DE60223828T2

DE60223828T2 - Spermizide

Info

Publication number: DE60223828T2
Application number: DE60223828T
Authority: DE
Inventors: Suren Solanki; William Duncan Potter; Lorraine Anderson
Original assignee: LRC Products Ltd
Current assignee: LRC Products Ltd
Priority date: 2001-10-25
Filing date: 2002-10-24
Publication date: 2008-10-30
Anticipated expiration: 2022-10-25
Also published as: US20050131238A1; EP1438041B1; WO2003035059A3; WO2003035059A2; ES2292810T3; DE60223828D1; GB0125659D0; EP1438041A2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Maleimid-Derivaten, wie sie in den Ansprüchen spezifiziert sind, als spermizide Mittel. Insbesondere betrifft sie die Verwendung von Maleimid-Derivaten als Kontaktspermizid. Die Erfindung stellt ferner neue Verbindungen und deren Anwendung in der Medizin bereit. Die Erfindung betrifft ferner Spermizid-Formulierungen mit Maleimid-Derivaten.
Spermizide sind chemische Produkte, welche Sperma inaktivieren oder abtöten. Zur Anwendung werden sie üblicherweise vor dem Geschlechtsverkehr äußerlich auf die Vagina aufgebracht. Die Spermizide werden als eine angenehme Form der Schwangerschaftsverhütung angesehen, da sie weit verbreitet ohne Rezept verfügbar sind und selbst verabreicht werden können. Im Gegensatz zu der Anti-Baby-Pille müssen Spermizide nicht auf einer regelmäßigen Basis eingenommen werden, sondern lediglich vor dem Geschlechtsverkehr, ihr Effekt ist temporär und sie haben keine hormonellen Nebenwirkungen. Spermizide können alleine verwendet werden, werden aber oftmals in Kombination mit Barriereverfahren zur Schwangerschaftsverhütung verwendet.
Augenblicklich verfügbare Spermizide umfassen Nonoxynol-9, Octoxynol-9, Menfegol und Benzalkoniumchlorid, welche alle als Detergent-Spermizide klassifiziert sind. Es wurde angedeutet, dass Spermizide vom Detergent-Typ Läsionen der Vagina und der Gebärmutterhalsepithel bewirken.
Maleimide sind eine bekannte Klasse chemischer Verbindungen. Bei Maleimid-Derivaten ist es bekannt, dass sie eine breite Vielzahl von Anwendungen aufweisen, und Anwendung sowohl auf biologischem und medizinischem Gebiet als auch eine allgemeine industrielle Anwendung, beispielsweise in der Herstellung von Polymeren und Farben, finden.
So beschreibt beispielsweise das US-Patent Nr. 3,129,225 (United States Vitamin and Pharmaceutical Corporation) Maleimid-Betaine, von denen behauptet wird, dass sie eine anti mikrobielle und anti-parasitäre Aktivität sowie eine pharmakologische Aktivität, insbesondere die Vermindung von Serumcholesterin, aufweisen.
Das deutsche Patent 1,140,192 (United States Rubber Company) beschreibt ein neues Bismaleimid mit einer CH₂-O-CH₂-Brücke und seine Verwendung bei der Vulkanisierung, der Vernetzung von Polymeren und als Fungizid für Tomaten.
US-Patent 4,876,358 (Texaco Inc.) beschreibt neue Bismaleimide mit einer (Poly)oxyethylen-Brücke zur Verwendung bei der Herstellung von Polymeren.
US-Patent 5,552,396 und WO 97/19080 (Eli Lilly) beschreiben Klassen von N,N-überbrückten Bisindolylmaleimiden, von welchem behauptet wird, Inhibitoren für Protein-Kinease-C zu sein, und welche bei der Behandlung von Diabetes, Ischämie, Entzündungen, Störungen des zentralen Nervensystems, Herz-Gefäß-Erkrankungen, dermatologische Erkrankungen und Krebs hilfreich sind.
US-Patent 5,380,764 (Goedecke AG) beschreibt Bis-Indolmaleimide, von denen gesagt wird, dass sie Protein-Kinease-C-Inhibitoren sind, die zur Behandlung von Erkrankungen des Herzens oder der Blutgefäße, Entzündungsprozessen, Allergien, Krebs und einer degenerativen Beschädigung des zentralen Nervensystems, Erkrankungen des Immunsystems und Virus-Erkrankungen, einschließlich Erkrankungen, die von den Retroviren HTLV-I, -II, -III verursacht werden, verwendbar sind.
WO 96/09406 (The Government of the United States of America, vertreten durch den Sekretär des Department of Health and Human Services) beschreibt die Verwendung von Disulfiden, Maleiniden und einer Vielzahl von anderen Elektronen-Akzeptor-Verbindungen zum Inaktivieren von HIV-1 und anderen Retroviren.
Igarashi et al., J. Industrial Microbiology, 6 (1990), Seiten 223-225, berichtet, dass verschiedene N-Alkylmaleimide antibakterielle und antifungizide Aktivitäten zeigen.
Reges et al., Archives of Andrology, 7, (1981), Seiten 159-168, beschreibt die Verwendung von N-(4-Carboxy-3-hydroxyphenyl)-Maleimid (CPhM) zum Vermindern der Fertili tätskapazität von Sperma. Eine Inkubation mit einer 10 mM-CPhM-Lösung für 10 Minuten resultiert darin, dass sich die Fertilitätskapazität von Sperma von 80% auf 17% vermindert. Eine Exposition von 10 Minuten ist außerhalb einer klinisch relevanten Zeitskala für ein Spermizid, d. h. zwischen 20 und 40 Sekunden nach der Hinzufügung eines mutmaßlichen Spermizids (Sander FV und Cramer: A practical method for testing the spermicidal action of chemical contraceptives, Hum. Fertil., 1941, 6, 134-153 und Kleinman RL in "IPPF Medical Handbook" zweite Ausgabe, London, 1964, International Planned Parenthood Federation).
Mammoto et al., Journal of Experimental Zoology, 278 (1997), Seiten 178-188, beschreibt die Wirkungen von Sulfhydryl(SH)-erschöpfenden Mitteln bei einer Sperma-Ei-Fusion einer Maus. Die untersuchten SH-vermindernden Mittel waren N-Ethyl-Maleimid, Na₂S₄O₆ und 5,5'-Dithiobis(2-Nitro-Benzoesäure).
Reges et al., Excerpta Med. Int. Congr. Ser. (1976), 370 (Recent Adv. Hum. Reprod., Proc. Int. Congr. 1^st, 1974), Seiten 322-324, beschreibt die Inhibition der Kapazitation und der Fertilitätskapazität von Kaninchen-Spermatozoon durch Blockieren von Membran-Sulfhydryl-Gruppen unter Verwendung des Mittels N-4-Carboxy-3-hydroxyphenylmaleimid (CPhM).
Es gibt daher ein fortbestehendes Bedürfnis nach Spermizid-Verbindungen, welche schnell und effizient beim Inaktivieren oder Abtöten von Sperma wirken.
Wir haben nun überraschenderweise gefunden, dass erfindungsgemäße Maleimid-Derivate die menschliche Spermamotilität vermindern. Die Verbindungen sind daher nützlich als Spermizide. Ferner suggerieren Ergebnisse von Zell-Cytotoxizitäts-Assays, dass die Verbindungen keinen signifikanten Schaden an der Vaginal- und Gebärmutterhalsepithel verursachen.
Bei einem ersten Aspekt der vorliegenden Erfindung wird daher die Verwendung einer Maleimid-Verbindung der allgemeinen Formel (III) für die Herstellung einer Zusammensetzung zur Verwendung bei einem Verfahren der Schwangerschaftsverhütung bereitgestellt
wobei A repräsentiert wird durch (R¹)_n-(R²)_p-(R³)_q, wobei R¹, R² und R³ unabhängig voneinander ausgewählt sind aus:
einer acyclischen aliphatischen Gruppe mit 1, oder 3 bis 20 Kohlenstoffatomen;
einer Polyalkylenglykol-Gruppe mit einem durchschnittlichen Molekulargewicht in dem Bereich von 100 bis 1000;
einer cyclischen aliphatischen Gruppe mit 4 bis 20 Kohlenstoffatomen;
einer monocyclischen oder polycyclischen aromatischen Kohlenwasserstoff-Gruppe mit 6 bis 18 Ring-Kohlenstoffatomen;
einer nicht-aromatischen heterocyclischen Gruppe mit 3 bis 8 Ring-Atomen oder
einer monocyclischen oder polycyclischen aromatischen heterocyclischen Gurppe mit 5 bis 20 Ring-Atomen;
und n, p und q jeweils 0 oder 1 darstellen, so dass die Summe von n + p + q = 1 bis 3 ist,
A¹, welches A entsprechen kann oder unterschiedlich sein kann, eine Gruppe (R¹)_n-(R²)_p-(R³)_q repräsentiert, wobei R¹, R², R³, n, p und q den oben Definierten entsprechen,
x 0 oder 1 und y 1 bis 6 ist.
Bei den Verbindungen gemäß der obigen Formel (III) kann es sich bei einer acyclischen aliphatischen Gruppe bzw. einem acyclischen aliphatischen Teil um ein verzweigtes oder unverzweigtes Alkyl, wobei die Alkyl-Gruppe optional von einem oder mehreren Sauerstoffatomen unterbrochen sein kann, C_2-20-Alkenyl oder C_2-20Alkynyl handeln, wobei jede von diesen optional mit einem oder mehreren Substitueten ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Cyano, Nitro, -C(O)R⁴, -CO₂R⁴, -OR⁴, -SR⁴, -SOR⁴, -SO₂R⁴, -NR⁴R⁵, -C(O)NR⁴R⁵ substituiert sein kann, wobei R⁴ und R⁵ unabhängig voneinander Wasserstoff, C_1-8-Alkyl, Aryl oder Aryl-C_1-8-Alkyl darstellen.
Für die Zwecke der vorliegenden Erfindung können Alkyl-Gruppen 1 oder 3 bis 20 Kohlenstoffatome, vorzugsweise zwischen 1 oder 3 bis 15 Kohlenstoffatome und insbesondere zwischen 1 oder 3 bis 10 Kohlenstoffatome aufweisen. Alkenyl-Gruppen können zwischen 2 bis 20 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 2 bis 15 Kohlenstoffatome und insbesondere 2 bis 10 Kohlenstoffatome aufweisen. Alkynyl-Gruppen können zwischen 2 bis 20 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 2 bis 15 Kohlenstoffatome und insbesondere 2 bis 10 Kohlenstoffatome aufweisen.
Eine Polyalkylenglykol-Gruppe kann ein Polyethylenglykol (PEG) oder ein Polypropylenglykol sein, welches durch die Formel -(OCH₂CH₂)_mOH oder -(OCH₂CH₂CH₂)_mOH repräsentiert werden kann, wobei m in dem Bereich von 4 bis 20 liegt. Es sei angemerkt, dass Polyalkylenglykole im Allgemeinen eine Mischung von Kettenlängen sind, und sie daher üblicherweise in Begriffen wie mittlere relative Molekülmasse und Mittelwert von m beschrieben werden. Beispielsweise hat PEG 200 eine Molekühlmasse in dem Bereich von 190–210 und einen Mittelwert von m = 4 (The Merck Index, elfte Ausgabe).
Aryl ist Phenyl, optional substituiert mit einem oder mehreren Substituenten gewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Cyano, Nitro, -C(O)R⁶, -CO₂R⁶, -OR⁶, -SR⁶, -SOR⁶, -SO₂R⁶, -NR⁶R⁷, -C(O)NR⁶R⁷, wobei R⁶ und R⁷ unabhängig voneinander Wasserstoff oder ein C_1-8-Alkyl darstellen.
Eine cyclische aliphatische Gruppe oder ein cyclischer aliphatischer Teil kann ein Cycloalkyl oder ein Cycloalkenyl sein, von denen jedes optional mit einem oder mehreren Substituenten substituiert sein kann, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Cyano, Nitro, -C(O)R⁴, -CO₂R⁴, -OR⁴, -SR⁴, -SOR⁴, -SO₂R⁴, -NR⁴R⁵, -C(O)NR⁴R⁵, wobei R⁴ und R⁵ wie oben definiert sind.
Cycloalkyl-Gruppen der vorliegenden Erfindung können 3 bis 20 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 3 bis 10 Kohlenstoffatome und am bevorzugsten 3 bis 6 Kohlenstoffatome aufweisen. Cycloalkenyl-Gruppen der vorliegenden Erfindung können 3 bis 20 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 3 bis 10 Kohlenstoffatome und am bevorzugsten 3 bis 6 Kohlenstoffatome aufweisen.
Aromatische Kohlenwasserstoffgruppen und aromatische Kohlenwasserstoffteile umfassen beispielsweise optional substituierte ungesättigte monocyclische, kondensierte bicyclische oder tricyclische Ringe mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen, wie beispielsweise Phenyl und Naphtyl, und insbesondere gesättigte bicyclische oder tricyclische Ringe, wie beispielsweise Tetrahydro-Naphtyl. Aromatische Gruppen umfassen ebenfalls verknüpfte aromatische Ringe, wie beispielsweise eine Biphenyl-Gruppe. Die aromatischen Ringe können durch Heteroatome, beispielsweise O, S oder NR⁴, verknüpft sein. Beispiele von Substituenten, die an einer aromatischen Gruppe oder einem aromatischen Teil vorhanden sein können, umfassen ein oder mehrere Halogene, Alkyl, Haloalkyl, Cyano, Nitro, -C(O)R⁴, -CO₂R⁴, -OR⁴, -SR⁴, -SOR⁴, -SO₂R⁴, -NR⁴R⁵ oder -C(O)NR⁴R⁵. Substituenten an dem aromatischen Ring befinden sich vorzugsweise in der Ortho- oder Para-Stellung bezüglich der Maleimid-Gruppe.
Eine aromatische heterocyclische Gruppe oder ein aromatischer heterocyclischer Teil kann ungesättigt oder teilweise gesättigt sein, wie beispielsweise ein optional substituierter heterocyclischer aromatischer Ring mit 5 oder 6 Atomen, welcher 1 bis 4 Heteroatome, ausgewählt aus O, N und S, umfassen kann. Die heterocyclischen Ringe können optional mit einem oder mehreren Phenyl-Ringen kondensiert sein. Beispiele von Heteroaryl-Gruppen umfassen somit Furyl, Thienyl, Pyrrolyl, Oxazolyl, Oxazinyl, Thiazolyl, Imidazolyl, Oxadiazolyl, Thiadiazolyl, Pyridyl, Triazolyl, Triazinyl, Pyridazyl, Pyrimidinyl, Pyrazolyl, Indolyl, Indazolyl, Benzofuranyl, Benzothienyl, Benzimidazolyl, Benzoxazolyl, Benzoxazinyl, Chinoxalinyl, Chinolinyl, Chinazolinyl, Cinnolinyl, Benzothiazolyl, Pyridopyrrolyl. Beispiele von Substituenten, welche an einer heterocyclischen aromatischen Gruppe gegeben sein können, umfassen ein oder mehrere Halogen, Oxo, Nitro, Cyano, Alkyl, Haloalkyl, -C(O)R⁴, -CO₂R⁴, -OR⁴, -SR⁴, -SOR⁴, -SO₂R⁴, -NR⁴R⁵ oder -C(O)NR⁴R⁵, wobei R⁴ und R⁵ wie oben definiert sind. Teilweise gesättigte Derivate der zuvor genannten Heteroaryl-Gruppen umfassen 3-Pyrrolin und 1,2-Dihydrochinolin.
Nicht-aromatische heterocyclische Gruppe umfassen Pyrrolidinyl, Tetrahydrofuryl, Tetrahydrothienyl und Piperidinyl.
Bei Verbindungen der Formel (III), bei denen x gleich 1 ist, ist es bevorzugt, dass die Gesamtzahl der Atome in dem Teil A und A¹ 50 nicht überschreitet.
Eine bevorzugte Verbindungsklasse zur erfindungsgemäßen Verwendung ist die der Bismaleimid-Derivate, dargestellt durch Formel (IV):
wobei A, A¹ und x wie oben definiert sind.
Bei den Verbindungen gemäß Formel (IV) ist x vorzugsweise 0 und A ist wie oben definiert.
Bei der Gruppe A sind R¹, R², R³, n, p und q vorzugsweise derart ausgewählt, dass A
eine C_1-8-Alkyl-Gruppe, optional mit einem Sauerstoffatom unterbrochen;
eine Polyalkylenglykol-Gruppe mit einem durchschnittlichen Molekular-Gewicht in dem Bereich von 100 bis 1000; oder
eine Phenyl-Gruppe; oder
n und q sind vorzugsweise 1, p ist 0 oder 1, R¹ und R³ stellen vorzugsweise jeweils eine Phenyl-Gruppe dar, und wenn p gleich 1 ist, stellt R² vorzugsweise eine C_1-8-Alkyl-Gruppe dar, welche optional durch ein Sauerstoffatom unterbrochen ist; oder
eine Polyalkylenglykol-Gruppe mit einem durchschnittlichen Molekular-Gewicht im Bereich von 100 bis 1000 darstellt.
Wenn A ein Phenyl darstellt, sind die Maleimido-Teile vorzugsweise in der Para-Stellung relativ zueinander. Wenn A ein Biphenyl darstellt, sind die Bindungen zwischen den Maleimido- und Phenyl-Gruppen und die Bindung zwischen den zwei Phenyl-Gruppen ebenfalls vorzugsweise in den Para-Stellungen.
Maleimid-Derivate zur erfindungsgemäßen Verwendung sind kommerziell verfügbar und können gemäß bekannten Verfahren hergestellt werden.
Ein Maleimid-Derivat zur erfindungsgemäßen Verwendung kann als der einzige aktive Bestandteil verabreicht werden, oder kann in Kombination mit einem oder mehreren anderen Maleimid-Derivaten, wie hier definiert, und/oder in Kombination mit einem oder mehreren anderen therapeutischen Mitteln verabreicht werden. In diesem Kontext bedeutet "in Kombination", dass die Verbindungen gleichzeitig oder aufeinanderfolgend verabreicht werden können, und dass ein Zeitintervall zwischen der Verabreichung der zwei oder mehr Verbindungen liegen kann. Therapeutische Mittel, welche in Kombination mit einem oder mehreren Maleimid-Derivaten verabreicht werden können, umfassen anti-bakterielle, pilztötende und antivirale Mittel.
Zur Verwendung als Spermizide können die Maleimid-Derivate zur Verabreichung an den Fortpflanzungstrakt unter Verwendung üblicher bekannter Verfahren formuliert werden. Somit können sie beispielsweise als Cremes, Gele, einschließlich thermoreversible Gele, Gleitmittel, Pessars, Schaumtabletten, Aerosolschäume, Sprays, Spülung oder Filme formuliert werden. Die Verbindungen können in nachhaltig wirkenden Formulierungen, beispielsweise durch Mikro-Verkapselung, Formulierungen mit einem bio-anhaftendem Material, wie beispielsweise Poly-Carbophil, oder anderen üblichen Mitteln umfasst sein. Gele, Cremes und Pessars können gemäß den Umständen mit einem entsprechenden Aufbringungsmittel verabreicht werden. Die Formulierungen, insbesondere Gels, Cremes und Pessars können mit einem entsprechenden Aufbringmittel zum Vereinfachen der Verabreichung verpackt sein.
Spermizide-Zubereitungen können ferner in empfängnisverhütenden Einrichtungen umfasst sein. So können sie beispielswei se in Vaginal-, Zervikal-, oder Uterus-Einrichtungen, wie beispielsweise Vaginal-Schwämmen oder -Ringen, und Diaphragmas verwendet werden, oder zum Lubrizieren und/oder Beschichten von Kondomen verwendet werden. Auf diese Weise verwendete Spermizide-Zubereitungen können zur sofortigen und/oder nachhaltig wirksamen Freisetzung der aktiven Verbindung bzw. Verbindungen formuliert werden, so dass eine gesteuerte Freisetzung über eine Zeitperiode bereitgestellt ist.
Zur Verwendung als Spermizid gemäß der vorliegenden Erfindung kann ein Maleimid-Derivat mit einer Dosierung in dem Bereich von 10–1000 mg, beispielsweise 30 bis 1000 mg, verabreicht werden.
Ein zweiter Aspekt der Erfindung stellt eine Verbindung gemäß Formel (V) bereit
wobei R²⁰ ein Aryl ist;
R²¹ -(OCH₂CH₂)_n- ist, wobei n 15 ist;
R²² eine O-R²³-Gruppe ist, wobei R²³ ein Aryl ist; oder
R²¹ -(OCH₂CH₂)_n ist, wobei n 3 bis 15, vorzugsweise 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 oder 13 ist;
R²² eine O-R²³-Gruppe ist, wobei R²³ ein C_1-4-Alkyl, vorzugsweise ein C_1-4-Alkyl und besonders bevorzugt Methyl ist;
wobei die Aryl- oder Alkyl-Gruppe optional substituiert ist mit
Bevorzugte Verbindungen für eine Verwendung in der Medizin sind in der nachfolgenden Tabelle aufgeführt.
Der zweite Aspekt der Erfindung betrifft auch Salze, Ester oder Amide der Verbindungen gemäß Formel V.
Die Verbindungen gemäß dem zweiten Aspekt können gemäß bekannten Verfahren synthetisiert werden. Insbesondere wird ein PEG mit entsprechender Kettenlänge zunächst unter Verwendung üblicher chemischer Synthesen in das Aminoaryl-Derivat überführt. Ein Beispiel einer solchen chemischen Synthese umfasst die Kopplung von PEG mit p-Fluornitrobenzen in der Gegenwart von Natriumhydrid und DMF zum Herstellen eines nitrosubstituierten Aryl-PEG-Teils. Die nitro-substituierte Aryl-PEG-Einheit wird dann mit einem Reduktionsmittel, wie beispielsweise Palladium/Kohlenstoff, zum Ausbilden der erforderlichen Amin-Verbindung reduziert. Die Amin-Verbindung kann dann mit einer Anzahl von bekannten Verfahren in die Maleimid-Verbindung gemäß Formel V umgewandelt werden. Ein Beispiel eines solchen Verfahrens umfasst ein Umsetzen des Amins mit Maleinsäureanhydrid.
Der dritte Aspekt der Erfindung stellt eine Verbindung gemäß Formel V wie oben definiert zur Verwendung als Spermizid bereit.
Sämtliche bevorzugten Merkmale der unterschiedlichen Aspekte der Erfindung sind mutatis mutanalis zueinander anwendbar.
Die Erfindung wird anhand der folgenden Beispiele näher veranschaulicht:
Beispiele
Biologische Tests
Methoden
1. Bestimmung der menschlichen Spermamotilität (Spermizid-Wirksamkeit)
Die Anzahl der beweglichen Spermien (%) wird rasch (innerhalb von 30 Sekunden) nach der Aussetzung gegenüber verschiedenen Konzentrationen des Spermizids unter Verwendung einer manuellen Mikroskopie bestimmt. Unter Verwendung einer nichtlinearen Regressions-Analyse werden Motilitätsdaten anhand dieser Screens zum Erzeugen von Konzentrationskurven und anschließend einem ED₅₀-Wert unter Verwendung von GraphPad Prism-Software (San Diego, CA, USA) verwendet. Der ED₅₀-Wert ist die Konzentration des Spermizids, welche eine 50%ige Hemmung der Spermienmotilität verglichen mit einer Kontrollgruppe erzeugt.
2. Bestimmung von Zell-Cytotoxizität (MTT-Zellenlebensfähigkeits-Assay)
Die Wirkung von Verbindungen auf die Vaginalzellenlebensfähigkeit wird unter Verwendung des MTT-Assays bestimmt. MTT ist ein Tetrazolium-Salz, welches von lebenden Zellen in ein unlösliches Tetrazoliym-Salz umgewandelt wird. Diese Farbveränderung wird durch Spektrophotometrie gemessen. Die Daten werden dann einer nicht-linearen Regressionsanalyse zum Erzeugen von Konzentrationskurven und nachfolgend von EC₅₀-Wert-Kurven unter Verwendung der GraphPad Prism-Software (San Diego, CA, USA) unterzogen. Der EC₅₀-Wert ist die Konzentration des Spermizids, welche die Zellenlebensfähigkeit, verglichen mit einer Kontrollgruppe, um 50% hemmt.
3. Bestimmung des therapeutischen Index
Der therapeutische Index ist das Verhältnis der Zell-Cytotoxizität EC₅₀-Bezuggröße zu der Spermizidwirksamkeit ED₅₀-Bezuggröße und wird unter Verwendung der bei den obigen Methoden 1 und 2 erhaltenen Daten unter Verwendung der folgenden Formel bestimmt:
Test-Verbindungen
Die folgenden erfindungsgemäßen Verbindungen wurden gemäß den oberen Methoden getestet.
Verbindungen 1 und 5 wurden von Sigma-Aldrich Corp. erhalten, die Verbindungen 2 und 10 von Tokyo Chemical Industry UK, die Verbindungen 3, 6, 7, 8 und 9 von Maybridge plc, Verbindung 4 von Wako Pure Chemicals Industries, Ltd., Verbindung 11 von Sigma-Aldrich library of rare chemicals und Verbindung 12 von Molecular Biosciences.
Ergebnisse
1. Wirkung der Verbindungen auf die menschliche Spermamotilität

Tabelle 1

Verbindung	Hemmung der menschlichen Spermamotilität (ED₅₀ μM)
1	32 (± 5) n = 3
2	26 (± 7) n = 3
3	77 (± 10) n = 3
4	31 (± 3,5) n = 8
5	294 (± 24) n = 6
6	26 (± 1) n = 3
⁷	43 (± 3) n = 3
8	79 (± 16) n = 3
9	56 (± 7) n = 3
10	4 (± 0,5) n = 3
11	1,4 (± 0,5) n = 4
12	10,5 (± 3,5) n = 3
13	4,6 (± 1,03) n = 4
14	149 (± 19) n = 4
15	5 n = 2
16	34,4 (± 7,2) n = 3

Tabelle 1. Wirkung von Maleimiden auf die menschliche Spermamotilität. Die Spermamotilität wurde unter Verwendung einer manuellen Mikroskopie bestimmt. Die Konzentration jeder Verbindung, die zum Hemmen der Spermamotilität (ED₅₀) um 50% erforderlich ist, wurde aus dem Logarithmus der Konzentrationskurven unter Verwendung einer nicht-linearen Regressionsanalyse bestimmt. Die Anzahl von Experimenten ist angegeben als ± SEM.
2. Wirkung der Verbindungen auf die Zell-Cytotoxizität

Tabelle 2

Verbindung	Hemmung ME 180 Zellen-Lebensfähigkeit (EC₅₀ μM)
1	370 (± 60) n = 3
2	600 (± 101) n = 3
3	363 (± 119,5) n = 3
4	268 (± 126) n = 7
5	114 (± 41) n = 3
6	88 (± 28) n = 4
7	410 (± 85) n = 4
8	858 (± 142) n = 3
9	143 (± 25) n = 3
10	516 (± 106) n = 3
11	> 30 (±) n = 3
12	333 (± 146) n = 4
13	125 (± 23) n = 3
14	285 (± 75) n = 3
15	153 n = 2
16	1890 (± 1220) n = 5

Tabelle 2. Wirkung von Maleimiden auf ME180-Zellen-Lebensfähigkeit. ME180-Zellen-Lebensfähigkeit wurde unter Verwendung des MTT-Assays bestimmt. Die Konzentration jeder Verbindung, die für eine Hemmung der ME180-Zellen-Lebensfähigkeit (EC₅₀) um 50% notwendig war, wurde anhand der logarithmischen Konzentrationskurven unter Verwendung einer nicht-linearen Regressionsanalyse berechnet. Die Anzahl der Experimente ist angegeben als ± SEM.
3. Therapeutischer Index
Tabelle 3

Verbindung TI

1 12

2 23

3 5

4 -

5 0,4

6 3

7 10

8 11

9 2,6

10 129

11 > 21

12 32

13 27

14 2

15 31

16 55
Übliche gegenwärtig verwendete Spermizide weisen üblicherweise therapeutische Indizes von 1 oder weniger auf.

Claims

Die Verwendung einer Maleimid-Verbindung gemäß Formel (III):
wobei A repräsentiert wird durch (R¹)_n-(R²)_p-(R³)_q, wobei R¹, R² und R³ unabhängig voneinander ausgewählt sind aus: einer acyclischen aliphatischen Gruppe mit 1, oder 3 bis 20 Kohlenstoffatomen; einer Polyalkylenglykol-Gruppe mit einem durchschnittlichen Molekulargewicht in dem Bereich von 100 bis 1000; einer cyclischen aliphatischen Gruppe mit 4 bis 20 Kohlenstoffatomen; einer monocyclischen oder polycyclischen aromatischen Kohlenwasserstoff-Gruppe mit 6 bis 18 Ring-Kohlenstoffatomen; einer nicht-aromatischen heterocyclischen Gruppe mit 3 bis 8 Ring-Atomen oder einer monocyclischen oder polycyclischen aromatischen heterocyclischen Gurppe mit 5 bis 20 Ring-Atomen; und n, p und q jeweils 0 oder 1 darstellen, so dass die Summe von n + p + q = 1–3 ist, A¹, welches A entsprechen kann oder unterschiedlich sein kann, eine Gruppe (R¹)_n-(R²)_p-(R³)_q repräsentiert, wobei R¹, R², R³, n, p und q den oben Definierten entsprechen, x 0 oder 1 und y 1 bis 6 ist; für die Zubereitung einer Zusammensetzung für die Verwendung bei einem Kontrazeptionsverfahren.
Die Verwendung nach Anspruch 1, wobei die Maleimid-Verbindung die Formel (IV) aufweist:
wobei A, A¹ und x entsprechend Anspruch 1 definiert sind.
Eine Verbindung gemäß Formel V oder ein Salz, ein Ester oder ein Amid davon,
wobei R²⁰ ein Aryl ist; R²¹ -(OCH₂CH₂)_n- ist, wobei n 15 ist; R²² eine O-R²³-Gruppe ist, wobei R²³ ein Aryl ist; oder R²¹ -(OCH₂CH₂)_n ist, wobei n 3 bis 15 ist; R²² eine O-R²³-Gruppe ist, wobei R²³ ein C_1-10-Alkyl ist, wobei die Aryl- oder Alkyl-Gruppe optional substituiert ist mit
Eine Verbindung nach Anspruch 3, ausgewählt aus
Eine Verbindung gemäß Formel V oder ein Salz, ein Ester oder ein Amid davon,
wobei R²⁰ ein Aryl ist, R²¹ -(OCH₂CH₂)_n- ist, wobei n 3 bis 15 ist, R²² eine O-R²³-Gruppe ist, wobei R²³ ein Aryl oder ein C_1-10-Alkyl ist, wobei die Aryl- oder Alkyl-Gruppe optional substituiert ist mit
für die Verwendung in der Medizin.
Ein Verbindung ausgewählt aus
für die Verwendung in der Medizin.
Ein Verbindung nach Anspruch 3 oder 4 für die Verwendung als Spermizid.