DE69708134T2

DE69708134T2 - Herstellungsverfahren eines geschlossenen, kontrastmittel enhaltenden behälters

Info

Publication number: DE69708134T2
Application number: DE69708134T
Authority: DE
Inventors: Robert Snow
Original assignee: Nycomed Imaging AS
Current assignee: GE Healthcare AS
Priority date: 1996-08-27
Filing date: 1997-08-27
Publication date: 2002-08-22
Anticipated expiration: 2017-08-28
Also published as: NO990866D0; ATE208330T1; GB9617811D0; US6177160B1; CA2264075A1; EP0929465B1; JP2000517272A; CN1233224A; WO1998008747A1; EP0929465A1; DE69708134D1; NO990866L; AU4026197A

Description

Diese Erfindung betrifft Lagerungsmittel für Kontrastmittel, insbesondere für Kontrastmittel, welche flüchtige Substanzen einschließen oder zum Einschließen angepasst sind.
Es ist altbekannt, dass die Ultraschallbildgebung ein potentiell wertvolles diagnostisches Hilfsmittel umfasst, beispielsweise in Studien des Gefäßsystems, insbesondere in der Cardiographie, und des Mikrogefäßgewebes. Eine Vielzahl von Kontrastmitteln wurde vorgeschlagen, um die akustischen Bilder, welche so erhalten werden, zu verstärken, einschließlich Suspensionen von festen Teilchen, emulgierten flüssigen Tröpfchen, Gasblasen und eingekapselten Gase oder Flüssigkeiten. Es ist allgemein akzeptiert, dass Kontrastmittel mit niedriger Dichte, welche leicht komprimierbar sind, besonders wirksam sind in Bezug auf die akustische Rückstreuung, die sie bilden, und daher wurde der Herstellung von Gas-enthaltenden und Gas-bildenden Systemen, z. B. Kontrastmitteln, welche flüchtige Substanzen einschließen oder zum Einschuss angepasst sind, bemerkenswertes Interesse entgegengebracht.
Viel Aufmerksamkeit wurde der Auswahl von Gasen für Gas-enthaltende Ultraschallkontrastmedien geschenkt, um Eigenschaften, wie deren Stabilität und Dauer des echogenen Effekts, zu verbessern. So schlägt beispielsweise die WO- A-9305819 die Verwendung von freien Gasmikrobläschen mit einem Koeffizienten Q größer als 5 vor, worin
Q = 4,0 · 10&supmin;&sup7; · p/CsD
(worin p die Dichte des Gases in kg · m³, Cs die Wasserlöslickeit des Gases in mol · l&supmin;¹ und D die Verteilbarkeit (Diffusität) des Gases in Lösung in cm³ · sec&supmin;¹ darstellt). Eine ausgiebige Liste von Gasen, welche dieses Erfordernis erfüllen soll, wird präsentiert, wobei diese eine Vielzahl von Kohlenwasserstoffen, wie Alkane, Alkene etc., und halogenierte Verbindungen, wie Schwefelhexafluorid, Dischwefeldecafluorid, Wolframhexafluorid, bromierte und/oder chlorierte und/ oder fluorierte und/oder iodierte Kohlenwasserstoffe, bromierte Aldehyde, fluorierte Ketone, fluorierte Amine, fluorierte Mercaptane etc. einschließt.
Die EP-A-0 554 213 schlägt vor, dass man gasgefüllten Mikrovesikeln eine Widerstandsfähigkeit gegenüber Kollaps durch Druck durch Einführen mindestens eines Gases verleihen kann, dessen Löslichkeit in Wasser, ausgedrückt in Litern Gas/Liter Wasser unter Standardbedingungen dividiert durch die Quadratwurzel von dessen Molekulargewicht, 0,003 nicht überschreitet. Gase, welche als bevorzugt angegeben sind, umschließen halogenierte Verbindungen, wie Schwefelhexafluorid, Selenhexafluorid und verschiedene Freone .
Die WO-A-9416739 offenbart Ultraschallkontrastmittel, umfassend kolloidale Flüssigkeit-in-Flüssigkeit-Dispersionen, in denen die dispergierte Phase eine Flüssigkeit mit einem Siedepunkt unterhalb der Körpertemperatur des Versuchsobjekts darstellt, von dem ein Bild aufgenommen wird. Solche Mittel unterziehen sich einem Phasenwechsel zu einem echogenen gasförmigen Schaum, worauf die Gabe an das Versuchsobjekt erfolgt. Beispiele geeigneter flüchtiger disperser Phasen-Flüssigkeiten sollen aliphatische Kohlenwasserstoffe, wie Butane und Penthane, und organische Halogenide, insbesondere Fluorkohlenwasserstoffe, wie Perfluorbutan, Perfluorpentan und Perfluorneopentan, einschließen.
Die WO-A-9503835 schlägt die Verwendung von Mikrobläschen vor, welche eine Gasmischung enthalten, wobei deren Zusammensetzung auf Betrachtungen des Gaspartialdruckes sowohl innerhalb als auch außerhalb der Mikrobläschen beruhen, so dass osmotische Effekte auf die Mikrobläschengröße einbezogen werden. Repräsentative Mischungen umfassen ein Gas mit einem niedrigen Dampfdruck und einer begrenzten Löslichkeit in Blut oder Serum (z. B. ein Fluorkohlenstoff) in Kombination mit einem anderen Gas, welches mit Gasen, welche in normalem Blut oder Serum (z. B. Stickstoff, Sauerstoff, Kohlendioxid oder Mischungen davon) enthalten sind, schnell ausgetauscht wird.
Die WO-A-9516467 schlägt die Verwendung von Ultraschallkontrastmedien vor, enthaltend eine Mischung von Gasen A und B, worin Gas B in einer Menge von 0.5-41% v/v vorliegt, ein Molekulargewicht größer als 80 Dalton aufweist und eine Wasserlöslichkeit unterhalb von 0,0283 ml/ml Wasser unter Standardbedingungen besitzt. Repräsentative Gase B umschließen halogenierte Gase, wie Schwefelhexafluorid, und eine Vielzahl von bromierten und/oder chlorierten und/oder fluorierten Kohlenwasserstoffen. Repräsentative Gase A, welche den Rest der Mischung ausmachen, umschließen Luft, Sauerstoff, Stickstoff, Kohlendioxid und Mischungen davon.
Die WO-A-9608234 beansprucht Behälter, umfassend eine wässrige Lipidsuspensionsphase und eine gasförmige Phase, z. B. umfassend einen Kohlenwasserstoff, wie ein Alkan oder Alken, oder insbesondere ein fluoriertes Gas, wie einen Perfluorkohlenwasserstoff, welche im wesentlichen von der Lipidphase getrennt ist. Bewegung der Bestandteile solcher Behälter soll gasgefüllte Liposomzusammensetzungen bilden, welche als Kontrastmittel beispielsweise in der Ultraschall- oder Magnetresonanzbildgebung nützlich sind.
Die WO 96/01105 beansprucht ein Verfahren gemäß der Präambel von Anspruch 1 zur Behandlung von Schmiermittel-beachichteten Kapseln, welche zur Lagerung eines pharmazeutischen Pulvers verwendet werden, umfassend das Aussetzen der Schmiermittel-beschichteten inneren Oberfläche der Kapsel einem pharmazeutisch annehmbaren Lösungsmittel, welches zum Lösen des Schmiermittels fähig ist, vor dem Einfügen des pharmazeutischen Pulvers in das innere der Kapsel. Während das Lösungsmittel flüchtig sein kann, ist das pharmazeutische Pulver bevorzugt ein Polypeptid zur Gabe an einen Patienten über ein Aerosol.
Die US 2,573,637 offenbart ein Verfahren gemäß der Präambel von Anspruch 1 und betrifft Stopfen für Medikamentenfläschchen, wobei der Stopfen ein Silikonantischaummittel umfasst, welches in die Fläschcheninhalte zum Verhindern des Schäumens freigesetzt wird.
Die WO-A-9618420 bezieht sich auf Produkte, umfassend Gasbläschen, welche innerhalb eines eingefrorenen physiologisch annehmbaren wässrigen Trägermediums immobilisiert sind, enthaltend geeignete Stabilisierungsadditive etc.; solche Produkte können unter Bildung von injizierbaren Ultraschallkontrastmitteln aufgetaut werden. Repräsentative Gase sollen halogenhaltige Gase, wie Schwefelhexafluorid, Perfluormethan, Perfluorethan, Perfluorethen, Perfluorpropan, Perfluorpropen, Perfluorpropan, Perfluorbut-2-en, Perfluorbutadien, Perfluorcyclobutan, Perfluorpentan, Perfluorcyclopentan und Mischungen davon, einschließen. Kontrastmittel, wie die in der oben erwähnten EP-A-0 554 213, der WO-A-9503835 und der WO-A-9516467 offenbarten, sind typischerweise zur Gabe als trockene Formulierungen vorgesehen, z. B. umfassend geeignete Tenside, Additive, Stabilisatoren etc., unter einer Atmosphäre des vorgesehenen Gasbestandteils. Solche trockenen Formulierungen können durch Zugabe einer geeigneten Trägerflüssigkeit, z. B. sterilem Pyrogen-freiem Wasser oder Salzlösung, vor der Gabe, z. B. durch intravenöse Injektion, aufgelöst werden.
Kontrastmittel, wie jene der WO-A-9416739 und der WO-A-9608234, werden als flüssige Formulierung zugeführt. Jene der WO-A-9608234 erfordern insbesondere die Anwesenheit eine s Gases in dem Kopfraum oberhalb der wässrigen Lipidphase. Jeglicher Kopfraum oberhalb der gelagerten Kontrastmittelformen gemäß der WO-A-9416739 kann etwas dispergiertes Phasenmaterial in Dampfform aufgrund der bestimmten Flüchtigkeit dieses Materials enthalten.
Im allgemeinen werden die Kontrastmittel und deren Vorstufen, wie trockene Formulierungen, typischerweise in geschlossenen Behältern zur Verfügung gestellt, beispielsweise in Fläschchen oder anderen Behältern, welche mit Verschlußmitteln verschlossen sind, wie Stopfen oder Septen, oder in vorgefüllten Spritzen. Die Inhalte solcher Behälter können vorteilhafterweise derartig sein, dass sie eine geeignete Einheitsdosierung des Kontrastmittels festsetzen oder bilden. Behälter, wie Fläschchen, können typischerweise Glas- und/oder Plastikmaterialien umfassen und mit Verschlußmitteln verschlossen sein, umfassend Plastikmaterialien, beispielsweise Elastomere. Behälter, wie Spritzen, können auf ähnliche Weise Glas- und/oder Plastikmaterialien umfassen und können typischerweise Tauchkolben einschließen, welche Plastikmaterialien umfassen.
Die vorliegende Erfindung basiert zum Teil auf dem Auffinden, daß dort, wo Kontrastmittel, welche eine flüchtige Substanz umfassen, in geschlossenen Behältern, umfassend ein Plastikmaterial, gelagert werden, die Lagerungsstabiltät solcher Mittel, wie z. B. gemessen durch die Länge der Lagerungszeit, während der das Produkt zur Bildung von beständig reproduzierbarer Echogenizität unter Standardbedingungen fähig bleibt, deutlich erhöht werden kann durch die Vorbehandlung solcher Plastikmaterialien mit der flüchtigen Substanz. Darüber hinaus wurde gefunden. daß solche vorbehandelten Plastikmaterialien ebenso als Quellen der flüchtigen Substanz zum Einleiten in die geschlossenen Behälter und dadurch in die Kontrastmittel oder deren Vorstufen, welche darin enthalten sind, eingesetzt werden können.
Somit wird gemäß der vorliegenden Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines geschlossenen Behälters vorgesehen, enthaltend ein Kontrastmittel oder eine Vorstufe davon, welcher eine flüchtige Substanz einschließt oder zum Einschließen angepasst ist, wobei das Verfahren das Verschließen des Behälters mit einem Verschlußmittel umfasst, enthaltend ein elastomeres Polymer, dadurch gekennzeichnet, daß das Verschlußmittel durch Aussetzen einer Probe der flüchtigen Substanz in einem abgedichteten Reaktor vor dem Verschließen des Containers vorbehandelt wird.
Beispiele geschlossener Behälter, welche gemäß der Erfindung nützlich sind, umschließen Fläschchen, beispielsweise aus Glas, Plastikmaterialien oder Glas, welches mindestens teilweise mit Plastikmaterialien verblendet ist, wobei die Fläschchen beispielsweise mittels Stopfen, Septen oder Schraubdeckeln verschlossen sind, welche ein elastomeres Polymer enthalten und wahlweise Abdichtungseinsätze und/oder Einlagen, umfassend Plastikmaterialien, einschließen; Spritzen, welche beispielsweise eine Kammer, zwei Kammern oder viele Kammern enthalten und welche beispielsweise Glas, Plastikmaterialien oder Glas, welches mindestens teilweise mit Plastikmaterialien verblendet ist, umfassen, wobei solche Spritzen beispielsweise Tauchkolben einschließen, umfassend und/oder beschichtet mit einem elastomeren Polymer; und Beutel, Schachteln und Behälter, beispielsweise umfassend und/oder beschichtet mit im wesentlichen impermeablen Materialien, wie Metallfolien, und welche ebenso Plastikmaterialien einschließen, wobei diese Beutel, Schachteln und Behälter typischerweise eine Vielzahl von Kontrastmittel enthaltenen Fläschchen enthalten. Wenn erwünscht, können die Behälter, wie jene, die oben beschrieben worden sind, zusätzlich oder alternativ Einsätze einschließen, umfassend Plastikmaterialien, beispielsweise in der Form von Stangen, Röhren, Kugeln, Scheiben, Wafern, Schwämmen, Schäumen, Aerogelen, Honigwabengittern, Folien und ähnlichem. In Behältern, wie Spritzen, besitzt der Tauchkotben wirksamerweise die Form eines Verschlußmittels; weitere Verschlußmittel können ebenso beispielsweise auf vorbefestigten Nadeln oder Nadelbefestigungspositionen vorliegen.
Es ist anerkannt, daß dort, wo Behälter gemäß der Erfindung mehr als ein Plastikmaterial und/oder eine Plastikmaterialkomponente einschließen, eine jede oder alle dieser Materialien und/oder Komponenten mit der flüchtigen Substanz vorbehandelt sein kann/können.
Plastikmaterialien, welche gemäß der vorliegenden Erfindung nützlich sind, umschließen einen weiten Bereich an natürlichen und synthetischen Polymermaterialien. Wo die Materialien als Verschluss- oder Abdichtmittel, wie Stopfen, Septen, Schraubverschlüsse, Deckeleinsätze oder Spritzenkolben, verwendet werden, müssen sie elastomere Polymere umfassen, wobei Beispiele, ohne darauf begrenzt zu sein, Polyethylen, Polypropylen, Polyisobutylen, Polystyrol, Polyvinylchlorid, Polyacrylnitril, perfluorierte Polymere, wie Teflon®, natürlichen Kautschuk, Butylkautschuk, synthetische Kautschuke, wie Hycars®, oder Neopren, Silikonpolymere, Teflon®-Silikon-Laminare, Teflon®-Kautschuk-Laminate und andere Elastomere, welche im Stand der Technik als nützlich in beispielsweise Verschlussfläschchen und ähnlichen Gefäßen, welche Pharmazeutika, diagnostische Mittel etc. enthalten, bekannt sind, einschließen.
Plastikmaterialien, welche gemäß der vorliegenden Erfindung verwendet werden, können, wenn erwünscht, Absorptionsmittel einschließen, z. B. anorganische Materialien, wie Zeolithe oder Molekularsiebe, um beispielsweise die Aufnahme von flüchtigen Substanzen während der Vorbehandlung zu erhöhen.
Darüber hinaus kann die Größe und Form von Plastikmaterialien, wie von Stopfen und Einsätzen, ausgewählt sein, um geeignete Eigenschaften im Hinblick beispielsweise auf das Ausmaß der Beladung von flüchtigen Substanzen während der Vorbehandlung und die nachfolgende Freisetzungsrate der flüchtigen Substanz zu ergeben, z. B. wo ein Plastikmaterial als eine Quelle einer flüchtigen Substanz zur Einleitung in einen geschlossenen Behälter verwendet wird. Somit können die Dimensionen, wie die Dicke, erhöht werden, um die Menge der flüchtigen Substanz, welche absorbiert oder adsorbiert ist, zu vergrößern. Die Verwendung von Plastikmaterialien mit einem relativ hohen Oberflächen Volumen- Verhältnis, beispielsweise Materialien, welche porös, faserförmig (z. B. in Faserbündeln) oder stangenförmig sind oder flanschförmige, gerippte, gerillte oder aufgerauhte Oberflächen aufweisen, kann die Raten sowohl der Vorbehandlungsaufnahme als auch der nachfolgenden Freisetzung der flüchtigen Substanz erhöhen.
Die flüchtige Substanz kann im Allgemeinen ein oder mehrere Gase umfassen (wobei der Begriff alle Substanzen einschließt, inklusive Acetylen, Propin oder Butine; Cycloalkane, wie Cyclopropan, Methylcyclopropan, Cyclobutan, Cyclopentan oder Cyclohexan: und Arene, wie Benzol).
Die Verwendung von gasförmigen halogenhaltigen Verbindungen, z. B. perfluorierten Gasen, wie Schwefelhexafluorid, Perfluorpropan, Perfluorbutan oder Perfluorpentan, ist bevorzugt. Solche Gase können, wenn erwünscht, mit anderen nicht-halogenierten Gasen, wie beispielsweise Luft, Sauerstoff, Stickstoff, Kohlendioxid oder Mischungen davon, vermischt werden.
Kontrastmittel, welche in den Behältern gemäß der Erfindung vorliegen, können eine jede geeignete Form einnehmen und umschließen beispielsweise wässrige Zusammensetzungen, welche zum Erhalt und zur Stabilisierung von Gasmikrobläschen angepasst sind, wie z. B. beschrieben in der US-A-4,466,442 oder der WO-A-9115244; Dispersionen in geeigneten Trägerflüssigkeiten von Gasmikrobläschen, welche wahlweise wie in gasgefüllten Mikroballons eingekapselt sein können (z. B. worin das Gas innerhalb eines einschlagenden Materials, wie einem Polymer, Protein oder filmbildenden Tensid, wie in Phospholipidvesikeln etc., enthalten ist), flüchtigen Flüssigkeiten oder Feststoffmikroteilchen; und feste Kontrastmittelvorstufenformulierungen zur Auflösung in beispielsweise einer Trägerflüssigkeit, wie sterilem Wasser oder Salz lösung, zur Injektion. Solche festen Formulierungen können beispielsweise durch Lyophilisierung hergestellt werden und enthalten typischerweise ein oder mehrere Tenside, z. B. filmbildende Lipide, wie Phospholipide, Zusätze, beispielsweise Cryoprotectanden und/ oder Tonuseinsteller, Stabilisatoren etc.
Die Vorbehandlung von Plastikmaterialien zur Verwendung in oder als geschlossene(n) Behälter(n) gemäß der Erfindung wird bewirkt durch Aussetzen der Substanz bei beispielsweise Umgebungs- oder erhöhter Temperatur und Druck in einem abgedichtetem Reaktor, wie einer Parrbombe; die Bedingungen können vorteilhaft derartig sein, daß das Material mit der absorbierten oder adsorbierten flüchtigen Substanz gesättigt wird. Wo notwendig oder erwünscht, kann ebenso eine Atmosphäre, umfassend die flüchtige Substanz, in den Behälter vor dem Verschließen eingefüllt werden. Alternativ kann es ausreichend sein, die flüchtige Substanz aus dem vorbehandelten Plastikmaterial in den Behälter fließen zu lassen und dadurch mit dem Kontrastmittel oder dessen Vorstufe wechselwirken zu lassen. Dieses letzte Verfahren kann im Hinblick auf die Verfahrenskosten von Vorteil sein. Somit können Verfahren, welche das Einführen der flüchtigen Substanz in die Behälter, wie Fläschchen, beispielsweise durch Evakuieren einer oder mehrerer Fläschchen in einer Vakuumkammer, beispielsweise in der Kammer einer Lyophilisierungsapparatur als Teil eines Lyophilisierungsverfahrens, und anschließendes Einleiten der flüchtigen Substanz in die Kammer, zu einer Verschmutzung der Kammer durch restliche flüchtige Substanzen führen. Die Druckbehandlung des Plastikmaterials kann auf der anderen Seite eine wirksamere Verwendung der restlichen flüchtigen Substanz erlauben, welche leicht zur Quelle bei Vervollständigung der Behandlung zurückgeführt werden kann.
Nach dem Verschließen der Behälter, wie der Fläschchen, mit Verschlußmitteln, wie Stopfen, Septen, Schraubverschlüssen und ähnlichem, kann es von Vorteil sein, die äußere Oberfläche des Verschlusses weiter abzudichten, beispielsweise mit einer Metallfolie oder einer Metall-Crimp-Abdeckung, oder durch Auftragung einer Schicht eines Materials, welches im Wesentlichen impermeable gegenüber der flüchtigen Substanz ist, beispielsweise eines geeigneten natürlichen oder synthetischen Wachses oder Silikonabdichtungsmittels, oder eines hydrophilen Materials, z. B. Glycerin oder eines niedermolekulargewichtigen Polyethylenglykols, welches ein Nicht-Lösungsmittel für die flüchtige Substanz darstellt. Alternativ können vorgebildete Verschlußmittel eingesetzt werden, welche ein solches impermeables Material, z. B. als eine Beschichtung oder als integralen Bestandteil, beispielsweise auf einer äußeren Oberfläche oder Oberflächen davon, einschließt.
Die folgenden nicht begrenzenden Beispiele dienen zur Verdeutlichung der Erfindung.

Beispiel 1

Ein Flaschenstopfen wird in eine sterile Parrbombe gegeben, gehalten bei 0ºC. Perfluorbutan wird zugesetzt, und die Bombe wird abgedichtet und bei 50ºC 24 Stunden lang erhitzt. Die Bombe wird anschließend auf 20ºC abgekühlt und belüftet, um das gasförmige Perfluorbutan entweichen zu lassen. Der Stopfen wird entfernt und als Verschluss eines Fläschchens verwendet, enthaltend eine lyophilisierte Phospholipid-Liposom-Kontrastmittelformulierung sowie eine Mischung aus Luft und Perfluorbutan in dem Kopfraum; der Stopfen wird anschließend mit einer Aluminium-Crimp-Kappe abgedeckt. Die Konzentration an Perfluorbutan in dem Fläschchen und die Lagerungsstabilität der Kontrastmittelzusammensetzungen werden beide relativ zu einem vergleichbaren Fläschchen erhöht, in dem der Stopfen nicht mit Perfluorbutan vorbehandelt ist.

Beispiel 2

Ein Flaschenstopfen wird mit Perfluorbutan wie in Beispiel 1 beschrieben behandelt und als Verschluss eines Fläschchens, enthaltend eine lyophilisierte Phospholipid-Liposom-Kontrastmittelformulierung und Luft in dem Kopfraum, verwendet; der Stopfen wird anschließend mit einer Aluminium-Crimp-Kappe abgedeckt. Die Zusammensetzung bildet anschließend eine Perfluorbutan-enthaltende Mikrobläschen-Dispersion zur Injektion durch Auflösen in Wasser.

Beispiel 3

Flaschenstopfen werden gewaschen, im Autoklaven hitzebehandelt (121ºC, 15 Stunden), um während des Autoklavenverfahrens absorbiertes Wasser zu entfernen. Die heißen Flaschenstopfen werden gasförmigem Perfluorbutan ausgesetzt und auf Umgebungstemperatur in Gegenwart dieses Gases abgekühlt.

Beispiel 4

Unverschlossene Flaschen (ohne Stopfen), enthaltend eine Kontrastmittelvorstufe, werden in einer Lyophilisierungskammer, ausgestattet mit einer Glovebox, lyophilisiert. Nach der Lyophilisierung wird Perfluorbutan in die Apparatur eingeleitet. Die vorbehandelten Flaschenstopfen, welche wie in Beispiel 3 hergestellt wurden, werden per Hand auf die Fläschchen mittels der Glovebox aufgesetzt.

Beispiel 5

Fläschchen, welche eine Kontrastmittelvorstufe enthalten, werden locker mit vorbehandelten Stopfen, hergestellt wie in Beispiel 3 beschrieben, verstopft und in einer Lyophilisierungskammer lyophilisiert, woraufhin die Stopfen in eine geschlossene Position gepresst werden. Stickstoff wird in die Kammer eingeleitet, um das Vakuum aufzuheben, und die verschlossenen Fläschchen werden entfernt. Es wurde gefunden, daß Perfluorbutan stufenweise aus den Stopfen in den Kopfraum der Fläschchen freigesetzt wurde.

Claims

1. Verfahren zur Herstellung eines geschlossenen Behälters, enthaltend ein Kontrastmittel oder eine Vorstufe davon, welcher eine flüchtige Substanz einschließt oder zum Einschließen angepaßt ist, wobei das Verfahren das Verschließen des Behälters durch Verschlußmittel umfaßt, dadurch gekennzeichnet, daß das Verschlußmittel ein elastomeres Polymer umfaßt, sowie dadurch, daß es durch Aussetzen einer Probe der flüchtigen Substanz in einem abgedichteten Reaktor vor dem Verschließen des Containers vorbehandelt wird.

2. Verfahren nach Anspruch 1, worin der geschlossene Behälter in Form eines geschlossenen Glasfläschchens oder einer Spritze vorliegt.

3. Verfahren nach Anspruch 2, worin das Verschlußmittel einen Stopfen, ein Septum, einen Schraubverschluß, einen Verschlußeinsatz oder einen Spritzenkolben umfaßt.

4. Verfahren nach Anspruch 2, worin der geschlossene Behälter ein Glasfläschchen, abgedichtet mit einem Stopfen, umfassend ein elastomeres Polymer, umfaßt.

5. Verfahren nach Anspruch 4, worin der Stopfen mit einem Material beschichtet ist, welches im wesentlichen impermeabel gegenüber der flüchtigen Substanz ist.

6. Verfahren nach Anspruch 4, worin der Stopfen als eine integrale Komponente ein Material umfaßt, welches im wesentlichen impermeabel gegenüber der flüchtigen Substanz ist.

7. Verfahren nach mindestens einem der vorangehenden Ansprüche, worin die flüchtige Substanz ein Schwefelhalogenid oder ein aliphatisches, cycloaliphatisches, araliphatisches oder aromatisches Halogenid, welches bis zu 20 Kohlenstoffatome enthält, umfaßt.

8. Verfahren nach Anspruch 7, worin die flüchtige Subtanz Schwefelhexafluorid oder einen Perfluorkohlenwasserstoff, enthaltend bis zu 8 Kohlenstoffatomen, umfaßt.

9. Verfahren nach Anspruch 8, worin der Perfluorkohlenwasserstoff ausgewählt ist aus Perfluorpropan, Perfluorbutan und Perfluorpentan.

10. Verfahren nach mindestens einem der vorangehenden Ansprüche, worin er geschlossene Behälter eine wäßrige Zusammensetzung, welche zum Aufnehmen und Stabilisieren von Gasmikrobläschen angepaßt ist, eine Dispersion von wahlweise eingekapselten Gasmikrobläschen in eine Trägerflüssigkeit der eine feste Kontrastmittelvorstufenformulierung, angepaßt zur Rekonstitution mit einer Trägerflüssigkeit enthält.

11. Verfahren nach Anspruch 10, worin die feste Kontrastmittelvorstufenformulierung ein lyophilisiertes Phospholipid umfaßt.

12. Verfahren nach mindestens einem der vorangehenden Ansprüche, worin ach dem Verschließen des Behälters die äußere Oberfläche des Verschlußmittels mit einem weiteren Abdichtungsmittel versehen wird, welches eine Metallfolie oder eine Metall-Crimp-Abdeckung umfaßt.

13. Verfahren nach mindestens einem der vorangehenden Ansprüche, worin das Verschlußmittel der flüchtigen Substanz in dem abgedichteten Reaktor bei erhöhtem Druck und/oder erhöhter Temperatur ausgesetzt wird.

14. Verfahren nach mindestens einem der vorangehenden Ansprüche, worin das elastomere Polymer des Verschlußmittels mit der flüchtigen Substanz während der Vorbehandlung in dem abgedichteten Reaktor gesättigt wird.