DE60209122T2

DE60209122T2 - Bernsteinsäurederivate

Info

Publication number: DE60209122T2
Application number: DE60209122T
Authority: DE
Inventors: Thomas RÖLLE; Thomas Lehmann; Markus Albers; Gerhard Müller; Gerhard Hessler; Rüdiger Fischer; Masaomi Soraku-gun TAJIMI; Karl Ziegelbauer; Kevin Kobe BACON; Haruki Ann Arbor HASEGAWA; Hiromi Souraku-gun OKIGAMI
Original assignee: Bayer Healthcare AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 2001-07-06
Filing date: 2002-06-24
Publication date: 2006-08-03
Anticipated expiration: 2022-06-25
Also published as: EP1406865A2; ES2258636T3; EP1406865B1; GB0116577D0; ATE317380T1; WO2003004460A2; PT1406865E; DK1406865T3; GB2377933A; WO2003004460A3; US20040254157A1; US7064229B2; DE60209122D1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der Formel (I):
deren Herstellung und Verwendung als pharmazeutische Zusammensetzungen als Integrin-Antagonisten, besonders als α₄β₁- und/oder α₄β₇- und/oder α₄β₁-Integrin-Antagonisten und insbesondere zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen, die sich zur Inhibierung oder Vorbeugung von Zelladhäsions- und Zelladhäsion-mediierten Störungen bzw. Krankheiten eignen.
Adhäsive Wechselwirkungen zwischen Leukozyten und Endothelialzellen spielen eine entscheidende Rolle beim Ablaufweg der Leukozyten zu Entzündungsstellen. Diese Abläufe sind wesentlich für eine normale Wirtsabwehr gegen Pathogene und zur Reparatur von Gewebeschäden, sie können aber auch zur Pathologie einer Vielfalt von Entzündungs- und Autoimmunstörungen beitragen. Tatsächlich ist eine Eosinophil- und T-Zellinfiltration in das Gewebe als Kardinalmerkmal allergischer Entzündungen wie von Asthma bekannt.
Die Wechselwirkung zirkulierender Leukozyten mit Adhäsionsmolekülen auf der Luminaloberfläche von Blutgefäßen scheint den Wanderweg der Leukozyten zu modulieren. Diese Gefäß-Zelladhäsionsmoleküle halten zirkulierende Leukozyten auf, um dadurch als erste Stufe zur Erfassung an infizierten oder entzündeten Gewebestellen zu dienen. Anschließend treten die Leukozyten, die den extravaskulären Raum erreichen, in Wechselwirkung mit Bindegewebezellen wie mit Fibroblasten sowie mit extrazellulären Matrixproteinen wie mit Fibronektin, Laminin und mit Kollagen. Adhäsionsmoleküle auf den Leukozyten und auf dem Gefäßendothelium sind somit wesentlich für die Leukozytwanderung und stellen attraktive therapeutische Zielpunkte für einen Eingriff in viele Entzündungskrankheiten dar.
Die Leukozyt-Erfassung an Entzündungsstellen tritt stufenweise auf und beginnt mit der Anbindung der Leukozyten an die Endothelialzellen, die die Blutgefäße belegen. Darauf folgen eine Rollung, Aktivierung, feste Adhäsion und das Hindurchgehen der Leukozyten. Eine Anzahl von Zelladhäsionsmolekülen, die an diesen vier Erfassungsablaufstufen beteiligt sind, ist bereits identifiziert und charakterisiert worden. Darunter haben die Wechselwirkung zwischen dem Gefäßzellen-Adhäsionsmolekül 1 (vascular cell adhesion molecule 1 = VCAM-1) und dem sehr späten (very late) Antigen 4 (= VLA-4, α₄β₁-Integrin) sowie die Wechselwirkung zwischen dem Schleimaddressin-Zelladhäsionsmolekül 1 (mucosal addressin cell adhesion molecule 1 = MAdCAM-1) und dem α₄β₇-Integrin gezeigt und ergeben, dass sie die Anbindung, Rollung und Adhäsion von Leukozyten und Eosinophilen, aber nicht von Neutrophilen an Endothelialzellen unter physiologischen Fließbedingungen mediieren bzw. vermitteln. Dies legt es nahe, dass die VCAM-1/VLA-4- und/oder MAdCAM-1/α₄β₇-Integrin-mediierten Wechselwirkungen vorrangig eine selektive Erfassung von Leukozyt-Subpopulationen in vivo mediieren könnten. Die Inhibierung dieser Wechselwirkung stellt einen Ausgangspunkt für einen therapeutischen Eingriff dar (A.J. Wardlaw, J. Allergy Clin. Immunol. 1999, 104, 917–26).
VCAM-1 ist ein Mitglied der Immunoglobulin (Ig)-Überfamilie und stellt einen der Schlüssel-Regulatoren des Ablaufweges der Leukozyten zu den Entzündungsstellen dar. VCRM-1 wird, zusammen mit intrazellulärem Adhäsionsmolekül 1 (ICAM-1) und E-Selektin, auf entzündetem Endothelium exprimiert, das durch solche Zytokine wie Interleukin 1 (IL-1) und Tumor-Nekrosefaktor α (TNF-α), sowie durch Lipopolysaccharid (LPS), über einen von Kernfaktor κB (NF-κB) abhängigen Ablaufweg aktiviert wird. Allerdings werden diese Moleküle nicht auf ruhendem Endothelium exprimiert. Durch VCAM-1 mediierte Zelladhäsion kann an zahlreichen physiologischen und pathologischen Prozessen, einschließlich Myogenese, Hämatopoiesie und Entzündungsreaktionen, sowie an der Entwicklung von Autoimmunstörungen beteiligt sein. Die Integrine VLA-4 und α₄β₇ fungieren beide als Leukozyt-Rezeptoren für VCAM-1.
Das Integrin α₄β₁ ist ein heterodimeres Protein, das in wesentlichen Gehaltsmengen auf allen zirkulierenden Leukozyten außer auf reifen Neutrophilen exprimiert wird. Es reguliert die Zellwanderung in das Gewebe während Entzündungsreaktionen und normalen Lymphozyt-Bewegungen. VLA-4 wird an unterschiedliche primäre Sequenzdeterminanten, wie an ein QIDSP-Motiv von VCAM-1 und an eine ILDVP-Sequenz der hauptsächlichen Zelltyp- spezifischen Adhäsionsstelle der alternativ gespleißten Typ III-Verbindungsdomäne (CS-1) von Fibronektin, gebunden.
In vivo-Studien mit neutralisierenden monoclonalen Antikörpern und mit Inhibitor-Peptiden haben eine kritische Rolle für eine α₄-Integrin-Wechselwirkung bei Leukozyt-mediierten Entzündungen belegt. Eine Blockierung von VLA-4/Ligand-Wechselwirkungen ist somit für einen therapeutischen Eingriff in eine Vielzahl von Entzündungs-, Autoimmun- und Immunkrankheiten vielversprechend (C. Zimmerman; Exp. Opin. Ther. Patents 1999, 9, 129–133).
Ferner wurden Verbindungen mit einem Bisarylharnstoff-Rest als Substituent als α₄β₁-Integrin-Rezeptorantagonisten offenbart: WO 96/22 966, 97/03 094, 99/20 272, 99/26 923, 99/33 789, 99/37 605 und 00/00 477. Allerdings sind keine β-Aminosäuren oder Homologe davon mit α₄β₁-Integrin-Rezeptorantagonist-Aktivität beschrieben worden.
WO 98/04 247 offenbart Zelladhäsionsinhibitoren, von denen einige einen Bernsteinsäure-Rest umfassen.
Zusätzlich zu ihrer α₄β₁-Integrin-Antagonistaktivität können die Verbindungen der vorliegenden Erfindung auch als α₄β₇- oder α₉β₁-Integrin-Antagonisten verwendet werden.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, neue von Bernsteinsäure oder von Homologen davon abgeleitete Integrin-Antagonisten zur Behandlung von Entzündungs-, Autoimmun- und Immunkrankheiten anzugeben und bereitzustellen.
Die vorliegende Erfindung betrifft daher Verbindungen der allgemeinen Formel (I):
worin gilt:
R¹ stellt einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten, ungesättigten oder aromatischen cyclischen Rest dar,
der 0 bis 3 Heteroatome, die unabhängig aus N, S und O ausgewählt sind, enthalten kann
und mit -R^1-1-Z substituiert ist,
worin R^1-1 eine Bindung, -O-, -S-, NR^1-2, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 3 Heteroatomen aus O, N oder S darstellt
und gegebenenfalls mit aus der Gruppe R^1-3 ausgewählten Substituenten substituiert ist,
worin R^1-2 gegebenenfalls Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl oder C_2-10-Alkinyl ist, und
worin R^1-3 Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 3 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen darstellt, und worin Z -C(O)OR^Z-1, -C(O)NR^Z-2R^Z-3, -SO₂NR^Z-2R^Z-3, -SO(OR^Z-1), -SO₂(OR^Z-1)_, -P(O)R^Z-1(OR^Z-3) oder -PO(OR^Z-1)(OR^Z-3) darstellt,
worin gilt:
R^Z-2 ist Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_2-6-Alkenyl, C_2-6-Alkinyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, -C(O)R^Z-4 oder -SO₂R^Z-4, worin
R^Z-4 C_1-4-Alkyl, C_2-6-Alkenyl, C_2-6-Alkinyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl ist, und
R^Z-1 und R^Z-3 sind unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_2-6-Alkenyl, C_2-6-Alkinyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt und
gegebenenfalls mit 1 bis 3 Substituenten aus C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen und aus Cyano substituiert,
wobei R¹ gegebenenfalls mit 0 bis 2 Substituenten aus R^1-4, Halogen, Nitro, Amino, Cyano und aus Oxo substituiert ist, worin R^1-4 aus C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Phenyl, Phenoxy, Phenylamino und aus C_3-6-Cycloalkyl ausgewählt ist;
R² stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder C_3-7-Cycloalkyl dar
und ist gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten substituiert, die unabhängig aus C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Halogen, Cyano, Nitro und aus Oxo ausgewählt sind;
R³ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar
und ist gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten R^3-1 aus C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, -OR^3-2, -SR^3-2, -NR^3-3R^3-4, -C(O)R^3-2, -S(O)R^3-2, -SO₂R^3-2, -OC(O)R^3-2, -C(O)NR^3-3R^3-4, -NR^3-2(O)R^3-3, -SO₂NR^3-3R^3-4, -NR_3-2SO₂R^3-3, -NR^3-2C(O)NR^3-3R^3-4, -NR^3-2C(O)OR^3-3, -OC(O)NR^3-3R^3-4, -CO₂R^3-5, Halogen, Cyano, Nitro oder aus Oxo substituiert, worin gilt:
R^3-2 stellt Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl dar,
R^3-3 und R^3-4 sind unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt, und
R^3-5 stellt C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl dar;
R⁴ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar
und ist gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten R^4-1 aus C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, -OR^4-2, -SR^4-2, -NR^4-3R^4-4, -C(O)R^4-2, -S(O)R^4-2, -SO₂R^4-2, -OC(O)R^4-2, -C(O)NR⁴R^4-4, -NR^4-2C(O)R^4-3, -SO₂NR^4-3R^4-4, -NR^4-2SO₂R^4-3, -NR^4-2C(O)NR^4-3R^4-4, -NR^4-2C(O)OR^4-3, -OC(O)NR^4-3R^4-4, -CO₂R^4-5, Halogen, Cyano, Nitro oder aus Oxo substituiert,
worin gilt:
R^4-2 stellt Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl dar,
R^4-3 und R_4-4 sind unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt,
R^4-5 stellt C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl dar;
oder
R³ und R⁴ bilden zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 4- bis 7-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten Ring mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen, welcher gegebenenfalls mit 1 bis 2 Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe aus C_1-4-Alkyl, Phenyl, Benzyl, C_3-7-Cycloalkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Cyano und aus Oxo, substituiert ist und mit einem 3- bis 7-gliedrigen homo- oder heterocyclischen gesättigten, ungesättigten oder aromatischen Ring kondensiert sein kann;
R⁵ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder C_3-7-Cycloalkyl dar
und ist gegebenenfalls dreifach mit C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Halogen, Cyano, Nitro oder mit Oxo substituiert;
R⁶ stellt Phenyl oder einen 5- bis 6-gliedrigen aromatischen heterocyclischen Rest mit bis zu 3 unabhängig aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar,
wobei R⁶ mit -NR^6-2C(O)NR^6-3R^6-4 oder mit -NR^6-2C(S)NR^6-3R^6-4 und ferner gegebenenfalls mit Halogen substituiert ist,
worin R^6-2 und R^6-3 unabhängig aus Wasserstoff oder C_1-4-Alkyl ausgewählt sind oder zusammen die Gruppe:
und worin R^6-4 Phenyl darstellt,
das gegebenenfalls mit 1 bis 2 Substituenten aus C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy oder aus Cyano substituiert ist,
oder
R⁶ stellt eine Gruppe:
worin R^6-1 einen Substituent darstellt, ausgewählt aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy oder aus Cyano,
und
worin R^6-5 einen Substituent darstellt, ausgewählt aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy oder aus Cyano
R⁷ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar, wobei R⁷ gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten R^7-1 substituiert ist,
worin R^7-1 C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, -OR^7-2, -SR^7-2, -NR^7-3R^7-4, -C(O)R^7-2, -S(O)R^7-2, -SO₂R^7-2, -OC(O)R^7-2, -C(O)NR^7-3R^7-4, NR^7-2C(O)R^7-3, -SO₂NR^7-3R^7-4, -NR^7-2SO₂R^7-3, -NR^7-2C(O)NR^7-3R^7-4, -NR^7-2C(O)OR^7-3, -OC(O)NR^7-3R^7-4, -CO₂R^7-5, Halogen, Cyano, Nitro oder Oxo darstellt,
worin R^7-2 Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl darstellt,
R^7-3 und R^7-4 unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt sind,
und worin R^7-5 C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl darstellt;
R⁸ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar,
wobei R⁸ gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten R^8-1 substituiert ist,
worin R^8-1 C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, -OR^8-2, -SR^8-2, -NR^8-3R^8-4, -C(O)R^8-2, -S(O)R^8-2, -SO₂R^8-2, -OC(O)R^8-2, -C(O)NR^8-3R^8-4, -NR^8-2C(O)R^8-3, -SO₂NR^8-3R^8-4, -NR^8-2SO₂R^8-3, -NR_8-2C(O)NR^8-3R^8-4, -NR^8-2C(O)OR^8-3, -OC(O)NR^8-3R^8-4, -CO₂R^8-5, Halogen, Cyano, Nitro oder Oxo und
R^8-2 Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl darstellen,
R^8-4 und R^8-4 unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt sind,
und worin R^8-5 C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl darstellt;
oder
R⁷ und R⁸ bilden zusammen einen 4- bis 7-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten Ring mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen, welcher gegebenenfalls mit 1 bis 2 Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe aus C_1-4-Alkyl, Phenyl, Benzyl, C_3-7-Cycloalkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Cyano und aus Oxo, substituiert und mit einem 3- bis 7-gliedrigen homo- oder heterocyclischen, gesättigten, ungesättigten oder aromatischen Ring kondensiert ist;
X stellt eine Bindung oder (-CR^X-1R^X-2-)_n dar,
worin R^X-1 und R^X-2 unabhängig aus der Gruppe aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_2-4-Alkenyl und aus C_2-4-Alkinyl ausgewählt und
unabhängig mit 1 bis 2 Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe aus C_1-4-Alkyl, Phenyl, Benzyl, C_3-7-Cycloalkyl, C_1-4-Alkoxy, Halogen, Nitro, Cyano und aus Oxo, gegebenenfalls substituiert sind,
und worin n eine ganze Zahl von 0 oder 1 ist;
und pharmazeutisch geeignete und zulässige Salze davon.
Im Zusammenhang der vorliegenden Erfindung steht Alkyl für einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest, wie Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl und n-Pentyl. Falls nichts Anderes ausgesagt ist, ist C_1-10-Alkyl bevorzugt, und C_1-6-Alkyl ist besonders bevorzugt.
Alkenyl und Alkinyl stehen für geradkettige oder verzweigte Reste mit einer oder mehreren Doppel- oder Dreifachbindungen, z.B. für Vinyl, Allyl, Isopropinyl und Ethinyl. Ist nichts Anderes ausgesagt, sind C_1-10-Alkenyl oder -Alkinyl bevorzugt, und C_1-6-Alkenyl oder -Alkinyl sind besonders bevorzugt.
Cycloalkyl steht für eine cyclische Alkylgruppe wie Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl oder Cyclopeptyl. Bevorzugt ist monocyclisches C_3-7-Cycloalkyl.
Halogen steht im Zusammenhang der vorliegenden Erfindung für Fluor, Chlor, Brom oder Jod. Ist nichts Anderes ausgesagt, sind Chlor oder Fluor bevorzugt.
Ein 4- bis 9-gliedriger gesättigter, ungesättigter oder aromatischer cyclischer Rest steht für ein monocyclisches System mit 4 bis 9 Ringatomen und enthält 0, 1 oder mehrere Doppelbindungen, die über ein Kohlenstoffatom oder gegebenenfalls über ein Heteroatom im Ring gebunden sein können, wie z.B. Phenyl, Thiazolyl, Pyridyl oder Cyclopentyl.
Aryl steht für ein monocyclisches Hueckel-aromatisches cyclisches System mit 6 bis 10 Ringkohlenstoffatomen.
Heteroaryl steht für ein monocyclisches heteroaromatisches System mit 4 bis 9 Ringatomen, die über ein Kohlenstoffatom oder gegebenenfalls über ein Stickstoffatom im Ring gebunden sein können, wie z.B. Furan-2-yl, Furan-3-yl, Pyrrol-1-yl, Pyrrol-2-yl, Pyrrol-3-yl, Thienyl, Thiazolyl, Oxazolyl, Imidazolyl, Triazolyl, Tetrazolyl, Pyridyl, Pyrimidyl oder Pyridazinyl.
Ein gesättigter oder ungesättigter heterocyclischer Rest steht für ein heterocyclisches System mit 4 bis 9 Ringatomen, das eine oder mehrere Doppelbindungen enthalten und über ein Ringkohlenstoffatom oder gegebenenfalls über ein Stickstoffatom gebunden sein kann, wie z.B. Tetrahydrofur-2-yl, Pyrrolidin-1-yl, Piperidin-1-yl, Piperidin-2-yl, Piperidin-3-yl, Piperidin-4-yl, Piperazin-1-yl, Piperazin-2-yl, Morpholin-1-yl, 1,4-Diazepin-1-yl oder 1,4-Dihydropyridin-1-yl.
Ist nichts Anderes ausgesagt, steht das Heteroatom im Zusammenhang der vorliegenden Erfindung vorzugsweise für O, S, N oder P.
Verbindungen gemäß der Erfindung, in denen einer der Substituenten R³, R⁴, R⁷ und R⁸ Phenyl darstellen, das gegebenenfalls mit bis zu 3 Substituenten substituiert sein kann, die unabhängig aus der Gruppe aus C_1-4-Alkyl und Halogen ausgewählt sind, wobei die weiteren Substituenten Wasserstoff darstellen, sind so beschaffen, dass sie 1 einzelne Phenylgruppen aufweisen, die an eines der Kettenkohlenstoffatome gebunden ist, an welche jene Substituenten gebunden sind.
In einer bevorzugten Ausgestaltung betrifft die vorliegende Erfindung Verbindungen der allgemeinen Formel (I), worin R¹ einen Phenylring darstellt.
In einer weiteren bevorzugten Ausgestaltung betrifft die vorliegende Erfindung Verbindungen der allgemeinen Formel (I), worin R^1-1 eine Bindung und Z COOR^Z-1 darstellen, worin RZ-1 die oben angegebene Bedeutung hat.
In noch einer weiteren bevorzugten Ausgestaltung betrifft die vorliegende Erfindung Verbindungen der allgemeinen Formel (I), worin R⁶ Phenyl darstellt, das mit -NHC(O)NHR^6-4 substituiert ist, worin R^6-4 mit Methyl oder Trifluormethoxy substituiert ist.
In noch einer weiteren bevorzugten Ausgestaltung betrifft die vorliegende Erfindung Verbindungen der allgemeinen Formel (I), worin X die Methylengruppe darstellt.
In noch einer weiteren bevorzugten Ausgestaltung betrifft die vorliegende Erfindung Verbindungen der allgemeinen Formel (I), worin einer der Substituenten R³, R⁴, R⁷ und R⁸ Phenyl darstellt, das gegebenenfalls mit bis zu 3 Substituenten substituiert ist, die unabhängig aus der Gruppe aus C_1-4-Alkyl und Halogen ausgewählt sind, wobei die weiteren Substituenten Wasserstoff darstellen.
In noch einer weiteren bevorzugten Ausgestaltung betrifft die vorliegende Erfindung Verbindungen der allgemeinen Formel (I), worin R¹ ein 1,4-substituierter Phenylring ist.
Ein bevorzugtes Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel (I) ist ebenfalls herausgefunden worden, wobei das Verfahren die Reaktion von Carbonsäuren der allgemeinen Formel (I'):
oder aktivierter Derivate davon,
worin
R¹, R², R³, R⁴, R⁷ und R⁸ die oben angegebenen Bedeutungen haben,
mit Verbindungen der allgemeinen Formel (I''): R⁶-X-NR⁵H (I''),worin
X, R⁵ und R⁶ die oben angegebenen Bedeutungen haben,
in inerten Lösungsmitteln umfasst, was noch detaillierter im weiteren Beschreibungsteil der vorliegenden Beschreibung beschrieben wird.
In überraschender Weise zeigen und ergeben die Verbindungen der vorliegenden Erfindung eine gute Integrin-Antagonistaktivität. Sie eignen sich daher zur Behandlung von Krankheiten, insbesondere als α₄β₁- und/oder α₄β₇- und/oder α₉β₁-Integrin-Antagonisten, sowie zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung oder Vorbeugung einer durch Integrine mediierten Bedingung und insbesondere zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen zur Inhbierung oder Vorbeugung von Zelladhäsion und von durch Zelladhäsion mediierten Krankheiten. Beispiele sind die Behandlung und Prophylaxe von Atherosklerose, Asthma, chronischer zerstörerischer Lungenkrankheit (COPD), Allergien, Diabetes, Magenentzündungen, multipler Sklerose, Myokardischämie (Blutsturz im Herzmuskel), rheumatoider Arthritis, Transplantatabstoßung und weiterer Entzündungs-, Autoimmun- und Immunkrankheiten.
Die Integrin-Antagonisten eignen sich nicht nur zur Behandlung der oben diskutierten physiologischen Bedingungen, sondern auch zu solchen Anwendungen wie einer Reinigung von Integrinen und zu deren Aktivitätstestnachweis.
Zur Behandlung der oben genannten Krankheiten können die Verbindungen gemäß der Erfindung nicht-systemische oder systemische Aktivität aufweisen, wobei die letztere bevorzugt ist. Zum Erhalt einer systemischen Aktivität der Wirkverbindungen können diese u.a. oral oder parenteral verabreicht werden, wobei die orale Verabreichung bevorzugt ist.
Zur parenteralen Verabreichung sind Verabreichungsformen auf die Schleimhautmembranen (d.h. buccal, lingual, sublingual, rektal, nasal, pulmonär, konjunktivisch (in die Gelenke) oder intravaginal) oder in das Körperinnere besonders geeignet. Die Verabreichung kann unter Vermeidung von Absorption (d.h. durch intrakardiale, intraarterielle, intravenöse, intraspinale oder intralumbare Verabreichung) oder unter Einschluss von Absorption (d.h. durch intrakutane, subkutane, perkutane, intramuskuläre oder intraperitoneale Verabreichung) erfolgen.
Für die obigen Zwecke können die Wirkverbindungen per se oder in Verabreichungsformen verabreicht werden.
Geeignete Verabreichungsformen zur oralen Verabreichung werden u.a. durch normale und enterisch-überzogene Tabletten, Kapseln, überzogene Tabletten, Pillen, Körner, Pellets, Pulver, feste und flüssige Aerosole, Sirupprodukte, Emulsionen, Suspensionen und Lösungen dargestellt. Geeignete Verabreichungsformen zur parenteralen Verabreichung sind Injektions- und Infusionslösungen.
Die Wirkverbindung kann in den Verabreichungsformen in Konzentrationen von 0,001 bis 100 Gew.% vorliegen; bevorzugt sollte die Konzentration der Wirkverbindung 0,5 bis 90 Gew.% betragen, d.h., in Mengen vorliegen, die hinreichen, um den spezifischen Dosierungsbereich zu ergeben.
Die Wirkverbindungen können in bekannter Weise in die oben genannten Verabreichungsformen unter Verwendung inerter, nicht-toxischer pharmazeutisch geeigneter Hilfsstoffe, wie z.B. von Exzipienten, Lösungsmitteln, Vehikeln, Emulgatoren und/oder von Dispergiermitteln, überführt werden.
Die folgenden Hilfsstoffe können als Beispiele genannt werden: Wasser, feste Exzipienten wie gemahlene natürliche oder synthetische Minerale (z.B. Talkum oder Silikate), Zucker (z.B. Lactose), nicht-toxische organische Lösungsmittel wie Paraffine, Pflanzenöle (z.B. Sesamöl), Alkohole (z.B. Ethanol, Glycerin), Glykole (z.B. Polyethylenglykol), Emulgatoren, Dispergiermittel (z.B. Polyvinylpyrrolidon) und Gleitmittel (z.B. Magnesiumsulfat).
Im Fall oraler Verabreichung können Tabletten auch Additive wie Natriumzitrat sowie Additive wie Stärke, Gelatine und dgl. enthalten. Geschmacksverstärker oder Farbstoffe können ebenfalls den wässrigen Zubereitungen zur oralen Verabreichungen zugefügt werden.
Zum Erhalt wirkungsvoller Ergebnisse hat es sich im Fall parenteraler Verabreichung generell als vorteilhaft erwiesen, Mengen von ca. 0,001 bis 100 und vorzugsweise von ca. 0,01 bis 1 mg/kg Körpergewicht zu verabreichen. Im Fall oraler Verabreichung beträgt die Menge ca. 0,01 bis 100 und vorzugsweise ca. 0,1 bis 10 mg/kg Körpergewicht.
Nichtsdestoweniger kann es notwendig sein, andere als die oben genannten Mengen anzuwenden, abhängig vom jeweiligen Körpergewicht, der Verabreichungsmethode, der individuellen Reaktion auf die Wirkverbindung, dem Zubereitungstyp und vom Verarbeitungszeitpunkt und der Abfolge.
Pharmazeutisch zulässige und geeignete Salze der Verbindungen der vorliegenden Erfindung, die einen Säure-Rest enthalten, schließen mit organischen oder anorganischen Basen gebildete Additionssalze ein. Die aus solchen Basen abgeleiteten Salzbildungsionen können Metallionen, z.B. von Aluminium, Alkalimetallionen, wie von Natrium oder Kalium, Erdalkalimetallionen, wie von Calcium oder Magnesium, oder ein Aminsalzion sein, von denen eine Anzahl für diesen Zweck bekannt ist. Beispiele schließen Ammoniumsalze, Arylalkylamine wie Dibenzylamin und N,N-Dibenzylethylendiamin, Niederalkylamine wie Methylamin, t-Butylamin, Procain, Niederalkylpiperidine wie N-Ethylpiperidin, Cycloalkylamine wie Cyclohexylamin oder Dicyclohexylamin, 1-Adamantylamin, Benzathin, oder Salze von Aminosäuren wie von Arginin, Lysin oder dgl. ein. Die physiologisch geeigneten Salze wie die Natrium- oder Kaliumsalze und die Aminosäuresalze können, wie unten beschrieben, medizinisch verwendet werden und sind bevorzugt.
Pharmazeutisch geeignete und zulässige Salze der Verbindungen der vorliegenden Erfindung, die einen Base-Rest enthalten, schließen mit organischen oder anorganischen Säuren gebildete Additionssalze ein. Die aus solchen Säuren abgeleiteten Salzbildungsionen können Halogenidionen oder Ionen natürlicher oder unnatürlicher Carbon- oder Sulfonsäuren sein, von denen eine Anzahl für diesen Zweck bekannt ist. Beispiele schließen Chloride, Acetate, Trifluoracetate, Tartrate oder aus Aminosäuren wie von Glycin oder dgl. abgeleitete Salze ein. Die physiologisch geeigneten Salze wie die Chlorid-, Trifluoressigsäure- und die Aminosäuresalze können, wie unten beschrieben, medizinisch verwendet werden und sind bevorzugt.
Diese und weitere Salze, die nicht unbedingt physiologisch zulässig zu sein brauchen, eignen sich dann zur Isolierung oder Reinigung eines Produktes, das für die unten beschriebenen Zwecke akzeptabel ist.
Die Verbindungen gemäß der Erfindung können in unterschiedlichen stereoisomeren Formen vorliegen, die zu einander enantiomer (wie Bild und Spiegelbild) oder diastereomer (wie ein sich vom Spiegelbild unterscheidendes Bild) sind. Die Erfindung betrifft die Enantiomeren und die Diastereomeren sowie deren Mischungen. Diese können gemäß üblicher Verfahren aufgetrennt werden.
Allgemeine Synthese der Verbindungen
Die Synthese von Verbindungen gemäß der allgemeinen Formel (I) kann mit dem folgenden Schema 1 dargestellt werden:
Schema 1
Durch Kupplung der Carbonsäurederivate (III) mit den Aminen (II) sind die Amide (IV) erhältlich. Die Kupplung aktivierter Carbonsäuren (IV) mit den Aminen (V) ergibt die Amide (VI). Die Entfernung der Schutzgruppe PG ergibt Carbonsäuren vom Typ (I).
Im obigen Schema stellt der in den Formeln (I), (II), (IV) und (VI) dargestellte Ring einen durch R¹ gebildeten cyclischen Rest dar. Aktivierte Carbonsäurederivate dieses Typs sind dem Fachmann bekannt und im Detail in Standard-Textbüchern beschrieben, wie z.B. in (i) Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg Thieme Verlag, Stuttgart, oder in (ii) Comprehensive Organic Synthesis, Hrsg. B.M. Trost, Pergamon Press, Oxford, 1991. Die Carbonsäure wird vorzugsweise aktiviert, wie z.B. als AG = 1-Hydroxy-1H-benzotriazolo und mit Kupplungsmitteln wie z.B. mit Dicyclohexylcarbodiimid (DCC), 1-Ethyl-3-(3'-dimethylaminopropyl)carbodiimid × HCl (EDCI), 2-(7-Aza-3-oxido-1H-1,2,3-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium-Hexafluorphosphat. Weitere aktivierte Carbonsäurederivate wie z.B. symmetrische oder gemischte Anhydride, N-Carboxyanhydride, Halogenide oder auch aktivierte Ester, z.B. Succinyl- oder Pentafluorphenylester, können ebenfalls angewandt werden.
Im obigen Schema steht PG für eine geeignete Schutzgruppe der Carboxylgruppe, oder COOPG steht für eine Carboxylgruppe, die an ein polymeres Harz gebunden ist, das sich zur Festphasen-Synthese eignet. Schutzgruppen dieses Typs sind dem Fachmann bekannt und im Detail in T.W. Greene, P.G. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3. Ausgabe, Hrsg. John Wiley, New York, 1999, beschrieben. Die Carboxylgruppe ist vorzugsweise verestert, wobei PG C_1-6-Alkyl, wie z.B. Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, t-Butyl, Pentyl, Isopentyl, Neopentyl, Hexyl, C_3-7-Cycloalkyl wie z.B. Cyclopropyl, Cyclopropylmethyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl oder Cyclohexyl, Aryl wie z.B. Phenyl, Benzyl, Tolyl oder ein substituiertes Derivat davon ist.
Stufe A
Die Bildung der Amide (IV) kann durch Reaktion eines Carbonsäureanhydrids (II) mit dem gewünschten Amin (III) oder einem geeigneten Salz davon erfolgen.
Beispielsweise können Amide des Typs (IV) wie folgt hergestellt werden:
Anhydridverfahren
Eine Lösung von Carbonsäureanhydrid in einem inerten Lösungsmittel wird bei r.t. gerührt. Nach Zugabe des Amins und einer nicht-nukleophilen Base wie von Ethyldiisopropylamin oder Kaliumcarbonat wird bei r.t. oder bei erhöhter Temperatur weiter gerührt. Nach Eindampfen wird der Rückstand in Ethylacetat wieder aufgelöst, mit wässriger Säure und Base gewaschen, getrocknet und eingedampft. Nötigenfalls kann das Produkt durch Verreibungsreinigung oder Blitzchromatographie gereinigt oder auch ohne weitere Reinigung eingesetzt werden.
Verbindungen der allgemeinen Formel (II) sind im Handel erhältlich, bekannt oder können mit üblichen Verfahren aus im Handel verfügbaren Vorstufenverbindungen hergestellt werden.
Verbindungen der allgemeinen Formel (III) sind im Handel erhältlich, bekannt oder mit üblichen Verfahren aus bekannten Carbonsäurederivaten herstellbar.
Stufe B
Die Bildung der Amide (VI) kann durch Reaktion der jeweiligen Carbonsäuren (IV) – aktiviert mit einem Kupplungsmittel wie mit DCC und HOBt, mit EDCI und HOBt oder HATU – mit den gewünschten Aminen (V) oder einem geeigneten Salz davon durchgeführt werden. Aktivierte Derivate der Säuren (IV) wie Anhydride, Halogenide und Ester, z.B. Bernsteinsäure- oder Pentafluorphenylester, können ebenfalls angewandt werden.
Beispielsweise können Amide (VI) wie folgt hergestellt werden:
Eine Lösung der Carbonsäure, von 1-Hydroxy-1H-benzotriazol (HOBt) und von 1-Ethyl-3-(3'-dimethylaminopropyl)carbodiimid × HCl (EDCI) in einem inerten Lösungsmittel wird bei r.t. gerührt. Nach Zugabe des Amins und einer nicht-nukleophilen Base wie von Ethyldiisopropylamin oder Kaliumcarbonat wird bei r.t. oder bei erhöhter Temperatur weiter gerührt. Nach Eindampfen wurde der Rückstand in Ethylacetat wieder aufgelöst, mit wässriger Säure und Base gewaschen, getrocknet und eingedampft.
Nötigenfalls wurde das Produkt durch Verreibungsreinigung oder mit Blitzchromatografie gereinigt oder ohne weitere Reinigung eingesetzt. Verbindungen der allgemeinen Formel (V) sind im Handel erhältlich, bekannt oder mit üblichen Verfahren aus bekannten Carbonsäurederivaten herstellbar. Bisarylharnstoffe können durch Kupplung eines Aminophenylessigsäurederivats und eines Phenylisocyanats hergestellt werden.
Stufe C
Die Entfernung der Schutzgruppe PG kann entweder mit einer Säure wie mit Trifluoressigsäure oder mit einer Base wie mit Kalium- oder Lithiumhydroxid, abhängig von der Natur der PG, durchgeführt werden. Die einschlägigen Reaktionen werden in wässrigen, inerten organischen Lösungsmitteln wie in Alkoholen, z.B. in Methanol oder Ethanol, Ethern, z.B. in Tetrahydrofuran oder Dioxan, oder in polaren aprotischen Lösungsmitteln, z.B. in Dimethylformamid, durchgeführt. Nötigenfalls können auch Mischungen der obigen Lösungsmittel herangezogen werden.
Beispiele
Abkürzungen

AcOH

Essigsäure

Boc

t-Butyloxycarbonyl

DCC

Dicyclohexylcarbodiimid

DCM

Dichlormethan

DIPEA

Diisopropylethylamin

EDCI

1-Ethyl-3-(2'-dimethylaminopropyl)carbodiimid × HCl

eq.

Äquivalente

EtOAc

Ethylacetat

FC

Blitzchromatografie

GC

Gaschromatografie

HATU

2-(7-Aza-3-oxido-1H-1,2,3-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium-Hexafluorphosphat

HOBt

N-Hydroxybenzotriazol-Monohydrat

HPLC

Hochleistungs-Flüssigchromatografie

ICAM-1

intrazelluläres Adhäsionsmolekül 1

IL-1

Interleukin 1

LPS

Lipopolysaccharid

MAdCAM-1

Mucosal-Addressin-Zelladhäsionsmolekül 1

MeOH

Methanol

MeCN

Acetonitril

min

Minuten

M.P.

Schmelzpunkt = F.

NF-κB

Kernfaktor κB

NMR

kernmagnetische Resonanz

n.d.

nicht ermittelt

PE

Leichtpetroleum (Sdp. = 40–60°C)

r.t.

Raumtemperatur

R_f

TLC: R_f-Wert = zurückgelegter Weg des Flecks/zurückgelegter Weg der Lösungsmittelfront

TFA

Trifluoressigsäure

THF

Tetrahydrofuran

TLC

Dünnschichtchromatografie

TNF-α

Tumor-Nekrosefaktor α

T_R

Retentionszeit, bestimmt mit HPLC

VCAM-1

Vaskular-Zelladhäsionsmolekül 1

VLA-4

sehr spätes Antigen 4 (very late antigen 4) (α₄β₁-Integrin)

Allgemeine Anmerkungen
In den unten angegebenen Beispielen sind alle quantitativen Daten, falls nichts Anderes ausgesagt ist, auf Gewichtsprozentsätze bezogen. Die Blitzchromatografie wurde an Kieselgel 60, 90–63 μm (E. Merck, Darmstadt, Deutschland) durchgeführt.
Die Dünnschichtchromatografie wurde unter Anwendung von mit Kieselgel 60 F₂₅₄ überzogenen Aluminiumoxid-Platten (E. Merck, Darmstadt, Deutschland) mit der angegebenen Mobilphase durchgeführt.
Die Schmelzpunkte wurden in offenen Kapillaren bestimmt und sind nicht korrigiert.
Die Masse-Bestimmungen wurden mit dem Elektrosprüh-Ionisier- (ESI-) Verfahren mit Schleifen- oder Spalt-Injektion über ein HPLC-System durchgeführt.
Synthese von Vorstufenverbindungen Beispiel 2: N-(4-Aminophenyl)-N'-(2-methylphenyl)harnstoff
2-Methylphenylisocyanat (24,6 g, 184,9 mmol) wurden bei 0°C zu einer Lösung von 1,4-Diaminobenzol (20,00 g, 184,9 mmol) in 1000 mL EtOAc getropft. Nach Rühren über 2 h bei r.t. wurde das Produkt durch Filtration gesammelt (42,7 g, 177,0 mmol). F => 300°C
TLC (PE/EtOAc: 1/4) R_f = 0,32
¹H-NMR (400 MHz, D₆-DMSO) δ: 2,10 (s, 3H); 4,76 (s, 2H); 6,59 (mc, 2H); 6,89 (mc, 1H); 7,07–7,15 (m, 4H); 7,73 (s, 1H); 7,85 (mc, 2H); 8,50 (s, 1H)
Beispiel II: t-Butyl-4-({[(2-methylphenyl)amino]carbonyl}amino)benzylcarbamat
2-Methylphenylisocyanat (7,57 g, 59,83 mmol) wurde bei 0°C zu einer Lösung von (4-Aminobenzyl)carbaminsäure-t-butylester (13,30 g, 59,83 mmol, hergestellt analog zu: Moloney, Gerard P.; Martin, Graeme R.; Mathews, Neil; Milne, Aynsley; Hobbs, Heather; et al., J. Med. Chem. 1999, 42, 2504–2526), in 120 mL DCM getropft. Die Reaktion wurde unter Rückfluss 16 h lang erwärmt, auf r.t. abgekühlt, und das ausgefällte Produkt wurde durch Filtration gesammelt und im Vakuum getrocknet (19,20 g, 54,00 mmol).
F. = 200–202°C
TLC (PE/EtOAc: 1/1) R_f = 0,65
¹H-NMR 400 MHz, D₆-DMSO) δ: 1,39 (s, 9H); 2,24 (s, 3H); 4,06 (d, J = 6 Hz, 2H); 6,93 (mc, 1H); 7,12–7,17 (m, 4); 7,32 (mc, 1H); 7,40 (mc, 2H); 7,85 (mc, 1H); 7,90 (s, 1H); 8.98 (s, 1H)
Beispiel III: N-[4-(Aminomethyl)phenyl]-N'-(2-methylphenyl)harnstoff
Zu einer Lösung von t-Butyl-4-({[(2-methylphenyl)amino]carbonyl}amino)benzylcarbamat (2,00 g, 5,63 mmol) in CH₂Cl₂ (120 mL) wurde TFA (36 mL) bei 0°C gegeben, worauf das Ganze 2 h lang bei r.t. gerührt wurde. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft, worauf das Produkt gesammelt wurde (2,72 g, TFA-Salz).
F. = 142–143°C
TLC (PE/EtOAc: 3/2) R_f = 0,14
¹H-NMR (400 MHz, D₆-DMSO) δ: 2,24 (s, 3H); 3,97 (q, J = 5 Hz, 2H); 6,96 (mc, 1H); 7,14–7,19 (m, 2); 7,36 (mc, 2H); 7,51 (mc, 2H); 7,81 (mc, 2H); 8,06 (s, 1H); 8,08 (s, 3H); 9,23 (s, 1H)
Synthese von Verbindungen, Beispiel 1 Stufe A Beispiel IV: 4-{[4-(Ethoxycarbonyl)phenyl]amino}-4-oxo-2-phenylbutansäure
Ethyl-4-aminobenzoat (910 mg, 5,50 mmol) und Phenylbernsteinsäureanhydrid (1070 mg, 6,00 mmol) wurden in 40 mL abs. CH₃CN gelöst und über Nacht bei r.t. gerührt. Der Feststoffniederschlag wurde isoliert und mit 2-Propanol digeriert, im Vakuum getrocknet, in DCM aufgelöst und mit Zitronensäure gewaschen. 4-{[4-(Ethoxycarbonyl)phenyl)amino}-4-oxo-2-phenylbutansäure wurde als kristalliner Feststoff gesammelt (980 mg, 2,88 mmol).
F. = 212°C
TLC (Cyclohexan/EtOAc: 7/3) R_f = 0,17
¹H-NMR (400 MHz, D₆-DMSO) δ: 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3H); 2,75 (dd, J = 3,7 Hz, J = 17,2 Hz, 1H); 3,42 (dd, J = 3,7 Hz, J = 17,2 Hz, 1H); 4,09 (dd, J = 3,7 Hz, J = 17,2 Hz, 1H); 4,35 (q, J = 7,2 Hz, 2H); 7,33–7,41 (m, 5H), 7,75 (mc, 2H), 7,94 (mc, 2H)
Die Regiochemie wurde mit NOESY-NMR-Spektroskopie bestimmt.
Beispiel V: 4-{[4-(Ethoxycarbonyl)phenyl)amino}-4-oxo-3-phenylbutansäure
Das Lösungsmittel wurde verdampft, worauf der Rückstand durch Blitzchromatografie gereinigt wurde, was 4-{[4-(Ethoxycarbonyl)phenyl]amino}-4-oxo-3-phenylbutansäure ergab (690 mg, 2,87 mmol) ergab.
F. = 190°C
Stufe B Beispiel V: Ethyl-4-[(4-{[4-({[(2-methylphenyl)amino]carbonyl}]amino)phenyl]amino}-4-oxo-3-phenylbutanoyl)amino]benzoat
4-{[4-(Ethoxycarbonyl)phenyl]amino}-4-oxo-2-phenylbutansäure (400 mg, 1,17 mmol) wurde in MeCN (10 mL) gelöst, 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (247 mg, 1,29 mmol), 1-Hydroxy-1H-benzotriazol (158 mg, 1,17 mmol) und dann N-(4-Aminophenyl)-N'-(2-methylphenyl)harnstoff (282 mg, 1,17 mmol) wurden bei r.t zugegeben und die Reaktionsmischung 24 h lang gerührt. Ethyl-[(4-{[4-({[(2-methylphenyl)amino]carbonyl}amino)phenyl]amino}-4-oxo-3-phenylbutanoyl)amino]benzoat (194 mg, 0,34 mmol) wurde durch Filtration als weißer Feststoff gesammelt.
F. => 220°C
TLC (DCM/MeOH: 9/1) R_f = 0,21
¹H-NMR (400 MHz, D₆-DMSO) δ: 1,30 (t, J = 7,1 Hz, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,80 (mc, 1H); 3,25 (mc, 1H); 4,25–4,30 (m, 3H); 3,74 (s, 3H); 6,00 (bs, 1H); 6,65 (d, J = 6,6 Hz, 2H); 6,90–6,96 (m, 2H); 7,10–7,19 (m, 4H); 7,34–7,38 (m, 2H); 7,43–7,51 (m, 2H); 7,69–7,71 (m, 1H); 7,79–7,90 (m, 2H); 8,70 (s, 1H); 8,97 (s, 1H)
Tabelle 2: Die folgenden Verbindungsbeispiele wurden gemäß dem allgemeinen Verfahren hergestellt:
Stufe C Beispiel 1: 4-((4-{[4-({[(2-Methylphenyl)amino]carbonyl}amino)phenyl]amino}-4-oxo-3-phenylbutanoyl)amino]benzoesäure
Ethyl-4-[(4-{[4-({[(2-methylphenyl)amino]carbonyl}amino)phenyl]amino}-4-oxo-3-phenylbutanoyl)amino]benzoat (160 mg, 0,28 mmol) wurde in Wasser:THF (10 mL; 1:1; V:V) gelöst, LiOH (27 mg, 1,13 mmol) wurde bei 0°C zugegeben, worauf die Reaktionsmischung bei r.t. 24 h lang gerührt wurde. Die Reaktionsmischung wurde angesäuert, das Produkt wurde durch Filtration gesammelt und durch Blitzchromatografie (CH₂Cl₂/MeOH/AcOH: 10/1/0,5) gereinigt (11 mg, 0,02 mmol).
F. = 169°C; TLC (DCM/MeOH): 9/1) R_f = 0,27; ESI-MS: 537 [M+H]⁺
In vitro-Assay: Adhäsion von Ramos-Zellen an immobilisiertes VCAM-1 (Domänen 1 bis 3)
Zubereitung von VCAM-1 (extrazelluläre Domänen 1 bis 3)
Komplementäre DNA (cDNA), einkodierend die 7-Domänenform von VCAM-1 (GenBank, Zugangs-#M60335), wurde unter Anwendung von Rapid-ScreenTM-cDNA-Bibliotheksbänken (OriGene Technologies, Inc.) am Takara Gene Analysis Center (Shiga, Japan) erhalten. Die eingesetzten Primer waren 5'-CCA AGG CAG AGT ACG CAA AC-3' (Sense) und 5'-TGG CAG GTA TTA TTA AGG AG-3' (Antisense). PCR-Amplifikation der 3-Domäne-VCAM-1-cDNA wurde mit Pfu-DNA-Polymerase (Stratagene) mit den folgenden Sätzen von Primern durchgeführt: (U-VCAMdl-3) 5'-CCA TAT GGT ACC TGA TCA ATT TAA AAT CGA GAC CAC CCC AGA A-3') (L-VCAMdl-3) 5'-CCA TAT AGC AAT CCT AGG TCC AGG GGA GAT CTC AAC AGT AAA-3'. Der PCR-Zyklus lief bei 94°C 45 s lang, bei 55°C 45 s lang und bei 72°C 2 min lang, wobei 15 Zyklen wiederholt wurden. Nach Reinigung des PCR-Produkts wurde das Fragment mit KpnI-AvrII abgebaut. Das abgebaute Fragment wurde in pBluescript-IISK(-) (Stratagene) ligiert, welches durch Abbau mit KpnI-XhoI linearisiert war. Auf die Ligation folgte eine Transformation aus einem Dam/Dcm-Methylase-freien E. coli-Stamm SCS110 (Stratagene), um das Donorplasmid pHH7 zu erzeugen. Zur Ausrichtung des VCAM-1-Moleküls in den Insektenzellen-Ausscheidungsweg wurde die VCAM-1-kodierende Sequenz an eine Signal-Peptidsequenz von Honigbienen-Melittin kondensiert. Die entstandene Melittin-VCAM-Fusion wurde in korrekte Orientation zum Baculovirus-Polyhedrin-Promotor gebracht. Baculovirus-Transfervektor, enthaltend die erste 3-Domänenform VCAM-1 (pH10) wurde durch Ligation eines 0,9 kb-Fragments aus AvrII/Klenow/BcII-Abbauprodukten von pH7 in SaII/Klenow/BamHI-Abbauprodukte von pMelBacB (Invitrogen) aufgebaut. Rekombinantes Baculovirus wurde durch Anwendung eines Bac-N-B1ue^TM-Transfektionskit (Invitrogen) gemäß der Gebrauchsanweisung des Herstellers erzeugt. Das rekombinante Virus wurde durch Infektion an High-Five^TM-Insektenzellen 5 bis 6 Tage lang verstärkt, und der Virus-Titer wurde mit Plaque-Assay ermittelt.
Die High-FiveTM-Insektenzellen wurden in einem konischen 225 mL-Rohr durch Zentrifugation bei 1000 U/min 5 min lang pelletiert. Nach Entsorgung des Oberstands wurde das Pellet in 1,5 × 10⁹ pfu (MOI = 5) Hoch-Titer-Viruslösung resuspendiert, worauf 1,5 h lang bei Raumtemperatur inkubiert wurde. Die Zellen wurden erneut pelletiert und 1 Mal in frischem, von Express Five^TM-Serum freien Medium gewaschen. Die Zellen wurden erneut pelletiert und schließlich in 200 mL frischem Express Five^TM-Medium resuspendiert, in 1000 mL-Schüttelkolben gegeben und in einem Schüttler bei 27°C, 130 U/min, 48 h lang inkubiert, bevor der Kulturüberstand gesammelt wurde. Die Reinigung der 3-Domänenform von VCAM-1 aus dem Kulturüberstand wurde mit einer einstufigen Anionaustausch-Chromatografie durchgeführt. Die Protein-Konzentration wurde mit Coomassie-Protein-Assayreagens (Pierce) gemäß der Gebrauchsanweisung des Herstellers ermittelt.
Zubereitung von mit VCAM-1 überzogenen Mikrotiterplatten
Rekombinantes menschliches VCAM-1 (extrazelluläre Domänen 1 bis 3) wurden mit 1,0 μg/mL in PBS gelöst. Jede Lochvertiefung der Mikrotiterplatten (Nalge Nunc International, Fluoronunc Cert, 437958) wurde mit 100 μL Substrat oder zum Hintergrund-Vergleich mit Puffer allein 15 h lang bei 4°C überzogen. Nach Entsorgung der Substrat-Lösung wurden die Lochvertiefungen mit 150 μL Block-Lösung (Kirkegaard Perry Laboratories, 50-61-01) pro Lochvertiefung 90 min lang blockiert. Die Platten wurden mit Waschpuffer, enthaltend 24 mM Tris-HCl (pH = 7,4), 137 mM NaCl, 27 mM KCl und 2 mM MnCl₂, kurz vor der Zugabe des Assay gewaschen.
In vitro-Assay mit Ramos-Zellen
Zubereitung von Fluoreszenz-markierten Ramos-Zellen
Ramos-Zellen (American Type Culture Collection, Clone CRL-1596) wurden in RPMI 1640-Medium (Nikken Bio Medical Laboratory, CM1101), ergänzt mit 10 % fötalem Rinderserum (Hyclone, A-1119-L), 100 E/mL Penicillin (Gibco BRL, 15140-122) und mit 100 μg/mL Streptomycin (Gibco BRL, 15140-122), in einem befeuchteten Inkubator bei 37°C unter 5 % CO₂ gezüchtet.
Die Ramos-Zellen wurden mit Phosphat-gepufferter Lösung (PBS, Nissui, 05913), enthaltend 25 μM 5- (und 6)-Carboxyfluoresceindiacetatsuccinimidylester (CFSE, Dojindo Laboratories, 345-06441) 20 min lang bei Raumtemperatur inkubiert, wobei das Ganze alle 5 min milde verwirbelt wurde. Nach Zentrifugation bei 1000 U/min über 5 min wurde das Zell-Pellet mit Adhäsionsassay-Puffer mit einer Zell-Dichte von 4 × 10⁶ Zellen/mL resuspendiert. Der Adhäsions-Assay-Puffer war aus 24 mM Tris-HCl (pH = 7,4), 137 mM NaCl, 27 mM KCl, 4 mM Glucose, 0,1 % Rinderserumalbumin (BSA, Sigma, A9647) und aus 2 mM MnCl₂ zusammengesetzt.
Assayverfahren (Ramos-Zellen)
Die Assay-Lösung, enthaltend jede Testverbindung oder 5 μg/mL anti-CD49d-Monoclonalantikörper (Immunotech, 0764), wurde auf die mit VCAM-1 überzogenen Platten gegeben. Die Endkonzentration jeder Testverbindung betrug 5 μm, 10 μM oder verschiedene Konzentrationen von 0,0001 bis 10 μM, wobei eine Standard-5-Punkt-Serienverdünnung angewandt wurde. Die Assay-Lösung, enthaltend die markierten Ramos-Zellen, wurde auf die mit VCAM-1 überzogenen Platten mit einer Zell-Dichte von 2 × 10⁵ Zellen pro Lochvertiefung gegeben und 1 h lang bei 37°C inkubiert. Die nicht-anhaftenden Zellen wurden durch dreimaliges Waschen der Platten mit Wasch-Puffer beseitigt. Die anhaftenden Zellen wurden durch Zugabe von 1 % Triton X-100 (Nacalai Tesque, 355-01) gebrochen. Freigesetztes CFSC wurde durch Messung der Fluoreszenz in einem Fluorometer (Wallac, ARVO 1420-Multimarkierungszähler) quantitativ bestimmt.
Die Adhäsion der Ramos-Zellen an VCAM-1 wurde durch die Prozent-Bindung analysiert, die mit der Formel berechnet wurde: 100 × (FTS-FBG)/(FTB-FBG) = %-Bindung, worin FTB die Gesamtfluoreszenzintensität aus mit VCAM-1 überzogenen Lochvertiefungen ohne Testverbindung, FBG die Fluoreszenzintensität aus Lochvertiefungen mit anti-CD49d-Monoclonalantikörper und FTS die Fluoreszenzintensität aus Lochvertiefungen sind, die die Testverbindung der vorliegenden Erfindung enthalten.
In vitro-Aktivität
Im Ramos-VCAM-1-Assay sind die beobachteten IC₅₀-Wertebereiche in Tabelle 4 wie folgt angegeben:

C > 10 μM ≥ B > 1 μM ≥ A

Tabelle 4:

Claims

Verbindungen der allgemeinen Formel (I):
worin gilt: R¹ stellt einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten, ungesättigten oder aromatischen cyclischen Rest dar, der 0 bis 3 Heteroatome, die unabhängig aus N, S und O ausgewählt sind, enthalten kann und mit -R^1-1-Z substituiert ist, worin R^1-1 eine Bindung, -O-, -S-, NR^1-2, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 3 Heteroatomen aus O, N oder S darstellt und gegebenenfalls mit aus der Gruppe R1-3 ausgewählten Substituenten substituiert ist, worin R^1-2 gegebenenfalls Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl oder C_2-10-Alkinyl ist, und worin R^1-3 Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 3 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen darstellt, und worin Z -C(O)OR^Z-1, -C(O)NR^Z-2R^Z-3, -SO₂NR^Z-2R^Z-3, -SO(OR^Z-1), -SO₂(OR^Z-1), -P(O)R^Z-1(OR^Z-3) oder -PO(OR^Z-1)(OR^Z-3) darstellt, worin gilt: R^Z-2 ist Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_2-6-Alkenyl, C_2-6-Alkinyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, -C(O)R^Z-4 oder -SO₂R^Z-4, worin R^Z-4 C_1-4-Alkyl, C_2-6-Alkenyl, C_2-6-Alkinyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl ist, und R^Z-1 und R^Z-3 sind unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_2-6-Alkenyl, C_2-6-Alkinyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt und gegebenenfalls mit 1 bis 3 Substituenten aus C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen und aus Cyano substituiert, wobei R¹ gegebenenfalls mit 0 bis 2 Substituenten aus R^1-4, Halogen, Nitro, Amino, Cyano und aus Oxo substituiert ist, worin R^1-4 aus C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Phenyl, Phenoxy, Phenylamino und aus C_3-6-Cycloalkyl ausgewählt ist; R² stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder C_3-7-Cycloalkyl dar und ist gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten substituiert, die unabhängig aus C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Halogen, Cyano, Nitro und aus Oxo ausgewählt sind; R³ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar und ist gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten R^3-1 aus C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, -OR^3-2, -SR^3-2, -NR^3-3R^3-4, -C(O)R^3-2, -S(O)R^3-2, -SO₂R^3-2, -OC(O)R^3-2, -C(O)NR^3-3R^3-4, -NR^3-2C(O)R^3-3, -SO₂NR^3-3R^3-4, -NR^3-2SO₂R^3-3, -NR^3-2C(O)NR^3-3R^3-4, -NR^3-2C(O)OR^3-3, -OC(O)NR^3-3R^3-4, -CO₂R^3-5, Halogen, Cyano, Nitro oder aus Oxo substituiert, worin gilt: R^3-2 stellt Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl dar, R^3-3 und R^3-4 sind unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt, und R^3-5 stellt C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl dar; R⁴ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar und ist gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten R^4-1 aus C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, -OR^4-2, -SR^4-2, -NR^4-3R^4-4, -C(O)R^4-2, -S(O)R^4-2, -SO₂R^4-2, -OC(O)R^4-2, -C(O)NR⁴R^4-4, -NR^4-2C(O)R^4-3, -SO₂NR^4-3R^4-4, -NR^4-2SO₂R^4-3, -NR^4-2C(O)NR^4-3R^4-4, -NR^4-2C(O)OR^4-3, -OC(O)NR^4-3R^4-4, -CO₂R^4-5, Halogen, Cyano, Nitro oder aus Oxo substituiert, worin gilt: R^4-2 stellt Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl dar, R^4-3 und R^4-4 sind unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt, R^4-5 stellt C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl dar; oder R³ und R⁴ bilden zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 4- bis 7-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten Ring mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen, welcher gegebenenfalls mit 1 bis 2 Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe aus C_1-4-Alkyl, Phenyl, Benzyl, C_3-7-Cycloalkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Cyano und aus Oxo, substituiert ist und mit einem 3- bis 7-gliedrigen homo- oder heterocyclischen gesättigten, ungesättigten oder aromatischen Ring kondensiert sein kann; R⁵ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder C_3-7-Cycloalkyl dar und ist gegebenenfalls dreifach mit C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Halogen, Cyano, Nitro oder mit Oxo substituiert; R⁶ stellt Phenyl oder einen 5- bis 6-gliedrigen aromatischen heterocyclischen Rest mit bis zu 3 unabhängig aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar, wobei R⁶ mit -NR^6-2C(O)NR^6-3R^6-4 oder mit -NR^6-2C(S)NR^6-3R^6-4 und ferner gegebenenfalls mit Halogen substituiert ist, worin R^6-2 und R^6-3 unabhängig aus Wasserstoff oder C_1-4-Alkyl ausgewählt sind oder zusammen die Gruppe:
und worin R^6-4 Phenyl darstellt, das gegebenenfalls mit 1 bis 2 Substituenten aus C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy oder aus Cyano substituiert ist, oder R⁶ stellt eine Gruppe:
worin R^6-1 einen Substituent darstellt, ausgewählt aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy oder aus Cyano, und worin R^6-5 einen Substituent darstellt, ausgewählt aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy oder aus Cyano; R⁷ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen dar, wobei R⁷ gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten R^7-1 substituiert ist, worin R^7-1 C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, -OR^7-2, -SR^7-2, -NR^7-3R^7-4, -C(O)R^7-2, -S(O)R^7-2, -SO₂R^7-2, -OC(O)R^7-2, -C(O)NR^7-3R^7-4, NR^7-2C(O)R^7-3, -SO₂NR^7-3R^7-4, -NR^7-2SO₂R^7-3, -NR^7-2C(O)NR^7-3R^7-4, -NR^7-2C(O)OR^7-3, -OC(O)NR^7-3R^7-4, -CO₂R^7-5, Halogen, Cyano, Nitro oder Oxo darstellt, worin R^7-2 Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl darstellt, R^7-3 und R^7-4 unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt sind, und worin R^7-5 C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl darstellt; R⁸ stellt Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_2-10-Alkinyl, C₆- oder C₁₀-Aryl, C_3-7-Cycloalkyl oder einen 4- bis 9-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten heterocyclischen Rest mit bis zu 2 aus O, N oder 5 ausgewählten Heteroatomen dar, wobei R⁸ gegebenenfalls mit 1 bis 3 Resten R^8-1 substituiert ist, worin R^8-1 C_1-4-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, -OR^8-2, -SR^8-2, -NR^8-3R^8-9, -C(O)R^8-2, -S(O)R^8-2, -SO₂R^8-2, -OC(O)R^8-2, -C(O)NR^8-3R^8-4, -NR^8-2C(O)R^8-3, -SO₂NR^8-3R^8-4, -NR^8-2SO₂R^8-3, -NR^8-2C(O)NR^8-3R^8-4, -NR^8-2C(O)OR^8-3, -OC(O)NR^8-3R^8-4, -CO₂R^8-5, Halogen, Cyano, Nitro oder Oxo und R^8-2 Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl darstellen, R^8-3 und R^8-4 unabhängig aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder aus Benzyl ausgewählt sind, und worin R^8-5 C_1-4-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl darstellt; oder R⁷ und R⁸ bilden zusammen einen 4- bis 7-gliedrigen gesättigten oder ungesättigten Ring mit bis zu 2 aus O, N oder S ausgewählten Heteroatomen, welcher gegebenenfalls mit 1 bis 2 Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe aus C_1-4-Alkyl, Phenyl, Benzyl, C_3-7-Cycloalkyl, C_1-4-Alkyloxy, Halogen, Nitro, Cyano und aus Oxo, substituiert und mit einem 3- bis 7-gliedrigen homo- oder heterocyclischen, gesättigten, ungesättigten oder aromatischen Ring kondensiert ist X stellt eine Bindung oder (-CR^X-1R^X-2-)_n dar, worin R^X-1 und R^X-2 unabhängig aus der Gruppe aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, C_2-4-Alkenyl und aus C_2-4-Alkinyl ausgewählt und unabhängig mit 1 bis 2 Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe aus C_1-4-Alkyl, Phenyl, Benzyl, C_3-7-Cycloalkyl, C_1-4-Alkoxy, Halogen, Nitro, Cyano und aus Oxo, gegebenenfalls substituiert sind, und worin n eine ganze Zahl von 0 oder 1 ist; und pharmazeutisch geeignete und zulässige Salze davon.
Verbindungen der allgemeinen Formel (I) gemäß Anspruch 1, worin R¹ einen Phenylring darstellt.
Verbindungen gemäß Anspruch 1 oder 2, worin R^1-1 eine Bindung und Z -COOR^Z-1 darstellen, worin R^Z-1 die oben angegebene Bedeutung hat.
Verbindungen gemäß Anspruch 1, 2 oder 3, worin R⁶ Phenyl darstellt, das mit -NHC(O)NHR^6-4 substituiert ist, worin R^6-4 Methyl oder Trifluormethoxy ist.
Verbindungen gemäß einem der Ansprüche 1 bis 4, worin X eine Methylengruppe darstellt.
Verbindungen gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5, worin einer der Substituenten R³, R⁴, R⁷ und R⁸ Phenyl, das gegebenenfalls mit bis zu 3 Substituenten substituiert ist, die unabhängig aus der Gruppe aus C_1- ₄-Alkyl und Halogen ausgewählt sind, und die übrigen Substituenten Wasserstoff darstellen.
Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (I) gemäß einem der Ansprüche der 1 bis 6, welches die Reaktion von Carbonsäuren der allgemeinen Formel (I'):
oder aktivierter Derivate davon, worin R¹, R², R³, R⁴, R⁷ und R⁸ die oben angegebenen Bedeutungen haben, mit Verbindungen der allgemeinen Formel (I''): R⁶-X-NR⁵H (I''),worin X, R⁵ und R⁶ die oben angegebenen Bedeutungen haben, in inerten Lösungsmitteln umfasst.
Verbindungen gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7 zur Behandlung von Krankheiten.
Verwendung einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 6 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung oder Vorbeugung einer durch Integrine mediierten Bedingung.
Verwendung einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 6 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung oder Vorbeugung von Atherosklerose, Asthma, chronischer zerstörerischer Lungenkrankheit (chronic obstructive pulonary disease = COPD), Allergien, Diabetes, Magenentzündungskrankheiten, multipler Sklerose, Myokardischämie (Blutleere des Herzmuskels), rheumatoider Arthritis, Transplantationsabstoßung sowie weiterer Entzündungs-, Autoimmun- und Immunstörungen.
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend Verbindungen gemäß einem der Ansprüche 1 bis 6 und einen pharmazeutisch zulässigen und geeigneten Träger.
Verbindungen der allgemeinen Formel (I) gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass R¹ ein 1,4-substituierter Phenylring ist.