DE2938339B2 - Verfahren zur kontinuierlichen Vergärung von wässrigen Maischen für die Gewinnung von Alkohol und Hefe-Biomasse - Google Patents
Verfahren zur kontinuierlichen Vergärung von wässrigen Maischen für die Gewinnung von Alkohol und Hefe-BiomasseInfo
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur kontinuierlichen Vergärung von wäßriger Maische für die
Gewinnung von Alkohol und Hefe-Biomasse in einem Fermenter und in einer Trenn- und Rückführstufe,
wobei in den Fermenter frische, wäßrige Maische, Gärhefe, ein Nährmedium-Gemisch und Sauerstoff-enthaltenes
Gas kontinuierlich eingeführt werden. Als Produkt wird Alkohol-enthaltende, enthefte vergorene
Maische ausgeschleust.
Die kontinuierliche Herstellung von Äthylalkohol wird in letzter Zeit interessant, da sie eine weitere
Energiequelle erschließt und für größere Industrieeinheiten die Vorteile einer gleichmäßigen Produktion,
einer einfacheren Steuerung und eine mögliche Produktivitätssteigerurig durch Vermeiden von Reinigungs-
und Anstellzeiten erbringt. Für die kontinuierli-
ehe Gewinnung von Alkohol ist es erforderlich, daß den
Hefemikroorganismen ausreichend zuckerhaltiges Substrat, sogenannte Maische, zur Verfügung steht und die
günstigsten Gärbedingungen eingehalten werden.
Konventionell wurde bei der technischen Herstellung von Äthylalkohol mit Hilfe von Fermentation durch
Hefen im Chargenbetrieb gearbeitet, d. h. die umzusetzenden zuckerhaltigen Substrate wurden in wäßriger
Lösung in einem Gärbehälter eingesetzt, mit Gärhefe versetzt und sich selbst überlassen. Hierbei setzten die
Hefemikroorganismen den im Substrat enthaltenen Zucker gemäß der Gleichung
C6H2O6=2 C2H5OH + 2 CO2+22 Kcal
= 100kgHexose
= 51,15 kg Äthanol+48,86 kg CO2
zu Äthyalkohol und Kohlendioxyd um. Da dieser Prozeß
anaerob abläuft, ist keine Belüftung des Systems erforderlich. Nach vollständiger Umsetzung des Zukkers
wird der Gärbehälter abgeerntet und der Inhalt einer Destillation unterworfen, wobei das gewünschte
Äthanol anfällt. Technische Verbesserungen, wie die gezielte Einbringung der Gärhefe, eine konstante
Temperaturhaltung mittels Kühlung, eine pH-Wertregelung, die Zugabe von mikrobiologischen Nährstoffen
sowie eine mechanische Durchmischung des Gärsystems erbrachten Ausbeutesteigerungen und eine
Beschleunigung der Umsetzung.
Da man im Chargenbetrieb nur mit geringen Industrieeinheiten arbeiten kann und keine gleichmäßige Produktion erzielt, ging man mehr und mehr zur kontinuierlichen Vergärung von wäßrigen Maischen über und kam dabei zu verschiedenen Verfahren. So ging man mehr und mehr dazu über, daß Verfahren angewendet wurden, die eine räumliche und zeitliche Trennung von Gärprozessen, also Katalysatorwirkung der Hefe auf der einen Seite und Aufrechterhaltung des aeroben Hefemetabolismus, also Hefewachstum und Regeneration auf der anderen Seite anwendeten. Dies führte zwangsläufig zu mehrstufigen Verfahren. In den ersten Stufen wird, bei Sauerstoffüberschuß die Zellvermehrung der Hefen betrieben. In den nachfolgenden Stufen steht die anaerobe Umsetzung von Zucker zu Alkohol im Vordergrund; in einer letzten Stufe wird angestrebt alles noch erhaltene Restsubstrat quantitativ umzusetzen und eine maximale Alkoholkonzentration zu erreichen. Notgedrungen führt ein derartiges Vorgehen dazu, daß in den einzelnen Stufen jeweils die eine oder die andere zulässige Randbedingung über oder unterschritten wird, was zur Schädigung des Biokatalysators und/oder zu einer Verschlechterung der Reaktion führt.
Da man im Chargenbetrieb nur mit geringen Industrieeinheiten arbeiten kann und keine gleichmäßige Produktion erzielt, ging man mehr und mehr zur kontinuierlichen Vergärung von wäßrigen Maischen über und kam dabei zu verschiedenen Verfahren. So ging man mehr und mehr dazu über, daß Verfahren angewendet wurden, die eine räumliche und zeitliche Trennung von Gärprozessen, also Katalysatorwirkung der Hefe auf der einen Seite und Aufrechterhaltung des aeroben Hefemetabolismus, also Hefewachstum und Regeneration auf der anderen Seite anwendeten. Dies führte zwangsläufig zu mehrstufigen Verfahren. In den ersten Stufen wird, bei Sauerstoffüberschuß die Zellvermehrung der Hefen betrieben. In den nachfolgenden Stufen steht die anaerobe Umsetzung von Zucker zu Alkohol im Vordergrund; in einer letzten Stufe wird angestrebt alles noch erhaltene Restsubstrat quantitativ umzusetzen und eine maximale Alkoholkonzentration zu erreichen. Notgedrungen führt ein derartiges Vorgehen dazu, daß in den einzelnen Stufen jeweils die eine oder die andere zulässige Randbedingung über oder unterschritten wird, was zur Schädigung des Biokatalysators und/oder zu einer Verschlechterung der Reaktion führt.
In der DE-AS 23 54 556 wird ein kontinuierliches Verfahren vorgeschlagen, bei dem in wechselnder Folge
Alkohol und Hefe-Biomasse erzeugt werden. Dabei ist die in den Fermenter eingeleitete Maische so zu
dosieren, daß dabei eine Konzentration an vergärbarem Substrat, gerechnet als Glukose, von höchstens 5 g/l
resultiert. Bei vorwiegender Alkoholerzeugung wird die Zufuhr von Sauerstoff so dosiert, daß 1 g im Fermenter
befindliche Hefe 0,2 — 5 mg Sauerstoff/h verbrauchen kann und bei der Herstellung von Hefebiomasse wird
die Zufuhr von Sauerstoff auf höchstens 400 mg/g produzierte Hefetrockensubstanz dosiert. Dieses Verfahren
weist eine große Bandbreite der Sauerstoffzufuhr, das bis zu 25fache, bei der Gärung und eine hohe
Sauerstoffzugabe bei der Hefeerzeugung auf. Es wird nicht gewährleistet, daß für die Vergärung die optimale
Sauerstoffkonzentration an allen Stellen vorhanden ist.
Die bisherigen bekannten Verfahren basierten auf der Vorstellung, daß Hefebiomasse-Erzeugung und Vergärung
zu Alkohol als zwei unterschiedliche Reaktionsabläufe in zeitlicher Folge ablaufen müssen.
Überraschenderweise wurden gefunden, daß gemäß der Erfindung das Verfahren zur kontinuierlichen
Vergärung von wäßriger Maische für die Gewinnung von Alkohol und Hefe-Biomasse in einem Fermenter
und einer damit zusammenhängenden Trennstufe, wobei in den Fermenter wäßrige Maische, Gärhefe,
NährmediuiTigemisch und Sauerstoff-enthaltendes Gas
eingeführt werden derart durchgeführt werden kann, daß die Konzentration der zugeführten Maische in
bezug auf den Zuckergehalt dem erreichbaren Umsetzungsgrad zu Hefe und Alkohol entspricht, so daß die im
Fermenter meßbare, freie Zuckerkonzentration den Wert 0,1 Gew.-% nicht übersteigt,
im Fermenter durch bekannte Mittel eine homogene, definierte Mischung eingestellt wird, die aktive Hefekonzentration innerhalb des Reaktionsraumes durch Rückführung von alkohol- und hefehaltigem Medium aus der Trennstufe zwischen 100 und 110% des spezifischen Vergärungsgrades gehalten wird, Sauerstoff-enthaltendes Gas homogen verteilt und reguliert eingeführt wird, und eine mittlere freie Sauerstoffkonzentration von 1 ppm in der Flüssigkeitsphase nicht überschritten wird,
im Fermenter durch bekannte Mittel eine homogene, definierte Mischung eingestellt wird, die aktive Hefekonzentration innerhalb des Reaktionsraumes durch Rückführung von alkohol- und hefehaltigem Medium aus der Trennstufe zwischen 100 und 110% des spezifischen Vergärungsgrades gehalten wird, Sauerstoff-enthaltendes Gas homogen verteilt und reguliert eingeführt wird, und eine mittlere freie Sauerstoffkonzentration von 1 ppm in der Flüssigkeitsphase nicht überschritten wird,
eine flokulierende untergärige Gärhefe eingesetzt wird, und daß aus der Trennstufe entheftes, alkoholhaltiges
Medium aus dem in Kreislauf befindlichen Hefe- und Alkohol-enthaltenden Medium abgezogen wird.
Nach einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung kann das Sauerstoff-enthaltene Gas Luft sein.
Eine vorteilhafte Weiterbildung ergibt sich, wenn die Verweilzeit des Hefe- und Alkohol-enthaltenden Mediumanteils
in der Trennstufe nicht mehr als 30 Minuten, vorzugsweise 5—15 Minuten beträgt.
Erfindungswesentlich ist, daß nach der neuen Lehre der Prozeß der kontinuierlichen Vergärung von
Maische so gefahren wird, daß gleichzeitig bewußt und gesteuert Hefe-Biomasse regeneriert wird. Es wurde
gefunden, daß bei richtiger Einstellung der Randbedingungen im Fermenter die Neubildung von voll aktiver
und sich teilender Hefezellen und die Gärung quasi gleichzeitig ablaufen. Entgegen der Meinung der
Fachwelt hat der minimale Sauerstoffüberschuß von maximal 1 ppm keinerlei negative Auswirkung auf den
Gärprozeß. Die Hefezellen verbrauchen den vorhandenen Sauerstoff derart bevorzugt zu ihrem Aufbau und
ihrer Teilung, daß er der gleichzeitigen Vergärung nicht schadet. Da intrazellulär wegen der limitierten Sauerstoffzufuhr
auch anaerobe Bedingungen herrschen, aber gleichzeitig ausreichend Maische vorliegt, findet gleichzeitig
Vergärung der Maische statt.
Durch die Dosierung der Zugabe von zuckerhaltigen Rohstoffen, Sauerstoff und Frischhefe und exakter
Einhaltung der Randbedingungen wird bei gleichzeitigem Ablauf der Reaktionen eine optimale Produktion
erzielt. Mittels der gesteuerten Hefeproduktion wird eine bewußte Limitierung des Sauerstoffes erreicht und
damit auch eine gezielte Alkoholerzeugung der Hefezellen. Der im Vergleich mit bekannten Verfahren
niedrige Alkoholgehalt in dem Umlauf schädigt in keiner Weise die Hefezellen. Aus dem Fermenter wird
die an Zucker verarmte alkoholreiche und mit Hefe vermischte Maische abgeleitet in die Trennstufe.
Das Verfahren wird durch die folgenden Beispiele in Verbindung mit der Abbildung beschrieben, die ein
Fließschema einer bevorzugten Aust'ührung.sform darstellt
In der Nährlösungsvorlage 1 von ca. 3001 wird eine
Rübenmelasse-Nährlösungs-Maische folgender Zusammensetzung zubereitet:
Anteile pro 1:
250 g Rübenmelasse
2 g (NH4J2SO4
032 g KH21PO4
0,5 g CaCI2
0,12 g MgSO4
800 ml Leitungswasser
Der pH-Wert wird mittels Zugabe von H2SO4 auf 4
eingestellt Als Mikroorganismen wird Sacharomyces uvarum eingesetzt. Nach einer Anwachsphase von Hefe
im Fermenter 2 von ca. 1 1 Inhalt wird dieser Fermenter kontinuierlich über Leitung 3 mit Maische aus der
Nährlösungsvodage 1 beschickt. Die Nährlösungszugabe
erfolgt am Fermenterkopf. Gleichzeitig wir der Fermenter mit 0,05 vvm (=3 l/h) Luft über Leitung 4
begast Der Fernienter 1 weist einen dreistufigen Blattrührer 5 mit Kopfantrieb, eine nicht eingezeichnete
pH-Wert-Messung und eine Temperaturregeleinrichtung 6 auf. Es wird eine Fermentationstemperatur von
35° C eingestellt und eingehalten.
Nach einer Anlaufphase der Gärung wird mit einer Rate von 4 l/h die vergorene Hefe- und alkoholhaltige
Würze kontinuierlich über das interne Überlaufrohr 7 und Leitung 8 in den Trennbehälter 9 mit einem
Volumen von 300 ml abgezogen. Der Trennbehälter weist ein langsam drehendes Rührwerk auf. Die sich an
der Oberfläche der Füllung bildende Klarphase mit geringem Hefeanteil wird über einen seitlich angebrachten
und vertikal verschiebbaren Stutzen der gleichzeitig Standkontrolle ist, mit einer Rate von 1 l/h über Leitung
10 in ein 151 großes Auffanggefäß 11 geleitet. Der Alkoholgehalt der Klarphase beträgt 6,5 Vol.-%, was
einer theoretischen Ausbeute von über 95% des in der Nährlösung eingesetzten Zuckers entspricht.
Die im Trennbehälter 9 vorliegende Trübphase mit einem praktisch gleich hohen Alkoholgehalt wird
mittels einer Membranpumpe in einer Rate von 3 l/h in den Fermenter 2 zurückgeführt.
Die in der Klarphase noch enthaltende Hefe setzt sich im Auffanggefäß 11, das reichlich bemessen ist, ab und
wird von Zeit zu Zeit entfernt. Diese Hefe ist die Überschußhefe, die durch Hefewachstum entstanden ist.
Aus dem Auffanggefäß 11 wird nur hefefreie Würze zur
Alkoholaufbereitung abgezogen.
Die Hefekonzentration im Kreislaufsystem, d. h., im Fermenter 2 und im Trennbehälter 9 liegt bei 70 g/l
Trockensubstanz.
Die Nährlösungsvorlage von 300 I wurde in 12 Tagen
leergefahren mit gleichmäßiger Alkoholausbeute in diesem Zeitraum.
Die Apparatur von Beispiel 1 wird mit der gleichen Rübenmelasse-Nährlösungs-Maische beschickt, jedoch
wird diesmal ein Hefestamm vom Typ Sacharomyces cerecisiae eingesetzt. Dieser Stamm ist eine untergärige
flockuiierende Hefe, wie sie in dem Buch »Die Hefen«, Band 1, Verlag Hans Carl, Nürnberg 1960, Seite 187
beschrieben ist.
Auch mit diesem Hefestamm konnte die Nährlösungsvorlage von 3001 in 12 Tagen leergefahren
werden. Bei einer gleichmäßig guten Prozeßführung wurde wiederum eine theoretische Ausbeute von über
95% des in der Nährlösung eingesetzten Zuckers erreicht.
Eine technische Apparatur gemäß der Abbildung wird mit einer Rübenmelasse-Nährlösungs-Maische wie
in Beispiel 1 beschrieben, beschickt. Der Hefestamm ist ebenfalls der gleiche.
Aus der Nährlösungsvorlage 1, diesmal einem 5-m3-Rührbehälter, wird die Lösung unsteril mittels
einer Kolbendosierpumpe dem Fementer 2 am Fermenterkopf zugeführt. Der Fermenter 2 ist ein 10001
Schlaufenfermenter bekannter Bauart mit Düsenbegasung,
Überlaufstandhaltung und einer Temperaturregeleinrichtung
6 in Form einer Mantelkühlung.
Die Begasung erfolgt mit 0,05 vvm (=3 NmVh) Luft und zusätzlich mit 1 vvm (=60 NmVh) Stickstoff. Die
Stickstoffbegasung bewirkt eine homogene Durchmischung und Umwälzung im Schlaufenreaktor.
Nach einer Anlaufphase der Gärung wie in Beispiel 1 wird mit einer Rate von 4 mVh die vergorene Hefe- und
alkoholhaltige Würze kontinuierlich über das interne Überlaufrohr 7 und Leitung 8 in den Trennbehälter 9 mit
einem Volumen von 300 I ohne Rührwerk abgezogen. Die sich bildende Klarphase läuft frei in das 1501 große
Auffanggefäß 11. Auch hier liegt der Alkoholgehalt der
Klarphase bei 6,5 VoL-%, was einer theoretischen Ausbeute von über 95% des in der Nährlösung
eingesetzten Zuckers entspricht.
Die im Trennbehälter 9 vorliegende Trübphase mit einem praktisch gleich hohen Alkoholgehall wird
mittels einer dosierbaren Monopumpe in einer Rate von
3 mVh in den Fermenter zurückgeführt. Die Trennung der Klarphase von der noch in ihr enthaltenen Hefe
findet wie in Beispiel 1 im Auffanggefäß 11 statt.
Die Hefekonzentration im Kreislaufsystem wird wie in Beispiel 1 eingehalten. Bei Einhaltung der übrigen
Randbedingungen wie:
| pH-Wert | 3,5-6 |
| Temperatur | |
| (abhängig von den verwendeten | |
| Hefestämmen; innerhalb eines | |
| Temperaturbereiches eine | |
| Toleranz von ±2%) | 28-360C |
| Freie Sauerstoffkonzentration | |
| im Kulturmedium | 0- 1 ppm |
| Freie, vergärbare Zucker | |
| konzentration | 0-0,1% |
| Freie Produktkonzentration | |
| (je nach Hefestamm) | |
| nicht erößerals | 8.5 Vol.-% |
läßt sich das beschriebene Verfahren einwandfrei über einen längeren Zeitraum durchführen. So wurde in einer
mehrtägigen Produktionszeit kontinuierlich eine gleichmäßige Produktionsrate an Alkohol erzielt, ohne daß es
zu Verschiebungen in den Randbedingungen und der Produktqualität kam.
Da im Fermenter die Hefevermehrung bei Anwesenheit von Luft und zuckerhaltiger Maische stattfindet und die Vergärung des Zuckers bei Anwesenheit von Zucker und Hefe und der Sauerstoffüberschuß minimal ist, wird die Zugabe der Reaktionspartner in die Maische so geregelt, daß am Austritt Fermenter die freie vergärbare Zuckerkonzentration < 0,1%, die Hefeüberkonzentration an aktiver Hefe< 10% ist und die Sauerstoffkonzentration im Medium 0,05 ppm beträgt. Das Maß der Mischgüte ist einmal verantwortlich für einen gleichmäßigen Stoff- und Wärmetransfer und damit für die Einhaltung enger Konzentrations- und Temperaturbandbreiten und zum anderen verantwortlich für den Vergärungsgrad, d. h. für die schnelle Vergärung unter minimalstem Sauerstoffüberschuß.
Da im Fermenter die Hefevermehrung bei Anwesenheit von Luft und zuckerhaltiger Maische stattfindet und die Vergärung des Zuckers bei Anwesenheit von Zucker und Hefe und der Sauerstoffüberschuß minimal ist, wird die Zugabe der Reaktionspartner in die Maische so geregelt, daß am Austritt Fermenter die freie vergärbare Zuckerkonzentration < 0,1%, die Hefeüberkonzentration an aktiver Hefe< 10% ist und die Sauerstoffkonzentration im Medium 0,05 ppm beträgt. Das Maß der Mischgüte ist einmal verantwortlich für einen gleichmäßigen Stoff- und Wärmetransfer und damit für die Einhaltung enger Konzentrations- und Temperaturbandbreiten und zum anderen verantwortlich für den Vergärungsgrad, d. h. für die schnelle Vergärung unter minimalstem Sauerstoffüberschuß.
Hierzu 1 Blatt Zeichnungen
Claims (4)
1. Verfahren zur kontinuierlichen Vergärung von wäßriger Maische für die Gewinnung von Alkohol
und Hefe-Biomasse in einem Fermenter und in einer Trenn- und Rückführstufe, wobei in den Fermenter
frische, wäßrige Maische, Gärhefe, ein Nähr-Mediumgemisch und Sauerstoff-enthaltendes Gas kontinuierlich
eingeführt werden, und Alkohol-enthaltende, enthefte, vergorene Maische ausgeschleust wird,
dadurch gekennzeichnet, daß
a) die Konzentration der zugeführten Maische in bezug auf den Zuckergehalt dem erreichbaren
Umsetzungsgrad zu Alkohol entspricht, so daß die im Fermenter meßbare, freie Zuckerkonzentration
den Wert 0,1 Gew.-% nicht übersteigt,
b) im Fermenter durch bekannte Mittel eine homogene, definierte Mischung eingestellt wird,
c) die aktive Hefekonzentration innerhalb des Reaktionsraumes durch Rückführung von alkohol-
und hefehaltigem Medium aus der Trennstufe zwischen 100 und 110% des spezifischen
Vergärungsgrades gehalten wird,
d) Sauerstoff-enthaltendes Gas homogen verteilt und reguliert eingeführt wird, und eine mittlere
freie Sauerstoffkonzentration von 1 ppm in der Flüssigkeitsphase nicht überschritten wird,
e) eine flokulierende untergärige Gärhefe eingesetzt wird,
f) aus der Trennstufe entheftes, alkoholhaltiges Medium aus dem in Kreislauf befindlichen
Hefe- und Alkohol-enthaltenden Medium abgezogen wird.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Sauerstoff-enthaltende Gas Luft
ist.
3. Verfahren nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Verweilzeit des Hefe- und
Alkohol-enthaltenden Mediumanteils in der Trennstufe nicht mehr als 30 Minuten, vorzugsweise 5-15
Minuten beträgt.
4. Verfahren nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß das aus der Trennstufe separat
abgezogene alkoholhaltige Medium zu Alkohol aufgearbeitet wird.
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