DE68913146T2

DE68913146T2 - Verbindung mit insektizider Wirksamkeit und Verfahren zu deren Herstellung.

Info

Publication number: DE68913146T2
Application number: DE68913146T
Authority: DE
Inventors: Shuichi C O Meiji Seika K Gomi; Kei-Ichi C O Meiji Sei Imamura; Shigeharu C O Meiji Seik Inoye; Michiaki C O Meiji Seika Iwata; Shinji C O Meiji Seika Miyadoh; Masaji C O Meiji Seika Sezaki; Masaru C O Meiji Seika Shimura; Takashi C O Meiji Seik Shomura
Original assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Current assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date: 1988-11-11
Filing date: 1989-11-10
Publication date: 1994-10-06
Anticipated expiration: 2009-11-11
Also published as: US5026547A; EP0368331A3; EP0368331A2; CA2002755C; CA2002755A1; DE68913146D1; EP0368331B1

Description

Gebiet der Erfindung

Diese Erfindung betrifft eine neue Verbindung mit Insektizidwirkung und ein Verfahren zu ihrer Herstellung.

Hintergrund der Erfindung

Obwohl eine Anzahl durch Mikroorganismen hergestellter physiologisch wirksamer Substanzen vorliegt, ist die Zahl derer, die Insektizidwirkungen besitzen, beschränkt. Somit besteht dringender Bedarf, neue Insektizidverbindungen zu entwickeln.

Zusammenfassung der Erfindung

Eine erfindungsgemäße Aufgabe ist es, eine neue Verbindung mit Insektizidwirkung und ein Verfahren zu ihrer Herstellung zur Verfügung zu stellen.
Als Ergebnis intensiver Forschung fanden die Erfinder, daß eine neue Verbindung mit Insektizidwirkung aus der Kultur eines zu Denteromycotina gehörenden Stammes isoliert werden kann.
Somit betrifft die Erfindung eine neue Verbindung mit Insektizidwirkung (im folgenden als Verbindung PF1018 bezeichnet) und deren Salze.
Die vorliegende Erfindung betrifft gleichfalls-ein Verfahren zum Herstellen der Verbindung PF1018 wozu das Kultivieren eines Verbindung PF1018 herstellenden Stammes, der zu Denteromycotina gehört, und Isolieren der Verbindung PF1018 von der Kultur gehören.

Kurzbeschreibung der Zeichnungen

Fig. 1 zeigt ein UV und sichtbares Spektrum der Verbindung PF1018 in Methanol (20 um/ml, durchgezogene Linie), in saurem Methanol (20 um/ml, gestrichelte Linie) und in basischem Methanol (20 um/ml, strich-punkt Linie).
Fig. 2 zeigt ein IR Spektrum der Verbindung PF1018 in einem Kaliumbromidpressling.
Fig. 3 zeigt das 400 MHz ¹H NMR Spektrum der Verbindung PF1018 in einer Deuterochloroformlösung.
Fig. 4 zeigt das 100 MHz ¹³C NMR Spektrum der Verbindung PF1018 in einer Deuterochloroformlösung.

Genaue Beschreibung der Erfindung

Die physikochemischen und biologischen Merkmale der erfindungsgemäßen Verbindung PF1018 sind wie folgt:
Physikochemische Eigenschaften der Verbindung PF1018
(1) Aussehen: schwach gelbliches kornförmiges Kristall.
(2)
Elementaranalyse C&sub2;&sub8;H&sub3;&sub5;NO&sub3; H&sub2;O:
Berechnet: C 74,47 %, H 8,26 %, N 3,10 %
Gefunden: C 75,08 %, H 8,06 %, N 3,38 %.
(3) Massenspektrum (FD-MS) : m/z 433 (M&spplus;).
(4) Schmelzpunkt 182ºC - 184ºC.
(5) Spezifische Rotation: [α]24D 0 - 185º (c 1,0; CHCl&sub3;).
(6) UV und sichtbares Spektrum: (Fig. 1):
λmax nm (E1%1cm)
[MeOH]: 204 (393) , 251 (294) und 320 (355).
[0,1 N HCl-MeOH]: 204 (215), 235 (229) , 332 (471) und 358 (sh 280)
[0,1 N NaQH-MeOH]: 213 (992), 254 (326) und 316 (340)
(7) IR-Spektrum: (Fig. 2): (KBr cm&supmin;¹): 3410, 2960, 2925, 2870, 1710, 1640, 1580, 1430, 1380, 1360, 1330, 1315, 1290, 1245, 1230, 1165, 1125, 1075, 1040, 1010, 1000, 950, 920, 890, 870, 845, 805, 775, 760 und 720.
(8) ¹H NMR Spektrum: abgebildet in Figur 3.
(9) ¹³C NMR Spektrum: abgebildet in Figur 4.
(10) Löslichkeit: löslich in Chlorophorm, Ethylacetat, Aceton und Methanol, jedoch unlöslich in Wasser.
(11) basisch, sauer oder neutral: sauer.

Biologische Merkmale der Verbindung PF1O18

Verbindung PF1018 besitzt eine intensive Insektizidwirkung, wie in den folgenden Testbeispielen beschrieben.

Mycologische Merkmale des die Verbindung PF1018 herstellenden Stammes

Ein Beispiel für den erfindungsgemäß verwendeten Verbindung PF1018 herstellenden Stamm ist Stamm PF1018, der aus einer bei Ohmachi-shi, Nagano, Japan zum ersten mal gesammelten Bodenprobe isoliert wurde.
Stamm PF1018 wurde auf einem Kartoffel-Dextrose Agar (PDA), Kartoffel-Karotten Agar (PCA) und Maismehl Agar (CMA) kultiviert, um dadurch seine Wachstumsbedingungen zu untersuchen. Als Ergebnis zeigte er annähernd das selbe Wachstum auf diesen Medien. Die Wachstumsrate bei 25ºC über 7 Tage betrug 10 mm Koloniedurchmesser und die für 14 Tage 20 mm bis 22 mm, während bei 37ºC kein Wachstum auftrat. Er zeigte innerhalb eines pH-Wertbereichs von 5 bis 7 gutes Wachstum. Die Kolonien besaßen eine ebene Oberfläche und waren weiß bis grau und baumwollartig. Die Farbe der Kolonie wechselte unter Bildung einer braunen bis schwarzen Conidia zu schwarz. Die Rückseite der Kolonie wechselte von orange zu schwarz durch Conidiabildung. Kein lösliches Pigment wurde gebildet.
Die Ergebnisse der mikroskopischen Beobachtung sind wie folgt: Ein Conidiophor ist farblos und erstreckt sich vereinzelt ohne Verzweigung vom Aerialhyphae. Es besitzt die Form eines Knüppels oder einer Ampulle. Ein Conidium ist unizellular und besitzt eine glatte Oberfläche. Es besitzt eine ellipsoide Form von 6,0 - 8,4 x 3,6 - 4,4 um. Die Conidia dieses Stammes sind Aleurioconidien und individuell am Ende und Seiten eines Conidiophors ausgebildet und bilden keine Kette. Jedes Conidium besitzt ein rundes Oberteil und ein abgeschnittenes Unterteil.
Die mycologischen Merkmale zeigen, daß Stamm PF1018 dem Genus Humicola gemäß M.B. Ellis [Dematiaceous Hyphomycetes, 59- 60, C.M.I., Kew (1971)] zugeordnet werden kann. Die Erfinder benannten diesen Stamm Humicola sp. PF1018. Er wurde gemäß des Budapest Abkommens beim Fermentation Research Institute of Agency of Industrial Science and Technology mit der Nr. FERM BP-2627 hinterlegt.
Wie andere Pilze besitzt Stamm PF1018 leicht änderbare Merkmale. Somit ist jede spontane oder induzierte Mutante, Transduktante oder genetische Rekombinante, die von Stamm PF1018 stammt, in vorliegender Erfindung verfügbar, solange sie Verbindung PF1018 herstellen kann.

Kultivierung des Verbindung PF1018 herstellenden Stamms

Verbindung PF1018 herstellende Mikroorganismen. - Stamm PF1018 - kann in einem Medium mit herkömmlich für Pilze verwendeten Nährstoffen kultiviert werden. Herkömmlich zum Kultivieren von Pilzen bekannte Nährstoffquellen können daher verwendet werden. Eine Kohlenstoffquelle sind beispielsweise Glycose, Stärkesirup, Dextrin, Stärke, Melasse und Tier- und Pflanzenöle. Eine Stickstoffquelle sind beispielsweise Sojabohnenmehl, Weizenkeim, Maisweicheflüssigkeit, Baumwollsamenmehl, Fleischextrakt, Pepton, Hefeextrakt, Ammoniumsulfat, Natriumnitrat und Harnstoff. Darüber hinaus können ionenbildende anorganische Salze wie Natrium, Kalium, Calcium, Magnesium, Cobalt, Chlor, Phosphat oder Sulfationen falls notwendig zugegeben werden. Weiterhin können geeignete organische oder anorganische Stoffe, die das Wachstum des Stammes fördern und die Herstellung der Verbindung PF1018 beschleunigen, zu dem Medium gegeben werden.
Bevorzugt wird die Kultivierung unter aeroben Bedingungen durchgeführt, wobei eine Submergkultur am meisten bevorzugt wird. Die Kultur kann bei 23ºC bis 30ºC, geeignet um 26ºC durchgeführt werden. Die Herstellung der Verbindung PF1018 zeigt die maximale Akkumulation innerhalb 2 bis 7 Tagen entweder in Schüttel- oder Tankkultur, wobei es in Abhängigkeit des Mediums oder der Kulturbedingungen etwas variieren kann. Wenn die Akkumulation der Verbindung PF1018 in dem Kulturmedium das Maximum erreicht, wird die Kultur beendet und das gewünschte Produkt aus dem Medium isoliert.

Reinigung der Verbindung PF1018.

Die durch das erfindungsgemäße Verfahren gewonnene Verbindung PF1018 kann aus dem Kulturmedium durch ein herkömmliches Isolierungsverfahren unter Ausnutzung ihrer Eigenschaften, beispielsweise durch Lösungsmittelextraktion, Ionenaustauscherharzverfahren, Adsorptions- oder Trennungssäulenchromatographie, Gelfiltration, Dialyse, Fällung oder eine Kombination dieser Verfahren, isoliert werden. Beispielsweise kann Verbindung PF1018 von den Zellen mit Aceton/Wasser, Methanol/Wasser oder Ethylacetat extrahiert werden. Andererseits kann die im Kulturmedium akkumulierte Verbindung PF1018 mit einem wasserunmischbaren organischen Lösungsmittel wie Butanol oder Ethylacetat extrahiert werden.
Verbindung PF1018 kann weiterhin durch Chromatographie, beispielsweise mit einem Adsorbens wie Silicagel (Wakogel C-200, hergestellt durch Wako Pure Chemicals, etc.), Aluminiumoxid, Sephadex LH-20 (hergestellt durch Pharmacia) oder Toyopearl HW-40 (hergestellt durch Tosoh) weiter gereinigt werden.
Geeignete Entwicklungslösungen sind Chloroform/Methanol (100/1 volumenbezogen) oder Hexan/Aceton (4/1 volumenbezogen) für Silicagel (Wakogel C-200) Chromatographie und Methanol für Chromatographie mit Sephadex LH-20 oder Toyopearl HW-40.
Die zuvor beschriebenen Isolier- und Reinigungsverfahren können bei Raumtemperatur (etwa 26ºC) durchgeführt werden.
Die so im Kulturmedium hergestellte Verbindung PF1018 kann in freier Form, nämlich als Verbindung PF1018 per se isoliert werden. Daneben kann eine Verbindung PF1018 enthaltende Lösung oder deren Konzentrat mit einer Base, beispielsweise einer Alkalimetallverbindung wie Natrium- oder Kaliumhydroxid, eine Erdalkaliverbindung wie Calcium- oder Magnesiumhydroxid, eine anorganische Base, wie ein Ammoniumsalz oder eine organische Base wie Ethanolamin, Triethylamin oder Dicyclohexylamin während der Extraktions-, Isolierungs- oder Reinigungsstufen behandelt werden, um dadurch Verbindung PFI018 in das entsprechende Salz zu überführen, das anschließend isoliert wird. Das so gewonnene Salz der Verbindung PF1018 kann in die freie Form durch ein herkömmliches Verfahren umgewandelt werden. Darüberhinaus kann die in freier Form gewonnene Verbindung PF1018 in das entsprechende Salz durch ein herkömmliches Verfahren umgewandelt werden. Diesbezüglich betrifft die vorliegende Erfindung weiterhin die zuvor erwähnten Salze zusammen mit Verbindung PF1018.
Die Salze der erfindungsgemäßen Verbindung PF1018 sind bevorzugt ein Natrium- und Calciumsalz.
Verbindung PF1018 zeigt eine Insektizidwirkung auf schädliche Insekten, wie beispielsweise Lepidoptera (z.B. Spodoptera litura, Plutella xylostella, Chilo suppressalis), Coleptera (z.B. Curculionidae, Chrysomelidae), Diptera (z.B. Musca domestica, Culex pipiens), Thysanoptera, Blattaria (z.B. Kakerlaken), Hemiptera (z.B. Aphididae, Delphacidae, Deltocephalidae, Pentatomidae), Orthoptera, Acarina u.ä..
Bei Verwendung als Insektizid kann Verbindung PF1018 allein oder allgemein mit einem festen, flüssigen, gasförmigen Träger, einer Seife, einem Dispergiermittel oder anderem Hilfsmittel oder Nahrungsmittel in eine Emulsion gegeben, einer Flüssigkeit, einem benetzbaren Pulver, einem Pulver, einem Korn, einer Öllö-Sung, Aerosol, einem fließfähigen Mittel oder vergifteter Nahrung eingesetzt werden.
Feste Träger sind beispielsweise Talk, Bentonit, Ton, Kaolin, Kieselgur, Vermiculit, weißer Kohlenstoff und Calciumcarbonat.
Flüssige Träger sind beispielsweise Alkohole, wie Methanol, n-Hexanol, Ethylenglycol und Cellosolv, Ketone, wie Aceton, Methylethylketon und Cyclohexanon, aliphatische Kohlenwasserstoffe, wie Kerosin, aromatische Kohlenwasserstoffe, wie Benzol, Toluol, Xylol und Methylnaphthalen, halogenierte Kohlenwasserstoffe, wie Dichlorethan, Trichlorethylen und Tetrachlorkohlenstoff, Ether, wie Diethylether, Dioxan und Tetrahydrofuran, Ester, wie Ethylacetat, Nitrile, wie Acetonitril und Isobutyronitril, saure Amide, wie Dimethylformamid und Dimethylacetamid, Pflanzenöl, wie Sojabohnen- und Baumwollsamenöl, Dimethylsulfoxid oder Wasser.
Gasförmige Träger sind beispielsweise LPG, Tetrafluorkohlenstoff, Luft, Stickstoff, Kohlendioxid und Dimethylether.
Zum Emulgieren, Dispergieren oder Ausbreiten verwendete Seifen, Dispergiermittel sind beispielsweise Alkylsulfate, Alkyl(aryl)sulfonate, Polyoxyalkylenalkyl(aryl)ether, mehrwertige Alkoholester oder Ligninsulfate.
Hilfsmittel zum Verbessern der Herstellung sind beispielsweise Carboxymethylzellulose, Gummi Arabicum, Polyethylenglycol oder Calciumstearat.
Die zuvor beschriebenen Zusätze können allein oder - falls notwendig - in Kombination verwendet werden.
Die Verbindung PF1018 ist in der Präparation in einer Menge von 1 bis 50 Gewichtsteilen im Falle einer Emulsion, von 0,3 bis 25 Gewichtsteilen, einer Pulverformulierung, von 1 bis 90 Gewichtsteilen, eines benetzbaren Pulvers und 0,5 bis 10 Gewichtsteilen in Körnern enthalten.
Die PF1018 Präparation kann wie sie ist oder vor dem Einsatz verdünnt verwendet werden. Die Darstellung kann als eine Mischung mit anderen Insektiziden, Mitiziden, Fungiziden, Bakteriziden, Herbiziden, Pflanzenwachstumsregulatoren, Düngemitteln, Bodenverbesserungsmitteln oder Synergisten verwendet werden.
Die vorliegende Erfindung wird anhand folgender Beispiele näher beschrieben. Jedoch ist es möglich sich viele Herstellungsverfahren der Verbindung PF1018 bezogen auf ihre in vorliegender Erfindung offenbarten Eigenschaften auszudenken. Daher ist die vorliegende Erfindung nicht durch folgendes Beispiel eingeschränkt, schließt jedoch nicht nur jede Abänderung des Beispiels sondern gleichfalls jedes Verfahren zur Herstellung, Konzentration, Extraktion und Reinigung der Verbindung PF1018 mit den auf die Merkmale der Verbindung PF1018 bezogenen erfindungsgemäß offenbarten Eigenschaften ein.

Beispiel

Ein Samenmedium mit 2,0% Stärke, 1,0% Glukose, 0,6% Weizenkeim, 0,5% Pepton, 0,2% Sojabohnenmehl, 0,3% Hefeextrakt und 0,1% Calciumcarbonat wurde eingesetzt. Ferner wurde ein Herstellungsmedium mit 2,0% Stärke, 2,0% Glukose, 1,0% Sojabohnenmehl, 1,0% Weizenkeim, 0,5% Fleischextrakt, 0,2% Natriumchlorid, 0,3% Calciumcarbonat, 0,1% Magnesiumsulfatheptahydrat und 0,001% Zinksulfatheptahydrat eingesetzt. Vor dem Sterilisieren wurde der pH-Wert jedes Mediums auf 7,0 eingestellt.
Ein 100 ml Erlenmeyer Kolben mit 20 ml Samenmedium wurde bei 120ºC über 30 min. sterilisiert und dann mit 2 oder 3 Platinschlaufen voll Humicola sp. PF1018 (FERM BP-2627), das auf einem Agar kultiviert wurde, geimpft. Anschließend wurde der Stamm unter Schütteln bei 26ºC über 5 Tage kultiviert, um eine erste Samenkultur zu ergeben. Darauf wurde ein 500 ml Erlenmeyer Kolben mit 80 ml des Samenmediums bei 120ºC über 30 min. sterilisiert und anschließend mit 4 ml der ersten Samenkultur geimpft. Nach Kultivieren unter Schütteln bei 26ºC über 3 Tage wurde die zweite Samenkultur gewonnen.
Zwei 50 l Rüttelfermenter mit jeweils 35 l des zuvor bei 120ºC über 30 min. sterilisierten Herstellungsmediums wurden mit 400 ml Portionen der obigen zweiten Samenkultur geimpft. Anschließend wurde jede Kultur bei 26ºC über 5 Tage unter Luft zufuhr von 20 l/min. und Rühren bei 250 Umdrehungen/min. zu Beginn und nach 41 Stunden bei 400 Umdrehungen/min. kultiviert. Nach Abschluß der Inkubation wurde Kieselgur zu dem Kulturmedium als Filtrierhilfe gegeben; das Medium wurde filtriert, um ein Filtrat und Zellen zu ergeben.
50 l einer 60%igen wässrigen Acetonlösung wurde den Zellen zugesetzt und die Mischung über 1 Stunde gerührt. Nach Filtern der Zellen wurde ein Zellextrakt erhalten. Das Lösungsmittel wurde vom Zellextrakt im Unterdruck abdestilliert, um 22 l eines Konzentrats zu ergeben. Dieses Konzentrat wurde zweimal mit 20 l Portionen Ethylacetat extrahiert. Nach Konzentrieren der Ethylacetatphase wurden 16 g einer öligen Substanz erhalten. Diese ölige Substanz wurde auf eine Silicagelsäule (700 g) gegeben und mit einer Mischung aus Hexan Aceton (4 : 1) als Entwicklungslösung chromatographiert. Die durch Dünnschichtchromatographie bestimmte Verbindung PF1018 haltige Fraktion wurde gesammelt und zur Trockene konzentriert, um 320 mg einer braun-öligen Substanz zu ergeben. Diese Substanz wurde auf eine Silicagelsäule (20 g) gegeben und mit einer Mischung aus Chloroform/Methanol (100 : 1) als Entwicklungslösung chromatographiert. Die so gewonnene Rohverbindung PF1018 haltige Fraktion (232 mg) wurde weiter mit 600 ml Sephadex LH-20 und Methanol als Entwicklungslösung säulenchromatographiert. So wurden 216 mg schwach gelbliche ölige Substanz gewonnen. Diese schwach gelbliche ölige Substanz wurde in 120 ml Chloroform gelöst und mit 120 ml 0,01 N Salzsäure gewaschen. Anschließend wurde die Chloroformphase zur Trockene konzentriert und der Rückstand in 5 ml Methanol gelöst. Nach erneutem zur Trockne Konzentrieren, wurden 176 mg gereinigter Verbindung PF1018 als schwach gelbliches Pulver erhalten. Das Pulver wurde aus Methanol umkristallisiert, um 110 mg der Verbindung PF1018 als schwach gelbliches kornförmiges Kristall zu ergeben.
In den folgenden Formulierungsbeispielen bedeutet "Teil", sofern nicht anders bezeichnet, "Gewichtsteil".

Formulierungsbeispiel 1

20 Teile Verbindung PF1018 wurden mit 20 Teilen N,N-Dimethylformamid, 30 Teilen Xylol und 10 Teilen Polyoxyethylenalkylarylether gelöst; die Mischung wurde gerührt, um eine Emulsion zu erhalten.

Formulierungsbeispiel 2

25 Teile Verbindung PF1018 wurden mit 30 Teilen Tonerde, 35 Teilen Kieselgur, 3 Teilen Calciumligninsulfonat und 7 Teilen Polyoxyethylenalkylarylether gemischt und gemahlen, um ein benetzbares Pulver zu erhalten.

Formulierungsbeispiel 3

2 Teile Verbindung PF1018 wurden mit 60 Teilen Tonerde, 37 Teilen Talk, 1 Teil Calciumstearat gemischt, um eine Pulverformulierung zu erhalten.

Formulierungsbeispiel 4

5 Teile Verbindung PF1018 wurden mit 40 Teilen Bentonit, 53 Teilen Talk, 2 Teilen Calciumligninsulfonat gemischt und gemahlen. Nachdem Wasser zu der Mischung gegeben wurde, wurde sie granuliert und getrocknet, um Körner zu erhalten.

Testbeispiel 1

Die in Formulierungsbeispiel 1 gewonnene Emulsion wurde mit 0,05 Tween-20 (ICI) verdünnt, um eine Konzentration der Verbindung PF1018 von 1.000 ppm zu ergeben. Zehn Plutella xylostella des dritten instar wurden in die obige Suspension über 10 sek. eingetaucht. Anschließend wurde das Insekt auf einem Kohlblatt (5 x 5 cm) in einem Plastikbecher (9 cm Durchmesser) bei 25ºC gehalten. Nach 2 Tagen Fütterung wurden die toten Insekten gezählt und die Sterblichkeit wurde gemäß folgender Gleichung berechnet:
Sterblichkeit (%) = (Zahl der getöteten lnsekten/Zahl der getesteten Insekten) x 100.
Als Ergebnis wurde eine Sterblichkeit von 100% gefunden.

Testbeispiel 2

10 weibliche Tetranychus cinnbarinus imagos wurden auf das primäre Blatt der grünen Bohne (Phasaolus vulgaris) gegeben, die in einem Plastiktopf (6 cm Durchmesser) kultiviert worden war.
Einen Tag nach Aufbringung der Insekten wurden die in Formulierungsbeispiel 2 gewonnen benetzbaren Pulver mit 0,05% Tween-20 (ICI) haltigem Wasser verdünnt, so daß eine Konzentration der Verbindung PF1018 von 100 ppm entstand; 10 ml der Suspension wurden durch einen Sprayer in den Plastiktopf gesprüht. Anschließend wurden die Insekten einen weiteren Tag bei 27ºC gefüttert; die Sterblichkeit wurde gemäß Testbeispiel 1 berechnet. Als Ergebnis wurde eine Sterblichkeit von 100% bestimmt.

Testbeispiel 3

10 weibliche Musca domestica imagos wurden mit Äther anästhesiert und einer Acetonlösung mit Verbindung PF1018 (1,0 um/ul) wurden örtlich dem dorsalen Thorax mit einer Dosis von 1 ul durch eine Mikrospritze verabreicht. Anschließend wurden die Insekten auf einem mit einer Sucroselösung infiltrierten Absorbenzbaumwolle in einem Plastiktopf (9 cm Durchmesser) bei 25ºC gefüttert. Nach einem Tag Fütterung wurde die Sterblichkeit gemäß Testbeispiel 1 berechnet.
Die Sterblichkeit betrug 100%.
Wie zuvor beschrieben, besitzt die erfindungsgemäße Verbindung PF1018 eine intensive Insektizidwirkung; es kann erwartet werden, daß sie als ein Wirkstoff eines Insektizid und als Ausgangsmaterial für die Herstellung dessen Derivats nützlich ist.
Obwohl die Erfindung anhand ihrer speziellen Ausführungsform beschrieben wurde, ist für den Fachmann offensichtlich, daß verschiedene Änderungen und Modifikationen vorgenommen werden können, ohne von ihrem Sinn und Umfang abzuweichen.

Claims

1. Verbindung mit folgenden Eigenschaften:

(1) Aussehen: schwachgelbliches kornförmiges Kristall;

(2) Elementaranalyse als C&sub2;&sub8;H&sub3;&sub5;NO&sub3; H&sub2;O:

Berechnet: 74,47% C, 8,26% H, 3,10% N,

Gefunden: 75,08% C, 8,06% H, 3,38% N;

(3) Massenspektrum (FD-MS) : m/z 433 (M+);

(4) Schmelzpunkt 182-184ºC;

(5) Spezifische Rotation: [α]²D&sup4; = -185º (c 1,0, CHCl&sub3;);

(6) UV und sichtbares Spektrum: abgebildet in Figur 1;

(7) IR Spektrum: abgebildet in Figur 2;

(8) ¹H NMR Spektrum: abgebildet in Figur 3;

(9) ¹³C NMR Spektrum: abgebildet in Figur 4;

(10) Loslichkeit: löslich in Chlorophorm, Ethylacetat, Aceton und Methanol, jedoch unlöslich in Wasser; und

(11) basisch, sauer oder neutral: sauer und deren Salze.

2. Verfahren zur Herstellung einer Bindung nach Anspruch 1 oder deren Salze, wobei ein Stamm des Genus Humicola kultiviert und die Verbindung aus der Kultur isoliert wird.

3. Verfahren nach Anspruch 2, wobei der Stamm FERM BP-2627 ist.

4. Insektizid, das als aktiven Wirkstoff eine Verbindung nach Anspruch 1 oder deren Salze enthält.