DE3007402C2

DE3007402C2 - Verfahren zum Reduzieren von Pertechnetat

Info

Publication number: DE3007402C2
Application number: DE3007402A
Authority: DE
Inventors: Clinton Frederick Amersham Buckinghamshire Ruddock
Original assignee: Radiochemical Centre Ltd
Current assignee: GE Healthcare Ltd
Priority date: 1979-02-27
Filing date: 1980-02-27
Publication date: 1986-10-09
Also published as: GB2046000B; US4314986A; GB2046000A; JPS55116630A; JPS6016375B2; DE3007402A1; FR2450234A1; FR2450234B1

Description

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Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zum Reduzieren von Pertechnetat in wäßriger Lösung. Das Technetium-99m-Isotop steht gewöhnlich in Lösung in Form des chemisch stabilen Pertechnetations (TCO4-) zur Verfügung. Wäßrige Lösungen des Pertechnetations werden, häufig mit einer Salzlösung als Elutionsmittel, aus das langlebige Nachbarelement Molybdän-99 enthaltenden Generatoren eluiert Pertechnetat selbst findet nur begrenzte Anwendung beim diagnostisehen Abtasten, weil es nicht leicht Komplexe mit Materialien bildet, die sich in speziellen Körperteilen ansammeln. Es war daher lange allgemeine Praxis, Technetium vom 7wertigen Zustand im Pertechnetat zum 3-, 4- oder 5wertigen Zustand, in dem es leicht Komplexe mit zahlreichen Materialien bildet, zu reduzieren. Zu diesem Zweck sind in den letzten 20 Jahren zahlreiche Reduktionsmittel versucht worden, aber die derzeitigen Reduktionsmittel der Wahl sind Zinn(II)-Salze (z. B. das Chlorid, Fluorid oder Tartrat). Trotz weit verbreiteter kommerzieller Anwendung haben Zinn(II)-Reduktionsmittel eine Reihe schwerwiegender Nachteile:

1. Zinn(II)-Salze sind während der Herstellung, Lagerung und nach der Markierung sowohl hinsichtlich Hydrolyse in Lösung als auch Oxydation instabil. Dies führt zu durch Oxydation ausgelösten Verlusten und zu markierten Verunreinigungen als Ergebnis der Hydrolyse.

2. Strenge Vorsichtsmaßnahmen müssen vom Hersteller ergriffen werden, um die Oxydation minimal zu halten, dazu gehört Stickstoffspülung aller zur Herstellung verwendeten Lösungen und der an den Abnehmer versandten Fläschchen.

zugleichen, neigen die Hersteller zur Verwendung eines sehr großen stöchiometrischen Überschusses. Die Verwendung eines großen Überschusses ist wegen der möglichen Toxizität unerwünscht. 4. Ohne diese Vorsichtsmaßnahmen ist die Lebensdauer der Zinn(II)-Salze als Reduktionsmittel enthaltenden Fläschchen im allgemeinen mäßig und selbst mit ihnen gelegentlich kürzer als erwünscht.

Die DE-OS 29 07 880 beschreibt ein Verfahren zum Reduzieren von Pertechnetat mit Zinn oder einer zinnhaltigen Legierung als Reduktionsmittel in Gegenwart eines Komplexierungsmittels für das reduzierte Technetium. Aus den dort beschriebenen Gründen ist dieses Verfahren der Verwendung eines Zinn(II)-Salzes als Reduktionsmittel sehr überlegen, hat aber selbst einige Nachteile:

a) Metallisches Zinn und seine Legierungen sind so. wie sie von den Herstellern geliefert werden, und nur einer einfachen Entfettungsbehandlung unterzogen, insofern keine ganz zuverlässigen Reduktionsmittel, als, obgleich sie normalerweise das Pertechnetat innerhalb weniger Minuten perfekt reduzierend wirken, gelegentlich eine Materialcharge oder insbesondere ein Teil einer Materialcharge oder insbesondere ein Teil einer Materialcharge als wirksames Reduktionsmittel versagt Man nimmt an, daß die Reduktion eher an der Metalloberfläche als im flüssigen Medium stattfindet und daher durch ein Oxidfilm gehemmt werden kann. Wenngleich dieser Nachteil durch strikte Auswahl und Qualitätskontrolle des Zinns oder seiner Legierung überwunden werden kann, erhöht dies die Kosten und mag für schwach komplexierende Liganden nicht völlig wirksam sein.

b) Die Zuverlässigkeit von Zinn und seinen Legierungen kann durch Aktivieren, z. B. durch Eintauchen in konzentrierte Salzsäure für 1 min und anschließendes Waschen in Äthanol, verbessert werden. Diese Behandlung verbessert zweifellos die Zuverlässigkeit des Metalls bei baldiger Verwendung nach der Behandlung. Für das kommerzielle Arbeiten jedoch mag es nötig sein, das behandelte Material in seiner schließlich abgegebenen Form viele Monate zu lagern, und die Zuverlässigkeit sinkt unter diesen Umständen.

c) Metallisches Zinn und seine Legierungen sind als Reduktionsmittel für Pertechnetat nur in Gegenwart eines Komplexierungsmittels für das reduzierte Technetium wirksam. Das Verfahren arbeitet nicht wesentlich in Abwesenheit eines Komplexierungsmittels und kann daher nicht zur Herstellung beispielsweise von wäßrigen Dispersionen von Technetiumdioxid, TcÜ2, verwendet werden, es sei denn, das Zinn wird in Säure unmittelbar vor seiner Verwendung geätzt.

Aufgabe der Erfindung ist es, diese Mangel zu beseitigen.

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Reduzieren von Pertechnetat, TcO4~ in wäßriger Lösung, wobei man metallisches Zinn oder dessen Legierung als Reduktionsmittel für das Pertechnetat und ein lösliches Salz eines Metalls über Zinn in der elektrochemischen Spannungsreihe als Aktivator für das Zinnmetall-Reduktionsmittel der Pertechnetatlösung zusetzt.

Metalle, die in der elektrochemischen Spannungsrei-

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Quecksilber, Arsen, Antimon, Wismut, Platin und die Platinmetalle. Im Prinzip kann ein Salz eines jeden dieser Elemente, das in der wäßrigen Pertechnetatlösung löslich ist, verwendet werden. In der Praxis gibt es jedoch Beschränkungen für die Wahl, da

a) viele Salze toxisch sind, und selbst wenn sie in so kleinen Mengen verwendet wurden, daß keine toxi-

sehen Effekte zu beobachten wären, besteht eine natürliche Abneigung gegen ihre Verwendung,

b) Silbersalze nicht in Gegenwart von Chloridionen verwendet werden können, und Chloridionen liegen normalerweise in Pertechnetatlösung vor,

c) einige der Metalle starke Komplexe mit bestimmten, für das Technetium verwendeten Komplexierungsliganden bilden oder anderweitig mit diesen Liganden in Wechselwirkung treten können.

Das erfindungsgemäß bevorzugte edle Metall ist Kupfer. Jedes physiologisch annehmbare Kupfer^ I)-SaIz kann verwendet werden, z. B. das Sulfat oder das Chlorid.

Die zum Aktivieren des Zinns als Reduktionsmittel erforderlichen Metallsalzmengen sind sehr gering. Sogar 1 .ng (ausgedrückt als Gewicht des Metallions) kann wirksam sein, wenngleich bevorzugt 10 bis 1000 μg verwendet werden, um die wirksame Reduktion des Pertechnetats in angemessen kurzer Zeit zu gewährleisten. Es gibt keine kritische Obergrenze für die Menge des Metallsalzes, die als Aktivator wirkt. Eine praktische Obergrenze ergibt sich durch die Metallsalzkonzentration, die für eine Injektion in Patienten für diagnostische Erfassung akzeptabel ist.

Die Pertechnetatlösung ist bequemerweise das sterile Eluat aus einem Technetiumgenerator, z. B. eine wäßrige Lösung von Pertechnetat normalerweise in isotonischer Salzlösung. Die genaue Art der Lösung ist unkritisch, und im allgemeinen ist keine Vorbehandlung der Lösung erforderlich.

Zinn kommerzieller oder analytischer Qualität oder sogar 99,999%ig reines Zinn können beim Verfahren mit Erfolg eingesetzt werden. Zinnlegierungen mit anderen Metallen sind zuverlässige und wirksame Reduktionsmittel. Da die zu reduzierende Pertechnetatmenge sehr klein ist, bestimmt der Anteil des Zinns in der Legierung in gewissem Grad die Reduktionsgeschwindigkeit, ist sonst aber unkritisch, und Legierungen mit nur 5% Zinn sind brauchbar. Zinnlegierungen mit Gold, Quecksilber, Silber und Blei (z. B. Lot) sind geeignet, und von diesen sind Legierungen mit 0,5 bis 10 Gew.-% Silber. Rest Zinn, besonders zufriedenstellend und zuverlässig. Legierungen können gegenüber Zinn andere Vorteile als verbesserte Reaktivität und Zuverlässigkeit haben, z. B. bessere mechanische Festigkeit, Schmiedbarkeit und Korrosionsbeständigkeit.

Die Reduktion von Technetium mit dem durch das Edelmetall aktivierten Zinn als Reduktionsmittel erfolgt ebenso gut in Gegenwart wie in Abwesenheit eines Komplexierungsmittels.

Wenn das Gemisch ein Komplexierungsmittel für Technetium enthält, wird das Technetium nach Reduktion vom + 7wertigen Zustand zu einem niedrigerwertigen Zustand an das Kompiexierungsmittel gebunden. Im allgemeinen ist die Art der Bindung nicht genau bekannt, wenngleich angenommen wird, daß dabei ein Elektronenschub vom Komplexierungsmittel (Donorligand) zum Technetium (Akzeptorion) beteiligt ist. In vielen Fallen gibt es einen chromatographischen Hinweis auf mehr als eine Art Tc-Komplex. Die Verbindungen, die so mit Technetium-99m markiert sein können, werden hier Komplexierungsmittel genannt. Eine große Zahl erfindungsgemäß geeigneter Komplexierungsmittel steht für die diagnostische Abtastung verschiedener Körperteile zur Verfügung, wie die folgende nicht erschöpfende Aufstellung andeutet:

1. Gehirnabtastung — Diäthylentriaminpentaacetat (DTPA), Gluconat, Glucoheptonat

2. Nierenabtastung — DTPA, Gluconat, Glucoheptonat, Dimercaptosuccinat (DMSA), Citrat

3. Knochenabtastung — Methylendiphosphonat (MDP), Pyrophosphat.

4. Myokardinfarkt-Abtastung — MDP, Pyrophosphat.

5. Leber-Gallen-Abtastung — N-2,6-(Dimethylphenyl)carbamoylmethyliminodiessigsäure (HIDA), Diäthyl-HIDA.

6. Thrombus-Nachweis in unter der Haut liegenden Blutgefäßen (DVT) — Fibrinogen, Streptokinase, Urokinase.

7. Sichtbarmachung von Blutansammlungen — Humanserumalbumin.

8. Lunge — makroaggregiertes Albumin, Albuminmikrokugeln.

9. Leber — stabilisierte Kolloide, z. B. durch Gelatine, Polyvinylpyrrolidon, Dextran stabilisierter kolloidaler Schwefel.

10. Sonstige — Aminosäuren, Thioglucose, Thiomalat

Wird kein Komplexierungsmittel verwendet, scheint das Pertechnetat zum Technetiumdioxid, TCO2, reduziert zu werden, dessen wäßrige Dispersion mit einem Kolloidstabilisator, wie z. B. Gelatine, Polyvinylpyrrolidon, Carboxymethylcellulose oder Dextran, stabilisiert werden kann. Ein Kolloidstabilisator ist für die Reduktion des Pertechnetats nicht notwendig, kann aber dazu beitragen, die Aggregation der Teilchen des reduzierten Technetiums zu verhindern.

Da die Menge an in das Gemisch eingeführtem Pertechnetat sehr klein ist, ist die Menge des Komplexierungsmittels oder des Kolloidstabilisators und des vorliegenden metallischen Reduktionsmittels notwendigerweise stark im Überschuß zur stöchiometrischen Menge und unkritisch. Mengen von 1 mg bis 1 g Komplexierungsmittel oder Kolloidstabilisator sind durchaus zufriedenstellend für die Handhabung des Produkts einer Elution, z. B. von 0,5 bis 50 ml und typischerweise 1 bis 15 ml eines kommerziellen Technetiumgenerators. Die Oberfläche des anwesenden metallischen Reduktionsmittels bestimmt die Geschwindigkeit der Reduktion des Pertechnetats; es sollte genügend Zinn verwendet werden, um die Reduktion in angemessen kurzer Zeit zu gewährleisten. Im allgemeinen sind 0,1 bis 10 cm² ausreichend; beispielsweise wurde gefunden, daß ein Stück körnigen Zinns analytischer Reagensqualität (99,9%) mit einem Gewicht von 100 bis 200 mg oder ein Stück Zinnfolie analytischer Qualität mit den Abmessungen 0,5 cm χ 1 cm χ 0,25 mm ausreicht, um vollständige Reduktion von 100 mCi Pertechnetat in 5 bis 10 min zu bewirken.

Einer der Vorteile der Verwendung metallischen Zinns anstelle eines Zinn(II)-Salzes als Reduktionsmittel für das Pertechnetat liegt darin, daß die erhaltene Lösung keine wesentliche Menge an Zinn(II)ionen enthält. Damit liegt der pH des erfindungsgemäß entstandenen Gemisches vorzugsweise im Bereich von 3 bis 12, da außerhalb dieses Bereichs Zinn in wäßrigen Medien bis zu einem gewissen Grad löslich ist. Die Art des Edelmetallsalzes kann einige weitere Einschränkungen auferlegen; so sind beispielsweise Kupfersalze im allgemeinen in wäßrigen Medien unter alkalischen Bedingungen nicht löslich. Der pH des Gemischs kann z. B. mit Hilfe eines festen Puffers oder durch Zugabe von Säure oder Alkali zur Pertechnetatlösung bis zu einem Wert, der für

das zu verwendende Komplexierungsmittel optimal ist, eingestellt werden.

Zur Herstellung diagnostischer Abtastmittel werden Reagensgemische häufig in Flaschen geliefert, die jeweils mit einem durchstoßbaren, sterilisierbaren Ver-Schluß verschlossen sind und Einzeldosen der Reagentien in trockenem Zustand enthalten, die durch aseptische Injektion der aus einem Generator eluierten Pertechnetatlösung aktiviert werden sollen. Erfindungsgemäß k5nnen das Metallsalz und gegebenenfalls das Komplexierungsmittel für Technetium oder der Kolloidstabilisator in jede einzelne Flasche eindosiert werden, entweder als Lösung oder Dispersion, worauf gefriergetrocknet wird, oder durch trockne Eingabe, z. B. als Pulver oder Tablette. Das Metall kann in passender Form vorliegen, wie als Folie,. Granulat, Draht oder Schrot, und kann im Kolben lose sein. Die Verwendung losen Metallpulvers ist nicht zu empfehlen, und zwar aufgrund der Gefahr, daß das Pulver von der zur Entnahme der diagnostischen Abtastlösung aus dem Behälter verwendeten Injektionsspritze aufgezogen werden kann. Andererseits kann das Metall als Überzug vorgelegt werden, z. B. durch Überziehen der Innenwände des Behälters oder eines inerten Trägers, so können z. B. inerte Plastikkugeln, in geeigneter Weise mit 0,3 bis 1,0 cm Durchmesser, zuerst elektrisch leitend gemacht werden, z. B. durch Vakuumaufdampfen von Gold, und dann mit Zinn galvanisch überzogen werden. Oder aber das Metall kann von dem durchstoßbaren sterilisierbaren Verschluß getragen oder mit diesem verbunden werden, wobei dann ein Umdrehen des Behälters nötig wäre, um das Gemisch zu bilden und das Pertechnetat zu reduzieren.

Die bevorzugte Anordnung besteht darin, das Zinn oder die Zinnlegierung an einem Stück flexibler, ehemisch inerter Folie, z. B. aus rostfreiem Stahl oder einem Kunststoffmaterial, wie Celluloseacetat, zu befestigen und die Folie in gekrümmter Anordnung an der Innenwand der Flasche entlang anzuordnen. Beispielsweise kann ein Stück Zinnfolie mit einem Kleber an die flexible Folie geklebt werden, oder Zinnmetall kann auf die Folie, wenn nötig über ein Zwischenmetall, galvanisiert werden. Die Folie selbst sollte ausreichend elastisch sein, um durch Reibung an der Flaschenwand in gekrümmter Anordnung gehalten zu werden. Solche An-Ordnung des Zinns in der Flasche hat Vorteile. Erstens kann es nahe dem Flaschenboden angeordnet werden, so daß es in der Pertechnetatlösung eingetaucht ist, wenn die Flasche steht; oder es kann nahe dem Flaschenhals angeordnet werden, so daß es in die Pertechnetatlösung nur dann eintaucht, wenn die Flasche gekippt wird; dies kann nützlich sein, wenn das Metallsalz als Flüssigkeit abgegeben und in der Flasche lyophilisiert werden soll, ohne Berührung mit dem Zinn zu erlauben, oder wenn das Zinn mit der Pertechnetatlösung nur für begrenzte Zeit in Berührung gelangen soll. Zweitens ist es aus dem Weg geschafft, so daß keine Gefahr besteht, daß ein Techniker, der eine Injektionsspritze benützt, um Flüssigkeit abzuziehen, die Nadel in Metall oder Kunststoffmaterial sticht

Das Zinn oder die Zinnlegierung sollte entfettet sein, um es benetzbar zu machen. Es kann auch durch Entfernen der Oxidschicht aktiviert werden, z. B. durch Eintauchen in konzentrierte Salzsäure und anschließendes Waschen in Äthanol. Gute Ergebnisse können jedoch ohne Aktivierung erreicht werden.

Legt man den Inhalt des Behälters im festen Zustand vor, führt dies zu einer Verbesserung der Zuverlässigkeit und möglicherweise auch der Lebensdauer. Selbst wenn das Metallsalz in direktem Kontakt mit dem reduzierenden Zinn steht, finden kaum chemische Reaktionen im festen Zustand und Korrosion oder Oxydation des Metalls in wesentlichem Umfang statt, wird jedoch ein festes Gemisch durch Gefriertrocknen einer Lösung in dem Behälter hergestellt, sollte das metallische Zinn entweder ohne Kontakte während des Gefriertrocknens oder nach dem Abschluß des Gefriertrocknens zugesetzt sein.

Auch andere Materialien können im Behälter enthalten sein. Ein Puffer kann zur Steuerung des pH des flüssigen, durch Zugabe der Pertechnetatlösung gebildeten Gemische auf einen gewünschten Wert im Bereich von 3 bis 12, vorzugsweise 3 bis 7, vorgesehen sein, geeignete Puffer sind physiologisch akzeptable Materialien, die auf dem Fachgebiet bekannt sind, wie Phosphat, Tris-Puffer, Bicarbonat, Acetat, Konservierungsmittel und Antioxydantien können verwendet werden. Der geschlossene Behälter kann anstelle von Luft Stickstoff oder ein anderes Inertgas enthalten. Wenn der Technetiumkomplex lipophil ist, kann es nützlich sein, ein mit Wasser mischbares, organisches Lösungsmittel, wie Äthanol, zuzusetzen; dies sollte jedoch zusammen mit oder kurz vor der Pertechnetatlösung zugesetzt werden.

Nur ein einziges Stück Metall muß verwendet werden; natürlich können mehr als ein Stück verwendet werden, damit wird aber kein Vorteil erreicht, ob nun die Stücke in elektrischem Kontakt gehalten werden oder nicht. Vorzugsweise wird ein frisches Stück Metall für jede Reduktion verwendet; wird ein Stück Metall wiederholt verwendet, kann Oberflächendesaktivierung ein Problem werden.

Die Erfindung hat folgende Vorteile gegenüber der herkömmlichen Reduktionsmethode unter Verwendung von Zinn(II)-Salzen:

1. Probleme der Zinn(II)-Salz-Instabilität während der Herstellung, Lagerung und nach dem Markieren werden beseitigt, indem sowohl die Verluste durch Oxydation als auch markierte Verunreinigungen durch Hydrolyse verringert werden.

2. Die Arbeitsweisen zur Herstellung werden vereinfacht, z. B. durch die Verwendung von Metallschnitzeln oder überzogenen Ampullen und als Pulver abgegebenen Bestandteilen.

3. Es ist nicht mehr nötig, wenngleich es von Vorteil sein kann, die Ampullen vor dem Sterilisieren mit Stickstoff zu spülen.

4. Die Toxizität ist herabgesetzt, weil das einzig in Lösung gebrachte Zinn die winzige Menge ist, die beim Reduzieren des Pertechnetats oxydiert wird. Da es nicht erforderlich ist, einen großen Überschuß Zinn(II)-Salz in Lösung zum Kompensieren von Verlusten zu haben, müssen auch keine zusätzlichen Mengen Komplexierungsmittel vorliegen, um das Zinn(II)-Salz zu komplaxieren, und daher können von allen Bestandteilen kleinere Mengen verwendet werden.

5. Die Lebensdauer der Diagnosesätze zum Abtasten kann verbessert werden.

*>. Das metallische Reduktionsmittel kann durch v-Bestrahlung ohne Verschlechterung sterilisiert werden, im Gegensatz zu bestimmten Zinn(ll)-Salzen.

7. Die Markierungstechnik kann über weiten pH-Bereich und insbesondere in alkalischer Lösung vorgenommen werden, wodurch die Möglichkeit des

Beispiel 2

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Markierens neuer Moleküle gegeben ist.
8. Kein Zinn(II)-Ion ist in vivo vorhanden, das einen späteren Test stören könnte.

Während die Erfindung als rascher, zuverlässiger und einfacher Weg zu allen Technetiumkomplexen von Wert ist, die für das diagnostische Abtasten verwendet werden, ist sie von besonderem Vorteil auf folgenden Gebieten:

a) Wo die Zinnverbindung mit dem Komplexierungsmittel in Wasser unlöslich ist, z. B. Alumion. In solchen Fällen könnten Zinn(II)-Salze nicht leicht als Reduktionsmittel verwendet werden.

b) Wo die Reaktion zwischen dem reduzierten Technetium und dem Komplexierungsmittel im Vergleich zur Geschwindigkeit der Hydrolyse und/ oder Oxydation eines alternativen Zinn(II)-Salzes als Reduktionsmittel langsam ist, z. B. Zuckersäure und Zucker im allgemeinen. In solchen Fällen führt die Verwendung von Zinn(II)-Salzen als Reduktionsmittel leicht zur Bildung einer kolloidalen Dispersion nicht-reaktiven Technetiumdioxids.

c) Wo der komplexierende Ligand schwach ist und in Abwesenheit eines Überschusses des Komplexierungsmittels, z. B. Gluconat, leicht der Hydrolyse unterliegt

Die folgenden Beispiele veranschaulichen die Erfindung. Ausgenommen, wo angegeben, war das metallisehe Reduktionsmittel ein Stück Zinnfolie von 5x10 mm und 0,1 mm Dicke, 99,5% rein, das vor der Verwendung entfettet aber nicht aktiviert wurde. Diese Laborversuche wurden nicht unter sterilen Bedingungen durchgeführt und in einigen Fällen erfolgt die pH-Einstellung unmittelbar nach Zugabe der Pertechnetat-Iösung. Für das kommerzielle Arbeiten jedoch würde der Puffer normalerweise in trockener Form zusammen mit dem Komplexierungsmittel und dem metallischen Reduktionsmittel vorgelegt In allen Fällen war die Pertechnetatlösung das isoionische Salzlösungseluat aus einem Technetium-gSm-Generator. Die Messung des Ausmaßes der Komplexbildung erfolgte dünnschichtchromatographisch an Kieselgel durch Elution zuerst mit Methylethylketon und dann mit isotonischer Salzlösung.

Beispiel 1

1.5 mg Thioäpfelsäure wurden in 1 ml Pertechnetatlösung gelöst, 1 Tropfen Kupfer(II)sulfat-Lösung (mit 11 ug Kupfer(Il)ionen) wurde zugesetzt, und der pH des Gemisches wurde mit Natriumbicarbonat auf 4,0 eingestellt Ein Stück Zinnfolie von 0,5 cm² wurde zugesetzt, und das Gemisch wurde 15 min stehengelassen. Die Analyse zeigte vollständige Reduktion des Pertechnetats mit 97% Komplexbildung.

Beispiel 3

0,5 mg Arsenazo wurden in 1 ml Pertechnetatlösung gelöst. Ein Tropfen Kupfer(II)sulfat-Lösung (mit 11 μg Kupfer(II)ionen) wurde zugesetzt und der pH mit Schwefelsäure auf 4,0 eingestellt. Ein Stück Zinnfolie mit 0,5 cm² wurde zugegeben und das Gemisch 30 min stehengelassen. Die Analyse zeigte einen Rückstand von 4% Pertechnetat und 84% Komplexbildung.

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Beispiel 4

6, 4 mg Natriumgluconat wurden in 1 ml Pertechnetatlösung gelöst, und 1 Tropfen Kupfer(II)sulfat-Lösung (mit 378 μg Kupfer(II)ionen) zugesetzt. Ein Stück Zinnfolie wurde zugegeben, und das Gemisch wurde 15 min stehengelassen. Die Analyse zeigte vollständige Reduktion des Pertechnetats und 97% Komplexbildung.
Bei einem Wiederholungsversuch zeigte die Analyse vollständige Reduktion des Pertechnetats und 98% Komplexbildung.

Zwei Kontrollversuche ohne Kupfersulfatzusaz führten zu 7 und 8% Komplexbildung.

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2 mg N-Acetyl-L-cystein wurden in 1 ml Pertechnetatlösung gelösL E^;n Tropfen Kupfer(II)suIfat-Lösung (mit 11 ug Kupfer(II)ionen) wurde zugesetzt, und der pH wurde mit Natriumbicarbonat auf 3,0 eingestellt Ein Stück Zinnfolie von 0,5 cm² wurde zugegeben und das Gemisch 15 min stehengelassen. Die Analyse zeigte vollständige Reduktion des Pertechnetats und 97% Komplexbildung.

Beispiel 5

Der Versuch des Beispiels 4 wurde unter Verwendung einer verdünnteren Kupfersulfatlösung wiederholt, so daß der Tropfen nur 50 μg Kupferionen enthielt. Die Analyse eines Doppelversuchs zeigte 97 und 98% Komplexbildung. Zwei Kontrollversuche, unter identischen Bedingungen durchgeführt, aber ohne Kupfersulfat, zeigten 54 und 18% Komplexbildung.

Der Versuch wurde unter Verwendung einer noch verdünnteren Kupfersulfatlösung wiederholt, so daß der Tropfen nur 11 μg Kupferionen enthielt Die Analyse von Doppelversuchen zeigte 97 und 98% Komplexbildung, aber diesmal war das Pertechnetation in beiden Präparaten nachweisbar.

Beispiel 6

Dieses Beispiel zeigt die Leistung des erfindungsgemäßen Verfahrens ohne einen Komplexbildner.

Ein Tropfen Kupfersulfatlösung (mit 50 μg Kupfer(II)ionen) wurde mit 0,5 ml Pertechnetatlösung gemischt, und 1 Stück Zinnfolie wurde zugegeben. Nach 15 min wurde die Lösung entfernt und analysiert Die Zinnfolie wurde gespült und die auf ihr verbliebene Restaktivität wurde gemessen. Die Lösung enthielt kein Pertechnetat, sondern nur Aktivität, die sich wie die von Technetiumdioxid verhielt Die Zinnfolie hielt 4,5% der Gesamtaktivität zurück.

Ein Zweitversuch lieferte das gleiche Ergebnis, mit der Ausnahme, daß die mit der Zinnfolie verbundene Restaktivität nur 2,4% betrug.

Bei einem weiteren Versuch wurde 1 Tropfen Kupfersulfatlösung mit 11 μg Kupfer(II)ionen mit 2 ml Pertechnetatlösung gemischt und 1 Stück Zinnfolie zugegeben. Nach 15 min wurde die Lösung analysiert; Pertechnetat lag nicht mehr vor, lediglich Aktivität, die sich wie die von Technetiumdioxid verhielt Diese Lösung wurde Ratten intravenös injiziert bei rascher Aufnahme in Leber und Milz. Die Sektion nach 2 h zeigte, daß 95% der Aktivität in der Leber waren.

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Beispiel 7 gen waren wenigstens 1 h nach Abtrennen vom reduzie

renden Zinnmetall stabil, wenngleich der Gluconatkom-

Zwei Ampullen wurden hergestellt, die jeweils plex nach dieser Zeitspanne Zeichen von Zersetzung 19,3 mg Natriumgluconat und 11 μg Kupfer(II)ionen als zeigte. Kupfersulfat enthielten. Der Ampulleninhalt wurde durch Vakuumverdampfen getrocknet. Ein Stück Zinnfolie wurde in jede Ampulle gegeben. Eine Ampulle wurde in Luft verschlossen, die andere evakuiert, mit Stickstoff gefüllt und dann verschlossen. Die Ampullen wurde 3 Tage stehengelassen, dann wurden jeweils 3 ml Pertechnetatlösung zugegeben. Nach 15 min wurde jeder Ampulle ein Probe zur Analyse entnommen. Beide Proben zeigten vollständige Reduktion des Pertechnetats, gekoppelt mit Komplexbildung. Darauf wurde der Inhalt jeder Ampulle auf Kupfer- und Zinnkonzentrationen in Lösung analysiert. Die Analysen erfolgten nach 15 min, 1 h, 2 h, 4 h und 6 h, alle zeigten 1 bis 2 TpM Kupfer und 2 bis 3 TpM Zinn in wäßriger Lösung.

Beispiel 8

Drei Ansätze mit 300 Flaschen wurden hergestellt, jede Flasche enthielt ein gefriergetrocknetes Gemisch aus 15 mg Calciumgluconat und 15 μg Cu²⁺ als Kupfersulfat. In jede Flasche von Ansatz 1 wurde ein flexibler Streifen aus Celluloseacetat als Träger für 1 Stück Zinnmetallfolie von etwa 5 χ 20 mm gegeben. In jede Flasche von Ansatz 2 wurde ein tropfenförmiges Pellet Zinnmetall mit einem Gewicht von etwa 150 mg gegeben. In jede Flasche von Ansatz 3 wurde entweder eine Zinnfolienscheibe von 6 mm Durchmesser oder ein Stück verzinnter Kupferdraht von etwa 2 mm Durchmesser χ 10 mm gegeben.

Fläschchen eines jeden Ansatzes wurden durch Zugabe von 5 ml eines Tc-99m-Generatoreluats zum Rekonstruieren der gefriergetrockneten Komponenten und Stehenlassen der aktiven Lösung in Berührung mit dem reduzierenden Zinnmetall für wenigstens 15 min getestet. Proben der Lösung wurden dünnschichtchromatographisch analysiert, um das Ausmaß der Bildung des Tc-99m-markierten Gluconatkomplexes zu messen, und durch intravenöse Injektion in Ratten zur Ermittlung der Bioverteilung analysiert

Über einen Zeitraum von mehr als zwei Monaten zeigten alle getesteten 25 Flaschen reproduzierbar hohe Komplexbildung (über 95%) und identische Verteilung im lebenden Tier unabhängig von der physikalischen Form des reduzierenden Zinnmetalls. Die Analyse der Lösungen auf Sn²⁺ und Cu²⁺ durch Atomabsorptionsspektroskopie zeigte, daß die Sn²⁺-Werte von etwa 1 TpM bei 15 min auf etwa 10 TpM nach 8 h und auf über 30 TpM nach 48 bis 170 h seit Zugabe des Generatoreluats stiegen, während die Cu²⁺-Werte bei 2—3 TpM nahezu konstant blieben.

55 Beispiel 9

1 ml-Teilmengen der Lösung, die 1,2 χ 10-² molar an Methylendiphosphonsäure, Zitronensäure, Natriumgluconat oder ÄDTA waren und wenigstens 10 μg Cu²⁺ enthielten, zeigten reproduzierbare gute Markierung (über 90%) nach Zugabe von 2,5 ml Tc^m-Generatoreluat und eines Stücks Zinnmetallfoiie von wenigstens 0,2 cm² Oberfläche. Die Markierung von Methylendiphosphonsäure und Zitronensäure war vollständiger als für Gluconat oder ÄDTA für jede gegebene Oberfläche der Zinnfolie.

Unterteilte Mengen der markierten Komplexlösun-

Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren zum Reduzieren von Pertechnetat, TcC>4~ in wäßriger Lösung, dadurch gekennzeichnet, daß man metallisches Zinn oder dessen Legierung als Reduktionsmittel für das Pertechnetat und ein lösliches Salz eines Metalls über Zinn in der elektrochemischen Spannungsreihe als Aktivator für das Zinnmetall-Reduktionsmittel der Pertechnetatlösung zusetzt

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man ein Kupfersalz als Aktivator für das Zinnmetall-Reduktionsmittel verwendet

3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch ge- is kennzeichnet, daß man ein Komplexierungsmittel für das reduzierte Technetium oder einen Kolloidstabilisator zusetzt

4. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man den pH-Wert des Gemisches bei 3 bis 7 hält