DE2834001A1 - Neue pepstatinderivate und verfahren zu ihrer herstellung - Google Patents

Neue pepstatinderivate und verfahren zu ihrer herstellung

Info

Publication number
DE2834001A1
DE2834001A1 DE19782834001 DE2834001A DE2834001A1 DE 2834001 A1 DE2834001 A1 DE 2834001A1 DE 19782834001 DE19782834001 DE 19782834001 DE 2834001 A DE2834001 A DE 2834001A DE 2834001 A1 DE2834001 A1 DE 2834001A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
pepstatin
acid
arginine
valine
hours
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE19782834001
Other languages
English (en)
Inventor
Bertrand Castro
Pierre Covol
Genevieve Evin
Joel Menard
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bpifrance Financement SA
Original Assignee
Agence National de Valorisation de la Recherche ANVAR
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Agence National de Valorisation de la Recherche ANVAR filed Critical Agence National de Valorisation de la Recherche ANVAR
Publication of DE2834001A1 publication Critical patent/DE2834001A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K7/00Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/02Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12Antihypertensives
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0205Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/86Renin inhibitors

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

PATENTANWÄLTE % $ 3 4 OQ\
DlpL-lng. P. WIRTH · Dr. V. SCH MI E D-KOWARZIK Dlpl.-lng. G. DANNENBERG · Dr. P. WEI NHOLD · Dr. D. GUDEL
33 SO 24 SIEGFRIEDSTRASSE 8
TELEFON: C089) ^^ 80Q0 MDNCHEN 4Q
SK/SK
4018 DE 3758
Agence Nationale de Valorisation de la Recherche
131 rue Madeleine Michelis
92522 Neuilly sur Seine / Frankreich
Neue Pepstatinderivate und Verfahren zu ihrer
Herstellung
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf neue Pepstatinderivate der allgemeinen Formel:
(CH ) CHCH2Co-(NHCHCO)2 - NHCHCII(OH)Cn2CONIICII-CONIHpICH(OH)CII2-3 CH(CHg)2 CH2CH (CIIg)2 CH3 CH2CH (CH3 )g
-co-(x)a(Y)b(z)c (D
ihre Salze, ihre Herstellung und auf die sie enthaltenden Präparate.
In der allgemeinen Formel (I) stehen X, Y und Z, die gleich oder verschieden sein können, jeweils für einen Aminosäurerest aus der Gruppe von Arginin, Glutaminsäure, Asparginsäure, Lysin, Histidin oder Valin und bilden mit der freien Carboxylgruppe des Pepstatins oder der benachbarten Aminosäure eine Peptidin-CONH- Bindung, wobei die Carboxyl- ■ funktion der endständigen Aminosäure in freier Form oder als
909808/0824
Ester eines aliphatischen Alkohols mit 1 bis 4 C-Atomen vorliegen kann; a, b und c sind jeweils O oder 1, wobei die Summe von 1 + b + c = 1, 2 oder 3 ist.
Bei der obigen Darstellung sind die durch X, Y und Z definierten Aminosäuren vorzugsweise in natürlicher Form, d.h. in L-Form, anwesend.
Wenn die endständige CarboxyIfunktion frei ist, bezieht sich die vorliegende Erfindung auch auf die Salze der Produkte der allgemeinen Formel (i) mit löslich machenden Basen, so daß die Löslichkeit der erhaltenen Salze in Wasser gleich oder über 0,4 % Gew./Vol. liegt. Als löslich machende Basen werden vorzugsweise Aminosäuren, wie Arginin, Lysin oder c<,y-Diaminobuttersäure, ausgewählt.
Weiterhin bezieht sich die vorliegende Erfindung auf die oben definierten neuen Derivate des Pepstatins als Arzneimittel, insbesondere als Inhibitoren der Reninwirkung, sowie auf pharmazeutische Präparate, die als aktiven Bestandteil ein neues Pepstatinderivat enthalten.
Weiter betrifft sie Verfahren zur Diagnose und/oder Behandlung hypertensiver Krisen, die mit einer übermäßigen Reninsekretion verbunden sind.
Pepstatin, d.h. Isovaleryl-L-valyl-L-valyl^-amino^-hydroxy·- ^-methyl-heptanoyl-I^-alanyl^-amino-S-hydroxy-e-methylheptansäure, ist ein bekanntes Produkt (vgl. z.B. die Fr PS 7021 557)l Außerdem sind Pepstatinderivate, insbesondere die Butyl-y Propyl- und Acetylpepstatine gemäß Chem.Abstr. Nr. 124. Seite 637, Bd. 79 (1973) bekannt.
909808/0824
Erfindungsgemäß können die neuen Pepstatinderivate der allgemeinen Formel (I) nach üblichen, zur Peptidsynthese verwendeten Verfahren hergestellt werden, indem man z.B. Pepstatin mit einer geeigneten Aminosäure oder einem Di- oder Tripeptid in Anwesenheit eines Kondensationsmittels umsetzt oder indem man zuerst mit einem üblichen Reagenz, wie Isopropylchlorformiat, die Carboxylfunktion des Pepstatins in ein gemischtes Kohlensäure-Carbonsäureanhydrid umwandelt und dieses umsetzt. Als
Kondensationsmittel kann
/man insbesondere Dicyclohexylcarbodiimid, Benzotriazolyloxytris-dimethylaminophosphonium-hexafluorphosphat (vgl. Tetrahedron Letter 1219 (1975)) oder Bates-Reagenz (A.J. Bates et al, Helv.Chim.Acta, 58', 633 (1975)) verwenden. Gewöhnlich erfolgt die Reaktion in einem organischen Lösungsmittel, wie Dimethylformamid oder Dirnethylsulfoxid, bei einer Temperatur um. 200C.
Es ist besonders zweckmäßig, die nicht an der Reaktion teilnehmenden Funktionen durch blockierende Gruppen zu schützen, die nach beendeter Kondensation leicht wieder eliminierbar sind.
Die Salze der Verbindungen der Formel (i) kann man erhalten, indem man eine wässrige Suspension eines Pep'statinderivates der Formel (I) mit einer geeigneten löslich machenden Base in stöchiometrischer Menge bei einer Temperatur zwischen 20° bis 40 C. bis zum vollständigen Lösen rührt und dann das Salz in bekannter Weise, insbesondere durch Lyophilisierung, isoliert.
Das als Ausgangsprodukt verwendete Pepstatin ist Isovaleryl-L-valyl-I^valyl-4-amino-3~hydroxy-6-methylheptanoyl-L-alanyl-4-amino-3-hydroxy-6-methylheptansäure der folgenden Formel:
909808/0824
(CH3 ) 2CHCH2CO-/~NH~CH-CO7
CH-CO72' -NH-CHCH (OH) CII2- CONHCHCONHCH CH (Oil) CH(CHg)2 CH2CH(CH3)2 CH3 CH2CH(CH3)
3)2 CH3 CH2CH(CH3) -CH2COOH;
Diese kann nach dem Verfahren der französischen PS 70 21 557 hergestellt werden.
Das Verfahren besteht im Züchten eines Pepstatin produzierenden Streptomyces-Stammes, wie S. testaceus, S. argenteolus, var. toyokensis und S. caespitosus, in einem Nährmedium "bei aeroben Bedingungen, bis sich in diesem Kulturmedium eine deutliche Pepsininhibierungswirkung zeigt, und in der Gewinnung des Pep-' statins aus dem Kulturmedium.
Die erfindungsgemäßen neuen Derivate haben eine deutlich überlegene Wasserlöslichkeit im Vergleich zu Pepstatin. Da das Pepstatin in Wasser praktisch unlöslich ist, haben die Produkte der allgemeinen Formel (I) gewöhnlich eine Löslichkeit über 0,4 %t d.h. mindestens 40 Mal stärker als die von Pepstatin. Es wurde tatsächlich festgestellt, daß man eine vollständige Löslichmachung des Pepstatins in Wasser bis zu einer Konzentration von 146 /um/l erreicht. Im Gegensatz dazu ist die Löslichkeit des Methylesters von Pepstatin-Arginin in Wasser 30 Mal
während
höher, / die des Argininsalzes von Pepstatin 50 Mal stärker
als die von Pepstatin ist.
Die erfindungsgemäßen neuen Derivate inhibieren die Reninwirkung. Renin ist ein proteolytisches, von der Niere gebildetes und ausgeschiedenes Enzym, das auf das Angiotensinogen des Plasmas unter Bildung eines inaktiven Decapeptids (Angiotensin I)
909808/0824
wirkt, das seinerseits in ein Octapeptid (Angiotensin II) umgewandelt wird, das auf den Organismus unter Erhöhung des arteriellen Druckes wirkt.
In Vitro kann die inhibierende Wirkung der erfindungsgemäßen neuen Produkte durch die Wirkung auf Schweinerenin auf einem synthetischen Substrat aus einem N-acetylierten Tetradecapeptid (Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-LeuTrVal-Tyr-Ser), indem man das freigesetzte Tetrapeptid (Leu-Val-Tyr-Ser) durch Fluorimetrie mit Fluorescamin
oder auf Schweinerenin auf einem natürlichen Substrat nachgewiesen werden, das aus Angiotensinogen von Ratten besteht (Vgl. das Verfahren von J. Menard und K.J.Catt, Endocrinology, 90, 422 (1972))i
In beiden Systemen liegt die molare Inhibierungskonzentration der erfindungsgemäßen Produkte (CΙ™), die die Reninaktivität um 50 90 herabsetzt, gewöhnlich zwischen 1,10 und 1,10 .
erfindungsgemäßen Produkte
In vivo ergaben die/bei anästhetisierten, binephtrektomisierten Ratten, denen 50 m UG/kg gereinigtes Schweinerenin injiziert wurde, eine Inaktivierung des Plasmarenins und eine Verminderung des arteriellen Druckes in Dosen zwischen 50 bis 300 /Ug/kg bei intravenöser Verabreichung.(UG = Goldblatt-Einheit.)
Weiterhin sind die erfindungsgemäßen neuen Produkte nur wenig toxisch. Bei Mäusen liegt die DL^q gewöhnlich über 800 mg/kg bei intraperitonealer Verabreichung,
909808/0824
Im folgenden werden die Produkte als "Pepstatin" sowie dem Namen der Aminosäure, des Di- oder Tripeptides "bezeichnet, an welche das Pepstatin gebunden ist.
Die folgenden Beispiele veranschaulichen die vorliegende Erfindung, ohne sie zu beschränken.
Beispiel 1
Zu 69 mg Pepstatin und 70 mg des Dichlorhydrates des Methylesters von Arginin wurden 5 ecm Dimethylformamid zugefügt. Dann wurden 88 mg JBenzotriazolylbxytris-dimethylamino-phospho-■nium-hexafluorphosphat (im folgenden als"B0P" bezeichnet) und 50 mg Triäthylamin zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 72 Stunden bei einer Temperatur um 200C. gerührt, dann wurden 15 ecm,Wasser und 20 ecm einer gesättigten v/ässrigen Natriumchloridlösung zugefügt. Nach Abkühlen auf eine Temperatur um 0°C. wurde der gelatinöse Niederschlag luftgetrocknet, mit Äther gewaschen und bei 200C. unter vermindertem Druck (20 mm Hg).getrocknet. Der trockene Rückstand wurde in 50 ecm Methanol gelöst, die Lösung filtriert und das Filtrat zur Trockne konzentirert. So erhielt man 69 mg des Methylesters von Pepstatin-Arginin mit dem folgenden Eigenschaften: F. (»Köfler"-Bank): 262-263°C.
Rotationsvermögen: Ζρ<7β°= -AO,1° (c=0,18; Methanol) Analyse (Aminosäuren) nach Hydrolyse mit 6N Salzsäure während 24 std bei 1100C: Arginin 0,95, Alanin: 1; Valin: 2,10 j.fl-Spektrum, charakteristisches Esterband bei 1740 cm
909808/0824
Beispiel
In eine Mischung aus 4 ecm Dimethylformamid und A ecm DimethyI-sulfoxid wurden 100 mg Pepstatin und 100 mg Trifluoracetat des Benzylesters von Nitronin zugefügt. Dann wurden 90 mg BPO und 40 mg Triäthylamin zugegeben, die Reaktionsmischung wurde 6 Stunden gerührt, es wurden 15 ecm V/asser und dann 20 ecm einer gesättigten wässrigen Ammoniumsulfatlösung zugefügt, und nach Abkühlen auf eine Temperatur um 0°C. wurde das Produkt luftgetrocknet und dann in einer Mischung aus Wasser, Salzsäure und Essigsäure (19:1:80 Vol.) gelöst. Die Lösung wurde bei normalem Druck in Anwesenheit von Palladium-auf-Kohle 24 Stunden hydriert, auf "Celite" filtriert, das Filtrat zur Trockne konzentriert und der Rückstand in 50 ecm Isopropanol aufgenommen. Nach Abfiltrieren des unlöslichen Rückstandes wurde das Filtrat zur Trockne eingedampft und das erhaltene Produkt getrocknet. So erhielt man 60 mg Pepstatin-Arginin mit dem folgenden Eigenschaften: F. (Köfler-Bank): über 25O°C. (u.Zers.); Analyse auf Aminosäuren nach Hydrolyse mit 6N Salzsäure während 24 std bei 1000C: Alanin 1; Valin 1,96; Arginin 1. B e i s ρ 1 e 1 3
In 8 ecm einer 3:1 Vol-Mischung aus Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid wurden 130 mg Pepstatin und 120 mg des Chlorhydrates des tert.-Butyldiesters der Glutaminsäure zugefügt. Dann wurden 180 mg BOP und 45 mg Triäthylamin zugegeben; nach 72-stündigem Rühren wurden 15 ecm dest. Wasser zugefügt, der Niederschlag wurde luftgetrocknet und mit 15 ecm Äthyläther gewaschen und das Produkt erneut in 30 ecm Methanol gelöst. Der unlösliche Rückstand wurde abfiltriert und das Filtrat eingedampft. Nach
903808/0824
Zugabe von 10 ecm einer 1:1 Vol-Mischung aus Methylenchlorid und Trifluoressigsäure wurde 30 Minuten bei einer Temperatur um 200C. stehen gelassen. Die Mischung wurde fast zur Trockne konzentriert, dann wurde Äther zugefügt, der gebildete Niederschlag wurde abfiltriert und mit Äther gewaschen. Nach dem Trocknen erhielt man 130 mg Pepstatin-Glutaminsäure mit den folgenden Eigenschaften:
F. (Köfler-Bank) 2300C; Rotationsvermögen föÜ^0 - -79,0° (c = 0,55; Methanol); Analyse auf Aminosäuren nach 24 stündiger Hydrolyse mit 6N Salzsäure bei 110°C: Alanin 1; Valin 1,97; Glutaminsäure 0,99.
Beispiel 4
Gemäß Beispiel 3 erhielt man aus 137 g Pepstatin, 98 mg Chlorhydrat des tert.-Butyldiesters der Asparginsäure, 177 mg BOP und 68 mg Triethylamin in 8 ecm Dimethylformamid 109 mg Pepstatin-Asparginsäure mit den folgenden Eigenschaften: F. (KtSfler-Bank) 238-2400C; Rotationsvermögen jjXj^ = -67,6° (c=0,5i; Methanol) Analyse auf Aminosäuren nach 24 stündiger Hydrolyse mit 6N Salzsäure bei 110°C: Asparginsäure 0,92; Alanin 1,12; Valin 2.
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auch auf pharmazeutische Präparat, die ein Pepstatinderivat der allgemeinen Formel (I) oder eines ihrer Salze in Verbindung mit einem oder mehreren verträglichen, pharmazeutisch annehmbaren Verdünnungs- oder Hilfsmittels enthalten. Die erfindungsgemäßen Präparate werden vorzugsweise parenteral, insbesondere intravenös, verabreicht*
909808/0824
283400]
Als parenteral verabreichbare Präparate werden insbesondere sterile Lösungen der Produkte von Formel (I) in Wasser oder einer physiologischen, isotonischen Lösung verwendet. Weiter kann man Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen der Produkte von Formel (l) in geeigneten, pharmazeutisch annehmbaren Lösungsmitteln oder Trägern verwenden. In diesem Fall sind Propylenglykol, Polyäthylenglykol, Pflanzenöle (wie Olivenöl) oder organische, injizierbare Ester (wie Äthyloleat) geeignet. Dem Präparat können Netzmittel, Emulgatoren oder Dispergierungsmittel zugefügt werden. Die Sterilisation kann auf verschiedene Weise erfolgen, z.B. mit Hilfe eines bakteriologischen Filters, durch Einverleibung von Sterilisierungsmitteln in das Präparat oder durch Bestrahlung. Die erfindungsgemäßen Präparate können auch in Form fester steriler Präparate hergestellt werden, die zum Zeitpunkt ihrer Verwendung in sterilem V/asser oder einem anderen, sterilen, injizierbaren Medium gelöst werden.
Die erfindungsgemäßen Präparate sind insbesondere geeignet, um die Verantwortlichkeit des Renin-Angiotensin-Systems bei der Tensionserhöhung von Hypertonikern festzustellen. Die therapeutische Behandlung hängt im wesentlichen von einer solchen Analyse ab. Auf intravenösem Wege kann eine einmalige Dosis zwischen 1 und 30 mg/kg verabreicht werden. Die herbeigeführte Inhibierung des Plasmarenins bewirkt einen Spannungsabfall, wenn ein Reninüberschuß Grund der Hypertension ist. Auf dieser Grundlage wird eine blockierende Behandlung des Renin-Angiotensin-Systems ausgewählt. Die erfindungsgemäßen
909808/0824
neuen Präparate eignen sich besonders zur schnellen bzw. dringenden Behandlung bestimmter hypertensiver Erkrankungen in Verbindung mit einer übermäßigen Reninsekretion. Bei akuter Behandlung liegen die Dosen gewöhnlich zwischen 1 bis 30 mg/kg für einen Erwachsenen und können durch einfache Injektion oder Infusion verabreicht werden. Weiter können die erfindungsge-, mäßen Präparate auch in schwächeren Dosen bei der Dauerbehandlung verwendet werden.
Gewöhnlich bestimmt der Arzt Behandlung und Posologie aufgrund von Schwere der Hypertension, von Alter, Gewicht und allen anderen, entsprechend zu behandelnden Faktoren.
Beim folgenden Anwendungsbeispiel wurden 500 mg des Produktes von Beispiel 2 (Pepstatin-Arginin) in 100 ecm injizierbarem Solut gelöst, die Lösung durch Filtration auf einem bakteriologischen Filter sterilisiert und in Mengen von 10 ecm pro Ampulle aseptisch in Ampullen gegeben; diese wurden verschlossen und enthielten 50 mg aktive Verbindung. Pharmakologische Versuchsergebnisse
ki Inhibierungswirkung in vitro des Methylesters von Pepstatin-Arginin
1) auf natürlichem Substrat
30 Einheiten Mikro-Goldblatt (30 /um UG) gereinigtes Schweinerenin (Corvol et al., Cir.Res.; 41, 616-622 (1977)) wurden 17 Minuten bei pH 6,5 und 37°C. in Anwesenheit eines Überschusses des Substrates von Rattenrenin bebrütet, das aus binephrektom-sierten Ratten erhalten worden war. Das gebildete Angiotensin I wurde durch radioimmunologische Dosis gemessen (vgl.
909803/0324
2834QQl
Menard & Catt, Endocrinology, 90, 422-430 (1972)).
Es wurde festgestellt, daß unter den obigen Bedingungen der Methylester von Pepstatin-Arginin eine 50-%ige Inhibierung der Reninaktivität bei einer Konzentration um 10 Mol/l ergibt.
Unter denselben Bedingungen vermindert auch Pepstatin die Renin aktivität um 50 % in einer Dosis um 10 · Mol/l.
2) auf synthetischem Substrat
10 Einheiten Milli-Goldblatt Schweinerenin aus derselben Quelle wie oben wurden 1 Stunde bei pH 6 und 37°C in Anwesenheit eines synthetischen Substrates aus dem Tetradecapeptid von N-acetyliertem Renin bebrütet (Galen et al, Biochem.Biophys. Acta, 523, 485-493 (1978)).
Die pro Stunde Bebrütung gebildete Tetrapeptidmenge wurde fluorometrisch bemessen.
Das Tetradecapeptid wurde in drei verschiedenen Konzentrationen, nämlich 2,3, 4,6 und 9,3 Millimol mit sich kreuzenden Konzentrationen von Pepstatin oder dem Methylester von Pepstatin-Arginin, nämlich 0,25, 0,5 und 0,75 10 Mol/l verwendet. Die Ergebnisse wurden gemäß der Methode von Dixon ausgewertet, wodurch bestimmt wurde, daß die Inhibierungskonstante
—7
des Methylesters von Pepstatin-Arginin bei 3,15 10 Mol/l
—7 lag, während die von Pepstatin bei 10 Mol/l liegt.
B. Inhibierungswirkung in vivo des Methylesters von Pepstain-Arginin und von Pepstatin-Arginin
Verwendet wurde das Versuchsmodell einer renalen Hypertension bei Ratten gemäß Rojo-Ortega & Genest (Can.j.Phys.Pharm. 46,
909808/0824
833-885 (1968)). /!Γ
Bei 20 männlichen Sprague-Dawley Ratten von 300 g Gewicht wurde eine vollständige Ligatur der Aorta zwischen den renalen Arterien durchgeführt und die Tiere zwischen 5 und 10 Tagen nach der Operation beobachtet.
Der arterielle Druck wurde bei frei herumlaufenden Ratten, die bei Bewußtsein waren, mittel einer 24 Stunden vor dem Messen eingeführten Karotiskanüle gemessen. Die maximale Senkung des arteriellen Druckes durch Injektion von "Saralasin" ^Sar-1-Ala-8-Angiotensin ΙΪ7 wurde bei denselben Tieren mit dem maximalen Abfall des arteriellen Druckes verglichen, der durch die erfindungsgemäßen Pepstatinderivate induziert wurde.
Von 20 hypertonischen Ratten mit einem durchschnittlichen arteriellen Druck von 157 + 4,37 mm Kg erfuhren 13 Ratten eine Senkung des arteriellen Druckes von 10 mm Hg und mehr nach intravenöser Injektion von 140 ecm "Saralasin". Bei diesen 13 Ratten betrug die durchschnittliche Verminderung des arteirellen Druckes 44,5 + 8,5 mm Hg. Die intravenöse Injektion von 350 η-Mol des Methylesters von Pepstain-Arginin bei zwei Ratten und von Pepstatin-Arginin bei den elf weiteren Ratten ergab eine Senkung des arteriellen Druckes von 48,3 + 8,2 mm Hg.
Der maximale Abfall des arteriellen Druckes zeigte sich 5 Minuten nach Injektion von Saralasin" und 6 Minuten nach Injektion der erfindungsgemäßen Pepstatinderivate, wobei der Druck 10 Minuten nach Injektion der beiden Inhibitoren wieder normal war.
909808/0824
Die Konzentration des Plasmarenins betrug bei diesen 13 Ratten
—1 —1 501 +125 p-Mol Angk/tensin I h ecm im Vergleich zu der von normal gehaltenen Tieren von 5,8 + 1,8 ρ Mol Angiotensin I
1 —1
h ecm , Die Konzentration des Plasmarenins senkte sich bis
—1 —1
auf 289 + 74 p«Mol Angiotensin I h ecm 5 Minuten nach intravenöser Injektion der erfindungsgemäßen löslichen Pepstatinderivate. (η-Mol und p-Mol bedeuten nana-Mol bzw. pico-Mol.)
909808/082*

Claims (1)

  1. 283400V
    Patentansprüche
    Neue Pepstatinderivate der allgemeinen Formel (l)s
    (CH ) CHCII CO-(NHCHfJO)2 -NHCHCII(OII)CII2CONHCH-CONHCHCH(OH)CIi2
    -co-(x)a(Y)b(z)c
    ι ι
    CH2CH (CH3 )2 CII3 CH2QI(CH3) ^
    in welcher X, Y und Z, die gleich oder verschieden sein können, jeweils für eine Aminosäure aus der Gruppe von Arginin, Glutaminsäure, Asparginsäure, Lysin, Histidin oder Valin stehen, mit der freien Carboxylgruppe des Pepstatins eine Peptid-CONH-Bindung bilden , wobei die Carboxylfunktion der endständigen Aminosäure in freier Form oder als Ester eines aliphatischen Alkohols mit 1 bis 4 C-Atomen vorliegen kann, und a, b und c jeweils einen V/ert von 0 oder 1 haben, wobei die Summe a + b -f c = 1,2 oder 3 ist,
    sowie ihre Salze mit löslich machenden Basen.
    2.- Verbindung nach Anspruch 1, nämlich der Methylester von Pepstatin-Arginin mit den Parametern:
    F. (Köfler-Bank) 262-2630C; Rotationsvermögen ßij^ = -40,1° (c = 0,18; Methanol); Analyse auf Aminosäuren nach Hydrolyse mit 6N Salzsäure während 24 std bei 110°C: Arginin = 0,95; Alanin = 1; Valin = 2,10; IR: 1740 cm""1 (Ester).
    -3·- Verbindung nach Anspruch 1, nämlich Pepstatin-Arginin mit den Parametern:
    F. (Köfler-Bank) über 2500C.(u.Zers.); Analyse auf Aminosäuren nach 24 stündiger Hydrolyse mit 6N Salzsäure bei 1100C: Alanin = 1; Valin = 1,96; Arginin = 1.
    909808/0824
    4,- Verbindung nach Anspruch 1, nämlich Pepstatin-Glutaminsäure mit den Parametern:
    F. (Köfler-Bank) 23O°C ; Rotationsvermögen /7x7^° = -79,0° (c = 0,55; Methanol; Analyse für Aminosäuren nach 24-stündiger Hydrolyse mit 6N Salzsäure bei 11O0C: Alanin = 1; Valin = 1f97; Glutaminsäure = 0,99.
    5·- Verbindung nach Anspruch 1, nämlich Pepstatin-Asparginsäure mit den Parametern:
    F. (Köfler-Bank) 238-2400C; Rotationsvermögen £^J^ = -67,6° (c = 0,51; Methanol); Analyse auf Aminosäuren nach 24-stündiger Hydrolyse mit 6N Salzsäure bei 1100Ci Asparginsäure = 0,92; Alanin = 1,12; Valin = 2.
    6,- Verfahren zur Herstellung einer Verbindung gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man Pepstatin mit einer Säure oder einem entsprechenden Di- oder Tripeptid unter den zur Bildung einer Peptid-CONH- Bindung geeigneten Bedingungen umsetzt, die erhaltene Verbindung isoliert und gegebenenfalls mit einer löslich machenden Base in ein Salz umwandelt.
    7·- Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Reaktion zwischen dem Pepstatin, und der Säure oder dem entsprechenden Di- oder Tripeptid in Anwesenheit eines Kondensationsmittels erfolgt.
    8.- Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß das Pepstatin zuerst in ein gemischtes Kohlensäure-Carbonßäureanhydrid umgewandelt wird.
    909808/0824
    9.- Arzneimittel, enthaltend eine Verbindung gemäß Anspruch 1 Ms 5 und übliche Hilfs- und Trägerstoffe.
    Der Patentanwalt:
    9808/0824
DE19782834001 1977-08-04 1978-08-03 Neue pepstatinderivate und verfahren zu ihrer herstellung Withdrawn DE2834001A1 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR7724093A FR2399409A1 (fr) 1977-08-04 1977-08-04 Nouveaux derives de la pepstatine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE2834001A1 true DE2834001A1 (de) 1979-02-22

Family

ID=9194246

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19782834001 Withdrawn DE2834001A1 (de) 1977-08-04 1978-08-03 Neue pepstatinderivate und verfahren zu ihrer herstellung

Country Status (9)

Country Link
US (1) US4185096A (de)
JP (1) JPS5448710A (de)
BE (1) BE869261A (de)
CH (1) CH634041A5 (de)
DE (1) DE2834001A1 (de)
FR (1) FR2399409A1 (de)
GB (1) GB2003481B (de)
IT (1) IT1107964B (de)
NL (1) NL7808140A (de)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0129189A2 (de) * 1983-06-15 1984-12-27 Merck & Co. Inc. Renininhibitoren mit einem C-terminalen Amidzyklus sowie Zusammensetzungen und Mehrkomponentenzusammensetzungen davon

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4478826A (en) * 1981-10-08 1984-10-23 Merck & Co., Inc. Renin inhibitory peptides
CA1258748A (en) 1981-10-08 1989-08-22 Daniel F. Veber Renin inhibitory peptides
US4384994A (en) * 1981-10-08 1983-05-24 Merck & Co., Inc. Renin inhibitory peptides
US4479941A (en) * 1981-12-10 1984-10-30 Merck & Co., Inc. Renin inhibitory peptides having PHE13 delection
US4650661A (en) * 1982-09-15 1987-03-17 Aktiebolaget Hassle Enzyme inhibitors
US4661473A (en) * 1984-03-27 1987-04-28 Merck & Co., Inc. Renin inhibitors containing peptide isosteres
US4663310A (en) * 1984-04-04 1987-05-05 Merck & Co., Inc. Renin inhibitors containing 2-substituted statine
US4906613A (en) * 1985-11-05 1990-03-06 Schering Corporation Antiglaucoma compositions and methods
US4743584A (en) * 1986-10-07 1988-05-10 Merck & Co., Inc. C-terminal amide cyclic renin inhibitors containing peptide isosteres
US5688770A (en) * 1989-12-14 1997-11-18 Schering Corporation Antiglaucoma compositions and methods
AU6668694A (en) * 1993-04-21 1994-11-08 Nzym, Inc. Pepstatin derivatives for treatment, prevention and detection of infections
US5833946A (en) * 1995-06-06 1998-11-10 Bayer Corporation Dissemination of fungal infections: animal model and method of prophylaxis
EP2113510A1 (de) 2008-04-30 2009-11-04 Freie Universität Berlin Pepstatin-A-Derivate
FR3002736B1 (fr) * 2013-03-04 2015-06-26 Virbac Composition orale nutritionnelle et medicamenteuse a usage veterinaire

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3867364A (en) * 1968-11-21 1975-02-18 Microbial Chem Res Found Process for the synthesis of leupeptins and their analogues
US3840516A (en) * 1969-06-13 1974-10-08 Microbial Chem Res Found Biologically active substance,pepstatin and production processes thereof
JPS5022116B1 (de) * 1970-04-28 1975-07-28
US3869347A (en) * 1971-03-26 1975-03-04 Microbial Chem Res Found Process for the production of new pepstatins having anti-pepsin activity

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0129189A2 (de) * 1983-06-15 1984-12-27 Merck & Co. Inc. Renininhibitoren mit einem C-terminalen Amidzyklus sowie Zusammensetzungen und Mehrkomponentenzusammensetzungen davon
EP0129189A3 (de) * 1983-06-15 1985-10-02 Merck & Co. Inc. Renininhibitoren mit einem C-terminalen Amidzyklus sowie Zusammensetzungen und Mehrkomponentenzusammensetzungen davon

Also Published As

Publication number Publication date
FR2399409A1 (fr) 1979-03-02
CH634041A5 (fr) 1983-01-14
JPS5448710A (en) 1979-04-17
US4185096A (en) 1980-01-22
IT7850591A0 (it) 1978-08-03
NL7808140A (nl) 1979-02-06
BE869261A (fr) 1979-01-25
FR2399409B1 (de) 1980-09-19
GB2003481A (en) 1979-03-14
GB2003481B (en) 1982-02-10
IT1107964B (it) 1985-12-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0034259B1 (de) Peptidester, Verfahren zur Herstellung derselben und diese enthaltende Arzneimittel beziehungsweise Diagnostica
DE2717548C2 (de)
EP0067425B1 (de) Gegebenenfalls geschützte Peptide, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel
DE3000225C2 (de)
DE2914059C2 (de) 4-Thiazolidincarbonsäuren, Verfahren zu deren Herstellung und diese enthaltende pharmazeutische Zusammensetzung
DE2834001A1 (de) Neue pepstatinderivate und verfahren zu ihrer herstellung
EP0150263A1 (de) Derivate der cis, endo-2-Azabicyclo-[3.3.0]-octan-3-carbonsäure, Verfahren zu ihrer Herstellung, diese enthaltende Mittel und deren Verwendung
DE3211397A1 (de) Spiro (4.(3+n))-2-aza-3-carbonsaeure-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung
DE3246503A1 (de) Derivate der cis, endo-2-azabicyclo-(5.3.0)-decan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung
DE3508251A1 (de) Dipeptide
DE60133654T2 (de) Arzneimittel enthaltend analgetische peptide
DE3619633A1 (de) Peptide mit einfluss auf die diurese und natriurese, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung
DE2730549A1 (de) Peptidderivate und deren herstellung
CH676425A5 (de)
CH626328A5 (en) Process for the preparation of somatostatin analogues
CH649562A5 (de) Derivate des methionin-enzephalins.
EP0034260B1 (de) Peptide, Verfahren zur Herstellung derselben und diese enthaltende Arzneimittel beziehungsweise Diagnostica
DE2633976A1 (de) Tripeptidderivate, verfahren zu ihrer herstellung sowie diese enthaltende arzneimittel
EP0137339B1 (de) Pharmakologisch aktive Peptide
EP0203450B1 (de) Neue Derivate bicyclischer Aminosäuren, Verfahren zu ihrer Herstellung, diese enthaltende Mittel und deren Verwendung
DE1916481B2 (de) Hydroxylamindenväte und Arzneimittel, die diese Verbindungen enthalten
DE3236484A1 (de) Tripeptide, verfahren zur herstellung derselben und diese enthaltende arzneimittel
DE2749932C2 (de) 1-Desamino-asparagin&amp;uarr;4&amp;uarr;-D-arginin&amp;uarr;8&amp;uarr;-vasopressin-Analoga, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese Verbindungen enthaltende antidiuretische Arzneimittel
DE2721761A1 (de) Peptidderivate und verfahren zu deren herstellung
DE2900926C2 (de)

Legal Events

Date Code Title Description
OAR Request for search filed
OB Request for examination as to novelty
OC Search report available
8141 Disposal/no request for examination