DE60226181T2

DE60226181T2 - Cyclopentenon-derivate für krebs-therapie

Info

Publication number: DE60226181T2
Application number: DE60226181T
Authority: DE
Inventors: M. K. Gurjar; R. D. Wakharkar; H.B.R. Borate; Gautam R. Desiraju; Ashwini Nangia; Sanjay Sarkhel; K.V.V.M. Sairam; J.S. Yadav; S. Chandrasekhar; Anand C. Burman; Rama Mukherjee; Manu Jaggi; Anu T. Singh; Kamal K. Kapoor
Original assignee: Dabur Research Foundation
Current assignee: Fresenius Kabi Oncology Ltd
Priority date: 2002-12-20
Filing date: 2002-12-20
Publication date: 2009-05-07
Anticipated expiration: 2022-12-21
Also published as: ATE392408T1; AU2002356434A1; EP1581471B9; EP1581471B1; DE60226181D1; EP1581471A1; CA2511219C; CA2511219A1; WO2004056738A1

Description

Gebiet der Erfindung
Die Erfindung betrifft Derivate von Cyclopentenon zur Verwendung bei der Hemmung oder Verhinderung des Wachstums oder der Vermehrung von Krebszellen, und therapeutische Zusammensetzungen, die diese Verbindungen enthalten. Die Verbindung betrifft insbesondere Derivate von Cyclopentenon zur Verwendung bei der Hemmung und/oder Verhinderung von Kolon-, Pankreas-, Larynx-, Ovar-, Duodenum-, Nieren-, Mundhöhlen-, Prostata-, Lungen-, Endothelzellen-Krebs und Leukämien.
Hintergrund der Erfindung
Die Behandlung solider Tumor-Krebserkrankungen vertraut weiterhin auf die Entwicklung strukturell neuer und biologisch leistungsfähiger und Antitumor- und Antimitose-Mittel. Vincristin, Taxol, Dolastatin 10 und Combretastatin A-4 (CA-4)-Prodrugs entwickelten klinische Effizienz als Antimitose-Mittel. Wir haben eine neue Klasse von Verbindungen entwickelt (über Molekül-Modelling und 3D-QSAR) und synthetisiert, d. h. Cyclopentenon-Derivate, d. h. 2,3-Diaryl-4- oder 5-substituierte Cyclopent-2-en-1-on-Derivate die insbesondere Combrestatin A-4 imitieren können. Die Leitverbindungen in unseren entwickelten Molekülen zeigen bemerkenswerte cytotoxische Aktivität gegen eine Reihe von Human-Krebszelllinien, welche Kolon-, Pankreas-, Larynx-, Ovar-, Duodenum-, Nieren-, Mundhöhlen-, Prostata-, Lungen-, Endothelzellen-Krebs und Leukämien veranschaulichen.
Zusammenfassung der Erfindung
Die Erfindung betrifft neue Cyclopentenon-Derivate der allgemeinen Strukturformel (1) worin ist:
X Sauerstoff, Hydroxyimino, Alkoxyimino, Aryloxyimino oder Arylimino;
R Hydroxy, Oxo, Amino, Alkylamino, Hydroxyimino, Alkoxyimino, Aryloxyimino, Alkylcarbonyloxy, Aroyloxy, Alkoxy, Methoxymethyloxy, 2-Methoxyethoxymethyloxy, tert.-Butyldimethylsilyloxy, Trimethylsilyloxy, Carbonsäure, Carboxylat-Salze oder Carbonsäureester (vorzugsweise C₁-C₄-Alkylester)
R₁, R₂ und R₄ bis R₁₀ gleich oder verschieden und zwar: Wasserstoff, Hydroxy, Alkyl, Alkoxy, Methoxymethyloxy, 2-Methoxyethoxymethyloxy, tert.-Butyldimethylsilyloxy, Trimethylsilyloxy, Chlor, Fluor, Brom, Mercapto, Alkylthio, Nitro, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Azido, Carboxyl, Carbalkoxy, Alkylcarbonyloxy, Carboxymethyloxy, NHCOCH₃, NHCOCF₃, NH-Alkyl (vorzugsweise ist das Alkyl von NH-Alkyl Methyl, Propyl, Butyl oder t-Butyl), N-Dialkyl (die Alkylgruppen können gleich oder verschieden sein und vorzugsweise C₁-C₄-Alkylgruppen veranschaulichen), CN, Guanidin, NHCOOR₁₁, CH₂C=NR₁₂NR₁₃; NHNH₂, NHCONH₂, NHNHCONH₂, NHNHC(=S)NH₂ und ihre Salze, wobei bevorzugte Salze HCl- und HBr-Salze sind;
OPO₃H₂, OPO₃Na₂, OPO₃K₂, SO₂NH₂, CONH-Alkyl (vorzugsweise C₁-C₄), CHO, CH=NOH oder -(CH₂-CH₂-N[CH₃])-, die an die R₈- bzw. R₉-Positionen kondensiert sind, oder Methylendioxygruppe, die statt der R₈,R₉- bzw. R₉,R₁₀-Position kondensiert ist, und im letzteren Fall ist R₈ Alkoxy (vorzugsweise Methoxy) und R₁₁, R₁₂ und R₁₃ Niederalkylgruppen, ausgewählt aus C₁-C₄-Alkylgruppen; und R₃ gleich Alkoxy; oder ein Salz davon.
Die vorliegende Erfindung betrifft auch das Design und die Synthese neuer Cyclopentenon-Derivate mit Antikrebs-Aktivität.
Die vorliegende Erfindung stellt auch pharmazeutische Zusammensetzungen der neuen Derivate von Verbindungen auf Cyclopentenon-Basis oder pharmazeutisch verträgliche Salze der Verbindungen auf Cyclopentenon-Basis bereit, die sich zum Abtöten oder Hemmen der Vermehrung von Krebszellen und zum Testen ihrer Bioaktivität mittels gezüchteter Human-Krebszellen als Überwachung eignen.
Kurze Beschreibung der Figur
Es zeigt:
1 die prozentuale Hemmung des Wachstums des PTC Xenotransplantats mit der Verbindung der Formel 49 verglichen mit der Kontrolle.
Eingehende Beschreibung der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft die Entwicklung von Cyclopentenon-Derivaten als neue Antikrebsmittel.
Wie hier beschrieben umfasst die vorliegende Erfindung Verbindungen, ausgewählt aus einer Gruppe von Verbindungen der allgemeinen Formeln (1A) und (1B)
worin ist:
X Sauerstoff, Hydroxyimino, Alkoxyimino, Aryloxyimino oder Arylimino;
R Hydroxy, Oxo, Amino, Alkylamino, Hydroxyimino, Alkoxyimino, Aryloxyimino, Alkylcarbonyloxy, Aroyloxy, Alkoxy, Methoxymethyloxy, 2-Methoxyethoxymethyloxy, tert.-Butyldimethylsilyloxy, Trimethylsilyloxy, Carboxyl, Carboxylat-Salze oder Carbonsäureester (vorzugsweise C₁-C₄-Alkylester)
R₁, R₂ und R₄ bis R₁₀ gleich oder verschieden und zwar: Wasserstoff, Hydroxy, Alkyl, Alkoxy, Methoxymethyloxy, 2-Methoxyethoxymethyloxy, tert.-Butyldimethylsilyloxy, Trimethylsilyloxy, Chlor, Fluor, Brom, Mercapto, Alkylthio, Nitro, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Azido, Carboxyl, Alkylcarbonyloxy, Carbalkoxy, Carboxymethyloxy, NHCOCH₃, NHCOCF₃, NH-Alkyl (vorzugsweise ist das Alkyl von NH-Alkyl Methyl, Propyl, Butyl oder t-Butyl), N-Dialkyl (die Alkylgruppen können gleich oder verschieden sein und vorzugsweise C₁-C₄-Alkylgruppen veranschaulichen), CN, Guanidin, NHCOOR₁₁, CH₂C=NR₁₂NR₁₃; NHNH₂, NHCONH₂, NHNHCONH₂, NHNHC(=S)NH₂ und ihre Salze, (wobei bevorzugte Salze HCl- und HBr-Salze sind); OPO₃H₂, OPO₃Na₂, OPO₃K₂, SO₂NH₂, CONH-Alkyl (vorzugsweise C₁-C₄), CHO, oder CH=NOH oder -(CH₂-CH₂-N[CH₃])-, können an die R₈- bzw R₉-Positionen kondensiert sein, oder die Methylendioxygruppe, kann statt der R₈,R₉- bzw. R₉,R₁₀-Position kondensiert sein, und im letzteren Fall ist R₈ Alkoxy (vorzugsweise Methoxy) und R₁₁, R₁₂ und R₁₃ Niederalkylgruppen, ausgewählt aus C₁-C₄-Alkylgruppen; und R₃ gleich Alkoxy; und die Salze davon.
Die vorliegende Erfindung betrifft die Synthese von Verbindungen der Strukturformel 1
mit zwei substituierten Arylgruppen oder Kombinationen davon, die durch eine Überbrückungseinheit von C=C getrennt sind, die ein Teil einer cyclischen C₅-Einheit ist. Die Arylgruppe(n) sind vorzugsweise durch mindestens eine oder mehrere Alkoxygruppen substituiert. Das bevorzugte Substitutionsmuster ist das 3,4,5-Trimethoxysystem in einer der Arylgruppen.
Die vorliegende Erfindung erwägt den Einsatz von Verbindungen der Formel 1
bei denen R an C-4 (1A) oder C-5 (1B) der Cyclopentenon-Einheit als freie Hydroxygruppe vorliegt, oder Derivaten davon.
Eine bevorzugte Verbindung der Formel 1
wobei X Sauerstoff oder Hydroxyimono ist. Hydroxyimino stellt wahrscheinlich eine hydrophilere Substanz bereit, die für die biologische Aktivität erforderlich ist.
Wie hier verwendet, ist Alkyl eine Gruppe mir C₁-C₄-Kohlenstoffatomen.
Wie hier verwendet betrifft der Begriff Alkoxy O-Alkylgruppen, wobei die Alkylgruppe 1 bis 4 Kohlenstoffatome hat. Die bevorzugte Alkylgruppe ist Methyl.
Die Arylgruppe kann substituiert sein. Bevorzugte Substituenten sind Wasserstoff, Hydroxy, Alkyl, Alkoxy, Methoxymethyloxy, 2-Methoxyethoxymethyloxy, tert.-Butyldimethylsilyloxy, Trimethylsilyloxy, Chlor, Fluor, Brom, Mercapto, Alkylthio, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Azido, Carboxyl, Alkylcarbonyloxy, Carbalkoxy, Carboxymethyloxy, NHCOCH₃, NHCOCF₃, NH-Alkyl (vorzugsweise ist das Alkyl von NH-Alkyl Methyl, Propyl, Butyl oder t-Butyl), N-Dialkyl (die Alkylgruppen können gleich oder verschieden sein und vorzugsweise C₁-C₄-Alkylgruppen veranschaulichen), CN, Guanidin, NHCOOR₁₁, CH₂C=NR₁₂NR₁₃; NHNH₂, NHCONH₂, NHNHCONH₂, NHNHC(=S)NH₂ und ihre Salze, (wobei bevorzugte Salze HCl- und HBr-Salze sind); OPO₃H₂, OPO₃Na₂, OPO₃K₂, SO₂NH₂, CONH-Alkyl (vorzugsweise C₁-C₄), CHO, oder CH=NOH oder -(CH₂-CH₂-N[CH₃])-, können an die R₈- bzw R₉-Positionen kondensiert sein, oder die Methylendioxygruppe kann an benachbarte Positionen des Arylrings kondensiert sein, und im letzteren Fall ist R₈ Alkoxy (vorzugsweise Methoxy) und R₁₁, R₁₂ und R₁₃ sind Niederalkylgruppen, ausgewählt aus C₁-C₄-Alkylgruppen.
Alkylcarbonyloxy ist eine Gruppe der Formel O(CO)-Alkyl, wobei die Acylgruppe ((CO)Alkyl), die 1-4 Kohlenstoffatome enthält, an ein Sauerstoffatom gebunden ist. Die bevorzugte Acylgruppe hat 2 Kohlenstoffatome.
"Alkylamino", "Monoalkylamino" und "Dialkylamino" betreffen eine Gruppe, bei der eine Alkylgruppe oder zwei Alkylgruppen an einen Amino-Stickstoff gebunden sind, d. h. NH(Alkyl) oder N(Alkyl)₂. NH oder N ist die Brücke, die die Alkylgruppen mit der Aryl/Phenylgruppe der in dieser Anmeldung beschriebenen Formeln verbindet. Beispiele umfassen NHMe, NHEt, oder N(Me)₂, N(Et)₂ und dergleichen.
Wie hier verwendet betrifft Alkylthio ein S-Alkyl, wobei das Alkylthio über das S-Atom als Substituent gebunden ist. Das S ist die Brücke, die die Alkylgruppe mit der Aryl/Phenylgruppe verbindet.
Aryloxyimino umfasst Gruppen der Formel Ar-O-N=, wobei Ar Aryl ist. "Carbalkoxy" ist eine Gruppe, wobei die Acylgruppe an die Haupt-Aryl/Phenyleinheit gebunden ist, und Alkyl die vorstehend definierte Bedeutung hat. Beispiele umfassen COOMe, COOEt und dergleichen.
Aroxyl ist ArCO, wobei Ar eine Arylgruppe ist. Aroyloxy ist ArC(O)O. Carboxylat-Salze können Natrium, Kalium- oder Ammonium-Salze sein. Die Ester der Carbonsäure könnne 1 bis 4 Kohlenstoffatome in der Estergruppe aufweisen. Chemie
Eine übliche Synthese von 2,3-Diaryl-4-hydroxycyclopent-2-en-1-on und 2,3-Diaryl-5-hydroxycyclopent-2-en-1-on der allgemeinen Formeln (6A) bzw. (6B) und anderer Derivate der Formel (1)
ist in den Schemata 1 und 2 gezeigt. Gemäß einer erfindungsgemäßen Ausführungsform wurde Furan mit einer starken Base behandelt, ausgewählt aus Methyllithium, n-Butyllithium, s- oder t-Butyllithium, Lithium-Diisopropylamid (LDA) und substituierten Benzaldehyden der Formel 2, bei –40°C bis 0°C, so dass man einen substituierten Furfurylalkohol der Formel (3) erhält. Schema 1
Schema 2
Die Behandlung der Verbindung der Formel (3) mit einer Lewis-Säure, vorzugsweise Zinkchlorid führte zur Bildung von 2-Aryl-4-hydroxycyclopent-2-en-1-on der Formel (4)
Im Gegensatz zum Stand der Technik, nämlich G. Piancatelli, A. Scettri, und S. Barbadoro, Tet. Lett. 39, 3555–3558 (1976); G. Piancatelli und A. Scettri, Tet. Lett. 13, 1131–1134 (1977); G. Piancatelli, A. Scettri, G. David und M. D. Auria, Tetrahedron 34, 2775–2778 (1978); A. Scettri, G. Piancatelli, M. D. Auria und G. David, Tetrahedron 35, 135–138 (1979); P. W. Collins, S. W. Kramer und G. W. Gullikson, J. Med. Chem. 30, 1952–1955 (1987); P. W. Collins, S. W. Kramer, A. F. Gasiecki, R. M. Weier, P. H. Jones, G. W. Gullikson, R. G. Bianchi, und R. F. Bauer, J. Med. Chem. 30, 193–197 (1987); M. D. Auria, Heterocycles, 52, 185–194 (2000), die ein Zweischritt-Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (4) offenbaren, erfolgt im Verfahren des Anmelders zur Gewinnung von 2-Aryl-4-hydroxycyclopent-2-en-1-on der Formel (4) die doppelte Umlagerung der substituierten Furfuryl-Alkohole der Formel (3) in einem Reaktionsansatz.
Die Verbindungen der Formel (4) unter Heck-Reaktions-Bedingungen mit korrekt substituierten Iodbenzolen der Formel (5) ergaben das 2,3-Diaryl-4-hydroxycyclopent-2-en-1-on der Formel (6A).
Standard-Derivatisierungs-Techniken wurden zum Umwandeln der Verbindungen der Formel (4) und (6A) in 4-Acetoxy-, 4-tert.-Butyldimethylsilyloxy- und 4-Trimethylsilyloxy-Derivate (siehe beispielsweise Schema 3) eingesetzt. Zur Steigerung der Löslichkeit der entwickelten Moleküle wurde die Oximierung des cyclischen Ketons, die Oxidation der 4-Hydroxy-Gruppe und eine weitere Dioximierung durch Routine-Verfahren durchgeführt. Schema 3
Die Derivatisierung der funktionellen Gruppen in dem Cyclopentenon-Ring kann vor oder nach der Heck-Reaktion erfolgen. Die Heck-Reaktion ergab jedoch bessere Ausbeuten, wenn das Hydroxy am C-4 des Cyclopentenons geschützt war. Die Verbindung der Struktur 4 wurde vorzugsweise als Trimethylsilyl- oder tert.-Butyldimethylsilylether geschützt, bevor die Heckreaktion durchgeführt wurde, so dass die zweite Arylgruppe an der Position C-3 gebunden wurde. Die Entfernung der Schutzgruppe von der Silyloxygruppe an C-4 in der Verbindung der Formel der Struktur (6A) erfolgte unter sauren Bedingungen, beispielsweise Essigsäure in wässrigem Tetrahydrofuran bei 50°C, und die darauf folgende Acylierung oder Oxidation ergab die entsprechenden Acyloxy- oder Oxo-Derivate. Das 2,3-Diaryl-1,4-cyclopent-2-en-dion der Formel (15) wurde weiter mit Hydroxylaminhydrochlorid behandelt, so dass das Dioxim der Formel (18) erhalten wurde.

Nach dem Protokoll von Schema 1 wurden die Verbindungen (gezeigt in der Tabelle 1) der Formeln (7) bis 45), der allgemeinen Formel (1A) synthetisiert.

Tabelle 1

Verbindung der Formel Nr.	R	R2	R3	R4	R6	R7	R8	R9	X
7	OH	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	O
8	OH	OMe	OMe	OMe	H	Me	OMe	Me	O
9	OH	OMe	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	O
10	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	O
11	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	H	H	H	O
12	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	Me	OMe	Me	O
13	OTBS	OMe	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	O
14	OAc	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	O
15	O	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	O
16	OH	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	N-OH
17	O	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	N-OH
18	N-OH	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	N-OH
19	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	N-OH
20	OAc	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	H	N-OH
21	OTBS	OMe	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	N-OH
22**	OTBS	H	H	H	H	H	H	H	O
23	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	COOMe	OMe	H	O
24	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	OMe	OMe	H	O
25	OTBS	H	OMe	NO₂	H	H	OMe	H	O
26	OAc	OMe	OMe	OMe	H	Me	OMe	Me	O
27	OAc	OMe	OMe	OMe	H	Me	OMe	Me	N-OH
28	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	OMe	OMe	H	N-OH
29	OAc	OMe	OMe	OMe	H	OMe	OMe	H	N-OH
30	OH	OMe	OMe	OMe	H	OMe	OMe	H	O
31	OH	OMe	OMe	OMe	OMe	H	OMe	OMe	N-OH
32	OAc	OMe	OMe	OMe	OMe	H	OMe	OMe	N-OH
33**	OH	H	H	H	H	H	H	H	N-OH
34**	OAc	H	H	H	H	H	H	H	N-OH
35**	OAc	H	H	H	H	H	H	H	O
36**	OH	H	H	H	H	H	H	H	O
37	OAc	OMe	OMe	OMe	OMe	H	H	OMe	O
38	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	OMOM	OMe	H	O
39	OH	OMe	OMe	OMe	H	OH	OMe	H	O
40	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	OMOM	OMe	H	N-OH
41	OTBS	OMe	OMe	OMe	H	OH	OMe	H	O
42	OH	OMe	OMe	OMe	H	OH	OMe	H	N-OH
43	OH	OMe	OMe	OMe	H	OMOM	OMe	H	O
44	OAc	OMe	OMe	OMe	H	OMOM	OMe	H	O
45	OH	OMe	OMe	OMe	H	OMOM	OMe	H	N-OH

* OMOM veranschaulicht Methoxymethyloxy
** Nicht erfindungsgemäß gemäß den Ansprüchen

Das tert.-Butyldimethylsilyl-Derivat der Verbindungen der Formel (4) unter Grignard-Reaktionsbedingungen mit korrekt substituierten Iodbenzolen der Formel (5) oder die Reaktion von Aryllithium aus der Formel (5) ergab die entsprechenden 1,2-Diaryl-4-(tert.-butyldiemthylsilyloxy)cyclopent-2-en-1-ole der Formel (4A), die einer Pyridiniumdichromat-katalysierten Umlagerung unterworfen werden, so dass die Titel-2,3-Diaryl-5-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-cyclopent-2-en-1-one der Formel (6B) erhalten werden, wie in Schema 2 gezeigt.
Gemäß dem in Schema 2 gezeigten Protokoll wurden die (in der Tabelle 2 gezeigten) Verbindungen der Formeln (46) bis (73), die zu der Allgemeinen Formel (1B) gehören, synthetisiert. Tabelle 2

* OiPr veranschaulicht Isopropyloxy

Repräsentative Salze der Verbindungen der Formel 1 umfassen, sind aber nicht eingeschränkt auf Acetat, Ascorbat, Benzoat, Citrat, Oxalat, Stearat, Trifluoracetat, Succinat, Tartrat, Lactat, Fumarat, Gluconat, Glutamat, Phosphat/Diphosphat, und Valerat. Andere Salze umfassen Ca-, Li-, Mg-, Na-, und K-Salze, Halogenide, Salze von Aminosäuren wie Lysin oder Arginin; Guanidin, Ammonium, substituierte Ammoniumsalze oder Aluminiusalze. Die Salze können auf herkömmliche Weise hergestellt werden.
Die Erfindung stellt auch eine Zusammensetzung bereit, umfassend eine Verbindung der Formel 1, ein Derivat oder ein Salz davon und einen pharmazeutisch verträglichen Träger, Verdünnungsmittel, oder Lösungsmittel. Die Zusammensetzung kann gegebenenfalls und vorzugsweise pharmazeutisch verträgliche Verdünnungsmittel, Exzipienten, Additive, Füllstoffe, Gleitmittel, Lösungsmittel, Bindemittel, Stabilisatoren, und dergleichen enthalten. Solche Verdünnungsmittel können umfassen: RPMI 1649, gepufferte Salzlösung, isotonisches NaCl, Ringer-Lösung, destilliertes Wasser, Polyethylenglycol (rein oder in Wasser), 2% Tween in Wasser, Dimethylsulfoxid auf 50% in Wasser, Propylenglycol (rein oder in Wasser), phosphatgepufferte Salzlösung, ausgeglichene Salzlösung, Glycerin, und andere herkömmliche Fluide, die sich zur intravenösen Verabreichung eignen. Pharmazeutische Zusammensetzungen, die etwa 0,1 bis 10 g (vorzugsweise 0,5 bis 5,0 g) der Zusammensetzung pro Einheitsdosis bereitstellen, sind bevorzugt und werden herkömmlicherweise hergestellt als Tabletten, Pastillen, Kapseln, Pulver, wässrige oder ölige Suspensionen, Sirupe, Elixire und wässrige Lösungen. Die Natur der eingesetzten pharmazeutischen Zusammensetzung hängt natürlich von dem gewünschten Verabreichungsweg ab.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen lassen sich in einem Verfahren zur Behandlung von Menschen, Säugetieren, oder anderen Tieren verwenden, die an Krebs oder anderen Tumoren leiden. Das Verfahren kann geeigneterweise die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Dosis der pharmazeutischen Zusammensetzung, damit Krebs- oder Tumorzellen abgetötet werden oder deren Vermehrung gehemmt wird, umfassen, daraus bestehen oder im Wesentlichen daraus bestehen. Die Erfindung betrifft insbesondere Verbindungen der Formel (I), Derivate oder Salze davon zur Verwendung bei der Hemmung und/oder Verhinderung von Krebserkrankungen von Kolon, Larynx, Ovarien, Duodenum, Niere, Mundhöhle, Prostata, Lunge, Endothelzellen oder Leukämien.
Die Verfahren, in denen die erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden umfassen, bestehen, oder bestehen im Wesentlichen aus der systemischen Verabreichung einer therapeutisch effizienten Kombination von Cyclopentenon-Derivaten an das Säugetier. Eine wirksame Dosis von Cyclopentenon-Derivaten oder pharmazeutisch verträglichen Salzen der Cyclopentenon-Derivate reicht von 1 mg/kg Körpergewicht bis 300 mg/kg Körpergewicht (vorzugsweise 10 bis 100 mg)/kg Körpergewicht des Säugetiers, wobei die Dosis von den angestrebten Wirkungen, der Verabreichungsweise und der behandelten Krebserkrankung abhängt. Systemische Verabreichung steht für orale, rektale, nasale, transdermale und parentale (d. h. intramuskuläre, intravenöse und subkutane) Verabreichung. Gemäß guter klinischer Praxis wird die Zusammensetzung vorzugsweise in einer Dosis verabreicht, die krebsbekämpfende Wirkungen erzeugt, ohne dass übermäßige schädliche Nebenwirkungen hervorgerufen werden. Die Zusammensetzung kann entweder allein oder als Gemisch mit anderen Therapeutika verabreicht werden, wie 5-Fluoruracil, Methotrexat, Etoposid, Paclitaxel, Taxotere, Doxorubicin, Daunarubicin, Vincristin, Vinblastin und andere solcher bekannten und bewährten Antikrebs-Arzneistoffe.
Eine wirksame Menge ist die Menge eines Medikamentes oder eines Arzneimittels, die die angestrebte biologische oder medizinische Reaktion eines Gewebes, Systems, Tiers oder Menschs hervorruft.
Weitere chemische Transformationen zur Gewinnung der gewünschten Moleküle wurden mit Standard-Verfahren durchgeführt, und einige von Ihnen wurden in den folgenden Beispielen aufgeführt.
Für ein weiteres Verständnis der vorliegenden Erfindung und nicht zur Einschränkung sind die folgenden Beispiele gegeben, so dass die vorliegende Erfindung eindeutiger beschrieben wird.
BEISPIEL 1
Herstellung von substituierten Furfurylalkoholen der Formel (3)
Furyl-(3,4,5-trimethoxyphenol)methanol
Magnesium (1,68 g, 70 mmol) wurde in einen Dreihals-Rundbodenkolben mit Kühler überführt, und 100 ml Ether gefolgt von Dibromethane (9,5 g, 51,02 mmol) wurden unter Rühren bei 0°C unter Stickstoffatmosphäre zugefügt. Das Rühren wurde so lange fortgesetzt, bis sämtliches Magnesium umgesetzt war, dann wurde der Ether unter Vakuum entfernt, bis ein Schlamm entstanden war. (A). In einem weiteren Dreihals-Rundbodenkolben wurde Furan (4,76 g, 70 mmol) in Tetrahydrofuran (100 ml) mit einem Eis-Salz-Gemisch gekühlt, n-Butyllithium (2 M, 35 ml, 70 mmol) wurde tropfenweise zugegeben, und das Gemisch wurde 45 min bei 0°C gerührt. (B).
Das so in Kolben (B) hergestellte Furyllithium wurde zu dem kalten Gemisch in (A) mittels Kanüle gegeben, 5 min bei 0°C gerührt, auf Raumtemperatur gebracht und 1,5 Std. bei Raumtemperatur gerührt, dann auf –20°C gekühlt (Trockeneis und CCl₄). Substituiertes Benzaldehyd (51,02 mmol) in Tetrahydrofuran (50 ml) wurde zugegeben und 4 Std. bei –20°C gerührt (überwacht durch DC). Nach Beendigung der Reaktion wurde das Gemisch mit gesättigter Ammoniumchloridlösung gequencht. Man ließ das Gemisch auf Raumtemperatur aufwärmen. Das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt und der Rückstand mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser, und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurden reine Verbindungen der Formel der Struktur 3 erhalten (Ausbeute 93%).
Spektraldaten von Furyl-(3,4,5-trimethoxyphenyl)methanol:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,72 (bs, 1H), 3,84 (s, 9H), 5,75 (bs, 1H), 6,15 (d, J = 6 Hz, 1H), 6,27-6,32 (m, 1H), 6,66 (d, J = 2 Hz, 2H), 7,40 (bs, 1H).
Masse (m/e): 264 (M⁺, 80), 247 (60), 233 (12), 214 (15), 189 (20), 169 (70) 161 (25), 95 (100)
Beispiel 2
Herstellung von 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-4-hydroxycyclopent-2-enonen
Eine Lösung von Arylfurfurylalkohol, d. h. der Verbindung der Struktur 3, wobei R₁ und R₅ gleich H sind und R₂-R₄ gleich OCH₃ sind (25 g, 94,69 mmol), und ZnCl₂ (51,26 g, 378,7 mmol) in Dioxan (30 ml) und Wasser (206 ml) wurde 24 Std. unter Rückfluss erhitzt, wonach die DC-Analyse das vollständige Verschwinden des Ausgangsmaterials anzeigte. Das Gemisch wurde auf Raumtemperatur gebracht, mit verdünnter HCl auf pH-Wert 1 angesäuert und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend mit Salzlösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Die organische Schicht wurde unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Es wurde das erforderliche 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-4-hydroxy-cyclopent-2-en-1-on (21,25 g, 85%) erhalten.
Spektraldaten:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,52 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,89 (s, 6H), 5,00-5,10 (m, 1H), 6,98 (s, 2H), 7,58 (d, 1H).
Masse (m/e): 264 (M⁺, 100), 249 (57), 233 (10), 221 (22), 205 (32), 189 (15), 177 (20), 161 (40).
BEISPIEL 3
Herstellung von tert.-Butyldimethylsilylderivaten
Eine Lösung von 2-Aryl-4-hydroxy-cyclopent-2-en-1-on der Formel (4) (8,7 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (30 ml) wurde bei 0°C unter inerter Atmosphäre (erhalten durch Verwendung von Stickstoff- oder Argongas, gefüllt in einem Ballon) gerührt, eine Lösung von tert-Butyldimethylsilylchlorid (1,5 g, 9,95 mmol) und Dimethylaminopyridin (0,194 g, 1,5 g mmol) in Dichlormethan (10 ml) wurde tropfenweise zugegeben und für 15 min bei der gleichen Temperatur gerührt. Dann wurde Triethylamin (1,77 ml, 12,7 mmol) zugegeben, und das Gemisch wurde auf Raumtemperatur erwärmt und weitere 3 Std. gerührt (überwacht durch DC). Das Reaktionsgemisch wurde durch Whatman Filterpapier filtriert, Dichlormethan wurde unter reduziertem Druck entfernt und mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt, so dass die Titelderivate erhalten wurden.
Spectraldaten von 2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-4-tert.-butyldimethylsilyoxy-cyclopent-2-en-1-on:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 0,16 (s, 3H), 0,17 (s, 3H), 0,94 (s, 9H), 2,47 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,92 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,90 (s, 6H), 4,95-5,05 (m, 1H), 6,96 (s, 2H), 7,45 (d, 1H).
Masse (m/e): 378 (M⁺, 100), 363 (10), 321 (15), 290 (40), 219 (70).
BEISPIEL 4
Herstellung von 4-Acetoxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-1-on
Eine Lösung von 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-4-hydroxy-cyclopent-2-en-1-on (3 g, 11,36 mmol) in Dichlormethan (30 ml) wurde mittels Eis-Salzbad auf 0°C gekühlt. Zu der kalten Lösung wurde wasserfreies Pyridin (1,70 g, 1,73 ml; 26,0 mmol) gegeben und für 10 min bei 0°C gerührt. Zu der gerührten Lösung wurde Essigsäureanhydrid (1,63 g, 1,50 ml, 16,0 mmol) tropfenweise gegeben, während die Temperatur unter 0°C gehalten wurde. Das Reaktionsgemisch wurde 15 Std. bei Raumtemperatur gerührt (überwacht durch DC) und dann durch Zugabe von kalter verdünnter Salzsäure gequencht. Die organische Schicht wurde dreimal mit Wasser, 10% Natriumbicarbonatlösung und schließlich Salzlösung gewaschen. Die organische Schicht wurde über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether: Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das reine 4-Acetoxy-2-(3,4,5-trimethoxy-phenyl)-cyclopent-2-en-1-on (2,56 g, 73,47%) erhalten.
Spektraldaten:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,08 (s, 3H), 2,54 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,84 (s, 6H), 5,80-5,90 (m, 1H), 6,96 (s, 2H), 7,59 (d, J = 4 Hz, 1H)
Masse (m/e): 306 (M⁺, 100), 264 (14), 247 (34), 231 (8), 219 (51).
BEISPIEL 5
Heck-Reaktion von Aryliodiden mit Cyclopentenon
Ein Gemisch von p-Iodanisol (3,71 g, 15,87 mmol), 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-4-hydroxy-cyclopent-2-enon (7,93 mmol), Palladiumacetat (0,230 g, 1,026 mmol), Triphenylphosphin, (0,400 g, 1,52 mmol), Kaliumcarbonat (2,20 g, 15,86 mmol), und einer katalytischen Menge Tetrabutylammoniumbromid (0,030 g) in entgastem Acetonitril wurde 36 Std. unter Rückfluss erhitzt. Dann wurde das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur gekühlt, und Acetonitril wurde unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt. Der Rückstand wurde mit verdünnter HCl angesäuert und mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurden reine Produkte der Formel der Struktur (7) erhalten.
Spektraldaten Verbindung der Formel der Struktur (7)
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,65 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,11 (dd, J = 18 Hz und 8 Hz, 1H), 3,72 (s, 6H), 3,83 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 5,45-5,50 (m, 1H), 6,46 (s, 2H), 6,87 (d, J = 10 Hz, 2H), 7,41 (d, J = 10 Hz, 2H).
Masse (m/e): 370 (M⁺, 100), 355 (19), 262 (32), 231 (20), 219 (18), 177 (30), 163 (27), 135 (25).
BEISPIEL 6
Herstellung der Verbindung der Formel der Struktur (10)
Ein Gemisch aus p-Iodanisol (3,71 g, 15,87 mmol), 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-4-ter-butyldimethylsilyoxy-cyclopent-2-enon (7,93 mmol), Palladiumacetat (0,230 g, 1,026 mmol), Triphenylphosphin, (0,400 g, 1,52 mmol), Kaliumcarbonat (2,20 g, 15,86 mmol), und einer katalytischen Menge Tetrabutyl-ammoniumbromid (0,030 g) in entgastem Acetonitril wurde für 36 Std. unter Rückfluss erhitzt. Dann wurde das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur gekühlt, und Acetonitril wurde unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt. Der Rückstand wurde mit verdünnter HCl angesäuert, und dann mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurden reine Produkte der Formel der Struktur (10) erhalten.
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur (10):
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 0,05 (s, 3H), 0,09 (s, 3H), 0,80 (s, 9H), 2,57 (d, J = 16 Hz, 1H), 3,02 (dd, J = 16 Hz und 6 Hz, 1H), 3,69 (s, 6H), 3,82 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 5,30-5,40 (m, 1H), 6,44 (s, 2H), 6,82 (d, J = 6 Hz, 2H), 7,27 (d, J = 6 Hz, 2H).
Masse (m/e): 484 (M⁺, 5), 427 (30), 369 (32), 353 (100), 325 (61), 294 (47).
BEISPIEL 7
Herstellung der Verbindung der Formel der Struktur (11)
Ein Gemisch aus Iodbenzol (15,87 mmol), 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-4-terbutyldimethylsilyoxy-cyclopent-2-enon (7,93 mmol), Palladiumacetat (0,230 g, 1,026 mmol), Triphenylphosphin, (0,400 g, 1,52 mmol), Kaliumcarbonat (2,20 g, 15,86 mmol), und einer katalytischen Menge Tetrabutylammoniumbromid (0,030 g) in entgastem Acetonitril wurde für 36 Std. unter Rückfluss erhitzt. Dann wurde das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur gekühlt, und Acetonitril wurde unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt. Der Rückstand wurde mit verdünnter HCl angesäuert, und dann mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurden reine Produkte der Formel der Struktur (11) erhalten.
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur (11):
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ –0,05 (s, 3H), 0,05 (s, 3H), 0,77 (s, 9H), 2,61 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,05 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,63 (s, 6H), 3,82 (s, 3H), 5,27-5,33 (m, 1H), 6,47 (s, 2H), 7,32 (bs, 5H).
Masse (m/e): 454 (M⁺, 28), 379 (100), 323 (28), 291 (27), 247 (92), 219 (66), 75 (83).
BEISPIEL 8
Herstellung der Verbindung der Formel der Struktur (12)
Ein Gemisch von 3,5-Dimethyl-4-methoxy-1-iodbenzol (15,87 mmol), 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-4-ter-butyldimethylsilyoxy-cyclopent-2-enon (7,93 mmol), Palladiumacetat (0,230 g, 1,026 mmol), Triphenylphosphin, (0,400 g, 1,52 mmol), Kaliumcarbonat (2,20 g, 15,86 mmol), und einer katalytischen Menge Tetrabutylammoniumbromid (0,030 g) in entgastem Acetonitril wurde für 36 Std. unter Rückfluss erhitzt. Dann wurde das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur gekühlt, und Acetonitril wurde unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt. Der Rückstand wurde mit verdünnter HCl angesäuert, und dann mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurden reine Produkte der Formel der Struktur 12 erhalten.
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur 12:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ –0,01 (s, 3H), 0,07 (s, 3H), 0,78 (s, 9H), 2,20 (s, 6H), 2,56 (d, J = 18 Hz, 1H) 3,01 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,68 (s, 6H), 3,70 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 5,20-5,30 (m, 1H), 6,51 (s, 2H), 6,97 (s, 2H).
Masse (m/e): 512 (M⁺, 18), 456 (38), 425 (16), 381 (51), 353 (15), 322 (13) 129 (100).
BEISPIEL 9
Herstellung der Verbindung der Formel der Struktur (13)
Ein Gemisch von 2,5-Dimethoxy-1-iodbenzol (15,87 mmol), 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-4-ter-butyldimethylsilyoxy-cyclopent-2-enon (7,93 mmol), Palladiumacetat (0,230 g, 1,026 mmol), Triphenylphosphin, (0,400 g, 1,52 mmol), Kaliumcarbonat (2,20 g, 15,86 mmol), und einer katalytischen Menge Tetrabutylammoniumbromid (0,030 g) in entgastem Acetonitril wurde für 36 Std. unter Rückfluss erhitzt. Dann wurde das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur gekühlt, und Acetonitril wurde unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt. Der Rückstand wurde mit verdünnter HCl angesäuert, und dann mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurden reine Produkte der Formel der Struktur 13 erhalten.
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur 13:
¹HNMR (CDCl₃ + CCl₄): δ –0,19 (s, 3H), –0,04 (s, 3H), 0,74 (s, 9H), 2,55 (d, J = 16 Hz, 1H), 3,02 (dd, J = 16 Hz und 6 Hz, 1H), 3,63 (s, 6H), 3,65 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 5,25-5,38 (m, 1H), 6,45-6,72 (m, 3H), 6,75-6,96 (m, 2H).
Masse (m/e): 514 (M⁺, 71), 458 (87), 443 (30), 384 (40), 154 (70) 75 (100).
Das Beispiel 10 beschreibt ein allgemeines Verfahren zur Entfernung der Schutzgruppe der tert.-Butyldimethylsilyloxy-Gruppe, die bei der Herstellung verschiedener Verbindungen verwendet wird, die in dieser Beschreibung beschrieben sind. Die Verbindungen der Formel 8 und 9 sind spezifische Verbindungen, die durch dieses Verfahren aus ihren entsprechenden TBS-Derivaten erhalten werden, d. h. Verbindung 8 wird aus der Verbindung 12 erhalten, und die Verbindung 9 wird aus der Verbindung 13 erhalten.
BEISPIEL 10
Entfernung der Schutzgruppe von tert-Butyldimethylsilyloxy-Derivaten
Eine Lösung des geschützten 4-tert-Butyldimethylsilyloxy-2,3-diarylcyclopent-2-enon (0,72 mmol) in Essigsäure; Tetrahydrofuran und Wasser (3:1:1) wurde bei 50°C 20 Std. erhitzt (überwacht durch DC). Das Reaktionsgemisch wurde auf 0°C gekühlt und durch Natriumbicarbonat neutralisiert und mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend mit Salzlösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde bis zur Trockne unter reduziertem Druck mit einem Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das 4-Hydroxy-2,3-diarylcyclopentenon der allgemeinen Formel der Struktur 6 erhalten.
Spektraldaten der Verbindungen der Formel der Struktur 8:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,21 (s, 6H), 2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,07 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,69 (s, 6H), 3,71 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 5,35-5,45 (m, 1H), 6,47 (s, 2H), 7,06 (s, 2H).
Masse (m/e): 398 (M⁺, 100), 367 (5), 262 (32), 247 (51), 231 (12), 177 (15), 149 (13).
Spektraldaten der Verbindungen der Formel der Struktur 9:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,63 (dd, J = 18 Hz und 2 Hz, 1H), 3,06 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,64 (s, 6H), 3,71 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 5,35-5,50 (m, 1H), 6,45-6,75 (m, 3H), 6,84-7,00 (m, 2H).
Masse (m/e): 400 (M⁺, 19), 369 (3), 111 (82), 83 (52), 71 (67).
Beispiel 11
Herstellung der Verbindung der Formel der Struktur 14
Eine Lösung von 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)-4-hydroxy-cyclopent-2-en-1-on (0,235 g, 0,63 mmol) in Dichlormethan (20 ml) wurde mit einem Eis-Salz-Bad auf 0°C gekühlt. Zu der kalten Lösung wurde wasserfreies Pyridin (0,10 g, 1.46.0 mmol) gegeben und 10 min bei 0°C gerührt. Zu der gerührten Lösung wurde Essigsäureanhydrid (0,10 g, 0,95 mmol) tropfenweise zugegeben, während die Temperatur unter 0°C gehalten wurde. Das Reaktionsgemisch wurde 15 Std. bei Raumtemperatur gerührt (überwacht durch DC) und dann durch Zugabe von kalter verdünnter Salzsäure gequencht. Die organische Schicht wurde dreimal mit Wasser, 10% Natriumbicarbonatlösung und schließlich Salzlösung gewaschen. Die organische Schicht wurde über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das reine 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)-4-acetoxy-cyclopent-2-en-1-on (0,21 g, 80,45%) erhalten.
Spektraldaten:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,01 (s, 3H), 2,52 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,15 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,71 (s, 6H), 3,81 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 6,40 (m, 1H), 6,44 (s, 2H), 6,81 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,26 (d, J = 8 Hz, 2H).
Masse (m/e): 412 (M⁺, 100), 397 (8), 352 (13), 337 (17).
BEISPIEL 12
Herstellung von Diketon der Struktur 15
Eine Lösung von Pyridiniumchlorchromat (0,300 g) in Dichlormethan (20 ml) wurde auf 0°C gekühlt, 5 min gerührt, dann wurde eine Lösung von 2,3-Diaryl-4-hydroxycyclopentenon der Formel 7, (0,200 g, 0,54 mmol) in Dichlormethan (5 ml) zugegeben und 2 Std. bei Raumtemperatur gerührt (durch DC überwacht). Das Reaktionsgemisch wurde durch Celit filtriert. Das Filtrat wurde mit Wasser und anschließend mit Salzlösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne unter reduziertem Druck mit einem Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das reine Cyclopentendion der Struktur 15 erhalten (0,060 g, 30,16%).
Spektraldaten:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 3,17 (s, 2H), 3,69 (s, 6H), 3,83 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 6,63 (s, 2H), 6,88 (d, J = 6 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 6 Hz, 2H).
Masse (m/e): 368 (M⁺, 100), 353 (30), 283 (23), 169 (20), 111 (46) 69 (70).
BEISPIEL 13
Herstellung des Oxims der Struktur 16
Ein Gemisch des Ketons der Formel 7 (0,100 g, 0,20 mmol), Hydroxylaminhydrochlorid (0,02 g, 0,30 mmol) und Natriumacetat (0,025 g, 0,30 mmol) in Ethanol (5 ml) wurde im Wasserbad 3 Std. unter Rückfluss erhitzt. Die Reaktion wurde durch DC überwacht und nach Beendigung der Reaktion wurde das Lösungsmittel unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt. Der Rückstand wurde mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das reine Oxim der Struktur 16 erhalten (0,086 g, 83,50%).
Spektraldaten:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄) δ 2,80 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,36 (dd, J = 18 Hz und 8 Hz, 1H), 3,73 (s, 6H), 3,79 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 5,30-5,40 (m, 1H), 6,47 (s, 2H), 6,80 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,26 (d, J = 8 Hz, 2H).
Masse (m/e): 385 (M⁺, 100), 368 (40), 336 (12).
BEISPIEL 14
Herstellung des Oxims der Struktur 17 aus der Verbindung der Struktur 16
Eine Lösung von Pyridiniumchlorchromat (0,080 g) in Dichlormethan (10 ml) wurde auf 0°C gerührt, 5 min gerührt, dann wurde eine Lösung von 2,3-Diaryl-4-hydroxycyclopentenon der Formel 16, (0,075 g, 0,19 mmol) in Dichlormethan (5 ml) zugegeben und 2 Std. bei Raumtemperatur gerührt (überwacht durch DC). Das Reaktionsgemisch wurde durch Celit filtriert. Das Filtrat wurde mit Wasser und anschließend mit Salzlösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne unter reduziertem Druck mit einem Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das reine Cyclopentendion der Struktur 15 erhalten 17 (0,026 g, 35%) erhalten.
Spektraldaten der Verbindung der Struktur 17:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 3,41 (s, 2H), 3,69 (s, 6H), 3,80 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 6,58 (s, 2H), 6,83 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,60 (bs, 1H).
Masse (m/e): 384 (M+, 100), 367 (37), 336 (34), 307 (12).
BEISPIEL 15
Herstellung des Oxims der Struktur 19
Ein Gemisch des Ketons der Formel 10 (0,100 g, 0,20 mmol), Hydroxylaminhydrochlorid (0,02 g, 0,30 mmol) und Natriumacetat (0,025 g, 0,30 mmol) in Ethanol (5 ml) wurde im Wasserbad 3 Std. unter Rückfluss erhitzt. Die Reaktion wurde durch DC überwacht und nach Beendigung der Reaktion wurde das Lösungsmittel unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt. Der Rückstand wurde mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das reine Oxim der Struktur 19 erhalten (0,086 g, 83,50%).
Spektraldaten:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ –0,01 (s, 3H), 0,08 (s, 3H), 0,82 (s, 9H), 2,70 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,32 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,69 (s, 6H), 3,78 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 5,24-5,30 (m, 1H), 6,46 (s, 2H), 6,76 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,14 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,85 (bs, 1H).
Masse (m/e): 499 (M+, 68), 442 (67), 368 (100), 320 (12), 74 (60).
BEISPIEL 16
Herstellung des Dioxims der Struktur 18
Ein Gemisch des Diketons der Formel 15 (0,060 g, 0,16 mmol), Hydroxylaminhydrochlorid (0,026 g, 0,40 mmol) und Natriumacetat (0,033 g, 0,40 mmol) in Ethanol (5 ml) wurde 3 Std. in einem Wasserbad unter Rückfluss erhitzt (überwacht durch DC). Dann wurde das Lösungsmittel unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt, und der erhaltene Rückstand wurde mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das reine Dioxim der Struktur 18 erhalten (0,033 g, 51,6%).
Spektraldaten:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 3,42 (s, 2H), 3,47 (s, 6H), 3,61 (s, 3H), 3,64 (s, 3H), 6,36 (s, 2H), 6,60 (d, J = 6 Hz, 2H), 7,06 (d, J = 6 Hz, 2H).
BEISPIEL 17
Herstellung der Verbindung der Struktur 20
Ein Gemisch des Ketons der Formel 14 (0,100 g, 0,24 mmol), Hydroxylaminhydrochlorid (0,023 g, 0,36 mmol) und Natriumacetat (0,03 g, 0,36 mmol) in Ethanol (5 ml) wurde im Wasserbad 3 Std. unter Rückfluss erhitzt. Die Reaktion wurde durch DC überwacht, und nach Beendigung der Reaktion wurde das Lösungsmittel unter reduziertem Druck mittels Rotationsverdampfer entfernt. Der Rückstand wurde mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und anschließend Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck bis zur Trockne mittels Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Rückstand wurde durch Säulenchromatographie mittels Silicagel (Petroleumether:Aceton als Elutionsmittel) gereinigt. Es wurde das reine Oxim der Struktur 20 erhalten (0,088 g, 85,40%).
Spektraldaten der Verbindung der Struktur 20:
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,02 (s, 3H), 2,72 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,40 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,72 (s, 6H), 3,78 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 6,25-6,35 (m, 1H), 6,46 (s, 2H), 6,75 (d, J = 10 Hz, 2H), 7,12 (d, J = 10 Hz, 2H).
Masse (m/e): 427 (M⁺, 100), 412 (7), 369 (47), 351 (25), 320 (31), 305 (7).
Die Verbindung der Formel der Struktur 21 wurde mit dem gleichen Verfahren wie oben aus einer Verbindung der Formel der Struktur 13 hergestellt.
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur (21):
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ –0,21 (s, 3H), –0,06 (s, 3H), 0,76 (s, 9H), 2,69 (d, J = 18Hz, 1H), 3,36 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,66 (s, 6H), 3,70 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 5,20-5,30 (m, 1H), 6,50-6,57 (m, 3H), 6,76 (bs, 2H), 7,99 (bs, 1H).
Masse (m/e): 529 (M⁺, 63), 512 (71), 472 (100), 398 (68), 75 (60).
BEISPIEL 18
Herstellung von 5-tert-Butyldimethylsilyloxy-3-(4-methoxy-3-i-gropoxygheny)-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on der Formel (56)
4-Iod-2-i-propoxyanisol (1,94 g, 7,90 mmol) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (10 ml) wurde unter Stickstoff bei –78°C gerührt, und n-Butyllithium (3,45 ml einer 2,3 M Lösung, 7,90 mmol) wurde tropfenweise zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde bei –78°C für 1,5 Std. gerührt. 4-tert-Butyldimethyisilyloxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)cyclopent-2-en-1-on (2,00 g, 5,29 mmol) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (10 ml) wurde zugegeben, und das Reaktionsgemisch wurde bei –78°C für 12 Std. gerührt. Dies wurde dann mit einer gesättigten Ammoniumchlorid-Lösung (30 ml) gequencht, das Tetrahydrofuran wurde unter reduziertem Druck entfernt, mit Dichlormethan (3 × 50 ml) extrahiert, mit Wasser (2 × 20 ml) und anschließend mit Salzlösung (1 × 20 ml) gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat), durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 8% Aceton in Petroleumether) eingeengt und gereinigt, so dass die Verbindung der Formel (4A) erhalten wurde, wobei R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe, R₉ = Oi-Pr (1,28 g, 45%) als gelblicher Halbfeststoff erhalten wurde.
Der vorstehende Alkohol der Formel (4A), wobei R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe, R₉ = Oi-Pr (0,50 g, 0,92 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (15 ml) wurde mit Pyridiniumdichromat (0,69 g, 1,83 mmol) unter Stickstoff bei Raumtemperatur für 4 Std. gerührt. Dies wurde dann durch Celit (3,00 g) filtriert, mit Dichlormethan (50 ml) gewaschen, durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 5% Aceton in Petroleumether) eingeengt und gereinigt, so dass die Titelverbindung der Formel (56) erhalten wurde (0,42 g, 79%).
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur (56)
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 0,21 (s, 6H), 0,96 (s, 9H), 1,13 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 6 Hz, 3H), 2,92 (dd, J = 18 Hz, und 6 Hz, 1H), 3,33 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H) 3,74 (s, 6H), 3,81 (s, 6H), 3,85 (s, 3H), 4,01-4,06 (m, 1H), 4,45-4,50 (m, 1H), 6,41 (s, 2H), 6,80 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,08 (dd, J = 8 Hz und 2 Hz, 1H)
¹³C NMR (CDCl₃+ CCl₄): δ –5,19, –4,42, 18,30, 21,61, 21,75, 25,76 (3C), 39,07, 55,61, 55,79 (2C), 60,46, 71,05, 106,33 (2C), 111,04, 115,71, 121,62, 127,21, 128,39, 135,78, 137,65, 146,51, 152,17, 153,42 (2C), 162,39, 204,77, 205,00
BEISPIEL 19
Herstellung von O-tert-Butyldimethylsilyloxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on der Formel (52)
Magnesiumspäne (0,19 g, 7,93 mmol) wurden in einen 100 ml Rundbodenkolben unter einer Stickstoffatmosphäre überführt. Wasserfreies Tetrahydrofuran (25 ml) wurde zugegeben, gefolgt von tropfenweiser Zugabe von p-Bromanisol (1,48 g, 7,90 mmol). Das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur für 2 Std. gerührt, wonach sämtliches Magnesium unter Bildung von 4-Methoxyphenylmagnesiumbromid umgesetzt wurde. 4-tert-Butyldimethylsilyloxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on (2,00 g, 5,29 mmol) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (15 ml) wurde zugegeben und bei Raumtemperatur für 2 Std. gerührt. Dies wurde dann mit verdünnter Salzsäure (25 ml) gequencht, Tetrahydrofuran wurde unter reduziertem Druck entfernt, das Reaktionsgemisch wurde mit Ethylacetat (3 × 25 ml) extrahiert, mit Wasser (2 × 25 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 7% Aceton in Petroleumether) eingeengt und gereinigt so dass der Alkohol der Formel (4A) erhalten wurde, worin R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₉ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe (1,28 g, 52%).
Der vorstehende Alkohol der Formel (4A) worin R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₉ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe (1,15 g, 2,36 mmol) wurde in wasserfreiem Dichlormethan (30 ml) gelöst und unter Stickstoff mit Pyridiniumdichromat (1.73 g, 7.38 mmol) unter Stickstoff bei Raumtemperatur für 12 Std. gerührt. Die Aufarbeitung wie in Beispiel 1 und die Reinigung durch Säulenchromatographie über Silikagel (Elutionsmittel 3% Aceton in Petroleumether ergab die Titelverbindung der Formel (52) (0,52 g, 45%).
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur (52)
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 0,23 (s, 6H), 0,97 (s, 9H), 2,94 (dd, J = 16 Hz und 4 Hz, 1H), 3,30 (dd, J = 16 Hz und 8 Hz, 1H), 3,74 (s, 6H), 3,81 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 4,45-4,52 (m, 1H), 6,44 (s, 2H), 6,80 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 8 Hz, 2H)
BEISPIEL 20
Herstellung von 5-tert-Butyldimethylsilyloxy-3-(4-thiomethylphenyl)-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on der Formel (55)
4-Bromthioanisol (1,07 g, 5,28 mmol) und Magnesiummetall (0,12 g, 5,28 mmol) wurden in einem 100 ml Zweihals-Rundbodenkolben unter einer Argonatmosphäre vorgelegt. Wasserfreies Tetrahydrofuran (10 ml) wurde zugegeben, und das Gemisch wurde bei Raumtemperatur für 2 Std. gerührt. Dies wurde dann auf 0°C gekühlt, 4-tert-Butyldimethysilyloxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on (1,00 g, 2,64 mmol) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (10 ml) wurde tropfenweise zugegeben, bei 0°C für 1/2 Std., und dann bei Raumtemperatur für 2 Std. gerührt. Die Reaktion wurde dann mit gesättigter Ammoniumchloridlösung (50 ml) gequencht, und Tetrahydrofuran wurde unter reduziertem Druck entfernt. Das restliche Reaktionsgemisch wurde mit Ethylacetat (3 × 50 ml) extrahiert, mit Wasser (2 × 20 ml) und anschließend Salzlösung (10 ml) gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat) und eingeengt. Die Reinigung durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 7% Aceton in Petroleumether) ergab die Verbindung der Formel (4A) worin R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₉ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = OMe, R₈ = SMe (0,95 g, 72%).
Die vorstehende Verbindung der Formel (4A) worin R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₉ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = OMe, R₈ = SMe (0,65 g, 1,29 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (10 ml) wurde auf 0°C gekühlt, Pyridiniumdichromat (0,96 g, 2,5 mmol) wurde zugegeben, das Gemisch wurde bei der gleichen Temperatur für 1 Std. gerührt, and dann bei Raumtemperatur für 10 Std. gerührt. Dies wurde dann durch Celit (2,00 g) filtriert und mit Dichlormethan (20 ml) gewaschen. Die vereinigte Dichlormethanschicht wurde mit Wasser (2 × 10 ml) und anschließend Salzlösung (5 ml) gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat), und durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 2–5% Aceton in Petroleumether) eingeengt und gereinigt, so dass die Verbindung der Formel (55) (0,30 g, 46%) erhalten wurde.
Spektraldaten die Verbindung der Formel der Struktur (55)
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 0,23 (s, 6H), 0,98 (s, 9H), 2,48 (s, 3H), 2,96 (dd, J = 16 Hz und 4 Hz, 1H), 3,30 (dd, J = 16 Hz und 6 Hz, 1H), 3,74 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 4,45-4,60 (m, 1H), 6,44 (s, 2H), 7,13 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 8 Hz, 2H).
¹³C NMR (CDCl₃): δ –5,23, –4,53, 14,70, 18,22, 25,69 (3C), 39,25, 55,83 (2C), 60,57, 72,84, 106,44 (2C), 125,12 (2C), 127,01, 128,57 (2C), 131,11, 136,40, 137,80, 142,06, 153,16 (2C), 162,13, 204,92
Masse (m/z): 500(M⁺)
BEISPIEL 21
Herstellung von 5-Hydroxy-3-(3-chlor-4-methoxyphenyl-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on der Formel (67)
Ein Gemisch aus Magnesiumspänen (0,31 g, 13,1 mmol), 2-Chlor-4-bromanisol (3,00 g, 13,5 mmol), 4-tert-Butyldimethysilyloxy-2-(3,4,5-trimethoxy-phenyl)-cyclopent-2-en-1-on (2,58 g, 6,84 mmol) und wasserfreiem Tetrahydrofuran (35 ml) unter Stickstoff wurde für 4 Std. bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktion wurde mit verdünnter Salzsäure (30 ml) gequencht, Tetrahydrofuran wurde unter reduziertem Druck entfernt, und das restliche Reaktionsgemisch wurde mit Ethylacetat (3 × 35 ml) extrahiert, mit Wasser (2 × 20 ml) gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Die Einengung und Reinigung durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 6% Aceton in Petroleumether) ergab den Alkohol der Formel (4A) worin R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄= R₆= OMe, R₉ = Cl (1,32 g, 37%).
Eine Lösung des vorstehenden Alkohols der Formel (4A) worin R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe, R₉ = Cl (0,95 g, 1,83 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (15 ml) wurde auf 0°C gekühlt, Pyridiniumdichromat (1,92 g, 8,17 mmol) wurde zugegeben, und das Gemisch wurde 3 Std. bei Raumtemperatur gerührt. Die Filtration durch Celit (3,00 g), Waschen mit Dichlormethan (30 ml) und Einengen ergab das Rohprodukt, das durch Säulenchromatographie (Elutionsmittel 3% Aceton in Petroleumether) gereinigt wurde, so dass die Titelverbindung der Formel (1B) erhalten wurde, worin R = OTBS, R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe, R₉ = Cl (0,32 g, 34%), das nach Entfernung der TBDMS Schutzgruppe mit dem in Beispiel 10 beschriebenen Verfahren die Verbindung der Formel (67) ergab.
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur (67)
¹H-NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,96 (dd, J = 18 Hz und 2 Hz, 1H), 3,33 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,75 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 4,45-4,54 (m, 1H), 6,42 (s, 2H), 6,81 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,21-7,29 (m, 1H), 7,48 (bs, 1H).
¹³C-NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 37,79, 55,87 (2C), 60,58, 71,57, 106,23 (2c), 111,31, 122,41, 126,82, 127,59, 128,58 (2C), 130,05, 135,90, 138,07, 153,36 (2C), 156,48, 162,51, 206,95
BEISPIEL 22
Herstellung von 5-Hydroxy-3-(3-fluor-4-methoxyphenyl)-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on der Formel (64)
4-Brom-2-fluoranisol (1,08 g, 5,29 mmol) und Magnesiummetall (0,13 g, 5,29 mmol) wurden in einem 100 ml Zweihals-Rundbodenkolben unter einer Argonatmosphäre vorgelegt. Wasserfreies Tetrahydrofuran (10 ml) wurde zugegeben, und das Gemisch wurde bei Raumtemperatur für 2 Std. gerührt. Dies wurde dann auf 0°C gekühlt, 4-tert-Butyldimethysilyloxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on (1,00 g, 2,64 mmol) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (10 ml) wurde tropfenweise zugegeben, bei 0°C für 1 Std. und dann bei Raumtemperatur für 2 Std. gerührt. Die Reaktion wurde dann mit gesättigter Ammoniumchloridlösung (50 ml) gequencht, und Tetrahydrofuran wurde unter reduziertem Druck entfernt. Das restliche Reaktionsgemisch wurde mit Ethylacetat (3 × 50 ml) extrahiert, mit Wasser (2 × 20 ml) und anschließend Salzlösung (10 ml) gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat) und eingeengt. Die Reinigung durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 5–8% Aceton in Petroleumether) ergab die Verbindung der Formel (4A), worin R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe, R₉ = F (1,20 g, 90%).
Die vorstehende Verbindung der Formel (4A), worin R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe, R₉ = F (0,50 g, 1,00 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (10 ml) wurde auf 0°C gekühlt, Pyridiniumdichromat (0,47 g, 2,0 mmol) wurde zugegeben, das Gemisch wurde bei der gleichen Temperatur für 1 Std. gerührt, und dann bei Raumtemperatur für 8 Std. gerührt. Dies wurde dann durch Celit (2,00 g) filtriert und mit Dichlormethan (20 ml) gewaschen. Die vereinigte Dichlormethanschicht wurde mit Wasser (2 × 10 ml) und anschließend Salzlösung (5 ml) gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat), und durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 2–5% Aceton in Petroleumether) eingeengt und gereinigt, so dass die Verbindung der Formel (1B) erhalten wurde, worin R = OTBS, R₁ = R₅ = R₆ = R₇ = R₁₀ = H, R₂ = R₃ = R₄ = R₈ = OMe, R₉ = F (0,24 g, 48%). Nach Entfernen der TBDMS-Schutzgruppe mit dem in Beispiel 10 beschriebenen Verfahren wurde die Verbindung der Formel (64) erhalten
Spektraldaten die Verbindung der Formel der Struktur (64)
¹H-NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,93 (dd, J = 16 Hz und 4 Hz, 1H), 3,30 (dd, J = 16 Hz und 6 Hz, 1H), 3,70 (s, 6H), 3,82 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 4,45-4,60 (m, 1H), 6,40 (s, 2H), 6,78-6,91 (m, 1H), 7,00-7,20 (m, 2H).
¹³C-NMR (CDCl₃): δ 37,86, 55,84 (2C), 60,58, 71,50, 106,16 (2C), 112,56, 115,72, 116,12, 125,35, 127,00 (2C), 136,01, 137,92, 149,28, 149,50, 153,32 (2C), 162,80, 207,17.
Masse (m/z): 388 (M⁺).
BEISPIEL 23
Herstellung von 5-Hydroxy-2-(4-methoxy-3-nitrophenyl)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on der Formel (46)
3,4,5-Trimethoxyiodbenzol (0,20 g, 0,68 mmol) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (7 ml) wurde unter Stickstoff bei –78°C gerührt, und n-Butyllithium (0,3 ml einer 2,3 M Lösung, 0,68 mmol) wurde tropfenweise zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde bei der gleichen Temperatur für 1.5 Std. gerührt und dann wurde 4-tert-Butyldimethysilyloxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-cyclopent-2-en-1-on (0,25 g, 0,68 mmol) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (5 ml) wurde tropfenweise zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde bei –78°C für 1/2 Std. und bei RT für 1 Std. gerührt. Dies wurde dann mit einer gesättigten Ammoniumchloridlösung (10 ml) gequencht, Tetrahydrofuran wurde unter reduziertem Druck entfernt, das Produkt wurde mit Ethylacetat (2 × 15 ml) extrahiert, mit Wasser (1 × 10 ml) gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat), durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 10% Aceton in Petroleumether) eingeengt und gereinigt, so dass die Titelverbindung der Formel (4A) erhalten wurde, worin R₁ = R₄ = R₅ = R₆ = R₁₀ = H, R₃ = R₇ = R₈ = R₉ = OMe, R₂ = NO₂ (0,14 g, 40%).
Der vorstehende Alkohol der Formel (4A) worin R₁ = R₄ = R₅ = R₆ = R₁₀ = H, R₃ = R₇ = R₈ = R₉ = OMe, R₂ = NO₂ (0,10 g, 0,19 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (10 ml) wurde mit Pyridiniumdichromat (0,14 g, 0,37 mmol) für 18 Std. unter einer Stickstoffatmosphäre unter Rückfluss erhitzt. Dies wurde dann durch Celit (2,00 g) filtriert und mit Dichlormethan (30 ml) gewaschen. Die vereinigte Dichlormethanschicht wurde mit Wasser (2 × 10 ml) und anschließend Salzlösung (5 ml) gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat), und durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 10% Aceton in Petroleumether) eingeengt und gereinigt, so dass die Verbindung der Formel (1B) erhalten wurde, worin R = OTBS, R₁ = R₄ = R₅ = R₆ = R₁₀ = H, R₃ = R₇ = R₈ = R₉ = OMe, R₂ = NO₂ (0,06 g, 52%). Nach Entfernen der TBDMS-Schutzgruppe mit dem in Beispiel 10 beschriebenen Verfahren wurde die Verbindung der Formel (46) erhalten
Spektraldaten die Verbindung der Formel der Struktur (46)
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 3,02 (bd, J = 16 Hz, 1H), 3,27 (dd, J = 16 Hz und 6 Hz, 1H) 3,68 (s, 6H), 3,88 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 4,53 (bs, 1H, D₂O austauschbar), 5,28-5,30 (m, 1H), 6,59 (s, 2H), 7,07 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,45 (bd, J = 8 Hz, 1H), 7,79 (bs, 1H)
BEISPIEL 24
Herstellung der Verbindung der Formel (58) aus der Verbindung der Formel (51)
Ein Gemisch der Verbindung der Formel (51) (0,300 g, 0,67 mmol), Aluminiumchlorid (0,180 g, 1,35 mmol) und Benzol (10 ml) wurde bei 50°C unter einer Argonatmosphäre gerührt. Dies wurde dann gekühlt und mit kalter verdünnter Salzsäure (10 ml) gequencht und mit Ethylacetat (2 × 20 ml) extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser (2 × 15 ml) und anschließend Salzlösung (10 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter reduziertem Druck eingeengt. Die Reinigung durch Säulenchromatographie über Silicagel (Elutionsmittel 8%, 10% Aceton in Petroleumether) ergab die reine Verbindung der Formel (58) (0,180 g, 66%).
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur (58)
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,94 (bd, J = 18 Hz, 1H), 3,32 (dd, J = 18 Hz und 8 Hz, 1H), 3,76 (s, 6H), 3,88 (s, 6H), 5,29-5,40 (m, 1H), 6,44 (s, 2H), 6,65-6,75 (m, 2H), 6,84 (bs, 1H)
Masse (m/z): 401 (M⁺).
Beispiel 25
Herstellung der Verbindung der Formel (42) aus der Verbindung der Formel (40)
Ein Gemisch der Verbindung der Formel (40) (0,100 g) und Tetrahydro-furan-Essigsäure-Wasser (3:1:1,20 ml) wurde bei 50°C für 20 Std. erwärmt. Dies wurde dann durch wässr. Ammoniak neutralisiert und mit Ethylacetat extrahiert, über Natriumsulfat getrocknet, durch Säulenchromatographie eingeengt und gereinigt, so dass die reine Verbindung der Formel (42) (0,070 g, 77%) erhalten wurde.
Spektraldaten der Verbindung der Formel der Struktur (42)
¹H NMR (CDCl₃ + CCl₄): δ 2,68 (bd, J = 18 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 18 Hz und 6 Hz, 1H), 3,70 (s, 6H), 3,84 (s, 6H), 5,18-5,35 (m, 1H), 6,43 (s, 2H), 6,62-6,80 (m, 2H), 6,88 (bs, 1H).
BEISPIEL 26
In vitro-Cytotoxizität der Cyclopentenon-Derivate
Eine Reihe von Cyclopentenon-Derivaten wurde auf Cytotoxizität gegen 9 menschliche Tumorzelllinien getestet. Kurz gesagt wurde ein Dreitages-MTT-Cytotoxizitätstest durchgeführt, der auf dem Prinzip der Aufnahme von MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromid), einem Tetrazoliumsalz beruht, durch metabolisch aktive Zellen, wo es durch aktive Mitochondrien zu einem blau gefärbten Formazan-Produkt verstoffwechselt wird, das spektralphotometrisch gelesen wird. MTT wurde in phosphatgepufferter Salzlösung mit einem pH-Wert von 7,4 gelöst, so dass eine MTT-Konzentration von 5 mg/ml erhalten wurde; das resultierende Gemisch wurde durch ein 0,22 Mikron Filter filtriert, so dass eine kleine Menge an unlöslichem Rest sterilisiert und entfernt wurde. Für jeden Typ Tumorzelle wurden 10000 bis 15000 Zellen in eine Anzuchtplatte mit 96 Vertiefungen überimpft und mit den einzelnen Cyclopentenon-Derivaten in einem CO₂-Inkubator für insgesamt 72 Std. inkubiert. Die Kontrollzellen, die nicht mit den Cyclopentenon-Derivaten behandelt wurden, wurden ähnlich inkubiert. Der Test wurde bestimmt durch Zugabe von 100 μg (20 μl) MTT in jede Vertiefung, dann für eine weitere Std. inkubiert und schließlich 50 μl von 10% SDS-0,01 N HCl in jede Vertiefung gegeben, so dass die Zellen lysiert wurden und Formazan gelöst wurde. Nach Inkubation für eine Std. wurde die Platte spektralphotometrisch bei 540 nm gelesen, und der Prozentsatz der Cytotoxizität mit der folgenden Formel berechnet: Prozentsatz Cytotoxizität = 100 × [1 – (X/R1)],wobei:
X = (Absorption der behandelten Probe bei 540 nm) – (Absorption der Leerprobe bei 540 nm)
R₁ = Absorption der Kontrollprobe bei 540 nm
Die ED₅₀-Werte der Cytotoxizität, definiert als Konzentration, bei der 50% der Zellen in vitro abgetötet werden, wurde für jede Zelllinie berechnet, die jeweils mit den Cyclopentenon-Derivaten behandelt wurde.
Die Zelllinien sind PTC (Gesamt-Kolon), MOLT-4 (Leukämie), SW620 (Ovarien), DU145 (Prostata), KB (orale Squamosum-Zellen), L132 (Lunge), MlAPaCa2 (Pankreas), Hep2 (Larynx), PA-1 (Ovarien), HuTu80 (Duodenum), ECV304 (Endothel) und 293 (Niere).
Die ED₅₀-Werte der In-vitro-Cytotoxizität der erfindungsgemäßen Cyclopentenon-Derivate sind in der Tabelle 3 gezeigt.
BEISPIEL 27
Die Cyclopentenon-Derivate wurden auf ihre Wirkung auf Tubulin-Polymerisation in vitro überprüft. Kurz gesagt wurde die Tubulin-Aufbaureaktion bei 37°C in Puffer mit 80 mM PIPES, 1 mM EGTA, 1,0 mM GTP und 1 mM MgCl₂ (pH-Wert 6,9) bei einer Tubulin-Konzentration von 1 mg/ml in Anwesenheit oder Abwesenheit der Cyclopentenon-Derivate durchgeführt. Die Endkonzentration der Cyclopentenon-Derivate in dem Reaktionsgemisch variierte von 1 bis 5 μM. Die Derivate wurden in 0,1% DMSO gelöst. Die Kontroll-Experimente erfolgten mit 0,1% DMSO. Die Tubulin-Polymerisation erfolgte durch Messung der Absorption der Lösung bei 340 nm alle 30 sec. Die IC₅₀-Werte für die Hemmung der Tubulin-Polymerisation durch Cyclopentenon-Derivate sind in der Tabelle 4 gezeigt. Wie nachstehend gezeigt, hemmten die Cyclopentenon-Derivate die Tubulin-Polymerisation mit IC50-Werten im Bereich von 1,4–2,9 μM in vitro. Somit vermittelten die Cyclopentenon-Derivate ihre beobachteten Antikrebs-Aktivitäten durch Tubulin-Depolymerisation. Tabelle 4 IC50-Werte für die Hemmung der Tubulin-Polymerisation durch Cyclopentenon-Derivate

S. Nr. Verbindung der Formel Nr. IC50-Werte (μM) zur Hemmung der Tubulin-Polymerisation

1 48 2,1 ± 0,1

2 49 2,3 ± 0,5

3 39 1,4 ± 0,6

4 66 2,0 ± 0,6

5 74 1,8 ± 0,5
BEISPIEL 28
Menschliches Squamosum-Zell-Karzinom (KB) wurde in einem 25 cm² Kolben plattiert. Nachdem die Kulturen Konfluenz erzielt hatten, wurde das Cyclopentenon-Derivat der Struktur 20 zu den Zellen gegeben. Die Endkonzentration des Derivates der Struktur 20 in dem Kolben betrug 5 μg/ml. Die unbehandelten Vertiefungen dienten als Kontrollen. Die Zellen wurden mit dem Arzneistoff für 2 unterschiedliche Zeitpunkte von 6 und 16 Std. bei 37°C inkubiert. Die Zellen wurden durch Zentrifugation bei 2000 U/min für 10 min gesammelt. Der Überstand wurde vorsichtig entfernt und verworfen, wohingegen der Lyse-Puffer zu dem Zellpellet gegeben wurde (25 μl Lysepuffer pro 1 × 10⁴ Zellen). Das Zelllysat wurde auf Eis für 10 min inkubiert und für 1 min bei 10000 × g zentrifugiert. Der Überstand wurde in ein neues Röhrchen überführt und auf Eis gehalten. 50 μl Zelllysat wurde in eine Platte mit 96 Vertiefungen überführt. Dazu wurde 2× Reaktionspuffer gegeben. Vor der Verwendung des Reaktionspuffers wurde 10 μl frische DTT-Stammlösung pro 1 ml 2× Reaktionspuffer gegeben. Zu jeder Vertiefung wurden 5 μl kolorimetrisches Caspase-3-Substrat (DEVD-pNA) gegeben.
Die Platte wurde 1 bis 3 Std. bei 37°C inkubiert und bei 405 nm gelesen.

Das Ausmaß der Caspase-Enzymaktivität in dem Zelllysat ist direkt proportional zu der Absorption bei 405 nm. Die Tabelle 5 zeigt das Ausmaß der Induktion von Caspase 3 in KB-Zellen, die mit einem der Cyclopentenon-Derivate behandelt wurde. Tabelle 5 Caspase-3-Induktion, verursacht durch Cyclopentenon-Derivate in Oral-Krebszellen (KB)

Molekül	Prozent Induktion von Caspase-3
	6 Std.	16 Std.
20	13,6 ± 2,4	20,7 ± 3,1
39	12,8 ± 0,2	17,0 ± 1,5
48	18,4 ± 1,1	22,7 ± 1,5
49	26,7 ± 2,8	31,9 ± 3,2
66	17,0 ± 1,0	22,1 ± 0,6
74	21,8 ± 2,8	28,4 ± 2,1

BEISPIEL 29
Menschliche Endothelzellen (ECV304) wurden bei einer Dichte von 8 bis 10 × 10⁵ Zellen pro 2 ml in einer Platte mit 6 Vertiefungen plattiert. Nach einer Inkubation der Zellen über Nacht bei 37°C wurden die Cyclopentenon-Derivate bei einer Konzentration von 5 μg/ml zu den Vertiefungen gegeben. Die unbehandelten Vertiefungen dienten als Kontrollen. Die Platten wurden 4 Std. bei 37°C inkubiert. Das Medium wurde aus sämtlichen Vertiefungen (Kontrolle und behandelt) gesammelt und bei 2000 U/min zentrifugiert, so dass das Zellmaterial entfernt wurde. Der Überstand wurde gesammelt und für ELISA (Quantikine Human-VEGF, R&D Systems) verwendet.
Der Test setzt die quantitative Sandwich-Enzym-Immuntest-Technik ein. Ein monoklonaler Antikörper, der für VEGF spezifisch ist, wurde vorher auf eine Mikrotiterplatte geschichtet. Die Standards und Proben wurden in die Vertiefungen pipettiert, und das vorhandene VEGF wurde an den immobilisierten Antikörper gebunden. Nach dem Wegwaschen der ungebundenen Substanzen wurde ein für VEGF spezifischer enzymgebundener polyklonaler Antikörper zu den Vertiefungen gegeben. Nach einer Wäsche zur Entfernung von jeglichem ungebundenen Antikörper-Enzym-Reagenz wurde eine Substratlösung in die Vertiefungen gegeben, und die Farbe entwickelte sich proportional zur Menge von VEGF, das im anfänglichen Schritt gebunden wird. Die optische Dichte jeder Vertiefung wurde innerhalb von 30 min mit einem Mikrotiterplatten-Lesegerät bestimmt, das auf 450 nm und eine Referenz-Wellenlänge bei 540 nm eingestellt war.
Die VEGF-Mengen wurden durch Zugabe der Cyclopentenon-Derivate in vitro gehemmt. Die prozentuale Reduktion der Hemmung von VEGF durch die Cyclopentenon-Derivate ist in der Tabelle 6 gezeigt. Tabelle 6 Prozentuale Reduktion der VEGF-Mengen in Endothelzellen (ECV304), behandelt mit Cyclopentenon-Derivaten in vitro

Verbindung Prozentuale Reduktion in VEGF

13 11,3 ± 2,4

20 2,0 ± 0,1

21 16,2 ± 3,4

48 23,7 ± 2,2

49 28,6 ± 1,9

39 21,9 ± 1,5

66 12,9 ± 2,9

74 16,9 ± 0,5
Eine PubMed-Suche des National Library of Medicine erfolgte zur Bestimmung der Relevanz der von uns verwendeten Zelllinien zur Bestimmung der Antikrebs-Aktivität der Peptide. HT29 (Human-Kolon) zeigte zwar 2021 "Treffer" bei der Suche in Bezug auf Krebs, andere von uns verwendete Human-Krebszelllinien zeigten jedoch auch viele Treffer (6848 für K562, 2532 für MOLT-4, 542 für DU145, 1063 für MCF-7, 542 für DU145 und 182 für PA-1). Dies zeigt klar die ausgiebige Verwendung dieser Zelllinien in der Krebsforschung. Es ist zudem eine übliche und Standard-Praxis und Norm zur Untersuchung von Molekülen auf Antikrebs-Aktivität in vitro an Human-Tumorzelllinien (Br. J. Cancer 2001, 18. Mai; 84(10): 1289–90 (Flasks, Fibres and Flanks – Preclinical tumor models for predicting clinical antitumor Activity). Die Autoren berichten, dass die in vitro-Aktivität gegen 6 oder mehr Lungen- oder Brustkrebs-Zelllinien eine Xenotransplantat-Aktivität gegen diese Tumortypen vorhersagt. In den Artikeln "Semin Oncol 1992, Dez.; 19(6): 622–38 (The National Cancer Institute: Cancer drug discovery and development program) und "Jpn J Antibiot 1977 Dez.; 30 Suppl: 35–40 (Antitumor screening procedures of the National Cancer Institute)" wird die ausgiebige Nutzung von Human-Tumorzelllinien zur Identifikation potentieller cytotoxischer Arzneistoffe beschrieben.
BEISPIEL 30
In vivo Anti-Tumor-Aktivität der Verbindung der Formel Nr. 49 an Mäusen mit Primärtumor (Kolon)-Xenotransplantat.
PTC-Tumor-Xenotransplantate wurden in athymischen Balb/c Mäusen durch subkutane Beimpfung einer einzelnen Zellsuspension von PTC-Zellen (15 × 10⁶ Zellen/100 μl) gezüchtet. Die tumortragenden Tiere wurden in zwei Gruppen von jeweils drei Tieren unterteilt, die jeweils eine Gruppe umfassen, die unbehandelte Kontrolltiere beinhalten. Die Behandlung mit der Verbindung der Formel Nr. 49 wurde begonnen, wenn die mit einem Messschieber gemessenen durchschnittlichen Tumor-Volumina zwischen 500 mm³ waren. Die Verbindung der Formel Nr. 49 wurde intravenös an die zugeordnete Gruppe der tumortragenden Tiere bei einer Dosis von 0,5 mg/100 μl einmal täglich verabreicht, und die Behandlung wurde für einen Zeitraum von 14 Tagen fortgesetzt.
Die Antitumor-Aktivität der Verbindung wurde durch Messen der Tumorvolumina an jedem vierten Tag mit der Formel W·W·L·0,4 (W = kleiner Durchmesser, L = großer Durchmesser) überwacht. Die prozentuale Hemmung des Tumorwachstums wurde mit der Formel (1 – Tumorvolumen-behandelt/Tumorvolumen-Kontrolle)·100 berechnet. Die 1 zeigt die Tumorkinetiken bis zum Tag 23 in den behandelten und unbehandelten Tieren. Die Verbindung der Formel Nr. 49 zeigte signifikante Antitumor-Aktivität an PTC-Xenotransplantaten. Die prozentuale Hemmung des Tumorwachstums, das durch die Verbindung der Formel Nr. 49 verursacht wurde, war verglichen mit den Kontrollen an Tag 23 gleich 45,8%.

Claims

Verbindung der Formel 1:
Derivate oder Salze davon, worin ist: X Sauerstoff, Hydroxyimino, Alkoxyimino, Aryloxyimino oder Arylimino; R Hydroxy, Oxo, Amino, Alkylamino, Alkylamino, Hydroxyimino, Alkoxyimino, Aryloxyimino, Alkylcarbonyloxy, Aroyloxy, Alkoxy, Methoxymethyloxy, 2-Methoxyethoxymethyloxy, tert.-Butyldimethylsilyloxy, Trimethylsilyloxy, Carbonsäure, Carboxylat-Salz oder Carbonsäureester; R₁, R₂ und R₄ bis R₁₀ gleich oder verschieden und zwar: Wasserstoff, Hydroxy, Alkyl, Alkoxy, Methoxymethyloxy, 2-Methoxyethoxymethyloxy, tert.-Butyldimethylsilyloxy, Trimethylsilyloxy, Chlor, Fluor, Brom, Mercapto, Alkylthio, Nitro, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Azido, Carboxyl, Carbalkoxy, Alkylcarbonyloxy, Carboxymethyloxy, NHCOCH₃, NHCOCF₃, NH-Alkyl, NH-Dialkyl, CN, Guanidin, NHCOOR₁₁, CH₂C=NR₁₂NR₁₃; NHNH₂, NHCONH₂, NHNHCONH₂, NHNHC(=S)NH₂ und ihre Salze; OPO₃H₂, OPO₃Na₂, OPO₃K₂, SO₂NH₂, CONH-Alkyl (vorzugsweise C₁-C₄), CHO, CH=NOH oder -(CH₂-CH₂-N[CH₃])-, die an die R₈- bzw R₉-Positionen kondensiert sind, oder Methylendioxygruppe, die statt der R₈,R₉- bzw. R₉,R₁₀-Position kondensiert ist, und im letzteren Fall ist R₈ Alkoxy und R₁₁, R₁₂ und R₁₃ sind ausgewählt aus C₁-C₄-Alkylgruppen; und R₃ gleich Alkoxy.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei das Cyclopentenon ein Cyclopent-2-en-1-on-Derivat ist.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei das Cyclopentenon ein Cyclopent-2-en-1-on-Derivat mit einem Rest R an der Position C-4 ist, dargestellt durch die Formel (1A).
Verbindung nach Anspruch 1, wobei das Cyclopentenon ein Cyclopent-2-en-1-on-Derivat mit einem Rest R an der Position C-5 ist, dargestellt durch die Formel (1B).
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (20)
und die 2-en-1-on-oxim ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (39)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-4-hydroxycyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (40)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-methoxymethyloxy-4-methoxyphenyl)-4-(tert.-butyldimethylsilyloxy)cyclopent-2-en-1-on-oxim ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (42)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-4-hydroxy-cyclopent-2-en-1-on-oxim ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (48)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)-5-hydroxy-cyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (49)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)-5-hydroxy-cyclopent-2-en-1-on-oxim ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (52)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)-5-(tert.-butyldimethyl-silyloxy)cyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (53)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)-5-acetoxy-cyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (54)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)-5-acetoxy-cyclopent-2-en-1-on-oxim ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (55)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(4-methylsulphanylphenyl)-5-(tert.-butyldimethylsilyloxy)cyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (56)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-isopropyloxy-4-methoxyphenyl)-5-(tert.-butyldimethylsilyloxy)cyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (59)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-isopropyloxy-4-methoxyphenyl)-5-acetoxycyclopent-2-en-1-on-acetoxylimin ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (60)
und die 2-(3-Amino-4-methoxyphenyl)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-5-hydroxycyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (63)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-chlor-4-methoxyphenyl)-5-hydroxycyclopent-2-en-1-on-oxim ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (64)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-fluor-4-methoxyphenyl)-5-hydroxycyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (65)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-fluor-4-methoxyphenyl)-5-acetoxycyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (66)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-fluor-4-methoxyphenyl)-5-hydroxycyclopent-2-en-1-on-oxim ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (67)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-chlor-4-methoxyphenyl)-5-hydroxycyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (70)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-chlor-4-methoxyphenyl)-5-acetoxycyclopent-2-en-1-on-oxim.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (71)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-5-acetoxycyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (72)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-acetamido-4-methoxyphenyl)-5-hydroxycyclopent-2-en-1-on ist.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (73)
und die 2-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)-3-(3-acetamido-4-methoxyphenyl)-5-hydroxycyclopent-2-en-1-on-oxim.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel (75)
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel 1A, worin R₁, R₅ und R₁₀ Wasserstoff sind, R₃ ist OMe und R, R₂, R₄, R₆, R₇, R₈, R₉ und X die folgenden Bedeutungen haben: R R2 R4 R6 R7 R8 R9 X OH OMe OMe H H OMe H O OH OMe OMe H Me OMe Me O OH OMe OMe OMe H H OMe O OTBS OMe OMe H H OMe H O OTBS OMe OMe H H H H O OTBS OMe OMe H Me OMe Me O OTBS OMe OMe OMe H H OMe O OAc OMe OMe H H OMe H O O OMe OMe H H OMe H O OH OMe OMe H H OMe H N-OH O OMe OMe H H OMe H N-OH N-OH OMe OMe H H OMe H N-OH OTBS OMe OMe H H OMe H N-OH OAc OMe OMe H H OMe H N-OH OTBS OMe OMe OMe H H OMe N-OH OTBS OMe OMe H COOMe OMe H O OTBS OMe OMe H OMe OMe H O OTBS H NO₂ H H OMe H O OAc OMe OMe H Me OMe Me O OAc OMe OMe H Me OMe Me N-OH OTBS OMe OMe H OMe OMe H N-OH OAc OMe OMe H OMe OMe H N-OH OH OMe OMe H OMe OMe H O OH OMe OMe OMe H OMe OMe N-OH OAc OMe OMe OMe H OMe OMe N-OH OAc OMe OMe OMe H H OMe O OTBS OMe OMe H OMOM OMe H O OH OMe OMe H OH OMe H O OTBS OMe OMe H OMOM OMe H N-OH OTBS OMe OMe H OH OMe H O OH OMe OMe H OH OMe H N-OH OH OMe OMe H OMOM OMe H O OAc OMe OMe H OMOM OMe H O OH OMe OMe H OMOM OMe H N-OH

worin OMOM für Methoxymethyloxy steht.
Verbindung nach Anspruch 1, der Formel 1B, worin R₁, R₅, R₆ und R₁₀ Wasserstoff sind, R₃ ist OMe und R, R₂, R₄, R₇, R₆, R₉ und X die folgenden Bedeutungen haben: R X R2 R4 R7 R8 R9 OH O NO₂ H OMe Ome OMe OH N-OH NO₂ H OMe Ome OMe OH O OMe OMe H Ome H OH N-OH OMe OMe H Ome H OH O OMe OMe OiPr Ome H OH N-OH OMe OMe OiPr Ome H OTBS O OMe OMe H Ome H OAc O OMe OMe H Ome H OAc N-OH OMe OMe H Ome H OTBS O OMe OMe H Sme H OTBS O OMe OMe OiPr Ome H OTBS N-OH OMe OMe OiPr Ome H OH N-OH OMe OMe OH Ome H OAc NOAc OMe OMe OiPr Ome H OH O NH₂ H OMe Ome OMe OTBS O NO₂ H OMe Ome OMe OH N-OH OMe OMe H Sme H OH N-OH OMe OMe Cl Ome H OH O OMe OMe F Ome H OAc O OMe OMe F Ome H OH N-OH OMe OMe F Ome H OH O OMe OMe Cl Ome H OAc O OMe OMe OiPr Ome H OAc O OMe OMe Cl Ome H OAc N-OH OMe OMe Cl Ome H OAc O OMe OMe OH Ome H OH O OMe OMe NHAc Ome H OH N-OH OMe OMe NHAc Ome H OH O OMe OMe OH Ome H OH O OMe OMe OCH₂CO₂Na Ome H

worin OiPr für Isopropyloxy steht.
Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 29 und ein Additiv, ein Verdünnungsmittel, einen Exzipient, ein Lösungsmittel, ein Bindemittel, einen Füllstoff, ein Sprengmittel, einen Stabilisator oder einen Träger, welche jeweils pharmazeutisch verträglich sind.
Zusammensetzung nach Anspruch 30, welche 0,1 bis 10 g pro Einheitsdosis der Verbindung der Formel 1, ihres Salzes oder Derivates bereitstellt.
Zusammensetzung nach Anspruch 30, in der Form einer Tablette, einer Pastille, einer Kapsel, eines Pulvers, einer wässrigen oder öligen Suspension, eines Sirups, eines Elixirs, eines Implantates oder einer wässrigen Lösung.
Verbindung der Formel (1) nach einem der Ansprüche 1 bis 29 zur Verwendung bei der Behandlung eines Patienten mit einem Kolon-, Pankreas-, Larynx-, Ovar-, Duodenum-, Nieren-, Mundhöhlen-, Prostata-, Lungen- oder Endothelzellen-Karzinom oder Leukämie.
Verbindung zur Verwendung nach Anspruch 33, wobei der Patient ein Mensch, ein Säugetier oder anderes Tier ist.
Verbindung zur Verwendung nach Anspruch 33, wobei die Dosierung für Menschen im Bereich von 1 mg/kg Körpergewicht bis 300 mg/kg Körpergewicht ist.
Verbindung zur Verwendung nach Anspruch 33, wobei die Verbindung dem Patient systemisch verabreicht wird.
Verbindung der Formel (1) nach einem der Ansprüche 1 bis 29 zur Verwendung in einem Verfahren zum Hemmen des Wachstums von Tubulin in einem Patient.
Verbindung der Formel (1) nach einem der Ansprüche 1 bis 29 zur Verwendung in einem Verfahren zum Induzieren von Caspase-3 in einem Patient.
Verbindung der Formel (1) nach einem der Ansprüche 1 bis 29 zur Verwendung in einem Verfahren zum Verringern der VEGF-Spiegel in einem Patient.