre IV som fx et symmetrisk anhydrid eller blandet anhydrid, fx med pivalinsyre eller dannet med et halogen- 7 147338 formiat såsom et lavere alkylhalogenformiat. De blandede eller symmetriske anhydrider kan dannes in situ. Fx kan man danne et blandet anhydrid ved hjælp af N-ætoxykarbonyl-2-ætoxy-l, 2-dihydrokinolin. Blandede anhydrider kan også dannes med fosforsyrerne (fx fosforsyre eller fosforsyrling), svovlsyre eller alifatiske eller aromatiske sulfonsyrer, (fx p-toluensulfonsyre).

Omsætningen af 3-hydroxymetylcephalosporinet V med et isocyanat med den almene formel Rs.NCO (hvor Rs har den foran angivne betydning) udføres fortrinsvis i nærværelse af en tri-alkylamin med 1-4 kuls tof atomer i hver alkyl gruppe. Reaktionen kan udføres ved en temperatur i området fra -50 til +105°Cf hensigtsmæssigt ved en temperatur på 0 til 25°C. Reaktionen kan udføres i et i det væsentlige inaktivt organisk opløsningsmiddel, fx Ν,Ν-disubstitueret amid, en halogeneret kulbrinte eller en æter. Reaktioner af denne type er fx beskrevet i USA patentskrift nr. 3.355.452.

3-hydroxymetyl-udgangsmaterialet til anvendelse ved denne fremgangsmådevariant kan fremstilles fx på de måder der er beskrevet i britisk patentskrift nr. 1.121.308 og belgisk patentskrift nr. 783.449.

Som anført foran kan udgangsmaterialer med den almene formel III evt- anvendes i form af syreadditionssalte, fx med sal.t-r · syre, brombrintesyre, svovlsyre, salpetersyre, fosforsyre, toluen-p-sulfonsyre eller metansulfonsyre.

En evt. blokerings gruppe som substituent på 4-karboxy-gruppen i forbindelser med den almene formel III, V eller VI er hensigtsmæssigt en gruppe som let kan fraskilles på et senere trin af reaktionsfølgen og er med fordel en gruppe indeholdende.

1-20 kulstofatomer. Egnede blokerede karboxylgrupper er velkendte i kemien og en liste af repræsentative grupper er indbefattet i vort ovennævnte belgiske patentskrift nr. 783*449.

Foretrukne blokerede karboxylgrupper er bl.a. arylalkoxykarbonyl-grupper såsom p-metoxybenzyloxykarbonyl, p-nitrobenzyloxykarbonyl og difenylmetoxykarbonyl; lavere alkoxokarbonylgrupper såsom t-butoxykarbonyl; og lavere halogenalkoxykarbonylgrupper såsom 2,2,2-triklorætoxykarbonyl. Den karboxylblokerende gruppe kan senere fjernes ved en hvilken som helst af de relevante metoder 8 147338 der er angivet i literaturen; således kan man fx i mange tilfælde bruge syre- eller basekatalyseret hydrolyse såvel som enzymatisk katalyserede hydrolyser.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede antibiotisk virksomme forbindelser kan oparbejdes til indgift på en hvilken som helst hensigtsmæssig måde i analogi med andre antibiotika. Herved kan der fremstilles farmaceutiske præparater der indeholder en antibiotisk virksom forbindelse med den almene formel I eller et ugiftigt derivat deraf, fx et salt eller en biologisk acceptabel ester, idet præparatet oparbejdes til anvendelse i human- og veterinærmedicinen. Sådanne præparater kan oparbejdes til praktisk anvendelse på konventionel måde ved hjælp af passende farmaceutiske bærestoffer eller ekscipienter.

I almindelighed kan præparaterne indeholde fra 0,1% af det virksomme materiale og opefter, fortrinsvis 10-60% deraf, men alt efter den tilsigtede indgiftsmåde. Hvor præparatet har form af dosisenheder vil hver dosis fortrinsvis indeholde 50-1500 mg af det virksomme stof. Den dosis der bruges til behandling af voksne mennesker vil fortrinsvis være 500-4000 mg om dagen i afhængighed af indgiftsvejen og indgiftens hyppighed.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser kan indgives i kombination med andre, dermed forenelige lægemidler såsom antibiotika, fx penicilliner, andre cephalosporiner eller tetracykliner.

9 147338

Nogle eksempler tjener til nærmere belysning af fremgangsmåden ifølge opfindelsen. Smeltepunkter bestemtes på en Kofler-blok i eksempel 1-6; i eksempel 7-13 bestemtes smeltepunkterne i kapillarrør med åben ende på et Mettler-apparat, og de har formen (M^), hvor x er opvarmningshastigheden i °C pr. minut og y er indsætningstemperaturen. Optiske drejninger måltes i temperaturområdet 18-24°C. Ultraviolette spektra måltes i pH6 fosfatpuffer. Forbindelsernes strukturer bekræftes også af infrarød og protonmagnetisk resonansspektroskopi.

Eksempel 1 (6R. 7R)-7-/2- (fur-2-yl )-2-metoxyiminoacetamido7-3-N-f enylkarba-moyloxymetylceph-3-em-4-karboxylsyre f syn-isomer

En opløsning af 1,00 g af syn-isomeren af (6R,7R)-7-/2- (fur-2-yl )-2-metoxyiminoacetamido7-3-hydroxymetylceph-3-em-karboxylsyre i 20 ml Ν,Ν-dimetylformamid (renset ved filtrering gennem basisk aluminiumoxyd) afkøles til 5°C og behandledes med 0,73 ml triætylamin og 2,85 ml fenylisocvanat. Reaktionsblandingen omrørtes i 1 time ved 5°C hvorefter isbadet fjernedes og omrøringen fortsattes i 1 l/2 time ved ca. 20°C. Opløsningen fordeltes mellem 100 ml 3%s vandig natriumbikarbonat og loo ml ætylacetat Lagene adskiltes og den vandige opløsning vaskedes med 3x100 ml ætylacetat og dækkedes derefter med 100 ml ætylacetat og syrnedes til pH 1,89 med koncentreret saltsyre.

Lagene adskiltes og det vandige lag ekstraheredes med yderligere 4x100 ml ætylacetat. De forenede organiske ekstrakter vaskedes med 5x150 ml vand og 100 ml mættet natriumkloridopløsning og tørredes over MgSO^, hvorpå opløsningsmidlet fjernedes i vakuum hvorved der fremkom et gult skum som tritureredes med 50 ml æter og gav 905 mg af den i overskriften angivne forbindelse med ctp = +270 (c = 1 i DMSO), Amax (pH6) 255 nm (ε = 23.500) og 270 nm (ε = 19.500).

10

Eksempel 2 147338

Natrium-(6R, 7R )-7-/2- C f ur-2-yl )-2-metoxyiminoacetamido7-3-N-metylkarb-anoyloxymetylceph- 3-em-4-karboxylat, syn-isomer

Behandling af 1,525 g af syn-isomeren af (6R,7R)-7-fl- ( fur-2-yl) -2-metoxyiminoacet amidc^- 3-hydr oxymetylceph- 3-em- 4-karboxylsyre i 60 ml N, N-dime tylf ormamid med 1,12 ml triætyl-amin og 2,0 ml metylisocyanat som beskrevet i eksempel 1 gav 0,803 g af syn-isomeren af (6R,7R)-7-,/2-(fPi’-2-yl)-2-metoxy-iminoacetamido7-3-N-metylkarbamoyloxymetylceph-3-em-4-karboxyl-syre. En del heraf, nemlig 0,726 g, opløstes i 2 ml acetone og der tilsattes en opløsning af 1,66 mmol natrium-DL-2-ætylhexa-noat i 1,6 ml acetone, hvorefter opløsningen henstod i køleskab natten over. Produktet frafiltreredes vaskedes med afkølet acetone og tørredes i vakuum til frembringelse af 282 mg af den i overskriften angivne forbindelse, ctp = +59° (c = 1 i H20), λ max (PH6) 274 nm (ε = 17.600).

Eksempel 3 (6R, 7R)-3- (N-ætylkarbamoyloxymetyl )-7-/5- (fur-2-yl )-2-metoxy-iminoacetamido7-ceph-3-em-4—karboxylsyre, syn-isomer

Omsætning af 1,54 g (6R, 7R)-7-i/2-(fur-2-yi)-2-metoxy-iminoacetamido7-3-hydroxymetylceph-3-em-4-karboxylsyre (syn-isomer) i 60 ml Ν,Ν-dimetylformamid med 2,0 ml ætylisocyanat og 1,12 ml triætylamin som i eksempel 1 gav 622 mg af den i overskriften angivne forbindelse med = + 68° (c = 1 i DMS0),

Amax (PH6) 273 um ( ε = 16.350).

Eksempel 4 (6R, 7R)-3- (N-t-butylkarbamoyloxymetyl-7-/2- ( f ur-2-yl )-2-metoxy-iminoacetamido7-ceph-3-em-4-karboxylsyre, syn-isomer

Omsætning af 2,00 g af syn-isomeren af (6R,7R)-7-^2- (fur-2-yl)-2-metoxyiminoacetamido7-3-hydroxymetylceph-3-em-4-karboxylsyre i 60 ml Ν,Ν-dimetylf ormamid med 5,20 g t-butyl-isocyanat og 2,92 ml triætylamin som i eksempel 1 gav 1,58 g af den i overskriften angivne forbindelse med aD = +77° (c = 1 i DMS0), Amax (pH 6) 275 nm (ε = 16.400).

11

Eksempel 5 147338 (6R, 7R)- 3- (N -allylkarbamoyloxymetyl )-7-/?- (fur-2-yl )-2-metoxy-iminoacetamido'7-ceph-3-emr-4-karboxylsyre, syn-isomer

Behandling af 2,00 g af syn-isomeren af (6R,7R)-7 (fur-2-yl)-2-metoxyiminoacetami doj- 3-hydroxymetyl ceph- 3-em-4-karboxylsyre i 100 ml N,N-dimetylformamid med 2,0 ml triætyl-amin og 4,42 g allylisocyanat som iøvrigt forklaret i eksempel 1 gav 1,63 g af den i overskriften angivne forbindelse med = + 32° (c = 1,1 i DMSO), Xmax (pH 6) 274 nm (ε = 13.100).

Eksempel 6 (6R,7R)-7-/gL(fur-2-yl)-2~metoxyiminoacetamido7-3-N-metylkarba-moyloxymetylceph-3-em-4—karboxylsyre, syn-isomer

En suspension af 1,00 g af syn-isomeren af (6R,7R)-7-(f ur-2-yl) - 2-met oxyiminoacet ami åo/- 3-hydroxymetyl ceph- 3-em-4-karboxylsyre i 50 ml tør diklormetan behandledes med 0,871 g tri-n-butyltinoxyd og omrørtes under nitrogen i 30 min. ved 21°C, i løbet af hvilken periode suspensionen gik i opløsning. Der tilsattes 0,60 g (10,50 mmol) metylisocyanat og omrøringen fortsatte i yderligere 3 timer. Der tilsattes 30 ml ætylacetat og 30 ml vand og diklormetanen fjernedes i vakuum. Rumfanget af ætyl- ' acetatet udgjorde ca. 30 ml og opløsningens pH værdi reguleredes til 8,5 med vandigt natriumbikarbonatopløsning. Den vandige opløsning vaskedes med ætylacetat (3 x 30 ml) og dækkedes med yderligere ætylacetat (30 ml), hvorefter den reguleredes til pH 1,9 med saltsyre. Faserne adskiltes og den vandige fase ekstraheredes med yderligere 3 x 30 ml ætylacetat. De forenede ætylacetatekstrakter vaskedes med mættet natriumkloridopløsning og tørredes over magniumsulfat, hvorpå opløsningsmidlet fjernedes i vakuum og gav den i overskriften angivne karboxyl-syre som et smudsigt hvidt skum i en mængde på 0,962 g; aD = +47° (c =0,57 i DMSO), \max 273 nm (ε = 15.450)i

Eksempel 7 147338 12 (6R, 7R)-3-M- cyklohexylkar bamoyloxymetyl-7-/2-iretr>xvi nvi no-2- (fur-2-vl) -acetamido7- ceph-3-em-4-karboxylsyre, syn-isomer

En suspension af 1,00 g af syn-isomeren af (6R,7R)-3-hydroxymetyl-7-i(^-metoxyimino--2- (fur-2-yl) -acet ami do7-ceph- 3-em-4-karboxylsyre i 50 ml tør benzen under nitrogen behandles med 0,870 g tri-n-butyltinoxyd, og der indtrådte opløsning efter on>-røring i 30 minutter. Der tilsattes 1,318 g cyklohexylisocyanat og omrør|ng^ogggtsattes i yderligere 3 l/2 time i løbet af hvilken periode/blev i det væsentlige fuldstændig.

Tilsætning af 50 ml vand til reaktionsblandingen bevirkede udfældning af dicyklohexylurinstof, der frafiltreredes. Benzenlaget fraskiltes og omrørtes og der tilsattes 50 ml 0,1M saltsyre til frembringelse af et hvidt gelatinøst bundfald, der frafiltreredes. Bundfaldet opløstes i vandig natriumbikarbonat-opløsning som ekstraheredes med 50 ml ætylacetat. Den vandige fase syrnedes med 2M saltsyre og ekstraheredes med 2 x 80 ml ætylacetat. Det organiske lag vaskedes med 2 x 150 ml vand, tørredes over magniumsulfat og inddampedes i vakuum til 396 mg af den i overskriften angivne forbindelse i form af et smudsig-hvidt fast stof med smeltepunkt (m|q) 162°C, a^0’·5 = + 38,0° (c = 1,03 i dioxan), Amax (pH 6 fosfatpuffer) 274 nm (ε = 16.930).

Eksempel 8 (6R, 7R)- 3-N-n-butylkarbamoyloxymetyl-7-/^,-metoxyimino-2- (fur-2-yl)-acetamido7-ceph-3-em-4—karboxylsyre, syn-isomer

En suspension af 2,00 g af syn-isomeren af (6R,7R)-3-hydroxymetyl-7-j/2-metoxyimino-2-(fur-2-yl)-acetamido7-ceph-3-em-4-karboxylsyre i tørt benzen (under nitrogen) behandledes med 1,74 g tri-n-butyl tinoxyd, og der indtrådte opløsning efter omrøring i 1 time. Der tilsattes 2,08 g n-butylisocyanat og om- 13 147338 røringen fortsattes i yderligere 4 timer. Der sattes 100 ml vand til reaktionsblandingen og det omrørte, fraskilte benzenlag behandledes med 100 ml 0,1M saltsyre til at bevirke afsætning af et gelatinøst bundfald; dette frafiltreredes og opløstes i 100 ml mættet vandig natriumbikarbonatopløsning. Efter vask af den vandige opløsning med 2 x 100 ml ætylacetat syrnedes den vandige fase med 2M saltsyre under et ætylacetatlag (100 ml). Den organiske fase fraskiltes og det vandige lag genekstraheredes med 100 ml ætylacetat. De forenede organiske ekstrakter vaskedes med 2 x 200 ml vand, tørredes over magniumsulfat og inddampedes i vakuum til 1,124 g af den i overskriften angivne forbindelse som et lysegult fast stof med smeltepunkt (M^q) 149,6°C, = +42,6° (c = 1,03 i DMS0), Amax (pH 6 fosfatpuffer) 274 nm (ε = 16.960),

Eksempel 9 (6R, 7R) -7- Z^-met oxyimino- 2- (ti en- 2-yl) -acet ami åoj- 3-N-metylkar-bamoyloxymetylceph-3-em-4-karboxylsyre, syn-isomer

En opløsning af 926 mg af syn-isomeren af 2-metoxyimino- 2-(tien-2-yl)-eddikesyre i 30 ml tør diklormetan afkøledes til ca. 0°C under tørt nitrogen.

Denne opløsning omrørtes ved ca. 0°C med 0,7 ml triætyl-amin, 0,43 ml oxalylklorid og 1 dråbe tørt N,N-dimetylformamid i 1 1/4 time i løbet af hvilken periode der indtrådte mild brus-ning og affarvning.

Opløsningen inddampe des og tørredes i vakuum i 1 l/4 time, hvorved det tilsvarende syreklorid vandtes som smudsighvide krystaller.

En opløsning af ca. 5 mmol af syrekloridet i 50 ml tør acetone sattes dråbevis i løbet af 15 min. ved ca. 1°C til en opløsning af 862 mg (6R,7R)-7-amino-3-N-metylkarbamoyloxymetyl-ceph-3-em-4—karboxylsyre og 756 mg natriumhydrogenkarbonat i 60 ml vand, og reaktionsblandingen omrørtes i yderligere 1 1/4 time i løbet af hvilken periode reaktionen gik "til ende (bedømt ved tic).

Opløsningen (ved ca. pH 7) vaskedes med 3.x 100 ml ætylacetat og de.forenede vaskevæsker tilbageekstraheredes med 2 x 50 ml vand.

147338 14

Den vandige fase bragtes til lagdeling med 150 ml ætylacetat og syrnedes til pH 1,9 med koncentreret saltsyre. Den vandige fase ekstraheredes med yderligere 2 x 100 ml ætylacetat, hvorefter de organiske ekstrakter forenedes, vaskedes med 2 x 150 ml vand og 75 ml mættet saltlage og tørredes over magniumsulfat og inddampedes i vakuum til 1,503 g halvkrystallinsk hvidt fast stof. Triturering af råproduktet med 30 ml æter gav 863 mg af den i overskriften angivne forbindelse som et hvidt fast stof med smeltepunkt (m|0) 144°C, a^2 =+57,3° (c= 1,14 i DMSO), Xmax (pH 6 fosfatpuffer) 263 nm (ε = 16.300)med en inflektion ved 295 nm (ε = 10.650).

Eksempel 10 (6R, 7R)-7-/?-ætoxyimino-2-fenylacetamido7-3-N-metylkarbamoyloxy-metylceph-3-em-4-karboxylsyre, syn-isomer

Denne forbindelse fremstilledes på lignende måde som beskrevet i eksempel 9, men med den forskel at syrekloridet fremstilledes ud fra 561 mg af syn-isomeren af 2-ætoxyimino-2-fenyl-eddikesyre og at det rå syreklorid isoleredes som et gult krystallinsk fast stof.

Dråbevis tilsætning af syrekloridet i 28 ml tør acetone til en opløsning af 500 mg (6R,7R)-7-amino-3-N-metylkarbamoy-loxymetylceph-3-em-4-ka-rboxylsyre og 439 mg na triumhydr o genkarbonat i 35 ml vand ved ca. 10°C i løbet af 10 minutter og påfølgende omrøring ved 5-10°C i 3 l/2 time førte til acylering af aminoforbin-delsen, hvilket fremgik af tic. Reaktionsblandingen oparbejdedes derefter på i det væsentlige samme måde som beskrevet i eksempel 9, hvorved der vandtes 480 mg af den i overskriften angivne forbindelse som et hvidt pulver med smeltepunkt (Mg0) 138°C, ,ό^2 = +58,0° (c = 1,0 i DMSO), Xmax (pH 6 fosfat puffer) 259 nm (ε = 20.150).

Eksempel 11 14-7338 15 (6R, 7R)-3-N-metylkarbamoyloxymetyl-7-/£-fenoxyimino-2-»fenvlacet-amido7-ceph-3-em-4-karboxylsyre, syn-isomer 700 mg af syrekloridet af 2-fenoxyimino-2-fenyleddike-syre (syn-isomer) fremstilledes på samme måde som beskrevet i eksempel 9. Det rå syreklorid isoleredes som en lysebrun gummi.

En opløsning af dette rå syreklorid i 28 ml tør acetone sattes dråbevis til en til 10°C afkølet opløsning af 500 mg (6R,7R)- 7-amino-3-N-metylkarbamoyloxymetylceph-3-em-4-karboxylsyre, 35 ml vand og 439 mg natriumhydrogenkarbonat i løbet af 10 min., og efter tic-undersøgelse var reaktionen fuldført efter omrøring i 3 timer ved 5-10°C. Reaktionsblandingen oparbejdedes derefter på praktisk talt samme måde som beskrevet i eksempel 9 og der vandtes herved 453 mg af den i overskriften angivne forbindelse som et hvidt pulver med smeltepunkt (MgQ) 165°C, = + 78,8° ( c = 1,23 i DMS0),

Xmax (pH 6 fosfatpuffer) 260 nm (ε = 20.050) med inflektioner ved 265,5 nm (e = 18.685) og 282 nm (ε = 13.300).

Eksempel 12 (6R, 7R)-7-/2-cyklopentyloxyimino-2- (f ur-2-yi) -acet ami do7- 3-N-met yl-karbamoyloxymetylceph-3-em-4-karboxylsyre, syn-isomer

Den metode der anvendtes til fremstilling af syrekloridet var den samme som den der anvendtes i eksempel 9 med den forskel at der anvendtes 556 mg af syn-isomeren af 2-cyklopentyloxyimino-2-(fur- 2-yl)-eddikesyre som udgangssyre. Syrekloridet isoleredes derefter som et krystallinsk fast stof

En opløsning af ovennævnte syreklorid i 25 ml tør acetone sattes dråbevis ved ca. 10°C til en opløsning af 500 mg (6R,7R)-

7-amino-3-N-metylkarbamoyloxymetylceph-3-em-4-karboxylsyre og 439 mg natriumhydrogenkarbonat i 35 ml vand i løbet af en periode på 10 min. Efter at man havde ladet reaktionen fortsætte i 2 timer ved 5-10°C

16 147338 viste tic at reaktionen var fuldstændig. Reaktionsiblandingen oparbejdedes på i det væsentlige samme måde som beskrevet i eksempel 9, og herved vandtes 608 mg af den i overskriften angivne forbindelse som et hvidt pulver med smeltepunkt (Mqq) 126°C, o^2 = +6.8,5° (c = 1,06 i DMSO), Xmax (pH 6 fosfatpuffer) 276,5 nm (e = 19.400).

Eksempel 13 (6R, 7R)-3-N-metylkarbamoyloxymetyl-7-/5-metoxyimino-2- (fur-2-yl )-acetamido7-ceph-3-em-4—karboxylsyre, syn-jsomer

Fremstillingen af syrekloridet foregik på lignende måde som beskrevet i eksempel 9, men med den forskel at der brugtes 282 mg af syn-someren af 2-metoxyimino-2-(fur-2-yi)-eddikesyre som udgangsmateriale. Syr ekloridet isoleredes som smudsighvide krystaller.

En opløsning af ca. 1,67 mmol af syrekloridet i 17 ml tør acetone sattes dråbevis ved ca 10°C til en opløsning af 287 mg (6R, 7R) -7-amino- 3-N-metylkarbamoyloxymetyl ceph- 3- em-4—k ar boxyl-syre og 252 mg natriumhydr o genkarbonat i 20 ml vand i løbet af 15 min. Blandingen holdtes på 5 til 10°C i 1 time efter hvilken periode reaktionen var fuldført, bedømt ved tic. Blandingen oparbejdedes på lignende måde som beskrevet i eksempel 9 og der fremkom herved 258 mg af den i overskriften angivne forbindelse som et fast stof med smeltepunkt (Møq) 159°C, a^2 = +58,9° (c = 1,08 i DMSO), \max (pH 6 fosfatpuffer) 273 nm (ε = 17.360) med inflektioner ved 260,5 nm (ε = 15-300) og 285 nm (ε = 15.825).

Eksempel 14 (R og S)-1-Acetoxyatyl-(6R,7R) -3-N-metylkarbamoyloxymetyl-7-[ (Z) -2- (fur-2-y3>-2-metoxyiminoacetamido3 -ceph-3-em-4-karboxylat En opløsning af 0,682 g (6R,7R)-3-metylkarbamoyloxy-metyl-7-[(Z)-2-(fur-2-yl)-2-metoxyiminoacetamido]-ceph-3-em-4-karboxylsyre i 10 ml N,N-dimety3formamid behandledes successivt ved 0°C med 0,107 g tørt kaliumkarbonat og en opløsning af 0,286 g (R,S)-1-acetoxyætylbromid i 5 ml Ν,Ν-dimetylformamid.

17 147338

Reaktionsblandingen omrørtes ved 0°C i 50 minutter og fordeltes mellem 40 ml ætylacetat og 40 ml 2N saltsyre. Den vandige fase ekstraheredes med yderligere 40 ml ætylacetat og de forenede organiske ekstrakter vaskedes successivt med 40 ml vand, 40 ml vandig natriumbikarbonatopløsning, 40 ml vand og 40 ml mættet saltlage, tørredes over magniumsulfat og inddampedes til tørhed i vakuum. Triturering af remanensen, 0,63 g, med vandfri æter gav 0,45 g af den i overskriften angivne ester som et fast stof; [a]D = +49,6° (c = 1,07 i DMSO); vmax (nujol) 3500-3100 (2 x NH), 1790 (β-laktam) , 1766 (O.CO.CHg), 1725 (COOH) , 1680 (O.CO.NHCH-j) og 1680 og 1534 cm-1 (CONH).

Fremstilling a£ et udgangsmateriale (6R,7R)-7-amino-3-N-metylkarbamoyloxymetylceph-3-em-4-karboxyl··» syre

En suspension af 1,029 g (6R,7R)-7-amino-3-hydroxymetyl-ceph-3-em-4-karboxylsyre i 50 ml tør diklormetan behandledes under nitrogen med 0,436 g triætylamin og med 1,25 g tri-n-butyl-tinoxyd, og blandingen omrørtes i 30 min. Der tilsattes 0,570 g metylisocyanat i 5 ml tør diklormetan og reaktionsblandingen omrørtes ved 22°C i 4 timer. Det uopløselige materiale frafiltre-redes og der tilsattes 2 ml vand, hvorpå opløsningen afkøledes og pH reguleredes til 3,1 med myresyre. Den resulterende suspen- o sion omrørtes i 30 min. ved ca. 5 C og bundfaldet frafiltreredes, vaskedes med koldt vand og tørredes i vakuum til frembringelse af 0,482 g af den i overskriften angivne aminosyre, = + 34° (c = 0,70 i DMSO), Xmax (pH 6 puffer) 263 nm (ε = 7.100), kinf 246 nm (ε = 6.300).

Claims (2)

147338

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af cephalospo-rinforbindelser med den almene formel ? ? S. R.jj.CONH_j_/ \ 1_!_N .J_CH_O.CO.NH.RS I xoRa

/ 2 COOH hvor R betegner en furylgruppe, tienylgruppe eller fenylgrup-pe, Ra en alkylgruppe med 1-4 kulstofatomer, en alkenylgrup-pe eller alkynylgruppe med 2-4 kulstofatomer, en cykloalkyl- G gruppe med 3-7 kulstofatomer eller en fenylgruppe og R en alkylgruppe med 1-4 kulstofatomer, en alkenylgruppe eller alkynylgruppe med 2-4 kulstofatomer, en cykloalkylgruppe med 3-7 kulstofatomer, en benzylgruppe eller en fenylgruppe, eller salte eller biologisk acceptable estere deraf, idet forbindelsen er en syn-isomer der eventuelt indeholder indtil 10% af anti-isomeren, kendetegnet ved at man a) kondenserer en forbindelse med den almene formel h2n —i— ^ ....N^^j-C^O.CO.NHR5 III COOR1 hvor R^· er et hydrogenatom eller en karboxylblokerende gruppe og Rs har den ovenfor angivne betydning, eller et syreadditionssalt eller N-silylderivat deraf med et acyleringsmiddel svarende til syren R.C.COOH il IV ^•OR3