JPH02256694A

JPH02256694A - 新規物質ｐｆ１０１８物質ならびにその製造法及び殺中剤

Info

Publication number: JPH02256694A
Application number: JP1288715A
Authority: JP
Inventors: Keiichi Imamura; 圭一今村; Shuichi Gomi; 修一五味; Michiaki Iwata; 道顕岩田; Shinji Miyaji; 宮道　慎二; Takashi Shomura; 庄村　喬; Masaru Shimura; 志村　勝; Masaji Sezaki; 瀬崎　正次; Shigeharu Inoue; 重治井上
Original assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Current assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date: 1988-11-11
Filing date: 1989-11-08
Publication date: 1990-10-17
Anticipated expiration: 2011-02-28
Also published as: JPH0819131B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利用分野本発明は、新規物質ＰＦ１０１８物質ならびにその製造
法、及び殺虫剤に関する。

従来の技術およびその課題従来、＠生物が生産する種々の生理活性物質が知られて
いるが、殺虫活性を有する物質はそれ程多く見出されて
いないため、新規な殺虫物質の創製が常に要望されてい
る。本発明の目的は、新規な物質ＰＦ　１０１８物質な
らびにその製造法、及びＰＦＩＯ１８物質を有効成分と
して含有する殺虫刺を提供することにある。

課題を解決するための手段第１の本発明の要旨とするところは、新規物質ＰＦ　ｌ
　０１８物質およびその塩にある。本発明によるＰＦ１
０１８物質の理化学的性状は２次の通りである。

（１）色および形状：淡黄色粒状結晶（２）元素分析：Ｃ２８Ｈ３５ＮＯ３・Ｈ２０として計
算値　Ｃ７４，４７％、Ｈ８，２６％、Ｎ３．１０％実
測値　Ｃ７５，０８％、Ｈ８，０６％、Ｎ３．３８％（
３）マススペクトル（ＦＤ−ＭＳ）　：　ｍ／ｚ　４３
３　（Ｍ　　）（４）融点：　１８２−１８４°Ｃ（５）比旋光度：［α］３４−−１８５°（Ｃ１，０，
ＣＨＣ：Ｃ３）（６）　ｇ！！：外部および可視部吸収
スペクトルλ　　　　（Ｅ’％）ｍａｘ　ｎｍ　　　　ｌｃｎ＋ｒＭｅＯＨ］　：　２０４（３９３）、　２５１（２９
４）、　３２０（３５５）［０，１Ｎ　ＨＣＩ−ＭｅＯ
Ｈ］　：　２０４（２１５）、　２３５（２２９）、　
３３２（４７１）３５８（ｓｈ　２８０）［０，ＩＮ　ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ］　：　２１３（９９
２）、　２５４（３２６）。

（７）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ　ｃｍ’）　：　３４１０．２９６０．２９２
５．２８７０．１７１０゜１６４０、１５８０．１４３
０．１３８０．１３６０．１３３０．１３１５゜１２９
０、１２４５．１２３０．１１６５．１１２５．１０７
５．１０４０゜１０１０、１０００．　９５０．　９２
０．　８９０．　８７０．　８４５゜８０５、　７７５
．　７６０．　７２０（８）　　ｌＨＮＭＲスペクトル
：第３図に示す。

（９）　　１３ＣＮＭＲスペクトル：第４図に示す。

（１０）　溶解性：クロロホルム、酢酸エチル、アセト
ン、メタノールに溶け、水に溶けない。

（１１）塩基性、酸性、中性の区別：酸性物質第２の本
発明の要旨とするところは、不完全菌に属するＰＦ　１
０１８物質生産菌を培養し、その培養物からＰＦｉ０１
８物質を採取するＰＦＩＯ１８物質の製造法にある。

本発明に使用されるＰＦ１０１８物質生産菌の一例とし
ては、長野県大町市の土壌から新たに分離されたＰＦ１
０１８株がある。

１、ＰＦ１０１８物質生産菌の菌学的性状ポテト・ブド
ウ糖寒天培地（ＰＤＡ）、ポテト・ニンジン寒天培地（
ＰＣＡ）、コーンミール寒天培地（ＣＭＡ）の３種類の
培地でＰＦ１０１８株の生育状態を調べたが、どの培地
でも同様の生育状態を示した。生育速度は２５℃、７日
間で１Ｏｎ＋ｍ。

１４日間で２０〜２２ｍｍであったが、３７°Ｃでは生
育しなかった。ｐＨ５〜７での生育は良好である。集落
の表面は平たんで、白色〜灰色の綿毛状であるが。

茶褐色〜黒色の分生子を着生するにつれて黒色となる。

集落の裏面も最初オレンジ色であるが１分生子形成とと
もに黒色となる。可溶性色素は生成しない。

また、顕微鏡下での観察結果を以下に述べる。

分生子柄は無色で、焦土菌糸から半生し非分枝であり、
こん棒型もしくはアングル型を示す。分生子はｌ細胞性
で、滑面である。大きさは６．０〜８．４×３．６〜４
．４μｍであり、その形は楕円型である。

分生子形成様式はアレウロ型であり２分生子柄の先端お
よび側面に分生子を半生し、連鎖しない。

その上部は丸く、基部は裁断状となる。

以上の菌学的性状より、ＰＦＩＯ１ｇ株はエム・ビー・
エリス［Ｍ、Ｂ、Ｅｌｌｉｓ、　Ｄｅｍａｔｉａｃｅｏ
ｕｓＨｙｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓ、　７５−７７、　Ｃ，
Ｍ、１．、　Ｋｅｙ（１９７１）］記載の不完全菌フ、
ミコーラ属（Ｈｕｏ＋１ｃｏｌａ）に属する菌株であり
２本発明者らは本菌をフミコーラ・エスピー・Ｐ　Ｆ　
Ｉ　Ｏ１８（Ｈｕｍｉｃｏｌａ　ｓｐ、　ＰＦ１０１８
）と命名した。なお２本菌株は当初は工業技術院微生物
工業技術研究所に微工研菌寄第１０３６５号（ＦＥＲＭ
　　Ｐ−１０３６５）として受託されていたが、現在は
国際寄託に切り替えられ微工研条寄第２６２７号（ＦＥ
ＲＭ　ＢＰ−２６２７）として受託されている。

ＰＦ１０１８株は、他の真菌に見られるようにその性状
が変化し易い。例えば、ＰＦＩＯ１Ｂ株に由来する突然
変異株（自然発生または誘発性）。

形質接合体または遺伝子組換え体であっても、ＰＦ１０
１８物質を生産するものは全て本発明に使用できる。

２、ＰＦ１０１８物質生産菌の培養法不完全菌に属するＰＦ１０１８物質生産菌を通常の微生
物が利用しうる栄養物を含有する培地で培養する。栄養
源としては、従来真菌の培養に利用されている公知のも
のが使用できる。例えば。

炭素源としては、グルコース、水飴、デキストリン、澱
粉、糖蜜、動・植物油等を使用しうる。また、窒素源と
しては、大豆粉、小麦胚芽、コーン・ステイープ・リカ
ー、綿実粕、肉エキス、ペプトン、酵母エキス、硫酸ア
ンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素等を使用しうる。そ
の他必要に応じ。

ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、コ
バルト、塩素、燐酸、硫酸およびその他のイオンを生成
することができる無機塩類を添加することは有効である
。また、菌の発育を助け、ＰＦＩＯ１８物質の生産を促
進するような有機および無機物を適当に添加することが
できる。

培養法としては、好気的条件での培養法、特に深部培養
法が最も適している。培養に適当な温度は２３〜３０℃
であるが、多くの場合２６°Ｃ付近で培養する。ＰＦＩ
Ｏ１８物質の生産は培地や培養条件により異なるが、振
盪培養、タンク培養のいずれにおいても通常２〜７日間
でその蓄積が最高に達する。培養中のＰＦＩＯ１８物質
の蓄積量が最高になった時に培養を停止し、培養液から
目的物質を単離精製する。

３、ＰＦＩＯ１８物質の精製法本発明によって得られるＰＦ１０１８物質の培１１物か
らの採取に当たっては、その性状を利用した通常の分離
手段１例えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着ま
たは分配カラムクロマト法。

ゲルろ適法、透析法、沈澱法等を単独でまたは適宜組み
合わせて抽出精製することができる。例えば、ＰＦ１０
１８物質は、培養菌体中からはアセトン−水、メタノー
ル−水または酢酸エチル等で抽出される。また、培養液
中に蓄積されたＰＦ１０１８物質は、水と混ざらない有
機溶剤９例えば。

ブタノール、酢酸エチル等で抽出すればＰＦＩＯ１８物
質は有機溶剤層に抽出される。

ＰＦＩＯ１８物質を更に精製するには、シリカゲル（ワ
コーゲルＣ−２００、和光紬薬工業社製等）。

アルミナ等の吸着剤やセファデックスＬＨ−２０（７プ
ルマシア社製）、トヨバールＨＷ−４０（東ソー株式会
社製）等を用いるクロマトグラフィーを行うとよい。

このようにして培養物中に生産されたＰＦＩＯ１８物質
は遊離の形、ＰＦ１０１８物質それ自体として分離する
ことができ、またＰＦ　ｌ　０１８物質を含有する溶液
またはその濃縮液を塩基、すなわち例えば水酸化ナトリ
ウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属化合物、水酸化
カルシウム、水酸化マグネシウム等のアルカリ土類金属
化合物、アンモニウム塩等のような無機塩基、エタノー
ルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン
等の有機塩基により１例えば抽出２分離または精製の各
工程の操作中に処理した場合、ＰＦＩＯ１８物質は対応
するその塩類の形に変化し１分離される。また別にこの
ようにして製造されたＰＦ１０１８物質の塩類は、常法
により遊離の形に変化させることができる。更に遊離の
形で得られたＰＦＩＯ１８物質を前記塩基により常法で
対応するその塩類に変化させてもよい。従ってＰＦＩＯ
１８物質と同様に前記のようなその塩類も、この発明の
範囲内に包含されるものとする。

第３の本発明の要旨とするところは、ＰＦＩＯ１８物質
を有効成分とする殺虫剤にある。

本発明のＰＦ１０１８物質が特に有効な害虫としては、
ハスモンヨトウ、コナガ、ニカメイガ等の鱗翅目、ノウ
ムシ類、ハムシ類等の鞘翅目、イエバエ、アカイエカ等
の双翅目、アザミウマ目、ゴキブリ等の網翅目、アブラ
ムシ類、ウンカ類、ヨコバイ類、カメムシ類等の半翅目
、その信置翅目、ハダニ類等が挙げられる。

本発明化合物を殺虫剤の有効成分として使用する場合は
、そのまま用いてもよいが、通常は適当な固体担体、液
体担体、ガス状担体、界面活性剤、分散剤その他の製剤
用補助剤、餌等と混合して乳剤、液剤、水和剤、粉剤、
粒剤、油剤、エアゾール剤、フロワブル剤、毒餌等任意
の剤型にして使用することができる。

固体担体としては、例えばタルク、ベントナイト、クレ
ー、カオリン、ケイソウ土、場−ミキュライト、ホワイ
トカーボン、炭酸カルシウム等が挙げられる。液体担体
としては、例えばメタノール、ｎ−ヘキサノール、；チ
レングリコール、セロソルブ等のアルコール類、アセト
ン、メチルエチルケトン、シクロヘキサノン等のケトン
類、ケロシン、灯油等の脂肪族炭化水素類、ベンゼン、
トルエン、キシレン、メチルナフタレン等の芳を族炭化
水素類、ジクロロエタン、トリクロロエチレン、四塩化
炭素等のハロゲン化炭化水素類、ジエチルエーテル、ジ
オキサン、テトラヒドロフラン等のエーテル類、酢酸エ
チル等のエステル類、アセトニトリル、イソブチロニト
リル等のニトリル類、ジメチルホルムアミド、ジメチル
アセトアミド等の酸アミド類、大豆油、綿実油等の植物
油類、ジメチルスルホキシド、水等が挙げられる。

またガス状担体としては、例えばＬＰＧ、７０ンガス、
空気、窒素、炭酸ガス、ジメチルエーテル等が挙げられ
る。

乳化、分散、展着等のための界面活性剤、分散剤として
は、例えばアルキル硫酸エステル類、アルキル（アリー
ル）スルホン酸塩類、ポリオキシアルキレンアルキル（
アリール）エーテル類、多価アルコールエステル類、リ
グニンスルホン酸塩等が用いられる。

更に製剤の性状を改善するための補助剤としては、例え
ばカルボキシメチルセルロース、アラビアガム、ポリエ
チレングリコール、ステアリン酸カルシウム等が用いら
れる。

上記の担体、界面活性剤、分散剤及び補助剤は、必要に
応じて各々単独に、あるいは組み合わせて用いられる。

これらの製剤中の有効成分の含有量は、乳剤では通常１
−５０重量部、粉剤では０．３−２５重量部、水和剤で
は通常１−９０重量部、粒剤では通常０．５−１０１ｉ
量部が適当である。

これらの製剤は、そのままであるいは希釈して用いる。

また、他の殺虫剤、殺ダニ剤、殺菌剤、除草剤、植物成
長調節剤、肥料、土壌改良剤、協力剤等と混合して用い
る事もできる。

実施例以下に本発明の製造例、製剤例、試験例を示すが。

本発明はこれらの例示のみに限定されるものではない。

製造例１゜種培地として、スターチ２．０％、グルコース１．０％
、小麦胚芽０．６％、ポリペプトン０．５％。

大豆粉０．２％、酵母エキス０．３％、炭酸カルシウム
０．１％の組成からなる培地を用いた。また、生産培地
として、スターチ２．０％、グルコース２．０％、大豆
粉１．０％、小麦胚芽１．０％、肉エキス０．５％、塩
化ナトリウム０．２％、炭酸カルシウム０．３％、硫酸
マグネシウム（７水塩）０．１％、硫酸亜鉛（７水塩）
　　０．００１％の組成からなる培地を用いた。なお、
殺菌前ｐｕはすべてｐＨ７，０に調整して使用した。

前記の種培地２０ｍ＋２を分注した１００１ＩＩａ容三
角フラスコを１２０℃で３０分間殺菌し、これにフミコ
ーラ・エスピー・ＰＦｌｏ、１８株（ＦＥＲＭ　ＢＰ−
２６２７）の斜面寒天培養の２〜３白金耳を接種し、２
６°Ｃで５日間振盪培養し７て第１種培養とした。次い
で９種培地（８０ｍＱ）を分注した５００ｍ（２容三角
フラスコを１２０℃で３０分間殺菌し、前記第１種培養
（４ｍＱ）を接種し、２６°Ｃで３日間振盪培養してこ
れを第２種培養とした。

予め１２０℃で３０分間殺菌した３５１．の生産培地を
含む５０Ｌ容ジヤー・ファーメンタ−２基に前記の第２
種培養を各４０Ｏｎ＋Ｑずつ接種し、２６℃で５日間通
気（２０Ｌ／分）、攪拌（初期２５０ｒｐ＋ｎ、　４１
時間以降４００ｒｐｍ）培養した。培養終了後、ろ過動
剤として珪藻土を加えてろ過し、ろ液と菌体を得た。

この菌体に６０％アセトン水（５０Ｌ）を加え、１時間
攪拌後菌体をろ別して菌体抽出液を得た。菌体抽出液は
。減圧下でアセトンを留去して２２Ｌの濃縮液とした。

この濃縮液から酢酸エチル（２０Ｌ×２）でＰＦ１０１
８物質を抽出し、酢酸エチル層を濃縮すると油状物質（
１６ｇ）が得られた。この油状物質をシリカゲルカラム
（７００ｇ）の上部に載せ、ヘキサン−アセトン（４：
　１）を展開溶媒とするクロマトグラフィーを行い、Ｐ
ＦＩＯ１８物質を含む画分を濃縮乾固すると褐色の油状
物質（３２０ｍｇ）が得られた。次いで、この油状物質
をシリカゲルカラム（２０ｇ）の上部に載せ、クロロホ
ルム−メタノール（１００：ｌ）を展開溶媒とするクロ
マトグラフィーを行った。得られた粗ＰＦ１０１８物質
（２３３ｍｇ）を更に、メタノールを展開溶媒とするセ
ファデックスＬＨ−２０（６００ｉ１２）カラムクロマ
トグラフィーを行って精製すると、淡黄色油状物質（２
１６ｍｇ）が得られた。この淡黄色油状物質をクロロホ
ルム（１２０ｍＱ）に溶解し、　０．０１Ｎ塩酸（１２
０ｎａＱ）で洗浄後クロロホルム層を濃縮乾固し、残渣
をメタノール（５−）に溶解して再び濃縮乾固すると純
粋なＰＦＩＯ１８物質が淡黄色粉末（１７６ｍｇ）とし
て得られた。この粉末をメタノールに溶解し再結晶化し
てＰＦ１０１８物質の淡黄色の粒状結晶１１０ｍｇを得
た。

製剤例１．乳剤本発明化合物２０重量部、Ｎ、Ｎジメチルホルムアミド
２０重量部、キシレン５０重量部にポリオキシエチレン
アルキルアリルエーテル１０重量部を加え均一に混合、
溶解して乳剤を得た。

製剤例２．水和剤本発明化合物２５重量部、クレー３０重量部、ケイソウ
１３５重量部、リグニンスルホン酸カルシウム３重量部
、ポリオキシエチレンアルキルアリルエーテル７重量部
を均一に混合し、粉砕して水和剤を得た。

製剤例３．粉剤本発明化合物２重量部、クレー６０シて部、タルク３７
重量部、ステアリン酸カルシウム１重量部を均一に混合
して粉剤を得た。

製剤例４３粒剤本発明化合物５重量部、ベントナイト４０重量分、タル
ク５３重量部、リグニンスルホン酸カルシウム２重量部
を均一に粉砕混合し、水を加えてよく練合したのち、造
粒乾燥して粒剤を得た。

試験例１゜コナガ（ＰｌｕＬｅｌｌａ　ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ）幼
虫に対する効力試験製剤例１に準じて製剤し、界面活性剤（０，０５％）を
含む水で１１０００ｐｐに希釈した薬液にコナガ３令幼
虫１０頭を１０秒間浸漬した。処理後、キャベツ葉片（
５ｃｍＸ５ｃｍ）を入れた直径９ｃｍのグラスチックカ
ップに放虫し、２５°Ｃの恒温室に放置した。２日後の
生死虫数を調査し、下記の計算式から死去率を求めた。

死去率（％）−（死去数／供試虫数）Ｘ１００結果は、
１００％の死去率であった。

試験例２゜ニセナミハダニ（Ｔｅｔｒａｎｙｃｈｕｓ　ｃｉｎｎａ
ｂａｒｉｎｕｓ）雌成虫に対する効力試験直径６ｃｍのプラスチックポットに栽培したツルナシイ
ンゲン初生葉にニセナミハダニ雌成虫１０頭を接種した
。これに接種１日後に製剤例３に準じて製剤し、界面活
性剤（０，０５％）を含む水で１１００ｐｐに希釈した
薬液を噴霧塔で１０ｎ＋散布した。処理後２７°Ｃの恒
温室に放置した。１日後の生死虫数を調査し、試験例１
の式から死去率を求めた。結果は１００％の死去率であ
った。

試験例３゜イエバエ（Ｍｕｓｃａ　ｄｏｍｅｓｔｉｃａ）雌成虫に
対する効力試験エーテル麻酔したイエバエ雌成虫１０頭の胸部背面に、
本発明化合物のアセトン溶液（１，０μｇ／μｌ）をマ
イクロシリンジを用いてｌμｌずっ局所施用した。処理
後、餌として蔗糖液をしみこませた脱脂綿を入れた直径
９ｃｍのプラスチックカップに放虫し、２５°Ｃの恒温
室に放・置した。１日後の生死虫数を調査し、試験例１
の式から死去率を求めた。結果は１００％の死去率であ
った。

発明の効果本発明のＰＦ１０１８物質は上記に示した如く強力な殺
虫活性を有している。この性質に基づき本発明のＰＦＩ
Ｏ１８物質を殺虫剤、あるいはそれへの変換用素材とし
て用いることができる。

【図面の簡単な説明】

第１図：ＰＦ１０１８物質のメタノール中（２０ｇｇ／
ｒｓＱ、実線）、酸性メタノール中（２０ｇｇ／ｍＱ、
　破線）および塩基性メタノール中（２０ｇｇ／ｍＱ、
−点鎖線）での紫外部および可視部吸収スペクトルを示
す。第２図：ＰＦ１０１８物質の臭化カリウム錠での赤外部
吸収スペクトルを示す。第３図二ＰＦＩＯ１８物質の重クロロホルム溶液中での
４００ＭＨｚ　’ＨＮＭＲスペクトルを示す。第４図：ＰＦＩＯｌ中での１００ＭＨｚ　１３Ｃ８物質の重クロロホルム溶液ＮＭＲスペクトルを示す。手６士祁補正 ±（自発）目証１年１２月７３−日

Claims

【特許請求の範囲】１、下記の特性を有するＰＦ１０１８物質およびその塩（１）色および形状：淡黄色粒状結晶（２）元素分析：Ｃ＿２＿８Ｈ＿３＿５ＮＯ＿３・Ｈ＿
２Ｏとして計算値Ｃ７４．４７％、Ｈ８．２６％、Ｎ３
．１０％実測値Ｃ７５．０８％、Ｈ８．０６％、Ｎ３．
３８％（３）マススペクトル（ＦＤ−ＭＳ）：ｍ／ｚ４
３３（Ｍ＾＋）（４）融点：１８２−１８４℃ （５）比旋光度：［α］＾２＾４＿Ｄ＝−１８５゜（ｃ
１．０、ＣＨＣｌ＿３）（６）紫外部および可視部吸収
スペクトル：第１図に示す。（７）赤外部吸収スペクトル：第２図に示す。（８）＾１ＨＮＭＲスペクトル：第３図に示す。（９）＾１＾３ＣＮＭＲスペクトル：第４図に示す。（１０）溶解性：クロロホルム、酢酸エチル、アセトン
、メタノールに溶け、水に溶けない。（１１）塩基性、酸性、中性の区別：酸性物質２、フミ
コーラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属に属する、ＰＦ１０１８
物質生産菌を培養し、その培養物からＰＦ１０１８物質
を採取することを特徴とするＰＦ１０１８物質の製造法
。３、ＰＦ１０１８物質を有効成分として含有する殺虫剤
。